Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Особенности метаболизма тиамина в организме при росте злокачественных опухолей

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Содержание диссертации, доктора биологических наук, Требухина, Раиса Васильевна

ВВЕДЕНИЕ.б

ШВА I. АНАЛИТИЧЕСКИЙ ОБЗОР.

1.1. Обмен тиамина и тиаминпирофосфата у животных с экспериментальными опухолями

1.1.1. Тиаминпирофосфатсодержащие ферменты

1.1.2. Влияние различной обеспеченности организма тиамином на развитие опухоли.,.

1.1.3. Влияние окситиамина на рост экспериментальных опухолей.

1.1.4. Ферменты синтеза и распада тиаминпирофосфата

1.2. Обмен тиамина у людей со злокачественными опухолями

1.3. Активность пентозофосфатного цикла при опухолевом росте

1.4. Современные представления по обмену тиамина.

ГЛАВА 2. ПОСТАНОВКА ВОПРОСА, ОБОСНОВАНИЕ ТЕШ И МЕТОДОВ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Определение цели и задач исследования

2.2. Подготовка к опытам и условия их проведения.

2.3. Специфика проведения витаминно-онкологических исследований

2.4. Биохимические методы анализа.

ГЛАВА 3. ОСОБЕННОСТИ ОШЕНА ТИАМИНА НА УРОВНЕ ТИАМИН

ЗАВИСИМЫХ ФЕРМЕНТОВ И СВЯЗАННЫХ С НИМИ СУБСТРАТОВ У ЖИВОТНЫХ С ПЕРЕВИВАЕМЫМИ ОПУХОЛЯМИ И ОНКОЛОГИЧЕСКИХ БОЛЬНЫХ.

3.1. Обмен витамина Bj у животных с перевиваемыми опухолями

3.1.1. Влияние опухолевого процесса на обмен тиамина,

ТГВ> и активность ТШ-содержащих ферментов.

3.1.2. Обмен пировиноградной и молочной кислот у животных с перевиваемыми опухолями.

3.1.3. Активность пентозофосфатного цикла у животных с перевиваемыми опухолями.

3.2. Изучение обмена тиамина у онкологических больных

ПЛАВА 4. ОШЕН 14С-ТИАМИНА В ТКАНЯХ ЖИВОТНЫХ С ПЕРЕВИВАЕМЫМИ ОПУХОЛЯМИ . Ю

4.1. Особенности всасывания, депонирования, экскреции тиамина у животных в динамике развития экспериментальных опухолей.

4.2. Развитие опухоли в организме и анорексия.

4.3. Обмениваемость 14с -тиамина, активность ТПФ-содер-жащих ферментов в тканях животных с перевиваемыми . опухолями

4.4. Динамика включения 14с -тиамина в его фосфорные эфиры в тканях животных с перевиваемыми опухолями

4.5. Катаболизм 14с -тиамина, период его полураспада

ГЛАВА 5. МЕТАБОЛИЗМ ТИАМИНА У ЖИВОТНЫХ-ОПУХОЛЕНОСИ

ТЕЯЕЙ ПРИ РАЗЛИЧНОЙ ОБЕСПЕЧЕННОСТИ ИХ ВИТАМИНОМ Bj

5.1. Обмен тиамина у интактных животных в динамике развития авитаминоза Bj

5.2. Обмен тиамина у животных с асцитной карциномой Эрлиха в условиях различной обеспеченности организма витамином Вj

ГЛАВА. 6. ВОЗМОЖНОСТЬ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ВИТАМИНА Bj И ЕГО

ПРОИЗВОДНЫХ В ОНКОЛОГИЧЕСКОЙ ПРАКТИКЕ.

6.1. Влияние избытка тиамина на рост экспериментальных опухолей

6.2. Защитный эффект тиамина от токсического, угнетающего кроветворение, действия противоопухолевых препаратов

6.3. Окситиамин и рост экспериментальных опухолей

6.3.1. Токсикологическая оценка окситиамина.

6.3.2. Действие окситиамина на рост перевиваемых опухолей

6.3.3. Характеристика активности транскетолазы и клеточная морфология опухолевой ткани у животных с перевиваемыми опухолями после введения окситиамина

6.3.4. Сочетанное использование окситиамина с сарколи-зином

ГЛАВА 7. ОБСЩЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ И ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ.

Документы о внедрении результатов исследования

Введение Диссертация по биологии, на тему "Особенности метаболизма тиамина в организме при росте злокачественных опухолей"

Витамины и их производные функционируют в организме как ко-энзимы, клеточные антиоксиданты, а также как регуляторы генной экспрессии. Целостность физиологических систем, включая процессы детоксикации, клеточной репарации, реакций иммунитета, нервной и эндокринной функций зависят от витаминного статуса организма. Роль витамина Bj в онкогенезе не ясна и мало изучена. Возможны три вида взаимодействий между опухолью и организмом: влияние витамина на рост опухоли (стимуляция или торможение), действие опухоли на метаболизм витамина в тканях организма и, наконец, воздействие витамина на эффекты химических канцерогенов и противоопухолевых химиопрепаратов.

Выяснение механизмов действия этих факторов является актуальной проблемой современной биологиии. С момента малигнизации опухолевого очага организм становится объектом его системного действия (Шалот, 1975). Это действие нарушает в той или иной степени функции всех физиологических систем и тканей организма-хозяина, расстраивает его обмен веществ. Иными словами злокачественное образование действует как дезинтегратор метаболического гомеостаза (Островский, 1971). По мнению В.С.Шапота (1979, 1980) имеются две основные взаимосвязанные формы системного действия опухоли: успешная конкуренция её с тканями за необходимые метаболиты и факторы и влияние на биологические свойства отдаленных тканей, приводящее к их деспециализации и ослаблению регулируемости со стороны организма. Основным патогенетическим звеном опухолевого процесса является энергетический дефицит клеток организма (Бирк, 1966; Edstrom, Bennegard et al., 1982).

Среди многообразных нарушений, вызываемых присутствием опухоли в организме, процессы метаболизма тиамина остаются наименее изученными. Между тем известно, что ТШ в составе пируват- и ок-соглутаратдегидрогеназ принимает участие в окислительном декар-боксилировании о^-кетокислот, являющихся одним из основных источников энергии в живой клетке. С другой стороны, тиамин в составе кофермента транскетолазы регулирует функционирование ПЩ, основного источника восстановленногоnadp.h и рибозо-5-фосфата, необходимых для многочисленных синтетических процессов, в том числе синтеза нуклеотидов и нуклеиновых кислот. Одним из наиболее изученных показателей обмена тиамина при канцерогенезе является уровень витамина в крови и моче, а также активность транскетолазы в тканях и жидкостях организма животных и человека. Представленные по этому вопросу литературные данные чрезвычайно противоречивы, а главное - они трудно сопоставимы друг с другом, так как подавляющее число исследований выполнено на различающихся объектах и типах опухолей.

Практически не изучалась функциональная роль ферментов синтеза и распада ТШ. Открытым остается вопрос о характере всасывания, депонирования и экскреции витамина Bj при экспериментальном канцерогенезе. К тому же значение тиамина в регуляции процессов жизнедеятельности представляется сейчас намного более широким и универсальным, чем это было 10-15 лет назад. Стали известны новые производные тиамина в различных биологических объектах. Обсуждаются их возможные, ранее не известные, функции. Отсутствуют сведения об исследованиях содержания фосфорных эфи-ров тиамина (ТМФ, ТТФ) в тканях животных с неоплазмой. В связи с развитием новых подходов в современной витаминологии, пристальное внимание привлекают к себе некоферментные производные тиамина, роль которых только сейчас начинает изучаться.

Учитывая весьма широкую метаболическую значимость тиамина, недостаточную изученность многих вопросов, касающихся характеристики состояния обмена тиамина и его значение при опухолевом росте. ,, разрозненность имеющихся исследований и противоречивость полученных результатов, проведение исследований в этом направлении является достаточно обоснованным.

Настоящая работа представляет собой первое фундаментальное исследование, посвященное решению актуальной биологической проблемы взаимоотношения опухоли и организма в использовании витамина Bj. С учетом всего вышеизложенного сформулирована цель настоящего исследования:

Изучить особенности метаболизма тиамина в организме при росте злокачественных опухолей, выявить возможности наиболее ранней диагностики Bj-витаминной недостаточности с последующим обоснованием целесообразности применения тиамина и его производных для коррекции нарушенного обмена.

Для решения поставленной задачи эксперименты проводились на животных в различные временные периоды развития в их организме перевиваемых опухолей (асцитная карцинома Эрлиха, карциносаркома Уокер 256, саркома 45). Использованы современные методы радиоизотопной индикации при изучении распределения и обмена ^^С-тиа-мина, ионообменной хроматографии при разделении фосфорных эфи-ров тиамина, новые методические приемы и разработки при определении уровня кофермента и активности ТШ-содержащих ферментов, определялась активность ферментов, контролирующих синтез и рас пад ТПФ.

На основании результатов экспериментальных исследований, в дополнение к ранее известным единичным показателям, установлено по более широкому числу тестов, что процесс развития злокачественной опухоли в организме сопровождается развитием дефицита тиамина в нем (изменение концентрации тиамина, ТШ в крови, тканях, активности пируват-, оксоглутаратдегидрогеназ, транскетолазы, ти-аминпирофосфатазы и тиаминпирофосфокиназы).

Значительный интерес представляло сопоставление полученных данных с периодами роста опухоли, каждая из которых характеризуется своеобразием системных эффектов и индивидуальными типами адаптационных ответов со стороны организма-хозяина.

Показано, что в начальный период роста карциномы Эрлиха из печени мышей исчезает свободный тиамин и падает активность пиру-ватдегидрогеназы в ней. Стадия интенсивного роста опухоли (карцинома Эрлиха, карциносаркома Уокер 256) характеризуется снижением уровня ТПЗ> в крови и печени, снижением активности пируват-, оксоглутаратдегидрогеназ и транскетолазы в печени, почках, мышцах животных-опухоленосителей.

Метаболизм ТПФ, играющий ключевую роль в синтезе нуклеиновых кислот (через ПЩ), необходимых опухолевым клеткам в процессе их митотического цикла, тесно связан с активностью ферментов синтеза и распада кофермента. В работе впервые показана регулирующая роль тиаминпирофосфатазы и тиаминпирофосфокиназы в поддержании клеточного пула кофермента в печени животных-опухоленосителей.

Приведены новые данные о высокой функциональной емкости транскетолазы в опухолевых клетках за счет наличия значительного количества апотранскетолазы.

В опытах с *^С-тиашшом впервые установлено, что в ходе развития экспериментальных опухолей происходит активное перераспределение витамина между тканями. Опухоль, активно ассимилируя ■^С-тиамин, не создает предпосылок для ухудшения потребления его тканями организма-хозяина при введении дозы, эквивалентной физиологической потребности. Однако при гиповитаминозе Bj уже выявлены конкурентные взаимоотношения между опухолью и организмом в использовании ^^С-тиамина.

Установлен более интенсивный обмен 14с -тиамина в тканях мы-шей-опухоленосителей в сравнении с органами интактных животных. Продемонстрирована высокая метаболическая активность 14с -тиамина в опухолевых клетках.

Впервые изучено распределение 14с -тиамина в его фосфорных эфирах: тиаминмоно-, тиаминпиро-, тиаминтри- фосфатах в печени животных-опухоленосителей и в опухолевой ткани. В последней обнаружено до 40% 14С -тиамина в составе ТТФ. Впервые определена концентрация тиаминмоно- и тиаминтрифосфата в опухолевой ткани.

Представлялось также целесообразным сконцентрировать внимание на устранение противоречий по вопросу дополнительной витаминизации организма-опухоленосителя - обоснована она или противопоказана. Получены прямые доказательства отсутствия стимулирующего действия тиамина на рост экспериментальных опухолей. При этом наблюдались явления большей резистентности к этому заболеванию, выраженные отсутствием явлений диарреи, слепоты. Частично снижался метаболический ацидоз. Увеличивалась средняя выживаемость животных.

Приведены новые данные о протекторном действии тиамина против токсического влияния винбластина и циклофосфана на кроветворение без снижения их специфического противоопухолевого действия.

При изучении функции и значения тех или иных субстратов и ферментов в биохимии уже давно и успешно применяются различные специфические ингибиторы (Цулли, 1954; Rogers» 1970; Островский, 1973), с помощью которых искусственно создается контролируемый дисбаланс в обмене веществ. В настоящее время проводятся исследования с целью выяснения возможного использования антиметаболита витамина Bj - окситиамина в онкологической практике. Более стратегический подход в этой области не исключает использования и других производных тиамина в качестве противоопухолевых средств. В наших экспериментах получены новые данные о губительном действии окситиамина на опухолевые клетки (дистрофическое изменение структуры карциноматозных клеток и торможение' активности транскетолазы в них на 70$).

Таким образом, на основании обширного экспериментального материала охарактеризовано состояние обмена тиамина у животных с перевиваемыми опухолями, присущее различным периодам роста неоплазмы по более широкому кругу показателей с привлечением новых, ранее не исследованных тестов. Решена важная биологическая проблема взаимоотношений опухоли и организма в использовании витамина Bj, имеющая важное прикладное значение.

В результате проведенных исследований установлено, что между организмом и опухолью четко выявляются три типа взаимоотношений:

1. При избыточном поступлении витамина Bj в организм, тиамин утилизируется тканями опухоленосителя и опухолевыми клетками без конкурентных отношений.

2. При ограниченном поступлении тиамина с пищей, выявляются конкурентные взаимоотношения между тканями и опухолевыми клетками в захвате витамина Bj в пользу последних.

3. В случае тотального исключения из пищевого рациона витамина Bj нарушается обмен тиамина в тканях организма и в опухолевых клетках.

Избыточное введение тиамина не стимулирует рост опухоли, благоприятно сказывается на общей резистентности организма и снимает частично побочное действие цитостатиков. Из полученных результатов следует, что тиамин может широко использоваться в онкологической практике, поскольку он восстанавливает функцию, нарушенных при бластоматозе, ТШ-содержащих ферментов, повышает уровень тиамина и его коферментной формы и частично снижает метаболический ацидоз. Нарушение обмена тиамина при онкогенезе можно рассматривать как одну из форм системного действия опухоли на организм, успешно доказанную в отношении глюкозы, гормонов, нук-леотидов (Шалот, 1979), но не рассматривавшуюся ранее в отношении витаминов. В механизме действия опухоли на обмен тиамина можно выделить два этапа.

Во-первых, расстройство энергетического обмена (Морозкина, 1979; Шапот, 1982; Edstrom, Bennegard et al.,1982 ), обуславливающее дефицит АТФ в клетках, приводит к нарушению фосфорилиро-вания тиамина в тканях организма-опухоленосителя. Недостаток ТШ сопровождается постепенным выключением специфических кофермент-ных функций витамина в составе пируват-, оксоглутаратдегидроге-наз и транскетолазы.

Во-вторых, быстрая обмениваемость 14с -тиамина в опухолевых клетках создает конкурентно-способную ситуацию в ассимиляции тиамина в условиях его недостаточного поступления.

Результаты проведенных исследований уже нашли применение.,, в исследованиях института биологии Карельского филиала АН СССР, НИИ онкологии и медицинской радиологии МЗ БССР; в учебном процессе Минского и Калининского медицинских институтов и Витебского ветеринарного института.

На основании обобщенных результатов проведенного исследования на публичную защиту выносятся следующие положения:

1. Нарушение метаболизма тиамина в организме опухоленоси-теля находится в прямой зависимости от стадии опухолевого роста. В начальный период из печени исчезает свободный тиамин, падает активность пируватдегидрогеназы, тиаминпирофосфокиназы и повышается активность тиаминпирофосфатазы. В стадии интенсивного роста опухоли и в терминальный период снижается уровень Т®, усугубляется торможение активности пируватдегидрогеназы, падает активность оксоглутаратдегидрогеназы, транскетолазы и значительно возрастает уровень кетокислот. Обоснована целесообразность дополнительной витаминизации организма с целью специфической коррекции выявленных сдвигов.

2. Обмен *^С-тиамина характеризуется более быстрой обнов-ляемостью его в организме с неоплазмой. Сопутствующий опухолевому росту дефицит тиамина.развивается в результате интенсивной обмениваемости витамина в опухолевых клетках.

3. При недостаточно полном снабжении организма тиамином наблюдаются конкурентные взаимоотношения опухоли и организма-опухоленосителя в использовании витамина Bj.

4. Дополнительные инъекции витамина Bj нормализуют активность ферментов, уровень субстратов тиаминового обмена, не стимулируя при этом рост опухоли. Витамин повышает резистентность организма, продляет выживаемость животных, пораженных опухолью. Введение тиамина совместно с винбластином или циклофосфаном снижает токсическое действие этих препаратов на кроветворение, не нарушая при этом их противоопухолевый эффект.

5. Инъекции антиметаболита витамина Bj - окситиамина животным с экспериментальными опухолями вызывают дистрофическое нарушение структуры опухолевых клеток и торможение активности транскетолазы в них. Изучение механизма действия антивитамина на опухолевую ткань может представить интерес для дальнейших исследований.

Считаю своим приятным долгом выразить искреннюю признательность заслуженному деятелю науки БССР, члену-корреспонденту АН БССР, доктору медицинских наук, профессору Ю.М.Островскому, чьё постоянное внимание и поддержка позволили реализовать замыслы этой работы.

Приношу глубокую благодарность члену-корреспонденту АМН СССР, доктору медицинских наук, профессору В.С.Шалоту за пред- ^ ставленную возможность широкого обсуждения результатов экспериментов на рабочих совещаниях Онкологического научного центра АМН СССР.

Сердечно благодарю коллег из Отдела регуляции обмена веществ АН БССР: Величко М.Г., Бородинского А.Н., Михальцевича Г.Н., Ла-шак Л.К., Петушок В.Г., Туманова В.Н. за профессиональную помощь при выполнении совместных исследований.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Требухина, Раиса Васильевна

ВЫВОДЫ

1. Нарушение обмена тиамина в организме находится в ямой зависимости от стадии опухолевого роста. а). Начальный период ее развития характеризуется низ-м уровнем свободного тиамина в печени животных с карцино-ркомой Уокер 256, торможением активности пируватдегидроге-зы (печень, почки, мышцы), тиаминпирофосфокиназы (печень) повышением активности тиаминпирофосфатазы (печень). б). В интенсивной стадии роста неоплазмы и терминаль-м периоде ее развития (карцинома Эрлиха, карциносаркома кер 256) снижается количество тиаминпирофосфата в печени и дает активность тиаминпирофосфатсодержащих ферментов.

2. В опухолевых клетках в процессе их развития непрерыв-уменыпается концентрация тиаминпирофосфата, угнетается аквность транскетолазы и пропорционально возрастает свободная офорыа транскетолазы (стимуляция активности фермента при бавлении тиаминпирофосфата in vitro ). Присутствие избытка офермента в них при любом уровне обеспечения животных вита-ном Bj можно рассматривать как механизм, обеспечивающий пее эффективный захват кофермента опухолью в ущерб тканям.

3. Изучено состояние обмена тиамина у больных раком желуд-. Установлено, что развитие злокачественной опухоли сопро-кдается снижением уровня тиамина, тиаминпирофосфата и утне-яием активности транскетолазы в крови пациентов. Наиболее йонстративным показателем Вj-гиповитаминоза является опре-иение в крови содержания кофермента, уровень которого пазт на 40-60% в процессе развития этого заболевания.

4. Динамика включения и распределения ^С-тиамина в тка-х мышей с карциномой Эрлиха зависит от обеспеченности их [тамином Bj. а). При избыточном его потреблении он равномерно ути-зируется тканями организма и опухолевыми клетками. б). При ограниченном поступлении тиамина с пищей в его симиляции выявляются конкурентные взаимоотношения между ор-нами и злокачественными клетками в пользу последних.

5. Обмен ^С-тиамина- в тканях мышей с карциномой Эрлиха оисходит более интенсивно в сравнении с таковыми у интактных вотных: период оборота меченого витамина в гепатоцитах здо-вых мышей составляет 91 час, а у пораженных опухолью 64 час.

6. Сопутствующий прогрессирующему злокачественному росту аневой дефицит тиамина развивается в результате ускоренной таболитной реализации витамина в клетках карциномы Эрлиха: риод полураспада тиамина в них короче по сравнению с гепа-цитами в 1,5 раза. Всасывание витамина Bj из желудочно-ки-чного тракта при этом существенно не нарушается.

7. Впервые оцределено содержание тиаминтрифосфата в печеные с карциносаркомой Уокер 256 (1,49+0,14 мг/кг ткани, и контроле - 1,37+0,15) и в опухолевой ткани (0,37+0,06) вотных и аденокарциноме желудка у больных (0,095+0,019). Ти-интрифосфат занимает существенное место в метаболизме соб-венно витамина в тканях в период неопластического роста, клетках карциномы Эрлиха или карциносаркомы Уокер 256 по авнению с печенью обмен его интенсифицирован на уровне это-фосфорного эфира. Меченый витамин включается соответствен в тиаминтрифосфат, тиаминпирофосфат и тиаминмонофосфат i 39, 50 и II (опухолевые клетки) и 17, 64, 10% (печень ор-юизма опухоленосителя).

8. Дополнительная витаминизация тиамином обеспечивает >лную нормализацию активности транскетолазы, оксоглутаратде-щрогеназы (печень, почки, мышца), тиаминпирофосфатазы (пещь), повышает содержание тиаминпирофосфата в печени живот-ос с перевиваемыми опухолями.

9. Витамин В j не стимулирует рост экспериментальных о пухлей (саркома 45, карциносаркома Уокер 256, меланома B-I6, фцинома легких Льюиса) и повышает общую резистентность ор-1ниэма, увеличивая выживаемость животных. При совместном юдении тиамина с циклофосфаном или винбластином снижается ►ксическое действие этих препаратов на кроветворение и не срушается при этом их противоопухолевый эффект.

10. Инъекции антиметаболита витамина Bj - окситиамина [вотным с карцино саркомой Уокер 256 вызывают дистрофические рушения структуры опухолевых клеток, торможение активности ■анскетолазы и увеличивают количество патологических мито-в в них. Сочетанное введение окситиамина с сарколизином рмозит рост саркомы 45 и асцитной карциномы Эрлиха на 96% и увеличивает продолжительность жизни животных в 2 раза.

У Т В Е Р Ж Д А ГО" Зав. отдел<ж регуляции обмена веществ К проф.,

У Т В Е Р S Д А Ю" юктор Института биологии з филиала АН СССР,

С.Н.Дроздов

S 1984г.

АКТ внедрении разработки "Специфический метод ранней диагностики Bj-гиповитаминоза"

Мы, нижеподписавшиеся, представители отдела регуляции обмен* юществ АН БССР старший научный сотрудник, кандидат медицинских [аук Требухина Р.В., младший научный сотрудник Туманов В.Н. ,с од-сой стороны, и заведующий лабораторией физиологии пушных зверей [нститута биологии Карельского филиала АН СССР, заслуженный деяте ауки РСФСР и Карельской feP, доктор ветеринарных наук, профессор ерестов В.А., старший научный сотрудник лаборатории, к.б.н. етрова Г.Г., с другой стороны, составили настоящий акт о внедре-ии метода ранней диагностики Bj-гиповиташноза, разработанного в тделе регуляции обмена веществ АН БССР в ходе выполнения научно сследовательской теш J£ 78078463 от 15.12.79 " Изучение взаимо-гношений между опухолями и организмом опухоленосителя в использо ании витамина Bj".

Основные предпосылки и результаты, предлагаемой разработки

Необходимость ранней диагностики Bj-дефицита в организме тшных зверей диктуется присутствием в основном компоненте их радона - рыбе- высокоактивного фермента тиаминазы, расщепляющего намин Bj. Особенно существенное значение имеет обеспеченность ятаминаш беременных и лавирующих самок, испытывающих повышенну] ребность в витаминах. В этот период нередко наблюдается скры-дефицит, характеризующийся отсутствием клинических симптомов, тому гиповитаглинозные состояния обнаруживаются несвоевременно, может привести к нарушению репродуктивных функций животных: личениго количества пустых самок, резорбции эмбрионов и др. и ышенной гибели щенков в подсосный период.

Авитаминозы и гиповиташнозы, возникающие у растущего молодня-способствуют торможению роста, повышенной гибели щенков в пост-альный период и отрицательно влияют на формирование мехового рова, что может привести к значительному экономическому ущербу.

Раннее выявление Bj-недостаточности дает возможность предупре-ь развитие более глубокой стадии авитаминоза и сохранить пого-ье пушных зверей.

Предлагается, наряду с определением активности транскетолазы ГДФ':-эффекта", регистрировать уровень тиашндифосфата в крови наиболее специфического биохимического показателя дефицита лина в организме животных.

Преимущества предлагаемой разработки

Широко используемый для количественного определения тиамин-эсфата в тканях флуорометрический метод требует больших 1честв исследуемого материала ( 20 и более мл ), что создает зделенные трудности при многократном прижизненном исследовании зи. Предлагаемый ферментативный метод- определения уровня тиамин-эсфата требует в десять раз меньшего количества крови ( 2-3 мл): щфичен, высокочувствителен и хорошо воспроизводим. В сочетании 1ределением активности тренскетолазы и "ТДФ-эффекта", предлагав г разработка расширяет возможность наиболее ранней диагностики

3j- недостаточности у пушных зверей, шщую тиаминазу. потребляющих рыбу, содер

Представители Института биологии Карельского филиала АН СССР :

Зав. лабораторией физиологии пушных зверей, заслуженный деятель науки РСФСР и Ка-\ рельской ССР, д.б.н., проф. ^Ю^Р^л^Ф-^- Берестов Ставший научный сотрудник, кандидат биологических наук Г.Г. Петрова

Представители бтдела регуляции обмена веществ АН БССР:

Старший научный сотрудник, кандидат медицинских наук

Р.В. Требухина Младший научный сотрудник fj'fftyiM^ в.Н. Туманов

У т в ш.Отдело: ;1еств АН

АКТ

Утверждаю"

НИИ онкологии и меди-щологии МЗ БССР

И.Г.Жаков г. о внедрении разработки "Метод диагностики тиаминовой недостаточности у онкологических больных"

Мы, нижеподписавшиеся, представители Отдела регуляции обме-i веществ АН БССР старший научный сотрудник, кандидат медицинских 1ук Требухина Р.В., младший научный сотрудник Туманов В.Н., с сной стороны, и представители НИИ онкологии и медицинской радио-)гии МЗ БССР руководитель отделения лабораторных методов диаг-)стики, старший научный сотрудник, кандидат медицинских наук юхорова В.И. и заведующий лабораторным отделением Зенькович Г.А. другой стороны, составили настоящий акт о внедрении "Метода гагностики тиаминовой недостаточности у онкологических больных", )зработанного в Отделе регуляции обмена веществ АН БССР в ходе шолнения научно-исследовательской работы "Изучение взаимоотно-!ний между опухолью и организмом опухолвносителя в использова-1и витамина Bj", номер государственной регистрации 79078463 от >.ХП.79 г.

Основные предпосылки и результаты предлагаемой разработки

Развитие опухоли в организме сопровождается снижением в :анях концентрации тиамина и накоплением кетокислот (метабо-гтный ацидоз). Общепринятый метод определения тиамина неприго-'н для клиники из-за своей трудоемкости и необходимости болыпо-) количества биологического материала для одного анализа, а кон-нитрация кетокислот является косвенным показателем, прямо не $язанным с обеспеченностью организма витамином Bj.

Предлагаемая разработка включает ферментативное определение давня тиаминдифосфата и выявление количества свободной апо-транскетолазы ("ТДФ-эффект") в крови онкологических больных.

Ферментативный метод определения тиаминдифосфата в крови разработан применительно к онкологической клинике с учетом использования минимального количества (2-3 мл) биологического материала. Параллельно с уровнем кофермента регистрируется по-генциальная активность транскетолазы и "ТДФ-эффект". Высокая чувствительность, хорошая воспроизводимость и специфичность ме-года регистрации тиаминдифосфата в сочетании с определением "ТДФ-эффекта" расширяет возможности диагностики Bj-недостаточ-зости у онкологических больных на любой стадии развития патологического цроцесса и контроля обеспеченности организма тиами-зом в период комплексного лечения больных.

Представители НИИ онкологии

Преимущества предлагаемой разработки и медицинской радиологии МЗ БССР:

Руководитель отделения лабораторных методов диагностики,

Старший научный сотрудник

Заведующий лабораторным отде

ЛШи-Р Требухина Р.В. Младший научный сотрудник Туманов В.Н.

Зенькович Г.А.

У т в е р к д а ю" жого государственного \ого Красного Знамени ^института, профессор (<-е— вА.А.Ключарев h/?£cM 1984 г.

У т в е р ж д а ю" Замйв^Этделом регулш обшеизш&т^ш БССР, члеь тофессор иОстровский 4^1984 г.

АКТ об использовании (внедрении) НИР

Мы, ни к е по дпи с авшы е с я, представители Отдела регуляции обмена ;ществ АН БССР старший научный сотрудник Требухина Р.я., с одной :тороны, и заведующий кафедрой биоорганической и биологической [мии, профессор Кухта В.К. и доцент этой кафедры, доктор биологиеских наук Морозкина Т.О., с другой стороны, составили настоящий :т об использовании (внедрении) результатов законченной НИР "Осо

ННости метаболизма тиамина в процессе онкогенеза, выполненной ?аршим научнымЬотрудником Требухиной Р»Б. в Отделе регуляции об-!на веществ АН БССР, в учебномп процессе на кафедре биоорганичесн биологической химии (выписка из протокола заседания кафедры 6 : прилагается).

Данные о необходимости коррекции углеводного обмена при опухоле iM росте в условиях повышенного потребления тканями витамина Bj :пользуются при чтении лекций по разделу клинической биохимии для [ецординаторов и ординаторов ШЖ доцентом Морозкиной Т.О. по те:: "Особенности обмена веществ при опухолевом росте".

Результаты, полученные Требухиной Р.В. при выполнении НИР собенности метаболизма тиамина в процессе онкогенева", позволи-. расширить представление о частных вопросах регуляции обмена ви-ашна Bj и тем самым улучшить качество подготовки выпускаемых шдаалистов.

Предо т аштели кафедры биоорганячеокой и биологической химии f/шнекого медицинского института:

Заведующий кафедрой, профессор Д/У

Ш.К.Кухта доцент кафедры, доктор биологических наук

Т.С.Морозкина представителе! итдела регуляции обмена веществ АН БССР:

Старший научный сотрудник, кандидат медицинских наук

Фч

Р.Б.Требухина

Утверждаю" )р Витебского ордена"Знак Почета" эинарного института имени Октябрьс-эеволюции,профессор

М.С. Жаков 1984 г.

Утверждаю' Зав. Отделом регуляции о( lH БССР,чл.-к< jq$eccop

Островок;

АКТ об использовании ( внедрении) НИР.

Мы, нижеподписавшиеся, представители Отдела регуляции обмена [еств АН БССР старший научный сотрудник, кандидат медицинских нау Мухина Р.В. , с одной стороны, и заведующий кафедрой органическс дологической химии-9 доцент Гидранович В.И. и доцент этой кафедрь шейко А.В., с другой стороны, составили настоящий акт об исполь; ши ( внедрении) результатов законченной НИР " Особенности метабс зма тиамина в процессе онкогенеза", выполненной старшим научным грудником Требухиной Р.В. в Отделе регуляции обмена веществ АН Б( учебном процессе на кафедре органической и биологической химии выписка из протокола заседания кафедры № 5 от 19 марта 1984 года илагается ).

Данные об особенностях обмена тиамина при онкогенезе и его ре ция витаминами и субстратами используется при чтении лекций по к биохимии животных для студентов в разделе " Ферментативные реак участием тиамина ". Новые сведения по изотопному обмену 14 С -ти на применяется при проведении практических занятий по курсу " §э ры, влияющие на скорость реакций замещения ". Результаты экспери itob о влиянии фармакологического препарата окситиамина на показ? ш неокислительных реакций пентозофосфатного пути обмена углевод* активность ферментов, уровень субстратов ) включены доцентом 3. Корнейко в лекцию по курсу " Антиметаболиты - структурно-подо' з ингибиторы,их роль в обмене веществ и перспективы'использована зельском хозяйстве

Использование данных,полученных Требухиной Р.В. при выполнен] ? " Особенности метаболизма тиамина в процессе онкогенеза" позво. расширить представление о частных вопросах регуляции обмена вит. аа Bj и тем самым улучшить качество подготовки,выпускаемых специ зтов.

Представители кафедры Представители Отдела органической и биологи- регуляции обмена веще ческой химии Витебского АН БССР : ветеринарного института:

Заведующий кафедрой , Старший научный сотру доцент у . ник,кандидат медицине

В.И. Гидранович ких наук

Доцент кафедры . Р.В.Требухи фс-Л А'в« Корнейко

УТВЕЕВДАЮ"

Заведующий Отделом регуляции об" БССР, член-кор-ЮСЮ профессор

W/Щй. Островский

1984 ^

УТВЕРВДАЮ"

Ректор Калининского государственного медицинского института, доктор медицинских наук, ?фессор

А.Дунаевский 1984 г.

A I^at---^ggff' об использовании /внедрении/ НИР

Мы, нижеподписавшиеся, представители Отдела регуляции обмена веществ АН БССР, старший научный сотрудник, кандидат мед. наук Требухина Р.Б. с одной стороны и заведующий кафедрой биоорганической и биологической химии профессор Петухов М.И. и старший преподаватель этой кафедры, кандидат биологических наук Ходырева А.Ф., с другой стороны, составили настоящий акт об использовании /внедрении/ результатов законченной НИР "Особенности метаболизма тиамина в процессе онкогенеза", выполненной старшим научным сотрудником Требухиной Р.Б. в Отделе регуляции обмена веществ АН БССР, в учебном процессе на кафедре биоорганической и биологической химии /выписка из протокола заседания кафедры $ ц от 28/1У-84 г.прилагается/. Данные об особенностях обмена тиамина в тканях животных с перевивными опухолями используются при чтении лекций по курсу биохимии животных и человека для студентов в разделах: "Питание - составная часть обмена веществ. Промежуточный обмен углеводов в норме и патологии"*. Результаты экспериментов о защитном эффекте тиамина против угнетающего действия цитостатиков на кроветворение используются старшим преподавателем Ходыревой А.Ф. в лекциях по теме: "Кровь, форменные элементы крови, различные форш анемии".

Новые сведения о влиянии тиамина или его аналога оксити-эмина на активность неокислительных реакций пентозофосфатного 1ути обмена углеводов применяются при проведении практических занятий по курсу "Основы ферментативной кинетики. Использование ингибиторов для изучения механизмов ферментативных эеакций".

Использование данных, полученных Требухиной Р.В. при вы-юлнении BMP "Особенности метаболизма тиамина в процессе он-согенеза", позволило расширить представление о частных вопросах регуляции обмена витамина Bp и тем самым улучшить качество подготовки выпускаемых специалистов.

Получатель: алининскии государственный юдицинский институт, .афедра биоорганической и иологической химии !ав. кафедрой, профессор '

Петухов М.И. тарший преподаватель, андидат биологических

Разработчик:

Отдел регуляции обмена веществ АН БССР, старший научный сотрудник, канднцс^йедицинских наук

WJL. Требухина Р.В.

Ходырева

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ И ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Главной предпосылкой для постановки настоящего исследования зились уже хорошо известные представления о роли тиамина в рефляции ферментных систем пентозофосфатного пути обмена углево->в и ЦГК. ТПФ в составе пируват и оксоглутарат ДГ принимает гастие в окислительном декарбоксилировании ^-кетокислот, явля-дахся одним из основных источников энергии в живой клетке (Ос-ювский, 1975; Кочетов, 1978; Cornack, Denton, 1979). С дру->й стороны,как кофермент транскетолазы тиамин контролирует фун-даонирование ПФЦ, основного источника mdph+ и Р-5-Ф, необхо-[мых компонентов многочисленных биохимических процессов, в том зеле синтеза нуклеиновых кислот (Северин, Степанова, 1973; Lin, jibkoff , 1976; Бирк, Шапот, 1979). Естественно, в этой связи, !о дефицит витамина Bj приводит к нарушению важнейших процес-IB жизнедеятельности организма-опухоленосителя.

Отличительная особенность наших исследований - изучение крушения обмена тиамина в организме животных в динамике развися опухоли. Такая постановка задачи позволила охарактеризовать мен тиамина в тканях животных на различных этапах роста нео-:азмы.

Сопоставление полученных результатов с периодами роста ухпли (глава 3) показывает, что неоплазма специфическим обозом изменяет обмен тиамина в тканях. На самых ранних стадиях l3вития опухоли в организме из тканей исчезает свободный тиа-;н, затем его коферментная форма - ТПФ, снижается экскреция тамина с мочой, а к периоду интенсивного развития опухолево-роста падает активность пируватдегидрогеназы и транскето-зы.

Полученные нами результаты уточняют и детализируют уже известные данные и более точно характеризуют состояние обмена -тиамина по стадиям роста опухоли. Следует,однако,отметить, что снижение активности пируват ДГ в тканях организма хозяина, как правило, рассматривается в связи с повышенной способностью раковых клеток к гликолизу (Шапот, 1982), недостаточным обеспечением тканей кислородом ( Vaupei , 1977), нарушением энергетического обмена (Морозкина, 1979; Holt , 1983). Одним из механизмов угнетения окисления пирувата в тканях считается усугубляющийся в процессе развития опухоли дефицит витаминов группы В-предщественников коферментов ЦЦГ комплекса (Саввов, Карпов, 1978; Величко, 1980). Введение тиамина частично восстанавливает активность ПДГ. Однако окончательная трактовка полученных результатов в связи с обеспеченностью организма и самого фермента коферментом весьма сложна. С одной стороны,показано, что ПДГ присутствует в митохондриях в активной и неактивной форме ( Walajtis,Gotteaman,Williamson » 1974). А ежедневное в/б введение тиамина 1фысам повышает содержание ТПФ в митохондриях печени, уменьшает чувствительность ПДГ комплекса к ингибирова-нию АТФ, сохраняя его в активной форме, и тем самым способствует усилению окисления пирувата В ЦГК ( Hommes, Berger, Luit, 1973). С другой стороны, необходимо также иметь в виду, что активность ПДГ комплекса кроме всего прочего зависит и от других кофакторов (Саввов, Карпов, 1978).

Представленные в литературе данные об активности транскетолазы неоднозначны. Наиболее противоречивы результаты об активности транскетолазы в крови больных с различными, по гистологическому строению, видами опухолей (Нижегородова, 1970; Бродская, Янскен, Кудрявцева, 1979), а использование "ТПФ-эф$екта" в качестве индикаторного теста Bj-недостаточности при опухолевом росте встречается в единичных работах (Aksoy» Basu t Brient , 1980). Активность транскетолазы служит специфическим а четким показателем обеспеченности организма витамином Bj. Снижение активности транскетолазы при исключении из корма витамина 3j обусловлено недостаточным обеспечением ее коферментом. Величина ТПФ-эффекта характеризует количество свободной ненасыщен-юй ТПФ транскетолазы (Полыцак, Рыбина и др., 1978). Указанный эффект больше 15% рассматривается как признак легкой "биохимической", около 30% - умеренной, больше 40% - тяжелой недоста-рочности тиамина. Оценка обеспеченности организма тиамином по штивности транскетолазы должна, однако, учитывать ряд обстоятельств. Известно, что возраст эритроцитов оказывает опреде-1енное влияние на энзиматическуго активность (Сукристик, Лука-шк, Доста, 1978). В молодых эритроцитах более высокий уровень штивности транскетолазы по сравнению со зрелыми клетками (Спи-эичев, Исаева, 1957). Возможно^именно эти обстоятельства могут злужить объяснением противоречивости литературных данных по активности транскетолазы в крови больных с опухолями различных юкализаций (Погосов, Спиричев, 1974; Бродская, Янскен, Кудрявцева, 1979; Aksoy, Basu, Brient , 1980).

Наличие свободной апотранскетолазы в тканях при Bj-недоста-гочности широко дискутируется в литературе и поэтому поводу высказывается диаметрально противоположные взгляды (Воскобоев, Гриценко, Грушник, 1978). В наших экспериментах активность рранскетолазы с добавлением ТПФ" in vitro " и без него в крови, з тканях, в опухолевых клетках определялась параллельно с регистрацией уровня ТПФ в этих же биологических образцах у животных при различной обеспеченности их витамином Bj (главы 3,4,5). Сопоставление результатов между собой, а так же с литературны- ' ми данными позволяет высказать следующие соображения. Диагностика Bj недостаточности у животных с перевивными опухолями и у больных с аденокарциномой желудка по результатам исследований крови должна включать определение активности транскетолазы с ТПФ, добавленным " in vitro " и без него, с одновременным учетом уровня ТПФ в этой биологической жидкости, так как количество кофермента в крови снижается на самых ранних стадиях развития опухоли в организме. ТПФ-эффект возрастает по мере снижения уровня ТПФ в крови (глава 3, таблица 5). В тканях животных-опу-холеносителей (главы 3,4,5) отсутствует определенная закономерность между снижением активности транскетолазы и величиной ТПФ-эффекта. Торможение активности транскетолазы в сердце (глава 3, таблица 5) с одновременным приростом ТПФ-эффекта дает возможность оспаривать высказывания тех авторов, которые отрицают наличие свободной апотранскетолазы в тканях (Виноградов, Струмило, Мандрик, 1978).

Подтверждением этому могут служить опыты с определением уровня ТПФ, активности транскетолазы и ТПФ-эффекта в карцино-саркоме Уокер 256 (рис. 35).

Количество ТПФ непрерывно уменьшается в печени животных-опухоленосителей и в карциносаркоме, в последней уровень кофермента к 12 дню снижается более круто. Одновременно в опухоли отмечается резкий дефицит кофермента и избыток апоферментных форм транскетолазы, выявляемых в опытах in vitro при добавлении ТПФ. Оценивая полученные данные, можно сказать, что стимуляция транскетолазы искусственно добавляемым ТПФ характерная для неc.2f2

Рис. 35. Содержание ТПФ в печени и опухолевой ткани у животных с карциносаркомой Уокер 256.

Содержание апотранскетолазы (заштрихованные столбики] в опухолевых клетках (в усл.ед.). По оси ординат -содержание ТПФ (мг/кг ткани) в печени (I) ив опухоли (2). По оси абсцисс - сутки роста опухоли, достатка кофермента в опухоли все время нарастает, свидетельствуя о росте его дефицита. На основании выявленного

ТПФ-стимулирупцего эффекта и обратных корреляционных связей между уровнем ТПФ и ТПФ-эффекта в опухолевых клетках (рис. 36) можно высказать предположение, что последние обеспечены большим запасом резервных апоферментных белков, которые не используются раковой клеткой в силу недоступности или отсутствия необходимых кофакторов, в частности ТПФ. тле тпф эффект

0цб1 601

О*

ОЯ

20 с. г\ь тпфэмт

ТПФ

I 11

Рис. 36. Содержание ТПФ и ТПФ-эффектов опухолевой ткани у крыс с карциносаркомой Уокер 256.

По оси ординат - содержание ТПФ (мг/кг ткани) и ТПФ-эффект (%).

По оси абсцисс - сутки роста опухоли. Коэффициент корреляции на 4-ые сутки г=-0,89, р <: 0,001; на 12 сутки г=-0,77, р<0,01. Резерв апотранскетолазы в опухолевых клетках - один из способов улавливания малых количеств ТПФ и смещения равновесия в общем балансе распределения тиамина в организме в пользу опухоли. Повышенный захват тиамина может быть связан с метаболическими потребностями злокачественных клеток, высокая митотическая активность и пластическое обеспечение роста которых сопряжены с интенсивным потреблением глюкозы (Шалот, 1975, 1979, 1980). Исходя из приведенных данных, можно ожидать, что возрастающий дефицит тиамина в опухоли будет способствовать большей напряженности обмена тиамина в тканях организма и неполной реализации коферментных функций ТПФ, связанных с энергообеспечением (пируват, оксоглутарат ДГ и смежных с ними реакций). Параллельно с обеднением организма-опухоленосителя витамином Bj в тканях и крови нарастает концентрация кетокислот (глава 3, таблица б). Метаболитный ацидоз представляет собой сложный процесс. Он может быть обусловлен, с одной стороны, интенсивным гликолизом В раковых клетках ( Holroyde, Axelrod et al. , 1979; Шалот, 1980), а с другой - сопутствующим канцерогенезу - постепенно развивающимся эндогенным тканевым дефицитом витамина Bj (Дьяч-кова, Шамаева, Платонова и др., 1972). Витаминный характер ацидоза наиболее четко выявлен нами у 1фыс с карциносаркомой Уокер 256 в терминальный период развития опухоли (глава 3, таблица б). Активность пируватдегидрогеназы в печени опухолевых крыс заторможена на 80$ (р<0,001), а уровень лактата в крови в 4 раза (р<"0,001) возрастает.

Ежедневное введение этим животным тиамина в дозе 12,5 мк/кг, эквивалентной лечебной для человека, оказывает нормализующее действие на пируватдегидрогеназу печени крыс-опухоленосителей (восстановление активности на 43$, р<0,001) и значительно снижает (на 67$, р< 0,001) уровень лактата в крови, (рис. 3). Таким образом,можно сказать, что если для высокого уровня лакта-та при онкогенезе существуют много других причин, не связанных прямо с тиамином (Розанов, Торбинский, 1969; Карпов, Двужильная, Саввов и др., 1975; Островский, Величко, Якубчик, 1984), то дополнительное введение витамина способно очень эффективно влиять на этот показатель нормализующим образом. Возможно^ витамин активирует очень заметно ПДГ " in vivo что не видно по результатам исследования максимальной in vitro активности фермента. Нормализация "ракового" обмена веществ при добавлении витамина Bj получена также и на суспензии клеток куриного эмбриона: добавление тиамина в среду в 3 раза повышает потребление клетками Og и на I/I7 снижает образование молочной кислоты ( Warburg, Geisaler, Lorens , 1970).

Результаты проведенных нами исследований указывали, что наиболее глубокое (50-70$) торможение активности ТПФ-содержащих ферментов при канцерогенезе наблюдается в терминальной стадии. Оставался открытым вопрос, являются ли нарушения обмена тиамина результатом влияния опухоли на метаболизм собственно тиамина в тканях, или нарушения процессов его ассимиляции из кишечника при нормальном поступлении с пищей.

Т А

Для решения возникших вопросов поставлены опыты с С-ти-амином (глава 4). Установлено, что развитие асцитной опухоли Эрлиха в организме не нарушает всасывание тиамина в желудочно-кишечном тракте. Уровень метки в плазме мышей с опухолью через один час после внутрижелудочного введения ^^С-тиамина не отличается от величин, полученных у интактных животных. При опреде

14 лении метки через 24 часа после введения С-тиамина, когда последний уже специфически связан с белками (Островский, 1971), присутствует в тканях в основном в фосфорилированной форме йабина, 1959) и в качестве ТПФ-кофермента обеспечивает функции тиаминзависимых ферментов (Кочетов, 1972; Островский, 1974), 14 концентрация С-тиамина в тканях интактных животных и мышей с асцитной карциномой Эрлиха после в/ж введения препарата оказалось на 30-40% р^0,001 ниже, чем при п/к введении меченого витамина. Результаты указанных опытов говорят о том, что парентеральное применение витамина предпочтительнее в тех случаях, когда за короткое время необходимо улучшить обеспеченность организма тиамином,как это имеет место у больных с различными формами рака (Дзгобко, I960; Исмагулова, Погосов, Спиричев, 1971).

При изучении межтканевого распределения С-тиамина нами впервые показано, что метка активно поглощается опухолевыми клетками из асцита (рис. 3;7). Сравнительный анализ включения К,

С-тиамина в ткани организма и опухолевые клетки в зависимости эт периода развития асцитной карциномы Эрлиха указывает, что три п/к введении меченого витамина мышам в дозе, эквивалетной (изиологической потребности организма в нем, опухоль не ухудша-зт потребление витамина тканями организма-хозяина (глава 4, таблица 14). Несмотря на усиленную ассимиляцию витамина Bj шухолевыми клетками^используемая доза оказывается достаточной, ггобы обеспечить витамином и ткани организма. При пониженном ;набжении организма тиамином (содержание животных на Bj- гипоштаминозном корме) или введении I мкг "^С-тиамина выявляются юнкурентные взаимоотношения между опухолью и тканями опухоле-юсителя в захвате меченого витамина (рис. 38).

Рис. 37. Содержание метки в асците и опухолевых клетках после

14 введения 10 мкг/мышь С-тиамина мышам на 5-ые сутки после инокуляции им опухоли.

По оси ординат - содержание С-тиамина в асците

2 —2 (1-Ю" мг/л) и в опухолевых клетках (2-10 мг/кг). п 14

По оси абсцисс - часы после введения С-тиамина.

У мышей,лучше обеспеченных витамином, печень захватывала больше метки, чем опухоль. На явно гиповитаминозном фоне уровень метки (на грамм ткани) в печени и опухоли сближается, т.е. можно полагать;что печень и опухоль в этой ситуации становятся равноправными (и заметно конкурирующими) потребителями витамина.

201510 5 0

Рис. 38. Связывание ^С-тиамина в опухолевых клетках (I) ив печени (2) у мышей с асцитной карциномой Эрлиха в условиях содержания их на синтетической диете с дополнительной витаминизацией.

С-тиамин введен в дозе I мкг/мышь.

14 2

По оси ординат - содержание С-тиамина (10"" мг/кг).

По оси абсцисс - ежедневная доза тиамина на мыль (в мкг) Захват меченого витамина опухолевыми клетками (рис. 38) существенно снижает включение тиамина в ткани организма-опухоле-носителя. Однако следует отметить, что определение динамики депонирования меченого тиамина после однократного введения не отражает действительного прироста витамина Bj в ткани, так как включение его метаболитов в ультраструктуры клеток может сопровождаться вытеснением немеченого витамина (Розанов, 1978). Регистрация метки не дает также ответа о путях превращения меченого соединения в ТШ и другие фосфорные эфиры (моно- и трифосфаты) и обеспечения функции коферментных витаминов в тканях организма. Такое кажущееся на первый взгляд несоответствие было выявлено в экспериментах по учету поеда-емости корма интактными мышами и с АКЭ. Потребление корма (а значит и витамина) в группах интактных мышей и с подкожно ино-кулированной опухолью Эрлиха было одинаковым (рис. 7) , а уровень ТПФ в печени мышей - опухоленосителей достоверно снижен (р <0,001). Полученные результаты указывают на нарушение обмена ТПФ в процессе онкогенеза. Впервые в динамике роста опухоли изучалась (глава 4) обмениваемость ^С-тиамина, возможность включения последнего в фосфорные эфиры тиамина и функциональная способность тиаминовых ферментов. Скорость обновления эндоген

14 ного немеченого витамина на экзогенно введенный С-тиамин во всех тканях животных с карциномой Эрлиха выше по сравнению с интактными мышами (рис. 12).

14

Включение С-тиамина в ТПФ и насыщенность тиаминовых ферментов коферментом оценивалось по регистрации уровня ТПФ в печени и определению активности транскетолазы и ТПФ-эффекта" пи-руват и оксоглутарат ДГ в тканях. В опухолевых клетках всегда присутствует апотранскетолаза, количество которой постепенно возрастает в зависимости от стадии опухолевого процесса (от 40 п,о 150%, р <0,001). Этот феномен можно рассматривать как мехашзм, обеспечивающий более эффективный захват ТПФ опухолью в /щерб тканям организма опухоленосителя. Уровень ТПФ в печени !ретерпевает фазовые колебания (спад-подъем-спад) и зависит эт стадии опухолевого процесса. Терминальный период роста опухоли характеризуется снижением концентрации кофермента и торможением активности тиаминовых ферментов. Возникновение тиами-яовой недостаточности в условиях раковой патологии в свете изложенных выше фактов можно рассматривать, как одну из форм системного действия опухоли на организм (Шалот, 1975, 1982). Такое действие четко проявляется и по некоторым другим показате

14 пям. Так, период полураспада С-тиамина в печени опухоленосителей падает до 49, против 63 час., р<0,001,в контроле. Круго-14 оборот С-тиамина при этом снижается в 1,5 раза (р<0,001). Расстройство тиаминового обмена у животных - опухоленосителей прежде всего сказывается на внутриклеточной концентрации ТПФ, уровень которого контролируется тиаминпирофосфокиназой и ти-аминпирофосфатазой. Выявленные (глава 5, таблицы 38, 39) фазовые колебания концентраций кофермента в печени животных (карцинома Эрлиха, Уокер 256) обусловлены компенсаторным изменением активности ферментов синтеза и распада ТПФ. Обратная корреляционная связь между уровнем ТПФ и активностью тиаминпирофос-фатазы ( г =-0,72, р<0,05) и прямая между концентрацией кофермента и активностью тиаминпирофосфокиназы (г =0,8, р<.0,05) указывает на регуляторную роль этих ферментов в перераспределении витамина между тканями организма и опухолью, направленную на экономию кофермента в клетке (рис. 39). Таким образом, результаты экспериментов указывают, что злокачественный рост

С. Щ

Рис. 39. Уровень ТПФ (мг/кг), активность тиаминпирофосфокиназы (нмоль ТПФ/кг/сек) и тиаминпирофосфатазы (мкмоль ТПФ/кг/сек) в печени интактных мышей и с АКЭ. По оси ординат - I-уровень ТПФ; 2, 3 - активность ферментов. По оси абсцисс - сутки роста опухоли. А - уровень ТПФ в печени интактных мышей и с АКЭ (I). Б - активность тиаминпирофосфокиназы в печени интактных мышей и с АКЭ (2). В - активность тиаминпирофосфатазы в печени интактных мышей и с АКЭ (3). ** г=+0,80 р<0,05 между I и 2. * г=-0,72 р<0,05 между I и 3. рост вызывает заметное снижение уровня кофермента в ткани печени, которое обусловлено, с одной стороны,торможением активности тиаминпирофосфокиназы, с другой - возрастающей активностью ти-аминпирофосфатазы. Указанные механизмы наиболее заметно выявляются у опухолевых животных, содержащихся на Bj авитаминозной диете (глава 5,таблицы 38, 39), на ранних стадиях гиповитаминоза. В терминальный период развития опухолевого процесса прогрессирующий дефицит витамина Bj приводит к значительному снижению уровня ТПФ в тканях (10% от исходных величин), торможению активности пируват- и оксоглютаратдегидрогеназ на 70-80% и транскетолазы на 50%, что указывает на отсутствие регуляторной роли ферментов синтеза и распада ТПФ в поддержании уровня кофермента в клетках.

Отдельного рассмотрения заслуживает вопрос о включении *^С-тиамина в его фосфорные эфиры (моно-, ди- и трифосфаты) в печени животных опухоленосителей и в опухолевых клетках. К настоящему моменту в литературе нет работ по этому направлению. В единичных работах 60-х годов показано увеличение концентрации ТТФ в зоне проростания семян, в распускающихся почках и проли-фирирующих клетках дрожжей ( Yusa , 1961, 1962).

ТА

Динамика включения С-тиамина в его фосфорные эфиры в печени мышей с АКЭ и крыс с КС-Уне отличается от величин, полученных у интактных животных и составляет в относительных процентах: ТДФ- (61-75%), ТТФ - (13-30%), ТМФ - (5-10%). Закономер

35 ность включения s тиамина в ТТФ, ТДФ, ТМФ печени крыс, морских свинок и кроликов уже исследовалась (Розанов, 1978; Халму-радов, 1982). Используя различные методы идентификации фосфорньи эфиров тиамина,авторы убедительно показали, что наиболее непостоянной фракцией фосфорных эфиров тиамина является ТТФ, уровень которого находится в прямой зависимости от поступления

35 витамина Bj в организм. Увеличение дозы иньекцируемого -тиамина повышает включение последнего и в ТТФ (Розанов, 1978).

Результаты наших экспериментов выявляют аналогичную ситуацию

14 повышения включения С-тиамина в ТТФ печени мышей с АКЭ, предварительно содержавшихся на Bj-гиповитаминозной диете, (рисунок 20). Образование ^С-ТТФ из иньекцируемого ^С-тиамина в опухолевых клетках зависило от обеспеченности организма тиамином, от дозы вводимого меченного соединения. В условиях содержания мышей на Вт-гиповитаминозном рационе в опухолевых клетках

14 обнаруживалось до 40$ С-ТТФ (рис. 22), что заметно выше включения метки в ТТФ в печени.

Полученные данные говорят о том, что высокий уровень ТТФ в опухолевых клетках при бластоматозе может иметь принципиальное значение, Например, на основании уже имеющихся данных (Воскобоев, Аверин, 1981) можно допустить, что включение витамина в ферментные системы опухоли опосредуются через ТТФ. Косвенным подтверждением могут служить данные (глава 5) с низкой (следовые количества) активностью тиаминпирофосфокиназы в опухолевых клетках карциномы Эрлиха.

Дополнительная витаминизация животных исследовалась в связи с изучением действия тиамина на рост опухоли. Введение витамина Bj или его коферментной формы ТПФ в дозах, эквивалетных физиологической потребности животных или десятикратно превышающих их, - не стимулируют роста экспериментальных опухолей (карцинома легких Льюис, саркома 45, меланома B-I6, карциносаркома 256), продляет среднюю выживаемость животных и увеличивает резистентность организма к этому заболеванию, выраженную в отсутствии явлений диарреи, слепоты (глава 6). Более того, инъекции витамина нормализовали ряд показателей (пируват, лактат, рис. 2, 3) в организме животных-опухоленосителей. Таким образом, наши результаты подтверждают целесообразность дополнительной витаминизации больных.

Оценивая перспективы практического использования витамина Bj в онкологической практике следует также сказать и об опосредованных витаминных эффектах ("некоферментное действие тиамина") Нами установлено, что тиамин, введенный совместно с винбласти-ном, циклофосфаном, защищает кроветворение от токсического действия этих препаратов не снижая их противоопухолевый эффект (глава 6).

Конкурентные взаимоотношения опухоли и организма в использовании витамина (главы 4 и 5), торможение роста опухоли при авитаминозе Bj (глава 6) и некоторые уже имеющиеся в литературе (Дьячкова, Шамаева и др., 1968) данные могут рассматриваться как достаточно убедительное обоснование для изучения возможности применения антиметаболитов тиамина в качестве средств,, тормозящих рост опухоли или средствлпотенцирующих эффекты известных лечебных противоопухолевых препаратов. Действительно^введение антивитамина крысам с КС-3 на протяжении 5 суток с интервалом в 6 часов (суточная доза - 20 мг/кг массы) тормозит (глава 6) активность транскетолазы на 70%, а массу опухолевой ткани на 43%. Окситиамин вызывает дистрофическое изменение клеточной структуры опухоли, увеличивая при этом количество патологических митозов на 37%, Не обладая самостоятельно 100%-цитотокси-ческим действием^ окситиамин; может быть использован как "Модификатор", изменяющий чувствительность опухолевых клеток к различным внешним воздействиям (лучевая терапия, гормоны, цито-статики). Примером могут быть результаты по сочетанному использованию окситиамина с сарколизином. Совместное введение этих препаратов красам с саркомой 45 увеличило продолжительность жизни опухолевых животных в 2 раза и торможение роста опухоли на 90%.

Таким образом, в проведенном исследовании в динамике роста различных опухолей охарактеризовано состояние обмена тиамина у лабораторных животных. В отличие от имевшихся в литературе разрозненных, противоречивых и часто весьма неполных данных, обмен тиамина охарактеризован по более широкому кругу показателей с привлечением новых, ранее не исследованных тестов. Решена важная биологическая и прикладная проблема - раскрыт механизм взаимоотношений опухоли и организма в использовании витамина Bj.

В результате проведенных исследований установлено, что между организмом и опухолью четко выявляются 3 типа взаимоотношений:

1. При избыточном поступлении витамина Bj в организм тиамин равномерно утилизируется тканями организма и опухолевыми клетками без ущерба для обеих сторон.

2. При ограниченном поступлении тиамина с пищей развиваются конкурентные взаимоотношения между тканями и опухолевыми клетками в захвате витамина Bj в пользу последних.

3. В случае тотального исключения из пищевого рациона ви-гамина Bj нарушается обмен тиамина в тканях организма и в опухолевых тканях.

Избыточное введение тиамина не стимулирует рост опухоли, благоприятно сказывается на общей резистентности организма и снимает частично побочное действие цитостатиков. Из полученных результатов следует, что тиамин широко может использоваться в энкологической практике, поскольку он восстанавливает функцию нарушенных при бластоматозе ТПФ-содержащих ферментов, повышает сниженный уровень тиамина и его коферментной формы и частично снижает метаболический ацидоз. Нарушение обмена тиамина прирос-?е опухоли можно рассматривать как одну из форм системного действия опухоли на организм, успешно доказанную в отношении глюкозы, гормонов, нуклеотидов (Шапот, 1979), но не рассматривавшеюся ранее в отношении витаминов. В механизме действия опухоли на обмен тиамина можно рассматривать два этапа.

Во-первых, расстройство энергетического обмена (Морозкина, 1979; Шапот, 1982; Edstrom, Bennegard et al. ; 1982), обуславливающее дефицит АТФ в клетках, приводит к нарушению фосфорили-рования тиамина в тканях организма-опухоленосителя. Дефицит ТЩ, возникающий на этой основе,сопровождается постепенным выключени-эм специфических коферментных функций витаминов в составе пиру-ват-, оксоглютаратдегидрогеназ и транскетолазы.

Во-вторых, быстрая обмениваемость С-тиамина в опухолевых клетках создает конкурентно-способную ситуацию в ассимиляции тиамина в условиях его недостаточного поступления.

На основании обобщения и анализа полученных результатов были предложены и уже внедрены в практику НИР, учебный процесс следующие рекомендации:

1. Разработан высокочуствительный специфический ферментативный метод определения тиаминпирофосфата, требующий в 10 раз меньше крови для индикации в ней кофермента по сравнению с известным флуориметрическим методом. Уменьшение количества исследуемого материала очень важно при многократном прижизненном исследовании крови на предмет выявления скрытого дефицита витамина Bj из-за присутствия в корме тиаминазы у пушных зверей самок в период беременности и лактации. Предложенный метод нашел применение в лаборатории физиологии пушных зверей Института биологии Карельского филиала АН СССР (акт внедрения от 5 января 1984 года).

2. Унифицирован применительно к онкологической клиники с учетом минимального количества (2 - 3 мл) крови ферментативный метод определения тиаминпирофосфата в крови онкологических больных. Высокая чувствительность, хорошая воспроизводимость и специфичность метода регистрации кофермента в сочетании с определением "ТШ эффекта" в крови расширили возможность диагностики Bj-недостаточности у онкологических больных на любой стадии развития патологического процесса. Метод используется в отделении лабораторных методов диагностики НИИ онкологии и медицинской радиологии МЗ БССР (акт внедрения от 16 января 1984 года).

3. Данные о необходимости коррекции углеводного обмена при опухолевом росте в условиях повышенного потребления тканями витамина Bj используются при чтении лекций по разделу клинической биохимии для спецординаторов и ординаторов в Минском государственном медицинском институте в разделе: "Особенности обмена веществ при опухолевом росте" (акт внедрения от 2 декабря 1983 года).

Новые сведения по изотопному обмену -тиамина применяются при проведении практических занятий по курсу "Факторы, влияющие на скорость реакций замещения" в Витебском ветеринарном институте на кафедре органической и биологической химии (акт внедрения от 19 марта 1984 года).

Результаты экспериментов о том;что тиамин обладает защитным эффектом против угнетающего действия цитостатиков на кроветворение, используются при чтении лекций по курсу биохимии животных и человека для студентов в разделе: "Кровь, форменные элементы крови, различные формы анемии" в Калининском государственном медицинском институте (акт внедрения от 28 апреля 1984 года).

Все перечисленные акты внедрений прилагаются.

Библиография Диссертация по биологии, доктора биологических наук, Требухина, Раиса Васильевна, Гродно

1. Абартене Д.Ю. Влияние алкилирующих препаратов и витаминов группы В на некоторые показатели функции печени у здоровых и опухолевых крыс. В кн.: Поиски и изучение противоопухолевых, противовоспалительных и мутагенных веществ. Вильнюс, 1977, с.314-316.

2. Аг ат о в а А.И. Изменение изозимного состава и активности лактатдегидрогеназы в процессе развития асцитной опухоли Эрлиха. Вопр. мед. химии, 1975, т.21, №3, с.276-281.

3. Александров Н.Н., ФрадкинС.З. Пути повышения безопасности применения метода управляемой гипергликемии перекисления в комплексном лечении злокачественных опухолей. - В кн.: Актуальные проблемы онкологии, радиологии. Минск, 1973, т.З, с.245-247.

4. АрчаковА.И. Микросомальное окисление. М.: Наука, 1975. -323 е., ил.

5. Асатиани B.C. Ферментные методы анализа. М.: Наука, 1969. -740 е., ил.

6. БаранЛ.К. Кислород и витамины в онкологической практике. Киев: Здоровье, 1973. -152 е., ил.

7. Бекир-Заде, Мухина Э.С., Горожанек а я Э.Г. Активность транскетолазы в гепатомах и тканях мышей с гепатомами. В кн.: Лентозофосфатный путь превращения углеводов, его механизмы и регуляция: Тез. докл. 4 Всесоюз. симпозиума. Калинин, 1984, с.20.

8. Белоус о ваА.К. Биохимические подходы к химиотерапии рака. Л.: Медицина, 1965. -395 е., ил.

9. БерезовТ.Т. Обмен аминокислот нормальных тканей и злокачественных опухолей. М.: Медицина, 1969. -236 е., ил.

10. Б и р к Р.В. Об особенностях дыхательной системы нормальных тканей с разной чувствительностью к алкилирующим агентам. -Здравоохранение Советской Эстонии, 1966, №3, с.184-185.

11. Б и р к Р.В. Изоферменты глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы в печени и гепатомах мышей. Вопр. мед. химии, 1974, т.20, №3, с.298-302.

12. Б и р к Р.В. Регуляция окислительного пути пентозофосфатного цикла при канцерогенезе печени и в гепатомах. Вестн. АМН СССР, 1977, МО, с.84-87.

13. Бирк Р.В., Ш а п о т B.C. Активность дегидрогеназ и транс' кетолазы в трансплантируемых гепатомах мышей. Биохимия,1979, т.44, №5, с.892-896.

14. Б л и н о в В.А., Шапот B.C. Роль глюконеогенеза в поддержании нормогликемии в организме животных с перевиваемыми опухолями. Вопр. онкологии, 1974, т.20, №12, с.60-65.

15. Богданов Г.Н., Ш м о н и н а В.М., Э м а н уэ л ь Н.М. Кинетические закономерности роста перевиваемых гепатом с различной степенью дифференцировки. - Бюл. экспер. биол. и медицины, 1973, т.78, №3, с.87-89.

16. Б о й к о С.С., Цейтлин А. А. Расщепление фосфорных эфиров тиамина в норме и при адреналиновом миокардите. -Вопр. мед. химии, 1970, т.16, в.1, с.81-83,

17. БостонЛ.Я. Активность транскетолазы эритроцитов как показатель обеспеченности организма тиамином. Вопр. мед. химии, 1975, т.21, №4, с.339-341.

18. Бродская Н.И., Я н с к е н Л.И., Кудрявцев а Г.В. Активность глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы и транскетолазы в крови нейроонкологических больных до операции и в динамике послеоперационного периода. Вопр. мед. химии, 1979, т.25, с.687-690.

19. Б у т о в В.И. Баланс витаминов Bj и Bg и антитоксическая функция печени в условиях экспериментальной терапии тиофос-амидом. Фармакология и токсикология, 1973, №3, с.216-220.

20. ВеличкоМ.Г. Взаимосвязь пирувата и лактата печени различных видов грызунов-опухоленосителей с гиповитаминозом Bj. В кн.: Теоретические и практические аспекты изучения питания человека: Тез. докл. науч. конф. М., 1980, с.124.

21. ВеличкоМ.Г. К вопросу об источниках лактата в организме животных с опухолью. В кн.: Вторая областная конференция молодых ученых: Тез. докл. Гродно, 1983, с.98.

22. Взаимосвязь между обменом тиамина и рибофлавина в норме и при патологии в эксперименте. / Л.А.Сийле, Л.Ю.Пране, З.Х. Заринып и др. В кн.: Тиамин П, материалы симпозиума, Гродно, 1972, с.ИЗ.

23. ВилейшисА.Ю. Влияние витамина Bj на рост карциномы Эрлиха. В кн.: Труды Каунаского мед. института. Каунас, 1957, т.5, с.267-268.

24. ВилейшисА.Ю. Изменение веса печени мышей при росте карциномы Эрлиха (под влиянием питания). В кн.: Труды Каунаского мед. института. Каунас, 1961, т.10, с.155-165.

25. Б. Виноградов В.В. К вопросу о функциональных пулах тиаминдифосфата в печени. Изв. АН ЕССР, сер.; биол. наук, 1976, №2, с.74-77.

26. Виноградов В.В., Струмило С.А., Манд-р и к К.А., Островский Ю.М. Изучение тиамин- и ти-аминдифосфатсвязыващей способности гиалоплазматической фракции печени крыс. Вопр. мед. химии, 1978, т.24, №3, с.383-389.

27. Ю. Виноградов В.В., Струмило С.А., Механизм активации тиаминпирофосфокиназы печени крыс ионами магния. Биохимия, 1979, т.44, №1, с.50-56.

28. Я.Виноградов В.В., М а н д р и к К.А., С т р у м и -л о С.А., М ацю к С.К. О механизмах активации транскетолазы печени Bj-гиповитаминозных крыс введением тиамина. -Биохимия, 1979, №5, с.868-875.

29. Влас о в аН.А, Побочное действие некоторых цитостати-ческих препаратов на органы пищеварения. В кн.: Морфология. М., 1974, №1, с.70-73.

30. Влияние тиамина на развитие экспериментальных опухолей и биохимические аспекты его применения в клинике злокачественных новообразований. /В.Б.Спиричев, Л.В.Дьячкова, Т.СЛсмагулова и др. В кн.: Тиамин П, материалы симпозиума, Гродно, 1972, с.115.

31. Влияние тиамина, рибофлавина и никотиновой кислоты на развитие злокачественных опухолей в эксперименте. /Л.А.Сийле,

32. Л.Ю.Иране, З.Х.Заринып и др. В кн.: Теор. и практ. вопр. питания. Вильнюс, 1977, 147-148.

33. Воскобоев А.И. Сравнительное исследование тиаминпи-рофосфокиназ (КФ 2.7.6.2.) из пивных дрожжей и печени крыс. В кн.: Актуальные проблемы витаминологии: Тез. докл. Все-союз. конф. М., 1978, т.1, с.39-40.

34. Воскобоев А.И., Островский Ю.М. Изучение проницаемости тиаминдифосфата в гепатоциты крыс. Вопр. мед. химии, 1983, т.29, №4, с.42-44.

35. Воскобоев А.И., Аверин В. А. Содержание свободного и связанного тиаминдифосфата в митохондриях печени крыс при различной обеспеченности организма тиамином. -Вопр. мед. химии, 1981, т.27, №2, с.239-243.

36. Воскобоев А.И., Аверин В.А., Острове-к и й Ю.М. Депонирование "^С-тиамина в субклеточных фракциях печени белых крыс. Вопр. мед. химии, 1981, т.27, №3, с.366-371.

37. Воскобоев А.И., Островский Ю.М., Гриценко Э.А., Аверин В.А. Активность транскетолазы крови и ТДФ-эффект как показатели обеспеченности организма тиамином. Вопр. мед. химии, 1981, т.27, №5, с.690-693.

38. Воскобоев А.И., Гриценко Э.А., Г р у ш -ник В.В. О характере связывания и обмениваемости тиаминди-фосфата в транскетолазе. В кн.: Лентозофосфатный путь превращения углеводов и его регуляция: Тез. докл. Всесоюз. симпозиума. Гродно, 1978, с.35-36.

39. В у л л и Д. Учение об антиметаболитах. М.: Иностранная литература, 1954, -304 е., ил.

40. Гайсенюк Л.А., Пащенко Н.С. Состояние иммунитета у больных с гипоплазиями кроветворения различного генеза. Эксперим. и клинич. радиология. Киев, 1982, №16, с.59-63.

41. Г а р и н A.M. Современные тенденции развития клинической химиотерапии опухолей. -Вопр. онкологии, 1983, т.24, №1, с.93-98.

42. Гарин A.M., Переводчикова Н.И. Проблемы современной химиотерапии опухолей. Вестн. АМН СССР, 1982, №12, с.55-60.

43. Георгадзе Г.Е. Влияние витаминов Bj и Bjg на индукцию злокачественных опухолей у хомяков. Вопр. онкологии, I960, т.6, №10, с.54-57.

44. Герштейн Е.С., Ворновицкая Г.И., Ш ап о т B.C. Кинетика превращений тша в гепатомах итканях нормального и опухолевого организма. Биохимия, 1978, т.43, №7, с.1303-1311.

45. Г л ем ж а А. А. Пируватдегидрогеназа: механизм действия и структура. Успехи биологической химии, 1969, т.10, с. 89119.

46. Головацкий И.Д., Подильчак М.Д. О взаимосвязи пентозного цикла и гликолиза у животных, пораженных карциномой Брауна Пирс. - В кн.: Труды 8 Международного противоракового конгресса: Тез. докл. М., 1963, т.2, с.133-134.

47. Г о л о в а ц ь к и й Д. ,Колотницький А.Г., Красневич А.Я. Деяк механ зми регуляц обм ну ву-глевод в за участю НАДФ. Укр. б ох м. журн., 1977, т.49, №3, с.35-38.

48. ГоловацкийИ.Д. Регуляторные механизмы активности отдельных НАДФ- и НАД-зависимых дегидрогеназ. В кн.: Биохимия животных и человека. Киев, 1978, в.2, с.39-43.

49. ГорбачЗ.В. Пентозофосфаты и обмен нуклеиновых кислот. В кн.: Пентозофосфатный путь превращения углеводов и его регуляция: Тез. докл. науч. симпозиума. Гродно, 1978, с.43.

50. Горбач З.В., М а г л ы ш С.С.,К у б ы ш и н В.Л. функционирование окислительной цепи пентозофосфатного пути в печени крыс при развитии недостаточности витамина Bj у животных. Вопр. мед. химии, 1983, т.29, №5, с.36-40.

51. Горбач З.В., Кубышин В.Л. Неокислительные пути обмена фосфопентоз в печени. В кн.: Пентозофосфатный путь превращения углеводов, его механизм и регуляция: Тез. докл. 4 Всесоюз. симпозиума. Калинин, 1984, с.6-7.

52. Горенштейн Б.И., Пузач С.С., Островский Ю.М. Сравнительная оценка двух методов определения активности пируватдегидрогеназы в тканях при различных способах получения авитаминоза Bj. Вопр. мед. химии, 1975, т.21, №3, с.328-331.

53. Горожанская Э.Г., Ш а п о т B.C. Общая активность и изоферментный спектр лактатдегидрогеназы сыворотки крови онкологических больных. Вопр. онкологии, 1980, т.26, №1, с.55-57.

54. Г о р ожанская Э.Г., Ш а п о т B.C. Изоэнзимный спектр лактатдегидрогеназы лейкозных клеток человека при остром лейкозе. Вопр. онкологии, 1973, т.19, №3, с.18-29.

55. Горожанская Э.Г., Любимова Н.В., Ш ап о т B.C. Особенности углеводного обмена опухолей в связи их прогрессией. Вестн. АМН СССР, 1977, №3, с.6-И.

56. Греб енскаяН.И. Тиаминдифосфатаза (тиаминпирофос-фатаза, КФ 3.6.1.6.). В кн.: Островского Ю.М. Кокарбокси-лаза и другие тиаминфосфаты. Минск, 1974, с.89-104.

57. Г у д э З.Ж., Л я п и с М.А. Некоторые показатели обмена тиамина у больных раком желудка. Врачебное дело, 1970, №4,с.19-21.

58. Де йл а 3., М ацекК. Жидкостная колоночная хроматография. -М.: Мир, 1978, т.1, 510 е., ил.

59. Д з ю б к о Н.Я. Влияние витаминов группы В (Bj, Bg, РР, Bg, Bjg) на развитие опухолей у экспериментальных животных. -Врачебное дело, I960, №2, с.151-154.

60. ДзюбкоН.Я. Содержание тиамина в печени крыс при действии проникающей радиации. Вопр. онкологии, 1971, т.17, №6, с.67-69.

61. Д у н а е в В.В., Бутов В.И. Функциональная способность некоторых систем организма в условиях опухоленосительства. -В кн.: Биология и фармакология опухолевого процесса. Рязань, 1974, т.78, с.31-41.

62. Ду н а е в В.В. Влияние ряда витаминных и гормональных препаратов на интенсивность роста злокачественных новообразований. В кн.: Биология и фармакология опухолевого процесса. Рязань, 1974, т.48, с.22-31.

63. Дьчкова Л.В., С п и р и ч е в В.Б. Витамин Bj и злокачественный рост. В кн.: Материалы национальной конф. по ви таминологии. Яссы, 1967, с.30-35.

64. Дьячкова Л.В., Шамаева Е.М., Платонов а Г.Н., Спиричев В.Б. Содержание тиамина в тканях, активность транскетолазы и развитие экспериментальных опухолей при различной обеспеченности организма тиамином. -Вопр. питания, 1972, т.31, 12, с.42-47.

65. ДэглиС.,НикольсонД. Метаболические пути. -М.: Мир, 1973. -310 е., ил.

66. Е л и с е е в а Г.Д. Флуориметрическое определение тиамина, кокарбоксилазы и рибофлавина в биологических объектах. В кн.: Витамины. Киев, 1953, в.1, с.38-57.

67. Ельцина Н.В., Энгельгард В.А. Цути вовлечения углеводов в пластический обмен раковой клетки. Биохимия, 1958, т.23, с.486-489.

68. Е щ е н к о Н.Д., Путилина Ф.Е., В и л к о в а В.А. Особенности обмена пирувата в митохондриях различных тканей. В кн.: Митохондрии. Аккумуляция энергии и регуляция ферментативных процессов. М., 1977, с.27-32.

69. Зайцев В.А., Морозкина Т.С. Энергетический обмен при спонтанной регрессии перевиваемых опухолей. -Вопр. онкологии, 1980, т.26, №7, с.46-51.

70. Западнюк И.П., Западнюк В.И., 3 а х а -р и я Е. А. Лабораторные животные. Киев: Вища школа, 1974, - 300 е., ил.

71. ЗариньЗ.Х. Обмен тиамина у хомяков с экспериментальной саркомой. В кн.: Онкотропизм вирусов. Рига, 1969,с.165-171.

72. ЗариньЗ.Х. Некоторые показатели обмена тиамина у хомяков, которым привита экспериментальная саркома. Изв. АН Латвийской ССР, 1968, №3, с.15-18.

73. ВО. ЗариньЗ.Х. Экспериментальные исследования о возможном антибластическом действии окситиамина. В кн.: Современное состояние химиотерапии опухолей: Тез. докл. I Всесоюз. конф. по химиотерапии опухолей. Рига, 1968, с.400-404.

74. Зиматкина Т.И., Моргачева Н.И., 0 п а -р и н Д.А. Антагонисты витамина Bj на основе окситиамина и дикарбоновых кислот жирного ряда. В кн.: Антивитамины в регуляции обмена веществ (эксперимент, клиника): Тез. докл. научч. симпозиума. Гродно, 1983, с.71.

75. Золотникова Г.П., Дорофеев В.Н. Защитное действие некоторых витаминов и аминокислот от цитотоксичес-кого эффекта фосфамида и акрекса. Фармакология и токсикология, 1978, т.41, №2, с.186-188.

76. Изучение биологической активности некоторых новых алкилсуль-фидов окситиамина. Д.И.Зиматкина, Б.И.Горенштейн, М.Г.Величко и др. В кн.: Вопросы токсикологии и санитарной химии синтетических материалов: Тез. докл. науч. конф. М., 1981, №3, с.297-299.

77. Исмагулова Т.С., П о г о с о в a B.C., С п и р и -ч е в В.Б. Обмен витамина Bj у больных раком гортани. -Вопр. мед. химии, 1971, т.17, №1, с.76-81.

78. ИсмагуловаТ.С. Содержание витамина Bj и активность транскетолазы в опухолевой ткани и нормальной ткани при раке гортани. Обмен витамина Bj у больных раком гортани в динамике комбинированного лечения. Здравоохранение Казахстана, 1970, №6, с.37-39.

79. Кавецкий Р.Е. Взаимодействие организма и опухоли. -Киев: Навукова думка, 1977. -236 е., ил.

80. Кавецкий Р.Е., Казьмин С.Д. Активность ферментов гексозомонофосфатного шунта на различных этапах митоти-ческого цикла клеток рака Эрлиха. ДАН СССР, 1974, т.217, S3, с.730-732.

81. Карпов Л.М., Двужильная Е.Д., С а в в о в В.И.,

82. АнисимовВ.Д. Проницаемость мембран митохондрий изорганов белых крыс с привитой карциносаркомой Уокер А к ли35поевой кислотеи.тиамину, меченым по . Вопр. онкологии, 1975, т.21, №8, с.69-73.

83. Карпов Л.М., Розанов А.Я., С а в в о в В.И. Влияние карциномы Уокера на распределение в организме белых крыс 35-липоевой кислоты. Вопр. онкологии, 1973, т.19, №12, с.57-61.

84. КаткувенеЮ.И. Активность гуаниндезаминазы после применения цитостатиков, цистафоса и витаминов группы В здоровым и опухолевым животным. В кн.: Поиски и изучение противоопухолевых, противовоспалительных и мутагенных веществ. Вильнюс, 1977, с.335-342.

85. КильдемаЛ.А. Изоферменты гексокиназы печени при канцерогенезе. Вопр. мед. химии, 1975, т.21, №2, с.195-200.

86. КирикуцеИ., ОлиничиК. Цитогенетическая характеристика карциносаркомы Уокер и её метастазов. Вопр. онкологии, 1972, т.18, №3, с.60-63.

87. Киселева Е.Г., Солякова Т.Н., Коновал о-в а Н.П. Кинетические закономерности развития асцитной карциносаркомы Уокер. Эксперим. онкология, 1980, т.2, с.43-45,

88. Кицманюк З.Д., ДербинаМ.М., Телешов а В.А. Содержание тиамина и рибофлавина у больных с опухолевыми и воспалительными заболеваниями верхней челюсти. - Стоматология, 1973, №3, с.91-92.

89. КицманюкЗ.Д. О содержании тиамина и рибофлавина в организме больных раком гортани. В кн.: Научные труды Иркутского мед. института, 1968, в.91, с.95-98.

90. Ко зло вскаяЛ.В., Мартыно ваМ.А. Учебное пособие по клиническим лабораторным методам исследования. -М.: Медицина, 1975, -352 е., ил.

91. Конь И.Я., Кондратьева И.И. Изучение обеспеченности здоровых детей и подростков школьного возраста тиамином путем определения активности транскетолазы и ТДФ-эф-фекта в крови. Вопр. питания, 1982, №3, с.29-33.

92. Кора надпочечников и тиамин. Виноградов В.В., Маццрик К.А., Струмило С.А. и др. Вопр. питания, 1976, №2, с.15-17.

93. КочетовГ.А. Структура и функция транскетолазы. В кн.: Структура и функция ферментов. М., 1972, в.1, с. 89149.

94. К о ч е т о в Г.А. Практическое руководство по энзимологии. М.: Высшая школа, 1980. -272 е., ил.

95. Кочетов Г.А. Тиаминовые ферменты. М.: Наука, 1978.-232 е., ил.

96. Кравченя Н.А., Забродская С.В., Д о с -т а Г.А., Островский Ю.М. Антивитаминная активность фосфорилиро ванных производных окситиамина. Вопр. питания, 1974, №1, с.40-43.

97. Кравчук Р.И., Никитин B.C., Островский Ю.М. Митотическая активность клеток регенерирующей печени крыс при окситиаминовом Bj-гиповитаминозе. ДАН БССР, сер. биол. наук, 1983, т.27, №9, с.850-852.

98. КречетоваГ.Д. К вопросу об апотомическом и дихотомическом расщеплении углеводов в некоторых нормальных и опухолевых тканях. В кн.: Углеводы и углеводный обмен в животном и растительном организмах. М., 1959, с.189-195.

99. Кубарева М.М., П о к а с Л.В., Киселев С.О. Содержание пирувата и лактата в крови больных при комбинированном лечении рака легкого, пищевода, желудка. Мед. радиология, 1974, №4, с.52-57.

100. КуторгаВ.В. Современные взгляды на роль витаминов в патогенезе, терапии и профилактике опухолевых заболеваний. В кн.: Вопросы противораковой борьбы. Вильнюс, 1964, с.202-204.

101. К у х т а В.К., Ч е щ е в и к А.Б., Селицкая А.А. Изучение содержания молочной и пировиноградной кислот и активности лактатдегидрогеназы в эритроцитах больных митральным стенозом. Вопр. мед. химии, 1973, т.19, №4, с.431-435.

102. Ларионов II. Химиотерапия злокачественных опухолей. М.: Медицина, 1962. - 463 е., ил.

103. НО. ЛенинджерА. Биохимия. М.: Мир, 1976, -960 е., ил.

104. JI e у с Н.Ф. Уровень биосинтеза и распада тиаминдифосфа-та в субклеточных частицах печени белых крыс. Укр. био-хим. журн., 1967, т.39, №3,, с.308-310.

105. Л е у с Н.Ф. Роль митохондрий в обмене фосфорных эфиров тиамина в клетках печени. В кн.: Митохондрии. Материалы симпозиума Биохимические функции в системе клеточных орга-нелл. М., 1969, с.151-155.

106. ИЗ. Л е у с Н.Ш. Интенсивность обмена фосфорных эфиров тиамина в субклеточных структурах печени. В кн.: Витамины. Киев, 1974, в.7, с.87-93.

107. Л у ц ю к Н.В., Морозова А.К. Витамин Bj и имь/унитет имеющиеся данные и вопросы, подлежащие дальнейшему изучению. Вопр. питания, 1975, №5, с.56-61.

108. Малаховский А.Я. Применение дифосфотиамина для уменьшения токсического действия хлорамбуцила, бензотефа, сарколизина и лофенала. В кн.: Вопросы противораковой борьбы. Каунас, 1964, с.138-142.

109. Манцевичуте-Эрингене Е.В. Упрощенный математико-статистический метод в исследовательских работах. Патол. физиол. и эксперим. медицина, 1964, №4, с. 71-77.

110. М е ц л е р Д. Химические реакции в живой клетке. В кн.:

111. Биохимия. М., 1980, т.2, с.201-300.

112. Монахов Н.К. О функциональной гетерогенности митохондрий нормальной и опухолевой клетки. Молекулярная биология, 1967, т.1, №1, с.114-122.

113. МорозкинаТ.С. Расстройство энергетического гомео-стаза в опухолевом организме и его возможные механизмы. -Латол. физиол. и эксперим. медицина, 1979, Я?2, с.65-68.

114. МорозкинаТ.С., Шапот B.C. Содержание аденило-вых мононуклеотидов и дыхательное фосфорилирование в митохондриях крыс с перевитыми опухолями. Бюлл. эксперим. би-ол. и медицины, 1976, т.81, №6, с.727-729.

115. МохнацкаяИ., ШафранскийР. Активность транскетолазы в тканях голубей с авитаминозом Bj.1956, т.З, №4, с.539-541.

116. Н е р к ар ан я нА.В. Изоферментный спектр лактатдегид-рог.еназы в тканях мышей при развитии асцитной карциномы Эр-лиха. Молодой науч. работник. Естеств. н., 1977, №2/26, с.115-118.

117. Нестерова В.И., Чеботарева М.А. Содержание и активность ферментов в клетках крови при лейкозе. -Вопр. мед. химии, 1976, т.22, №6, с.732-735.

118. НижегородоваА.И. Состояние пентозофосфатного цикла в форменных элементах крови у больных лейкозами.в кн.: Материалы 4 биохимической конференции Прибалтийских республик и Белорусской ССР. Вильнюс, 1970, с.261-262.

119. Никитин B.C., Кравчук Р.И., Острове-к и й Ю.М. Изменение митохондриального аппарата миоцитов паппилярных мышц при окситиаминовом Bj-авитаминозе. ДАН

120. БССР, 1982, т.26, №5, с.458-461.

121. Никулин А.А., Дунаев В.В. Роль прямых и опосредованных реакций в механизме противоопухолевого эффекта тиофосфамида. В кн.: Биология и фармакология опухолевого процесса. Рязань, 1974, с.65-70.

122. Новицкий В.В., Гольдберг Е.Д., А н ь ш ак о в а Н.А. Резервные возможности кроветворной ткани у животных в период восстановления морфологического состава крови после введения карминомицина. Антибиотики, 1981, т.26, №12, с.901-906.

123. НьюсхолмЭ., Старт К. Регуляция метаболизма. -М.: Мир, 1977. -407 е., ил.

124. Обмен витамина Bj при экспериментальной саркоме и его влияние на злокачественный рост. /JI.В.Дьячкова, Е.М.Шамаева, Г.Н.Платонова и др. В кн.: Материалы 6 научной сессии Всесоюзного НИИ витаминологии МЗ СССР. М., 1967, с.120124.

125. Об обмене тиамина и его биологически активных производных. /Р.В.Чаговец, А.А.Рыбина, Ю.М.Пархоменко и др. В кн.: Тиамин. Обмен, механизм действия. М., 1978, с.5-25.

126. ОгайС.В., Богатырев А.Г. Экскреция с мочой тиамина й рибофлавина у онкологических больных в предоперационном периоде. Вопр. онкологии, 1974, т.20,№9, с.16-19.

127. Определение активности транскетолазы и ТДФ-эффекта как показатель обеспеченности тиамином. /В.Б.Спиричев, Н.В.Бла-жеевич, В.А.Исаева и др. Вопр. питания, 1973, №6, с.6-И.

128. Определение тиаминосоединений в моче для диагностики в поликлинических условиях злокачественных новообразований. /Р.Э.Кимерал, Е.Н.Сырескина, Т.С.Томбаева и др. Вопр.онкологии, 1978, т.24, №10, с.82-83.

129. Островский Ю.М. Тиамин. Минск: Беларусь, 1971. -100 е., ил.

130. ОстровскийЮ.М. Антивитамины в экспериментальной и лечебной практике. Минск: Беларусь, 1973. -175 е., ил.

131. ОстровскийЮ.М. Кокарбоксилаза и другие тиамин-фосфаты. Минск: Наука и техника, 1974. - 263 е., ил.

132. Остро вскийЮ.М. Активные центры и группировки в молекуле тиамина. Минск: Наука и техника, 1975. -424 е., ил.

133. ОстровскийЮ.М. Экспериментальная витаминология. -Минск: Наука и техника, 1979. -552 е., ил.

134. Островский Ю.М., Величко М.Г., Я к у бч и к Т.Н. Пируват и лактат в животном организме. Минск: Наука итехника, 1984. -173 е., ил.

135. Островский Ю.М., Воскобоев А.И, Гриценко Э.А., Г р у ш н и к В.В. Содержание свободного и связанного тиаминдифосфата в гиалоплазме печени крыс при различных Вj-авитаминозных состояниях. Прикл. биохимия и микробиология, 1979, т. 15, Jf6, с.728-734.

136. Островский Ю.М., Черникевич И.П., Воскобоев А.И., ШелленбергерА. Взаимодействие аналогов тиамина с дрожжевой тиаминпирофосфокиназой.рн. биоорган, химии, 1977, т.З, №8, с1083-Ю89.

137. Оценка, оксигенации злокачественных опухолей железистого типа человека. /И.Ю.Кирьянов, Ю.Х.Саркисян, В.П.Харченко и др. Мед. радиология, 1979, т.24, №10, с.50-54.

138. Пархоменко Ю.М., Рыбина А.А. Регуляция активности дегидрогеназ -кетокислот в организме животных. В кн.: Биохимия животных и человека. Киев, 1978, в.2, с.58-71.

139. Пархоменко Ю.М., Рыбина А.А., Грушков-с к а я Р.А. Динамика содержания тиамина, его моно-, ди- и трифосфорных эфиров в печени эмбрионов цыплят. В кн.: Актуальные проблемы витаминологии: Тез. докл. Всесоюз. конф. М., 1978, т.1, с.125-126.

140. Пархоменко Ю.М., Рыб на А.А., П о л ь щ а к Р.Б. Розд лення фосфорных эф р в т ам ну на кат онообм н-ному сефадекс . Укр. б ох м. журн., 1976,, т.48, №3,с.384-387.

141. Переводчикова Н.И. Клиническая химиотерапия опухолевых заболеваний. М.: Медицина, 1976. -200 е., ил.

142. П и н ч у к В.Г., Балицкий К.П. Некоторые пути взаимодействия организма и опухоли. Вопр. онкологии, 1982, т.28, №5, с.18-22.

143. Плецитый Д.Ф., Фомина В.Г., Плецитый

144. К.Д. О влиянии массивных доз витамина Bj на некоторые механизмы естественного иммунитета. Патол. физиол. и экспе-рим. терапия, 1975, №3, с.67-69.

145. Плецитый К.Д. Витамины и естественный иммунитет. -Вопр. питания, 1981, №3,с.3-10.

146. Погосянц Е.Е., Киселева Н.С. Опухолевые штаммы, подцерживаемые в Институте экспериментальной и клинической онкологии АМН СССР. Вопр. онкологии, 1963, т.9, №8, с.103-106.

147. ПокровскийА.А. Метаболичнские аспекты фармакологии и токсикологии пищи. М.: Медицина, 1979,. -184 е., ил.

148. ПокровскийА.А. Биохимические методы исследования в клинике. М.: Медицина, 1969. -652 е., ил.

149. ПрохороваМ.И. Методы биохимических исследований. -Л.: Ленинградский университет, 1982. -272 е., ил.

150. Поляк Н.Д., Б у л к и н а З.П. Роль витаминов группы В в лечении опухолей. В кн.: Канцерогенез, методы диагностики и лечение опухолей. Киев, 1968, с.74-78.

151. П о л ь щ а к Р.Б., Рыбина А.А., Халмурад ов А.Г., Пархоменко Ю.М. Исследование содержания тиамина и его коферментной формы, а также активности ТДФ-за-висимых ферментов в онтогенезе крыс. Укр. биохим. журн., 1978, т.50, №2, с.226-229.

152. РозановА.Я. Динамика метаболизма тиамина, его биологическое значение и зависимость от функций пищеварительной системы. В кн.: Тиамин. Обмен, механизм действия. М., 1978, с.27-85.

153. Розанов А.Я., Торбинский A.M. Влияние некоторых витаминов и кортизона на окисление пирувата в карциноме Уокер-256, имплантированной в легочную ткань белых крыс. Вопр. мед. хирургии, 1969, т.15, №2, с.147-150.

154. РозановА.Я. Определение тиамин^трифосфата в животных тканях. Биохимия, 1966, т.31, №4, с.815-820.

155. Р о к и ц к и й п.Ф. Биологическая статистика. Минск: Вы-шейшая школа, 1973. -328 е., ил.

156. Роль пируватдегидрогеназы и АТФ-цитрат(про-3 )лиазы в инги-бировании биосинтеза жирных кислот никотиновой кислоты. /С.И.Щушевич, С.В.Пожарун, А.И.Фоменко. Укр. биохим. журн., 1982, т.54, №5, с.530-534.

157. РубенчикБ.Л;0 возможном механизме усиления гликолиза в печени крыс при канцерогенезе. Биохимия, 1974,т.39, М, с.740-746.

158. Рыбина А.А., Пархоменко Ю.М., Ч а у с о в -с к и й Т.И. О внутриклеточной локализации и регуляции образования фосфорных эфиров тиамина, синтеза тиаминдифос-фатсодержащих ферментов и их активность. В кн.: Витамины. Киев, 1974, вып. 7, с.74-87.

159. Рыбина А.А. Распределение тиамина в субклеточных фракциях печени крыс в норме и после дополнительного его введения. Укр. биохим. журн., 1969, т.41, №5, с.475-479.

160. Р э к е р Э. Биоэнергетические механизмы. М.:Мир, 1967. -276 е., ил.

161. С а в в о в В.И., Карпов Л.М. Окисление пирувата иосфиксация липоевой кислоты гомогенатами опухоли молочной железы. Вопр. онкологии, 1978, т.24, №8, с.97-99.

162. С а в в о в В.И., Карпов Л.М. Проницаемость мембран35митохондрий из органов крыс с карциномой Уокер 256 к ^ липоевой кислоте. В кн.: Биохимия митохондрий. М., 1976, с.159-161.

163. Савицкий И.В., Л е у с Н.Ф. О некоторых причинахнарушения коферментной функции витамина Bj при перевиваемой опухоли. Вопр. онкологии, 1968, т.14, №11, с.105-106,

164. С а л я м о н Л.С. Рак и дисфункция клетки. Л.: Наука, 1974. -319 е., ил.

165. Северин С.Е., Виноградов А.Д. Методы практической биохимии. М.: Мир, 1978. -260 е., ил.

166. Северин С.Е., Степанова Н.Г. Лентозофосфат-ный путь превращения углеводов в ткани сердца (регуля-торная роль Э-4-Ф). ДАН СССР, сер. биол. наук., 1974, №3, с.416-424.

167. Северин С.Е., Степанова Н.Г. Изучение биосинтеза пентозофосфатов в мышце сердца и роль эритрозо-4-фосфата в этом процессе. Биохимия, 1973, т.38, №3, с. 583-588.

168. СеверинС.Е. Внутриклеточный обмен углеводов и биологическое окисление. В кн.: Химические основы процессов жизнедеятельности. М., 1962, с.25-30.

169. Семе'некая Е.М., Абакелия Ц.И. .Ларионова Н.Г., Ц о м а я И.С. Влияние некоторых витаминов на развитие и течение экспериментального лейкоза у мышей. Сакартвелос ССР мецниеребата Академиис моабе. Сообщ. АН Грузинской ССР, 1964, т.33, №2, с.461-468.

170. С и й л е Л.А., С т р а у м е А.К. Изучение обмена некоторых витаминов группы В и витамина С в процессе развития злокачественных опухолей. В кн.: Вопросы противораковой борьбы. Вильнюс, 1964, с.198-199.

171. СийлеЛ.А. К вопросу об обеспеченности организма раковых больных витаминами группы В. В кн.: I биохим. конф.

172. Прибалтийских республик и Белорусской ССР: Тез. докл. Рига, I960, с.128-130.

173. Скулачев В.П. Аккумуляция энергии в клетке. М.: Наука, 1969. -440 е., ил.

174. Смирнов М.И. Витамины М.: Медицина, 1974. -495 е., ил.

175. С о ф ь и н а З.П., С ы р к и н а А.Б. (СССР), Г о л -динА.,КляйнА. (США). Экспериментальная оценка противоопухолевых препаратов в СССР и США. М.: Медицина, 1980. -296 е., ил.

176. СпиричевВ.Б. Молекулярные основы некоторых авитаминозов. В кн.: Ореховича В.Н. Молекулярные основы патологии. М., 1966, с.220-268.

177. Спиричев В.Б., Исаева В.А. Изменение активности транскетолазы в процессе созревания эритроцитов. Вопр. мед. химии, 1967, т.13, №5, с.544-545.

178. Спиричев В.Б., Б а р а ш е в Ю.И. Врожденные нарушения обмена и функции витаминов. В кн.: Витамины и реактивность организма. М., 1978, с.44-55.

179. Старостенко A.M. Содержание тиамина в организме больных раком гортани в зависимости от распространенности процесса и метода лечения. й$урн. ушных, носовых и горловых болезней, 1963, №6, с.13-17.

180. Степанова Н.Г., Северин С.Е. О роли транскетолазы в неокислительных реакциях пентозофосфатного пути в нормальной и гипертрофированной сердечной мышце. Биохимия, 1972, т.37, №5, с1048-Ю57.

181. СтрумилоС.А. О роли субстрата во взаимодействии пи-руватдегидрогеназного комплекса надпочечников с тиаминпиро-фосфатом. Изв. АН БССР, сер. биол. наук, 1982, №1, с.102-104.2

182. СтрумилоС.А. Участие Са в регуляции активности оксоглутаратдегидрогеназного комплекса из коры надпочечников быка. Укр. биохим. журн., 1983, т.55, №4, с.415-419.

183. СтрумилоС.А., Таранда Н.И., Виноград о в В.В. Кооперативный характер взаимодействия аденозин-дифосфата с оксоглутаратдегидрогеназным комплексом коры надпочечников. ДАН БССР, 1983, т.27, №3, с.269-271.

184. Струмило С.А., Таранда Н.И., Виноград о в В.В. Особенности регуляции оксоглутаратдегидрогеназ-ногоь комплекса надпочечников и аденозиндифосфатом. Биохимия, 1982, т.47, №5, с.724-732.

185. Струмило С.А., Таранда Н.И., Виноградов В. В. О роли АТФ в регуляции оксоглутаратдегидрогеназного комплекса коры надпочечников. Вопр. мед. химии, 1982, т.28, №4, с.59-61.

186. С т р у м | л а С.А., Т а р а с а у Ю.А., В i н а г р а -д а у У.В. Некаторыя механ'омы уплыву вiтамiну РР на абмен тиамин дыфасфату. Весц) АН БССР, сер. б'|ял. навук, 1975, №1, с.62-65.

187. Сукристик В.В., Л у к а ш и к Н.К., Д о с т а Г.А. Активность транскетолазы в эритроцитах разного возраста при избытке и недостатке тиамина в организме крыс. В кн.: Актуальные проблемы витаминологии: Тез. докл. В сесоюз. конф. М., 1978, т.1, с.171.

188. Т ерасЛ.Э., Л ондМ.Э. Активность ферментов обмена глюкозо-6-фосфата в ткани гепатом различной скорости роста. Вестн. АМН СССР, 1977, №10, с.82-84.

189. Токсикологическое изучение окситиамина. /Лукиенко П.И., Бушма М.И., Сушко Л.И. В кн.: Антивитамины в регуляции обмена веществ (эксперимент, клиника), Гродно, 1983, с.28.

190. ТорбинскийА.М. Ферментативная активность опухолевой ткани при ране легкого. В кн.: Вопросы легочной хирургии: Тез. докл. науч. конф. Львов, 1968, с.51-53.

191. ТорбинскийА.М. Обмен пиро виноградной кислоты у больных раком легкого. В кн.: Актуальные вопросы клинической и экспериментальной медицины. Одесса, 1969, с.109-III.

192. Т о ц к и й В.Н., Халмурадов А.Г. Биохимические аспекты транспорта тиамина. Укр. биохим. журн., 1980, т.52, №1, cIIO-112.

193. ТруфановА.В. Биохимия витаминов и антивитаминов. М.: Колос, 1972, -328 е., ил.

194. X а й л о в а Л.С., Ф е й г и н а М.М., Северин С.Е. Некоторые свойства пируватдегидрогеназы. В кн.: Структура и функция ферментов. М., 1973, т.2, с.249-277.

195. Халмурадов А.Г., Т о ц к и й В.Н., Ч а г ов е ц Р.В. Мембранный транспорт коферментных витаминов икоферментов. Киев: Навукова думка, 1982. - 280 е., ил.

196. ХмелевскийЮ.В. Обмен тиамина и активность тиаминовых ферментов при экспериментальном инфаркте миокарда. -в кн.: Витамины при сердечно-сосудистых заболеваниях: Тез. докл. науч. симпозиума. М., 1969, с.67-69.

197. ХоррекерБ., ХайятГ. Г^ти углеводного обмена в здоровых и опухолевых клетках. В кн.: Современные проблемы биохимии. М., 1961, с.362-365.

198. ЧерномордикА.Е. 0 содержании изоэнзимов лактатде гидрогеназы в ткани раковой опухоли и полипов толстой кишки. Вопр. онкологии, 1982, т.28, №8, с.60-64.

199. Ш а п о т B.C. Биохимические аспекты опухолевого роста. М.: Медицина, 1975, -304 е., ил.

200. Ш а п о т B.C. Опухоль и организм. Эксперим. онкология, 1979, т.1, S2, с.16-24.

201. Ш а п о т B.C. Прогрессия опухоли и организм. Вопр. онкологии, 1980, т.26, №3, с.103-109.

202. ШапотВ.С. О некоторых генетических аспектах неоплазии. Архив патологии, 1981, т.63, №2, с.5-13.

203. ШапотВ.С. О молекулярно-генетических основах неопластического превращения клетки. Патол. физиол. и эксперим. терапия, 1982, №6, с.10-22.

204. Ш а п о т B.C. Белки и опухолевый рост. Вестн. АМН СССР, 1982, №3, с.22-29.

205. Ш о н к аИ.О. О значении пентозного цикла в медицине. -Чехословацкое мед. образование, I960, вып.4, с.309-311.

206. Эмануэль Н.М. Кинетика экспериментальных опухолевых процессов. М.: Наука, 1977. -416 е., ил.на иностранных языках:

207. Acidose lactique au cours dune leucemic aigue. / M. Marty, J. P. Yernant, H. Rochant, et al. Aon. med. interne., 1975, vol. 126, N 2, p. 115-120.

208. A k s о у M. The effect of thiamin and thiamin pyrophosphate on action of 5-fluorouracil on nucleic acid synthesis. Cancer, 1981, vol. 11, N 1, p. 41-54.

209. A k s о у M., В a s u Т. К., В r i e n t J., D i с k-e r s о n J. W. T. Thiamin status of patients treated with drug combinations containing 5-fluorouracil. Eur. J. Cancer, 1980, vol. 16, N 8, p. 1041-1045.

210. Arany I.,Rady P.,Kertai P. Regulation of glycolysis and oxygen consumption in lymph-node cells of normal and leukaemic mice. Brit. J. Cancer, 1981, vol. 43, N 6, p. 804-808.

211. В a m 3 i M. S. Changes in hepatic and erythrocyte trans-ketonase activity and thiamine concentration of liver in experimental deficiency of water soluble vitamins. Int. J. Vit. Nutr. Res., 1972, vol. 42, p. 184-189.

212. В a m j i M. S. Regulation of hepatic transketolase activity of thiamin. Ind. J. Biochem. Biophys., 1973» vol. 10, N 4, p. 290-291.

213. Banerjee S.,Banerjee A. K., R о у S. С. Activities of some enzymes of pentose phosphate pathway of malignant cervix uteri during various stages of malignant growth. Ind. J. Biochem., 1966, vol. 3, N 1, p. 24-25.

214. Barankiewicz J.,Henderson J. F.

215. Determination of ribose 1-phosphate in ascites tumor cells. Biochem, 1977, vol. 17, N 1, p. 45-53.

216. Barchi R.L., В r a u n P.E. Thiamine triphosphatase in the nervous system. Biochim. Biophys. Acta, 1972, vol, 255, N p. 402-407.

217. В a s u Т.К., А к s о у M.,Dickerson J.W.T. Effects of 5-fluorouracil on the thiamin status of adult female rats. Chemotherapy, 1979, vol. 25, N 2, p. 70-76.

218. В a s u Т.Е. Significance of vitamins in cancer. Oncology, 1976, vol. 33, N 1, p. 183-187.

219. В a s u Т.К., Dicker son J.W.T. The thiamin status of early"cancer patients with particular reference to those with breast and bronchial carcinomas. Oncology, 1976, vol. 33, H" 5-6, p.250-252*

220. В a s u Т.К., Dickerson J.W.T., Raven R.W., Williams D.C. The thiamine status of patients with cancer as determined by the red cell transketolase activity. Int. J. Vitam. and Nutr. Res., 1974, vol. 44, N 1, p. 53-58.

221. Belt J.A., Th о m a s J.A., Buchsb aum R.N., R а с к e r E. Inhibition of lactate transport and glycolysis in Ehrlich ascites tumor cells by bioflavonoids. -Biochemistry, 1979, vol. 18, N 16, p. 3506-3510.

222. Bergmeyer H.U. Methods of en^yma^ic analysis. -New York London, 1965, - 790 p.

223. Berman K.,Fishman R.A. Thiamine phosphate metabolism and possible coenzyme-independent functions of thiamine in brain. J. Neurochem., 1975, vol. 24, H" 3, p. 457-465.

224. Biochemical analyses of the beriberi patients. / M. Kuri-yama, R. Yokomine, H. Arima, et al. Vitamins, 1978, vol.52, N 2, p. 83-87.

225. Б i г Ъ е с к M.S.O., Wheatley D.N. An electronmicroscopic study of the invasion of ascites tumor cells into the abdominal wall. Cancer Res., 1965* vol. 25, p. 490497.

226. Blackmore P.F., Willi a m s J.F. Estimation of pentose-5-phosphate in the presence of heptulose and he-xose-phosphates by the orcinol method. Int. J. Biochem., 1974, vol. 5, p. 343-348.

227. В 1 e у e r W.A. Neurologic sequelae of methotrexate and ionizing radiation. A new classification. Cancer Treat. Repts., 1981, vol. 65» N 1, p. 89-98.

228. Block J.B. Lactic acidosis in malignancy and observations on its possible pathogenesis. Ann. N. Y. Acad. Sci., 1974, vol. 230, p. 94-102.

229. Bonsignore A., Fontremoli S., F о r n -aini G., G r a z i E. Heptoformation non oxydative dans des extracts enzymatiques de foie de rat. Boll. Soc. Chim., 1957, vol. 39, N 2, p. 77-88.

230. Brand K., Deckner К., M u s i 1 J. Enzyme pattern of the pentose phosphate pathway in ascites tumor cells and the effect of nucleoside triphosphates on its enzyme activities. Hoppe-Seyler*s Z. physiol. Chem., 1970, vol. 351, N 2, p. 213-220.

231. Breslow R. The mechanism of thiamine action; prediction from model experiments. Ann. N. Y. Acad. Sci., 1962, N 2, p. 445-448.

232. Brubacher G. Fruherfassung und Bedeutung von Vita-minmangelzustanden. Bull. Schweiz. Akad. med. Wiss., 1976, vool. 31, N 4—6, S. 291-302.

233. С a s a t i A. Cellule neoplastiche ed 1-glucosio. Minerva med., 1973» vol. 64, N 2, p. 53-63.

234. С h 0 n g Y. H., et al. Erythrocyte transketolase activity. Amer. J. Clin. Nutr., 1970, vol. 23, N 3» p. 261-266.

235. Cooper J. R., К i n i M. M. The partial purification and characterization of thiamine pyrophosphatase from rabbit brain. J. Neurochem., 1972, vol. 19, N 7, p. 18091811.

236. Cooper J. R.,Pincus J. H., Itokawa Y., P i г о s K. Experience with phosphoryl transferase inhibition in subacute necrotizing encephalomyelopathy. -New Eng. J. Med., 1970, vol. 283, N11, p. 793-795.

237. Cooper J.R., P i n с u s J. H. The role of thiaminein nervous tissue. Neurochem. Res., 1979» vol. N 2, p. 223-239.

238. Cooper J.R., P i n с u s J.H. Role of thiamine triphosphate in subacute necrotizing encephalomyelopathy. J. Agr. and Food Chem., 1972, vol. 20, N 3, p. 490-493.

239. О о о r e H.G. Cyclic AMP and pyruvate dehydrogenase. Eu-karyoyic cell function and growth regulation. In: Intracell. cyclic Nucl. N.Y.-London, 1976, p. 533-535.

240. Couch R.D., L о h K.K., S u g i n о J. Sudden cardiac death following Adriamycin therapy. Cancer, 1981, vol. 48, N 1, p. 38-39.

241. Cusaro G.,Sciorelli G., R i n d i G. Loca-lizzazione subcellulare della tiaminpirofosfocinase ( TC ) in cellule epitelule epiteliali di intestino tenue di ratto.- Boll. Soc. ital. biol. sper., 1975, vol, 51» N 18 bis, p. 115.

242. Cusaro G., R i n d i G.,Sciorelli G. Subcellular distribution of thiaminepyrophosphokinase and thi-amine-pyrophosphatase activiyes in rat isolated enterocytes,- Int. J. Vitamin, and Nutr. Res., 1977, vol, 47, N 2, p. 9< -106.

243. DeLuca C.,Matheisz J.S. Glucose-6-phosphate dehydrogenase activity in a hepatoma cell line: preliminary evidence for negative genetic control, J. Cell. Physiol., 1976, vol. 87, N 1, p. 100-109.

244. D e u s В., Blum H. Subcellular distribution of thiamine pyrophosphokinase activity in rat liver and erythrocytes. Biochim. Biophys. Acta, 1970, vol. 219, U 2, p, 4-89-4-92 •

245. Die Funktion des Herzens unter postoperativer Hochvoltthe-rapie bei Patientinnen mit linksseitigem Mammakarzinom. / M. Wehr, B.G. Rosskopf, P.M. Pittner, et al.- Klin. Wochen-schr., 1982, vol. 60, N 24, S. 1505-1507.

246. D i P a 1 m a J.R. ,McMichael R. fflae interaction of vitamins with cancer chemotherapy. Oancer, 1979» vol. 29, N 5, p. 280-286.

247. Dohadwala M.M., D a t t a A.G., Ohaudhuri L. A comparative study of glucose-6-phosphate dehydrogenase in Ehrlich ascites carcinoma and host^ liver. J. Indian Chem. Soc., 1978, vol. 55, N 2, p. 174-176.

248. D о r f m a n L. J*Donaldson S.S., G u p t a P. R., В о s 1 e у T.M. Electrophysiologic evidence of subclinical injury to the posterior columns of the human spinal cord after therapeutic radiation. Oancer, 1982, vol. 50, N 12, p. 2815-2819.

249. D r i n g s P. Zytostatika. Klin. Forum, 1980, vol. 1, N 10, p. 4-8, 10-14.

250. Eaton R.H., M о s s D.W. Organic pyrophosphatasesas substrates for human alkaline phosphatases. Biochem. J., 1967, vol. 105, N 10, p. 1307-1309.

251. Eckert T., M о b u s W. ttber eine ATF: Thiamindi-phosphat-Phosphotransferase-Aktivitat in Nervengewebe. -Hoppe Seyler1s Z. Physiol. Chem., 1964, vol. 338, p. 286289.

252. Eder b., Y v e s D. Thiamine and cholinergic transmission in the electric-organ of Torpedo marmorato. Cellular localisation and functional changes of thiamine and thiamine phosphate esters, J. Neurochem., 1980, vol. 36, N 6, p. 1278-1286.

253. Edstrom S.,Bennegard К., E d ё n E., Lundholm K. Energy and tissue metabolism in patients with cancer during nutritional support. Arch. Otolaryngol., 1982, vol. 108, N 11, p. 697-699.

254. Erythrocyte transketolase activity in uremia. / M. Kuri-yama, A. Mizuma, R. Yokomine, A. Igata, Y. Otuji Clin. Chim. Acta, 1980, vol. 108, N 2, p. 169-177.

255. Ferrari G., Ventura U., R i n d i G. The Na+-dependence of thiamine intestinal transport in vitro. Life Sci., 1971, vol. 10, IT 1, p. 67-75.

256. Fields A. L. A., Cheema-Dhadli S., Wolman S. b.,Halperin M. L. Theoretical aspects of weight loss in patients with cancer. Possible importance og pyruvate dehydrogenase. Cancer, 1982, vol. 50, N 10, p. 2183-2188.

257. Finck S. J., Giuliano A. E., Morton D. LDH and melanoma. Cancer, 1983, vol. 51, N 5, p. 840843.

258. Fish R. G., R о s e F. A. Studies on phosphogluconat(dehydrogenase in an ethionine induced rar hepatoma. Int. J. Biochem., 1974, vol. 5, N 5-6, p. 479-486.

259. Fragner J. In: Yitamine Chemie und Biochemie, Fischer Yerlag, Jena, 1965, vol. 2, p. 144-148.

260. Free thiamine as the likely precursor of endocellular thiamine phosphatases in everted rings of rar jejunum. / G. Ferrari, G. Sciorelli, P. del Poggio, U. Yentura, et al. -Pflugers Arch., 1975, vol. 356, N 2, p.111-120.

261. Friess A. E. Elektronenmikroskopische Lokalisation von Thiaminpyrophosphatase und Nucleosiddiphosphatase in Itfmphozyten. Acta haematol., 1976, vol. 55, N 4, p. 205215.

262. F u 1 о p M. Lactic acidosis. N. Y. State J. Med., 1982, vol. 82, N 5, p. 712-717.

263. Gontzea I.,Gorcea Y.,Popesco F. Con-trole biochimique de l'etat de nutrition thiaminique chez les malades avec nevrose. Ann. nutr. et alim., 1975, vol. 29, N 5, p. 411-419.

264. G u Ъ 1 e r C. J. Studies on the physiological functions of thiamin. 1. The effects of thiamin antagonists on the oxidation of L-ketoacids by rat tissues. J. Biol. Chem., 1961, vol. 236, N 12, p. 3112-3120.

265. Gubler C. J. Enzyme studies in thiamine deficiency.-Int. Z. Vitaminforsch, 1968, vol. 38, N 3/4, p. 283-303.

266. Gubler C. J. Enzyme studies in thiamine deficiency.-Vitaminology, 1969, vol. 15, N 4, p. 337-338.

267. Gubler C. J. Biochemical changes in thiamine deficiencies. J. Nutr. Sci. Vitaminol., 1976, vol. 22 ( suppl.), N 1, p. 33-40.

268. G u m а а K. A., MacLeod R. M., M с L e a n P.

269. Hilf R. ,Ickowicz R. ,Bartley J. C., Abraham S. Multiple molecular forms of glucose-6-phosphate dehydrogenase in normal, preneoplastic, and neoplastic mammary tissues of mice. Cancer Res., 1975, vol. 35, N 8, p. 2109-2116.

270. Hilf R.,Rector W.,Abraham S. A glucose-6-phosphate dehydrogenase isoenzyme characteristic of preneo plastic and neoplastic mouse mammary tissue. J. Nat. Cancer Inst., 1973, vol. 50, N 5, p. 1395-1398.

271. Hoekstra D., В e r g e r R., H о m m e s E. A. Thiamine diphosphate content of liver mitochondria of the pregnant and developing rat. Nutr. and Metab., 1974, vol.16, N 5, p. 317-323.

272. Hoffmann I., К n a p p A., R i e t z K., Milne r Oh. Die Bestimmung der Transketolase-Aktivitat im Blut. Clin. chim. acta,. 1971, vol. 33, N 2, p. 415-421.

273. Holt J. A. G. Cancer, a disease of defective glucose metabolism. The energy for mitosis appears to come from a glutathione mediated glycolysis. Med. Hypotheses, 19S3, vol. 10, N 2, p. 133-150.

274. Hommes F. A., В e r g e r R., Luit-de-Ha-a n G. The effect of thiamine treatment on the activity of pyruvate, dehydrogenase: relation to tkfe treatment of Leigh1 s encephalomyelopathy. Pediat. Res., 1973, vol. 7, N 7, p. 616-619.

275. Horecker B. L. ,Smyrniotis P., К 1 e n о w H. The formation of sedoheptulose phosphate from pentose-phosphate. J. Biol. Chem., 1953, vol. 205, p. 661-663.

276. Horecker B. L., С h о n g T.,Pontremoli The coupled reaction catalyzed by the enzymes transketolase and transaldolase. J. Biol. Chem., 1963, vol. 238, N 10, p. 3428-3431.1. Ah

277. Hosoda S.,Nakamura W. Carbon ( '^G ) dioxi14de evolution from glucose ( 1- С ) by a microsome free supernatant of Ehrlich ascites tumor calls. Gann, Japan. J. Cancer Res., 1969, vol. 60, N 1, p. 49-55.

278. Hume D. A.,Weidemann M. J., Role and regulation of glucose metabolism in proliferating cells. J. National. Cancer Inst., 1979, vol. 62, N 1, p. 3-B.

279. Ischii K., S a r a i K., Sanemori H., К aw a s а к i T. Analysis of thiamine and its phosphate esters by high-performance liquid chromatography. Anal. Biochem., 1979, vol. 97, N 1, p. 191-195.

280. Itokawa Y., Cooper J. K. Ion movements and thiamine in nervous tissue. I. Intact nerve preparations. -Biochem. Pharmacol., 1970, vol. 19, N 8, p. 985-992.

281. Itokawa Y., Cooper J. K. The enzymatic synthesis of triphosphothiamine. Biochim. Biophys. Acta, 1968, vol. 158, N 2, p. 180-182.

282. Itokawa Y., S с h u 1 z K. A., Cooper J. K. Thiamine in nerve mambranes. Biochim. Biophys. Acta, 1972, vol. 266, N 3, p. 293-299.

283. Iwata H., В а Ъ a A.,Matsuda T.,Terash1 n a Z. Properties of thiamine di- and triphosphatases in rat brain microsomes: effects of chlorpromazine. J. Neurochem., 1975, vol. 24, N 6, p. 1209-1213.

284. Iwata H.,Matsuda T.,Baba A. Thiamine di-phosphatase in rat small intestine. Experientia, 1976, vol. 32, N 10, p. 1252- 1253.

285. Jacob A. Modification du metabolisme glucidique dans le foie en voie de cancerisation par le dimethylaminoazoben-zene. III. Recherches au niveau de la voie des pentoses phosphates. Internat. J. Cancer, 1970, vol. 5, N 1, p. 111118.

286. Jacob A. Relations entre la voie des pentoses phosphates et la glycolyse. J. physiol., 1969, vol. 61 ( suppl.2 ), p. 320.

287. Jannella P. ,Mazzarella V. A., R u s s u A. Studi sul metabolismo dei pentosi. II. Determinazione di pentosi in soggetti portatori di neoplasie ( nota prelim.). Riv. anat. patol. e oncol., 1966, vol. 30, N 2-3, p. 267269.

288. Januschke D.,Reinauer H.,Hollmann S. Pyruvate- und Ketoglutaratmung in Mitochondrien Thiami-nmangelratte. Z. Ernaharungs. Wiss., 1975» vol. 12, N 4, p. 261-273.

289. Jones J. H.,Foster G.,Dorfman F., Hunter G.L. Effects on the albino mouse of feeding diets very deficient in each of several vitamin В factors ( thiamine, riboflavin, pyridoxine and panthothenicacia )• J. Nutrition, 1945, vol. 22, p. 127-131.

290. Katona E.,Moscarello M. A. The associatio; of enzymic activities in subfractions of isolated rat liver Golgi. Experientia, 1975, vol. 31, N4, p. 412-414.

291. Katz J.,Brand K.,Golden S.,Ruden-stein D. Lactate and pyruvate metabolism and reducing equivalent transfer in Ehrlich ascites tumor. Oancer Res. 1974, vol. 34-, N 4, p. 872-877.

292. Kiessling K.H. Thiamine triphosphate in liver and brain of the rat. Biochim. Biophys. Acta, 1961, vol.46, Н 1, p. 603-604.

293. К i е s s 1 i 11 g К. H. Thiamine triphosphate. Biochim. Biophys. Acta, 1966, vol. 20, IT 2, p. 293-298.

294. К i t a d a S., H а у s E. F., M e a d J. F. Characterization of a lipid mobilizing factor from tumors. Golden Jubilee Int. Congr. Essent. Fatty Acids Prostaglandins, Univ. Minn., May 5-7, 1980, Oxford e. a., 1982, p. 823-826.

295. Komai T., К e n j u K.,Shindo H. Active transport of thiamine from rat small intestine. J. Nutr. Sci. Vitamino1, 1974, vol. 20, p. 163-177.

296. Lactate metabolism in patients with metastatic colorectal cancer. / C. P. Holroyde, R. S. Axelrod, C. L. Skutches, A.

297. Haff, P. Paul, G. A. Reichard Lactate metabolism in patients with, metastatic colorectal cancer. - Cancer Res., 1979» vol. 39» N 12, p. 4900-4904.

298. L a n t о s P. L. The fine structural localisation of thiamine pyrophosphatase and adenosine triphosphatase in neural tumours induced by N-ethyl-N-nitrosourea in rats. -Acta neuropathol., 1974, vol. 29, N 3, p. 199-209.

299. L a z о P. A., S о 1 s A. Identification of an AMP-acti-vatable pyruvate dehydrogenase isozyme in embryon and tumors. Febs letters, 1980, vol. 120, N 2, p. 287-288.

300. L a z о P. A., S о 1 s A. Pyruvate dehydrogenase complex of ascites tumour. Biochem. J., 1980, vol. 190, N 5, p. 705-710.

301. L i 1 i e n D. L. The current status of tumor imaging. -JAM, 1974. vol. 230, N 5, p. 735-738.

302. Lin A. L., Z u b к о f f P. L. Pentose phosphate pathway in the scyphistomae of Chrysaora quinquecirrha. Сотр. Biochem. and Physiol., 1976, vol. В 54, H1, p, 33-36.

303. Littman M. L.,Taguschi T.,Shimizu Y Retarding effect of vitamin deficient and cholesterol free diets on growth of sarcoma 180. Proc. Soc. Exptl. Biol. Med., 1964, vol. 116, N 1, p. 95-101.

304. Longenecker J. P.,Williams J. P. Use14 14of ( 2- С ) glucose and ( 5- С )glucose for evaluatingthe mechanism and quantitative significance of the " livercell 11 pentose cycle. Biochem. J., 1980, vol. 188, p.847.857.

305. Maneche H. 0. Blood pyruvate in melignant neoplastic disorders. Clin. Chem, 1966, vol. 12, N 3, p. 158164.

306. Mathematical modelling of growth kinetics of walker 256 carcinoma in rats. / G. Dagnino, M. Rocchetti, R. Urso, et al. Oncology, 1983, vol.40, N 2, p. 143-147.

307. M с С a n d 1 e s s D. W., С a s s i d у С. С. A. D. Thiamine deficiency and the hepatic pentose phosphate cycle. Biochem. Med., 1975, vol. 14, N 4, p. 384-390.

308. McCormack J. G.,Denton R. M. The effect of calcium ions and adenine nucleotides on the activity of pig heart 2-oxoglutarate dehydrogenase complex. Biochem. J., 1979, vol. 180, p. 533-539.

309. Menon J. A., Quastel J. H. Transport and metabolism of thiamine in Ehrlich ascites carcinoma cells. -J. Biochem., 1966, vol. 99, N 6, p. 766-769.

310. Mijata J.,Kawasaki Т.,Nose Y. Thiamin kinase in membrane fraction of E. Coli. Biochem. Biophys, Res. Commun., 1967, vol. 27, N 5, p. 601-606.

311. Mitsuda Т.,Cooper J. R. Separation and determination of thiamin and its phosphate esters in brain. Anal. Biochem., 1981, vol. 117, N 1, p. 203-207.

312. Morris H. P., Dubnick C. S. Thiamin deficiency and thiamin requirements in G^H mice. J. Natl. Cancer Res., 1W, vol. 8, p. 127-134.

313. Murphy J. V., С r a i g L. J., G 1 e w R. H. Leigh disease: biochemical characteristics of the inhibitor. -Archiv. Neurol., 1974, vol. 31, N 4, p. 220-227.

314. Murphy J.V. , F r e r m a n F. E., H о d а с h A. Characteristics of an acid active thiamine diphosphatase from beef brain. Neurochem. Res., 1980, vol. 5, N 2, p. 145-147.

315. Naidoo D.,Pratt 0. E. Thiamine pyrophosphatase acid and alkaline phosphatase activity in the chicken brain in vitamin B^ deficiency. Biochim. Biophys. Acta, 1955, vol. 16, N 1, p. 75-78.

316. Naujokaitis S. A. Thiamine protection of murine L 1210 leukemia cells against mechlorethamine cytotoxicity and its relation to the choline uptake system. Res. Commirn. Chem. Pathol, and Pharmacol., 1981, vol. 32, N 2, p. 317-327.

317. Palek J.,Dubovsky J., S о u к a J. Human erythrocytes and the metabolism of sedoheptylose in malignancy. Cal. Oncol., 1956, vol. 3, p. 298-300.

318. Pasetto N., P о m i n i P., Bp it al i R. Aspet-ti biochimici delle neoplasie uterine. Nota II. I pentosi ed il ribosio-5-fostato nell*epitelioma della portio. Arch.fisiol., 1963, vol. 62, N 2, p. 88-93.

319. Penttinen H. K., U о t i 1 a L. The relation of the soluble thiamine triphosphatase activity of various rat tissues to non-specific phosphatases. Medical Biology, 1981, vol. 59i N 5, P* 177-184.

320. Penttinen H.K. Differences in thiochrome fluorescence produced by thiamine and its mono, di -, and triphosphate esters. - Acta chem. scand., 1976» vol. 30, N 7» p. 659-663.

321. Peripheral blood lymphocyte count in patients with stomach ulcer. / S. Shimada, K. Futatsuki, I. Ishibashi, et al. J. Jap. Soc. Cancer Ther., 1981, p. 420-421.

322. Peterson J. W., G u b 1 e r C. J., К u b у S. A. Partial purification and properties of thiamine pyrophos-phokinase from pig brain.- Biochim. et biophys. acta, 1975» vol. 397, N 2, p. 377-394.

323. Pincus J. H.,Solitare G. В.,Cooper J. K. Thiamine triphosphate levels and histopathology. Arch. Neurol., 1976, vol. 33, N 5, p. 759-763.

324. Racker E.,Haba G., L e d e r J. G. Thiamine pyrophosphate a coenzyme of transketolase. J. Amer. Chem. Soc., 1953, vol. 75, p. 1010-1012.

325. Ram D.,Navon R., Bio с h F r ankenthal L. The interconversion of lactate and pyruvate and its effect on the apparent oxidative decarboxylation of these substrates in normal tissue and ascites tumor cells. - Cancer

326. Res., 1966, vol. 26, N 8, Part 1, p. 1734-1739.

327. Randle P.J., Sale G. J., К e г Ъ e у A. L.,

328. К e a r n s A. Regulation of pyruvate dehydrogenase complex by phosphorylation and dephosphorylation. Ins Protein Phosphorylation. Book A. Cold Spring Harbor, 1981, p. 687-699.

329. Reed L. J. Structure and regulation of pyruvate and ketoglutarate dehydrogenase complex. J. Vitaminol., 1969» vol. 15, N 4, p. 322-323.

330. Reed L. J.,Pettit Т. H., Roche 0?. E., S u -tterworth P. J, Regulation of the mammalian pyruvate dehydrogenase complex by phosphorylation and dephosphorylation. Protein Phosphorylation Control Mechanism, New-York - London, 1973, P* 83-95.

331. Roche Т. E., С a t e R. L. Purification of porcine liver pyruvate dehydrogenase complex and characterization of its catalytic and regulatory properties. Arch. Biochem. and Biophys., 1977, vol. 183, IT 2, p. 664-667.

332. Rogers E. E. Thiamine antagonists. In: Methods in Enzymology, New York, 1970, p. 250-260.

333. Sanders E. J., S i n g a 1 P. K. Eurrow formation in Xenopus embryos. Involvement of the Golgi body as revealec by Ultrastructural localization of thiamine pyrophosphatase activity. Exp. Cell. Res., 1975, vol. 93, N 1, p. 219-224.

334. Sanemori H.,Neki H., Kawasaki T. Rever-sed-phase high performance liquid chromatographic analysis o. thiamine phosphate esters at subpicomole levels. Anal. Biochem. , 1980, vol. 107, p. 451-455.

335. Sanioto S. M. L., R e i n a u e r H., H о 1 1 m a n . S. Thiamine pyrophosphokinase activity in liver, heart andbrain crude extracts of control and thiamine deficient rats.- Int. J. Vitamin and Nutr. Res., 1977» vol. 47, N 2, p. 315-324.

336. Sato K., Suzuki R., T s u i к i S. Oxidation of , 14 . 14

337. С 6-0 ) glucose to 002 by the pentose cycle in Ehrlich ascites tumor cells. Biochim. et biophys. acta, 1968, vol. 165, N 2, p. 189-201.

338. Sauermann G. On the reversibility of the first segment of glycolysis in ascites tumor cells. Biochim. et biophys. acta, 1968, vol. 158, N 1, p. 1-10.

339. S a u e r L.A., D a u с h у R. Т. Ketone body, glucose, lactic acid, and aminoacid utilization by tumor in vivo in fasted rat. Cancer Res., 1983, vol. 43, N 8, p. 34973503.

340. Schellenberger A. Zur Function der Amino-gruppe von Thiaminpyrophosphat bei Enzymreactionen. -Wiss. Z. Med. Luther - Univ. Halle - Wittenberg. Math. -natur. wiss. R., 1980, vol. 30, N 1, p. 136-144.

341. Schiffer D. Histochemical observations on NDPase and TPPase in cerebral tumours. Acta neuropathol., 1973, vol. 23, N 2, p. 112-117.

342. Schneider F. Die aerobe Glykolyse der Tumorzelle.- Naturwissenschaften, 1981, vol. 68, N 1, p. 20-27.375» Schwartau M.,Doehn M. Metabolische Azidose durch Thiaminmangel. Anaesthesist, 1981, vol. 30, N 9, p. 452-454.

343. Shamberger R. J. Vitamins and cancer: current controversies. Cancer Bull., 1982, vol. 34, N 4, p. 150-155.

344. Shehata M. M., D a n у s z A. Investigations on the cause of a decrease in vitamins of the B-group in diabetes. Acta phisiol. pol., 1976, vol. 27, N 6, p. 565572.

345. Siess E. A., Nimmannit S.,Wieland 0. H. Kinetic and regulatory properties of pyruvate dehydrogenase from Ehrlich ascites tumor cells. Cancer Res., 1976, N 36, p. 55-59.

346. Smith С. M., В г у 1 a J. .Williamson J. R. Regulation of mitochondrial a-ketoglutarate metabolism by product inhibition at ketoglutarate dehydrogenase. J. bi-ol. Chem., 1974, vol. 249, P« 1497-1499.

347. Somogyi J. C. Early signs of thiamine deficiency. -Nutr. et dieta, 1976, N 23, p. 78-85.

348. Spiegel R. J. The acute toxicities of chemotherapy.- Cancer Treat. Rev., 1981, vol. 8, N 3, p. 197-247.

349. S p i s n i D. Tumori e vitamine, aminoacidi, macro E microelement! essenziali. Pisa: Arti Grafiche Pacini Nariotti, 1968, 593 p.

350. Takahashi K., Nakamura A.,Nose J. Effects of thiamine degiciency and thiamine administration on the thiamine diphosphate-dependent enzymes in rat liver.- J. of Vitaminology, 1971, vol. 17, N 3, p. 207-214.

351. Tilander K.,Kiessling К. H. A thiamine diphosphatase from rat liver. Acta chem. scand., 1961, vol. 15, p. 477-479»

352. Thomson A. D., L e e v у 0. M. Observations on the mechanism of thiamine hydrochloride absorption in man.- Clin. Sci., 1972, vol. 43, N 1, p. 153-163.

353. Trenfield K.,Masters C. Patterns of synthesis and degradation of lactate dehydrogenase during the cell cycle of Burkitt*s lymphoma cell. Int. J. Biochem., 1980, vol. 11, N 1, p. 55-67.

354. Uchiyama Y., V о n Mayersbach H., G r oa h V. Circadian changes in thiamine pyrophosphatase activity of rat hepatocytes a histochemical study at the electron microscopic level. - Cell, and Mol. Biol., 1982, vol. 28, N 2, p. 245-254.

355. Ullrich J. Methods in Enzymology. New York, Academic Press, 1970, vol. 18, p. 100-107.

356. V a u p e 1 P. Hypoxia in neoplastic tissue. Microvasc. Res., 1977, vol. 13, N 3, P. 399-408.

357. Vaupel P., Thews G., Wendling P. Kri-tische Sauerstoff- und Glucoseversorgung maligner Tumoren. Dtsch. med. Wochenschr., 1976, Bd. 101, N 49, S. 18101816.

358. Ventura U., Ferrari G. ,Tagliabue R. A kinetical study of thiamine intestinal transport in vitro. life Sci., 1969, vol. 8, N 6, p. 699-705»

359. Waterhouse 0. Lactate metabolism in patients with cancer. Oancer, 1974, vol. 33, N 1, p. 66-71.

360. Wieland 0. H.,Portenhauser R. Regulation of pyruvate dehydrogenase interconversion in rat liver mitochondria as related to the phosphorylation state of intramitochondrial adenine nucleotides. Eurp. J. Bio-chem., 1974, vol. 45, N 2, p. 577-588.

361. Williams J. F., Clark M. G. An error in metabolism. The pentose phosphate cycle. Search, 1971, vol. 2, N 3, p. 80-88.

362. Williams B. A. A. Carbohydrate metabolism in KB cells. Biochem. and Exp. Biol., 1976, vol. 12, N 3» p. 357-365.

363. Yoonessi M., R о m n e у S., D а у e m H. Gastrointestinal tract complications following radiotherapy of uterine cervical cancer: past and present. J. Surg. Oncol., 1981, vol. 18, N 2, p. 135-142.

364. Y u s a T. Thiamine triphosphate in yeasts and some plant materials. Plant and Cell Physiol., 1961, vol. 2, N 4, p. 471-474.

365. Y u s a T. Studies on.thiamine triphosphate. II. Thiamine triphosphate as phosphate donor. Plant and Cell Physiol., 1962, vol. 3, N 1, p. 95-ЮЗ.

366. Yusa T.,Maruo B. Biochemical role of thiamine triphosphoric acid ester. J. of Biochemistry, 1966, vol. 60, N 6, p. 735-737.