Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНА РЕЦЕПТОРА E.COLI F18 (ECR F18 / FUT1) И ЕГО ВЛИЯНИЕ НА ХОЗЯЙСТВЕННО-ПОЛЕЗНЫЕ ПРИЗНАКИ СВИНЕЙ

ВАК РФ 03.00.23, Биотехнология

Автореферат диссертации по теме "ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНА РЕЦЕПТОРА E.COLI F18 (ECR F18 / FUT1) И ЕГО ВЛИЯНИЕ НА ХОЗЯЙСТВЕННО-ПОЛЕЗНЫЕ ПРИЗНАКИ СВИНЕЙ"



На правах рукописи

КОНОВАЛОВА ЕЛЕНА НИКОЛАЕВНА

ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНА РЕЦЕПТОРА E.COLÏ F18 (ECR F18 / FUTI) И ЕГО ВЛИЯНИЕ НА ХОЗЯЙСТВЕННО-ПОЛЕЗНЫЕ ПРИЗНАКИ СВИНЕЙ

03.00.23 - Биотехнология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискаыие ученой степени кандидата биологических наук

Дубровины - 2003

Работа выполнена в отделе биотехнологии Всероссийского государственного научно-исследовательского института животноводства РАСХН.

Научны« руководители: Официальные оппоненты:

Веду щая организация:

Защита диссертации состоится « 2004 года, в 10 часов на

заседании диссертационного совета Д 006.013.01 при учреждении Всероссийский государственный научно-исследовательский институт животноводства (ВИЖ).

Адрес института: 142132, Московская область, Подольский район, пос. Дубровицы, ВИЖ

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института. Автореферат раз слан

2003 года.

доктор биологических наук Зиновьева Наталия Анатольевна; доктор сельскохозяйственных наук Шмаков Юрий Иванович

доктор биологических наук, профессор Фомичев Юрий Павлович; кандидат биологических наук, доцент Новикова Людмила Федоровна

Московский государственный университет прикладной биотехнологии (МГУПБ)

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы.

На формирование продуктивности сельскохозяйственных животных оказывают влияние как генетические, так и не генетические (внешние) факторы. В этой связи, при традиционном отборе животных по фенотипическому проявлению признаков, опенка истинного генетического потенциала животных может быть занижена. Селекция по генотипу, предполагающая определение генов, напрямую или косвенно связанных с локусами количественных признаков (QTL), имеет преимущества перед традиционными методами. Она делает возможным оценку животных в раннем возрасте независимо от пола животных и, в конечном итоге, повышает эффективность селекционной работы.

Поэтому в настоящее время поиск, научное и экспериментальное обоснование целесообразности использования м опекул ярн о-генетнческих маркеров признаков продуктивности является актуальной проблемой биотехнологии в животноводстве.

В качестве возможного генетического маркера, представляющего практический интерес для свиноводства, рассматривается ген рецептора Е. coli FIS (ECR FJ8). Установлено, что ген, кодирующий белок рецепторов кишечника свиней, имеющих сродство к E.coU FIS, тесно сцеплен с геном альфа-1-фукозилтрансферазы (FUTI). Наличие точковоЛ мутации гена FUTI (A—>G в позиции 307) делает возможным проведение косвенной диагностики полиморфизма гена ECR FIS / FUTI [Meijerink et al., ¡997]. Предполагается, что выявленный полиморфизм может служить причиной устойчивости или чувствительности свиней к колибактернозу. Исходя из этого, актуальным является определение полиморфизма гена ECR F18/FUTI и определение связи между его вариантами и признаками продуктивности свиней.

Цель и задачи исследования.

Целью диссертационной работы явилось исследование полиморфизма гена рецептора Е. coli FIS (ECR F18/FUT1) у свиней различных пород и установление связи между аллелъными вариантами гена и хозяйственно-полезными признаками.

