Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

ПОВЫШЕНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ ОТДАЛЕННОЙ ГИБРИДИЗАЦИИ МАЛИНЫ ПУТЕМ РАДИАЦИОННЫХ ВОЗДЕЙСТВИЙ

ВАК РФ 03.00.01, Радиобиология

Автореферат диссертации по теме "ПОВЫШЕНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ ОТДАЛЕННОЙ ГИБРИДИЗАЦИИ МАЛИНЫ ПУТЕМ РАДИАЦИОННЫХ ВОЗДЕЙСТВИЙ"



Всесоюзный научно-исследовательский институт сельскохозяйственной радиологии Госагропрома СССР

На правах рукописи

ЖУКОВА Наталья Владимировна

УДК 634. 71:631.527.5:577.326

ПОВЫШЕНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ ОТДАЛЕННОЙ ГИБРИДИЗАЦИИ МАЛИНЫ ПУТЕМ РАДИАЦИОННЫХ ВОЗДЕЙСТВИЙ

СпециалЬносшЬ: 03.00.01—радиобиология

Автореферат дисертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Обнинск—1987

Всесоюзный научно-исследовательский институт сельскохозяйственной радиологин Госагропрома СССР

На правах рукописи

ЖУКОВА Наталья Владимировна

УДК 634,71:631.527,5:577.346

ПОВЫШЕНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ ОТДАЛЕНОЙ ГИБРИДИЗАЦИИ МАЛИНЫ ПУТЕМ РАДИАЦИОННЫХ ВОЗДЕЙСТВИЙ

Специальность; 03. 00. 01—радиобиология

Автореферат диссертации на соискание ■

ученой степени кандидата биологических наук

Обнинск—1987

,_й-г&т

| Іі. і іїр^ЬїчГ* (

С 1':;;^-нет ;*■(.! '

к ' • • • . ч-.^..1. сгг*:а "г..а*. I

¡с<;^ - ^ ^ л<; з л їсі с г^ «г?-:.-. [

иа. А. |

Работа выполнена в Центральной ордена Трудового Красного Знамени генетической лаборатории имени И. В. Мичурина-

Научный руководитель: доктор биологических наук В. И. Остапенко.

Официальные оппоненты: доктор сельскохозяйственных нау* И. В. Дрягина, кандидат биологических наук Т. Н. Иванова.

Ведущая организация—Всесоюзный научно-исследовательский институт садоводства имени И, В. Мичурина.

Защита диссертации состоится «22 198? года

на заседании специализированного совета по радиобиологии^ К 120,81-01-прн Всесоюзном научно-исследовательском инстн-* туте сельскохозяйственной радиологии Госагропрома СССР по адресу; Москва—Центр., ул. Белинского, д. 4, ком. 300. 4 //ШС 00 миН.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Всесоюзного научно-исследовательского института сельскохозяйственной*радиологии. Отзывы на автореферат просьба направлять по ' адресу: 249020, Калужская ' обл., г. Обнинск, ВНИИСХР, специализированный совет.

Автореферат разослан «2/ » ш>х$^х 198?г.

Ученый секретарь специализированного совета кандидат биологических наук

'Н. И- Санжарова

Актуальность исследований.

В материалах XXVII съезда КПСС указывается, что необходимо усилить работы по селекции новых сортов сельскохозяйственных культур, в том числе плодово-ягодных, отвечающих требованиям современных индустриальных технологии,

В связи с этим стоит задача селекции малнны на высокую урожайность, пригодность к- механизированной уборке, хорошие товарные качества плодов, устойчивость к болезням И вредителям, т. к; отсутствие сортов, обладающих комплексом названных качеств, привело к сокращению площадей под этой ценной ягодной культурой.

Многими, из ценных в селекционном отношении свойств обладают разные виды рода Ии£и$ , которые необходимо вовлекать в работу. Но отдаленная гибридизация в роде ¿¿и£и.р , как н у других растений, затрудняется слабой скрещиваемостью исходных форм, плохой всхожестью гибридных семян и полным или частичным бесплодием отдаленных гибридов.

Поэтому задача разработки методов повышения выхода семян и их всхожести при отдаленной гибридизации малнны является актуальной.

'Цель и задача исследования.

Целью настоящего исследования являлась разработка методов повышения выхода семян и сеянцев при отдаленной гибридизации малнны.

Задачи:

1. Разработка радиационных методов воздействия на пыльцу отцовского растения для увеличения выхода семян при межвидовых скрещиваниях в роде ки£и$

2. Разработка методов повышения всхожести гибридных семян малины с помощью химической скарификации и предпосевной обработки их. лазерным излучением.

3. Физиологическое обоснование подбора «сходных форм и применения радиационных методов воздействия при отдаленной гибридизации малины.

Научная новизна работы заключается в развитии представлении о роли окнслнтелыю-восстаиовнтельных процессов в оплодотворении при отдаленной гибридизации малины. Обнаружена прямая корреляция между активностью окислительных ферментов в листьях и пыльце представителей рода Ки£из н связь этого показателя с продуктивностью отдаленных скрещиваний. Доказана возможность изменения активности окислительных процессов в пыльце и результативности отдаленной гибридизации с помощью радиационных воздействий.

Научно-практическая значимость работы. На основании обнаруженной корреляции между активностью окислительных ферментов в листьях и пыльце представителей рода и их скрещиваемостью был предложен метод подбора исход-пых форм для отдаленной гибридизации малины. Были разработаны методы повышения продуктивности отдаленной гибридизации малины с помощью воздействия на пыльцу и семена электромагнитными излучениями различной частоты, подобраны оптимальные дозы воздействия гамма-, рентгеновским излучениями, излучениями гелни-неонового и ультрафиолетового лазеров и нефильтрованным, излучением ртутно-кварцевой лампы для данной культуры. Увеличение числа полученных при отдаленной гибридизации-сеянцев дает больший объем материала для отбора, что ускоряет селекционный процесс. В ходе работы с применением радиационных методов преодоления нескрещиваемостн были получены отдаленные гибриды малпны, представляющие интерес для дальнейшей селекционной работы.

Апробация работы. Результаты исследований доложены па Тамбовской областной научной конференции «Развитие научного наследия И.' В. Мичурина» (г. Мичуринск, 1981), Всесоюзной научной конференции молодых ученых «Проблемы повышения эффективности современного садоводства» (г. Мичуринск, 1982), Второй Всесоюзной конференции по сельскохозяйственной ' радиологии (г. Обнинск, 1984), Тамбовской областной научной конференции молодых ученых «Наука—сельскому хозяйству» (г. .Мичуринск, 1985).

