Оптимизация методики получения гаплоидов мягкой пшеницы (Triticum aestivum L. ) в культуре пыльников in vitro и возможности их использования в селекции

Данилова, Татьяна Викторовна

Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему
Оптимизация методики получения гаплоидов мягкой пшеницы (Triticum aestivum L. ) в культуре пыльников in vitro и возможности их использования в селекции
ВАК РФ 06.01.05, Селекция и семеноводство

Автореферат диссертации по теме "Оптимизация методики получения гаплоидов мягкой пшеницы (Triticum aestivum L. ) в культуре пыльников in vitro и возможности их использования в селекции"

На правах рукописи ДАНИЛОВА Татьяна Викторовна РГ5 ОД

^ "" ДВГ 2000

ОПТИМИЗАЦИЯ МЕТОДИКИ ПОЛУЧЕНИЯ ГАПЛОИДОВ МЯГКОЙ ПШЕНИЦЫ (TRITICUM AESTIVUM L.) В КУЛЬТУРЕ ПЫЛЬНИКОВ IN VITRO И ВОЗМОЖНОСТИ ИХ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В СЕЛЕКЦИИ

Специальность 06.01.05 — селекция и семеноводство

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

МОСКВА 2000

Диссертационная работа выполнена на кафедре селекции и семеноводства полевых культур Московской сельскохозяйственной академии им. К. А. Тимирязева и в лаборатории «Новые технологий размножения растений» Главного ботанического сада им. Н. В. Цицина, РАН.

Научные руководители: доктор сельскохозяйственных иаук, профессор Ю. Б. Коновалов; кандидат сельскохозяйственных наук О. И. Молканова.

Официальные оппоненты: доктор биологических наук В. В. Мазин; 'кандидат биологических наук О. Г. Семенов.

Ведущее учреждение — Научно-исследовательский институт сельского хозяйства центральных районов нечерноземной зоны.

Защита диссертации состоится......................2000 г.

в 1У....... ч 'на заседании диссертационного совета Д 120.35.04

в Московской сельскохозяйственной академии им. К. А. Тимирязева.

Адрес: 127550, Москва, ул. Тимирязевская, 49. Ученый совет МСХА.

С диссертацией можно ознакомиться в ЦНБ МСХА.

Автореферат разослан..........^.^.....^У^1^:.................. 2000 г.

Ученый секретарь диссертационного совета кандидат сельскохозяйственнь] наук

Р. Усманов

/7 т

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность темы диссертации. Методы биотехнологии позволяют существенно повысить эффективность селекции. Можно утверждать, что в ближайшее время первое место по перспективе широкого использования будет принадлежать гаплоидии. Распространенным методом получения гаплоидов пшеницы является культура пыльников in vitro. Андроклинные дигаплоидные линии гомозиготны, т.е. обладают стабильными рекомбинантными генотипами. Однородные популяции гомозиготных дигаплоидов легче оценить по хозяйственно-ценным признакам, тогда как на свойства растений в сложных популяциях ранних гибридных поколений (из которых обычно производят отборы), оказывают влияние внутрипопуляционные взаимодействия и гетерозисный эффект. Поскольку расщепление в популяции удвоенных гаплоидов аналогично расщеплению гамет, объем популяции, из которой производят отборы, а, следовательно, и площадь посева могут быть значительно уменьшены. Применение гаплоидных растений позволяет сократить сроки выведения сорта самоопылителей на 3-4 года. Использование метода гаплоидии в селекции сдерживается чрезмерно низким выходом гаплоидных растений, получаемых in vitro. Поэтому в представленной работе осуществлен поиск оптимальных условий культивирования, которые позволили бы получать стабильно высокий процент гаплоидных регенерантов. При использовании метода гаплоидии в практической селекции неизбежно возникают следующие вопросы: соответствует ли спектр рекомбинантных генотипов, наблюдаемый в популяции удвоенных гаплоидов, спектру популяций юлученных традиционными методами, вызывают ли применяемые методики изменение наследственности растений. Поэтому в работе были изучены агрономические свойства линий удвоенных гаплоидов и проведен сравнительный анализ расщепления по маркерному признаку в популяциях удвоенных гаплоидов и в F2, полученным обычным путем.

Цель и задачи исследований. Не существует единого мнения об оптимальном составе питательной среды для культивирования in vitro пыльников Triticum aestivum L., (а именно, ее консистенции и типе источника углерода) который обеспечивал бы надежное получение гаплоидных растений разных генотипов, а свойства линий удвоенных гаплоидов не всегда соответствуют ожидаемым от данной комбинации скрещивания. Исходя из этого, были поставлены следующие цели:

• изучить влияние консистенции и Сахаров питательной среды на выход гаплоидных растений Triticum aestivum в культуре пыльников in vitro;

• изучить характер наследования и, в частности, наследования по материнской линии способности к андрогенезу in vitro;

• изучить возможность гаметоклональной изменчивости и гаметного отбора в процессе получения андроклинных гаплоидов.

Для достижения поставленных целей предстояло, используя набор гибридных комбинаций яровой пшеницы, решить следующие задачи:

• изучить влияние агара и Сахаров (сахарозы, глюкозы и мальтозы) питательной среды на выход эмбриоидов, регенерантных растений и долю альбиносных регенерантов в культуре пыльников in vitro;

• провести сравнительный анализ способности к андрогенезу in vitro реципрокных гибридов;

• провести сравнительный анализ расщепления по маркерному признаку в популяциях удвоенных гаплоидов и популяциях гибридов второго поколения;

• изучить агрономические свойства линий удвоенных гаплоидов в сравнении с родительскими линиями и стандартным сортом.

Научная новизна работы состоит в том, что в результате проведенных исследований показано наличие эффекта материнского растения и комплементарный характер наследования способности к андрогенезу in vitro мягкой пшеницы. Изучены агрономические свойства линий удвоенных гаплоидов в сравнении с родительскими сортами и стандартом, что продемонстрировало высокую эффективность применения андроклинных гаплоидов в селекции мягкой пшеницы. Даны рекомендации по использованию для культивирования пыльников жидких питательных сред, содержащих в качестве источника углерода глюкозу или мальтозу.

Практическая значимость работы. Результаты работы станут основой для дальнейшего усовершенствования методики культуры пыльников in vitro и будут использованы для широкомасштабного получения гаплоидов пшеницы в целях практической селекции. Полученные в процессе работы линии удвоенных гаплоидов яровой пшеницы будут включены в селекционный процесс лаборатории селекции и семеноводства полевых культур МСХА.

Апробация результатов , диссертации. Основные положения диссертационной ¿заботы были представлены и доложены на заседании кафедры селекции и семеноводства полевых культур (1999 г.), на научных конференциях молодых ученых и специалистов ТСХА 1998 и 1999 г.

Публикации. Материалы исследований опубликованы в четырех печатных работах.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 102 страницах машинописного текста и включает введение, обзор литературы, материал и методику исследований, две главы экспериментальной части, выводы. Работа содержит 30 таблиц, 12 рисунков. Список литературы включает 142 источника, из которых 107 на иностранном языке.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ 1. Получение дигаплоидных растений. Для решения поставленных задач были подобраны сорта яровой пшеницы (Triticum aestivum L.), различающиеся по маркерным признакам (остистые - безостые, высокорослые - карликовые, с опушенными колосковыми чешуями - без опушения, устойчивые к определенной расе бурой ржавчины - поражаемые), и агрономическим показателям (сроки колошения, урожайность). В таблице 1 приведено описание гибридов, сортов и линий, использованных в разные годы в качестве доноров пылышков для культуры in vitro.

Таблица 1. Генотипы донорных растений

№ Гибридная комбинация Комбинации свойств с указанием кодирующих генов

V д

1 Яровой аналог Мироновской 808(8) Топт Pouce, Rht3 Яровой аналог Мироновской 808 Короткостебельный (ЯЫЗ) х высокорослый

2 Aurore Альбидум1125-79л Красные колосковые чешуи х белые

3 Agatlia Саратовская 29 Короткостебельный, устойчивый к бурой ржавчине ( ИШ, Ьг9) х высокорослый, неустойчивый

4 Новосибирская 67 АНК-12 Высокорослый х короткостебельный (1Ш2)

5 Саратовская 29 Пысар 29 Неустойчивый к бурой ржавчине х устойчивый (1.г19)

6 Яровой аналог Мироновской 808 Яровой аналог Мироновской 808(8) Siete Cerros 66, Rhtl Высокорослый х короткостебельный (Юи1)

7 Calanda Иволга Остистый х безостый

8 Линия 294h-4 Линия 431h-10a-15r Низкорослый, скороспелый х высокорослый, позднеспелый

9 Новосибирская 67 АНК-2 Неустойчивый к бурой ржавчине х устойчивый (ГгТг)

10 Новосибирская 67 Эгисар 29 Неустойчивый к бурой ржавчине х устойчивый (Ьг9)

11 Calanda

12 Иволга

13 АНК-12

14 Линия 431 h-10а-15г

15 Линия 294h-4

lé Иволга Calanda Безостый х остистый

17 Линия 431Ы0а-15г Линия.294Ь-4 Высокорослый, позднеспелый х низкорослый, скороспелый

18 Иволга Линия 35/5 Безостая х остистая

19 Линия 35/5 Иволга Остистый х безостый

20 АНК12 Линия 35/5 Безостый, короткостебельный (ЯШ) х остистый, высокорослый

21 Линия 35/5 АНК12 Остистый, высокорослый х безостый, короткостебельный (1Ш2)

22 Линия 35/5 Линия 294h-4 Остистый, позднеспелый х безостый, раннеспелый

23 Линия 29411-4 Линия 35/5 Безостый, раннеспелый х остистый, позднеспелый

Продолжение таблицы 1

24 Линия 35/5 Лшшя 431h-10a-15r Остистый х безостый

25 Лшшя 431h-10a-15r Линия 35/5 Безостый х остистый

26 Линия 431h-10a-15r Велютинум 693 Нет опушения х опушенные колосковые чешуи

27 Лшшя 35/5

Растения - доноры пыльников - гибриды Fi, сорта и линии выращивали в поле или в теплице. Побеги срезали в фазу выхода в трубку. Срезанные побеги 6-8 дней содержали в темноте при температуре 5±1°С. Стадию развития микроспор оценивали микроскопированием непосредственно перед началом культивирования пыльников. Колосья стерилизовали в 0,1% растворе диацида 7 минут. Для культивирования пыльников использовали среду MN6 [Chu С.С. et al. 1990] с добавлением сахарозы, глюкозы или мальтозы в концентрации 0,25 моль/л. Растворы витаминов, гормонов и Сахаров стерилизовали фильтрованием. Пыльники культивировали при температуре 28-30°С в темноте, по 30 пыльников в 5 мл среды. Каждый вариант опыта включал в среднем 220 культивируемых пыльников. Сформировавшиеся эмбриоиды переносили на среду «190-2» [Zuang, Jia, 1983] и культивировали при температуре +10°С и фотопериоде 16 ч-день, 8 ч-ночь. Хорошо развитые регенерантные растения (высота 10-15 см, 5-6 листьев, 3-5 корешков) обрабатывали колхицином (0,1% раствор с добавлением 2% DMSO) в течение 5 часов при комнатной температуре, в раствор погружали точку роста, затем растения промывали в проточной воде в течение часа и высаживали в почву.

Обработку данных проводили, используя ф-преобразование Фишера для долей (выход эмбриоидов или регенерантов на 100 культивируемых пыльников) с введением поправки Йейтса [Лакин, 1990]. Существенность влияния факторов на результаты опыта определяли с помощью двухфакторного дисперсионного анализа небольшой группы данных без повторностей [Зайцев, 1991]. Для оценки существенности отличия опытных вариантов от стандарта (агаризированная среда, содержащая сахарозу), вычисляли критерий Стьюдента. Для оценки существенности различий между вариантами вычисляли доверительный интервал для доли [Лакин, 1990]. Для всгх статистических оценок использовали 5% уровень значимости.

2. Полевой опыт. Агрономические свойства линий удвоенных гаплоидов. Посев производили в 1999 году на участке с выровненным фоном лаборатории селекции и семеноводства полевых культур МСХА. Метеорологические условия 1999 года сильно отличались от среднемноголетних: начало вегетации (май) - пониженная температура, июнь, июль - недостаточное количество осадхов; среднесуточная температура выше среднемноголетней. В опыте изучали линии удвоенных гаплоидов, полученные от трех комбинаций скрещивания: 1, 7 и 8 (таблица 1) - 2, 16 и 18 линий соответственно.

Повторность трехкратная. Варианта опыта были организованы в блоки, каждый включал набор линий удвоенных гаплоидов, полученных от данной комбинации скрещивания, 2 родительские линии, стандартный сорт (Энита) и F2, полученные обычным путем. Рядки длиной 1м располагали поперек полос, расстояние между рядками 30см, 10 растений в рядке. Семена высевали вручную. Такой способ посева обеспечивал равномерное заглубление семян, дружные всходы, одинаковую площадь питания и сводил к минимуму взаимное влияние растений. Линии удвоенных гаплоидов высевали на двухрядковые делянки, линии родителей и стандарт - по 6 рядков, F2 — 12 рядков. Крайние растения рядков и четыре рядка в начале и в конце блока служили защиткой. Расположение делянок в повторении было систематическим. Обработку опытных данных проводили, используя однофакторный дисперсионный анализ [Доспехов, 1985]. Для оценки существенности отличий между вариантами вычисляли доверительные интервалы. Для анализа расщепления по маркерным признакам в популяциях удвоенных гаплоидов и F2 применяли критерий %2. Все оценки различий между вариантами проводили на 5% уровне значимости.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 1. Выход гаплоидных эмбрнондов и регенерантов пшеницы в зависимости от состава питательной среды, генотипа н условии выращивания доиорных растении. В этой части работы проводилось сравнение эффективности использования трех углеводов - глюкозы, сахарозы и мальтозы в жидких и агаризированных питательных средах при культивиречнии пыльников яровой пшеницы. Согласно результатам дисперсионного анализа, оба фактора (генотип и состав питательной среды) существенно влияли на выход эмбриоидов. Хотя генотипы сильно различались по способности к андрогенезу- in vitro, более чем для половины из них более эффективными оказались . жидкие среды (без агара). Так, для трех из тринадцати генотипов, включенных в опыт 1997 г. (растения - доноры выращивали в теплице), на агаризированной среде с сахарозой эмбриоиды либо не были получены вообще, либо их количество не превышало 1 на 100 пыльников (гибриды №2, 10 и линия №13), тогда как на жидкой среде с глюкозой выход эмбриоидов для этих генотипов составил 6.5, 33.3 и 66.7 соответственно, а для гибридов № 1, 7 и 8 на жидких средах он был больше в 25 раз. Исключением оказался гибрид № 9, для которого стандартная среда -агаризированная, включающая сахарозу, была оптимальной. Для гибридов № 1, 2, 7 и 8 выход регенерантов был пропорционален выходу эмбриоидов. Для гибрида № 3 были получены эмбриоиды на всех вариантах сред, но способными к регенерации оказались только эмбриоиды с агаризированной среды, содержащей глюкозу. Способность к регенерации в условиях данного

опыта сильно варьировала в зависимости от генотипа и в лучшем случае составляла 64,3 %, включая альбиносы, и 50 %, если брать в расчет только зеленые растения. Для наиболее отзывчивых генотипов на жидкой среде с глюкозой было получено более 100 эмбриоидов (гибрид № 8) и 20 зеленых регенерантов (гибриды № 7, 8) в пересчете на 100 культивируемых пыльников. Соотношение зеленых и альбиносных регенератов зависело от генотипа и состава питательной среды и изменялось от 25.7 до 0.5, хотя в отдельных случаях получали либо только зеленые растения, либо только альбиносы.

Описанные тенденции сохранялись в следующем опыте 1997 года, когда донорные растения выращивали в поле. Для половины генотипов (гибриды 3, 7, 8, 9, линии 11, 14) более эффективными оказались жидкие среды. За исключением линии 14 (агаризированная среда с мальтозой), для перечисленных генотипов выход эмбриоидов на жидких средах был в 2-10 раз выше, чем на агаризированных средах с теми же сахарами. Процент регенерации эмбриоидов изменялся в зависимости от генотипа и питательной среды от 250% (в случае полиэмбриоидов - сложных структур, состоящих из нескольких эмбриоидов, полученных на средах с мальтозой) до 0%.

Для тринадцати из восемнадцати генотипов испытываемых в 1998 г. (доноры пыльников выращены в поле) существенно больший выход эмбриоидов по сравнению с агаризированной средой, содержащей сахарозу, был получен на жидких средах. Пять оставшихся генотипов оказались слабо отзывчивыми или вообще не дали эмбриоидов ни на одной из испытываемых сред. Для трех генотипов - гибридов 25, 26 и линии 14 выход эмбриоидов на жидкой среде, содержащей мальтозу, был существенно выше, чем на пяти других вариантах сред. Та же тенденция прослеживается и для гибрида 17. Нужно отметить, что материнской формой гибридов 17, 25 и 26 является линия 14, которая проявила высокую способность к андрогенезу in vitro на жидкой среде с мальтозой (79,6 эмбриоидов на 100 культивируемых пыльников). Все гибридные комбинации, включающие эту линию (8, 17, 24, 25, 26), показали неплохие результаты. Гибриды 7 и 8 показали наилучшие результаты на жидкой среде с сахарозой, 7 и 17 - на жидкой среде с глюкозой. Результаты использования жидких питательных сред, содержащих различные сахара, приведены в таблице 2.

Таблица 2. Процент генотипов, превосходящих контроль (агаризнрованная среда с

сахарозой), по выходу эмбриоидов и регенерантов

Опыт Количество испытываемых генотипов Сахароза Глюкоза Мальтоза

Эмбр. Рег-ты Эмбр. Рег-ты Эмбр. Рег-ты

1997(теплнца) 13 30,8 23,0 46,2 23,0 - -

1997(поле) 12 41,7 41,7 41,7 25,0 41,7 33,5

1998(полс) 16 62,5 18,8 56,3 31,3 62,5 50,0

I 1

Для оценки влияния материнского растения на способность яровой пшеницы к андрогенезу in vitro были проведены реципрокные скрещивания, и пыльники полученных гибридов Ft введены в культуру. В таблице 3 приведены значения критерия Стыодента, рассчитанные для выхода эмбриоидов пар реципрокных гибридов. Четыре пары гибридов из шести рассматриваемых показали существенные отличия по выходу эмбриоидов на разных вариантах сред. Генотипы 20 и 21 оказались слабо отзывчивыми; для них и для пары 22 - 23 существенных различий не выявлено.

Таблица 3. Критерии Стыодента 0ф) для выхода эмбриоидов реципрокных гибридов.

№ п/п Пары реципрокных гибридов (комбинация прямого скрещивания) сж ст гж гт мж мт

1 7-16 (Каланда х Иволга) 2,33 0,99 2,47 1,59 0,36 0,34

2 8-17 (Линия 29411-4 х Линия 431Ь-10а-15г) 12,47 1,78 3,15 2,03 0,20 1,92

3 18-19 (Иволга х Линия 35/5) 4,89 0,21 0,97 0,20 2,29 0,12

4 23 -22 ( Линия 294И-4 х Линия 35/5) 0,09 0,06 1,93 0 1,33 0,06

5 24 -25 ( Линия 35/5 х Линия 431Ь-10а-15г) 2,93 0,85 5,54 1,21 5,41 0,71

6 20-21 (АНК12х Линия 35/5) 0,02 0,01 0,16 0,09 0,50 0,65

Обозначения:

_-отли чие . - существенно, стандарт - агаризнрованная среда с

сахарозой; с - среда с сахарозой, г - с глюкозой, м - с мальтозой,

ж - жидкая, т - твердая (агаризнрованная), t st= 1,96 В опыт были включены как гибриды, так и родительские формы. Интересно отметить, что родителями реципрокных гибридов 7 и 16, образующих эмбрионды в культуре пыльников, являются чистолинейные сорта Иволга и Каланда, не давшие эмбриоидов ни на одной из испытываемых сред. Можно предположить, что в данном случае гены, отвечающие за способность к андрогенезу in vitro, действуют как комплементарные.

При подборе компонентов для скрещивания важно учитывать, что на результаты работы может существенно повлиять выбор материнского растения;

Из пятнадцати генотипов, использованных в опытах 1997 года, десять были включены в оба опыта, что позволило оценить влияние на выход эмбриоидов генотипа (10 вариантов), питательной среды (4 варианта) и условий выращивания донорных растений (2 варианта). Была проведена статистическая обработка данных, полученных в ходе опытов 1997 года с применением

трехфакторного дисперсионного анализа, результаты которого приведены в таблице 4. Существенное влияние на выход андроклинных эмбриоидов оказали условия выращивания донорных растений и генотип.

Таблица 4. Результаты трехфакторного дисперсионного анализа, пропеденного для

преобразованных данных [Зайцев, 1991, Лакин, 990

Вариабельность данных

Суммы квадр. откл.

Степ, свободы

Дисперсия

F Фишера расчетн._

F Фишера табличный.

По

генотипам

1135.83

126,20

3,83

2,32

По

питательным средам

205,34

68,45

2,08

2,98

двух опытов 1997 года

По условиям выращивания донорных растений

214,10

__1

214,10

6,49, 4,22

Общая

2412,60

_____39

61,86 1,88

Остаточная

857,33

32,97

■ Влияние генотипа и условий выращивания донорных растений существенно.

Таким образом, в данном опыте более высокой способностью к регенерации обладали эмбриоиды, полученные на жидких средах с мальтозой, способность к регенерации сильно варьировала в зависимости от генотипа и в лучшем случае составляла более 100% (для полиэмбриоидов) без учета альбиносных регенераитов. Возможность получения гаплоидов в культуре пыльников in vitro не всегда предсказуема для той или иной комбинации скрещивания. С одной стороны, даже в том случае, когда родительские формы не способны к андрогенезу in vitro, гибрид может показать очень хорошие результаты, но может быть также и совершенно бесперспективным. С другой стороны, реальной является возможность использовать в скрещиваниях линии - доноры отзывчивости к андрогенезу in vitro, обеспечивая тем самым достаточно стабильный выход гаплоидов.

2. Агрономические свойства линий удвоенных гаплоидов. Анализ расщепления по маркерным признакам в популяциях удвоенных гаплоидов н в Fj. Получение удвоенных гаплоидов с применением культуры пыльников in vitro сопровождается гаметоклональной изменчивостью [Veilleux, 1998], то есть в процессе андрогенеза in vitro может происходить изменение количества и качества ядерной ДНК и ДНК митохондрий и хлоропластов.

Линии удвоенных гаплоидов, получаемые ранее в лаборатории Биотехнологии ГБС РАН для целей практической селекции характеризовались агрономическими свойствами, отличными от свойств линий, выведенных традиционными способами. По предварительным наблюдениям, среди линий

дигаплоидов преобладали низкорослые, скороспелые и малопродуктивные. При использовании в качестве донорных растений гибридов, родителями которых были остистые и безостые формы, в популяциях удвоенных гаплоидов преобладали остистые растения.

В опытах 1997 - 1998 г. наибольшее количество линий удвоенных гаплоидов было получено для комбинаций скрещивания № 7 и № 8 (16 н 18 соответственно). Эти линии, а также 2 линии удвоенных гаплоидов от скрещивания № 1 (таблица 5) были изучены в опыте. Анализ линий проводили по следующим показателям: продуктивность (масса зерна с растения, масса 1000 зерен, число зерен с растения, продуктивная кустистость), высота, срок колошения.

Таблица 5. Средняя масса 1000 зерен, г, число зерен и средняя масса зерна с одного

растения, г (комбинация скрещивания № 7)

№ Генотип Масса 1000 зерен Число зерен Масса зерна с растения

Значение Откл. от ст. Значение Откл. от ст. Значение Откл. от ст.

1 Энита 28,83 — 164,48 — 4,71 —

2 Иволга 26,78 -2,05 151,14 -13,34 4,04 -0,67

3 Каланда 27,41 -1,43 149,36 -15,12 4,10 -0,61

4 ДГ7.1 29,96 Р1 1,13 143,35 -21,13 4,29 -0,41

5 ДГ7.2 32,41 Р1 Р2 3,58 155,52 -8,96 4,99 Р1 0.28

6 ДГ 7.3 25,77 -3,06 147,40 -17,08 3,80 -0,91

7 ДГ 7.4 30,1 Р1 1,27 128,82 -35,66 3,87 -0,84

8 ДГ 7.5 29,93 1,09 124,42 -40.06 3,74 -0,97

9 ДГ 7.6 34,14 Р! Р2 5,31 134,04 -30,44 4,58 -0,13

10 ДГ 7.7 28,64 -0,20 127,20 -37,28 3,65 -1,06

11 ДГ 7.8 30,11 Р1 1,27 118,97 Р1 Р2 -45,51 3,56 -1,14

12 ДГ 7.9 29,60 0,77 130,10 -34,38 3,8« -0,85

13 ДГ 7.10 26,75 -2,08 154,49 -9,99 4,14 -0,57

14 ДГ 7.11 29,34 0,51 143,10 -21,38 4,18 -0,52

15 ДГ 7.12 26,95 -1,88 171,26 6,78 4,61 -0,10

16 ДГ 7.13 29,03 0,20 167,94 3,46 4,85 0,14

17 ДГ 7.14 28,08 -0,75 172,52 8,04 4,84 0,14

18 ДГ 7.15 27,81 -1,03 158,63 -5,85 4,42 -0,29

19 ДГ7.16 27,81 -1,02 130,43 -34,05 3,62 -1,09

НСР05 3,155 26,935 0,905

Я Фишера факт. (Р05«1,870) 3,358 3,144 2,089

Обозначения: - отклонение от стандарта существенно

р1, р2 - отклонение от 1-ой, 2-ой родительской линии существенно.

Согласно данным таблиц 5 и 6, фактор (генотип), существенно влиял на изменчивость признаков (масса 1000 зерен, число зерен и масса зерна с растения) линий удвоенных гаплоидов, полученных от скрещиваний №7 и№8.

Родительские сорта Иволга и Каланда (комбинация скрещивания №7) не имели существенных отличий по этим признакам и не отличались от стандарта. Линии удвоенных гаплоидов ДГ-7.2 и ДГ-7.6 существенно превосходили стандарт и оба родительских сорта по массе 1000 зерен. Около половины (7 из 16) линий удвоенных гаплоидов имели существенно меньше зерен на одно растение по сравнению со стандартом. У остальных линий удвоенных гаплоидов число зерен было промежуточным между родительскими линиями и не отличалось существенно от стандарта. Масса зерна с одного растения была существенно ниже по сравнению со стандартом у 5 линий удвоенных гаплоидов, тогда как различия между стандартом и родительскими линиями были несущественными. У остальных линий масса зерна с растения была на уровне стандарта; у большинства удвоенных гаплоидов этот показатель колебался между значениями родительских линий.

На рис. 1,2, 3 отображены результаты измерения продуктивной кустистости, сроков колошения и высоты удвоенных гаплоидов. Согласно результатам однофакторного дисперсионного анализа влияние фактора (генотипа) на указанные параметры было существенным.

Рис. 1 Сроки колошения (комбинация скрещивания №7)

III

Рис. 2 Продуктивная кустистость' (комбинация скрещивания №7)

Согласно рис.2, Каланда, а также две линии удвоенных гаплоидов (ДГ-7.12 и ДГ-7.13) существенно превосходили стандарт по продуктивной кустистости, но все линии удвоенных гаплоидов имели промежуточное значение этого показателя по сравнению с родительскими линиями.

Сроки колошения линий удвоенных гаплоидов (рис.!) в большинстве случаев были промежуточными между таковыми у родителей. Только одна линия -ДГ-7.2 выколашивалась существенно раньше более скороспелого

родителя - К«лчча.£1- Высота половины линии удвоенных гаплоидов существенно меньше стандарта (рис.3). Один из родителей (Иволга) был также существенно ниже стандарта. Две линии (ДГ-7.3 и ДГ-7.4) были существенно ниже низкорослого родителя, а одна линия (ДГ-7.2) существенно превосходила более высокорослого родителя - Каланду. Высота большинства линий удвоенных гаплоидов была промежуточной между родительскими линиями.

Таблица 6. Средняя масса 1000 зерен, г, число зерен и средняя масса зерна с одного растения, г (комбинация скрещивания № 8)

№ Генотип Масса 1000 зерен Число зерен Масса зерна с растения

Значение Откл. от ст. Значение Откл. от ст. Значение Откл. от ст.

1 Энита 25,98 — 137,30 — 3,56 —

2 линия 431Ь-10а- 15г 35,30 9,33 124,48 -12,82 4,37 0,81

3 линия 29411-4 25,04 -0,93 117,89 -19,41 2,94 -0,62

4 ДГ 8.1 27,77 Р1 Р2 1,79 155,84 Р2 18,54 4,32 Р2 0,76

5 ДГ 8.2 28,87 Р1 р2 2,90 107,48 -29,82 3,08 Р1 -0,48

6 ДГ 8.3 31,63 Р1 Р2 5,66 115,83 -21,47 3,60 0,04

7 ДГ 8.4 31,79 р1 р2 5,81 192,0 Р1 Р2 54,70 6,10 Р1 Р2 2,54

8 ДГ 8.5 27,40 р1 1,43 137,74 0,44 3,79 0,23

9 ДГ 8.6 28,70 Р1 Р2 2,72 148,95 11,64 4,24 Р2 0,68

10 ДГ 8.7 26,62 Р1 0,65 112,37 -24,94 3,00 Р1 -0,56

I)!

Ю<

(Й

2 Я

— ^ ччсичс;^

Рис.3 Высота растений, см (комбинация скрещивания №7).

Продолжение таблицы 6

11 ДГ 8.8 27,15 Р1 1,17 142,61 5,30 3,92 0,36

12 ДГ 8.9 31,92 Р1 р2 5,94 119,11 -18,19 3,81 0,25

13 ДГ 8.10 37,23 Р2 11,26 129,81 -7,49 4,81 Р2 1,25

14 ДГ 8.11 27,06 Р1 1,08 146,73 9,43 3,96 0,40

15 ДГ 8.12 27,24 Р1 1,26 143,05 5,75 3,89 0,33

16 ДГ 8.13 31,58 Р1 Р2 5,60 106,53 -30,78 3,39 -0,17

17 ДГ 8.14 29,71 Р1 Р2 3,73 115,78 -21,52 3,45 -0,11

18 ДГ 8.15 32,40 Р1 Р2 6,42 109,79 -27,51 3,57 0,01

19 ДГ 8.16 31,59 Р1 Р2 5,61 142,74 5,43 4,53 Р2 0,97

20 ДГ 8.17 27,43 Р1 1,46 172,94 Р1 р2 35,63 4,79 р2 1,23

21 ДГ 8.18 33,30 Р2 7,32 137,54 0,23 4,57 Р2 1,01

НСР 05 2,920 31,439 1,017

Р Фишера факт. (К05=1,870) 11,900 4,040 4,284

Обозначения: отклонение от стандарта существенно

р1, р2 - отклонение от 1-ой, 2-ой родительской линии существенно.

Линии удвоенных гаплоидов от скрещивания №8 имели промежуточные, по сравнению с родителями значения массы 1000 зерен главного и боковых колосьев, а также всего растения. Отцовская линия 431Ь-10а-15г существенно превосходила стандарт по рассматриваемому показателю. 10 из 18 линий удвоенных гаплоидов также превосходили стандарт по массе 1000 зерен. По числу зерен с растения большинство линий удвоенных гаплоидов также занимали промежуточное положение по сравнению с родителями. Однако линии ДГ-8.4 и ДГ-8.17 существенно превосходили лучшего родителя по этому показателю. Большинство линий удвоенных гаплоидов имели промежуточную по сравнению с родителями массу зерна с главного, боковых колосьев и с растения в целом. Только одна линия - ДГ-8.4 существенно превосходила более продуктивного родителя по массе зерна с растения за счет большего числа зерен. Однако 3 линии удвоенных гаплоидов существенно превосходили стандарт по массе зерна с растения (табл. 6). Родительские линии 294И-4 и 431Ь-10а-15г и стандарт не имели существенных отличий по числу продуктивных колосьев на растение. У линий удвоенных гаплоидов этот показатель имел промежуточные значения по сравнению с родителями. По срокам колошения родительские линии существенно отличались между собой и от стандарта (рис.4). Сроки колошения линий удвоенных гаплоидов не выходили за пределы родительских.

Только две линии ДГ-8.7 и ДГ-8.16 выколашивались позже стандарта. Родительская линия 294h-4 являлась более низкорослой, чем 431h-10a-15r, и оба родителя существенно отличались от стандарта. Линии удвоенных гаплоидов имели промежуточную высоту и только две из них - ДГ-8.2 и ДГ-8.3 оказались существенно ниже низкорослого родителя. Пять линий были существенно выше стандарта, а четыре - существенно ниже.

Для комбинации скрещивания №1 были получены только 2 линии удвоенных гаплоидов. Оба родителя относятся к разновидности lutescens, хотя короткостебельный Яровой аналог Мироновской 808(8) Тот Pouce, Rht3 имел остевидные отростки длиной 1-1,5 см на верхних цветковых чешуях. Однако одна из двух полученных для данной комбинации линий удвоенных гаплоидов оказалась остистой. Среди растений • F2 наблюдали только безостые формы и формы с остевидными отростками. Возможно, появление такой формы объясняется явлением гаметоклональнон изменчивости. Обе линии удвоенных гаплоидов были существенно выше карликового родителя и по высоте не отличались от стандарта.

Анализ расщепления по признаку остистости проводили в популяциях линий удвоенных гаплоидов и F2, полученных от комбинации скрещивания №7. Были учтены все удвоенные гаплоиды: как фертильные, так и стерильные, полученные на всех вариантах питательных сред. Как в популяциях линий удвоенных гаплоидов так и F2 расщепление по остистости соответствовало ожидаемому по схеме Менделя - 1 : 1 и 3 : 1 соответственно ( %г опыта меньше X2 st ) (таблица 7).

Таблица 7. Результаты статистического анализа расщепления

Популяция Показатель Повторение Остистые Безостые Всего

F2 1 29 60 89

2 17 59 76

3 16 69 85

? 2,53

Xjst 3,84

Удв. гаплоиды 31 21 52

XJ 1,92

X3st 3,84

4) Р S

у;

£ ю ledoeoooooooooooood""—;™—: —; — -■ —-

Ci о 5 ctyetcirtctctctciUi " " " "

Рис.4 Сроки колошения (комбинация скрещивания №8)

Количество линий удвоенных гаплоидов было недостаточным для поведения статистического анализа соотношения остистых и безостых форм в зависимости от питательных сред, использованных для культивирования пыльников. Однако можно отметить, что при использовании жидкой среды с сахарозой среди полученных дигаплоидов преобладали остистые формы.

Анализ показателей продуктивности линий удвоенных гаплоидов двух гибридных комбинаций продемонстрировал, что с помощью метода культуры пыльников можно получать гомозиготные линии, не уступающие, а иногда и превышающие родительские формы по продуктивности. Средние показатели продуктивности линий удвоенных гаплоидов комбинации №7 превышают родительские. Нужно отметить, что среди них не было отмечено линий, с показателями, существенно меньшими, чем у худшего родителя, зато 2 линии удвоенных гаплоидов существенно превышали обоих родителей по массе 1000 зерен. В среднем масса 1000 зерен дигаплоидов комбинации № 8 меньше среднего родителей, но больше, чем у менее продуктивной формы, а масса зерна с растения больше, чем среднее родительских форм. Эти результаты отличаются от большинства данных, приводимых в литературных источниках: обычно по средним показателям линии дигаплоидов, полученные от одной гибридной комбинации, несколько хуже родителей из-за большой доли низкопродуктивных линий, хотя дигаплоиды с положительной трансгрессией также не редкость. Возможно, объяснение состоит в том, что на протяжении всего опыта условия адаптации гаплоидных регенерантов при высадке в почву были неблагоприятными и на этой стадии растения подверглись жесткому отбору. Так, процент прижившихся растений составлял в среднем 50% и менее. Среди них, как правило, преобладали стерильные растения, оставшиеся гаплоидными. Часть диплоидных растений не дали семян из-за неблагоприятных условий выращивания. Вероятно, этими же причинами объясняется отсутствие дигаплоидов с ярко выраженными аномалиями, хотя среди регенерантов, оказавшихся в дальнейшем стерильными, наблюдали карликовые формы.

ВЫВОДЫ

1. Наибольшее влияние на эффективность культуры пыльников in vitro оказывают условия выращивания донорного растения и его генотип.

2. В условиях конкретного опыта состав и консистенция питательной среды

существенно влияют на выход эмбриоидов, а, следовательно, и гаплоидных

регенерантов в культуре пыльников, причем при культивировании

пыльников на жидких питательных средах, он существенно выше.

Оптимальный источник углерода нужно подбирать с учетом особенностей

генотипа. Замена сахарозы в составе питательной среды мальтозой или

глюкозой может привести к увеличению выхода гаплоидных растений

пшеницы либо за счет усиления индукции андрогенеза, (при использовании

глюкозы), либо за счет увеличения регеиерационной способности гаплоидных эмбриоидов (при использовании мальтозы).

3. Четыре пары реципрокных гибридов из шести рассматриваемых показали существенные отличия по выходу эмбриоидов на разных вариантах сред, следовательно, цитоплазма материнского растения влияет на способность гибрида к андрогенезу in vitro.

4. Неотзывчивые линии при скрещивании могут давать высоко отзывчивые гибриды. Можно предположить, что гены, отвечающие за рассматриваемый признак, действуют как комплементарные.

5. Выявлена линия с высокой способностью к андрогенезу in vitro, причем гибриды, полученные с ее участием, также показали хорошие результаты. Отзывчивые линии могут быть использованы в селекционном процессе в качестве донора рассматриваемого признака.

6. Линии удвоенных гаплоидов имеют промежуточные по сравнению с родителями высоту, сроки колошения и продуктивность. Отсутствие малопродуктивных линий удвоенных гаплоидов и линий с ярко выраженными аномалиями можно объяснить воздействием жесткого отбора на этапе адаптации регенерантных гаплоидных растений. В целом, метод культуры пыльников in vitro позволяет получать высокопродуктивные гомозиготные линии пшеницы.

7. У линий удвоенных гаплоидов не наблюдали отклонений по морфологическим признакам. Только одна линия обладала морфологическими свойствами, отличными от родителей. Возникновение остистой дигаплоидной линии от скрещивания безостых родителей, возможно, объясняется явлением гаметоклоналыюй изменчивости.

8. Условия культивирования пыльников оказывают селективное воздействие на микроспоры пшеницы. Среди всех линий, происходящих от скрещивания остистого и безостого сортов, не наблюдали статистически достоверного отклонения от менделевской нормы расщепления, однако отбор гамет был отмечен на питательных средах, различающихся по составу Сахаров. Так, среди линий, полученных на среде с сахарозой, преобладали остистые, но для того, чтобы результаты были достоверными, необходимо проанализировать большее количество удвоенных гаплоидов.

ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Для получения гаплоидов пшеницы целесообразно использовать жидкие питательные среды, в качестве источника углерода содержащие глюкозу или мальтозу. Применение андроклинных гаплоидов в селекции пшеницы является целесообразным, т.к. с помощью метода культуры пыльников можно получать гомозиготные линии, не уступающие родительским формам по продуктивности, а иногда и более продуктивные.

СИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ

1. Молканова О.И., Данилова Т.В. Выход гаплоидных растений яровой пшеницы (Triticum aestivum L.) в культуре пыльников in vitro в зависимости от состава Сахаров питательной среды. Известия ТСХА, 1994, вып. 4, с.69-75.

2. Данилова Т.В. Влияние генотипа и Сахаров питательной среды на выход гаплоидов в культуре пыльников in vitro. Труды научной конференции молодых ученых и специалистов ТСХА 8-10 июня 1999 г.

3. Молканова О.И., Коновалов Ю.Б., Хупацария Т.Н., Данилова Т.В. Изучение детерминированности морфогенеза в культуре тканей пшеницы в интересах селекции. Тезисы конференции к 100-летию Н.В. Цицина, М. 1999 г.

4. Данилова Т.В., Коновалов Ю.Б. Оптимизация условий культивирования in vitro пыльников яровой пшеницы, оценка агрономических свойств линий удвоенных гаплоидов. Тезисы докладов II съезда Вавиловского общества генетиков и селекционеров 1-5 февраля 2000 г., т. 1, с. 101., Санкт-Петербург, 2000.

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Данилова, Татьяна Викторовна

Введение.

1. Цели и задачи исследования.

2. Обзор литературы.

2.1 Гаплоиды растений.

2.2 Возникновение гаплоидных растений.

2.3 Использование гаплоидных растений в селекции.

2.3.1. Сокращение сроков выведения сортов.

2.3.2. Повышение эффективности отбора. Сокращение объема популяций и затрат труда в селекционной и семеноводческой работе.

2.3.3. Мгновенная фиксация и проявление генетических изменений, возникших в результате мутагенеза или .рекси^биногенеза.

2.3.4. Результаты применения гаплоидов в селекции.

2.3.5. Проблемы гаплоидии.

2.4 Культура пыльников пшеницы.

2.4.1. Этапы развития микроспор in vivo и in vitro.

2.4.2. Факторы, определяющие пути развития микроспор в культуре пыльников in vitro.

2.5. Свойства линий андрогенных удвоенных гаплоидов.

2.5.1. Явление гаметоклональной изменчивости.

2.5.2. Гаметный отбор.

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Оптимизация методики получения гаплоидов мягкой пшеницы (Triticum aestivum L. ) в культуре пыльников in vitro и возможности их использования в селекции"

Методы биотехнологии позволяют существенно повысить эффективность селекции. Можно утверждать, что в ближайшее время первое место по перспективе широкого использования будет принадлежать гаплоидии. Для получения гаплоидов пшеницы широко применяется культура пыльников in vitro. Получаемые при помощи этого метода дигаплоидные линии гомозиготны, т.е. обладают стабильными рекомбинантными генотипами; это то, к чему стремится селекционер, формируя в течение 5 -6 лет однородные нерасщепляющиеся линии самоопылителей. Однородные линии гомозиготных дигаплоидов легче оценить по хозяйственно-ценным признакам, тогда как на свойства растений в сложных популяциях первых гибридных поколений (из которых обычно производят отборы), оказывают влияние внутрипопуляционные взаимодействия и гетерозисный эффект. Поскольку расщепление в популяции удвоенных гаплоидов аналогично расщеплению гамет, объем популяции из которой производят отборы, а следовательно и площадь посева могут быть значительно уменьшены.

Частота образования гаплоидов зависит от вида растения и применяемой технологии и колеблется от долей процента до нескольких десятков процентов от числа культивируемых пыльников. Чтобы метод культуры пыльников являлся составной частью селекционного процесса, он должен стать технологией, обеспечивающей надежное получение гаплоидных растений с частотой в несколько десятков или сотен процентов. При разработке методики необходимо учитывать, что выход гаплоидных растений определяется генетическими особенностями и условиями выращивания донорных растений, стадией развития микроспор и условиями культивирования пыльников. Условия культивирования in vitro - это температура, световой режим и состав питательной среды. В данной работе рассматривались, во-первых, состав Сахаров питательной среды и ее консистенция, во-вторых, влияние генотипа, в том числе материнского наследования на выход гаплоидных эмбриоидов и регенерантов.

При использовании методов гаплоидии в практической селекции неизбежно возникают следующие вопросы: соответствует ли спектр рекомбинантных генотипов, наблюдаемый в популяции удвоенных гаплоидов, спектру популяций, полученных традиционными методами, вызывают ли применяемые методики изменение наследственности растений. Поэтому в представленной работе было проведено изучение агрономических свойств линий удвоенных гаплоидов и проведен сравнительный анализ расщепления по маркерному признаку в популяции удвоенных гаплоидов и F2.

Заключение Диссертация по теме "Селекция и семеноводство", Данилова, Татьяна Викторовна

6. Выводы

2. В условиях конкретного опыта состав и консистенция питательной среды существенно влияют на выход эмбриоидов, а, следовательно, и гаплоидных регенерантов в культуре пыльников in vitro, причем при культивировании пыльников на жидких питательных средах, он существенно выше. Оптимальный источник углерода нужно подбирать с учетом особенностей генотипа. Замена сахарозы в составе питательной среды мальтозой или глюкозой может привести к увеличению выхода гаплоидных растений пшеницы либо за счет усиления индукции андрогенеза, (при использовании глюкозы), либо за счет увеличения регенерационной способности гаплоидных эмбриоидов (при использовании мальтозы).

7. У линий удвоенных гаплоидов не наблюдали отклонений по морфологическим признакам. Только одна линия обладала морфологическими свойствами, отличными от родительских. Возникновение остистой дигаплоидной линии от скрещивания безостых родителей, возможно, объясняется явлением гаметоклональной изменчивости.

8. Условия культивирования пыльников оказывают селективное воздействие на микроспоры пшеницы. Среди всех линий, происходящих от скрещивания остистого и безостого сортов, не наблюдали статистически достоверного отклонения от менделевской нормы расщепления, однако отбор гамет был отмечен на питательных средах, различающихся по составу Сахаров. Так, среди удвоенных гаплоидов, полученных на среде с сахарозой, преобладали остистые формы.

5.3 Заключение

Анализ показателей продуктивности линий удвоенных гаплоидов двух гибридных комбинаций продемонстрировал, что с помощью метода культуры пыльников можно получать гомозиготные линии, не уступающие родительским формам по продуктивности, а иногда и более урожайные. В таблице 29 представлены средние значения наиболее важных показателей продуктивности - массы 1000 зерен и массы зерна с растения, рассчитанные для всех линий удвоенных гаплоидов, произведенных от одной гибридной комбинации в сравнении с родителями.

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, кандидата биологических наук, Данилова, Татьяна Викторовна, Москва

1. Батыгина Т.Б. Хлебное зерно. (Атлас). Л. : Наука, 1987. - 103 с.

2. Бигон М., Харпер Дж., Таунсед К. Экология. Особи, популяции и сообщества: В 2-х т. Т. 1.: Пер. С англ.- М.: Мир, 1989 667 с.

3. Биологический энциклопедический словарь / Гл. ред. М.С.Гиляров -2-е изд., исправл. М.: Сов. энциклопедия, 1989. - 864 с.

4. Вавилов Н.И. Селекция как наука. Теоретические основы селекции. -М.: Наука, 1987.- 512 с.

5. Гуляев Г.В., Большаков Н.В. О методах и приемах сохранения типа сорта в первичном семеноводстве. Селекция и семеноводство, 1990, № 6, с. 40-44.

6. Гуляев Г.В., Мальченко Г.В. Словарь терминов по генетике, цитологии, селекции, семеноводству и семеноведению. М.: Россельхозиздат, 1983.-240 с.

7. Джори Б.М., Pao П.С. Экспериментальная эмбриология. / Эмбриология растений: использование в селекции, генетике, биотехнологии. Т. 2. М.: Агропромиздат, 1990, с. 5-38.

8. Дорофеев В.Ф., Удачин P.A., Семенова JI.B. И др. Пшеницы мира. JL: ВО Агропромиздат, 1987. - 560 с.

9. Доспехов Б.А. Методика полевого опыта. М.: Агропромиздат, 1985. -351 с.

10. Дьячук Т.Н. Культура пыльников злаков: современное состояние, проблемы, перспективы. Сельскохозяйственная биология, 1989, №5, с. 3-10.

11. Дьячук Т.И., Столярова C.B., Носова О.И. Культура пыльников межвидовых гибридов пшеницы и тритикале. / Биологические основы селекции растений. Саратов. 1991.-е. 35-41.

12. Дьячук Т.Н. Культура пыльников и формообразовательный процесс у яровой мягкой пшеницы. Генетика, 1994, т. 30 (прил.), с. 45.

13. Зайкина Т.Ф. Особенности культивирования пыльников на жидких средах. Апомиксис и цитоэмбриология растений (сборник).-Издательство Саратовского ун-та, 1987 вып. 7, с. 111-117.

14. Зайцев Г.Н. Математический анализ биологических данных. М.: Наука, 1991.- 184 с.

15. Коновалов Ю.Б. Теория отбора в селекции растений (лекция). М.: Издательство МСХА, 1990. - 36 с.

16. Коновалов Ю.Б. и др. Практикум по селекции и семеноводству полевых культур. М.: Агропромиздат, 1987. - 367 с.

17. Круглова H.H. и др. Эмбриологические основы метода культуры пыльников пшеницы как биотехнологического приема. Тезисы докладов II съезда Вавиловского общества генетиков и селекционеров 1-5 февраля 2000 г., т. 1, с. 151., Санкт-Петербург, 2000.

18. Кузьменко А.И., Дьячук Т.Н., Галкин А.Н., Данилова В.А., Зотова Г.К. Об итогах изучения андрогенных линий яровой пшеницы. Селекция и семеноводство, 1990, №4, с. 10.

19. Лакин Б.Ф. Биометрия. М.: Высшая школа, 1990. - 352 с.

20. Лакшман К.К., Амбегаокар К.Б. Полиэмбриония. / Эмбриология растений: использование в селекции, генетике, биотехнологии. Т. 2. М.: Агропромиздат, 1990, с. 5-38.

21. Лисовская Т.П. Гаметный и зиготный отбор генотипов в расщепляющейся популяции томатов в условиях засухи. /Гаметная и зиготная селекция растений. (Материалы республиканской конференции 23 июня 1986 г.). Кишинев.: Штиинца, 1987. С. 36-41.

22. Молканова О.И., Данилова Т.В. Выход гаплоидных растений яровой пшеницы в культуре пыльников в зависимости от состава Сахаров питательной среды. Известия ТСХА, 1994, Вып. 4, с. 69-75.

23. Молканова О.И., Ковалева И.С., Коновалова Л.И., Слюсаренко А.Г. Индукция гаплоидных растений в культуре пыльников межвидовых гибридов пшеницы. Бюллетень ГБС РАН, 1990, №156, с. 73-78.

24. Наволоцкий В.Д. Результаты селекции ячменя с использованием гаплоидии. Сб. науч. тр. Селекция ячменя на повышение адаптивности с целью увеличения и стабилизации урожая. - Одесса.: ВСГИ, 1990. С. 19-27.

25. Ноглер Г.А., Гаметофитный апомиксис. / Эмбриология растений: использование в селекции, генетике, биотехнологии. Т. 2. М.: Агропромиздат, 1990, с. 39-91.

26. Нокс Р.Б. Пыльцевое зерно. / Эмбриология растений: использование в селекции, генетике, биотехнологии. Т. 1. М.: Агропромиздат, 1990, с. 224-316

27. Паушева З.П. Практикум по цитологии растений. М.: ВО Агропромиздат, 1988. - 271с.

28. Рахимбаев И.Р., Тивари Ш., Кударов Б.Р. Экспериментальная гаплоидия в культуре пыльников и микроспор зерновых злаков. -Сельскохозяйственная биология, 1990, №3, с. 44-55.

29. Смиряев A.B., Мартынов С.П., Кильчевский A.B. Биометрия в генетике и селекции растений. М.: Издательство МСХА, 1992. - 269 с.

30. Тивари Ш. Морфогенез в культуре пыльников и изолированных микроспор ячменя. Автореф. канд. дис. 03.00.12. М., 1989.

31. Чалык С.Т. Перспективы использования гаплоидов кукурузы вселекции. Сельскохозяйственная биология. 1993. - № 5. -с. 86.

32. Чистякова В. Н. Использование гаплоидов для ускорения селекционного процесса у ярового ячменя. /Гаметная и зиготная селекция растений. (Материалы республиканской конференции 23 июня 1986 г.). Кишинев.: Штиинца, 1987. С. 194-196.

33. Чистякова В.Н. Место гаплоидии в интенсификации генетико-селекционных программ. Тезисы докладов II съезда Вавиловского общества генетиков и селекционеров 1-5 февраля 2000 г., т. 1, с. 167., Санкт-Петербург, 2000.

34. Юркова Г.Н. Настоящее и будущее культуры пшеницы in vitro. /Экспериментальная генетика растений в ускорении селекционного процесса. Киев.: Наукова думка, 1989, с.

35. Armstrong Т.A., Metz S.G., Mascia P.N. Two regeneration systems for the production of haploid plants from wheat anther culture. Plant Science, 1987, №51, p. 231-236.

36. Baenziger P.S., Wesnberg D.M., Smail V.M., Alexander W.L., Schaeffer G.W. Agronomic performance of wheat doubled haploid lines derived from cultivars by anther culture. Plant breeding, 1989, Vol. 103 (2), p. 101-109.

37. Bajaj Y.P.S. In vitro production of haploids. Handbook of plant cell culture. (Ed. Evans D.A. et al.), 1983, Vol.1, Mac Millian, New York, p. 228-287.

38. Bajaj Y.P.S. In vitro production of haploids and their use in cell genetics and plant breeding. Biotechnology in Agriculture and Forestry (ed. by Bajaj Y.P.S.), Vol.12, Haploids in crop improvement I. Springer-Verlag Berlin Heidelberg, 1990, p. 3-35.

39. Ball S.T., Zhou H., Konzak C.F. Sucrose concentration and its relationship to anther culture in wheat. Crop science, 1992, Vol. 32, p. 149-154.

40. Blakeslee A.F., Belling J., Farnham M.E., Bergner A.D. A haploid mutant in the Jimson weed , Datura stramonium. Science, 1922, Vol. 55, p. 646-647.

41. Botty N., Dunwell J. Effect of maltose on the response of potato anthers in culture. Plant Cell Tissue and Organ Culture, 1989, Vol. 18, № 2, p. 221226.

42. Bruins M.B.M., Snizders C.H.A. Inheritance of anter culture derived green plantlet regeneration in wheat (T. aestivum L.). Plant Cell Tissue and Organ Culture, 1995, Vol. 43, № i, p. 13-19.

43. Chen J.L., Beversdorf W.D. A comparison of traditional and haploid-derived breeding populations of oilseed rape (Brassica napus L.) for fatty acid composition of the seed oil. Euphytica, 1990, Vol. 51, p. 59-65.

44. Choo T.M., Reinbergs E., Park S.J. Comparison of frequency distributions of doubled haploid and single seed descent lines in barley. Theoretical and Applied Genetics, 1982, Vol. 61, № 3, p. 215-218.

45. Chu C.C., Hill R.D., Brule-Babel A.L. High frequency of pollen embryoid formation and plant regeneration in Triticum aestivum L. on monosaccaridcontaining media. Plant Science, 1990, Vol. 66, № 2, p. 255-262.

46. Day A., Ellis T.H.N. Chloroplast DNA delitions assotiated with wheat plants regenerated from pollen: possible basis for maternal inheritance of chloroplasts. Cell, 1984, Vol. 39, p. 359-368.

47. De Buyser J., Henry Y., Lonnet P., Hertzog R., Hespel A. "Florin": a doubled haploid wheat variety developed by the anther culture method. -Plant breeding, 1987, Vol. 98, p. 53-56.

48. De Buyser J., Henry Y., Taleb G. Wheat androgenesis: cytogenetical analysis and agronomic performance of doubled haploids. Z. Pflanzenuechtung, 1985, Vol. 95, p. 23-34.

49. Devaux P., Kilian A., Kleinhofs A. Anther culture and Hordeum bulbosum-derived barley doubled haploids: mutations and methylation. Mol. Gen. Genet., 1993, Vol. 241, p. 674-679.

50. Dunwell J.M. Pollen, ovule embryo culture as tools in planr breeding. -Plant tissue culture and its agricultural applications., Butterworths, London, 1986, p. 375-404.

51. Elkonin L.A., Enaleeva N.Kh. A meiotic mutant of sorghum (Sorghum bicolor L. Moench) induced in haploid tissue culture. J. Genet.& Breed., 1998, Vol. 52, p. 211-216.

52. Fadel F., Wenzel G. Medium-genotype-interaction on androgenetic haploid production in wheat. Plant breeding, 1990, Vol. 105, p. 278-282.

53. Finnie S.J., Forster B.P., Chalmers K.J., Dyer A.F., Waugh R., Powell W. Genetic stability of microspore-derived doubled haploids of barley: a cytological, biochemical and molecular study. Genome, 1991, Vol. 34, p. 923-928.

54. Finnie S.J., Powell W., Dyer A.F. The effect of carbohydrate composition and concentration on anther culture recponse in barley (Hordeum vulgare L.). Plant Breeding 1989, № 103 □ (2)p. 110-118.

55. Foisset N., Delourme R., Lucas M.O., Renard M. Segregation analysis of isosime markers on isolated microspore-derived embryos in Brassica napus L. -PlantBreeding, 1993, Vol. 110, p. 315-322.

56. Foroughi-Wehr B., Wenzel G. Andro- and parthenogenesis. - Plant breeding: principles and prospects. (Ed. by Hayward M.D., Bosemark N.O., Romagosa I.), 1993, Chapman & Hall, London, p. 261-277.

57. Foroughi-Wehr B., Wenzel G. Recurrent selection alternating with haploid steps a rapid breeding procedure for combining agronomic traits in inbreeders. - Theor. Appl. Genet., 1990, Vol. 80, p.564-568.

58. Franzone P.M., Rios R.D., Procopiuk A.M., Diaz D.G., Robredo C.G., Aguinaga A. Genetic analysis of in vitro regeneration in wheat (T. aestivum1.). J. Genet. & Breed., 1998, Vol. 52, p. 195-201.

59. Goldberg R.B., Beals T.P., Sanders P.M. Anther development: basic principles and practical applications. The Plant Cell, 1993, Vol. 5, p. 1217-1229.

60. Gonzales M., Hernandes I., Jouve N. Analysis of anther culture response in hexaploid triticale. Plant breeding, 1997, Vol. 116, p. 302-304.

61. Guha S., Maheshwari S.C. In vitro production of embryos from anthers of Datura. Nature, 1964, Vol. 204, p. 497.

62. Hamilton D.A., Mascarenhas J.P. Gene expression during pollen development. Pollen biotechnology for crop production and improvement. (Ed. by Shivanna K.R. and Sawhney V.K.), Cambridge University Press, 1997, p. 392-422.

63. Hansen F.L., Andersen S.B., Due I.K., Olesen A. Nitrous oxide as a possible alternative agent for chromosome doubling of wheat haploids. Plant Science, 1988, Vol. 54, p. 219-222.

64. Hassawi D.S., Liang G.H. Antimitotic agents: effects on double haploid production in wheat. Crop Science, 1991, Vol. 31, p. 723-726.

65. Hassawi D.S., Sears R.G., Liang G.H. Microspore development in the anther culture of wheat (T. aestivum L.). Cytologia, 1990, Vol. 55, p. 475-478.

66. He D.D., Ouyng J.W. , Effect of stages of anther development on anther culture of wheat T. aestivum L. Ann. Rep. 1980, p. 74-75.

67. He P., Shen L., Lu C., Chen Y., Zhu L. Analysis of quantitative trait loci which contribute to anther culturability in rice (Orysa sativa L.). Molecular Breeding, 1998, Vol. 4, p. 165-172.

68. Heberle-Bors E. Experimental control of pollen development. Androgenesis and Haploid Plants. (In memory of J.-P. Bourgin). SpringerVerlag, 1998, p. 38- 53.

69. Henry Y., Marcotte J.-L., De Buyser J. Nuclear gametophytic genes from chromosome arm IRS improve regeneration of wheat microspore -derived embryos. Genome, 1993, Vol. 36, p. 808-814.

70. Heszky L.E., Simon-Kiss I., Bihn D.Q. 1.3 Release of the rice variety Dama developed by hsploid somsclone breeding. Biothechnology in agriculture and forestry (ed. By Bajaj Y.P.S.). Springer-Verlag berlin Heidelberg, 1996, Vol. 36, p. 46-54.

71. Horlow C., Raquin C. A critical analysis of existing haploidization techniques. Androgenesis and Haploid Plants. (In memory of J.-P. Bourgin). Springer-Verlag, 1998, p. 7- 23.

72. Howes N.K., Woods S.M., Townley-Smith T.F. Simulations and practical problems of applying multiple marker assisted selection and doubled haploids to wheat breeding programs. Euphytica, 1998, Vol. 100, p. 225230.

73. Hu H. In vitro induced haploids in wheat. / In vitro haploid production in higher plants. Vol. 4, Cereals. (Ed. by Jain M.S., Sopory S.K., Veilleux

74. R.E.), Kluwer Academic Publishers, 1997, London.

75. Hu H. Variability and gamete expression in pollen-derived plants in wheat. / Haploids of higher plants in vitro (Ed by Hu Han and Yang Hongyuan), 1986, p. 67-78, Springer-Verlag, Berlin Heidelberg.

76. Hu T., Kasha K.J. Performance of isolated microspore-derived doubled haploids of wheat (T. aestivum L.). Can. J. Plant Sci., 1992, Vol. 77, p. 549-554.

77. Huang B. Ultrastructural aspects of pollen embryogenesis in Hordeum, Triticum and Paeonia. / Haploids of higher plants in vitro (Ed by Hu Han and Yang Hongyuan), 1986, p. 91-117, Springer-Verlag, Berlin Heidelberg.

78. Inagaki M.N., Mujeeb-Kazi A. Production of polyhaploids of hexaploid wheat using pearl millet pollen. Euthytica, 1998, Vol. 100, p. 253-259.

79. Jansen R.C. On the Selection for specific genes in doubled haploids. -Heredity, 1992, Vol. 69, p. 92-95.

80. Karsai I., Bedo Z. Relationship between anther culture response and aluminium tolerance in wheat (T. aestivum L.). Euphytica, 1998, Vol. 100, p. 249-252.

81. Kasha K.J., Ziauddin A., Cho U.H. Haploids in cereal improvement: anther and microspore culture. / Gene manipulation in plant improvement II. (Ed. by Gustafson J.P.), New Yore.: Plenium Press. 1990, p. 213-236.

82. Kisana N.S., Nkongolo K.K., Quick J.S., Johnson D.L. Production of doubled haploids by anther culture and wheat x maize method in a wheat breeding programme. Plant Breeding, 1993, Vol. 110, p. 96-102.

83. Knox R.E., Fernandez M.R., Brule-Babel A.L., De Pauw R.M. Inheritance of common bunt resistance in androgenetically derived doubled haploid and random inbred populations of wheat. Crop Science, 1998, Vol. 38, №5, p. 1119-1124

84. Larsen E.T., Tuvesson I.K.D., Andersen S.B. Nuclear genes affecting percentage of green plants in barley (Hordeum vulgare L.) anther culture. -Theor. Appl. Genet., 1991, Vol. 82, p. 417-420.

85. Lashermes P., Engin G., Ortiz-Ferrara G. Anther culture of wheat (T. aestivum L.) adapted to dry areas of West Asia and North Africa. J. of Genetics and breeding 1991, Vol. 45, № 1 p. 33-37.

86. Last D.I., Brettell R.I.S. Embrio yield in wheat anther culture is influenced by the choice of sugar in the cultural medium. Plant Cell Reports, 1990, Vol. 9,№ l,p. 14-16.

87. Lazar M.D., Schaeffer G.W., Baenzieger P.S. The effects of interactions of culture environment with genotype of wheat (T. aestivum L.) anther culture response. Plant Cell Reports, 1990, Vol. 8, № 9, p. 525-529.

88. Li H., Qureshi J.A., Kurtha K.K. The influence of different temperature treatments on anther culture response of spring wheat (T. aestivum L.). -Plant Science, 1988, Vol. 57, № 1, p. 55-61.

89. Magoon M.L., Khanna K.R. Haploids. Cariologia, 1963, Vol. 16, № 1, p.191.230.

90. Marsolais A.A., Seguin-Swartz G., Kasha K.J. The influence of anther cold pretriatments and donor plant genotypes on in vitro androgenesis in wheat (T. aestivum L.). Plant Cell Tissue and Organ Culture, 1984, Vol. 3, № 1, p. 69-79.

91. Matzk F., Mahn A. Improved techniques for haploid production in wheat using chromosome elimination. Plant Breeding, 1994, Vol. 113, p. 125129.

92. Mezencev N., Clement G., Guideroni E. Variation among progenies of diploid plants regenerated from haploid, microspore-derived cell-suspension of rice (Orisa sativa L.). Plant breeding, 1995, Vol. 114, p. 149-154.

93. Mitchell M.J., Busch R.H., Rines H.W. Comparison of lines derived by anther culture4 and single-seed descent in a spring wheat cross. crop Science, 1992, Vol. 32, p. 1446-1451.

94. Moieni A., De Vallavieeille-Pope C., Sarrafi A. Potential use of doubled haploid lines for the screening of resistance to yellow rust (Puccinia striiformis) in hexaploid wheat. Plant Breeding, 1997, Vol. 116, p. 595597.

95. Moieni A., Lokos-Toth K., Sarrafi A. Evidence for genetic control and media effect on haploid regeneration in the anther culture of hexaploid wheat. Plant Breeding, 1997, Vol. 116, p. 502-504.

96. Morshedi A.R., Darvey N.L. High frequency of embryos in wheat x maize crosses. Sabrao Journal, 1995, Vol. 27, № 1-2, p. 17-22.

97. Murigneux A., Baud S., Beckert M. Molecular and morphological evaluation of doubled haploid lines in maize. 2. Comparison with single seed descent lines. Theoretical and Applied Genetics, 1993, Vol. 87, № 12, p. 278-287.

98. Orshinsky B.R., McGregor L/J/, Iohonson G.I.E., Hud P., Karttha K.K. Improved embryoid induction and green shoot regeneration from wheat anthers cultured in medium with maltose. Plant Cell Reports, 1990, Vol. 9, № 7, p. 365-369.

99. Orshinsky B.R., Sadasivaiah R.S. Effects of media on embryoid induction and plant regeneration from cultured anthers of soft white spring wheats (T. aestivum L.) Plant Science, 1994, Vol. 102, p. 99-107.

100. Orshinsky B.R., Sadasivaiah R.S. Effects of plant growth conditions, plating density, and genotype on the anther culture response of soft white spring wheat hybrids. Plant Cell Reports, 1997, Vol. 16, p. 758-762.

101. Ottaviano E., Sari-Gorla M. Gametophytic and sporophytic selection. Plant breeding: principles and prospects. (Ed. by Hayward M.D., Bosemark N.O., Romagosa I.), 1993, Chapman & Hall, London, p. 332-352.

102. Ouyang J. Induction of pollen plants in Triticum aestivum. / Haploids of higher plants in vitro (Ed by Hu Han and Yang Hongyuan), 1986, p. 26-41, Springer-Verlag, Berlin Heidelberg.

103. Palmer C.E., Keller W.A. Pollen embryos. Pollen biotechnology for crop production and improvement. (Ed. by Shivanna K.R. and Sawhney V.K.), Cambridge University Press, 1997, p. 392-422.

104. Pelletier G. Use of haplo-diploidisation for plant breeding. Androgenesis and Haploid Plants. (In memory of J.-P. Bourgin). Springer-Verlag, 1998, p. 104-111.

105. Pérez de la Vega M. Biochemical characterisation of populations.- Plant breeding: Principles and prospects, (Ed. by Hayward M.D., Bosemark N.O., Romagosa I.), 1993, Chapman & Hall, London, p. 184-200.

106. Ponitka A., Slusarekiewicz-Jarzina A. Anther culture response in F1 hybrids of winter wheat (T. aestivum L.). J. Appl. Genet., 1996, Vol. 37, № 3, p. 253-260.

107. Powell W., Environmental and genetical aspects of pollen embryogenesis. -Biotechnology in Agriculture and Forestry (ed. by Bajaj Y.P.S.), Vol.12, Haploids in crop improvement I. Springer-Verlag Berlin Heidelberg, 1990 p. 45-61.

108. Powell W., Borrino E.M., Allison M.J., Griffiths D.W., Asher M.J.K., Dunwell J.M. Genetical analysis of microspore derived plants of barley (Hordeum vulgare). Theoretical and Applied Genetics, 1986, Vol. 77, № 5, p. 619-626.

109. Raina S.K. Doubled haploid breeding in cereals. Plant Breeding Reviews (ed. Janick J.), 1997, Vol. 15, p. 141-186.

110. Raina S.K., Irfan S.T. High frequency embryogenesis and plantlet regeneration from isolated microspores of indica rice. Plant Cell Reports, 1998, Vol. 17, p. 957-962.

111. Redha A., Attia T., Bueter B., Saisington S., Stamp P., Schmid J.E. Improved production of doubled haploids by colchicine application to wheat (T. aestivum L.). Plant Cell Reports, 1998, Vol. 17, p. 974-979.

112. Redha A., Schmid J.E., Bueter B., Stamp P., Attia T. Cytological investigation of R1 and R2-generations of spontaneusly and colchicine induced diploid anther derived wheat plants. Cytologia, 1998, Vol. 66, p. 267-278.

113. Reynolds T.L. Ultrastructure of pollen embryogenesis. Biotechnology in Agriculture and Forestry (ed. by Bajaj Y.P.S.), Vol.12, Haploids in crop improvement I. Springer-Verlag Berlin Heidelberg, 1990, p. 66-97.

114. Reynolds T.L. A cytological analysis of microspores of Triticum aestivum (Poaceae) during normal ontogeny and induced embryogenic development. -American Journal of Botany, 1993, Vol. 80(5), p. 569-576.

115. Reynolds T.L., Kitto S.L. Identification of embryoid-abundant genes that are temporally expressed during pollen embryogenesis in wheat anther cultures. Plant Physiol., 1992, Vol. 100, p. 1744-1750.

116. Rode A., Hartmann C., Benslimane A., Picard E., Quetier F. Gametoclonal variation detected in the nuclear ribosomal DNA from doubled haploid lines of a spring wheat (T. aestivum L.), cv. 'Cesar'. Theor.Appl. Genet., 1987, Vol. 74, p. 31-37.

117. Schaeffer G.W., Shape F.T. Jr., Dadley J.T. Biochemical characterisations of anther-derived and inhibitor-selected mutants with inhanced lysine in rice (Oryza sativa L.). J. Appl. Genet., 1998, Vol. 39(1), p. 37-48.

118. Scowcroft W.R., Larkin J. Somaclonal variation. Applications of plant cell and tissue culture. Wiley, Chichester (Ciba Foundation Symposium 137), 1988, p. 21-35, John Wiley & Sons

119. Shannon P.R.M., Nickolson A.E., Dunwell S.M. Effect of anther orientation on microspore-callus production in barley (Hordeum vulgare L.). Plant Cell Tissue and Organ Culture, 1985, Vol. 4, № 3, p. 271-280.

120. Shon C., Sanchez M., Blake T., Hayes P.M. Segregation of Mendelian markers in doubled haploid and F2 progeny of a barley cross. Hereditas, 1990, Vol. 113, № l,p. 69-72.

121. Simonson R.L., Baenziger P.S. The effect of gelling agents on wheat anther and immature embryo culture. Plant Breeding, 1992, Vol. 109, p. 211-217.

122. Snape J.W., Simpson E. The genetical expectations of doubled haploid lines derived from different filial generations. Theor. Appl. Genet. 1981, Vol. 60(2), p. 123-128.

123. Snape J.W., Sitch L.A., Simpson E., Parker B.B. Tests for the presence of gametoclonal variation in barley and wheat doubled haploids produced using the Hordeum bulbosum system. Theor. Appl. Genet. 1988, Vol. 75, p. 509-513.

124. Sorwary S., Schieder O. Influence of sucrose and melibiose on barley anther cultures in starch media. Plant breeding, 1987, Vol. 99, p. 164-171.

125. Stober A., Hess D. Spike pretreatments, anther culture conditions and anther culture response of 17 German varieties of spring wheat (T. aestivum L.). -Plant breeding, 1997, Vol. 116, p. 443-447.

126. Suenaga K., Nakajima K. Variation in doubled haploid plants of wheat obtained through wheat (T. aestivum) x maize (Zea mays) crosses. Plant Breeding, 1993, Vol. Ill, p. 120-124.

127. Thiagarajan M.R., Stringam G.R. A comparison of genetic segregation in traditional and microspore-derived populations of Brassica juncea L. Czern and Coss. Plant Breeding, 1993, Vol. Ill, p. 330-334.

128. Thomas J., Chen Q., Howes N. Chromosome doubling of haploids of common wheat with caffeine. Genome, 1997, Vol. 40,

129. Thompson D.M., Chalmers K., Waugh R., Forster B.P.,Thomas W.T.B., Caligari P.D.S., Powell W. The inheritance of genetic markers inmicrospore-derived plants of barley Hordeum vulgare L. Theor. Appl. Genet. 1991, Vol. 81, p. 487-492.

130. Twell D., Howden R. Mechanisms of asymmetric division and cell fate determination in developing pollen. Androgenesis and Haploid Plants. (In memory of J.-P. Bourgin). Springer-Verlag, 1998, p. 69-103.

131. Ullrich S.E., Kleinhofs A., Hou L., Jones B.L. Application of in vitro culture techniques to barley (Hordeum vulgare L.) improvement. J. Appl. Genet., 1998, Vol. 39(1), p. 49-58.

132. Veilleux R.E. 7. Gametoclonal variation in crop plants. Current Plant Science and Biotechnology in Agriculture. 1998, Vol. 32: Somaclonal variation and induced mutations in crop improvement. - Kluwer Academic Publishers, Great Britain.

133. Wang G., Ji J., Wang Y-B., Hu H., King I.P., Snape J.W. The genetic characterisation of novel multi-addition doubled haploid lines derived from triticale x wheat hybrids. Theor. Appl. Genet., 1993, Vol. 87, p. 531-536.

134. Wei Z.M. Pollen callus culture in Triticum aestivum. Theor. Appl. Genet., 1982, Vol. 63, p. 71-73.

135. Wenzel G., Foroughi-Wehr B. In vitro selection. - Plant breeding: principles and prospects. (Ed. by Hayward M.D., Bosemark N.O., Romagosa I.), 1993, Chapman & Hall, London, p. 353-370.

136. Winzeler H., Schmid J., Fried P.M. Field performance of androgenetic doubled haploid spring wheat lines in comparison with lines selected by the pedigree system. Plant breeding, 1987, Vol. 99, p. 41-48.

137. Zhang X.Q., Wang X.P., Jing J.K., Ross K., Hu H., Gustafson J.P. Characterization of wheat-triticale doubled haploid lines by cytological and biochemical markers. Plant Breeding, 1998, Vol. 117, p. 7-12.

138. Zhou H., Konzak C.F. Genetic control of green plant regeneration from anther culture if wheat. Genome, 1992, Vol. 35, p. 957-961.

139. Ziauddin A., Marsolais A., Simion E., Kasha KJ. Improved plant regeneration from wheat anther and barley microspore culture using phenylacetic acid (PAA). Plant Cell Reports, 1992, Vol. 11, p. 489- 498.

140. Zivy M., Devaux P., Blaisonneau J., Jean R., Thiellement H. Segregation distortion and linkage studies in microspore-derived double haploid lines of Hordeum vulgare L. Theor. Appl. Genet., 1992, Vol. 83, p. 919-924.

141. Zuang J.J., Jia X. Increasing differentiation frequencies in wheat pollen callus. /Cell and tissue culture techniques for cereal crop improvement. -Beijing.: Sci. Press. 1983, p. 431-432.

Информация о работе

Данилова, Татьяна Викторовна
кандидата биологических наук
Москва, 2000
ВАК 06.01.05

Диссертация

Оптимизация методики получения гаплоидов мягкой пшеницы (Triticum aestivum L. ) в культуре пыльников in vitro и возможности их использования в селекции - тема диссертации по сельскому хозяйству, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы