Биологические аспекты паразитирования Dirofilaria Immitis у собак в Астраханской области

Богданова, Татьяна Викторовна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Биологические аспекты паразитирования Dirofilaria Immitis у собак в Астраханской области
ВАК РФ 03.02.01, Ботаника

Автореферат диссертации по теме "Биологические аспекты паразитирования Dirofilaria Immitis у собак в Астраханской области"

На правах рукописи

Богданова Татьяна Викторовна

БИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ПАРАЗИТИРОВАНИЯ ЫЯОПЫЫА 1ММ1Ш У СОБАК В АСТРАХАНСКОЙ ОБЛАСТИ

03.02.11 - паразитология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва 2010

004603286

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Астраханский государственный университет»

Научные руководители: доктор медицинских наук

Бойко Оксана Витальевна

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор

Архипов Иван Алексеевич

кандидат биологических наук, с.н.с. Кузнецов Дмитрий Николаевич

Ведущая организация: Федеральное государственное учреждение высшего профессионального образования « Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И.Скрябина».

Защита состоится « У» ¿¿-^.¿¿tf 2010 г. В /^часов на заседании диссертационного совета Д 002.213.03 при Учреждении РАН Институте проблем экологии и эволюции им. А.Н.Северцова (119071 г. Москва, Ленинский проспект 33).

С диссертацией можно ознакомиться: в библиотеке Учреждения РАН Института проблем экологии и эволюции им. А.Н.Северцова по адресу: 119071 г. Москва, Ленинский проспект 33, факс (495) 952-31-46, e-mail: centraparasitol@mail.ru

Автореферат разослан «_f2010 года.

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат биологических наук

Т.А. Малютина

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы.

Дирофиляриоз - трансмиссивное, зоонозное инвазионное заболевание, вызываемое гельминтами, относящимися к классу круглых червей Nematoda, отряду Spirurida, сем. Filariidae, роду Dirofilaria. Род Dirofilaria насчитывает более 20 видов. Возбудителями дирофиляриоза людей и животных являются представители 8 видов: D. immitis, D. repetís, D. tenius, D. ursi, D. subdermata, D. lutrae, D. striata, D. spectans. Распространенные на территории России возбудители инвазии D. repetís (Railliet et Henry, 1911) и D. immitis (Leidy, 1856) являются облигатными паразитами плотоядных семейства псовых и кошачьих, D. ursi - бурого медведя и амурского тигра (М.Ш. Акбаев, 2001; И.А.Архипов, Д.Р.Архипова, 2004).

Проблема дирофиляриоза обусловлена широкой циркуляцией возбудителя в природной среде и отсутствием надлежащих мер по выявлению и дегельминтизации зараженных животных - облигатных дефинитивных хозяев (домашних собак и кошек). Одним из факторов распространения данного заболевания следует считать длительный латентный период (до 5 лет), в течение которого в крови присутствуют циркулирующие микрофилярии. Этот процесс сочетается с повсеместным расселением комаров, являющихся промежуточными хозяевами, их способностью к быстрому увеличению популяции и коротким периодом развития в них микрофилярий до личинок третьей стадии (И.А.Архипов, E.H. Борзунов, В.И.Шайкин, 2001; W.Tarello, 2000).

Патогенетическое действие оказывают взрослые гельминты D. immitis. У большинства собак с паразитированием в их организме небольшого количества особей явных признаков заболевания не проявляется (что резко повышает их эпизоотологическую опасность) и только при значительной инвазии отмечается нарушение функционирования кровеносной системы. В основном это хроническая застойная, правосторонняя сердечная недостаточность. Кроме того, возможны, эндокардит сердечных клапанов и пролиферативный легочный эндоар-териит. К летальному исходу приводят так же легочная эмболия, вызываемая мертвыми или погибающими гельминтами и синдром полой вены, вызываемый теми же причинами. Контрольные мероприятия при этом заболевании трудноосуществимы, поэтому профилактика основывается преимущественно на лечении. В настоящее время эта проблема в Северной Америке настолько актуальна, что созданы специальные клиники для лечения сердечных гельминтозов (Д.Р. Архипова, 2003; А.Е.Р.Тейлор, 1960; М.А.Фисько, 2005).

Хотя дирофиляриоз регистрируется чаще в странах и регионах с теплым климатом, где имеет место большое количество комаров, являющихся промежуточными хозяевами, в последние годы отмечена тенденция к его широкому распространению не только на юге, но и в средней полосе России (Д.Р. Архипова, 2003; В.Г. Супряга и др., 2004; М.В. Сухова, 2002; В.Б. Ястреб, 2006). Рост заболеваемости дирофиляриозом, возможно, связан с изменением экологии и климата. Определенную роль могут играть и переезды домашних собак и кошек, которые путешествуют со своими хозяевами. По мнению

\ \

Д.Р.Архиповой, (2002) основными причинами распространения дирофиляриоза являются неограниченные перемещения животных из одного региона в другой, плохо обустроенные оросительные каналы, создающие условия для массового выплода комаров - промежуточных хозяев, ввоз заболевания из других стран, ограничение использования химических средств защиты от гнуса, а также недостаточный арсенал антигельминтиков против взрослых дирофилярий.

Высокий уровень пораженности собак и обилие переносчиков создают явную угрозу и потенциальные возможности для роста инвазирования дирофи-ляриями во многих регионах мира, в том числе и России, в связи с чем, эту инвазию у человека и животных в соответствии с современной терминологией можно рассматривать как «emerging infection» или «возникающую инфекцию» (Г.Г.Онищенко, 2003).

Дирофиляриоз представляет большую опасность и для человека. В Российской Федерации и странах СНГ известно свыше 150 случаев поражения человека D.repens, истинная же заболеваемость людей дирофиляриозом в настоящее время неизвестна, так как не ведется её официальная регистрация. Вследствие недостаточной информированности врачей дирофиляриоз проходит под различными диагнозами непаразитарной этиологии (Т.И.Авдюхина, В.Ф.Постнова, Л.М.Абросимова, 1996, 1997).

В последние годы дирофиляриозу уделяется значительное внимание со стороны биологов, а также ветеринарных и медицинских специалистов (W.Tarello, 2000; М.В. Сухова, 2002; Д.Р.Архипова, 2003; М.А.Фисько, 2005; Р.С.Аракельян, 2007; В.Б.Ястреб, 2009 и др). Сообщаются сведения, касающиеся в основном, распространения дирофиляриоза в том или ином регионе или ассоциативном течении с другими болезнями. До сих пор в литературе недостаточно освещены количественные параметры развития D.immitis в организме дефинитивного и промежуточного хозяев, биологические особенности D.immitis и влияние нематоды D.immitis на организм собак различных пород в определенных условиях, а также методы диагностики, для выявления конкретного вида паразита и на любой стадии болезни.

Из вышеизложенного следует, что необходима тщательная регистрация и анализ всех выявленных случаев дирофиляриоза (D.immitis) с целью последующего статистического анализа, выявления устойчивых тенденций в заболеваемости с определением районов наибольшего риска заражения, усовершенствования методов диагностики, лечения и профилактики. Цель исследования:

изучение распространения дирофиляриоза, вызываемого D. immitis в условиях Астраханского региона; установление биологических особенностей па-разитирования нематоды Dirojilaria immitis у собак и разработка нового метода диагностики паразитирования Dirojilaria immitis у плотоядных.

Для достижения цели, в ходе исследования решались следующие задачи:

- установить восприимчивое поголовье дефинитивных хозяев Dirojilaria immitis, количественно изучить городскую популяцию собак и кошек в городе Астрахани;

- дать сравнительную оценку зараженности дирофиляриозом (£>. ¡ттШ-ч) собак в различных районах города, определить влияние возраста, пола, породы, типа содержания животных на зараженность Отф1аг'ш тт '1Ш.

- изучить промежуточных хозяев и их зараженность личинками дирофи-лярий, в различное время года;

- оценить степень летальности и биологические особенности паразитиро-вания Бго/Иапа ттШв\

- разработать унифицированную методику выявления носительства £)г'го-/¡¡апа ттпШб у плотоядных.

Научная новизна работы заключается в том, что впервые количественно определено поголовье собак и кошек, проживающих в условиях города Астрахани. Изучен биологический цикл развития нематоды Бгго/Иапа ¡ттШэ у собак в условиях конкретного региона. Выяснено влияние пола, породы, условий содержания на зараженность собак дирофиляриями (р. ттШя) и летальность. Разработан и внедрен новый метод диагностики дирофиляриоза (О. тт1ш). Практическая значимость.

Результаты исследований могут быть использованы для дальнейшего изучения данной нозоформы, разработки комплекса противоэпизоотических и эпидемиологических мероприятий при дирофиляриозе (О. ттШв). Знание биологических особенностей паразитирования О. ттШя у собак в конкретном регионе, поможет в постановке диагноза и прогнозировании планирования профилактических и лечебных мероприятий, направленных на снижение заболеваемости и смертности животных.

Метод диагностики паразитирования В '1го[йаг 'ш 'ттШя, отличается высокой чувствительностью и специфичностью и может быть использован для установления паразитирования на любой стадии болезни и любой интенсивности инвазии.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту :

1. Распространение дирофиляриоза, вызываемого О. ттшз у собак в г. Астрахани;

2. Влияние сезона года, пола, возраста, породы и типа содержания собак на зараженность их Б. ипт1й.г,

3. Метод определения паразитирования Бтф1аг1а ттШя, как способ диагностики при любой интенсивности инвазии и стадии болезни.

Апробация работы и внедрение в практику.

Основные положения диссертационной работы доложены на научно-практических конференциях: «Проблемы ресурсодобывающего производства и переработки экологически чистой сельскохозяйственной продукции» (Астрахань, 2006 г.); «Актуальные проблемы современных аграрных технологий» (Астрахань, 2006 г.); «Актуальные проблемы современных аграрных технологий» (Астрахань, 2007 г.); научно-практическом симпозиуме «Лабораторная медицина: инновационные технологии в аналитике, диагностике, образовании, организации» (Москва, 2008 г.); объединенном иммунологическом форуме (С-Пстербург, 2008 г.), V Международной научно-практической конференции

«Aktualne problem nowoczesnych nauk -2009» (Przemysl, 2009), научно-практической конференции «Лабораторная медицина в свете Концепции развития здравоохранения России до 2020 года» (Москва, 2009).

Результаты проведенных исследований были апробированы и используются в лабораториях следующих кафедр: молекулярной биологии, генетики и биохимии ГОУ ВПО «Астраханский государственный университет»; общей и биоорганической химии ГОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия». Предлагаемый метод диагностики был апробирован на группе собак, внедрен в практику в клиниках ветеринарной медицины города Астрахани и применяется в работе профильной лаборатории ГУ АО «Астраханская областная ветеринарная лаборатория».

По результатам исследований подана заявка на изобретение №2007131172 от 15.08.2007г. и получен патент на изобретение «Способ определения зараженности собак Dirofilaria immitis» № 2371145 от 27.10. 2009г.

Публикации.

По материалам диссертации опубликовано 11 научных статей, в том числе - 4 в изданиях из списка, рецензируемых ВАК Российской Федерации (журналы: «Вестник АГТУ» (2007), «Клиническая лабораторная диагностика» (2008), «Российский иммунологический журнал» (2008), «Ветеринарная Практика» (2008)).

Структура и объем диссертации.

Диссертация состоит из введения, литературного обзора, главы с описанием методов исследования, двух глав собственных результатов, обсуждения результатов, выводов, практических рекомендаций и списка литературы. Работа изложена на 123 страницах компьютерного текста, иллюстрирована 29 таблицами и 12 рисунками. Указатель литературы включает 213 источников, в том числе 162 отечественных и 51 иностранных.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Исследовательская работа проводилась с 2002 по 2009 годы самостоятельно и на базе кафедры молекулярной биологии, генетики и биохимии биологического факультета ГОУ ВПО «Астраханский государственный университет».

Изучение численности собак и кошек проводили методом опроса, по-квартирного и подворного обхода, учета бездомных животных на улицах города Астрахани с последующей обработкой полученных данных на карте. Кроме того, учитывались официальные данные по регистрации животных в клубах любителей домашних животных. Опрос проводился в двух районах города по три улицы в каждом районе, на каждой улице опрошено равное количество человек и обследовано равное количество квартир. Всего было обследовано 1000 квартир в благоустроенном секторе, опрошено 1200 человек в частном секторе.

Работу по исследованию крови на наличие микрофилярий проводили на базе ГУ АО «Астраханская областная ветеринарная лаборатория». Всего за 5

лет было проведено 800 исследований крови собак, из них кобелей - 521, сук -279. Исследования проводили в день взятия крови. Пробы крови объемом 2-5 мл брали из подкожной вены предплечья или из вены Сафена в дневное время. В качестве антикоагулянта использовали 5,0% раствор цитрата натрия.

В работе использовали методы:

1) толстой раздавленной капли;

2) обогащения Кнотта;

3) тонкого фиксированного мазка с окраской по Романовскому-Гимзе.

Метод Кнотта, модифицированный Маркеллом и Воге (1965) - 2 мл периферической крови смешивали с 10 мл 1% раствора уксусной кислоты и центрифугировали при 1500 об/мин в течение 2 минут. Далее после гемолиза верхний слой сливали, а из осадка готовили мазок на предметном стекле, фиксировали спиртовым раствором 95% и окрашивали по Романовскому-Гимзе по общепринятой методике. Размеры личинок изучали под световым микроскопом с помощью миллиметровой линейки. Анатомическое строение и идентификацию микрофилярий проводили после фиксации мазков спиртовым раствором 95% и окраской по Романовскому-Гимзе. Дифференциацию микрофилярий проводили по C.F.Schrey, Е. Trautvetter (1996), S. Pampiglione (1995), W. Tarello (1999).

Породу, пол, возраст, хозяйственное назначение, тип содержания собаки определяли по паспорту и родословной или со слов владельца.

На территории городских улиц и квартир произведен отлов 229 комаров различных родов, из них Culex - 93, Anopheles - 67, Aedes - 69. Отлов проводили в вечернее время (с 19 до 21 часа) - как в городских квартирах, где есть домашние плотоядные, так и в собачьих питомниках, а также в условиях городских улиц. Насекомых оглушали этиловым эфиром, отрывали ножки и крылья. Затем тушки высушивали на предметных стеклах, фиксировали 96% спиртом и окрашивали по Романоскому-Гимзе, микроскопировали при увеличении х90. Идентифицировали до рода по E.H. Павловскому (1934). Вскрытие животных проводили в ГУ АО «Астраханская областная ветеринарная лаборатория». Всего проведено 135 неполных гельминтологических вскрытий по К.И.Скрябину (1928): П-образно сначала препарировалась кожа в районе грудной и брюшной полости, далее вдоль позвоночника выполняли разрез, открывая грудную и брюшную полость. Исследованию подвергали отдельные органы и ткани - подкожную клетчатку, сердце, печень, легкие, органы извлекали из трупа и исследовали.

За 5 лет в районах области было проведено 404 патологоанатомических вскрытий собак, для работы использовали годовые формы отчетов районных лабораторий области.

В качестве источника материала для получения антигена использовались свежие трупы животных, поступившие из Советского, Кировского и Ленинского районов города в ГУ АО «Астраханскую областную ветеринарную лабораторию». Было отобрано 10 собак различных пород - 3 кавказские овчарки, 2 среднеазиатские овчарки, 2 восточноевропейские овчарки, 3 крупные беспородные собаки, из них 3 суки и 7 кобелей. Возраст животных варьировал от 3 до 12 лет.

При конструировании метода диагностики «Способ определения зараженности собак Dirofilaria immitis» использовали:

- для приготовления антигена - половозрелые Dirofilaria immitis в количестве - 697; определение общего белка в полученном экстракте проводили рефрактометрическим методом на рефрактометре RL-3 по справочнику «Методы клинической лабораторной диагностики» под ред. проф. И.П. Кондрахина (2004);

- для установления микробиологической чистоты антигена проводили его посев на следующие среды:

Агар Чапмана

Агар Мак Конки

Агар Сабуро

Агар Шэндлера + вит. К + кровь лошади.

также для посева использовали панель Микоплазма ДУО. Все используемые в работе среды производства Bio-Rad США;

- для получения антисывороток в виварии ГУ АО «Астраханская областная ветеринарная лаборатория», иммунизировали 10 серых кроликов весом 2,53 кг, для контроля использовали 3 серых кроликов той же возрастной группы, кровь у иммунизированных животных брали из краевой вены уха;

- для гипериммунизации использовали этих же кроликов;

- идентификацию антигенов проводили методом иммунодиффузии по Ухтерлони, используя микромодификацию этого метода, на трех предметных стеклах, используя штамп «семерка» (металлический пробойник для агара, состоящий из семи лунок), во влажной камере при температуре +4°С;

- иммуноэлектрофорез проводили с использование набора «КлиниТест-ЭФ» производства НПЦ «Эко-Сервис», на оборудовании: электрофоретической ячейке Wade MiniCell GT System, блок питания PowerPac Basic (300) Power-Supple (Bio-Rad, США). Для отмывания балластных белков использовали 5% раствор хлорида натрия, окраску на белки проводили Амидо черным 10Б из набора «КлиниТест-ЭФ Амидо» производства НПЦ «Эко-Сервис» (Санкт-Петербург), для отбеливания фона использовали 5% раствор уксусной кислоты;

- для апробации метода использовали спонтанно зараженных дирофиля-риозом (D. immitis) 75 собак. 25 животных, подлежащих выбраковке из собачьего питомника ФБУ ИК-В, остальные (50 собак) - у частных владельцев. В 10 случаях лечение животных не проводилось (контрольная группа). Для последующего патологоанатомического подтверждения поставленного нами диагноза наблюдения за животными проводилось в течение 2006 - 2008 гг.

Цифровой материал диссертации обработан математическими и статистическими методами (Плохинский, 1970), в компьютерной программе Microsoft Excel с вычислением средней арифметической (М), средней ошибки средней арифметической (ш), вероятности различий (р) ( Большее JI.H., 1983, Мюллер П., 1982, Халафян А.А., 1995)

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Для распространения и развития дирофиляриоза (.D.immitis) необходимы три обязательных компонента: источник инвазии, фактор передачи и восприимчивый организм. Астраханская область по своим природно-климатическим условиям и современному состоянию социума полностью соответствует критериям, способствующим распространению дирофиляриоза (D.immitis). Поэтому изучение распространения дирофиляриоза (D.immitis) плотоядных имеет приоритетное значение для города Астрахани и области. Жизненный цикл D.immitis продолжается 7-8 месяцев, плотоядные животные заражаются в период лета при нападении комаров рода Aedes, Culex, Anopheles и др. Для Астраханской области этот период довольно значителен с марта-апреля по октябрь (первые насекомые появляются уже во второй декаде марта).

Изменение температурного режима в последнее десятилетие в Астраханской области имеет существенное значение в распространении дирофиляриоза - из-за высоких летних температур высыхают и заболачиваются лиманы и другие мелководные водоемы, что, в свою очередь приводит к новым местам вы-плода комаров и, следовательно, увеличению их численности. Удлинение сроков весенне-осенних сезонов приводит к значительной продолжительности жизнедеятельности кровососущих и, соответственно, увеличению периода заражения дирофиляриозом (D.immitis).

Значительную эпидемическую опасность для жителей городской зоны представляют собаки и кошки, так как они являются соактантами ряда гель-минтозов, опасных для человека. Эта опасность многократно возрастает из-за большого числа неучтенных бродячих собак и кошек. В настоящее время в городе Астрахани существуют устойчивые популяции домашних плотоядных: кошек (Felis catus domesticus) и собак (Canis Familiaris domesticus), которые являются восприимчивыми животными для заболевания и распространения дирофиляриоза (D.immitis).

В городе Астрахани в клубах любителей собаководства зарегистрировано около 2200 животных, в кинологических питомниках и приютах содержится около 600 собак. Количество незарегистрированных животных в десятки раз больше. С целью учета незарегистрированных животных нами были обследованы различные сектора города. В результате выяснилось, что в благоустроенном секторе 1 собака приходится на 29 человек, 1 кошка на 13 человек, в частном секторе 1 собака на 3-4 человека, кошка на 2-3 человека, кроме того, в каждом дворе благоустроенного фонда постоянно проживает около 3-5 собак и 510 кошек. В результате проведенных исследований также выяснено, что более 70% домашних животных не зарегистрированы, а популяции бродячих собак и кошек с каждым годом увеличиваются, а также их миграция по территории города, области и в другие регионы.

Всего по городу были получены следующие результаты - общее поголовье собак и кошек по городу Астрахани составило 299 527 животных, из них собак - 119 431 голов (16%), кошек - 180 096 голов (24%), всего домашних животных - 260 527 голов, бродячих - 39 000 голов.

Характеризуя дефинитивных хозяев дирофиляриоза (Б. ттШз) - кошек и собак городской зоны, одной из главных критериев опасности инвазии следует считать способ их содержания.

В городе Астрахани собаки и кошки неравномерно рассредоточены по городу, и их количество зависит от типа застройки жилья; явное преобладание, как собак, так и кошек наблюдалось в частном секторе. В связи с тем, что такой вид застройки есть в любом районе, это не исключает распространение инвазии повсеместно.

Исходя из потенциальной возможности заражения животных дирофиля-риозом (£>. ттШя), мы условно поделили городские популяции кошек и собак на несколько категорий, взяв за основу классификацию, предложенную И. М. Зубаревой (2001).

Поголовье городских кошек в данное время представлено следующими категориями:

А - домашние кошки, лишенные возможности контакта с внешней средой;

В - полувольные кошки, живущие иногда в квартирах или в частных домах, имеющие возможность находиться на улице;

С - бродячие или бездомные кошки, живущие в подвалах, чердаках и других местах.

В настоящее время в мире насчитывается более 400 пород собак, которые А.П.Умельцев, (2001), условно поделил на 4 группы, по хозяйственному назначению: служебные, охотничьи, комнатно-декоративные и бойцовские. По способу содержания поголовье городских собак мы также разделили на категории с учетом вышеперечисленных групп:

А - домашние собаки, место обитания - городские квартиры и дома, места прогулок - улицы города и дворы; в данной группе - в основном породистые животные - комнатно-декоративных и служебных пород, бойцовские, а также охотничьи породы собак, хозяева которых имеют дачные участки или выезжают на природу;

В - цепные собаки, место обитания и прогулок - частный сектор, изолированные дворы; в данной группе в основном собаки крупных пород - служебные и бойцовские, а также беспородные крупные собаки;

С - бродячие или бездомные собаки, местом обитания которых является все свободное жизненное пространство города и пригорода; это, в основном, беспородные животные, хотя есть и породистые собаки, брошенные хозяевами; все различных размеров.

Исходя из полученных ранее учетных данных, поголовье собак и кошек г.Астрахани распределены на категории по районам города (на 1000 человек).

Таблица 1

Количество собак и кошек по категориям в районах города_

Район Собаки (голов) Категория % от общего кол-ва Кошки (голов) Категория % от общего кол-ва

Кировский 18±1,3 А 5,1 40±1,5 А 7,6

86±1,4 В 24,2 110±1,2 В 21,2

21±1,7 С 6,1 63±1,7 С 12,2

Советский 20±1,0 А 5,6 17±1,4 А 3,2

174±1,5 В 49 215±1,0 В 42

35±1,3 С 10 7Ш,08 С 13,8

Наиболее многочисленной категорией у собак является «В» - «цепные» собаки, как в Кировском - 24,2%, так и в Советском - 49% районах; у кошек -категория «В» - полувольные кошки - как в Кировском - 21,2%, так и в Советском - 42%. Эти категории животных значительное время пребывают на улице и подвержены укусам комаров. Так же заметно, что процент бродячих животных - категория «С», остается высоким, и превалирует в 2 раза над домашними животными. Эта категория животных наиболее мобильна и может способствовать распространению дирофиляриоза (О. ттШз) не только на территории города, но и по всей области.

В период активного лета комаров - с апреля по октябрь мы проводили исследования крови собак, различных категорий из разных районов города на наличие микрофилярий (Б. ¡ттШ,ч).

Таблица 2

Исследование крови собак на наличие микрофилярий_

Год Исследовано крови (проб) Обнаружены микрофилярии (проб) ЭИ, %

2003 12 1 8,3

2004 59 8 13,5

2005 233 34 14,6

2006 215 14 6,5

2007 281 102 36,3

2003-2007 800 159 15,9±5,3

Морфологические признаки микрофилярий изучали после окраски мазков по Романовскому-Гимзе. Размеры микрофилярий составили от 0,158 до 0,223 мм, в среднем 0,193±0,01 мм в длину, и от 0,004 до 0, 006 в среднем 0,005±0.0002 мм в ширину. Головной конец микрофилярий слегка вытянут, конической формы, затемнен, крупнее остальной части тела, хвостовой конец длинный, конической формы сильно ссужен на конце, экскреторная и анальная поры неокрашены.

Среднемноголетняя экстенсивность инвазии у наблюдаемых собак составила - 15,9±5,3% • Наибольшая экстенсивность инвазии (ЭИ) наблюдалась у беспородных собак из категории «С» - 49%, немногим меньше в категории «В» - 16,82±4,3%, и наименьшая экстенсивность инвазии у собак из категории «А» -3,2±0,2%. У декоративных пород собак за период наблюдения инвазия не регистрировалась.

Для проведения сравнительного ретроспективного анализа мы исследовали кровь на наличие микрофилярий £). \mmitis служебных собак тех же пород, только находящихся в одинаковых условиях содержания. С этой целью провели обследование собак в кинологических питомниках. Экстенсивность инвазии у этих животных составила - 36,6±13,2%, а у собак из других категорий она значительно ниже - в 2,3 раза.

Зараженность собак дирофиляриозом (Г). ¡ттШя) по результатам прижизненной диагностики мазков крови на наличие микрофилярий (табл. 3) в Советском районе оказалась выше, чем в Кировском, в 1,7 раза.

Таблица 3

Район Всего исследований Обнаружены микрофи-лярии % положительных

Кировский 214 24 11,2

Советский 189 37 19,6

В результате проведенного анализа был выявлен возраст зараженных дирофиляриозом (£>. ттШз) собак и он составил - от 1,5 до 15 лет; у собак до полутора лет инвазия не регистрировалась. Установлено, что болезнь регистрировалась значительно чаше у собак в возрасте от 4 до 10 лет; зараженность собак в возрасте от 1,5 до 3 лет является минимальной и составляет 1%, от 14 до 15 лет - 5%, от 11 до 13 лет - 8%; четверть зараженных приходится на возраст от 4 до 6 лет - 25%, наибольшее количество инвазированных дирофиляриозом собак наблюдалось в возрастном отрезке от 7 до 10 лет; наивысший же процент инвазированных наблюдался в двух возрастных группах - от 7 до 8 лет (31%) и от 9 до 10 лет (30%).

Кровь для исследований была отобрана у собак различного пола; результаты показали, что чаще в 2,5 раза заражаются дирофиляриозом (£>. ттШз) кобели, чем суки.

Наибольшее количество зараженных собак наблюдалась в августе - сентябре (ЭИ - 23,5%), а также в первые месяцы активного лета комаров - апреле - мае (18%) (среднемесячная температура воздуха в регионе в эти месяцы достигает + 26°С), наименьшая экстенсивность инвазии наблюдается в самые жаркие летние месяцы региона - июне - июле (16,5%).

Дирофилярии (Б. ттШв) - биогельминты, их развитие и распространение происходит с участием промежуточного хозяина - комара. С целью изуче-

ния особенностей промежуточного хозяина в регионе мы провели отлов комаров в период наибольшей их активности в августе месяце (с учетом заражаемости собак). Отлов проводили в вечернее время (с 19 до 21 часа) - как в городских квартирах, где есть домашние плотоядные, так и в собачьих питомниках, а также в условиях городских улиц. Всего исследовано 229 комаров родов Aedes, Anopheles, См/ex; при этом обнаружены микрофилярии у 15 особей, максимально инвазированы комары рода Culex (ЭИ - 8,6%), минимально - рода Anopheles (ЭИ - 4,5%).

Всего за период наблюдений проведено 135 неполных гельминтологических вскрытий собак тех пород, которые наиболее подвержены заражению ди-рофиляриозом (D. immitis). Из них пали от закупорки легочной артерии и задней полой вены половозрелыми нематодами D. immitis - 31 собака (27,6±4,2 %), т.е., почти каждая четвертая собака гибнет в результате паразитирования диро-филярий (D. immitis). Самый большой процент гибели от дирофиляриоза наблюдался среди восточноевропейских овчарок (40%), самый низкий (15,8%) - у среднеазиатских.

Анализируя особенности распространения дирофиляриоза (D. immitis) в Астраханской области, нельзя не обратить внимание на сезонность. Гибель животных от дирофиляриоза, в результате паразитирования Dirofilaria immitis наступает не в течение всего года, а в определенные месяцы. Установлено, что гибель собак от дирофиляриоза (D. immitis) наступает преимущественно в - декабре, январе, феврале, марте и июле. Февраль - самый холодный месяц в Астраханской области, и именно в нем отмечался максимальный процент павших животных - 48,4; минимальный процент - в июле (6,4%) - самом жарком месяце, гибель животных может быть связана с усилением нагрузки на сердечнососудистую систему.

В таблице 4 отражен скрининг зараженности собак по результатам исследований крови на наличие микрофилярий D. immitis, и падежа собак от дирофиляриоза (D. immitis) в разрезе пород:

Таблица 4

Сравнительная оценка зараженности ¿). иптШъ и падежа собак по породам

Породы собак Исследования мазков крови Патологоанатомические вскрытия

Всего Обнар мик-рофил. % Всего Обнар. дирофил. %

Немецкая 130 13 10 12 4 33,3

Кавказская 146 48 32,8 18 5 27,8

Восточно-европейская 130 9 7,9 5 2 40

Среднеазиатская 132 11 8,3 19 3 15,8

Беспородные 262 78 29,7 81 17 21

Проведенный сравнительный анализ зараженности собак и их падежа в различные годы показывает пропорциональность зараженности и падежа, их прямую зависимость от климатических условий и количества переносчиков в различные годы наблюдений. Наиболее неблагополучными в эпизоотическом плане по дирофиляриозу (Б. ттйш) можно считать 2004, 2005, 2007 годы (р<0,05). Именно в эти годы отмечался наибольший процент зараженности и гибели собак.

В районах области регистрировали гибель собак от паразитирования нематод Б. ттШБ, путем патологоанатомических вскрытий и обнаружения половозрелых гельминтов в местах локализации. В четырех районах области, таких как Енотасвский, Черноярский, Харабалинский, Лиманский гибель собак от дирофиляриоза (Б. ттШБ) не зарегистрирована. Наибольший процент гибели собак зарегистрирован в Наримановском и Камызякском районах области (13,5% и 6,3% соответственно). Эти районы области наиболее приближены к городу, расположены вдоль берегов Волги, в данных районах расположены места отдыха людей (дачные массивы, турбазы, базы отдыха, детские лагеря и «дикие» стоянки туристов). В Камызякском районе расположен Астраханский заповедник, с достаточным количеством диких плотоядных - таких как волки, лисы, енотовидные собаки и другие, что создает угрозу возникновения синан-тропного очага по дирофиляриозу (Б. ттШэ) и в дикой природе.

Число павших животных от дирофиляриоза (Б. 1ттШз) в городе Астрахани в 4,6 раза превышал показатель по области (27,6±4,2 % и 6,0±1,6% соответственно).

Обнаруженные путем неполных гельминтологических вскрытий нематоды по морфологическим, анатомическим признакам идентифицированы как Б1-го/йапа ттШя. Самки Б. иптШь - крупные белые нитевидные нематоды длиной - 250±30 мм, шириной 0,960±0,370 мм, хвостовой и головной концы - конусовидные, скрученные яичники в заднем отделе тела, поверхность тела имеет продольные гребни. Самцы Б. ттШБ — белые нитевидные нематоды, немного меньше самок, их длина 150±25 мм, ширина - 1,120 ± 0,20 мм. Хвостовой конец конической формы, немного закруглен и сильно ссужен (иногда закручен).

Дальнейшей целью наших исследований стала разработка метода ранней диагностики паразитирования у собак Иго/Папа 1тт1ш. Для приготовления антигенного диагностикума, нами были использованы Б. ттШз, извлеченные путем неполного гельминтологического вскрытия собак различных пород, пола и возраста.

Извлеченных Б. 'ттШ$ сначала промывали водопроводной, затем дистиллированной водой, далее измельчали на небольшие фрагменты ножницами, затем тщательно растирали с добавлением кварцевого песка в фарфоровой ступке при добавлении небольшого количества физиологического раствора в течение двух часов до получения однородной массы. Затем полученную суспензию подвергали замораживанию при температуре - 4°С. В течение последующих трех суток суспензию извлекали из морозильной камеры и после некоторого оттаивания смесь тщательно растирали, а затем повторно подвергали замораживанию. Эту процедуру повторяли 3 раза.

В полученную суспензию добавляли физиологический раствор из расчета 1:3, учитывая первоначально добавленное количество физиологического раствора при растирании гельминтов. После чего полученную смесь экстрагировали путем четырехчасового встряхивания на шуттель-аппарате при комнатной температуре. Далее биомассу центрифугировали при 3000 оборотах/минуту в течение 30 минут. Надосадочную жидкость (экстракт) сливали, а к осадку прибавляли 10 мл физиологического раствора и повторно центрифугировали в течение 30 минут в том же режиме. Полученные порции экстрактов соединяли. Полученный экстракт для концентрирования помещали в диализный мешок. Содержание белка в данном экстракте составило - 15,2 г/л (15,2 ± 0,2 мг/мл) (Р <0,01).

