Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Применение ронколейкина с целью коррекции иммунного статуса собак при кожных заболеваниях

ВАК РФ 03.01.06, Биотехнология (в том числе бионанотехнологии)

Автореферат диссертации по теме "Применение ронколейкина с целью коррекции иммунного статуса собак при кожных заболеваниях"

На правах рукописи

Масимов Эдуард Нусратович

ПРИМЕНЕНИЕ РОНКОЛЕЙКИНА С ЦЕЛЬЮ КОРРЕКЦИИ ИММУННОГО СТАТУСА СОБАК ПРИ КОЖНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ

03.01.06 - биотехнология (в том числе бионанотехнологии)

06.02.02 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискания ученой степени кандидата биологических

наук

1 О НОЯ 2011

Щелково-2011

005001320

На правах рукописи

Маснмов Эдуард Нусратовнч

ПРИМЕНЕНИЕ РОИКОЛЕЙКИНА С ЦЕЛЬЮ КОРРЕКЦИИ ИММУННОГО СТАТУСА СОБАК ПРИ КОЖНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ

03.01.06 - биотехнология (в том числе бионанотехнологни)

06.02.02 - петеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотокснкологией и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискания ученой степени кандидата биологических

наук

Щелково - 2011

Работа выполнена в отделе иммунологии Всероссийского исследовательского и технологического института биологической промышленности Российской академии сельскохозяйственных наук

Научный руководитель: доктор биологических наук

Матвеева Ирина Николаевна

Научный консультант:

Официальные оппонепты:

Ведущая организация:

доктор биологических наук Сургучева Лилия Михайловна

доктор биологических наук Скотникова Татьяна Анатольевна;

Заслуженный деятель науки РФ, доктор ветеринарных наук, профессор

Гаврилов ВладимнрАндреевнч

Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины

Защита состоится 25 ноября 2011 года в 10 часов на заседании диссертационного совета Д 006.069.01 при ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности» РАСХН по адресу: 141142, Московская область, Щелковский район, п/о Кашинцево, пос. Биокомбината, д. 17, ВНИТИБП.

E-mail: vnitbp@mail.ru

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности» Россельхозакадемии.

Автореферат разослан 24 октября 2011 года.

Ученый секретарь диссертационного совета,

кандидат биологических наук Ю.Д.Фролов

1 .ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность темы. Несмотря на интенсивное развитие ветеринарной медицины мелких домашних животных, кожная патология собак остается самой распространенной и сложной в диагностике проблемой. По данным многих исследователей (М.Ю.Лопатина (2004), С.И.Лебедько (2004), Н.И.Левяшова (2009), Т.В.Новикова и др.(2010), J.S.Mason (1998), D.N.Carlotti (2003) в настоящие время более 25% случаев обращений владельцев собак к ветеринарным специалистам связано с заболеванием кожи и ее состояние во многих случаях является показателем общего здоровья животного.

Кожа обеспечивает барьерную функцию, препятствует потери воды, электролитов и механически защищает организм животного от неблагоприятных воздействий окружающей среды. Кроме того, кожный покров отвечает за температурную регуляцию, синтез и накопление витамина D, жиров, углеводов и белков. Поверхность кожи обладает антибактериальными и противогрибковыми свойствами. Причинами заболеваний кожного покрова собак могут быть различные травмы, бактерии, грибки, вирусы и эктопаразиты. Анализ многочисленных литературных источников свидетельствует о важной роли иммунологических нарушений в механизмах возникновения и развития кожных патологий у животных (Ю.Н.Федоров (2000), И.М. Донник (2000), Н.В.Монов (2002), В.А.Черешнев и др. (2003), Ю.Н.Федоров (2008), М.Ю.Лопатина (2004) и др.).

По мнению С.А.Griffin, K.W.Kwochka (1993), Е.С. Кузнецовой и др.(2002) многие кожные болезни вызываются банальной микрофлорой (бактериями и грибками), которые являются постоянными обитателями кожи, а их повышенная колонизация приводит к хронизации инфекционного процесса, что связано с иммунодефицитным состоянием организма. Аналогические данные изложены в научных статьях И.П.Вершинина и др. (2003), Ю.Н.Федоров (2000), М.А.Медведева (2003) и др. Авторы указывают,

з

что демодекоз собак относится к наиболее часто встречаемым и трудно поддающимся лечению заболеваниям, так как инвазионный процесс всегда сопровождается иммунологической недостаточностью организма.

Детальное изучение иммунологических показателей собак, страдающими различными кожными патологиями, позволяет ввести коррекцию в стратегию лечения с помощью иммуномодулирующих препаратов. С начала XXI века в ветеринарной практике успешно применяются цитокины и интерлейкины при различных патологиях сельскохозяйственных и мелких домашних животных. Одним из производных цитокина и интерл^кина является ронколейкин. В доступной литературе мы не нашли применения данного препарата при кожных патологиях животных.

Приведенные выше обстоятельства и определили актуальность и направления настоящей работы.

Цели и задачи исследований. Целью исследований являлось изучение гематологических и иммунологических показателей при кожных болезнях различного генеза и определение эффективности ронколейкина для коррекции иммунного статуса животных. Для реализации указанной цели были поставлены следующие задачи:

1. Определить клинический, гематологический и иммунный статус у собак различного возраста и породы, при кожных патологиях различного генеза. '

2. Определить диагностический алгоритм кожных болезней и их место в структуре патологии у собак.

3. Изучить динамику гематологических и иммунологических показателей больных собак при применении ронколейкина в качестве иммуностимулирующего средства.

4. Определить терапевтическую эффективность ронколейкина при заболеваниях кожи различного генеза у собак.

5. Разработать рекомендации по коррекции иммунного статуса у собак с заболеваниями кожи различного генеза.

Научная новизна. В результате проведенной работы:

- комплексно изучены этиопатогенетнческие аспекты кожных патологий собак, обусловленных бактериями, патогенными грибами и клещами рода Оетос1ех;

- определены параметры гематологических и иммунологических показателей собак при гшодермиях, дематофитозах и демодекозах;

- установлено, что болезни кожи собак различного генеза всегда сопровождаются значительными изменениями в морфологическом, биохимическом и иммунологическом составе крови и сыворотки крови;

- впервые на основе клинических, бактериологических, микологичеких, арахнологичеких, гематологических и иммунологических исследований обоснована целесообразность применения препарата ронколейкина в комплексе терапии собак при пиодермнях, дерматофитозах и демодекозах для коррекции иммунного статуса организма.

Практическая значимость работы. Результаты гематологических и иммунологических исследований используются при диагностике и оказании лечебной помощи больным с кожной патологией собак.

Применение ронколейкина у собак с кожными заболеваниями различного генеза, сопровождающимися вторичными иммунодефицитными состояниями, повышает эффективность терапии и значительно сокращает сроки выздоровления.

Результаты исследований используются в учебном процессе при чтении лекций и проведения практических занятий на кафедрах эпизоотологии и инфекционных болезней и паразитологии и инвазионных болезней животных для студентов факультета ветеринарной медицины и ветеринарным врачам клиник на факультете повышения квалификации в МГАВМиБ.

Разработаны методические положения по определению иммунного статуса животных, утверждены академик-секретарем отделения ветеринарной медицины РЛСХН 01.06.2011г.

Разработаны «Методические рекомендации по применению препарата в комплексной терапии собак при кожных патологиях. Рекомендации утверждены директором ВНИТИПБ 27 сентября 2011г.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Клинический, иммунологический и гематологический статус собак, при кожных патологиях различного генеза.

2. Динамика гематологических и иммунологических показателей больных собак при применении ронколейкина в качестве иммунокорректирующего средства.

3. Терапевтическая эффективность ронколейкина при заболеваниях кожи собак различного генеза.

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы

отражены в итоговых отчетах ГНУ ВНИИТБП за 2010-2011гг. Материалы доложены и обсуждены на заседаниях ученного совета ГНУ ВНИИТБП (2010-2011гг), а также на конференции «Актуальные вопросы ветеринарной медицины домашних животных», посвященной 100-летию со дня рождения бывшего ректора Казанской академии ветеринарной медицины профессора Х.Г.Гизатуллина, 26 ноября 2010г. (Казань,2010), на Межрегиональной научно-практической конференции «Актуальные проблемы ветеринарии и животноводства», Самара, 2010, на Международной научно-практической конференции «Задачи ветеринарной науки в реализации докторины продовольственной безопасности Российской Федерации» 16-17марта 2011г. (Покров,2011г.), на конференции молодых ученых Московской государственной академии ветеринарной медицины и биотехнологии (27апреля 2011г.) г. Москва.

Публикации результатов исследований. По материалам диссертации в трудах, сборниках и материалах научной конференции опубликовано 6 печатных работ, в том числе 2 в журналах, рекомендованных ВАК РФ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 146 страницах машинописного текста и включает: Общая характеристика работы, обзор литературы, собственные исследования, обсуждения полученных результатов, выводы, практические предложения, список используемой литературы, включающего 169 источников, в том числе 75 иностранных, приложения. Работа иллюстрирована 27таблицамн и 8 рисунками.

2. Собственные исследования 2.1. Материалы и методы

Диссертационная работа выполнена в период 2009-2011 годы в отделе иммунологии Всероссийского научно-исследовательского и технологического института биологической промышленности Российской академии сельскохозяйственных наук.

Для выполнения поставленных задач были выбраны клинические, бактериологические, микологические, арахнологические, гематологические и иммунологические методы исследования.

Особое внимание уделяли наличию признаков зуда, его интенсивность, время появления и характер экссудатов, наличие местной температуры. Всего клинически обследовано 2785 собак различных пород и возраста.

Бактериологическому исследованию подвергнут патологический материал от 328 собак, имевших характерные клинические признаки пиодермии. С целью подтверждения дерматофитозов при помощи люминесцентных ламп ПРК-4 и ОЛД-41 подвергнуты исследованиям 246 проб волос и корочек, взятых с мест поражений. Арахнологическим исследованиям подвергались 246 соскобов из пораженных участков кожи. Гематологически исследовано 286 проб крови, взятых от больных собак в начале болезни, в период курса лечения и по выздоровлению.

Определение иммуноглобулинов в сыворотке крови проводили методом осаждения сульфатом цинка (В.М.Холод, Г.Ф.Ермолаев, 1988). Бактерицидную активность сыворотки крови определяли фотоэлектроколориметирическим методом по Смирновой О.В., Кузьминой Т.А. (1979). Лизоцимную активность сыворотки крови определяли фотоэлектроколориметрическим методом по Дорофейгуку А.Г. (1968).Циркулирующие иммунные комплексы определяли методом преципитации с 3,5% раствором полиэтиленгликоля. Определение фагоцитарной активности гранулоцитов исследовали методом Колабской Л.С. (1987), с использованием агаровой тест-культуры Staphilococcus aureus и с использованием краски Романовского-Гимза.

Эффективность ронколейкина изучали в комплексе терапии собак, имевших клинические признаки кожных поражений. Препарат назначался в дозировке 10 тыс. МЕ/кг, для подкожного введения, через каждые сутки, в количестве 3-х инъекций. Помимо ронколейкина были применены средства лечения собак, различных кожных патологий.

Полученные цифровые данные подвергали статистической обработке с использованием стандартных прикладных программ, определяли средние величины (М) и критерий достоверности Стьюдента (И.П.Ашмарин, А.А.Воробьев, 1963).

2.2. Результаты бактериологических и клинических исследований собак

при пиодермиях

Болезни кожи, вызываемые бактериями, принято называть пиодермиями. С целью определения видового состава бактерий с пораженных участков кожи собак брали биологический материал (корочки экссудата, волосы) и отправляли в ветеринарную лабораторию. Всего бактериологически исследовано 328 проб соскобов из пораженных участков кожи. Результаты исследований приведены в таблице 1, из которой видно, что 63% случаев были выделены Staphilococcus aureus, в 34%-

8

St.saprophyticus, в 19%- Streptococcus pyogenes, в 16%- Echerichia coli,в 15% -Pseudomonas aeruginosa и в 9% случаев Proteus Vulgaris.TaKiiM образом, из патологического материала изолировались различные бактерии (стафилококки, стрептококки, кишечная палочка, синегнойная палочка, протей) во всех случаях в различных ассоциациях.

Таблица 1.

Результаты бактериологических исследований при пиодермитах собак.

Ж» я/и Породы собак Колич.исспед.проб Виды выделенных бактерий (%от исследованных проб)

1. Немецкая овчарка 64 l.Staphiloccocus

2. Ротвейлер 23 auteus-63%

3. Такса (жесткошерстая) 14 2.St.epidermaticus-

4. Американский 20 34%

стаффордшийский 3 .St. saprophyticus-

5. терьер 40 27%

б. Пудель (малый) 11 4.Streptococcus

7. Дог (немецкий) 7 puogenes- 19%

8. Пекинес 8 5. Echerichia coli-16%

9. Шарлей 57 6.Pseudomonas

Собаки других пород и aeruginosa-15%

беспородные 7.Proteus vulgaris-9%

Результаты проведенных исследований показали, что поверхностные и

глубокие пиодермии кожного покрова собак имеют широкое распространение, в развитии их этиопатогенеза участвуют различные микроорганизмы, в том числе патогенные стафилококки, а так же факторы внешней и внутренней среды.

Пиодермию можно классифицировать в соответствии с клинической картиной и глубиной поражения дермы. В зависимости от этого при клиническом обследовании больных собак различали поверхностную, неглубокую и глубокую пиодермию.

У собак до одного года в основном регистрировали поверхностную пиодермию, для которой характерными признаками являлись поражения верхних слоев эгшдермальной ткани и, как следствие, неглубокие эрозии,

напластования грануляции, небольшие экссудативные процессы и периодический зуд. Пораженные области часто были болезненными. Различали две разновидности неглубокой пиодермии. У щенков наблюдали быстро развивающиеся поражения кожи в области паха, подгрудка, шеи и хвоста. В литературе такая пиодермия получила название «влажная экзема» или «мокнущий дерматит» или «летная экзема», так как ее проявлению способствовала жаркая и влажная погода. Нередко к подобной пиодермии приводили небольшие травмы кожи и аллергия к блохам.

Генерализованная форма глубокой пиодермии была установлена у 17 собак старше 7 лет. При этом заболевание кожи сопровождалось фурункулезом, изъязвлением, увеличением региональных лимфатических узлов, обильным экссудативным процессов, интенсивным зудом и расчесами.

2.3.Результаты микологических и клинических исследований собак при дерматофитозах

При анализе статистических данных и собственных наблюдений установлено, что у более 20% собак различных пород и возрастных групп с кожной патологией регистрируются поверхностные микозы, основными возбудителями которых являются Microsporum canis и Trichopyton mentagrophytes.

Всего микологическим исследованиям подвергались 557 собак и 183 пробы волос с корочками, взятых с пораженным участков кожи (таблица 2).

Таблица 2.

Результаты люминесцентного метода исследований.

Объект исследования Beer о Обнаружено свечение Не обнаружено свечение

Всего % Всего %

Собаки, пораженные участки кожи 557 226 40,8 331 59,2

Патматериал из пораженных участков кожи 183 64 35,0 119 65,0

Всего 740 280 37,8 440 62,2

При положительном результате люминесцентного метода исследований исследования обнаружено ярко зеленоватое, точечное отсвечивание, что составило более 40% от 557 исследованных животных. Из 183 проб волос с корочками такое отсвечивание обнаружено в 64 случаях (35%).

Клинические признаки трихофитии больных собак характеризовались в основном образованием толстых корочек в области полости шей, головы, конечностей. Наблюдалось преимущественно фолликулярная форма, с резко выраженной воспалительной реакцией, экссудативными проявлениями. При микроспорозе поверхностная форма болезни характеризовалась обламыванием и выпадением волос, образованием безволосых и шелушащих пятен округлой формы.

Таким образом, как видно из вышеприведенных данных дерматомикозы занимают важное место в кожной патологии собак. Нужно отметить, что так называемый «стригущий лишай», как зооантропоноз, представляет серьезную опасность для людей.

2.4. Результаты арахнологических исследований собак, имевших признаки пора-,копия кожного покрова

В последние годы в ветеринарной медицине специалистами все чаще

приходится сталкиваться с проблемами кожной патологии собак, вызванными эктопаразитами - клещами, блохами, власоедами и вшами. Наиболее часто встречаемыми заболеваниями по нашим наблюдениям является демодекоз, вызываемый подкожными клещом Demodex canis. При клиническом осмотре и микроскопии соскобов из пораженных участков кожи 65 случаев из 273 исследованных собак был установлен диагноз демодекоз (таблица 3). При клиническом осмотре у больных собак в основном отмечали локализованную форму демодекоза. Вначале болезни наблюдали аллопецию, шелушения кожи, зуд в области пораженных участков. Затем образовывались облысевшие участки кожи, покрытые мелкими чешуйками ороговевшего эпидермиса серого цвета, которые легко

снимаются пинцетом. В дальнейшем на месте пораженных участков появлялись папулы - сыпь, в виде возвышенного на коже безполостного образования.

Таблица 3.

Результаты микроскопии соскобов различных пород собак на демодекоз

№ Породы собак Количество исследованных Обнаружено %

п/п проб Оетос1ех сатэ

1 Английский бульдог 19 7 2,6

2 Бассет 14 3 1,1

3 Боксер 26 11 4,0

4 Колли 6 1 0,4

5 Мастино 9 3 1Д

6 Мопс 4 1 0,4

7 Немецкий дог 7 2 0,8

8 Немецкая 77 14 5,1

овчарка

9 Такса 28 4 1,4

10 Сеттер 15 3 1,1

11 Беспородные собаки 68 16 8,5

Всего 273 65 23,8

У 4 собак из 65 больных демодекозом нами установлена генерализованная форма болезни. При этом отмечали эрозийно-язвенные поражения кожи с участками, покрытыми грязно-желтыми струпьями, появлениями сильного зуда и аллопеции.

2.5. Результаты гематологических и иммунологических исследовании собак при пиодермиях

Для проведения гематологических и иммунологических исследований

нами были отобраны 25 собак с поверхностной и 17 собак с глубокой пиодермией. Морфологические показатели крови собак при поверхностной и глубокой пиодермиях приведены в таблице 4. Установлено, что у собак с поверхностными и глубокими пиодермиями количество эритроцитов

12

уменьшалось на 1 и 1,5 млн/мкл соответственно, по сравнению с показателями клинически здоровых собак. Отмечается также снижение гемоглобина более чем на 15% по сравнению со значением данного показателя у клинически здоровых животных (140,9 г/л).

Таблица 4.

Морфологические показатели крови собак при поверхностных п __глубоких пиодермиях_

№ п/п Показатели Единицы измерения Клинически здоровые собаки Пиодермии

Поверхностная Глубокая

1 Эритроциты млк/мкл 6,55±0,19 5,45±0,24 5,06±0,1

2 Гемоглобин г/л 140,9±3,37 104,69 102,0±0,18

3 Лейкоциты тыс/мкл 8,70±0,20 8,03±0,88 7,43±0,64

4 Эозинофилы % 5,92±0,46 4,24±0,7 4,15±0,49

5 Базофилы % 0 0 0

6 Нейтрофилы п/я % 2,55±0,48 4,16±0,07 5,05±0,51

7 Нейтрофилы с/я % 55,61±0,18 62,18±0,2 66,3±0,25

8 Моноциты % 3,36±0,18 3,37±0,4 4,04±0,11

9 Лимфоциты % 30,06±0,58 21,4±0,63 20,09±0,13

У больных собак уменьшилось общее количество лейкоцитов на 5 и 14% соответственно при поверхностной и глубокой пиодермиях. В лейкоцитарной формуле отмечено уменьшение количества эозинофилов - 4,24 при поверхностной и 4,15 при глубокой пиодермиях. Относительно резкие изменения претерпевают процентное соотношение сегментоядерных нептрофилов п лимфоцитов. Если количество первых увеличилось на 1012%, то вторых уменьшилось настолько же, что характерно для острых воспалительных процессов.

Результаты иммунологического анализа крови собак, больных поверхностной и глубокой пиодермиях приведены в таблице 5, из которой видно что, почти все иммунологические показатели крови снижаются. Так, уровень ^А снизилась при поверхностной пиодермии до 1,2 г/л, а при глубоких составляла 1,3, при норме 2,4г/л, а уровень - 6,0г/л при

поверхностной и 5,7г/л при глубокой пиодермии, при норме 6,2 соответственно.

Таблица 5.

Иммунологические показатели крови собак при поверхностной и _глубокой пиодермиях_

№ п/ п Показатели Ед. измерени я Клиническ и здоровые собаки Пиодермии

Поверхностная Глубокая

1 1йА г/л 2,4±0,11 1,2±0,18 1,3±0,42

2 1ВМ г/л 0,96±0,14 1,1 ±0,24 0,86±0,54

3 1йО г/л 6,2±0,98 6,0±0,91 5,7±0,72

4 Лизоцимная активность % 11 ±0,92 10±2,25 9±1,26

5 Бактериальная активность % лизиса Е.соН 66,4±0,56 46,4±0,56 46,6±0,44

6 Циркулирующие иммунные компоненты у.е. 22,4±1,2 18±0,62 18,2±0,66

7 Фагоцитарная активность % 28,8±2,6 26,4± 1,12 23,4±0,66

8 Фагоцитарное число у.е 1,47±0,14 1,22±0,42 1,12±0,35

9 Фагоцитарный индекс у.е 4,86±0,6 3,5±0,3 3,4±0,08

Снизились также такие важные показатели иммунного статуса организма лизоцимная, бактериальная и фагоцитарная активности крови, примерна на 10 и 20 % при поверхностной и глубоких пиодермиях соответственно.

Таким образом, обобщая полученные нами результатов, иммунологических показателей, можно заключить , что у собак больных поверхностной и особенно глубокой пиодермией имеет место иммунодефицитное состояние.

2.6. Результаты гематологический и иммунологических исследований при дирматомпкозлх

Для проведения гематологических н иммунологических исследований

нами были отобраны 33 собак с установленными диагнозам микроспория (23 головы) и трихофития (10 голов). Возраст собак колебались от 1 до 3 лет.

Морфологическая картина крови собак при дерматомикозах резким изменениям не подвергается, за исключением уменьшения количества лимфоцитов на 7,3%, что предполагает иммунодсфицитнос состояние организма. Значимым фактором является увеличение количества нейтрофилов Результаты иммунологических исследований проб крови собак, больных дерматомикозами представлены в таблице 6. При анализе данных таблицы статистически достоверных разниц между иммунологическими показателями крови собак, больных трихофитией и микроспорией и клинически здоровыми животными ис установлены, что предполагает иммунносупрсссивнос состояние организма.

Таблица 6

Иммунологические показатели крови собак при микроспории и

Показатели Ед. измерсни я Клинически здоровые собаки Дсрматомикозы

Микросп ория Трихоф ития

1йА г/л 2,4±0,11 2,6±0,14 2,3±0,42

г/л 0,96±0,14 0,89±0,12 0,91±0,6 3

1вО г/л 6,2±0,98 5,1±0,66 6,4±0,14

Лизоцимная активность % II ±0,92 14,3±0,37 11,6±0,1 2

Бактериальная активность % лизиса Е.соП 66,4±0,56 67,09±0,3 6 64,2±0,4 4

Циркулирующие иммунные компоненты у.е. 22,4±1,2 20,15±0,4 3 21,9±0,8 3

Фагоцитарная активность % 28,8±2,6 32,8±4,89 32,3±1,2

Фагоцитарное число у.е 1,47±0,14 1,56±0,33 2,1 ±0,4

Фагоцитарный индекс у.е 4,86±0,6 4,87 4,66±0,3

2.7. Результаты иммунологических исследовании при демодекозе собак

У больных локализованном формой демодекоза уровень ^О 33,73 мг/мл,

что на 1,08% больше, а при генерализованной форме составляет 25,0 мг/мл, что на 8% ниже чем показателей клинически здоровых животных.

Средний уровень 1§М при локализованной форме демодекоза на 7% ниже, а при генерализованной форме 6,8%. Уровень ^А была ниже на 5,68% при локализованной форме н на 26,4 при генерализованной форме демодекоза. Таким образом при генерализованной форме демодекоза у собак происходит нарушение нммунорегуляторных механизмов, приводящих к развитию селективной иммуносупрессии, обуславливающей низкий уровень ^М и ^А в сыворотке крови. В тоже время, повышение концентрации напрямую связано с гуморальным иммунным ответом организма на воздействие антигенов клеща. А при более «легкой» форме проявление болезни (локализованная форма демодекоза) уровень всех классов иммуноглобулинов снижаются, что приводит к иммунодефицитному состоянию организма.

2.8. Влияние ронколейкина на гематологические и иммунологические

показатели собак при пнодермиях

Для определения лечебной эффективности ронколейкина при пиодермии

собак и влияние его на гематологические и иммунологические показатели крови, было сформировано 4 группы животных.

1 группа - 20 больных поверхностной формой пиодермии. Лечебная помощь больным была оказана с применением антисептических препаратов (3%-ный раствор перекиси водорода, 0,05%-ный раствор хлоргекседин), наложением антибактериальных мазей (линкомициновая, эритромициновая) и комплексного препарата «Тридерм». 2 группа - 30 больных собак с поверхностной формой пиодермии, для лечения которых кроме выше указанных лекарственных препаратов назначали раствор ронколейкина 3 ин7>екции через 24 часа, подкожно. 3 группа - 6 больных собак с диагнозом

глубокая пиодермия. Лечебные процедуры осуществляли так же, как животным 1 группы. 4 группа - 7 больных с диагнозом глубокая пиодермия, лечение которых осуществляли так же, во 2 группе.

Клиническими исследованиями установлено, что у собак 1 групп и 3 группы процесс заживления поражённых участков кожи в основном протекало медленнее, чем у больных 2 и 4 групп. Хотя признаки зуда, расчёсов и экссудации у животных всех групп постепенно ослаблялись и к концу курса лечения практически исчезли. У 2-х животных из 20 1 группы и 3-х 3 группы и 1-го животного 4 группы через 20 дней (по окончанию курса лечения) была установлена незначительная экссудация серозного характера. Морфологическая картина крови у животных опытных групп после курса лечения значительно улучшилась. В частности увеличились количества эритроцитов, гемоглобина и лейкоцитов, а в лейкоцитарной формуле лимфоцитов. Однако при сравнительном анализе данных по опытным группам имеют существенные различия. Так животным, которым лечебная помощь оказана с применением ронколейкина (2 и 4 группы) практически вышеуказанные показатели крови на порядок выше, чем у животных 1 и 3 группы.

Наиболее статистически достоверным изменениям претерпевала уровень общего белка во всех опытных группах. Так, если у животных 1 и 3 групп, подвергнутых лечению без применения ронколейкина, снизилась на 8 и 15% соответственно, то 2 и 4 группах па 20 и 25% ,что предполагает о положительном влиянии данного препарата на протеинового обмена в организме. Прослеживая динамику уровней 1уА, отмечено что в 1 группе происходит его увеличение в 2 раза, во 2 группе 2,5 раза, в 3 - 1,4 и 4 в 2,5 раза. Аналогичные данные получены и по

Уровень циркулирующих иммунных комплексов в 1 группе составляла 18,0 у.е, во 2 - 19,3, в 3 - 20,0 и в 4 - 21,8 ,при норме 22,4 у.е., что так же

свидетельствует о положительном влиянии ронколеикина на иммунную систему организма больных пиодермией собак.

Анализируя показатели неспецифической резистентности, нами выявлено, что в 1 и 3 группах лизоцимная активность была значительно ниже 10% и 9,0% соответственно, чем у животных 2 и 4 групп (13,4 и 12,6% лизиса), где при лечении больных пиодермией собак, кроме антисептических, антибактериальных препаратов, применяли ронколейкин. Аналогические результаты были получены при расчете бактериальной и фагоцитарной активности. Так в 1 группе бактериальная активность до лечения составляла 46,4 % лизиса Е.соП, после курса лечения 55,2, во 2 группе - 46,4 и 65,4, в Зей - 46,6 и 60,5. Этот показатель у клинически здоровых животных был равен 66,4 % лизиса Е.соН. Фагоцитарная активность нейтрофилов в 2 и 4 группах была значительно выше (в среднем 7%) чем, в 1 и 3 группах.

Клиническое обследование животных показало, что при применении ронколейкина(2 и 4 группы) у 90% животных с поверхностной пиодермией и 77% с глубокой, наблюдалось более интенсивное заживление поражённых участков кожного покрова, чем у животных 1 и 3 групп.

Таким образом, полученные результаты свидетельствуют об эффективности препарата ронколеикина в комплексной терапии собак больных пиодермией.

2.9.Влнянне ронколеикина на гематологические и иммунологические показатели собак, больных дерматофнтозом

С цель определения лечебной эффективности ронколеикина в

комплексной терапии и влияния его на гематологические и иммунологические показатели собак при дерматомикозах были сформулированы 2 группы больны животных по 26 голов в каждой. В первой группе лечения больных животных проводили противогрибковыми препаратами (миколам, вакдерм, микосал, нитрофунгин, бакмикосептин), а

во второй - кроме указанных препаратов использовали ронколейкип схеме, как при ниодсрмиях собак.

Из результатов опыта следует, что у 17 из 26 больных животных первой группы без обострения клинических признаков дерматофитоза в течение 10-12ти дней с начала курса лечения отмечали заживление пораженных очагов кожи, рост новых волос, отсутствие новых дерматофитозных очагов и нормализации гематологических и иммунологических показателей (таблица 8). Однако у 9 больных собак заживление поражённых участков происходило медленно (в среднем на 7-15 дней больше) и у них же на коже были обнаружены скрытые дерматофитозиые очаги. Средняя продолжительность выздоровления больных собак но этой группе составляла 23 дня.

Во второй группе, где для лечения собак, кроме препаратов назначенных животным первой группы, применяли ронколейкип отмечены следующие клинические, иммуногематологичсскне изменения: у 23-х из 26-ти больных собак на 7-8 дней после начала курса лечения произошли заживления очагов поражения кожи, рост новы волос и отсутствие появления новых очагов инфекции; у 3-х больных животных клинические признаки болезни постепенно исчезали на 12-15 дней после начало курса лечения; морфологический состав крови характеризовался увеличением общего количества лейкоцитов на 7% и лимфоцитов на 16,8%; при биохимическом исследовании отмечено уменьшении общего белка до уровня этого показателя у клинически здоровых собак 64,7 г/л; из иммунологичеекп показателей наиболее статистически достоверными были уровень гаммаглобулинов класса О, которая составила 6,7 г/л(+-0,34),зто даже больше на 0,5 г/л, чем у клинически здоровых животных; средняя продолжительность выздоровления собак составила 18 дней.

Таблица 7

Основные гематологические и иммунологические показатели собак, больных _дерматомикозами (до и после лечения). (М+-т(п=0,7)_

Показатели Клиническ п здоровых животных 1 группа лечения без ронколейкина 2 группа лечения с применением ронколейкина

Эритроциты (млн/мкл) 6,55 6,43 6,67

Лейкоциты (МНС/мкл) 8,70 7,94 8,84

Лимфоциты (%) 30,06 22,1 30,20

Общий белок (г/л) 64,6 62,8 64,7

1ЙА (г/л) 2,4 2,3 2,6

О (г/л) 6,2 5,5 6,7

Лизоцимная Активность (% лизиса) 11,62 12,7 13,2

Бактериальная активность (% лизиса Е.соП) 66,4 64,2 65,8

Циркулирующие иммунные комплексы (У-е.) 22,4 21,8 25,6

Фагацитарная активность (%) 28,8 32,9 32,4

Отмечено также незначительное увеличение уровня ^А (на 0,2 г/л) по

сравнению этого показателя у клинически здоровых животных (таблица 7).

Необходимо отметить, что показатели неспецпфическон резистентности (лизоцимная, бактериальная и фагоцитарная активность) у больных собак и первой и второй группы особых изменений не претерпевали до и после оказания им лечебной помощи.

2.10. Влияние роиколейкииа на гематологические и иммунологические показатели собак, больных демодекозом

С целью изучения лечебной эффективности ронколейкина в комплексе

терапии больных демодекозом собак и влияния его на иммуно-гематологические показатели,нами было проанализированы результаты лечения 20 собак с локализованной 13 с генерализованной формой.

20

Контролем служила группа больных животных в количестве 16 голов, которым были назначены только антнпаразптарные препараты. За животными всех опытных групп проводили ежедневные наблюдения в течение 30 дней, а до и после курса лечения брали кровь для гематологических и гистологических исследований. На 10-й и 25 дни с начала лечения брали пробы соскобов кожи для арахнологичсских исследований. Больным собакам всех групп в качестве акарацидного препарата назначали ивермск, ивсрмск-гель, огодектин и баймск. Животным 2 группы, кроме антппаразптарных препаратов назначали мазь лсвомсколь.

Клиническими исследованиями установлено, что у 20-ти животных с диагнозом локализованная форма дсмодскоза на 10-20 дни после начала курса лечения пораженные участки кожи полностью исчезали, постепенно уменьшались и затем отсутствовали экссудация, расчссы и зуды, на месте очагов поражения появились волосы. Средняя продолжительность полного выздоровления равнялась 18 дням. При контрольных арахнологичсских исследования соскобов, взятых из бывших поражены участков кожи клешей Оетоскх не были обнаружены.

Во второй опытной группе собак(диагноз генерализованная форма демодек^оза) заживления пораженных участков кожи происходило вяло, медленно снижались и пр1изнаки расчеса и экссудации. У 3-х собак из 13 до конца курса лечения эти признаки так и не исчезали. У остальных полное выздоровление было зарегистрировано па 30-35 дни после начала курса лечения. При контрольных исследованиях соскобов кожи на 10-й день, клеши были обнаружены в 3-х пробах, а на 25 день только в одном случае. Продолжительность полного выздоровления 10 собак этой группы составила 32 дня.

В контрольной групнс(3 группа) где 16 больным демодскозом (из них 12 локализированной и 4 генерализированной формой) как отмечено выше, лечебная помощь была оказана только с использованием антипаразитарных

21

препаратов, отмечено следующее: у животных локализированной формой пораженные участки кожи полностью разрослись волоски при отсутствии расчёсов, экссудации, корочек и клещей. На 22-28 дни: у животных с генерализованной формой признаки поражения кожи в том числе расчёсы, корочки и экссудация продолжались (хотя по интенсивности значительно меньшей степени) в сроки наблюдения - 35 дней.

Таблица 8.

Основные гематологические и иммунологические показатели собак. _больных демолекозом (до и после лечения)_

Показатели Клиниче ски здоровы X собак 1 группа. Локалпзованн ая форма дсмодскоза(с ронколепкипо м) 2 группа. Генерализованн ая форма демодекоза (с ронколейкином ) 3 группа. Демодекоз. Лечение без ронколейкна

До лечепи я Поел е лече пня До Лечени я После лечен ия До Лечен ия Поел е лечен ия

Эритроциты(млн /мкл) 6,55 5,8 6,47 5,9 6,7 6,9 6,43

Лейкоциты (МНС/мкл) 8,70 6,5 7,76 12,2 9,18 10,0 9,5

Лимфоциты(%) 30,06 24,2 31,0 35 28 34 30

Общий белок (г/л) 64,6 76,4 66,8 79,8 63,7 72,8 60,2

^А (г/л) 2,5 1,42 2,3 0,66 2,6 0,78 1,2

180 (г/л) 31,26 33,73 31,8 25 30 26,8 28,4

^М (г/л) 3,74 2,28 4,2 2,5 3,6 2,83 3,0

Лизоцимная активность(% лизиса) 11,62 10,3 14,3 9,2 11,6 9,4 10,0

Бактериальная активность (% лизиса Е.соН) 66,4 56,9 67,7 53,8 60,6 61,7 61,8

ЦИК (у.е.) 22,4 20,4 23,7 19,0 22,0 20,6 21,2

Фагоцитарная активность (%) 28,8 22,5 27,7 21,8 28,3 24,3 25,6

Результаты гематологических и иммупологичсски анализов до и после лечения собак, больных дсмодскозом представлены в таблице 9, из которой можно заключить: во всех опытных группах наблюдались увеличение (после курса лечения) лейкоцитов процентного соотношения лимфоцитов в лсйкоформулс. Так же нормализировался уровень общего белка в крови. Так у животных 1 группы этот показатель до лечения был 76,4, 2ой группы -79,8 и Зей - 72,8 г\л, а после курса лечения снизилась до значения 66,8.,63,7. И 60,2 при норме 64,6 г\л; в 1 и 2 группах после лечения резко, на 24-40% увеличился уровень ^ Л , в и М, что свидетельствует о положительном влиянии роиколейкпна на иммунную систему организма больных демодскозом собак. В третьей группе, где лечение больных осуществлялись без применения ронколейкина, показатели иммуноглобулинов практически оказались на том же уровне, что и до лечения; отмечено увеличение циркулирующих иммунных комплексов в 1 и 2 группах после лечения на 7 и 12% соответственно и всего на 3% у животных третьей группы.

Таким образом, применение роиколейкпна в комплексе с антииаразитарными препаратами локализованной и особенно генерализированной формах дсмодскоза собак, положительно влияет на клинико-гематологичсскис и иммунологические показатели больных животных.

3. ВЫВОДЫ

1. При клиническом осмотре 328 собак с признаками поражения кожного покрова в 102 случаях установлена поверхностная, в 62 - локальная и в 17 случаях - генерализованная формы пиодермии. Типичными местами локализации кожных поражения - брюшная стенка, паховая область, у основания ушных раковин и внутри уха, спинки носа и между пальцами.

2. При бактериологических исследованиях соскобов кожи, взятых из пораженных очагов, были изолированы различные бактерии

(стафилококки, стрептококки, кишечная и синегнойная палочки, протей) в чистых культурах и в различных ассоциациях. Ведущее место (более 70% случаев) в этих ассоциациях, судя по частоте выделения, занимали стафилококки.

3. В результате микологических исследований проб волос с корочками, взятых с пораженных участков кожи 483 собак, в 132 случаях установлена микроспория и в 163 - трихофития.

4. В результате клинических и арахноэнтомологических исследований соскобов кожи у 165 собак из 1264-х был установлен демодекоз, что составил 13%. Характерными признаками болезни являлись: аллопеция, зуд в области пораженных участков, облысевшие очаги, покрытые мелкими чешуйками, папулы и экссудативное воспаление с образованием пузырьков.

5. Гематологическими п иммунологическими исследованиями крови, взятых от больных пиодермией, установлены снижение общего количества эритроцитов на более чем 1 млн/мкл, уменьшение уровня гемоглобина на 15% и лейкоцитов в среднем на 10%. Отмечено также увеличение показателя общего белка - более 85 г/л при норме 40-73 г/л, что свидетельствует о высокой интенсивности и динамичности инфекционного процесса при пиодермиях. Установлено снижение уровня ^А на 1,2 г/л, лизоцимной, бактерицидной и фагоцитарной активности крови в среднем на 15%, что характерно для гнойных воспалительных процессов и иммунодефицитных состояний.

6. Статистически достоверных разниц между иммунологическими показателями крови собак, больных трихофитией и микроспорией и клинически здоровых животных не установлены, что предполагает иммуносупрессивное состояние организма.

7. При демодекозе в крови собак установлено снижение уровня гемоглобина на 17%, увеличение количества оозинофилов на 20% и

24

лимфоцитов иа 14% на фоне резко выраженного лейкоцитоза. Отмечено также динамическое повышение уровня общего белка в среднем на 20%, глюкозы - на 4%, билирубина и холестерина, что предполагает нарушения функциональной деятельности печени. Уровень иммуноглобулинов Л и М в 2 раза ниже, чем у здоровых животных, а уровень ^О в пределах нормы или незначительно повышен, что характерно для иммуносуирсссивных и иммунодефицитных состоянии организма.

8. В условиях проведённых экспериментов установлено, что трёхкратное подкожное введение ропколейкпна в дозе 10000 МЕ собакам способствует:

- у больных пиодермией в комплексе с антибактериальными препаратами повышению количества лимфоцитов и моноцитов, снижению уровня палочкоядерных нейтрофшюв п общего белка, увеличению уровней ^А, ^С и циркулирующих иммунных комплексов, повышению лизоцимной, бактериальной и фагоцитарной активности крови, более интенсивному заживлению пораженных участков кожи и сокращению сроков выздоровления на 3-5 дней.

- у больных дерматофитозамп в комплексе с противогрибковыми препаратами увеличению общего количества лейкоцитов на 7%, уменьшению содержания общего белка до уровня этого показателя у клинически здоровых животных, стабилизации уровня ^А и иммуноциркулирующих комплексов, более интенсивному заживлению очагов поражения кожи, росту новых волос и отсутствию новых очагов поражения, что свидетельствует об иммунокорректирующем свойстве ронколейкина.

- у больных демодекозом в комплексе с аитипаразнтарными препаратами увеличению количества лейкоцитов и стабилизации процентного соотношения лимфоцитов в лейкоформуле, снижению уровня общего белка на 17% и увеличению на 25-40% уровней иммуноглобулинов и

25

циркулирующих иммунных комплексов, что предполагает о положительном влиянии препарата на иммунную систему организма.

4. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Материалы научных исследований включены в методический

разработки:

-методические положения по определению иммунного статуса животных, утверждена академик-секретарем отделения ветеринарной медицины РАСХН 01.06.2011г.

- методические рекомендации по применению препарата ронколейкина в комплексной терапии собак при кожных патологиях разного генза, утвержденных директором ВНИТИБП академиком РАСХН, профессором А.ЯСамуйленко 27 сентября 2011 года;

- теоретические и практические результаты диссертации используются в учебном процессе при изучении студентами дисциплин «Эпизоотология и инфекционные болезни» и «Паразитология и инвазиозные болезни животных» в МГАВМиБ;

- метод лечения собак, больных пиодермией, дерматомикозами и демадекозом с использованием препаратов ронколейкина и гипохлорита натрия внедрен в практику ветеринарных клиник «Лебеди», «Оберег», и «Юниор» города Москвы.

5.Список опубликованных рабог но теме диссертации

1. Масимов Э.Н. Эффективность ропколенкнна в комплексной терапии

собак при пиодермии /Масимов Э.Н.// «Ветеринария и кормление». -2011, №3, с.-39-40

2. Масимов Э.Н. Эффективность препарата ронколейкпн в комплексной терапии собак при дсмодскозс/Масимои Э.Н.// «Российский паразнтологичеекпи журнал», №3, с. 62-64

3. Масимов Э.Н. Анализ применения гппохлорита натрия и препарата ронколейкпн при гнойных дерматитах собак/Маспмов Э.Н.// Ветеринарная медицина домашних животных: Сборник статей. Выпуск 7, Казань, 2010, с.184-186

4. Федоров Ю.Н. Иммунодфпциты собак: характеристика, диагностика, иммунокоррекцпя/Фсдоров Ю.Н., Юнокина В.И., Масимов Э.1 ¡.//Актуальные проблемы ветеринарии и животноводства: Материалы Межрегиональной научно-практической конференции. -Самара, 2010.-c.321-331

5. Федоров 10.11. Алгоритмы в диагностике нммунодефицитов животных / Федоров Ю.П., Клюкииа В.П., Богомолова O.A., Масимов Э.Н. // Задачи ветеринарной науки в реализации доктрины продовольственной безопасности Российской Федерации. Материалы международной научной научно-практической конференции 16-17 марта 2011г. -Покров, 2011.-С. 154-156.

6. Масимов Э.Н. Гематологические изменения при кожных патологиях собак/Маснмов Э.Н.// Вопросы физико-химической биологии в ветеринарии - Сборник научных трудов МГАВМиБ. - 2011, с.75-78

Отпечатано в типографии «Мещёра», г. Щёлково, ул. Свирская, д.8а. Тираж 100 экз.

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Масимов, Эдуард Нусратович

1 .ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.

1.1. Актуальность темы.

1.2.Цели и задачи исследований.

1.3. Научная новизна.

1.4. Практическая значимость работы.

1.5.Основные положения, вынесенные на защиту.

1.6. Апробация работы.

1.7. Публикации результатов исследования.

1.8. Объем и структура диссертации.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2.1. Общая характеристика кожных болезней собак.

2.2. Кожа как иммунный орган.

2.2.1. Болезни кожи и ее производных, вызываемые бактериями.

2.2.2. Паразитарные болезни кожи.

2.2.3. Грибковые заболевания кожи.

2.2.4. Характеристика аутоиммунных, эндокринных и аллергических болезней кожи собак.

2.3. Критерии оценки иммунного статуса животных.

2.4. Средства, применяемые для коррекции иммунного статуса животных

2.4.1. Характеристика цитокинов и интерлейкинов.

2.4.2. Характеристика препарата ронколейкина.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Применение ронколейкина с целью коррекции иммунного статуса собак при кожных заболеваниях"

1.1. Актуальность темы

Значение собаководства общеизвестно. Служебные и охотничьи собаки выполняют довольно большой объем полезной работы в различных областях человеческой деятельности. В последние десятилетие в связи с урбанизацией общества привязанность человека к собаке значительно возросла. Резко расширяется круг собаководов - любителей, организуются специальные общества, питомники, клубы, ярмарки, выставки и др.

Одновременно с все более широким применением собак в различных отраслях хозяйства и в быту, возрастает опасность распространения болезней, среди которых много общих с болезнями сельскохозяйственных животных и людей - бешенство, туберкулез, лептоспироз, дерматофитозы.

Несмотря на интенсивное развитие ветеринарной медицины мелких домашних животных, кожная патология собак остается самой распространенной и сложной в диагностике проблемой. По данным многих исследователей в настоящие время более 25% случаев обращений владельцев собак к ветеринарным специалистам связано с заболеванием кожного покрова (М.Ю.Лопатина (2004), С.И.Лебедько (2004), Н.И.Левяшова (2009), Т.В.Новикова и др.(2010), Т.Б.Мазоп (1998), Б.КСагЬШ (2003) и др.Состояние кожи и ее производных во многих случаях является показателем общего здоровья собаки.

Кожа обеспечивает барьерную функцию, препятствует потери воды, электролитов и механически защищает организм животного от неблагоприятных воздействий окружающей среды. Кроме того, кожный покров отвечает за температурную регуляцию, синтез и накопление витамина

D, жиров, углеводов и белков. Поверхность кожи обладает антибактериальными и противогрибковыми свойствами.

Причинами заболеваний кожного покрова собак могут быть различные травмы, бактерии, грибки, вирусы и эктопаразиты. Анализ многочисленных литературных источников свидетельствует о важной роли иммунологических нарушений в механизмах возникновения и развития кожных патологий у животных (Ю.Н.Федоров (2000), И.М. Донник (2000), Н.В.Монов (2002), В.А.Черешнев и др. (2003), Ю.Н.Федоров (2008), М.Ю.Лопатина (2004) и

ДР-)

По мнению C.A.Griffin, K.W.Kwochka (1993), Е.С. Кузнецовой и др.(2002) многие кожные болезни вызываются банальной микрофлорой (бактериями и грибками), которые являются постоянными обитателями кожи, а их повышенная колонизация приводит к хронизации инфекционного процесса, что связано с иммунодефицитным состоянием организма. Аналогические данные изложены в научных статьях И.И.Вершинина и др. (2003), Ю.Н.Федорова (2000), М.А.Медведева (2003) и др. в частности авторы указывают, что демодекоз собак относится к наиболее часто встречаемым и трудно поддающимся лечению заболеваниям, так как инвазионный процесс всегда сопровождается иммунологической недостаточностью организма.

Детальное изучение иммунологических показателей собак, страдающими различными кожными патологиями, позволяет ввести коррекцию в стратегию лечения с помощью иммуномодулирующих препаратов. С начала XXI века в ветеринарной практике успешно применяются цитокины и интерлейкины при различных патологиях сельскохозяйственных и мелких домашних животных. Одним из производных цитокина и интерлейкина является ронколейкин. В доступной литературе мы не нашли применения данного препарата при кожных патологиях животных, в том числе и собак.

Приведенные выше обстоятельства и определили актуальность и направления настоящей работы.

Заключение Диссертация по теме "Биотехнология (в том числе бионанотехнологии)", Масимов, Эдуард Нусратович

5. ВЫВОДЫ

1. При клиническом осмотре 328 собак с признаками поражения кожного покрова в 102 случаях установлена поверхностная, в 62 — локальная и в 17 случаях - генерализованная формы пиодермии. Типичными местами локализации кожных поражения - брюшная стенка, паховая область, у основания ушных раковин и внутри уха, спинки носа и между пальцами.

2. При бактериологических исследованиях соскобов кожи, взятых из пораженных очагов, были изолированы различные бактерии (стафилококки, стрептококки, кишечная и синегнойная палочки, протей) в чистых культурах и в различных ассоциациях. Ведущее место (более 70% случаев) в этих ассоциациях, судя по частоте выделения, занимали стафилококки.

3. В результате микологических исследований проб волос с корочками, взятых с пораженных участков кожи 483 собак, в 132 случаях установлена микроспория и в 163 - трихофития, возбудителями которых являлись. Клинические признаки дерматофитозов характеризовались образованием корочек в области головы, шеи, спины, экссудативными явлениями, обламыванием и выпадением волос.

4. В результате клинических и арахноэнтомологических исследований соскобов кожи у 165 собак из 1264-х был установлен демодекоз, что составил 13%. Характерными признаками болезни являлись: аллопеция, зуд в области пораженных участков, облысевшие очаги, покрытые мелкими чешуйками, папулы и экссудативное воспаление с образованием пузырьков.

5. Гематологическими и иммунологическими исследованиями крови, взятых от больных пиодермией, установлены снижение общего количества эритроцитов на более чем 1 млн/мкл, уменьшение уровня

127 гемоглобина на 15% и лейкоцитов в среднем на 10%. Отмечено также увеличение показателя общего белка — более 85 г/л при норме 40-73 г/л, что свидетельствует о высокой интенсивности и динамичности инфекционного процесса при пиодермиях. Установлено снижение уровня 1§ А на 1,2 г/л, лизоцимной, бактерицидной и фагоцитарной активности крови в среднем на 15%, что характерно для гнойных воспалительных процессов и иммунодефицитных состояний.

6. Статистически достоверных разниц между иммунологическими показателями крови собак, больных трихофитией и микроспорией и клинически здоровых животных не установлены, что предпологает иммуносупрессивное состояние организма.

7. 7.При демодекозе в крови собак установлено ^снижение уровня гемоглобина на 17%, увеличение количества эозинофилов на 20% и лимфоцитов на 14% на фоне резко выраженного лейкоцитоза. Отмечено также динамическое повышение уровня общего белка в< среднем на 20%, глюкозы - на 4%, билирубина и холестерина, что предполагает нарушения функциональной деятельности печени. Уровень иммуноглобулинов А и М 2 раза ниже,чем у здоровых животных,а уровень ^О в пределах нормы или незначительно повышен, что характерно для иммуносупрессивных и иммунодефицитных состояний организма.

8. В условиях проведённых экспериментов установлено, что трёхкратное подкожное введение ронколейкина в дозе 10000 МЕ собакам способствует:

- у больных пиодермией в комплексе с антибактериальными препаратами повышению количества лимфоцитов и моноцитов, снижению уровня палочкоядерных нейтрофилов и общего белка, увеличению уровней ^ А, ^ С и циркулирующих иммунных комплексов, повышению лизоцимной, бактериальной и фагоцитарной активности крови, более интенсивному заживлению пораженных участков кожи и сокращению сроков выздоровления на 3-5 дней.

- у больных дерматофитозами в комплексе с противогрибковыми препаратами увеличению общего количества лейкоцитов на 7%, уменьшению содержания общего белка до уровня этого показателя у клинически здоровых животных, стабилизации уровня ^ А и иммуноциркулирующих комплексов, более интенсивному заживлению очагов поражения кожи, росту новых волос и отсутствию новых очагов поражения, что свидетельствует об иммунокорректирующем свойстве ронколейкина.

- у больных демодекозом в комплексе с антипаразитарными препаратами увеличению количества лейкоцитов и стабилизации процентного соотношения лимфоцитов в лейкоформуле, снижению уровня общего белка на 17% и увеличению на 25-40% уровней иммуноглобулинов и циркулирующих иммунных комплексов, что предполагает о положительном влиянии препарата на иммунную систему организма.

6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Материалы научных исследований включены в методический разработки:

- методические положения по определению иммунного статуса животных, утверждена академик-секретарем отделения ветеринарной медицины РАСХН 01.06.2011 г.;

-методические рекомендации по применению препарата ронколейкина в комплексной терапии собак при кожных патологиях разного генеза,утвержденных директором ВНИТИБП академиком

РАСХН,профессором А.Я.Самуйленко 27 сентября 2011 года;

-теоретические и практические результаты диссертации используются в учебном процессе при изучении студентами дисцплин «Эпизоотология и инфекционные болезни» и «Паразитология и инвазионные болезни животных» в МГАВМиБ;

-метод лечения собак, больных пиодермией, дерматомикозами и демодекозом с использованием препаратов ронколейкина и гипохлорита натрия внедрен в практику ветеринарных клиник «Лебеди», «Оберег» и «Юниор» города Москвы.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Масимов, Эдуард Нусратович, Щёлково

1. Архипов A.A. Лечение собак с синдромом аллопеции // Ветеринария.- 1999.-№7-с.53-55

2. Базарный В.В., Прислонова Е. Б. Цитохимические особенности нейтрофильных гранулоцитов собак.// Актуальные вопросы ветеринарной медицины мелких домашних животных. Выпуск 1. - Екатеринбург, 1996.

3. Бакшеев А.Н. Становление, породные особенности и возможности коррекции иммунной системы у свиней: Автореф. дис.докт.биол.наук.- Новосибирск, 1998.-32 с.

4. Белов А.Д., Данилов Е.П., Дукуров И.И. Болезни собак.- М.: «Колос»,1995,129-133,361 с.

5. Бережной А.Е. «Определение иммунного статуса у собак» -Материалы двенадцатого Международного Московского Конгресса по болезням мелких домашних животных, 22-24 апреля, 2004.

6. Бибина И.Ю. Характеристика и частота проявления кожной патологии у собак / XIII Международный Московский конгрее по болезням мелких домашних животных.// Материалы 2010, С. 60-61.

7. Бикхардт К. Клиническая ветеринарная патофизиология — М.: Аквариум ЛТД, 2001. 400с.

8. Бирюков A.A. Лечение аллергического дерматита у собак, вызванного блохами / Ветеринар, 1998, №5-6, С. 28-29.

9. Булатова C.B. Сезонная и возрастная динамика функции щитовидной железы у животных и человека на Среднем Урале: Дис.канд. биол. наук.-Екатеринбург, 2001.-134 с.

10. Бутенко Г. М., Терешина О. П.// Иммунология. 1992. -№3. - С. 15-17.

11. Бутковский В.Ф. Дерматомикозы собак и кошек в Якутии / В.Ф. Бутковский, Ю.Ю. Устинцева // Ветеринария. 2008 - №12 - С. 49-52.

12. Василевич Ф.И., Кириллов А.К. «Демодекоз у собак» -Российская академия менеджмента и агробизнеса, 1997

13. Вертелина Е.С., Гречиха А.Ю., Дармина Е.А. и др. «Лабораторная диагностика: оценка показателей крови у животных» М.: «ИПЦ Маска», 2007, 57с.

14. Воробьев, А. А. Принципы классификации • и стратегия применения иммуномодуляторов в медицине / А. А. Воробьев // ЖМЭИ — 2002. —№4. —С. 93-98.

15. Воронин Е.С., Петров A.M., Серых М.М., Дервишев Д.А. Иммунология / Под ред. Е.С. Воронина.-М.: Колос-Пресс, 2002.-408с.

16. Воронин Е.С., Шахов А.Г. Современная концепция этиологии, профилактики и лечения болезней молодняка сельскохозяйственных животных.//Сб. мат. науч. Сессии РАСХН,- М., 1999. с.209-214

17. Горский А.Н. Изучение формирования иммунитета у свиней в онтогенезе при применении биологически активных веществ: Дис. .канд. вет. наук.- Новосибирск, 2001.-113 с.

18. Гребенникова Т.В. Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) в диагностике инфекционных заболеваний // В книге «Микробиология» под ред. А.С.Лабинской и В.Г. Жуховицкого. М., 2004

19. Гребенникова Т.В. Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) в диагностике и мониторировании лечения инфекционных заболеваний // В книге «Микробиология» под ред. А.С.Лабинской и В.Г. Жуховицкого. М., 2004

20. Долгих В.Т. «Основы иммунопатологии» «Медицинская книга», издательство НГМА, 1998, 202с.

21. Долгих В.Т. Основы иммунопатологии.- М.:«Медицинская книга», Издательство НГМА, 2000,122с.

22. Долгушин И.И., Бухарин О.В. Нейтрофилы и гомеостаз.-Екатеринбург: УрО РАН, 2001.-С.425.

23. Домарадский И.В. Некоторые проблемы адаптации патогенных бактерий в окружающей среде// Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии.-1997.-№ 4.-С.31-35.

24. Донник И. М. Иммунограмма животных в клинической практике. // Актуальные вопросы ветеринарной медицины мелких домашних животных. Выпуск 2. - Екатеринбург, 1997.

25. Донник И.М. Состояние здоровья сельскохозяйственных животных в индустриальных территориях// Продовольственная безопасность XXI век: Сб. науч. тр. 2000, с. 114-130

26. Дыгай A.M., Шахов В.П. Роль межклеточных взаимодействий в регуляции гемопоэза.- Томск: Изд-во Томск.ун-та, 1989.-С.214.

27. Ермолаев C.B. Эколого-эпизоотологический анализ крупного рогатого скота в разных условиях Среднего Урала.- Дисс.ученой степени кандидата вет.наук, Барнаул, 2000.-146 с.

28. Журнал «Ветеринарная медицина», №2 (2010)133

29. Журнал «Ветеринарная клиника», №2 (февраль, 2007)

30. Журнал «Цитокины и воспаление», 2002, №1

31. Зарецкая Ю.М. Клиническая иммуногенетика. М.: Медицина, 1983.-208 с.

32. Земсков A.M., Полякова С.Д. Связь иммунологической реактивности с характером микрофлоры у больных хроническим гнойным средним отитом// Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии.-1997.-№ 1.-С.89-90.

33. Золотарева H.A. Иммунодефицита и борьба с ними// Ветеринарный консультант,2003.- №16(64).-с.З

34. Зорин B.JI. Демодекоз собак и его лечение // Ветеринарная клиника.- 2002.-№7.-с.17.

35. Зудин Б.И. «Кожные и венерические болезни» М.: «Медицина», 1996, 256с.

36. Игнатов П.Е. Стафилококковый дерматит у собак / Ветеринария, №5, 1995, с.53-56.

37. Карелин A.B., Карелина Е.А. Комплексный подход при лечении атопических дерматитов у собак. / XII Международный Московский конгрее по болезням мелких домашних животных.// Материалы 2004, С. 94.

38. Карпецкая H.JI. «Эрозивно-язвенные поражения кожи у собак», Ветеринарный консультант, 2003, №18(66) 18-21с.

39. Кирк Р., Бонагура Д. «Современный курс ветеринарной медицины Кирка» М.: «Аквариум», 2005

40. Кондрахин И. П., Архипов А. В., Левченко В. И. и др., Методы ветеринарной клинической лабораторной диагностики: Справочник/. М.: Издательство "КолосС", 2004. - 520 с.

41. Кондрахин И.П. «Эндокринные, аллергические и аутоиммунные болезни животных: Справочник» М.: КолосС, 2007, 251с.

42. Крячко O.B. Ронколейкин в качестве средства монотерапии при хронических обструктивных болезнях легких у лошадей / О.В. Крячко, О.В. Романова, Е.А. Шевченко // Российский ветеринарный журнал. — 2005, №4, С. 22-23.

43. Крячко О.В., Романова О.В. Влияние ронколейкина на гельминтологические показатели у лошадей при дерматите // Ветеринария, 2007, №6, с. 45-48.

44. Кузнецов А.Ф. «Ветеринарная микология» СПб.: Издательство «Лань», 2001, 416с.

45. Кузнецова Е.С. Аллергии и пиодермии. Их место в кожной патологии у собак. / XII Международный Московский конгрее по болезням мелких домашних животных.// Материалы 2004, С. 96-97.

46. Кузнецова Е.С. Отиты диагностика и лечение. / XIII Международный Московский конгрее по болезням мелких домашних животных.//Материалы 2010, С. 61-64.

47. Лебедько С.И. «Кожные болезни собак: этиология, диагностика и терапия с использованием препаратов хитозана» Дисс.ученой степени кандидата ветеринарных наук, Щелково, 2004, 128с.

48. Левятова Н.И. «Дермтофитозы кошек и собак» материалы 16 Международного конгресса по болезням мелких домашних животных, 2008

49. Лопатина М.Ю. «Показатели иммунной системы и эффективность иммунокоррекции у собак с хроническими заболеваниями кожи» Дисс.ученой степени кандидата ветеринарных наук, автореферат, Екатеринбург, 2004, 21с.

50. М.Д. Уиллард. Лабораторная диагностика в клинике мелких домашних животных, 2004, Аквариум, 414с.

51. Масимов H.A., Лебедько С.И., Лебедько Е.И. Лечение собак с использованием мазей при хронических отитах. / Ветеринарная медицина// 2005, №1, С. 16-17.

52. Масимов Э.Н. анализ применения гипохлорита натрия и препарата «Ронколейкин» при гнойных дерматитах собак / Ветеринарная медицина домашних животных // Сборник статей. Выпуск 7, Казань — 2010ю С.184-186.

53. Машковский М.Д. Лекарственные средства. В двух томах.-Изд. 13-е, новое.-Харьков: Торсинг, 1998.-С.202.

54. Маянинский Д.Н. «Хроническое воспаление», М.: Медицина, 1991.- 168с.

55. Медведева М.А. Иммунологическое обоснование патогенеза и лечения демодекоза собак- Дисс.ученой степени кандидата вет.наук, Москва, 2003

56. Меерсон Ф.З. «Общий механизм адаптации и профилактики», М.: Медицина, 1973 -378с.

57. Мельникова В.М. Эффективность оздоровительных мероприятий при лейкозе крупного рогатого скота в экологически неблагополучных территориях Среднего Урала.- Дис. . канд. вет. наук.-Екатеринбург, 2001.-167с.

58. Наттол Т. «Кожные болезни собак» М.: «Аквариум-Принт», 2007, 28с.

59. Никиту шкина Н.А., Гордиенко Л.Н. Методы диагностики дерматитов мелких домашних животных, вызванных патогенной и условнопатогенной микрофлорой. / XIII Международный Московский конгрее по болезням мелких домашних животных.// Материалы 2010, С. 6465.

60. Новиков Д.К., Новикова В.И. Оценка иммунного статуса. М.: Медицина.- 1996.-281с.

61. Новикова Т.В., Шустова М.В., Холопайнен Л.Э. Этиологическияструктура дерматологии у мелких домашних животных в условияхурбанизированных территорий Вологодской области. / XIII Международный136

62. Московский конгрее по болезням мелких домашних животных.// Материалы 2010, С. 67-68.

63. Овчеренко H.A., Гордиенко JT.H. Селиванова Д.М. Видовой состав микрофлоры персистирующей на коже животных с признаками дерматомикоза. / XII Международный Московский конгрее по болезням мелких домашних животных.// Материалы 2004, С. 97-99.

64. Павлович С.А. Основы иммунологии/ Минск.:Вышюшкола, -1997- 115с.

65. Паттерсон С. «Кожные болезни собак» М.: «Аквариум», 2000

66. Петров В.В., Ломакин М.П. Эффективность эмицидина, как средства патогенетической терапии в комплексном лечении собак при дерматитах. / XIII Международный Московский конгрее по болезням мелких домашних животных.// Материалы 2010, С. 68-70.

67. Петров Р.В., Хаитов P.M., Пинегин Б.В. Оценка иммунного статуса человека в норме и при патологии. Иммунология, 1984 - N1 - С.6-9.70. под. редакцией В.А. Ткачука «Клиническая биохимия», М.:ГГЭОТАР МЕД, 2002 - 360с.

68. Поляков И.А. Клиническое проявление дерматомикозов у собак и кошек. / XII Международный Московский конгрее по болезням мелких домашних животных.// Материалы 2004, С. 100-101.

69. Разнатовский К.И., Родионов А.Н., Котрехова Л.П. «Дерматомикозы». СПб.: Издательский дом СПбМАПО, 2006. - 184.

70. Санин, А. В. Иммуномодуляторы и гемопоэз / А. В. Санин, М. А. Туманян // Экспериментальная онкология. — 1988. — № 10. — С. 8-15.

71. Святковский, А. В. Некоторые вопросы патогенеза и диагностики демодекоза у собак / А. В. Святковский, Л. Ю. Карпенко, В. В. Тиханин и др. // Ветеринарная практика. — 1997. — № 1. — С. 40^5.

72. Смирнов П.Н., Донник И.М. Экологические проблемы ветеринарной медицины Сибири и Урала // Сиб. аграрная наука Ш тысячелетия.- Новосибирск, 2001.-С.120-123

73. Справочник ветеринарных препаратов в России./ Кленова Н.Ф., Яременко Н.А.-М.: Сельхозиздат, 2001.-544с

74. Старченков C.B. Болезни мелких животных.- С.-Петербург:Изд-во «Лань», 1999.- 286-287с.

75. Тиханин В.В., Карпецкая Н.Л. Бактериальные дерматиты у собак. Особенности патогенеза и лечебная тактика. / Одиннадцатый конгресс./ Материалы 2003, С. 112-113.

76. Устинцева Ю.Ю. Диагностика дерматомикозов мелких домашних животных / Ю.Ю. Устинцева // Ветеринария сельскохозяйственных животных 2007 - №7 - С. 72-73.

77. Федоров Ю.Н. «Основы иммунологии и иммунопатологии собак» М., Издательско-информационный центр ООО «Информ-12», 2000. - 248с.

78. Федоров Ю.Н. Иммунологический мониторинг: состояния и перспективы / Актуальные проблемы инфекционной патологии ииммунологии животных. Материалы международной научно-практической конференции (Москва, 16-17 мая, 2006г.); М.: Изографъ, 2006 - С. 432-434.

79. Федоров Ю.Н., Верховский О.А. Иммунодефицита домашних животных.-М., 1996.-96с.

80. Федоров Ю.Н., Верховский О. А., Костына М.А. Иммунодефицита у животных: характеристика, диагностика, и коррекция.// Продовольственная безопасность -XXI век: эколого-экономические аспекты: Сб. науч. Трудов.-Екатеринбург, 2000.-е. 160-168

81. Фотина Е.Б. Кожные болезни собак.-С.-Петербург: Изд-во «Синтез- Полиграф»,2000, 9-41,57 с.

82. Хаитов Р.М. Физиология иммунной системы.-М.: 2001.- с. 201.

83. Хаитов Р.М., Игнатьева Г.А., Сидорович И.Г. Иммунология М.: Медицина, 2006 - С. 432.

84. Хаитов Р.М., Пинегин Б.В. Вторичные иммунодефицита : клиника, диагностика, лечение. //Иммунология, 1999, 1, С. 14-17.

85. Хаитов Р.М., Пинегин Б.В., Истамов Х.И. Экологическая иммунология.-М.: ВНИРО, 1995, с.6-41

86. Хаитов P.M., Пинегин Б.В., Чередеев А.Н. Оценка иммунной системы человека: современное состояние вопроса, сложности и достижения. -Иммунология, 1998.-N1 С. 8-10.

87. Эндокринные, аллергические и аутоиммунные болезни животных: Справочник/ Кондрахин И.П. М.: Издательство "КолосС", 2007. -251 с.

88. Ярилин А.А. «Основы иммунологии» М., Медицина, 1999

89. Ярилин А.А. Основы иммунологии. — М.: Медицина, 1999, 608с.

90. Abeck, D., Mempal, M. Staphylococcus aureus colonization in atopic dermatitis and its therapeutic implications. British Journal of Dermatology 1998; 139: 13-16.

91. Bell T.G.et al. Autosomal recesive combined immunodeficliency of Jack Russel terriers. // J. Vet. Diagn. Invest., 2002, 14, 3, p. 74-75.

92. Blalock J.E. Proopiomelanocortin and neuro-immune-endocrine connection//Ann. N.Y. Acad. Sci. 1999. Vol.885, p. 161-172

93. Bonagura, J.D. (ed.) (1995) Kirk's Current Veterinary Therapy XII. W.B. Saunders, Philadelphia

94. Brockus, C.W., Dillon, A. R., Kemppainen, R.J. Effect of alternate-day prednisolone administration on hypophyseal-adrenocortical activity in dogs. American Journal of Veterinary Research 1999; 60: 698-702.

95. Bush, B.M. (1991) Interpretation of Laboratory Results for Small Animal Clinicians, Blackwell Science, Oxford.

96. Campbell KL, Sundberg JP, Goldshmidt MH, et al: "Cutaneous inverted papilomas in dogs. Vet Pathol, 1988

97. Campbell, K. L., Uhland, C.F., Dorn, G.P. Effects of oral sunflower oil on serum and cutaneous fatty acid profiles in seborrhoeic dogs. Veterinary Dermatology 1992; 3: 29-35.

98. Curtis, C.F. Diagnostic techniques and sample collection. Clinical Techniques in Small Animal Practice 2001; 16(4): 199-206.

99. Day M.J. Clinical Immunology of the dog and cat.// Iowa State University Press/ Ames, 1999. 240 p.

100. Debencham S.L. et al. Canine leucocyte adhesion deficiency in Irish red and white Setters.// J. Small Animal Pract., 2002, 43, 2, p. 74-75/

101. Goldschmidt, N.H. and Shofer, F. (1992) Skin Tumours of the Dog and Cat. Pergamon Press, New York.

102. Green, C. E. (1990) Infectious Disease of the Dog and Cat. W.B. Saunders, Philadelphia.

103. Griffin C.E: Insect and arachid hypersensitivity. In: Griffin CE, ed: "Current Veterinary Dermatology: The Science and Art of Therapy". St.Louis, 1993

104. Griffin C.E: Malassezia paronychia in atopic dogs. Proceedings of the 12th annual American Collegt of Veterinary Dermatology/American Academy of Veterinary Dermatology meeting, 1996

105. Griffin, C.A., Kwochka, K.W. and MacDonald, J.M. (eds) (1993) Current Veterinary Dermatology. Moseby Year Book, St Louis.

106. Gross,T.L.,Ihrke, P.J. and Walder,E.J. (1992) Veterinary Dermatotolodgy. Moseby Year Book, St Louis

107. Haliwell R.E.W., Gorman N.T. Veterinary Clinical Immunology, 1989, p. 449-466/

108. Harvey, R.G., Noble, W.C. A temporal study comparing the carriage of Staphylococcus intermedius on normal dogs with atopics dogs in clinical remission. Veterinary Dermatology 1994; 5: 21-25.

109. Harvye, R.G. A blinded, placebo-controlled'study of the efficacy of borage seed oil and fish oil in the management of canine atopy. Veterinary Record 1999; 144: 405-407.

110. Hasegawa, A. Malassezia on animals: animal skin lesions and MalasseziaT pachydermatis. Japanese Journal of Medical Mycology 1993; 34: 413-416

111. Hasegawa, A. Malassezia on animals: animal skin lesions and Malassezia pachydermatis. Japanese Journal of Medical Mycology 1993; 34: 413416.

112. Helfand SC, Modiano JF, Moore PF "Functuonal interleukin-2 receptors are expressed on natural killer — like leukemic cells from dog with cutaneous lymphoma", 1995

113. Helfand SC, Soergel SA, Mac Williams PS, "Clinical and immunological effector of human recombinant interleukin-2 given by repetitive weekly infusion in normal dogs", 1994

114. Jeffers, J., Shanley, K., Meyer, E. Diagnostic testing of dogs for food hypersensitivity. Journal of the American Veterinary Medical Association 1991; 198: 245-250.

115. Jezyk P.F. et al. X-linked severe combined immunodifiency in the dog.// Clin. Immunol. Immunopathol., 1989, 52, p. 173-189.

116. Kremer M. J. Sunergy, pain and immune function // CRNA. 1999. Vol. 10, №3. p. 94-100.

117. Leistra, M.H., Markwell, P.J., Willemse, Т/ Evaluation of selected protein source diets for management of dogs with adverse reactions of foods. Journal of the American Veterinary Medical Association 2001; 219: 1411-1414.

118. Lemarie SL, Horohow DW "Evaluation of interleukin-2 production and interleukin-2 receptor expression in dogs wit generalized demod-icosis", 1996

119. Lewis, L.D. and Morris, M.L. Jr (1984) Small Animal Clinical Nutrition, 2nd Edition. Topeka, Mark Morris Associates, Topeka.

120. Lewis, R.M. and Picut, C.A. (1989) Veterinary Clinical Immunology. Lea and Febiger,Philadelphia.

121. Lisitsina A.A., Verkhovsky O.A., and Fedorov Yu.N. Immunological investigation in dogs with demodecosis and dermatitis.-Immunology Letters, 1997, vol.56 (1-3), p.404.

122. Lodn, M., Andersson, A.-C., Lindberg, M. Improvement in skin barrier function in patients with atopic dermatitis after treatment with a moisturizing cream. British Journal of Dermatology 1999, 140: 264-267.

123. Logas, D., Kunkle, G.A. Double blinded crossover study with marine oil supplement containing high-dose eicosapentaenoic acid for the treatment of canine pruritic skin disease. Veterinary Dermatology, 1994; 5: 99-104.

124. M.M. Abdel-Halim et all. Stadies on parasitic dermatolosis in dogs and cats// J. Egypt Vet., Mes. Ass. 1990-V. 50, Xs 1. P. 55-67

125. Macahiko Nagata. Диагностика атопического дерматита у собак / Waltham focus, том 10, №3, 2000. С. 4-9.

126. Masahiko Nagata DVM, MS Dermatologist, Animal Dermatology Centre, ASC, Tokyo, Japan, WALTHAM Focus, Vol 10, No 2, 2000

127. Mason, K.V., Evans, A.G. Dermatitis associated with Malassezia pachydermatis in 11 dogs. Journal of the American Animal Hospital Assiciation 1991; 27: 13-20.

128. Mayne P.D.-Clinical Chemistry in Diagnosis and Treatment-Edward Arnold, London/Sydney/Auckland, 1994, 314-324.143

129. Nagata, M. Efficacy of commercial hypoallergenic diets in canine allergic dermatosis. Japanese Journal of Veterinary Dermatology 1999; 5: 25-29.

130. Nagata, M., Sakai, T. Clinical survey of canine dermatosis in Japan. Japanese Journal of Veterinary Medical Association 1999; 52: 775-779.

131. Paterson, S., Pike, R., Boydell, P. Norweigian scabies in a dog. Veterinary Record 1995; 136: 393-394.

132. Pedersen N.C. A review of immunologic diseases of the dog.// Vet. Immunology and Immonopathology, 1999, 69, p. 251-342.

133. Perryman L.E. Animal Models. Molecular Pathology of severe combined Immunodeficiency in mice, horses, and dog.// Vet. Pathol., 2004, 41, p.95-100.

134. Reedy, L.M. and Miller, W.H.Jr (1989) Allergic Skin Diseases in Dog and Cat. W.B. Saunders, Philadelphia.

135. Reedy, L.M., Miller, W.H. Jr, Willemse, T. Allergic Skin Diseases of Dogs and Cats, 2nd Edn. Philadelphia: W.B. Saunders Co., 1997: 32-115.

136. Reedy, L.M., Miller, W.H. Jr, Willemse, T. Allergic Skin Diseases of Dogs and Cats, 2nd Edn. Philadelphia: W.B. Saunders Co., 1997: 202-225.

137. Ritter C, Batting M, Kraemer R, et al: "IgE hidden in immune complexes with anti-IgE autoantibodies in children with astma". Jallergy Clin Immunol, 1991

138. Scarff, D.H., Lloyd, D.H. Double blind, placebo-controlled, crossover study of evening primrose oil in the treatment of canine atopy. Veterinary Record 1992; 131: 97-99.

139. Scott DW, Miller WH, Griffin CE: "Muller and Kirk's Small Animals Dermatology", 5th ed. Philadelphia: WB Saunders, 1995

140. Scott, D.W., Miller, W.H. Jr, Griffin C.E. Muller and Kirk's Small Animal Dermatology, 5th Edn. Philadelphia: W.B. Saunders Co, 1995: ix-x.

141. Scott, D.W., Miller, W.H. Jr, Griffin, C.E. Muller and Kirk's Small Animal Dermatology, 5th Edn. Philadelphia: W.B. Saunders Co, 1995: 500-518.144

142. Scott. D.W, Miller, W.H.Jr (1989) Allergic skin diseases in dog's and cat's. W.B.Saunders, Philadelphia

143. Somberg R.L. et al. A single nucleotide insertion in the canine interleukin-2 receptor gamma chain results in X-linked severe combined immunodeficiency disease. Vet.// Immunol. Immunopathol., 1995, 47, p. 203-213.

144. Sonea I. M., Jergens A.E., Sacco R.E. et al. Flow cytometric analysis of colonic and small intestinal lymphocytes obtained by endoscopuc biopsy in the healthy dog// Vet. Immunol. Immunopathol. 2000. Vol. 77, JAl-2. p. 103-119.

145. Tizard I.R. Veterinary Immunology. An Introduction, Six Edition, 2000, - 482 p.

146. Watanabe, M., Tagami, H., Horii, I., Takahashi, M., Kligman, A. M. Functional analyses of the superficial stratum corneum in atopic xerosis. Archives of Dermatology 1991; 127: 1689-1692.

147. Watson, T. Diet and skin disease: 1. The importance of polyunsaturated fatty acidis and zinc. Proceeding of the 16th Annual Congress of the European College of Veterinary Dermatology, Helsinki 1999: 77-78.