Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Описторхоз плотоядных в Западно-Казахстанской области Республики Казахстан

ВАК РФ 03.02.11, Паразитология

Автореферат диссертации по теме "Описторхоз плотоядных в Западно-Казахстанской области Республики Казахстан"



СИДИХОВ БЕКЖАСАР МУСТАКАПОВИЧ

Описторхоз плотоядных в Западно — Казахстанской области Республики Казахстан (диагностика, эпизоотология, меры борьбы)

03.02.11 - паразитология

АВТОРЕФЕРАТ

на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

- 7 ИЮН 2072

Саратов-2012

005045293

Работа выполнена в научно - исследовательском институте Республиканского государственного казенного предприятия «Западно - Казахстанский аграрно-технический университет им. Жангир хана»

Научный руководитель: доктор ветеринарных наук,

профессор, чл.-кор. РАСХН Ларионов Сергей Васильевич

Официальные оппоненты: Сидоркин Владимир Александрович

доктор ветеринарных наук, профессор ФГБОУ ВПО «Саратовский ГАУ» профессор кафедры паразитологии, эпизоотологии и ветеринарной санитарной экспертизы

Губарев Николай Николаевич

кандидат ветеринарных наук ОГУ Саратовская районная станция по борьбе с болезнями животных ведущий ветеринарный врач

Ведущая организация: ФГБОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина»

Защита состоится «22» июня 2012 г. в Ю00 часов на заседании диссертационного совета Д 220.061.04 при ФГБОУ ВПО «Саратовский государственный аграрный университет им. Н.И. Вавилова» по адресу 410005, г. Саратов, ул. Соколовая, 335, диссертационный зал.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВПО «Саратовский ГАУ им. Н.И. Вавилова» по адресу 410005, г. Саратов, ул. Соколовая, 335.

Автореферат диссертации разослан «^»мая 2012 г. Отзывы на автореферат направлять по адресу 4100012, г. Саратов, Театральная пл.1, «Саратовский ГАУ», ученому секретарю диссертационного совета

Ученый секретарь

диссертационного совета,

доктор биологических наук, профессор

Карпунина Л.В.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ А1сгуальность темы. Борьба с зооантропонозными гельминтозами, широко распространенных в Республике Казахстан, относится к числу государственных задач здравоохранения и ветеринарии. На территории Казахстана существуют природные очаги многих опасных паразитарных заболеваний, что требует от ветеринарной службы эффективных мер по мониторингу, профилактики и лечению предупреждения распространения этих болезней в другие регионы республики. Как свидетельствуют многочисленные научные публикации последних лет эпизоотическая и эпидемическая ситуация по многим паразитарным болезням таким как описторхоз, эхинококкоз, аскариоз, токсокароз, трихинеллез в Республике Казахстан, остается напряженной и создает определенную угрозу для здоровья населения.

Цель работы: изучите особенностей очага описторхоза бассейна реки Урал Западно- Казахстанской области Республики Казахстан и разработка мер борьбы с инвазией описторхиса.

Для достижения поставленной цели были определены следующие задачи:

1. Изучить гидрологические особенности водоемов бассейна реки Урал, благоприятных для сохранения и циркуляции возбудителя болезней.

2. Определить видовую принадлежность первого промежуточного хозяина описторхиса, численности и плотности моллюска и определение экстенсивности (ЭИ, %) и интенсивности (ИИ, %) инвазии описторхиса в популяциях моллюсков.

3. Установить видовой диапазон вторых промежуточных хозяев (рыбы) описторхиса, определить ЭИ и ИИ метацеркария описторхиса в популяциях хозяев — промысловых рыб.

4. Установить инвазированность дефинитивных хозяев описторхозом — домашних плотоядных (кошки и собаки).

5. Экспериментально заразить лабораторных животных с целью изучения степени инвазированности описторхисами.

6. Изучить клинические изменения при описторхозе плотоядных.

7. Определить эффективную лечебную дозу препарата «Азинокс» при описторхозе.

Научная новизна. Выявлена структура очага описторхоза бассейна р. Урал. Очаг отнесен к пойменно - речному типу. Установлено, что популяции моллюска семейства ВиЬупийае (ВНкута и-оясЬИ), обитающие в условиях эвтрофных малых рек впадающих в Урал, наиболее сильно заражен церкариями описторхиса: ЭИ - 9,6 %; ИИ - 5,06 экз./м2

Определены видовой состав и зараженность дополнительных промежуточных хозяев метацеркариями описторхиса. Установлено, что жизненной стадии носительства церкарий паразита очаг полигастальный. К числу основных трематоды относятся три вида рыб семейства Карповые (Сурптс1ае):язь, красноперка и линь.

Впервые разработаны методы экспериментального заражения дефенитивных хозяев метацеркариями описторхиса. Изучены клинические изменения при описторхозе кошек в зависимости от дозы инвазионного начала.

Впервые в условиях Республики Казахстан определены эффективные лечебные противоописторхозные дозы препарата «Азинокс» на экспериментальной модели описторхоза лабораторных животных, которые подтверждены в производственных условиях на значительном поголовье спонтанно инвазированных животных.

Практическое значение. Полученные данные эндемичности и большой распространенности описторхоза животных в Западно — Казахстанской области Республики Казахстан, а также экспериментальное заражение плотоядных метацеркариями описторхиса и высокая терапевтическая эффективность препарата «Азинокс» послужили основой для разработки методических рекомендаций «Проведение ветеринарно—

санитарных и лечебно-профилактических мероприятий при описторхозе плотоядных», (соавторстве профессором М.Ш. Шалменовым) и утвержденных территориальной инспекцией комитета государственной инспекции агропромышленного комплекса Министерства сельского хозяйства Республики Казахстан при Западно - Казахстанской области и научно - исследовательским институтом «Западно - Казахстанский аграрно-технический университет им. Жангир хана» (протокол № 4 от 07.12.2011 г.). Проведенные клинические и лабораторные исследования позволили обосновать перспективность экспериментального заражения плотоядных животных.

Получены 3 инновационные патентына изобретение: «Способ искусственного заражения домашних кошек описторхозом» 04.10.2010, МПК С 12 N 1/00 С 12 С! 1/02 № 24884; «Способ искусственного заражения домашних собак описторхозом» 26.10.2010 МПК С 12 N 1/00 С 12 1/02 № 24705; «Способ искусственного заражения хомяка описторхозом» 01.08.2011 МПК С 12 N 1/00 С 12 С! 1/02 Регистрационный № 2011/0860.1, № 032051, (Комитет по правам интеллектуальной собственности Министерства юстиции Республики Казахстан).

Материалы научных исследований внедрены в ветеринарную практику в Западно - Казахстанской областной территориальной инспекции комитета государственной инспекции агропромышленного комплекса Министерства сельского хозяйства Республики Казахстан (акт о внедрения протокол № 4 от 07.11.2011 г.), а также используются при чтении лекций и проведении лабораторно - практических занятий для студентов ветеринарных и биологических факультетов, а также научно - исследовательской работе в Республиканском государствешюм казенном предприятии Западно -Казахстанском аграрном - техническом университете им. Жангир хана (акт о внедрения протокол № 4 от 07.12.2011 г.), Западно - Казахстанском инженерно - технологическом университете (акт о внедрения протокол № 4

от 30.11.2011 г.), а также Западно - Казахстанском инженерно -технологическом колледже (акт о внедрения протокол № 3 от 10.12.2011 г.). Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

1. Бассейн реки Урал в Западно - Казахстанской области Республики Казахстан является очагом описторхоза плотоядных с высокой напряженностью.

2. Основными промежуточными хозяевами жизненного цикла описторхиса являются рыбы из семейства карповых и доминирующую роль в очаге гельминтной инвазии бассейна реки Урал играет язь.

3. Домашние плотоядные как антропогенный фактор играют существенную роль в существовании очага описторхоза в бассейне среднего течения р. Урал.

4. Разработана оригинальная методика экспериментального заражения домашних плотоядных, позволяющая обеспечить высокую приживаемость метацеркариев описторхиса.

5. Препарат «Азинокс» обладает высокой антигельминтной эффективностью против возбудителей описторхоза и позволяет профилактировать инвазию в Западно - Казахстанской области.

Апробация работы. Основные результаты диссертационной работы представлены на: Международной научно-практической конференции «Проблемы воспроизводства осетровых в среднем течении реки Урал и пути их решения» (г. Уральск, 2009); научно-практической конференции «Современные проблемы экологии и устойчивое развитие общества» (Алматы, 2010); научно-практической конференции (г. Уральск, 2010).

Личный вклад соискателя состоит в проведении экспериментальных исследований на всех этапах работы и участии подготовке публикации.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 8 работ, из них 3 статьи в журналах, рекомендованных ВАК РФ и 3 патента Республики Казахстан.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 150 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, включающих объекты, материалы и методы исследований, результатов исследований и их обсуждений, а также из заключения, выводов, списка используемых источников и приложений. Работа содержит 122 наименований отечественных авторов, 35 таблиц и 14 рисунков.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ Объекты, материалы и методы

Объектами исследований являлись возбудитель Opisthorhis felineus (церкарии, метацеркарии описторхиса и мариты), моллюски (Bithynia troschli), рыбы из семейства карповых (Cyprinidae) - примущественно язь, плотоядные животные (собаки, кошки).

С 2009 по 2011 год было исследовано 120 проб бентоса из 20 водоемов бассейне реки Урал в 6 районах Западно - Казахстанской области. Общая площадь отбора проб моллюсков составила 120 м2. Всего за 3 года было выловлено и исследовано 2512 экземпляров рыб различных видов. В бассейне р. Урал и Урало - Кушумской оросительно-обводнительной системы обнаружено 14 видов рыб, (красноперка, язь, карась и др.), определен их возрастной состав (одно-, двух-, трех- и четырехлетки).

Исследование рыб проводили по общепринятым методикам с определения ее видовой принадлежности и измерения (Н.А.Мягков, 1994). Определение возраста рыбы проводили по чешуе по Атласу Г.Г. Галкина (1958).

Гельминтоовоскопически исследовано 45 собак и 19 кошек, принадлежащих рыбакам, проживающим в Зеленовском районе, Западно -Казахстанской области.

Сбор моллюсков проводили по стандартной малакологической методике, с помощью гидробиологических орудий лова; вручную собирали моллюсков, находящихся на веточках водных растений или на поверхности

кусков древесины по берегам водоема. Пробы бентоса и фито-, зоопланктонов отбирали дночерпателеми, бентосными сачками, а также усовершенствованными скребками. Исследовали пробы на наличие моллюсков методом промывания.

Материалы фиксировали 75 %-м этанолом; видовую идентификацию моллюсков осуществляли с применением конхологических и анатомических методов. Видовую принадлежность моллюсков определяли по Я.И. Старобогатову, С.А. Беэру, Ю.В. Беляковой, Е.Г. Сидорову (1970; 1977; 1986; 1987).

Для сбора эпизоотологических данных проводили исследование рыб, выловленных в Урапо - Кушумской оросительно — обводнительной системе (УКООС) и водоемах средней течении бассейна реки Урал, ставными и плавными сетями с лодки в количестве не менее 50 экз. из каждого водоема. Для установления зараженности рыб метацеркариями описторхиса применяли методику компрессорного исследования с последующим микроскопированием с помощью МБС«Биолам».

Метацеркарии описторхиса получали методом переваривания мышц рыб в искусственном желудочном соке, подсчитывали и использовали для заражения лабораторных животных. Видовую принадлежность метацеркарии определяли по Сударикову В.Е. (2002).0кончательный диагноз описторхоза устанавливали по результатам биопробы, после получения мариты О. /еИпвих.

Заражали котят, щенят (если известно, что их не кормили рыбой и рыбными отходами), морских свинок, золотистых хомяков из расчета 50100, 250-500 метацеркариев на одного животного. Личинок скармливали или задавали насильственно. Через 3-5 недель проводили копроскопическое исследование или убой животных и гельминтологическое исследование печени.

Исследование фекалий проводили методом флотации по И.А. Щербовичу, с нитратом натрия по Е.В. Калантаряну (1952), методом

нативного мазка по Като-Миура (1962), а также комбинированным методом по Г.А. Котельникову, А.А. Вареничеву (1991) и П.П. Горячеву (1949). Прижизненное определение интенсивности инвазии производили количественными методами.

Проводили неполное гельминтологическое вскрытие рыб. Полное гельминтологическое вскрытие плотоядных животных осуществляли по общепринятой методике. К. И. Скрябин (1950). Локализацию метацеркарий описторхиса в теле рыб определяли по схеме, предложенной Е.Г. Сидоровым (1987).

Биохимические и клинические методы исследования крови проводили при помощи анализатора Hemascreen vet. производитель Hospitex diagnostics (Италия). Статистическую обработку материалов проводили методами вариационной статистики с учетом критерии Стьюдента (Лакин, 1990).

Результаты исследований и их обсуждение Плотность популяции моллюсков и их инвазированность церкариями описторхиса

В результате проведенных исследований установлено, что битинииды обитают не во всех исследованных водоемах. С апреля по август 2009 - 2011 годы нами исследовано 120 проб бентоса из 20 водоемов в бассейне реки Урал. Средняя плотность моллюсков составила 5,06 экз./м2 (табл. 1).

Промежуточный хозяин возбудителя описторхоза — моллюск рода Bithynia в бассейне реки Урал встречается в 5 из 20 исследованных водоемов, в мелководных хорошо прогреваемых, с подводной и надводной растительностью участках в реках Рубежка, Ембулатовка, Малая Быковка, Утва и озере Щучье (Теплое). Из 73 экземпляров моллюсков из озера Теплое, только 7 экз. были инвазированы церкариями описторха, что составило 9,6%. В других исследованных водоемах гидрологические условия малопригодны для обитания моллюсков.

Таблица 1 — Численность моллюсков в водоемах очаговой территории

Название инвазирован-ных водоемов Количество обследованных биотопов Обследованная площадь инвазиро-ванных биотопов (М2) Количество исследованных проб Общее число моллюсков Плотность моллюсков, (экз./м2)

Всего Проба с моллюсками

Рубежка 3 24 12 2 13 6,5

Ембулатовка 3 24 12 2 10 5

Выковка 3 24 12 6 27 4,5

Утва 3 18 9 4 17 4,25

Теплое 3 30 15 15 73 5,05

Всего 15 120 60 29 140 5,06

*Примечание: одна проба - 1 м2обследованной площади.

Видовой состав ихтиофауны водоемов и зараженность карповых рыб метацеркариями описторхиса

В таблице 2 показан состав ихтиофауны бассейна реки Урал и Урало -Кушумской оросительно-обводнительной системы и зараженность отдельных видов рыб метацеркариями описторхиса.Из результатов видно, что в уловах доминируют два вида: карась и линь (44,11—82,6 %), тогда как показатели зараженности выше у язя, красноперки и лини.

Паразитологическая ситуация в водоеме является составной частью его экологического состояния. Вследствие двойственности среды обитания (внешняя среда и организм хозяина) паразиты представляют собой естественную составную часть биоценоза водоема и его видового разнообразия, формируя особый структурный уровень экосистем. Кроме того, паразитарный фактор — один из существенных, определяющих численность видов хозяев, и через нее влияющий на структуру и функционирование экосистем.

Таблица 2 —Зараженность рыб метацеркариями описторхиса, в уловах из водоемов бассейна р.Урал(2009-2011 гг.)

№ Тип водной экосистемы Доля в уловах (%) видов рыб

Сазан Карась сереб-рянный Лещ Плотва Красноперка л Я Линь Щука

1. Малая Быковка 2,45 7,35 25 - 4,41 5,39 44,11 2,94

2. Бесагаш - 79,4 - - - 12,3 20,6 .

3. Барбастау 18,6 34,88 11,62 - - 9,13 27,9 6,97

4. Вильная 18,1 - - - 31,9 24,5 - 15,9

5. Ембулатовка - 82,6 - - - 7,1 10,3 -

6. Рубеж ка - 79,3 - - - 15,6 20,7

7. Солянка - 18,6 - - - 10,2 6,97 -

8. Щучье (Теплое) - 75,3 - 4,7 - 19,6 - -

ЭИ, % - 1,2± ±0,05 - 2,23 ± ±0,11 32,4± ±0,21 59,7 ± ±0,31 1,8 ± ±0,05 -

ИИ, экз. - 10,2 ± ±0,51 - 4,5 ± ±0,02 83,6 ± ±0,45 452,2 ± ±1,12 24,6 ± ±1,05 -

Установлено, что в данных водоемах вторыми промежуточными хозяевами возбудителя описторхоза являются 5 видов рыб из семейства карповых (СургШ(1ае). Наиболее богатой в видовом отношении по ихтиофауне были водохранилища на реках Малая Быковка, Барбастау, Вильная.

Из всех исследованных видов карповых рыб метацеркарии описторхиса обнаружены у язя 57,2 %, ИИ - 4-700 , карася 1 %, ИИ - 1 - 15, красноперки 33 %, ИИ - 20-150 экземпляров, плотвы 2,8 %, ИИ - 3-5 экземпляров и линя 1,9 %, ИИ - 1-34 экземпляра. Остальные виды рыб оказались свободными от личинок.

Максимальный показатель инвазированности для язя отмечен в реке Багырлай, на нижнем участке Урало — Кушумской оросительно — обводнительной системы, расположенном в Акжаикском районе. Все язи этого водоема (70 экземпляров) оказались носителями метацеркариев описторха. Зараженность красноперки из этого же водоема составила 32,4 %, карася - 9,09 %, линя - 7,1 %.

Зараженность язя варьирует в зависимости от возраста (рис. 1). У язя в возрасте одного года инвазированность достигает 20 % и далее увеличивается у двухлеток до 45 %, трехлеток 65 %, четырехлетнем 100 %. Увеличивается и интенсивность инвазии.

Максимальная интенсивность инвазии язя водохранилища Багырлай достигала 3000-4000 тыс. экземпляров метацеркарий на одну особь в возрасте старше 4 лет. У красноперки максимальные показатели достигали 150 личинок на одну особь в 3 года, а у карася — до 10—15 r 3 — 4 летнем возрасте. Численность личинок у всех видов рыб увеличивается с возрастом.

Высокую зараженность язей водохранилища Багырлай можно объяснить тем, что в уловах этого водоема встречались более взрослые возрастные группы, а также тем, что сам водоем в этой оросительно-обводнительной системе располагается ниже всех остальных водоемов (четвертый по счету) и именно в нем сосредотачивается рыбы во время сброса воды из Урала.

1 год 2 года 3 года 4 года

Возраст рыб

Рис.1. Возрастная динамика зараженности язей водохранилища Багырлай

Метацеркарии были обнаружены только в мышечной ткани. Тело рыбы делилось на 6 участков, далее в каждом их них определялось количество личинок. Наибольшее количество их было обнаружено в среднеспинной

мускулатуре 488 (49,34 %), 297 (30,03 %) в переднеспинной мускулатуре, 168 (16,99 %) в верхнехвостовой мускулатуре, 18 (1,82 %) в грудной мускулатуре, 12 (1,21 %) в брюшной мускулатуре, 6 (0,61 %) в нижнехвостовой мускулатуре. В других органах и тканях метацеркарий обнаружено не было. Амплитуда интенсивности инвазии: максимальная — 89 метацеркария на 1 экз. рыбы, а минимальная - 5.

Инвазированность собак и кошек гельминтами Проведены гельминтологические исследования собак и кошек и выявлены их инвазированность маритами описторхиса и другими кишечными гельминтами.

В Зеленовском районе экстенсивность инвазии описторхисами собак составляет в среднем 55,5 %, кошек 71,4 %. Данные исследования подтверждают участие кошек и собак в циркуляции возбудителя описторхоза. Основным источником выделения во внешнюю среду яиц описторхисов являются кошки и собаки, которые в прибрежных сельских населенных пунктах поддерживают функционирование очагов описторхоза и способствуют их стабилизации.

Экспериментальное заражение лабораторных животных Нами проведено экспериментальное заражение домашних кошек, щенков собак и лабораторного обыкновенного хомяка. Выделение яиц гельминта у этих животных началось с 20-22 суток после инвазирования. Была разработана оригинальная методика заражения этих животных (3 патента на изобретение). Установлено, что приживаемость описторхов зависит от дозы метацеркариев (рис. 2).

Доза метацеркариев, экз./гол.

Рис. 2. Результаты экспериментального заражения кошек метацеркариями Ор'МкогсЫз/еИпеиз

Оптимальная доза 250 метацеркариев на животное, приживаемость при этом достигает 98,15 %. У всех инвазированных животных к концу эксперимента в печени, желчном пузыре и поджелудочной железе обнаружены половозрелые паразиты. Наибольшее количество марит обнаружено в протоках печени - 89,2 %, наименьшее - в поджелудочной железе —1,8 %.

Клиническая картина исследуемых животных для удобства интерпретации нами оценивалась показателем общего состояния животных. Течение описторхозной инвазии у кошек можно разделить на три периода: острый (23-32 дня) после заражения животных, который включал период начала клинических проявлений; хронический (2-5 месяцев) и период спада клинических проявлений (от 6 месяцев).

Активность препарата «Азинокс» при описторхозе кошек

Для определения эффективной дозы препарата «Азинокс» было сформировано 5 групп по 5 кошек в каждой по принципу аналогов. Кошек содержали в ветеринарной клинике ЗКАТУ им. Жангир хана в металлических клетках, кормили полнорационным кормом «Вискас». Четыре группы содержали экспериментально зараженных кошек, пятая — здоровый контроль.

В трех группах кошкам задавали препарат «Азинокс» в дозах 15,25 и 35 мг/кг перорально с кормом. На 2, 6 и 10-е сутки после применения препарата проводили гельминтоовоскопические исследования, а также контроль гематологических показателей. Дозы 25 и 35 мг/кг показали примерно одинаковую экстенсэффективность (табл. 3), однако возврат гематологических показателей к уровню здорового контроля быстрее происходил группе 2 (25 мг/кг).

При исследовании экстенсэффективности было выявлено, что при дозе 15 мг/кг непрямая активность равна на вторые сутки группе 1 - 45 %, шестые -50 %, десятые - 52 %. Был проведен контроль копроскопией, при этом ИИ колебалась от 5 до 13 экз. яиц.

При дозе 25 мг/кг экстенсэффективность составила на вторые сутки в группе 2-82 %, шестые - 86 %, десятые — 88 %. При этом ИИ колебалась от 0 до 4 экз.

Таблица 3 -Экстенсэффективность препарата «Азинокс»

Экстенсэффетивность, ИИ,экз.

Показатель после введения препарата, %

через 2 суг. через 6 сут. через 10 сут.

Здоровый контроль - - - -

Группа 1 (доза 15 мг/кг) 45 50 52 5-13

Группа 2 (доза 25 мг/кг) 82 86 88 0-4

Группа 3 (доза 35 мг/кг) 85 85 88 0-5

Зараженный контроль - - - -

При дозе 35 мг/кг экстенсэффективность составила на вторые сутки в группе 3 - 85 %, на шестые - 85 %, на десятые - 88 %, а ИИ колебалась от 0 до 5 экз. При этом доза 35 мг/кг оказывает отрицательное влияние на гомеостаз и обладает токсическим действием на организм. Гематологическая картина существенно изменялась (табл. 4, 5).

Таблица 4 -Влияние препарата «Азинокс» (доза 35мг/кг) на гематологические показатели кошек

Показатель До введения препарата После введения препарата, сут.

2 6 10

Лейкоциты, хю7л 9,5 ±1,8 12,2±2,85 13,2±2,9 12,9±2,75

Лимфоциты, х 107л 6,5 ±0,5 5,7±1,5 5,9±1,8 5,8±1,7

Моноциты, х 107л 0,5 ±0,08 0,7±0,03 0,8±0,03 0,8±0,02

Гранулоциты, хЮ7л 4,5 ±0,5 5,5±1,3 6,0±1,2 5,9±1,4

Эритроциты, хЮ'7л 9,5 ±0,5 11,1±0,3 10,5±1,05 11,9±1,7

Гемоглобин, г/л 116,5 ±9,9 130±7,6 128±12,9 137,8±20,9

Гематокрит, % 29,5 ± 2,5 34,5±0,6 33,9±3,5 36,7±5,7

Средний объем эритроцита, АЬ 32,9 ±0,2 34,3±0,6 33,9±1,1 36,7±0,9

Среднее содержание гемоглобина в 1 эритроците, pg 12,9 ±0,5 12,5±0,45 11,9±0,4 12,3±0,4

Среднее содержание гемоглобина в эритроцитах, г/л 390,5 ± 9,8 383±9,5 382±5,3 380,5±5,5

Тромбоциты, хЮ"/л 7,5 ±0,5 7,9±0,48 8,0±0,4 7,8±0,6

Скорость оседания эритроцитов, хЮ г/л 0,29 ±0,01 0,18±0,01 0,17±0,01 0,19±0,01

Общий белок, г/л 75 ±2,5 60,6±3,9 65,8±2,8 61,9±1,5

Таблица 5 -Влияние препарата «Азинокс» (доза 25мг/кг) на гематологические показатели кошек

Показатель До введения препарата После введения препарата, сут.

2 6 10

Лейкоциты, х ю7л 9,8 ± 1,9 11,2±2,9 12,2±2,68 11,9±2,6

Лимфоциты, хЮ7л 6,1 ±0,6 5,5±1,3 5,7±1,8 5,6±1,5

Моноциты, х 107л 0,4 ± 0,09 0,5±0,03 0,7±0,02 0,6±0,02

Гранулоциты, хЮ7л 4,7 ±0,5 5,1±1,4 5,9±1,2 5,6±1,4

Эритроциты, *10'7л 9,1 ±0,6 10,1±0,3 9,9±1,06 10,9±1,7

Гемоглобин, г/л 115,8 ±10,1 129±6,6 126±12,9 136,8±22,9

Гематокрит, % 29,4 ±2,4 33,5±0,6 32,9±3,5 35,7±5,8

Средний объем эритроцита, £Ь 32,5 ±0,3 33,3±0,6 32,9±0,9 35,7±0,6

Среднее содержание гемоглобина в 1 эритроците, pg 12,7 ±0,4 12,7±0,45 12,7±0,4 12,5±0,4

Среднее содержание гемоглобина в эритроцитах, г/л 392,3 ±9,9 385±9,9 384±5,5 382,3±5,7

Тромбоциты, *10"/л 7,8 ±0,6 7,9±0,4 7,9±0,5 7,8±0,6

Скорость оседания эритроцитов, х Ю г/л 0,27 ± 0,02 0,2±0,01 0,19±0,01 0,2±0,01

Общий белок, г/л 79 ±2,4 60,6±1,8 69,9±5,2 63,4±1,2

Одновременно с назначением антигельминтных препаратов следует проводить симптоматическое и патогенетическое лечение, завершающий этап диетотерапия.

Для повышения эффективности мероприятий по профилактике описторхоза в его очагах нами разработаны «Рекомендации по ветеринарно-санитарной и медицинско-гигиенической профилактике описторхоза плотоядных и рыб на Западе Казахстана». Применение предложенных мероприятий позволило снизить заболеваемость населения в Зеленовском районе Западно-Казахстанской области.

По данным анализа материалов отдела эпидемиологии Западно-Казахстанского областного центра санитарно-эпидемиологической службы, из рисункаЗ видно, что за 12 лет в области описторхозом заболело 1754 человек, наибольшее число заболевших 356 человек отмечено в 2003 году, показатель на 100 тыс. населения составил 58,9, затем с 2004 года, постепенно снижаясь от 279 достигло 113 в 2009 году, показатель на 100 тыс. населения колебался от 48,2 до 18,6, в 2011 году за 9 месяцев заболело 74 человека, показатель на 100 тыс. населения составил 12,3.

58,9

46,1

.Ш|

29Л 31^2

11

-1

22,3

18,7 18,6

т.

11

м

7,8

2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010

■ - Республика Казахстан, I I - Западно - Казахстанская область

Рис. 3. Заболеваемость описторхозом среди населения Западно - Казахстанской области с 2000 г. по 20! О г. (показатель на 100 тыс. населения)

Таким образом, на основании результатов исследований установлены неблагоприятное эпидемиологическое состояние бассейна среднего Урала в отношении описторхозной инвазии. Описана многолетняя динамика инвазированности населения с пиком заболеваемости в 2002 - 2003 гг., каторый приходится на годы максимальных уловов язя и красноперки. По савокупности фактов показана ведущая роль антропогенного фактора (загрязнение водной среды), человека и домашних плотоядных (кошка и собака) в существовании и распространении инвазии описторхоза, ареал и биотопы промежуточного хозяина, а также степень пораженности рыб метацеркариями описторхиса.

Выявлены эколого-биологические предпосылки для циркуляции возбудителя описторхоза: - на значительной протяженности Урал имеет хорошо развитую пойму с многочисленными постоянными и пересыхающими водоемами. Все это создает биотопы, благоприятные для жизнедеятельности моллюсков ВНИута trosch.li.

Проведенные исследования позволили составить «Рекомендации по ветеринарно-санитарной и медицинско-гигиенической профилактике описторхоза плотоядных и рыб на Западе Казахстана», позволившие снизить зараженность населения в 2011 году по сравнению с 2010 годом (рис. 4).

450 -г-—---

123456789 10 11 Месяцы года

Рис.4. Заболеваемость описторхозом населения Зеленовского района Западно—Казахстанской области

19

ВЫВОДЫ

1. Эколого-биологической предпосылкой циркуляции возбудителя описторхоза является наличие водных биотопов с медленным течением и многочисленной растительностью, благоприятных для жизнедеятельности моллюсков ВИкута 1го$М1 Средняя плотность моллюсков в акватории реки Урал составила 5,06 экз./м2, инвазированность церкариями описторха - 9,6%.

2. В исследованных водоемах к видам рыб, опасным возможностью заражения описторхозом, относятся язь, красноперка, линь, карась, плотва. Язь занимает наибольший удельный вес по экстенсивности (57,2 %), и интенсивности инвазии (4—700 экз.) среди других дополнительных хозяев Ор'ЫкогсЫБ /еИпеш. С возрастом рыбы увеличивается интенсивность и экстенсивность инвазии.

3. Домашние плотоядные значительно инвазированы Ор'^когсЫь /еНпеия (собаки - 55,5 %, кошки - 71,4 %), что подтверждает участие кошки и собаки в циркуляции возбудителя описторхоза. Плотоядные являются основным источником выделения во внешнюю среду яиц описторхисов и поддерживают, таким образом, функционирование очагов описторхоза, а также способствуют их стабилизации.

4. Проведенное экспериментальное заражение домашних кошек, щенков собак и золотистого хомячка по оригинальной методике позволило установить, что приживаемость описторхисов зависит от дозы метацеркариев. Оптимальной является доза 250 метацеркариев на животное, при которой приживаемость достигает 98,15 %. Наибольшее количество марит обнаружено в протоках печени — 89,2 %, наименьшее — в поджелудочной железе-1,8 %.

5. Течение описторхозной инвазии у кошек можно разделить на три периода: острый период (23-32 дня) после заражения животных, который включает период начало клинических проявлений, хронический (2-5 месяцев) и период спада клинических проявлений (от 6 месяцев).

6. При введении животным, больным описторхозом, препарата «Азинокс» в дозе 25 мг/кг установлено, что он обладает высокой противоописторхозной активностью, не оказывает отрицательного влияния на гомеостаз организма и не обладает токсическим действием. Препарат «Азинокс» в дозе 25 мг/кг может быть рекомендован для лечения описторхоза плотоядных.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Паразиты отдельных видов рыб водохранилища на реке Барбастау / Я.М. Кереев, Т.К. Мурзашев, Ф.Х. Нуржанова, Б.М. Сидихов [и др.] // Проблемы воспроизводства осетровых в среднем течении реки Урал и пути их решения: Материалы Междунар. научн. - практ. конф., ноябрь 2009. - Уральск, 2009. - С. 81-83.

2. Анализ эпидемической ситуации по описторхозу в Западно - Казахстанской области / Т.К. Мурзашев, Я.М. Кереев, Ф.Х. Нуржанова, Б.М. Сидихов [и др.] // Проблемы воспроизводства осетровых в среднем течении реки Урал и пути их решения: Материалы Междунар. научн. - практ. конф., ноябрь 2009. - Уральск, 2009.-С. 84-86.

3. Эколого - Биологические основы фунционирования описторхоза в Урало -Кушумской оросительно - обводнительной системы Западно - Казахстанской области / Я.М. Кереев, М.Ш. Шалменов, Ф.Х. Нуржанова, Б.М. Сидихов [и др.] // Современные проблемы экологии и устойчивое развитие общества: Материалы Междунар. научн. - практ. конф., октябрь 2010. - Алматы, 2010. -СЛ 81—184.

4. Впервые на Западе Казахстана в эксперименте получен описторхоз кошек / Я.М. Кереев, М.Ш. Шалменов, Ф.Х. Нуржанова, Б.М. Сидихов [и др.] // Наука и образование. - 2010. - № 4(21). - С. 85-87.

5. Инновационный патент № 24705 от 26.10.2010 Способ искусственного заражения домашних собак описторхозом / Я.М. Кереев, М.Ш. Шалменов, Ф.Х. Нуржанова, Б.М. Сидихов [и др.] // МПК С 12 N 1/00 (2010.01); С 12 (} 1/02 -КПИС МЮ РК - Астана, 2010.

6. Инновационный патент № 24884 от 04.10.2010 Способ искуственного заражения домашних кошек описторхозом / Я.М. Кереев, М.Ш. Шалменов, Б.М.

Сидихов [и др.] // МПК С 12 N 1/00 (2010.01); С 12 Q 1/02, - КПИС MIO РК -Астана, 2010.

7. Впервые на Западе Казахстана в эксперименте получен описторхоз собак / М.Ш. Шалменов, Я.М. Кереев, Ф.Х. Нуржанова, Б.М. Сидихов [и др.] // Журнал Наука и образование.-20 И.-№ 1(22) С. 101-103.

8. Заключение предпатента Регистрационный № 2011/ 0860.1, № 032051 Способ искуственного заражения хомячка описторхозом / Я.М. Кереев, М.Ш. Шалменов, Б.М. Сидихов [и др.] // МПК С 12 N 1/00 (2011.01); С 12 Q 1/02 -КПИС MIO РК - Астана, 01 ав1уста 2011.

9. Сидихов Б.М., М.Ш. Шалменов. Битинииды в верхней пойменной части реки Урал, Западно Казахстанской области (Bithyniidae)H Вестник Саратовского госагроуниверситета им. Н.И. Вавилова.-2011.-№12.-С. 42-44.

10. Распределение личинок OPISTHORCHIS FELINEUS у рыб в водоемах Западно — Казахстанской области / М.Ш. Шалменов, Я.М. Кереев, Ф.Х. Нуржанова, Б.М. Сидихов [и др.] // Российский паразитологаческий журнал. -2011.-№4.-С. 70-72.

12. Сидихов Б.М., М.Ш. Шалменов. Инвазированность рыб семейства карповых метацеркариями описторхоза в водоемах Западно Казахстанской области// Вестник Саратовского госагроуниверситета им. Н.И. Вавилова. — 2012. — №1,- С. 59-60.

Автор выражает сердечную признательность своим учителям доктору ветеринарных наук, профессору, чл.-кор. РАСХН С.В. Ларионову и доктору ветеринарных наук, профессору М.Ш. Шалменову за неоценимую помощь и постоянное внимание к работе. Мы искренне благодарны генеральному директору ООО НВЦ «Агроветзащита», доктору ветеринарных наук, профессору С.В. Енгашеву за предоставление нам препарата «Азинокс» дм клинических испытаний и внедрения в практику. Выражаем благодарность директору ЗКФ ТОО «КазНИИ РХ», кандидату биологических наук Т.К.Мурзашеву и директору НИИ ЗКАТУ им. Жангир хана, кандидату биологических наук Н.Х. Сергалиеву, а также всем сотрудникам НИИ, где проводили исследования.

Формат 60x84 1/16. Бумага офсетная. Подписано в печать 16.05.2012

Гаршлура Times. Печать Riso. _Усл. печ. л. 1,00. Тираж 100 эта. Заказ 0174_

Отпечатано с готового оригинал-макета в типографии ИП «Экспресс тиражирование» 410005, Саратов, Пугачёвская, 161, офис 320 8 27-26-93

Содержание диссертации, кандидата ветеринарных наук, Сидихов, Бекжасар Мустакапович

Список условных сокращений.

ВВЕДЕНИЕ.

1. Обзор литературы.

1.1. Распространение и эпизоотологическая ситуация по описторхозу в регионах СНГ и Российской Федерации.

1. 2. Эпизоотология и эпидемиология описторхоза в населенных пунктах бассейна реки Урал (Западно - Казахстанская область).

1.3. Биология возбудителя описторхоза.

1. 3.1. Особенности экологии и биологии первых промежуточных хозяев ОргзМогсЫБ/еИпеш.

1.3.2. Второй промежуточный хозяин О./еИпеш.

1. 3. 3. Роль дефинитивных хозяев в природных очагах описторхоза

1. 4. Диагностика метацеркарий О./еНпеш и обезвреживание рыб от личинок описторхиса.

2. Собственные исследования.

2.1. Объект, материалы и методы исследований.

2. 1.1. Методика компрессорного исследования.

2. 1. 2. Методы копроскопических исследований.

2. 1. 3. Биопроба на описторхоз.

3. Результаты исследований и их обсуждение.

3.1. Распространенность описторхоза в Западно-Казахстанской области и профилактические мероприятия.

3. 2. Характеристика пресноводных экосистем бассейна реки Урал

3. 2. 1. Гидробиологическая характеристика водоемов.

3. 2. 2. Видовой состав ихтиофауны водоемов.

3. 3. Эпизоотологическая ситуация по описторхозу в боссейне реки Урал.

3. 3.1. Плотность популяции моллюсков и их инвазированность церкариями описторхиса.

3. 3. 2. Инвазированность дефинитивных и промежуточных хозяев описторхозом.

3. 3. 2.1. Инвазированность собак и кошек.

3. 3. 2. 2. Зараженность карповых рыб метацеркариями описторхиса в водоемах области.

3. 3. 2. 3. Клинический осмотр и патологоморфологические исследования больной рыбы.

3. 3. 2. 4. Заболеваемость людей описторхозом в области.

3. 4. Результаты экспериментального заражения плотоядных животных метацеркариями описторхиса в условиях Западно

Казахстанской области.

3. 4.1. Показатели общего состояния у кошек, зараженных O.felineus 121 3. 4. 2. Противогельминтная активность препарата «Азинокс» при описторхозе кошек.

3. 5. Профилактика и меры борьбы.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Описторхоз плотоядных в Западно-Казахстанской области Республики Казахстан"

Актуальность темы. Борьба с зооантропонозными гельминтозами, широко распространенных в Республике Казахстан, относится к числу государственных задач здравоохранения и ветеринарии. На территории Казахстана существуют природные очаги многих опасных паразитарных заболеваний, что требует от ветеринарной службы эффективных мер по мониторингу, профилактики и лечению, а также предупреждения распространения этих болезней в другие регионы республики. Как свидетельствуют многочисленные научные публикации последних лет эпизоотическая и эпидемическая ситуация по многим паразитарным болезням, таким как описторхоз, эхинококкоз, аскариоз, токсокароз, трихинеллез в Республике Казахстан остается напряженной и создает определенную угрозу для здоровья населения.

В настоящее время в рационе питания человека возросла доля рыбы и рыбопродуктов, что повысило риск заражения людей особо опасными инвазионными болезнями, среди которых наибольшее значение в патологии человека занимает описторхоз.

Очаги описторхоза наиболее распространены среди населения в бассейнах рек, где имеются благоприятные условия для существования и размножения моллюсков (промежуточных хозяев) и карповых рыб, вода которых подвергается значительному фекальному загрязнению, а население употребляет в пищу зараженную личинками описторхисов рыбу [6, 15, 24, 31, 69, 96,100, 103].

Ареал Орг^/юг/ги /еИпет простирается практически непрерывно от восточных до западных границ Республики Казахстан, охватывая территории многих областей, в том числе и Западно-Казахстанской области, которая богата пресноводными водоемами.

В настоящее время исследования по расположению очагов описторхоза в Западно-Казахстанской области не проводятся, однако по данным областной санитарно-эпидемиологической станции, на территории области ежегодно регистрируются случаи заболевания описторхозом у людей, большая часть из которых относится к Зеленовскому району и городу Уральску.

Поддержанию эпидемического процесса описторхоза в активном состоянии способствуют такие факторы, как многочисленность населения на берегах водоемов, отсутствие обеззараживания бытовых сточных вод в населенных пунктах, широко развитый любительский лов рыбы. Особенно в последние годы активизировалось употребление в пищу, значительной частью населения, малосоленой и вяленой рыбы, некачественная кулинарная обработка, отсутствие ветеринарно-санитарной экспертизы в местах стихийной торговли рыбой.

Социально-экономическая значимость описторхоза вскрывалась по мере выявления его широты распространения от регионального до международного значения.

На сегодняшний день назрела необходимость разработки методов мониторинга для оценки эпидемиологической и эпизоотологической значимости различных объектов окружающей среды в передаче инвазионного материала, распространения инвазий и для проведения профилактических мероприятий. Данные исследования будут способствовать рационализации ветеринарно-санитарного надзора.

Необходимость проведения оценки распространения описторхоза на территории области и недостаточная изученность данного вопроса явились предпосылкой для выполнения данней работы.

Цель работы: изучение особенностей очага описторхоза бассейна реки Урал Западно - Казахстанской области Республики Казахстан и разработка мер борьбы с инвазией описторхиса.

Для достижения поставленной цели были определены следующие задачи: 1. Изучить гидрологические особенности водоемов бассейна реки Урал, благоприятных для сохранения и циркуляции возбудителя болезней.

2. Определить видовую принадлежность первого промежуточного хозяина описторхиса, численности и плотности моллюска и определение экстенсивности (ЭИ, %) и интенсивности (ИИ, %) инвазии описторхиса в популяциях моллюсков.

3. Установить видовой диапазон вторых промежуточных хозяев (рыбы) описторхиса, определить ЭИ и ИИ метацеркария описторхиса в популяциях хозяев - промысловых рыб.

4. Установить инвазированность дефинитивных хозяев описторхозом -домашних плотоядных (кошки и собаки).

5. Экспериментально заразить лабораторных животных с целью изучения степени инвазированности описторхисами.

6. Изучить клинические изменения при описторхозе плотоядных.

7. Определить эффективную лечебную дозу препарата «Азинокс» при описторхозе.

Научная новизна. Выявлена структура очага описторхоза бассейна р. Урал. Очаг отнесен к пойменно - речному типу. Установлено, что популяции моллюска семейства Bithyniidae (Bithynia troschli), обитающие в условиях эвтрофных малых рек впадающих в Урал, наиболее сильно заражен церкариями описторхиса: ЭИ - 9,6 %; ИИ - 5,06 экз./м2

Определены видовой состав и зараженность дополнительных промежуточных хозяев метацеркариями описторхиса. Установлено, что жизненной стадии носительства церкарий паразита очаг полигастальный. К числу основным хозяйном тремотод относятся три вида рыб семейства Карповые (Cyprinidae): язь (Leuciscus idus), красноперка (Scardinius erythrophthalmus) и линь (Tinea tinea).

Впервые разработаны методы экспериментального заражения дефенитивных хозяев метацеркариями описторхиса. Изучены клинические изменения при описторхозе кошек в зависимости от дозы инвазионного начала.

Впервые в условиях Республики Казахстан определены эффективные лечебные противоописторхозные дозы препарата «Азинокс» на экспериментальной модели описторхоза лабораторных животных, которые подтверждены в производственных условиях на значительном поголовье спонтанно инвазированных животных.

Практическое значение. Полученные данные эндемичности и большой распространенности описторхоза животных в Западно - Казахстанской области Республики Казахстан, а также экспериментальное заражение плотоядных метацеркариями описторхиса и высокая терапевтическая эффективность препарата «Азинокс» послужили основой для разработки методических рекомендаций «Проведение ветеринарно-санитарных и лечебно-профилактических мероприятий при описторхозе плотоядных», (соавторстве профессором М.Ш. Шалменовым) и утвержденных территориальной инспекцией комитета государственной инспекции агропромышленного комплекса Министерства сельского хозяйства Республики Казахстан при Западно - Казахстанской области и научно - исследовательским институтом «Западно - Казахстанский аграрно-технический университет им. Жангир хана» (протокол № 4 от 07.12.2011 г.). Проведенные клинические и лабораторные исследования позволили обосновать перспективность экспериментального заражения плотоядных животных (прил. 7).

Получены 3 инновационные патентына изобретение: «Способ искусственного заражения домашних кошек описторхозом» 04.10.2010, МПК С 12 N 1/00 С 12 С2 1/02 № 24884; «Способ искусственного заражения домашних собак описторхозом» 26.10.2010 МПК С 12 N 1/00 С 12 1/02 № 24705; «Способ искусственного заражения хомяка описторхозом» 01.08.2011 МПК С 12 N 1/00 С 12 1/02 Регистрационный № 2011/0860.1, № 032051, (Комитет по правам интеллектуальной собственности Министерства юстиции Республики Казахстан).

Материалы научных исследований внедрены в ветеринарную практику в Западно - Казахстанской областной территориальной инспекции комитета государственной инспекции агропромышленного комплекса Министерства сельского хозяйства Республики Казахстан (акт о внедрения протокол № 4 от

07.11.2011 г.), а также используются при чтении лекций и проведении лабораторно - практических занятий для студентов ветеринарных и биологических факультетов, а также научно - исследовательской работе в Республиканском государственном казенном предприятии Западно -Казахстанском аграрном - техническом университете им. Жангир хана (акт о внедрения протокол № 4 от 07.12.2011 г.), Западно - Казахстанском инженерно - технологическом университете (акт о внедрения протокол № 4 от 30.11.2011 г.), а также Западно - Казахстанском инженерно - технологическом колледже (акт о внедрения протокол № 3 от 10.12.2011 г., прил. 6, 8, 9).

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

1. Бассейн реки Урал в Западно - Казахстанской области Республики Казахстан является очагом описторхоза плотоядных с высокой напряженностью.

2. Основными промежуточными хозяевами жизненного цикла описторхиса являются рыбы из семейства карповых и доминирующую роль в очаге гельминтной инвазии бассейна реки Урал играет язь.

3. Домашние плотоядные как антропогенный фактор играют существенную роль в существовании очага описторхоза в бассейне среднего течения р. Урал.

4. Разработана оригинальная методика экспериментального заражения домашних плотоядных, позволяющая обеспечить высокую приживаемость метацеркариев описторхиса.

5. Препарат «Азинокс» обладает высокой антигельминтной эффективностью против возбудителей описторхоза и позволяет профилактировать инвазию в Западно - Казахстанской области.

Апробация работы. Международной научно-практической конференции «Проблемы воспроизводства осетровых в среднем течении реки Урал и пути их решения» (г. Уральск, 2009); научно-практической конференции «Современные проблемы экологии и устойчивое развитие общества» (Алматы, 2010); научно-практической конференции (г. Уральск, 2010).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 8 работ, из них 3 статьи в журналах, рекомендованных ВАК РФ и 3 патента Республики Казахстан.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 150 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, включающих объекты, материалы и методы исследований, результатов исследований и их обсуждения, а также из заключения, выводов, списка используемых источников и приложений. Работа содержит 122 наименований отечественных авторов, 35 таблиц и 14 рисунков.