Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Особенности окислительного стресса, ассоциированного с изменением содержания катехоламинов и серотонина у ВИЧ-инфицированных лиц с алкогольным делирием

ВАК РФ 03.01.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Особенности окислительного стресса, ассоциированного с изменением содержания катехоламинов и серотонина у ВИЧ-инфицированных лиц с алкогольным делирием"

На правах рукописи

Шатрова Юлия Михайловна

ОСОБЕННОСТИ ОКИСЛИТЕЛЬНОГО СТРЕССА, АССОЦИИРОВАННОГО С ИЗМЕНЕНИЕМ СОДЕРЖАНИЯ КАТЕХОЛАМИНОВ И СЕРОТОНИНА У ВИЧ-ИНФИЦИРОВАННЫХ ЛИЦ С АЛКОГОЛЬНЫМ ДЕЛИРИЕМ

03.01.04 - биохимия

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

г 8 ноя тз

005541114

Казань - 2013

005541114

Работа выполнена на кафедре Теории и методики физической культуры и спорта ФГБОУ ВПО «Южно-Уральский государственный университет» (национальный исследовательский университет) Министерства образования и науки Российской Федерации» в г. Челябинск.

Научный руководитель:

доктор медицинских наук, профессор Цейликман Ольга Борисовна Лунева Светлана Николаевна - доктор биологических наук, профессор, ФГБУ Российский научный центр «Восстановительная Официальные оппоненты: травматология им. Академика Г.А. Илизарова»

Министерства здравоохранения России, руководитель клинико-экспериментального лабораторного отдела

Аглетдинов Эдуард Феликсович - доктор медицинских наук, профессор кафедры биологической химии ГБОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет» Минздрава России

Ведущая организация: Федеральное государственное бюджетное учреждение «Научно-исследовательский институт биохимии» Сибирского отделения Российской академии медицинских наук.

Защита диссертации состоится 26 декабря 2013 г. в 13°° часов на заседании диссертационного совета Д212.081.08 при Казанском (Приволжском) федеральном университете по адресу: 420008, Республика Татарстан, г. Казань, ул. Кремлевская, д. 18, Казанский (Приволжский) федеральный университет, аудитория №211.

С диссертацией можно ознакомиться в Научной библиотеке им. Н.И. Лобачевского по адресу 420008, ул. Кремлевская, д.35.

Автореферат разослан «_»_2013 г.

Ученый секретарь Диссертационного совета, доктор биологических наук, профессор

З.И.Абрамова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы исследования и степень ее разработанности

На сегодняшний день ВИЧ-инфекцию, алкоголизм и психические расстройства относят к категории социально значимых заболеваний, исходя из высокого уровня первичной инвалидности и смертности населения. В 2007 году утверждена «Концепция демографической политики Российской Федерации на период до 2025 года». Одной из задач концепции является снижение уровня смертности и инвалидизации от ВИЧ/СПИД, прежде всего среди трудоспособного населения (Медик В.А., Юрьев В.К. Общественное здоровье и здравоохранение. М.: Профессионал, 2009. 432 е.). Внедрение в лечебную практику методов высокоактивной антиретровирусной терапии (ВААРТ) снизило показатели летальности в 5 раз, но смертность, связанная с последствиями алкоголизма среди ВИЧ-инфицированных выросла в 3,8 раз (Hooshyar, Dinaa et al. Trends in perimortal conditions and mortality rates among HIV-infected patients: HIV deaths decline 75%; Hepatitis deaths Up 4-Fold. AIDS, 2007. № 7. P. 78-88). Известно, что алкоголизм утяжеляет течение ВИЧ-инфекции, приводит к манифестации СПИДа (Kumar S. Alcohol consumption effect onantiretroviral therapy and HIV-lpathogenesis: role of cytochrome P450 isozymes. Expert Opin Drug Metab Toxicol. 2012. Vol. 8. № 11. P. 1363-1375), а отказ от алкоголя улучшает иммунологические показатели серопозитивных пациентов с приростом числа CD4+ Т -лимфоцитов на 41% (И Y., Douglas SD. The journal of infectious diseases: Oxford journals, 2002. № 1. P.185-193). Но у больных алкоголизмом отмена употребления алкоголя может вызывать алкогольные психозы, из них на долю алкогольного делирия приходится - 71-91% (Галанкин JI.H. и соавт. Алкогольный делириозный шок. С-Пт, 2004. 215 е.). В настоящее время именно алкогольные психозы занимают первое место (19,8%) среди психических расстройств, наблюдаемых у населения, инфицированного ВИЧ (Халезова Н.Б. Влияние ВИЧ-инфекции на клиническую картину, течение и лечение шизофрении: Автореферат диссертации. С.-Пт., 2011. 24 е.). Между тем, алкогольный делирий - неотложное, потенциально смертельное состояние, приводящее к целому ряду осложнений (Maldonado JR. Delirium in the Acute Care Setting: Characteristics, Diagnosis and Treatment, Critical Care Clinics, 2008. Vol. 24. P. 789-856). Как и прочие неотложные состояния, алкогольный делирий сопровождается полиорганной недостаточностью / дисфункцией, компонентом которой является окислительный стресс (Сачков Н.В. Клинико-биофизический мониторинг окислительного стресса в ходе интенсивной терапии у больных с синдромом полиорганной дисфункции/недостаточности: Автореферат диссертации. М., 2007. 24 е.).

