Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Оптимизация ветеринарно-санитарной экспертизы при гельминтозах

ВАК РФ 03.02.11, Паразитология

Автореферат диссертации по теме "Оптимизация ветеринарно-санитарной экспертизы при гельминтозах"

005010337

На правах рукописи

ВИКУЛИН ДЕНИС ВЛАДИМИРОВ

ОПТИМИЗАЦИЯ ВЕТЕРИНАРНО-САНИТАРНОЙ ЭКСПЕРТИЗЫ ПРИ ГЕЛЬМИНТОЗАХ

03.02.11 - паразитология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации насоискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

З 0ЕЗ 2С<2

МОСКВА-2012

005010337

Работа выполнена в ГНУ Всероссийском научно - исследовательском институте гельминтологии имени К.И. Скрябина (ВИГИС)

Научный руководитель:доктор ветеринарных наук, профессор УСПЕНСКИЙ АЛЕКСАНДР ВИТАЛЬЕВИЧ

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук

Ястреб Валерий Брониславович

кандидат ветеринарных наук, доцент

Шемяков Дмитрий Николаевич

Ведущая организация - Московский государственный университет

пищевых производств

Зашита диссертации состоится «29» февраля 2012 г. в 11:00 часов на заседаниисовета по защитедокторских и кандидатских диссертацийДООб.011.01 при Всероссийском научно-исследовательском институте гельминтологии имени К.И. Скрябина (ВИГИС).

Адрес: 117218, Москва, Б. Черемушкинская ул., д. 28 С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ВИГИС

Автореферат размещен на официальном сайте ВАК РФ

Автореферат разослан 2012 г

Ученый секретарьСовета по защите докторских и кандидатских диссертаций, доктор биологических наук, профессор

Бережко В.К.

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность проблемы. Инвазионные заболевания являются одними из основных факторов,влияющих на эпидемическую и эпизоотическую обстановку, оказывают активное воздействие на эволюцию животного мира в качестве селективного процесса. Паразитарные болезни вызывают значительную белково-энергетическую недостаточность питания людей, снижениеиммунитета и как следствие являются серьезной социально -экономической проблемой многих стран (К.И. Абуладзе, 1964).

Несмотря на значительное снижение поголовья животных в последние годы, эпизоотическая обстановка по гельминтозоонозам в Российской Федерации остается нестабильной. По данным ветеринарной отчетности в результате ветеринарно-санитарной экспертизы мяса и мясопродуктов убойных животных в 2010 году зарегистрировано 523 (0,003%) случая трихинеллеза, 25985 (0,14%) случаев цистицеркоза, 161767 (0,86%) -

эхинококкоза.

Отсутствие эффективных целевых программ по финансовой поддержке развития АПК на селе со стороны государства, несовершенные технологии выращивания и низкая культура разведения животных в личных подсобных хозяйствах ведет к распространению многих паразитарных болезней, в том числе и гельминтозоонозов.

За последние пять лет с развитием промышленного свиноводства, проблема распространения трихинеллеза и цистицеркоза свиней на закрытых свиноводческих комплексах европейского образца практически сведена к нулю. Но в целом по Российской Федерации эта проблема остается актуальной.

Определенную опасность представляет также мясо-сырье, поступающее в Российскую Федерацию из стран ближнего и дальнего зарубежья.

Анализ эпизоотической и эпидемической ситуации по зоонозам в Российской Федерации свидетельствует о возрастающей роли диких промысловых животных в распространении этих инвазий среди жителей Сибирского, Уральского и Южного федеральных округов. В тоже время распространение гельминтозоонозов среди населения Европейской части Российской Федерации чаше всего вызвано употреблением в пищу непроверенного мяса домашних животных. В Российской Федерации (2010 год) смертность от заболеваний паразитарной этиологии составила 21 случай на 100 000 населения (для сравнения в США этот показатель равен 6, в Германии - 8, в Японии - 5). В России эхинококкоз копытных животных приобрел природную очаговость, стационарность и возможность перекрестного заражения дефинитивных и промежуточных хозяев (А.В. Успенский, 1995, Ю.Ф. Петров, 2004). За последние три года (2007 - 2009 гг.) зарегистрировано более 500 случаев трихинеллеза у населения, более 900 случаев тениаринхоза и около 300 случаев тениоза.

При вступлении России во Всемирную торговую организацию усилятся требования к качеству контроля на предприятиях по производству и

переработке продуктов питания, что потребует

усовершенствованиядействующих и разработки новых методик экспертизы пищевого сырья, выявления возбудителей паразитарных зоонозов таких как трихинеллез, цистицеркоз, эхинококкоз, описторхоз, дифиллоботриоз и ряда других заболеваний.

Глобальное значение паразитарных зоонозов и их огромное влияние на экономику и здоровье населения признаны Всемирной организацией

здравоохранения. Комитетом экспертов ВОЗ разработана международная классификация заразных болезней, в категорию болезней разных видов животных включены: цистицеркоз свиней, эхинококкоз, трихинеллез. Важную роль в предупреждении этих заболеваний играет ветеринарносанитарная экспертиза туш животных в условиях перерабатывающих предприятий, боен, лабораторий ветеринарно-санитарной экспертизы на рынках.

Цель ветеринарно-санитарной экспертизы не только в постановке диагноза и оперативного изъятия пораженной туши или органов из технологического цикла переработки, но и анализ зараженности животных и своевременная передача соответствующей информации органам государственной ветеринарной и санитарно-эпидемиологической службы, осуществление мониторинговых исследований и ведение мероприятий по борьбе с инвазией.

Данные ветеринарно-санитарной экспертизы играют важную роль в уточнении эпизоотической и эпидемической ситуации, позволяют определить сезонную и возрастную динамику в распространении инвазии, выявить неблагополучные хозяйства, повысить товарные качества животноводческой продукции. Поэтому предъявляются высокие требования к профессиональному уровню специалистов данного профиля, техническому обеспечению и созданию оптимальных производственных условий для выполнения исследований.

Цель и задачи исследований.

Целью работы было: усовершенствование методов диагностики

паразитарных зоонозов и цистицеркоза овец, проведение сравнительных испытаний, технологическая доработка диагностических устройств и оптимизация ветеринарно-санитарной экспертизы.

Для достижения поставленной цели были определены следующие задачи:

- уточнить эпизоотическую обстановку по изучаемым гельминтозам (СузисегсизЫтв, Сузйсегсияшз, ТпсЫпеПаБрцаПз);

- изучить основные факторы передачи инвазии;

- провести сравнительные испытания действующих методик экспертиз на цистицеркоз крупного рогатого скота и овец;

- провести математический анализ и обосноватьоптимальное количество разрезов исследуемых мышц для выявления цистицеркоза крупного рогатого скота и овец;

- определить диагностическую эффективность нового состава искусственного желудочного сока с применением аппарата по выделению личинок трихинелл АВТ - Л7;

- повысить эффективность диагностики данных гельминтозов.

Научная новизна. Впервые на основании математического анализа

определено оптимальное количество разрезов миокарда крупного рогатого скота и овец, позволяющее значительно повысить выявляемость цистицеркоза. Установлено, что при 19 разрезах миокарда крупного рогатого скота и 18 - у овец эффективность послеубойной диагностики цистицеркоза повысилась соответственно в 2 и 1,5 раза. Показано, что использование ИЖС Бетасол в качестве искусственного желудочного сока (ИЖС) в аппарате АВТ-Л7 при диагностике трихинеллезаявляется более технологичным и безопасным, особенно, в производственных условиях и не уступает стандартному раствору ИЖС.

Практическое значение диссертационной паботы. По результатам диссертационной работы разработаны Методические положения «Ветеринарно - санитарная экспертиза на трихинеллез на основе нового состава компонентов искусственного желудочного сока». Одобрены секцией «Инвазионные болезни животных» Россельхозакадемии 23.09.2011г.

Разработаны дополнения к «Правилам ветеринарного осмотра убойных животных, ветеринарно-санитарной экспертизы мяса и мясных продуктов» (от 27.12.1983г) (23.10.2010 г).

Материалы работы используются лабораториями ветеринарносанитарной экспертизы на объектах мелкорозничной торговли.

Апробация работы. Материалы и методы исследований представлены на научной конференции «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями» (2008 г), отчетных конференциях ВИГИС (2007-2010 гг.), секции «Инвазионные болезни животных» Отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии (2011 г).

Личный вклад соискателя. Представленная диссертация является результатом работы за период аспирантуры. Исследования по усовершенствованию методики ветеринарно-санитарной экспертизы внутренних и наружных жевательных мышц, миокарда крупного рогатого скота и овец выполнены аспирантом лично.

Работа выполнялась под руководством д.в.н., профессора Успенского А.В., который оказывал консультационную и научно методическую помощь в выполнении поставленных задач, их анализе и обобщении результатов.

Основные положения, выносимые на зашиту:

- математический анализ количества разрезов в миокарде крупного рогатого скота и овец;

- усовершенствованная методика ветеринарно-санитарной экспертизы по диагностике цистицеркоза крупного рогатого скота и овец;

- усовершенствованная технология ветеринарно-санитарной экспертизы на трихинеллез методом автоматизированного пептолиза.

Публикации.Материалы исследований опубликованы в четырех работах, две из которых в изданиях, рекомендованных ВАК РФ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 127 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, включающих материалы и методы, результаты и их обсуждения, выводов, практических предложений.

Работа иллюстрирована 12 таблицами, 11 рисунками. Список используемой литературы содержит 179 источников, в т.ч. 69 зарубежных авторов.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Представлен анализ по распространению гельминтозоонозов в Российской Федерации и за рубежом, анализзаболеваемости населения за 2007-2009 гг. в Российской Федерации, а также краткая характеристика методовветсринарно-санитарной экспертизы при этих гельминтозах.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОАНИЙ НА ЦИСТИЦЕРКОЗ

Исследования на цистицеркоз проводили в течение 3-х лет с 2007 по 2010 гг. на бойнях Московской области, в лабораториях ветеринарносанитарной экспертизы на рынках г. Москвы и Липецкой области. Всего было исследовано 1536 туш крупного рогатого скота и 791 туша овец.

Животные для убоя на бойнях Московской области поступали

преимущественно из регионов Южного Федерального Округа (Астраханская обл., Ростовская обл., Краснодарский край, Ставропольский край, Республика Дагестан и Республика Калмыкия). В лаборатории ветеринарносанитарной экспертизы на рынках Москвы туши крупного рогатого скота доставлялись из регионов ЦФО (Белгородская обл., Брянская обл., Владимирская обл., Воронежская обл., Калужская обл., Курская обл., Липецкая обл., Московская обл., Орловская обл., Рязанская обл., Тамбовская обл., Тверская и Тульская обл.). Туши мелкого рогатого скота поступали напрямую из регионов ЦФО и в большинстве случаев из регионов ЮФО через убойные пункты Московской области. В лаборатории ветеринарносанитарной экспертизы на рынках Липецкой обл. продукция доставлялась из близлежащих районов.

Для экспертизы в лаборатории продукция поступала как с предварительным клеймом (выпуск в реализацию после проведения

ветеринарно-санитарной экспертизы в полном объеме), так и с овальным

(выпуск в реализацию без ограничения). Также для экспертизы в лаборатории г. Москвы поступали туши мелкого рогатого скота

промышленного убоя (без ливера), прошедшие все ступени ветеринарносанитарной экспертизы и товароведения.

Возраст убойных животных составлял от 6 мес. до 5 лет.

Согласно «Правилам ветеринарного осмотра убойных животных встсринарно-санитарной экспертизы мяса и мясных продуктов» от 27.12.1983г. с изменениями от 17.06.1988г., на цистицеркоз осматривается сердце и голова. При обнаружении цистицерков в сердце или в мышцах головы производят дополнительно по два параллельных разреза поясничных, шейных, лопаточно-локтевых, спинных мышц, мышц тазовых конечностей и диафрагмы.

В первую очередь ветеринарно-санитарную экспертизу продуктов убоя на цистицеркозы проводили согласно вышеуказанным правилам ветеринарно-санитарного осмотра убойных животных и ветеринарносанитарной экспертизы мяса и мясопродуктов.

Нами была усовершенствована применяемая методика ветеринарносанитарной экспертизы туш крупного и мелкого рогатого скота на цистицеркозы.

1.В первую очередь наружные жевательные мышцы крупного рогатого скота разрезали пластами по четыре на кавдой стороне, на всю ширину, параллельно их поверхности. Ширина пласта при этом не должна превышать 2-3 мм.

2.Разрезали внутренние жевательные мышцы тремя разрезами на пласты такой же ширины.

3. Сердце располагали верхушкой к исследователю, после вскрытия сердечной сумки осматривали эндокард, делали несквозной разрез по большой кривизне, тем самым, увеличивая осматриваемую поверхность. Производили несквозные разрезы мышц, сердца сверху вниз, начиная с левой стороны сердца. Расстояние между разрезами 0,5-1,5 (крупный рогатый скот) 0,3-0,5см (овцы) глубина несквозного разреза зависела от толщины миокарда. Количество разрезов не менее 17-20 у овец и до 18-22 у крупного рогатого скота. Дополнительно также проводили до семи поперечных разрезов. Число разрезов зависело от возраста исследуемого животного, породы, веса, упитанности животного.

4. Туши осматривали с поверхности и с внутренней стороны, отделяли диафрагмальные мышцы от туши и исследовали более детально, пальпацией. Это необходимо делать т.к. краниальная часть диафрагмы в процессе ветеринарно-санитарной экспертизы остается недосмотренной, в смотровой комнате не всегда хватает освещения.

5. На поясничных мышцах туш овец делали 3-4 разреза вдоль мышечных волокон. У крупного рогатого скота на поясничных мышцах дополнительных разрезов не проводили

Статистический анализданных исследований проведен на основе нормального распределения Гаусса. Роль нормального распределения в теории вероятности и статистики совершенно особая - это самое распространенное в практических приложениях распределение. Оно является

предельным для многих других распределений, что связанно со справедливостью центральной предельной теоремы.

(В.А.Медик,М.С.Токмачев,2007 г).

2.2. МЕТОДЫ ОПТИМИЗАЦИИ ВЕТЕРИНАРНО-САНИТАРНОЙ ЭКСПЕРТИЗЫ НА ТРИХИНЕЛЛЕЗ

Целью настоящих исследований явилась необходимость детального исследования усовершенствованного аппарата АВТ-Л7, определение его эксплутационных, технологических и диагностических показателей. А также адаптация данного аппарата к новому составу искусственного желудочного сока в условиях передвижных лабораторий ветеринарно-санитарной экспертизы.

Передвижные лаборатории ветеринарно-санитарной экспертизы организованы для экстренных и нестандартных случаев в сфере ветеринарно-санитарного надзора. Лаборатории оснащены необходимым диагностическим оборудованием для проведения ветеринарно-санитарной экспертизы в полном объеме. Единственным слабым местом в данных моделях является слабая функциональная способность вентиляционной системы сконструированных не по ГОСТ 12.4.021, СНиП 2.04.05-91 и системой водоснабжения, отвечающим требованиям ГОСТ 2874. В настоящее время передвижные лаборатории используются для обслуживания ярмарок выходного дня.

Согласно Постановления Правительства г. Москвы № 864 от 29.09.2010.Г. «Об утверждении Порядка организации ярмарок выходного дня и продажи товаров на них на территории г. Москвы» реализуются готовые мясные изделия только промышленной выработки, в заводской упаковке с маркировкой завода изготовителя. Но как показывает практика, торгующие структуры зачастую занимаются подлогом сала соленого промышленного производства на сало, произведенное в домашних условиях. Эту продукцию переупаковывают в заводскую упаковку и наносят маркировку завода изготовителя, тем самым, создавая эпидемиологическую ситуацию по трихинеллезу в г. Москве.

Для исследования отбирались пробы продукции, реализуемые на ярмарках выходного дня. В работе использовались образцы массой 50 г. с искусственным включением 5-6 срезов мышц от крыс, инвазированных личинками трихинелл (10 личинок трихинелл на 1 г мышц). Для определения поставленных целей доставляемые пробы делились на четыре группы:

Охлажденные мясопродукты. Для исследования отбирались пробы диафрагмальных, межреберных мышц и мышц языка. Данная продукция произведена в Белгородской области.

Замороженные мясопродукты. Мышцы языка, диафрагмальные и межреберные мышцы. Продукция произведена в Воронежской области.

Соленые и солено-копченые готовые мясные изделия (шпик по-белорусски(сало соленое) ГОСТ 4938 - 85, шпик копченый ГОСТ 4948 - 85,

грудинка соленая ГОСТ 16594 - 85) Продукция доставлена из Липецкой и Тамбовской областей.

Сыровяленые и сырокопченые готовые мясные изделия (карбонат сыровялеиый ГОСТ 16594 - 85 . шейка сыровялсная ГОСТ 16594 - 85, колбаса сыровяленая солями «Свиная» ГОСТ 16594 - 85, колбаса свиная сырокопченая ГОСТ 16131 - 86). Продукция доставлена из Республики Беларусь и Липецкой обл.

В качестве переваривающей жидкости использовали стандартный искусственный желудочный сок (на 1 литр воды температурой 40 С 10 - 15 г пепсина 100.000 ЕД и 10 мл. концентрированной соляной кислоты).

Для сравнения качества переваривания испытуемых проб использовали разработанный в ВИГИСе новый состав искусственного желудочного сока «Бетасол», состоящий из 10 г бетаина, 14 г лимонной кислоты и 10-15 г пепсина 100.000 ЕД.

Для объективного изучения качества переваривания исследуемых проб использовали два цикла по 25 мин. плюс 10 мин. отстаивания. После каждого цикла переваривания влажный остаток исследуемого фарша взвешивался.

2.2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1.2.Сравнительная оценка методов исследования на цистицеркоз туш и внутренних органов крупного рогатого скота и овец

Независимо от квалификации, тщательности в работе ветеринарносанитарного эксперта примерно 40-50% пораженных Cysticercusbovis туш крупного рогатого скота пропускаются при стандартной ветеринарносанитарной экспертизе (B.C. Шеховцов 1967).

Исследовав 1536 туш и внутренние органы крупного рогатого скота по стандартной методике обнаружено в пяти тушах по одному цистицерку в наружных жевательных мышца. В 18 тушах по одному в миокарде, во внутренних жевательных мышцах цистицерков не зарегистрировали.

По разработанной нами методикенровели экспертизу туш и внутренних органов вторично исследуя, те же мышцы, что и при стандартной методике. Исследования проводили до обнаружения первого цистицерка. В миокарде дополнительно зарегистрировано 53 случая цистицеркоза. В наружных жевательных мышцах головы крупного рогатого скота зарегистрировано 12 случаев цистицеркоза на первом разрезе, 4 - на третьем разрезе. И лишь при высокой интенсивности инвазии обнаружен 1 случай поражения внутренних жевательных мышц.

Таблица 1

Сравнительная оценка методов исследования на цистицсркоз туш и внутренних органов крупного рогатого скота

Стандартная ВСЭ Усовершенствованная методика исследования

Точки осмотра

Миокард Наружные 1 жевательные мышцы Внутренние жевательные мышцы і Дополнительные I разрезы 1 чы Общее число цистицерков Миокард , Наружные ! жевательные мышцы Внутренние жевательные мышцы Дополнительные ! разрезы Общее число

Кол-во

случаев 18 5 . . 23 53 іб і 70

цистице

ркоза

ЭИ 1,17 0,32 - 1,49 3,45 1,04 0,06 - 4,5

В наружных жевательных мышцах крупного рогатого скота цистицерки располагались преимущественно в слоях мышечной ткани на глубине 2-4 мм и 8-11 мм от наружной поверхности. Между этими слоями на глубине 4-7 мм мышца пронизана сухожильными волокнами, среди которых цистицерки не были обнаружены. Всего обнаружено в жевательных мышцах головы 17 цистицерков из них 12 на первом разрезе, 4 на третьем и один при исследовании внутренних жевательных мышц.

В миокарде крупного рогатого скота процент выявления увеличивался более чем в 2,9 раза, в наружных жевательных мышцах в - 3,2 раза, во внутренних жевательных мышцах - на 100%.

При исследовании внутренних органов и туш овец согласно стандартной методике, в миокарде обнаружено 17 цистицерков, в диафрагмальных мышцах 24 и 2 цистицерка при проведении дополнительных разрезов мускулов шеи, лопаточно-локтевых, больших поясничных, бедренной группы мышц и мускулов диафрагмы.

При осмотре туш по методике, разработанной нами, обнаружено 24 тушиовец, пораженных цистицерками на каудальной части диафрагмальных мышц, дополнительнозарегистрировано 7 случаев цистицеркоза на краниальной стороне диафрагмальных мышц, хотя до отделения диафрагмы от туши цистицерки не были обнаружены. Также дополнительно обнаружено 3 цистицерка с локализацией исключительно на краниальной стороне диафрагмы. В миокарде овец зарегистрировано 59 цистицерков.

В поясничных мышцах туш овец цистицерки обнаружены только в двух случаях, в других точках осмотра цистицерков не обнаружено.

Таблица 2

Сравнительная оценка методов исследования на цистицеркоз туш и внутренних органов овец

Стандартная ВСЭ Усовершенствованная методика исследования

Точки осмотра

Миокард Диафрагма Поясничные мышцы Дополнительные разрезы 1 Общее число цистицерков Миокард Диафрагма Поясничные мышцы | Дополнительные : разрезы Общее число цистицерков

Кол-во

случаев 17 24 . 2 43 59 34 95

цистиц

еркоза

ЭИ 2.1 3.03 - 0.25 5.43 7.45 4.29 0.25 - 12.01

2.1.3. Статистическое определение вероятности оптимального количества разрезов при послеубойной диагностике цистицеркоза в миокарде овец

В нашем исследовании в миокарде овец было обнаружено N = 59 случаев цистицеркоза. По имеющейся методике формируем статистический ряд, табл.З. В таблице используются следующие обозначения: X) - номер разреза; Ш) - число случаев обнаружения цистицерков на X; разрезе; со; -относительная частота обнаружения финны на X; разрезе, которая рассчитывается по следующей формуле: со; =пУЫ.

Таблица 3

Статистический ряд распределения случаев обнаружения цистицерков у овец в миокарде

х: 1 2 3 4 5 6 7 8 9

т, 3 1 1 2 4 5 5 5 5

СО; 0.051 0.017 0.017 0.034 0.068 0.085 0.085 0.085 0.085

XI 10 11 12 13 14 15 16 17 18 N

ПП; 5 6 6 4 3 2 1 0 1 59

(С, 0.085 0.102 0.102 0.068 0.051 0.034 0.017 0 0.017 1

Из полученного статистического ряда построим гистограмму

• ... . - - ) > ППГ "'Т1 7 ; ; 1 ■: ЕГ" ' 1 , :: 5 1. ,|

I . . : . ■; 1 ■

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18

Номер разреза, XI

Рис.1. Гистограмма числа обнаруженных цистицерков на соответствующем разрезе в миокарде овец.

Исходя из вида гистограммы, сравнивая ее визуально по форме с кривой Гаусса, можно предположить, что генеральная совокупность имеет нормальное распределение.

Нормальное распределение имеет функцию вида:

- (х-а)2

р, , 1 2-ог

ВД = —7= -с

а у 2к

где: х - номер разреза; Р(х) - функция распределения; а - математическое ожидание; о - среднее квадратичное отклонение.

Математическое ожидание и среднее квадратичное отклонение рассчитываются по формулам соответственно:

а=|Е(хга)2^

Подставляя имеющиеся данные в вышеописанные формулы, получаем: а = 9;ст = 3.971.

Окончательно имеем формулу нормального распределения в нашем случае:

-(х-9)-

г., < 1 2-3.971

Р(х) =-------—-е

3.971у2я

График полученной функции распределения вероятности Р(х) представлен на рис.2.

Вероятность обнаружения первого цистицерка в зависимости от числа разрезов определяется формулой:

У(х)

■Г

Р(х) с!х

где: У(х) — искомая вероятность; Р(х) - функции распределения вероятности; х-число разрезов. В нашем случае:

- (х-а)‘

2-а

(1х

Чтобы определить вероятность обнаружения цистицерка необходимо запрограммировать формулу У(х) в математическом пакете МАТНСАБ и подставить вместо хчисло разрезов. Например, для числа разрезов х=12, вероятность обнаружения цистицерка составит У(12) = 0,775, т.е. 77,5%. В случае х=17, вероятность У(17) составит 97,8%.

Рис.2. График функции распределения вероятности обнаружения первого цистицерка в зависимости от числа разрезов миокарда овец.

Данные исследования математически подтверждены расчетами на основе нормального распределения Гаусса.

Формула распределения вероятности определения количества разрезов для выявления цистицеркоза в миокарде крупного рогатого скота определяется аналогичным методом и имеет вид:

'X 28 -(х-а1)2 25 - (х-а2)2

53 2-а\2 53 2-о22

а\\[Ьс о2\]2к -

— оо

График полученной функции распределения вероятности Р(Х) представлен на рмс.З

0.15 0.] 42 0.135 0.128 0.12 0.112 0.105 0.0975 0.09 0.0825 Р(х) 0.075

------0.0675

0.06 0.0525 0.045 0.0375 0.03 0.0225 0.015 0.0075 О

О 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20

Рис.З. График функции распределения вероятности обнаружения первого цистииерка в миокарде у крупного рогатого скота.

2.1.4. Послеубойная диагностика цистицеркоза укрупного рогатого скота и овец в различных регионах РФ

Результаты наших исследований показывают, что выявляемость напрямую зависит от объема осматриваемых поверхностей и квалификации исследователя. Продукция поступала из различных регионов ЦФО и почти во всех регионах были зарегистрированы случаи цистицеркоза. Наибольшее количество туш крупного рогатого скота поступило из Липецкой области.

ЭИ распределилась не равномерно, в миокарде составила 3,72%, против 1,37 при стандартной ВСЭ, в наружных жевательных мышцах -

0,78%, во внутренних жевательных - 0,19%, хотя при стандартной ВСЭ цистицеркн в жевательных мышцах не обнаружены. В продукции, поступившей из Тамбовской области, ЭИ при стандартной ВСЭ составила

0,75% против 3,03% в миокарде и 1,76% в наружных жевательных мышцах.

Показатели ЭИ по Воронежской области в миокарде 1,55% против

0,77% (стандартная методика). Рязанская область 4,2% против 1,6%, Смоленская область 6,0% против 2,4%, Белгородская область 4,9% против 1,6%. В продукции, поступившей из Рязанской области, стандартная методика исследования жевательных мышц не дала результатов, хотя усовершенствованная методика выявила дополнительно один случай цистицеркоза. Средние показатели ЭИ по областям ЦФО колеблются от 1,0% до 6,0% и более. В среднем по региону составляет 4,5%.

Наибольшая ЭИ отмечалась в Тамбовской и Липецкой областях, что находит отражение в высокой пораженное™ тениаринхозом населения в этих областях.

Сравнивая статистические данные нашей работы и данные государственной ветеринарной службы необходимо отметить значительное несовпадение результатов ветеринарно-санитарной экспертизы.

Данные по ветеринарно-санитарной экспертизе 791 туши овец показали, что наиболее высокая степень ЭИ отмечается в Астраханской обл. 17,6% стандартная методика и 29,4 усовершенствованная методика. Республика Дагестан - миокард 2,9% против 4,7 %, диафрагма 4,1% - 5,8%, Республика Калмыкия - миокард 3,7% - 9,4%. Ставропольский край -миокард 0,4% - 7,2%, диафрагма - 2,4% - 5,8%. Краснодарский край -

миокард 7,4% - 7,4%, Ростовская обл. - миокард 1,05% - 5,7%, диафрагма 3,6% - 4,7%. Волгоградская обл. миокард 1,05%-5,2%, диафрагма 4,2%- 2,1%, Республика Мордовия 10% - 10%. При стандартной методике в тушах овец из Липецкой и Тамбовской обл. цистицерки необнаружены, при усовершенствованной методике ЭИ составила 9%, 8,3% соответственно.

Так же нами была учтена интенсивность инвазии (ИИ) цистицерками крупного рогатого скота и овец. С ИИ 1 цистицерк на тушу крупного рогатого скота зарегистрировано 115 случаев, ИИ 3- в 7 тушах и один случай более - 30 цистицерков зарегистрирован на бойне Московской обл. В партиитуш крупного рогатого скота в количестве 10 голов, доставленной из Венгрии, случай инвазионности зарегистрирован лишь в одной туше, по локализации цистицерки располагались исключительно в миокарде, дополнительные продольные разрезы других мышц, регламентированных правилами,цистицерков не выявили.

ИИ, равная 1,0 цистицерк на тушу мелкого рогатого скота выявлена в 134 тушах, 2 цистицерка -в2тушахи 3 цистицерка - в 2 тушах.

В среднем исходя из наших данных ИИ, у крупного рогатого скота, не учитывая случай венгерского скота составляет 1,1 цистицерка на пораженную тушу, ИИ мелкого рогатого скота 1,04 цистицерка.

2.1.5. Динамика выявления цистицеркоза в зависимости от возраста убойных животных

По данным ветеринарно санитарной экспертизы 1536 туш крупного рогатого скота, установлено, что наиболее частому поражению цистицеркозом подвергаются животные от 6 мес. до 3-х лет.

Возможно, такой высокий процент обнаружения можно объяснить более тесным контактом обслуживающего персонала с молодняком. В Российской Федерации мясное скотоводство развито слабо, как правило, применяется подсосный тип выпойки молодняка, телята с момента рождения и до полноценного развития находятся с матерью, контакт с обслуживающим персоналом минимален и происходит во время ветеринарно-зоотехнических мероприятий. При выращивании телят

молочного направления применяется поддойный тип выпойки молодняка, телят отоивают от коровы к выпаивают в ручную, в таких условиях возможен контакт с дефинитивным хозяином.

На основании полученных данных можно отметить значительное снижение экстенсивности инвазии крупного рогатого скота с увеличением возраста.

2.2.1.Сравнительная эффективность стандартного искусственного желудочного сока и ИЖС Бстасол для выделения личинок трихинелл в

аппарате АВТ-Л7

В соответствии с задачей комплексного анализа диагностических показателей нового варианта аппарата АВТ -Л7 проведен цикл опытов по перевариванию четырех групп мясной свиноводческой продукции. При этом использовались растворы стандартного ИЖС и раствор ИЖС Бетасол. Условия работы, включая объем навески фарша, температурный режим, были во всех случаях аналогичными.

Для отработки технологии переваривания образцов с использованием ИЖС Бетасол на аппарате АВТ-Л7 провели 6 циклов исследований с применением полной загрузки прибора, включающего два реактора. Одновременно тестировали стандартный ИЖС и ИЖС Бетасол. Условия работы, включая навеску фарша и температурный режим, были во всех случаях аналогичными. Каждая проба прошла по два цикла пептолиза, после каждого цикла проводили взвешивание непереваренного остатка.

Технологическая схема приготовления искусственного желудочного сока из сухих компонентов (ИЖС Бетасол).

1. Предварительно провести тест на активность партии пепсина, используемого для анализа.

2. Приготовить навески препаратов из расчета на 1 л воды: Юг бетаина, 14 глимонной кислоты, пепсин 3-30 г в зависимости от его активности.

3. В 1 л воды при температуре 39-40° С растворить бетаин и лимонную кислоту. После растворения внести пепсин.

4. Внести навеску мясного фарша в ИЖС, проводить переваривание аппаратным методом при 39-42С.

Результаты исследования представлены в таблице4.

Таблица № 4

Сравнительный анализ качества переваривания испытуемых образцов на аппарате АВТ - Л7 при стандартном составе ИСЖ и с ИЖС Бетасол

Наименование мясной продукции ИЖС Бетасол Стандартный ИЖС

Вес, (г) 1 цикл 2 цикл Вес (г) 1 цикл 2 цикл

(Г) |% (Г) |% (г) % (г) 1%

1 группа

Диафрагма 50 37,5 25 24 52 50 40 20 30 40

Язык 50 38 24 25 50 50 38 24 25 50

Межреберные мышцы 50 37 26 25 50 50 39,5 21 22 56

2 группа

Диафрагма 50 37 26 24,5 51 50 39 22 30 40

Язык 50 37 26 25 50 50 37,5 25 26 52

Межреберные мышцы 50 36 28 24 52 50 37 26 23 54

3 группа

Шпик копченый 50 34 32 25 50 50 37 26 28 44

Шпик по белоруски 50 28 44 19 62 50 29 42 16 68

Г рудника соленая 50 35 30 27 46 50 37 26 27 46

4 группа

Карбонат сыровяленый 50 29,5 41 19 62 50 30 40 18,5 63

Шейка сыровяленая 50 41 18 31 38 50 43 14 31 38

Колбаса сыровяленая Свиная 50 40 20 30 27 50 40 20 31,5 37

Колбаса сыровяленая Салями «Свиная» 50 40 20 31 38 50 40 20 30 27

Колбаса сырокопченая свиная 50 37,5 25 24,5 49 50 38 24 23 54

В процессе работы установлено, что в первой группе (охлажденные мясопродукты) образцов, новый искусственный желудочный сок на основе ИЖС Бетасол был эффективнее на 3,3 % при первом цикле переваривания, чем используемый ранее стандартный состав. Так, при переваривании диафрагмы результат составил 25% от первоначального объема, а переваривание пробы в стандартном искусственном желудочном соке произошло на 20%. В первом цикле пептолиза мышц языка ИЖС Бетасол и стандартным раствором ИСЖ составил 24%. Пептолиз межреберных мышц с ИЖС Бетасол составил 26% против 21% при стандартном растворе.

Во втором цикле переваривания наблюдалось изменение качества переваривания с обратной динамикой. Пептолиз с использованием стандартного раствора ИЖС в целом по первой группе был на 2% лучше, чем переваривание с применением с ИЖС Бетасол. Диафрагмальные мышцы переваривались на 52% от общей массы с использованием бетасола и 46% при стандартном ИЖС, мышцы языка переваривались равномерно по 50%. Межреберные мышцы: 50% ИЖС Бетасол, против 56% стандартный ИЖС.

Во второй группе исследуемой продукции (замороженные мясопродукты), в первом цикле, масса осадка при использовании ИЖС Бетасол на 1,7 % была меньше чем при переваривании в стандартном ИЖС. Во втором цикле пептолиза масса осадка с применением ИЖС Бетасол была на 2,4% меньше чем в стандарте.

В третьей группе (соленые и копченые готовые мясные изделия) концентрация пепсина была увеличена до 14 г на 1 литр раствора. Анализируя опыт ряда других исследователей (Н.А. Никитина, 1998, Л.А. Гребенкина, 2010), отмечено, что в мясных изделиях, подвергнутых копчению, солению, биохимические процессы изменяют структуру мышечного волокна, тем самым увеличивая длительность процесса пептолиза.

После первого цикла переваривания масса осадка с использованием бетасола была на 4% меньше аналогичной пробы, а после второго цикла пробы переварились в равных объемах.

В четвертой группе (сыровяленые и сырокопченые готовые мясные изделия) концентрация пепсина была сохранена на уровне 14 г на 1 литр раствора. Первый цикл пептолиза в целом по группе показал, что переваривание равнозначных проб в ИЖС Бетасол хоть и незначительно, но эффективнее стандартного ИЖС на 1,2%, хотя второй цикл переваривания говорит о несколько другом результате 42,8% ИЖС Бетасол против 43,8% стандартный ИЖС.

Контроль остаточных количеств испытуемых проб в первом и втором циклах пептолиза показал, что из 4-х групп мясной продукции более полное и быстрое переваривание наблюдалось в охлажденных и дефростированных мясопродуктах.

Исследование мясной продукции, подвергнутой более сильной технологической обработке (4 группа), показало, что процесс переваривания протекал значительно медленнее, чем при пептолизе проб 3 группы. У

некоторых видов продукции так и не смогли достигнуть 50% уровня даже при втором цикле переваривания как с ИЖС Бетасол, так и при стандартной схеме приготовления ИЖС, несмотря на увеличение концентрации пепсина до 14г. Очевидно, это связанно с глубокими изменениями структуры мышечного волокна под воздействием температурных, химических и ферментативных факторов в процессе обработки сырья.

Необходимо учесть, что личинки трихинелл, находящиеся в продукции, подвергнутой замораживанию, солению, высушиванию или копчению, как правило, погибшие или ослабленные в значительной степени ввиду воздействия этих факторов. В связи с этим очевидно, что излишне длительное воздействие ИЖС ведет к разрушению трихинелл. Соответственно самым перспективным будет первый режим цикла переваривания.

В процессе работы было установлено, что в первом цикле переваривания с ИЖС Бетасол количество остаточной массы, не переваренной мышечной ткани, было низке на 1,5 - 3% относительно стандартной прописи ИЖС, что потенциально указывает на возможность наличия в них личинок трихинелл.

Как известно из исследований ряда авторов основная масса личинок трихинелл выделяется в период между 10 -25 минутами первого цикла от 53% до 80 % (П.А. Владимирова, 1965, А.С. Бессонов, 1992, Н.А. Никитина, 1998).

За счет увеличения рабочего объема реакторов и соответственно массы проб до 50 г производительность экспертизы увеличивается в 1,5 - 2 раза. Это позволит повысить экономическую эффективность исследований, сократить общее время на проведение трихинелоскопического контроля и облегчить работу в целом для ветеринарно - санитарных экспертов.

Приготовление искусственного желудочного сока Бетасол происходит без использования соляной кислоты, относящейся к соединению второго класса опасности, требующего особых режимов хранения и использования. В условиях передвижных лабораторий ветеринарно-санитарной экспертизы, где эти условия трудновыполнимы - вибрация, перепады температурного режима, отсутствие необходимого освещения для работы с реактивами этого класса опасности. Использование ИЖС Бетасол является выходом из многих ситуаций, наносящих вред сотрудникам лабораторий не только в передвижных лабораториях, но и на других диагностических объектах мелкорозничной торговли.

2.2.2. Динамика выделения личинок трихинелл при использовании бетасола и стандартной прописи искусственного желудочного сока

Использование пепсина в концентрации 10 г на 1 литр раствора показало, что основная масса личинок трихинелл выделялась в течение первого цикла переваривания 42% - 43% в зависимости от вида продукции. Такая динамика наблюдалась как при использовании ИЖС Бетасол, так и при

эксперименте со стандартным раствором ИЖС. Во втором цикле переваривания количество выделенных личинок значительно снижено до 33% - 34% как с ИЖС Бетасол, так и с применением стандартной прописи приготовления ИЖС.

Увеличение концентрации пепсина до 14 г на 1 литр раствора позволилоактивировать процесс выделения личинок трихинелл даже при пепетолизе мясных изделий, подвергнутых термическим и химическим воздействиям (3 и 4 испытуемая группа). Так, в третьей группе при подсчете личинок трихинелл процент выделения сдвинулся на уровень 45% - 46%, а в четвертой группе увеличение зафиксировано на 0,5% - 1% относительно 10% концентрации пепсина. Причем выделение личинок происходило равнозначно как при применении ИЖС Бетасол, так и с использованием стандартной схемы приготовления раствора ИЖС. Второй цикл переваривания 3 и 4 групп также не выявил существенной разницы в выделении личинок трихинелл между испытуемыми растворами. В целом по группам процент выявления составил 35%.

Очевидно, что увеличение концентрации пепсина ведет к более быстрому выделению личинок трихинелл из мышечной ткани. Данная динамика может быть использована для дальнейшего усовершенствования экспресс - диагностики трихинеллеза.

Таким образом, удалось установить, что контрольный отбор проб осадка необходимо проводить уже после первого цикла переваривания.

В целом сравнительные испытания ИЖС Бетасол и стандартного раствора ИЖС по такому критерию определения качества диагностики, как динамика выделения личинок трихинелл, говорит об идентичности результатов, однако технологичность использования ИЖС Бетасол позволяет его применять в более широком диапазоне производственных условий.

Выводы

1. Эпизоотическая и эпидемическая обстановка по паразитарным зоонозам в Российской Федерации характеризуется выраженным неблагополучием. Ежегодно регистрируется до 500 случаев трихинеллеза у домашних и промысловых животных, более 25 тысяч бовисного цистицеркоза и около 160 тысяч эхинококкоза овец и крупного рогатого скота.

2. За последние три года у населения России отмечено более 500 случаев трихинеллеза, 900 случаев тениаринхоза и около 300 случаев тениоза.

3. Неблагополучие по данным гельминтозам обусловлено недостаточно высоким ветеринарно-санитарным уровнем животноводческих хозяйств, нарушениями технологии выращивания животных и слабой кормовой базой. Наиболее неблагополучная ситуация по данным гельминтозам наблюдается вЦентральном,Сибирском, Уральском и Южном федеральных округах.

4. В целях оптимизации ветеринарно-санитарной экспертизы при гельминтозах усовершенствована методика исследования жевательных мышц крупного рогатого скота, включающая дополнительные разрезы наружных и внутренних мышц, что позволило повысить эффективность послеубойной диагностики с 0,32 до 1,1%.

5. Установлено, что увеличение числа и конфигурации разрезов

миокарда крупного рогатого скота и овец увеличило процент обнаружения цистицерков с 1,17 до 3,45% и с 2,1 до 7,45% соответственно.

6. На основании математического анализа данных, полученных при ветеринарио-санитарной экспертизе, обосновано оптимальное количество разрезов мышц сердца, которое составляет 19 у крупного рогатого скота и 18 у мелкого рогатого скота.

7. Визуальный осмотр и пальпация отделенной от туши овец диафрагмы повысил диагностическую эффективность экспертизы на цистицеркоз с 3,03 до 4,29%.

8. В условиях реализации мяса и мясных продуктов на объектах

мелкорозничной торговли для диагностики трихинеллеза наиболее

перспективно применение устройства АВТ-Л7 с использованием нового состава искусственного желудочного сока «Бетасол», исключающего работу с высокотоксичной соляной кислотой.

Практические предложения

Для повышения качества ветеринарно-санитарной экспертизы по диагностике цистицеркоза крупного рогатого скота и овец считаем

необходимым внести изменения в действующие правила ветеринарносанитарной экспертизы мяса и мясопродуктов и дополнить их следующей информацией:

«Голова: осматривают и прощупывают губы и язык. Разрезают и осматривают жевательные мышцы. Проводят разрезы наружных жевательных мышц пластами по четыре на каждой стороне, на всю ширину, от нижнего края нижней челюсти до скуловой кости параллельно их поверхности, ширина пласта 2-3 мм. На внутренних жевательных мышцах проводить три разреза параллельно их поверхности во всю ширину мышц».

«Туша: для обнаружения цистицерков у мелкого рогатого скота отделять в обязательном порядке диафрагмальные мышцы от туши и далее исследовать путем пальпации и более внимательного визуального осмотра в зоне хорошего освещения».

«Сердце: после вскрытия сердечной сумки осматривать эпикард, делать несквозиой разрез по большой кривизне, тем самым, увеличивая осматриваемую поверхность,осматривать эндокард. Производить несквозные разрезы мышц, сердца сверху вниз, начиная с левой стороны сердца. Расстояние между разрезами 0,5-1,5 для крупного рогатого скота, 0,3-0,5см

для мелкого рогатого скота. Количество разрезов не менее 18 (мелкий рогатый скот) и не менее 19 (крупный рогатый скот) зависит от возраста исследуемого животного, породы, веса и упитанности».

В целях обеспечения качественной экспертизы на трихинеллез готовых мясных изделий, реализуемых на ярмарках выходного дняи других объектах мелкорозничной торговли, обслуживаемых силами передвижных лабораторий ветеринарно-санитарной экспертизы,применять аппарат АВТ -Л7 с искусственным желудочным соком «Бетасол».

СПИСОК РАБОТ,

ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1.Викулин Д.В. Оптимизация методов ветеринарно-санитарной экспертизы при гельминтозоонозах.// Материалы докладов научной конференции «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями» - М -2008 - вып. №9. - с. 105-107.

2.Викулин Д.В. Паразитологическая ситуация по гельминтозоонозам на продовольственных рынках г. Москвы.// Материалы докладов научной конференции «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями» - М -2009-вып. №10.-с. 91-92.

3.Викулин Д.В. Математический анализ эффективности послеубоиной диагностики цистицеркоза. /Успенский А.В.// Российский паразитологический журнал.-2010.-№2-с. 87-92.

4.Викулин Д.В. Определение оптимального количества разрезов в миокарде крупного рогатого скота при послеубойной диагностике цистицеркоза. /Российский паразитологический журнал.-2011.-№1-с. 100107.

Заказ № 6547 Тираж - 100 экз. Печать трафаретная. Типография «11-й ФОРМАТ» ИНН 7726330900 115230, Москва, Варшавское ш., 36 (499) 788-78-56 \у\у V/. autoreferat.ru

Текст научной работыДиссертация по биологии, кандидата ветеринарных наук, Викулин, Денис Владимирович, Москва

ВСЕРОССИЙСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ГЕЛЬМИНТОЛОГИИ ИМ. К.И. СКРЯБИНА (ВИГИС), РОССЕЛЬХОЗАКАДЕМИИ

61 12-16/46

На правах рукописи

ВИКУ ЛИН ДЕНИС ВЛАДИМИРОВИЧ

ОПТИМИЗАЦИЯ ВЕТЕРИНАРНО-САНИТАРНОЙ ЭКСПЕРТИЗЫ ПРИ ГЕЛЬМИНТОЗ АХ

Специальность 03.02Л1 - паразитология

ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Научный руководитель: Успенский Александр Витальевич член-корреспондент Россельхозакадемии, доктор ветеринарных наук, профессор

МОСКВА-2012

СОДЕРЖАНИЕ стр.

Введение....................................................................................4

1. Обзор литературы..................................................................11

1.1. Распространение гельминтозоонозов..........................................11

1.2. Диагностика гельминтозоонозов...............................................27

1.3. Распространение гельминтозоонозов среди населения Российской Федерации за 2007 - 2009 гг......................................................... .39

2. Собственные исследования......................................................51

2.1. Материалы и методы...................... .........................................51

2.2. Результаты и их обсуждение..................................................58

2.2.1. Сравнительная оценка методик исследования на цистицеркоз

туш и внутренних органов крупного рогатого кота и овец.....................58

2.2.3.Статистическое определение вероятности оптимального

количества разрезов при послеубойной диагностике цистицеркоза в миокарде овец............................................................................64

2.2.4. Статистическое определение вероятности оптимального

количества разрезов при послеубойной диагностике цистицеркоза в миокарде крупного рогатого скота...................................................69

2.2.5. Анализ собственных исследований по обнаружению цистицеркоза в различных регионах РФ и результаты экстенсивности и интенсивности инвазии.......................................................76

2.2.6. Анализ собственных исследований по обнаружению цистицеркоза в зависимости от возраста убойных животных................86

2.3. Оптимизация ветеринарно-санитарной экспертизы на

трихинеллез.....................................................................87

2.3.1. Материалы и методы........................ ....................................87

2.3.2. Конструктивные и технические особенности аппарата ABT -JI7.....90

2.3.3. Результаты и их обсуждение..................................................94

2.3.4. Динамика выделения личинок трихинелл при использовании ИЖС Бетасол и стандартной прописи искусственного желудочного

сока......................................................................................100

Выводы..................................................................................103

Практические предложения.........................................................105

Список использованной литературы.............................................107

Приложение.............................................................................128

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность проблемы. Инвазионные заболевания являются одними из основных факторов, влияющих на эпидемическую и эпизоотическую обстановку, оказывают активное воздействие на эволюцию животного мира в качестве селективного процесса. Паразитарные болезни вызывают значительную белково -энергетическую недостаточность питания людей, снижение иммунитета и, как следствие, являются серьезной социально -экономической проблемой многих стран (К.И. Абуладзе 1964).

Несмотря на значительное снижение поголовья животных в последние годы, эпизоотическая обстановка по гельминтозоонозам в Российской Федерации остается нестабильной. По данным ветеринарной отчетности в результате ветеринарно - санитарной экспертизы мяса и мясопродуктов убойных животных в 2010 году зарегистрировано 523 (0,003%) случая трихинеллеза, 25985 случаев цистицеркоза (0,14%) и 161767 (0,86%)-эхинококкоза.

Отсутствие эффективных целевых программ по финансовой поддержке развития АПК на селе со стороны государства, несовершенные технологии выращивания и низкая культура разведения животных в личных подсобных хозяйствах ведет к распространению многих паразитарных болезней, в том числе и гельминтозоонозов.

За последние пять лет с развитием промышленного свиноводства, проблема распространения трихинеллеза и цистицеркоза свиней на закрытых свиноводческих комплексах европейского образца практически сведена к нулю. Но в целом по Российской Федерации эта проблема остается актуальной.

Определенную опасность представляет также мясосырье, поступающее в Российскую Федерацию из стран ближнего и дальнего зарубежья.

Анализ эпизоотической и эпидемической ситуации по зоонозам в Российской Федерации свидетельствует о возрастающей роли диких промысловых животных в распространении этих инвазий среди жителей Сибирского, Уральского и Южного федеральных округов. В то же время распространение гельминтозоонозов среди населения Европейской части Российской Федерации чаше всего вызвано употреблением в пищу непроверенного мяса домашних животных. В Российской Федерации (2010 год) смертность от заболеваний паразитарной этиологии составила 21 случай на 100 ООО населения (для сравнения в США этот показатель равен 6, в Германии - 8, в Японии - 5). В России эхинококкоз копытных животных приобрел природную очаговость, стационарность и возможность перекрестного заражения дефинитивных и промежуточных хозяев (A.B. Успенский, 1995, Ю.Ф. Петров, 2004). За последние три года (2008 - 2010 гг.) зарегистрировано более 500 случаев трихинеллеза у населения, более 900 случаев тениаринхоза и чуть менее 300 случаев тениоза.

В связи с вступлением России во Всемирную торговую организацию усилятся требования к качеству контроля на предприятиях по производству и переработке продуктов питания, что потребует усовершенствования действующих и разработки новых методик экспертизы пищевого сырья, выявления возбудителей паразитарных зоонозов таких как трихинеллез, цистицеркоз, эхинококкоз, описторхоз, дифиллоботриоз и ряда других заболеваний.

Глобальное значение паразитарных зоонозов и их огромное влияние на экономику, и здоровье населения признаны Всемирной организацией здравоохранения. Комитетом экспертов ВОЗ разработана международная классификация заразных болезней, в категорию болезней разных видов животных включены цистицеркоз свиней, эхинококкоз, трихинеллез. Важную роль в предупреждении этих заболеваний играет ветеринарно-санитарная экспертиза туш животных в условиях перерабатывающих предприятий, боен, лабораторий ветеринарно-санитарной экспертизы на рынках.

Цель ветеринарно-санитарной экспертизы не только в постановке диагноза и оперативного изъятия пораженной туши или органов из технологического цикла переработки, но и анализ зараженности животных и своевременная передача соответствующей информации органам государственной ветеринарной и санитарно-эпидемиологической службы, осуществление мониторинговых исследований и ведение мероприятий по борьбе с инвазией.

Данные ветеринарно-санитарной экспертизы играют важную роль в уточнении эпизоотической и эпидемической ситуации, позволяют определить сезонную и возрастную динамику в распространении инвазии, выявить неблагополучные хозяйства, повысить товарные качества животноводческой продукции. Поэтому предъявляются высокие требования к профессиональному уровню специалистов данного профиля, техническому обеспечению и созданию оптимальных производственных условий для выполнения исследований.

Цель и задачи исследований.

Цель работы: усовершенствование методов диагностики паразитарных зоонозов и цистицеркоза овец, проведение сравнительных испытаний, технологическая доработка

диагностических устройств и оптимизация ветеринарно-санитарной экспертизы.

Для достижения поставленной цели были определены следующие задачи:

уточнить эпизоотическую обстановку по изучаемым гельминтозам (Cysticercus bovis, Cysticercus ovis, Trichinella spiralis);

- изучить основные факторы передачи инвазии;

- провести сравнительные испытания действующих методик экспертиз на цистицеркоз крупного рогатого скота и овец;

- провести математический анализ и обосновать оптимальное количество разрезов исследуемых мышц для выявления цистицеркоза крупного рогатого скота и овец;

- определить диагностическую эффективность нового состава искусственного желудочного сока с применением аппарата по выделению личинок трихинелл ABT - Л7;

- повысить эффективность диагностики данных гельминтозов.

Научная новизна. Впервые на основании математического

анализа определено оптимальное количество разрезов миокарда крупного рогатого скота и овец, позволяющее значительно повысить выявляемость цистицеркоза. Установлено, что при 19 разрезах миокарда крупного рогатого скота и 18 - у овец эффективность

послеубойной диагностики цистицеркоза повысилась соответственно в 2 и 1,5 раза. Показано, что использование бетасола в качестве искусственного желудочного сока (ИЖС) в аппарате АВТ-Л7 при диагностике трихинеллеза является более технологичным и безопасным, особенно, в производственных условиях и не уступает стандартному раствору ИЖС.

Практическое значение диссертационной работы. По

результатам диссертационной работы разработаны Методические положения «Ветеринарно - санитарная экспертиза на трихинеллез на основе нового состава компонентов искусственного желудочного сока». Одобрены секцией «Инвазионные болезни животных» Россельхозакадемии 23.09.2011г.

Разработаны дополнения к «Правилам ветеринарного осмотра убойных животных ветеринарно-санитарной экспертизы мяса и мясных продуктов» (от 27.12.1983г.) (23.09.2010г.). Материалы работы используются лабораториями ветеринарно-санитарной экспертизы на объектах мелкорозничной торговли.

Апробация работы. Материалы и методы исследований представлены на научной конференции «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями» (2008 г.), отчетных конференциях ВИГИС (2007 - 2010 гг.), секции «Инвазионные болезни животных» Отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии (2011 г.).

Личный вклад соискателя. Представленная диссертация является результатом работы за период аспирантуры. Исследования по

усовершенствованию методики ветеринарно-санитарной экспертизы внутренних и наружных жевательных мышц, миокарда крупного рогатого скота и овец выполнено аспирантом лично.

Работа выполнялась под руководством д.в.н., профессора A.B. Успенского, который оказывал консультационную и научно методическую помощь в выполнении поставленных задач, их анализе и обобщении результатов.

Основные положения выносимые на защиту:

- математический анализ количества разрезов в миокарде крупного рогатого скота и овец;

усовершенствованная методика ветеринарно-санитарной экспертизы по диагностике цистицеркоза крупного рогатого скота и овец;

- усовершенствованная технология ветеринарно-санитарной экспертизы на трихинеллез методом автоматизированного пептолиза.

Публикации. Материалы исследований опубликованы в четырех работах, две из которых в изданиях рекомендованных ВАК РФ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 127 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, включающих материалы и методы, результаты и их обсуждения, выводов, практических предложений.

Работа иллюстрирована 12 таблицами, 11 рисунками. Список используемой литературы содержит 180 источников, в т.ч. 71 зарубежных авторов.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Распространение гельминтозоонозов

Цистицеркоз крупного рогатого скота вызывается паразитированием личиночной стадии ленточного гельминта Taeniarhynchus saginatus, цистицеркоз у овец паразитированием личиночной стадии Taenia ovis, а у свиней Taenia Solium семейства Taeniidae. Заболевания характеризуются острым или хроническим течением в результате поражения личинками (цистицерками) поперечнополосатой мускулатуры дефинитивных хозяев.

Локализация личинок - мышечная ткань сердца, диафрагма, жевательные мышцы, язык, различные участки скелетной мускулатуры, реже паренхиматозные органы.

Основным фактором распространения цистицеркоза в странах мира является уровень социально-экономического развития, так как он определяет состояние общей и санитарной культуры, экономические возможности стран, тип и систему животноводства, ориентацию экономического развития страны. По мнению многих исследователей существует прямая связь между широким распространением заболевания и уровнем социального развития региона.

Высокий уровень цистицеркоза крупного рогато скота и овец обусловлен отсутствием эффективного контрольно-диагностического оборудования, примитивными методами убоя животных местным населением, подворным убоем скота, а также хочется отметить реализацию и приобретением жителями мясопродуктов в местах

несанкционированной торговли не только в регионах с низким социально-экономическим развитием, но и в московском регионе. Как правило, в таких местах мясопродукты реализуются не редко без проведения ветеринарно-санитарной экспертизы.

Цистицеркоз широко распространен во многих странах мира, где занимаются выращиванием крупного рогатого скота, мелкого рогатого скота и свиней.

Цистицеркоз встречается во всех возрастных группах животных, но у молодняка процент пораженности наиболее высок. Многие исследователи указывают, что чаще поражается скот в возрасте от 7-ми месяцев до 2-х лет. Также возможно заражение телят от 20-30-дневного до 3-х месячного возраста, этим подтверждается факт внутриутробного заражения (Л.И. Попова, 1943; М.Г. Сафронов, 1955; Д.З. Болховитинов, P.C. Четыркина, 1961)

По данным И.А. Степанова (1962) и О.С. Карамендина (1966) цистицеркоз обнаруживали не во всех возрастных группах: у телят моложе года процент обнаружения составил 0,48, у животных годовалого возраста — 1,7%, у животных 2-х летнего возраста процент заражения составил 1,68%. Среди животных старше 10-летнего возраста цистицеркоз не регистрировался.

Высокий процент обнаружения цистицеркоза у молодых животных можно объяснить их более тесным контактом с обслуживающим персоналом. Наибольшее абсолютное число зараженных цистицерками туш крупного рогатого скота в период с 1964 по 1980 г. выявлялось в России (от 56,2 до 73,7%). В целом по бывшему СССР от 92 до 95,4% всех туш зараженного скота попадало из РСФСР, Украины, Узбекистана, Казахстана, Азербайджана и

Армении и только от 4,6 до 7,3% - из остальных республик (A.C. Бессонов, 1988).

Тениаринхоз и цистицеркоз постоянно регистрируют в европейских странах. Наиболее неблагополучными считаются Польша, Чехия и Словакия (J. Slais, 1974, 1975), в некоторых районах Боснии, Герцоговины и Черногории уровень зараженности скота достигал 30% и более (Z. Petrovic, 1977).

В Испании и Англии встречаемость зооноза сравнительно редка. Обратная ситуация складывается во Франции, где начиная с 60-х годов прошлого века наблюдалась тенденция к увеличению экстенсивности инвазии. Так в 1980 г. из 4 млн. убитого во Франции скота 19 тыс. оказались заражены C.bovis, а среди населения страны регистрировали до полумиллиона случаев тениаринхоза в год (Р. Bouree et al, 1982).

По тениаринхозу и цистицеркозу среди стран Азии неблагополучны Китай, Индия (N.K. Venkataramana et al., 1989), Монголия (L. Froyd, 1962).

Страны Африки относятся к числу наиболее неблагополучных по цистицеркозу в мире. В Эфиопии скот заражен C.bovis на 14,6-36%, в Судане на 20,2%, в Кении в среднем по стране до 8%, а в некоторых районах до 85%. Буйволы в Египте инвазированы бовисным цистицеркозом на 4,25%, а крупный рогатый скот на 9,21% (A.C. Бессонов, 1999).

Исследования, выполненные в странах Северной Америки (в первую очередь США и Канада) указывают на относительно невысокий уровень зараженности цистицеркозом. Распространение цистицеркозов в мире в целом, судя по литературным данным последних лет, медленно снижается (A.C. Бессонов, 1999).

В настоящее время в РФ необходимо отметить тенденцию к снижению обнаружения цистицеркоза в свиноводческой продукции как на рынках в лабораториях ветеринарно-санитарной экспертизы, так и на бойнях и мясоперерабатывающих предприятиях. Это объясняется развитием свиноводческой отрасли по западным технологиям. Приобретаются свиноводческие комплексы закрытого типа с более высокой организацией труда и минимальным количеством обслуживающего персонала.

К трихинеллезу восприимчивы животные многих видов: более 120 видов животных и десятки видов птиц. Инвазия, вызываемая Trichinella spiralis, вариететами (штаммами) этого вида (Trichinella spiralis native,, T.s. nelsoni., T.s. britovi и др.) и вида T.pseudospiralis обнаруживают так же у морских млекопитающих - китов, моржей, тюленей. В качестве резервуаров выявлены морские звезды, моллюски и ракообразные. Т. pseudospiralis регистрируется у многих видов птиц. Трихинеллез распространен практически на всех континентах земного шара и является одним из опаснейших паразитарных заболеваний человека и животных (A.C. Бессонов, 1964, 1970, 1972).

Вспышки трихинеллеза у людей отмечаются в тех случаях, когда в пищу допускается мясо не прошедшее ветеринарно-санитарный контроль.

По данным A.C. Бессонова (1997, 2004), одной из главных причин распространения трихи