Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Пути и методы интенсификации воспроизводства в скотоводстве

ВАК РФ 06.02.01, Разведение, селекция, генетика и воспроизводство сельскохозяйственных животных

Автореферат диссертации по теме "Пути и методы интенсификации воспроизводства в скотоводстве"

ВСЕРОССИЙСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ . . лИНСТИТУТ ЖИВОТНОВОДСТВА г ^ (ВИЖ)

На правах рукописи

Хипькевич Сергей Николаевич

ПУТИ И МЕТОДЫ ИНТЕНСИФИКАЦИИ ВОСПРОИЗВОДСТВА В СКОТОВОДСТВЕ

06.02.01 — Разведение, селекция, генетика и воспроизводство сельскохозяйственных животных

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание-ученой степени доктора биологических наук

п. Дубровицы Московской области 1996

Работа выполнена зо Всероссийском няучно-исследо-ватапьском институте животноводства.

Научный консультант - заслуженный деятель няууи Российской Федерации, доктор биологических наук, профессор Н.И.СЕРГЕЕВ.

Официальные оппоненты: доктор биологических наук,

' профессор И.Я.ШИХСВ;

доктор сельскохозяйственных нчук, профессор Д.В.ОРЛИКОВ;

доктор биологических н*ук А.С.ЕРОХИН.

Ведущее учреждение - Нижегородская сельскохозяйственная «•к'деиия.

/а

Защита диссертации состоится "ло* 1996 г

в 10 ч»сов, на заседании диссертационного совет« Д 020.16.01 во Всероссийском научно-исследовательском институте животноводства.

Адрес института: 142С12 п.Дуйповицы, Московской обл.. Подольского р-на.

С диссертацией ыояно ознакомиться в библиотеке ЕИдя.

Автореферат разослан " ^*1595 г.

Ученый секретарь диссертацконного совета, кяндид«т сельскохозяйственных нвук

И.И.Емчков

I. ОЗ^ая характеристика работы

ггузльноогь Современное скотоводство э ведуаих странах 2в-

)пк, С1А я Канады характеризуется динамичными сгрукгурккмн язме-¡ннями ~ численности поголовья. С восьмидесятых годов намети-зсь устойчивое сокращение общего поголовья и доли молочных ко->б, но одновременно увеличился шлейф. При этом возросла продук-твность, а общее производство продукция осталось практически габильккм. В России с 1991 г. происходит устойчивое сокращение зголозья, сопровождающееся повышением доля коров в стаде при од-1 эвременном уменьшении алейфа (а это снижает возможности увзлл-эния производства молока). В эти;: условиях придают большую акту-льность мероприятия:/ по улучшению организации воспроизводства ? основе гибких технологий с учетом складывающихся организацион-ых, технических, экономических и других обстоятельств (Д.Л.Лэ-ангин а др., 1995), Поэтому особое значение приобретают биотох-ологические методы управления биологическими процессами, став-ие воз.мокнк.'.!!! благодаря современным биорегуляторам. Они позволя-г проводить мероприятия по интенсификации воспроизводства и ебля-ению эволюция ре проективных процессов с технологическими и эко-омическими требованиями, причем введения принципиально других югодов управления репродуктивной функцией животных в обозримом удулем ожидать не приходится.

Мощным средством интенсификации воспроизводства слухитме-од трансплантации эмбрионов крупного рогатого скота, основным изначением которого является генетическое улучшение животных. 1звестнке достижения в этой области уге сейчас превзошли ожида-алыв э^ектк как в теоретическом, гак и практическом смысле .З.А.Тялугин, 1994).

Однако, потенциальные возможности биотехнологии в практика зоспроизводств--! стада крупного рогатого скота используют еще да-:еко не полностью. Перехода исследований от чисто научных к про-!эбэдсгв9:;ным испьтаниям и внедрения их в производственную прак-•ику в масштабах, прогнозируемых теоретическими предпосылками, не :ооисходят. Имеет место дане разочарование некоторых специали-:гов в ожидаемых розу/агатах. Данную тенденцию отмечают в ряде ¡убллкаа::;! (А.А.Суоин, 1939), я в процессе собственной работы в ¡азличнкх регионах мч констатировали (¡акты падения популярности биотехнических методов. Практика требует преодоления этого проти-

воречия.

' Изучение литературы показывало несовершенство организации биотехнологии воспроизводства, которую сводят лишь к проведению искусственного осеменения зевотных либо получению и трансплантации э^йраонов, в то время как система интенсихикации воспроизводства требует предусматривать комплекс мероприятий: подготовку коров и глубокостельных нетелей к отелу, активизацию их воспроизводительной функции в ранний послеродовой период, стимуляцию а синхронизацию охоты у коров с длительным анэструсоы, профилактику и устранение патологии репродуктивной системы, а только на этой основе - искусственное осеыекеЕие, получение и трансплантацию эмбрионов. Успех применения метода трансплантации эмбрионов на 50 % зависит от организационных мероприятий, оценку которым может дать учет по стаду индекса осеменений. В.Л.1.!адисон (1988) считает, что работы по трансплантация в хозяйствах, где оплодотворяемость коров от первого осеменения не превышает 30 %, противопоказаны. Проблема стоит очень остро. Экономический удерб от бесплодия превышает потери, наносимые хивотноводству всеми заразными а незаразными болезнями вместе взятыми. В настоящее время наш знания относительно процессов гормо но профилактика, гормонотерапии, эмбриогенеза, эндокринных аспектов размножения значительно обогатились. Емасте с тем необходима корректировка методах, которая давала бы возможность болре эффективно проводить работу в производственных условиях по синхронизации охоты, вызыванию супзрову-.тяцаи и другим сыежым технологическим элементам в направлении реального улучшения общепринятых показателей плодовгтосси.

Учитывая выаеизлоЕЭНное, мы поставил;! ц&дь. - определить пути и метода интенсификации воспроизводства в скотоводства ка основе применения биорегуляторов.

Для досгияения цели определили необходимым ре па г ь следующие задача:

1. Усовершенствовать методы применения гормональных препаратов с целью управления поло ею,: и циклами коров и талок.

2. Исследовать наиболее существенные фэкгоры индуцирования суперовуляаии и осеменения лактирукхцих коров-доноров с учетом производственных и экономических аспектов, в основа которых лааат традиционные методы технологии воспроизводства.

3. Изучить эндокринные профили, определяющие нормальное функ ционирование репродуктивной системы корон при введении биорегуляторов.

4. Провести исследования пи эффективному использованию выбракованных, "проблемные" а бесплодных коров в целях воспроизводства, включая использование метода гране плантации эмбрионов.

5. Оценить значение микроклиматических условий и оакторов внутренней среды организуй для воспроизводительной функции коров.

6. Проанализировать целесообразность синхронизации охоты, кан метода подготовки телок для использования в качестве реципиентов, принимая во внимание организационные и экономические аспекты; выяснить роль гормональных критериев при отборе реципиентов.

7. По всей работе провести анализ и сформулировать общее заключение, выводы и прсктические предложения.

Исследования в области столь обширного спектра проводки з четко концептуальном направлении - в какой степени решение поставленных задач будет влиять на улучшение показателей плодовитости. Научная нозлзкд,_ Исследованы морфологические и функционально-эндокринные предпосылки, определяющие качество индуцированной охоты и качество индуцированного полового цикла коров и телок. Изучены эндокринные показатели у коров-доноров в период течения индуцированной суперовуляции. Разработаны методы гормональной ова-ркостимуляции в ранний послеродовой период. На основе теоретических изысканий и собственных экспериментальных исследований доказана целесообразность применения биотехнических методов для восстановления репродуктивной функции коров с овариопатологией на патогенетической основе. Найдено, что отрицательное влияние на воспроизводительную функцию оказывает не столько сезон года (летний), сам по себе, сколько термосгресс, как существенный негативный фактор. Предложен механизм отрицательного влияния стрессового повышения температуры на плодоеитость. Изучена и доказана возможность распространения патологического процесса молочная яе» лаза - матка - яичники, что обусловливает необходимость системного подхода при изучении нормы и патологии этих органов, т.е. в рамках единой репродуктивной системы. Дана методическая основа для разработок и проведения комплексной оксигеногарапии и про|и-лзкгнкн патологии репродуктивной системы.

Исследованные нами факторы, определявшее качество индуцированной охоты и индуцированного полового цикла позволяли? широко планировать и эффективно проводить (в ряде случаев унифицирование) как искуссгвэнное осеменение животных, так а индуцирование полиовуляции у коров-доноров с целью получе-

ния эмбрионов, Эффективно готовить и проводить эмбриопересадки одновременно большому числу реципиентов. Ускоренное восстановление репродуктивной функции лактирущих коров-донороз после иззле чения зародашей, а такге стимуляция послеродовой озариальноп ак-тизностя позволяет получать эмбрионы за период времени не превк-тяпциЕ экономически обоснований. Патогенетически обоснованное восстановление репродуктивной функции коров с озариопатологиеп позволяет их не только плодотворно осеменять, но и элективно ис пользовать в качестве доноров эмбрионов. Данные об этиологии мик роклиматического г симптоматического бесплодия могут слугить нау но-методическо11 основой для разработок и проведения комплексной системы профилактики а лечения бесплодия с учетом конкретных Сак торов внутренней и внешне!: средк. Это открывает козне перспектив более эффективного применения биотехнологии и дает возможность более широко использовать высокопродуктивных коров в качестве до норов эмбрионов.

Реализация результатов исследован:!;:. Оснознке положения и практические дредлогеняя, вктекаадие из исследований, вошли в комплексные системы по борьбе с бесплодием и технологии тракспла тации эмбрионов в Вологодской, Нижегородской, Московских области и PGO-Алания. Уатериалк чаучных исследовании положены в основу составления Департаментом ветеринарии Цинистерстза сельского хозяйства Российской Федерации методических рекомендаций по интенсификации воспроизводства и борьбе с бесплодием крупного рогатог скота в хозяйствах страны.

Апробация работа, ¿¡атериалы диссертации доложены и одобрены на заседаниях учених советов IBX, EU, TCIA, ГТАУ гг.

на двенадцати Всероссийских, зональных и республиканских кон].ере цаях (Москва, ДуброЕИцы, Оренбург, Льзоз, Цианин Новгород, Зол ох да, Элиста, Душанбе, Владикавказ, Воронез; (1083-11)^4 гг.).

Публикации. Основные научные результаты, включениие в дпссе тацна опубликованы в 45 печатных работах.

Структура п объе.',< диссертации. Диссертации изложена на 337 страницах машинописного текста. Содержит 78 таблиц и 7 рисунков. Состоит из шести глав, каздая из которых зклячае? в себя обзор литературы, экспериментальную часть, обсугщэние, выводы и праки ческие предложения. Список литературы включает 433 источника, в том числе 276 на иностранных языках.

- о -

Материалы и -атсли исследован::".,. "Лсоледсиапия проведены з 1933-12&4 гг. 2 племенных хозяйствах ^скозсаой, Иилегородсксй: а Вологодское областях. Первоначально задаче.. нагих аоследсзавай было совершенствование технологии трансплактад::;: о.'лбрясноз. По г.е-ре накопления цатериала возникла необходимость в лсстановк8 параллельных экспериментах связанных с антенса^кацаей воспроизводства в стадах. Синхронизацию охоты, вызывание супоровуляцаа, определение эффективности разных препаратов, осеменение короз п телек, извлечение и пегэсадку эибраонов осуществляли по методикам Е\1л1а. Концентрацию гормонов в кроБЯ коров определяли радноа*глунологачес-кии методом. Стимуляция активности яичников у коров в ранний послеродовой период ироведена на 440 коровах чернопестрои породы с использованием препаратов ФСГ а ГСЖ в сочетании с сур.Тагоном и простагландннани в разных дозировках. Влияние препаратов ФСГ, го-надолиберина а ЛГ на качество эмбрионов определяли на 57 коровах-донорах. Эффективность использования в качестве доноров эмбрионов высокопродуктивных коров определена на 60 животных. В работе применены общезоотехнпческае штода исследований, племеннне запаси и материалы зоотехнического учета по воспроизводству в стадах хозяйства, а такае материалы ветеринарного учета. •

Цифровой материал обработан по Е.К.Меркурьевой (1970). В целях экономна объема ограничились информацией о достоверности показателей, либо степенью ах корреляции. В некоторых главах сочли возмогшим приводить показатели в абсолютных величинах.

2. Результаты собственных исследований

2.1. Синхронизация охоты самок крупного рогатого скота

Основной ¿[актор, дестабилизирующий конечную результативности обработки с целью синхронизации - это отклонение срока наступления индуцированной охоты в сторону увеличения пли уиопызения от оптимального, равного 48 ч (после анъекцпа простаглалдина). В этих случаях сшигаются: I - результативность осеменения в индуцирозаннув охоту; 2 - эффективность использования коров в качес:^о донороз, а телок в качестве реципиентов на протяжении цикла, начавшегося после индуцированной охоты, т.е. в пндуцарова!

кий цикл. Эго дает обоснованность понятиям - качество ендудиро-охсгк и качество. и^гудиро генного цкклз. Иллюстрацией мо-

23г служить следугций эксперимент: в 3-х группах коров охогу индуцировали 500 и кг эстрофана. Группы формировали по стадиям цикла: в I, П я Ш группы вопли жиботекэ с 7 по 9, с 10 по 12 и с 13 по 15 деЕЬ цикла. У всех живогеых в одном из яичников было в наличии типичное гелтое тело.

Лучшие результаты были получены во П группе (табл. I). Большинство еивотных пришло в охогу через равный интервал - 48 часов после инъекции эсгрофана. У 90,0 % животных на 8-10 дэеь ендуциро' ванного цикла диагностировали желтое тело при отсутствии фолликула, что предполагает результативность при использовании коровы в качестве донора.

Таблица I

Результаты синхронизации охоты в зависимости от стадии полового цикла и гормонального профиля

Труп- Интервал Число хина от обра- вогних

ботки до пришедших начала в охоту

Гормональный профиль перед обработкой

Число КЙЕОТНЫХ пригодных к индуцированию полнову-ляшш

охогк, ч п % прогесте-_ рон,кг/шг эстраднол, п в % к числу пришедпнх в охогу

24 4 13,3 0,5+0,3 18,0*1,4 -

I 48 5 16,7 1,8*0,2 19,6*0,1 4 13,4

72 10 33,4 0,8*0,1 20,6*0,1 I 3,3

Всего 19 63,3 - - 5 16,6

24 3 10,0 1.9*0,2 31,9*2,0 3 10,0

П 48 21 70,0 3,1*0,3 28,9*1,7 21 70,0

72 3 10,0 1,5*0,3 26,0*2,0 3 10,0

Всего 27 90,0 - - 27 90,0

24 II 36,7 0,7*0,3 30,Ii3,0 2 6,7

Ш 43 4 13,3 2,0*0,2 27,0*2,1 9. 29,9

72 4 13,3 0,7*0,1 21,6*2,3 - -

Всего 19 63,3 - - II 36,6

Всего по трем группам 65 70,0 43 46,3 "

ЗЕ Р г 0,001; XX Р/ 0,05.

Результаты в других группах оказались значительно хуже. Сроки прихода в охоту как в I, так я в Ш группе были значительно рассеяны. Коров, пригодных для использования в качестве доноров, было меньше в 5 и 2,5 раза. Таким образом, общее снижение результативности синхронизация половых циклов у коров в промежуток с 7 по 15 дань спонтанного цикла при наличии хорошо выраженного желтого тела в одном из яичников происходит за счет неудовлетворительных показателей у тех животных, которых обрабатывали с 7 по 9 и с 13 по 15 день.

Проведенные гормональные исследования показали, что уровень прогестерона в крови животных I и Ш групп перед обработкой -0,5-0,7 нг/мд - существенно низок и характеризует неполноценность желтых тел относительно возможности их быстрого лизиса под действием экзогенного просгагландина. Тем не менее, такое функциональное состояние характерно для соответствующих периодов цак ла, гак как всего лишь 15,7 и 13,3 % коров в этих группах имели приемлемые концентрации прогестерона - 1,8 и 2,0 нг/мл соогвегст венно, что в определенной степени обусловило 48-часовой интервал прихода в охоту и, следовательно, физиологическое состояние яичников на 8-10 день индуцированного цикла, позволяющее сгимуля ровагь суперовуляцию.

Сопоставление соответствующей концентрации прогестерона и эсградиола с результатами синхронизации показывает, что характер ное для середины люгеальной фазы цикла (Д группа) сочетание сред них концентраций прогестерона и эсградиола соответствовало оптимальному интервалу прихода коров в охоту - 48 часов. Сочетание более высокого значения эсградиола о более низким, чем среднее значение прогестерона, соответствовало укорочению аналогичного интервала до 24 часов, а значения концентраций как эсградиола, гак и прогестерона ниже средних - увеличению интервалов до 72 чг сов.

Приемлемые результаты, 48-часовой интервал прихода в охоту и наибольший процент пригодных для последующего использования животных в I и Ш группах получены при соотношениях близких к средним показателям концентраций эсградиола и удовлетворительны показателях прогестерона. Отклонения в сторону увеличения либо уменьшения от такой концентрации эсградиола при существенно низ ках показателях прогестерона приводят либо к рассеиванию сроков прихода в охоту в I и Ш группах, либо к ее отсутствию во всех грех.

Ъ дальнейшем проведении эксперимента две группы животных на 7-9 и IS-I5 день цикла обработали ко:лплексно: одну - эстро-фанзы г ГСЕК, животным другой - дополнительно, через 48 ч, вводили сурфагон. Контролем служила П группа (табл. I) с наилучшими показателями. СосоставлвЕие показало, что введение гонадотропи-ное положительно корректирует недостатки, связанные с неблагоприятными исходными факторами на момент начала обработок. Введение в комплексе синтетического гонадолиберина ведет к дальнейшему повышению эффективности на 10,0

ibsEO предполагать следующее построение причинно-следственных отношений, приводящих к снижению результативности обработок: индуцирование охоты в период до 10-го и после 12-хо дня спонтан-еого полового цикла и при морфологическом состоянии яичников, которое не соответствовало способности целесообразно в Функциональном отношении реагировать на эндргооннй просгагландин приводит к рассеиванию сроков проявления охоты. В этой ситуации увеличивается вероятность нарушения процесса индуцированной овуляции. Это подтверждается данными литературы, согласно которым, в противоположность естественному циклу, базальная концентрация ЛГ не повышается перед индуцированным эструсом, а предовуляторный пик ЛГ может не достигать необходимой для нормального процесса овуляции величины. В нашей работе введение синтетического гонадолиберина перед осеменением всегда оказывало нормализующее влижие на пред-овулягорную концентрацию ЛГ и, тем самым, стабилизировало высокие показатели оплодогворяемосги животных в индуцированную охоту.

Для понимания сущности процессов, лежащих в основе направленной регуляции половых циклов большое значение имеет выяснение роли межэсгралышх фолликулов. Предпосылки к вызыванию охоты у животных зависят не только от возраста желтого тела и его функционального состояния, но и от степени развития фолликулов и размера их популяции на протяжении всей лютеальной £азы. Введение просга-гландина перед серединой полового цикла прэрываог литвиновую фазу только при наличия маленького фолликула, а от того овулировал ли преобразованный фолликул или образовавшийся з результате лизиса желтого тела под действием экзогенного простагланднна, зависит продолжительность периода между прерыванием спонтанного цикла и последующей индуцированной охотой. Данное положение имеет исключительное значение, гак как объясняет важнейшую причину, приводя-

зух к рассеиванию сроков прихода з г хоту коров, обработанных про-стаглг .¡динами. Зге и обосновывает введение в схему индуцирования охоты у гизотпнх гонадогропинов при обработках простагландп-ками до 10 а после 12 дня и, более того, при фронтальных обработках, благодаря тому, что гонадогропинк будут способствовать унификации (в определенной степени) про.^гоз г яичниках обрабатываемых коров относительно роста, созревания и овуляции фолликулов. Становится очзвидной закономерность более синхронного прихода в охогу большинства животных через оптимальный 43-часовой интервал. Большое значение приобретают выясненные нами соотношения концентраций эстрадкзла а прогестерона перед обработками о налью индуцирования охоты. С точки зрения теории, они доказывают з обосновывают правильность выдвигаемых нами полохениЛ, с точки зрения практики, определение исходного гормонального статуса дает информацию об исходных овариальных процессах в яичниках, позволяющих регламентировать режим обработок: синхронизация введением только простагландина будет эффективной при концентрациях прогестерона - 3,1 нг/мл и эстрадисла - 23,9 иг/мл, характерных для середины спонтанного полового цикла. При концентрациях, характерных для периодов цикла с о-го по 9-2 и с I3--0 по 16-2 день целесообразно в обработку вводить гонадотропины.

