Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОПТИМАЛЬНЫХ ДОЗ СЕМЕНИ ПРИ ГЛУБОКОЦЕРВИКАЛЬНОМ ОСЕМЕНЕНИИ ОВЦЕМАТОК ЗАМОРОЖЕННЫМ СЕМЕНЕМ

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОПТИМАЛЬНЫХ ДОЗ СЕМЕНИ ПРИ ГЛУБОКОЦЕРВИКАЛЬНОМ ОСЕМЕНЕНИИ ОВЦЕМАТОК ЗАМОРОЖЕННЫМ СЕМЕНЕМ"

МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА СССР

ВСЕСОЮЗНАЯ ОРДЕНА ЛЕНИНА АКАДЕМИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ НАУК НМЕНН В. И. ЛЕНИНА

ВСЕСОЮЗНЫЙ ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ЖИВОТНОВОДСТВА

На правах рукописи

СТОЯНОВ Виктор Константинович

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОПТИМАЛЬНЫХ ДОЗ СЕМЕНИ ПРИ ГЛУБОКОЦЕРВИКАЛЫЮМ ОСЕМЕНЕНИИ ОВЦЕМАТОК ЗАМОРОЖЕННЫМ СЕМЕНЕМ

03.00.13—ФИЗИОЛОГИЯ ЧЕЛОВЕКА И ЖИВОТНЫХ /ФИЗИОЛОГИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ/

^Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Дубровины, Московская области 1982 г.

Работа выполнена в Отделе биологии воспроизведения к искусственного осеменения сельскохозяйственных животных Всесоюзного Трудового Красного Знамени научно-исследова-тельскогй института животноводства,

'Научный руководитель: академик ВАСХНИЛ

В. К. МИЛОВАНОВ

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор Ю. Л. МАКСИМОВ кандидат биологических наук В. А. НАУК

Ведущее учреждение — Украинский НИИ степных районов им. М. Ф, Иванова «Асхания-Нова».

Защита состоится <

на заседании специализированного Совета Д-020.16.02 по защите диссертаций на соискание ученой степени доктора наук вря Всесоюзном Лрдеяа Трудового Красного Знамен« научно-исследовательском институте животноводства (ВИЖ).

Адрес института: 142012, Дубровицы, Подольского района, Московской области. - С диссертацией можво ознакомиться в библиотеке лнстн-

Автореферат разослан » —Г.

Ученый секретарь специализированного Совета кандидат биологических наук

И. И. ШМЫГИН

ОЙЦАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ, В основных направлениях вкономического и социального развитая пронятых на ХХУ1 съезде КПСС предусматривается обеспечение насаяёшщ продуктами питания,и преддевсего мясом. Добиться этого можно путем решительного улучшения воспроизводства стада к сохранения приплода. Решение этой задачи невозможно представить без применения такой прогрессивной технологии, как искусственное осеменение. Б овцеводстве искусственное осеменение до.сих пор проводятся свешал и сохраненным не более 1,5 суток семенем. При такда подходе ценна о и выдающиеся производители в т.ч. проверенные по качеству потомства используются с малой нагрузкой. Метод длительного хранения семени барана в глубокозаморсиенном состоянии позволит шире использовать таких баранов и получать максимум потомства от них.

Метод длительного хранения семени быка, открытый В.К.Милован сивым, И Л .Соколовской к. И.И.Смирновым успешно применяют в скотоводстве. В то время как в овцеводстве, до сих пор недостаточно решен вопрос технологии замораживания семени барана в техники искусственного осеменения овец. Совершенствование может идти по следящим направлениям: изучение анатоыо-гисталогических и физиологи-чесхюс особенностей полового тракта овцы, совершенствование технологии замораживания и дозирования семени, техники осеменения и при- -* меневия более совершенных инструментов для осеменения овеа. '

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЙ. В связи с необходимость!) совершенствования технологии искусственного осеменения овец замороженным семенем баранов и выяснения возможности интенсивного использования: дорогостоящих и высокоценных в племенной отношении юторт-- mir Дарангт нами бшш проведены исследования, задачи которых

заключались ВСЛЗЦУВДШ1

X. Изучить анатсмсь-гистологическов строение цервикального кабала овцы.

2. Усовершенствовать защитную. синтетическую среду для разбавления, замораживания семени барана.

3* Усовершенствовать инструменты для глубоксиервикалъного осеменения овец.

4» Изучить эффективность глубокоцервикального осеменения замороженным семенем по результатам ягвония.

5. На основании этих работ изучить влияние дозы'я числа оттаян-внх додвягшпс живчиков ва результативность осеменения при глубоко-цервикальном осеменении.

МАТЕРИАЛИ ЫБГСЙЦ ИССЛЭДОВАНИЙ. Изучение внутренней полости цервикального. канала шейки матки овцы прогадали ш Целиноградском мясокомбинате» Б шейку иатки адальбаевскях ярок в возрасте 18 месяцев .прижизненно вводили быстротверцеюцую полиакриловую пластмассу {Редонт - 03). через 1-1,5 часа ткань органу разрезали и извлекали слепок. С целью отбора препаратов шейки иатки овцн, адаяь-баевсккх взрослых овец убивали в состоянии охоты, вне половой охоты в. овцесовхозе "Аршалинский* Целиноградской области Казахе- ' коВ ССР. Материал фиксировали в жидкости Буэна. Гистологическое строение шейки матки овцн изучали путем заливки в пара^зш г окраски срезов гематоксилином н эозином. На. муцин' применяли опаску по 1Аай-Гршвальду, муцикащином по Ыайеру,

Для определения глубины введения: семени с помоасью сконструированного нами инструмента, вместо семени впрыскивала краску /трииан синий, метилвиолет/ в цервикальный канал. Маткам в охоте вводили глубокозамороженнов и оттаянное семя на возможную глубину

из расчета 40 юн. в ОД ид. Сразу после.введения семени и краски маток убивали и извлекали половые органы.

Лабораторные исследования проводили в Отделе биологии воспроизведения и искусственного осеменения ШЖа. Материалом служило семя баранов различных пород, принадлежащих Центральной. станции искусственного осеменения сельскохозяйственных животных. За основу защитной синтетической средн была взята сахарозно-комдлексонатная среда с антиоксжданто« бутжлокситолуолом /ВОТ/, предложенная И.Н.ШаДдуллинШ.

Метаном встречных арифметических рядов были определены наиболее благоприятные концентрации другого. антиоксвданта - дитретбутил-крезола ДТЕК/, глицерина и желтка. Качество оттаянных жнвчиког определяли по абсолютному показателю живучести (по В,К.Милованову 1935). В саду яз опытных групп вводили «физиологически активное вещество (адиурекрин) - препарат задней доли гипофиза, - содер-жащий.горыон окситоцинового действия 500 мг, на 100 ыя среды.

Заготовку семени проводили в опытном хозяйстве ЕИа на' овцеферме с. Чернецкое, ва Целиноградской областной госшгшстанции, $ госплемэаводе "Котовский" Рязанской области, где было организовано приучение баранов к взятию от шх семени в искусственное влагалище. В период подготовки к приучения баранов (1,5 мое.) были оборудованы лаборатории по глубещщу замораживанию семени баранов. Во время приучения и взятия семени от баранов применялй массаж семенников, семенных канатиков ж придатков семенников. При эта* изготовлена и апробирована.укороченная искусственная вагина с сдаораз сшыы. с шяприемником.

Доела получения эякузиты оценивали по подвижности, объецу, ■ концентрация и другим общепринятым характеристикам. Концентрате

сшени определяли при помощй ФЭКН-57, ФЭК-56 я счетных камер Тоыа в Горяева. Минимальные требования к качеству свежего семени были следующие: концентрация .не менее 2,5 млрд. в I мл., густое, подвижность не менее 0,8, После получения и оценки качества семя до разбавления выдерживали 15^20 минут при комнаткой температуре (+18-20°С).

Разбавление семени провсешли в соотношении 1:2 в йсигее в зависимости от концентрации живчиков с прямолинейно поступательным движением после оттаивания в объеме 0,2 мл. с числом живчиков в 80, 40 и 20 млн. Семя замораживали в форяе гранул и в полипропиленовых соломинках. Наполнение с оломинок семенем проводили в аппарате Ттценко йо технологии, описанной Й.Н.ШаВиуллиным. После закупорки соломинки выдерживали в пластмассовых пеналах (по Байсогальской технологии) 3-4 часа в холодильнике при температуре 0 +2°С, Замораживание семени проводили в камере Ющенко, приспос обленной наш для замораживания семени как в форме гранул на фторопластовой пластине, так и в полипропиленовых ссясминках на медной пластине. Соломинки упаковывали в металлические усовершенствованные вами канистры сосуда Дьюара АТ-6 (Удостоверение на рационализаторское предложение К 131 от 16 марта 1978 г.).

НАУЧНО-ПРШЗВОДСТВШШ ОПЫТЫ, Всего в опытах было осеменено 3340 овец, в том числе замороженным семенем 2192, контролем служили овца осемененные сохраненным незамороженным семенем (1148 овец). Научно-производственные опыты 1977 года"в Лршалинском совхозе г в Учхозе ЦСХИ Целиноградской области, в Кзыл-Жигидинском овцесовхозе Ал?ла-Агинской области проводили глубокозамороженным семенем баранов породы финский ландрас ва эдильбаевских, "крос-обредных" и казахских тонкорунных матках. В 1978 году гдубокоза-мороженным семенем "кроссбредных" баранов осеменили в совхозах

"Аршалинский", "Заря" эдильбаевских и "кроссбредкых" маток. А в 1979 году в Учхозе и совхозе "УлентинсниЙ" Целиноградской области бшга проведены опыты по осеменении овец глубокозамороясен-нш семенем импортных английских баранов ыясо-шерстных полутонкорунных пород: бордер-дейстер, ромни-марш, шевиот, суф$одьк, • клан-форест.1 Заготовка .семени проводилась в гоедлеыэаводе "Котово-кий" Рязанской области;'•

Натек,в опытных,группах осеменяй с помощью следующих инструментов: I. Освменительнан полистироловая пипетка с наконечником, имевшим форму "буравчика", с одним двумя,витками, левого вращения. Инструмент в комплекте имеет металлический стержень для вьгталкн-вания овмени в полипропиленовой соломинке и стержень-извлекатель использованной соломинки. 2." Сконструированный нами совместно с И.Н.ПаЯдуллиным инструмент состоит из ос вменит ельной пипетки (для семени замороженного в соломинках) и.шприца-катетера,' отличающегося от обычного шприца-катетера тем, что имеет очень тонкий наконечник; передний конец которого лишь вполоборота спирально изогнут по направлению .справа-налево г заканчивается единообразным утолщением.' Контрольные группы овец 'осеменяли с помощью обычного шприца-катетера.

Для осеменения овец применяли- светопроводкые влагалищные расширители конструкции Б.К.Милованова и Ю.Н.Трофимова.

Выборку маток в состоянии половой охоты проводили одан раз в сутки с шести до восьми часов утра. Для этого использовали баранов-иробнпков с подвязанными фартуками (в опыте, проведеныот в овцесовхозе "Хзыл-Жигидинский" 'баранн-пробники были вазэктоми-рованы и предварительно проверены на отсутствие живчиков в эякултгахН Овец"в охоте как в опытных, так и контрольных группах осеменяли двукратно: первый раз непосредственно после выборки, второй - по

истечения 8-9 часов. Овец с продолжительной охотой осеменяли третий раз утрам следующего дня.

Саля оттаивали непосредственно перед осеменением. Семя замороженное в форме гранул оттаивали в устройстве, внутренний сосуд которого представляя конус, обеспечивающий немедленное разделение жидкой фаза от твердой. Оттаивание семени проводила при температуре +45-50%, которую контролировали в верхней части конусного оттаивателя. В соломинках семя оттаивала в водяной бане при температуре +40—42Для осеменения применяли семя о подвижностью не менее 0,4. Контролем служило сохраненное семя (+2-4%), разбавленное глпкоз о-цитратно-желточной средой с числом подвижных живчиков 80-100 млн. в 0,1 мл. Фиксировали маток в станках, в наклонном положении с приподнятой (на 15-17 см) задней частью туловища, что позволяло быстрее отыскивать.шейку матки и удерживать ее о пемощьв влагалищного расширителя. Глубокоцервккально осемененными считали тех маток, которым инструмент доя осеменения был введен в цервикалышй канал на 2-4. см.

НАУЧНАЯ ЕСШЗНА., Впервые для замораживания семени барана в состав синтетической среды был введен антиоксидант дятретбутил-крезол (ДТЕК), который предохраняет живчики от холодового удара, его действие можно сравнить с желтком куриного яйца. На даннуи среду получено авторское свидетельство В 852324 вццанноо Государственным комитет см СССР по делам изобретений и открытий с приоритетом от 31 августа 1979 года по заявке № 2854651. Изобретение зарегистрировано в Государственном реестре изобретений СССР 7 апреля. I98X года. Раскрыта зависимость результатов осеменения от числа подвижных живчиков введенных в цервикальный канал оввд. Определена оптимальная доза семени необходимая для достижения высокой оплодотворяемоети при глубокоцервикальном осеменении замороженным семенем, что позволяет в дальнейшем широко

использовать пенных мясо-терстных импортных баранов, содержащихся в Европейской части СССР, на катках других пород Казахстана, Это позволяет значительно экономить и эффективно использовать денное семя.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЦЕННОСТЬ РАБОТЫ. Результаты исследований икесг практическое значение для овцеводства." Определены оптимальные дозы глубокозамороженного (оттаянного) семени баранов при глубоко-цервикальном осеменении овец. Доказана возможность заготовка семени от баранов в условиях облгосплемстанции, госплемзавода, племенной фермы.

Осеменение овец глубокоэаморшенныы оеменеи позволит увеличить число полученного приплода от ввдйвдихся баранов до 10 раз, по сравнению с обычно применяемой технологией искусственного осеменения.

РЕАЛИЗАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ. Предложенные для практики рекомендации внедряются на Целиноградской областной госил оистандага, где в настоящее время в зоне станции искусственно осеменено замороженным семенем 3,5 тысячи овец.

АПРОБАПДЯ РАБОТЫ.' Основные результаты диссертации доложены и обсуждены:

I. На 31 и,32 научных конференциях аспирантов ШХ& (Дубровины 1978 Н 1979 1Т.).-

2*.На координационном совещании по биологии воспроизведения и искусственного осшенения сельскохозяйственных животных (ШЖ, Быково, Отдел биологии воспроизведения и искусственного осеменения сельскохозяйственных животных ШХа, 1Э7Э), где было вынесено решение о внедрении в практику защитной синтетической среды предложенной в диссертации.

ПУБЛИКАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЭДОВАНИЙ. По теме диссертации опубликовано Ц научные статьи.

ОВЬШ РАБОТЫ. Диссертация изложена на 13Э страницах машинописного текста.' Состоит и» введения, обзора литература, методик исследований, результатов собственных'исследований, обсуждений результатов,- выводов и практических предложений.

Текст диссертации написан на русской языке, иллюстрирован 16 таЛяицамя, 7 рисунками и.12 фотографиями.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ. В ходе анатсмо-гисталогических исследований установлено следующее: что канал шейки матки овцы представляет собой полость довольно сложного отроения, как правило величина поперечных расширений полости уменьшается в краниальном направлении. Иногда полость состоит из воронок, следующих друг _-за другом, со слегка загнутыми и утонченными краями, расположенных узкой частью в каудальноы направлении. Число поперечных воронок составляет 5-7. Эти воронкообразные полости махну собой соединены серозно-иышечной прослойкой, поэтомукаодое расширение может перемещаться относительно соединения. Весь канал с воронкообразными "карданами" и соединяющими их собственно каналом шейки матки представляет иногда довольно четкий б - образный изгиб. Поперечные складки довольно массивные в первых трех "карманах", сглаживаются и становятся меньше в краниальном направлении. Поперечные ; складки выше в дорсальном направлении, чем в вентральном. -»^"Ьаличина (диаметр) собственно дервикалъного канала увеличивается также краниально. Кроме того, довольно четко.прослеживается на протяжении всего цервикального канала продольная и поперечная складчатость, ее можно видеть на гребнях "карманов" и собственно цервикальном канале. Иногда полость цервикального канала представляет собой винт левого вращения.. 3 - образный изгиб в этш случае имеет также спиральную форму.

Высота "карманов", образованных поперечными складками, варьи-

рует в широких пределах - от 4 до 12 мм.

При суягности внутренние полости в собственно цервикальный канал особенно карыаны увеличиваются в размерах.

Изучение поперечных срезов на обзорных. гистологических препаратах шейки натки овцы показало, что цервикальный канал имеет сильную продольную и поперечную складчатость. Собственно цервикальный хавал не всегда, проходит по оси шейки матки, а зачастую эксцентрично йииже.к нашей ее части. Сверху шейка матки покрыта рыхлой соединительной траныо, свда подходят крупные кровеносные сосуды и нервные волокна.

Мышечный слой шейки маткн довольно плотный, представлен пучками мышечных волокон, расположенных в основном в двух направлениях: наружный продольный и внутренний кольцевой. Соотношение размеров между собой этих двух мышечных слоев - в различных участках цервикального канала неодинаково. В мышечном слое, как и в адвен-тиции, встречаются крупные и мелкие сосуды, заполненные форменными элементами крови.

Продольные и поперечные - складки шейки матки образуют большую секретирукцую поверхность.'

.Таким образом шейка матки имеет сложное анатомо-гистологичес-кое строение. Поперечные складки ее массивны неправильной формы вершинами направлены каудально. Цервикальный канал у некоторых •овец имеет <5- образный изгиб, который но-ввдимому является основным препятствием при проникновении в шейку матки обычным стеклянный шрицем-катет ерш.

Следовательно для введения семени за вторую и третью складш. шейки матки потребуется дальнейшее совершенствование осемени-тельного инструмента. .

Для проведения научно-производственных опытов по глубокоцер-

викальнсыу осеменению был сконструирован специальный инструмент. Эффективность этого инструмента была установлена по числу овец, которым можно было ввести семя на глубину 2-4 см. С помощью инструмента•стало возможным провешить глубокоцервикальное осеменение значительного поголовья (60 процентов и более) ори условии двукратного осеменения в течении одной охоты.

При введении краски (трипана синего и метилвиодета) трем овцам, находящимся в состоянии половой охоты было выяснено, что новый образец инструмента для глубокоцервикального осеменения овец.позволяет'вводить семя.на достаточную глубину: 4; 3 и 2 см. Аналогичные результаты были получены при введении замороженных и оттаянных живчиков. Доза ОД ми семени полностью размещалась в цервикальном канале и не вытекала. Более глубокое введение инструмента при осеменении создавали лучше условия для размещения дозы большего объема (0,2 мл). Это достигается геликовдно-иэог-нутой формой наконечника инструмента. Данный инструмент сконструирован доя искусственного осеменения овец семенем замороженным как в форме гранул так -и в соломинках.

Таким образом инструмент, для глубокоцервикального осеменения овец в сочетании со светопровсдныш влагалищными расширителями позволяет вводить семя более глубже (2-4 см), в то. время когда обычным стеклянным шприц-катетером удается проникнуть в шейку на глубину не более 1-2 см. Размещение и число живчиков зависело как от глубины1введения так и от концентрации живчиков.

Методом изучения двухкомпонентных систем по В.К.Мялованову Д962/ были.установлены оптимальные концентрации: ДТЕК, желтка и глицерина. Нами установлено, что ДТБК повышает устойчивость живчиков при замораживания и защипает их от холодового удара при оптимальной концентрации (20 кг%). Проверяя оптимальную концентрации желтка в сахарозно-когяшексонатной среде с ДТБК, ш

столкнулись о тем, что если желток вводят обычно из расчета 20 мл на 100 ил среды, а у нас оптимальная концентрация:келтка как ввдно (Ряс. I) составила 5 процентов. Это связано с тем, что ДТБК, как било установлено ранее повышает устойчивость живчиков при замораживании и доел еду щуп живучесть их после оттаивания* Оптимальной, концентрацией'глицерина в наших опытах было 6 процентов (Рис. I).

С целью повышения оплодотворяющей способности замороженного семени барана в состав защитной синтетической среды включили физиологически активное вещество - окситодин, входящей в состав препарата задней доли гипофиза (ЗДГ) адиурекрин. При введении-адиурекрина 0,005 мг£ в питательный раствор начиналось ритмичное сокращение матки крысы и особо бурным оно становилось при кокпен-трации 0,52-0,82 аг% адиурекрина (в среднем 0,в7 ыг£).

РЕЗУЛЬТАТЫ НАУТОО-СРСИЗВОДСТВЕННЫХ ШЫТОВ. -За три подготовительных периода удалось приучить 71 барана различных пород для получеша и замораживания от них семени. -При одинаковом- уровне кормленая и' нагрузки качество свежеполученного семени баранов зависало в основном от породных, индивидуальных особенностей и уровня подготовки. Самый палый объем семени был у баранов породы финский ландрас и кяа^форест 0,7-0,93 мл, а самый большой у борд&р-лейстеров 1,44 мх. Наименьшая концентрация семени у' баранов породы кдан*форест.2,2 ылрц/ил, наибольшая у поиесннх ^россбре-дой/ - 3,4 млрд/ил. СТайл. I).

Семя баранов в наших опытах отличалось разной устойчивостью к замораживание, лучше других пород переносило процесс замораживания н оттаивания семя баранов суффольк процент брака составил - 20, в то время как у "кроссбредов", бордер-лейстерав и ромни-марш - 39 процентов.

Минимальной стелены) разбавления семеня синтетической средой

Содержание. глицерина и желтка в %

Pue. I. Оптимальная концентрация глицерина и желтка в синтетической среде с ДТБК.

Таблица I

Качество семени баранов различных пород, используемых в опытах по замораживание.

Погана бананов- {число ¡число(Общий {Средний (Концентрац!

! ! ¡семени (мл)! (ад) !

_;_1_!_1___J_!_

Финский ландрас 19 468 353,9 0,7 3,1

"Кроссбреды" 20 202 224,9 1Д 3.4

Бордер-лейот ер 4 112 161,1 1,44 ЗД5

Су^фсльи 3 79 102,8 1,31 2,65

рсиаи-марш 20 245 2S6.7 1,17 2,6

Клан-форест 3 21 19,6 0,93 2,2

Шевиот 2 23 28,5 1,23 2,8

Итого; 71 И50 1177,5 — ■

в наших опытах было соотношение 1:2. (в три раза) и белее в зависимости от концентрации живчиков в I ыл свежеполученного сшени.' В опытах по разбавлению семени была установлена следующая заново-

v

мерность - при увеличении степени разбавления семени синтетической средой с БОТ до 12 раз повышался абсолютные показатель живучести замороженного и оттаянного семени.

Во всех научно-производственных опытах было заготовлено 9236 доз семеня в основном от импортных баранов.

На племенной ферме с. Чернецкое было заморожено 1350 доз семени в полипропиленовых соломинках (0,2 мл) в том числе 270 доз о 80 млн; подвижных живчиков в дозе после оттаивания, 539 доз с 40 млн., 541 доза с .20 млн.

Во втором опыте по заготовке семени проведенном на Целиноградской областной госплемотанции было заготовлено 1965 доз семени,

от пдаескнх ("кроссбредных") баранов. В соломинках 914 доз, в том числе 347 доз с 80 млн. подвижных живчиков (0,2 жл) к 667 доз с 40 млн. Остальное (1051 доза) было заморожено в гранулах о -числом подвижных живчиков - 80 млн. в дозе.

В третьем опыте заготовили 5921 дозу семени в гранулах с числом подвижных живчиков 70-80 рн. в 0,2 мл. Заготовку проводили в госплетааводе "Котовский" Рязанской области от импортных английских баранов: борцер-лейстер, рошш-ыарш, суффольк, клан-форест, шевиот.

В первых опытах проведенных в овцесовхозе "Кзыл-Жиги,пинский" и "Дршалияский" било установлено, что результаты осеменения находятся в прямой зависимости от глубины введения семени в цервикалькый канал. (Таблица 2)

Таблица 2

Результаты научно-производственных опытов, проведенных в овцесовхозе "Кзыл-Жигидинский" Алма-Атинской области и "Аршалинский" Целиноградской области.

I Число подвижных живчиков !после оттаивания в 0,2 мл Наименование !

! ! !

¡80 х 10®(40 х 106]ао х 10е

]_|_|_

Контроль.-: свежэразбавлен-ное семя, +443 не менее 100 х

106 живчиков в 0,1 мя

Осеменено овец 100 80 137 ; 189 ■

в т.ч. глубокоцерви-кально 29 ,14 20 —

Учтено овцематок 73 71 115 174

Объягнились, включая -аборты овцематок 24 9 16, гаг

% суягности овец . 32,8 12,6 13,8 59,2

в т.ч. от глубокоцер-викального осеменения 82,7 64,2 . 80,0 _

При глубокоцервикальнсм осеменении на 4 и более см число подвижных живчиков в дозе 0,2 мл не имело существенного значения .

для конечного результата : и 20. млн. и 80 млн. дали одинаковые проценты суягности (82,7 и 805?). Однако» при обычном цервикаяьнсн осеменении когда семя вводят в цервнкальный канак на глубину- не более I см результаты, зависели от числа подвижных живчиков в объеме.0,2 мл:-80 млн. - 32,8 процента суягности, 40 млн. - 12,6, 20 млн. 13,8* Сравнительно низкие результаты от цёрвикального (на I см) осеменения можно объяснить вытеканием чаоти объема дозы во влагалище и применением несовершенных геликоидных инструментов, которые позволяли вводить семя глубокоцервикально только 14,6-29 лрацертов маток (в среднем 20).

Для того, чтобы выяснить какой все же объем и число подвижных живчиков является оптимальным при глубокоцервикальном осеменении были проведены опыты в совхозах "Заря", "Аршалинский" и Учхозе Целиноградского СХИ, результат» которых представлены в таблице 3.

Таблица 3

Влияние объема и числа подвижных живчиков в дозе оттаянного семени на результативность глубокоцервикального осеменения.

Число ПОДВИЖНЫХ ЖИВЧИКОВ (млн.) !Объем ! с вмени | (мл) !Учтено !овец ! I у . Объягнилось- овец

} ЧИСЛО V * 1 и ! Р

5 ' 0,05 90 17 19±8,7 3,678 <0,01

10 0,05 163 48 29+3,5 5,513 <0,01

20 0,05 159 .80 50^3,9 о,4ёз > 0,01

40 ОД 36 52 53+5,0 0Д63 > 0,01

20-40* 0,05-0,1 64 45 70+5,7 3,035 С 0,01

70-80 0,2 292 210 71,9+2,9 5,705 <•0,01

Контроль 80-100 ОД 447 233 52,1+2,3 - _ —.

х) Примечание: в тем числе овцы двукратно осемененные замороженным семенем глубокоцервикально.

Введение овцам глубокоцервикально от 20 до 80 мяв. подвяжных Живчиков дало в итоге приемлемые результаты ягнения овец от 50 до 71,9 процентам Дальнейшее снижение числа подвижных живчиков в дозе сшевж нецелесообразно так как это приводит к резкому ухудшению результативности осеменения.

. Дучдам числом оказалось 70-60 млн.. подвижных живчиков в объеме 0,2 мл семени н 20-40 млн. в 0,05-0,1 мл (при условии двукратного цервикального осеменения в одну охоту). Хотя при етсм были получены совершенно одинаковые результаты, все же предпочтение следует отдать 20-40 млн. в 0,05-0,1 ил, так как при этом достигается более рациональное использование ценного семени.

В опытах, проведенных в совхозе Тлентинский" было сравнено влияние двух антиокевдантов в синтетических средах на оплодотворяе-ыость овец. Сравнение защитных сред по фактическому ягнению показало преимущество средн е ДТБК (48, в процентов) перед БОТ (34 процента). (Таблица 4). Разница составила 1*1,6 процента.

Таблица 4

Результаты ягнения овец в совхозе Тлентинский"

Варианты опыта !Учтено 1маток к I ягнению •Объягнилось ! ! овец ! ! 1 % ягнения

Замотюжекное семя *

Среда с БОТ 176 60 34,0±3.6

Среда с ДТБК III 54 48,6±4,8

Разность 14,6*5,0

ронттзодь:

?езамороженное семя при +2—442 срок хранения I сутки) 155 80 51,6

Введение препарата задней доли гипофиза (ЭДГ) в состав синтетической среды не оказало заметного влияния на результаты ягнения овец от замороженного .'семени. Разница с группой адиурекрина 4,5 процента недостоверна. Таблица 5.

Таблица 5

Результативность осеменения овец -в Учхозе Целиноградского СХ1.

ГУчте-!Объят-! % Группы ! но !нилось'ягнения 'натек!маток ! }1\±гхъ Щолуче-'Выход ягнят ! но !на 100 объяг-!ягнят [нившихся маток

I. Среда с ЭДГ осеменение двукрат-■ ное 190 96 50,0^3,6 Г 124 " 129,1

в т.ч. глубоко. цервшшльно 119 87 . 73,1±4,0

П. Среда без ЭДГ осеменение двукратное 300 138 46,0^2,9 168 121,7

в т.ч. глубоко-цервикально 173 123 71,0±3,4

Ш. Среда без ЗДГ . осегленэние однократное 104 36 34,6^4,7 45 ■ 125,0

в т.ч. глубоко-цервикальяо 34 18 52,9^

Итого по э аморояенноцу сшени. 594 270 45,3^2 . 337 124,8 '

Контроль незакотойсенное семя (при +2-44; I сутки) 69 37 53,6±6 41 '110,8

В.наших опытах, при условии глубокоцервикального введения выяснилось, что суягность при двукратном осеменении составила 71 цр<щент, а при однократном осеменении - 52,9. Цервикальное

двукратное осеменение глубокозаыороженнш и оттаянным семенем имело преимущество перед однократным. Суягность при двукратном осеыенеши составила - 46 процентов, а при однократном - 34,6. Результат двукратного осеменения замороженным семенем превосходил однократное на 11,4 процента.

Глубокоцервикальное осеменение замороженным семенем с числом подвижных живчиков 70-80 мяв. повышает результаты ягнения на 22,6-25 процентов по сравнению с обычным введением.- А в группах осемененных двукратно н глубокоцервикально до - 71 процента ягнения, что по результатам ягнения превосходит контроль на 19,8 процента при статистически достоверной разнице (Р 0,01).

Применение предложенного вами инструмента для осеменения овец позволяет вводить семя глубокоцервикально 59,3 - 70 процентам (в бреднем 61), то есть в 3 раза большему числу овец, чем при применении геликоидных наконечников,

. . Достоверность происхождения ягнят от замороженного семени была доказана генетическими маркерами, а именно: ягнята наследовали следухщие характерные признаки отцов и отличались от контроля. При скрещивании финского ландраса с казахской тонкорунной * породой овец, наследовались наиболее характерные внешние признаки финского ландраса: остроносая форма головы, короткий хвост, стоячие короткие уши, белая масть, а от скрещивания финского ландраса с эдиль-баевской породой наследовались те же характерные признаки, за исключением.масти. В приплоде были ягнята рыжие, черные и белые. Кроме того у помесей финского ландраса о эдильбаевскими овцами отсутствовал курдюк. Помесные ягнята, полученные при скрещивании с импортными английскими баранами отличались от контрольных по следующим признакам:' суффольк х советский меринос — верной окраской шерсти головы и ног, борцер-лейстер х советский меринос - масть

- Iß -

белая и характерные для овец породы бордер-чиейстер - длинные стоячие уш /заячьи/, шевиот х советский меринос - белая шерсть и характерная дал шевиота форма головы и' ушей, клан-форест х советский меринос - рыжая окраска шерсти головы, наг и стоячие маленькие уши..

Ягнята, полученные от скрещивания помесных "кроссбредных" маток с английскими баранами, не отличались'по живой массе цри ,.„_'.-рождении от контрольных ягнят /"кроссбредные" матки в бараны/, хотя в большинстве случаев превосходили контроль. Разница статно-: тнчески недостоверна /Р > 0,01 Таблица 6/.

Таблица 6

Средняя живая масса ягнят, ращенных "кроссбредными" матками Дчхоз Целиноградского СХИ/,

• ¿яд д1 ид11 * *

Порода баранов !при рож- ! Пол ! п, I М± т.

!дении ! ! !

I г I I

{Сонттоль одинцы баранчики ярки 14 10 4,81^1,27 4,26^,31

Незамороженное семя "Кроссбредные" ДВОЙНИ баранчики ярки 4 4 4,32±0,55 3,55^0,51

Замороженное семя: одинцы баранчики ярки 41 46 4,9СЩРД4 4,58±0,Н

I. Бордер-лейстер ДВОЙНИ баранчики ярки 24 36 3,9СЩ0Д5 3,62ЩЭ,14

П. Ромни-марш одинцн баранчики ярки 44 54. ' 4;82±0Д4 4,б6±0,12

ДВОЙНИ баранчики ярки 41 51 4,15^,12, 3.72ЩЗД

Ярки — одиыщ, подученные от скрещивания советский меринос х кдан-форест, превосходили контроль ва 0,31±0,И разница статистически достоверна Аналогично при скрещивании советский меринос х шевиот в этом случае опытные ягнята по группе ярок также превосходили контроль на достоверную разницу Л>ХО,:|/. Таблица 7.

Таким образом, процесс замораживания семени баранов и дальние перевозки не оказывают отрицательного влияния ва качество новорожденного приплода.

Таблица 7

масса ягнят, рожденных матками породы Советский меринос /совхоз "Улентинский" Целиноградской области/.

Наименование груш и порода баранов

!Тип ягнят I !при рож-г ! 1дении !

! I

! ПСЛ 1 1IV ! ! I

баранчики 45 4,02*0,03

ярки ,61 3,69лР,06

баранчики 15 2;7б£РД5

ярки II 2,60^0,23

баранчики 29 4;09^0,13

ярки 24 3,87^,10

бяранчики г 2;70±2Д2

ярки 4 3,ОСЩО,12

ИИИ 32 4,01±0,09

ярки 31 3,;81^.08

баранчшеи 2 3,00^0,42

баранчики II ' 4ДЗ±РД7

ярки II 4,00±0,17

баранчики 7 4,27±0;25

ярки 10 4,00^,18

Контроль

Незамороженной семя Советский меринос

Замороженное семя:

I." Бордер-лейстер

II. Суффольк

Ш* Клан-форест

17. Шевиот

одинцы двойня

двойни

одинцы двойни

ОДИНЦЫ

выводы

Т.- При псмощи полиакриловых слепков /Радонт - 03/ цервикаль- . ного канала эдильбаевскях ярок уточнены данные о канале как полоста сложного строения о мощной поперечной и продольной складчатостью. ,

2. При глуйокоцервикальном введении семени иугао учитывать аватомо-гистологические особенности строения и физиологическое -состояние шейки матки; Благоприятным участком для эффективности осеменения является введение семени в краниальную часть шейки матки.'

3.' Результативность введения глубокозамороженного и оттаян^-ного семени за третью поперечную складку, т.е. глубокоцервикально, с содержанием в дозе 20-40 мяв. оттаянных подвижных живчиков,. била на уровне контроля /52,1 процент/ незамороженного семени, а при введении такого же числа живчиков при двукратном осеменении Аерез 8-10 часов/ суягность повысилась по сравнению с контролем на 20. процентов."

4.' Двукратное /в одну охоту/ осеменение - глубокозамороженным оттаянным семенем имело преимущество перед однократным, так как -позволило ввести катетер в краниальную часть втрое большему числу.овец /до 70 процентов/.

5. Транспортировка"глубокозамороженного семени,баранов на большие расстояния не влияла на качество потомства.

ПРШШШКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ ДЛЯ ПРСИЗВОДСТВА.

I. Применять "укороченное" искусственное влагалище Дб см/ для взятия семени с полиэтиленовым семяприемником. Удостоверение на рационализаторское предложение № в от I сентября 1980 г./

П. Для замораживания семени барана использовать синтетическую , среду с антиоксидантоы ДТБК.- /Авторское свидетельство № 852324 веданное Государственным Комитетом СССР.по.делам изобретений и открытий В.А.ВарнавскоЙ, И.Н.ШДцуллину, В.'К,"Стоянову с приорите-. том изобретений от 31 августа 1979 года.' Изобретение зарегистрировано в Государственвом реестре изобретений СССР 7 апреля 1981 года/;

СОСТАВ:

1. Сахароза - 9,64 г.

2. Кальциевый комплекс дкнатриевой соли ЭДТА - 0,84 г;

3. ДТБК - 0,02 г. .

4. Глицерин - 6 мл.

5. Желток куриного яйца — 5 мл.

6. Вода дистиллированная до 100 мл.

7. Санируиие весцества по инструкции МСХ СССР.

Ш;- Применять для искусственного осеменения овец замороженным семенем геликоидный инструмент.

17. Организовать в лучших овцеводческих племзаводах лаборатории для круглогодичной заготовки глубокозамороженного ошени от дорогостоящих импортных высокопродуктивных- прецатентных, а также линейных проверенных по качеству потомства и признанных достоверными улучшат елями, что позволит получить от них в 10 раз большую .численность улучшенного потомства.'

СПИСОК (ПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДЙССЕРТЩМ.

I." 'Определение оптимальных доз семени при глубокоцериикадь-нсм осеменении овцематок замороженным семенем: Неучные исследования аспирантов /бюллетень научных работ - Дубровщщ, 1979 выпуск 58, стр.; 92-94.

2. Опыт глубокоцервикнлъного осеменения овец замороженный семенем: Животноводство - Ввемесячный научно-зоотехнический, журнал Министерства сельского хозяйства СССР - М., 1980 - I, стр. 45-46.

З.1 Новое в осеменении мясо-шерстных овец: Овцеводство -Ежемесячный научно-производственный журнал Министерства сельского хозяйства СССР - и., 1980 - II, сур.™ 36.

4. Авторское свидетельство * 852324.

Л - 73077 Подписано в печать 3.03,8гг. Формат 60x84/16 объем I п.л. Тираж 100 экз. гак 715

Типография НИИМАШ г.Щерб*ика,Ротопринт,