Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Образование оксида азота в гипертрофированном сердце

ВАК РФ 03.00.25, Гистология, цитология, клеточная биология

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Тищенко, Ольга Васильевна

ВВЕДЕНИЕ

Глава! ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1 Интрамуральные нервные узлы сердца

1.2 Общая характеристика нитрооксидсинтазы

1.3 Оксид азота и его свойства

1.4 Оксид азота в сердце животных и человека

1.5 Оксид азота и гипертрофия сердца

Глава II МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 35 II. 1 Экспериментальный метод

11.2 Общеморфологический метод исследования

11.3 Гистохимические методы исследования

11.3.1 Метод Hope, Vincent

11.3.2 Иммуногистохимический метод определения индуцибельной нитрооксдсинтазы (iNOS) с использованием моноклональных антител

11.4 Метод количественного исследования

Глава III СОБСТВЕННЫЕ ДАННЫЕ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ. 41 III. 1 Развитие гипертрофии сердца в условиях экспериментальной почечной гипертензии 41 III.2 Нитрооксидергическая иннервация сердца 56 III.2.1. Интрамуральные ганглии сердца

II.2.2 Природа нейронов сердца

III.2.3 Нитрооксидсинтаза нейронов сердца 62 III.3. Образование оксида азота нейронами и кардиомиоцитами гипертрофированного сердца 67 Ш.ЗЛ.Нитрооксидергические нейроны в условиях гипертрофированного сердца

III.3.2 Изменение активности нитрооксидсинтазы в интрамуральных нейронах сердца при его гипертрофии 71 III.3.3. Изменение активности нитрооксидсинтазы в кардиомиоцитах в условиях гипертрофии сердца.

Ш.3.4.Индуцибельная изоформа нитрооксидсинтазы в гипертрофированном сердце

III. 4. Нитрооксидсинтаза сердца человека

Введение Диссертация по биологии, на тему "Образование оксида азота в гипертрофированном сердце"

Наиболее типичным поражением сердца при артериальной гипертензии является гипертрофия миокарда, которая характеризуется гипертрофией кардиомиоцитов и диффузным миокардиофиброзом различной степени выраженности [Сидоренко Б.А., Преображенский Д.В., 1998].

Гипертрофия миокарда наблюдается у 25-30 % больных с артериальной гипертензией (АГ) и первоначально представляет собой компенсаторную реакцию на увеличение напряжения стенок левого желудочка. В то же время гипертрофия левого желудочка является одной из серьезных кардиологических проблем, что обусловлено ее важной ролью в развитии различных сердечнососудистых осложнений, таких как застойная сердечная недостаточность, нарушения ритма сердца и ишемическая болезнь сердца [Ten Eick R.E., Basset A.L., 1992; Agabiti-Rosei Е., 1994].

Однако, многие аспекты патофизиологии гипертрофии сердца изучены недостаточно. Известно, что в основе ее лежат процессы, увеличивающие размеры ядер кардиомиоцитов, количество митохондрий, и особенно содержание специфических для кардиомиоцитов органелл - миофиламентов [Непомнящих Л.М., 1991].

Претендентом на роль аутокринного регулятора внутриклеточной регенерации органелл может рассматриваться оксид азота. N0 функционирует как ключевой элемент в передаче сигнала вазодилятации от эндотелия к клеткам сосудов, участник передачи сигналов в центрапьной и периферической нервной системе и элемент системы неспецифических иммунных реакций [Брюне Б. и соавт., 1998; Premaratne S. et al., 2001].

Способность тканей сердца образовывать оксид азота (NO) показана в работах ряда исследователей [Feron et al., 1999; Shah, 2000]. Оксид азота играет важную роль в регуляции деятельности сердечно-сосудистой системы. В настоящее время установлено, что в сердце активно функционирует два типа нитрооксидсинтаз - эндотелиальная (eNOS) и нейрональная (nNOS).

В то же время продукция NO в гипертрофированном сердце изучена недостаточно. Его образование в гипертрофированных кардиомиоцитах, как это показано в некоторых работах, увеличено [Jones et al., 2000; Barton et al., 2001]. Однако, систематические динамические исследования состояния фермента, синтезирующего газ в процессе развития гипертрофии миокарда, в литературе отсутствуют. Нет данных о состоянии NOS в интрамуральных нитрооксидергических нейронах гипертрофированного сердца.

Изучение гипертрофированного сердца поможет глубже понять изменения, вызываемые артериальной гипертензией и участие в этом процессе оксида азота.

Цель исследования состояла в том, чтобы в условиях экспериментальной гипертрофии сердца изучить активность нитрооксидсинтазы в кардиомиоцитах и интрамуральных нейронах, дать количественую характеристику нитрооксидергическим нервным клеткам и показать возможную роль оксида азота в развитии гипертрофии кард иом иоцитов.

Исходя из цели, определились следующие задачи:

1. В условиях экспериментальной ренопривной артериальной гипертензии получить гипертрофированное сердце.

2. Идентифицировать и изучить нитрооксидергические нейроны в вегетативных интрамуральных узлах сердца.

3. Установить количество нитрооксидергических нейронов в сердце.

4. Изучить качественные и количественные изменения активности нитрооксидсинтазы в кардиомиоцитах и нейронах сердца в условиях гипертрофированного миокардя.

5. Показать значение оксида азота в развитии гипертрофии сердца.

Научная новизна

Получена новая экспериментальная модель ренопривной гипертензии у крысы, вызванная разрушением части почечной паренхимы инъекцией в её передний полюс формалина. Впервые в гипертрофированном сердце установлено увеличение числа нитрооксидергических нейронов и активности в них конститутивной формы нитрооксидсинтазы (NOS). Отмечена высокая активность NOS в гипертрофированных кардиомиоцитах. Выявлена связь между развитием гипертрофии миокарда и активностью нитрооксидсинтазы в кардиомиоцитах и нейронах сердца. Предполагается ауто- и паракринное участие оксида азота в развитии гипертрофии кардиомиоцитов.

Теоретическое и практическое значение

Изменение активности нитрооксидсинтазы в гипертрофированном сердце обсуждено на экспериментальной модели артериальной гипертензии. Полученные результаты вносят новые факты в нитрооксидергическую регуляцию интактного и гипертрофированного сердца, дополняют представление о механизмах развития гипертрофии сердца данными об участии в этом процессе оксида азота как аутокринного и паракринного регулятора гипертрофии кардиомиоцитов. Предлагаемая модель гипертрофии сердца не требует тяжелой полостной операции и вызывает постепенное нарастание артериального давления, приводящего к гипертрофии миокарда, что дает возможность приблизить результаты исследования к клинике и выявить общие закономерности перестройки кардиомиоцитов.

Проведенные исследования во многом являются новыми и существенно расширяют имеющиеся в науке представления о механизмах развития гипертрофии сердца в условиях артериальной гипертензии.

Заключение Диссертация по теме "Гистология, цитология, клеточная биология", Тищенко, Ольга Васильевна

ВЫВОДЫ

1. Предложена новая экспериментальная модель ренопривной гипертензии, вызывающая гипертрофию сердца. Она установлена на основании увеличения массы сердца, сердечного индекса, диаметра кардиомиоцитов, утолщении стенки грудной аорты. Гипертрофия сердца развивается при нарастании кровяного давления, увеличении содержания в сыворотке крови ренина и альдостерона.

2. В сердце человека и крысы идентифицированы нейроны с различной степенью активности нитрооксидсинтазы (NOS). У крысы их доля в интрамуральных ганглиях составляет 23.1 %. Преобладают нитрооксидергические клетки первого типа по классификации Догеля, аксоны которых конвергируют на кардиомиоциты и кровеносные сосуды.

3. В гипертрофированном сердце число нитрооксидергических нейронов и степень активности в них конститутивной формы NOS увеличены. На протяжении всего эксперимента преобладают нейроны с высокой степенью активности энзима. Избыток секреции оксида азота (NO) с помощью паракринного механизма способствует развитию гипертрофии кардиомиоцитов.

4. Кардиомиоциты интактного сердца обладают слабой NADPH-диафоразной активностью. В миоцитах экспериментальных животных активность NOS повышается, что предшествует их гипертрофии. Предполагается, что оксид азота как аутокринный регулятор может участвовать в развитии гипертрофии.

5. Иммуногистохимическим методом установлено наличие индуцибельной нитрооксидсинтазы в макрофагах (перицитах) гипертрофированного сердца и отсутствие этой изоформы в кардиомиоцитах и нейронах. Изозимный профиль nNOS в нервных клетках и eNOS в кардиомиоцитах при развитии гипертрофии миокарда не изменяется.

6. В кардиомиоцитах гипертрофированного сердца человека установлено повышение активности нитрооксидсинтазы, сходное с результатами, полученными в эксперименте. Это подтверждает протективное значение eNOS

92 в развитии гипертрофии сердца и позволяет рассматривать увеличение секреции NO как компенсаторный механизм.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Основной компенсаторной реакцией сердца на перегрузку давлением при артериальной гипертензии (АГ) является увеличение совершаемой сердцем работы, что приводит к развитию гипертрофии кардиомиоцитов [Тен Эйк Р. Е., Бассет A. JI. 1990].

В нашем эксперименте гипертрофия сердца развивается в результате ренопривной гипертензии, вызванной выключением части почечной паренхимы инъекцией в её передний полюс формалина. Причиной развития АГ при экспериментальной гипертрофии как и при заболеваниях почек является активация прессорной и снижении депрессорной гормональной активности почечного эндокринного аппарата [Kaplan N.M., 1994; Кутырина И. М. 1999., 1999].

Наличие гипертрофии миокарда, сформировавшейся в эксперименте, установлено на основании увеличения массы сердца, сердечного индекса, диаметра кардиомиоцитов. Эти изменения явились следствием артериальной гипертензии, наличие которой подтверждается высоким артериальным давлением, типичными изменениями стенки аорты, гиперплазией и расслоением ее эластических мембран, активацией прессорной системы ренин-альдостерон.

Возникновение и прогрессирование гипертрофии осуществляется через изменения всех компонентов миокарда, включая кардиомиоциты, интрамуральные коронарные артерии и интоостиций. При этом нарушается сбалансированное равновесие между ними [Дядык А.И. и соавт., 1997]. Преобразование кардиомиоцитов направлено на увеличение сократительной способности миокарда левого желудочка и проявляется увеличением скорости репликации и дифференцировки ДНК, ускорением синтеза РНК и белка, индукцией миофибриллогенеза, образованием новых саркомеров и митохондрий и модификацией внутриклеточных ионных потоков [Agabiti-Rosei Е., 1994; Сидоренко Б.А., Преображенский Д.В., 1998]. Указанные изменения приводят к перестройке цитоскелета и увеличению размера кардиомиоцита. Этот процесс не сопровождается пролиферацией кардиомиоцитов [Devereux R., Roman M.J., 1995; Преображенский Д.В. и соавт., 1997]. Однако, многие аспекты патофизиологии гипертрофии сердца изучены недостаточно [Непомнящих Л.М., 1991].

Претендентом на роль аутокринного регулятора внутриклеточной регенерации органелл может рассматриваться оксид азота. Тем не менее, роль NO в развитии гипертрофии сердца все еще дискутируется и возможно она меняется в зависимости от стадии заболевания [Nava Е. et al., 1998].

При развитии патологии (ишемия миокарда, левожелудочковая гипертрофия, сердечная недостаточность, миокардиты), оксид азота может оказывать положительный и/или негативный эффект на сердечную мышцу [Shah А. М., MacCarthy Р. А. 2000]. Положительный эффект оказывает эндотелиальная форма нитрооксидсинтазы или пространственно и временно ограниченная экспрессия индуцибельной изоформы NOS. Негативный эффект является результатом дефицита продукции оксида азота или высоким уровнем продукции его индуцибельной нитрооксидсинтазой и образованием пероксинитрита [Fukuchi М. et al., 1998; Adams V. et al., 1998].

В гипертрофированном миокарде оксид азота вовлекается во многие физиологические и патофизиологические процессы [Nava Е. et al., 1998; Barton С.Н. et al., 2001]. В частности, он модулирует возбуждение-сокращение; миокардиальную релаксацию; диастолическую функцию; ответ Франка-Старлинга; сердечный ритм; энергетику миокарда и субстратный метаболизм. Эффекты нитрооксида зависят от его количества, присутствия на клетках реактивных оксигенных зон, взаимосвязей с нейрогуморальными стимулами и активации цГМФ-зависимого и -независимого сигнала [Shah А. М., MacCarthy Р. А., 2000].

Данные литературы об экспрессии кардиомиоцитами нитрооксидсинтазы являются малочисленными и противоречивыми. Так, Ursell [1993] показал, что кардиомиоциты являются NOS-неактивными. Другими авторами позднее было выявлено, что и предсердные и желудочковые кардиомиоциты экспрессируют эндотелиальную NOS [Fukuchi M., 1998; Wang Y. G. et al., 1998]. В последнее время получены доказательства солокализации eNOS с мускариновыми АХ рецепторами на кардиомиоцитах, что способствует передаче нервного импульса с ацетилхолинового аксона на мышечное волокно [Feron О. et al. 1999]. Образование оксида азота в гипертрофированных кардиомиоцитах, как это показано в некоторых работах, увеличено [Jones S.P. et al., 2000; Barton C.H. et al., 2001].

Согласно результатам нашего исследования, кардиомиоциты негипертрофированного сердца показывают слабую реакцию на NADPH-диафоразу. Высокая активность нитрооксидсинтазы в сердечных миоцитах наблюдается в условиях эксперимента. Нами установлена определенная временная связь между продукцией фермента и развитием гипертрофии. Выявлено, что увеличение образования оксида азота предшествует развитию гипертрофии кардиомиоцитов. Можно предположить, что NO является аутокринным регулятором в развитии компенсаторной реакции, какой следует считать гипертрофию сократительных кардиомиоцитов сердца.

Наши данные о кардиопротективной роли эндотелиальной формы нитрооксидсинтазы согласуются с исследованиями ряда ученых. Увеличение активности сосудистой eNOS на повышенную гемодинамическую нагрузку в эндотелии сосудов может уменьшить степень повреждения органов-мишеней при развитии гипертензии [Bataineh A., Raij L., 1998; Raij L., 1998]. При развитии экспериментального инфаркта миокарда, блокируя продукцию eNOS, авторы отмечают появление более обширных инфарктных участчов миокарда по сравнению с контрольной группой, что подтверждает вывод о защитной функции eNOS [Takimoto Y. et al., 2000].

Известно, что оксид азота может синтезироваться не только кардиомиоцитами, но также и нервными клетками [Ursell Р.С., Mayes М., 1995]. Внутрисердечные ганглии, содержащие нитрооксидергические нейроны, располагаются непосредственно под эпикардом, преимущественно в области устьев нижней и верхней полых вен, легочных вен и в межпредсердной перегородке.

Рядом авторов [Hassal et al., 1992; Chikada et al., 2000] показано, что NADPH-диафораза в сердечных нейронах маркирует нейрональную NO-синтазу (nNOS). Наши данные подтверждают этот вывод относительно нормального сердца и доказывают, что при его гипертрофии увеличение активности энзима происходит за счет nNOS, т.к. iNOS в сердечных нейронах нами не выявлена.

Существует мнение, что сердечные нервы с NOS-активностью образуют особый тип нервной ткани - NANC-систему, которая не воздействует непосредственно на коронарный кровоток [Ursell Р.С., Mayes М., 1993].

Работы других исследователей [Addicks К. et al., 1994; Sawada К. et al., 1997] и наши собственные исследования показали непосредственное влияние нейрональной нитрооксидсинтазы на сосудистое русло. Выявлено, что в миокарде предсердий и желудочков нейрональная NOS локализована в автономных нервных волокнах вдоль всего сосудистого древа. NADPH-d.-позитивные волокна иннервируют коронарные артерии: от их главных ветвей до уровня артериол. Мы согласны с точкой зрения авторов [Sawada К. et al., 1997], что оксид азота может играть роль нейротрансмиттера, и/или нейромодулятора в нейрональном контроле сердечного кровотока.

В литературе имеются единичные данные о нейрональной нитрооксидсинтазе при развитии экспериментальной ишемии сердца у крыс. Показано увеличение числа нитрооксидергических структур в постинфарктный период [Takimoto Y. et al., 2000]. Данные об изменении nNOS при развитии гипертрофии сердца в современной литературе отсутствуют.

Анализируя собственные наблюдения, мы выявили увеличение числа нейронов, экспрессирующих нитрооксидсинтазу. В нормальном сердце количество нейронов с активностью NOS составляет 21.3 %, при гипертрофии этот показатель увеличивается в 1.5 раза и достигает 34.1 %. Следовательно, определенная часть внутрисердечных нервных клеток в условиях гиперфункции сердца синтезирует в избытке оксид азота, повышая роль его в нейрональном контроле за деятельностью сердца.

Проведенная иммуногистохимическая реакция показала наличие iNOS в макрофагах гипертрофированного сердца и отсутствие этой изоформы в кардиомиоцитах. Таким образом, NADPH-диафораза выявляет в гипертрофированных кардиомиоцитах по нашим и литературным данным [Jones et al., 2000; Barton et al., 2001] эндотелиальную нитрооксидсинтазу (eNOS). Между тем, при развитии некоторых патологических состояний (например, инфаркте миокарда), кардиомиоциты в зонах, близких к некрозу, могут экс пресс ировать iNOS [Takimoto Y. 2000].

Существует, надо полагать, определенная связь между развитием гипертрофии и повышенной продукцией nNOS в нервных клетках. Гипертрофия миокарда, вероятно, способствует росту числа нитрооксидергических нейронов и степени активности продуцируемой ими нитрооксидсиназы. Выполняя при передаче нервного импульса роль паракринного регулятора, NO вовлекается в нейрогенный контроль за состоянием кардиомиоцитов и кровеносных сосудов, облегчает вазодилятацию и модуляцию миокардиального расслабления.

Таким образом, выявлена зависимость между развитием гипертрофии миокарда и активностью нитрооксидсинтазы в кардиомиоцитах и нейронах сердца, что позволяет предположить непосредственное участие NO в развитии компенсаторной реакции сердца в ответ на постоянное увеличение нагрузки кровяным давлением. При этом NO регулирует функцию кардиомиоцитов с помошью ауто- и паракринного механизмов.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Тищенко, Ольга Васильевна, Владивосток

1. Брюне Б., Сандау К., А. фон Кветен Апоптотическая гибель клеток и оксид азота: механизмы активации и антагонистические сигнальные пути // Биохимия. 1998. - Т. 63. - № 7. - С. 966-975.

2. Ванин А.Ф. Динитрозильные комплексы железа и s-нитрозотиолы две возможные формы стабилизации и транспорта оксида азота в биосистемах // Биохимия. - 1998. - Т. 63. - № 7. - С. 924-938.

3. Вихерт А. М., Волков В. Н., Соколова Р. И. Активность ренина в плазме крови и почках при внезапной сердечной смерти у больных артериальной гипертензией // Кардиология. 1984. - № 3. - С. 83-87.

4. Волин М.С., Дэвидсон К.А., Камински П.М., Фэйнгерш Р.П., Мохаззаб X. Механизмы передачи сигнала оксидант-оксид азота в сосудистой ткани // Биохимия. - 1998. - Т. 63. - № 7. - С. 958-965.

5. Воробьев В.П. Вегетативная нервная система // Избранные труды. Л.: Медицина, 1958. - С. 214-235.

6. Гервазиев Ю.В., Соколов Н.Н. Механизмы регуляции кальмодулином активности синтазы окиси азота // Вопросы медицинской химии- 1999. № 3. -С. 1-15

7. Говырин В.А. Трофическая функция симпатических нервов и скелетных мышц. Л.: Наука, 1967. 132 с.

8. Гогин Е.Е., Сененко А.Н., Тюрин Е.И. Артериальные гипертензии. Л., Медицина, 1983. 272 с.

9. Гомазков О.А. Ангио^ецзинпревращающий фермент в кардиологии: молекулярные и функциональные аспекты // Кардиология. 1997. - № 11. - С. 58-62.

10. Де Лиюв П. Современные взгляды на гипертоническую болезнь // Кардиология. 1997. - № 4. - С. 93-100.

11. Дроздова Г. А. Клеточные механизмы артериальной гипертензии // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 2000. - № 3. - С. 26-30.

12. Дядык А. И., Багрий А. Э., Лебедь И. А., Яровая Н. Ф., Щукина Е. В., Черний В. В. Гипертрофия левого желудочка у больных с хронической почечной недостаточностью // Кардиология. 1997. - № 2. С. 76-80.

13. Кикнадзе М.П. Ренин-ангиотензиновая система сердца // Кардиология. 1995. - № 3. - С. 56-58.

14. Колосов Н.Г., Хабарова А.Я. Структурная организация вегетативных ганглиев Л.: Наука, 1978. 72 с. 1978.

15. Крохина Е.М. Функциональная морфология и гистохимия вегетативной иннервации сердца. М.: Медицина, 1973. 232 с.

16. Кутырина И. М. 1999. Патогенез артериальной гипертонии при почечных паренхиматозных заболеваниях // В кн.: Артериальная гипертония и почки. -М.: ММА им. И.М.Сеченова. 1999. - С. 21-23

17. Кушаковский М.С. Гипертоническая болезнь. С-П.: Сотис, 1995. 311с.

18. Леви М.Н., Мартин П.Ю. Нейрогуморальная регуляция работы сердца // В кн.: Физиология и патофизиология сердца. М.: Медицина. - 1990. - Т. 2. -С. 64-91.

19. Малышев И.Ю. Введение в биохимию оксида азота: Роль оксида азота в регуляции основных систем организма // Рос. жур. гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 1997. - № 1. - С. 49-55.

20. Марков Х.М., Кучеренко А.Г., Аралов М.Д., Брязгунов И.П., Яцык П.К., Намазбеков М.Н. // Кардиология. 1986. - Т. 26. № 3. С. 80-84.

21. Марков Х.М. Патофизиология артериальной гипертонии. -София, 1970.-376 с.

22. Меерсон Ф.З. Пластическое обеспечение функции организма. М.:1968.

23. Мотавкин П.А., Гельцер Б.И. Клиническая и экспериментальная патофизиология легких. М.: Наука, 1998. - 366 с.

24. Недоспасов А.А. Биогенный оксид азота: десять лет второго пришествия. Предыстория открытия аргининзависимого биосинтеза NO // Биоорганическая химия 1999. - Т. 25. - № 6. - С. 403-411.

25. Некрасова А.А., Учитель И.А., Клембовский А.А., Матвеева J1.C., Шпилькин В.Н. Активность ренина плазмы аортальной и венозной крови при артериальной гипертонии различной этиологии // Терапевтический архив. -1981.-Т. 53.-№8.-С. 62-66.

26. Непомнящих Л.М. Морфогенез важнейших общепатологических процессов в сердце. Сибирь: Наука, 1991. - 352 с.

27. Новиков И.И. Сердце и сосуды: онтогенез и восстановление нейрорегуляторной системы. Минск: Наука и техника, 1990. 239 с.

28. Ноздрачев А.Д. Физиология вегетативной нервной системы. Л.: Медицина, 1983. 295 с.

29. Писаренко О.И., Студнева И.М., Постнов А.Ю. Особенности энергетического состояния тканей при спонтанной гипертензии крыс // Кардиология. 1998. - № 12 - С. 37-42.

30. Пауков B.C., Фролов В.А. Элементы теории патологии сердца. М.: Москва, 1982.-272 с.

31. Преображенский Д.В., Сидоренко Б.А., Сополева Ю.В., Иосава И.К. Физиология и фармакология ренин-ангиотензиновой ситемы // Кардиология. -1997.-№ 11.-С. 91-95.

32. Плечкова Е.К. Реакция нервной системы организма на хроническое повреждение периферического нерва. М.: Медгиз. 1961. 259 с.

33. Постнов А. Ю. Молекулярная биология ренина: возможности супрессии ренин-ангиотензиновой системы // Кардиология. 1995. - № 10. - С. 46-51.

34. Ратнер Н.А. Артериальные гипертонии. М.: Медицина, 1974. - 46 с.

35. Реутов В.П., Сорокина Е.Г., Охотин В.Е., Косицин Н.С. Циклические превращения оксида азота в организме млекопитающих. М.: Наука, 1997. -159 с.

36. Реутов В.П., Сорокина Е.Г. NO-синтазная и нитритредуктазная компоненты цикла оксида азота // Биохимия. 1998. - Т. 63. - № 7. - С. 10291040.

37. Рунихин А.Ю., Савчук В.И., Соколова Р.И., Левицкая Ю.В., Почепцова Г.А., Арабидзе Г.Г. Влияние инфузий простагландина F 2а на течение артериальной гипертонии у спонтанно гипертензивных крыс // Кардиология. 1998. - № 12 - С. 31-37.

38. Саркисов Д.С. Регенерация и ее клиническое значение. М.: Наука, 1970.- 198 с.

39. Сидоренко Б.А., Преображенский Д.В. Гипертрофия левого жлудочка: патогенез, диагностика и возможность обратного развития под влиянием антигипертензивной терапии // Кардиология. 1981. - № 5. - С. 80-85.

40. Северина И.С. Растворимая форма гуанилатциклаза в молекулярном механизме физиологических эффектов окиси азота и в регуляции процесса агрегации тромбоцитов // Биохимия. 1998. - Т. 63. - № 7. - С. 939-947.

41. Спаркс Х.В., Уонглер Р.Д., ДеВитт Д.Ф. Регуляция коронарного кровообращения // В кн.: Физиология и патофизиология сердца. М.: Медицина. - 1990. - Т. 2. - С. 562-595.

42. Стокле Ж-К., Мюлле Б., Андрианцитохайна Р., Клещев А. Гиперпродукция оксида азота в патофизиологии кровеносных сосудов // Биохимия. 1998. - Т. 63. - № 7. - С. 939-947.

43. Стропус Р.А. Холинергическая и адренергическая иннервация сердца и ее изменения при сердечно-сосудистой патологии: Автореф. дис. . д-ра мед.наук. М., 1982. - 35 с.

44. Стулова О.С. Распределение афферентных проводников депрессорного и спинномозгового происхождения по областям и слоям сердца: Автореф. дис. . д-ра мед.наук. 1968. 24 с.

45. Сумароков А.В., Моисеев B.C. Клиническая кардиология М.: Универсум паблишинг, 1995. 240 с.

46. Тен Эйк Р. Е., Бассет А. Л. Гипертрофия миокарда и изменение электрической активности кардиомиоцитов // В кн.: Физиология и патофизиология сердца. М.: Медицина. - 1990. - Т. 2. - С. 169-203.

47. Углова М.В. Дифференцировка, зрелость и старение сердечных нейроцитов человека в постнатальном онтогенезе // Автореф. дис. д-ра мед. наук. М.: 1978. 31 с.

48. Хабарова А.Я. Иннервация сердца и коронарных сосудов. Л.: Наука, 1975,- 167 с.

49. Хаценко О. Взаимодействие оксида азота и цитохрома Р-450 в печени // Биохимия. 1998. - Т. 63. - № 7. - С. 984-991.

50. Ферранс В.Д. Влияние токсических веществ на миокард // В кн.: Физиология и патофизиология сердца. М.: Медицина. - 1990. - Т. 2. - С. 338365.

51. Швалев В.Н., Стропус Р.А., Морозов Е.К. Внезапная смерть. М.: Медицина, 1980. - С.303-322.

52. Швалев В.Н., Сосунов А.А., Гуски Г. Морфологические основы иннервации сердца. М.: Наука, 1992. 368 с.

53. Червова И.А. Структурная организация внутрисердечного нервного аппарата // Вопросы нервной регуляции тканевых процессов. М., 1971. С. 3849.

54. Форбс М.С. Гладкомышечные и другие периэндотелиальные клетки сосудов сердца млекопитающих //В кн.: Физиология и патофизиология сердца. М.: Медицина. - 1990. - Т. 2. - С. 366-399.

55. Ярыгин Н.Е., Ярыгин В.Н. Патологические и приспособительные изменения нейрона. М.: Медицина, 1973. 179 с.

56. Adcock I.M., Brown C.R., Kwon O.G., Barnes P.J. Oxidativ stress induces NF-kappa-B DNA-binding and inducible NOS messenger RNA in human epithelial cells // Biochem. and Byophys. Res. Commun.

57. Addicks К., Bloch W., Feelisch M. Nitric oxide modulates sympathetic neurotransmission at the prejunctional level // Microsc. Res. Tech. 1994. - Vol. 29. - № 2. - P. 161-168.

58. Agabiti-Rosei E. Evalution Of the cardiac effects of antihypertensive agents // J. Cardiovasc. Pharmacol. 1994. - Vol. 23. - № 5. - P. 425-485.

59. Asano K., Chee C.B., Gaston B. et al. Constitutive and inducible nitric oxide synthase gene-expression, regulation and activity in human lung epithelial cells // Proc. Nat. Acad. Sci. US. 1994. - Vol. 91. - N 21. P. 1198-1205.

60. Atoji Y., Yamamoto Y., Suzuki Y. Innervation of NADPH-diaphorase-containing neurons correlated with acetylcholinesterase, tyrosine hydroxylase and neuropeptides in the pigeon cloaca // J. Anat. 2001. - Vol. 198 - № 2. - P. 181-188.

61. Bassoulet C., Lonchampt., Canet E. Differential immunolocalization of type I, II, III nitric oxide synthase isoforms in murine lung epithelium // Europ. Respirat. J. 1996. - Vol. 9. - P. 23-124.

62. Bataineh A., Raij L. Angiotensin II, Nitric Oxide and and end-organ damage in hypertension // Kidney Int Suppl. 1998. - № 68. - P. 14-19.

63. Barton C.H., Ni Z., Vazary N.D. Effect of severe aortic banding above the renal arteries on nitric oxide synthase isotype expression // Kidney Int. 2001. - Vol. 59№2.-P. 654-661.

64. Berridge M.J. Inositol triphosphat and calcium signalling // Nature. 1993. -Vol. 361.-P. 315-325.

65. Bredt D.S., Snyder S.H. Isolation of nitric oxide synthase, a calmodudulin-requiring enzyme // Proc. Nat. Sci. US. 1990. - Vol. 87. - P. 682-685.

66. Brookes P.S., Zhang J., Dai L., Parks D.A. Increased Sensitivity of Mitochondrial Respiration to Inhibition by Nitric Oxide in Cardiac Hypertrophy // J. Mol Cell Cardiol. 2001. - Vol. 33. - № 1. - P. 69-82.

67. Burnstock G. Autonomic neuromuscular juictions: Current developments and future directions // J. Anat. 1986. - Vol. 146. - P. 1-30.

68. Burnstock G. // Autonomic neuroeffector mechanisms: Recent development. 1987. - Vol. 2. - № 4. - P. 427-436.

69. Capasso J.M., Strobeck J.K., Sonnenblick E.H. Myocardial mechanical alteration during gradual onset long term hypertension in rats // Am. J. Physiol. -1981.-Vol. 10.-P. H435-H441.

70. Chen Y., Lin D., Ohmori Y., Naito J. Localization of sympathetic, parasympathetic and sensory neurons innervating the heart // J. Vet. Med. Sci. -1999.-Vol. 61.-№ l.-P. 1-5.

71. Devereux R., Roman M.J. Hypertensive Cardiac Hypertrophy: Pathophysiological and Clinical Characteristics // In: Hypertension: Pathophisiology. Diagnosis. New York: Raven Press Ltd. - 1995. - P. 409-432.

72. Digerness S.B., Harris K.D., Kirklin J.W., Urthaler F. Peroxynitrite irreversibly decreases diastolic and systolic function in cardiac muscle // Free Radic. Biol. Med. 1999. - Vol. 27 - № 11-12. - P. 1386-1392.

73. Dusting G.J. Nitric oxide in cardiovascular disorders // J.Vase. Res. 1995. -Vol. 32.-P. 143-161.

74. Filogamo G., Cracco C. Models of neuronal plasticity and repair in the enteric nervous system: a review // Ital. J. Anat. Embriol. Vol. 100 - № l.-P. 185195.

75. Felaco M., Grilli A., Gorbunov N., Di Napoli P. Endothelial NOS expression and ischemia-reperfusion in isolated working rat heart from hypoxic and hyperoxic conditions // Biochim Biophys Acta. 2001. - Vol. 1594. - М» 2-3. - P. 203-211.

76. Feron O., Zhao Y.Y., Kelly R.A. The ins and outs of caveolar signaling m2 muscaring cholinergic receptors and eNOS activation versus neuregulin and Erb B4 signaling in cardiac myocites // Ann. N.Y. Acad. Sci. 1999. - № 874. - P. 11-19.

77. Freeman B.A. Nitric oxide: A central regulatory species in pulmonary oxidant reactions // Amer. J. Physiol. Lung Cell, and Mol. Physiol. - 1995. Vol. 268. - N 12. - P. L697-L698.

78. Funck R.C., Wilke A., Rupp H. Cardiac structure function relationship and the renin-angiotensin-aldosterone system in hypertensive heart disease // Herz. -1995. - Vol. 20. - № 5. - P. 330-339.

79. Furchgott R.F., Zawadski J. The obligatory role of endothelial cells in the relaxation of arterial smooth muscle by acetylcholin // Nature. 1980. - Vol. 288. - P. 373-376.

80. Furukawa K., Harrison D.G., Saleh D. et al. Expression of nitric-oxide synthase Hyman nasal-mucosa // Amer. J. Respirat. and Crit. Care. Med. 1996. -Vol. 153.-N2.-P. 847-850.

81. Gard V.C., Hassid A. Nitric oxide-generating vasodilatators and 8-bromocyclic guanosinemonophosphate ihibit mitogenesis and proliferation of cultured rat vascular smooth muscle cells // J. Clin. Invest. 1989. - Vol. 83. - P. 1774-1777.

82. Gorren A.C.F. and Mayer B. The versatile and Complex Enzymology of Nitric Oxide Synthase // J.Biochem. 1998. - Vol. 63. - Publ. 7. - P. 870-880.

83. Gutierrez H.H., Pitt B.R., Schwarz M. et al. Pulmonary alveolar epithelial inducible NO synthase gene expression: Regulation by inflammatory mediators // Amer. J. Physiol. Lung Cell, and Mol. Physiol. - 1995. - N 3. - P. L501-L508.

84. Gyurko R., Kunlencordt P., Fishman M.C., Huang P.L. Modulation of mouse cardiac function in vivo by eNOS and ANP // Am. J. Physiol. Heart Circ Physiol. 2000. - Vol. 278. № 3. - P. 971-981.

85. Hattori R., Sase K., Eizawa H., Kosuga К., Aoyama Т., Inoue R., Sasayama S., Kawai C., Yui Y. Structure and function of nitric oxide synthases // Infl. J. Cardiol. 1994. - Vol. 47. - P. S71-S75.

86. Hope V.T., Vincent S.R. Histochemical characterization of neuronal NADPH-diaphorase // J. Histochem. Cytochem. 1989. - Vol. 37. - P. 653-661.

87. Horackova M., Armour J.A., Byczko Z. Distribution of intrinsic cardiac neurons in whole-mount guinea pig atria identified by multiple neurochemical coding. A confocal microscope study // Abstract Volume 297. 1999. - Issue 3. - P. 409-421.

88. Ignarro L.G., Kadowitz P.J. The pharmacological and physiologicalrole of cyclic GMP in vasculare smooth muscle relaxation // Annu. rev. Pharmacol, and Toxicol. 1985. - Vol. 25. - P. 171-191.

89. Jacobs M.C., Lenders Jacques W. M., Willemsen J. J., Thien T. Adrenom edullary secretion of epinephrine is increased in mild essential hypertension // Hypertension. 1997. - Vol. 29. № 6. - P. 1303-1308.

90. James T.N. Sudden cardiac death: Third USA-USSR joint symp. Kaunas, 1984. P. 1-23.

91. Jones S.P., Girod W.G., Huang P L., Lefer D.J. Myocardial reperfusion injury in neuronal nitric oxide synthase deficient mice // J. Coron. Artery Dis. 2000. -Vol. 11.-№8.-P. 593-597.

92. Kaplan N.M. Renal parenchimal hypertension // In: Clinical Hypertension, Baltimore: Williams and Wilkins. 1994. - P. 299 - 318.

93. Klimaschewski L., Kummer W., Mayer В., Couraud J.Y., Preissler U., Philippin В., Heym C. Nitric oxide synthase in cardiac nerve fibers and neurons of rat and guinea pig heart // Circ. Res. 1992. - Vol. 71. - № 6. - P. 1533-1537.

94. Kristek F., Gerova M. Long-term NO syntnase inhibition affects heart weight and geometry of coronary and carotid arteries // Physiol. Res. 1996. - Vol. 45.-№5.-P. 361-367.

95. Kooy N.W., Royall J.A., Ye Y. Z. Evidence for in vivo peroxynitrite production in human acute lung injury // Amer. J. Respirat. and Crit. CareMed. -1995.-Vol. 151.-№4.-P. 1250-1254.

96. Lamas S., Marsden P.A., Li G.K., Temst P., Michel T. Endothelial nitric oxide synthase: molecular cloning and characterization of a distinct constitutive enzyme isoform // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1992. - Vol. 88. - P. 6348-6352

97. Leone A.M., Palmer R.M., Knowles R.G. et al. Constitutive and inducible nitric oxide synthases incorporate molecular oxigen into both nitric oxide and citrulline // Ibid. 1991. - Vol. 266. - P. 23790-23795.

98. Lindpaintner K., Ganten D. The cardiac renin-angiotensin system. An appraisal of present experimental and clinical evidence // Circ. Res. 1991. - № 68. -P. 905-920.

99. Loesch A., Belai A., Burnstock G. Ultrastructural localization of nitric oxide synthase in endothelial cells of the rabbit aorta // Cell. Tissue Res. 1993. -Vol. 274. - № 3. P. 539-545.

100. Matter C.M., Mandinov L., Kaufmann P.A., Vassali G., Jiang Z., Hess O.M. Effect of NO donors on LV diastolic function in patients with severe pressure -overload hypertrophy // Circulation. 1999. - Vol. 99. - № 18. - P. 2396-2401.

101. Mayer В., John M., Heinzel B. et al. Brain nitric oxide synthase is a biopterin- and flavin-containing multi-functionfl oxido-reductase // Ibid. 1991. N 288. P. 187-191.

102. Mcintosh M.A. Hicks.M.N., Kane K.A., Rankin A.C., Cobbe S.M. A characterized model of left ventricular hypertrophy in the rabbit // Cardioscience. -1994.-Vol. 5.-№2.-P. 95-100.

103. Merlos M., Rabasseda X., Silvestre J. S. Discovery of new angiotensin 2 receptor antagonists // Meth. and Find. Exp. and Clin. Pharmacol. 1998. Vol. 20. -№9.-P. 805-815.

104. Moncada S., Palmer R.M.J., Higgs E.A. Nitric Oxide: Physiology, phatophysiology and pharmacology // Pharmacol. Rev. 1991. - Vol. 43. P. 256.

105. Muscholl M. W, Schunkert H., Muders F., Eisner D., Kuch В., Hense H. W, Riegger G. A. Neurohormonal activity and left ventricular geometry in patients with essential arterial hypertension // Am. Heart J. 1998. - Vol.135. - № 1. -P. 5666.

106. Nava E., Farre A. L., Moreno C., Casado S., Moreau P., Cosentino F., Luscher T. F. Alteration to the nitric oxide pathway in the spontaneously hypertensive rat // J. Hypertens. 1998. Vol. 16. - № 5. -P. 609-615.

107. Qae S., Shinchama K. Organic thionitrites and related substances // Org. Prep. Proc. Intern. 1983. - N 15. - P. 119-127.

108. Ogura H. Cioffi W.G., Offner P.J. et al. Effect of inhaled nitric oxide on pulmonary function after sepsis in a swine model // Surgery. 1994. - Vol. 166. - N 2.-P. 313-321.

109. Owman C., Hanko J. Kardebo J.E., Kahrstrom J. // Neural regulation of brain circulation. Amsterdam: Elsevier, 1986. P. 331.

110. Palmer R.M.J., Ashton D.S., Moncada S. Vasculare endothelial cells synthesize nitric oxide from L-arginine // Nature. 1988. - Vol 333. - P. 664-666.

111. Palmer R.M.J , Ferrige A.G., Moncada S. Nitric oxide accounts for the biological activity of endothelium derived relaxing factor // Ibid. 1987. - Vol. 327. -P. 524.

112. Pollock J.S., Forstermann U., Mitchell J.A. et al. Purification and characterization factor synthase from cultured and native bovine aortic endothelial cells // Proc. Nat. Acad. Scien. US. -1991. Vol. 88. - P. 10480.

113. Premaratne S., Xue C., McCarty J.M., Zaki M., McCuen R.W. Neuronal nitric oxide synthase: expression in rat parietal cells // Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 2001. - Vol. 280. - № 2. - P. 308-313.

114. Quinn A.C., Petros A.J., Vallance P. Nitric oxide: an endogenous gas // Brit. J. Anaesth. 1995. - N 74. - P. 443-451.

115. Raij L. Nitric oxide in hypertension: relationship with renal injury and left ventricular hypertrophy // Hypertension. 1998. - Vol. 31. - № 3. - P. 189-193.

116. Ramis I., Lorente J., Rosello-Catafau J. et al. Differential activity of nitric-oxide synthase in human nasal-mucosa and polyps // Rupor. Respirat. J. -1996. Vol. 9. - N 2. - P. 202-206.

117. Ritchie R.H., Schiebinger R. J., La Pointe M.C., Marsh J.D. Angiotensin H-induced hypertrophy of adult rat cardiomyocytes is blocked by nitric oxide // Am. J. Physiol. 1998. - Vol. 275. - № 4. - P. 1370-1374.

118. Rosenberg M.E., Smith L.J., Correa-Rotter R., Hostetter Т.Н. The paradox of the renin-angiotensin system in chronic renal disease // Kidney Int. -1994. v. 45.-P. 403 -410.

119. Rossi G.P., Sacchetto A., Visentin P.A. Changes in left ventricular anatomy and primary aldosteronism // Hypertension. 1996. - Vol. 27. - № 27. - P. 1039-1045.

120. Schini V.B., Vanhoutte P.M. Inhibitors of calmodulin impair the constitutive but not the inducible nitric oxide synthase activity in the rat aorta // J. Pharmacol. Esp. Ther. 1992. - Vol 261. - P. 553-558.

121. Schwarz P., Diem R., Dun N. J., Forstermann U. Endogenous and exogenous nitric oxide inhibits norepinephrine release from rat heart sympathetic nerves // Circ Res. 1995. - Vol. 77. - № 4. - P. 841-848.

122. Shah A. M., MacCarthy P. A. Paracrine and autocrine effects of nitric oxide on myocardial function // Pharmacol. 2000. - Ther. - Vol. 86. - № 1. - P. 4986.

123. Simko F., Simko J. The potential role of nitric oxide in the hypertrophic growth of the left ventricle // Physiol. Res. 2000. - Vol. 49. - № 1. - P. 107-114.

124. Tanaka K., Hassal C.J., Burnstock G. Distribution of intracardiac neurones and nerve terminals that contain a marker for nitric oxide, NADPH-diaphorase in the guinea pig heart // Cell Tissue Res. 1993. - Vol. 273. - № 2. - P. 293-300.

125. Tanaka K., Chiba T. Ultrastrural localisation of nerve terminals containing nitric oxide synthase in rat adrenal gland // Neurosci Lett. 1996. Vol. 204. -№3. - P. 153-156.

126. Tanaka K., Chiba T. The vagal origin of preganglionig fibers containing nitric oxide synthase in the guinea pig heart // Neurosci Lett 1998. - Vol. 252. - № 2.-P. 135-138.

127. Topol E.J., Traill T.A., Fortuin N. J. Hypertensive hypertophic cardiomyopathy of the elderly //N. Engl. Med. 1985. - Vol. 312. - P. 277-283.

128. Ursell P.C., Mayes M. The majority of nitric oxide synthase in pig heart in pig heart is vascular and not neural // Cardiovasc. Res. 1993. - Vol. 27. - № 11.-P. 1920-1924.

129. Ursell P.C., Mayes M. Anatomic distribution of nitric oxide synthase in heart // Int. J. Cardiol. 1995. - Vol. 50. - № 3. - P. 217-223.

130. Ursell P.C., Mayes M. Endothelial isoform of nitric oxide synthase in rat heart increases during development // Anat. Rec. 1996. - Vol. 246. - № 4. - P. 465472.

131. Vallance P., Moncada S. Role of endogenous nitric oxide in septic shock //New-Horiz. 1993. - Vol. 1. -N 1. - P. 77-86.

132. Vasan R.S., Levy D. The role of hypertension in the pathogenesis of heart failure. A clinical mechanistic overview // Arch. Intern Med. 1996. - Vol. 156. - P. 1789-1796.

133. Vapaatalo H., Mervaala E., Nurminen M.L. Role of endothelium and nitric oxide in experimental hypertension // Physiol, res. 2000. - Vol. 49. - № 1. - P. 1-10.

134. Vincent S.R. Nitric oxide: A radical neurotransmitter in the central nervous system // Progr. Neurobiol. 1994. - Vol. 42. - P. 129-160.

135. Waldman S.A., Murad F. Cyclic GMF synthesis and function // Pharmacol. Rev. 1987. - Vol 39. - P. 163-196.

136. Wang Y. G., Rechenmacher С. E., Lipsius S. L. Nitric oxide signaling mediates stimulation of L-type Ca 2+ current elicited by withdrawal of acetylcholine in cat atrial myocytes // J. Gen. Physiol. 1998. - Vol. 111. - № 1. - P. 113-125.

137. Wolf G., Wurdig S., Shunzel G. Nitric oxide synthase in rat brain is predominantly located at neuronal endoplasmatic reticulum: An electron microscope demonstration of NADPH-diaphorase activity // Neurosci. Lett. 1992. - Vol. 147. -P. 63-66.

138. Wolf G.Nitric oxide and nitric oxide synthase: biology, pathology, localization // J. Histol. Histopathol. 1997. - Vol. 12. - № 1. - P. 251-261.

139. Xiu Q., Cho Hi, Calaycay J., Mi!imford R.A., Swiderk K.M., Lee T.D., Ding A., Troso Т., Nathan C. Cloning and characterization of inducible nitric oxide synthase from mause macrophages // Science. 1992. - Vol. 256. - P. 225-228.

140. Xue C., Rengasamy A., Le Cras T.D. et al. Distribution of NOS in normoxic, hypoxic rat lung: Upregulation of NOS by chronic hypoxia // Amer. J. Physiol. 1994. - Vol. 267. - P. L667-L678.

141. Zhang Q., Kohara K., Qui H., Hiwada K. // Comparative effects of three sites renin-angiotensin blocade on the regression of left ventricular hypertropb> in spontaneously hypertensive rats // Am. J. Ther. 1997. - Vol. 4. - № 5-6. - P. 199202.