Дальнейшими исследованиями эндокринных аспектов суперову-ляциа и осеменения коров-доноров выяснили ^акторы (стр.2 0 ), нмапдиэ ванное значение а справедливые для моноовуляции при ин-дуцироЕанкой охоте. Б результате мы пришли к выводу о необходимости разграничения показаний с целью управления половым циклом: I - для улучшения качества индуцированной охоты с целью наиболее плодотворного искусственного осеменения; 2 - для достижения качественного индуцированного цикла при подготовке доноров и реципиентов.

Унификация овариальных процессов гонадотропиками, вводимыми в сочетании с просгагландинами, предполагает возможность 'фронтальной обработки при обеих разграничениях. Однако, в первом случае введение гонадолиберина в охоту перед осеменением корректирует срок зыброса лГ, создавая адэкЕатнка условия для оплодотворения при осеменении, во втором - следует зьодить препарат через 43 часов после инъекции-простагландина, для стабилизации времени прихода з охогу, что на момент начала вызывания суперовуляции или пересадок эмбрионов положительно повлияет на функциональ-

нов качество желтого тела.

Следует подчеркнуть, что нягда в литературе гот или другой предлагаемый метод обработок не обусловливают конкретными показаниями. В го же время наши исследования предполагают целесообразность а других показаний при обработках с целью индуцирования охоты: для отбора коров в качестве доноров, а телок - в качестве реципиентов г для диагностики рядапатологий репродуктивной системы.

2.2. Восстановление репродуктивной функции коров, однократно иопользуаыкх в качесгзе доноров эмбрионов. Стимуляция овариальной активности в послеродовой период

При однократной использовании лактирующих коров в качестве доноров эмбрионов экономическая целесообразность диктует планировать время индуцирования суперовуляции и извлечения зародышей таким образом, чтобы иметь максимально сокращенный период от пре,, шествующего извлечению отела до последующего после извлечения зм брионов плодотворного осеменения. Известно, что стадия лактации влияет на показателя суперовуляцли, определяя особую сложность в достижении сопряжения опгимумов двух показателей: числа пригодных для пересадки эмбрионов и продолжительности периода от отела др плодотворного осеменения коровы после использования ее в качестве донора.

Нами был проведен анализ показателей эмбриопродукгявности '-оров в разные стадии лактации. В итоге выяснили, что наиболее благоприятным сроком проведения индуцирования супэровулнции являг ется период от 60 по 80 день лактации.. Но при таком сроке промежуток от отела до плодотворного осеменения после извлечения эмбрионов довольно продолжителен а соответствует 134,8-159,1 дн. Его можно сократить за счет интервала от извлечения да последующей охоты, т.е. восстановительного периода, за время которого происходит лизис желтых тел а нормализация размеров яичников. С этой целью у доноров введением синтетических прэс1'агландинов стимулировали ускоренный лизис желтых тел. В результате воздействия было достигнуто уменьшение как продолжительности восстановительного периода в 2,0 раза, гак в промежутка от отела до плодотворного осеменения, который сократился относительно контроля на 2543 дня. При этом оплодотворяемоегь в опытных группах после первого осеменения была лучше чем в контрольной группе.

В продолжение экспериментальной работы была посгазлена цель: выяснить возможные пути дальнейшего сокращения периода от отела до плодотворного после извлечения эмбрионов осеменения, предполагая, что этого молено достичь путем стимулирования циклической активности яичников посла родов медикаментозными средствами а таким образом получигь возможность в более ранние сроки использовать корову в целях воспроизводства.

Для реализации поставлено?: задачи исследования провели в направлениях: I - определение возможности ускорить наступление 1-й овуляции I 2 - выяснить влияние стимуляции овариальной активности на нормализацию первых циклов в деятельности яичников (табл. 2; 3). На первом этапе исследований оценку воспроизводительного статуса проводили по оплодотворявшего коров после искусственного осеменения.

Таблица 2

Схема исследований по стимуляции послеродовой овариальной активности (опыт I)

Группа Число животных Препарг Доза День введения после отела

I - контр, , 50 - - -

П 30 Сурфагон 15 мкг 10

Ш 50 Фоллитропиь 500 ИЕ 10

1У 50 ГСЕК 1000 ИЕ 5

У 30 рз¥ 500 мкг I

сурфагон 15 мкг 10 Таблица 3

Схема исследований по стимуляции послеродовой овариальной активности (опыт 2)

Группа Число животных Препарат Доза День введения после отела

I - контр, . 50 - - -

П 30 Фоллитропин + сурфагон 500 ИЕ 15 мкг 5 12

Ш 50 ГСЗЕК + сурфагон 1000 ИЕ 15 МКГ 5 12

1У 30 Фоллнтропин + рз- V 1000 ИЕ 500 мкг 12 12

+ сурфагон 15 мкг 14

У 40 пяж + Р* Р9* + сур«агон 1000 ИЕ 500 мкг 15 мкг II 13 15

Влияние введенных препаратов на ускоренное наступлениз овараальной активности после огела оказалось очевидным. У большинства опытных животных в сравнении с контролем достигнуто как раннее созревание ^оллгкуг.з., так и раннее наступление овуляпин. Число коров с овуляциями до 15 дня после родов во втором опыте было ниже, чем в первом. Однако, Ее было достоверных различай по показателям общей оплодотворяемосги в обеих опытах, включая контрольные группы. При анализе стимулирующего овуляцию действия обработок по отдельным группам констатировали более выраженное действие в группах Ш и У первого опыта и 1У и У второго опыта. Для более детального анализа степени Еоспроизюдигелъкого статуса животных в опытных и контрольных группах вывела и сравнили показатели индексов осеменений. В первом оныте индексы осеменения меньше при более коротком сервис-периоде, а это доказывает более качественный воспроизводительный статус. Во втором опыте окончательные результаты наиболее благоприятны в 1У и У группах. Большое значение имеет эффективность примененных схем для тех животных у которых ко дню аппликации препаратов не было в наличии ' Золликулэ и отсутствовала овуляция к 15 дню после родов. Худшую оплодогворяешсгь, соответствующую более высоким индексам осеменения зафиксировали в Ш и 1У группах первого опыта. У части животных, обработанных только '¡оллитропаном ила ГСЕК в первом опыте, у которых к 15 дню имелся фолликул, была отмечена тенденция к трансформации -юлликула в фолликулярную кисту, причем такие зиЕОТные не оплодотворились а в дальнейшем. Это говорит о нежелательности индуцировать овуляцию до 15 дня после отела.

Установлено, что различия в оплодогворяемосги между животными с хорош и плохо Екраненной овариальной активностью экспериментальных групп в обеих опытах приблизительно соответствует таковым различиям контрольных групп.

Допуская, что посла стимуляции первой после отела овуляции яичники начинают нормальную функциональную деятельность, мы испытали возмокность индуцировать супе]х>ауляцию в последующие 1-й а 2-й цаклы.

Исследования доказали возмокность вызывать суперовуляцаю во 2-й половой цикл после стимулирования перЕой послеродовой овуляциа и получагь хорошие результаты. При этом значительно сократился париод от отела до плодотворного после.извлечения зародышей осеменения (стимуляцию более быстрого заваргеная восстано* витального периода проводили введением нросгагландинов).

В данном фрагменте работы была установлена эффективность профилактики возможного эндометрита после извлечения эмбрионов комплексным применением ГАМП с грициллином. Дополнительное введение в комплексе кислорода позволило еще более повысить результативность осеменения коров после использования в качества доноров.

Далее мы исследовали эндокрин.'ше факторы, лежащие в основе направленной стимуляции воспроизводительной активности. Для этого проанализировали показатели суперовуляции вызванной в пос! партальный период при наиболее типичных проявлениях половых пик лов. Но предварительно было выяснено, что 1-ая овуляция наступает на 14-33 день после отела и у половины коров клинически вы раженными признаками не проявляется. Эту овуляцию фиксировали регулярными исследованиями рекгально. Парный цикл пожег быть укороченным. В этом случав вызывание суперовуляпии 8 1-й или 2-цикл оказывается безрезультатным. В го же время было найдено, что укороченный цикл негативного влияния на рвзуль"агявноогь ис куссгвенного осеменения не оказывает.

Гормональнкэ исследования иллюстрирую;- п%\ •'.•'*< 1у негативных показателей супероэуляции в первый поолерсд^во4 ТаИкя - это существенно низкая концентрация прогестерона вследствие функциональной неполноценности желтого тела, что в свою очередь предполагает отсутствие завершения инволюции матки и послеродовой эндокринной перестройки (рис. I, А). Однако, направленная активизация функциональной деятельнооги яичников дала возможное« получать удовлетворительные показатели (3-5 эмбрионов) в индуцированный цикл и хорошие показатели (а» 5 эмбрионов) в спонга] ный цикл, последовавший за индуцированным. Значения концентраций прогестерона при этом свидетельствуют о наступившей нормал! зации половой функции (рис. I, Б и В).

Таким образом, гормональные исследования указывают на при ципиальную состоятельнооть стимулирования овариальной активное после отела, что дает обоснованность проведению биотехнических мероприятий о целью более раннего (после отела) как осеменения так и получения эмбрионов. Теоретически важным является выясне ние того, что восстановление и стабилизация морфофункциональко го состояния эндометрия тела, рогов матки и ее внутренней сред запаздывает относительно срока стабилизации циклических процес сов в яичниках. С другой сгоро*.-.., необходимо отметить, что достигнутая за счог послеродовой овариостимулядяи стабилизация

Прогестерон (нг/мл)

Обработка в 1-1. спонтанный цикл

.(негативные результаты суперовуляции)

Дна после отела

Обработано в индуцированных цикл

(удовлетворительные результаты;

Дни посла отела

Обработка б спонтанный цикл после индуциоованной охоты (позитивные результаты)

Дна после отела

отел

осеменение

Рис. I. Изменения концентрации прогестерона в крови в зависимости от длительности послародового*интервала

функциональной деятельности яичников определешалгобразом ускоряв? восстановительные процессы в матке и это подтверждают позитивные показатели супероЕуляции, вызванной в спонтанный цикл, последовавши за первый индуцированным.

Показательно, насколько а не л из динамлки изменений концентрации прогестерона мо~.бт быть полезен для оценки функционального состояния рапродуктявной системы в критическую послеродовую фазу, причем на только относительно технологии трансплантации, но и в целом для зоотехнической и ветеринарной работы (например, своевременно зафиксирэсэнная овуляция, не сопровогдакцаяся клиническими признаками, предста&'кег реальную.возможность снесения среднестатистического показателя серакс-пераода).

2.3, Эндокринные аспекты отбора, суперовуляции и осеменения коров-доноров эмбрионов

Исследования позволяют констатировать, что определением концентрации прогестерона в крови коров, наряду с правильной оценкой овэриальной активности яичников после родов мокно уточнять и дополнять данные клинического контроля перед синхронизацией охоты я индуцированием суперовуляции. 3 частности оптк:лэяь-ная активность желтого тела, предполагающая результативность индуцирования супоровуляции, обусловлишзт концентрацию прзгаст< рона в крови доноров от 2,9 др 4,0 нг/мл. Болбе качественно осуществить отбор доноров дает возможность анализ динамики изменений концентраций прогестерона. На рисунке 2 показаны примеры типичных я атипичных кривых, отражающих изменения концентрации прогестерона в крови, предшествующих положительным и отрипа твльпт показателям супоровуляторной реакции. Следует обратить внимание на значения прогестерона в день охоты, которая предшествует началу обработок. В случаях А и 3, при получении оптимального я приемлемого уровней суперовулянии, показатели концентрации прогестерона в кропи доноров соответствовали типичным среднестатистическим значениям, характерным для данного период« полового цикла, в то время как негативной супоровуляторкэй реаг ции в этот период временя нредиесгЕОваля атиличниа значения (В и Г). Необходимо отметить, что неправильная фиксация сроков охоты - весьма распространенная ошибка, часто сводящая к минимуму усилия специалистов в практике технологии получения эмбри< онов. Это обстоятельство определяет значимость выясненных нашх показателей, дакхцих методическую оонову избегать омбок пря да

Рио'. 2, Градация концентраций прогестерона в крови, определяющая целесообразность использования коровы в качеотве донора.

агностике охоты.

Введение а режим обработок для индуцирования суперовулнции синтетических гонадолиберинов оптимально унифицирует продолжительность охогы, в результата этого происходит улучшение показателей суперовулягорной реакции (С.Н.Хильаавич и др., 1990). Такой же эффект получают и от введения в схемы обработок.'- . лют а визирующего гормона (препарат - овогон-ТИО), Ситуация является следствием положительного влияния указанных препаратов на оптимизацию гормонального фона при котором прсиоходиг овуляция фолликулов, оплодотворение и развитие э?лбрконов.

Выяснению взаимосвязи динамика гормональных профилей и показателями индуцированной супзровуляции была посвщена саль наших исследований, для достижения которой поставили задачу проследить в какой степени показатели гормонального фона при судерову-ляции соответствуют параметрам гормонального фона в аналогичный период спонтанного цикла и в этой связи проанализировать эмбрио-продукгивность доноров. /

Суперовуляцию у коров-доноров двух опытных груш: вызывали на 10 день цикла сочетанием препаратов $СГ и Р^ Тсу*- по 4-дневной схеме» Осеменение проводили через 48 ч пооле иг.ьекции про-сгагландина дважды с интервалом 12 ч. Донорам ¡1-й группы перед первым осеменением вводили в качества гонадолиберина па 15 мкг сэ фагсна. Для представителей 1-й опытной группы построила два графика , соответствующие негативной и позитивной реакции* Животные П-й группы в целом прореагировали позитивно (при извлечении от донора 3-х и более ннгакгнюс эмбрионов реакцию считали позитивной, менее 3-х - негативной).

На рисунка 3-А представлено графическое отражение средних значоний прогестерона {?0,001) и эсградиола (Р/. 0,05) конца-начала спонтанного цикла (п=20), построенное на основе полученных данных, совпадающих либо близких данным, приведенным в публикациях других исследователей (А.Г.Нежданов, Н.А.Соловьев, 1986; 1990).

Изменения концентрации прогестерона и эсградиола, соогвпг-сгзующие поз иг иеной суперовулягорной реакции (рис. 3-© близки значениям, которые характерны для соответствующего периода епонгонного цикла. При оптимальной функциональной акгивнооги желтого тела на 10 день цикла, вследствие дополнительно к эндогенному гонадогропного ^Г-дейс-твия, происходит рост дополнительного числа фолликулов и гместе с тем продуцирование допол-

га

А. Спонтанный цикл (контроль)

Эсградиол (иг/мл)

16-

<1

4 Прогестерон

2 (ш/МЛ) 1>

В. Негативная реакция

Эсградиол (пг/мл)

Прогестерон (нг/мл)

7П-5

тп—и

С. Позитивная реакция

Эсградиол (нг/мл)

д

Прогестерон (нг/мл)

Д. Позитивная реакция

Зсградаол (пг/мл)

Введение синтегичео- ^ кого гонадолиберина

--у. ■ 0 - — у-7 " 0 4-Г

Рис. 3. Гормональные профили с у п е ро вул иру вдих коров.

Лщ в 7цк,<ла

ш

нагельного количества эстрадгаэла. Поэтому эсгрэгэзная вершина з прздрвуляторный период выше, чем при обнчнс/1 течка. Багом следует крутое паденае, незначительную подъем и снова умеренное падание эсградиола к 7 дня индуцированного цикла. Иллюстрируемая динамика определена нормально проходящим процессом стимули-розанного роста, созревания и овуляций фолликулов.

Параллельно, вследствие воздействия эндогенного просгаглан-дина, происходит быстрый лизис зелгого тела цикла. Концентрация прогестерона закономерно снижается до базального уровня, соответствующего кошентрации, характерной для спонтанной охоты и начинается умеренный и, далее, с 3 дня быстрый и крутой подъем к 7 дню цикла, что обусловлено значительно массой лззгеальной ткани, образовавшейся в результате овуляции большого числа фолликулов.

Кривая (рис. огракаюзая изменения концентрации гсгра-

диола и прогестерона при суперовуляции с негативными показателями, резко отличается от графиков, отражающих спонтанно прогэу кащую овуляцию и позитивную суперовулягорнуто реакцию. Отличие', равно как и негативные показатели, могут быть обусловлены рядом факторов. Одним из них монет быть недостаточный лааас желтого тела после воздействия экзогенного простагландина, что является важнейшей причиной отсутствия позитивных показателей в реакции яичников на гонадогропин, гак как его остаточная активность отрицательно влияет на развитие и оплодотворение яйцеклеток. В эгой ситуации обратная реакция выделения гипофизом ЛГ на действие эстрогенов, хотя и позитивна, но монет быть недостаточна для овуляции всех вызванных к росту фолликулов. Одновременно нельзя исключить возможность преждевременного возрастания концентрации прогэсгерона, чему способствует преждевременная овуляция какой-то части индуцированных фолликулов и, соответственно, секреторная активность преждевременно образовавшихся желтых тел. Яйцеклетки этих фолликулов досрочно проникают в матку и, вследствие физиологической неподготовленности маточной среды подвергнутся процессу перерождения. Ситуация хорошо прослеживается на кривой, огра-.улщей смаку падания концентрации прогестерона в день 0 его подъемом в день I.

Зсградиол с окре тпрукая функция индуцированных фолликулов определяет более высокую концентрация эсградиола, чем при спонтанной течке. Небольшая разница не оказывает отряцательного влияния на показатели супороьулягорной реакции, но существенно высо-

кие концентрации эстрадиола предполагают негативные показателя. Это возможно в случае, когда под действие гонадо тронных препаратов попадает какая-то часть фолликулов начинающейся "второй болен" популяции, эстрогенная инкрецяя которых суммарно к инкрецил фолликулов от "первой волны" создает черезмернкй эстрогенЕый фон.

Сохранении высокой постовуляторной концентрации эстрадиола будет способствовать и некоторое число фолликулов, остающихся неовулироваваими либо запаздывание их овуляции, а остаточный эсгрогеннкй фон отрицательно сказывается на процессе оплодотворения и развития эмбрионов.

Нами кратко изложена лишь часть возможных вариантов гормональных сдвигов, взаимообусловленных с предзвулягорнкм состоянием индуцированных к росту фолликулов, предполагающих негативные результаты. Однако, важным моментом является то, что все варианты предоаудиторного гормонального дисбаланса сведутся в конечном счете к отклонению в сторону увеличения или уменьшения продолжительности интервала между инъекцией простаглаЕдина и пиком лютеинизярухиего гормона при возможной, одновременно, его общей недостаточности. Только это может быть непосредственно!, причиной трех важнейших нарушений в процессе множественной овуляции:

1 - преждевременные или поздние овуляции;

2 - отсутствие овуляций большого или меньшего числа фолли-

кулов;

3 - сочетание двух первых нарушений.

Указанные нарушения уже в свою очередь обусловливают посг-овуляторныа сдвиги в гормональном балансе, ответственном за оплодотворение яйцеклеток и развитие эмбрионов. Поэтому, вполне закономерно, что введение синтетического аналога гонадолиберина в ранимы гормонального индуцирования суперовуляцяи приводит к стабилизации позитивных результатов за счет оптимальной унификации срока выброса ЛГ. Справедливость полозсения доказывают эволюции концентраций прогестерона я эстрадиола, которые идентичны эволюциям, протекающим во время спонтанной овуляция (ряс. 3-Д).

В отдельных случаях введение аналогов гонадолиберина не дает ожидаемых результатов. Ограничение позитивной реакции на препарат может происходить вследствие длительного дефицита ЛГ в депонирующих структурах. В корме эндогенный гонадолаберан первично стимулирует выброс ЛГ я только вторично- его синтез, поэтому, разовое введение синтетического аналога в прздзлах обцепря-

пятых дозировок не приведет к необходимому, в количественном отношении, выделению гокгдотропика. Б го же время повышение дозы вводимого препарата с целью стимуляции синтеза гонадотропина на даст положительного эффекта беиду ^ого, что з корма эндогенный гонадэлиберин выделяется пульсаторно, а равномерно высокий уровень введенного аплога не будет физиологичным и вызовет десенсибилизацию гонадогропных клеток. Кроме того, равномерно высокая концентрация гонадолиберина опосредовано кнгибирует все интраова-риальные процессы, а если имеет место функциональная недостаточность яичников, го введенный в большой дозе препарат нарушает плюс-минус координацию в системе яичник-гипоталамус-гипофиз. В результате не произойдет завершения созревания и овуляции фолликулов (Л.Г.Нежданов, А.Н.Соловьев, 1990), а как крайне неблагоприятное осложнение, возможно глубокое структурное перерождение ткани яичников, ведущее к необратимому бесплодию. Указанные факторы требуют четкого разграничения показаний к применению аналогов гонадолиберина на технологические и терапевтические, а факго длительного дефицита ЛГ в депонирующих структурах, при котором аппликация гонадолиберина не может быть результативной, служит противопоказанием к его применению и очевидным показанием к применению препарата оеогои-ТИО.

Гормональные исследования суперовулягорного процесса, вызываемого с введением в схему обработки синтетического гонадолиберина обосновызают возможность унифицированного режима осеменения двукратно, с интервалом 12 часов, начиная через 48 часов после инъекции просгагландина. При рекомендуемых параметрах учитывается: жизнеспособность яйцеклеток - 8 часов, живучесть спермиев в половых путях - 24 часа, длительность продвижения их к месту оплодотворения - около 12 часов. Благодаря этим факторам, возможные незначительные сдвиги выброса пика ЛГ и, связанные с этим, изменения продолжительности овуляторных процессов в небольших временных границах существенного негативного влияния не окажут.

2,4. Использование "выбракованных" и "проблемных" коров в целях воспроизводства

3 экспериментах по получению эмбрионов от выбракованных ко> ров, яивогннх в качестве доноров использовали от одного до четы рек раз подряд. При этом выявили стабильную тенденцию снижения показателей суперовуляции после каждой последующей обработки. Несмотря на негативную тенденцию к снижению результативности пр

лтгократпых обработках, сум-мзрно среднее число интактных эм1ри-)edb на донора при четырехкратной обработка оказывается почти в *ва раза вьзяе, чем при двух- и трехкратной.

Таким образом, усганоалзна целесообразность многократного ¡^пользования е качестве доноров Забракованных коров, учитывая гулесгванную деталь - отсутствие положительной реакции на oóps-5отку не является абсолютным пспззанием для исключения животного из числа доноров, т.к. даже после первых грех безуспешных обработок, четвертая - может оказаться успе-пно£.

Опыт по воспроизводству с "проблемными" животными подтверди большую значимость и ценность бнокагализаторов. Тем не ленее, направление первой части исследований, проведенных, прак-сически. в полной аналогии с методиками исследований, описанных в литература, показало несостоятельность прагмагично-гехнологи-1вского подхода к решению проблемн. Вря^ ли состоятельны и сами гермины - "Еыбракованные коровы", "проблемные коровы" как в теоретическом, так и практическом смысле. Вторая часть исследований шдгвердила это позитивными результатами, когда целью ставилось восстановление репродуктивной функции коров на осиовэ точно дифференцированного диагноза и адекватного гормонального воздействие Коровам с фоллиЙярной кистой эеодилп аналог гонадолябарика -зурфагон в дозе 10,0 мл и 3,0 мл аналога просгагландина (супермен, клатрапросгин или эсгуфалан) с интервалом 8 дней, коровам з лютеальной кистой или персисгентным желтым телом - 3,0 мл ана-tora просгагландина. При гипофункции яичнакоз вводили 1000 ИЕ ЗЙГ (фоллитропин) и 1500 ИЕ ХГЧ с интервалом три дня. Гормональную терапию сочетали с внугриматочным вьзденаем препаратов ГАШ i трициллина или ГАШ и гряцидлина в сочетании с кислородом.

Полученные данные позволяют констатировать положительную и 1риблизительно равную результативность (до 30 %) примененных ре-еимов гормональных воздействий при всех указанных патологиях. 1римзнение утероинфузнй дало последовательное улучшение резуль-гативносги.

Режимы обработок разрабатывали предполагая следующую дина-лику патогенеза: несвоевременный, запоздалый (как правило, еслзд-зтвие блокады прогестероном) выброс пика JT на «¿она обзей кедо-:гаточности генадотропинов приводит к нозникновенно пэреистирующего фолликула и трансформации его в фолликулярную кисту, гормо-iaльнaя активность которой проявляется специфической клиникой: j коров регистрируют постоянные признаки течки и половой охоты.

При возобновлении нормопаклической деятельности соответствующих эндокринных структур возможна лэгегнизгщия фолликулярной кисты с последующим ее лизисом (в том случав, если будет иметь место нормальное образование и секреция маточного просгагландана). Однако, нарушение образования Pf Fg* может служить причиной формирования стойкой лютеальной кисты. В кистозном образовании наступают глубокие дегенеративные изменения и агрофические процессы. Нарушение тканевого питания служит причиной развития неспецифической соединительно.; ткана, способствующей фиброзному перерождению яичника. Углубление патологического процесса ведет к'постепенному замещению специфических структур яичника соединительнотканными элементами, что морфологически соответствует резкому уменьшению объема и уплотнению тканей яичников, а (функционально - к гило- и затем к дисфункции. Внешнее проявление патогенеза проявляется в неправильном чередовании стадий полового возбуждения, в начале с укорачавагдимася интервалами ств-дий уравновешивания. По мере развития патологии, стадии уравновешивания удлиняются до полного прекращения цикличности половых поведенческих реакций животного. Тако8 объяснение патогенеза монет быть рекомендовано в качестве методической основы заместительной гормонотерапии. Оно аргументируется положительными результатами собственных исследовании.

Опыты по индуцирования суперовуляции после устранения ова-риопагологии проводили на четырех группах коров. В опытах в 1-ю группу входили животные после устранения персисгенгного желтого тела, во П-ю и Ш-ю .фолликулярной и лютеальной кисты, 1У-ю - гипофункции яичников. Индуцирование суперовуляции проводили фол-ликулостимулирующим гормоном по 4-дневной схеме.

Показатели суперовуляции, индуцированной во второй половой цикл у коров после проведенного лечения оказались неудовлетЕори тельными, в го время как индуцирование суперовуляции в 3-й половой цикл после терапевтических мероприятий оказалось приемлемым. Следует отметить, что персисгенгное желтое тело является м тяжелой патологией, в смысле простоты его устранения, а показатели последующей полиовуляпии выше, чем у коров после устранения других видов патологии.

2.5. Блеяние экзогенных и эндогенных факторов на воспроизводительную функцию крупного рогатого скота

Являясь часть® общей нейро-эндокринкой системы организма, нейро-эндокринная система гениталий «с-долочеои железы в определенном смысла целостна для этих органов. Как а в основе всей нейро-эядркринной регуляции организма, в основа ее функциональной деятельности лежит принцип "плюс-минус" взаимодействия. Поэтому, в случав возникновения патологии, следует предполагать два возможных направления патологического процесса: молочная железа - гениталии и гениталии - молочная железа. Изложенная нам« концепция не заходят отражения или не принимается во внимание в исследованиях по биотехнологии воспроизводства. Учитывая это, и изучили данный аспект как эндогенный фактор, влияющий на воспроизводство в контексте с результатами сс тэдований по выяснению влияния внешних факторов на репродуктивную функцию.

2 ходе детального анализа по месяцам (1985-1993 гг.) зако'-вомерно постоянного влияния сезонных условий на получение в результате индунированной полиовуляция эмбрионов проследить не удалось. В то же время выяснили один из основных факторов; оказывающий негативное влияние на воспроизводительный статус, которым является температура окружающей среда. У лактирующих коров эффективность обработок резко снизалась в условиях, когда температура окружающей среды поднималась вь-ше 30 °С, что было характерно для разных лот и разных регионов страны: Московская об-даоть. Северный Кавказ, Уральская область, Башкортостан.

Внешние признаки индуцированной охоты всегда были выражены плохо. Это затрудняло фиксацию сроков начала охоты к, следовательно, увеличивало вероятность ошибки при выборе дня для начала индуцирования суперовуляции. Желтые тела в яичниках в день нача-ва ищуцирования полиовуляции пальпировали с трудом и оценивали всегда как плохие и редко как удовлетворительные.

(Невидно, низкая оплодотворяемость и высокий процент дегока-запяя эмбрионов связаны с нарушениями в условиях термального >тресса 2-х процессов: терморегуляции и сохранения нормального гормонального равновесия. У лакгирукцях коров нарушается способность поддергивать нормальную температуру тела при термострэссах и-за высокой интенсивности теплопродукции, связанной с с о кран/.-!Й молока.' Это приводило к повышению ьнугрнмах'очной температуры г всех исследованных коров приблизительно на 0,5-1,0 °С вшэ

средненормальной (37,о °С).

В условиях термального стресса нарушается гормональный баланс. Хотя авторы большинства публикаций сообщают, что даже при значительном повышении температуры окружающей среды изменений концентрации прогестерона и эсградиола не происходит, мы такие изменения зафиксировали: у всех животных на 9-10 день цикла концентрация прогестерона была всегда ниже нормальной. Если учесть существующую закономерность соотношения прогестерона с эсгради-олом для середины полового цикла, го и концентрация эстрадиола не соответствовала норме. Низкая концентрация прогестерона перед началом обработок является, по всей вероятности, следствием повышенной секреции эндометрием лактирующих коров ,

который ингибируег развитие и гормональную активность желтого тела. Повышение секреторной активности матки происходит из-за увеличения чувствительности эндометральных тканей к окснгоцину, •в ответ на действие которого и осуществляется дополнительный выброс маточного просгагландина. В свою очарздь, повышение чувств! гельности эндометрия к окситощшу в условиях гермосгресса происходит из-за нарушения внугриматочного равновесия температуры. 3 агих же условиях задняя доля гипофиза дополнительно инкрегиру-ег оксигоцин, что дополнительно усугубляет процесс. При стрессовом повышении температуры окружающей среды концентрация прогесг« рона на протяжении полового цикла остается устойчиво низкой и лишь к 10 дню несколько повышается. В такой ситуации возможно отсутствие пика эстрадиола перед началом индуцированного процесса овуляций, а концентрация ЛГ имеет небольшой пик при короткой продолжительности. При спонтанно протекающем цикле, указанный гормональный дисбаланс многократно увеличивает вероятность образования овариальных кист. В опыте это предположение подтверждается наличием большого числа'неовулировавших фолликулов после индуцированной суперовуляции.