Для установления микробиологической чистоты антигена перед введением его кроликам проводили посев на питательные среды. Общепринятым методом была установлена бактериологическая пригодность антигена, приготовленного из Отф1аг1а 1ттШ$ для последующей иммунизации кроликов с целью получения антисывороток, необходимых для подтверждения чистоты полученного нами диагностикума.

Полный цикл иммунизации кроликов длился 12 суток. На подкожные и внутримышечные инъекции израсходовано - 7,7 мл антиген-экстракта и, соответственно - 117,04 мг белка.

Спустя 30 дней после последней инъекции, продолжили иммунизацию кроликов путем внутримышечных инъекций в различные участки бедер.

На весь курс иммунизации было израсходовано 11,4 мл антиген-экстракта, что составило 173,28 мг белка. Все животные опытной и контрольной группы живы.

Идентификацию антигенов проводили методом иммунодиффузии по Ух-терлони. Тем же способом было подтверждено отсутствие возможной реакции с перекрестно реагирующими антигенами (сывороткой крови, тканями легких и сердечной мышцы инвазированных собак) при проведении исследования рекомендуемым нами методом. В связи с тем, что чувствительность иммунодиф-фузного метода не всегда может достаточно точно свидетельствовать об отсутствии реакции идентичности или же частичной идентичности между антигенами, следующим этапом, подтвердившим иммунологическую частоту и высокую специфичность нашего диагностикума, был иммуноэлектрофорез.

Таким образом, в результате проведенных испытаний, получено достоверное подтверждение высокой иммунологической частоты (отсутствие перекрестно реагирующих антител, проверенной в два этапа - иммунодиффузией по Ухтерлони, а затем, с использованием иммуноэлектрофореза) и эффективности предлагаемого нами метода. Только его достоверно подтвержденная иммунологическая чистота позволила нам рекомендовать его к широкому применению.

Для проведения дальнейшей апробации метода «Способ определения зараженности собак И. Ьпт'й'ту нами была выбрана группа животных, спонтанно зараженных дирофиляриозом ф. 1ттШ£), выявленных по клиническому осмотру, аускультации. При выборе контрольных групп животных учитывали породу и возраст. Возраст животных составил - от 7 до 13 лет. Всех собак разбили на

группы по породам. Перед началом эксперимента у всех животных взяли венозную кровь и исследовали на наличие микрофилярий D. immitis по модифицированному методу Кнотта.

У всех животных параллельно вышеописанным исследованиям получали венозную кровь и приготовляли сыворотки путем отстаивания и удаления сгустков. Сыворотки хранили в холодильнике при температуре +2...+4°С.

Далее проводили постановку реакции преципитации в агаровом геле, согласно методике «Способ определения зараженности собак D. immitis». Ранее приготовленный антиген из Dirofilaria immitis и сыворотки крови наблюдаемых собак вносили в вырезанные пробойником лунки агара, по следующей схеме: в центральную лунку вносили антиген, по периферии помещали сыворотки собак опытной группы.

Проведенная апробация метода в опытной и контрольной группах собак доказала его высокую специфичность и достоверность. В опытной группе эффективность предлагаемого нами метода составила - 98%, в контрольной группе - 100%. Экспериментальным путем была доказана высокая чувствительность и специфичность (98% и 97% соответственно) предлагаемого нами метода.

ВЫВОДЫ

1. При исследовании собак и кошек г. Астрахани выявлено восприимчивое поголовье дефинитивных хозяев Dirofilaria immitis: наиболее подвержены опасности заражения цепные собаки служебных пород, из-за длительного пребывания их вне помещений и более частого контакта с комарами.

2. По результатам исследований морфологии микрофилярий выявлено пара-зитирование у собак в Астраханской области - D.immitis. Максимальная микрофиляремия (ЭИ - 23,5%) наблюдалась у собак в августе-сентябре.

3. Микрофилярии обнаружили у собак 4-х служебных пород и беспородных, чаще инвазию регистрировали у кавказских и немецких овчарок и беспородных. У декоративных пород инвазию не регистрировали. Значительное влияние на зараженность оказывал тип содержания животных и хозяйственное назначение (бездомные и цепные).

4. Установлено, что чаще подвержены инвазии кобели, чем суки. Заражению подвержены собаки всех возрастов, наибольшее количество инвази-рованных в возрастном отрезке - от 7 до 10 лет (30±1,0%), возрастной минимум приходится на 1,5-3 года (1,0%).

5. Среди промежуточных хозяев - комаров, наиболее инвазированы личинками дирофилярий (£1. immitis) комары рода Culex (8,6%), менее рода Aedes (5,8%) и Anopheles (4,5%).

6. Результаты гельминтологических вскрытий подтвердили паразитирова-ние у собак D. immitis. Летальность собак от дирофиляриоза (D. immitis) наибольшая среди немецких и восточноевропейских овчарок, 81% всех летальных случаев приходится на зиму (декабрь - 10%, январь - 22,6%, февраль - 48%), осенью гибель животных не зарегистрирована.

7. Разработан и апробирован унифицированный метод диагностики «Способ определения зараженности собак Dirofilaria immitis», основанный на реакции преципитации специфичного антигена и сыворотки крови собак в агаровом геле, который отличается высокой чувствительностью и специфичностью (98% и 97% соответственно) и имеет ряд преимуществ: позволяет проводить массовые исследования крови собак и выявлять инвазию на любой стадии болезни.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Исходя из результатов наших исследований по изучению дирофиляриоза (D. immitis) собак в условиях Астраханской области для своевременной диагностики и усовершенствования мер борьбы с данной инвазией рекомендуем проводить следующие мероприятия:

1. Не реже одного раза в год в августе проводить обследование всех животных на наличие микрофилярий D. immitis, а также обследовать всех ввозимых на территорию области собак.

2. При подозрении на дирофиляриоз (D. immitis), необходимо принимать во внимание - возраст животного, породу, пол, сезон года и особенно способ содержания.

3. Для установления достаточно точного диагноза рекомендуется использовать разработанный «Способ определения зараженности собак Dirofilaria immitis» - ввиду его специфичности к определенному виду Dirofilaria, достоверности и надежности, а также финансовой доступности.

Список работ, опубликованных по теме диссертации.

1. Богданова Т.В. Дирофиляриоз собак в Астраханской области / Бойко О.В. //Журнал «Вестник АГТУ». -№4(39). - Астрахань, 2007. - С.137-139.

2. Богданова Т.В. Иммунологическая диагностика дирофиляриоза собак / Бойко В.И. // Российский иммунологический журнал. - Т.2(11), №2-3. - Москва, 2008.-С. 164.

3. Богданова Т.В. Диагностика паразитирования D. immitis у собак в Астраханской области //Журнал «Ветеринарная практика».- № 4 (43). - С-Петербург, 2008. -С.24-26.

4. Богданова Т.В. Диагностическое использование антигена, приготовленного из D. immitis / Бойко В.И.// Журнал «Клиническая лабораторная диагностика» . - №9. - Москва, 2008. -С.52-53.

5. Богданова Т.В. Ветеринарный контроль за паразитозами собак и кошек в г. Астрахани / Полковниченко А.П. // Материалы II Всеросс. научной конференции студентов и молодых ученых с межд. участием: «Актуальные проблемы современных аграрных технологий».-Астрахань, 2007. -С. 199-200.

6. Богданова Т.В. Дирофиляриоз плотоядных в условиях Астраханской области /Полковниченко А.П.// Материалы международной научно-практической

конференции: «Проблемы ресурсодобывающего производства и переработки экологически чистой с/х. продукции». - Астрахань, 2006 - С.77-78.

7. Богданова Т.В. Лабораторная диагностика и лечение дирофиляриоза собак / Полковниченко А.П.// Материалы межд. научно-практической конференции: «Проблемы ресурсодобывающего производства и переработки экологически чистой с/х продукции». - Астрахань, 2006 - С.82-83.

8. Богданова Т.В. Некоторые актуальные проблемы ветеринарной паразитологии в Астраханской области / Бойко О.В.// Материалы Российской научной конференции студентов и молодых ученых с межд. участием: «Актуальные проблемы современных аграрных технологий».-Астрахань,2006.-С.111-112.

9. Богданова Т.В. Климато-географические особенности Астраханской области как приоритетный фактор распространения дирофиляриоза / Бойко О.В.// Materialy V miedzynarodowej naukowi-praktycznej konferencji "Aktualne problemy nowoczesnych nauk-2009". - Volume 18. - Przemysl, Nauka I studia, 2009. - P.45-46.

10. Богданова Т.В. Эпизоотологический мониторинг дирофиляриоза в Астраханской области // Materialy V miedzynarodowej naukowi-praktycznej konferencji "Aktualne problemy nowoczesnych nauk-2009". - Volume 18. -Przemysl, Nauka I studia, 2009. - P. 47-48.

11. Богданова T.B.Иммунологический метод диагностики инвазии, вызываемой D. immitis/Бойко О.В., Бойко В.И.//Труды научно-практической конференции «Лабораторная медицина в свете Концепции развития здравоохранения России до 2020 года». - Москва, 28-30 сентября 2009. - С.220-221.

Уч.-изд. л. 1,2. Усл. печ. л. 1,1. Заказ № 2124. Тираж 80 экз.

Оттиражировано в Издательском доме «Астраханский университет» 414056, г. Астрахань, ул. Татищева, 20 Тел. (8512) 48-53-47 (отдел маркетинга), 48-53-45 (магазин); тел. 48-53-44, тел./факс (8512) 48-53-46 E-mail: asupress@yandex.ru

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Богданова, Татьяна Викторовна

Содержание.2

Введение.4

ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР.

1.1. Систематическое положение и морфология Dirofilaria immitis.9

1.2. Жизненный цикл Dirofilaria immitis.12

1.3. Распространенность дирофиляриоза у людей и животных.14

1.4.Физико-географические и природно-климатические особенности Астраханской области, способствующие распространению Dirofilaria immitis .18

1.5. Дефинитивные хозяева Dirofilaria immitis.20

1.6. Промежуточные хозяева Dirofilaria immitis.21

1.7. Патогенетическое воздействие на организм «хозяина» Dirofilaria immitis .23

1.8. Диагностика паразитирования Dirofilaria immitis.25

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.36

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

ГЛАВА 3. БИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ПАРАЗИТИРОВАНИЯ DIROFILARIA IMMITIS СРЕДИ СОБАК ГОРОДСКОЙ ПОПУЛЯЦИИ

3.1. Дефинитивный хозяин дирофиляриоза {D. immitis). Учет поголовья собак и кошек в городе Астрахани.40

3.2. Категории и группы городской популяций собак и кошек.45

3.3. Динамика заболеваемости дирофиляриозом (D. immitis). в городе Астрахани в течение 2003-2007 годов. Прижизненная диагностика дирофиляриоза {D. immitis).48

3.4. Фактор передачи дирофиляриоза (D. immitis) .56

3.5. Результаты патологоанатомических исследований.58

ГЛАВА 4. РАЗРАБОТКА МЕТОДА ДИАГНОСТИКИ ПАРАЗИТИРОВАНИЯ DIROFILARIA IMMITIS У ПЛОТОЯДНЫХ

4.1. Приготовление антигена.67

4.2. Апробация метода.

4.2.1. Получение антисывороток.70

4.2.2.Идентификация антигенов.74

4.2.3. Определение иммунологического родства между полученной антисывороткой и тканями инвазированных животных.77

4.2.4. Иммуноэлектрофоретическое исследование антигена.79

4.2.5 Испытание предлагаемого метода «Способ определения зараженности собак D. immitis» на конкретных животных.82

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ И ЗАКЛЮЧЕНИЕ.86

ВЫВОДЫ.101

Введение Диссертация по биологии, на тему "Биологические аспекты паразитирования Dirofilaria Immitis у собак в Астраханской области"

Инфекции и инвазии остаются одной из основных причин инвалидности и смертности людей и животных в мире. По данным Всемирной организации здравоохранения, ежегодно инфекционные и паразитарные болезни уносят свыше 15-16 миллионов человеческих жизней. Официальная медицинская статистика отмечает, что ежегодно в России паразитарными болезнями болеют 1,6 млн. человек [86, 106, 176, 208]. В настоящее время известно много задокументированных случаев паразитозов среди населения, при которых источником и резервуаром возбудителей являются дикие и домашние плотоядные.

Научный интерес к современному собаководству в РФ значительно возрос в связи с расширением его породного состава и широким использованием собак в оперативно - розыскной работе и охранной службе. Высокая затратность обучения ценных пород собак обуславливает повышенный интерес к их здоровью, к разработке новых и совершенствованию традиционных методов диагностики заболеваний собак и лечению больных животных.

По мнению ряда отечественных и зарубежных исследователей [28] собаки не только являются соактантами инфекционных и инвазионных паразитарных систем как хозяева возбудителя, но резервуаром и источником возбудителей зоонозных болезней для других видов животных и человека. Будучи паразитами, гельминты наносят вред здоровью собак, а попадая в окружающую среду, загрязняют ее и создают предпосылки пространственной аппликации на территории и расширения популяционных границ. Биологический цикл развития гельминтов в основном протекает в организме животных и человека, а также в природной среде, которые всегда находятся в экологической взаимосвязи.

В условиях крупных городов нозологический профиль заразной патологии собак является показателем нестабильным как по набору нозоформ, так и по уровню биологического проявления. До сих пор многие биологические аспекты проявления заразных болезней собак еще недостаточно изучены и объяснены. К числу таких заразных болезней собак в условиях Астраханской области относится дирофиляриоз, вызываемый нематодой Dirofilaria immitis.

Недостаточная изученность функционирования данной паразитарной системы в условиях Астраханской области, методы ее ранней диагностики и определили выбор темы и направления наших исследований.

Цель исследования: изучение распространения дирофиляриоза, вызываемого D. immitis в условиях Астраханского региона; установление биологических особенностей паразитирования нематоды Dirofilaria immitis у собак и разработка нового метода диагностики паразитирования Dirofilaria immitis у плотоядных.

Для достижения цели, в ходе исследования решались следующие задачи;

- установить восприимчивое поголовье дефинитивных хозяев Dirofilaria immitis, количественно изучить городскую популяцию собак и кошек в городе Астрахани;

- дать сравнительную оценку зараженности дирофиляриозом (D. immitis) собак в различных районах города, определить влияние возраста, пола, породы, типа содержания животных на зараженность Dirofilaria immitis.

- изучить промежуточных хозяев и их зараженность личинками диро-филярий, в различное время года;

- оценить степень летальности и биологические особенности паразитирования Dirofilaria immitis;

- разработать унифицированную методику выявления носительства Dirofilaria immitis у плотоядных.

Научная новизна работы заключается в том, что впервые количественно определено поголовье собак и кошек, проживающих в условиях города Астрахани. Изучен биологический цикл развития нематоды Dirofilaria immitis у собак в условиях конкретного региона. Выяснено влияние пола, породы, условий содержания на зараженность собак дирофиляриями (D. immitis) и летальность. Разработан и внедрен новый метод диагностики дирофиляриоза (D. immitis).

Практическая значимость. Результаты исследований могут быть использованы для дальнейшего изучения данной нозоформы, разработки комплекса противоэпизоотических и эпидемиологических мероприятий при ди-рофиляриозе (D. immitis). Знание биологических особенностей паразитирова-ния D. immitis у собак в конкретном регионе, поможет в постановке диагноза и прогнозировании планирования профилактических и лечебных мероприятий, направленных на снижение заболеваемости и смертности животных.

Метод диагностики паразитирования Dirofilaria immitis, отличается высокой чувствительностью и специфичностью и может быть использован для установления паразитирования на любой стадии болезни и любой интенсивности инвазии.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

1. Распространение дирофиляриоза, вызываемого D. immitis у собак в г.Астрахани;

2. Влияние сезона года, пола, возраста, породы и типа содержания собак на зараженность их/), immitis;

3. Метод определения паразитирования Dirofilaria immitis, как способ диагностики при любой интенсивности инвазии и стадии болезни.

Апробация работы и внедрение в практику. Основные положения диссертационной работы доложены на научно-практических конференциях: «Проблемы ресурсодобывающего производства и переработки экологически чистой сельскохозяйственной продукции» (Астрахань, 2006 г.); «Актуальные проблемы современных аграрных технологий» (Астрахань, 2006 г.); «Актуальные проблемы современных аграрных технологий» (Астрахань, 2007 г.); научно-практическом симпозиуме «Лабораторная медицина: инновационные технологии в аналитике, диагностике, образовании, организации» (Москва, 2008 г.); объединенном иммунологическом форуме (С-Петербург, 2008 г.), V Международной научно-практической конференции «Aktualne problem no-woczesnych nauk -2009» (Przemysl, 2009), научно-практической конференции «Лабораторная медицина в свете Концепции развития здравоохранения России до 2020 года» (Москва, 2009).

По результатам исследований подана заявка на изобретение №2007131172 от 15.08.2007г. и получен патент на изобретение «Способ определения зараженности собак Dirojilaria immitis» № 2371 145 от 27.10. 2009г.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 11 научных статей, в том числе - 4 в изданиях из списка, рецензируемых ВАК Российской Федерации (журналы: «Вестник АГТУ» (2007), «Клиническая лабораторная диагностика» (2008), «Российский иммунологический журнал» (2008), «Ветеринарная Практика» (2008)).

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, литературного обзора, главы с описанием методов исследования, двух глав собственных результатов, обсуждения результатов, выводов, практических рекомендаций и списка литературы. Работа изложена на 123 страницах компьютерного текста, иллюстрирована 29 таблицами и 12 рисунками. Указатель литературы включает 213 источников, в том числе 162 отечественных и 51 иностранных.

Заключение Диссертация по теме "Ботаника", Богданова, Татьяна Викторовна

выводы

1. При исследовании собак и кошек г. Астрахани выявлено восприимчивое поголовье дефинитивных хозяев Dirofilaria immitis'. наиболее подвержены опасности заражения цепные собаки служебных пород, из-за длительного пребывания их вне помещений и более частого контакта с комарами.

2. По результатам исследований морфологии микрофилярий выявлено паразитирование у собак в Астраханской области - D.immitis. Максимальная микрофиляремия (ЭИ - 23,5%) наблюдалась у собак в августе-сентябре.

4. Установлено, что чаще подвержены инвазии кобели, чем суки. Заражению подвержены собаки всех возрастов, наибольшее количество инва-зированных в возрастном отрезке - от 7 до 10 лет (30±1,0%), возрастной минимум приходится на 1,5-3 года (1,0%).

5. Среди промежуточных хозяев - комаров, наиболее инвазированы личинками дирофилярий (D. immitis) комары рода Culex (8,6%), менее pojs&Aedes (5,8%) и Anopheles (4,5%).

6. Результаты гельминтологических вскрытий подтвердили паразитирование у собак D. immitis. Летальность собак от дирофиляриоза (£). immitis) наибольшая среди немецких и восточноевропейских овчарок, 81% всех летальных случаев приходится на зиму (декабрь - 10%, январь — 22,6%, февраль — 48%), осенью гибель животных не зарегистрирована.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

2. При подозрении на дирофиляриоз (D. immitis), необходимо принимать во внимание — возраст животного, породу, пол, сезон года и особенно способ содержания.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Богданова, Татьяна Викторовна, Астрахань

1. Издания на русском языке

2. Авданина Д.А., Лихотина С.В., Кокорина Л.М. Методы борьбы с гель-минтозами собак и кошек // Российск. ветеринар, журн. «Мелкие домашние и дикие животные». 2006. - №1. - С.46-47.

3. Авдюхина Т. И., Постнова В. Ф., Абросимова Л. М. и др. Дирофиляри-оз (D. repens) в Российской Федерации и некоторых странах СНГ: ситуация и тенденция ее изменения // Мед. паразитол.—2003.— № 4.—С. 44-48.

4. Авдюхина Т. И., Лысенко А. Я., Супряга В. Г., Постнова В. Ф. Диро-филяриоз органа зрения: реестр и анализ 50 случаев в Российской Федерации и странах СНГ // Вестник офтальмологии.—1996.—№3. С. 35—39.

5. Авдюхина Т. И., Супряга В. Г., Постнова В. Ф. и др. Дирофиляриоз в странах СНГ: анализ случаев за 1915—1996 годы // Мед. паразитол.— 1997.—№4.—С. 3—7.

6. Авилов В.М., Сочнев В.В. Управлять эпизоотическим процессом // Колос Сибири. Новосибирск, 1991. - № 29-30.

7. Акбаев М.Ш. Паразитология и инвазионные болезни животных; Учебник средних специальных заведений. -М.: Колос, 2001. С.336-339.

8. Аракельян Р.С. Эпидемиолого-эпизоотические особенности дирофиляриоза на территории Астраханской области // Автрореф. дис. . канд. мед. наук. — Москва, 2007.— 25 с.

9. Международный евроазиатский конгресс по инфекционным болезням «Актуальные вопросы инфекционной патологии». Витебск, 2008. — С. 3738.

10. Артамонова А. А. Случаи дирофиляриоза в Ростовской области // Гельминтозы человека; Республ. сб.— Л., 1989.—С. 92—95.

11. Артамонова А.А., Бережная В.Г. Локализация дирофилярий у человека в Ростовской области // Тез. Докл. межд. научн. конф. «Актуальные проблемы медицинской и ветеринарной паразитологии». — Витебск, 1993. — С.48.

12. Артамонова А. А., Нагорный С. А., Стрельникова Г. В., Левченко Л. В. Дирофиляриозы у людей и собак в Ростовской области // Тез. докл. VII Всесоюзного съезда общества эпидемиологов, микробиологов, паразитологов.— М., 1997.—Т 1.—С. 326—327.

13. Артамонова А. А., Нагорный С. А., Строкатова Н. А. Проблемы дирофиляриоза на Северном Кавказе // Тез. докл. всерос. симпозиума «Роль Российской гельминтологической школы в развитии паразитологии».—М., 1997.—С. 4-5.

14. Архипов И.А., Архипова Д.Р. Дирофиляриоз. М., 2004. - 194 с.

15. Архипова Д. Р. Биология дирофилярий и эпизоотология дирофиляриоза собак в степной зоне юга России // Автрореф. дис. . канд. биол. наук. — Н. Новгород, 2003.— 26 с.

16. Архипов И.А., Борзунов Е.Н., Шайкин В.И., Зоопаразитозы, передаваемые человеку от собак и кошек // Матер. IX Моск. междунар. вет. конгр. -М., 2001.-С. 230-231.

17. Архипов И.А., Тиханова Н.В., Кузмичев В.В. Эпизоотология гельмин-тозов кошек в урбанизированной местности // Матер. IX Моск. междунар. вет. конгр. М., 2003. - С. 42-43.

