Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Паразитарная система Dirofilaria sp. в городе Хабаровске

ВАК РФ 03.02.11, Паразитология

Автореферат диссертации по теме "Паразитарная система Dirofilaria sp. в городе Хабаровске"

На правах рукописи

Иванова Ирина Борисовна

ПАРАЗИТАРНАЯ СИСТЕМА ВІНОРІЬАША вР. В ГОРОДЕ ХАБАРОВСКЕ

03.02.11 - паразитология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

5 ДЕК

Москва 2013

005541847

Работа выполнена в ГБОУ ВПО Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова Минздрава России и в ФБУН «Хабаровский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии» Роспотребнадзора

Научный руководитель:

доктор биологических наук Ганушкина Людмила Алимпьевна

Официальные оппоненты:

Малышева Наталья Семёновна доктор биологических наук, профессор, заведующая кафедрой биологии растений и животных ФБОУ ВПО «Курский государственный университет», директор научно-исследовательского Института паразитологии при Курском государственном университете

Довгалев Анатолий Семёнович доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой «Тропические и паразитарные болезни» ГБОУ ДПО Российская медицинская академия последипломного образования Минздрава России

Ведущая организация: Федеральное бюджетное учреждение науки «Тюменский научно-исследовательский институт краевой инфекционной патологии» Роспотребнадзора „ ,—

Защита состоится 4П.Э.у> 201 года в /( часов на заседании

диссертационного совета при ГБОУ ВПО Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова (119991, г. Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГНЦМБ Первого МГМУ им. И.М. Сеченова (117998, г. Москва, Нахимовский проспект, д.49) Автореферат разослан «Оьс» /-ОИ^Л^'/'иЯ 2013 года

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат медицинских наук

Фролова Александра Александровна

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы.

Дирофиляриоз становится одной из актуальных проблем медицинской паразитологии. Проблема распространения данного гельминтоза обусловлена широкой циркуляцией возбудителя в природной среде и отсутствием надлежащих мер по выявлению и дегельминтизации зараженных животных - облигатных дефинитивных хозяев (собак и кошек). Территории, где существует риск заражения населения дирофиляриями, определяются ареалом переносчиков и суммой температур, необходимых для развития в комарах микрофилярий до инвазионной стадии [Сергиев В.П. с соавт. (2009), Дарченкова H.H. с соавт. (2009) ШуйкинаЭ.Е. с соавт. (2009)].

В России за период с 1915 по 2011 гг.. выявлено 701 случай дирофиляриоза на территории Приморского, Хабаровского, Краснодарского, Ставропольского краёв, республик Северного Кавказа, Астраханской, Волгоградской, Ростовской, Липецкой, Воронежской, Нижегородской, Амурской, Ульяновской областей и др. [Авдюхина Т.И. с соавт. (1997), Сергиев В.П. с соавт. (2009), Сергиев В.П., Супряга В.Г. с соавт. (2011)]. По данным Федеральной службы Роспотребнадзора в 2012 году официально зарегистрировано 143 случая.

Ряд территорий Дальнего Востока относятся к зоне умеренного риска распространения дирофиляриоза: западные районы Приморского края, южные районы Хабаровского края, Амурская и Еврейская автономная область [Дарченкова H.H. с соавт. (2009)].

Впервые заражение дирофиляриозом человека в г. Хабаровске было зафиксировано в 1929 году [Козырева Т.Г. с соавт. (2009)].

В последние годы в городе отмечается рост заболеваемости дирофиляриозом среди людей и животных. Этому способствуют благоприятные для циркуляции инвазии факторы, такие как теплый влажный климат, высокая численность комаров и собак, выезд населения г. Хабаровска на территории, эндемичные по данному заболеванию.

Паразитарная система, включающая Diroßlaria immitis (собака-комар-собака) и Diroßlaria repens (собака-комар-собака (человек)), на территории города Хабаровска ранее не изучалась.

Цель работы: изучение D. immitis и D. repens в структуре паразитарной системы дирофиляриоза в городе Хабаровске с целью снижения риска заражения и местной передачи возбудителя дирофиляриоза человеку.

Задачи исследования:

1. Провести анализ заболеваемости дирофиляриозом дефинитивных хозяев (собак);

2. Провести анализ случаев обнаружения дирофилярий у человека за период с 2007 по 2012 гг.;

3. Определить зараженность микрофиляриями кровососущих комаров, собранных в различных округах города Хабаровска, методом ПЦР;

4. Дать сравнительную оценку зараженности дирофиляриями собак в различных округах города. На основании проведенных исследований составить эпидемиологическую карту распространения дирофиляриоза в городе Хабаровске;

5. Разработать комплекс профилактических мероприятий, направленных на предупреждение распространения дирофиляриоза на территории г. Хабаровска.

Научная новизна результатов исследований. Впервые изучена паразитарная система, включающая Dirofilaria immitis (собака-комар-собака) и Dirofllaria repens (собака-комар-собака (человек)), на территории города Хабаровска. Установлена высокая экстенсивность заражения собак дирофиляриями - 29,3% . За 5 лет исследований зарегистрировано 36 случаев заболевания дирофиляриозом среди населения. По данным заболеваемости людей и животных составлена эпидемиологическая карта округов города.

Впервые изучена экстенсивность заражения основных переносчиков дирофилярий - кровососущих комаров в г. Хабаровске. Зараженность комаров рр. Aedes и Culex микрофиляриями составила в среднем 5,4%.

Совместно с компанией ВЕКТОР-БЕСТ (г. Новосибирск) создана диагностическая тест-система, предназначенная для выявления IgG к антигенам нематод рода Dirofilaria в сыворотке крови собак методом ИФА, которая показала высокую чувствительность и специфичность.

Впервые предложен комплекс профилактических мероприятий, направленных на предупреждение распространения дирофиляриоза на территории Хабаровска.

Практическая значимость.

Проведённые масштабные исследования позволили установить широкую циркуляцию дирофилярий среди дефинитивных хозяев (собак) и в переносчиках (кровососущих комарах), а также наличие больных людей дирофиляриозом на территории города Хабаровска. В результате был разработан комплекс профилактических мероприятий, направленный на предупреждение распространения дирофиляриоза.

Создана и испытана диагностическая тест-система, позволяющая выявить антитела на ранних стадиях заболевания у животных, которые являются основными носителями дирофилярий.

Внедрение в практику.

Опубликовано информационно-аналитическое письмо «Распространение дирофиляриоза на юге Дальнего Востока России, на примере города Хабаровска» (2013г.), материалы которого используют при чтении лекций и проведении семинаров для специалистов практического здравоохранения и студентов медицинских вузов (акты о внедрении утверждены: в Управление Роспотребнадзора по Хабаровскому краю от 09.06.2013 г., в ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Хабаровском крае» от 21.05.2013 г., в ГБОУ ВПО Дальневосточном государственном медицинском университете Министерства здравоохранения РФ от 23.05.2013 г.).

Совместно с компанией ЗАО «Вектор-Бест» г. Новосибирск создан пилотный набор реагентов, направленный на выявления иммуноглобулинов класса в к антигенам нематод рода Огго/Иагш в сыворотке крови собак «Дирофилярия-^О-ИФА-БЕСТ» (2013 г.). Апробирован в ФБУН «Хабаровский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии» Роспотребнадзора, в лаборатории паразитологии (Письмо-подтверждение от 05.02.2013 г. №ВБ-14/90).

Положения, выносимые на защиту:

1. Комплексная характеристика паразитарной системы: £). ¡ттШз собаки -комары (сем. СиНЫс1ае)-собаки; О. герет - собаки -комары (сем. СиНЫс1ае) - собаки (человек) на территории г. Хабаровска.

2. Методы диагностики (микроскопия, ПЦР, ИФА) дирофиляриоза у собак и их эффективность при любой интенсивности инвазии.

Публикации. По результатам проведенных исследований опубликовано 10 научных работ, в том числе - 3 в изданиях из перечня журналов, рекомендуемых ВАК Российской Федерации (журналы: Дальневосточный журнал инфекционной патологии (2007), Медицинская паразитология и паразитарные болезни (2013), Пест-менеджмент (2013)).

Апробация результатов исследования.

Основные положения диссертации были изложены на заседаниях регионального (Хабаровского) отделения Всероссийского научно-практического общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов (2008, 2012 гг.), Всероссийской конференции «Природно-очаговые инфекции Дальнего Востока» (18-19 августа 2009 года, г. Хабаровск), регионального совещания «Актуальные вопросы эпидемиологического надзора за биогельминтозами» (27 сентября 2012 года, г. Тюмень), региональной научно-практическая конференции с международным участием «Актуальные вопросы инфекционной патологии на Дальнем Востоке Российской Федерации» (20-21 сентября 2012 года, г. Хабаровск), международной научной конференции «Современные проблемы общей паразитологии» (1 ноября 2012 года, г. Москва), Всероссийской конференции «Актуальные аспекты паразитарных заболеваний в современный период» (25-26 сентября 2013 года, г. Тюмень).

Личный вклад автора.

Автор лично принимала участие в создании пилотного набора «Дирофилярия -

- ИФА - БЕСТ» совместно с ЗАО «Вектор-Бест», использовании различных методов диагностики дирофиляриоза в исследованиях комаров и дефинитивных хозяев (собак). Автором самостоятельно выполнен аналитический обзор отечественной и зарубежной литературы, касающейся биологии возбудителя дирофиляриоза, распространенности его в различных регионах, вопросов диагностики и профилактики заболевания. В течение 5 лет автором лично проводился сбор и определение комаров, а также обработка и систематизация полученных материалов. Автор лично провела анализ зараженности дирофиляриями дефинитивных хозяев (собак) и людей, а также комаров в различных округах Хабаровска. Составлены эпидемиологические карты города.

Объём и структура диссертации.

Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследований, 4-х глав, излагающих результаты исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, приложений и списка литературы. Список литературы включает 122 работы отечественных и 75 зарубежных авторов. Диссертация изложена на 125 страницах машинописного текста, иллюстрирована 52 рисунками и 15 таблицами.

Благодарности.

Огромную признательность выражаю директору ХНИИЭМ Троценко О. Е. за постоянный интерес, консультации, поддержку и помощь в моих исследованиях.

Выражаю искреннюю благодарность научному руководителю: Ганушкиной Л. А. Выражаю признательность Дремовой В.П., Супряге В.Г. и Раковой В. М. за ценные советы, Ткачевой Т. Н. за помощь в разработке диагностической системы, Ибрагимову И. Р. за предоставленный биологический материал.

Материал, методы и объем исследования.

Исследовательская работа проведена с 2007 по 2012 годы в г. Хабаровске, на базе паразитологической лаборатории ФБУН «Хабаровский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии» Роспотребнадзора. Биологический материал (кровь собак) был собран в ветеринарных клиниках, питомниках УВД, УВД на транспорте, ИК-3 УФСИН России по Хабаровскому краю, а также от бездомных животных. Исследованы комары, отловленные в 4-х округах города Хабаровска. Изучены эпидемиологические карты людей с диагнозом дирофиляриоз. Объем проведенных исследований в таблице 1.

Таблица 1 - Объем исследований.

Выполненные работы Число исследований

Прямая микроскопия проб крови собак 659

Проведено сборов комаров 2075

Изучены эпидемиологические карты пациентов с диагнозом «Дирофиляриоз» 36

Патологоанатомические вскрытия собак 2

Поставлено серий ПЦР 2215

Серологические исследования сывороток крови собак с использованием пилотного набора «Дирофилярия-1§0-ИФА-БЕСТ» 191

Лабораторная диагностика дирофиляриоза у собак.

При исследовании крови животных применяли методы: прямая микроскопия венозной крови, метод ПЦР, метод ИФА.

Видовая идентификация дирофилярий, удаленных у человека.

Морфологическое изучение дирофилярий.

Исследование кровососущих комаров на наличие дирофилярий - метод ПЦР.

Статистические методы.

Для обработки полученных данных с целью подтверждения их статистической достоверности применялись методы: оценки достоверности результатов исследования (показателей): - m (средняя ошибка), t (доверительный коэффициент Стьюдента), m¡2 и т22 (средние ошибки сравниваемых показателей), Р| и Р2 (выборочные показатели). Для графического оформления материала и статистической обработки использовали стандартное программное обеспечение Paint, Microsoft Excel, Microsoft Access.

Результаты собственных исследований.

Дирофиляриоз у людей.

Нами проведено изучение эпидемиологических карт пациентов с диагнозом дирофиляриоз, обратившихся в лечебные учреждения г. Хабаровска. За период с 2007 по 2012 гг. дирофиляриоз был выявлен у 36 человек. Возраст больных варьировал от 16 до 76 лет. Максимальное число случаев заболевания зарегистрировано у лиц в возрасте 54 - 65 лет - 17 человек (47,2%). У лиц от 38 до 48 лет - 8 человек (22,2%), от 70 до 76 лет - 8 человек (22,2%), от 16 до 23 лет - 3 человека (8,4%). В большинстве случаев дирофилярии были обнаружены у женщин - 32 человека (88,9%), у мужчин -4 человека (11,1%).

Из 36 случаев у 32-х человек (88,9%) установлено поражение органов зрения, у 4-х человек (11,1%) наблюдали подкожную локализацию паразита в области туловища, головы и конечностей. Основными жалобами были боль, жжение, гиперемия и отечность пораженного участка, больные отмечали чувство шевеления и перемещение гельминта. Во всех случаях клинический диагноз поставлен в лечебно-профилактических учреждениях г. Хабаровска.

Все городские округа Хабаровска являются неблагополучными по данному заболеванию среди людей: Железнодорожный - 33,4%, Северный - 25%, Центральный - 22,2%, Южный - 19,4 % (рис. 1).

Дирофиляриоз у собак.

В результате анализа наших исследований установлена высокая зараженность собак дирофиляриями - 29,3% (193/659) в городе Хабаровске. При обследовании 39 служебных собак, состоящих на службе в УВД, УВД на транспорте, ФКБ ИК-3 УФСИН России по Хабаровскому краю, в 14 случаях (35,9%) был выявлен дирофиляриоз на ранних стадиях развития заболевания.

При обследовании 336 домашних животных у 87 выявлены микрофилярии, экстенсивность инвазии составила 25,9%. Безусловно, на зараженность собак дирофиляриями в большой степени влияют условия содержания, характер использования животных и наличие переносчиков. В связи с этим, экстенсивность инвазии служебных собак в 1,4 раза выше, чем у домашних собак (табл. 2).

Таблица 2 - Пораженность собак дирофиляриозом в г. Хабаровске.

Группы животных Всего обследовано Выявлено инвазир. (Абс.) Р, %; ш, ±

Домашние собаки 336 87 25,9±2,3

Служебные собаки 39 14 35,9±7,6

Бездомные собаки 284 92 32,4±2,7

Всего 659 193 29,3±1,7

В г. Хабаровске, как и в ряде регионов Российской Федерации, является актуальной проблема увеличения числа бездомных собак. При обследовании 284 бродячих собак в 2010-2012 гт. микрофилярии в крови были обнаружены нами в 92-х случаях. Экстенсивность инвазии составила 32,4%, что в 1,2 раза выше, чем у собак, имеющих хозяев и содержащихся в квартирах (табл. 2).

Анализ сезонной динамики инвазированности собак дирофиляриями показал, что экстенсивность инвазии практически не изменялась в течение года и составляла

28% (54/193) в летний и 26,4% (51/193) в зимний периоды, оставаясь достаточно высокой весной 23,8% (46/193) и осенью 21,7% (42/193) (табл. 3).

Таблица 3 - Сезонная динамика инвазированности собак дирофиляриями в 2010-2012 гг. (п=193).

Время года Выявлено инвазир. (Лбе.) Р, %; т, ±

Лето 54 28±3,2

Осень 42 21,7±2,9

Зима 51 26,4±3,1

Весна 46 23,8±3

Итого 193 -

Р,%- экстенсивность инвазии, т,±- ср. ошибка.

Наибольшая экстенсивность инвазии собак дирофиляриями зарегистрирована в Южном и Железнодорожном округах города - 36,8% и 29,8% соответственно, меньшая инвазированность установлена в Центральном округе - 13,8%. (рис. 1).

С помощью метода ПЦР исследовано 140 образцов крови собак, в которых микроскопическим методом были обнаружены микрофилярии. Исследования проводили с видоспецифическими праймерами к £>. ¡ттШ$ и И. герет. В результате этих исследований в 61 пробе (43,6%) обнаружены последовательности ДНК, характерные для £>. ттШх, в 53 (37,8%) для й.герет, а в 26 (18,6%) содержались последовательности ДНК обоих видов паразита (£>. ¡ттШз, £>. герепз) (табл. 4).

Таблица 4 - Выявление ДНК О. ¡ттИЬ, А. герем в сыворотках крови собак (п=140).

Вид паразита +ДНК паразитов

Абс. Р, %; ш, ±

ОЛттШя 61 43,6±4,2

А герею 53 37,8±4,1

ОЛттШъ и Л г ереїм 26 18,6±3,2

Р,%- экстенсивность инвазии, т, ± - ср. ошибка.

(25,0)

Ж

1 I

~ \ л ' ■■■■ 4

Щр

( \ (22,2)

ч . 48

тшшж - ь

(3) - больные

дирофиляриозом собаки (%)

- больные дирофиляриозом люди(%)

и

№

Ш^'ШШ

щ ¡¡рр

'' ' ' ' Г. Ч '' . ) -" И

«■'V III

(-*<>:

А -

Рисунок 1 - Эпидемиологическая карта больных дирофиляриозом людей и собак в г. Хабаровске

Выделение ДНК дирофилярий у собак, обитающих в Хабаровске, свидетельствует о довольно широкой циркуляции паразитов двух видов в данном регионе.

Была проведена экспериментальная работа с использованием пилотного набора «Дирофилярия-^О-ИФА», созданного диагностической компанией Вектор-Бест г. Новосибирск. В конструировании данной системы был использован антиген Г). ¡ттШ$ из дирофилярий погибших собак. Исследована 191 проба сывороток крови собак, как положительных, так и отрицательных на наличие микрофилярий. Для достоверности результатов, исследуемые образцы анализировали в дублях, используя для каждого образца по две лунки.

Инвазированность обследуемых собак дирофиляриями с использованием данного набора составила 7,8% (15/191), при том, что микроскопическим методом микрофилярии были обнаружены только в И образцах (5,8%) (табл. 5). Данный диагностический набор обладает высокой чувствительностью и специфичностью к обнаружение к антигенам £). ШтШБ и может быть использован для ранней диагностики дирофиляриоза у дефинитивных хозяев, а так же при амикрофиляремичной форме, диагностика которой крайне затруднена.

Таблица 5 - Выявление к антнгенам ймо/Напа тпийз в сыворотках

крови собак (п=191).

Результаты Микроскопические исследования (микрофилярии) ИФА метод (1^)

Абс. Р,%; ш, ± Абс. Р,%;ш, ±

положительные 11 5,8±1,7 15 7,8±1,9

отрицательные 180 94,2±1,7 176 92,2±1,9

Р,%- экстенсивность инвазии; т± - ср. ошибка

Зараженность комаров.

Для установления зараженности комаров микрофиляриями было исследовано 2075 комаров. Сбор комаров проводили в период их активности в утренние часы с 8 до 11 часов на человеке в четырех округах города.

Исследовали кровососущих комаров на наличие микрофилярий, собранных на территориях питомников для служебных собак и обитающих на близлежащих территориях. В местах непосредственного скопления инвазированных животных (питомники) экстенсивность заражения комаров составила 7,3% (58/794), что в 1,7 раз выше, чем у комаров, отловленных на территориях округов города — 4,3%. Очевидно, что на территориях служебных питомников сформировалась зона синантропного очага дирофиляриоза, что связано с круглосуточным содержанием служебных собак в открытых вольерах. Экстенсивность инвазии комаров дирофиляриями родов Culex и Aedes, отловленных на территории питомников, выше в 1,6 и 1,8 раза, чем зараженность комаров микрофиляриями в округах города (табл. 6).

Таблица 6 - Зараженность микрофиляриями комаров различных родов (сем. СиПс1(]ае) в городе Хабаровске.

Род комаров Округа Питомники Всего

Число иссл. особен Заражено микрофил. Число иссл. особей Заражено Число иссл. особей Заражено микрофил.

Абс. % Абс. % Абс. %

Culex 474 23 4,9 380 30 7,9 854 53 6,2

Aedes 776 29 3,7 408 28 6,9 1 184 57 4,8

Anopheles 31 3 10,0 6 0 - 37 3 8,1

Всего 1 281 55 4,3 794 58 7,3 2 075 113 5,4

Зараженность микрофиляриями комаров в г. Хабаровске составила 5,4% (113/2075). Наибольшая зараженность комаров установлена в Южном округе - 8% (19/239), в Северном округе показатель зараженности составил 4,6% (13/282), в Центральном округе - 3,3% (13/394), в Железнодорожном округе - 2,7% (10/366) (рис. 2).

7,5

/ Aedes

I

Culex

Рисунок 2 - Зараженность микрофиляриями комаров различных родов, в округах г. Хабаровска (в %).

Комплекс профилактических мероприятий, направленных на предупреждение распространения дирофиляриоза на территории г. Хабаровска.

Профилактические мероприятия в очаге инвазии направлены на снижение численности комаров и популяции бродячих собак, кошек и других плотоядных. Профилактика заражения людей дирофиляриями основывается в первую очередь на прерывании трансмиссивной передачи инвазии и состоит из нескольких направлений: истребление комаров, выявление и дегельминтизация инвазированных собак, предотвращение контакта комаров с животными и человеком.

Мероприятия:

1. Истребление комаров. В местах, где формируются стойкие очаги (парковая зона, зона отдыха и выгула собак, питомники собак), специалисты санитарно — эпидемиологической службы должны проводить наблюдения за фенологией, экологией переносчиков дирофиляриоза, определять сроки выплода и массового вылета комаров. Устанавливать и определять совместно с территориальными органами исполнительной власти сроки и объемы

истребительных мероприятий, как с личинками, так и с имаго комаров, выплод которых происходит в многочисленных временных и постоянных водоемах. В очагах дирофиляриоза необходимо проводить сплошную обработку водоемов - деларвацию. Для обработки водоемов, имеющих хозяйственное или рыбохозяйственное значение, используют бактериальные препараты, нехозяйственные водоемы, водоемы в подвальных помещениях могут быть обработаны препаратами группы ФОС и пиретроидами в дозировках, предусмотренных инструктивно-методическими указаниями. Деларвацию водоемов следует проводить, начиная с I декады июня, повторять по мере появления в водоемах личинок II возраста. Уничтожение имаго комаров проводят путем опрыскивания водными суспензиями (эмульсиями) инсектицидов территории вокруг питомников собак, подвальные помещения, залитые водой. Обработку против имаго следует проводить, начиная с III декады мая (после вылета перезимовавших комаров) и повторять в зависимости от вида выбранных инсектицидов раз в 4-5 недель.

2. Выявление и дегельминтизация зараженных собак. Важное мероприятие в практике дирофиляриоза - недопущение контакта животных с кровососущими насекомыми.

Прежде чем проводить профилактическое лечение, необходимо всех собак (6 месяцев и старше) проверить на наличие данных гельминтов. Эти проверки (тесты) следует повторять раз в полгода или ежегодно. Профилактическое лечение необходимо проводить у щенков в возрасте 9-12 недель и до конца жизни собак, лекарство дают за месяц до начала вылета комаров и в течение двух месяцев после первых заморозков (конец октября - начало ноября). Ветеринарные врачи в г. Хабаровске успешно используют такие препараты как ивермектин, левамизол и другие.

Территорию вокруг питомников следует обрабатывать инсектицидами. Собак необходимо держать в закрытых вольерах вечером, когда комары наиболее активны. Для защиты животных, целесообразно использовать репелленты.

Собакам, свободным от инвазии в эндемичной зоне, для предотвращения заболевания дирофиляриозом проводят химиопрофилактику теми же антигельминтиками, что и при лечении. Наиболее целесообразно применять

препараты, которые можно использовать не чаще 2 раз в период лета комаров. Предотвращение инвазии - важнейшая задача ветеринарного врача. Собаки с микрофиляриемической формой дирофиляриоза должны быть изолированы на время лечения, если существует угроза заражения других животных (в летний период).

Обсуждение результатов и заключение.

Несмотря на то, что дирофиляриоз широко распространен в странах с тропическим и субтропическим климатом, в последние годы стали выявляться новые очаги этого трансмиссивного гельминтоза, в том числе и на территориях с умеренным климатом, в частности на Дальнем востоке Российской Федерации (г. Хабаровск). В связи с этим возникла необходимость в изучении всей цепочки развития паразита в переносчиках (комарах), основных хозяевах (собаках) и среди людей на ранее считавшейся не эндемичной территории - юг Дальнего Востока.

Г. Хабаровск расположен на 48°29'00 с.ш. и 135°04'00 в.д. и отнесен к территориям с умеренным распространением дирофиляриоза. Температура 14°С является пороговой для развития личинок дирофилярий и сумма тепла, необходимая для завершения одного цикла в комарах, составляет 130 градусо-сутки. В сезон передачи возбудителя дирофиляриоза средняя температура в летние месяцы составляла 19,2 -23,9°С, число циклов развития микрофилярий в комарах до инвазионной стадии-1,2-2,4 (табл. 7). Следовательно, температурные условия Хабаровска благоприятны для трансмиссии дирофилярий.

Расчет числа генераций инвазионных личинок дирофилярий в переносчике может быть основой определения эпидемиологической ситуации и необходимости проведения профилактических и противоэпидемических мероприятий с учетом зараженности дефинитивных хозяев.

Установлена широкая циркуляция дирофилярий двух видов среди животных, экстенсивность заражения составила - 29,3% на всей территории г. Хабаровска. При этом последовательности ДНК, характерные для й. \mmitis преобладают - 43,6%, О. герепя выявлен у 37,8% от всех исследуемых собак. Следует отметить достаточно высокий процент (18,6%) микст инвазии (Л ни/и//¿г, О. герет).

Таблица 7 - Средние температуры (°С) н число возможных циклов развития микрофилярин в комарах до инвазионной стадии.

Годы/ месяцы 2007 2008 2009 2010 2011 2012

t'c ср. ЦИКЛ t С ср. цикл. t С ср. цикл t С ср. цикл t С ср. цикл tu С ср. цикл

май 12,9 0,1 15,5 0,0 17,3 0,6 16,8 0,4 19,0 0,3 17,1 0,5

июнь 19,2 1,2 20,4 1,5 16,4 0,6 22,6 2,0 16,3 0,6 20,9 1,6

июль 21,8 1,9 23,7 2,3 20,4 1,5 21,0 1,7 23,9 2,4 21,5 1,8

август 20,9 1,6 20,4 1,5 20,4 1,6 21,1 1,7 21,6 1,8 21,2 1,7

сентябрь 16,8 0,5 18,4 0,5 16,3 0,4 20,0 0,7 15,7 0,2 16,7 0,5

Отмечена высокая зараженность дирофиляриями собак в возрасте 1-3 года, находящиеся на службе (питомники УВД, УВД на транспорте, ИК-3 УФСИН России по Хабаровскому краю). Собак этого возраста чаще используют в работе, и в местах их содержания отмечена высокая зараженность комаров. Для сравнения в питомниках -7,3%, вне питомников 4,3%.

Бродячие собаки свободно перемещаются по городу и чаще подвергаются нападению комаров, чем домашние животные, поэтому зараженность их дирофиляриями в 1,2 раза выше.

Так как паразит может длительно развиваться и находится в организме дефинитивного хозяина (собаки) без проявления признаков болезни, нами сделан анализ сезонной динамики инвазированности собак дирофиляриями. Экстенсивность инвазии практически не изменялась в течение года и составляла 28% в летний, 26,4% -в зимний периоды, оставаясь достаточно высокой весной 23,8% и осенью 21,8%.

Одним из самых неблагополучных округов города является Южный, там отмечена высокая заболеваемость животных дирофиляриозом — 36,8% и зараженность комаров дирофиляриями - 8% в сравнении с другими территориями. В данном округе есть все необходимые условия для выплода комаров и передачи инвазии дефинитивным хозяевам - собакам. В Центральном округе экстенсивность инвазии

дирофиляриями собак составляет 13,8%, это можно объяснить тем, что он является наиболее благоустроенным по сравнению с другими территориями города и где бродячие собаки практически отсутствуют. Зараженность комаров паразитом составляет 3,3%.

Созданные совместно с НПО «Вектор-Бест» пилотные иммуноферментные наборы «Дирофилярия-lgG - ИФА - БЕСТ», предназначенные для выявления IgG к антигенам нематод рода Dirofilaria в сыворотке крови собак методом ИФА могут быть использованы как при диагностике заболевания собак с амикрофиляриемией, так и в эпидемиологических исследованиях.

На территории города Хабаровска наиболее распространенными явились комары р. Aedes (60,6%), доля комаров р. Culex составила 37%, а наименее распространенным на территории города Хабаровска оказались комары p. Anopheles (2,4%) из всех отловленных нами особей.

Высокая зараженность комаров личинками дирофилярий установлена у комаров рода Culex - 6,2%, меньшая у комаров рода Aedes- 4,8%. Так как комары рода Anopheles были отловлены в малом количестве, мы не можем достоверно оценить зараженность их данным паразитом.

Анализ 36 эпидемиологических карт больных дирофиляриозом показал, что в 88,9% случаях паразит локализовался в области глаза и только в 11,1% подкожно. По видимому это связано с тем, что в большинстве случаев человек видит паразита и может обратиться за помощью к врачу офтальмологу. Исследования зараженности переносчиков (комаров) и основных хозяев (собак), проведенные нами в черте города Хабаровска, не исключают возможности заражения людей в пригородах города. Характерно, что максимальное число случаев заболевания дирофиляриозом у людей было зарегистрировано в возрастной группе 54-65 лет (47,2%), что позволяет предположить их заражение в пригородной зоне, поскольку данная категория людей чаще выезжает за город для работ на приусадебных участках.

Учитывая ежедневное перемещение людей из одного округа города в другой (из дома на работу, на учебу, в пригородные зоны), нельзя с точностью определить место их заражения. Наибольшую обращаемость населения Железнодорожного округа (31,4%) по поводу дирофиляриоза можно объяснить тем, что данная территория

является самым большим округом города по площади и с наибольшей населенностью. Нельзя не учитывать тот факт, что на территории данного округа имеются многочисленные частные подворья, коттеджные постройки, в пределах которых содержатся собаки. При этом показатель зараженности собак дирофиляриями в этом округе достаточно высок (29,8%).

Выводы

1. Полученные нами данные о циркуляции возбудителей дирофиляриоза на ранее считавшейся не эндемичной территории юга Дальнего Востока России свидетельствуют о том, что в городе Хабаровске сформировался синантропный очаг данного паразитоза. Это подтверждается обнаружением микрофилярий в переносчиках - кровососущих комарах, выявляемостью заболевания среди дефинитивных хозяев (собак) и людей.

2. Официально зарегистрировано 36 случаев заболевания дирофиляриозом людей в Хабаровске в 2007-2012 гг. Во всех 4-х округах города выявляются случаи выявления данного паразитоза. Максимальное число случаев заболевания дирофиляриозом у людей зарегистрировано в возрастной группе 54-65 лет (47,2%). В 88,9% случаях паразит локализовался в области глаза и только у 11,1% подкожно.

3. Инвазированность собак дирофиляриями в городе Хабаровске составляет 29,3%. Экстенсивность инвазии бродячих собак дирофиляриями в 1,2 раза выше, чем у собак, имеющих хозяев и содержащихся в квартирах; экстенсивность инвазии служебных собак составила 35,9% и была выше в сравнении с домашними собаками (25,9%), в 1,4 раза.

4. В г. Хабаровске зараженность комаров рр. Aedes и Culex микрофиляриями составила в среднем 5,4%. Зараженность комаров в местах содержания служебных собак составляла 7,3%, а вне питомников 4,3%, т.е. экстенсивность инвазии комаров в служебных питомниках была в 1,7 раза выше, чем в округах города. Наибольшая зараженность комаров установлена в Южном округе - 8%. В Северном округе показатель зараженности 4,6%, в Центральном округе - 3,3%, в Железнодорожном округе - 2,7%.

5. Сезоном потенциальной зараженности людей дирофиляриозом в г. Хабаровске является период июнь-август, когда среднемесячная температура воздуха

превышает 14°С и в этот период регистрируется максимальная активность комаров-переносчиков. В г. Хабаровске, относящемуся к зоне умеренного риска заболевания дирофиляриозом, число циклов развития микрофилярий в комарах до инвазионной стадии в летние месяцы составляет 1,2- 2,4.

6. Система мероприятий по профилактике дирофиляриоза в г. Хабаровске, включает контроль численности комаров, выявление и лечение инвазированных животных, уменьшение числа бездомных животных, санитарно-просветительную работу среди населения, повышение знаний врачей и работников ветеринарной службы по вопросам эпидемиологии, клиники и лечения дирофиляриоза.

Практические рекомендации

Предложено дальнейшее совершенствование методов лабораторной диагностики возбудителя дирофиляриоза у собак, что в значительной степени позволит улучшить раннее обнаружение и эффективное лечение. С этой целью была разработана и апробирована диагностическая система выявления к антигенам нематод рода С/го/Нагю в сыворотке крови собак. Авторы: Ткаченко Т.Н., Иванова И.Б., Ибрагимов И.Р.

На основе данных литературы и наших исследований подготовлено информационно-аналитическое письмо для специалистов службы Роспотребнадзора, студентов Дальневосточного государственного медицинского университета и ветеринарных служб города, материалы которого используют при изучении данной патологии. Разработана памятка для специалистов ветеринарной службы и владельцев собак по профилактике и лечению дирофиляриоза.

Ветеринарной службе г. Хабаровска рекомендовано проводить официальную регистрацию больных дирофиляриозом животных и осуществлять контроль над бродячими собаками.

Сотрудникам ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» г. Хабаровска необходимо проводить исследования комаров на наличие в них возбудителя дирофиляриоза.

Специалистам ветеринарных клиник г. Хабаровска при диагностике дирофиляриоза у собак можно использовать тест-систему «Дирофилярия - - ИФА

- БЕСТ» с целью выявления IgG к Diroftlaria immitis в крови животных при амикрофиляриямии, а также стандартные методы микроскопии.

Для оценки эпидемиологической ситуации по дирофиляриозу службе Роспотребнадзора по Хабаровскому краю необходимо учитывать полученные нами данные о том, что расчет числа генераций инвазионных личинок дирофилярий в переносчике в зависимости от температуры может быть основой определения эпидемиологической ситуации и необходимости проведения профилактических и противоэпидемических мероприятий с учетом зараженности дефинитивных хозяев. В г. Хабаровске комплекс профилактических мероприятий необходимо проводить, а на северных территориях Хабаровского края от 53° с.ш., где средние температуры в июне, июле, августе ниже 14°С проводить их не целесообразно.

Список работ, опубликованных по теме диссертации:

1. Иванова И.Б. Дирофиляриоз в г. Хабаровске. // Дальневосточный журнал инфекционной патологии.-2007. -№11.-С. 120-123.

2. Иванова И.Б., Гриднева Н.М. Случай дирофиляриоза в Хабаровске //Тезисы Четвертой конф. «Идеи Пастера в борьбе с инфекциями», посвящ. 85-летию ин-та имени Пастера: Матер, конф. - С.-Пб. - 2008. - С. 148.

3. Иванова И.Б. Дирофиляриоз в г. Хабаровске. //Тезисы юбил. научно-практич. конф., посвящ. 200-летию кафедры биологии им. академика E.H. Павловского «Актуальные вопросы медицинской биологии и паразитологии». - С.-Пб. - 2009. - С. 47.

4. Иванова И.Б. Актуальные проблемы дирофиляриоза в г. Хабаровске: распространение и диагностика. // Дальневосточный журнал инфекционной патологии.-2010.-№17.-С. 1-5.

5. Иванова И.Б. Распространенность дирофиляриоза в г. Хабаровске. // Тезисы Всероссийской конференции «Актуальные аспекты паразитарных заболеваний в современный период». - Ростов-на-Дону - 2011 г. - С. 145-148.

6. Иванова И.Б. Заболеваемость дирофиляриозом на территории г. Хабаровска. // Тезисы международной научной конференции «Современные проблемы общей паразитологии». -М. - 2012 г.-С. 138-142.

7. Иванова И.Б., Троценко O.E., Каравянская Т.Н., Ганушкина JI.A., Дирофиляриоз человека в г. Хабаровске. // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. - 2013 г. - Х»3. - С. 18-20.

8. Иванова И.Б., Котова В.О., Ибрагимов И.Р. Результаты изучения дирофиляриоза в г. Хабаровске. // Пест-менеджмент. - 2013 г - №1. - С. 29-31.

9. Иванова И.Б., Котова В.О., Ибрагимов И.Р., Ганушкина JI.A., Троценко O.E., Корепова А.П. Распространение дирофиляриоза на юге Дальнего Востока России, на примере города Хабаровска // Информационное-аналитическое письмо: Библиотека инфекционной патологии. - Выпуск 34. -Хабаровск. - 2013 г. - 44 с.

10. Иванова И.Б. Актуальные аспекты распространения дирофиляриоза на территории города Хабаровска. // Матер. Всероссийской конференции «Актуальные аспекты паразитарных заболеваний в современный период». - Тюмень. - 2013 г. - С. 67-70.

Подписано в печать: 21.11.2013 Объем: 1,0 п.л. Тираж: 100 экз. Заказ № 302 Отпечатано в типографии «Реглет» 119526, г. Москва, пр-т Вернадского, д. 39 (495) 363-78-90; www.reglet.ru

Текст научной работыДиссертация по биологии, кандидата биологических наук, Иванова, Ирина Борисовна, Москва

ГБОУ ВПО ПЕРВЫЙ МОСКОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМЕНИ И.М. СЕЧЕНОВА ФЕДЕРАЛЬНОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ НАУКИ ХАБАРОВСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ЭПИДЕМИОЛОГИИ И МИКРОБИОЛОГИИ РОСПОТРЕБНАДЗОРА

04201450183

На правах рукоп

Иванова Ирина Борисовна

Паразитарная система И^о/Иапа Бр. в городе Хабаровске

03.02.11 - паразитология

Диссертация на соискание учёной степени кандидата биологических наук

Научный руководитель: д.б.н. Ганушкина Л.А.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ:

ДВ - Дальний Восток ЕАО - Еврейская автономная область ИК - исправительная колония ИФА - иммуноферментный анализ ПНР - полимеразная цепная реакция МУ - методические указания РФ - Российская Федерация УВЧ - ультравысокие частоты УЗИ - ультразвуковое исследование

УФСИН - Управление Федеральной службы исполнения наказания

ОГЛАВЛЕНИЕ

Список сокращений......................................................................................................................................2

Введение......................................................................................................................................................................5

Глава 1. Обзор литературы....................................................................................................................10

1.1. Характеристика эпидемического процесса дирофиляриоза в современных условиях..................................................................................................................10

1.2. Этиология дирофиляриоза......................................................................................................13

1.3. Паразитарная система дирофилярий..............................................................................20

1.4. Патогенез и клинические проявления дирофиляриоза у людей и животных....................................................................................................................................................25

1.5. Методы диагностики дирофиляриоза у людей и животных......................32

1.6. Краткая характеристика природно-климатических условий Хабаровского края............................................................................................................................38

1.7. Фауна и экология кровососущих комаров города Хабаровска

и его окрестностей............................................................................................................................45

Глава 2. Собственные исследования..........................................................................................48

2.1. Материалы и объем исследования....................................................................................48

2.2. Методы исследований..................................................................................................................52

2.2.1. Методы диагностики дирофиляриоза у собак........................................................52

2.2.2. Определение ДНК Ико/йапа герет и 01гсф1апа шгпШб в образцах крови собак и комарах..........................................................................................55

2.2.3. Методы обнаружения дирофилярий в комарах..............57

2.2.4. Методика диагностической системы ИФА для выявления антител

к антигенам дирофилярий собак в крови....................................................................59

2.2.5. Методы статистической обработки результатов исследований............61

Глава 3. Циркуляции возбудителя дирофиляриоза на территории города

Хабаровска.............................................................................. 63

3.1. Обнаружение дирофилярий у собак на территории города Хабаровска..............................................................................................................................................63

3.2. Исследования системы «Дирофилярия - - ИФА - БЕСТ», предназначенной для выявления к антигенам нематод рода И^о/Иапа в сыворотке крови собак методом ИФА (пилотные им-муноферементные наборы, созданные с участием НПО «Вектор -Бест»)..............................................................................................................................73

3.3. Изучение зараженности микрофиляриями комаров с помощью метода ПЦР..................................................................... 75

3.4. Анализ случаев обнаружения взрослых паразитов дирофилярий у человека........................................................................... 82

3.5. Комплекс профилактических мероприятий, направленных на предупреждение распространения дирофиляриоза на территории г. Хабаровска.................................................................. 90

Глава 4. Обсуждение результатов................................................ 94

Выводы.................................................................................. 102

Практические рекомендации...................................................... 104

Список литературы.................................................................. 106

ВВЕДЕНИЕ

Паразитарные заболевания являются актуальной проблемой здравоохранения. Это касается не только негативного воздействия их на здоровье людей и животных, но и является причиной больших экономических потерь [2,37,88]. Актуальной медицинской проблемой в настоящее время является заболеваемость людей дирофиляриозом. Это единственный гельминтоз в зоне умеренного климата, имеющий трансмиссивный путь передачи. Случаи дирофиляриоза зарегистрированы на территории 37 государств [167,172,176,180]. В Российской Федерации случаи дирофиляриоза человека зарегистрированы в 39 субъектах, расположенных в пределах 41,30-58,30° с.ш. Основное число больных - 518 человек (90,9%) зарегистрировано в Европейской части России, в том числе в зоне устойчивого риска - 386, в зоне низкого риска - 96 и в зоне умеренного риска - 36 случаев [92,94,113,114].

Нозоареал дирофиляриоза и риск его распространения определяется ареалом переносчиков и суммой температур, необходимых для развития комаров и дирофилярий в переносчиках до инвазионной стадии [42]. По данным М.В. Гу-зеевой (2009), дирофиляриоз занимает второе место в группе редких гельминто-зов и на его долю приходится 15±1,4% случаев [102]. В ряде регионов РФ дирофиляриоз уже не следует относить к редким гельминтозам у людей, т.к. там ежегодно регистрируют это заболевание (Ростовская, Астраханская обл., Краснодарский край, и др.) [3,7,10,34]. В 2012 году на всей территории Российской Федерации (по данным Федеральной службы Роспотребнадзора) официально зарегистрировано 143 случая.

Дефинитивными хозяевами возбудителей дирофиляриоза являются разные виды псовых и кошачьих, однако наибольшее эпидемиологическое и эпизоото-логическое значение имеют собаки [110,127]. Значение собак увеличивается в

связи с большим числом неконтролируемых бродячих животных. У собак диро-филяриоз вызывают 2 вида возбудителей - Dirofilaria immitis и Dirofilaria repens, у людей, как правило, D. repens. Переносчиками возбудителей дирофи-ляриоза являются комары родов Aedes, Culex, Anopheles. Циркуляции возбудителей в природных и синантропных популяциях животных (собак и кошек) способствуют увеличению передачи дирофиляриза человеку [131,136,137]. Истинная заболеваемость людей дирофиляриозом в настоящее время в России неизвестна, так как официально регистрация данного гельминтоза не проводится. Вследствие недостаточной информированности врачей, дирофиляриоз нередко проходит под различными диагнозами непаразитарной этиологии [2,67,86,103,121]. По материалам Н.Н. Дарченковой с соавт. (2009) территория Дальнего Востока относится к зоне умеренного риска распространения дирофи-ляриоза [42]. Ранее в Хабаровске регистрировали единичные случаи заболевания. Первый случай заражения дирофиляриозом человека был выявлен в 1929 г. [57,58]. К настоящему времени на территории г. Хабаровска с 2007 по 2012 гг. зарегистрировано 36 случаев.

Увеличение заболеваемости дирофиляриозом, возможно, связано с изменением социальных условий и климата. Разработка современных комплексных мероприятий по профилактике местной передачи возбудителя в структуре «собака-комар-собака (человек)» основывается на исследованиях паразитарной системы Dirofilaria sp., изучении экстенсивности заражения дирофиляриями дефинитивных хозяев с использованием новых методов клинической и лабораторной диагностики, а также определения роли переносчиков возбудителей - кровососущих комаров разных видов.

Ранее такие исследования на территории г. Хабаровска не проводили.

Цель работы

Изучение £>. /шй и. В. герет в структуре паразитарной системы диро-филяриоза в городе Хабаровске с целью снижения риска заражения и местной передачи возбудителя дирофиляриоза человеку.

Задачи исследования

1. Провести анализ заболеваемости дирофиляриозом дефинитивных хозяев (собак);

2. Провести анализ случаев обнаружения дирофилярий у человека за период с 2007 по 2012 гг.;

3. Определить зараженность микрофиляриями кровососущих комаров, собранных в различных округах города Хабаровска методом ПЦР;

4. Дать сравнительную оценку зараженности дирофиляриозом собак в различных округах города. На основании проведенных исследований составить эпидемиологическую карту распространения дирофиляриоза в городе Хабаровске;

5. Разработать комплекс профилактических мероприятий, направленных на предупреждение распространения дирофиляриоза на территории г. Хабаровска.

Научная новизна работы

Впервые изучена паразитарная система, включающая И^о/Иапа ттШ$ (собака-комар-собака) и ТЯго]\1апа герет (собака-комар-собака (человек)), на территории города Хабаровска. Установлена высокая экстенсивность заражения собак дирофиляриями - 29,3% . За 5 лет исследований зарегистрировано 36 случаев заболевания дирофиляриозом у человека. По данным заболеваемости людей и животных составлена эпидемиологическая карта округов города.

«

Впервые изучена экстенсивность заражения основных переносчиков диро-филярий - кровососущих комаров в г. Хабаровске. Зараженность комаров рр. Aedes и Culex микрофиляриями составила в среднем 5,4%.

Совместно с компанией ВЕКТОР-БЕСТ (г. Новосибирск) создана диагностическая тест-система, предназначенная для выявления IgG к антигенам нематод рода Dirofilaria в сыворотке крови собак методом ИФА, которая показала высокую чувствительность и специфичность.

Впервые предложен комплекс профилактических мероприятий, направленных на предупреждение распространения дирофиляриоза на территории Хабаровска.

Практическая значимость работы

Проведённые масштабные исследования позволили установить широкую циркуляцию дирофилярий среди дефинитивных хозяев (собак) и в переносчиках (кровососущих комарах), а также наличие больных людей дирофиляриозом на территории города Хабаровска. В результате был разработан комплекс профилактических мероприятий, направленный на предупреждение распространения дирофиляриоза.

Создана и испытана диагностическая тест - система, позволяющая выявить антитела на ранних стадиях заболевания у животных, которые являются основными носителями дирофилярий.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

1. Комплексная характеристика паразитарной системы: D. immitis- собаки-комары (сем. Culicidae) - собаки; D. repens - собаки-комары (сем. Culicidae) -собаки (человек) на территории г. Хабаровска.

2. Методы диагностики (микроскопия, ПЦР, ИФА) дирофиляриоза у собак и их эффективность при любой интенсивности инвазии.

Внедрение материалов диссертации:

Опубликовано информационно-аналитическое письмо «Распространение дирофиляриоза на юге Дальнего Востока России, на примере города Хабаровска» (2013г.), материалы которого используют при чтении лекций и проведении семинаров для специалистов практического здравоохранения и студентов медицинских вузов (акты о внедрении утверждены: в Управление Роспотреб-надзора по Хабаровскому краю от 09.06.2013 г., в ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Хабаровском крае» от 21.05.2013 г., в ГБОУ ВПО Дальневосточном государственном медицинском университете Министерства здравоохранения РФ от 23.05.2013 г.).

Совместно с компанией ЗАО «Вектор-Бест» г. Новосибирск создан пилотный набор реагентов, направленный на выявления иммуноглобулинов класса в к антигенам нематод рода ВггоА1аг1а в сыворотке крови собак «Дирофиля-рия-^С-ИФА-БЕСТ» (2013 г.). Апробирован в ФБУН «Хабаровский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии» Роспотребнад-зора, в лаборатории паразитологии (Письмо-подтверждение от 05.02.2013 г. №ВБ-14/90).

Объём и структура диссертации

Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследований, изложения результатов исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, приложений и списка литературы, включающих 122 работ отечественных и 75 зарубежных авторов. Диссертация изложена на 125 страницах машинописного текста, иллюстрирована 52 рисунками и 15 таблицами.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Характеристика эпидемического процесса дирофиляриоза

в современных условиях

Дирофиляриозы - серьёзная медико-социальная проблема, поскольку больные животные являются источником заражения, как других животных, так и человека. Проблема дирофиляриоза обусловлена широкой циркуляцией возбудителя в природной среде и отсутствием надлежащих мер по выявлению и дегельминтизации зараженных животных - облигатных дефинитивных хозяев (собак и кошек) [139,154,156,157,165].

Ввиду важности проблемы, данный паразитоз требует повышенного внимания. В 2003 году дирофиляриоз впервые был включен в официальные документы Минздрава РФ: СанПиН 3.2.1333-03 «Профилактика паразитарных болезней на территории Российской Федерации», МУ 3.2.1756-03 «Эпидемиологический надзор за паразитарными болезнями» и МУ 3.2.1880-04 «Профилактика дирофиляриоза».

До середины прошлого века в мире были диагностированы лишь несколько десятков случаев дирофиляриоза, за последние 50 лет их число резко возросло. Наибольшее число заболеваний регистрируют в Средиземноморском регионе и Шри-Ланке [175]. С 1995 по 2000 гг. выявлено 372 новых случая в 25 странах мира, а к 2003 году число выявленных случаев инвазирования человека О. герет достигло 782 случаев [21,169,170,181,182,185,186]. Дирофиляриоз распространен на всех материках, за исключением Антарктиды. Однако основной ареал расположен в странах с теплым и умеренным климатом, включая южную часть Европы и тропические зоны (рисунок 1.1.1) [168]. В Северной Америке основная заболеваемость людей связана с заражением ОлттШэ, в большинстве

европейских и азиатских стран регистрируют случаи дирофиляриоза, связанные с заражением людей О, герет [117,118,122,123,126,142,162,176,178].

Рисунок 1.1.1 Распространение инвазий />. ¡ттМь у собак [71]

Из стран бывшего СССР болезнь встречается в республиках Центральной Азии и Закавказья, в Казахстане, на Украине, в Белоруссии [28,47,61,69,78]. В России за период с 1915 по 2011 гг., выявлено 701 случай дирофиляриоза на территории Приморского, Хабаровского, Краснодарского, Ставропольского краёв, республик Северного Кавказа, Астраханской, Волгоградской, Ростовской, Липецкой, Воронежской, Нижегородской, Амурской, Ульяновской, Липецкой, Воронежской, Ивановской, Тульской, Курганской, Ульяновской областей, в городах Рязани, Саратове, Казани, Тюмени и др. [1,4,20,2628,40,44,46,49,53,54,62,64,89,90,92,96].

Заболевание дирофиляриозом описано у псовых, кошачьих, енотовых, виверровых, медвежьих [82,148,152]. Основную эпидемическую значимость имеют собаки [159,164,166]. Первые работы о дирофиляриозе собак появились в России в 1904 году, а единичные случаи заражения человека начали регистрировать с 1867 года [84,174,175]. Следует учитывать, что ряд районных и городских ветстанций самостоятельно не диагностируют дирофиляриоз и не занимаются лечением инвазированных собак, поэтому не располагают данными об этом заболевании в своем регионе. По данным И.А. Архипова и Д.Р. Архиповой [15,16] О. ттШя чаще поражает собак на территории Хабаровского, Приморского краев, Сурхандарьинской области Узбекистана, на юге Казахстана, в Закавказье; О. герет встречается преимущественно в Азербайджане, Узбекистане, Запорожской области Украины, на Северном Кавказе, в Кзыл-Ординской области Казахстана.

На основании анализа распространения дирофиляриоза человека в России [42] определены 3 зоны потенциального риска заражения людей £>. герет: в зоне низкого риска число оборотов инвазии в переносчиках составляет 1-3; в зоне умеренного риска - 3-5; в зоне устойчивого риска в связи с повышенными температурами воздуха сезон заражения составляет 3-4 месяца, число оборотов инвазии - 5-7. Московский район относится к зоне низкой передачи дирофиляриоза, однако широкое распространение инвазии у собак позволяет считать регион эндемичным по заболеванию [30,102]. Детальный анализ совокупностей структуры паразитарной системы (собака-комар-собака (человек)) позволяет отнести регион к той или иной зоне потенциального риска заражения. Хабаровский край и г. Хабаровск отнесен авторами [90] к зоне риска передачи возбудителей дирофиляриоза.

1.2. Этиология дирофиляриоза

Возбудитель дирофиляроза относится к классу круглых червей Метала, отряду БряиШа, подотряду ШапМа, семейству РИагш1ае, роду 0[гсф1ста. Распространенные на территории России О. герет и £>. ттШв являются облигат-ными паразитами плотоядных семейств псовых, кошачьих и виверровых, О. иг$1 - бурого медведя и амурского тигра.

О. герет и О. \mmitis - довольно крупные гельминты светло-желтого цвета, суживающиеся к обоим концам. Поверхность нематод снабжена продольными гребнями. Половозрелые самки й. гттШз достигают длины 180-300 мм (рис. 1.2.1-1.2.3), £>. герет несколько меньше (135-150 мм ) - рис. 1.2.4, все они живородящие, личинки (микрофилярии) имеют длину 0,22-0,30 мм, а по ширине равны диаметру эритроцита (0,005-0,007 мм) [73,95].

Рисунок 1.2.1 Шг<ф1аг1а штШь (Гуськов В.В. и др., 2001) [40]

Рисунок 1.2.2 Микрофотография самки Dirofllaria иптШь (хЮО) (Гуськов В.В. и др., 20