Тяжесть алкогольного делирия во многом определяется степенью активации симпатоадреналовой системы, а ослабление симптоматики у пациентов коррелирует с нормализацией содержания катехоламинов в биологических жидкостях (Анохина И. П. Клиника, диагностика и лечение

3

связано с оптимизацией терапевтических мер, повышением эффективности лечения и снижением риска инвалидизации ВИЧ-инфицированных пациентов. Полученные данные полезны в теории и практики клинической биохимии, расширяют теоретическую базу знаний биохимии человека.

Результаты диссертационной работы могут быть использованы для дальнейших исследований по изучению влияний развившегося психоза на патогенез ВИЧ-инфекции. Результаты работы применимы в областях: «Профилактика и борьба с ВИЧ/СПИД», «Наркология».

Исследование выполнено при поддержке Министерства образования и науки Российской Федерации, соглашение 14.В37.21.0578 от 10.08.2012.

Методология и методы исследования

Проведено обследование 155 человек: 124 пациентов отделения неотложной наркологической помощи Челябинской областной наркологической больницы, 20 пациентов «Городского центра по профилактике и борьбе со СПИД» , 11 - условно здоровых лиц. Результаты биохимических исследований сопоставлены по четырем группам:

• «Алкогольный делирий (АД)» - включено 99 пациентов больных алкоголизмом II-III стадии с явлениями алкогольного делирия;

• «Алкогольный делирий на фоне ВИЧ-инфекции (АД+ВИЧ)» - 25 больных алкоголизмом II-III стадии с явлениями алкогольного делирия и подтвержденным диагнозом ВИЧ-инфицирования (диагноз подтвержден методом иммуноблотинга (Western Blot);

• «ВИЧ»- включено 20 ВИЧ-инфицированных пациентов без аддикции (не злоупотребляющих алкоголем и другими психотропными веществами);

• «Контроль (К)» - 11 условно здоровых лиц контрольной группы не страдающих алкоголизмом.

Выборки сформированы в соответствии с критериями включения и исключения. Критерии включения: лица мужского пола трудоспособного возраста (23-55 лет) больные алкоголизмом II-III стадии с явлениями алкогольного делирия развивающегося на фоне отмены алкоголя; лица с явлениями алкогольного делирия развивающегося на фоне отмены алкоголя с подтвержденным носительством ВИЧ; ВИЧ-инфицированные пациенты, не страдающие алкогольной и наркотической зависимостью. Критерии исключения: наличие заболеваний, способных оказать влияние на результат исследования; лица, страдающие психической патологией (включая деменцию и олигофрению), хронические заболевания инфекционного и неинфекционного генеза (туберкулез, сахарный диабет), наличие в анамнезе черепно-мозговых травм.

Взятие крови на исследование производилось пункцией кубитальной вены с 700 до 900. Исследование одобрено этическим комитетом ГБОУ ВПО «ЮУГМУ» как соответствующее этическим нормам.