18. Астафьев Б.А. Достижения отечественной науки в изучении патогенеза гельминтозов // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 1998. - №2. - С. 8-11.

19. Афендулова И.С. Случай глазной формы дирофиляриоза // Вестник офтальмологии. 2000. - №2. - С.40.

20. Афифи А.А., Эйзен С.П. Статистический анализ. Подход с использованием ЭВМ: Пер. с англ. М.: Мир, 1982. - 488 с.

21. Беляков В.Д., Голубев Д.Б., Каширский Г.Д., Гец В.В. Саморегуляция паразитарных систем. — Л.: Медицина. 1987. - 240 с.

22. Беляков В.Д. Проблема саморегуляции паразитарных систем и механизм развития эпидемиологического процесса // Вестн. АМН СССР. 1983. -№5. - С.3-9.

23. Бене Ф. Выбор антигельминтных средств при гельминтозе у плотоядных // Ветеринария. 1999. - №5. - С. 4-9.

24. Благова Н.Н. Некоторые факторы иммунитета у больных аскаридозом и энтеробиозом на фоне лечения албендазолом: автореф. дис. . канд. мед. наук. 1997. -25 с.

25. Бодня Е.И. Проблема профилактики паразитозов в современных условиях // Новости медицины и фармации. — 2005. № 20-22. — С.9.

26. Бойко О.В., Николаев А.А., Бойко В.И., Кондрашова Ю.В., Журихин А.В., Гудинская Н.И. Иммунологические методы диагностики некоторых видов патологий // Аллергология и иммунология. 2008. — Т. 9, № 3. - С.294.

27. Болыпев Л.Н., Смирнов Н.В. Таблицы математической статистики; 3-е изд.-М.: Наука, 1983.-С.416.

28. Бондаренко В.М. Факторы патогенности бактерий и их роль в развитии инфекционного процесса // Микробиол. 1999. - № 5. - С. 34-39.

29. Борисова М.А., Сирота Н.П. Дирофиляриоз у человека // Проблемы и перспективы паразитологии. Харьков - Луганск, 1997. - С.28-29.

30. Бронштейн А. М., Малышев Н.А. Гельминтозы органов пищеварения: кишечные нематодозы, трематодозы печени и ларвальные цестодозы (эхино-коккозы) // Российский медицинский журнал. — 2004. Т. 12, № 4.

31. Бронштейн А. М., Супряга В. Г., Ставровский Б. И. и др. Дирофиляриоз человека в Московском регионе // Мед. паразитол.— 2003.—№ 3.—С. 51—56.

32. Бронштейн А. М., Токмалев А. К. Паразитарные болезни человека: протозоозы и гельминтозы // РУДН, 2004. С.207.

33. Бухарин О. В., Литвин В. Ю. Патогенные бактерии в природных экосистемах. Екатеринбург, 1997. - 275 с.

34. Бухарин О. В., Усвяцов Б. Я. Бактерионосительство (медико-экологический аспект) // Екатерин.: УрО РАН. — 1996. С.3-12.

35. Веденеев С. А. Дирофиляриоз собак в Волгоградской области // Ветеринария. 2004. -No 6.- С. 33-35.

36. Веденеев С. А. Основные паразитозы плотоядных в условиях Нижнего Поволжья // Автореф. дис. . докт. вет. наук. — 2005. — 40 с.

37. Величко С. В., Василик Н. С., Мисюрин А. В., Абраменко Н. В. // Матер. YI Межд. науч. практ. конф. - Киев, 2001. - С. 15-18.

38. Воличев А. Н. Эпизоотология основных паразитозов плотоядных в условиях города Москвы // Тр. Всерос. ин-та гельминтол. 2003. - Т. 39. — С. 55-84.

39. Георгиу X., Расстригин А. Е. Изготовление и контроль антигенов из B.canis для РДСК // Ветеринарная патология. 2003. - № 1. - С. 144-147.

40. Глинчук Я.И., Форофонова Т. И., Роуман В. А. Случай дирофиляриоза стекловидного тела // Офтальмохирургия.—1992.—№4.— С. 59—62.

41. Горохов В. В., Москвин А. С. Дирофиляриозы плотоядных // Ветеринария,—2000.—№ 8.—С. 6—8.

42. Григорьева М. В. и др. Диагностика и лечение дирофиляриоза оболочек яичек у детей // Вестник инфектол. и паразитол.—2003.— www.infectology.spb.ru ISSN 1609—9877.

43. Григорьева М. В., Супряга В.Г. Особенности диагностики кожного дирофиляриоза // Проблема инфекции в клинической медицине. С-Петерб, Российская Военно-медицинская академия. -2002. - С. 342-343.

44. Гублер Е. В. Вычислительные методы анализа и распознавания патологических процессов. Л.: Медицина, 1978. - 294 с.

45. Гудина Р. В. Использование ФЭК-нефелометра при определении циркулирующих иммунных комплексов // Лабор. дело. 1988. - № 7. - С.67-68.

46. Гундарева А. Н. Биогенная миграция меди, цинка и марганца в наземных экосистемах Астраханской области // Автореф. дис. . канд. биол. наук. 2006. - 24 с.

47. Гуськов В. В., Горшкова Е. В., Постнова В. Ф., Агарунов А. В. Диро-филяриоз в Астраханской области //Лечащий врач.—2001.— № 1. С.55— 56.

48. Дахно И. С., Часнык Н. Г., Дахно Г. Ф., Андрианов И. М., Усенко В.И. Гельминтозы домашних животных Сумской области, диагностика, лечение, профилактика. Сумы, 1996. - 80 с.

49. Дрынов И. Д., Сергиев В.П., Малышев Н.А. Профилактика массовых инфекционных и паразитарных болезней человека медикаментозными средствами. -М.: Принт, 1998. 130 с.

50. Евдокимова М. И., Иванов В. М., Семенова Н. Н. Нематоды домашних и диких млекопитающих в Астраханской области // Матер, докл. научн. конф. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями». М., 1999. -С. 90-91.

51. Елгандиева Н. К., Абдиев Т. А. Ситуация по паразитарным болезням в Узбекистане // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2000. -№ 3. - С. 51-52.

52. Зубарева И. М. Основные гельминтозы домашних плотоядных в крупных городах (на примере г. Новосибирска) // Автореф. дис. . канд. вет. наук. -2001.-20 с.

53. Зубарева И. М., Сараев Д. А. Видовой состав гельминтов собак г. Новосибирска и пути распространения инвазии // Проблемы АПК в условиях рыночной экономики. Тез. докл. -Н-ск., 1996. С. 139.

54. Зубарева И. М. Основные гельминтозы домашних плотоядных г. Новосибирска // Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями; Мат.докл. научн. конф. М., 1999. - С. 106-107.

55. Кеннеди К. Р. Экологическая паразитология. М.: Мир, 1978. - 230 с.

56. Козлюк А. С., Анисимова JI. А., Шройт И. Г. Иммунологические методы в гигиенических исследованиях. Кишинев.: Штиинца, 1987. — 116 с.

57. Колычев Н. М., Госманов Р. Г. Ветеринарная микробиология и иммунология. -3-е изд., перераб. и доп. М.: КолосС, 2002. - 432 с.

58. Кондрахин И. П. Методы ветеринарной клинической лабораторной диагностики. М.: Колос, 2004. - 520 с.

59. Кузьмин А. А. Антигельминтики в ветеринарной медицине. М: Аквариум, 2001.- С. 144.

60. Кристиан Ф. Шрай., Траутветтер Е. Дирофиляриоз сердца у кошек и собак диагностика и терапия // Focus. - 1998. - Т.8, № 3. - С. 23.

61. Лаврова Н. А. Комплексный подход к защите собак и кошек от паразитарных болезней // Российск. ветеринар, журн. «Мелкие домашние и дикие животные». 2006. - №1. - С. 44-45.

62. Лакин Г. Ф. Биометрия. М.: Высшая школа, 1990. - 352 с.

63. Лебедев К. А., Понякина И. Д. Иммунограмма в клинической практике. М.: Медицина, 1990. - 280 с.

64. Литвин В. Ю. Эколого-эпидемиологические аспекты случайного паразитизма некоторых патогенных бактерий // Микробиология. 1986. - № 1. — С. 85-91.

65. Лобзин Ю. В. Руководство по инфекционным болезням. С - Петерб.: Фолиант, 2000. - 932 с.

66. Лысенко А. Я., Владимирова М. Г., Кондрашин А. В., Майори Дж. Клиническая паразитология: Руководство под общей ред. В.Я. Лысенко. -Женева, ВОЗ.—2002.—752 с.

67. Лысенко А. Я., Фельдман Э. В., Рыбак Е. А. Влияние инвазированно-сти детей нематодами на поствакцинальный иммунитет // Мед. паразитол. -1991.-№5.-С. 34-36.

68. Мазуркевич А. И., Величко С. В., Василик Н. С. и др. // Ветеринарная мед. Укр. Киев, 2001. - С. 18-46.

69. Марзанов Н. С. Иммунология и иммуногенетика овец и коз. — Кишинев.: Штиинца, 1991.-231 с.

70. Маркевич А. П., Полянский Ю. И., Сопрунов Ф. Ф. и др. Паразитоце-нология. Теоретические и прикладные проблемы. Киев.: Наук.Думка, 1985. -248 с.

71. Маркин А.В. Вопросы профилактики важнейших гельминтозов в России // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 1995. -№ 1.-С. 106-108.

72. Маркин А.В. Медико-социальное значение, эпидемиология и профилактика энтеробиоза на современном этапе // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 1993. - №3. - С. 12-17.

73. Методические рекомендации по клинике, диагностике, лечению и профилактике филяриатозов (для врачей леч.-проф. учреждений). — М., 1979.—С. 13—16.

74. Мирошников В. П., Бакуров Е. Д., Санач В. К., Артамонова А. А., Хлебникова О. С. Редкий случай локализации дирофиляриоза у человека // Хирургия.—1991.—№7.—С. 127.

75. Москалец О. В., Палеев Ф. Н. и др. Патогенез синдрома вторичной иммунной недостаточности и подходы к его лечению // Клиническая медицина. 2002. - Т. 80, № 11. - С. 18-23.

76. Моулдер Д. Биохимия внутриклеточного паразитизма. М.: Мир, 1965.- 196 с.

77. Мюллер П., Найман П., Шторм. Таблицы по математической статистике. Пер. с нем. М.: Финансы и статистика, 1982. - 272 с.

78. Никитин А. Ф., Жоголев Д. Т., Захаркин Ю. Ф., Мокроусов В. Н. Лабораторная диагностика паразитарных болезней // Медицинские технологии. М.: Интермедика, 1998. - Т. № 1. - С. 327-388.

79. Ниманд X. Г., Сутер П. Ф. Болезни собак. М.:Аквариум, 1998. - С.57-62.

80. Озерецковская Н. Н. Органная патология в острой стадии тканевых гельминтозов: роль эозинофилии крови и тканей, иммуноглобулинемии Е, G4 и факторов, индуцирующих иммунный ответ // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. — 2000. № 3. - С. 3-8.

81. Озерецковская Н. Н. Органная патология в острой стадии тканевых гельминтозов: роль эозинофилии крови и тканей, иммуноглобулинемии Е, G4 и факторов, индуцирующих иммунный ответ // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2000. - № 4. - С. 9-14.

82. Озерецковская Н. Н., Зальнова Н. С., Тумольская Н. И. Клиника и лечение гельминтозов. — Л., 1985. — 25 с.

83. Озерецковская Н. Н. Эозинофилия крови и иммуноглобинемия Е: особенности регуляции при гельминтозах и аллергических болезнях // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 1997. - № 2. - С.3-9.

84. Онищенко Г. Г. О мерах по усилению профилактики паразитарных болезней в России // Мед. паразитол. 2003. - № 3. - С. 3-7.

85. Паразитарные зоонозы // Сер. техн. докл. ВОЗ. Женева, 1980. - № 637.-С. 91-93.

86. Петров Р. В., Хаитов Р. М., Манько В. М. и др. Оценка иммунного статуса, иммунологический мониторинг современные проблемы клинической иммунологии и аллергологии // Иммунология. - 1994. - № 6. - С. 4-9.

87. Петров Р. В., Хаитов Р. М., Пинегин Б. В. Оценка иммунного статуса человека в норме и при патологии // Иммунология. — 1984. № 1. - С. 6-9.

88. Петров Р. В., Хаитов Р. М., Пинегин Б. В. Иммунодиагностика имму-нодефицитов // Иммунология. 1997. - № 4. - С. 4-7.

89. Петровская В. Г. Общие закономерности взаимодействия в системе паразит-хозяин и проблема смешанных инфекций // Микробиология. 1982. -№8.-С. 4-31.

90. Пленкина JI. В., Смирнова Е. А. Заболеваемость дирофиляриозом в Нижегородской области // Сб. «Основные достижения и перспективы развития паразитологии».— М., 2004.—С. 236—237.

91. Подолян В. Я., Первомайский Г. С. Паразитология человека. М.: Медицина. - 1974. - С. 301.

92. Покровский В.И. Руководство по зоонозам. Л.: Медицина. - 1983. -320 с.

93. Покровский В. И., Онищенко Г. Г, Черкасский Б. Л. Эволюция инфекционных болезней в России в XX веке. М.: Медицина, 2003. - С. 412-432.

94. Постнова В. Ф., Ковтунов А. И., Абросимова Л. М., Авдюхина Т. И. и др. Новые случаи дирофиляриоза человека // Мед. паразитол.—1997.—№ 1 —С. 6—9.

95. Профилактика паразитарных болезней на территории Российской Федерации: СанПИН 3.2.1333—03 / МЗ России.— М., 2003.—С. 42—43.

96. Ройт А. Основа иммунологии. Пер. с англ. М.: Мир. - 1991. - 327 с.

97. Руководство по эпидемиологическому надзору за малярией в Российской Федерации—М.: ИМПиТМ МЗ РФ, 2000.—С. 120.

98. Савченко А. П. Дирофиляриоз человека на Северном Кавказе // Сб. «Проблемы паразитологии».— Киев: Наукова думка, 1972.—С. 205—206.

99. Санин А. В. Выбор антигельминтных средств и основы дегельминтизации // Ветеринарная клиника — 2003. № 12. — С. 18-20.

100. Санин А. В., Липин А. В. и др. Справочник по традиционным и нек-традиционным методам лечения собак. — М.: Центрполиграф, 2002. 580 с.

101. Сафронова Е. Ю., Воробьев А. А., Латышевская Н. И. и др. Дирофиляриоз в Волгоградской области — новое заболевание региона // Мед. паразитол. -2004. №2. -С. 51-54.

102. Сепиашвили Р. И. Основы физиологии иммунной системы. — М.: Медицина-Здоровье, 2003. — 240 с.

103. Сергиев В. П. Животные в городе: неосознаваемая биологическая угроза // Микробиология 2007. - № 2. - С. 9-14.

104. Сергиев В. П. Паразитарные болезни сегодня и завтра // Паразитарные болезни,-2005.-№ 1.

105. Сергиев В. П. Регистрируемая и истинная распространенность паразитарных болезней // Мед. паразитол. 1992. - № 2. - С. 3-5.

106. Сергиев В. П., Романенко Н. А., Лебедева М. Н. и др. Эволюция инфекционных болезней в России в XX веке / под ред. В.И. Покровского, Г. Г. Онищенко, Б. Л. Черкасского. М.: Медицина, 2003. - С. 599-615.

107. Середа С.В., Лагунова Н.М., Прокопенкова И.А., Давыдова Н.С. // Матер. восьмой международн. конф. по проблемам вет. мед. мелких домашних животных, 6-8 апреля 2000г., Москва, Россия. М., 2000. - С. 186-188.

108. Скрябин А. К., Сальман Г. Я. Первый случай обнаружения нематоды Dirofilaria repens Railliet et Нешу, 1911 (Spirurida, Filariidae) у человека в Крыму//Мед. паразитол.—1979.—№ 4.—С. 76—77.

109. Скрябин К. И. Филяриидозные заболевания человека в СССР // Мед. паразитол.—1940.—Т. IX, № 1—2.—С. 119—127.

110. Скрябин К. И., Альтгаузен А. 3., Шульман Е. С. Первый случай обнаружения Dirofilaria repens у человека // Троп. мед. и ветерин. паразит.— 1930. —Т. VIII, № 2. —С. 9—11.

111. Скрябин К. И., Шихобалова Н. П. Филярии животных и человека.— М.: Изд. ОГИЗ, Сельхозгиз, 1948.—С. 152—180.

112. Скрябин К. И., Шихобалова Н. Б., Соболев А. А. Определитель паразитических нематод. Спирураты и филяриаты.—JL: Из-во Академии наук СССР, 1949.—С. 298—305.

113. Славин М.Б. Методы системного анализа в медицинских исследованиях. -М.: Медицина, 1989.-303 с.

114. Сонин М. Д. Основы нематодологии. Филяриаты животных и человека и вызываемые ими заболевания.— М.: Наука, 1975.—Т. 24,ч. III. —С. 237— 273.

115. Сонин М. Д. Филяриаты животных и человека и вызываемые ими заболевания. М., 1975 - С. 270-273.

116. Сонин М. Д. Филяриаты животных и человека и вызываемые ими заболевания. Филярииды, онхоцерцины. Основы нематодологии. М.: Наука, 1975. - Т. 24,ч. 3. - С. 273-292.

117. Сомов Г. П., Литвин В. Ю. Сапрофитизм и паразитизм патогенных бактерий: экологические аспекты. Новосибирск: Наука, 1988. - 208 с.

118. Сохин А. А. Парадокс инфекционного иммунитета // Микробиология. -1988.-№ 1.-С .73-80.

119. Степанов А. В. Гельминтозы сельскохозяйственных животных в тропических странах. М., 1982. - 107 с.

120. Струков А. И., Кауфман О. Я. Гранулематозное воспаление и грануле-матозные болезни. М., 1989. - 184 с.

121. Степанов А. В., Павлова Н. В. Словарь ветеринарных паразитологиче-ских терминов. Москва, 1987 - С. 43.

122. Супряга В. Г., Старкова Т. В., Короткова Г. И. Клинический и парази-тологический диагноз дирофиляриоза человека // Мед. паразитол —2002.—№ 1.—С. 53—55.

123. Супряга В. Г., Старкова Т. В., Сабгайда Т. П. и др. Изучение дирофиляриоза в России // Сб. «Основные достижения и перспективы развития паразитологии».— М., 2004.—С. 304—306.

124. Супряга В. Г., Цыбина Т. Н., Денисова Т. Н. и др. Первый случай диагностики дирофиляриоза по обнаружению микрофилярий в пунктате подкожной опухоли человека // Мед. паразитол —2004.—№ 4.—С. 6-8.

125. Сухова М. В. Эпизоотологический надзор при дирофиляриозе плотоядных в условиях Среднего и Нижнего Поволжья // Автореф. дисс. . канд. вет. наук.— Н. Новгород, 2002.—22 с.

126. Токмалев А. К. Гельминтозы человека // Российский медицинский журнал.-2001.-Т. 9, № 16-17.

127. Ульянкина Т. И. Зарождение иммунологии. М.: Наука, 1994. - 97 с.

128. Уркхард Г., Эрмур Дж. и др. Ветеринарная паразитология. М.: Аквариум, 2000.-С.111-114.

129. Федеральный закон «О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения» от 30 марта 1999 г. № 52-ФЗ.

130. Фисько М. А. Разработка методов диагностики, лечения и профилактики при ассоциативном течении дирофиляриоза с чумой плотоядных // Автореф. дис. . канд. вет. наук. 2005. - 30 с.

131. Фриденштейн А .Я. Морфологические аспекты современных теорий иммунитета // «Успехи современной биологии». T.XXXII, вып. №3(6). - С. 291-306.

132. Фримель Г. Иммунологические методы. М., 1987. - 450 с.

133. Хаитов Р. М., Игнатьева Г. А., Сидорович И. Г. Иммунология. М.: Медицина. - 1999. - 432 с.

134. Хаитов Р. М., Пинегин Б. В., Истамов X. И. Экологическая иммунология. М.: ВНИРО. - 2007. - 220 с.

135. Хаитов Р. М., Пинегин Б. В., Чередеев А. Н. Оценка иммунной системы человека: современное состояние вопроса, сложности и достижения // Иммунология. 1998. - № 6. - С. 8-10.

136. Халафян A. A. Statistica 6. статистический анализ данных. М.: ООО Бином-Пресс, 1995. - 512 с.

137. Челобанов Н. В. Земледелие в Астраханской области. Астрахань: Факел, 1998.-432 с.

138. Челобанов Н. В. Мелиорация и использование орошаемых земель в Астраханской области. Астрахань, 2003. — 473 с.

139. Черкасский Б. JI. Системный подход в эпидемиологии. М.: Медицина, 1988.-288 с.

140. Чуйкова Л.Ю. Общая экология. Астрахань: Интерпресс, 1996. — 172 с.

141. Шинкаренко А. Н., Акимова С. А., Петров Ю. Ф. и др. // Матер, докл. науч. конф. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями». М., 2005. - С. 407-408.

142. Шихобалова Н. П. Иммунитет при гельминтозах // МППБД940.- Т. IX, вып. №3. С. 245-253.

143. Шихобалова И. П. Иммунитет при гельминтозах // МППБД941.- Т. X, вып. № 3-4. С. 249-252.

144. Шихобалова И. П. Теоретические и практические задачи изучения иммунитета при гельминтозах // Тр. гельм. лаборатории АН СССР, 1950. Т. III. - С. 74-79.

145. Шувалова Е. П. Тропические болезни. М., 1989. - 342 с.

146. Шульц Р. С. Гельминтоиммунитет // Тр. Казаск. НИВИ, 1957.- Т. IX. -С. 359-375.

147. Шульц Р. С., Андреева Н. К. О некоторых закономерностях иммунитета при гельминтозах // Тр. ин-та вет. Каз. филиала ВАСХНИЛ. Алма-Ата, 1954.-Т. VI.-С. 468-491.

148. Шульц Р. С., Давтян Э. А. К вопросу о гельминтоантигенах // Изв.АН Арм. ССР; серия биол. и сельхоз. наук, 1951. T.IV, вып.6. - С. 533-541.

149. Шустрова М. В., Пашкин П. И. Паразитология и инвазионные болезни животных. Москва, 2006. - С. 279-280.

150. Юркив В. А., Сариев Н. Ж. Иммунобиологический статус телят при воздействии абивертина и абамекура // Аллергология и иммунология. — 2008. -Т. 9, № 3. С. 295-296.

151. Юркив В. А. Черкасова К. А., Кубатиев А. А. Состояние иммунной системы при дегельминтизации абамектином мышей, спонтанно зараженных нематодами Syphacia obvelata на фоне дисбактериоза // Аллергология и иммунология. 2008. - Т. 9, № 3. - С. 295.

152. Ярилин А. А. Основы иммунологии. — М.: Медицина, 1999. — 608 с.

153. Ястреб В. Б., Абалихин Б. Г., Крючкова Е. Н. Гельминтофауна хищников дикой природы Центрального района России // Сб. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями».— М., 2003.—Вып. 4.— С. 512—514.

154. Ястреб В. Б. Терапия дирофиляриоза (Dirofilaria immitis) собак // Тр. Всерос. ин-та гельминтол. -2005. -Т. 41. -С. 439-444.

155. Ястреб В. Б. Дирофиляриоз собак в Центральном регионе России // Тр. Всерос. ин-та гельминтол. —2006. -Т. 42. -С. 457-467.

156. Ястреб В. Б. Морфологические и биохимические показатели крови при дирофиляриозе собак // Тр. Всерос. ин-та гельминтол. —2006. -Т. 42. -С. 468473.

157. Ястреб В. Б. Сравнительное изучение методов обнаружения микрофилярий в крови собак // Матер, докл. науч. конф. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями». М., 2004. - С. 443-445.

158. Ястреб В. Б., Шестаков А. М., Лаврова Н. А. Дирофиляриоз собак в Москве и Московской области и меры его профилактики // Ветеринар. -2005. -№ 2. -С. 38-39.

159. Ятусевич А. И., Карасев Н. Ф., Пенькевич В. А. Паразитология и инвазионные болезни животных. — Минск, 2004. — С. 253-254.

160. Издания на иностранных языках

161. Antolova D., Miterpakova М., Reiterova К., Dubinsky P. Influence of anthelmintic baits on the occurrence of causative agents of helminthozoonoses in red foxes // Helminthologia 2006. - T.43, N 4. - P. 226-231.

162. Величко С. В., Носата Н. С., Абраменко I. В., Белоус Н. I. Визначення видово'1 надлежност! гельмшта та юпшко-патогенетичш особливост! nepe6iry швазп Dirofilaria repens у собак в швшчних районах УкраТни // Наук. BicHHK НАУ. 2000. - С. 167-172.

163. Bradford M. M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding // Anal. Bi-ochem. 1976. - Vol. 72. - P. 248-254.

164. Bredal W. P., Gjerde В., Eberhard M. L., Aleksandersen M., Wilhelmsen D. K., Manfield L. S. Adult Dirofilaria repens in a subcutaneous granuloma on the chest of a dog // J Small Anim Pract. 1998. - Dec 39(12): 595-7.

165. Cancrini G., Allende E., Favia G., Bornay F., Anton F., Simon F. Canine di-rofilariosis in two cities of southeastern Shain // Vet. parasitol. 2000. - Sep. -10;92,(1):81.-C. 6.

166. Davydov О., Gushva J., Pavlikovskaya Т., Kolos L. Human dirofilariosis in the Ukraine // VII Europen multicolloanium of parasitology. Parma, 1996. - P. 355.

167. Dissanaike A. S., Abeyewickreme W., Wijesundera M. D., Weerasooriya M. V., Ismail M. M. Human dirofilariasis caused by Dirofilaria (Nochtiella) repens in Sri Lanka // Parassitologia 01 Dec., - 1997. - 39(4): 375-82.

168. Durmaz В., Yakinci C., Koroglu M., Durmaz R. Concentration of total serum IgE in parasitized children and the effects of the antiparasitic therapy on IgE levels // Trop. Pediatr. 1998. - Vol. 44, N 2. - P. 121.

169. Jacobs D. E., Arakowa A., Courtney С. H. et al. Guidelines for evalution the efficacy of anthelmintics for dogs and cats // Vet. Parasitol. 1994. - V. 52, N 1. -P. 179-202.

170. Jamison D. Т., Mosley W. H., Measham A. R., Bobadilla J. L., (eds.). Disease control priorities in developing countries. Oxford: Oxford University Press, 1993.-746 p.

171. Kagan J.G., Goodchild M.G. Paper electrophoresis of sera from man and experimental animals infected with various helminthes // J. Parasitol. 1961. - N6. -P. 373-377.

172. Карвовський О., Макаревич О., Тростянецька Ю., Макаревич Т. Д1рофшярюз собак у Криму // Вет. Медицина Укра'ши. 1997. - № 5. - С. 26.

173. Kolcan A. A., Zaubach H. E. Dirofilaria immitis and Depetalontma recon-didum infections in Oklachoma dogs // JAVMA. 1976. -N 168. - P.419-420.

174. Logar J., Novsak V., Rakoves S., Stanisa O. Subcutaneous infection caused by Dirofilaria repens imported to Slovenia// Infect 01 - Jan -2001, 42(1). -P. 72.

175. Мазуркевич Ф. Й., Абраменко I. В., Величко С. В., Поживш А. I., Юре-вич О. В., Белоус Н. I., Носата Н. С. Деяю лабораторш показники KpoBi у собак при шваз1'1 Dirofilaria repens // Наук, вюник НАУ. 2000. - С. 137-142.

176. Мазуркевич Ф. Й., Абраменко I. В., Величко С. В., Василик Н. С., Юревич О. В., Белоус Н. I. Д1рофшярюз собак у Кшвському perioHi: юншчна картина // Ветеринарна медицина Укра'ши. К., 2001. - С. 18-19.

177. Marsella R. Advances in flea control // Vet. Clin. North Am Small Anim. Pract. 1999. - N 29. - P. 1407-1424.

178. Mussner W.,Bosch J., Buhl D., Neuweiter J., Bandhauer K. Filarien: eine Tropenkrankheit als Ursache fus das acute Scrotum // Urologe A. 1997. - Vol.36. -P. 84-86.

179. Nelson Y.S., Heisch R.B., Furlong M. Studies in filariasis in East Africa. Filarial infections in man, animals and mosquitoes // Trans. Roi. Soc.trop. Med. Hyd. 1962. -N56.-P. 203-217.

180. Nokes C., Granthan McGregor S. M., Sawyer A. W., et al. Moderate to heavy infections Trichuris trichura affect cognitive functions in Jamaican school children // Parasitology. - 1992. - V. 104. - P. 539-547.

181. Pampiglione S., Canestri Т., Rivasi F. Human dirofilariosis due to Dirofilaria (Nochtiella) repens: a review of world literature // Parasitologia. — 1995. -V.37, N 2 3. — P. 149-193.

182. Pampiglione S., Rivasi F., Angeli G., Boldorini R., Incensati R., Pastormerlo M., Pavesi M., Ramponi A. Dirofilariasis due to Dirofilaria repens in Italy, an emergent zoonosis: report of 60 new cases // Histopathology 01-Apr-2001; 38(4): 344-54.

183. Paz R., Trainin Z. Veterinary Immunology // Immunopathol. 1992.,— Vol. 34.-N 10.-P. 173-179.

184. Penson J., Nielubszyc A., Moszczynska Z. Zmainy W. Jatosciowym skadzie bialek osocza krwi i opadania krwinek w przebiegu wlonsnicy // Polskie Arch. Med. Wewn. 1953. -N 23. — P. 683-688.

185. Perec A., Okulewicz A. The presence of Syphacia obvelata in laboratory mice (BALB/c) parasite antigens in immune response // Helmintologia. - 2006. -T. 43, N 4. - C. 203.

186. Поживш A. I., Горжеев В. M. Д1рофшярюз собак // Вет. медицина Украши. 1999. - № 3. - С. 38-40.

187. Поживш А. I., Мищинин В. Т., Галат В. Ф. Випадки захворювання собак на д!рофшярюз в Укра'ши // 36. матер. III М1жнар. наук.-практ. конф./ 8-9 жовтня 1998 р., м. Ки1В / Проблеми ветеринарного обслуговування др1бних домашшх тварин. К., 1998.-С. 114-116.

188. Postlethwait J. Н., Hopson J. L. The nature of life // McGRAW pabl. com., USA. 1989.-P. 401-402.

189. Raccurt C.P. La dirofilariose, zoonose emergente et meconnue en France //Med. trop. (France). 1999. - V. 59,N 4. - P. 389-400.

190. Raccurt C. P. La dirofilariose humaine en France: Nouvelles donnees con-firmant if transmission humaine de Dirofilaria repens au nord de la latitude 46 nord // Med. trop. (France). 2000. -N 3. - P. 308-309.

191. R.E.W. Haliwell., Gordan N. Т. Veterinary Clinical Immunology. 1989. -P. 449-466.

192. Rust M. Advances in the control of Ctenocephalides felis (cat flea) on cats and dogs // Trends Parasitol. 2005. - N 21. - P.232-236.

193. Schrey C. F., Trautvetter E. //Waltham Focus. -1998. -V. 8, N 3. -P. 23-30.

194. Schwonzen Th. Uber Serumeiwesveranderungen bei Trichinose (unter Berucksichtigung der Elektrophorese) // Klin. Wschr. -1951. -N29. S. 612-615.

195. Statisnica for Windows, Version 5.5a. 1999.

196. Stephensen L. S. Optimising the benefits of anthelmintic treatment in children//Paediatr Drugs. 2001. - Vol. 3.-P. 495-508.

197. Stephensen L. S., Holland C.V., Cooper E. S. The public health significance of Trichuris trichiura // Parasitology. 2000. - Vol. 121. - P. 73-95.

198. Svobodova Z., Svobodova V., Genchi C., Forejtek P. The first report of autochthonous dirofilariosis in dogs in the Czech Republic // Helminthologia -2006. T.43, N 4. - P. 242-245.

199. Swist R.A. Heatworm remonal from a limb of a dog // JAVMA. 1980. - N 177.-P. 351.

200. Tallima H., Salah M., El-Ridi R. In vitro and in vivo effects of unsaturated fatty acids on Schistosoma mansoni and S. haematobium lung-stage larve // J. Parasitol. 2005. - Vol. 91 (5).-P. 1094-1102.

201. Tanner С. E., Gregory J. Immunochemical study of the antigens of Trichi-nella spiralis // Journ. of Michobiol.Canad. 1961. - N4, V.7. - P. 473-481.

202. Taylor A. E. R. Studies on the microfilariae of Zoa Loa, Wulcherelria ban-crofti, Brugia malayi, Dirofilaria immitis, Dirofilaria repens and D. aethiops // Helminthol. 1960. - N 34. - P. 13-26.

203. Tarello W. La dirofilariose sous-cutanye a Dirofilaria (Nochtiella) repens chez le chien. Revue bibliographique et cas clinique // Revue Myd. Vyt.,1999. — 150(8-9): 691-702.

204. Tizard I.R. Veterinary Immunology. An Introduction. 2000. - Six edition. -482 p.

205. Towbin H., Staehelin Т., Gordon J. Electrophoretic transfer of proteins from polycrylamide gels to nitrocellulose sheets: procedure and some applications // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 1979. - Vol. 76(9). - P. 4350-4354.

Информация о работе

Богданова, Татьяна Викторовна
кандидата биологических наук
Астрахань, 2010
ВАК 03.02.01

Диссертация

Биологические аспекты паразитирования Dirofilaria Immitis у собак в Астраханской области - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы