Противовирусное действие Витулина и Тулимкара в опытах in vitro и in vivo

Левковская, Мария Николаевна

Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему
Противовирусное действие Витулина и Тулимкара в опытах in vitro и in vivo
ВАК РФ 06.02.02, Кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов

Автореферат диссертации по теме "Противовирусное действие Витулина и Тулимкара в опытах in vitro и in vivo"

На правах рукописи

4852314

ЛЕВКОВСКАЯ МАРИЯ НИКОЛАЕВНА

ПРОТИВОВИРУСНОЕ ДЕЙСТВИЕ ВИТУЛИНА И ТУЛИМКАРА В ОПЫТАХ IN VITRO И IN VIVO

06.02.02 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

2 5 АВГ2011

Санкт-Петербург - 2011

4852314

Работа выполнена на кафедре микробиологии, вирусологии и иммунологии животных ФГОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины»

Научный руководитель:

доктор биологических наук, профессор

Тулева Надежда Павловна

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор

Данко Юрий Юрьевич

Заслуженный деятель науки, доктор ветеринарных наук, профессор Шумилов Константин Васильевич

Ведущая организация: ФГОУ ВПО «Курская государственная сельскохозяйственная академия имени профессора И.И. Иванова»

Защита диссертации состоится 29 сентября 2011 года в часов на заседании диссертационного совета Д 220.059.03 при ФГОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины» по адресу: 196084, г. Санкт-Петербург, ул. Черниговская, 5.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины».

Автореферат разослан_2011 года и размещен на сайте академии http://spbgavm.ru _2011 года.

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор биологических наук

Л.М.Белова

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Одной из важных проблем современной науки являются респираторные болезни.

По данным ученых, смертность от них во всём мире имеет тенденцию ко всё большему нарастанию (Воробьев A.A. и др.,1999; Гранитов В. М, 2001; Камышенцев М.В. и др., 2002; Костыркин Ю.А. и др., 2005; Тулева Н.П., 2004 - 2010; Богомолова И. К. и др., 2010; Дмитриева Г. М. и др., 2010).

Выявлено многообразие различных вирусов и их многочисленных се-ротипов, что затрудняет борьбу с ними с помощью методов специфической профилактики и способствует возникновению спонтанных инфекций (Сюрин В. Н. и др.,1991 - 1998; Нестерова И. В., 2002; Тулева Н. П., 2004-2011).

В племенном животноводстве у телят наиболее часто встречаются инфекционные болезни, вызванные вирусами из семейств Herpesviridae и Ог-thomyxoviridae. Возбудители данных семейств поражают эпителий верхних дыхательных путей, что способствует активации условно - патогенной и сапрофитной микрофлоры и проникновению её в ткань лёгких. Ассоциация респираторных вирусов и микроорганизмов приводит к снижению иммунологической реактивности организма телят и возникновению вторичного им-мунодефицитного состояния. Переболевшие животные в дальнейшем не могут быть использованы для племенных целей, что затрудняет воспроизводство стада. Наиболее опасным является вирусоносительство в критические возрастные периоды жизни, когда колостральный иммунитет находится на стадии затухания, а иммунная система еще не сформирована (Сюрин В Н 1991

- 1998; Тулева Н. П., 2004 - 2011).

Поиск средств защиты новорожденных телят от респираторных вирусных болезней проводится учеными всего мира в нескольких направлениях:

1. Активная иммунизация живыми или инакгивированными вакцинами;

2. Пассивная иммунизация специфическими гипериммунными сыворотками;

3. Повышение неспецифической резистентности организма с использованием нммунотропных препаратов.

Применение живых или инактивированных вакцин не предотвращает латенции вирусов сем. Herpesviridae в организме животных (Сюрин В. Н, 1991

- 1998; Глотов А. Г., 2003; Тулева Н. П., 2004, 2009).

Пассивная иммунизация специфическими гипериммунными сыворотками легко может быть преодолена вирусами с высокой вирулентностью (Ершов Ф. И., 2006).

Интерес к иммунотропным препаратам обусловлен возрастающей неэффективностью традиционных методов терапии, а также ростом устойчивости патогенов к лекарственным средствам (Манько В. М., Петров Р. В. и др., 2002; Фёдоров Ю. Н., 2005; Деева А. В. и др., 2006; ТулегаНПидр,2000-2011).'

Однако использование иммуностимуляторов, иммунокорректоров, вызывающих активацию Т и В - клеточного иммунитета, представляет серьез-

ную проблему. При их длительном применении возможна переактивация клеток иммунной системы (Агеенко А.И.,1994).

На современном этапе науки для профилактики респираторных болезней телят необходимы препараты с направленным действием: антимикробным, противовирусным, противовоспалительным и предотвращающим запуск опухолевой трансформации клеток даже при их длительном применении. Таким требованиям отвечают патентованные иммуномодулирующие препараты Витулин и Тулимкар. В своём составе они содержат соединения нескольких подгрупп флавоноидов (флавоны, флавонолы, флавононы) и их гликозиды, полученные из цветов, вегетативной части и корней растений нескольких семейств: сложноцветные, барбарисовые и астровые. Флавоноиды этих растений, находящиеся в гликозидированном виде, подвергнуты полному гидролизу, что абсолютно исключает токсичность препаратов. При ферментации гликозидов образуются радикалы, которые обладают активным бактериостатическим действием в отношении грамположительных и грамот-рицателыгых микроорганизмов, а также патогенных грибков, микоплазм и простейших.

Витулин включает биологически активные вещества, способствующие индукции эндогенного гамма - интерферона, который в свою очередь обладает противовирусным, антибактериальным, противовоспалительным, анти-пролиферативным и гепатотропным действием.

Тулимкар корректирует Т- и В-клеточный иммунитет, активирует NK клетки. Содержащийся в препарате 3 - окси - флавон - силибин тормозит лектинининдуцированный митогенез клеток (Тулева Н. П., 2004 - 2010).

Цель исследований. Целью данной работы является определение противовирусного действия Витулина и Тулимкара в опытах in vitro и in vivo.

Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи:

1. Изучить противовирусное действие препарата Витулин in vitro в перевиваемой конфлюэнтной культуре клеток MDCK, исключая влияние гомеостаза организма на активность вирусов;

2. Изучить противовирусное действие препарата Витулин in vivo на чувствительной биологической модели, самках мышей линии СВА;

3. Разработать эффективные и экономичные схемы и методы активной неспецифической иммунопрофилактики респираторных болезней новорожденных телят, обусловленных вирусами из семейств Нег-pesviridae и Orthomyxoviridae.

Научная новизна.

- впервые изучено ингибирующее действие Витулина на репродукцию респираторных эпидемических высоковирулентных для человека, животных и птиц вирусов гриппа А/Сидней/05/97(НЗ№) и А/17/утка/Потсдам/86/92 (H5N2) в опытах in vitro в конфлюентных культурах клеток MDCK, без влияния гомеостаза организма на активность вирусов;

- впервые изучено в опытах in vivo на чувствительной биологической модели, самках мышей линии СВА, ингибирующее действие Витулина на ре-

продукцию респираторных эпидемических высоковирулентных для животных, человека и птиц вирусов гриппа семейства Orthomyxoviridae;

- разработаны экономичные и эффекпшные схемы активной неспецифической иммунопрофилактики респираторных болезней новорожденных телят, обусловленных вирусами из семейств Herpesviridae и Orthomyxoviridae.

Практическая значимость диссертационной работы:

- разработаны эффективные и экономичные схемы и методы активной неспецифической иммунопрофилактики респираторных болезней новорождённых телят, обусловленных вирусами из семейств Herpesviridae и Orthomyxoviridae;

- разработаны рекомендации по применению Витулина и Тулимкара для активной неспецифической иммунопрофилактики респираторных вирусных болезней телят (утверждены на научно - координационном совете по животноводству и ветеринарии Северо - Западного научно - методического центра Россельхозакадемии, протокол №4 от 09 декабря 2009г.);

- разработанные рекомендации по применению Витулина и Тулимкара для активной неспецифической иммунопрофилактики респираторных вирусных болезней новорождённых телят с высоким положительным эффектом применены в племенных хозяйствах Калининградской области (Российская Федерация);

- полученные данные о противовирусном действии препаратов Виту-лин и Тулимкар используются в учебном процессе ФГОУ ВПО «СПбГАВМ».

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Витулин оказывает ингибирующее действие на репродукцию респираторных эпидемических высоковирулентных для животных, человека и птиц вирусов гриппа семейства Orthomyxoviridae в опытах in vitro в конфлюэнтной культуре клеток MDCK, без влияния гомеостаза организма;

2. Витулин ингибирует репродукцию респираторных эпидемических высоковирулентных для человека, животных и птиц вирусов гриппа семейства Orthomyxoviridae в опытах in vivo в тканях лёгких мышей линии СВА.

3. Разработаны оптимальные схемы и методы активной неспецифической иммунопрофилактики респираторных вирусных болезней новорожденных телят, обусловленных возбудителями из семейств Herpesviridae и Orthomyxoviridae, в критический период жизни животных с использованием Витулина и Тулимкара.

Апробация работы. Основные материалы исследований по диссертационной работе доложены и обсуждены на ежегодных научных конференциях Санкт - Петербургской Государственной академии ветеринарной медицины (Санкт - Петербург, 2007 - 2011 гг); Международном конгрессе ветеринарных фармакологов «Эффективные и безопасные лекарственные средства» (СПб, 2008 г); Всероссийском съезде ветеринарных фармакологов и токсикологов (СПб, 2009 г); научных конференциях молодых учёных и студентов СПбГАВМ (2008 - 2009 гг); Международных конгрессах ветеринарных фар-

макологов (СПб, 2008 - 2009); Международном съезде ветеринарных фармакологов и токсикологов (СПб, 2011 г).

Публикация результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано 15 научных работ, в том числе 4 в журналах, рецензируемых ВАК; а также методические рекомендации (утверждены на научно - координационном совете по животноводству и ветеринарии Северо - Западного научно - методического центра Россельхозакадемии, 2009г).

Объем и структура диссертации. Диссертация включает введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, результаты собственных исследований, обсуждение результатов, выводы, практические предложения, список литературы, приложения. Диссертационная работа изложена на 130 страницах машинописного текста, содержит 5 таблиц, 24 рисунка. Список литературы включает 263 источника, из них 103 иностранных авторов.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материалы и методы исследований

Научные исследования были проведены в период с 2006 по 2009 гг. в соответствии с планами научно-исследовательской работы кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии ФГОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины».

Препарат Витулин с растворителем исследовали в опытах in vitro и in vivo в отделе вирусологии НИИ экспериментальной Медицины СЗО РАМН.

Испытания препаратов Витулин и Тулимкар проводили в производственных условиях в племенном хозяйстве ЗАО «Нестеровское» Калининградской области на телятах черно-пестрой породы в возрасте до месяца в период энзоотии респираторных болезней, обусловленных возбудителями из семейств Herpesviridae и Orthomyxoviridae.

Было проведено три серии опытов:

1. В первой серии использовали перевиваемые монослойные конфлюэнтные культуры клеток MDCK для выявления прямого противовирусного действия Витулина in vitro, исключая влияние гомеостаза организма.

2. Во второй - проводили исследования in vivo, на лабораторных животных, (самках мышей линии СВА) с целью определения противовирусного действия препарата на возбудителей семейства Orthomixoviridae.

3. В третьей - изучали профилактический эффект препаратов Витулин и Тулимкар на телятах девятнадцати - тридцати одного дня жизни, когда иммунная система еще не сформирована, в период энзоотии респираторных болезней, обусловленных вирусами из семейств Herpesviridae и Orthomyxoviridae. IN VITRO (на культуре клеток MDCK). Для выявления прямого противовирусного действия Витулина in vitro были использованы вирусы гриппа А/Сидней/05/97(НЗН2) и холодоадаптированный, реассортантный штамм А/17/утка/Потсдам/86/92 (H5N2).

Культивирование вирусов проводили в десятидневных куриных эмбрионах от кур породы Леггорн го птицефабрики «Синявино». Гемагглюти-нирующую и инфекционную активность вирусов устанавливали в реакции гемагглютинации по Сонину П.Ф. (Сонин П.Ф., 2001). Инфекционный титр вируса, выраженный в 50% эмбриональных дозах (ЭИД50), определяли путем титрования 10-кратных разведений вирусов гриппа на куриных эмбрионах с последующим подсчетом результатов по Риду и Менчу (Reed L J Muench Н А., 1938).

Для определения 50% тканевой инфекционной дозы (ТЦИД50) в конфликтные культуры клеток MDCK,в 96-луночных панелях, вносили подготовленные разведения вирусов до 10"8. По окончании времени инкубации к супернатантам добавляли 1% куриные эритроциты. Результаты учитывали в реакции гемаг глютинации и подсчитывали ТЦИД50 по Риду и Менчу.