Для достижения цели были поставлены и решены следующие задачи:

1. Пополнить банк ДНК свиней раздичныхлород.

UHü МСХА

2. Усовершенствовать методику анализа полиморфизма гена ECR F18/FUTI.

3. Определить частоты встречаемости аллелей и генотипов гена ECR F18/FUT1 у свиней различных пород.

4. Провести исследования взаимосвязи полиморфизма генов ECR F38/FUT1 и Ryrl.

5. Выполнить исследования связи вариантов гена ECR F18/FUT1 с восприимчивостью поросят к диарее.

6. Изучить связи между вариантами данного гена и хозяйственно-полезными признаками свиней (среднесуточными привесами в период от рождения до отъема, сохранностью поросят).

Научная новизна.

Усовершенствована методика определения аллельных вариантов гена ECR F18/FUT1 свиней. Определены частоты встречаемости аллелей и генотипов гена ECR F18/FUT1 у свиней восемнадцати популяций восьми пород (крупная белая, белая короткоухая, уржумская, белорусская черно-пестрая, ландрас, эстонская беконная, дюрок, белорусская мясная), разводимых в России и Беларуси. Изучено влияние вариантов исследуемого гена на хозяйственно-полезные признаки свиней.

Практическая значимость работы.

Пополнен банк ДНК свиней 1027 образцами, отобранными от свиней семи пород, и созданы базы данных хозяйственно-полезных признаков. Проведена оценка свиней восьми пород на носитсльство нежелательного аллеля G гена ECR F18/FÜTL Изучена связь гена ECR F1S/FUT1 с геном рианодинового рецептора (Ryrl) - главным геном, обуславливающим чувствительность свиней к стрессам. Исследовано влияние генотипов гена ECR F18/FUT1 на рост поросят в период от рождения до отъема и их сохранность.

Апчобаиня работы.

Материмы диссертационной работы были доложены и обсуждены на:

• международной конференции «ДНК-технологии в клеточной инженерии и маркировании признаков сельскохозяйственных животных», ВИЖ, п, Дубровицы, 2001 г.;

• научно-практической конференции «Перспективы и развитие свиноводства в XXI веке», РАМЖ, п, Быково, 2001 г.;

• ежегодной конференции аспирантов и молодых ученых, ВИЖ, п, Дубровицы, 2002 г.;

• 2-о ¡1 международной научной конференции «Современные достижения и проблемы биотехнологии сельскохозяйственных животных», ВИЖ, п. Дубровицы, 2002 г.;

• ежегодной конференции аспирантов и молодых ученых, ВИЖ, п. Дубровицы, 2003 г.;

• 3-ей международной научной конференции «Современные достижения и проблемы биотехнологии сельскохозяйственных животных», ВИЖ, п. Дубровицы, 2003 г.

Основные положения, выносимые на защиту.

К Пополнен банк ДНК свиней 1027 образцами, отобранными от свиней семи пород.

2. С использованием усовершенствованной тест-системы дана характеристика генетической структуры популяиий свиней восьми пород по гену ECRFI8/FUT1.

3. Выявлена тенденция взаимосвязи гена ECR F18/FUT1 с геном рианодинового рецептора свиней (Ryrl), обуславливающим чувствительность свиней к стрессам.

4. Изучены связи между генотипами гена ECR FI8/FUT1 и хозяйственно-полезными признаками свиней (устойчивость поросят к послеотьемной диарее, среднесуточные привесы в период от рождения до отъема, сохранность).

Публикации.

По материалам диссертации опубликовано 6 научных работ.

Структура н объем работы.

Диссертационная работа написана на 95 страницах, состоит из следующих разделов: введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, результаты исследований, обсуждение, выводы, практические предложения, список литературы. Работа включает 22 таблицы и 18 рисунков. Список литературы включает 120 источников, в том числе 75 на иностранных языках.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Экспериментальные исследования проводились в лаборатории молекулярной генетики я шггогенетики животных в 2001-2003 гг. в соответствии с планом научно-исследовательской работы отдела биотехнологии ВИЖа.

Исследования проводились по схеме, представленной на рисунке I.

Рисунок 1. Схема исследований.

Свиньи различных пород {п=1222)

55

га ■ ж Н

ё с

о ¡£<г> Й

« й ? з А

о я га

У X о->■00

алп <С

1X1С со

т

£

I

га ¡1.

I с ||

а: я с

о к -

И О.А га О

"I

£ з1?

о о< О «со

X

Ландрас

а •ж £

ъе. и

са &

о.

ч

га го

<о

С и О е

ПЦР-ПДРФ анализ гена Руг1

~~Р

J т

ос о.

(О

о

_ II

5 е

Р 5

Йо

с; м

ем иэ

« а:

* го

5-Е

I

Белорусская черно-пестрая

3

о Ей О о к а.

о _

ш <г

«

ЙЙ V

О С

I

А К

¿52 <3 &

| ПЦР-ПДРФ анализ гена ЕСЯ Р181 РЦТ1

X

Частоты встречаемости

аллели

И

X

I

аллели

ЙГ

ш

I

генотипы

И

АЭ

Анализ взаимосвязи

во]

X

Крупная белая

I

ЗАО «Заречье», п-35; Сов.-ком, «Заря», п=64; ГПЗ «Талдом», п=80; ГПЗ «Соколовка», п=33; Э/х «Кленово-Чегодаево» п=127;

ЗАО «Дражно», п=12

Чувствительность к диарее

I

— Темпы роста

Сохранность поросят

I

Анализ влияния полиморфизма на проявление признаков

Для пополнения банка ДНК были взяты пробы ткани от животных 16-и популяций семи пород:

1) крупная белая - 5 популяций, 3IS голов:

2) белая короткоухая - I популяция. 64 головы:

3 ) белорусская мясная - 2 популяции, 47 голов;

4) дюрок - 1 популяция, 65 голов;

5) ландрас - 3 популяции, 298 голов;

6) белорусская черно-пестрая - 2 популяции, ¡69 голов;

7) эстонская беконная - 2 популяции, 66 голо

ДНК для анализа выделяли перхлоратным методом по методике Гладырь Е.А. и др. (2002). Выделенную ДНК тестировали методом ПЦР-ПДРФ по методике, усовершенствованной в ходе выполнения диссертационной работы.

Дополнительно было выполнено исследование свиней крупной белой породы ГПЗ «Со колов ка» Кировской обл. (п=33) и уржумской породы ГПЗ «Мухине кий» Кировской обл. (п=162).

Для амплификации фрагмента гена ECR FI8 использовали лраймеры ECR1 и ECR.2 {табл. /).

Таблица I.

Характеристика праймеров, используемых для диагностики полиморфизма гена ECR F1S/FUTL

Праймср Последовательность нуклеотидов Температура |

плавления, °C j

ECR.1 ege сас ctc tgt ctg асс tt 65 j

ECR2 agg age gtg cct gtc tac ctc 68 !

Полиморфизм гена ЕСК П8/риТ1 выявляли посредством ферментного гидролиза с использованием рестриктазы В5ТНН I (прототип Н11а1) с последовательностью узнавания вСв Ю. Отсутствие сайта рестрикции соответствует аллелю А, в то время как его наличие - аллелю О. Для анализа ам п л и ф ц и рованных фрагментов ДНК и продуктов рестрикции использовали метод гель-электрофореза. Идентификацию и документацию результатов осуществляли, используя систему УВТ1 (ООО «Компания Блоком», г. Москва),

Статистическую обработку данных проводили по методам вариационной статистики [Меркурьева Е.К. и др., 1991] и ПВМ (компьютере) с использованием программы Excel.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ. ЗЛ. Пополнение банка ДПК свиней.

В рамках выполнения данной работы были взяты пробы и выделена ДНК от 1027 свиней 16 популяций семи пород (табл. 2).

Таблица 2.

Характеристика породной принадлежности проб свиней,

пополнивших банк ДНК.

Порода Популяция Число голов

Крупная белая Э/х «Кленово-Чегодасво» Московской обл. 127

ГПЗ «Талдом» Московской обл. 80

Совхоз-ком «Заря» Гомельской обл. 64

ЗАО «Заречье» Кировской обл. 35

ЗАО «Дражно» Витебской области 12

Белая короткоухая ГПЗ «Сампурский» Тамбовской обл. 64

Белорусская черно-пестрая СК «Борисовский» Минской области 150

Совхоз-комб, «Заря» Гомельской обл. 19

Ландрас ГПЗ «Нива» Московской обл. 254

СГЦ «Заднспровский» Витебской обл. 26

Совхоз-комб. «Заря» Гомельской обл. 18

Эстонская беконная Совхоз-комб. «Заря» Гомельской обл. 41

ЗАО «Дражно» Витебской области 25

Дюрок ГПЗ «Тзлдом» Московской обл. 65

Белорусская мясная ПЗ «Сож» Гомельской обл. 30

ЗАО «Дражно» Витебской обл. 17

ИТОГО: 1027

3.2. Усовершенствование тест-системы для выявления полиморфизма гена ECRF18/FUT1.

Следующим этапом в работе явилось усовершенствование тест-системы для анализа аллельного полиморфизма гена ECR FI 8/FUTI.

Предлагаемые нами праймеры позволяют легко идентифицировать как фрагменты ДНК после ПЦР-амп лифнкшии, так и рестрицированные фрагменты, образующиеся в результате ПДРФ-анашш.

Как следует из данных, представленных на рисунке 2, наличие нерестрицнрованного фрагмента длиной 378 п.о. соответствует генотипу АА, двух фрагментов длиной 291 и 87 п.о. — GG, в то время как наличие трех фрагментов длиной 378,291 и 87 п.о. соответствует генотипу AG.

Рисунок 2.

Генотипцрование свиней по гену ECR FIS /FUTI,

l 2 3 4 5 6

/ 378 п.о. - 291 п.о. 4 87 п.о.

['ель-электрофорез продуктов ПЦР после энзима/.', ичсского гидролиза рестриктазой ВзШШ в 2% агарозном геле в буфере ТЛЕ с добавлением бромида, дтшдия до конечной концентрации 30 нг/мл. Верхний нерестрицироеанный фрагмент длиной 378 п.о. соответствует аляелю А, два нижних фрагмента длииой 291 п.о. и 87 п.о. соответствуют аллелю С, Дорожки 1, 2, 4, б—генотип СО, дорожки 3, 5 - генотип АО.

3.3. Анализ генетической структуры популяций евннен по гену ЕСИ Р18Л?иТ1.

Анализ полиморфизма гена ЕСЯ Р18<ТиТ I у российских и белорусских пород свиней различного направления продуктивности выявил наличие двух аллелей у всех исследованных пород. Как и ожидалось, частота встречаемости аллеля О была относительно высокой (табл. 3).

Как следует из данных таблицы 3, наибольшая частота встречаемости предположительно чувствительного к кол ибактер позу аллсля С была выявлена у свиней уржумском породы (0,950), а наименьшая - у животных белорусской мясной породы (0,649),

Таблица 3

Частоты встречаемости агюлей гена ЕСП у свиней

различных пород.

Порода* 1 Исследовано популяций Число голов, п Частоты встречаемости аллелей

А в

Белорусская мясная 2 47 0,35] 0,649

Белая короткоухая 1 64 0,300 0,700

Эстонская беконная 2 66 0,252 0,748

Дюрок 1 65 0,250 0,750

Ландрас 3 298 0,231 0,769

Белорус, черно-пестрая 2 169 0,216 0,784

Крупная белая 6 351 0,192 0,803

Уржумская 1 162 0,020 0,980

Итого 18 1222

* Породы животных указаны по возрастающей « зависимости от частоты встречаемости алигля О,

Следует отметить, что наиболее высокая частота желательного аллеля А отмечаюсь, как правило, у свиней мясных и беконных "¡«эрол. Так, в исследованных популяциях свиней белорусской мясной, белорусской черно-пестрой и эстонской беконной пород, а также свиней пород дгарок и ландрас она колебалась от 0,216 до 0,351,

Распределение генотипов гена ЕСК. Р1К/ПЛ1 в исследованных породах свиней схематично представлено на рисунке 3. Данные показывают, что частота нежелательного генотипа СО была относительно высокой у всех исследованных пород и составляла от 44% у свиней белой короткоухой породы до 96% у свнней уржумской породы, У свиней крупной белой породы средняя частота встречаемости генотипа СО составляла 65,2%.

Рисунок 3,

Частотм встречаемости генотипов ECR F18/FVT1.

□ GG ПАС ШЛА I

Породы .животных указаны в порядке уменьшения частоты встречаемости предположительно чувствительного в колибактериозу генотипа GG,

3.4. Анализ взаимосвязи гена ECR FÏ8/FUT1 и Ryrl.

Для исследования взаимосвязи генов ECR F18/FUT! и Ryrl был проведен [ЩР-ПДРФ-анапиз свиней исходы ландрас СГЦ «Заднепровский» по двум указанном генам. Результаты анализа представлены в таблиц 4.

Таблица 4.

Взаимосвязь генотипов гена Ryr 1 с аллелями гена ECR FIS/FUTI у свиней породы ландрас.

Генотип по Ryr Количество голов Частоты аллелей ECR.

А G

NN 16 0,16±0,09 0,8 4± 0,09

Nn 10 0,4±0,15 0,6±0,15

р>0,05

Как следует из данных таблицы 4, частота встречаемости аллеля G гена ECR F18/FUTI была выше у животных с генотипом NN гена Ryrl по сравнению со свиньями с генотипом Nn (р>0,05), что указывает на

тенденцию взаимосвязи аллеля G гена ECR FIS / FUTI с аллелем N гена Ryrl и подтверждает наше предположение об отрицательном влиянии селекции стрессустойчивых животных на невосприимчивость свиней к диарее. Проведенный корреляционный анализ подтвердил взаимосвязь аллелей Стена ECR F18/FUT1 и N гена Ryrl <x2=2,S35 р<0,05).

3.5. Изучение влияния полиморфизма гена ECR FIS/ПЛТ на проявление диареи.

Для исследования связи между генотипами гена £CR F18/FUTI и устойчивостью к диарее было выполнено генотипирование поросят в гнездах, в которых у части потомства наблюдалось проявление клинических признаков диареи. Результаты анализа суммированы в таблице 5.

Таблица 5.

Влияние генотипа ECR F18/FUT1 на проявление диареи у поросят крупной белой породы.

Хозяйство Число голов Частоты встречаемости

Генотипы, % Аллели

АА AG GG А G

ЗАО с Заречье» Кировской обл., поросята о возрасте 60 дней

Контроль* j 14 - 29,4 70,6 0,15 0,85

> Опыт** i 13 - 22,2 77,* 0,11 0,89

Э/х «Кченово-'кгодаево» Московской обл., новорожденные поросята.

Контроль* 7 5,9 26,2 67,9 0,19 0,81

Опыт** 66 8,0 24,0 68,0 0,20 0,80

* отсутствие ши ** наличие клинических признаков диареи;

разница между группами генотипов недостоверна.

Из таблицы 5 видно, что среди животных ЗАО «Заречье» с признаками диареи генотип йв встречается на 7,1% чаще по сравнению со здоровыми животными. У поросят из э/х «Кленово-Чегодаево» эта разница составляет 1,9%. Однако частота устойчивого к диарее генотипа АА в контрольной группе поросят э/х «Кленово-Чегодаево» была на 2,1% ниже по сравнению с опытной группой. Таким образом, полученные данные позволяют говорить о

наличии тенденция влияния генотипов гена р!8;ТиТ 1 на проявление диареи у послеотъемных поросят.

3.6. Исследование влияния генотипов гена ЕСЙ Р18/Р1ГП на признаки продуктивности свиней.

Так как чувствительность к диарее может оказывать влияние на уровень проявления признаков продуктивности, нами были выполнены исследования проявления некоторых хозяйственно-полезных признаков свиней о зависимости от генотипов по ЕСИП8/ПЛЧ.

3.6.1. Анализ темпов роста.

На рисунке 4 показан график темпов роста поросят в период от рождения до отъема в зависимости от генотипа свиноматок по гену ЕСИ Р18/РЦТ1.

Рисунок 4,

Влияние генотипа свиней по ЕСЯ ¥18/Р\]Т1 на темпы роста поросят от рождения до отъема.

Популяция

I. Уржумская (ГПЗ «Мухинекий»); 2. Крупная белая (э/х «К,чеиово-Чегодаево»); 3. Крупная белая (ЗАО »Заречье»); 4. Крупная белая (ЗАО «Дражно»); 5. Белорусская мясная (ЗЛО «Дражно»); 6. Эстонская беконная (ЗАО «Дражно»); 7. Ландрас (ГПЗ «Нива»); 8. Дюрок (ГГ!3 «Талдом»).

Возраст отъема: популяции 4, 5, 6— 45 дней; популяции I, 2, 3, 7,8 — 60 дней.

Как следует из данных рисунка 4, однозначной зависимости темпов роста поросят от генотипа матери по гену ECR F18/FUTI у исследованных пород выявлено не бьшо. Так, у двух из трех популяций свиней крупной белой породы наблюдалось превосходство по темпам роста животных с генотипом AG по сравнению с генотипом GG на 4,0-15,7%. Среди животных мясных и беконных пород свиней (ландрас, дюрок, эстонская беконная, уржумская) аналогичная закономерность выявлялась у животных эстонской беконной и уржумской пород. В первом случае поросята, несущие аллель А гена ECR F18/FUT1, имели lía 17,0% более высокие среднесуточные привесы по сравнению с животными, имеющими генотип GG (р<0,05), а у поросят уржумской породы эта разница составила 12,3% (р>0,05).

С целью установления влияния генотипа поросят по гену ECR F18/FUTI на темпы их роста, нами были выполнены исследования поросят ЗАО «Заречье» Кировской области.

На рисунке 5 показан график зависимости темпов роста помесных поросят из ЗАО «Заречье» в период от рождения до 3 месяцев в зависимости от их генотипа по ECR F3 8/FUT1.

Рисунок 5.

Динамика живой массы поросят в зависимости от генотипа по ECR F18/FUT1.

Как следует из представленных данных, животные с генотипами АА и АО имели незначительное преимущество по темпам роста в период от рождения до 3 месяцев, однако достоверных различий выявлено не бьшо.

Так как чувствительность свиней к диарее имеет доминантный тип наследования, был проведен анализ различий в темпах роста этих же поросят (ЗАО «Заречье») в зависимости от отсутствия (генотип АА) или наличия (генотипы AG+GG) предположительно чувствительного к диарее аллеля G (рис. б).

Как следует из данных рисунка б, наличие аллеля G гена ECR F Í S/FUT 1 обуславливало отставание поросят по темпам роста: поросята с генотипом АА превосходили аналогов, несущих аллель G, на 4,9-6,4%.

Рисунок 6.

Изменение живой массы поросят от рождения до 3 месяцев в зависимости от наличия или отсутствия аллеля G гена ECR F18/FVTI.

25

20

fe

Sis

v

£

£10 m £

5

0

4.5.2. Сохранность поросят.

Так как наличие в генотипе свиней аллеля О гена ЕСЯ Р18/Рит1 предположительно связано с восприимчивостью поросят к диарее и, вследствие этого, их потерями, нами было выполнено сравнение сохранности поросят, полученных от свиноматок с генотипом АА, и животных, несущих аллель О (генотипы Ай и СО) (табл. 6).

Как следует из данных таблицы 6, у животных с генотипом АА гена ЕСП Р18/РиТ1, в 6-и из 8-и исследованных популяций свиней сохранность поросят была выше по сравнению со свиньями, несущими аллель в. В зависимости от популяции, сохранность поросят В группе АА была выше от 0,4% у свиней эстонской беконной породы до ¡7,5% у свиней белорусской черно-пестрой породы.

■ АА DAG+GG: +5,2%

Таблица 6.

Сохранность поросят в зависимости от наличия е генотипе матерей аллеля С гена ЕСЯ. ПЯ/ГиТ!.

Порода Всего Сохранность, % Разница между

голов АА АС+СС группами (%)

Крупная белая1 64 85,2 79,6 +5,6

Белорусская черно-пестрая1 19 : 100 82,5 +17,5

Белорусская мясная3 17 100 96,1 +3,9

Ландрас1 18 88,9 80,9 +8,0

Ландрас2 93 85,0 81,8 +3,2

Дюрок2 25 76,8 81,7 -4,9

Эстонская беконная1 41 75,0 87,3 -12,3

Эстонская беконная3 25 94,1 93,7 +0,4

Примечание. 'совхоз-камбинат «Заря» Гомельской обл.; ГПЗ «Нива» Московской обл.;3ЗАО «Дражно» Витебской обл..

возраст отъема поросят: популяция ЗАО «Дражно» - 45 дней; остальные популяции -60 дней

Вместе с тем, следует отметить, что сохранность поросят в зависимости от генотипа матери является лишь косвенным показателем влияния полиморфизма гена ЕСЯ Р18/ПЛ"1 на этот признак, так как поросята наследуют от матери только один из двух аллелей. Для выявления более точной зависимости необходимо выполнение анализа генотипов поросят, полученных от контрольных спариваний маток и хряков с известными генотипами по типам АА х АА, Сй х СО или АА х (Ю, то есть когда генотипы потомства заранее предопределены.

5. ВЫВОДЫ

1. Пополнен банк ДНК свиней 1027 образцами, отобранными от 16-и популяций семи пород (крупная белая, белая короткоухая, белорусская черно-пестрая, ландрас, эстонская беконная, дюрок, белорусская мясная).

2. Усовершенствована методика определения вариантов гена рецептора Е. coli FIS (ECR F1S/FUT1), позволяющая диагностировать генотипы свиней АА, AG и GG.

3. Дана характеристика полиморфизма гена ECR F18/FUT1 у свиней восьми пород. Частота встречаемости предпочтительного с точки зрения устойчивости к диарее аллеля А варьировала от 0,020 у свиней уржумской породы до 0,351 у свиней белорусской мясной породы. Доли предпочтительных генотипов АА варьировали в зависимости от породы от 0 (уржумская) до 14,9% (белорусская мясная). Исследования выявили большие межпопуляционные различия у свиней крупной белой (рл=0,06-0,24) и эстонской беконной пород (ОД]-0,32). Отдельные популяции свиней пород белорусская черно-пестрая и ландрас оказались более консолидированными по данному показателю: рд=0,21-0,26 и 0,22-0,25, соответственно.

4. Установлена тенденция взаимосвязи «неблагоприятного» аллеля G гена ECR F18/FUT1 с «желательным» аллелем N гена рианодинового рецептора (Ryrl), обуславливающего устойчивость свиней к стрессам, что может быть одной из причин относительно высокой частоты встречаемости аллеля G гена ECRF18/ FUTI.

5. Выявлена тенденция влияния генотипов гена ECR F18/FUT1 на чувствительность поросят к диарее.

6. Изучение влияния генотипа матери на темпы роста поросят в период от рождения до отъема, проведенное на свиньях 8-и популяций б-и пород, не выявило однозначной зависимости. При исследовании темпов роста поросят ЗАО «Заречье» в зависимости от их генотипа по гену ECR FI8/FUT1 в период от рождения до 3 месяцев выявлено превосходство поросят с генотипом АА над животными, несущими аллель G (генотипы AG и GG), на 4,9-6,4%.

7. Изучено влияние аллельных вариантов гена ECR Fl8/FUT1 на сохранность поросят. В шести из восьми исследованных популяций свиней пород крупная белая, белорусская черно-пестрая, белорусская мясная, ландрас, эстонская беконная вьивлеиа повышенная сохранность поросят, полученных от свиноматок с генотипом АА гена ECR F18/FUT1 по сравнению с животными, несущими аллель G (генотипы AG И GG) на 0,4-17,5%.

7« ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Основываясь на обнаружении заметного влияния гена ECR F18/FUT1 на хозяйственно-полезные признаки свиней (среднесуточные привесы в период от рождения до отъема, сохранность) и на проявление диареи у послеогьемных поросят, рекомендуем научно-исследовательским лабораториям профильных НИИ проведение дальнейших исследований в данном направлении.

Список опубликованных работ.

1. Гладырь Е.А., Арсиенко Р.Ю., Мичурин В.П., Зыкунов Н.В., Фролкин Д.А., Карамчакова О.Н., Коновалова E.H., Зиновьева H.A. Использование маркерных генов в свиноводстве // Сб. трудов междунар. конф. «ДНК-технологпи в клеточной инженерии и маркировании признаков сельскохозяйственных животных», ВИЖ, л. Дубровицы, 2001, с. 64-67.

2. Коновалова E.H., Гладырь Е.А., Зиновьева H.A. Использование гена рецептора E.coli К88 в качестве генетического маркера в свиноводстве Я Сб. материалов науч.-пракг, конференции «Перспективы и развитие свиноводства в XXI веке» РЛМЖ, п. Быково, 2001, с. 112-113.

3. Коновалова E.H., Гладырь Е.А., Зиновьева H.A. Исследование полиморфизма гена рецептора E.colî как гена-кандидата хозяйственно-полезных признаков свиней // Сб. трудов междунар, науч. конференции «Современные достижения и проблемы биотехнологии сельскохозяйственных животных», ВИЖ, п. Дубровицы, 2002, с. 142-143,

4. Коновалова E.H., Гладырь Е.А., Зиновьева H.A. ПЦР-ПДРФ-анализ гена рецептора Exoli ECR FIS свиней // Методы исследований в биотехнологии сельскохозяйственных животных, школа-практикум, 2002,

5. Коновалова E.H., Гладырь Е.А., Зиновьева H.A. Исследование гена рецептора E.coli FIS во взаимосвязи с хозяйственно-полезными признаками свиней // Сб. трудов междунар. науч. конференции «Современные достижения и проблемы биотехнологии сельскохозяйственных животных», ВИЖ, п. Дубровицы, 2003, с. 112-117.

6. Коновалова E.H., Гладырь Е.А., Лобан H.A., Шмаков Ю.И. Зиновьева H.A. Полиморфизм гена рецептора Е. coli F18 свиней // Доклады РАСХН, №6,2003, с. 25-27.

с.51-52.

Издательство РУЦ ЭБТЖ 142132, Московская обл., Подольский р-н, п. Дубровицы Тел. (8-27)65-14-24, (8-27)65-14-07

Сдано в набор 24,12.03. Подписано в печать 25 12.03 Заказ№ 31. Уч.-тд. л 1,0. Тираж 100экз.