Публикация результатов исследований. По материалам исследований опубликовано 12 научных работ, из них 9 в соавторстве.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, семи глав, выводов, рекомендаций для селекционно!! практики, списка использованной литературы и приложении. Она включает 140 страниц машинописного текста, 31 таблицу, 21 рисунок н приложения, представленные 6 таблицами и 12' рисунками. Список литературы состоит из 304 наименований, в том числе 48 на иностранных , языках.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Представители рода ¿¿и^ия' различаются по активности окислительных ферментов (полифенолоксндазы и не-рокспдазы) в пыльце и вегетативных органах. Активность нолнфеполоксндазы и пероксндазы в пыльце прямо пропорциональна их активности в листьях.

2. Результативность отдаленных скрещиваний в роде

коррелирует с активностью окислительных ферментов родительских форм. Скрещивания, как правило, удаются лучше, когда активность пероксндазы и полифенолоксндазы выше у отцовского растения, чем у материнского.

3. Под действием электромагнитных излучений активность окислительных ферментов пыльцы и ее оплодотворяющая способность возрастают при увеличении доз обработки до определенного уровня, а при дальне/пнем увеличении доз снижаются. Дозы, повышающие оплодотворяющую способность пыльцы, соответствуют дозам, стимулирующим окислительную активность. Наибольшим стимулирующий эффект достнгаеттся при использовании излучений гелнн-неонового и ультрафиолетового лазеров, а также ртутно-кварцевой лампы, несколько меньший при обработке пыльцы рентгеновским н гамма-нзлученнямн.

4. Предпосевная обработка семян излучением гелпй-не-онового лазера в оптимальных дозах в сочетании с химической. скарификацией позволяет Значительно повысить их всхожесть-

ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Экспериментальная часть работы выполнена в 1981— 1987 годах в Центральной генетической лаборатории имени И. В.. Мичурина.

В качестве объектов исследования использовались сорта малины красной (ßuius. idaeus- Z. ) Моллинг промис и Оттава на диплоидном и тетраллондном уровнях, Чиф, Английская, Карнавал, Кенбн, Рубин болгарский; малина душистая {/¿u.£us odetatus¿.), являющаяся донором устоичп-аоспгк пурпуровой пятнистости; малина боярышниколистная (/¿¿¿¿¿¿s czataegifeztj+s. ), устойчивая к серой гни-

ли и сравнительно слабо поражаемая пурпуровой пятнистостью, « мутант ежевики сизой (/¿usus caest-usI. ), обладающий высокой урожайностью.

Пыльцу заготавливали из хорошо развитых бутонов, собранных перед распусканием. Пылинки подсушивали в термостате при температуре 30°С н сохраняли в эксикаторе над хлористым кальцием при температуре 2—4°С. Кастрацию цветков проводили с помощью пинцета А. А. Рязанова (19^), тычинки удаляли вместе с околоцветником. Для предотвращения свободного опыления использовали марлевые изоляторы.

Опыление проводили через 1 день после кастрации по методике Я. с. Нестерова, И. Г. Тюннкова, Ф. Н. Денисовой (1972). Для гибридизации брали по 3—4 повторности в варианте, не менее 40—50 цветков в каждой (3,5—4,5 тысячи пестиков). Ревизию завязываемости плодов проводили через 15 дней после опыления, .

Стратификацнюсемян проводили по общепринятой методике во влажном песке при низких положительных температурах (2—4°С) в течение четырех месяцев. Высевали семена в середине апреля в ящики на глубину 0,5—1,0 см.

Химическую скарификацию семян проводили 2н раствором гкдроксида калия и 1%-ным раствором глпохлорита кальция с избытком гидрата окиси кальция. Продолжительность обработки семян 2и раствором КОН составила 15, 30, 45 и 60 минут, 1%-ным раствором '—2, 3, 4, н 5 суток.

Намачивание семян в названных растворах проводилось в чашках Петри при комнатной температуре, после обработки семена промывали проточной водой.

Определение активности окислительных ферментов (перо* ксндазы и полифенолоксидазы) проводили по методике Л. М. Хандобнной (1980) спектрофотометрнческим методом (на: СФ-16)., В'качестве субстрата для определения активности пероксидазы был использован пирогаллол, полифенолоксидазы—пирокатехин. Результат выражался:- в единицах

imièHèmm оптической плотности на 1 грамм сырого веса.за 60 секунд.

Обработку пыльцы гамма-излучением проводили на установке «Гаммарнд» (радиоактивный элемент 137 Cs ) в дозах 0,5, 1, 5, 10 н 15 Fp при мощности дозы 0,007 Гр/с (40 Р/мнн,).

Рентгеновским излучением пыльцу обрабатывали па установке SL —140 в дозах 0,5, 1, 5, 10, 15 Гр при мощности дозы 0,007 Гр/с.

Для предгибрндизацнонной обработки пыльцы применяли также гелий-неоновый лазер ЛГ'78 н ультра фиолетовый лазер ЛГИ-21. Экспозиции обработки пыльцы в обоих случаях составляли 60, 180, 360, 540 и 720 секунд {1, 3, 6, 9 и 12 минут). Интенсивность излучения рассчитывали по методике Л. В. Будаговского (1984), Для гелий-неонового лазера она составила 0,6—0,7 Вт/м2, а для утл ьтр а фиолетово го — 3,6 Fr/м1. Неравно мерность поля в зоне расположения объекта составила 7%-

Обработку пыльцы нефильтрованным излучением ртутно-кварцевой лампы ПРК*4, включающим кванты как ультрафиолетовой, так и красной областей спектра, проводили при интенсивности излучения 7,3 Вт/м2 по методике В. И. Остапенко (1972). Экспозиции обработки составляли 300, 1200, 3600 и 7200 сек. (5, 20, 60 и 120 минут).

Предпосевную обработку семян излучением гелий-пеоно-г.ого лазера проводили на установке ЛГ-78 при интенсивности излучения 0,6—0,7 Вт/м2 и экспозициях равных 300, 900, 1800, 2700 и 3600 секундам (5", 15, 30, 45 и 60 минутам);

Применяли статистические методы обработки экспериментальных данных.

При изучении взаимосвязи активности окислительные ферментов в органах и тканях исходных форм растений и продуктивности отдаленной гибридизации подсчнтывалисъ; коэффициенты корреляции между названным» показателями.

При определении активности окислительных ферментов, процентного выхода семян, их всхожести вычисляли среднее арифметическое и его ошибку. Существенность различий между средними значениями вариантов с контролем вычисляли по Стьюдепту. Для редких событий (например, для выхода семян при отдаленной.гибридизации)проводилось преобразование процента в «угол-арксинус \/ процент» и вычислялась существенность разности между средними по методике, приводимой Н. Л. Плохннским (1970).

Для определения эффективности отдаленной гибрндиза- ' цни вычисляли коэффициент продуктивности скрещивания (к) ПО формуле, Предложенной В. И. Остапенко (1977) : К^—ттгк

где т. —выход семян в процентах от числа опыленных пестиков, п. —всхожесть семян в процентах от числа посеянных.

результаты исследования и их обсуждение

|Связь эффективности отдаленной гибридизации » роде &иёи$ с активностью окислительных ферментов у исходных форм

Было установлено, что в порядке снижения активности пе-рокендазы п полпфенолоксидазы в листьях объекты расположились следующим образом: ежевика сизая,, малина красная, малина боярышниколнетиая, малина душистая. У малины красной были'отмечены сортовые различия по этому показателю. Показано, что окислительная активность этих ферментов и листьях прямо коррелирует с их активностью в пыльце.

Выяснилось, что выход семян при скрещивании малнны красной с мутантом ежевики сизой и малиной "душистой в 75% случаев находится в обратной связи с активностью окислительных ферментов в листьях материнской формы (разных сортов малнны красной). Коэффициенты корреляции существенны па 5%-иом уровне значимости.

Показатели активности пероксидазы и полнфенолокенда-зы в листьях представителей рода могут быть ис-

пользованы как одни из критериев скрещиваемости при подборе исходных форм -для отдаленной гибридизации.

влияние электромагнитных излучении

различной частоты на активность

окислительных ферментов в пыльце (представителен рода ёи8и&

В 1981—1984 годах изучалось влияние обработки пыльцы представителей рода гамма-, рентгеновским получениями, излучением гелий-неонового и ультрафиолетового лазеров н нефильтрованным излучением ртутно-кварце-вой лампы. ПРК-4 на активность окислительных ферментов

а

аэробно» фазы окисления (полпфенолокспдазы и пероксн-дазы) с целью определения путей направленного влияния на этот показатель.

Влияние гамма-излучения на активность окислительных ферментов пыльцы-

С помощью гамма-излучения удалось повысить активность окислительных ферментов в пыльце малины красной, малины дуцшстоп и ежевики сизой (табл. 1).

Яаблнца 1

Влияние, обработки пыльцы представителей' рода гамма-излучением на активность

полифенолоксидазы н пероксидазы в ней (1983 г.)

Активность окислительных ферментов' в единицах изменен, оптической плотности на 1. г сырого веса за 60 с

Доза (Гр) ежевика .сизая малина красная 'малика душистая

перо- .чолифе- перо- | полифе-ксидаза * перо-ксилаза: полифе-нолокси-даза

контроль 0,5 . 1,0 5,0 10,0 15,0

0,070 0,070 0,083 0,093* 0,067 0,053

0,060 0,063 0,063 0,070 0,063 0,040

0,063 0,077 0,080* 0,08-3* 0,077 0,063

о о

0,023-* 0,033** 0,013 0,013

0,033 0,033 0,040 0,050* 0,037 0,010

0,020

0,023

0,043*

0,050*

0,030

0,027

* отличия от контроля существенны при уровне значимости 0,05.

** — » 0,01.

(В последующих таблицах обозначения аналогичны).

Оптимальные для повышения активности названных ферментов дозы гамма-излучения были равны 1—5 Гр при мощности дозы 0,007 Гр/с, При увеличении доз до 10 Гр. и более активность обоих названных, окислительных ферментов снижалась (табл. I).

В 1982 и 1984 годах были получены аналогичные данные.

Влияние рентгеновского излучения на активности окислительных ферментов пыльцы;

Оптимальными для повышения активности окислительных ферментов в пыльце малины, красной, ежевики сизой и

малины душистой оказались дозы рентгеновского излучения 0,5—5 Гр при мощности дозы 0,007 Гр/с.

^Таблица 2.

Влияние рентгеновского излучения на активность Цероксидазы и полифенолоксидазы и пыльце представителей рода Йи^ид1 (1983 г.)

Активность окислительных ферментов в единицах изменения оптической плотности из 1 г сырого веса за 60 с

Доза (Гр) ежевика сизая. малина,красная малина душистая

перокси> доза полифенол скси-даза. перокси-даза полифене ло*си-даза перо-ксидаза полнфз-нолокси-двза

контроль 0,5 1,0 5.0 . 10,0 15,0

0,070 0,093* 0,103* 0,103** 0,073 0,060

0,060 0,063 0,067 0,053 0,030 0.053

0,063 0,067 0,080* 0,097** 0,0770,063

о

о

0,020 0,040** 0,010 о

0,033 0,040 0,053* 0,060* 0,030 0.010

0,020 0,030 0,040 0,057* 0,017 0

При дозе 10 Гр отмечалось снижение активности перок-сндазы и нолнфенолоксидазы до исходного уровня. Дальнейшее увеличение дозы обработки приводило к уменьшению активности обоих названных ферментов (табл. 2).

Аналогичные данные были получены также в I982.it 1984 годах..

Влияние излучения ультрафиолетового лазера на активность окислительных ферментов пыльцы

С помощью излучения ультрафиолетового лазера удалось увеличить активность пероксндазы и полифенолоксндазы в лыльце мутанта ежевики сизой. Оптимальными оказались экспозиции обработки 60—360 секунд при интенсивности излучения 3,6 Вт/м!. Дальнейшее увеличение экспозиций привело к снижению активности изучавшихся окислительных ферментов (табл. 3).

Изменение активности нероксидазы и полифенолоксндазы под влиянием излучения ультрафиолетового лазера оказалось более значительным, чем под влиянием ионизирующей радиации (гамма- и рентгеновского излучении).

Влияние излучения ультрафиолетового лазера

на активность окислительных ферментов в

с

пыльце мутанта ежЧвики снзои,

Парнвнт (экспозиция в с^скундая)

Акшвность окислительных ферментов в единицах измене* ния оптической плотности на I г сырого веса за (Ю сскуя^

19ЯЗ г.

перо-кс »да за

полифе*

НУЛОКСН-

даза

1324 г.

перокеилзэ л

полифеиол-сксидаза

контроль 0,070 0,060 0,067 0,043

60 0,110* ОД 13* 0,103* 0,097**

180 0,117** 0,123** 0,113* 0,100**

360 0,113** 0,100* ^ 0,110** 0,090*

540 0,090 0,070 0,100 0,057 ;

720 0,063 0,053 0,057 0,040

Влияние излучения гелий-неонового лазера '

на активность окислительных ферментов пыльцы,

Использование нзлучеиня гелий-неоновего лазера для обработки пыльцы мутанта ежевики сизой вызвало в оптимальных вариантах значительное повышение активности окислительных ферментов. У малины красной и малины душистой и пыльце наблюдалась аналогичная зависимость активности перексидазы н полифенолоксидазы от доз обработки ее названным излучением. Оптимальными для пыльцы всех указанных видов оказались экспозиции обработки от 60 до 540 секунд (табл. 4) при интенсивности излучения 0,6—0,7 Вт/мг.

Влияние излучения гелий-неонового лазерана активность пероксидазы и полифенолоксидазы в пыльце". -представителей рода Й.и$и.$ (1983 г.).

Вариант (экспозиция в секундах) Активность окислительных ферментов в единицах изменения оптической плотности на 1 г сырого вгса за 60 секмд

ежевика снзая малина красная | малина душистая

перо-ксндаза іполифе-жол-оксн-1 да за п е роке ндеза, полифе- I нолоксн-даза 1 перо-ксидаза полнфе-нолоксн-даза

контроль 0,070 " 0,060 0,063 0 0,033 0,020

60 0,080 0,083 0,073 0 - 0,040 0,040

180 0,087* 0,087* 0,100* 0,030* 0,053* 0,047*

360 0,113** 0,120** 0,120** 0,053** 0,070* 0,063**

■ 540 0,087* 0,140** 0,107* 0,013 0,037 0,060

720 0,060 0,067 0,070 0 0,030 0,013

Аналогичные данные были получены в 1982 и 1984 годах.

"Изменение активности окислительных Ферментов в пыль-ие изучавшихся представителей рода fiu.bu.sr под влиянием' излучения гелий-неонового лазера ЛГ-78 было более значительным, чем под влиянием рентгеновского н гамма-излучений.

Влияние нефильтрованного изучения ртутно-кварцевой лампы ПРК-4 на активность окислительных ферментов пыльцы.

Установлено, что нефильтрованное излучение ртутно-квар-цевой лампы ПРК-4, которое содержит кванты как ультрафиолетовой, так и красной частей спектра, также способно изменять активность пероксидазы п полифенолоксидазы в пыльце представителей рода £и£и$ . Оптимальные для повышения активности окислительных ферментов экспозиции обработки пыльцы составили от 300 до 3600 секунд (5—60 минут) при интенсивности излучения 7,3 Вт/м4 (табл. 5).

......* ■ Таблица 5

Влияние обработки пыльцы представителей рода (¿ufas нефильтрованным излучением ртутно-квар-цевой лампы на активность пероксидазы и полифен ол оксид азы в неи (1983 г.).

Вариант (акспозиция в секундах)

Активность с te не л нто льны к фгриентов в единица! изнеценна опти ческой плотности на I г сырого веса за Со с

ежевика сизая

перо-кепдїїа

полнфе-нолокси' лаза

иалина красная малина душистая

перо-кекдаэа нолифе- НОД-ОКСИ- даза і перо-'■ кендаэа І поли ф г-нолокси-і да за

0,063 . 0 0,033 0,020

0,090* 0,030 0,040 0,057*

0,097* 0,04-7* 0,063* 0,070**

0,113* 0,063* 0,060* 0,083**

0,097 0,010 0,020 0,010

контроль 0,070 300 0,093* 1200 .0,110** 3000 0,103* 7200 0,063

0,060 . 0,073 0,110* 0,087 0,0&3

Аналогичные данные были получены в 1982 и 1984 годах.

Таким образом, было установлено, что при всех перечисленных видах радиационной обработки пыльцы с увеличением доз до определенного уровня наблюдается возрастание акиш-ности пероксидазы и полнфеиолоксидазы. При дальнейшем увеличении доз активность названных ферментов падает. Удалось установить оптимальные дозы обработки пыльцы электромагнитными излучениями различной частоты.

Наиболее значительное увеличение активности указанных ферментов наблюдалось в оптимальных вариантах обработки пыльцы излучениями ультрафиолетового и гелий-неонового ла. лазеров, а также излучением ртутно-кварцевой лампы ПРК-4. Действие ионизирующих излучений (рентгеновского и гамма—) на активность пероксидазы и полнфенолоксидазы бы? .'¡о выражено несколько слабее.

влияние обработки пыльцы электромагнитными излучениями различной частоты на выход семян

при отдаленной гибридизации малины'

Оплодотворяющая способность пыльцы разных, представителей рода Ли£и$ , которая находит конкретное сыра- ■ жепие в завязывании - плодов и выходе семян, под действием всех изучавшихся видов электромагнитных, .излучений— сначала увеличивалась по сравнению с контролем, а при дальнейшем возрастании доз уменьшалась. Количественное выражение этого эффекта при использоваиин излучении .различной частоты было неодинаковым..

Влияние гамма-излучения на выход-семян при'отдаленной гибридизации малины.

С помощью обработки пыльцы* отцовского растения гамма-излучением удалось повысить скрещиваемость малины 1-расной с мутантом ежевики сизой в 1,5—2'раза.

Оптимальными оказались дозы I—5 Гр при мощности дозы 0,007 Гр/с (табл. 6). Так, в 1981 году применение названных доз позволило увеличить выход семян при скрещивании малины красной с мутантом ежевики'сизой до 175— 228%, а в 1983 году — до 123—213% по сравнению с контролем. При увеличении доз обработки пыльцы до 10'Гр к "более выход семян снижался (табл. 6).

. Аналогичная картина -наблюдалась и при скрещивании ■ малины-красной с малиной душистой. В этой комбинации скрещивания-в 1982 году при дозе обработки иыльцы-отцов-ского растения 5 Гр удалось добиться выхода семян 1,57% от" числа. опыленных пестиков по сравнению с нулевым результатом в контроле.

; Было обнаружено соответствие оптимальных.доз обработ-. кн пыльцы гамма-излучением, повышающих выход, семян: при~отдаленной гибридизации в роде , дозам, уве-

личивающим активность полнфенолоксидазы. и пероксидазы, в пыльце, V " .

и:

'Влнпние -гамма-излучения на- выход -семян« при скрещивании малины красной (Моллинг промис) ■ ; ,с мутантом ежевикн сизой

■ ■ ' 1031 г. ІЙ8Ї г.

.Доза . 0:Р) . ■.. •Гнело оїшісн-ныг пестиков и ^ а к. £Э-»> Выход сси-в% от чисаа опиленных і пес ГИ Иг. в з ■ § « «Ї'ЕГ » л" «I . Э-' 55 а к ш*'* Я § ' ч и ^ 5 у са а о в

контроль ' 1215 32 5,26" 8320. 375 4,51

. 0,5 ,975 49 5,03 5242, 292 5,57

■ЬО 975 112 12,01* 3997 370 ■9,25*

••• 1154 " 128' - 9)20*-- '4659' 449' ■ 9,(14*

10,0 1539- 28- '1,81 3328 181. 5,44.

15,0 * " 1134 0 0 4160 143 3,44 "

Влияние обработки пыльцы рентгеновским излучением на выход семяи-лр и. отдален ной гибридизации.малины. Примененне рентгеновского излучения для обработки ПЫЛЬЦЫ: отцовского растеиияпрн .скрещивании малины красной с мутантом ежепикн увеличило выход семян; до 153—1.98% по.сравнению'с контролем в 1982:году.и до 111—218%в 19&3 году. При дальнейшем увеличении доз обработки выход се--мяи.. снижался.. Как ив предыдущем, случае,, оптимальные, дозы, обеспечивающие максимальное повышение активности пероксидазы и полнфенолоксидазы, совпадали с дозами,.ой- * пшальными для повышения выхода гибридных семян.

Влияние рентгеновского излучения на выход семян при скрещивании малины красной (Моллинг промис) с мутантом ежевики сизой -

• ^82 г. 1983 г.

Доза <Гр) Число опыленных пестиков ^ о к я 3 я еа 3 Выходсекян в% от числа опыленных пестиков » з а » а § ¡¡»и аг (у V а- « « • <и т а я яЗ«. V V 3 А «»во и- "* в * 1255 «в О в

контроль 3787 158 4,17 8320 375 4,51 .

0,5 3160 226 7,15* 5408 271 5,00

1,0 2106 172 8,27* 3744 364 9,75*

5,0 1377 89 6,40 4659 380 8,16*

10,0 3786 49 1,29 5242 201 3,84

15,0 1377 21 1,53 3994 146 3,66

Аналогичные результаты были получены прн скрещивании малины красной сорта Рубин болгарский с мутантом ежевики сизой, а также при скрещивании малины красной сорта Оттава с малиной душистой*

В численном выражении эффект иредгнбридизацнонной обработки пыльцы отцовского растения гамма- и рентгеновским излучениями оказался сходным. „ .

Влияние излучения ультрафиолетового лазера' на выход семян прн отдаленной гибридизации

малины

Удалось добиться повышения выхода семян с помощью излучения ультрафиолетового лазера, используя экспозиции обработки пыльцы от 60 до 360 секунд при интенсивности излучения 3,6 Вт/мг. Дальнейшее увеличение экспозиций приводило к снижению выхода семян (табл. ,8).

Оптимальные варианты обработки пыльцы позволили до-, биться увеличения выхода семян до 111—625% в 1983 году п до 171—244% в 1984 году по сравнению с контролем. Аналогичные результаты были получены и при использовании в качестве материнской формы сорта малины красной Карнавал. .

Влияние обработки пыльцы излучением ультрафиолетового лазера на выход семян при скрещивании малины красной (Моллннг промне) с мутантом ежевики сизой

іазз г. 1984 Г.

Вариант (экспозиция в секундах) Число опыленных пестиков * «І -ги (о 3 к £□ 5 Выход семян в% от числа опиленных пестиков Число опыленных пестиков 1 А г* ч э о ■■■* •и---3 « ю а Я и «ИХ. я а з «, 41 5і 3 Я о р* 5 з а! ^ КС л ~ 'О 3 а _ 3 ** Зс?в о а«®11

контроль 8320 375 4,51 4050 112 -2,77

:бо 6073 303 4,99 2025 96 • 4,74*

180 ; 6656 1880 28,16* 2430 1С4 6,75 *

360 4326 683 15,79* 2592 125 4,82*

540 5824 :зоі 5,17 -1782 45 2,52

720- 5408 106 1,96 2349 31 1.32

Было установлено, что оптимальные для повышения выхода семян при отдаленной гибридизации экспозиции обработки пыльцы излучением ультрафиолетового лазера ЛГИ-21 соответствуют экспозициям, повышающим активность окислительных ферментов—пероксидазы и полифенолокендазы.

Влияние излучения гелий-неонового лазера на активность окислительных: ферментов пыльцы

Использование гелий-неонового лазера для обработки пыльцы мутанта, ежевики сизой обеспечило в оптимальных вариантах облучения повышение выхода семян .при скрещивании малины красной (Моллинг промис) с этой формой до .119—512% по сравнению с контролем в 1983 году и до 129— 256% в 1984 году (табл. 9). Аналогичные результаты были получены и при использовании в качестве материнской формы сорта: малины красной Ллойд Джордж.

Влияние обработки пыльцы излучением гелий-неонового лазера ЛГ-78 на выход семян при скрещивании малины красной (Ліоллинг промис) с мутантом [ежевики сизой

1983 г. 1914 г.

Вариант (экспозиция в секундах) Число опыленных пестиков • а - 0>__ за 3 5- СО з Выход семян &% от числа опыленных пестиков а У Ч с • _ о и к X д к со з • і х ч и о и 3 „ 3 й ё к « ° 3 Й ВД <п о н

контроль 8320 375 4,51 4050 112 2,77

60 5408 290 5,36 2106 104 4,94

180 5408 1248 23,05** 2511 178 ' 7,09*

360 6323 1020 16,14* 3240 116 3,58

540 4659 205 4,40 2430 80 3,29

720 4909 163 3,82 2592 14 0,54

Оптимальные экспозиции воздействия на пыльцу излучением гелий-неонового лазера, увеличивающие активность окислительных ферментов, соответствовали экспозициям, обеспечивающим повышение выхода семян при отдаленной гибридизации малины.

Сравнивая стнмулщтэщнй эффект обработки пыльцы представителей рода Лй/од гамма-, рентгеновским излучениями и излучениями ультрафиолетового (азотного) н гелнй-неонового лазеров, можно отметить в целом его возрастание с уменьшением частоты излучения, хотя в некоторых вариантах эффект применения излучения ультрафиолетового лазера превышал эффект применения гелий-неонового лазера.

Влияние нефильтрованного излучения ртутно-кварцевой лампы на выход семян при отдаленной гибридизации малины

Нефильтрованное излучение ртутно-кварцевой лампы ПРК>4 оказалось достаточно эффективным средством повышения выхода семян при отдаленной гибридизации в роде . Оптимальными для повышения выхода гибридных семян экспозициями обработки пыльцы оказались 300— 3000 секунд при интенсивности излучения 7,3 Вт/м5. При этих

же экспозициях наблюдалось увеличение активности перо-ксидазы (Е полпфенолоксидазы.

При скрещивании малины красной (Моллшг иромис) с мутантом ежевики сизой на диплоидном уровне материнской формы в оптимальных вариантах облучения было отмечено увеличение выхода семян до 151—540%, а на тетраплопдном —до 226—547% по сравнению с контролем. Дальнейшее увеличение экспозиций приводило к снижению активности окислительных ферментов в пыльце н уменьшению выхода гибридных семян (табл. 10).

Таблица 10

Влияние излучения ртутно-кварцевой лампыПРК-4 на выход семян при скрещивании малнны красной (Моллинг промнс 2 л. ) с мутантом ежевики сизой

Вариант (ЭКСПОЗИЦИЯ в секундах) 1£Ь2 г. 1981 г.

Число опыленных пестиков и Т" и И у? « г о а Выход семян В% ОТ ЧИСЛ2 опыленных пестиков і § § 2з 3 За £ х я у , 4 К 1 V ^ ч Э о ч—' 3 ОЕ а 3 « ™ еіУЇи и :г 35 о «ЕЕЗ ё о £ Б « « §

контроль 2748 365 13,28 8320 375 4,51

300 3589 589 16,41 4160 283 6,80

.1200 2515 775 30,81* 5824 1440 24,73**

3600 4220 352- ■ 8,38- 3910 492 12,59*

7200 . .1221 32 2,62. 3744 170 4,54

Стимулирующее действие нефильтрованного излучения ртутно-кварцевой лампы на оплодотворяющую способность пыльцы наблюдалось также при скрещивании малины красной сорта Оттава (2л и 4 л-) с ежевикой сизой, малиной душистой и малиной боярышннколистной. В оптнмальиых вариантах наблюдалось повышение выхода семян до 250— 500% по отношению к контролю.

Во всех перечисленных комбинациях скрещивания выход семян был больше при использовании в качестве материнской формы диплоидных сортов по'сравнению с тстраплои-дамн. Но повышение выхода семян при обработке пыльцы излучением ртутно-кварцевой лампы ПРК-4 оказалось бо-

лее .значительным для комбинации скрещивания, в которых использовались тетраплондные формы.

Все комбинации скрещивания, в которых мутант ежевики сизой 'служил материнской формой, не дали семян. Объяс-пением'Этого факта может служить высокая активность пс-роксндазы п полифенолоксидазы в листьях и пыльце мутанта ежевики по сравнению с активностью этих ферментов в тканях других видов рода , использованных, в этой

работе, что говорит о нецелесообразности использования этого вида в качестве материнской формы при гибридизации. Нескрещиваемость в указанном случае не удается преодолеть даже с помощью обработки пыльцы отцовского растения электромагнитными излучениями.

Таким образом, было установлено, что оплодотворяющая способность пыльцы при отдаленной гибридизации малины прямо коррелирует с активностью присутствующих- В" ней окислительных ферментов (пероксидазы и полифенолоксидазы), на которую можно целенаправленно влиять с помощью радиационных воздействий при селекционной работе с этой культурой. С помощью обработки пыльцы электромагнитными излучениями различной частоты в большинстве комбинаций опыления удается повысить выход семян при отдаленной гибридизации малины.

¡ПОВЫШЕНИЕ ВСХОЖЕСТИ СЕМЯН. МАЛИНЫ:

С ПОМОЩЬЮ ХИМИЧЕСКОЙ СКАРИФИКАЦИИ И ЭЛЕКТРОМАГНИТНЫХ ИЗЛУЧЕНИЙ

Разрабатывались методы повышения выхода сеянцев в связи с тем, что очень низкая всхожесть семян малины, даже после длительной стратификации не превышающая 1;— 10% (Острейко, 1970), не позволяет получать достаточно большого числа сеянцев для отбора, что тормозит селекционный процесс.. Изучалось влияние на всхожесть семян пред-гнбрпдизацнонной обработки пыльцы электромагнитными излучениями, а. также предпосевной обработки семян различными химическими веществами, с целью нарушения их экзогенного покоя, и излучением гелнн-пеонового лазера, с целью нарушения эндогенного покоя. . .

Влияние предгіїбридизационной. обработки пыльцы.

электромагнитными излучениями на всхожесть семян н продуктивность отдаленной гибридизации

малины

Было установлено, что обработка пыльцы отцовского растения электромагнитными излучениями не вызвала существенного изменения всхожести семян по сравнению с контролем. Но ввиду того, что в оптимальных вариантах облучения повышался выход семян, коэффициент продуктивности отдаленноґі гибридизации тоже возрастал.

Так, воздействуя на пыльцу отцовского растения нефильтрованным излучением ртутно-кварцевой лампы ПРК-4 в экспозициях от 300 до 1200 секунд, при скрещивании малины красной сорта Моллннг промкс (2п ) с ежевикой удалось добиться повышения коэффициента продуктивности гибридизации до 155—172% по сравнению с контролем, малины красной сорта Оттава (4 п ) с мутантом ежевики сизой — до 387—550% (с 0,08 до 0,31—0,44% от числа опыленных пестиков), малины^ красной сорта Моллинг промне (4 л ) с малиной душистой—до 350—650% по сравнению с контролем (с 0,02 до 0,07—0,13%,от числа опыленных пестиков). Это свидетельствует о перспективности метода предгнбрнди-зацнонной обработки пыльцы электромагнитными излучениями для -повышения продуктивности отдаленных скрещиваний малины.

Влияние химической скарификации на всхожесть семян малины

Сравнивались два метода химической скарификации семян малины, рекомендуемых в литературе, а именно: предпосевная обработка нх'1%-ным раствором гипохлорита кальция (Казаков, 1983) и обработка 2н раствором гидрокепда калия (MiSiC, вг&с , 1973).

При использовании гидрокеида калия наиболее эффективной явилась 2700-секундная (45 мин.) обработка семян малины. В этом варианте обработки семян от скрещивания сортов малины красной Моллннг промне и Оттава-с ежевикой их всхожесть повысилась соответственно с 4,67 до 14,00% от числа посеянных (до 300% по сравнению с контролем) и с 1,07 до 14,00% от числа посеянных (до 838% по отношению к контролю).

Обработка семян 1%-ным раствйром'пшохлоритй кальция оказалась менее эффективной. В оптнмальиом варцанте (замачивание семян в течение 4-х суток) всхожесть семян от скрещивания сорта малины красной Моллннг промис с ежевикой повысилась до 227% по сравнению с контролем (с 4,67 до 12,67% от числа посеянных семян), а семян от скрещивания малины красной сорта Оттава с ежевикой до 859% к контролю (с 1,67 до 14,33% от числа посеянных семян)-

Влияние предпосевной .обработки, семян .малины, излучением гелий-неонового лазера. на. их всхожесть.

Всхожесть семян малины удалось стимулировать с помощью предпосевной обработки их излучением гелнй-неоно-иого лазера. При оптимальной экспозиции обработки (3600 с) всхожесть семян от скрещивания малины красной сортов Моллннг промис и Оттава с мутантом ежевики сизой возросла, соответственно, с 4,67 до 12,00 и с 1,67 до 9 67% от числа посеянных или до 236 и 580% по сравнению с контролем.

Влияние совмеетногодействия; химической скарификации и обработки семян малины лазерным излучением на их всхожесть.

Сочетание оптимальных вариантов химической скарификации семян и обработки их лазерным излучением обеспечило более значительное повышение всхожести семян малины, чем раздельное применение этих методов. С целью размягчения эндокарпня семян малины был использован 2н раствор КОН (45-мнпутная обработка), а для стимуляции обменных процессов в ннх применялась предпосевная обработка излучением гелий-неонового лазера прн интенсивности излучения 0,6—0,7 Вт/м! и экспозиции 3600 секунд (60 мин.).

При использовании указанных методов обработки всхожесть семян, полученных от скрещивания малины красной сорта Моллннг промис с мутантом ежевики сизой возросла с 4,67% от числа посеянных в контроле до 27,33%, а семян -от скрещивания малнны красной сорта Оттава с мутан+ом ежевики — с 1,67% в контроле до 16,00%. По отношению к контролю всхожесть семян, полученных от перечисленных комбинаций скрещивания, возросла, соответственно, в 5,6 и 9,6 раза. ________________ .

ОТДАЛЕННЫЕ ГИБРИДЫ-МАЛИНЫ, ПОЛУЧЕННЫЕ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ РАДИАЦИОННЫХ МЕТОДОВ ПРЕОДОЛЕНИЯ НЕСКРЕЩИВАЕМОСТИ

В-ходе работы были получены гибрнды малины красной с мутантом ежевики сизой и малиной душистой.

Мплиио-ежевичные гибриды по морфологическим признакам занимают промежуточное положение между исходными формами, несколько более уклоняясь в сторону ежевики (особенно, если материнское растение диплоидное). Несмотря па обильное цветение, у них, как правило, завязываются лишь единичные костянки, приближающиеся по вкусу к плодам растения-опылителя.

Гибрнды, полученные с использованием в качестве материнской' формы тетраплондных сортов малины красной, меньше уклоняются в сторону мутанта ежевики по форме и окраске стебля, шипов, листьев, морфологии цветка. Среди них встречаются достаточно плодовитые и-крупноплодные формы с удовлетворительными вкусовыми качествами нлодои (Д1>№ 82—2—5, 82—2—6), использование которых в дальнейшей селекционной работе является перспективным. Гибриды малины красной (Моллинг промнс, Оттава) с малиной душистой по морфологическому строению' занимают про. межуточное положение между родительскими формами. На основании полученных данных не представляется возможным сделать вывод об уклонении гибридов по строению п сторону одной из исходных форм. Все гибриды обладают слабой плодовитостью н не представляют непосредственной хозяйственной ценности. Но они могут быть использованы в дальнейшей селекционной работе, в частности, на устойчивость к пурпуровой пятнистости, серой гнили, прямостоя-* честь побегов и т. д..

выводы

1. Представители рода различаются ио актив-

ности окислительных ферментов (полифенол ОКСИД азы и героксидазы) в пыльце и вегетативных органах. Активность нолифенолоксндазы п пероксндазы в пыльце прямо пропорциональна их активности в листьях. В порядке снижения этого показателя изучавшиеся виды расположились следующим образом: ежевика сизая, малина боярышннколнстная,

малина красная, малина душистая. У малины красной обнаружены сортовые различия в активности полифенол оксид азы п пероксидазы..

2. Результативность отдаленных скрещиваний в роде коррелирует с активностью окислительных ферментов

родительских, форм. Скрещивания, как правило, удаются лучше, когда активность пероксидазы и полифенолоксидазы выше у отцовского растения, чем у материнского.

3. Под действием электромагнитных излучений всех изучавшихся частот активность окислительных ферментов пыльцы возрастает при увеличении доз обработки до определенного уровня, а при дальнейшем увеличении доз снижается. Наибольший стимулирующий эффект достигался при обработке пыльцы излучением ультрафиолетового лазера ЛГИ-21, несколько меньший — при обработке пыльцы излучением ртутио-кварцевой лампы. ПРК.-4 и гелий-неонового лазера ЛГ-78. В меньшей степени он выражен при обработке пыльцы рентгеновским и гамма-излучениями. Оптимальные дозы гамма- и рентгеновского излучений составили 1—5 Гр при мощности дозы 0,007 Гр/с, оптимальные экспозиции обработки излучением ртутно-кварцевой лампы. ПРК~4 составили 300—3600 секунд (5—60 минут) при интенсивности излучения 7,3 Вт/м1, излучением ультрафиолетового лазера ЛГИ-21—60-360 с (1—6 минут) при интенсивности излучения 3,6 Вт/м*, излучением гели й-неонового лазера ЛГ-78— 60—360 с (1—6 минут) при интенсивности излучения 0,6— 0,7 Вт/мг.

4. Установлено, что по мере увеличения дозы обработки пыльцы электромагнитными излучениями процент завязывания плодов и выхода гибридных семян сначала увеличивается, а затем, с дальнейшим увеличением дозы обработки, снижается. Оптимальные дозы излучений, повышающие опло-'дотворяющую способность пыльцы и выход , семян при отдаленной гибридизации малины, соответствуют оптимальным дозам, повышающим активность окислительных ферментов. Наиболее эффективным оказалось применение нефильтрованного излучения ртутно-кварцевой лампы ПРК-4, которое позволяет увеличить выход семян в 3—5 раз, в 2—3 раза увеличивается этот показатель под действием излучений гелий-неонового (ЛГ-78) и азотного (ЛГИ-21) лазеров, в 1,5—2 раза—под действием рентгеновского и гамма-излучений.

5. Всхожесть семян, полученных при отдаленной гибридизации малины с использованием предгибридизационной

обработки пыльцы отцовского растения электромагнитными излучениями, существенно не меняется по сравнению с контролем. Но в силу увеличения выхода семян коэффициент продуктивности оплодотворения в вариантах отдаленного скрещивания и самоопыления малины увеличивается.

6. Установлено, что с помощью химической скарификации семян 2н раствором гндроксида калия в течение 2700 секунд (45 минут) с последующей 3600-секундной (60 минут) обработкой их излучением гелий-неонового лазера ЛГ-78 при интенсивности излучения 0,6—0,7 Вт/м2 "всхожесть их возрастает в 5—9 раз по сравнению с контролем,

7. Совместное применение предгпбриднзационного воздействия на пыльцу электромагнитными излучениями и предпосевной обработки семян по указанной методике обеспечивает значительное увеличение выхода гибридных сеянцев малины, что расширяет возможности отбора при селекционной работе с этой культурой.

РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ СЕЛЕКЦИОННОЙ ПРАКТИКИ

Применение указанных методов обеспечивает повышение коэффициента продуктивности скрещивания (т. е-, в конечном счете, повышение выхода гибридных сеянцев) в 3,5— 5,5 раз по сравнению с контролем.

С целью повышения эффективности гибридизации при отдаленных скрещиваниях малины пыльцу отцовского растения рекомендуется подвергать обработке излучением гелнй-неонового лазера в течение 60—360 секунд при интенсивности излучения 0,-6—0,7 Вт/м2, обработке излучением ультрафиолетового лазера в течение 60—360 секунд.при интенсивности излучения 3,6 Вт/м2 или воздействию нефильтрованного излучения ртутно-кварцевой лампы ПРК-4 в течение 300—1200 секунд при интенсивности излучения 7,3 Вт/м2.

Для повышения всхожести гибридных семян малнны их необходимо подвергать комплексной обработке 2н раствором КОН в течение 2700 секунд (45 минут) и излучением гелпй-неонового лазера в течение 3600 секунд (60 минут) при интенсивности излучения 0.6—0,7 Вт/м2.

По теме диссертации опубликованы следующие работы:

1. Жукова Н. В-, Рязанов Л. А., Самохвалов Г. Н. Некоторые вопросы генетической детерминации количества половых элементов у представителей рода Ливия //Развитие научного наследия И. В'. Мичурина: Краткие тез. докл. обл. научн. конф.—Мичуринск, 1981. С. 67—68. .

2. Жукова Н. В., Рязанов А. А. Корреляционные отношения элементов цветка в роде {¿иёиз //4-й съезд ВОГнС: Краткие тез. докл—Кишинев, 1984.—С. 173—174,

3. Жукова Н, В. Выход семян при отдаленной гибридизации малины после воздействия на пыльцу ультрафиолетовой и ионизирующей раднации//Проблемы повышения эффективности современного садоводства/(октябрь, 1982) Краткие тез. докл. Всесоюз. иаучн. конф, молодых ученых. —Мичуринск, 1982.—С. 193—194.

4. Жукова Н. В., Рязанов А. А, Изучение количественных признаков цветка малины и ежевнкн//Бюллетень научн. информации ЦГЛ им. И. В. Мичурина.—Мичуринск, 1983— Вып. 40.—С. 25—28.

5. Жукова Н. В., Остапенко В, И- Активность окислительных ферментов и выход семян в связи с радиационной об4 работкой пыльцы малнны//Вторая Всесоюзная коиф. по с.-х. радиологии:. Тсзнсы докл.—Обнинск, 1984.—Т. 11.—С. 606. Остапенко В. И., Жукова Н. В, Облучение пыльцы малины перед гнбриднзацней/Садоводство. — 1984.—№ 7. — С. 26—27.

7. Жукова Н. В. Влияние радиационной обработки пыльцы на активность окислительных ферментов и выход семяи при отдаленной гибридизации малпны//Генётическне основы п практические результаты отдаленной гибридизации растений.—Мичуринск, 1984.—С. 116—119.

8. Жукова Н- В. Обработка семян малины щелочами и лазерным излучением с целью повышения их всхожестп//На-ука—сельскому хозяйству: Краткие тезисы докладов к предстоящей обл. научн. конф. молодых ученых,—Мичуринск, 1985,—С. 34—35.

9. Жукова Н. В., Остапенко В. И- Влияние нредгибридн-зационпого облучения пыльцы на выход семян при отдаленной гибридизации малины//Информлнсток Кг 20—84 Тамбовского ЦНТИ, 1984.

. ' 10. Жукова Н. В., Остапенко В. И. Способ подбора исходных форм при отдаленной гибридизации малины//Информ-лнеток № 204—86 Тамбовского ЦНТИ, 1986.

11. Остапенко В- И., Жукова Н. В. Новые отдаленные гибриды между малиной красной и малиной душнстой/Ин-фор мл исток № 212—87 Тамбовского ЦНТИ, 1987.

12. Остапенко В. И., Жукова Н. В, Новые отдаленные гибриды малпны//Информлнсток Кэ 274—87 Тамбовского 'ЦНТИ, 1987.

Заказ 3637. НЛ 01867. Тираж 100

Мичуринская городсная типография Управления издательств, полиграфии и книжной торговдн.