Оценку противовирусного действия Витулина in vitro проводили на культуре клеток MDCK. Монослойные конфлюэнтные культуры клеток MDCK выращивали в 96 - луночных панелях для культур клеток при 37°С и 5% С02. Культуральную среду удаляли и клетки трижды отмывали фосфатно - солевым буфером, содержащим антибиотики. В качестве заведомо положительного контроля был взят Ремантадин. На каждый препарат отводили по три лунки панели. В ряд А вносили Ремантадин, Витулин и Витулин с растворителем в объеме по 100 мкл. Далее проводили падающие двукратные разведения препаратов по ряд F на среде DMEM. Вирусы использовали в дозе 100 ТЦИД50 на лунку. Разведения вирусов готовили на среде DMEM, содержащей антибиотики и 5 мкг/мл трипсина. Во все лунки рядов A-F панели вносили по 100 мкл вируса. Ряд G служил клеточным контролем (в лунки вносили среду DMEM), ряд Н служил индикатором вирусной активности (вносили только вирус). Панели инкубировали 72 часа в термостате при 37°С и 5% С02.

По окончании времени инкубации клетки окрашивали 0,2% спиртовым раствором кристаллического фиолетового и проводили спектрофотометрию планшетов при длине волны 630 нм. Расчет 50% ингибирующей концентрации проводили, исходя из средних значений оптической плотности (ОП) в контрольных лунках рядов G и Н, по формуле: (ОП кл.к. - ОП вир.к)/2. IN VTVO (на мышах линии СВА). Для изучения противовирусного действия Витулина в отношении возбудителей семейства Orthomyxoviridae в опытах in vivo использовали высокочувствительных к вирусу гриппа самок мышей линии СВА в возрасте 6-8 недель. Животные были разделены на четыре группы по 10 мышей в каждой. Витулин, предварительно разведенный 1:1 растворителем, инъецировали парентерально в дозе 0,5 мл/мышь (0.3 мл -внутримышечно и 0.2 внутрибрюшинно).

Индикаторным вирусом служил эпидемический вирус гриппа А/Сидней/05/97 (H3N2). Мышей заражали интраназально в дозе 106ЭИД5о по 50 мкл на мышь.

Во второй группе (подопытная 1) препарат вводили мышам ежедневно в течение десяти дней до заражения и трёх - после введения вируса. В третьей группе (подопытная 2) инъекции проводили одновременно с введением вируса и в течение трёх дней после заражения. Животным первой, контрольной группы (контроль вируса), каждый день, в течение 10 дней до заражения, вводили физиологический раствор. Мыши четвертой группы (контроль 2) являлись здоровым контролем и не получали никаких препаратов (табл. 2).

Инфекционную активность вируса гриппа и ингибирующую эффективность Витулина определяли на третьи сутки после заражения, когда происходит максимальная репродукция возбудителя. Из каждой группы отбирали по три мыши и проводили забор легких, которые затем индивидуально гомогенизировали в 1 мл холодного фосфатно-солевого буфера в стерильных условиях. Гомогенаты центрифугировали при 10000 об/мин для удаления твердых примесей.

Инфекционный титр вирусов в пробах, выраженный в 50% тканевой цитопатической дозе (ТЦИД50), определяли титрованием десятикратных разведений образцов легких на культуре клеток MDCK. После инкубации при 37°С в течение трех суток клетки окрашивали 0,2% спиртовым раствором кристаллического фиолетового и проводили спектрофотометрию планшетов при длине волны 630 нм. Титр вируса в пробах вычисляли по методу Рида и Менча и графическим методом пробит - анализа.

Для гистологического исследования на третьи сутки после заражения из каждой группы отбирали по три мыши, у которых изымали легкие. Из отобранного материала готовили срезы по общепринятой методике и окрашивали гематоксилином и эозином, и пикроиндигокармином. Оценку и описание гистологических срезов проводили с помощью бинокулярного микроскопа «Микмед» («Петролазер»), используя окулярные насадки с увеличением 16 и 10 и объективы - 4, 10, 40. Фотографирование гистопрепаратов осуществляли цифровым фотоаппаратом Olympus SP 350, жёстко закреплённым с помощью фотонасадки на окуляр с увеличением 10. Обработку фотографий проводили с применением графического редактора Abode Photoshop SC.

Телята. В третьей серии опытов для изучения профилактического действия Витулина и Тулимкара использовали более ста двадцати телят черно-пестрой породы в возрасте до месяца в период энзоотии респираторных вирусных болезней. Животные были произвольно разделены на подопытную (65 голов) и контрольную (63 головы) группы. Телятам подопытной группы, начиная с девятнадцатого и по тридцать первый день жизни, проводили активную неспецифическую иммунопрофилактику с использованием Витулина и Тулимкара. Их вводили сочетано, внутримышечно, с интервалом в двое суток, в дозе 0,1 мл/кг массы. Перед применением препараты разводили специальным растворителем из расчета 1:1. Животным контрольной группы вводили у - глобулины и иммунотропные препараты.

От телят до и после проведения активной неспецифической иммунопрофилактики брали кровь для определения биохимических и иммунологи-

ческих показателей. Бактерицидную и лизоцимную активность сыворотки крови определяли, используя методические рекомендации под ред. Смирнова П.Н. с соавторами (1989). Белок определяли на полуавтоматическом биохимическом анализаторе «Stat Fax 1904 Plus» с использованием наборов реагентов «ОЛЬВЕКС ДИАГНОСТИКУМ».

Результаты экспериментов обрабатывали методом вариационной статистики с использованием критериев Стьюдента и К. Пирсона (Лакин Г Ф 1990). ' "

2.2. Результаты исследований.

2.2.1. Противовирусные свойства Витулииа in vitro.

В серии опытов с использованием перевиваемой культуры клеток MDCK в сравнительном аспекте изучено влияние различных концентраций иммуномодулирующих препаратов Витулин, Витулин с растворителем и Ремантадин на репродукцию вирусов гриппа А/Сидней/05/97(НЗ№) и А/17/Утка/Потсдам/86/92(Н5М2), высоковирулентных для человека, животных и птиц. Полученные данные представлены в таблице 1.

Таблица 1.

Противовирусная 50% ингибирующая концентрация препаратов

Препарат 50% ИК, мкг/мл

A//CudHeit/05/97(H3N2) *

Витулин 16,1

Витулин с растворителем 16,1

Ремантадин 4,9

A'l 7/Утка/Потсдам/86/92(Н5К2) *

Витулин 125

Витулин с растворителем 62,25

Ремантадин 9,1

* вирусы использовали в дозе 100 ТЦИДзо

Как видно из таблицы, 50% ингибирующая концентрация Ремантадина для вируса гриппа А/Сидней/05/97(НЗШ) составила 4,9 мкг/мл, а для вируса А/17/Утка/ГГот-сдам/86/92(Н5Ы2) - 9,1 мкг/мл.

Противовирусная 50% ингибирующая концентрация Витулина и Виту-лина с растворителем в отношении эпидемического вируса гриппа А/Сидней/05/97 (НЗШ) составила 16,1 мкг/мл. Для вируса гриппа А/17/Утка/Потсдам/86/92 (Н5Ш) 50% ингибирующая концентрация Витулина была в пределах 125 мкг/мл, Витулина с его растворителем - 62,25 мкг/мл При расчете ингибирующей концентрации Витулина и Ремантадина необходимо учитывать молекулярный вес данных препаратов. С учетом низкого молекулярного веса Витулина его 50% ингибирующая концентрация в отличие от Ремантадина несущественна.

На основании полученных данных можно заключить, что Витулин оказывал прямое ингибирующее действие на репродукцию эпидемических вирусов гриппа А в конфлюэнгной культуре клеток MDCK. Эффект воздействия был выраженным в отношении обоих эпидемических высоковирулентных для животных, человека и птиц вирусов А/Сидней/05/97 (H3N2) и

А/17/УткаЯ1отсдам/86/92 (H5N2).

Проведённые исследования показали, что Витулин и Витулин с растворителем нетоксичны для культуры перевиваемых клеток MDCK в дозах, вызывающих ингибицию высокопатогенных эпидемических штаммов вируса гриппа Использование в опытах двух штаммов вируса гриппа, различных по структуре ионного состава, не оказывало существенного влияния на активность Витулина и Витулина с растворителем.

2.2.2. Противовирусное действие Витулина in vivo.

В серии опытов, проведенных in vivo на высокочувствительной к вирусу гриппа биологической модели, самках мышей линии СВА, получены существенные различия в инфекционной активности вируса, выделенного из лёгких мышей подопытных и контрольных групп. Результаты проведённых исследований представлены в таблице 2.

Таблица 2.

Противовирусное действие препарата Витулин в опыте in vivo

№ группы Группа животных Титр вируса в lg ТЦИД50 /мл Индекс ингибиции в lg ТЦИД50 /мл

1 Контроль вируса (в течении 10 дней до заражения мышам вводили физиологический раствор) 10« 0

2 Подопытная 1 (Витулин инъецировали мышам ежедневно в течение 10 дней до заражения и 3 - после введения вируса) 2,3

3 Подопытная 2 (инекции Витулина проводили одновременно с введением вируса и в течение 3 дней после заражения) W** 1,9

4 Контроль 2 (здоровые животные) 0 0

Примечание: индекс ингибиции представляет собой отношение титра вируса, выраженного в ^ ТЦИД5о /мл контрольных групп к титру вируса подопытных групп.

Данные, приведённые в таблице, показывают, что репродукция вируса А/Сидней/05/97 (НЗЫ2) в группе «контрольная 1» (контроль вируса) была максимальной - 6,1 ^ТЦЩЬо/мл. Во второй группе (подопытная 1) снижение репродукции вируса наблюдали до 3,8 1ц ТЦИД5о/мл. Индекс ингибиции составил 2,3 ^ТЦИД50/мл. В третьей группе (подопытная 2) наблюдали снижение репродукции вируса до уровня 4,2 ТЦИД50/мл. Индекс ингибиции был равен 1,9 ^ ТЦИД5о/мл. Таким образом, снижение инфекционной активности

эпидемического штамма вируса гриппа А/Сидней/05/97 (Н3№) в подопытных группах было >200 раз по сравнению с группой 1 (контроль вируса).

Параллельно с вирусологическим исследованием была изучена гистологическая картина легочной ткани животных. Проведённые исследования показали, что картина легких мышей четвёртой группы (здоровые животные), не получавших никаких препаратов, характерна для здорового организма. Была обнаружена гиперемия, обусловленная танатологическими процессами, развившимися вследствие эвтаназии (рис. 1).

Рис.1.Контроль 2 (здоровые животные). Обнаружена гиперемия, обусловленная танатологическими процессами, развившимися вследствие эвтаназии. Окраска гематоксилином и эозином, ув.-100.

В первой группе (контроль вируса), где до заражения вирусом вместо Витулина вводили физиологический раствор, гистологические изменения в легких были характерны для пролиферативно-экссудативной (гнойной) очаговой интерстициальной пневмонии и катарально-гнойного бронхита. Крупные участки лёгочной ткани не имели выраженных структур из-за массивного скопления макрофагов, лимфоцитов и полиморфноядерных лейкоцитов, как целых, так и разрушенных, разроста фибробластов, диапедезных кровоизлияний, скопления белоксодержащей жидкости. Просветы бронхиол были заполнены десквамированным эпителием, лейкоцитами, белоксодержащей жидкостью; респираторный эпителий на большом протяжении имел признаки некробиоза, а стенка инфильтрирована клетками воспалительного ряда. В местах с массивными скоплениями клеток воспалительного инфильтрата отмечали разросты соединительной ткани (очаговый фиброз), перибронхио-лярные абсцессы с захватом и разрушением стенки бронхиол (рис. 2).

Рис. 2. Контроль вируса. Изменения в лёгких характерны для пролиферативно - экссуда-тивной (гнойной) очаговой интерстициальной пневмонии и катарально - гнойного бронхита. Окраска гематоксилином и эозином, ув.-100.

В группе №2 (подопытная 1) гистологическая картина легких животных, которым до заражения высоковирулентным для животных, человека и птиц вирусом гриппа А/Сидней/05/97 (НЗЫ2) вводили Витулин в течение десяти дней и трёх после заражения, незначительно отличалась от гистологической картины легких животных здорового контроля. Была видна десквамация эпителия бронхиол, наличие катарального экссудата и отёк соединительной ткани в местах скопления лимфоцитов, плазматических клеток и макрофагов, причем более крупные наблюдались в периваскулярных и перибронхиальных пространствах; не встречались признаки катарально - гнойного бронхита и полиморфноядерных лейкоцитов в клеточных скоплениях (рис. 3).

Рис.3. Подопытная 1. Легочная ткань мыши. Десквамация эпителия бронхиол, наличие катарального экссудата и отёк соединительной ткани в местах скопления лимфоцитов, плазматических клеток и макрофагов. Окраска гематоксилином и эозином, ув.-100.

В третьей группе (подопытная 2), где Витулин вводили одновременно с вирусом гриппа А/Сидней/05/97 (Н3№), воспалительные изменения проявлялись ярче, чем в группе №2 (подопытная 1). Признаки сосудистых реакций (скопление жидкости в полости альвеол, отёк перибронхиальной и перива-скулярной соединительной ткани, полиморфноядерные лейкоциты среди клеток воспалительного инфильтрата) были сильнее выражены. Встречались бронхи с признаками катарально-гнойного воспаления. Прослеживалось преобладание периваскулярных диффузных и очаговых скоплений над периб-ронхиальными. Однако, в отличие от первой группы (контроль вируса), где вместо Вигулина использовали физиологический раствор, не наблюдалось участков лёгочной ткани, где не были бы видны структуры лёгкого (просветы альвеол и межальвеолярные перегородки) из-за скопления клеток воспалительного инфильтрата. Бронхи были менее поражены, не выявляли признаков очагового фиброза (рис. 4).

Рис. 4. Подопытная 2. Структура ткани лёгких (просветы альвеол и межальвеолярные перегородки) сохранена. Бронхи менее поражены и не выявлены признаки очагового фиброза. Окраска гематоксилином и эозином, ув.-100.

Таким образом, проведённые вирусологические исследования показали, что Витулин при парентеральном введении вызывает в организме снижение инфекционной активности вируса гриппа. Причём его профилактическое использование до заражения респираторным высоковирулентным вирусом гриппа А/Сидней/05/97 (НЗЫ2) было более эффективным. Гистологическая картина лёгких мышей этой группы почти не отличалась от здоровых животных. Во второй подопытной группе, где Витулин вводили одновременно с вирусом, при гистологическом исследовании было выявлено, что структура лёгких сохранена, несмотря на кратковременное применение препарата (3 инъекции). Следовательно, Витулин обладает выраженным лечебным и профилактическим действием даже при экспериментальном заражении высоко-

чувствительных биологических моделей, мышей линии СБА, дозами высоковирулентного вируса гриппа.

На основании данных, полученных при вирусологическом и гистологическом исследовании можно сделать заключение, что Вигулин оказывает существенное ингибирующее действие на репродукцию эпидемических вирусов гриппа А в ткани легких мышей. Наибольший положительный эффект наблюдается при профилактическом применении препарата.

2.2.3. Применение Витулина и Тулимкара для неспецифической иммунопрофилактики респираторных вирусных болезней телят девятнадцати - тридцати однодневного возраста.

Профилактика респираторных вирусных болезней новорожденных телят в возрасте девятнадцати-тридцатиодного дней имеет свои характерные особенности. В этот период колостральный иммунитет находится на стадии затухания. Наблюдается снижение, как клеточного, так и гуморального иммунитета, а собственный еще не развивается. У таких животных клинические признаки болезни не проявляются, а выделение возбудителей происходит. Вирусы в большой концентрации (4,5 — 5 ТЦД 50/мл) выделяются из носовой слизи, содержимого коньюнктивального мешка, слюны и мочи. В связи с этим наблюдается широкое распространение возбудителей и массовое перезаражение (Сюрин В.Н. и др., 1991 - 1998).

Как правило, в это время снижаются как биохимические, так и иммунологические показатели. Проведенный нами анализ сыворотки крови телят 19-31- дневного возраста в племенном хозяйстве ЗАО «Нестеровское» Калининградской области, неблагополучном по респираторным болезням, показал снижение иммунологической реактивности организма животных в пределах 15-20%. Так, бактерицидная активность сыворотки крови в подопытной и контрольной группах составила: 29,1 ± 1,4 % и 31,3 ± 1,2 %; лизоцимная -11,3 ± 0,4 % и 13,01 ± 0,5 %; концентрация общего белка - 51,3 ± 1,2 г/л и 50,1 ± 1,2 г/л, соответственно.

Нами были испытаны различные схемы и дозы применения Витулина и Тулимкара для активной неспецифической иммунопрофилактики широко распространенных респираторных вирусных болезней телят, обусловленных возбудителями из семейств Негрезутёае и ОПЬотухохтпёае в угрожаемых и неблагополучных хозяйствах по респираторным болезням. Наиболее эффективной была следующая схема - начиная с девятнадцатого по тридцать первый день жизни животным внутримышечно с профилактической целью соче-танно вводится Витулин и Тулимкар. Интервал между инъекциями - двое суток, доза - по 0,025 мл/кг массы каждого. Перед применением препараты разводятся специальным растворителем из расчета 1:1. Телятам контрольной группы вводили у - глобулины и иммунотропные препараты. После проведения активной неспецифической иммунопрофилактики Витулином и Тулим-каром при повторном исследовании сыворотки крови было установлено повышение общего белка, лизоцимной и бактерицидной активности относи-

тельно исходных показателей. Бактерицидная активность сыворотки крови в подопытной группе составила 56,2 ±2,1 %, лизоцимная -21,3 + 0,3 %, кон-цешрация общего белка - 61,3 ± 1,2 г/л. В контрольной группе бактерицидная активность - 41,2 ± 1,6 %; лизоцимная - 14,1 ± 0,8% и концентрация общего белка - 51,2 + 1,3 г/л.

Таким образом, повышение биохимических и иммунологических показателей наблюдалось, как в подопытной, так и в контрольной группе. Однако в опыте, где использовали Витулин, общий белок был увеличен на 19,47%, тогда как в контрольной лишь на 3,98%; бактерицидная активность сыворотки крови повысилась на 96,55% и 36,84%, а лизоцимная - на 88,13% и 7,49%, соответственно.

Повышение резистентности организма животных подопытной группы отразилось и на количестве заболевших (3,07% от общего числа - 65 голов) (таблица 3).

Таблица 3

Эффективность применения Витулина и Тулимкара при активной неспецифической иммунопрофилактике респираторных болезней телят 19- 31- дневного возраста

№ п/п Группа животных Количество животных Возраст в днях Больные

Количество животных %

1 Контрольная 63 19-31 26 41,3

2 Подопытная 65 19-31 2 3,07

Следует отметить, что заболевание у телят протекало легко и через 10±3 суток животные выздоравливали.

В контрольной группе процент больных был высоким (41,3% от 63 голов), причем болезнь протекала тяжело, с осложнениями, часто сопровождаясь поражением желудочно-кишечного тракта, рецидивами и выбраковкой ценных племенных животных.

Таким образом, активная неспецифическая иммунопрофилактика с использованием Витулина и Тулимкара является эффективным и экономичным методом сохранения ценных племенных животных в возрасте 19-31 - дневного возраста при энзоотии респираторных вирусных болезней, обусловленных возбудителями из семейств НегреБуМае и Огйютухоушёае. Почта 100% сохранность молодняка подопытной группы обусловлена высокой противовирусной активностью Витулина, а также повышением факторов естественной ре-зистешности организма животных - индукции эндогенного гамма - интерферона, увеличением макрофагальной активности и других показателей, что было до-

казано в более ранних исследованиях (Левковская М.Н. и др., 2006 - 2009; Туле-ваН.П. и др., 2000-2011).

Следует отметить, что Витулин и Тулимкар защищали телят не только от возбудителей из семейств Herpesviridae и Orthomyxoviridae, но и от возможной ассоциации других патогенных вирусов, циркулирующих в животноводческих хозяйствах, включая аденовирусы, парамиксовирусы и многочисленные неклассифицированные энтеровирусы.

3. ВЫВОДЫ

1. Установлено противовирусное действие препарата Витулин in vitro в перевиваемой конфлюэнтной культуре клеток MDCK, без влияния гомеоста-за организма. 50% ингибирующая доза Витулина в отношении высоковирулентных для животных, человека и птиц респираторных эпидемических вирусов гриппа А/Сидней/05/97(НЗЫ2) составила 16,1 мкг/мл, для А/17/утка/Потс-дам/86/-92 (H5N2) - 62,25 мкг/мл.

2. Установлено противовирусное действие Витулина in vivo на высокочувствительной к вирусу гриппа биологической модели - самках мышей линии СВА. Выявлено снижение инфекционной активности высоковируленгаого для животных, птиц и человека вируса гриппа А/Сидней/05/97(НЗЫ2) с 6,1 до 3,8 lg ТЦИД5о/мл (>200 раз). Индекс ингибиции составил 2,3 lg ТЦИД50/МЛ.

3. Гистологическая картина ткани лёгких самок мышей линии СВА, которым до заражения высоковирулентным для животных, человека и птиц респираторным эпидемическим вирусом гриппа А/Сидней/05/97(НЗЫ2) с профилактической целью вводили Витулин, почти не отличалась от гистологической картины ткани лёгких здорового организма. В контроле, где вместо Витулина использовали физиологический раствор, наблюдалась пролиферативно - экссудативная (гнойная) очаговая ингерстициальная пневмония и катарально -гнойный бронхит.

4. Разработан эффективный и экономичный метод активной неспецифической иммунопрофилактики респираторных вирусных болезней телят девятнадцати - тридцатидневного возраста, когда колостральный иммунитет находится на стадии затухания, а иммунная система еще не сформирована По данному методу в хозяйствах, неблагополучных по респираторным болезням, обусловленным вирусами из семейств Herpesviridae и Orthomyxoviridae, Витулин и Тулимкар вводят внутримышечно, сочетало, в течение двадцати дней один раз в сутки с интервалом в два дня. Доза каждого препарата составляет 0,025 мл/кг массы тела Пеоед применением их разводят специальным растворителем в соотношении 1:1. Количество заболевших животных в таких группах не превышает 3% по сравнению с контролем - 41%. Различия достоверны при Р<0,01.

5. Активная неспецифическая иммунопрофилактика с использованием Витулина и Тулимкара защищает организм новорождённых телят не только от возбудителей семейств Herpesviridae и Orthomyxoviridae, но и от других многочисленных вирусов, циркулирующих у животных в хозяйствах.

4. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Витулин и Тулимкар можно с успехом использовать для профилактики многочисленных вирусных болезней новорождённых телят младшего возрастного периода жизни.

2. Разработана эффективная и экономичная доза и схема активной неспецифической иммунопрофилактики новорождённых телят с использованием Ви-тулина и Тулимкара в хозяйствах, неблагополучных по респираторным болезням. Инъекции следует проводить через каждые двое суток в течение двадцати дней. Доза каждого препарата составляет по 0,025 мл/кг массы тела

3. Разработана эффективная и экономичная доза и схема активной неспецифической иммунопрофилактики новорождённых телят с использованием Ви-тулина и Тулимкара в хозяйствах, угрожаемых по респираторным болезням. Инъекции следует проводить через каждые четверо суток в течение месяца Доза каждого препарата составляет по 0,025 мл/кг массы тела

5. СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ.

Публикации в изданиях списка ВАК

1. Левковская М. Н. Терапевтическое действие препарата Витулин на вирус гриппа / Левковская М. Н., Тулева Н. П., Ольховский С. Ю., Ольховская Т. В., Скачков А. П., Рекстин А. Р., Лосев Н. А.// Вестник РАСХН. - 2008. -№5. - С.63 - 64, 97.

2. Левковская М. Н. Изучение терапевтического действия Витулина при экспериментальной гриппозной инфекции / Левковская М. Н., Тулева Н. П., Рекстин А. Р., Лосев Н. А., Скачков А. П.// Российский иммунологический журнал. - 2008. - том 2 (11). - №2 - 3. - С. 168.

3. Тулев Ю. В. Применение иммуномодулирующих препаратов при генерализованных воспалительных процессах инфекционного генеза / Тулев Ю. В., Тулева Н. П., Лосев Н. А., Дедовских В. А., Лыкова А. А., Левковская М.Н. //Российскийиммунатопмеаашжурнал.-2008.-к»!2(11).-№2-3.-С.168.

4. Тулев Ю.В. Микрофлора матки коров, больных хроническим ката-рально - гнойным эндометритом. / Тулев Ю.В., Тулева Н.П., Левковская М.Н. // Молочное и мясное скотоводство. - 2009 - №5 - С. 29 - 30.

Публикации в сборниках периодической печати

5. Левковская М. Н. Изучение ингибирукмцего действия препарата Витулин на вирусы семейства Ог&от1хоутс1ае / Левковская М. Н., Тулева И. П., Рекстин А. Р. // Новые ветеринарные препараты и кормовые добавки. - 2008. -С. 15-16.

6. Тулев Ю. В. Определение противовоспалительного действия препарата Апитулим / Тулев Ю. В, Тулева Н. П., Тулев М. Ю., Лыкова А. А., Дедовских В. А., Левковская М. Н. // Матер, первого междунар. конгресса ветер.

фармакологов и токсикол. «Эффект, и безопасные средства». - СПб. - 2008 -С. 73.

7. Лыкова А. А. Противомикробное действие иммуномодулирующих препаратов серии Тулим / Лыкова А. А., Тулева Н. П.,Тулев М. Ю., Тулев Ю. В., Ледовских В. А., Левковская М. Н. // Матер, первого междунар. конгресса ветер, фармакологов и токсикол. «Эффект, и безопасные средства». - СПб. -2008-С. 67-68.

8. Тулев Ю. В. Определение противовоспалительного действия имму-номодулирующего препарата Тулим / Тулев Ю. В., Тулева Н. П., Тулев М. Ю., Лыкова А. А., Ледовских В. А., Левковская М. Н., Талыбов P. X., Ефимова Н. Ю. // Новые ветеринарные препараты и кормовые добавки. Экспресс информация 19. - СПб. - 2008. - С. 17 -18.

9. Тулев М. Ю. Противомикробное действие иммуномодулирующих препаратов серии Апитулим / Тулев М. Ю., Тулева Н. П., Тулев Ю. В., Лыкова А. А., Ледовских В. А., Левковская М. Н., Талыбов P. X. Новые ветеринарные препараты и кормовые добавки. Экспресс - информацш 19. - СПб. -2008. -с. 18-19.

10. Левковская М. Н. Оценка противовирусного действия иммуномоду-лирующего препарата Витулин «in vitro» / Левковская М. Н., Тулева Н. П., Рекстин А. Р. // Матер, всерос. съезда ветер, фармакологов и токсикол. «Эффект. и безопасные лекарств, средства в ветеринарии. - СПб. - 2009 - С. 41-42

11. Тулев М. Ю. Влияние иммуномодулирующего препарата Апитулим на жизнеспособность микроорганизмов в опытах «in vitro» / Тулев М. Ю., Тулева Н. П., Тулев Ю. В., Лыкова А. А., Ледовских В. А., Ефимова Н. Ю., Левковская М. Н. // Матер, всерос. съезда ветер, фармакологов и токсикол. «Эф-фективн. и безопасные лекарств, средства в ветеринарии - СПб. -2009 -С. 81-82.

12. Левковская М. Н. Изучение противовирусного действия иммуномодулирующего препарата «Вигулин» in vivo / Левковская М. Н., Тулева Н. П., Рекстин А. Р. // Матер. 63-й научн. конф. молодых ученых и студентов СПбГАВМ. - 2009. - С. 50.

13. Левковская М. Н. Противовирусное действие иммуномодулирующего препарата «Витулин» in vitro / Левковская М. Н., Тулева Н. П., Рекстин А. Р. // Матер. 63-й научн. конф. молодых ученых и студентов СПб-ГАВМ. -2009.-С. 49.

14. Тулева Н. П. Выявление специфического антигена вируса семейства HERPESVIRIDAE у телят, больных инфекционным ринотрахеитом / Тулева Н. П., Тулев Ю. В., Левковская М. Н., Ледовских В. А., Лыкова А.. А. // Новые ветеринарные препараты и кормовые добавки. Экспресс - информация 21. -СПб.-2010.-С. 28-30.

15. Левковская М. Н. Изучение профилактического и терапевтического действия иммуномодулируюдщего препарата Витулин при вирусной гриппозной инфекции / Левковская М. Н., Тулева Н. П., Рекстин А. Р., Лыкова А. А., Ледовских В. А. // Матер. 3 Съезда фармакологов и токсикол. России «Ак-туальн. проблемы вет. фармакологии, токсикологии и фармации». - СПб. -2011.-С. 308-309.

Подписано в печать 05.08.2011. Бумага офсетная. Объём 1,5 п.л., Тираж 100 экз. Заказ № 01-08- 2011

Отпечатано с оригинал-макета заказчика

в типографии ООО «Политон» 198096, Санкт-Петербург, пр. Стачек, 82 тел: 784-13-35

Содержание диссертации, кандидата ветеринарных наук, Левковская, Мария Николаевна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

1.0Б30Р ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Основные свойства вирусов семейства Orthomyxoviridae.

1.2. Основные свойства вирусов семейства Herpesviridae.

1.3. Современные препараты, обладающие противовирусным действием.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Материалы и методы исследований.

2.1.1. Характеристика изучаемых препаратов.

2.1.2. Вирусы.

2.1.3. Методы работы с развивающимися куриными эмбрионами.

2.1.4. Методы работы с перевиваемой линией клеток MDCK.

2.1.5. Животные.

2.1.6. Гистологические методы исследования.

2.1.7. Определение лизоцимной активности сыворотки крови.

2.1.8. Определение бактерицидной активности сыворотки крови.

2.2. Результаты исследований.

2.2.1. Противовирусные свойства Витулина in vitro.

2.2.2. Противовирусные свойства Витулина in vivo.

2.2.2.1. Показатели инфекционной активности, вируса гриппа. в лёгких мышей подопытных групп.

2.2.2.2. Гистологическое исследование патологического материала. от животных подопытных групп.

2.2.3. Применение Витулина и Тулимкара для неспецифической. иммунопрофилактики респираторных вирусных болезней телят. девятнадцати - тридцати однодневного возраста.

3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ.

4. ВЫВОДЫ.

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Противовирусное действие Витулина и Тулимкара в опытах in vitro и in vivo"

Актуальность темы.

Одной из важных проблем современной науки являются респираторные болезни.

По данным ученых, смертность от них во всём мире имеет тенденцию ко всё большему нарастанию (Воробьев A.A. и др.,1999; Гранитов В. М., 2001; Камышенцев М.В. и др., 2002; Костыркин Ю.А. и др., 2005; Тулева Н.П., 2004 - 2010; Богомолова И. К. и др., 2010; Дмитриева Г. М. и др., 2010).

Выявлено многообразие различных вирусов и их многочисленных се-ротипов, что затрудняет борьбу с ними с помощью методов специфической профилактики и способствует возникновению спонтанных инфекций (Сюрин В. Н. и др. Д 991 - 1998; Нестерова И. В., 2002; Тулева Н. П., 2004-2011).

1. Активная иммунизация живыми или инактивированными вакцинами;

2. Пассивная иммунизация специфическими гипериммунными сыворотками;

3. Повышение неспецифической резистентности организма с использованием иммунотропных препаратов.

Применение живых или инактивированных вакцин не предотвращает латенции вирусов сем. Негре8утс1ае в организме животных (СюринВ.Н,1991 - 1998; Глотов А. Г., 2003; ТулеваН. П., 2004, 2009).

Однако использование иммуностимуляторов, иммунокорректоров, вызывающих активацию Т и В - клеточного иммунитета, представляет серьезную проблему. При их длительном применении возможна переактивация клеток иммунной системы (Агеенко А.И.,1994).

На современном этапе науки для профилактики респираторных болезней телят необходимы препараты с направленным действием: антимикробным, противовирусным, противовоспалительным и предотвращающим запуск опухолевой трансформации клеток даже при их длительном применении. Таким требованиям отвечают патентованные иммуномодулирующие препараты Витулин и Тулимкар. В своём составе они содержат соединения нескольких подгрупп флавоноидов (флавоны, флавонолы, флавононы) и их гликозиды, полученные из цветов, вегетативной части и корней растений нескольких семейств: сложноцветные, барбарисовые и астровые. Флавоноиды этих растений, находящиеся в гликозидированном виде, подвергнуты полному гидролизу, что абсолютно исключает токсичность препаратов. При ферментации гликозидов образуются радикалы, которые обладают активным бактериостатическим действием в отношении грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов, а также патогенных грибков, микоплазм и простейших.

Тулимкар корректирует Т- и В-клеточный иммунитет, активирует NK клетки. Содержащийся в препарате 3 - окси — флавон — силибин тормозит лектинининдуцированный митогенез клеток (Тулева Н. П., 2004 - 2010).

Цель и задачи исследований.

Целью данной работы является определение противовирусного действия Витулина и Тулимкара в опытах in vitro и in vivo.

Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи:

Научная новизна работы.

Впервые изучено ингибирующее действие Витулина на репродукцию респираторных эпидемических высоковирулентных для человека, животных и птиц вирусов гриппа А/Сидней/05/97(НЗШ) и А/17/утка/Потсдам/86/92 (H5N2) в опытах in vitro в конфлюентных культурах клеток MDCK, без влияния гомеостаза организма на активность вирусов.

Впервые изучено в опытах in vivo на чувствительной биологической модели, самках мышей линии СВА, ингибирующее действие Витулина на репродукцию респираторных эпидемических высоковирулентных для животных, человека и птиц вирусов гриппа семейства Orthomyxoviridae.

Разработаны экономичные и эффективные схемы активной неспецифической иммунопрофилактики респираторных болезней новорожденных телят, обусловленных вирусами из семейств Herpesviridae и Orthomyxoviridae.

Практическая значимость работы.

Разработаны эффективные и экономичные схемы и методы активной неспецифической иммунопрофилактики респираторных болезней новорождённых телят, обусловленных вирусами из семейств Herpesviridae и Orthomyxoviridae.

Разработаны рекомендации по применению Витулина и Тулимкара для активной неспецифической иммунопрофилактики респираторных вирусных болезней телят (утверждены на научно - координационном совете по животноводству и ветеринарии Северо — Западного научно - методического центра Россельхозакадемии, протокол №4 от 09 декабря 2009г.).

Разработанные рекомендации по применению Витулина и Тулимкара для активной неспецифической иммунопрофилактики респираторных вирусных болезней новорождённых телят с высоким положительным эффектом применены в племенных хозяйствах Калининградской области (Российская Федерация).

Полученные данные о противовирусном действии препаратов Витулин и Тулимкар используются в учебном процессе ФГОУ ВПО «СПбГАВМ».

Основные положения, выносимые на защиту.

Апробация работы.

Основные материалы исследований по диссертационной работе доложены и обсуждены на ежегодных научных конференциях Санкт - Петербургской Государственной академии ветеринарной медицины (Санкт - Петербург, 2007 - 2011 гг); Международном конгрессе ветеринарных фармакологов «Эффективные и безопасные лекарственные средства» (СПб, 2008 г); Всероссийском съезде ветеринарных фармакологов и токсикологов (СПб, 2009 г); научных конференциях молодых учёных и студентов СПбГАВМ (2008 - 2009 гг); Международных конгрессах ветеринарных фармакологов (СПб, 2008 - 2009); Международном съезде ветеринарных фармакологов и токсикологов (СПб, 2011 г).

Публикации.

По материалам диссертации опубликовано 15 научных работ, в том числе 4 в журналах, рецензируемых ВАК; а также методические рекомендации (утверждены на научно - координационном совете по животноводству и ветеринарии Северо - Западного научно - методического центра Россельхо-закадемии, 2009г).

Объем и структура диссертации.

Диссертация изложена на 130 страницах машинописного текста и содержит следующие разделы: введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, результаты собственных исследований, обсуждение результатов, выводы, практические предложения, список литературы, приложения. Список использованных литературных источников включает 263 источника, в том числе 103 работы зарубежных авторов. Диссертация иллюстрирована 24 рисунками и 5 таблицами. В приложении представлены копии титульных листов документов, подтверждающих результаты отдельных этапов работы, их научную новизну и практическую значимость.

Заключение Диссертация по теме "Кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов", Левковская, Мария Николаевна

4. ВЫВОДЫ.

1. Установлено противовирусное действие препарата Витулин in vitro в перевиваемой конфлюэнтной культуре клеток MDCK, без влияния гомеоста-за организма. 50% ингибирующая доза Витулина в отношении высоковирулентных для животных, человека и птиц респираторных эпидемических вирусов гриппа А/Сидней/05/97(НЗН2) составила 16,1 мкг/мл, для А/17/утка/Потсдам/86/92 (H5N2) - 62,25 мкг/мл.

2. Установлено противовирусное действие Витулина in vivo на высокочувствительной к вирусу гриппа биологической модели — самках мышей линии СВА. Выявлено снижение инфекционной активности высоковирулентного для животных, птиц и человека вируса гриппа А/Сидней/05/97(НЗШ) с 6,1 до 3,8 lg ТЦИД50/мл (>200 раз). Индекс ингибиции составил 2,3 ^ТЦИД50/мл.

3. Гистологическая картина ткани лёгких самок мышей линии СВА, которым до заражения высоковирулентным для животных, человека и птиц респираторным эпидемическим вирусом гриппа А/Сидней/05/97(НЗМ2) с профилактической целью вводили Витулин, почти не отличалась от гистологической картины ткани лёгких здорового организма. В контроле, где вместо Витулина использовали физиологический раствор, наблюдалась пролиферативно - экссудативная (гнойная) очаговая интерстициальная пневмония и катарально — гнойный бронхит.

4. Разработан эффективный и экономичный метод активной неспецифической иммунопрофилактики респираторных вирусных болезней телят девятнадцати - тридцатидневного возраста, когда колостральный иммунитет находится на стадии затухания, а иммунная система еще не сформирована. По данному методу в хозяйствах, неблагополучных по респираторным болезням, обусловленным вирусами из семейств Herpesviridae и Orthomyxoviridae, Витулин и Тулим-кар вводят внутримышечно, сочетано, в течение двадцати дней один раз в сутки с интервалом в два дня. Доза каждого препарата составляет 0,025 мл/кг массы тела. Перед применением их разводят специальным растворителем в соотношении 1:1. Количество заболевших животных в таких группах не превышает 3% по сравнению с контролем - 41%. Различия достоверны при Р<0,01.

5. Активная неспецифическая иммунопрофилактика с использованием Ви-тулина и Тулимкара защищает организм новорождённых телят не только от возбудителей семейств Herpesviridae и Orthomyxoviridae, но и от друг их многочисленных вирусов, циркулирующих у животных в хозяйствах.

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

2. Разработана эффективная и экономичная доза и схема активной неспецифической иммунопрофилактики новорождённых телят с использованием Витулина и Тулимкара в хозяйствах, неблагополучных по респираторным болезням. Инъекции следует проводить через каждые двое суток в течение двенадцати дней. Доза каждого препарата составляет по 0,025 мл/кг массы тела

3. Разработана эффективная и экономичная доза и схема активной неспецифической иммунопрофилактики новорождённых телят с использованием Витулина и Тулимкара в хозяйствах, угрожаемых по респираторным болезням. Инъекции следует проводить через каждые четверо суток в течение месяца. Доза каждого препарата составляет по 0,025 мл/кг массы тела

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, кандидата ветеринарных наук, Левковская, Мария Николаевна, Санкт-Петербург

1. Абрамов С. С. Профилактика и лечение бронхопневмонии у телят / Абрамов С. С. // Актуальные вопросы профилактики и борьбы с болезнями животных в специализированных хозяйствах и комплексах: Тез. Респ. конф. Витебск, 1983. - С. 126-127.