К выводу о том, что термостресс один из главных факторов ш гативно влияющий на воспроизводительную функцию, приводят дан'ньм полученные на коровах-донорах, не давших в условиях термального стресса позитивной суперовуляторной реакции, но прореагировавши позитивно в условиях нормальной температуры.

Дополнительно следует учитывать данные литературы об увеличении коннэнтрации коргизола в сыворотке крови при сгресоовых повышениях температуры. Коршзо'л и регулятор его продукции -гяпофдзарннй коргиг.огроплн способны тормозить активность "поло-

вого центра" гипоталамуса, опосредовано подавляя выработку ДГ. Кроме того, твердо установлено непрямое, через пкгибированне лю-геинизирующей функции гипофиза, елияниз тнреоидккх гормонов, зависшее от стрессовых повкланяй температурк, на оплодотворяемость. Таким образом, прослеживается направленная обусловленность процесса овуляций ог темцерагурного фактора через посредство слоеной взаимосвязи щитовидная хзлеза - гипоталамус - гипофиз - гонада при определенной роли коры надпочечников.

Безусловно, негативную роль в возникновении патологий воспроизводства играют а другие факторы, например, резкая смена рационов кормления. В летний период» аре пастбищном содержании, возможно появление у коров, таг называемого, гоперэстрогенизма. Расгига.корма, содержащие фитоэстроганы являются предрасполагать фактором репродуктивных нарушений. Однако, фигоэстрогены кормов нельзя рассматривать только гаи негативный фактор. Найдено, что в ранний послеродовой период повышение содержания эстрогенов в крови, после скармливания коровам кормов, содержащих фитоэсгроганы, способствует нормализации образования маточного Ро Р«^ » янеолюции матки, элиминации микроорганизмов в магоч ной среде, усилению интенсивности фагоцитоза бактерий лейкоцитами из крови и лохяй. Эффакт растительных эстрогенов, сгимули-руддих созревание фолликула, а следовательно и наступления эсг-руса, в некоторых случаях, поено рассматривать как существенный фактор самовосстановления эндом-з тральных нарушений или интенсификации инволюции матки.

Преодоление в условиях производства неблагоприятного влияния климатических факторов представляется весьма проблемагичной задачей. Тем не менее мы наели, что иакторы теплового стресса возможно нивелировать за счет оптимизации условий содержания коров при существенном повышении температуры воздуха. С целью устранения гипа рте рмича с кого стресса изучали влияние охлаждения помещений на воспроизводительную функцию коров. Продолжительность охлаждения (с поыощ>ю разбрызгивания и вентиляции)-составляла 30 минут, по 7 раз в день с интервалом 2 часа. Такое применение охлаждения в летний период способствовало повышению плодовитости по сравнению с контролем. Работы со индуцированию суцеровуляции а этих условиях выяснили принципиальную возможность нивелировать неблагоприятные стрессовые факторы.

Анализируя данные литературы и собственных исследований, следует констатировать наличие тесных взаимосвязей между молочной

.те.73зой а половыми органами. Регуляция функционального состояния Еыменн й полоеых органов осуществляется нейро-гуморальной системой как единого целого. Если твердо установлено, что импульсы от гениталии к молочной железе идут по прома жно с гному нерву, з от молочной железы к гениталиям через посредство поясничко-па-хоеых и крастцово-промажкостных нервов коротких рефлекторных дуг, а кровоток от гениталий к молочной железе осуществляется по промежностной артерии и вене, то наличие локальной гуморальной связи в направлении молочная железа - гениталии ряд авторов отрицает. Однако то, что в период клинического проявления маститов, в период их терапии, а также в определенный период после их устранения у коров фиксируют репродуктивные нарушения (атонию и гипотонию матки, расстройство ритма и неполноценность половых циклов, снижение оплодотворяемости вследствие агглютинации сг.ер-мнен), объективно подтверждает наличие такой связи. Об этом говорит и факт обнаружения идентичной микрофлоры в вымени и матко при возникших первично маститах, а затем эндометритах. .\!ы нашли, что маститы могут являться причиной нарушения воспроизводительно." функции, приводящей к бесплодию коров. Почти у 50 % больных маститом коров нами зарегистрированы болезни гениталий. Соотношение патологий молочной железы и гениталий может сильно варьировать с зависимости от конкретных условий хозяйств, но тем не менее, справедлив обобщающий выеод: при регистрации мастита с 50 /"-ной вероятностью можно ожидать одновременно протекающую патологию репродуктивных органов. В наших исследованиях наиболее часто регистрировали взаимообусловленность маститов и эндометритов. Наши данные значительно дополняют общую систему взглядов на. патологию репродуктивной системы, а учитывая доказанную взаимообусловленность патологии яичников и матки, полная картина патологии будет взаимообусловлена, в основном процессами трех органов - яичников матка - молочной железы. Это яачяется существенной новизной, „о-полнитэльнЬй аргументацией концепции служат данные, полученные в процессе работ по воспроизводству "проблемных" коров. Предвари тельно им проводила лечебно-профилактические мероприятия, которые с высокой степенью вероятности исключали эндометриты. Тем менее, посла гормонального индуцирования супаровуляции, при извлечения эмбрионов у неоправданно большого числа доноров регистрировали эндометриты. Легальное обследование таких коров почти всегда выявляло наличие субклинической формы мастита.

В го :22 время комплексное лечабно-про^алакга-часаоб воздействие на молочную жале?у и матку одновременно приводило к полохительным результатам, чго г подтверждает правиль-носгь предположения об источнике вновь возникающего эндометрита.

В процессе работы выяснили, чго негативное влияние мастита ааэет проявление не только а период течения патологического процесса, но и на протяжении двух месяцев после извлечения. У таких коров фиксировали нарушения половой цикличности а снижение опло-догзорлеиосги после искусственного осеменения.

Полученные нами данные находятся в соответствии с данными, приведеннымз в обзоре литературы диссертация, и подтверждают тесные многосторонние связи молочной железы с гениталиями, но, главное, го , что маститы оказывают тормозящее влияние на процесс воспроизводства. Учитывая широкую распространенность маститов, необходимо принимать во внимание этот сг. :тор при отборе и комплектовании групп коров для искусственного осеменения, для использования коров в качестве доноров эмбрионов и экспериментальной работы. .

2.6. Избранные аспекты аппликации эмбрионов реципиентам

Исследования по подготовке телок-реципиентов выявили ряд преимуществ комбинированного метода синхронизации охоты с применением препаратов гонадогр:айна, простагландина и гонадолибернна.

Приведенные раочегы показывают годную состоятельность и обоснованность выдвигаемого нами тезиса, о нообходимости проводить и рассматривать технологию трансплантации.эмбрионов в рамках производственных задач по воспроизводству. Надо подчеркнуть, чго фронтальная обработка двукратно, с интервалом II дней, введением простагландина программирует приход в охоту среднестатистически, в лучшем случае, не бодав 50 % обработанных еивогных. Объясняется эго твердо установленным фактом, что пришедшие в охоту животные после первой инъекции, после второй в охоту не приходят, "сть публикации в когор'-ас указывают, что индуцярованное в резуль-аге воздействия экзогенным просгаглзнднном желтое тело не всегда •изяруегся после вторичного воздействия. Вероятно, причины этого явления могут быть следующими: в первую фронтальную обработку непременно попадает часть животных желтой гало которых на реагирует на просгагландин. Тем кв менвз, они приходят в спонтанную охоту, начало которой различно в зависгуоеги о г индгьидуального Функ-

циокального состояния. Вследствие этого животных в охоте .сразу после йзрвой обработки регистрируют на прогякэкла 5-7 а более дней. Поэтому, закономерно, что какая-то часть этих животных к моменту второго введения простагландана будет иметь желтое тело, которое в функциональном отношении реагировать на просгагландан не способно. Совершенно очевидно, что число таких животных будет всегда сально варьаровагь из-за всегда различного исходного функционального состояния. Это, в своей основе а объясняет значительные экономические аздер-ки, так как применение методики двукратной обработки вне концэпгуалъносгп относительно общих задач воспро изводства обусловливают большое число среднестатистических дней бесплодия: 50 % от числа двукратно обработанных телок не приходит в охоту, из числа проявивших охоту только 25 % оказываются пригодными для проведения пересадок, я при 50 ;".'-кои приживляемосгп трансплантированных эмбрионов оказывается, что до 87-88 %ш первично отобранных в качестве потенциальных реципиентов телок, в течение 60 дней оказываются бесплодными, что абсолютно не оправдано, т.к. при предлагаемом комбинированном методе подготовки реципиентов, ке пришедших в охоту я не подопедпях под пересадки, вторично обрабатывают с целью индуцирования охоты и по мере ее проявления осеменяют. Следует отметить, что при вторичной обработке можно гак же применять комбинированный метод, однако, если при первой инъекции вводили ГС1К, то при второй необходим гипо-(¡.•изарный гонадогропин либо гипофизарный гонадогропин при первом и втором введении.

Пря проведении грансцервикалъных пересадок проведены исследования по изучению зависимости пряжавляемосга эмбрионов от исходных концентраций прогестерона я эсградиола.

В наших исследованиях установлено, что оптимальной концентра' цией прогестерона перед пересадкой можно считать 2,0-5,0 нг/мл, при которой получали более 50 £ стельностей от пересадок свеже-полученнкх а замороменно-оггаянных эмбрионов. Увеличение или уменьшение значений концентрации сопровождалось снижением процента стельностей. Установленная оптимальная концентрация прогестерона в деюь пересадки не дает полной гарантии приживляемойи пересаживаемого эмбриона. Это осгесгвонко, гак как важную роль в успехе пересадка играют способ и путь аппликация эмбриона, его качество п ряд других известных я не выявленных еще факторов. Определение концентрации прогестерона является дополнительны?.! я цен ним тестом для выбора реципиентов, но, конечно, не может служить

единственным признаком для этой нала.

Таким образом, собственные исследования дают методическую основу реально управлять биологическими процессами в направлении сближения эволюций репродуктивных процессов с технологическими г экономическими требованиями.

Заключение

7ге к ôO-м годам был накоплен значительный объем работ по биотехнологии воспроизводства на основе применения биокагалаза-горов. Авторы большинства из них не ставили сЕсей задачей исслэдо-Еать закономерности репродуктивной физиологии. Принимая во внимание метод трансплантации эмбрионов, ¡1.И.Соколовская (1957) по этому поводу писала: "Наоборот, авторы пытались максимально упростить методику, разработать метод использования беспородных маток в качестве "инкубаторов" для "чистопородных зигот", получаемых методом гормонального стимулирования. Несмотря на многолетние работы по пути упрощения, ожидаемых результатов достигнуто не было... Тем не менее, исследования оказали большие услуги в познании биологических закономерностей оплодотворения и развития млекопитающих жяеотных". Характеристика в определенной мере справедлива и сейчас. В настоящее время причиной упрощенного подхода, определяющегося унитарным, массовым применением биокатализаторов, является достаточно широкий спектр их положительных свойств, позволяющих использовать гормональные препараты не только в биотехнических, но и в терапевтических целях. Применение часто проводится без учета типа нервной деятельности, конкретного состояния организма, без учета изменении, вызываемых патологическим процессом и изменяющимися-условиями внезней среды. Действие вещества, как правило, опредехяегся в зависимости от дозы, концентрации, го есть условий находящихся вне организма, а сам организм рассматривается как пассивный объект, индикатор, при посредстве которого определяется вредность или полезность веществ. Но и этот подход позволял путем фонтального применения биостимуляторов получать высокие положительные результаты." Однако, они никогда на отличались высокой стабильностью и сменялись резко отрицательными показателями. Такое положение побуждало разграничивать объекты для применения гормональных средств, например, на "выбракованных коров" и "проблемных коров", далее ка "выбраковя:;-кых коров в, связи с болезнями рэпродуктивно:! снсгпл'н", "выбракованных коров по потере прог/лтизносгя" г "кЛ^ьу^ы-иннх уоров со здоровой репродуктивной системой" а т.д. "Проблемных ::эров" подраз-

делили на "долгое время не приходящих в охоту", "приходящих в охоту после многократных осеменений", "проблемных коров с потенциально нарушенным послеродовым периодом" и т.п. В соответствие такому разграничение проводилась дифференциация доз и режимов гормональных воздействий в двух основных направлениях: с целью управления половым циклом и с целью индуцирования суперовуляции. Найденные схемы, режимы обработок и дозы препаратов позволяли получать приемлемые результаты, оцениваемые среднестатистическими показателями. В этой связи проводили исследования с целью поиска критериев, позволяющих отбирать животных, которых с большей степенью вероятности получения стабильных результатов можно было бы использовать в качестве доноров эмбрионов и реципиентов. Таким образом, сложилась ситуация: для схем, которые уже на зывали "классическими" необходим был подбор животных с определенными, средними физиологическими параметрами внутренней среды организма. Это находит отражение в исследованиях большинства авторов по гормональному фону, целью которых (в большинстве случаев) являлся либо подбор животных, либо прогнозирование результатов синхронизационной обработки или показателей суперовуляции. В подобных публикациях делались вывода, например: крутое повышение концентрации прогестерона коррелирует / или не коррелирует с числом индуцированных желтых тел; или - концентрация прогестерона крррелирует / ели не коррелирует с числом вымываемых зародышей и т.д.

Следует сказать, что на определённом этапе данные исследования имели большое значение, так как относительно среднестатистического животного позволяли:

1. получать достаточное количество овуляций и эмбрионов (учитывая необходимость иметь большое число зародышей для отработки методик грансцервикального извлечения и пересадки, оценки качества эмбрионов);

2. выяснить некоторые морфологические, функциональные, эндокринные аспекты, лежащие в основе эффективного проведения работ по биотехнологии воспроизводства;

3. дать сравнительную оценку эффективности различных препа ратов;

4. определить орвдаяе дозы биокатализаторов.

Хотя и в настоящее время подобные исследования своего значения не потеряли, прежние цели и достигнутые результаты на могут удовлетворять современным требованиям. В облаоги технология

трансплантации э:.«5раоЕэв нужны уха не столько прогнозы а методы отбора, напрамэр, коров для использования £ качества доноров, сколько методы, реглаавЕТяругЕяз дозы, рзнд^ы, схемы воздействии, которые давала бы возможность от лгсзго конкретного живо г-ногс, гарантированно получать необходимое число потомков. В этом отношении, если принимать ео внаманяе гормональные исследования, необходим поиск методов корректяоовкя гормональных прохалей, ог-ражающях процесс суперовуляция в случае их огклонапаи от оптимума. Показателя, полученные в результате гормональных исследований необходимо оценивать в том смысле, что они являются объективными даннкма, позволяющими уточнять диагноз и правильно определять стратегию я практику технологических а /аля лечебных зо: действий. Часто приходится работать с уникальными высокопродуктивными животными, что обусловливает ах сугубо индивидуальные хазаологические особенности. 2сгесгвзнн-;, что в подобной ситуация инструкция я рекомандацяи, разработанные на основа анализа среднасгагясгяческях показателей, полученных на экспериментальных животных-аналогах не всегда будут приемлемы. В собственной практической работе мы имели возможность таксировать очень еысо-каэ показатели суперовулягорной реакция после самых парадоксальных режимов обработок (проведанных таким образом по ряду случайных причин). Такие исключения доказывают, что имеют место осо-Зке, андавядуальныа качества животных. В этой связи, полностью признавая большую роль и значение вариационной сгатастака, необходимо помнить, что "методы вычислительной техника - всего лишь мсгрументы и сами по себе не являются панацеей. Чрезвычайно вах-ю прадарживаться правильной концешхяа га использования, ...толь-ад в сочетании со веема существующими методами исследований с ¡тчатом накопленного опыта". "Надо учитывать, что в экспериментах, доводимых в производственных условиях, при скромных средствах, <огда случайные причины заболеваний играют существенную роль, зтатастака, в особенности при неизбежно малых ци.-.рах, то есть но 1ри тысячах и десятков тысяч опытов, не всегда ум:-этна, в гаках :лучаях один факт разницы более чем на одну четверть имеет в научном смысле гораздо большее значение". Академик А.Самарский ,1983) отмечает, что когда применение методов математческого анализа становится чуть ля не правилом "хорошего тона", это приводит к прямо противоположным результатам, дискредитирует аычисли-ельную гехнчку, профанирует ее дости.-эная".

Учитывая требование интенсивного воспроизводства наиболее

высокопродуктивных животных, следует обязательно принимать во вниулдие, что они (высокопродуктивные животные) являются наиболее уязвимым звеном в отношении возникновения заболеваний, так как представляют собой напряженно функционирующую физиологическую систему, которая более всего подвержена вероятности "поломки". Поэто:.!у, мы очень часто имеем дело с больными животными, когда могут происходить разнообразнейшие пертурбации в деятельности всех систем организма и, в частности, системы желез внутренней секреции. Следовательно, для успешного практического использования биотехнологии размножения не совсем правильна сама постановка задачи воспроизводства "проблемных" или "вкбракэзал:ас;:" коров на основе биогехнологических методов применения бпокатализаторов, гак как мы имеем дело с бесплодными самками. Бесплодие может быть вызвано не только многочисленными болезнями полового аппарата, но и болезнями других органов. 3 го же время, сами болезни могут быть обусловлены большим разнообразием как внешних, гак и внутренних неблагоприятных факторов. Гормональные препараты (или биогенные стимуляторы) - это лекарства, применяя которые возможно изменить состояние организма в нужном направлении, го есгь регулировать его физиологические функции, йрименеяне гре-буег в каждом случае индивидуального подхода, в каждом случае лекарства следует назначать в определенных дозах и по соответствующим показаниям. Становится очевидным, что, если гак можно выразиться, классификационные признаки - "выбракованные коровы" или "проблемные корок:;" не могут служить сами по себе показанием или противопоказанием к применению тех или иных схем, рек:'.\:ов или доз гормональных препаратов, так как без учета характера и направления патогенеза, при унитарном воздействии будет нарушен важнейший методологический принцип причинно-следственных юаимо-связей. В этом может состоять одна из главных ошибок клижгко-эк-спериментальных исследований на основе которых .'.'огуг быть даны неудачные выводы и рекомендации для практики.

Излагаемые нами замечания хорошо иллюстрируются обзором литературы, особенно 4-ой главы. В некоторых исследованиях просматривается явная тенденция к упрощенности - использовать какой-либо один препарат для лечения всех (:орм бесплодия и даже более того, применяя какой-лг'Зо режим обработки биокагализагора.ми на значительной группе животных пытаются добиться одкомомонткого восстановления репродуктивной функции, управления этой пункцией

и высоких показателей плодовитости. В некоторых случаях такой подход возможен, например, на животных с персизгентным желтил телом, набранных в группу на основании твердо установленного диагноза. Но в целом это направление ошибочно, так как вместо восстановления половой функция может быть вызвано необратимое бесплодие у значительного числа животных. Это - явно ошибочное направление, гак как имеют место многочисленные и динамичные факторы внесшей и внутренней среды (что показано нами в 5 главе) от которых в значительной мере зависит характер действия препарата (или комплекса препаратов).

Подчеркивая и не отрицая успехов эндокринологов академик В.К.Мялованов (1962) писал: "...имея в своей основе успехи эндокринологии, регуляцию процессов размножения сводили к внутренним взаимодействиям органов эндокринной системы. Это вело на практике к игнорированию и даже отрицанию вне^лх условий как могущественных средств к управлению воспроязводстведением . ...Представители этого направления в науке предлагали средства борьбы с нарушением воспроизводительной системы..., с яловостью, заключающиеся только з гормональных воздействиях при полном игнорировании условий среды, и даже в противовес им.

Имеет место даже выставление этого как заслуги в отношении "преодоления" условий среды.

Это теоретически не верно и мало элективно. Любая реакция организма может быть полезна (для него) в том случае, если она закономерно связана как с внешними условиями существования организма, гак и с внутренним состоянием организма". Поэтом)-, использование биокатализагоров в целях улучшения показателей воспроизводства в соответствии с некоторыми универсальными методиками приводит к значительным срывам, ¿го и служит причиной разочарования некоторых специалистов-практиков в биотехнологических методах, незаслуженно их принижает и ведег иногда к игнорированию в животноводческой практике.

В целом же необходимо особо подчеркнуть, что биотехнические методы, активно внедряемые в практику не могут подменить или компенсировать ни недостатки планирования, организации, руководства и проведения процессов относительно содержания, кормления и эксплуатации животных, ни недостатков в организации и учете воспроизводства.

Собственные исследования (гл. 6) убедительно демонстрируют необходимость концептуального подхода к технологии гранспланга-

пил эмбрионов с точки зрения производственных показателей по зоспроазводстзу.

БЬ'шеизлояаннкз обобщения, складывавшиеся в процессе проведения наших теоретических и производственно-экспериментальных исследований, привели к такому характеру изложения материалов, который позволил бы-сделать собсгвешые выводы без оттенка дирек-гивносги (в отношении практического применения) и которые в езоы очередь, могли бы послужить базовой основой для дальнвйзей практической и научно-экспериментальной работы.

Выводы

1. Многочисленные варианты предэвуляторного гормонально:', .дисбаланса, приводящего к нарушению процесса овуляции (моноовуляции и полновуляпаи), сводятся в конечном счете к сдвигу . пака ЛГ во временных и/яла количественных парамегра7с Ввздение а режимы обработок синтетического аналога тадздолкЗ«.?**-* приводит к оптимизации параметров пика ЛГ, что чо^^'-ьлч.г.с ятян? на стабилизацию показателей индуцированной о^кус^'д р** .

2. Рассеивание сроков качала к'д^с&тлй?:;?.-.-?гх>--ч »ткнется основным (фактором, негативно влияющим регулы^ оалХронизаци: Степень рассеивания зависит от состояния яичников коров и телок, которое определяйся способностью желтого тела и возрастом растущего ¡/ежгс;;р2лъногс .:оллнку ла. Введение в схему обработок гонадотропина унифкирует свори-альные процессы и стабилизирует срока начала охо?ы

3. Изученные эндокринные аспекты в период течения индуцированной суперовуляциа у коров предполагают унифицированный вывозе ЛГ в ответ на ввздение гонадолиберина через 48 часов после введения просгагландина. Это определяет, в свою очередь, унифицированный режим двукратного осеменения коров-доноров: через 48 часов после введения просгагландина - первое осемененае и еще через 12 часов - второе.

4. Исследованиями по овараосгимуляции б послеродовой период установлено, что для этой цели наиболее эффективен комплекс препаратов: просгагландина, гонадотропина и гонадолибернна. С одинаковой эффективностью для этой цели можно применять как отечественные, так и импог?::ыэ препараты. Регламентировать режим обработок следует г^кпм образом, чтобы первая овуляция произошла не ранее 15 дня после стела.

Ь. Ускоренное восстановление репродуктивной функции лакги-

рующих коров-доноров после извлечения эмбрионов (в дополнение к послеродовой овариостимуляции) позволяет: а) получать эмбрионы в условиях производства за период времени не превышающий экономически обоснованный; б) реально снижать среднестатистический сервис-период,

6. Высокий суммарный показатель числа нормальных эмбрионов за четыре извлечения указывает на целесообразность многократного использования выбракованных коров в качества доноров эмбрионов.

7. Теоретические и экспериментальные исследования доказывают необходимость восстановления"репродуктивной функция коров на основании твердо установленного характера патологии и направления патогенеза.

8. Коров, после устранения у них с^эриопатология методом заместительной гормонотерапия, можно эффективно использовать в качестве доноров-эмбрионов.

9. Сезонным фактором, крайне отрицательно влияющим на воспроизводство, является гермосгресс. Установлена принципиальная возможность устранять его негативное влияние за счет нивелирования микроклиматических условий.

10. Выясненная возможность взаямонаправленносги патогенетического процесса молочная железа - матка - яичник диктуют необходимость комплексных методов лечения и профилактики, т.е. необходим обязательный учет вероятного патологического процесса в молочной железе.

11. ?.5атод комплексной.оке иге но терапии и профилактики патология репродуктивной системы дает возможность более эффективно восстанавливать воспроизводительную функцию животных.

12. Оптимальной концентрацией прогестерона в крови телок-реципиентов следует считать 2,С~5,0 нг/мл, что позволяет получать свыше 50 % приживляемости от пересадки свекеполученных и оттаянных после замораживания эмбрионов.

Практические предложения

На основании проведенных исследований производству предлагг*

ется:

I. Для проведения синхронизации охоты у коров и телок при-' .менять комплексное введение препаратов простагландина и гокадо-тропина. При этом необходимо разграничив??^ показания:

а. - индуцирование синхронного проявления охоты у коров и

телок с цель» последующего проведения искусственного осеменения;

б. - индуцирование синхронно проявляющего полового цикл« с целью использования животных в качестве доноров или реципиентов .

В первом случяе рекомендуем введение синтетического гоня-дог.ибериня перед осеменением, во втором - через 48 ччсов после инъекции простагландина.

2. С целью улучшения производственных показателей по воспроизводству проводить ст^.(уляцию овярияльной Активности после отеля комплексным введением препярятов простагляндина, гонядо-тропина и гонедолибериня на 11-й, 13-й и 15-й день после отеля, соответственно.

3. Коровям с овяриопятологией проводить заместительную гормонотерапию на пятогенетической основе. В комплексе гормонотерапии рекомендуем включать янтибкотикотеряпию в сочетании с окси-генотеряпней мятки и молочной яелезы.

4. При подготовке телок-реципиентов для большого числя пересадок синхронизацию проводить сочетанием простагляндина и фоллитропкн». Еивотных, не приведших в охоту или не подошедших под пепесядкУ, рекомендуется синхронизировать вторично введение! аналогичных ппеп«»р^тов (через 10 дней после первой обряботки) и осемененять по мере приходя в охоту.

Список основных научных рябот, опубликованных по мятериялям диссертации:

1. Хилькевич С., Овчинников А. Суперовуляция у коров-доноров в зависимости от гормонального профиля перед обработкой // Молочное и мясное скотоводство. - 1986. - № 2. - С.47-49.

2. Хилькевич С.Н. Приживляемость эмбрионов при нехирургиче ской пересадке// Животноводство. - 1986. - № 10. - С.46-47.

3. Хилькевич С. Применение простягляндина для синхронизации охоты коров-доноров и телок-реципиентов// Молочное и мясное скотоводство. - Х98&. - № 6. - С.40-41.

4. Хилькевич Н.М., Хилькевич С.Н. Оксигенотеряпия мястита коров // Ветеринария. - 1986. •• № 8. - С.60-62.

5. Хилькевич u., Хилькевич H. Помогает кислород // Сельские зори. - 1987. - £ 8. - С.52-53.

6. Хилькевич С.Н., Еириев В.М., Евстигнеева H.U. Влияние ФСГ-п, гонядолиберин» и лютенизирущегс гормона ня качество эыбри нов // Зоотехния. - I9SC. - )' 7. - С.72-73.

7. Хилькевич С.Н., Шириев В.М. Синхронизация охоты у телок-реципиентов/ тез.докладов. Львов. - ISSG. - С.39-40.

8. Сергеев Н.И., Хилькевич С.Н., Еириев В.М. Влияние некоторых факторов н-1 плиживляемость эмбрионов// Молочное и мясное скотоводство. - 1991. -Pl.- С.28-29.

9. Хилькевич С.Н., Ыириев B.LÎ., Алиб*ев Р.М. Влияние возрвс-тр коро? нч эффективность гормональной обработки и приживляе-ыость эмбрионов/ Еюлл.няучн.работ ВИЕч. - Д^убровицы. - 1921. -Вып. IC4. С. 36-38.

1С. Хилькевич С.Н., Алибяев Р.л. Эффективность использое-'-ник лактирукцих и выбраковянных коров в качестве доноров эмбрионов/ Еюлл.научных рябот ВИдя. - Дубровицы. - 1991. - Вып. 104.

- С. 12-14.

11. Хилькевич С.Н., Алибяев Р.М. Восстановление воспроизводительной функции коров-доноров эмбрионов // Зоотехния. - 1992.

- » 9-10.- С.32-34.

12. Хилькевич С., Тяпугин Е. Экономические яспекты тр?нс-пляктяции эмбрионов в молочном скотоводстве // водочное и мясное скотоводство. - 1992. - & 5-6. - С.16-17.

13. Хилькевич С.Н., Смоделкин А.Г., Тяпугин Е.А. Синхронизация половых циклов коров в программе ТрвЛСПЛ^НТ^ЦИИ эмбрионов // Зоотехния. - 1993. № 4. - С. 24-25.

14. Хилькевич С.Н., Тяпугин Е.А. Использование методов селе! дай крупного рогятого скотя // Достижения АПК. - 1993. - К 2.

- С. 72C-72I.

15. Хилькевич С.Н., Хилькевич Н.Ы., Тимошенко C.B., Дтку-ы^нькзов К.У. Лечение мастита и некоторых болезней м°тки у коров «нтиыикробными препэрятяыи в сочетании с кислородом// Ее-теринчрия. - IS94. - К> 3. - С.46-48.

16. Хилькевич С.Н., Сямоделкин А.Г., Тяпугин Е.А. Восстановление репродуктивной функции коров// Ветеринария. - 1994.

- £ о. - С. 41-42.

17. Тяпугин Е.А., Хилькевич С.К. Роль трянсплянтяции эыбрио-' нов в селекционной работе // Молочное и мясное скотоводство. -

1954. - * 4. - С.8-11.

18. Хилькевич С.Н., Душкин В.А., Цочкяев В.И. и др. Опыт борьбы с яловостью коров// Зоотехния. - 1994. - II. - С.30-31.

19. Хилькевич С.К., Тяпугин Е.А., Сямоделккн А.Г., Шириев В.М. Гормоняльный профиль у коров при суперовуляции// Доклады РАСХН. - 1995. - 3. - С.38-39.