Таблица 2 - Содержание катехоламинов и ДОФА в порционной (нг\мл) и суточной моче (мкг/сутки)

Показатель к (П=11) ВИЧ (п=20) АД (п=99) АД+ВИЧ (п=25)

Адреналин порция 33,70±9,60 57,43±15,60 * 271,40+39,20 ** 346,60+144,70

сутки 5,50±0,970 - * 17,10+2,30 *** 51,55+38,71

Норадреналин порция 19,61+4,38 ★ 112,86+37,70 * 459,30+66,20 ** 646,00+332,24

сутки 20,40±4,10 - * 213,50±28,04 *** 298,53+107,20

Дофамин порция 122,60±18,20 251,80+24,42 * 451,50+30,76 ** 534,80+76,10

сутки 133,86+25,90 - * 444,30+18,77 529,80+56,4

ДОФА порция 7,87+0,68 9,64±2,08 * 26,78+3,60 ** 21,90+4,88

сутки 25,80+3,23 - * 56,60+5,49 46,80+17,74

Примечание: статистические значимые отличия (р<0,05): * - от показателей контрольной группы, **- от группы «ВИЧ», *** - от группы «алкогольный делирий» («АД»)

Таким образом, гиперактивация САС наблюдаются в обеих группах алкогольного делирия, однако у ВИЧ-инфицированных пациентов алкогольный делирий протекает с увеличением экскреции катехоламинов и ДОФА, что свидетельствует о дополнительной активации симпато-адреналовой системы.

В крови у ВИЧ-инфицированных лиц без аддикции наблюдалось статистически достоверное увеличения уровня адреналина, норадреналина, ДОФА и серотонина при уровне дофамина сопоставимом с таковыми показателями контрольных значений (таблица 3).

В группе «АД» наблюдалась тенденция к увеличению уровня катехоламинов в крови - адреналина в 1,9 раз, норадреналина в 2,7 раз. Достоверно вырос уровень серотонина, дофамина и ДОФА.

У ВИЧ-инфицированных пациентов с алкогольным делирием содержание адреналина и норадреналина в крови приближено к «нормальным» значениям, но уровень дофамина остается характерно повышенным. Концентрация серотонина крови в группе «АД+ВИЧ», также как в группах «ВИЧ» и «АД» значительно увеличена. Однако, по этому показателю между группами «АД+ВИЧ» и «АД», «АД+ВИЧ» и «ВИЧ» статистически значимой разницы не обнаружено.

В группах контроля и «ВИЧ» не выявлено корреляционных взаимосвязей между содержанием катехоламинов и процессами

связано со значительным увеличением показателей трибулина (в 1,4 раза). Уровень кортизола у пациентов с алкогольным делирием увеличен в 1,3 раза относительно средних показателей контрольной группы. Уровень церулоплазмина достоверно ниже контрольных значений (таблица 4).

Наблюдалось значительное увеличение активности тромбоцитарной МАО-Б при алкогольном делирии, развивающемся у ВИЧ-инфицированных пациентов. Высокая активность фермента сопряжена с критическим снижением уровня трибулиновой активности мочи и развитием гипокортизолемии. Наблюдалось увеличение уровня церулоплазмина сыворотки крови до значений сопоставимых с контрольными (таблица 4).

Таблица 4 - Показатели активности МАО-Б тромбоцитов и уровня церулоплазмина в крови ВИЧ-инфицированных с алкогольным делирием

Показатель Контроль (п=11) ВИЧ (п=20) АД (п=99) АД+ВИЧ (п=25)

МАО-Б тромбоцитов, нмоль/мл/мин 3,01±0,36 4,80±0,74 2,97±0,22 ** *** 9,53±0,58

Кортизол, нмоль /л 265,90±33,20 * 725,72±31,44 * 349,80±26,61 ** *** 164,77±24,10

Трибулиновая активность, % 40,18±12,02 40,7±14,02 * 55,62±10,10 ** **★ 23,03±2,59

Церулоплазмин, Ед/г 4,18±0,8 * 3,28±0,23 * 3,17±0,16 ** *** 3,95±0,53

Примечание: статистические значимые отличия (р<0,05): * - от показателей контрольной группы, **- от группы «ВИЧ», *** - от группы «алкогольный делирий» («АД»)

Установлено наличие отрицательных корреляционных зависимостей между активностью тромбоцитарной МАО-Б и концентрациями дофамина (Rs=-0,614; р=0,043), адреналина (Rs=-0,753; р=0,023), норадреналина (Rs= -0,664; р=0,037) и серотонина (Rs =-0,676;р=0,021) в плазме крови ВИЧ-инфицированных пациентов с алкогольным делирием. Существует представление о положительных корреляционных связях между МАО-Б и МАО-А, отражающих коэкспрессию моноаминоксидаз (Oreland, L. Platelet МАО and Personality - Function and . Current Medicinal Chemistry, 2007. Vol.ll. P.2016). Вероятно, указанные закономерности отображают полученные нами корреляционные зависимости.

