Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему
Препарат Бромдезин для дезинфекции объектов ветеринарно-санитарного надзора
ВАК РФ 06.02.02, Кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов

Автореферат диссертации по теме "Препарат Бромдезин для дезинфекции объектов ветеринарно-санитарного надзора"

005017947

На правах рукописи

ЛАКАЕВ БАХРОМДЖОН БОБОЖОНОВИЧ

ПРЕПАРАТ БРОМДЕЗИН ДЛЯ ДЕЗИНФЕКЦИИ ОБЪЕКТОВ ВЕТЕРИНАРНО-САНИТАРНОГО НАДЗОРА

06.02.02 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

1 9 ДПР 2012

Душанбе-2012

005017947

Работа выполнена в лаборатории болезней птиц Института ветеринарии Таджикской академии сельскохозяйственных наук, Национальном центре ветеринарной диагностики Службы государственного ветеринарного надзора Министерства сельского хозяйства Республики Таджикистан.

Научный руководитель: Научный консультант:

Официальные оппоненты:

Ведущая организация:

доктор ветеринарных наук Салимов Тоджиддин Мухиддинович

доктор ветеринарных наук, профессор, член-корреспондент ТАСХН Мирзоев Давлатали Мирзоевич

доктор ветеринарных наук Муминов Абдулло Мумннович

кандидат ветеринарных наук Турдиев Шамсулло Абдуллоевич

Таджикский аграрный университет им. Ш. Шотемура

Защита диссертации состоится « 27 » апреля 2012 г. в 10.00 часов на заседании диссертационного совета ДМ 050.001.01 при Институте ветеринарии Таджикской академии сельскохозяйственных наук по адресу: 734005, Республика Таджикистан, г. Душанбе, ул. А. Каххорова, 43, ИВ ТАСХН, тел. (992-372) 27-39-95.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института ветеринарии ТАСХН.

Автореферат разослан « 27 » марта 2012 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат ветеринарных наук

~ Л".

З.Д. Ашурова

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы. Обеспечение микробиологической безопасности обусловлено увеличением эпидемической и эпизоотической опасности в результате циркуляции возбудителей антропозоонозных инфекций, которые не только длительно сохраняются в окружающей среды, но при способствующих условиях могут естественным образом нарастать (Ю.Е. Шахотин с соавт., 1996; В.П. Урбан, 1998). Эффективное использование технологий инактивации (современные дезинфекционные мероприятия) позволяет предупредить и устранить микробиологическую опасность, выражающуюся как в наличиии неуправляемых, так и управляемых вакцинами инфекций (Н.Х. Мамаев, 2000; М.Г. Шандала, 2002; В.В. Буянов с соавт., 2003; R.D. Harris et al., 2001).

У микроорганизмов устойчивость к внешним воздействиям, особенно химическими средствами, неодинакова и существенно различается (А.Г. Батиашвилли, 1997; Н.И. Попов с соавт., 1999; М.И. Леви с соавт., 2001; В.М. Бахир с соавт., 2003).

Резистентность может развиваться в результате изменения проницаемости бактериальных мембран, биохимических адаптационных изменений в клетках, образования некультивированных форм неспорообразующих возбудителей (А.Б. Агафонова, 1997; В.В. Буянов с соавт., 1999; Н.Ф. Соколова, 2002; В.Г. Ощепков с соавт., 2003).

Контаминация объектов ветеринарно-санитарного надзора резистентными к антисептикам и дезинфектантам микроорганизмами определяет выбор дезинфекционной технологии, адекватной соответствующей ситуации (Е.А. Zottola et al., 1994; N.G. Khalil, 1997; M.S. Favero et al. 2000; J. Richards, 2002).

Ликвидация источника инфекции во внешней среде, уничтожение возбудителя достигается дезинфекцией, целью которой является уничтожение только патогенных микроорганизмов, а не всех вообще микробов, населяющих объект, подвергающийся дезинфекции, что отличает ее от стерилизации, при которой вместе с патогенными уничтожаются и другие микроорганизмы (А. А. Поляков, 1986).

Различные источники, пути и факторы передачи обусловливают разнообразие дезинфектологических технологий, основанных на применении как антимикробных (дезинфицирующих или стерилизующих) средств борьбы с возбудителями, так и инсектицидных, акарицидных, родентицидных и репеллентных препаратов и устройств для борьбы с членистоногими и грызунами - переносчиками опасных заболеваний (М.Г. Таршис с соавт., 1997; К.Ш. Досанов, 1999).

Отсутствие современного ассортимента дезинфектантов, непрерывно возрастающие требования к их характеристикам, изменение сырьевых возможностей производства, повышением требований и ограничений экологического характера объясняют непрерывный поиск новых

дезинфицирующих средств (A.A. Закомырдин, 2004), что обусловливает актуальность настоящей диссертационной работы.

Целью исследований явилось научно-методическое обоснование комплекса мероприятий по обеспечению эпизоотического благополучия объектов ветеринарно-санитарного надзора, разработка и внедрение в ветеринарную практику нового высокоэффективного дезинфектанта, обладающего бактерицидным действием, и способов его применения на объектах ветеринарно-санитарного надзора.

Для достижения поставленной цели решены следующие задачи:

1. Исследовать эпизоотическую обстановку на продовольственных рынках г. Душанбе и птицефабриках Республики Таджикистан.

2. Обосновать состав и технологию изготовления нового дезинфектанта Бромдезин.

3. Определить бактерицидные свойства Бромдезина и устойчивость-чувствительность к нему выделенных микроорганизмов.

4. Изучить токсичность и опасность этого препарата.

5. Обосновать и разработать оптимальные режимы профилактической и вынужденной дезинфекции Бромдезином.

6. Провести производственные испытания его эффективности.

Научная новизна. Впервые осуществлен микробиологический

мониторинг продовольственных рынков г. Душанбе и птицефабрик Республики Таджикистан по проблеме ветеринарно-санитарного надзора на этих объектах и установлена значимость этого вопроса для ветеринарной медицины. Для производства нового дезинфектанта Бромдезин в качестве действующего вещества использовали 2-бром-7-метил-5-оксо-5Н-1,3,4-тииадиазоло[3,2-а]пиримидин, проявляющий

высокую антибактериальную активность, которая сохраняется и в новом препарате.

Разработан состав Бромдезина, изучен его ингибирующий эффект, который проявляется в отношении паспортизированных штаммов Е. coli и St. aureus в концентрации 0,039%, а полевых вирулентных штаммов этих культур - 0,019% основного раствора. Изучены токсичность и опасность Бромдезина, который по ГОСТу 12.1.007-76 относится к третьему классу опасности (умеренно токсическое вещество).

Определена эффективность препарата при профилактической и вынужденной дезинфекции, отработан рациональный способ его применения. Производственные испытания выявили 100%-ную эффективность Бромдезина в отношении микроорганизмов 1-й 2-ой групп устойчивости.

Практическая ценность. На основании полученных результатов Бромдезин предложен в качестве дезинфицирующего средства при профилактической и вынужденной дезинфекции объектов ветеринарно-санитарного надзора

Материалы диссертации вошли в нормативную документацию, утвержденную Службой государственного ветеринарного надзора Министерства сельского хозяйства (МСХ) Республики Таджикистан (РТ):

1. Инструкция о мероприятиях по борьбе с сальмонеллезом птиц (утв. СГВНМСХРТ 11.04.2008 г.).

2. Инструкция о мероприятиях по борьбе с колибактериозом птиц (утв. СГВНМСХРТ 11.04.2008 г.).

3. Инструкция о мероприятиях по борьбе с пастереллезом птиц (утв. СГВН МСХ РТ 11.04.2008 г.).

4. Временное наставление по применению дезинфицирующего средства Бромдезин для дезинфекции объектов ветнадзора (утв. СГВН МСХ РТ 17.09.2011 г.).

Основные положения диссертационной работы, выносимые на защиту:

1. Результаты микробиологического мониторинга на продовольственных рынках г. Душанбе и птицефабриках Республики Таджикистан.

2. Состав и технология изготовления нового дезинфектанта Бромдезин.

3. Результаты определения бактерицидных свойств Бромдезина и устойчивости-чувствительности к нему выделенных микроорганизмов.

4. Результаты изучения токсичности и опасности Бромдезина.

5. Схема профилактической и вынужденной дезинфекции Бромдезином.

6. Результаты производственных испытаний его эффективности.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены на

заседаниях ученого совета Института ветеринарии ТАСХН (2007 - 2011 гг.); республиканских и областных семинарах-совещаниях ветеринарных работников РТ (2007 - 2011 гг.); Международной научной конференции «Ветеринарные проблемы Центральной Азии - продовольственная безопасность: использование современных методов диагностики и профилактики инфекционных болезней животных» (2011 г.).

Публикации. По результатам исследований опубликованы в печати 6 научных работ.

Структура и объем диссертации. Работа состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, практических предложений, списка литературы и приложения.

Диссертация изложена на 110 страницах, иллюстрирована 10 таблицами и 8 рисунками. Список литературы содержит 187 источников. В приложение включены материалы, подтверждающие внедрение результатов исследования в практику.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Работа выполнялась с 2006 по 2011 гг. в условиях лаборатории болезней птиц Института ветеринарии Таджикской академии сельскохозяйственных наук, Национальном центре ветеринарной диагностики Службы государственного ветеринарного надзора Министерства сельского хозяйства Республики Таджикистан, в Государственных унитарных предприятиях «Саховат» и «Шохмансур», ООО «Тарз» (район Вахдат), ООО «Фаришта» (район Вахдат), ООО «Дипломат» (район Рудаки), ООО «Паррандапарварии Худжанд» и ЧП «Орипов» (Согдийская область).

В исследованиях использовались паспортизированные тест-культуры, перечень которых изложен в соответствующих разделах диссертации.

Вид возбудителя, питательные среды и методы культивирования выбирали с учетом конкретных задач и условий работы.

Изучение чувствительности выделенных микроорганизмов (из объектов ветеринарно-санитарного надзора) к различным антимикробным средствам и дезинфектантам, проводили в соответствии с «Методическими рекомендациями по ускоренному определению устойчивости бактерий к дезинфицирующим средствам» (10.01.2000 г.)

Определение бактерицидной активности испытуемого препарата проводили в пробирочных опытах по методу серийных разведений согласно «Методическим рекомендациям по дезинфекции при туберкулезе животных» Ю.Я. Кассич (1987), а также на тканевых тест-носителях бактериальной взвеси в соответствии с «Методическими указаниями о порядке испытания новых дезинфицирующих средств для ветеринарной практики».

Токсикологическую оценку препарата проводили согласно методическим указаниям МУ 1.2.1105-02. Оценка токсичности и опасности дезинфицирующих средств.

В качестве лабораторных животных при постановке биопробы для определения ЛД50; ЛД100; кожно-резорбтивного и местно-раздражающего действия использовали 252 белых мыши, 108 крыс, 72 кролика.

Суммарную площадь помещений, подлежащих дезинфекции, рассчитывали из данных длинны, ширины, высоты с добавлением 30% площади двух боковых стен согласно методике предложенной И.А. Дудницким с соавт. (1989).

Оценку качества дезинфекции помещений проводили согласно методике, изложенной в «Правилах проведения дезинфекции и дезинвазии объектов государственного ветеринарного надзора» от 15.07.02 г.

Отдельные методические приемы представлены по ходу изложения материала диссертации.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Микробиологический монитринг 3.1.1. Анализ циркуляции условно-патогенной микрофлоры на продовольственных рынках

Для изучения видового состава условно-патогенной микрофлоры, циркулирующей на продовольственных рынках Душанбе (Государственное унитарное предприятие «Саховат», Государственное унитарное предприятие «Шохмансур»), провели сравнительный анализ результатов лабораторных исследований смывов с пола, стен, оборудования и прилавков.

Установлено, что объекты ветеринарно-санитарного надзора обсеменены бактериями родов Staphilococcus, Streptococcus, Escherichia, Proteus, Pseudomonas, Klebsiella, Salmonella, Bacillus. Из 956 смывов, сделанных в Государственном унитарном предприятии «Саховат», в 115 выделена условно-патогенная микрофлора: Staphilococcus - 28, Escherichia

- 28, Proteus - 16, Bacillus - 16, Pseudomonas - 12, Salmonella - 8, Streptococcus - 4, Klebsiella - 3. На Государственном унитарном предприятии «Шохмансур» сделано 967 смывов, в которых выделили 147 изолятов: Escherichia - 39, Proteus - 26, Bacillus - 23, Pseudomonas - 21, Staphilococcus - 18, Salmonella - 12, Klebsiella - 6, Streptococcus - 2.

Полы и стены продовольственных рынков наиболее контаминированы Escherichia: ГУЛ «Саховат» - соответственно 4,7%, 2,8%, ГУП «Шохмансур» - 4,9%, 5,1%. Наибольшее количество изолятов, выделенных с оборудования, были представлены Staphilococcus - 4,6% (ГУП «Саховат») и Salmonella- 5,1% (ГУП «Шохмансур»). Прилавки были больше обсеменены Bacillus - 2,6% (ГУП «Саховат») и Pseudomonas -3,1% (ГУП «Шохмансур»),

Кроме того, на ГУП «Саховат» идентифицированы бактерии родов Staphilococcus (полы - 4,3%, стены - 1,6%, прилавки - 2%), Streptococcus (стены - 1,6%), Escherichia (оборудование и прилавки - по 2%), Proteus (полы - 2%, стены - 1,2%, оборудование - 3,3%, прилавки - 1%), Pseudomonas (полы 2,7%, прилавки - 1,7%), Klebsiella (стены - 0,8%, прилавки - 0,3%), Salmonella (стены - 1,2%, оборудование - 3,3%), Bacillus (полы - 1,2%, стены - 0,4%, оборудование - 2,6%), на ГУП «Шохмансур»

- Staphilococcus (полы - 1,1%, стены и оборудование - по 2,8%, прилавки -1,4%), Streptococcus (стены - 0,9%), Escherichia (оборудование - 4%, прилавки - 2,4%), Proteus (полы - 3,5%, стены - 3,7%, оборудование -1,1%, прилавки - 2%), Pseudomonas (полы - 4,2%), Klebsiella (стены -1,9%, прилавки - 0,7%), Salmonella (стены - 1,4%), Bacillus (полы - 1,4%, стены - 4,7%, оборудование - 2,8%, прилавки 1,4%).

Таким образом, установлено, что объекты ветеринарно-санитарного надзора обсеменены условно-патогенной микрофлорой и существует потенциальная опасность заражения человека.

3.1.2. Ветерипарно-санитарная оценка циркуляции условно-патогенной микрофлоры на птицефабриках

Бактериологические исследования, проведенные в ООО «Тарз» (район Вахдат), ООО «Фаришта» (район Вахдат), ООО «Дипломат» (район Рудаки), ООО «Паррандапарварии Худжанд» и ЧП «Орипов» (Согдийская область), выявили, что на птицефабриках циркулирует условно-патогенная микрофлора родов Staphilococcus, Streptococcus, Escherichia, Proteus, Pseudomonas, Klebsiella, Salmonella, Bacillus.

В ООО «Тарз» были сделаны смывы (по 100) со стен, полов, клеток, кормушек, поилок в птичнике, а также в производственных помещениях и автофургонах, где были выделены изоляты: Staphilococcus - 15, Streptococcus - 7, Escherichia - 11, Proteus- 6, Pseudomonas - 5, Klebsiella -6, Salmonella - 3, Bacillus - 5.

Результаты микробиологического мониторинга в ООО «Фаришта» свидетельствуют о циркуляции на фабрике условно-патогенной микрофлоры, представленной родами Staphilococcus, Streptococcus, Escherichia, Proteus, Pseudomonas, Klebsiella, Salmonella, Bacillus, изоляты которых были выделены из смывов (по 100) со стен (Staphilococcus, Streptococcus, Escherichia, Proteus, Klebsiella, Salmonella, Bacillus - no 1, Pseudomonas - 2), полов (Staphilococcus, Escherichia, Proteus, Pseudomonas, Klebsiella, Bacillus - no 1, Streptococcus - 2), поилок (Staphilococcus, Streptococcus, Escherichia, Proteus, Pseudomonas, Salmonella, Bacillus - no 1, Klebsiella - 2) и кормушек (Staphilococcus, Streptococcus, Escherichia, Pseudomonas, Klebsiella, Salmonella, Bacillus - no 1).

Аналогичную картину наблюдали в ООО «Дипломат», где на тех же объектах ветеринарно-санитарного надзора выделили 26 изолятов, в том числе по 4 Staphilococcus, Streptococcus, Pseudomonas, Salmonella, 5 Escherichia, по 3 Proteus и Klebsiella, 2 Bacillus.

В ООО «Паррандапарварии Худжанд» и ЧП «Орипов» смывы (по 100) были взяты со стен, пола, оборудования убойного цеха и в инкубатории (инкубационный и выводной шкафы, пол, стены), где также выделены изоляты условно-патогенной микрофлоры (24), представленной родами Staphilococcus, Streptococcus, Escherichia, Proteus, Pseudomonas, Klebsiella.

Следовательно, для птицеводческих предприятий яичного направления, применяющих как клеточное, так и напольное содержание, расположенных в различных регионах Республики Таджикистан, важной является проблема распространения условно-патогенной микрофлоры.

Результаты микробиологического мониторинга, осуществленного на 2 продовольственных рынках города Душанбе (Государственное унитарное предприятие «Саховат», Государственное унитарное предприятие «Шохмансур») и 5 птицефабриках Республики Таджикистан (ООО «Тарз» - район Вахдат, ООО «Фаришта» - район Вахдат, ООО «Дипломат» - район Рудаки, ООО «Паррандапарварии Худжанд» и ЧП

«Орипов» - Согдийская область) выявили актуальность проблемы ветеринарно-санитарного надзора для этих предприятий, решение которой имеет значение не только для ветеринарной медицины, но и для здравоохранения.

Микробиологический спектр условно-патогенной микрофлоры определил выбор действующего вещества (2-бром-7-метил-5-оксо-5Н-1,3,4-тииадиазоло[3,2-а]пиримидина, проявляющего высокую

противобактериальную активность (Т.М. Салимов с соавт., 2002; М.А. Куканиев с соавт., 2004) для изготовления дезинфицирующего средства Бромдезин.

3.2. Физико-химические свойства Бромдезина

Из изготовленной (19.01.2007 г.) в Институте ветеринарии ТАСХН серии (01) дезинфицирующего средства Бромдезин для проверки его качества сделали выборку (ГФ XI, вып. 2, с. 15 - 17), часть которой для определения стабильности оставили на хранение в складском помещении производственного отдела Института ветеринарии ТАСХН.

Физико-химические свойства дезинфектанта Бромдезин определяли в лаборатории гетероциклических соединений Института химии им. В.И. Никитина АН РТ.

Химический состав Бромдезина определяли согласно действующим методикам. Препарат представляет собой сбалансированную смесь 2-бром-7-метил-5-оксо-5Н-1,3,4-тииадиазоло[3,2-а]пиримидина (5%), твина-80 (0,5%), нитрита натрия (0,5%), красителя Е 142 (0,002%) и воды (до 100%).

Органолептические свойства. Бромдезин - прозрачная жидкость зеленого цвета, пенящаяся при взбалтывании. Препарат относится к не воспламеняющимся жидкостям, не взрывоопасен.

Плотность Бромдезина, которую определяли при 20°С с помощью ареометра (ГФ XI, вып. 1, с. 24), составляет 1,014.

рН Бромдезина, определенная потенциометрическим методом (ГФ XI, вып. 1, с. 113), находилась в пределах 6,5 - 7,0.

Подлинность_2-бром-7-метил-5-оксо-5Н-1,3,4-тиадиазоло[3.2-

al пиримидина устанавливали методом тонкослойной хроматографии на пластинах с силикагелем (ГФ XI, вып. 1, с. 102 - 105). В качестве растворителя использовали диметилсульфоксид (ДМСО). Стеклянную хроматографическую камеру заполняли на высоту 5 - В мм растворителем, герметично закрывали и выдерживали не менее 30 мин для насыщения парами растворителя.

Для приготовления стандартного раствора 2-бром-7-метил-5-оксо-5Н-1,3,4-тиадиазоло[3,2-а]пиримидина брали точную навеску 0,0500 г его образца, взвешивали с погрешностью не более 0,0002 г, помещали в мерную колбу объемом 100 мл и растворяли в 50 мл ДМСО. Затем объем содержимого колбы доводили до метки диметилсульфоксидом и

тщательно перемешивали. Получали стандартный раствор 2-бром-7-метил-5-OKCO-5H-1,3,4-тиадиазоло[3,2-а]пиримидина.

По 10 мкл растворов стандартного образца 2-бром-7-метил-5-оксо-5Н-1,3,4-тиадиазоло[3,2-а]пиримидина и исследуемого препарата наносили на линию старта хроматографической пластинки в точки, отстоящие одна от другой на 2 см. Пластину с нанесенными пробами высушивали при 100°С в течение 5 мин, а затем помещали в камеру для хроматографирования. Когда фронт растворителя поднимался на 10 - 12 см, пластинку вынимали из камеры и сушили при 100°С до проявления пятен. Пластинку просматривали в УФ-свете.

Пятна, полученные при хроматографировании растворов стандартного и исследуемого образца, были сходными и совпадали по показателю Rf (овальное пятно с RF около 0,5). В испытуемом образце допускается примесь на старте, других пятен быть не должно.

Массовую долю 2-бром-7-метил-5-оксо-5Н-1,3.4-тиадиазоло[3,2-аЫиуимидина в Бромдезине определяли микробиологическим методом диффузии в агар с использованием тест-культуры Escherichia coli АТСС 26, которую выращивали при 37°С в течение 24 ч в пробирках со скошенным мясопептонным агаром (рН 7,0 - 7,2). Затем ее смывали с питательной среды стерильным физиологическим раствором. Полученную взвесь хранили в запаянных ампулах при температуре 4 - 10°С и использовали до тех пор, пока культура давала четкие, резко очерченные зоны задержки роста Для контроля активности 2-бром-7-метил-5-оксо-5Н-1,3,4-тиадиазоло[3,2-а]пиримидина применяли 1-миллиардную взвесь суточной культуры.

Для приготовления основного раствора стандартного образца 2-бром-7-метил-5-оксо-5Н-1,3,4-тиадиазоло[3,2-а]пиримидина навеску стандартного его образца (2,0 - 2,5 г), взвешенную с погрешностью не более 0,0002 г, растворяли в 2 мл ДМСО. Полученную смесь растворяли в фосфатном буфере №4 (ГФ XI, вып. 2, с. 223; рН 7,8 - 8,0) до концентрации 1000 мкг в 1 мл. Этот раствор хранили в стеклянной посуде с притертой пробкой при температуре 4 - 6°С не более двух недель.

В день проведения испытания из основного раствора стандарта 2-бром-7-метил-5-оксо-5Н-1,3,4-тиадиазоло[3,2-а]пиримидина на фосфатном буфере №4 последовательными разведениями готовили пять растворов с концентрациями 0,078; 0,155; 0,31; 0,62 и 1,24 мкг/мл, которые использовали для построения стандартной кривой. Раствор, содержащий 0,31 мкг/мл 2-бром-7-метил-5-оксо-5Н-1,3,4-тиадиазоло[3,2-а]пиримидина, являлся контрольным.

Для приготовления питательной агаровой среды в 1000 мл дистиллированной воды вносили последовательно следующие компоненты: 6,0 г пептона; 4,0 г панкреатического гидролизата казеина, сухого; 3,0 г дрожжевого экстракта, сухого; 1,5 г мясного экстракта, сухого; 10,0 г агар-агара Агар-агар предварительно замачивали в

небольшом количестве из общего объема дистиллированной воды. Среду варили при температуре не выше 100°С, не допуская сильного кипения, до полного расплавления агара. Затем среду фильтровали через ватно-марлевый фильтр, устанавливали pH среды 10% раствором гидроокиси натрия до значения 8,2 - 8,4, разливали в колбы и стерилизовали автоклавированием при 0,5 кгс/см3 в течение 30 мин. Значение pH среды после стерилизации было 8,0 - 8,2.

Среду расплавляли на водяной бане, охлаждали до 48 - 50°С, после чего добавляли суспензию суточной культуры Е. coli АТСС 26 из расчета 20 - 40 млн микробных тел на 1 мл среды, перемешивали и разливали по 15 мл в каждую чашку Петри. После застывания среды в каждой чашке бором делали по 6 лунок.

Из раствора Бромдезина, содержащего 1,24 мкг 2-бром-7-метил-5-оксо-5Н-1,3,4-тиадиазоло[3,2-а]пиримидина в 1 мл путем последовательных разведений на фосфатном буфере №4 готовили рабочие растворы, которые в качестве исследуемых закапывали в чашки.

Для определения 2-бром-7-метил-5-оксо-5Н-1,3,4-тиадиазоло[3,2-а]пиримидина концентрация исследуемого раствора соответствует 0,31 мкг/мл.

Дальнейшее получение и обработку результатов проводили по общепринятой методике (ГФ XI, вып. 2, с. 210 - 217).

33. Бактерицидные свойства Бромдезина 3.3.1. Определение методам серийных разведений

Общепринятым методом серийных разведений определили минимальные бактерицидные ингибирующие концентрации Бромдезина. При контроле на бактерицидность использовали музейные штаммы Е. coli (штамм АТСС-25922), St. aureus (штамм 6538p), Вас. subtilis 6633 и полевые вирулентные штаммы Е. coli и St. aureus.

Установлено, что ингибирующий эффект Бромдезина проявляется в очень низких концентрациях: для Е. coli (штамм АТСС-25922) и St. aureus (штамм 6538p) она составила 0,039%, а для полевых вирулентных штаммов этих культур соответствующая концентрация была еще меньше -0,019% основного раствора.

3.3.2. Испытание на тканевых тест-объектах

В лабораторных условиях в соответствии с «Методическими указаниями о порядке испытания новых дезинфицирующих средств для ветеринарной практики» (07.01.1987 г.) изучили дезинфицирующую активность Бромдезина, используя в качестве тест-микроорганизмов музейные штаммы Е. coli (штамм АТСС-25922), St. aureus (штамм 6538p), Вас. subtilis 6633.

Обсемененные культурой испытуемых микроорганизмов батистовые тест-объекты погружали в рабочие растворы (0,5; 1,0; 2,0; 3,0; 4,0%)

Бромдезина, в течение первых 30 минут каждые 5 мин, затем каждые 10 мин до 60 мин стерильной петлей вынимали из раствора по 2 тест-объекта, дважды промывали в стерильной воде и делали посев на среды в зависимости от вида микроорганизма. Исследование проводили в трех повторностях.

Результы проведенных исследований свидетельствуют, что с увеличением времени экспозиции надежный стерилизующий эффект можно достигнуть меньшими концентрациями Бромдезина, бактерицидные свойства 0,5%-ная концентрация рабочего раствора которого проявляла в отношении Е. coli (шт. АТСС-25922) и St. aureus (шт. 6538p) соответственно через 50 и 60 мин, 1,0%-ная - через 30 и 50, 2%-ная - через 25 и 30, 3%-ная - через 10 и 15, а 4%-ная - через 5 и 10 мин. Кроме того, 2%-ная концентрации рабочего раствора Бромдезина оказалась бактерицидной для Вас. subtilis 6633 через 60 мин, а 3 и 4%-ные - через 50 мин.

3.4. Токсичность и опасность Бромдезина

3.4.1. Острая токсичность при введении в желудок

Белым мышам и крысам растворы Бромдезина вводили в желудок с помощью металлического зонда и микрошприца в объемах соответстенно 1 и 5 мл в дозах 300 мг/кг массы тела (1-я группа), 600 (2-я), 900 (3-я), 1200 (4-я), 1500 мг/кг массы тела (5-я группа). Контрольным животным в соответствующих объемах и дозах вводили дистиллированную воду.

Летальный исход и характер клинической картины служили критериями оценки острой токсичности Бромдезина.

Бромдезин в дозе 300 мг/кг массы тела как у белых мышей, так и у крыс не вызывал каких-либо клинических изменений, при введении больших доз (600, 900, 1200 и 1500 мг/кг массы тела) наблюдали токсикоз.

При изучении острой токсичности Бромдезина на белых мышах и крысах определены параметры острой токсичности: МПД - 300 мг/кг, ЛДюо - 1500, ЛД50 - соответственно 840 и 900 мг/кг массы тела.

3.4.2. Острая токсичность при нанесении на кожу

Способность 4 - 6%-ных растворов Бромдезина проникать через

неповрежденную кожу и вызывать токсический эффект оценивали на белых мышах и кроликах, которым делали однократные и многократные (12) аппликации.

При однократной аппликации на кожу в соответствии с классификацией опасности по выраженности местно-раздражающих свойств дезинфицирующих средств на коже (1 класс (более 6 баллов) -резко выраженное, 2 (4,1 - 6,0 баллов) - выраженное, 3 (2,1 - 4,0 балла) -умеренное, 4 класс (0 - 2,0 балла) - слабое или отсутствие) оценивали действие Бромдезина.

Максимальную концентрацию Бромдезина, вызывающую минимальный эффект у животных, принимали за порог раздражающего

действия. Регистрировали также минимальную концентрацию препарата, не вызывающую раздражение кожи.

При однократных и многократных хвостовых пробах на белых мышах и аппликациях на кроликах функционально-морфологических нарушений кожи, отказа от корма и гибели животных не отмечено.

3.4.3. Местпо-раздражающее действие на слизистые оболочки глаз Местно-раздражающее действие на слизистую глаз оценивали на кроликах (п=3), которым 4 - 6%-ные растворы Бромдезина при помощи пипетки в конъюнктивальный мешок однократно наносили по две капли. Реакцию слизистой глаза учитывали сразу после воздействия препарата, через 1 час, далее ежедневно в течение 10 дней.

В соответствии с классификацией по выраженности раздражающих свойств испытуемого средства на глаз (1 класс (более 11 баллов) - резко выраженное, 2 (7 - 10 баллов) - выраженное, 3 (4 - 6 баллов) - умеренное, 4 (1 - 3 балла) — слабое, 5 класс (0 баллов) - отсутствие) оценивали действие Бромдезина

Негативным считали действие препарата, выражавшееся гиперемией и отеком конъюнктивы, инъекцией сосудов склеры, учитывали состояние роговицы и радужной оболочки, количество и качество выделений из глаза.

В течение 3-4 дней с момента нанесения 6%-ного раствора Бромдезина у кроликов наблюдали отек век, выделения с увлажнением век и шерсти, прилегающей к векам. Помутнения роговицы не отмечено. Других изменений у кроликов в течение срока наблюдения (10 дней) не выявлено. 3 - 4%-ные растворы препарата не вызывали видимых изменений слизистых глаза.

3.4.4. Ингаляционная опасность В герметических емкостях (эксикатор), в котором создавались условия свободного испарения (при комнатной температуре в течение суток), в насыщающих концентрациях оценили ингаляционную опасность Бромдезина. Исследования провели на белых мышах статистическим методом из расчета объема воздуха на одно животное в час (для мышей - 2 л) с экспозицией 3 ч. В соответствии с классификацией химических веществ по степени летучести (1 = +20°С) (насыщающая концентрация: а) вызывает гибель - 1 класс опасности - чрезвычайно опасное вещество; б) вызывает отчетливые проявления интоксикации, гибель отсутствует - 2 -высоко опасное; в) вызывает минимальные изменения интегральных показателей при обследовании животных - 3 - умеренно опасное; г) не оказывает токсического действия - 4 класс опасности - малоопасное) по степени проявления интоксикации установили опасность ингаляционного отравления.

Видимых токсических проявлений у белых мышей при проведении опыта не наблюдали.

По классификации степени опасности химических веществ (ГОСТ 12.1.007-76) препарат Бромдезин относится к третьему классу опасности (умеренно токсическое вещество).

3.5. Определение дозировки и схемы применения препарата Бромдезин

Для экспериментального определения эффективности Бромдезина и разработки схемы применения препарата в зависимости от устойчивости микроорганизмов (1, 2 группы), цели дезинфекции (профилактическая / вынужденная: текущая или заключительная), способа обработки (влажный: орошение, погружение или протирание), нормы расхода (0,4; 0,5; 0,6 л/м2) и концентрации (0,5; 1,0; 2,0; 3,0; 4,0%) рабочего раствора, экспозиции (пробы на наличие микрофлоры отбирали через 30, 60, 120, 180 мин) и объекта дезинфекции (цемент (бетон), стекло, железо, дерево (масляная краска) в 2009 г. на объектах ветеринарно-санитарного надзора провели ограниченные производственные испытания.

В соответствии с «Правилами проведения дезинфекции и дезинвазии объектов государственного ветеринарного надзора» (15.07.02 г.) перед нанесением рабочих растворов дезинфектанта поверхности помещений были очищены.

Отбор проб-смывов для определения микробной обсемененности объектов ветеринарного надзора производили перед обработкой и после нее.

Установлено, что для микроорганизмов 1-ой группы устойчивости при дезинфекции цемента наиболее эффективна 2% концентрация Бромдезина в количестве 0,6 л/м2 при экспозиции 180 мин (эффективность - 100%), стекла железа и дерева (масляная краска) - та же концентрация в количестве 0,5 л/м2 при экспозиции 120 мин (эффективность - 100%). Эффективная обработка (100%) цемента при контаминации микроорганизмами 2-ой группы устойчивости достигается применением 3% концентрации Бромдезина в количестве 0,6 л/м2 при экспозиции 180 мин, а при дезинфекции стекла, железа и дерева (масляная краска) Бромдезин необходимо использовать в той же концентрации и при той же экспозиции, расходуя 0,5 л/м2.

В резултате проведенных исследований разработана схема применения дезинфицирующего средства Бромдезин:

Профилактическая дезинфекция

- влажный способ (орошение, погружение или протирание)

1%, 0,5 л/м2,120 мин

неокрашенное дерево, цемент, резина - 0,6 л/м2, 2 раза с интервалом 180 мин

Вынужденная дезинфекция

а) текущая

- влажный способ (орошение, погружение или протирание)

1 группа-2%, 0,5 л/м2, 120 мин

2 группа-3%, 0,5 л/м2,180 мин

неокрашенное дерево, цемент, резина - 0,6 л/м2, 2 раза с интервалом 180 мин

б) заключительная

- влажный способ (орошение, погружение или протирание)

1 группа -2%, 0,5 л/м2,120 мин

2 группа - 3%, 0,5 л/м2, 180 мин

неокрашенное дерево, цемент, резина - 0,6 л/м2, 2 раза с интервалом 180 мин.

З.б. Результаты производственных испытаний дезинфицирующего средства Бромдезии

На предмет оценки специфической дезинфицирующей, бактерицидной активности препарата Бромдезин проведены производственные испытания (2010 г.) в ООО «Тарз» (район Вахдат) и на продовольственном рынке г. Душанбе Государственное унитарное предприятие «Саховат».

Препарат применяли согласно наставлению.

Перед нанесением рабочих растворов Бромдезина поверхности были очищены, а отбор проб-смывов для определения микробной обсемененности объектов ветеринарного надзора производили перед обработкой и после нее.

Вынужденная дезинфекция. Учет специфической активности препарата «Бромдезин» проводили в ООО «Тарз» (район Вахдат) после заключительной обработки препаратом (вынужденная дезинфекция) птичника (стен, полов, клеток, поилок и кормушек), а также производственных помещений и автофургонов.

После обработки формальдегидом и едким натрием в смывах с полов и стен на уровне 1,5 м отмечена низкая, клеток, поилок и кормушек -средняя степень роста бактерий.

После заключительной дезинфекции 3% раствором Бромдезина в количестве 0,5 л/м2 при экспозиции 180 мин влажным способом в смывах с тех же объектов роста бактерий не выявлено.

В производственных помещениях и для дезинфекции автофургонов Бромдезин применяли в 3% концентрации в количестве 0,6 л/м2 2 раза с интервалом 180 мин.

Посев смывов с указанных объектов на твердые питательные среды показал высокий рост бактерий (из 50 смывов - 50 положительных). Двукратная обработка 3% раствором Бромдезина производственных помещений и автофургонов обеспечила полное уничтожение микрофлоры. Рост на питательных средах при посеве смывов (50 шт.) в этом случае отсутствовал.

Профилактическая дезинфекция. Для обработки полов, стен, оборудования и прилавков в Государственном унитарном предприятии «Саховат» влажным способом применяли 1% раствор Бромдезина в количестве 0,5 л/м2 при экспозиции 120 мин.

Перед применением препарата с объектов ветеринарно-санитарного надзора были сделаны смывы и выявлена условно-патогенная микрофлора в 20% проб, которая была представлена бактериями родов Staphilococcus, Streptococcus, Escherichia, Proteus, Pseudomonas, Salmonella.

Критерием обеззараживания считали отсутствие роста санитарно-показательной микрофлоры из смывов с поверхностей, орошенных растворами испытуемого препарата, при наличии роста микрофлоры из смывов с контрольных (орошение водой) поверхностей.

После дезинфекции Бромдезином ни в одном смыве из 105 роста бактерий не наблюдали, что свидетельствует о 100%-ной эффективности препарата при профилактической обработке объектов ветеринарно-санитарного надзора.

Таким образом, производственные испытания дезинфицирующего средства Бромдезин подтвердили результаты ограниченных производственных испытаний (разработана схема применения препарата при различных видах дезинфекции) и 100%-ную эффективность препарата при профилактической и вынужденной дезинфекции объектов ветеринарно-санитарного надзора.

4. ВЫВОДЫ

1. Результаты микробиологического мониторинга, осуществленного на 2 продовольственных рынках города Душанбе (Государственное унитарное предприятие «Саховат», Государственное унитарное предприятие «Шохмансур») и 5 птицефабриках Республики Таджикистан (ООО «Тарз» - район Вахдат, ООО «Фаришта» - район Вахдат, ООО «Дипломат» - район Рудаки, ООО «Паррандапарварии Худжанд» и ЧП «Орипов» - Согдийская область) выявили актуальность проблемы ветеринарно-санитарного надзора для этих предприятий, решение которой имеет значение не только для ветеринарной медицины, но и для здравоохранения.

2. Для производства дезинфицирующего средства Бромдезин в качестве действующего вещества применили 2-бром-7-метил-5-оксо-5Н-1,3,4-тииадиазоло[3,2-а]пиримидин, проявляющий высокую противобактериальную активность, подтвержденную результатами изучения ингибирующего действия Бромдезина.

3. Ингибирующий эффект Бромдезина проявляется в очень низких концентрациях: для Е. coli (штамм АТСС-25922) и St. aureus (штамм 6538p) - 0,039%, а для полевых вирулентных штаммов этих культур соответствующая концентрация составила 0,019% основного раствора.

4. С увеличением времени экспозиции надежный стерилизующий эффект можно достигнуть меньшими концентрациями Бромдезина: 0,5%-ная концентрация рабочего раствора проявляла активность в отношении Е. coli (шт. АТСС-25922) и St. aureus (шт. 6538p) соответственно через 50 и 60 мин, 1,0%-ная - через 30 и 50, 2%-ная - через 25 и 30,3%-ная - через 10 и 15, а 4%-ная - через 5 и 10 мин. Кроме того, 2%-ная концентрации рабочего раствора Бромдезина оказалась бактерицидной для Вас. subtilis 6633 через 60 мин, а 3 и 4%-ные - через 50 мин.

5. При изучении острой токсичности Бромдезина на белых мышах и крысах определены параметры острой токсичности: МПД - 300 мг/кг, ЛДюо - 1500, ЛД50 - соответственно 840 и 900 мг/кг массы тела.

6. При однократных и многократных хвостовых пробах на белых мышах и аппликациях на кроликах функционально-морфологических нарушений кожи, отказа от корма и гибели животных не отмечено. 3 - 4%-ные растворы препарата не вызывали видимых изменений слизистых глаза. При определении ингаляционной опасности видимых токсических проявлений у белых мышей не наблюдали. По классификации степени опасности химических веществ (ГОСТ 12.1.007-76) препарат Бромдезин относится к третьему классу опасности (умеренно токсическое вещество).

7. Дезинфицирующее средство Бромдезин стабильно в течение 2 лет хранения в интервале температур +10 - +25°С.

8. Для микроорганизмов 1-ой группы устойчивости при дезинфекции цемента наиболее эффективна 2% концентрация Бромдезина в количестве 0,6 л/м2 при экспозиции 180 мин (эффективность - 100%), стекла железа и дерева (масляная краска) - та же концентрация в количестве 0,5 л/м2 при экспозиции 120 мин (эффективность - 100%). Эффективная обработка (100%) цемента при контаминации микроорганизмами 2-ой группы устойчивости достигается применением 3% концентрации Бромдезина в количестве 0,6 л/м2 при экспозиции 180 мин, а при дезинфекции стекла, железа и дерева (масляная краска) Бромдезин необходимо использовать в той же концентрации и при той же экспозиции, расходуя 0,5 л/м2.

9. Производственные испытания дезинфицирующего средства Бромдезин подтвердили его 100%-ную эффективность при профилактической и вынужденной дезинфекции объектов ветеринарно-санитарного надзора.

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Инструкция о мероприятиях по борьбе с сальмонеллезом птиц (утв. СГВН МСХ РТ 11.04.2008 г.).

2. Инструкция о мероприятиях по борьбе с колибактериозом птиц (утв. СГВН МСХ РТ 11.04.2008 г.).

3. Инструкция о мероприятиях по борьбе с пастереллезом птиц (утв. СГВН МСХ РТ 11.04.2008 г.).

4. Временное наставление по применению дезинфицирующего средства Бромдезин для дезинфекции объектов ветнадзора (утв. СГВН МСХ РТ 17.09.2011 г.).

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Салимов Т.М. Сроки выведения остаточных количеств препаратов 2-бром-7-метил-5-оксо-5Н-1,3,4-тиадиазоло[3,2-а] пиримидина и 7-метил-5-оксо-5Н-1,3,4-тиадиазоло[3,2-а]пиримидин-2-ил-имидотио-карбамат гидробромида из организма птицы / Т.М. Салимов, Б.Б. Лакаев // Веткорм. -М., 2009,-№6. -С. 79.

2. Сангов З.Г. Фармакокинетика соединений 1,3,4-тиадиазоло[3,2-а]пиримидина / З.Д. Ашурова, Т.М. Салимов, Дж.Н. Джамшедов, Б. Лакаев, М.А. Куканиев, С.С. Сатторов, К.Х. Хайдаров // Здравоохранение Таджикистана. -2009.-№3. - С. 39-41.

3. Салимов Т.М. Эпизоотология пастереллеза птиц в Таджикистане / Т.М. Салимов, С.Д. Набиева, Ш.Х. Назаров, Б.Б. Лакаев, С. Мирзоев // Ветеринария. - Душанбе, 2009. - №4. - С. 27- 29.

4. Салимов Т.М. Среднесмертельная доза бромдезина / Т.М. Салимов, Б.Б. Лакаев, М.А. Куканиев, З.Г. Сангов // Ветеринария. -Душанбе, 2011. -№10 - 12 (33). - С. 27- 29.

5. Юсупов Х.А. Антимикробная активность бромметрина / Х.А. Юсупов, Т.М. Салимов, ДМ. Мирзоев, М.А. Куканиев, З.Г. Сангов // Изв. АН РТ. - 2011. - №3 (144). - С. 83 - 86.

6. Food salmonellas and their pharmacological therapy / T.M Salimov, M.A. Kukaniev, A.N. Mahmadshoev, S. Mirzoev, B. Lacaev // Veterinary Problems of Central Asia - Food Security: The Use of Modern Ways of Diagnostics and Prophylaxis of Infectious Diseases of Animals. - Dushanbe, 2011.-P. 78-79.

Сдано в печать 26.03.2012. Разрешено в печать 27.03.2012. Бумага офсетная. Формата 60x841/16. Печать офсетная. Заказ 27. Тираж 100 экз. Издательство «ИЛМ»

Содержание диссертации, кандидата ветеринарных наук, Лакаев, Бахромджон Бобожонович

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Резестентность микроорганизмов к дезинфектантам.

1.2. Требования к средствам дезинфекции.

1.3. Биологические свойства тиадиазолопиримидинов.

1.4. Антимикробная активность,токсико-фармакологические свойства и эффективность в ветеринарии препаратов на основе производных 1,3,4-тиадиазоло[3,2-а] пиримидина.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Микробиологический мониторинг.

3.1.1. Анализ циркуляции условно-патогенной микрофлорына продовольственных рынках г. Душанбе.

3.1.2. Ветеринарно-санитарная оценка циркуляцииуслоено-патогенной микрофлоры на птицефабриках РТ.

3.2. Технология изготовления дезинфицирующего средства Бромдезин.

3.2.1. Рецептура дезинфектанта Бромдезин.

3.2.2. Краткая технологическая схема изготовлениядезинфектанта

Бромдезин.

3.2.3. Физико-химические свойства дезинфектанта Бромдезин

3.2.4. Коррозионные свойства рабочих растворов Бромдезина.

3.3. Бактерицидные свойства дезинфицирующего средства

Бромдезин.

3.3.1. Определение методом серийных разведений.

3.3.2. Испытание на тканевых тест-объектах.

3.4. Токсичность и опасность дезинфицирующего средства Бромдезин.

3.4.1. Острая токсичность дезинфектанта Бромдезинпри введении в желудок.

3.4.2. Острая токсичность дезинфектанта Бромдезинпри нанесении на кожу.

3.4.3. Местно-раздражающее действие дезинфектанта Бромдезинна слизистые оболочки глаз.

3.4.4. Ингаляционная опасность дезинфектанта Бромдезин

3.5. Определение дозировки и схемы применениядезинфицирующего средства

Бромдезин.

3.6. Стабильность дезинфицирующего средства Бромдезинпри хранении.

3.7. Производственные испытаниядезинфицирующего средства Бромдезин.

3.7.1. Вынужденная дезинфекция Бромдезином.

3.7.2. Профилактическая дезинфекция Бромдезином.

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

ВЫВОДЫ.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Препарат Бромдезин для дезинфекции объектов ветеринарно-санитарного надзора"

Актуальность работы. Обеспечение микробиологической безопасности обусловлено увеличением эпидемической и эпизоотической опасности в результате циркуляции возбудителей антропозоонозных инфекций, которые не только длительно сохраняются в окружающей среде, но при способствующих условиях могут естественным образом нарастать [166, 177].Эффективное использование технологий инактивации (современные дезинфекционные мероприятия) позволяет предупредить и устранить микробиологическую опасность, выражающуюся как в наличиии неуправляемых, так и управляемых вакцинами инфекций [29, 94, 175,205].

У микроорганизмов устойчивость к внешним воздействиям, особенно химическими средствами, неодинакова и существенно различается [13, 17, 86, 125].Резистентность может развиваться в результате изменения проницаемости бактериальных мембран, биохимических адаптационных изменений в клетках, образования некультивированных форм неспорообразующих возбудителей [1, 28, 116, 155].

Контаминация объектов ветеринарно-санитарного надзорарезистентными к антисептикам и дезинфектантам микроорганизмамиопределяет выбор дезинфекционной технологии, адекватной соответствующей ситуации [198, 215, 239, 258].

Ликвидация источника инфекции во внешней среде, уничтожение возбудителя достигается дезинфекцией, целью которой является уничтожение только патогенных микроорганизмов, а не всех вообще микробов, населяющих объект, подвергающийся дезинфекции, что отличает ее от стерилизации, при которой вместе с патогенными уничтожаются и другие микроорганизмы^ 123].

Различные источники, пути и факторы передачи обусловливают разнообразиедезинфектологических технологий, основанных на применении как антимикробных (дезинфицирующих или стерилизующих) средств борьбы с возбудителями, так и инсектицидных, акарицидных, родентицидных и репеллентных препаратов и устройств для борьбы с членистоногими и грызунами - переносчиками опасных заболеваний [54, 162].

Отсутствие современного ассортимента дезинфектантов, непрерывно возрастающие требования к их характеристикам, изменение сырьевых возможностей производства, повышение требований и ограничений экологического характера объясняют непрерывный поиск новых дезинфицирующих средств [58], что обусловливает актуальность настоящей диссертационной работы.

Целью исследований явилось научно-методическое обоснование комплекса мероприятий по обеспечению эпизоотического благополучия объектов ветеринарно-санитарного надзора, разработка и внедрение в ветеринарную практику нового высокоэффективного дезинфектанта, обладающего бактерицидным действием, и способов его применения на объектах ветеринарно-санитарного надзора.

Для достижения поставленной цели решены следующие задачи:

1. Исследовать эпизоотическую обстановку на продовольственных рынках г. Душанбе и птицефабриках Республики Таджикистан (РТ).

2. Обосновать состав и технологию изготовления нового дезинфектантаБромдезин.

3. Определить бактерицидные свойства Бромдезина и устойчивость-чувствительность к нему выделенных микроорганизмов.

4. Изучить токсичность и опасность этого препарата.

5. Обосновать и разработать оптимальные режимы профилактической и вынужденной дезинфекции Бромдезином.

6.Провести производственные испытания его эффективности.

Научная новизна.В первые осуществлен микробиологический мониторинг продовольственных рынков г. Душанбе и птицефабрик РТ по проблеме ветеринарно-санитарного надзора на этих объектах и установлена значимость этого вопроса для ветеринарной медицины. Для производства нового дезинфектанта Бромдезин в качестве действующего вещества использовали 2-бром-7-метил-5-оксо-5Н-1,3,4-тииадиазоло[3,2-а]пиримидин, проявляющий высокую антибактериальную активность, которая сохраняется и в новом препарате.

Разработан состав Бромдезина, изучен его ингибирующий эффект, который проявляется в отношении паспортизированных штаммов Е. coli и St. aureus в концентрации 0,039%, а полевых вирулентных штаммов этих культур - 0,019% основного раствора. Изучены токсичность и опасность Бромдезина, который по ГОСТу 12.1.007-76 относится к третьему классу опасности (умеренно токсическое вещество).

Определена эффективность препарата при профилактической и вынужденной дезинфекции, отработан рациональный способ его применения.Производственные испытаниявыявили 100%-ную эффективность Бромдезина в отношении микроорганизмов 1-й 2-ой групп устойчивости.

Практическая ценность. На основании полученных результатов Бромдезин предложен в качестве дезинфицирующего средства при профилактической и вынужденной дезинфекции объектов ветеринарно-санитарного надзора.

Материалы диссертации вошли в нормативную документацию, утвержденную Службой государственного ветеринарного надзора (СГВН) Министерства сельского хозяйства (МСХ) РТ:

1. Инструкция о мероприятиях по борьбе с сальмонеллезом птиц (утв. СГВН МСХ РТ 11.04.2008 г.).

2. Инструкция о мероприятиях по борьбе с колибактериозом птиц (утв. СГВН МСХ РТ 11.04.2008 г.).

3. Инструкция о мероприятиях по борьбе с пастереллезом птиц (утв. СГВНМСХРТ 11.04.2008 г.).

4. Временное наставление по применению дезинфицирующего средства Бромдезин для дезинфекции объектов ветнадзора (утв. СГВН МСХ РТ 17.09.2011 г.).

Основные положения диссертационной работы, выносимые на защиту:

1. Результаты микробиологического мониторинга на продовольственных рынках г. Душанбе и птицефабриках РТ.

2. Состав и технология изготовления нового дезинфектанта Бромдезин.

3. Результаты определения бактерицидных свойств Бромдезина и устойчивости-чувствительности к нему выделенных микроорганизмов.

4. Результаты изучения токсичности и опасности Бромдезина.

5. Схема профилактической и вынужденной дезинфекции Бромдезином.

6. Результаты производственных испытаний его эффективности.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены на заседаниях ученого совета Ветеринарного института Таджикской академии сельскохозяйственных наук(ТАСХН) (2007 - 2011 гг.); республиканских и областных семинарах-совещаниях ветеринарных работников РТ (2007 -2011 гг.); Международной научной конференции «Ветеринарные проблемы Центральной Азии - продовольственная безопасность: использование современных методов диагностики и профилактики инфекционных болезней животных» (Душанбе,2011 г.).

Публикации.По результатам исследований опубликованы в печати 6 научных работ.

Структура и объем диссертации. Работа состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, практических предложений, списка литературы и приложения.

Заключение Диссертация по теме "Кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов", Лакаев, Бахромджон Бобожонович

ВЫВОДЫ

1. Результаты микробиологического мониторинга, осуществленного на 2 продовольственных рынках г. Душанбе (ГУП «Саховат», ГУП«Шохмансур») и 5 птицефабриках Республики Таджикистан (ООО «Тарз» - район Вахдат, ООО «Фаришта» - район Вахдат, ООО «Дипломат» - район Рудаки, ООО «Паррандапарварии Худжанд» и ЧП «Орипов» - Согдийская область) выявили актуальность проблемы ветеринарно-санитарного надзора для этих предприятий, решение которой имеет значение не только для ветеринарной медицины, но и для здравоохранения.

2. Для производства дезинфицирующего средства Бромдезин в, качестве действующего вещества применили 2-бром-7-метил-5-оксо-5Н-1,3,4-тииадиазоло[3,2-а] пиримидин, проявляющий высокую противобактериальную активность, подтвержденную результатами изучения ингибирующего действия Бромдезина.

3. Ингибирующий эффект Бромдезина проявляется в очень низких концентрациях: для Е. coli (штамм АТСС-25922) и St. aureus (штамм 6538p) - 0,039%, а для полевых вирулентных штаммов этих культур соответствующая концентрация составила 0,019% основного раствора.

4. С увеличением времени экспозиции надежный стерилизующий эффект можно достигнуть меньшими концентрациями Бромдезина: 0,5%-ная концентрация рабочего раствора проявляла активность в отношении Е. coli (шт. АТСС-25922) и St. aureus (шт. 6538p) соответственно через 50 и 60 мин, 1,0%-ная - через 30 и 50, 2%-ная - через 25 и 30, 3%-ная - через 10 и 15, а 4%-ная - через 5 и 10 мин. Кроме того, 2%-ная концентрации рабочего раствора Бромдезина оказалась бактерицидной для Вас. subtilis 6633 через 60 мин, а 3 и 4%-ные - через 50 мин.

5. При изучении острой токсичности Бромдезина на белых мышах и крысах определены параметры острой токсичности: МПД - 300 мг/кг, ЛДюо - 1500, ЛД50 - соответственно 840 и 900 мг/кг массы тела.

6. При однократных и многократных хвостовых пробах на белых мышах и аппликациях на кроликах функционально-морфологических нарушений кожи, отказа от корма и гибели животных не отмечено.З - 4%-ные растворы препарата не вызывали видимых изменений слизистых глаза. При определении ингаляционной опасности видимых токсических проявлений у белых мышей не наблюдали.По классификации степени опасности химических веществ (ГОСТ 12.1.007-76) препарат Бромдезин относится к третьему классу опасности (умеренно токсическое вещество).

7. Дезинфицирующее средство Бромдезин стабильно в течение 2 лет хранения в интервале температур +10 - +25°С.

8. Для микроорганизмов 1-ой группы устойчивости при дезинфекции цемента наиболее эффективна 2% концентрация Бромдезина в количестве

0,6 л/м при экспозиции 180 мин (эффективность - 100%), стекла железа и дерева (масляная краска) - та же концентрация в количестве 0,5 л/м при экспозиции 120 мин (эффективность - 100%). Эффективная обработка (100%) цемента при контаминации микроорганизмами 2-ой группы устойчивости достигается применением 3% концентрации Бромдезина в количестве 0,6 л/м при экспозиции 180 мин, а при дезинфекции стекла, железа и дерева (масляная краска) Бромдезин необходимо использовать в той же концентрации и при той же экспозиции, расходуя 0,5 л/м .

9. Производственные испытания дезинфицирующего средства Бромдезин подтвердили его 100%-ную эффективность при профилактической и вынужденной дезинфекции объектов ветеринарно-санитарного надзора.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1 .Инструкция о мероприятиях по борьбе с сальмонеллезом птиц (утв. СГВН МСХ РТ 11.04.2008 г.).

2.Инструкция о мероприятиях по борьбе с колибактериозом птиц (утв. СГВН МСХ РТ 11.04.2008 г.).

3. Инструкция о мероприятиях по борьбе с пастереллезом птиц (утв. СГВНМСХРТ 11.04.2008 г.).

4.Временное наставление по применениюдезинфицирующего средства Бромдезин для дезинфекции объектов ветнадзора(утв. СГВН МСХРТ 17.09.2011 г.).

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, кандидата ветеринарных наук, Лакаев, Бахромджон Бобожонович, Душанбе

1. Агафонова А.Б. Современные методы определения остаточных количеств антибиотиков в молоке и молочных продуктах / А.Б. Агафонова // Сб. науч. тр. - М: ВНИИВСГЭ, 1997. - Т. 103. - С. 127 - 132.

2. Андрюнин Ю.И. Применение препарата «Гексалит» для дезинфекции животноводческих помещений / Ю.И. Андрюнин // Вопросы ветеринарной дезинфекции на современном этапе: Тр. ВНИИВС. М., 1984.-С. 7- 13.

3. Аржаков В.Н. Токсикологическая характеристика отработанного раствора щелочи / В.Н. Аржаков, A.A. Сулимова // Пути совершенствования профилактики и диагностики бруцеллеза сельскохозяйственных животных: Сб. науч. тр. ВНИИБТЖ. Омск, 1990. -С. 127-130.

4. Аржаков В.Н. Токсичность нового бактерицидного препарата / В.Н. Аржаков, Т.Ф. Мосунова // Туберкулез и бруцеллез сельскохозяйственных животных: методы и средства диагностики и профилактики: Сб. науч. тр. ВНИИБТЖ. Новосибирск, 1994. - С. 95 -112.

5. Аржаков В.Н. Эпизоотологические и методологические подходы к оценке и направленному поиску новых средств дезинфекции и их композиций: Автореф. дис. . д-ра веет.наук / В.Н. Аржаков. -Новосибирск, 2002. 38 с.

6. Арчаков А.И. Окисление чужеродных соединений и проблемы токсикологии / А.И. Арчаков // Вестн. АМН СССР. М., 1988. - №1, С. 14

7. А. с. 1558915 СССР, МКИ А 61 К 31/33. 2-(5-нитрофурил)-2,3-дигидро-5Н-1,3,4-тиадиазоло2,3-Ь.хиназолинон-5, проявляющий противомикробную активность / Н. И. Чернобровин [и др.] (СССР). -№4467947/31-04; заявлено 29.07.88; опубл. 23.04.90, Бюл. №15.

8. Афиногенов Г.Е. Быстрый метод оценки эффективности дезинфектантов и антисептиков / Г.Е. Афиногенов, М.В. Краснова, A.A. Доморад // Клиническая и лабораторная диагностика. 2000. - №11. - С 17.

9. Бабков В.Ф. Совершенствование организации ветеринарного обслуживания в приграничном областном центре с целью улучшения эпизоотического благополучия города: Автореф. дис. . канд. вет. наук / В.Ф. Бабков. Курск, 2001. - 27 с.

10. Баранников В.Д. Ветеринарно-санитарные и технологические мероприятия на малых и средних фермах крупного рогатого скота / В.Д. Баранников // Сб. науч. тр. М.: ВНИИВСГЭ, 1997. - Т. 103. - С. 53 - 55.

11. Батиашвилли А.Г. Адсорбционные свойства отходов химической промышленности в отношении энтеровирусов / А.Г. Батиашвилли // Сб. науч. тр. М.: ВНИИВСГЭ, 1997. - Т. 103. - С. 39 - 44.

12. Батиашвилли А.Г. Моюще-дезинфицирующие средства из отходов промышленности / А.Г. Батиашвилли. Тбилиси, 1995. - 234 с.

13. Батиашвилли А.Г. Устойчивость энтеровирусов Т-80 и F-17 к ультрафиолетовому излучению и дневному свету / А.Г. Батиашвилли // Сб. науч. тр. М.: ВНИИВСГЭ, 1997. - Т. 103. - С. 32 - 34.

14. Батиашвилли А.Г. Характер воздействия химических веществ намикробную клетку / А.Г. Батиашвилли // Сб. науч. тр. М.: ВНИИВСГЭ, 1997.-Т. 103.-С. 29-32.

15. Бахир В.М. Пути создания эффективных и безопасных антимикробных жидких средств и эволюция общественного восприятия дезинфекционных мероприятий / В.М. Бахир, Б.И. Леонов, С.А. Паничева и др. // Медицинский Алфавит. 2003. - №9. - С. 20 - 23.

16. Белова В.И. Основные направления исследований по разработке дезинфицирующих препаратов / В.И. Белова, Л.И. Арефьева, В.Е. Лиманов и др. // Актуальные вопросы совершенствования дезинфекционных и стерилизационных мероприятий. М;, 1990. - С. 137 - 141.

17. Билич Г. Л. Регуляция регенерации клетка, ткань, организм / Билич Г. Л., Колла В. Э. // Фармакологическая регуляция регенераторных процессов в эксперименте и клинике. - Горький, 1978. - С. 14 - 20.

18. Бондарев В.А. О целесообразности определения культур к дезинфектантам и антисептикам / В.А. Бондарев, Г.Б. Алтайская // Актуальные вопросы неотложной медицины: Матер. 11 обл. науч.-практ. конф. Липецк, 1999. - С. 213 - 214.

19. Брезгунов В.Н. Определение электрооптическим методом числа неповрежденных бактериальных клеток после экстремальных воздействий / В.Н. Брезгунов, Н.В. Швед, В.Д. Бунин и др. // Микробиология. 1985.

20. Т. 54, вып. 4.-С. 616-620.

21. Брусиловская А. И. Изменение уровня сахара крови при действии некоторых производных пиримидина // Тр. Военно-морской академии. -Л, 1950.-Т. 20.-С. 138- 144.

22. Булатова A.C. Влияние дезинфицирующих веществ на дыхание покоящейся кишечной палочки / A.C. Булатова // ЖМЭИ. 1950. - №9. -С. 22-26.

23. Буртовой С.П. Вероятная оценка надежности бактерицидного эффекта / С.П. Буртовой, Т.В. Чикишева, А.Д. Болотов // Гиг. и сан. 1985. -№5. - С. 20.

24. Бутко М.П. Ускоренные методы контроля качества ветеринарно-санитарной обработки транспортных средств / М.Л. Бутко, И.Н. Чариков // Проблемы ветеринарной дезинфекции объектов животноводства: Тр. ВНИИВС. М., 1987. - С. 30 - 39.

25. Буянов В.В. Разработка технологии получения нового дезинфекционного средства с универсальным спектром антимикробного действия / В.В. Буянов, В.П. Никольская, В.А. Минаев и др. // Вестник РАМН. М., 1999. - №8. - С. 54 - 57.

26. Буянов В.В. Средства дезинфекции для ликвидации последствий биологического заражения при различных температурах окружающей среды / В.В. Буянов, В.П. Никольская, В.В. Канищев и др. Черноголовка. Редакционно-издательский отдел ИПХФ РАН, 2003. - 277 с.

27. Вашков В.И. Руководство по дезинфекции, дезинсекции и дератизации / В.И. Вашков. М.: Медгиз., 1952. - 656 с.

28. Вашков В.И. Средства и методы стерилизации, применяемые в медицине / В.И. Вашков. М.: Медицина, 1973. - 24 с.

29. Ветеринарно-санитарные правила для молочно-товарных ферм сельскохозяйственных организаций, личных подсобных хозяйств и крестьянских (фермерских) хозяйств по производству молока // Утв. постан. МСХиПРБ 17.03.05 г., №16. Вт.: УОВГАВМ, 2005.-28 с.

30. Волков Г.К. Ветеринарно-санитарные и гигиенические мероприятия на свиноводческих фермах / Г.К. Волков, А.Н. Данилов // Ветеринария. 1998. - №4. - С. 10 - 13.

31. Воробьева О.Н. Антибактериальная активность дезинфектантов нового поколения / О.Н. Воробьева, Г.Н. Челышева, Л.И. Денисенко и др. // Матер. VIII съезда Всероссийского общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов. М., 2002. - Т. 1. - С. 9 - 10.

32. Вранчан Э.Э. Ускоренный метод бактериологического контроля качества дезинфекции при сибирской язве по тест микробу Вас. antracoides, штамм №96 / Э.Э. Вранчан // Сб. науч. тр. М.: ВНИИВС, 1980.-Т. 67.-С. 87-91.

33. Герасимов В.Н. Исследование механизма действия нового класса перекисных дезинфектантов пероксогидратов / В.Н. Герасимов, Е.А. Голов, И.В. Бабич и др. // Дезинфекционное дело. - 1999. - №1. - С. 14 — 18.

34. ГОСТ 12.1.007-76 «Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности».

35. ГОСТ 22567.4-77 «Средства моющие синтетические. Метод измерения массы определенного объема».

36. ГОСТ 22567.5-93 «Средства моющие синтетические и вещества поверхностно-активные. Методы определения концентрации водородных ионов».

37. ГОСТ 22567.6-87 «Средства моющие синтетические. Метод определения массовой доли поверхностно-активных веществ».

38. ГОСТ 8.417-81 «Государственная система обеспечения единства измерений. Единицы физических величин».

39. ГОСТ 9.040-74 «Металлы и сплавы. Расчетно-экспериментальный метод ускоренного определения коррозионных потерь в атмосферных условиях».

40. Граменицкая В.Г. Эффективность применения для дезинфекцииновых спороцидных систем окислительного действия в сочетании с, моющими средствами / В.Г. Граменицкая, О.Д. Шапилов // ЖМЭИ. 1972. -№3. - С. 133- 134.

41. Громашевский J1.B. Общая эпидемиология / JI.B. Громашевский.- М.: ОГИЗ-Сельхозгиз., 1949. 643 с.

42. Гудкова Е.И. Контроль за микробной контаминацией антисептиков и дезинфектантов / Е.И. Гудкова, A.JI. Красильников // Лаб. дело. 1991. -№1.- С. 59-61.

43. Гусев A.A. Надуксусная кислота для деконтаминации сальмонелл на тушках птицы / A.A. Гусев, Т.Х. Чурукба, С.И. Козак // Ветеринария. -1998.-№2.-С. 44-46.

44. Даниленко И.П. Среда для идентификации бактерий рода протеус / И.П. Даниленко // Проблемы ветеринарной дезинфекции объектов животноводства: Тр. ВНИИВС. М., 1973. - Т. 46. - С. 23 - 26.

45. Джуфаев С. А. Дезинфекции яиц, зараженных возбудителями колибактериоза птиц / Джуфаев С. А. // Тр. АзербСХИ. 1976. - Вып. 3. -С. 74-77.

46. Дзюбак А.П. Методическое пособие по выявлению, изучению и оценке эпизоотологической обстановки и ее прогнозирование / А.П.

47. Дзюбак. ВВФ при МГАВМиБ им. К.И. Скрябина. - М., 1996. - С. 2 - 19.

48. Дмитриева B.C. Микробиологический контроль активности антибактериальных препаратов / B.C. Дмитриева, С.М. Семенов. М., Медицина, 1965. - С. 290 - 292.

49. Добряков С.Н. Бактериологический контроль качества дезинфекции (животноводческих объектов) с применением «бакпечаток» Печерского / С.Н. Добряков, В.И. Печерский // Сб. науч. тр. Ленинградского ветеринарного института. Л., 1988. - №95. - С. 40 - 45.

50. Досанов К.Ш. Изыскание и разработка эффективных антимикробных композиций / К.Ш. Досанов // Проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии: Тез.докл. Междунар. науч. конф. (16-17 сентября 1999 г., Москва). М.: ВНИИВСГЭ, 1999. - С. 108 - 110.

51. Дудницкий И.А. Дезинфекция на фермах неблагополучных по бруцеллезу и туберкулезу / И.А. Дудницкий, В.Ф. Бричко, И.Я. Беляев и др. // Ветеринария. 1989. - №6. - С. 7 - 11.

52. Дудницкий И.А. Контроль качества дезинфекции / И.А. Дудницкий // Ветеринария. 1991. - №9. - С. 21 - 25.

53. Ефимов K.M. Полигуанидины класс малотоксичных дезсредств пролонгированного действия / K.M. Ефимов, П.А. Гембицкий, А.Г. Снежко // Дезинфекционное дело. - 2000. - №4. - С. 27 - 29.

54. Закомырдин A.A. Становление и развитие ветеринарной дезинфекции в СССР и России / A.A. Закомырдин // Сб. науч. тр. М.: ВНИИВСГЭ, 2004. - Т. 116. - С. 11 - 33.

55. Закомырдин A.A. Электрохимически активированные растворы в ветеринарии (Мойка и дезинфекция) / A.A. Закомырдин // Проблемы ветеринарной медицины в условиях реформирования сельскохозяйственного производства. Махачкала, 2003. - С. 159- 165.

56. Заявка 57-142989, МКИ С 07 Д 513/04. Производные тиадиазолопиримидина / Исода Сумиою и др. (Япония); заявл. 27.02.81 // РЖХим. 1984. - Ч. 2. - 10 129 П.

57. Заявка 62-161793, МКИ С 07 Д 519/00. Новые цефалоспорины, способ получения и антибактериальные препараты на их основе / X. Ониси и др. (Япония); заявл. 04.07.85 // РЖХим. 1989. - Ч. 2. - 30 160 П.

58. Земсков А. М. Комбинированная иммунокоррекция / Земсков А. М., Караулов А. В., Земсков В. М. М., 1994. - С. 78 - 79.

59. Зубайдов Т. М. Противовоспалительное действие ориганола / Зубайдов Т. М. // Докл. АН РТ. 1992. - №3. - С. 56 - 58.

60. Ибрагимов Р.И. Некоторые проблемы дезинфектологии / Р.И. Ибрагимов, P.P. Ибадулин // Дезинфекционное дело. 2002. - №4. - С. 27 -29.

61. Игнатов О.В. Электрооптические свойства микробных клеток при метаболизме акриламида / О.В. Игнатов, H.A. Хоркина, О.М. Цивилева // Прикладная биохимия и микробиология. 1998. - №5. - С. 583 - 587.

62. Иммунологические и биохимические показатели крови при травматическом остеомиелите нижней челюсти / Козлов В. А. и др. // Вест.хирургии. 1981. - Т. 126, №4. - С. 99 - 101.

63. Иоффе Б.С. Синтез и применение катионных ПАВ / Б.С. Иоффе, Е.П. Бабаян, P.E. Злотник // Хлорная промышленность. М.: НИИТЕХИМ, 1988.-42 с.

64. Испенков А.Е. Зоогигиенический и санитарный режим на фермах и комплексах / А.Е. Испенков, И.И. Сапего. Минск: Ураджай. - 1985. -123 с.

65. Калинин Ю.Т. Проблемы биологической безопасности на пороге XXI века / Ю.Т. Калинин, В.Н. Злобин, Е.Н.Храмов // Вестн. РАМН. М., 1999.-№8.-С. 3-8.

66. Карлинская Р. С. К вопросу об изыскании средств, влияющих на кроветворение, среди производных пиримидина / Карлинская Р. С. // Тр. ВММА. Л., 1956. - Т. 55. - С. 421 - 424.

67. Кирютин Г.В. Гипохлориты / Г.В. Кирютин, И.Ф Горлов. -Волгоград, 2002. 484 с.

68. Кожаева Д.К. Обеззараживание мяса птицы сверхвысокочастотной энергией / Д.К. Кожаева // Вестн. ветеринарии. -1998.- №9 (3). С. 42 - 44.

69. Колибактериоз и меры борьбы с ним в птицеводческих хозяйствах промышленного типа / Грошева Г. А. и др. // Тр. ВИЭВ. -1979.-Т. 49.-С. 123 133.

70. Колычев Н.М. Зоопатогенные бактерии и меры борьбы с ними: Монография / Н.М.Колычев, В.Г. Ощепков // ОмГАУ. Омск, 2001. - 632 с.

71. Красильников А.П. Справочник по антисептике / А.П. Красильников. Минск, 1995. - 367 с.

72. Крейнгольд С.У. Практическое руководство по химическому анализу дезинфекционных препаратов / С.У. Крейнгольд. М., 1998. - 150 с.

73. Куканиев М.А. Химия и биологическая активность производных 1,3,4-тиадиазоло3,2-а.пиримидина / Куканиев М.А., Салимов Т.М., Хайдаров К.Х. М.: Компания Спутник+, 2004. - 157 с.

74. Куликовский A.B. Структурные и биохимические изменения спор Bacilluscereus при воздействии едкого натра и гипохлорита / A.B. Куликовский // Микробиология. Т. XLV, вып. 1. - 1976. - С. 128 - 132.

75. Куликовский A.B. Структурные изменения Е. coli после воздействия хлорамина / A.B. Куликовский // ЖМЭИ. 1969. - № 3. - С. 139- 142.

76. Куликовский A.B. Структурные и функциональные основымеханизма действия дезинфицирующих средств на бактерии и споры: Автореф. дисс. . д-ра вет. наук / А.В. Куликовский. М., 1979. - 33 с.

77. Лазарев Н. В. Пентоксил и его применение при алейкиях / Лазарев Н. В., Фелистович Г. И. Л., 1961 - С. 120.

78. Ланчинини Д. Антибиотики / Ланчинини Д., Паренти Ф. М.: Мир, 1985.-С. 184-231.

79. Леви М.И. Быстрый метод определения чувствительности бактериальных культур к различным антибиотикам в жидкой среде / М.И. Леви, И.А. Горожанкина, Л.А. Сагатовская // Антибиотики. 1967. -№1. -С. 57-65.

80. Леви М.И. К методике определения бактерицидной способности дезинфектантов, антисептиков и антибиотиков / М.И. Леви, Ю.Г. Сучков, В.Г. Слизкова и др. // Дезинфекционное дело. 2001. - №3. - С. 9 - 25.

81. Леви М.И. Методические особенности ускоренного и упрощенного способа определения антибактериальной активности дезинфекционных средств / М.И. Леви, Ю.Г. Сучков, М.М. Лившиц // Дезинфекционное дело. 2001. - №1. - С. 20 - 25.

82. Леесмент О. М. Предупреждение заболеваний птицы / Леесмент О. М. -М.: Колос, 1970. 121 с.

83. Литвин В.Ю. Факторы патогенности бактерий: Функции в окружающей среде / В.Ю. Литвин, В.И. Пушкарева // ЖМЭИ. 1994. -(приложение август - сентябрь). - С. 83 - 87.

84. Лярский П.П. Основные итоги научных исследований и внедрение в практику здравоохранения в области дезинфекции и стерилизации / П.П. Лярский // Сб. науч. тр. ВНИИДиС. М., 1986. - С. 3

85. Мальцева М.М. Система оценки безопасного применения дезинфекционных средств / М.М. Мальцева, Г.Н. Заева, Т.З. Рысина и др. // Дезинфекционное дело. 2002. - №4. - С. 22 - 26.

86. Мальченков A.M. Влияние дизинфектантов на морфологию и биологию бактериальной клетки (Электронномикроскопическое изучение структуры морфологических изменений кишечной палочки) / A.M. Мальченков // ЖМЭИ. 1962. - №8. - С. 3 - 8.

87. Маляновский А.Г. Изыскание антисептических средств важное научное направление ветеринарной санитарии / А.Г. Маляновский // Сб. науч. тр. ВНИИВСГЭ. - 1998. - Т. 104. - С. 112 - 122.

88. Мамаев Н.Х. Основные направления научных исследований по ветеринарной санитарии / Н.Х. Мамаев // Ветеринария. 2000. - №11. - С. 7-9.

89. Матвеев О.Ю. Санитарно-защитная зона свиноферм / О.Ю. Матвеев // Воен.-эконом. журнал. 1993. - №4. - С. 48.

90. Методика определения и' оценки коррозийной активности моющих и дезинфицирующих препаратов // Утв. 24.06.1974 г. Нач. главн. управл. ветеринарии МСХ СССР. М., 1974.

91. Методика определения экономической эффективности ветеринарных мероприятий // Утв. Департаментом ветеринарии 21.02.97 г.

92. Методические рекомендации по дезинфекции при туберкулезе животных / Ю.Я. Кассич // Утв. Гос. аграр. пром. ком. УССР, Юж. отд. ВАСХНИЛ, Укр. НИИ эксперим. ветеринарии. Харьков, 1987. - 18 с.

93. Методические рекомендации по ускоренному определению устойчивости бактерий к дезинфекционным средствам №1100-27-0-117 // Утв. Департаментом Госсанэпиднадзора Минздрава РФ от 10.01.00 г.

94. Методические указания о порядке испытания новых дезинфицирующих средств для ветеринарной практики // Утв. ГУБ ГАПК СССР 07.01.87 г.

95. Методические указания по классификации очагов туберкулезной инфекции, проведению и контролю качества дезинфекционных мероприятий при туберкулезе. -М.: Медицина, 1980.

96. Методические указания по определению чувствительности к антибиотикам возбудителей инфекционных болезней сельскохозяйственных животных. М., 1972. - 14 с.

97. Методические указания по оценки токсичности и опасности дезинфицирующих средств (МУ 1.2.1105-02) // Утв. 10.02.02 г. Главным государственным санитарным врачом РФ. М., 2002.

98. Методы определения токсичности и опасности химических веществ (токсокометрия): Справочник / Под ред. И.В. Саноцкого. М.: Медицина, 1970. - 139 с.

99. Методы экспериментальной химиотерапии: практич. рук-во. 2-е изд. / Под ред. Г. Н. Першина. -М.: Медицина, 1971. - С. 526 - 531.

100. Микробиологические и вирусологические методы исследования: Справочник / Под ред. М.О. Биргера. М.: Медицина, 1982. - 276 с.

101. Мичко С.А. Новые биоцидные свойства пролонгированного действия / С.А. Мичко, З.Э. Алиева, Н.И. Попов // Ветеринария. 2000. -№4.-С. 10-13.

102. Мозжерин В.И. Гигиенический и санитарный режим на свиноводческих фермах основа сохранения здоровья и повышения продуктивности животных / В.И. Мозжерин, В.М. Шириев, В.Р. Хусаинов и др. / Башкирский НИИСХ. - Уфа, 2002. - С. 115.

103. Монцевичюте-Эрингене Е.В. Упрощенные математико-статистические методы в медицинской исследовательской работе / Е.В. Монцевичюте-Эрингене // Патология, физиология и экспериментальная терапия. М.: Медицина, 1964. - №4. - С. 71 - 78.

104. Муравьева Д. А. Фармакогнозия / Муравьева Д. А. М.: Медицина, 1991. - 560 с.

105. Никифорова JI.O. Интенсификация работы сооруженийбиологической очистки сточных вод с использованием электромагнитных полей: Автореф. дисс. . д-ра биол. наук / Л.О. Никифорова. М., 2004. -27 с.

106. Никольская В.П. Проблемы дезинфекции и деконтаминации в системе биологической защиты и профилактики инфекционных заболеваний / В.П. Никольская, О.Б. Пудова, В.В. Буянов // Вестн. РАМН. -М., 2000.-№10.-С. 3-6.

107. Опарин П.С. Оценка возможности использования отходов гидролизного производства в качестве дезинфектанта / П.С. Опарин // Дезинфекционное дело. 2000. - №3. - С. 27 - 29.

108. Опыт оздоровления птицеводства от колибактериоза / Радчук Н. А. и др.. Л., 1985. - С. 46 - 48.

109. Ощепков В.Г. Чувствительность микроорганизмов к препаратам, широко используемым для дезинфекции / В.Г. Ощепков, В.Н. Аржаков// Сибирский вестн. с.-х. науки. 2003. - №3. - С. 99 - 102.

110. Павлова И.Б. Дезинфекционная активность йода и его композиций против микобактерий / И.Б. Павлова, Н.В. Григанова, Д.А. Банникова // Ветеринария. 2003. - №7. - С. 9 - 10.

111. Плеханов Б. П. Оздоровление птицефабрики от стафилококкоза птиц / Плеханов Б. П., Грязев Н. С., Солоницин Я. И. // Информ. листок №6 / Курский ЦНТИ. 1990. - С. 1 - 2.

112. Показания к применению тималина в терапии детей, больных хроническим вирусным гепатитом В / Гользанд И. В. и др. // Воен.-мед. журн. 1986. - №3. - С. 27 - 28.

113. Поляков A.A. Динамика структурных изменений Е. coli и Staph, aureus после воздействия щелочей / A.A. Поляков, И.Б. Павлова, A.B. Куликовский//ЖМЭИ.- 1971.-№11.-С. 31-35.

114. Поляков A.A. Еще раз о теории и практике ветеринарной дезинфекции / A.A. Поляков, A.B. Куликовский // Ветеринария. 1989. -№2.-С. 19-23.

115. Попов Н.И. Дезинфекция кожных покровов животных / Н.И. Попов, Г.А. Жоров // Ветеринария. 1999. - №12. - С. 21 - 25.

116. Попов Н.И. Дезинфекция объектов ветеринарного надзора бактерицидными пенами: Автореф. дис. . д-ра вет. наук / Н.И. Попов. -М., 2005.-30 с.

117. Притулин П.И. Ускоренная микробиологическая диагностика инфекционных болезней животных и индикация патогенных микроорганизмов во внешней среде / П.И. Притулин. М.: Россельхозиздат, 1996. - 137 с.

118. Прокопенко A.A. Выживаемость бактерий Е. coli в капельном и пылевом аэрозолях после воздействия отраженного КУФ-излучения / A.A.

119. Прокопенко // Сб. науч. тр. М.: ВНИИВСГЭ, 1997. - Т. 103. - С. 120 -126.

120. Прудников С.И. Оптимизация системы противоэпизоотических мероприятий в промышленном свиноводстве: Дис. . д-ра вет. наук / С.И. Прудников. Новосибирск, 1996. - 669 с.

121. Разумовский П.Н. Действие биологически активных веществ на микроорганизмы / П.Н. Разумовский, Д.И. Атаманюк, М.А. Златоуст и др. -Кишенев, 1975.- 160 с.

122. Ревадова Ю.А. Необходимость изучения отдаленных последствий контакта человека с дезинфицирующими средствами / Ю.А. Ревадова, В.В. Юрченко // Дезинфекционное дело. 1996. - №3. - С. 66 -67.

123. Руководство по ветеринарной санитарии / Под ред. A.A. Полякова. М.: Агропромиздат, 1986. - 320 с.

124. Русаков В. И. Опыт применения метилурацила и пентоксила в хирургии / Русаков В. И. // Хирургия. 1972. - №2. - С. 107 - 114.

125. Салимов Т.М. Производственные испытания терапевтической и профилактической эффективности «САП-2» при пастереллезе / Т.М. Салимов, Ш.Х. Назаров // Ветеринарная медицина. 2004. - №4. - С. 12 -13.

126. Салимов Т.М. Противомикробный препарат САП-2 / Т.М. Салимов // Птицеводство. 2004. - №7. - С. 18 - 19.

127. Эффективность САП-2 при пастереллезе птиц / Т.М. Салимов, Ш.Х. Назаров, М.С. Мурватуллоева // Ветеринария. Москва, 2005. - №4. -С. 26-27.

128. Самойленко И.И. Механизмы бактерицидного действия перекиси водорода / И.И. Самойленко, Е.И. Васильев, И.Б. Павлова // ЖМЭИ. 1983. - №12. - С. 30 - 33.

129. Самуйленко С.А. Влияние фенола на биологические свойства вируса бешенства / С.А. Самуйленко, Э.Я. Сазанова, C.B. Кузнецова и др. // Вестн. РАСХН. 2004. - №4. - С. 78 - 80.

130. Светличкин В.В. Теоретическое обоснование и разработка тестсистем ускоренной оценки безопасности и качества объектов ветеринарно-санитарного контроля: Автореф. дисс. . д-ра биол. наук / В.В. Светличкин. М., 2002. - 39 с.

131. Сидоренко C.B. Антибиотикограмма: Диско-диффузионный метод. Интерпретация результатов / C.B. Сидоренко, В.Е. Колупаев. М.: Издательская группа «Арина», 1999. - 147 с.

132. Скрябин К.И. Девастация в борьбе с гельминтозами и другими болезнями человека и животных / К.И. Скрябин. Фрунзе, 1947. - 98 с.

133. Соколова Н.Ф. Методологические основы определения устойчивости микроорганизмов к дезинфицирующим средствам / Н.Ф. Соколова // Матер. VIII съезда Всероссийского общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов. М., 2002. - Т. 4. - С. 55 - 56.

134. Соколова Н.Ф. Современные средства и методы для дезинфекции при сибирской язве /Н.Ф. Соколова // Матер. VIII съезда

135. Всероссийского общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов. М., 2002. - Т. 4. - С. 56 - 57.

136. Сочнев В.В. Планирование и организация ветеринарных мероприятий / В.В. Сочнев, М.И. Голубев, A.B. Усенков и др. Н. Новгород, 1998.-88 с.

137. Стрингер М. Охлажденные и замороженные продукты / М. Стрингер, К. Денис // Пер. с англ. под науч. ред. H.A. Уваровой. СПб.: Профессия, 2004. - 496 с.

138. Сравнительное изучение биологической активности тималина и синтетического пептида тимуса / Яковлев Г. М. и др. // Биохимия -медицине: тез.докл. науч. конф. Л., 1988. - С. 217 - 218.

139. Тактико-технические характеристики вооружения химических войск и средств защиты: Справочник. М., ВКАХЗ, 1989. - 87 с.

140. Тарабукина Н.П. Цеолит-хонгурин для санации объектов животноводства / Н.П. Тарабукина, М.П. Неустроев // Сб. науч. тр. М.: ВНИИВСГЭ, 2004. - Т. 116. - С. 65 - 68.

141. Таршис М.Г. Болезни животных, опасные для человека / М.Г. Таршис, Б.Л. Черкасский // М.: Колос, 1997. 298 с.

142. Терехов В.И. Чувствительность к антибиотикам штаммов Pseudomonasaeruginosa, выделенных от хряков-производителей / В.И. Терехов, В.А. Парашина, Д.П. Мудрый // Вестн. РАСХН. 2004. - №4. - С. 75-78.

143. Тикунов В.И. Комплексные дезинфектанты на основе гипохлорита натрия: Автореф. дис. . канд. вет. наук / В.И. Тикунов. -Белгород, 2000. 22 с.

144. Федорова JI.C. Научный подход к обоснованию выбора средств для дезинфекции поверхностей / Л.С.Федорова // Матер. VIII съезда Всероссийского общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов. М., 2002. - Т. 4. - С. 59 - 60.

145. Федорова Л.С. Современные средства дезинфекции и дезинсекции. Характеристика, назначение, перспективы / Л.С.Федорова, Л.И. Арефьева, Л.С. Путинцева и др. М.: НПО «Союзмединформ», 1991. - 125 с.

146. Филатова Н. А. Естественная киллерная активность спленоцитов мышей линии СЗНА в ранние сроки после трансплантации клеток гепатомы 22А: автореф. дис. . канд. биол. наук / Филатова Н. А. СПб., 1991.-20 с.

147. Фомченков В.М. Изменение электрических характеристик бактериальных клеток при нарушении барьерной функции цитоплазматической мембраны / В.М. Фомченков, А.Л. Мазанов, В.А. Чугунов и др. // Микробиология. 1986. - Т. 55, вып. 5. - С. 754 - 759.

148. Хадаев Т.И. Усовершенствованный метод определения краевого угла смачивания ПАВ (моющие и дезинфицирующие средства) / Т.И. Хадаев // Сб. науч. тр. М.: ВНИИВСГЭ, 1998. - Т. 104. - С. 128 - 134.

149. Хашимов А.У. Выживаемость возбудителя сальмонеллеза / А.У. Хашимов // Ветеринария. 1974. - №8. - С. 35 - 36.

150. Шандала М.Г. Вопросы дезинфектологического обеспечения биобезопасности / М.Г. Шандала // ЖМЭИ. 2002. - №6. - С. 16 - 22.

151. Шандала М.Г. Дезинфектологические аспекты борьбы с инфекционными заболеваниями / М.Г. Шандала // Матер. VIII съезда Всероссийского общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов. М., 2002. - Т. 4. - С. 67 - 68.

152. Шкарин В.В. Дезинфектология / В.В. Шкарин, М.Ш. Щафеев. -Н. Новгород: НГМА, 2003. 368 с.

153. Шукуров С. Ш. Синтез и превращения 2-118-метил-7-метил-(5-оксо-5Н-1,3,4-тиадиазоло3,2-а.пиримидина / Шукуров С. LLL, Куканиев М.

154. А., Насыров И. М. // Химия гетероциклических соединений. 1996. - Т. 6. -С. 549-552.

155. Эльчибекова Л. А. Применение душицы мелкоцветковой в медицине / Эльчибекова Л. А., Никонов Г. К. // Фармация. 1988. - № 3. -С. 16-18.

156. Якимова В.Я.Чувствительность условно-патогенной грамотрицательной микрофлоры, выделенной у больных, к антисептикам и дезинфектантам / В.Я. Якимова, Н.И. Маркелов, М.Я. Мельникова // Гиг. и сан. 1983. - №12. - С. 73 - 74.

157. AndersonM.E. Removalofanimalfatfromfoodgradebeltingasaffectedbypressureandtemperaturofs prayedwater/ М.Е. Anderson, Н.Е. Huff, R.T. Marshall // J. of Food Protection. 1985.-N44.-P. 246-248.

158. Andrade N.J. Bacteriocidal activity of sanitizers against Enterococcus attached to stainless steel as determined by plat count and impedance methods / N.J. Andrade, T.A. Bridgeman, E.A. Zottola // J. of Food Protection. 1998. -N661.-P. 833 -838.

159. A survey of Salmonella contamination in modern broiler production / Jones E. T. et al. // J. Food. Prot. 1991. - Vol. 54. - P. 502 - 507, 513.

160. Bautista D.A. The application of ATP bioluminescence for the assessment of milk quality and factory hygiene / D.A. Bautista, L. Mcintyre, L. Laleye // J. of Rapid Methods Autom. Microbiology. 1992. - N1. - P. 179

161. Bell C ATP bioluminescence techniques for assessing the hygienic condition of milk transport tankers / C. Bell, P.A. Stallard, S.E. Brown // Intern. Dairy J. - 1994. - N4. - P. 629 - 640.

162. Blenkinsopp S.A. Understanding bacterial biofilms / S.A. Blenkinsopp, J.W. Costerton // Trends in Biotechnology. 1991. - N9. - P. 138 -143.

163. Broussard L.A. Biological agents: Weaponos of warfare and bioterrirism / L.A. Broussard // Mol. Diagn. -2001,-6, N4. P. 323 - 333.

164. Comparison of therapeutic versus subthera-peutic levels of Chlortetracycline in the diet for selection of resistant Salmonella in experimentally challenged chickens / Kobland J. D. et al. // Poult. Sei. 1987. -Vol. 66.-P. 1129- 1137.

165. Connor D.E. Rotation of fhenolic disinfectants / D.E. Connor, M.K. Eckman // Applied and environmental microbiology. 1996. - N62. - P. 705 711.

166. Das J.R. Changes in biocide susceptibility of Staphyhcoccus epidemidis and Eicherichia coli cells associated with rapid attachment to plastic surfaces / J.R. Das, M. Bhakoo, M.V. Jones // J. of Applied microbiology. -1998.-N84.-P. 852-858.

167. Dhaliwal D.S. Impedimetric evaluation of the efficacy of desinfectants against biofilms / D.S. Dhaliwal, J.L. Cordier, L.J. Cox // Letters in applied microbiology. 1992. -15.-P. 217 -221.

168. Dunsmore D.G. Design and performance of systems for cleaning product contact surfaces of food equipment: A review / D.G. Dunsmore, A.

169. Twomey, W.G Whittlestone // J. of food production. 1981. - 44. - P. 220 -240.

170. Favero M.S. Bacteriological control of food equipment surfaces by cleaning systems. Detergent effects / M.S. Favero, W.W. Bond // J.of food protection. 2000. - N44. - P. 15 - 20.

171. Favero M.S. Chemistry of water treatment. 2nd Edition / M.S. Favero, W.W. Bond // Lewis Publishers, L., NY, W.D.C. 1996. - 582 p.

172. Frazier M. N. Gangrenous dermatitis of chickens / Frazier M. N, Parizek W. J, Garner E. // Avian Dis. 1964. - Vol. 8. - P. 269 - 273.

173. Glass B. Exposure to Glutaraldehyde Alone or in a Fume Mix: a Review of 26 cases / B. Glass // Journal of the NZMRT. 1997. - Vol. 40, N2, June.-P. 13-17.

174. Greenfield R.A. Unconventional biological threats and the molecular biological response to biological threats / R.A. Greenfield, B.D. Lutz, M.M. Huycke // Amer. J. Med. Sci. 2002. - 323, N6. - P. 350 - 357.

175. Griffiths J. An evaluation of luminometri as a technique in food microbiology and a comparison of six commercially available luminometeres / J. Griffiths, A. Blucher, J. Fieri // Food Science and Technology Today. 1994. -N8.-P. 209-216.

176. Harris R.D. What need to know about anthrax today / R.D. Harris, J.D. Grabenstein // J. Ky med. Assoc. 2001, - 99, N12. - P. 528 - 532.

177. Haues P.R. Cleaning and Disinfection: Methods / P.R. Haues // Food microbiology and Hygiene. Barking: Elsevier Applied Science Publishers. -1985.-P. 268-305.

178. Havronskyi J.M. ATP: A universal hygiene monitor / J.M. Havronskyi, J.T. Holah // Trends in Food Science and Technology. 1997. -N8.-P. 79-84.

179. Holah J.T. Cleanability in relation to bacterial retenterial retention ounused and abraded domestic sink materials / J.T. Holah, R.H. Thorpe // J. of Applied Bacteriology. 1990. - N69. - P. 599 - 608.

180. Holah J.T. Future techniques for desinfectant testing / J.T. Holah, A. Lavaud, W. Peters // Intern. Biodeterioration and Biodégradation. 1998. -N41.-P. 273-279.

181. Holah J.T. Malthus based surface disinfection test for food hygiene / J.T. Holah, C. Higgs, S. Robinson // Letters in Applied Microbiology. 1990. -N11.-P. 255-259.

182. Holah J.T. Special need for desinfectant in food-handling establishments / J.T. Holah // Revue Scientific et Technique Office International des Epizootics. 1995. - N14. - P. 95 - 104.

183. Hugo W.B. Factors contributing to the survival of Pseudomonas cepacia in chlorhexidine / W.B. Hugo, L.J. Pallent, D.J. Grant // Letters in Applied Microbiology. 1985. - N2. - P. 37 - 42.

184. Hugo W.B. Types of antimicrobial agent. Principles and Practices of Disinfection. Preservation and Sterilization / W.B. Hugo, A.D. Russell, G.A. Ayliffe // J. Oxford: Blackwell Sciences. - 1999. - P. 5 - 95.

185. Infection of egg-laying hens with Salmonella enteritidis PT4 by oral inoculation / Humphrey T. J. et al. // Vet. Rec. 1989. - Vol. 125. - P. 531 -532.

186. Khalil N.G. Incidence of Bacillus cereus in som food stuffs with the special reference to its production of thermonuclease enzyme in Assiut citi / N.G. Khalil // Assiut veter. med. J. 1997. - Vol. 38, N75. - P. 55 - 63.

187. Klemperer R. Test for desinfectants: principles and problems / R. Klemperer // Desinfectants: their assessment and industrial use. London: Scientific Symposia LTD. - 1982. - P. 54 - 58.

188. Knauer-KraetzlB. Reinigung und Desinfektion / B. Knauer-Kraetzl // 12 Fleischwarenforum: Fleisch-hygiene. Behr, s seminar. Darmstadt, 14 - 15 April 1994.-P. 416.

189. Koopal L.K. Physicochemical aspects of hard-surface cleaningn / L.K. Koopal // Netherlands Milk and Dairy Journal. 1985. N39. - P. 127 -154.

190. Kumar C.G. Significance of microbia biofilms in the food industry: a review / C.G. Kumar, S.K. Anand // Intern. J. of Food Microbiology. 1998. -N42.-P. 9-27.

191. Le Chevalier M.W. Inactivation of biofilm bacteria / Le M.W. Chevalier, C D. Cawthorn, R.G. Lee // Applied and Environmental Microbiology. 1988. - N44. - P. 972 - 987.

192. Lee S.L. Effect of growth temperature and media on inactivation of Listeria monocytogenes by chlorine / S.L. Lee, J.E. Frank // J. of Food Safety. -1991.-Nil.-P. 65-71.

193. Loshon C.A. Analisis of the killing of spores of Bacillus subtilis by a new disinfectant, sterilox / C.A. Loshon // J. of Applied Microb. 2001. - N91. -P. 1051 - 1058.

194. Mabesa R.C. Destruction and removal of microorganism from food equipment and utensil surfaces by detergent / R.C. Mabesa, M.M. Castillo, E.A. Contreras // The Philippine Journal of Science. 1982. - N3. - P. 17 - 22.

195. Matilla-Sandholm T. Biofilm formation in the food industry: a review / T. Matilla-Sandholm, G. Wirtanen // Food Reviews Intern. 1992. -N8.-P. 573-603.

196. Mettler E. Variations over time of microbial load and physicochcmical properties of floor materials after cleaning in food industry premises / E. Mettler, B. Carpentier // J. of Food Protection. 1998. - N61. - P. 57-65.

197. Middlemiss N.E. Effect of a water rinse and a detergent wash on milkfat and milk protein soils / N.E. Middlemiss, C.A. Nunes, J.E. Sorensen // J. of food protection. 1985. N48. - P. 257 - 260.

198. Mina B. Fatal inhalational anthrax with unknown source of exposure in a 61 year-old Connecticut woman in New York Citi / B. Mina, J.P. Dym, F. Kuepper // Yama. - 2002. - N7. - P. 858 - 862.

199. Mitrovic M. First report of paratyphoid infection in turkey poults due to Salmonella reading / Mitrovic M. // Poult. Sci. 1956. - Vol. 35. - P. 171 -174.

200. Mrozek H. Development trends with disinfection in the food industry / H. Mrozek // Deutsche Uolkerei - Zeituing. - 1982. - N12. - P. 348 - 352.

201. Munger L. L. Staphylococcal granulomas in a leghorn hen / Munger L. L, Kelly B. L. // Avian Dis. 1973. - Vol. 17. - P. 858 - 860.

202. Offner M.T. Open plant cleaning: equipment and methods / M.T. Offner // Proceedingso f hygiene forthe 90 s'november 7-8. Campden Food and Drink Research Association, Chipping Campden.Glos., UK. - 1990. - P. 55 -63.

203. Palomino J.C. Effects of decontamination methods and culture conditions on viability of Mycobacterium ulcerans in the bactec system / J.C. Palomino // J. clin. microbial. 1998. N36 (2). - P. 402 - 408.

204. Paulsen P. Schnellmethoden zum Nachweis von Salmonellen in Lebensmitteln / P. Paulsen, B. Rippel-Rachle, E. Schopf // Wien. tierarztl. Mschr. 1998. - Jg.85. - H. 1.-S.6-11.

205. Pontefract R.D. Bacterial adherence: its consequences in food processing / R.D. Pontefract // Canadian Institute of Food Science and Technology J. 1991. - N24. - P. 113 - 117.

206. Pritchett I. W. The epidemiology of fowl cholera. IV. Field observations of the "spontaneous" disease / Pritchettl. W., Beaudette F. R., Hughes T. P. // J. Exp. Med. 1930. - Vol. 51. - P. 249 - 258.

207. Reybrouck G. The testing of disinfectants / G. Reybrouck // Intern. Biodeterioration and Biodégradation. 1998. - N41. - P. 269 - 272.

208. Richards J. Withdrawl of disinfectant Hit by Safety Fears / J. Richards // BBC News on Line: Health. 2002. - January 22. - P. 3.

209. Ridgeway H.F. Chlorin resistance patterns of bacteria from two drinking water distribution systems / H.F. Ridgeway, B.H. Olsen // Applied and Environmental Microbiology. 1982. - N44. - P. 972 - 987.

210. Russell A.D. Principles and Practice of Desinfection, Preservation and Sterilization / A.D. Russell, W.B. Hugo, G.A.J. Ayliffe. London: Blackwell Scientific Publications. - 1982. - 347 p.

211. Rutala W.A. Anticeptics and disinfectant safe and effective / W.A. Rutala, E. Cole // Infect, coutrol. - 1984. - Vol. 5. - P. 215 - 218.

212. Salmonella contamination of poultry flocks in the Netherlands / Van de Giessen A. W. et al. // Vet. J. 1991. - Vol. 13. - P. 41 - 46.

213. Schmidt T.U. Cleaning and disinfection processes. IV Effects of cleaning and other measures on surface bacterial flora / T.U. Schmidt, K. Cremling//Fleischwirtschaft. -1981.-N61.-P. 1202- 1207.

214. Staphylococcus aureus infection of fowls on industrialized poultry units. II. Microbiological tests for S. aureus and other pathogens / Kohler B. et al. // Arch. Exp. Veterinaermed. 1980. - Vol. 34. - P. 905 - 923.

215. Syvanen A.C. Nucleic acid hybridization: from research tool to routin diagnostic method / A.C. Syvanen // Med. Biol. 1986. - Vol. 64, N3. - P. 313 -324.

216. Tablada L.M. Accion in vitro del acide peracetico frente a diferentis microorganismos Stapylococcus aureus / L.M. Tablada // Rov. salud avium.1984.-N6(1).-P. 19-27.

217. The Dillon Beach Project-a five year epidemiological study of naturally occurring Salmonella infection in turkeys and their environment / Zecha В. C. et al. // Avian Dis. 1977. - Vol. 21. - P. 141 - 159.

218. Thymopentin treatment of herpes simplex infection. An open, monitored, multicenter study / De Maubeuge J. et al. // Surv. Immunnol.Res.1985. Vol. 4, N1 (Suppl.). - P. 30 - 36.

219. Timperley D.A. Test rigs for evaluation of hygiene in plan design / D.A. Timperley, G.B. Lawson // Hygienic Design and operation of food plan. -Chichester: Ellis Horwood. 1980. - 132 p.

220. Tottori J. The use of feed restriction for mortality control of chickens in broiler farms / J. Tottori, R. Yamaguchi, Y. Murakawa // Avian Dis. 1997. -Vol. 41, N2.-P. 433-437.

221. Walkin R.L. Environmental survey for Listeria species in frozen milk product plants California / R.L. Walkin, L.N. Jensen, H. Kinde // J. of Food Protection. 1991.-N54.-P. 178- 182.

222. Wirtanen G. Epifluorescence imag analysis and cultivation of foodborn bacteria grown on stainless steel surfaces / G. Wirtanen, T. MattilaSandholm // J. of Food Protection. 1993. - N54. - P. 678 - 683.

223. Wirtanen G. Measurement of biofilm of Pediococcus pentosacceus and Pseudomonas fragi on stainless steel surfaces / G. Wirtanen, T. MattilaSandholm // Colloids and Surfaces B: Biointerfaces. 1994. -N2. - P. 33 - 39.

224. Wright J.B. Decreased biocide susceptibility of adherent Legionella pneumophila / J.B Wright, I. Ruseska, J.W. Costerton. // J. of Applied Microbiology. 1991.-N71.-P. 531 -538.

225. Zottola E.A. Microbial biofilms in the food processing environment -should they be a concern? / E.A. Zottola, K.C. Sasahara // Intern. J. ofFoodMicrobiology. 1994. -N23. - P. 125 - 148.