Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

ОЦЕНКА ГЕНЕТИЧЕСКОГО ПОТЕНЦИАЛА У РАЗЛИЧНЫХ ВИДОВ И ГИБРИДОВ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ НА ОСНОВЕ БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИХ МЕТОДОВ

ВАК РФ 03.00.23, Биотехнология

Автореферат диссертации по теме "ОЦЕНКА ГЕНЕТИЧЕСКОГО ПОТЕНЦИАЛА У РАЗЛИЧНЫХ ВИДОВ И ГИБРИДОВ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ НА ОСНОВЕ БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИХ МЕТОДОВ"



на правах рукописи >,/

ИОЛЧИЕВ БАЙЛАР САДРАДДИН ОГЛЫ

ОЦЕНКА ГЕНЕТИЧЕСКОГО ПОТЕНЦИАЛА

У РАЗЛИЧНЫХ ВИДОВ И ГИБРИДОВ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ НА ОСНОВЕ БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИХ МЕТОДОВ

03. 00. 23 - Биотехнология

АВТОРЕФЕРЛТ

па соискание ученой степени доктора биологических наук

Дубровнцы - 2006

Работа выполнена в Центре биотехнологии и молекулярной диагностики Всероссийского государственного научно-исследовательского института животноводства

Научные консультанты:

доктор биологических наук, профессор Н.Л. Зиновьева доктор биологических наук А.И. Абнлов Официальные оппоненты;

доктор биологических наук профессор, академик РАСХН М,И. Прокофьев доктор биологических наук, профессор И .Я. Шнхон доктор биологических наук, профессор Ю.Д. Клннский

Ведущее учреждение: Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. КЛ.Скрябина

Защита состоится

2006 года в 10ш та Д 006.013.01 при

часов на заседании диссертационного Всероссийском государственном научно-исследовательском институте животноводства

Адрес института: 142132, Московская область, Подольский район, тюс. Дубровицы, ВГНИИ животноводства.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института.

Автореферат разослан " /5" 2006 года.

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат биологических на;

фвя.

Губанова

1. Общая характеристика работы

Актуальность темы. Успехи в области биотехнологии, достигнутые в последнее время, делают возможным решение многих проблем, стоящих перед животноводством. Методы биотехнологии находит применение в восстановлении малочисленных видов и пород животных, создании новых популяций, изучении генетических особенностей видов и механизмов межвидовой изоляции и др. (Шзйдул-лин И. Н., Бин Н. Н., 199]; Стекленев Е, П.. Елистратова Т. М., 1992; Эрнст Л. К„ Зиновьева Н, Л., 2004). В настоящее время перед учеными стоит задача разработки научно-обоснованной методологии оценки генетического потенциала сельскохозяйственных животных. При решении этой задачи используются разные подходы и методы. В частности, большое внимание уделяется генетическим маркерам, находящимся в прямой или косвенной связи с продуктивными признаками. Применение такой маркерной технологии в селекции позволяет выявлять генетические дефекты и прогнозировать генетический потенциал продуктивности сразу после рождения животных (Букаров Н. Г., 1998; Попов Н. А., Иванов В. А. 1999; Кленовицкий 11. М. и др., 2005). Длительная узкоспециализированная селекция может приводить к снижению частот встречаемости отдельных аллелей, а в некоторых случаях - даже к их утере. Для их восстановления требуется интродукция генов, которая может достигаться посредством использования генотипов родственных, в том числе диких видов животных.

Цель и задачи исследований. Целью работы являлась опенка роли биотехнологических методов для получения новых генотипов, а также для прогнозирования и оценки продуктивности сельскохозяйственных животных. Для достижения цели работы были поставлены и решены следующие задачи:

• создать криобанк «эпидидимального семени» зубров с целью использования генетического потенциала дикой фауны;

• изучить экстерьерные и интерьерные показатели зубров (Bos bison L) в сравнительном аспекте с крупным рогатым скотом (Bos хаитл £.);

• получить гибридов разных генераций зубр (Bos bison L) х крупный рогатый скот (Bos taurus L.)\

• дать характеристику воспроизводительных качеств зубров и полученных на их основе гибридов разных поколений;

• изучить гематологические, биохимические и клинические показатели у гибридов разных генераций;

• определить цято-и иммуногенетичсские особенности зубров и гибридов различного происхождения;

• провести оценку молочной и мясной продуктивности гибридов 1-го поколения;

• изучить биохимический полиморфизм белков молока у различных видов жвачных животных;

• провести сравнительный анализ популяционно-генетическнх параметров полиморфных систем белков молока у различных пород, по-родностей и гибридов крупного рогатого скота;

• выявить связи между полиморфными системами белков молока с молочной продуктивностью, фтиуп.у нм и^| щ | mi in II i|ipi I........

гическими свойствами молока; РГАУ-МСЛА

имени к.а.Тимирязева ЦНБ имени Н-И. Железнова

Г2Ж

• создать группы животных с желательными генотипами по полиморфным системам белков молока.

Научная новизна работы. Впервые создан банк семени и ДНК зубров разных генераций и популяций с целью поддержания биоразнообразия вольно живущих стад н создания популяций гибридов. В процессе межвидовой гибридизации получены три поколения гибридов зубр х крупный рогатый скот, разработана модель создания популяции гибридов. Проведен сравнительный цито- и иммуногенс-тический анализ гибридов и исходных родительских форм.

Изучен полиморфизм белков у различных видов, пород и гибридов разного происхождения и поколений, влияние их генотипов на технологические свойства молока. Выявлена связь между ВВ генотипом бета-лактоглобулина (£-1^) и содержанием соматических клеток в молоке коров.

Теоретическая и практическая значимость работы. В результате исследования получены данные об эксгерьерных и интерьерных особенностях зубров, что дозволило дать теоретическое и практическое обоснование технологии межвидовой гибридизации. Создана популяция гибридов зубра с крупным рогатым скотом черно-пестрой и абердии-ангусской пород.

Предложена модифицированная методика изучения биохимического полиморфизма белков молока на полиакриламианом геле у жвачных животных. Разработано программное обеспечение для популяционно-ген этического анализа полиморфных систем и определения количественного содержания белковых фракций на основе анализа результатов электрофореза, позволяющее проводить анализ н прогноз генетического состояния популяции по исследуемым локусам белков молока. Результаты исследования использованы в селекции симментальского и черно-пестрого скота с целью улучшения содержания белка в молоке и улучшения его технологических свойств на сыропригодность.

Разработаны пути увеличения производства молока и говядины в условиях предгорных и горных районах Азербайджана на основе гибридизации зебу и крупного рогатого скота.

Апробация работы. Материалы диссертации были доложены и обсуждены: на научных конференциях отделов разведения и селекции молочного скота, воспроизводства и искусственного осеменения сельскохозяйственных животных, Центра биотехнологии и молекулярной диагностики ВИЖаРоссельхозакадемиив 1996-2005 гг.;

на научно-производственных конференциях: «Современные проблемы воспроизводства стада сельскохозяйственных животных и задачи кадрового обеспечения» (РАМЖ, Быково,1996); «Актуальные проблемы аграрной науки в современных условиях» (Тверь, 1998); «Повышение конкурентоспособности животноводства и задачи кадрового обеспечения» (РАМЖ, Быково, 1998-2002); «Проблемы отрасли овцеводства и перспективы ее развития в Среднем Поволжье» (Пенза, 2001); на международных научных конференциях: «ДНК-технологии в клеточной инженерии и маркировании признаков сельскохозяйственных животных» (ВИЖ, Дубровины, 2001); «Современные достижения и проблемы биотехнологии сельскохозяйственных животных» (ВИЖ, Дубровицы, 2002);

на XXVI и XXVII международных научных конференциях МОГЖ (Окланд, Новая Зеландия, 1998; Миннеаполис, США, 2000); на 50 и 51-

й международных ежегодных конференциях ЕАЖ (Цюрих, Швейцария, 1999; Гаага, Нидерланды, 2000);

на 51-й научной конференции аграрного факультета РУДН «Концепции, практика и перспективы современного земледелия» (РУДН, Москва, 2003);

на международной научной конференции по проблемам сохранения зубра (Польша, 2004);

на III международной научной конференции «Биотехнология в растениеводстве, животноводстве и ветеринарии» ( РУДН, Москва, 2004), Положения, выносимые на га щиту:

• создание криобанка «эпидидимального» семени зубра для сохранения и рационального использования генетического потенциала этого дикого вида животных;

• получение популяций гибридов крупного рогатого скота с зубром;

• популяциогто-генетические параметры полиморфных систем белков молока у разных видов жвачных животных;

• селекция животных с учетом генотипа по полиморфным белкам для увеличения содержания белка в молоке, улучшения его технологических свойств;

• связь генотипа ВВ с содержанием соматических клеток в молоке;

Публикация материалов. По материалам диссертации опубликовано 54 научные работы, из них 19 источников в центральных изданиях, рекомендованных ВАК РФ, а также 2 монографии и б методических рекомендаций.

Объем работы. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, материала и методов исследований, результатов собственных исследований, выводов и практических предложений, списка использованной литературы. Диссертация изложена на 232 страницах машинописного текста, содержит 22 таблицы, 49 рисунков и 10 фотографии. Список литературы включает 298 источников, в том числе 132 на иностранных языках.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Исследования были проведены с 1995 по 2006 гг, по схеме, представленной на рис.1. Работа проводилась на таких жвачных домашних животных, как крупный рогатый скот (черно-пестрая, симментальская, симментало-гсяштннская помеси), зебувидные и зубровидные гибриды, мелкий рогатый скот (овцы и козы), а также на диких популяциях зубра.

Объектом для изучения биологических особенностей всльноживущих зубров служи™ популяции Прнокско-Тераеекого (Московская обл.) и Окского (Рязанская обл.) биосферных заповедников. Выборка состояла из 9] особи разного возраста и пола. Межвидовую гибридизацию проводили в условиях физиологического двора ВИЖа и э/х «Кленово-Чегодаево». В сравнительном аспекте были исследованы экстерьерные данные зубров, крупного рогатого скота и 3-х поколений гибридов. Зоометрический анализ включал следующие промеры: высота в холке I] крестце, косая длина туловища, обхват груди и пясти, глубина груди. На основе показателей промеров вычисляли индексы телосложения: длинноногосгн, растянутости, сбито-стн, перерослости и костистости.

Исследования по изучению состава мяса, показателей, характеризующих мясную продуктивность, а также динамику развития внутренних органов у зубров, зубровидных гибридов и крупного рогатого скота проводили совместно с сотрудниками отдела мясного скотоводства в соответствии с методикой ВИЖа (1990).

Клинические и гематологические показатели у подопытных животных изучали в зависимости от возраста (при рождении, 1 мес., З мес., 6 мес., 12 мес. и 18 мес.) и сезона года (Кудрявцев Л.А., Кудрявцева ЛЛ„ 1974). Из клинических показателей определяли частоту дыхания, сердцебиение и температуру тела. Воспроизводительные качества изучали у зубров н 3-х поколений гибридов (Милованов

B.К., 1962).

Исследование крови от опытных животных проводили в лабораториях биохимии и генетики животных ВИЖа. Определение общего бслха, альбумина, мочевины, креатинина в сыворотке крови, а также активность ферментов ACT и AJTT проводили с помощью синхронного аппарата фирмы "BECKMAN". Группы крови у опытных животных определяли по методике, описанной П.Ф. Сороковым (1974).

Препараты хромосом гибридов и исходных видов Bos bison L и Bos taunts L для анализа получали по общепринятой методике (Графодатский А. С., Раджабли

C. И., 1988) с рядом модификаций (Кленовицкий П. М. и др., 1997). Для получения изображения хромосом и их анализа использовали цифровую видеокамеру КС-583С н пакет программ Image Scope 1, разработанный фирмой «Системы для микроскопии и анализа» совместно с институтом кристаллографии PAR

Полиморфные системы белков молока были исследованы у пяти видов жвачных животных: крупного рогатого скота (п=13б9), овец (п=44), коз (п=18), зебу (п=40) и зубров (п=8), а так же у межвидовых гибридов крупного рогатого скота с зебу (п"250) и зубром (п=4)_ Пробы для исследования полиморфных систем белков молока у крупного рогатого скота отбирали в хозяйствах Московской, Воронежской, Орловской областей и республики Азербайджан. Объектом исследований для изучения молока коз служили образцы, полученные от коз зааненской породы, принадлежащих жителям поселка Дубровины Подольского района Московской области.

Биохимический полиморфизм белков молока изучали методом вертикального электрофореза на полиакриламидном геле по модифицированной нами методике с учетом видовой специфики животных (ИолчиевБ. С. и др., 2001).

В рамках выполнения диссертационной работы нами создан банк ДНК трех пород крупного рогатого скота (симментальской, черно-пестрой голштинизиро-ванной и якутской), межвидовых гибридов (зубр х крупный рогатый скот) разной генерации и двух вольных популяций зубров. В зависимости от географического расположения, видовой, половозрастной принадлежности изучаемой популяции источником ДНК служили ткани или биологические жидкости (кровь, сперма, молоко), Выделение ДНК проводили общепринятыми методами. Для изучения генетического полиморфизма гена каппа-казеина использовали метод ПЦР-ПДРФ анализа.

Химический состав молока изучали в лаборатории анализа молока ВИЖа, Определяли следующие показатели молока: содержание жира, белка, сухого вещества, СОМО и минеральных веществ, отдельных фракции белка. Активную кислотность молока определяли с помощью рН-метра, тер неустойчивость выявляли по алкогольной пробе, а размер мицелл казеина - фотоколориметрическнм методом.

Рис. I. СХЕМА ИССЛЕДОВАНИЙ

ОЦЕНКА ГЕНЕТИЧЕСКОГО ПОТЕНЦИАЛА РАЗНЫХ ВИДОВ И ГИБРИДОВ С.-Х. ЖИВОТНЫХ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БИОТЕХНОЛОГИ-ЧЕСЮ1Х МЕТОДОВ

сравнительный анализ показателей по кр.рог, скоту разных пород

Изучение химических свойств молока и популяционно-генетический анализ полиморфных систем

г*

X

■л «І

«

о

я ЕІ а. КГ

£ С

о и І

т ВІЛ 3 с ж 1 а у Ї в ; г £ х 3 я 3 л. ? Р ї я Еі і* э я і

6 АІ ^ а 2 3 а = Р х С электрофорез белков на ПЛАТ

I изучение взаимосвязи между био-

В химическим полиморфизмом и ко-| зяйственно-полезташи признака-| ми с.-х. животных

создание группы животных с желательным генотипом в зависимости от генотипа по полиморфным системам белков молока

Свертываемость молока изучали под воздействием сычужного фермента. Размер жировых шариков в молоке определяли с помошью измерении окуляр-микрометра, а их количество методом подсчета в камере Горяева (Кугсиев П.В., Барабанщиков Н.В., 1988).

Биометрическую обработку полученных данных проводили с помощью пакета программ для статистики (Statistica for Windows, Excel и др.).

З.РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Одним из основных источников протеина в питании человека является молоко и молочные продукты. Для обеспечения возрастающей потребности в молочном белке необходимо иайти более эффективные методы увеличения его содержания в молоке, улучшения технологических и питательных свойств молока. Выявить эффективность использования молока того или иного вида, породы для производства различных бел ково-мод очных продуктов. При решении данной задачи можно использовать селекцию животных по полиморфным системам белков молока с получением желательного генотипа. Одним из кардинальных решеннй в этой области может служить интродукция желательного аллсля. Нами были проведены исследования полиморфных систем белков молока у разных видов и гибридов.

3 Л .Биологическая особенность зубра и использование его генетического потенциала

3.1.1. Мониторинг численности зубров в мире и Российской Федерации

Под воздействием антропогенного фактора численность зубров в диких популяциях сильно сократилась, и к началу 30-х годов XX века в естественных популяциях они были на грани уничтожения, и сохранились благодаря зоопаркам. По данным Международной родословной книги зубров (European Bison Pedigree Book [ЕВРВ]) в 1991 г, численность зубров в мире составляла более 3400 голов. Из них 49% содержалось в невате (зоопарки, зоосады, питомники, парки), а более 50% было сосредоточено в естественных популяциях. На территории России имеется 8 вольных стад зубров, где сосредоточено около 12% животных от общего поголовья зубров, находящихся в вольных стадах на территории Европы. Численность взрослых особей в стадах, которые находятся на территории Российской Федерации, составляет 125 голов, то есть более 60% животных, способных к воспроизводству. На рис. 2 приведен мониторинг численности зубров в вольных популяциях в мире. Как видно из данных рис, 2, численность зубров восстанавливается. Эгот процесс сопровождается использованием тесного инбридинга, в результате которого происходит обеднение генофонда вида с последующим отрицательным влиянием на ряд признахов,

В этой связи возникает необходимость разработки комплексных мероприятий для сохранения зубра. Одним из таких мероприятий является создание криобанка «эпвдидималыюго» семени зубров, его длительное хранение и рациональное использование с целью ухода от последствий вышеуказанных факторов и привлечения генетического потенциала дикой фауны для нужд человека.

ЇООІ

і а» 16оо

1400

11г,й 5 1«»

^ кю

«О 400 2» в

Рис. 2. Динамика численности зубров 3.1,2. Сравнительная характеристика экстерьера зубра Зубрята рождаются небольшими, новорожденные зубрята весят в среднем 25 кг. Живая масса взрослых особей во многом зависит от паратонических факторов, таких как сезон года, обилие кормов и др. У самцов она колеблется от 600 до 1100 кг, у салок в среднем составляет 500 кг.

Результаты анализа показывают, что рост у зубров продолжается до 5-6 лет. Как видно из табл. I, высота в холке 4-летних самок составляла 164 см, а в старшем возрасте - 178 см, этот показатель у отдельных взрослых самцов составляет 200220 см, а в среднем равен 192,7 см (табл. 1).

1. Показатели промеров зубра в зависимости от возраста, см

Возраст, мес. л Высота Обхват Косая длина туловища Глубина груди

в холке I * крестце груди [ пясти

Самки

ври рождении 15 85,9±6,7 85,1±3,4 74,412,9 15,3+0,8 68,114,2 34,510,95

6 1! 91,4±4,2 93,4±3,1 82,912,5 18,б±2,7 75,411,8 42,911,3

24 10 137,917,2 138,7+6,8 162,9±3;8 25,1 ±2,1 132,919,3 65,616,2

48 164,418,9 153,6+7,3 210,3±11,5 27,2±1,9 166,8 ±6,3 88,914,2

>120 5 178,317,6 167,6+9,3 217,3+20,2 28,811,9 166,3±7,2 104.816,5

Самцы

ври рождении 13 80,4 ±3,9 85,8±4,5 75,311,8 14,9±0,б 65,713,9 і 33,2+1,2

6 10 98,3 ±7,4 99,9±6,3 112,3+2,3 16,9+1,9 87,612,9 I 4Я,5±0,9

24 9 162,4±8,5 157,2+9,7 182,9±7,5 27,211,6 136,817,2 88,6±4,2

48-60 7 167,3±10,2 157,6±11,5 226,7± 11,8 28,8±2,1 174,916,3 93,413,6

>120 3 192,719,3 178,417,8 253,5118,3 31,612,4 194,9±9,8 117,915,7

■на

Т1ерМ(и<тодо)

Как видно из рис. 3, где за 100% взяты данные промеров черно-пестрой породы, зубры по всем основным промерам тела превосходят показатели домашних животных: по обхвату пясти - на 43,1, обхвату груди - на 7,8, глубине груди - на 21,7, косой длине туловища - на 6,9 и высоте в холке - на 27,4%.

Промеры

обхват пясти обхват груди глубина груди косая дайна туловища высота в холке

О 10 20 30 40 50

%

Рис. 3. Экстерьерный профиль зубра относительно черно-пестрой породы 3.1.3. Воспроизводительные качества и сохранность зубров

Половая зрелость как самок, так и самцов зубра наступает в 3-4-летнем возрасте. Самки обычно в этом возрасте приносят первого теленка, но этот возраст в зависимости от факторов окружающей среды и в зависимости от биологической особенности самок сильно варьирует. Например, в исследуемой нами популяции возраст первого отела у самок в среднем составил 48 месяцев, при этом он колебался от 25 до 62 мес. В среднем самки зубра за период жизни дают 7 потомков, продолжительность жизни может достигать 28 лет. Репродуктивный период самок составляет 20 —25 лет. Средний возраст начала размножения для самцов - 5 лет, что было подтверждено и в наших исследованиях: «эпидиднмальное» семя, полученное от 5-летного самца было биологическое полноценным. Расцвет половой активности у самцов наступает в 7-11-летнем возрасте.

Размножение у зубров носит сезонный характер, гон начинается в августе, обычно продолжается два-три месяца, разгар яра приходится на август - сентябрь. В популяциях, где зубры содержатся в полувольных стазах, где животных подкармливают, четкая сезонность воспроизводства нарушена, гон может растянуться до глубокой зимы.

При естественном спаривании стельность зубриц в среднем составляет 66%. Данный показатель в зависимости от производителя очень сильно варьировал (от 41 до 90%.)

3.1.4. Результаты использования криоконсервированного вндиднмального» семени зубров при гибриднзапин с крупным рогатым скотом

Сотрудниками ВИЖа (Абюов А.И., Эрнст Л.К., Стрекозов Н.И. и др„ 1994) и института «Охраны природы» была разработана методика получения и замораживания «эпидидимального» семени зубра. С использованием данной методики нами создан криобанк семени, в котором содержится 1000 спермадоз от 8 быков разных поколений и популяций. Созданный банк используется как для сохранения гено-

фонда этого вида, так и для создания популяции гибридов с привлечением потенциала зубра. Опыты по гибридизации зубра с крупным рогатым скотом проводились в э/х "Кленово-Чегодаево" ВИЖа. Коров черно-пестрой породы осеменяли криоконсервированкым «эпидидимальным» семенем зубров. В опытах использовали сперму двух быков. Для осеменения отобрали коров после третьего-четвергого отелов, В результате использования семени быка Мутфила оплодотворяемость коров составила 53%, а быка Моруса - 83,3%. От Мутфила была получена одна телка, а от Моруса - 3. Таким образом, процент оплодотворяемости сильно зависел от индивидуальных особенностей зубров. От обоих производителей были подучены только особи женского пола. Среди коров, осемененных спермой зубра, одна на 8 месяце стельности пала. При вскрытии был обнаружен плод (бычок).

3.1.5. Динамика роста, развития и экстерьер гибридов I поколения

Гибридные телки рождались крупнее, чем их чистопородные аналоги. Живая масса новорожденных телят составила 48,5 кг. Высота в холке зубровидных животных достигала 87 см, что на 13 см выше по сравнению с черно-пестрыми сверстницами (табл.2).

2.Динамикз роста гибридных телят и их сверстниц (см)

Показатели Гибриды Черно-пестрые (п**12) Зубры (»=15)

При рождении

Высота: в холке 87±312 74±2,1 85,9±б,7

в крестце 88±4,8 80±3,2 85,1±3,4

Косая мина туловища 68

Обхват: грули 91 ±5,6 76±3,4 74,4+2,9

пясти 12+0,8 10±0,4 15,3 ±0,8

Ширина: в маклоках 18±0,9 14±0,5 13±1,2

в тазобедренных сочленениях 14±1,2 12±0,9 11±1,3

седалищных буграх 9,5±1,1 9,0±0,8 9,0±1,0

В 6-месячном возрасте

Высота: в холке И3,0±1,49 99.8±1,31 91,2±1,72

в крестце 11О,0±О,81 105,0±2,08 93,4±2,01

Косая длина туловища 112,0±0,81 106, ±2,39 75,0±) ,40

Обхват; Груди 139,041,03 126,0±2,42 82,9± 1,83

Пясти 14,7±0,01 14,0±0,10 15,3±0,27

Ширина: в маклоках 31,5+0,64 30,6±0,87 28,3+0,72

в тазобедренных сочленениях 32,5+0,64 32,8+0,73 29,4+0,45

в седалищных буграх 14,0±0,91 12,6±0,87 11,8±0,60

Крестец у гибридов, по сравнению с чистопородными телочками, был выше на 8 см, обхват груди - больше на 19 и пясти - на 20%. Гибриды имели преимущество также и по широтным промерам, хотя исходный отцовский вид по ширине в тазобедренных сочленениях, маклаках и седалищных буграх значительно уступает большинству пород крупного рогатого скота. В 6-месячном возрасте живая масса гибридных телят составила 179 кг, черно-пестрых . 117,2 кг, среднесуточный прирост до годовалого возраста - 946 и 753 г соответственно,

В 18-месячном возрасте зубровидные животные были на 136 кг тяжелее, чем их чсрно-пестрые аналоги и весили 508 кг. Гибриды по основным промерам тела имели значительное преимущество над своими аналогами, например, по высоте в холке они превосходили своих сверстниц на 26 см, в крестце - на 21,8 см. Живая масса гибридных первотелок составила 745 кг, у черно-пестрых аналогов - 450 кг. По экстерьеру гибриды больше напоминают зубров. Обхват груди у гибридных коров достигает 230 см, у взрослых зубров он в среднем составляет 217 см.

3.1.6. Гематологические и биохимические показатели у гибридов Гематологические показатели организма являются отражением его физиологического состояния. Мы в своих исследованиях проводили длительный мониторинг гематологических показателей гибридов и их сверстников. Как видно из таблицы 3, содержание эритроцитов в 1 мм3 крови гибридных телят в месячном возрасте было больше на 14,2%, чем у чистопородных сверстниц. Различия между сверстницами в зависимости от породности наблюдались также по количеству лейкоцитов в крови. В 1 мм3, крови новорожденных гибридов содержалось 9,2 тыс. лейкоцитов, что больше на 0,9 тыс. клеток, чем у сверстниц. 3. Содержание эритроцитов (мм3/мл) в крови гибридных телок и их сверстниц

в зависимости от возраста

Возраст, мес. Группы

чистопородные (п=8) гибриды(п=4)

0 8,2±0,80 8,92±0,90

1 8,4±0,67 9,60±0,83

3 8,64±0,94 9,8б±0,78

6 7,5±0.8б 8,07* ±0,62

Превосходство по форменным элементам крови у гибридов свидетельствует о благоприятном влиянии гибридизации на физиологическое состояние гибридов.

Для определения влияния гибридизации на физиологическое состояние организма гибридов и на интенсивность протекающих у них окислительно-восстановительных реакций было проведено сравнительное изучение биохимических показателей крови у гибридов и их сверстников. Альбумины, помимо поддержания коллоидного осмотического давления плазмы крови и транспортных функций, имеют более высокую степень диссоциации по сравнению с глобулинами, в связи с чем для организма предпочтительнее вовлечение их в кругооборот белкового обмена. Известно, что в период интенсивного прироста мышечной ткани у животных биосинтез альбумина в печени повышается, что сопровождается повышением иего уровня в крови. Для характеристики фракционной структуры белков крови используют белковый индекс (отношение альбумина к глобулину). Б наших исследованиях данный индекс у гибридов был достоверно выше, чем у чистопородных животных (табл. 4).

4. Биохимические показатели крови гибридов I поколения и их сверстниц

Показатели Группы Гибриды к

чистопородные гибриды чистопородным

(п=8) <п-4) сверстницам, %

Общий белок, г/100 мл б,6±0,30 б,01±0,10 92.40

альбумин, г/100 мл 2,33±0,10 2,85±0.05 122.3

глобулин, г/100 мл 4,2 7±0,11 3,25±00,8 76.1

Белковый индекс 0,54±0,02 0,87*»*±0,02

Мочевина, мг% 75,9±11,8 94,8±3,52 126,8

Креатннин, мг% 1.01±0,Ю 1,68**±0,08 166.3

АЛТ, ИЕ/л 27,б±2,72 35,02+2,10 126,8

ACT, ИЕ/л 60,б±8,64 63,5+13,3 104,7

*»Р<0,01, ***Р<0,001.

Сравнительный анализ уровня мочевины и креатинина в крови который косвенно характеризует интенсивность пластического и энергетического обмена, показывает, что концентрация мочевины в крови гибридов была на 26,8%, а креатинина - на 66,3% выше. Эти показатели дают основание сделать выводы о том, что скорость прироста мышечной ткани у гибридов протекает несколько интенсивнее, чем у их аналогов.

Из метаболитов минерального обмена было исследовано содержание в крови кальция и фосфора. Концентрация кальция в крови гибридов была на 9,2%, а фосфора - на 23,9% выше, чем у чистопородных сверстниц.

3.1.7. Сравнительный цнтогенетический анализ гибридов н исходных родительских видов

При обследовании гибридов первого н второго поколений крупного рогатого скота с зубром было установлено, что кариотип всех исследованных животных содержит 60 хромосом. Аутосомы (29 пар) акроцентрического тина образ>тот плавно убывающий по величине ряд. Не обнаружено различий и в рисунке аутосом крупного рогатого скота и гибридов с зубром,

При изучении препаратов хромосом крупного рогатого скота, окрашенных С-метолом в сочетании с обработкой по И. Онуки, были выявлены особенности в организации аутосом и подовых хромосом. В результате проведенных нами исследований было отмечено, что у гибридов размеры половых ХХ-хромосом различаются. Было проанализировано 120 метафазных пластинок, В значительной части исследованных метафаз одна из Х-хромосом по размеру была намного больше гомолога, Разница в размерах Х-хромосом в ряде случаев была настолько значительна, что выявлялась даже без специальных измерений. Существование разницы в размерах гомологичных XX хромосом у гибридов подтвердили проведенные нами измерения по 45-ти парам гоносом с помощью специальных компьютерных программ. Как видно из таблицы 5, средняя длина одной из X хромосом у гибридов первого поколения составляла 5,25 мкм, а его гомолога - 4,48 мкм. Разница длины между гомологичными хромосомами составляет 0,77 мкм, или 17%. Площадь длинной X хромосомы составила 7,28, а гомолога - 6,74. У гибридов второго поколения эти различия были выражены в меньшей степени,

В

Показатели \ X * Розница

Гибриды первой генерации

Длина, мкм 5,25+0,21 4,48+0,15 0,77

Площадь, мкм'' 7,28+0,54 6,74+0,39 0,54

Яркость 83,61+4,73 78,93+5,50 4.68

Гибриды второй генерации (3/4 черно-пестрая)

Длина, мкм 5,67+0,03 5,41+0,04 0,26

Площадь, мкм"1 6,47+0,04 6,11+0,05 0,36

Яркость 54,1+8,72 69,8+9,21 -15,7

Крупный рогатый скот

Длина, мкм 5,31+0,06 4,98+0,08 0,33

Площадь, мкм1 5,78+0,05 5,97+0,04 -0,66

Яркость 88.02+9,05 100,7+9,68 12,68

Показано существование разницы не только в размерах, но и в рисунках гомологичных X хромосомах гибридов. Во многих метафазных пластинках более интенсивно была окрашена меньшая но длине и площади хромосома. Детальное исследование хромосом крупного рогатого скота с помощью компьютерной техники показало, что такая же закономерность сохраняется и у коров черно-пестрой породы.

Для изучения механизмов межвидовой изоляции нами были исследованы половые хромосомы самцов исходных видов. Результаты исследования указывают на высокую степень сходства Х-хромосом зубра и крупного рогатого. На огпнческой профиле Х-хромосомы быка можно выделить 15 зон, у зубра - 13. Пики а, и ъ-г, соответствующие первичным перетяжкам, на обоих профилях практически совпадают (рис, 4). Но имеются некоторые отличия оптических профилей, это, возможно, связано с различием в интенсивности окраски хромосом, которое, обусловлено неодинаковым связыванием красителя с белковыми компонентами хромосом у сравниваемых видов. Нельзя исключить и существование видовых особенностей в протекании клеточного цикла, а, следовательно, и включения 5'Вг(Ш в ДНК на разных его этапах. Последнее характерно для несинхронизированной культуры. Во всяком случае, различия эти не достоверны и могут рассматриваться как результат действия неконтролируемых факторов.

и

р-плеча

-»-рцпз I

Точки сканирования

Рис. 4. Оптические профили Х- хромосому салщов: ряд 1 — крупный рогатый скот; ряд 2—зубр (р и q-плечи хромосом)

Результаты наших исследований показали, что у Y-хромосом данных видов оптические профили существенно различаются. У Bos tawus L на профиле четко выражена первичная перетяжка (пик а), расположенная практически медиально, У Bos Bison L район кинетохора на профиле не выявляется (рис,5). Для обоих видов характерна практически монохромная окраска Y-хромосом. Лишь у зубра заметна се незначительная неоднородность. Второй отличительной чертой мужской половой хромосомы у этого вида является меньшая оптическая плотность.

У-хромоеом зубра

Яркость ' '

Ч-плеча "

п-шіеча .

} 4 4 * в т В » 10 и II И 14 « Ч 1* 1* I* Н *1 и

________ ________________Точки сканирования

-■-рцЛ1 -»—=«42 .

Рис. 5. Оптические профили У- хромосом: ряд 1 — крупный рогатый скот; ряд 2 — зубр (р и д-плечи хромосом) Полученные данные свидетельствуют об отсутствии визуальных отличиЛ в системе аутосом и женских гоносом у сравниваемых видов.

В тоже время, как мы видим, существуют четкие морфологические различия между У-хромосомами зубра и крупного рогатого скота, что, вероятно, является одной из причин нарушения фертильности у гибридных самцов. Причиной бесплодности может быть нарушение конъюгации между Х- и У-хромосомами в процессе мейоэа.

3.1.8. Мясная продуктивность гибридов Проведенные нами исследования показали, что зубровидные гибриды обладают очень хорошими мясными качествами. Предубойная живая масса гибрида в 24-месячном возрасте составила 640 кг, а сверстницы при одинаковых условиях содержания и уровне кормления - 430 кг, гибридная телка в сравнении со сверстницей была на 210 кг тяжелее. Убойный выход у гибридов составил 60,2%, а у чистопородных аналогов -52,4%. Масса парной туши гибрида составила 356 кг, что больше на 133 кг туши чистопородной черно-пестрой телки (223 кг). Туша, полученная от гибридной телки, была высшей упитанности и по всем требованиям соответствовала 1-й категории.

В таблице 6 приведена оценка жирового полива в разных частях туши у гибрида и ее чистопородной сверстницы.

6.Оценка жирового полива туши (в баллах)

Части туши Гибриды Чистопородные Гибрид к чистопородной телке, ±

Шея 4 2 2

Лопатка 5 3 2

Коробка 5 2,5 2,5

Поясница 5 2,5 2,5

Бедро 5 3 2

Максимальный бал, который был присвоен туше черно-пестрой телки, составил 3, тогда как у гибридной телки, кроме шейного отдела, все остальные части туши экспертами оценивались 5-ю баллами.

Между гибридной и чистопородной телками была существенная разница также по массе отрубов. Масса слрубов передней части туши гибрида была намного больше, чем у чистопородной телки (табл.7). От общей массы туши у гибридных животных на долю шеи приходилось 14%, грудной части - более 30, поясницы -более 10, бедра - около 29%, у черно-пестрых телок соответственно - 6,7%, 11,6, 7,1 и 31,8%.

Содержание влаги в пробах длиннейшей мышцы черно-пестрой породы было на 6,22% больше, чем у гибридов, а в средних пробах - на 8,42% (табл. 8). Площадь мышечного глазка у гибридов была на 18% больше, чем у черно-пестрых аналогов.

7.Масса отрубов туши

Части туши Масса, кг Гибрид к чистопородной, ±

гибриды черно-пестрые

Шея 50 15 35

Лопатка 56 44 12

Коробка 112 51 61

Поясница 36 16 20

Ведро 102 71 31

Мясо гибридов отличается высоким кулинарным и вкусовым качеством. В мясе гибридов содержится на 8,92% больше триптофана, чем у черно-пестрых аналогов. _____ в.Хпмический состав мяса _ _

Группы

Показатели гибриды черно-пестрые

Длиннейшая мышца спины

Влага 70,40 76,62

Белок 23,74 21,48

Жир 3,83 0,91

Зола 1,02 0,99

Средняя проба

Влага 63,04 71,46

Белок 19,77 20,80

Жир 7,89 12,30

Зада 0,89 0,74

3.1.9. Молочная продуктивность гибридов 1-й генерации

Состав молока и молочная продуктивность зависит от паратипических и генотипи чсских факторов. Генотип особей в свою очередь складывается из наследственного материала, полученного от родительских пар, который реализуется в конкретных условиях. Материнская порода полученных нами гибридов отличалась высоким удоем. Средняя продуктивность матерей гибридных телок за 1-ую лактацию составила 4470 кг молока с содержанием жира - 3,2% ,

В научной литературе информация о составе молока зубров отсутствует. Мы в своих исследованиях для изучения молочной продуктивности и состава молока

п

гибридов в течение лактации проводили контрольные дойки. Молоко гибридов по физико-химическому составу значительно отличается от коровьего молока.

В молозиве гибридных коров содержание жира в среднем составило 7,87% (в первый день у отдельных особей этот показатель колебался от 9 до 13%), белка -4,65%, а в первые часы после отела - около 18,3-22,2% (табл. 9).

Зубровидные гибриды по содержанию сухого вещества, жира и белка в 1 мл мат ока среди сельскохозяйственных животных уступали только буйволицам и овцам, Молоко гибридов по химическому составу ближе к зебу, хотя в сравнительном аспекте гибриды превосходили зебувидный скот по содержанию жира на 0,2% и протеина - на 0,03% (табл.10). По питательности молока гибриды значительно превосходили исходную материнскую породу. В молоке материнской породы в среднем содержалось 3,2% жира, а у гибридов • 5,4%, Зубровидные коровы отличались большей белковомолочностыо, в среднем за лактацию этот показатель составил 4,23%.

9. Состав молозива зубров ид них гибридов и крупного рогатого скота

Состав молозива Гибриды fit'3) Крупный рогатый скот (п=8) Гибриды к крупному рогатому скоту, ±

Содержание, %; жира 7,87±0,92 5,0±0,67 +2,87

белка 4,6 5 ±0.04 3,02±0,03 +1,63

сухого вещества 17,82±1,80 14,55±1,30 +3,27

COMO 10,11^1,42 9,б±1,25 +0,51

По сравнен [по с другими сельскохозяйственными животными они продуцируют меньше молочного сахара. По содержанию лактозы зубровидные гибриды в сравнительном аспекте уступали всем видам. Возможно, это является результатом целенаправленной селекции сельскохозяйственных животных. Содержание лактозы в молоке является одним из основных параметров, характеризующих вкусовые качества молока.

Жировые шарики в молоке гибридов по диаметру были меньше, чем в коровьем молоке. Они по структуре напоминают жировые шарики козьего молока. Количество жировых шариков в 1 мл молока составило 3,2 млн. Среднесуточный удой гибрида Зубриха на 6-м месяце лактации составил более 6,5 кг при содержании жира 6,87%, Удой ее матери за 305 дней первой лактации составил 5486 кг молока жирностью 3,72%. Суточный удой за лактацию составил 17,9 кг. Если молочную продуктивность перевести на базисную жирность, то Зубриха в сравнительном аспекте уступала своей матери незначительно, но при этом мы не делаем никаких поправок на условия содержания и кормления. Мать содержалась в молочном стаде, где уровень кормления и условия содержания соответствовали высоким требованиям.

10.Состав молока сельскохозяйственных животных

Молоко Содержание, %

сухого вещества жира белка лактозы

Буйволиное 17,80±1,2 7,50+0,95 4,50±0,03 5,00±0,05

Гибрид (к.р.с. х зубр) 16,75+1,3 5,4±0,67 4,23 ±0,06 3,92±0,03

Зебу 15,30±1.5 5,20±0,12 4,20±0,05 5,10±0,03

Козье 11,35±0,9 3,24±0,09 3,07±0,03 4.12±0,04

Коровье 12,50±0,8 3,80±0,03 3,30±0,04 4,70±0,02

Овечье 17,90±1,2 6,70±0,83 5,80±0,04 4,60±0,05

3.2. Биохимический полиморфизм белков молока у различных видов, пород и гибридов разного происхождения

3.2.1. Биохимический полиморфизм белков молока у крупного рогатого скота

Полиморфизм белков молока у черно-пестрого скота. Полиморфизм белков молока черно-пестрого скота изучали в популяциях Московской области (ОПХ «Дубровицы») и республики Азербайджан. Результаты анализа полиморфных систем белков молока представлены в таблице 11. В исследованных образцах молока популяции коров Московской области были обнаружены два варианта а;1 -казеина А и В. Вариант В был обнаружен во всех исследованных образцах, аллель А встречался только в гетерогенном сочетании, при этом продуцентами варианта АВбыли всего 2 особи.

Во всех образцах проб молока, полученных от азербайджанской популяции черно-пестрого скота, встречался только гомозиготный генотип ВВ.

В обоих группах фракция р-Сп была представлена аллелями А и В, которые встречались в трех следующих сочетаниях: гомогенные АЛ, ВВ и гетерогештый АВ. В исследованных популяциях, независимо от географической принадлежности, численное преимущество имеют особи-продуценты варианта А бета-казеина, но в популяции коров Московской области этот белок часто встречается в гетерогенном состоянии (54%) в сочетании с альтернативным вариантом В.

В изучаемых популяциях были выявлены два варианта каппа-казеипа: к-СпА и к-СпВ. В азербайджанской популяции продуцентами варианта А являются более 87% исследованных животных. Между двумя исследованными группами по встречаемости вариантов фракции каша-казеина существенная разница не отмечена, высокая тенденция частоты встречаемости варианта А независимо от географического расположения популяции сохраняется, хотя в московской популяции скота частота встречаемости варианта В по сравнению с азербайджанской выше. Возможно, это является следствием учета при подборе родительских пар генотипа каппа-казеина, практикуемого в последнее время во многим племпредприятиях.

В исследованных нами образцах молока черно-пестрого скота московской популяции из сывороточных белков полиморфизм был установлен во фракции Р-Ьв. Продуцентом высоко заряженного варианта АА бета-лактоглобулина являлись 19% исследованных животных. Гетерогенный вариант АВ был обнаружен в 33% изученных проб. Около 48% популяции продуцируют вариант ВВ бета-лактоглобулина. В московской популяции наиболее часто встречаются особи-продуценты варианта В, частота которого составляет 0,64, в то время как альтерна-

тивного варианта А - 0,36. В образцах молока, полученного от азербайджанской популяции, все сывороточные белки были моиоморфными.

П.Частота встречаемости вариантов полиморфных систем белков молока _у черно-нестрого скота_

Фракция Популяция

Азербайджанская Московская

(п=340)

а51-Сп

А 0 0,01

В 1,00 0,99

Р-Сп

А 0,87 0,70

В 0,13 0,30

к-Сп

А 0,86 0,70

В 0,14 0,30

А 0,00 0,36

В 1,00 0,64

Полиморфизм белков молока у симментальского скота. Популяционно-генетические параметры полиморфных систем белков молока у симментальского скота и его помесей с голштннской породой разных регионов представлены а таблице 12.

Исследования проводили в лабораториях разведения и генетики молочного скота и Центра биотехнологии и молекулярной диагностики ВИЖа. Образцы молока для исследований отбирались в ГПЗ «Масловский» Воронежской области и в хозяйствах центральной зоны Азербайджана.

В популяции симментальской породы было выявлено два варианта а^Сп: В и С. Вариант В встречался как в гомогенном, так и гетерогенном состоянии, а вариант С - только в сочетании с вариантом В. Частота встречаемости варианта С в исследованных нами популяциях симментальского скота составила 0,02.

У голштино-симментальских помесей частота встречаемости варианта С по сравнению с исходным симментальским скотом была выше. В исследованных образцах молока были обнаружены два варианта бета-казеина (Р-СпА и р-СпВ), которые встречались в трех сочетаниях.

Во всех исследованных популяциях численное преимущество имеют продуценты варианта А этого белка, В российской популяции доля продуцентов варианта А бета-казеина составляет 82% от общего поголовья, из них 41% - это продуценты варианта АА и столько же - варианта АВ,

12,Расп редел ение белков в полиморфных системах белков молока снммен-_ _ тальского скота и его голштннских помесей_

Фракции Варианты

А в с

Российская популяция чистопородного симментальского скота (п=275)

а,і-Сп • 0,98 0,02

Э-Сп 0,58 0,42

к-Сп 0,5 І 0,49

И-І.Й 0,11 0,86 0,03

Азербайджанская популяция чистопородного симментальского скота (п=130)

аві-Сп - 0,98 0.02

Р-Сп 0,52 0,48 -

к-Сл 0,33 0,67 -

3-й 0,22 0,65 0,13

Симментало-голштинские помеси (п=80)

а,1-Сп - 0,87 0,13

(Ї-Сп 0,60 0,40 -

к-Сп 0,78 0,22 -

Рік 0,12 0,88 0

В образцах молока чистопородного симментальского скота, полученного из популяции Азербайджана, вариант В был обнаружен в два раза с меньшей частотой. В этой популяции численное преимущество имеют особи-продуценты гетерогенного варианта АВ, более 51% тестированных животных являются продуцентами этого варианта.

Основная часть популяции симментало-голштинских помесей является продуцентом гомогенного варианта АА бега-лакгоглобулика. Альтернативный вариант ВВ обнаружен всего в 5% исследованных образцов.

В отличие от других фракций во фракции к-СпВБ наблюдаемся существенная разница я частотах встречаемости между популяциями в зависимости от их географического расположения. В исследованных образцах молока, полученных от российской популяции чистопородных симментальских коров, вариант А в гомогенном состоянии встречался в более 31% проб и в гетерогенном состоянии - в 42%. В азербайджанской популяции наблюдалась противоположная картина, то есть численное преимущество составляли продуценты варианта В в гомогенном состоянии.

Разница в п опул я цион но-генетических параметрах по данной фракции обусловлена тем, что молоко симментальского скота, разводимого в Азербайджане, в основном используется для производства молочно-бел ковы х продуктов, таких как брынза и творог, следовательно, в этих хозяйствах для разведения оставляли тех животных, у которых молоко отличалось высокими технологическими свойствами для производства этих видов продукции.

Полиморфные системы белков молока зебу видных гибридов. Для мониторинга популяаионно-генетических параметров при гибридизации нами было проведено исследование молока зебувидных гибридов. Пробы молока для исследования брали из НЭХ «Снегири» Московской области и из фермерских хозяйств

Сальянского района Азербайджана. Обе популяции гибридов получены методом сложной гибридизации нескольких пород крупного рогатого скота и зебу.

В исследованных нами образцах молока, полученного от стада зебуввдных гибридов 11ЭХ «Снегири», были обнаружены два варианта сщ-Сп: В и С, Частота встречаемости варианта В очень высокая, но она также характерна для исходной материнской породы черно-пестрого скота, однако, в популяции обнаружен вариант С, который не встречается у материнской породы, следовательно, он унаследован от отцовского вида. Следует отметить, 410 этот вариант встречается у азербайджанского, новозеландского и индийского зебу,

В образцах молока азербайджанской популяции зебу видных гибридов наряду с вариантами В и С был обнаружен еше вариант Б. Как и у исходных материнских пород наиболее часто встречались особи с гомозиготным вариантом ВВ. Следует отметить, что такая же картина наблюдается и в российской популяции. Вместе с тем, имеется существенная разница, проявляющаяся в высохой (18%) частоте встречаемости варианта С в азербайджанской популяции (рис. б).

Рис. 6. Распространение вариантов й,/-Сл в молоке зебувидного скота и зебу В исследованных нами популяциях гибридов во фракции р-Сп были обнаружены три варианта* А, В и С и два варианта к-Сп: А и В, В обеих популяциях часто встречались особи- носители В варианта. В образцах, полученных из азербайджанской популяции зебувидных гибридов, 67% животных несли вариант В. Вариант А продуцировали 33% особей, из них 12% - в мономорфном состоянии. В российской популяции частота встречаемости варианта А составляла 45%, что ка 12% больше, чем а азербайджанской популяции, что, скорее всего, является следствием того, что азербайджанская популяция создавалась на базе симментальской породы, у которой часто встречается вариант В, а при создания российской популяции зебувидных гибридов в качестве материнской породы была использована черно-пестрая порода.

Во фракции {i~'Lg были установлены четыре варианта: А, В, С и Р. В образцах молока, полученного от российской популяции, встречались следующие три вари-

анта: А, В, С. 13 популяции численное преимущество составляют особи-продуценты варианта В (72,5%), который встречается как в мономорфном (48%), так и в диморфном состоянии в сочетании с вариантами Л и С. Вариант С встречался очень редко и только в сочетании с вариантом В.

Фракция a-La у всех молочных пород считается мономорфной. В исследуемой нами популяции гибридных животных был обнаружен диморфизм этой фракции, На элеюрофореграмме белков в некоторых образцах данная фракция фиксировалась в виде двух полос. Наиболее подвижный вариант А встречался часто в гомозиготном и гетерозиготном состоянии, а альтернативный, менее подвижный, вариант - только в гетерозиготном состоянии в сочетании с другим вариантом.

3.2.2. Оценка состояния полиморфных л о кусов белков молока у овец

На мировом рынке очень высоко ценятся некоторые виды сыров (Пастор, Ше-веретг), которые изготавливаются из овечьего и козьего молока. Россия является импортером этих сыров. Следует отметить, что и в некоторых регионах РФ (Дагестан, Северная Осетия-Алания) овечье молоко используется для производства сыров.

В последние годы в ряде зарубежных стран большое внимание уделяется производству овечьего и козьего молока. Интенсивно изучаются физико-химические н технологические свойства молока мелкого рогатого скота. По сообщению ряда исследователей имеется связь между некоторыми биологическими особенностями овец, хозяйственно-полезными признаками и биохимическим полиморфизмом белков молока.

Мы в своих исследованиях изучали биохимический полиморфизм белков молока овец. Наиболее подвижной сывороточной фракцией является fi-Lg. В исследованных нами образцах молока овец фракция p-Lg была представлена двумя вариантами: А и В. Наиболее распространенным является вариант А, частота встречаемости которого составила 0,8 (табл. 13), Доля продуцентов варианта ВВ составила всего 0,04.

Фракция иммуноглобулина молока овец исследуемой популяции оказалась полиморфной. Результаты наших исследований показали, что Ig сыворогки молока овец является диморфным. Обнаруженные варианты в соответствии с элеюрофо-ретической подвижностью обозначили IgA н IgB.

13. Распределение белков в полиморфных системах белков молока у овец

Фракции Варианты

Л В С D

Osi-Cn 0,35 0,28 0,12 0.25

к-Cft 0,52 0.48 - -

P-Lg 0,11 0,86

ct-Lg 0,80 0,20

Ig 0,80 0,20

3*2.3.Характернстнка полиморфных систем белков молока у коз

Несмотря на то, что козье молоко составляет около 2% от общего валового производства молока сельскохозяйственных животных, оно вызывает интерес у производителей молочных продуктов. Это, прежде всего, связано с его б1 технологическим и свойствами. Козье молоко содержит меньшее количество казеина, особенно сцгСп и большее количество кальция, связанного с мицелием, но сравнению с коровьим и овечьим молоком. Сгусток из козьего молока обычно быстрее

обезвоживается. Одним из факторов, влияющих на биотехнологические свойства молока, является биохимический полиморфизм белков молока.

Мы в своих исследованиях изучали биохимический полиморфизм белков молока коз зааненской породы. Методом электрофореза казеина в 10% полиакрила-мидном геле при рН 8,6 были обнаружены четыре фракции: а а и -, |}- и к-Сп.

Фракция а51-Сп отличалась высоким уровнем полиморфизма, В исследуемой популяции были обнаружены три варианта данного белка: А, В, С, наиболее часто встречаемыми из которых были В и С. В популяции очень редко встречались особи с генотипом АА а5)—Сп.

Фракция р-казеина в результате электрофореза в полиакриламидном геле при рН 8,6 разделилась на две подфрахции, которые были обозначены как Рг-Сп и Сп.

В исследованных нами образцах козьего молока были обнаружены два варианта фракции к-Сп (А и В), которые встречались в трех сочетаниях. Наиболее часто встречались особи-продуценты варианта А, как в гомогенном <0,44), так и в гетерогенном состоянии (табл. 14).

№ сывороточных белков полиморфным оказался р-лактоглобулин. В популяции наиболее часто встречались особи-продуценты варианта А, из них более 55% - в гомогенном состоянии. В популяции очень редко встречаются продуценты гомогенного варианта ВВ - всего 5%. Это обуславливало значительно меньшую частоту встречаемости варианта В (всего 0,25) по сравнению с вариантом А.

14. Популяционно-генетический анализ полиморфных систем белков молока узаааенскнх коз(п=18)__

Фракция Варианты Частота

Казеин

ам-Сп АА 0,06

АВ 0,1

АС 0,06

ВВ 0,39

ВС 0,39

Р-Сп Рі-Сп 1,00

Зі-Сп 1,00

к-Сп АА 0,44

АВ 0,45

ВВ 0,11

аи-Сп АА 1,0

Сыворотка

АА 0,55

АВ 0,40

ВВ 0.05

а-Ьа АА 1

ІЕ АА 1

3.3, Полиморфизм гена к-Сп у различных видов и пород крупного рогатого скота

Нами были проведены исследования по изучению полиморфизма гена каппа-казеина у разных видов, пород и породностей крупною рогатого скота.

Материалом для анализ поцуляционно-генетических параметров данного локуса у зубров служила ДНК, выделенная из образцов крнобанка эпидидимального семени. В исследованных нами образцах частота встречаемости желательного В аллеля составила 0,85.

Была проведена идентификация гибридов (черно-пестрая х зубр) по данному локусу. Частота встречаемости В варианта составила 0,75 в том числе в гомозиготном ВВ состоянии 0,50, а альтернативный А вариант встречался только в гетерозиготном АВ состоянии с частотой встречаемости 0,25.

Исследование по изучению скота черно-пестрого корня проводили в племрепродукторе по разведению голштинского скота ЗАО А/К «Московский» и в ВИЖе.

Были маркированы дочери 28 быков-производителей, шесть из них (более 20%) были тестированы по локусу каппа-казеина (быки-проюволителн из ЦСИО), Следует отметить, что ЦСИО является одним из первых племенных предприятий, которое начало тестировать быков по каппа-казеину. Два из шести идентифицированных быков имели генотип АА, один - генотип ВВ и три быка были гетерозиготными.

В таблице 15 приводятся данные о частотах встречаемости аллелей и генотипов у дочерей разных быков-производителей. Пять быков (Дурман, Нарзан, Тигрис, Эйви и Этап) до использования в племрепродукторе были протестированы по данному локусу: два из них были гомозиготными по аллелю А, а три - гетерозиготными. Таким образом, около 93% использованных быков-производителей были носителями аллеля А, и от них были получены гомозигогные по данному аллелю дочери.

Существенное влияние на популяционно- генетические параметры стада оказал бык Гармоник. По результатам генетического маркирования этот бык был гомозиготным по аллелыо В локуса к-Сп. В нашем исследовании достоверность его отцовства у дочерей совпадала. Среди его дочерей гетерозиготными оказались 67% и гомозиготными но аллелю В - 33%. Частота встречаемости аллеля А в группе его дочерей составила 0,33, а аллеля В - 0,67.

Из 28 использованных быков-производителей, дочерей которых мы тестировали, 22 не были маркированы по к-Сп.

Совместно с сотрудниками лаборатории разведения и генетики молочного скота нами создан банк ДНК коров симментальской породы ГПЗ им. XVII парт-съезда Орловской области (п=299), проведено тестирование 110 коров по локусу каппа-казеина.

В таблице 16 приводятся данные о частотах встречаемости аллелей и генотипов в исследуемой части стада. Как видно нз таблицы, наиболее часто встречаются коровы-носительницы аллеля А, частота его встречаемости составляет 0,83, что говорят о том, что более 80% исследованных животных при неблагополучном подборе родительских пар могут быть потенциальными поставщиками генотипа АА, который с точки зрения технологии производства белковомолочных продуктов является нежелательным.

15. Распределение потомства быков-производителей по локусукаппа-казеина

Отцы Дочерей Количество Дочерей Генотип быка Генотип Аллели

АА АВ ВВ А В

Ваучер 7 - 0,78 0,22 0 0,86 0,14

Дебют 9 - 0,56 0,44 0 0,78 0,22

Гармоник 15 ВВ 0 0,67 0,33 0,33 0,67

Пикланд 5 - 0,80 0,20 0 0,90 0,10

Роджер 7 - 0,86 0,14 0 0,93 0,07

Снег б - 0,50 0,50 0 0,75 0,25

Стаж 3 - 0,67 0,33 0 0,83 0,17

Сэр 19 - 0,84 0,16 0 0,92 0,08

Эйви 14 АВ 0,64 0,36 0 0,82 0,18

Эстамп 4 - 0,25 0,50 0,25 0,50 0,50

Этап 9 АА 1 0 0 I 0

Жордан 15 - 0,33 0,54 0,13 0,60 0,40

Лидер 3 - 1,0 0 0 1.0 0

Злат 4 - 0,75 0,25 0 0,88 0,12

Нарзан б АВ 0,33 0,34 0,33 0,50 0,50

Олимп 3 - 1,00 0 0 1,00 0

Тандем 4 - 1,00 0 0 1,00 0

Бридон 2 - 1,00 0 0 1,00 0

Тигрис б АА 1,00 0 0 1,00 0

Пост 3 - 1,00 0 0 1,00 0

Чойс 1 - 1,00 0 0 1,00 0

Вольтер 1 - 1,00 0 0 1,0 0

Лидер 3 - 1,00 0 0 1,00 0 !

Крафт 2 - 1,00 0 0 1,00 0

Континент 2 - 1,00 0 0 1,00 0

Дурман 3 АВ 0 0,66 0,34 0,33 0,67

Диез 1 - 0 1 0 0,5 0,5

Полдарк 2 1,00 0 0 1,00 0

Стадо: 164 0,63 0,30 0,07 0,78 0,22

Высокая частота встречаемости аллеля А обусловлена тем, что в стаде основная масса коров имеет гомозиготный генотип по данному аллелго. Этот аллель встречался также в гетерозиготном сочетании с двумя другими аллелями. .

1 ¿.Частота встречаемости аллелей и генотипов по локусу каппа-казеина

Показатели Аллели Генотипы

А В Е АА ЛВ АЕ ВВ

Частота 0,839 0,151 0,009 0,743 0,194 0,018 0.06

п 102 26 2 81 19 2 7

Па основе тестирования дочерей установлен генотип быков-производителей (отцов исследованных коров). Из восьми быков-производителей четыре производителя имели гетерозиготный генотип АВ, остальные четыре быка были гомозиготными по аллелю А.

Нами был проведен анализ ДНК семени и тестирование по локусу каппа-казеина вольноживущих самцов зубра. Все особи были носителями аллеля В, при

этом у пяти из них данный аллель был идентифицирован в гомозиготном состоянии.

3.4.0 предел енне связи между технологическими свойствами молока, продуктивностью к его полиморфными системами у жвачных сельскохозяйственных животных

Крупный рогатый скот. Целью наших исследований являлось изучение взаимосвязи между аллельным состоянием каппа-казеина и молочной продуктивностью коров. Исследования проводили в ЗЛО «Агрокомбинат Московский» (Московская область), ГПЗ «Масловский» (Воронежская область), ГПЗ им, XVII тарт-съезда Орловской области.

Наивысшей молочной продуктивностью по законченной лактации (третья лактация) отличались животные с гомозиготным генотипом ВВ. Удой за 305 дней третей лактации составил 6325 кг молока, что на 5% больше по сравнению с ірун-пой животных, имеющих генотип АА, и на 2% - генотип АВ (табл. 17). Животные с генотипом ВВ превосходили своих сверстниц не только по удою, но и по содержанию питательных веществ в молоке.

За три лактации от коров с генотипом АЛ было получено 17078 кг молока, 696,2 кг молочного жира, 528 кг молочного белка, от аналогов с гетерозиготным генотипом АВ - 16727 кг, 664,5 и 578,2 кг соответственно. Суммарный удой за три лактации у коров с генотипом ВВ составил 17230 кг, что на 150 кг больше, чем в группе коров с гомозиготным генотипом АА и на 503 кг больше - с генотипом ЛВ. От коров с гомозиготным генотипом ВВ было получено 707 кг молочного жира и 538 кг молочного белка. По этим показателям они превосходили своих гомозиготных аналогов с генотипом АА на 2,1-1,7% и гетерозиготных аналогов - на 6,5%, 17.Продуктпвность коров, имеющих разный генотип но локусу каппа-каэснна

Лактация п Удой, кг Молочный жир, кг Молочный белок, кг

Генотип АА

1 55 5149±150,2 206,5±12,3 157±8,9

1+2 " 37 30997+180,5 «5,1 ±18,5 339,5±10,2

1+2+3 20 17078±230,4 692,6*17,4 528+12,5

Генотип АВ

1 29 5023± 120,5 198,9±15,7 154,7±13,4

1+2 21 10497± 140,8 418,4± 14,2 312,8±1б,2

1+2+3 12 16727± 167,5 664,5±20,3 499,7±18,7

Генотип ВВ

1 8 48б0± 140,5 194,9±20,3 147,7+15,5

1+2 7 10905*180,8 443,3 ±18,9 341,7±20,3

1+2+3 4 17230±230,5 707,1±14,7 537,8±17,3

Молоко как пищевой продует1 должно соответствовать определенным санитарно-гигиеническим требованиям. При его переработке помимо этих требований предъявляются ряд технологических требований. Одним из показателей, характеризующих его пригодность к потреблению и переработке, является число соматических клеток в 1 мл молока, которое обусловлено генетическими н паратипиче-скими факторами.

По результатам исследований последних лет ученые предполагают, что одним из генетических факторов, виляющих на количество соматических клеток в молоке, является генотипы коров по локусу P-Lg. Мы в своих исследованиях изучали связь между генотипом по локусу P-Lg н количественным содержанием соматических клеток в молоке коров ОПХ "Дубровицы".

Мы провели сравнительный анализ по содержанию соматических клеток в зависимости от генотипа коров по локусу p-Lg. Результаты исследований показывают, что количество соматических клеток в I мл молока в зависимости от генотипа P-Lg сильно варьирует (табл. 18). В среднем по стаду содержание соматических клеток в 1 мл молока за лактацию составило 250 тыс. Меньше всего соматических клеток в 1 мл молока содержится у коров с гомозиготным генотипом ВВ. По сравнению с количеством соматических клеток в сборном молоке, полученном от стада в течение лактации, этот показатель в данной группе был на 12% меньше. От коров с генотипом АА по сравнению с аналогами получают молоко с высоким количеством соматических клеток.

18. Содержав не соматических клеток в молоке коров в зависимости от гено-

типа в доку ce ft-Lg(n=80)

Месяцы лактации АА ВВ АВ Общее по стаду

1 мес. 283,75+7,40 102,58+8,51 196,78+6,87 193,25+9,85

3 мес. 325+25,63 195,25+12,5 294,35+16,8 281,0+13,86

6 мес. 356,47+37,8 185,89+7,95 254+7,98 267,05+19,78

Конец лактации 439,56+43,20 416,93+31,10 410,87+72,63 413,92+58,92

Среднее за лактацию 349,28+28,97 220,17+8,45 258,32+17,65 250,48+19,78

Для исследования достоверности влияния генотипа животных по локусу P-Lg на содержание соматических клеток в молоке мы провели сравнительный дисперсионный анализ, где изучали силу влияния генотипа животных по локусу P-Lg на такие показатели молочной продуктавности, как удой, содержание жира, белка и количество соматических клеток в молоке. Анализ данных таблицы 19 показывает, что наибольшее влияние генотипа животных по p-Lg сказывается на количестве соматических клеток и содержании белка в молоке коров. Сила влияния генотипа по локусу p-Lg на количество соматических клеток в молоке составляет 17,7%,

Таким образом, результаты наших исследований показывают, что имеется взаимосвязь между содержанием соматических клеток в I мл молока и генотипом животного по локусу Р- Lg.

19. Дисперсионный анализ влиявня факггоря генотипа по _на продуктивные показатели_

Показатели Сила влияния, %

Удой 3,61

Содержание жира 8,35

Содержание белка 16,6

Количество соматических клеток 17,7

Козы. Несмотря на то, что в нашей стране производство козьего молока находится практически на нулевом уровне, оно требует определенною внимания. Нами было проведено исследование молока и молочной продуктивности популяции зааненской породы. Определяли содержание жира, белка, лактозы, сухого вещества, сухого обезжиренного молочного остатка (СОМО) и казеина, рН, свертываемость под действием сычужного фермента. Изучали взаимосвязь между молочной продуктивностью и полиморфными системами белков молока, в частности между с^і-Сп и молочной продуктивностью.

В данной популяции обнаружены три аллеля (А, В и С). Продуктивность коз в зависимости от генотипа по данному локусу приведена в таблице 20. Наивысший удой отмечен у особей с генотипом ВС. Они превосходили своих сверстниц с гомозиготным генотипом ВВ на 93 кг (на 15%), а животных с генотипом АВ - на И 8 кг (на 21%). Высоким содержанием белка в молоке отличаются особи с генотипом ВВ (3,25%), что больше на 0,08%, чем в молоке коз с генотипами АВ и на 0,17% - с генотипом ВС,

Высоким содержанием жира в молоке отличались особи с генотипом АВ сс^-Сп (3,34%), что больше на 0,11 %, чем у гомозигот ВВ и на 0,10%, чем у животных с генотипом ВС. В молоке коз с генотипом АВ содержание сухого вещества в среднем за лактацию было выше на 0,47%, чем у гомозигот и на 0,55% - чем у гетерозигот с генотипом ВС. Высоким содержанием казеина отличалось молоко коз с генотипом ВВ, Доля казеина от общего количества белка в данной группе равнялась 71,7%, тогда как в других группах, соответственно, 61,1% (АВ) и 69,1% (ВС), Высокий уровень рН (6,67) установлен в молоке животных с гомозиготным генотипом ВВ,

20. Молочная продуктивность коз в зависимости от генотипа

по локусу а,г-Сп (п*18)

Показатели Генотипы

АВ ВВ ВС

Удой за лактацию, кг 470±16 495±27 588±24,0

Содержание, %: Жира 3,34±0,02 3,23±0,05 3,24±0,09

Белка 3,17±0,05 3,25±0,03 3,08±0,07

сухого вещества 12,18±0,17 11,71±0,30 11,63±0,20

Казеина 1,94+0,01 2,33±0,09 2,15±0,0б

Исследования свидетельствуют о существовании тесной взаимосвязи между биохимическим полиморфизмом и технологическими двойствами молока. Наиболее чувствительным к сычужному ферменту оказалось молоко животных с геноти-

пом ВС. Процесс коагуляции начинался сразу после добавлення фермента, продолжительность гелеобразования составила 9 мин.

Содержание жира в готовой продукции, полученной из молока группы животных с генотипом ВВ а^-Cn составило 18,5%, а в образцах, полученных из молока животных с генотипами АВ и ВС - 17%. Для производства 1 кг творога из молока животных с генотипом ВВ было израсходовано 4,7 л молока, что меньше на 6% по сравнению с группой животных с генотипом ВС и 2% - с генотипом АВ.

Выводы

1. Изучены полиморфизм белков молока и і~ена контролирующего синтеза фракции каппа-казеина у разных видов и гибридов, что позволило установить взаимосвязь между этими показателями, продуктивностью, физико-химическими и технологическими свойствами молока.

2. У крупного рогатого скота выя&зена связь генотипов калла-казеина с содержанием белка в молоке и его сыроггригодностью. Коровы с гомозиготным генотипом ВВ каппа казеина за три законченных лактации продуцировали на 9,8 и 38,] кг больше маточного белка, чем животные с генотипами АА (Р<0.05) и АВ, соответственно.

3. Черно-пестрая порода отличается низкой частотой встречаемости желательного В варианта каппа казеина (в исследуемой нами популяции в зависимости от географического расположения она составляет 0,13-0,30). Использование гибридизации зубра с крупным рогатым скотом вносит существенный вклад в увеличение частоты встречаемости желательного аллеля. У габркдов этот показатель составляет 0,75.

4. Показано, что одним из факторов, виляющих на содержание соматических клеток в молоке коров является генотип коров по Р-лактоглобулину. В молоке коров с генотипом ВВ содержится на 37% меньше соматических клеток.

5. Выявлено, что молоко коз с генотипом ВВ ctji-Cn отличается высокими технологическими свойствами: на производство 1 кг творога из молока животных с генотипом ВВ было израсходовано 4,7 л молока, что на 6% меньше по сравнению с группой животных с генотипом ВС и 2% - с генотипом АВ. По содержанию белка в молоке животные с генотипом ВВ превосходили аналогов с генотипом АВ на 0,08%, а с генотипом ВС - на 0,17%.

6. Интродукция генов зубров положительно отражается также на продолжительности хозяйственного использования животных. У гибридов первого поколения она составляет более 10, лет у их чистопородных черно-пестрых аналогов - 5 лет,

7. В результате использования криоконсервнрованного «эпидидимального» семени, зубров было получено потомство (п=4), что позволило сделать вывод о том, что подученное «эпидидимальное» семя даже вне сезона гона, характеризуется высокой оплодотворяющей способностью (в среднем составляет 69,15%). Выявлено, что этот показатель варьирует от 55 до 83,3% и, в большей степени, зависит от индивидуальных особенностей производителей.

8. Сравнительным анализом кариотипов зубра и крупного рогатого скота установлено, что оптические профили Y-хромосом зубра и крупного рогатого скота имеют разный вид. У Bos taurus L на профиле четко выражена первичная перетяжка, расположенная практически медиально, что отсутствует у

вида Bos Bison L. У зубра Y-хромосома имеет меньшую оптическую плотность, чем у крупного рогатого скота.

9. Установлено, что у гибридов зубр х крупный рогатый скот ярко выражен эффект гетерозиса, который проявляется в существенном превосходстве гибридных телят gj интенсивности роста и развития над черно-песчрыми сверстницами. По живой массе при рождении гибриды имели преимущество над сверстницами на 37,5 %, в возрасте 18 мес. - на 26,7%.

10. Показано, что гибриды 1-го поколения отличаются высокими мясными качествами, убойный выход у гибридов составил 60,2%, у чистопородных аналогов -52,4%, площадь мышечного глазка -7,8 см и 6,4 см соответственно.

Практические предложения

1. С целью увеличения содержания белка и уменьшения соматических клеток в молоке коров и улучшения его технологических свойств для производства белково-молочных продуктов рекомендуем при подборе родительских пар учитывать генотип животных по каппа-казеину и бе-та-лакгаглобулину.

2. При производстве творога и сыра из козьего молока рекомендуем учитывать генотип по ctsi-Cn.

3. Для восстановления ряда хозяйственно-полезных признаков крупного рогатого скога и создания популяции гибридов мясного и мясомолочного направлений продуктивности рекомендуем использовать крио консервированное «эпидидимальнос» семя зубров.

Список опубликованных работ В рецензируемых журналах;

1. Иолчнев Б .С. Анализ популяцнонно-генетических параметров полиморфных систем белков молока коров черно-пестрой породы / H.H. Стрекозов, B.C. Иолчиев it Доклады РАСХН. - 1995. - № 3.- С. 28-29.

2. Иолчиев Б.С. Белковый состав молока и биохимический полиморфизм его фракций / Н.И. Стрекозов, Н.В. Сивкин, B.C. Иолчиев // Вестник РАСХН. -1995,- № 1..-С. 52-53.

3. Иолчиев B.C. Использование полиморфных систем белков молока в селекции / B.C. Иолчиев, МА. Еремина // Молочное н мясное скотоводство,- 1996 . -,Vs2 - С. 20-22.

4. Иолчиев, Б.С. Сравнительные исследования воспроизводственных качеств зубров и крупного рогатого скота, і Н.И. Стрекозов, B.C. Иолчиев, А.И. Авилов, В.Н. Виноградов, Е. Киселева, Т.П Сипко. // Доклады РАСХН,- 1997. -Ха 6. -С. 28-29.

5. Иолчиев Б.С. Сравнительная оценка экстерьера зубров и крупного рогатого скота/Л.К. Эрнст, А.И, Абилов, Н.И. Стрекозов, [и др. ] //Зоотехния -1998. -Ж7.-С.7-10.

6. Иолчиев, Б.С. Сравнение двух методов изучения полиморфизма ß-Lg овец / В.В. Бочкарсв, B.C. Иолчиев, H.A. Зиновьева [и др.] // Доклады РАСХН. - 1998. - Ха 6.- С. 27-29.

7. Иолчнев Б.С, Развитие внутренних органов зубра и крупного рогатого скота / J1.K. Эрнст, А.И. Абилов, B.C. Иолчиев [и др.] // Сельскохозяйственная биология. -1998. - №2.- С.91-95.

8. Иолчиев Б.С. Определение условного фенотипа быков-производителей / Б.С. Иолчиев, Ю.П. Тимофеев, Н.Ф. Лось, М.Д. Дедов // Зоотехния.-1996.

№7.-С. 4-5.

9. Иолчиев Б.С. Биохимический полиморфизм белков молока у овец // Б.С. Иолчиев [идр.] /Аграрнаянаука.-1999. -№1.-С.26-27.

10. Иолчиев, Б.С. Взаимосвязь системы капла-казеина с молочной продуктивностью коров I Б.С. Иолчиев, В.И. Сельцов// Зоотехния,- 1999. -№6. -С, 4-S.

11. Иолчиев, Б.С. Биотехнологические особенности молока коз / Б.С. Иолчиев, Н С. Марзанов, Е.А. Чалых //Молочная промышленность. -2000, -Xa7.-C.44.

12. Иолчиев Б.С. Биологические особенности шбрндов крупного рогатого скота и зубра / Иолчиев [и др.] //Вестник Российского университета дружбы народов. -2001. -№б. -С .7-13.

13. Иолчиев Б.С. Метод ДНК-диагностшда для маркирования животных по ло-кусу каппа-казеин а / Т.Миносян, В.Конзрахик, Л.Никольская, Б, Иолчиев, Г. Левина// Молочное и мясное скотоводство.-2003. -№3.-С. 38-39.

14. Иолчиев, Б.С. Влияние локуса каппа-казеина на продуктивность коров / Б. Иолчиев Г. Левина, Т. Миносян, В.Кондрахин, Л.Никольская //Маточное и мясное скотоводство. -2003. -№5. -С. 34-35.

15. Иолчиев, Б,С. Создание зубровидного скота методом гибридизации крупного рогатого скота и зубра / Б.С. Иолчиев, А.И. Абилов, Н.И. Стрекозов //Доклады РАСХН. -2004, - Ns -5. -С. 35-36.

16. Иолчиев, Б.С. Молозиво высокопродуктивных коров и резистентность их приплода /Т.Н. Левина, Б.С. Иодчнев, ММ. Кондрахин, Л, А. Никольская //Зоотехния -2005. -№2.-С. 16-18.

17.Иолчиев Б.С. Сравнительная характеристика кариотипов самцов европейского зубра и крупного рогатого скота / B.C. Иолчиев [и др.] И Достижения науки и техники АПК,- 2006, -№2.-С.27-29,

18.Иолчнсв Б.С. Генетические особенности многоплодной популяции овец / Н.С. Марзанов, Б.С. Иолчиев, ЛІС. Марзапова, В.П. Шикал ова, Т.А. Магома-дов, М.Р, Нассири //Овцы, козы, шерстяное дело, - №1. —2000. -С. 14-17,

Монографии:

3 9, Иолчиев Б.С. Современные проблемы зоотехнии / П.М. Кленовицкий, В.А. Багиров,В.А. Иванов,Б.С. Иолчиев,-Дубровины.-2005.-Ибо.

20. Иолчиев, Б.С. Сохранение генофонда зубров и их использование в межвидовой гибридизации / Б.С. Иолчиев, HJÍ. Стрекозов, А.И. Абилов, П.М. Кленовицкий, Т.П. Сипко.-Дубровицы.-2005.-151 С.

В сборниках научных трудов и вестниках ВУЗОВов:

21.Иолчиев Б.С, Гомология генных порядков и картирования хромосом / П.М. Кленовицкий, Н.С. Марзанов, Л. Моисейкина, Б.С. Иолчиев //"Научные труды ученных и специалистов Респуб. Калмык. Калмыцкий гос. ун-т. Т.7. -Элиста.-1999. - С.-200-202.

22.Иолчиев Б.С. Криоконсервация эпидидимального семени диких зубров и перспективы их использования в селективном животноводстве /А.И. Абилов,

B,І1 Кононов, Т.П. Сипко, H.A. Камбарова, Б.С. Иолчиев // Бесплодие, вос-помогательные репродуктивные технологии: сб. науч. тр. /- Киев. -1997. . -

C. 166,

23.Иолчиев Ь.С. Группоепецифические факторы крови и биохимически Л полиморфизм белков у коз / J1.K. Марзанова, B.C. Иолчиев, U.C. Марзанов II Проблемы отрасли овцеводства и перспективы ее развития в Среднем Поволжье,/ Сб. мат. науч.-практ, конф. посвящ. памгги проф. Зеленского. Пенза. -2001. -С. 94-95,

В материалах международных симпозиумов, конгрессов и конфренций:

24. Иолчиев Б.С, Взаимосвязь между содержанием соматических клеток в молоке с удоем коров / В.А. Захопайло, H.H. Сулима, Б.С.Иолчиев //Материалы научной конференции аграрного факультета. РУДН, «Концепции, практика и перспективы современного земледелия» Москва.-2003. -С.124-125.

25. Иолчиев Б.С. Возможности использования зубров в гибридизации/В.Н. Ви-но|-радов [и др.] // Тезисы докладов научно-производственной конференции / «Современные проблемы воспроизводства стада, с.-х. животных и задачи кадрового обеспечения». РАМЖ, п.Быков, Московской область, -1996. -С. 40-41.

26. Иолчиев Б.С, Гибриды полученные от криоконсервированного «эпидиди-мального семени» зубров / Б. Иолчиев, Л, Абияов, М. Юлдашов //Тезисы докладов 21-ой научно-практической конференции /Актуальные проблемы аграрной науки в современных условиях. ТСХА, -Тверь. -1998. -С. 221-222.

27.Иолчиев B.C. Клинические и гематологические показатели гибридов / Б.С. Иолчиев, [и др.] // Тезисы докладов совместной научно-практической конференции по проблемам: " Повышение конкурентоспособности животноводства и задачи кадрового обеспечения". I часть п. РАМЖ, п. Быково, Московская область.-1998 - С.74-75.

2S. Иолчиев Б.С. Содержание соматических клеток в молоке коров черно-пестрой породы о/х «Дубровицы»/ Г. Карликова, Е. Климова // Тезисы докладов конференции по проблеме "Повышение конкурентоспособности животноводства и задачи кадрового обеспечения". РАМЖ, п. Быково, Московская область. -1999. -С. 38-40.

29. Иолчиев Б.С. Сравнительный анализ генных порядков у пяти видов млекопитающих / П.М. КленовицкиЙ, U.C. Марзанов, J1, Моисейкина, Б.С. Иолчиев//. Тезисы докладов конференции «Совершенствование племенных и продуктивных качеств животных и птиц». МВАМ. Москва. -1999. -С.96-97.

30. Иолчиев Б.С, Моделирование хромосомных перестроек у млекопитающих на основе анализа генных карт/ П.М. КленовицкиЙ, U.C. Марзанов, Б.С. Иолчиев, Л. Моисейкина// Тезисы докладов конференции по проблеме "Повышение конкурентоспособности животноводства и задачи кадрового обеспечения" . РАМЖ, п. Быково, Московская область. -2000. - С. 127-128.

31, Иолчиев, Б.С. Физико-химическая и технологическая характеристика молока коров симментальской породы и се помссей с красно-пестрыми гол штанами /Б.С. Иолчиев, С.Ф. Авилова // Тезисы докладов конференции по проблеме "Повышение конкурентоспособности животноводства и задачи кадрового обеспечения" . РАМЖ, п. Быково, Московская область. -2000, - С, 36-37,

32, Иолчиев Б.С. Гибридизация как резерв производства мяса ! Б.С. Иолчиев, Н.И. Стрекозов, Л.Н. Бугрим, А.И. Абияов // Тезисы докладов конференции по проблеме " Повышение конкурентоспособности животноводства и задачи кадрового обеспечения". РАМЖ, п, Быково, Московская область. - 2000. - С. 58,

33. Иолчиев B.C. Изучение кариотипоа крупного рогатого скота и их гибридов с европейским зубром / Б.С. Иолчиев, П.М. Кленовицкий, Н.И. Стрскозов // Мачериалы научно-практической конференции "Повышение конкурентоспособности животноводства и задачи кадрового обеспечения". РАМЖ, п. Быково, Московской обл., -2001. - С.35-36.

34. Иолчиев Б.С. Сравнительный анализ физических генных карт первой и тестой хромосом свиньи с генными порядками крупного рогатого скота и человека / П.М. КлсновнцкиЙ [и др.] // Тезисы докладов конференции по проблеме "Повышение конкурентоспособности животноводства и задачи кадрового обеспечения" .РАМЖ, п. Быково, Московская область.-2001. - С. 133-135.

35. Иолчиев Б.С. Изучение динамики экспрессии рекомбинанчного эритропо-этина в молоке соматических трансгенных животных / НА. Волкова [и др-J //Тезисы докладов международной научной конференции «ДНК-технологии в клеточной инженерии и маркировании признаков сельскохозяйственных животных». ВИЖ, Дубровицы,-2001. - С.58-61.

36.Иолчиев, Б.С. Использование ДНК-технологий в маточном скотоводстве / Б.С. Иолчиев, В.И. Сельцов //Тезисы докладов международной научной конференции «ДНК-техналогии в клеточной инженерии и маркировании признаков сельскохозяйственных животных». ВИЖ, Дубровицы, -2001. -С, 67-70.

37. Иолчиев Б.С, Компьютерная обработка изображений в ¡штогепетнке животных / ILM. Кленовицкий, Б.С, Иолчиев, В А, Багиров, В.Н. Гришин // Материалы международной научно-практической конференции "Повышение конкурентоспособности животноводства и задачи кадрового обеспечения", РАМЖ, п. Быково, Московская область.- 2002. В.8. -С. 228-229.

38.Иолчиев, Б.С. Структура белков молока овец, трансгенных но гену казеин/химозин / Б.С. Иолчиев /Тезисы докладов международной научной конференции «Современные достижения и проблемы биотехнологи сельскохозяйственных животных», ВИЖ, -Дубровицы,-2002. - С. 135-136.

39. Иолчиев Б.С. Взаимосвязь между генотипом по локусу p-Lg и содержанием соматических клеток в молоке коров / Б.С. Иолчиев, Н.Н. Сулима, В.А, За-колайло //Материалы международной научно-практической конференции ВПШИЖа «Прошлое, настоящее и будущее зоотехнической науки». ВИЖ, Дубровицы, - 2004 г. - С. 117-119.

40. Strekozov N.I., Sivkin N.V., lolchiev B,S, Hodnotenie krav roznych plemin na zaklade poiymorfizinu belkovin mlieka //Aktualnc ulohy vedy a uyskumu v chove hospodarskych zvierat (Zb. ref, z. vedeckej knof, k zivoinemu jubilee prof. Ing, Jana Plesnika, Dr. Sc.) -Nitra, -1995. - P.70-78.

41. Marzanov N.S., lolchiev B.S. Genetic polymorphism of protein in the milk of synthetic prolific sheep populations /XXVI Intern. Conf. on 1998 Anim. Genet. New Zealand, Auckland. - P. 19.

42. Marzanov N.S., lolchiev B.S., Nasiry M.R. and Shikalova V.P. Genctic analysis of synthetic mult ¡fertility of nudfme -wol Sheep //EAAP-50th Annual Meeting. Zurich.-1999.-P.49.

43. Marzanov N.S., lolchiev B.S. Marzanova L.K., Chalaia E.A. Genctic markers at goats ///XXVI Intern. Conf. on 1998 Anim. Genet. Minneapolis, USA. 2000. P.4.

44.1olchicvB.S/The biological characteristic of hybrids/Book EAAP-5 L-th Annual Meeting. Hague. -2000. -P. 265.

45,.Sipko T.P.,Iolchiev B.S., Klenovitski P.M.,Abilov A.I. and Strekozov N.I. The comparative characteristics of morphology of sex chromosomes of European bison Bison bonasus and cattle Bos taurus, using method of constructing the average optical structures //European Bison Conservation 30 September- 2 October.- 2004 Bialowieza, Poland. - P.l 18-122.

В методических рекомендациях и пособиях

46.Исшчиев Б.С. Методические рекомендации по прогнозированию удоя дочерей оыков-улучшателей в стадах с различным удоем сверстниц / Ю.П. Тимофеев [и др.].-Д> брови цы. -1995. -14 с..

47. Иолчиев, Б.С. Поиуляционно-генетический анализ белков молока у различных видов сельскохозяйственных животных / Б.С. Иолчиев, М.И. Стрекозов, Н.С. Марзанов, Н.А. Зиновьева. -Дубровицы. -2001 . - 29 с.

48.Иолчиев, Б.С. Пути увеличения производства молока и говядины в скотоводстве на основе зебу в предгорных и горных районах Азербайджана / С.А. Аббасов, А.И. Авилов, Абдуллаев,. Иолчиев Б.С. - Гянджа, -2001. - 24 с.

49. Иолчиев Б.С, Использование прикладных программ обработки изображений, совместимых с Windows, в цитогенегических исследованиях / П.М. Клено-вицкий [и др.],- Дубровицы,ВИЖ. -2002. -20 с.

50. Иолчиев Б.С. Изучение биохимического полиморфизма белков молока у сельскохозяйственных животных. ! Б.С. Иолчиев // Школа-практикум: «Методы исследований в биотехнологии сельскохозяйственных животных» под редакцией д.б.и. Зиновьевой НА. Дубровицы. -2002. -C.53-6I.

51. Иолчиев, Б.С. Хромосомы одомашненных животных и родственных им видов / П_М, Кленовицкий, А.А. Никишоя, Б.С. Иолчиев, В А. Багиров. - Дубровицы, ВИЖ. -2002. -44 с.

В периодической печати

52. Иолчиев Б.С.. Характеристика гибридного стада НЭХ «Сиегари» / К-С, Род-ригез, Н.С.Марзанов, М.М. Кот, Б.С, Иолчиев // Объеденный научный журнал № 9.-2003 - С. 81-84,

Принято к исполнению 04/08/2006 Исполнено 07/08/2006

Заказ Ks 534 Тираж; 100 экз.

ООО «11-й ФОРМАТ» ИНН 7726330900 Москва, Варшавское ш., 36 (495) 975-78-56 (495)747-64-70 www.auloreferatju