Таким образом, у ВИЧ-инфицированных не страдающих алкоголизмом и у неинфицированных пациентов с алкогольным делирием выявлены нарушения функционирования симпатоадреналовой и гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой систем, которые проявляются дополнительной активацией САС и развитием гипокортизолемии. Изменения сопровождаются увеличением активности МАО-Б тромбоцитов и уровня церулоплазмина крови.

Выраженность гиперферментемии сыворотки крови у ВИЧ-инфицированных при алкогольном делирии

Статистически значимые изменения в группе ВИЧ-инфицированных лиц без аддикции обнаружены только по показателям тимоловой пробы (таблица 5). Этот факт связан с характерным для ВИЧ-инфицированных больных высоким уровнем гамма-глобулинов. Необходимо отметить, что в ряде работ предлагается использовать показатели тимоловой пробы, как скрининг-тест на наличие ВИЧ-инфекции (Жильцов И.В. с соавт. Журнал инфектологии. Приложение. Т.4 №3, 2012. с 46-47). Кроме того в исследовании выявлены корреляционные взаимосвязями между показателями тимоловой пробы и уровнем карбонилированных белков (Rs=0,70;P<0,05), что говорит о снижении коллоидной устойчивости поврежденных белковых молекул.

В группе алкогольного делирия наблюдалось увеличение активности трансаминаз, гамма-глутамилтранспептидазы и тимоловой пробы (таблица 5). ГГТ является ферментом особенно чувствительным к влиянию на печень длительного потребления алкоголя и коррелирует с количеством употребляемого этанола (Кишкун, A.A. Руководство по лабораторным методам диагностики. М.: «ГЭОТАР-Медиа», 2007. 800 е.).

У ВИЧ-инфицированных больных с алкогольным делирием по сравнению с группой «АД» обнаружено статистически значимое увеличение активности АсАТ и показателей тимоловой пробы. Относительно группы ВИЧ-инфицированных лиц без алкогольной зависимости нарушения функции печени выражены в большей степени (таблица 5).

Совокупность лабораторных констелляций активности сывороточных ферментов указывает на высокую вероятность развития активной формы алкогольного гепатита в группе ВИЧ-инфицированных пациентов с алкогольным делирием и высокую степень выраженности цитолитического синдрома. Выявленные изменения функциональных проб печени при алкогольном делирии ВИЧ-инфицированных пациентов могут усугубляться в результате сниженного уровня глюкокортикоидов.

В связи с этим необходимо обратить внимание на наличие у этих больных отрицательной корреляционной связи между уровнем циркулирующего кортизола и активностью маркера алкогольного поражения печени - ГГТ (Rs=-0,67;p<0,05). Подобная тенденция проявляется и в отношении аминотрансфераз.

Текст научной работыДиссертация по биологии, кандидата биологических наук, Шатрова, Юлия Михайловна, Казань

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Южно-Уральский государственный университет» (национальный исследовательский университет)

;ах рукописи

02201455455

Шатрова Юлия Михайловна

ОСОБЕННОСТИ ОКИСЛИТЕЛЬНОГО СТРЕССА, АССОЦИИРОВАННОГО С ИЗМЕНЕНИЕМ СОДЕРЖАНИЯ КАТЕХОЛАМИНОВ И СЕРОТОНИНА У ВИЧ-ИНФИЦИРОВАННЫХ ЛИЦ С АЛКОГОЛЬНЫМ ДЕЛИРИЕМ

03.01.04 - Биохимия

Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Научный руководитель: Профессор Цейликман О.Б., доктор медицинских наук, профессор

Казань-2013

ОГЛАВЛЕНИЕ

Введение....................................................................................................................................................................4

Актуальность темы исследования и степень ее разработанности........................4

Цель исследования..............................................................................................................................................8

Задачи исследования........................................................................................................................................8

Методология и методы исследования..............................................................................................9

Степень достоверности, апробация результатов, личное участие автора.... 12

Положения, выносимые на защиту....................................................................................................13

Научная новизна................................................................................................................................................13

Теоретическая и практическая значимость работы............................................................16

Внедрение результатов исследования в практику................................................................16

Конкурсная поддержка исследования..............................................................................................16

ГЛАВА 1. Влияние обмена катехоламинов и серотонина на свободно-радикальные процессы и патогенез ВИЧ-инфекции при развитии

алкогольного делирия....................................................................................................................................17

1.1. Роль нарушений обмена катехоламинов и серотонина в патогенезе алкогольного делирия..................................................................................19

1.2.Катехоламины - модуляторы свободнорадикальных процессов................................................................................................................................................29

1.3. Показатели ПОЛ и ОМБ как маркеры окислительного стресса при алкогольном делирии..............................................................................33

1.4.Система антиоксидантной защиты - ферментативные и не ферментативные антиоксиданты......................................................................................37

1.5.Механизмы окислительного повреждения печени у больных алкоголизмом....................................................................................................................................40

1.6. Влияние катехоламинов на течение ВИЧ-инфекции, нейроиммуноэндокринные взаимодействия........................................................42

1.7. Окислительный стресс ВИЧ-инфицированных лиц........................44

1.8.Окислительный статус ВИЧ-инфицированных больных

алкоголизмом.................................................................. 46

ГЛАВА 2. Материалы и методы исследования................................... 50

2.1.Модель исследования, характеристика сформированных групп............................................................................. 50

2.2.Биохимические методы исследования............................... 52

2.3.Статистический анализ результатов................................. 59

ГЛАВА 3. Собственные исследования............................................. 60

3.1.Показатели ПОЛ и ОМБ у ВИЧ-инфицированных лиц с алкогольным делирием...................................................... 60

3.2. Активация симпатоадреналовой системы и концентрация серотонина в крови у ВИЧ-инфицированных больных с алкогольным делирием...................................................... 69

3.3.Изменение активности тромбоцитарной МАО-Б и уровня церулоплазмина крови у ВИЧ-инфицированных с алкогольным делирием........................................................................ 74

3.4. Выраженность гиперферментемии сыворотки крови при алкогольном делирии у ВИЧ-инфицированных........................ 79

Заключение (обсуждение полученных результатов).............................. 83

Выводы.................................................................................... 100

Практические рекомендации......................................................... 101

Список сокращений и условных обозначений.................................... 102

Словарь терминов....................................................................... 105

Список литературы..................................................................... 108

Введение

Актуальность темы исследования и степень ее разработанности

Исходя из высокого уровня первичной инвалидности и смертности населения ВИЧ-инфекцию, алкоголизм и психические расстройства относят к категории социально значимых заболеваний. Данные заболевания многофакторно и деструктивно воздействуют на демографические, экономические и социальные аспекты жизни общества. В 2007 году утверждена «Концепция демографической политики Российской Федерации на период до 2025 года». Одной из задач концепции является снижение уровня смертности и инвалидизации от ВИЧ / СПИД, прежде всего среди трудоспособного населения (Медик В.А., Юрьев В.К., 2009; Супотоцкий М.В., 2006). По данным на 31.12.11 в России вирусом иммунодефицита человека инфицировано 0,7% трудоспособного населения (Крылов В.А. и др., 2012). К 2012 г. именно среди трудоспособного населения резко увеличилось выявление новых случаев инфицирования ВИЧ: с 9,9% (2000 г.) до 44,2% (2012 г.), причем большинство зараженных — лица мужского пола (63,8%) (Справка Специализированной НИ лаборатории по профилактике и борьбе со СПИД ФБУН Центрального НИИ эпидемиологии, 2012). Ситуация обостряется в связи с широкой распространенностью алкоголизма (более 60%) в когорте носителей ВИЧ (Jose М., Shor-Posner G., 2002). Хронический стресс и депрессия, связанные с осознанием инфицированности, часто стают причиной злоупотребления алкоголем у ранее не пьющих людей (Сыропятов О.Г. и др., 2012). Известно, что этанол: угнетает иммунитет и повышает восприимчивость организма к патогенам; потенцирует активную репликацию вируса и развитие резистентности к терапии, приводит к манифестации СПИДа и быстрому прогрессированию нейроСПИДа (Беляков H.A. и др., 2012; Джон Бартлетт и др., 2010; Евтушенко С.К., Деревянко И.Н., 2006; Drain P.K. et al., 2007; Kumar S. et al., 2012; Venketaraman V. et al., 2011). Отказ от алкоголя улучшает

иммунологические показатели инфицированных с приростом числа CD4+ Т -лимфоцитов на 41%, риск развития СПИДа снижается в 3,8 раз (Xu Wang et al., 2002). Прекращение / ограничение употребления алкоголя - обязательное условие лечения препаратами высокоактивной антиретровирусной терапии (ВААРТ) (Джон Бартлетт и др., 2010). Однако у больных алкоголизмом отказ от алкоголя может вызывать алкогольные психозы, из них на долю алкогольного делирия приходится 71 - 91% (Галанкин J1.H. и др., 2004). Лечение антиретровирусными медикаментами на фоне продолжающегося алкоголизма приводит к взаимодействиям этанола / ацетальдегида с препаратами ВААРТ вовремя их утилизации цитохромами Р-450. Это не только снижает эффективность лечения, но и потенцирует возникновение психоза на 4-10 сутки приема препаратов (Джон Бартлетт и др., 2010). На долю алкогольных психозов приходится около 20% психических расстройств, наблюдаемых у инфицированного ВИЧ населения (Незнанов Н.Г., Халезова Н.Б., 2007; Халезова Н.Б., 2011). Между тем, алкогольный делирий - это тяжелое, неотложное, потенциально смертельное (5 -30%) состояние (Галанкин Л.Н. и др., 2004; Кекелидзе З.И. и др., 1998; Кутько И.И., Фролов В.М., 2006). Носительство вируса иммунодефицита рассматривается, как один из факторов риска развития алкогольного делирия при синдроме отмены, поскольку зараженность подразумевает наличие комплекса соматических, неврологических и психических нарушений, способствующих психозу (Беляков H.A. и др., 2012; Евтушенко С.К., Деревянко И.Н., 2006; Шейдер Р., 1998; Chen К. at al., 2011).

Для носителей ВИЧ характерно наличие базового окислительного стресса. Оксидативный стресс возникает уже с момента инфицирования и продолжает формироваться на фоне постепенного снижения буферной емкости антиоксидантной системы. Дополнительное (к базовому уровню) увеличение показателей перекисного окисления липидов (ПОЛ) и окислительной модификации белков (ОМБ) в плазме крови зараженных, коррелирует с прогрессированием осложнений ВИЧ-инфекции и манифестацией СПИДа (Anthenelli R.M. at al., 1998; Dina OA. At al., 2006; Dröge W. at al., 1991; Gil L. at

al., 2003; Javier J.J. at al., 1990; Kruman I.I. at al., 1998; Kumar S. at al., 2012; Mandas A. at al., 2009; Passi S., 1993; Passi S., 1998; Pasupathi P. at al., 2009; Venketaraman V.et al., 2011).

Известно, что катехоламины (KA) являются мощными индукторами свободнорадикальных процессов. В условиях окислительного стресса многократно интенсифицируется аутоокисление биогенных аминов (катехоламинов и серотонина). Это может приводить к значительному повышению уровня генерируемых в организме радикальных продуктов и окислительному повреждению тканей и органов (Бизунок H.A., Дубовик Б.В., 2001; Бизунок H.A., Дубовик Б.В., 2008; Дубинина Е.Е., 2006; Коган Б.М. и др., 2010; Паценко A.A. Канунникова Н.П., 2011; Семенов и др., 2009; Siraki-Garakhanian А., 2000; Nikolova G., 2012). В ряде зарубежных исследований, посвященных изучению стресса / депрессии в патогенезе ВИЧ-инфекции, отмечают особую роль катехоламинов в негативной динамике течения заболевания. Значимость последствий активации симпатоадреналовой системы (САС) позволяет осуществлять мониторинг эффективности антиретровирусной терапии по уровню выделяемых с мочой катехоламинов (Джон Бартлетт и др., 2010; Gail I. at al., 2008; Gaskill PJ. At al., 2009; Mahbub E. at al., 2013; Novio S. at al., 2011; Sloan E. К. at al., 2006). В свою очередь известно, что алкогольный делирий характеризуется катехоламиновым «всплеском». Тяжесть психоза во многом определяется степенью реактивности САС, а ослабление симптоматики у пациентов коррелирует с нормализацией содержания КА в биологических жидкостях (Анохина И. П., 1987; Галанкин JI.H и др., 2006; Кекелидзе З.И. и др., 1998; Кузьминов Л.В., 2002; Кутько И.И., Фролов В.М., 2006; Кутько И.И. и др., 2007; Maldonado JR., 2008). Противоречивы данные об изменениях уровня серотонина в крови пациентов при возникновении алкогольного делирия, однако не вызывает сомнений роль этого моноамина в патогенезе алкоголизма, психозов и его роль, как модулятора свободнорадикальных процессов (Андреев М.О., 2012; Бизунок H.A., Дубовик Б.В., 2001; Галанкин JI.H. и др., 2004; Брусов О.С. и др., 2007; Коган Б.М. и др., 1997; Maldonado JR., 2008).

Мощным индуктором окислительного стресса, является не только аутоокисление биогенных аминов, но и их окислительное дезаминирование моноаминоксидазами. С высокой активностью моноаминоксидаз (МАО) в клетках головного мозга связывают различные нейродегенеративные заболевания, характеризующиеся гибелью нейронов (Алферова В.В. и др., 2010; Коган Б.М. и др., 2010; Беленичев И.Ф. и др., 2009; Anthenelli R.M. at al., 1998; Duncan J. et al., 2012). Именно неврологические нарушения (энцефалопатии, полинейропатии, эпилептический синдром, эфедроновый паркинсонизм, деменция и т.д.) в последние годы стают основными факторами инвалидизации ВИЧ-инфицированных пациентов (Беляков H.A. и др., 2012; Евтушенко С.К., Деревянко И.Н., 2006; Крылов В.А. и др., 2012). В качестве маркера, характеризующего активность МАО в ЦНС при хроническом алкоголизме, принято рассматривать активность тромбоцитарной МАО-Б (Harro J., Oreland L., 2001; Oreland L. at al., 1983; Oreland L. at al., 2007). Информация об активности этого фермента при развившемся алкогольном делирии носит неоднозначный характер (Виноградов Д.Б., 2011; Галанкин JI.H. и др., 2006; Паначев И.В., 2012) Однако известно, что наиболее значимыми эндогенными регуляторами активности моноаминоксидаз являются кортизол и трибулин (Волчегорский И.А. и др., 1998; Волчегорский И.А. и др, 2000; Волчегорский И.А. и др., 2003; Медведев А.Е. и др., 1995; Медведев А.Е., 1996; Du J. et al., 2009; Manoli I. et al., 2005; Medvedev A.E., Glover V., 2004). Кроме того, кортизол - важный гормон стресс-реакции организма. У серопозитивных пациентов часто ]'бнаруживается гиперкортизолемия и кортизол-резистентность (Norbiato G. et al., 1992; Norbiato G., 2012). При развитии делирия в крови пациентов то же наблюдают увеличение концентрации глюкокортикоидов (Галанкин J1.H. и др., 2006; Кутько И.И., Фролов В.М., 2006; Кутько И.И. и др., 2007).

В последние годы интенсивно проводятся исследования свободнорадикальных механизмов при алкоголизме у ВИЧ-инфицированных (Ferrari L.F., Levine J.D., 2010; Frank J. et al., 2004; Jose M., Shor-Posner G., 2002; Kruman I.I. et al., 1998; Lu Y., Cederbaum AI., 2008; Mandas A. et al., 2009; Miguez

МЛ. е1 а1., 2003; КогЫаШ в., 2012; РаБираЙи Р. е1 а1., 2009), но остаются мало изученными особенности свободнорадикального окисления и стресс реакции у носителей ВИЧ находящихся в опасном состоянии алкогольного делирия. Поскольку алкогольный делирий сопровождается полиорганной недостаточностью (Галанкин Л.Н. и др., 2006; Нуркимбаев М.К. и др., 2010; Зубарев А.С., 2008; Сачков Н.В., 2006), то является целесообразным оценить взаимосвязи параметров свободнорадикального окисления (СРО) со степенью повреждения жизненно важных органов (печень) при алкогольном делирии ВИЧ-инфицированных больных.

Цель исследования

Установить особенности свободнорадикального окисления при дисфункции симпатоадреналовой системы и провести клинико-лабораторную оценку функционального состояния печени у ВИЧ-инфицированных лиц с алкогольным делирием.

Задачи исследования

1. Определить направленность изменений содержания молекулярных продуктов ПОЛ в плазме крови у ВИЧ-инфицированных пациентов при развитии алкогольного делирия.

2. Изучить изменения показателей окислительной модификации белка в плазме крови у носителей ВИЧ в условиях алкогольного делирия.

3. Оценить степень активации симпатоадреналовой системы и уровень серотонина крови при алкогольном делирии у ВИЧ-инфицированных пациентов.

4. У носителей ВИЧ с алкогольным делирием исследовать активность МАО-Б тромбоцитов и уровень церулоплазмина крови.

5. Исследовать изменения показателей эндогенной регуляции активности МАО (кортизола и трибулина) у ВИЧ-инфицированных больных с алкогольным делирием.

6. Изучить активность сывороточных ферментов Ас AT, Ал AT, ГГТ, ЩФ и показатели тимоловой пробы для оценки функционального состояния печени у носителей ВИЧ в сравнении с неинфицированными больными при алкогольном делирии.

Методология и методы исследования

Проведено обследование 155 человек: 124 пациентов отделения неотложной наркологической помощи Челябинской областной наркологической больницы, 20 пациентов «Городского центра по профилактике и борьбе со СПИД , 11 условно здоровых лиц. Результаты биохимических исследований сопоставлены по четырем группам: «АД» - включено 99 пациентов больных алкоголизмом II-III стадии с явлениями алкогольного делирия; «АД+ВИЧ» - 25 больных алкоголизмом II-III стадии с явлениями алкогольного делирия и подтвержденным диагнозом носительства ВИЧ; «ВИЧ»- включено 20 ВИЧ-инфицированных пациентов без аддикции (не злоупотребляющих алкоголем и другими психотропными веществами); «К» - 11 условно здоровых лиц, не страдающих алкоголизмом.

Выборки сформированы в соответствии с критериями включения и исключения. Критерии включения: лица мужского пола трудоспособного возраста (23-55 лет) с алкоголизмом II-III стадии и явлениями алкогольного делирия развивающегося на фоне отмены алкоголя; лица с явлениями алкогольного делирия развивающегося на фоне отмены алкоголя с установленным носительством ВИЧ; серопозитивные пациенты, не страдающие алкогольной и наркотической зависимостью. Критерии исключения: наличие заболеваний, способных оказать влияние на результат исследования; лица, страдающие психической патологией (включая деменцию и олигофрению), хронические

заболевания инфекционного и неинфекционного генеза (туберкулез, сахарный диабет), наличие в анамнезе черепно-мозговых травм.

Взятие крови на исследование производилось пункцией кубитальной вены с 700 до 900.

Включение поступавших в клинику пациентов в когортное исследование, производилось до 48 часов госпитализации после верификации диагноза: «алкоголизм Пб - Illa стадии с явлениями алкогольного делирия». ВИЧ-инфицирование подтверждалось методом иммуноблотинга с выявлением антител не менее чем к трем антигенам.

Порционную и суточную мочу собирали с соблюдением условий преаналитического этапа исследования. Материал хранили при температуре - 20°С - -70°С до осуществления анализа. Содержание катехоламинов определяли непосредственно после взятия биологического материала с соблюдением температурного режима и условий стабилизации.

В сыворотке крови на биохимическом анализаторе OLYMPUS AU 400 исследовалось содержание общего белка, активность аланинаминотрансферазы (АлАТ), аспартатаминотрансферазы (АсАТ), гамма-глутамилтранспептидазы (ГГТ), щелочной фосфатазы (ЩФ).

Постановка тимоловой пробы осуществлялась согласно приказу № 290 от 11.04.1972 МЗ СРСР "Об унификации клинических лабораторных методов исследований".

В плазме крови по методике И.А. Волчегорского и соавторов определяли содержание первичных (диеновые конъюгаты) и вторичных (кетодиены и сопряжённые триены) молекулярных продуктов перекисного окисления липидов (Волчегорский И. А., 1989).

Содержание конечных продуктов ПОЛ - оснований Шиффа и уровень Fe / аскорбат - индуцированного ПОЛ оценивали с использованием методик Е.И.Львовской и соавторов (Львовская Е.И. и др., 1991).

По методике