2. Абрамов С. С. Физиопрофилактика бронхопневмонии у телят / Абрамов С. С., Пигальцев Э. С., Соловьянов П. И. // Ветеринария. 1982. — № 12. — С. 66-67.

3. Абрамов С. С. Ферментотерапия бронхопневмонии телят / Абрамов С. С., Порохов Ф. Ф. // Ветеринарная наука производству. Вып. 21. - 1983.- С. 120-128.

4. Агеенко А. И. Лицо рака/Агеенко А. И. -М.: Медицина, 1994.-С. 147-149.

5. Ада Г. Вакцины, вакцинация и иммунный ответ / Ада Г., Рамсей А. М., 2002.-344с.

6. Андреев Е.В. Проблемы ветеринарной иммунологии / Андреев E.B. — М.,1985.-48с.

7. Атамась В.А. Респираторные болезни сельскохозяйственных животных / Атамась В.А., Андреев Е.А. и др. Киев: «Урожай», 1986. - С. 33-34^

8. Атлас по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии / под ред. A.A. Воробьева, A.C. Быкова. М., 2003. - 236с.

9. Баринский И.Ф. Семейство герпесвирусов. Общая и частная вирусология / Баринский И.Ф. — М., 1982. С. 375-412.

10. Барышников П.И. Ветеринарная вирусология / Барышников П.И. — М., 2007.-С.5-58.

11. Бояринцев Л. Е. Иммуномодулирующая активность лигавирина при гипотрофии телят / Бояринцев Л. Е. // Ветеринария. 2002. - № 9. — с. 41-44.

12. Бояринцев Л. Е. Методы тестирования иммунологической резистентности сельскохозяйственных животных / Бояринцев Л. Е. и др. // Труды ВАСХ-НИЛ. -Воронеж, 1999. С. 34-35.

13. Бурдейный В. В. Интерферон с неинактивированным индуктором при некоторых инфекционных болезнях молодняка животных (получение, свойства, применение): дис. док. вет. наук. / Бурдейный В. В. Кострома, 1998.-С. 38-43.

14. Бурцева Е. И. Мониторинг чувствительности выделенных в России эпидемических штаммов вирусов гриппа к этиотропным химиопрепаратам / Бурцева Е. И., Шевченко Е. С., Белякова Н. В. и др. // Вопросы вирусологии. 2009. - № 5. - С. 24-28.

15. Бурцева Е. И. Чувствительность к ремантадину и арбидолу вирусов гриппа, вызвавших эпидемические подъемы заболеваемости в России в сезоне 2004-2005 гг. / Бурцева Е. И., Шевченко Е. С., Ленева И. А. и др. // Вопросы вирусологии. 2007. - № 2. - С. 24-29.

16. Варгин В.В., Семенов Б.Ф. Вторичные иммунодефициты, возникающие в ходе инфекции / Варгин В.В., Семенов Б.Ф. // Иммунология инфекционного процесса: сборник научных трудов. М., 1993. - С. 178-192.

17. Васильев Ю. М. Вакцины против вируса гриппа птиц / Васильев Ю. М. // Вопросы вирусологии. 2008. - Том 53. - №6. - С 4-15.

18. Венгеровский А.И. Противомикробные, противовирусные и противопара-зитарные средства / Венгеровский А.И. — Томск, 2002. С. 222-257.

19. Вирусология / под ред. Б.Филдса, Д.Найпа. М., 1989. - Том 1. - 492с.

20. Вопросы общей вирусологии / под ред. О.И. Киселева, И.Н. Жилинской. -СПб., 2007.-С. 265-266.

21. Воробьев А. А. Новые принципы и методы создания иммунологических препаратов / Воробьев А. А., Медуницын Н. В. // Вестник РАМН. 1999. -№ 10.-с. 16-17.

22. Воробьев A.A. Современные направления в разработке новых иммунобиологических препаратов / Воробьев A.A. // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. — 1999. — №5 С. 16-21.

23. Воронин Е. С. Влияние Т активина на иммунологический статус телят / Воронин Е. С. и др. // Ветеринария. - 1990. - № 5. - С. 51-55.

24. Высокопоясный А. И. Респираторные болезни телят на Кубани / Высоко-поясный А. И., Басова Н. Ю., Шахов А. Г., Шипицын А. Г. // Ветеринария. -2000. №12.-с. 8-11.

25. Гендон Ю.З. Культуральные гриппозные вакцины / Гендон Ю.З. // Вопросы вирусологии. — 2002. — № 6. — С. 4-11.

26. Генетика вирусов гриппа / под ред. П. Пейлиза и. Д.У. Кингсбери. -М.,1986. -336с.

27. Глотов А.Г. Влияние вакцинации и иммуномодуляторов на течение ИРТ крупного рогатого скота у быков производителей / Глотов А.Г. // Ветеринария. - 2003. - № 2. - С. 17-20.

28. Глотов А.Г. Распространение вирусных респираторных болезней крупного рогатого скота / Глотов А.Г., Петрова О.Г., Глотова Т.И. и др. // Ветеринария. 2002. -№3. - С. 17-21.

29. Глушков Р. Г. Молекулярно биологические особенности действия арби-дола - нового противовирусного препарата / Глушков Р. Г., Фадеева Н. И., Ленева И. А. и др. // Химико - фармакологический журнал. - 1992. - № 2.-С. 8-15.

30. Гранитов В. М. Герпесвирусная инфекция / Гранитов В. М. М.: «Мед. книга», 2001. - 88с.

31. Грипп и гриппоподобные инфекции (включая и особо опасные формы). Фундаментальные и прикладные аспекты изучения / под редакцией В. И.

32. Покровского, Д. К. Львова и др. СПб. - 2008. - 109с.

33. Грипп и другие респираторные инфекции: эпидемиология, профилактика, диагностика и терапия / под ред. О. И. Киселёва, И. Г. Маринича, А. А. Сомининой. СПб., 2003. - 245с.

34. Грипп: руководство для врачей / под ред. Карпухина Г. И. Спб., 2003. — 360с.

35. Гуненко В. В. Основные направления изучения вирусных пневмоэнтери-тов телят / Гуненко В. В., Белоусова Р. В. , Сюрин В. Н. // Ветеринария. — 1992. -№ 4. -С.65.

36. Гуськова Т. А. Арбидол иммуномодулятор, индуктор интерферона, антиоксидант / Гуськова Т. А., Глупгков Р. Г. - М., 1999. - 92с.

37. Дадыбаев Ж. М. Некоторые показатели клеточных и гуморальных факторов иммунитета у телят, больных респираторными заболеваниями / Дадыбаев Ж. М. // Тез. докл. межвуз. научно практ. конф. - Фрунзе, 1990. - Ч. 1.-С. 10-11.

38. Дадыбаев Ж. М. Применение Т активина для лечения и профилактики респираторных болезней телят: автореферат дис.канд. вет. наук / Дадыбаев Ж. М. -М.3 1991.-С. 14-15.

39. Данилевский В. М. Бронхопневмония телят: этиология, патогенез, диагностика, профилактика и лечение / Данилевский В. М. // Ветеринария. -1985. -№ 2. -С. 48-50.

40. Дегтярев М. В. Радиопротекторные свойства препарата "Витулин": дис. канд. биол. наук / Дегтярев М. В. СПб., 2006. - 187с.

41. Деева A.B. Применение иммуномодуляторов продуктивным животным / Деева A.B., Мехдиханов Г.Г., Соколов В.Д. и др. // Ветеринария. 2006. — №8. -С. 8-12.

42. Деева Э. Г. Грипп. На пороге пандемии: руководство для врачей / Деева Э. Г.-М., 2008.-208с.

43. Денисенко В.Н. Иммунодефицитные состояния и особенности иммуно-коррекции организма телят: автореф. дис. док. вет. наук / Денисенко В.Н. -М.5 1999.-50 с.

44. Домникова Н. П. Предшествующее назначение антибактериальных препаратов фактор, способствующий развитию внутрибольничной пневмонии и ухудшающий прогноз / Домникова Н. П., Сидорова Л. Д., Ильина В. Н. // Пульмонология. - 2001. - № 4. - С. 23-27.

45. Дриневский В. П. Острые респираторные инфекции у детей и подростков / Дриневский В. П., Осидак Л. В., Цыбалова Л. М. Спб., 2003. - 181с.

46. Дубравина Р. Я. Возможные механизмы реализации защитного действия аминокапроновой кислоты при гриппе / Дубравина Р. Я., Ловицкий В. П., Иванова И. Я. и др. / Новые подходы к химиотерапии вирусных инфекций. -Рига: «Зинатне», 1991. С. 148-154.

47. Ершов Ф. И. Антивирусные препараты. Справочник. 2-е издание / Ершов Ф. И. -М.: «Медицина», 2006. 311с.

48. Ершов Ф. И. Система итерферона в норме и при патологии / Ершов Ф. И. -М., 1996.-238 с.

49. Ершов Ф. И. Возможна ли рациональная фармакотерапия гриппа и др. ОРВИ? / Ершов Ф. И., Касьянов И. В., Полонский В. О. // Инфекции и антимикробная терапия. -2003. Т. 5. -№ 6. - С. 129-135.

50. Ершов Ф. И. Интерфероны и их индукторы (от молекул до лекарств) / Ершов Ф. И., Киселев О. И. -М., 2005.-356 с.

51. Ершов Ф. И. Лекарственные средства, применяемые при вирусных заболеваниях / Ершов Ф. И., Романцов М. Г. М., 2007. - 368 с.

52. Жданов В.М. Эволюция вирусов / Жданов В.М. М., 1990. - С. 5-49.

53. Жилинская И.Н. Новые аспекты изучения механизмов патогенеза вирусных инфекций / Жилинская И.Н. // Успехи современной биологии. — 2002. Т.122. - №5. - С.414-417.

54. Жуков А. О. Динамика смертности и летальности от гриппа и ОРЗ в Ленинграде / Жуков А. О. // Эпидемиологический надзор за гриппом и прогнозирование эпидемий. Л., 1987. - С. 36-39.

55. Жуков М. С. Иммуноморфогенез у вакцинированных животных на фоне применения иммуномодуляторов / Жуков М. С., Прудников В. С., Анисин И. А. // Тез. докл. 1 всерос. конф. «Иммунодефицита с/х животных». -1994.-С. 21-22.

56. Закутский Н.И. Герпесвирусные болезни животных / Закутский Н.И., Ху-хоров И.Ю., Жестерев В.И. и др.. Владимир/Покров, 2003. - 282с.

57. Злыдников Д. М. Проблемы гриппа / Злыдников Д. М., Иванников Ю. Г., Лузянина Т. Я., Смородинцев А. А. -М., 1971. С. 102-105.

58. Измайлов И. А. Вспышка гриппа крупного рогатого скота / Измайлов И. А., Атамась В. А. и др. // Ветеринария.— 1973. № 5. - с. 69-70.

59. Иммунопрофилактика: справочник. 6 изд., доп. / под ред. В.К. Таточенко, Н.А. Озерецковского. -М., 2003. 176с.

60. Инфекционная патология животных. В 2 т. Т. 1.// под ред. Самуйленко А.Я., Соловьева Б.В., Непоклонова Е. А., Воронина Е.С. М.: «Академкнига», 2006. - 1911с.

61. Исаков В.А. Клиника и лечение генитального герпеса / Исаков В.А., Сафронова М.М. СПб., 1997. - 30с.

62. Исаков В. А. Иммунология и патогенез гриппа и гриппоподобных заболеваний / Исаков В. А., Шаманова М. Г, Чепик Е. Б. и др. СПб., 1991. -С. 78-82.

63. Йориш Н. П. Лечебные свойства мёда и пчелиного яда / Йориш Н. П. -М.: «Медгиз», 1956. С. 7-20.

64. Иориш Н. П. Мёд, полученный путём исскуственного кормления пчёл / Йориш Н. П. // Доклады ВАСХНИЛ. 1939. - № 20. - С. 10.

65. Камышенцев M. В. Грипп: пути решения проблемы / Камышенцев М. В., Стефанов В. Е. Спб., 2002. - С. 3-25.

66. Карпуть И. М. Иммунология и иммунопатология болезней молодняка / Карпуть И. М. Минск: «Ураджай», 1993. - С. 152-155.

67. Карпуть И. М. Незаразные болезни молодняка / Карпуть И. М., Порохов Ф. Ф;, Абрамов С.С. Минск: «Ураджай», 1989. - С. 85-90.

68. Карпуть И. М. Иммунный статус телят и поросят / Карпуть И. М., Севрюк И. 3., Ульянов А. Г. и др. // Матер, респ. научно произв. конф. по жи-вотн. и ветерин. медицине, 21 — 22 сент., 1994. — Витебск, 1994. — С. 36.

69. Карпухин Г. И. Профилактика и лечение гриппа / Карпухин Г. И. — Л., 1989.-32с.

70. Кассич А. Ю. Иммунодефициты и их коррекция при желудочно — кишечных заболеваниях телят: автореф. дисс.канд. вет. наук / Кассич А. Ю. — М., 1986.-23 с.

71. Киселев О. И. Антиривусные препараты для лечения гриппа и ОРЗ. Дизайн препаратов на основе полимерных носителей / Киселев О. И., Деева Э. Г., Слита А. В., Платонов В. Г. СПб.: «Время», 2000. - 132с.

72. Киселев О. И. Состояние разработки вакцин против вируса гриппа H5N1 в мире и России / Киселев О. И., Цымбалова A.M., Покровский В.И. // Журнал микробиологии. 2006. -№ 5. - С. 28-38.

73. Классификация и номенклатура вирусов позвоночных / под ред. Лутовце-ва В.Ю., Васильева Д.А. Ульяновск, 2002. - С. 31-34, 139-146.

74. Королькова Т.Н. Иммунный надзор и опухолевая прогрессия при лимфо-мах кожи низкой степени злокачественности: автореф. дис. д-ра мед. наук. / Королькова Т.Н. СПб., 1996. - 35с.

75. Костыркин Ю.А. Эффективность инактивированной вакцины при факторных респираторных болезнях телят / Костыркин Ю.А., Мищенко В.А., Думов В.В. и др. // Ветеринарная патология. 2005. - №3. - С. 72-75.

76. Крюков Н.И. Инфекционный ринотрахеит-пустулёзный вульвовагиниткрупного рогатого скота / Н.И. Крюков // Итоги науки и техники. Животноводство и ветеринария. — М., 1980. — Т. 13. — С. 35-37.

77. Кудесов Л. А. Применение препаратов «Волексин — 1» и «Волексин — 2» для профилактики и лечения бронхопневмонии у телят: автореф. дис. канд. вет. наук / Кудесов Л. А. СПб., 2001. - С. 16-25.

78. Куриленко А. Н. Бактериальные и вирусные болезни молодняка сельскохозяйственных животных / Куриленко А. Н., Крупальник В. Л., Пименов Н. В. -М., 2005. С 167-245.

79. Лавров В. Ф. Механизмы формирования иммунологической памяти и вакцинация / Лавров В. Ф., Кузин С. Н. // Эпидемиология и вакцинопро-филактика. 2004. - № 4. - С. 39-41.

80. Лакин Г. Ф. Биометрия / Лакин Г. Ф. М.: Высшая школа, 1990. - С. 16 — 25.

81. Ламонов С. А. Эффективность использования чистопородных и улучшенных симментальских коров / Ламонов С. А. // Молочное и мясное скотоводство. 2009. - №2 - С. 15.

82. Левковская М. Н. Изучение противовирусного действия иммуномодули-рующего препарата «Витулин» in vivo / Левковская М. Н., Тулева Н. П., Рекстин А. Р. // Материалы 63-й научн. конф. молодых ученых и студентов СПбГАВМ. 2009. - С. 50.

83. Левковская М. Н. Противовирусное действие иммуномодулирующего препарата «Витулин» in vitro / Левковская М. Н., Тулева Н. П., Рекстин А. Р. // Материалы 63-й научн. конф. молодых ученых и студентов СПбГАВМ. 2009. - С. 49.

84. Левковская М. Н. Терапевтическое действие препарата Витулин на вирус гриппа / Левковская М. Н., Тулева Н. П., Ольховский С. Ю. и др. // Вестник РАСХН. 2008. - №5. - С.63-64, 97.

85. Ленева И. А. Применение иммуноферментной индикации вирусспецифи-ческих антигенов в изучении нового противовирусного препарата / Ленева И. А, Фадеева Н. И., Федякина И. Т. и др. // Химико фармацевтический журнал. - 1994. - № 9 - С. 4-15.

86. Ленёва И.А. Изучение противовирусной активности отечественных противогриппозных химиопрепаратов в культуре клеток и на модели животных / Ленёва И.А., Федякина И.Т., Еропкин М.Ю., Гудова Н.В.и др. // Вопросы вирусологии. 2010. - Т.55. - № 3. - С. 19-26.

87. Литвин В.П. Инфекционные и инвазионные болезни телят / Литвин В.П., ПоживилА.И. Киев: «Наукова Думка», 1991.-208с.

88. Литвинова О. М. Этиология современного гриппа / Литвинова О. М., Смородинцева Е. А., Деева Э. Г. и др. // Эпидемиология и вакцинопро-филакгика. 2001. - №1 - С. 5-9.

89. Львов Д. К. Популяционные взаимодействия в биологической системе: вируса гриппа А дикие и домашние животные - человек / Львов Д. К. // Журнал микробиологии. - 2006. - № 3. - С.96-100.

90. Малецкая О. В. Влияние иммуномодулирующих препаратов на эффективность этиотропной терапии при экспериментальном хроническом бруцеллезе / Малецкая О. В. // Иммунология. 2003. - № 3. - С. 182-183.

91. Манько В.М. Иммуномодуляция: история, тенденции развития, современное состояние и перспективы: Обзор / Манько В.М., Петров Р.В., Хаитов P.M. // Иммунология. 2002. - Т. 23. - №3. - С. 132-138.

92. Матвеева И.Н. Оздоровление стад от массовых респираторных болезней / Матвеева И.Н. // Ветеринария. 2008. - №12. - С. 18.

93. Матюшев П. С. Профилактика бронхопневмонии телят иммуностимуляторами / Матюшев П. С., Самарина М. Н. // Ветеринария. 2001. - № 9. -С. 35-38.

94. Мищенко В. А. Проблема респираторных смешанных инфекций молодняка КРС / Мищенко В. А. // Материалы Междунар. научн. конф., посвященной 45-летию ФГУ «ВНИИЗЖ» под ред. Захарова В. М. Владимир, 2003. - С. 73-77.

95. Мищенко В. А. Вакцинация новорожденных телят против ИРТ и ПГ 3 крупн. рогатого скота // Мищенко В. А., Костыркин Ю. А. и др. / Ветеринария. - 2003. - № 7. - С. 19-20.

96. Назаров П. Г. Врожденный иммунитет и зашита от инфекций / Назаров П. Г. //Russ. J. brnmmol. -2005. -Vol. 9. -№ 2. -Р. 51-55.

97. Нестерова И. В. Иммуномодулирующая терапия при вирусных инфекциях. Справочник по иммунологии / Нестерова И. В.-М., 2002 С. 250-253.

98. Нефедченко A.B. Латенция вируса ИРТ у крупного рогатого скота: Особенности течения и эффективности иммуномодуляторов: дис. канд. вет. наук / A.B. Нефёдченко Новосибирск, 2002. - 133с.

99. Никитин И.Н. Организация и экономика ветеринарного дела / Никитин И.Н., Воскобойник В.Ф. М.: «Владос», 1999. - 384с.

100. Новиков В.И. Иммунотерапия при злокачественных новообразованиях / Новиков В.И., Карандашов В.И. и др.. -М.: «Медицина», 1999. 135с.

101. Новиков Ю. К. Современные подходы к лечению пневмоний / Новиков Ю. К. //Русский Медицинский Журнал. 2002. - Т.10. - № 5. - С. 29.

102. Новых H.H. Иммуноморфогенез, особенности проявления эпизоотического процесса при герпесвирусных инфекциях крупного рогатого скота ииспользование цитомединов: монография / Новых H.H. — Ижевск., 2005. — 256 с.

103. Общая и частная вирусология / под ред. Жданова В.М., Гайдамович С.Я. -М.: «Медицина», 1982. Том 1. -493с.

104. Острые респираторные заболевания крупного рогатого скота / под ред. О. Г. Петровой. Екатеринбург: РАСХН, 2010. - 216с.

105. Петрова О.Г. Инфекционный ринотрахеит инфекционный пустулезный вульвовагинит крупного рогатого скота. Методические рекомендации / Петрова О.Г., Глотов А.Г. Екатеринбург, 2000. — 43с.

106. Подкопаев В. М. Инфекционные и инвазийные болезни крупного рогатого скота / Подкопаев В. М., Степанова А. В. и др.. — М.: «Россельхозиз-даг», 1985.-С. 57-102.

107. Покровский В. И. Грипп птиц: происхождение инфекционных биокатастроф / Сборник статей под ред. президента РАМН, академика В. И. Покровского. СПб: «Росток», 2005. - с. 123-126.

108. ИЗ. Поляк М.С. Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам методом серийных разведений / Поляк М.С. Лекции по фармакотерапии. Спб. НИЦФ: ООО «Анатомия», 2000. -№10. - С. 3-10.

109. Пономарев А.П. Электронная микроскопия вирусов животных и некоторых условно-патогенных микроорганизмов / Пономарев А.П., Мишенко В.А. -Владимир, 2005. 69с.

110. Пономаренко Ф.М. Инфекционный катар дыхательных путей крупного рогатого скота. / Понаморенко Ф.М. // Советская ветеринария. — 1940. — № 11/12.-С. 1-4.

111. Попов В.Ф. Лекарственные формы интерферонов / Попов В.Ф. — М., 2002. 136с.

112. Попов Н. Н. Клиническая иммунология и аллергология: учебное пособие для врачей / Попов Н. Н:, Лавров В. Ф. и др.. М., 2004. - 524с.

113. Притулин П. И. Инфекционные проблемы иммунодефицита животных / Притулин П. И., Калмыкова Т. П. // Вестн. сельскохоз. науки. 1989. — №2. -С. 95-100.

114. Селькова Е. П. Профилактическая и лечебная эффективность Арбидола. / Селькова Е. П., Семененко Т. А., Готвянская Т. П. и др. // Эпидемиология и вакцинация. 2005. - № 4. - С. 17-24.

115. Семенков В. Ф. Иммунодефицитные состояния и вирусные инфекции / • Семенков В. Ф., Агеева О. Н. // Профилактика вирусных инфекций в светесовременных достижений иммунологии. 1985. — С. 73-87.

116. Семенюта Т.А. Иммунологическая реактивность животных, выращиваемых в комплексах / Семенюта Т.А., Колесников И.К. / Ветеринария. -1983.-№6.-С. 32-33.

117. Оетдикова Н.Х. Иммуномодуляторы в комплексной терапии иммуноком-проментированных пациентов: дисс.док. мед. наук / Сетдикова Н.Х. -М., 2002.-303с.

118. Сисягин П.Н. Профилактика вирусных респираторных болезней телят / Сисягин П.Н., Реджепова F.P., Убитина И.В., Зоткин Г.В. // Мат. межд. на-уч-практ. конф. актуал. пробл. болезней молодняка в соврем, условиях. -Воронеж, 2002. С.38-40.

119. Сметанин М.А. Особенности течения гриппа у крупного рогатого скота в хозяйствах Среднего Поволжья./ Сметанин М.А. // Диагностика заразных заболеваний с.-х. животных. — Казань, 1982. — С.45-47.

120. Сметанин М. А. Грипп жвачных. Обзор. / Сметанин М. А., Камалов В. Г. // Ветеринарный врач. 2000. -№4. с. 72-73.

121. Смородинцев А. А. Грипп и его профилактика / Смородинцев А. А. -М.,1984. — 382 с.

122. Смирнов В. С. Оценка естественной резистентности крупного рогатого скота и овец. Методические рекомендации / Смирнов В. С., Гончарова И. М., Воронова В. М. и др. Новосибирск, 1989. - С. 3-19.

123. Смирнов М.Н. Фитотерапия иммунодефицитных состояний / Смирнов М.Н., Пастушенков B.JI. // под ред. Смирнова B.C., Фрейдлин И.С. СПб.: «Фолиант», 2000. - С. 535-557.

124. Соминина А. А. Этиологическая природа эпидемий гриппа сезона 1996 — 1997 гг. / Соминина А. А., Литвинова О. М., Родионова В. Б. и др. // Тезисы юбилейной науч. конф. «Грипп. XX век». СПб., 1997. - С. 23-33.

125. Сонин П.Ф. Лабораторная'диагностика вирусных болезней у животных: Учебное пособие / Сонин П.Ф. СПб, 2001. - 91с.

126. Сухих Г. Т. Иммунитет и генитальный герпес / Сухих Г. Т., Ванько Л. В., Кулаков В. Н Н. Новгород - М., 1997. - 224 с.

127. Сюрин В.Н. Ветеринарная вирусология / Сюрин В.Н., Белоусова А.В, Фомина H.B. М.: «Агропромиздат», 1986. -266с.

128. Сюрин В.Н. Методы лабораторной диагностики вирусных болезней животных / Сюрин В.Н. Белоусова Р.В., Соловьев Б.В., Фомина H.B. М.: «Агропромиздат», 1986. -352с.

129. Сюрин В.Н. Частная ветеринарная вирусология. Справочная книга / Сюрин В.Н., Фомина Н.В. -М.: «Колос», 1979. -472с.

130. Сюрин В.Н. Вирусные болезни животных / Сюрин В.Н., Самуйленко А.Я., Соловьев Б.В., Фомина Н.В. -М.: ВНИТИБП, 1998. С. 213-293.

131. Сюрин В. Н. Диагностика вирусных болезней животных / Сюрин В. Н., БелоусоваР. В., Фомина Н. В. М.: «Агропромиздат», 1991. С. 28-54.

132. Таточенко В. К. Пневмонии у детей: этиология и лечение / Таточенко В. К. // Лечащий врач. 2002. - № 10. - С. 16.

133. Тулев Ю. В. Применение иммуномодулирующих препаратов при генерализованных воспалительных процессах инфекционного генеза / Тулев Ю.

134. B., Тулева Н. П., Лосев Н. А. и др. // Российский иммунологический журнал. 2008. - том 2 (11). - №2 - 3. - С. 168.

135. Тулева Н. П. Активная иммунотерапия телят, больных гнойно катаральной бронхопневмонией / Тулева Н. П., Тулев Ю. В. // Международный вестник ветеринарии. - 2004. - № 16. - С. 136-137.

136. Тулева Н.П. / Тулева Н.П., Тулев Ю.В. // Тулимкар. Технические условия. (ТУ 9325-00900493362-00). Утверждены Департаментом ветеринарии Минсельхозпрода. 2000. — 25 с.

137. Тулева Н. П. Изучение противовоспалительного действия Тулимкара / Тулева Н. П., Талыбов Р. X. и др. // Матер. 3 Съезда фармак. и токсик. России «Акт. пробл. вет. фарм., токсик. и фармации. Спб., 2011. — С. 445.

138. Тулева Н.П. Применение витулина при лечении телят с начальной стадией бронхопневмонии / Тулева Н.П. и др. // Ветеринария. — 2006. — №12. —1. C. 10-12.

139. Тулева Н. П. Микрофлора матки коров, больных хроническим катарально гнойным эндометритом. / Тулева Н.П., Тулев Ю.В. и др. // Молочное и мясное скотоводство. - 2009. -№5 - С. 29-30.

140. Усаченко А. А. Аэрозолепрофилактика и аэрозолетерапия респираторных болезней телят в СССР / Усаченко А. А., Левченко В. И. М., 1991. -С. 2-7.

141. Урбан В.П. Практикум по эпизоотологии и инфекционным болезням с ветеринарной санитарией / Урбан В.П., Сафин М.А., Сидорчук A.A. и др. -М., 2003.-С. 141-142.

142. Федякина И. Т. Чувствительность вирусов гриппа А/Н5, изолированных от диких птиц на территории России, к арбидолу в культуре клеток MDCK / Федякина И. Т., Ленева И. А., Ямникова С. С. и др. // Вопросы вирусологии. 2005. - № 6. - С. 22-25.

143. Феклисова Л. В. Клинические особенности, профилактика и лечение гриппа у детей / Феклисова Л. В., Шебекова В. М. / Вопросы современной педиатрии. 2003. - Т.2 - № 5. - С. 56-60.

144. Федоров Ю.Н. Иммунокоррекция: применение и механизм действия им-муномодулирующих препаратов / Федоров Ю.Н. // Ветеринария. 2005. -№2. - С.З - 6.

145. Фомина Н.В. Учебное пособие / Фомина Н.В., Белоусова Р.В. и др.. -М.: «Агропромиздат», 1991. -357с.

146. Хаитов Р. М. Вторичные иммунодефицита: клиника, диагностика, лечение / Хаитов Р. М., Пинегин Б. В. // Иммунология. 1999. - №1. -С. 14-17.

147. Хаитов Р. М. Иммунология. Учебная литература, для студентов / Хаитов Р. М., Сидорович И.Г., Игнатьева Г. А. М.: Медицина, 2000. - 429с.

148. Хаитов P.M. Физиология иммунной системы / Хаитов P.M. — М., 2005. — 375с.

149. Хаитов P.M. Экологическая иммунология / Хаитов P.M., Пинегин Б.В., Истамов Х.И. -М.:ВНИРО, 1995. С. 6-41.

150. Шевченко Е. С. Спектр чувствительности к ремантадину вирусов гриппа А, циркулировавших в эпидемических сезонах 2002 2004 гг. / Шевченко Е. С., Бурцева Е. И., Слепушкин А. Н. // Вопросы вирусологии - 2005 - № 5.-С. 32-35.

151. Шульженко А.Е. Галавит в терапии хронической рецидивирующей гер-песвирусной инфекции / Шульженко А.Е., Зуйкова И. Н. // Новые лек. средства. 2003. - №3. - С.23-27.

152. Ямникова С. С. Инфицирование свиней вирусами гриппа А/Н4 и А/Н5, изолированными от диких птиц на территории России / Ямникова С. С., Куриннов Г. В., Ломакина Н. Ф. и др. // Вопросы вирусологии. 2008. — Вып. 6, том 53. - С. 30 - 34.

153. Ярилин A.A. Основы иммунологии. М. / Ярилин A.A. М: Медицина. — 1999.-608с.

154. Ada, G. L. The immune response to influenza infection. / Ada, G. L., Jones, P. D. // Current Topics in Microbiology and Immunology. -1986. -Vbl. 128. -P 1—54.

155. Antuniou К. M. Interferons and their application in the diseases of the lung /Antuniou К. M., Ferdoutsis E. et al. // Chest. 2003. - Vol. 123(1). -P. 209-16.

156. Ashkar A. A. Interleukin-15 and natural killer and NKT cells play a critical role in innate protection against genital herpes simplex virus type 2 infection / Ashkar A. A., Rosenthal K. L. // J. Virol. 2003. - Vol 77. - P. 10168-10171.

157. Barhta A. Viruserkrankungen, des Respirationstraktes der Rinder / Barhta A. // Mh. Vet. Med. 1968. -V. 23. -P. 613.

158. Belshe R. B. Drug resistance and mechanisms of action on Influenza A viruses /Belshe R. В., Hay A. J. //J. Respir. Dis. 1989. - Vol. 10. -P. 952-961.

159. Besser. Т. E. Effect of bovine serum-albumin on passive transfer of immuno-loglobulin Gl to newborn calves / Besser Т. E., Osborn D. // Vet. Immunol, and Immunopathol. 1993. - V. 37. - № 3 - 4. - P. 321-327.

160. Bogel К. Vergleichende Untersuchungen über die Verbreitung des Diarrhoe — Virus und Parainfluenza 3 - Virus bei Rindern in Sudwest - Deutschland / Bogel K. //Berl. Munch. Tierarztl. Wschr. - 1963. -V. 76. -P. 101.

161. Boriskin Y. Arbidol: a broad-spectrum antiviral compound that bloks viral fusion/ Boriskin Y., Leneva I., Pecheur E., Polyak S. // Current Med. Chem.-2008. -№15(10). -P. 997-1005.

162. Brawn I. H. The epidemiology and evolution of influenza viruses in pigs / Brawn I. H. // Vet. Microbiol. 2000. - Vol. 74. - P.29-46.

163. Bright R. A. Incidence of adamantine resistance among influenza A(H3N2) viruses isolated worldwide from 1994 to 2005: a cause to concern / Bright R.

164. A., Medina M., XuX. et al. //Lancet. -2005. -Vol. 366. P. 1175-1181.

165. Bryson D.G. Parainfluenza -3 virus in cattle. In Infectious Diseases of Ruminants, edited by Z. Dinter, B. Morein / Bryson D.G. Amsterdam: Elsevier Scientific Publishers. - 1990. -P.319-333.

166. Capua I. The use of vaccination as an option for the control of avian influenza / Capua I., Marangon S. // Avian Pathol. 2003. - Vol.32. - P. 335-343.

167. Capua I. Development of a DIVA strategy using a vaccine containing a heterologous neuraminidase for the control of avian influenza / Capua I., Terregino C., Cattoli G. et al. / Avian Pathol. -2003: Vol. 32. - P. 47-55.

168. Chen S. H. Synergistic anti-herpes effect of TNF-alpha and IFN-gamma in human corneal epithelial cells compared with that in corneal fibroblasts / Chen S. H., Oakes J. E. et al. //Antiviral Res. 1994. - Vol. 25. -P. 201-213.

169. Choi Y. Studies of H5N1 influenza virus infection of pigs by using viruses isolated in Vietnam and Thailand in 2004 / Choi Y., Ngyen K., Ozaki H. et al. // J. Virol. -2005. Vol. 79. - P. 10821-10825.

170. Conn C.A. Cytokines and the acute phase response to influenza virus in ice / Conn C.A., McClellan J.L. et al. //Am.J.Physiol. 1995. - V.268. - P. 78-84.

171. Dauvergne M. Passive protection of newborn calves against rotavirus by vac-cinacion of their dams / Dauvergne M., Brun A., Soulebot J. P. // Develop. Biol. Stand. 1983. -№ 53. - P. 245-255.

172. Deshpande S. P. Dual role of B cells in mediating innate and acquired immunity to herpes simplex virus infections / Deshpande S. P., Kumaraguru U., Rouse

173. B. T. // Cell. Immunol. 2000. - Vol. 202. - P. 79-87.

174. Duerst R. Innate immunity to herpes simplex virus type 2 / Duerst R. // Viral Immunol. 2003. - Vol. 16, N 4. -P. 475-490.

175. Fanning T. G. 1917 Avian influenza virus sequences suggest that the 1918 pandemic virus Did Nut acquire its hemagglutinin directly from birds / Fanning T. G., Slemons R. D. et al. // J. Virol. 2002. - Vol. 76, N 15. - P.7860-7862.

176. File T. M. The epidemiology of respiratory tract infections / File T. M. // Semin. Respir. Infect. 2000. - Vol. 15. -P. 184-194.

177. Foucher Ron A. M. Characterization of a novel influenza A virus hemagglutinin subtype (HI6) obtained from black- headed gulls / Foucher Ron A. M., Mister Vincent, Wallensten Anders et al. // J. Virol. 2005. - Vol. 79. - № 5. -P. 2814-2822.

178. Frank G.H. Parainfluenza type-3 / A Practitioners Guide, edited by A.E. Castro, W.P. Heuschele: St.Louis: Veterinary Diagnostic Virology. Mosby Yearbook, 1992.-P. 114-116.

179. Frank G.H. Relationship of serum and nasal secretion-neutralizing antibodies in protection of calves against parainfluenza-3 virus / Frank G.H., R.G. Marshal. //Am. J. Vet. Res. 1971. - Vol. 32. -P. 1707-1713.

180. Friedman H. M. Immune evasion properties of herpes simplex virus type 1 glycoprotein gC / Friedman H. M., Wang L., Fishman N. O. et al. // J. Virol. 1996. Vol. 70. - P. 4253-4260.

181. Garbino J. Respiratory Viruses and Severe Lower Respiratory Tract Complications in Hospitalized Patients / Garbino J., Gerbase M. W., Wunderli W. et al. //Chest.-2004.-Vol. 125. — P. 1033-1039.

182. Garry F. B. Comparison of passive immunoglobulin transfer to dairy calves fed colostrums or commercially available colostral supplement products / Garry F. B. et al. // J. Amer. Vet. Med. Assn. - 1996. - Vol. 208. - № l.-P. 107-110.

183. Ghiasi H. The role of natural killer cells in protection, of mice against death and corneal scarring following ocular HSV-1 infection / Ghiasi H., Cai S., Perng G. C. et al. // Antiviral Res. 2000. - Vol. 45. - P. 33-45.

184. Glushkov R.G. Arbidol. Antiviral, Immunostimulant, Interferon inducer / Glushkov R.G. // Drug of the Future. 1992. -№17. -P.1079-1081.

185. Green J.A. Presence of interferon in acute and convalescent-phase sera of humans with influenza or an influenza like illness of undetermined etiology/ Green J.A.? Charette R.P., Yeh T.J. // J.Infect.Dis. 1982. - V.145. -P.837-841.

186. Gresser I. Role of interferon in the pathogenesis of virus diseases in mice as demonstrated by the use of anti-interferon serum / Gresser I., Tovey M.G. et al. //J.Exp.Med. 1976. - Vol. 144. -P. 1305-1315.

187. Gu H. The degradation of promyelocytic leukemia and SplOO proteins by herpes simplex virus 1 is mediated by the ubiquitin-conjugating enzyme UbcH5a / Gu H., Roizman B. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2003. - Vol. 100. -P. 8963-8968.

188. Gui Rong Bai. Evaluation of the ESPLINE INFLUENZA A & B-N Kit for the diagnosis of avian and swine influenza / Gui - Rong Bai, Sacoda Y. et al. // Microb. Immunol. -2005. - Vol. 49, N 12. -P. 1063-1067.

189. Hagglund R. Characterization of the novel E3 ubiquitin ligase encoded in ex-on 3 of herpes simplex virus-1-infected ceil protein 0 / Hagglund R., Roizman B. //Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -2002. Vol. 99: - P. 7889-7894.

190. Hak E. Clinical Signs and Symptoms Predicting Influenza Infection / Hak E., Moons K. G., Verheij T. J., Hoes A. W. // Arch, intern. Med. 2001. - Vol. 125. — P.1351-1352.

191. Hampson A. Report of the second meeting on the development of influenza vaccines that induce broad-spectrum and long-lasting immune responses / Hampson A., Osterhaus A., Pervikov Y. et al. // Vaccine. 2006. - Vol. 24. - P. 4897-4900.

192. Hannant D. Equine influenza / Hannant D., Mumford J.A. // Ed. Studdert M.J. Virus infections of equines. Elsevier: Amsterdam., 1996. -P.285-293.

193. Harris S. L. Glycoprotein C of herpes simplex virus type 1 prevents complement mediated cell lysis and virus neutralization / Harris S. L., Freak I., Yee A. et al. //J. Infect. Dis. 1990. - Vol. 162. - P. 331-337.

194. Hay A. Amantadine and Rimantadine-Mechanisms / D. Richman (ed), John Willey and Sons Ltd. //Antiviral Drug Resistance. UK, 1996. - P. 44-58.

195. Hayden F.G. Local and systemic cytokine responses during experimental human influenza A virus infection. Relation to symptom formation and host defense /Hayden F.G. et al. //J.Clin.Invest. 1998. - V.101. -No.3.-P643-649.

196. Hayden F. Transmission of avian influenza viruses to and between Humans / Hayden F., Croisier.A. //J. Infect Dis. -2005. -V. 192. -P. 1311-4.

197. Hennet T. A kineteic study of immune mediators in the lungs of mice infected with influenza A virus / Hennet T., Ziltener H J. et al. // J.Immunol. 1992. -V.149. -N.3. -P.932-939.

198. Homan E.J. Futher studies of naturally occurring latent bovine herpesvirus infection / Homan E.J., Easterday B.C. // Am. J. Vet. Res. 1981. - Vol. 42 -№10.-P. 1811-1813.

199. Ito Toshihiro. Generation of a highly pathogenic avian influenza A" virus from an avirulent field isolate by passaging in chickens / Ito Toshihiro, Goto Hideo, Yamamoto Eiji et al. // J. Virol. 2001. - Vol. 75, N 9. - P. 4439-4443.

200. Karasin A. I. Isolation and characterization of H4H6 avian influenza viruses from pigs with pneumonia in Canada / -Karasin A. I., Brawn I. H., Carman S., Olsen C. W. // J. Virol. 2000. - Vol. 74. - № 19. - P. 9322-9327.

201. Kilbourne E.D. Influenza / E.D. Kilbourne // New York; London: Plenum Medicine Book Company, 1987. 359 pp.

202. Klotzbucher A. Different effects of IFN gamma and IFN alpha/beta on "immediate early" gene expression of HSV-1 / Klotzbucher A., Mittnacht S., Kir-chnerH. et al. //Virology. 1990. - Vol. 179. - P. 487-491.

203. Leneva I. The neuraminidase inhibitor GS4104 (oseltamivir phosphate) is efficacious against A/Hong Kong/156/97 (H5NI) and A/Hong Kong/1074/99

204. H9N2) influenza virus / Leneva I., Roberts N, Govorkova E. et al. I I Antiviral Res.-2000. -Vol. 48 № 2. — R 101-115.

205. Leneva I. The mechanism of action of arbidol against influenza virus-selection and characterization of arbidol-resistant mutants / Leneva I., Hay A. // 12-th International Congress of Virology. Paris, 2002. -Abstr. 1077.

206. Losinger W. C. Management variables associated wich high mortality rates attributally to respiratory tract problems in female calves prior to weaning / Losinger W. C., Heinrichs A. J. // J. Amer. Vet. Med. Assn. 1996. - V. 209. - № 10.-P. 1756-1759.

207. Lubinski J. In vivo role of complement-interacting domains of herpes simplex virus type 1 glycoprotein gC / Lubinski J, Wang L., Mastellos D. et al. // J. Exp. Med.-1999.-Vol. 190.-P. 1637-1646.

208. Lvov D. K. Isolation of influenza viruses from atypical situations / Lvov D. K., Yamnikova S. S., Petrov N. A. // Option for the control of influenza II Eds C. Hannon et al. 1993. - P. 208-216.

209. Manickan E. Roles of different T-ceil subsets in control of herpes simplex virus infection determined by using T-ceil-deficient mouse models / Manickan E., Rouse B. T. //J. Virol. 1995. - Vol. 69. - P. 8178-8179.

210. Marozin S. Antigenic and genetic diversity among swine influenza A H1N1 and H1N2 viruses in Europe / Marozin S., Gregory V., Cameron K. et al. // J. Gen. Virol. 2002. - Vol.88. -P. 107-114.

211. Mc. Geech D. J. Alphaherpesviruses process a gene homologous to the protein kinase gene family of eukaryotes and retroviruses / Mc. Geech D. J., Davidson A. J. //Nucleic Acids Pes. 1986. - Vol. 14. - P. 1765-1777.

212. McLaren C. The relationship between interferon and virus virulence in influenza virus infections of the mouse / McLaren C., Potter W.C. // J.Med.Microbiol. 1973. - Vol.6. - P. 21.

213. Mossman K. L. Herpes simplex virus ICP0 mutants are hypersensitive to interferon / Mossman K. L., Safifran H. A., Smiley J.R. // J. Virol. 2000. - Vol. 74.-P. 2052-2056.

214. Nakazawa H. Viral respiratory infection causes airway hyperresponsivenes and decreases histamine N methyltransferase activity in guinea pigs / Nakazawa H., Lekizawa K. et al. //Am. J. Respir. Crit. Care. Med. - 1994. -V. 149. -P. 1180-1185.

215. Narita M. The Bglll-N fragment of herpes simplex virus type 2 contains a region responsible for resistance to antiviral effects of interferon / Narita M., Ando Y., Soushi S. et al. // J. Gen. Virol. 1998. - 'Vol,79. - P. 565-572.

216. Nicolson K.G. Influenza / Nicolson K.G., Wood J.M., Zambon M. // Lancet. -2003.-Vol. 362.-P. 1733-1745.

217. Noah T. L. Nasal cytokine production in viral acute respiratory infection of childhood / Noah T. L., Hendrson F. W. et al. // J. Infect. Dis. 1995. - V. 171. -P. 584-592.

218. O'Donnel D. R. Anaphylactic sensitization to acroantigen during respiratory virus infection / O'Donnel D. R., Openshaw P. J. M. // Clin. Exp. Allegory. -1998.-V. 57.-P. 214-219.

219. Park M. Engineered viral vaccine constructs with dual specificity: avian influenza and Newcastle disease / Park M., Steel J. et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -2006. Vol 103. - P. 8203-8208.

220. Peiris J. S. M. Cocirculation of Avian H9N2 and contemporary "Human" H3N2 influenza A viruses in pigs in Southeastern China: potential for genetic reassortment? / Peiris J. S. M., Guan Y. et al. // J. Virol. 2001. - Vol. 75. - № 20-P. 9679-9686.

221. Phillippo M. The effects of selenium housing and management on the incidence of pneumonia in housed calves / Phillippo M., Arthur J. R et al. // Vet. Res. 1987. -V. 121. -№ 22. - P. 509-512.

222. Proud D. Kinins are generated in nasal secretion during natural rhinovirus colds / Proud D., Naclerio R. M. et al. // J. Infect. Dis. 1990. - V. 161. - P. 120-123.

223. QuanF. Virus-like particle vaccine induces protective immunity against homologous and heterologous strains of influenza virus / Quan F., Huang C., Compans R. Et al. // J. Virol. 2007. - Vol. 81. - P. 3514-3524.

224. Reed L.J. A simple method of estimating fifty percent'endpoints / Reed L.J., MuenchH. //Am. J.Hyg. 1938. - Vol.27. - P. 493-497.

225. Rotermund H. Erfarunge bei der Bekampfung der Pneumonie in einer Kalberaufzuchtanlage / Rotermund H. // Mh. Vet. Med. 1988. - V. 43.- P. 469-470.

226. Salio M. Inhibition of dendritic cell maturation by herpes simplex virus / Salio M., Cella M. et al. // Eur. J. Immunol. 1999. - Vol. 29. - P. 3245-3253.

227. Shi L. Antiviral activity of arbidol against influenza A virus, respiratory syncytial virus, rhinovirus, coxsackie virus and adenovirus in vitro and in vivo/ Shi L., Xiong H. et al. //Arch Virol. 2007. - Vol. 152(8) - P. 1447-55.

228. Schalk J. Preclinical safety studies on DNA vaccines / Schalk J., Mooi F., Berbers G. et al. //Hum. Vaccines. 2006. - Vol. 2. - P. 45-53.

229. Schwarze J. Respiratory syncytial virus results in airway hiperresponsivenesss and anhanced airway sensation to allergen / Schwarze J., Hamelmann E. et al. // J. Clin. Invest. 1997. -V. 100. - P. 226-233.

230. Sit M.F. Effect of macrophage activation on resistance of mouse peritoneal macrophages to infection with herpes simplex virus types 1 and 2 / Sit M.F., Tenney D. J. et ai. //J. Gen. Virol. 1988. - Vol. 69. - P. 1999-2010.

231. Smorodintsev A.A. Investigation on volunteers infected with the influenza virus. / Smorodintsev A. A., Tushinsky M.D. et al. //Amer. J. Med. Sci. 1937. -Vol.194.-P.159-170.

232. Stohr K. Preventing and treating influenza / Stohr K. // BMJ. 2003. -Vol.326.-P. 1223-1224.

233. Suarez D. L. Isolation from turkey breeder heris of a reassortant H1N2 influenza viruswith swine, human- and avian lineage genes / Suarez D. L., Wool-cock P. R. et al. //Avian Dis. -2002. Vol. 46. -№ 1. - P. 111-121.

234. Subbaro K. Characterization of an avian influenza A (H5NI) virus isolated from a child with a fatal respiratory illness / Subbaro K., Klimov A., Katz J. et. al. // Science. 1993. - Vol. 279. - P. 393-396.

235. Swayne D. Principles for 2006 vaccine protection in chickens and domestic waterfowl against avian influenza: emphasis on Asian H5N1 high pathogenicity avian influenza / Swayne D. // Ann. N. Y. Acad. Sci. 2006. - Vol.1081. - P. 174-181.

236. Sylte M. Influenza neuraminidase antibodies provide partial protection for chickens against high pathogenic avian influenza infection / Sylte M., Hubby B., Suarez D. // Vaccine. 2007. - Vol. 25. - P. 3763-3772.

237. Todor L. Treatment of calf pneumonia with tilmicosin / Todor L., Vagra J., Gallowitsch F. //Acta veter. hung. 1993. - V. 41. - № 1 - 2. - P. 41-49.

238. Van der Berg T. Influenza vaccines and vaccination strategies in birds / van der Berg T., Lambrecht B., Marche S. et al. // Comp. Immunol. Microbiol. Infect. Dis. -2008. Vol.31. - P. 121-165.

239. Van Drunen Little van den Hurk S. Bovine herpesvirus — 1 / Van Drunen Little - van den Hurk S., Tikoo S. K., Liang X. et al. // Immunol. And Cell Biol. - 1993. - Vol. 71. -P. 405-420.

240. Van Reeth K. Avian and swine viruses: our understanding of zoonotick risk / Van Reeth K. // Vet. Res. 2007. - Vol. 38. -P 243-260.

241. Van Reeth K. Influenza in birds, pigs and human: old theories versus current viewpoint / Van Reeth K. et al. // Proceedings of 19-th IPVS Congress, Copen-hahen, Denmark. 2006. - Vol. 1. - P. 26-35.

242. Van Reeth K. Efficacy of vaccination of pigs with different H1NI swine influenza viruses using a recent challenge strain and different parameters of protection / Van Reeth K., Labarque G., Pensaert M. // Vaccine. 2001. - Vol. 19. P. 4479-4486.

243. Veits J. Newcactle disease virus expressing H5 hemagglutinin gene protects chickens against Newcactle disease and avian influenza / Veits J., Wiesner D. et al. //Proc. Natl. Acad. Sci. Usa. 2006. - Vol. 103. - P. 8197-9202.

244. Webster R. G. Evolution and ecology of influenza A viruses / Webster R. G., Bean W. J. et al. //Microbiol Rev. 1992. - Vol. 56, № 1. - P. 152-179.

245. Wittum T. E. Passive immune status of postpartum hour 24 and long term health and perfomans of calves / Wittum T. E., Perino L. J. // Am. J. Vet. Res. 1995. - Vol. 56. -№ 9. -P. 1149-1154.

246. WHO Global Influenza Programme. WHO Manualon animal influenza diagnosis and surveillance //WHO/CDS/NCS. -2002. -№ 5. -P. 19-62.

247. Wyde PR. Interferon production by leukocytes infiltrating the lungs of mice during primary influenza virus, infection / Wyde P.R., Wilson M.R. // In-fec.Immun. 1982. - Vol. 38. - P. 1249.

248. Yasin B. Evaluation of the inactivation of infectious herpes simplex virus of host-defense peptides / Yasin B., Pang M., Turner J. S.5 Cho Y., Dinh N. N., Waring A. J. et al. // Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 2000. - Vol. 19. - P. 187-194.

249. Zambon M. C. Epidemiology and pathogenesis of influenza / Zambon M. C.• // J. Antimicr. Chemother. 1999. - Vol. 44. - P. 3-9.

250. Zinkernagel R. On natural and artificial vaccinations / Zinkernagel R. //Annu. Rev. Immunol. 2003. - Vol. 21. -P. 516-546.

Информация о работе

Левковская, Мария Николаевна
кандидата ветеринарных наук
Санкт-Петербург, 2011
ВАК 06.02.02

Диссертация

Противовирусное действие Витулина и Тулимкара в опытах in vitro и in vivo - тема диссертации по сельскому хозяйству, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы