Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

О структурных особенностях и функциональной роли отдельных аминокислотных остатков аргиназы

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Геворкян, Маргарита Левоновна

ВВВДЕНИЕ.

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Аргиназа печени млекопитающих

1.1.1. Физико-химические и кинетические свойства

1.1.2. Иммунохимические свойства и регуляция

1.1.3. Изоферменты

1.2. Неуреотеличеекая аргиназа

1.2.1. Физико-химические и кинетические свойства

1.2.2. Изоферменты и регуляция

1.3. Роль некоторых функциональных групп в проявлении активности и особенности функционирования аргиназы.

1.3.1. Химическая модификация.

1.3.2. Действие ультрафиолетового и ионизирующих излучений.

1.3.3. Зависимость кинетических параметров каталитической реакции от рН среды.

ШВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

ГЛАВА III. РЕЗУЛЬТАТЫ ЭКСПЕРИМЕНТОВ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1. Изучение роли остатков триптофана в аргиназе

3.1.1. Влияние ультрафиолетового облучения

3.1.2. Сенсибилизированное эозином фотоокисление

3.1.3. Химическая модификация N - бромсукцинимидом

3.2. Влияние сульфгидрильных реагентов

3.2.1. Химическая модификация аргиназы ПХМБ

3.2.2. Влияние меркаптоэтанола и дитиотреитола

3.3. Химическая модификация остатков тирозина тетранитрометаном

3.4. Изучение роли остатков гистидина в аргиназе

3.4.1. Сенсибилизированная метиленовым синим фотоинактивация.

3.4.2. Химическая модификация диэтшширокарбонатом

3.5. Изучение зависимости величины к^ от pH.

3.6. Определение молекулярной массы субъединицы аргиназы

Введение Диссертация по биологии, на тему "О структурных особенностях и функциональной роли отдельных аминокислотных остатков аргиназы"

Актуальность проблемы. Аргиназа / L - аргинин уреогидролаза или амидиногидролаза Е.С.З.5.З.1./ катализирует реакцию расщепления аргинина на мочевину и орнитин. Эта реакция, впервые обнаруженная в печени млекопитающих в 1904 году (153), является завершающей стадией цикла реакций, связанных с нейтрализацией аммиака в организме - орнитинового цикла мочевины. На основании исследования аргиназной активности в тканях млекопитающих Клементи сформулировал положение, согласно которому аргиназа содержится преимущественно в печени уреотелических организмов (102). Дальнейшие исследования показали, однако, что этот фермент встречается не только в печени, но и в самых различных органах и тканях млекопитающих, включая почки, мозг, молочную железу, легкие, эритроциты и т.д. Аргиназа была обнаружена также в печени и других органах урикотелических и аммонотелических организмов, в микроорганизмах и растениях. Это свидетельствует о том, что кроме участия в орни-тиновом цикле, аргиназа в процессах жизнедеятельности организмов выполняет и другие функции. Согласно положению, выдвинутому Буня-тяном и Давтяном (24), в настоящее время различают две формы аргиназы - уреотелическую, находящуюся в печени уреотелических организмов и функционирующую в орнитиновом цикле мочевины, и неурео-телическую, которая не связана с механизмом нейтрализации аммиака и широко распространена в различных организмах, стоящих на разных ступенях эволюционного развития.

Многочисленные исследования свойств аргиназы из органов и тканей разных организмов показали, что аргиназа может участвовать в процессах биосинтеза пролина и глутамата (147,202,210,256), в процессах регуляции синтеза гистонов в ядре (24,125). Некоторые авторы предполагают участие аргиназы в пролиферации эпителиальных клеток кишечника, где орнитин используется как исходный материал для синтеза полиаминов (115). Аргиназа может участвовать, по-видимому, также в лимитировании содержания в клетках мочевины, аргинина и биологически активных однозамещенных гуанидиновых соединений (19). Таким образом, аргиназа - широко распространенный в живых организмах фермент, играющий важную роль во многих процессах метаболизма, и имеющий общебиологическое значение.

Б последние годы в ряде работ показано, что аргиназа угнетает рост опухолевых тканей. Так аргиназа печени крыс ингибирует рост гепатомы (183), а аргиназа печени быка подавляет рост лимфосарко-мы мыши in vitro (239). Антиопухолевой активностью обладает также аргиназа макрофагов перитонеального эксудата мышей (99), аргиназа печени акулы (220) и т.д. Задержка роста опухолей при введении аргиназы, возможно, объясняется удалением из среды аргинина, который в большом количестве необходим для злокачественного роста ( 220). Сравнительное исследование цитотоксичности аргиназы печени быка и крысы, проведенное на клеточных линиях рака человека (23), показало, что существует определенная специфичность во влиянии на рост и развитие клеточных культур аргиназ из разных объектов.

Из печени быка модификацией полиэтиленгликолем получен препарат аргиназы, который предотвращает рост клеток лимфосаркомы мышей в культуре, не действуя на нормальные клетки (219). Этот препарат по мнению авторов может быть использован в ферментной терапии как антираковое средство, причем большим преимуществом является то, что проблем по устранению иммунных реакций, возникающих при введении инородных белков, в данном случае не наблюдается, так как антигенные участки блокируются при взаимодействии с полимером. Таким образом, выделение высокоочищенных препаратов аргиназы и исследование ее структурных и функциональных особенностей является одной из важнейших задач не только современной энзимологии, но и ферментотерапии. Возможность получения эффективного препарата для лечения или замедления роста опухолевых тканей ставит этот вопрос в один ряд с важнейшими медико-биологическими проблемами современности.

Хотя важность метаболической роли аргиназы была определена ещё в 1932 году (154), и аргиназа, выделенная из многих органов и тканей различных организмов, широко исследуется, структура активного центра и механизм действия этого фермента остаются неизученными.

Цель работы. Настоящая работа посвящена исследованию роли некоторых аминокислотных остатков / триптофана, тирозина, гистидина, се-рина, лизина, цистина, цистеина/ в проявлении активности и поддержании нативной конформации аргиназы печени крупного рогатого скота с помощью методов химической модификации, сенсибилизированного красителями фотоокисления и изучения влияния ультрафиолетового излучения на растворы фермента. Изучались также субъединичная структура аргиназы и ионизационные свойства групп активного центра с помощью анализа зависимости величины кт от рН.

Научная новизна и практическая ценность. Впервые была исследована роль ряда аминокислотных остатков в аргиназе печени крупного рогатого скота. С помощью метода химической модификации и- бром-сукцинимидом и тетранитрометаном, сенсибилизированного эозином фотоокисления и изучения влияния ультрафиолетового облучения на растворы аргиназы показано, что остатки триптофана и тирозина не входят в состав активного центра, но участвуют, по-видимому, в поддержании нативной конформации аргиназы. Свободные БН - группы и дисульфидные связи, остатки серина и лизина не существенны для проявления активности фермента.

Впервые изучены некоторые закономерности фотохемилюминесценции, индуцированной ультрафиолетовым облучением, и сенсибилизированной эозином фотохемилюминесценции в растворах аргиназы. Исследовано также влияние рН на флуоресцентные свойства и скорость фотолиза

- 8 остатков триптофана под действием УФ света.

Применяя метода сенсибилизированного фотоокисления в присутствии метиленового синего и химической модификации удалось установить важную роль остатков гистидина в проявлении активности аргиназы. Показано,что остаток гистидина не участвует в каталитическом акте реакции, но, по-видимому, играет важную роль в процессах связывания субстрата.

Анализ зависимости величины Кщ от рН показал, что ионизирующиеся в исследуемой области рН группы аргиназы и аргинина не участвуют в связывании фермента с субстратом. При образовании фермент-субстратного комплекса происходит лишь изменение значений рК аминогруппы аргинина и неидентифицированной группы в аргиназе с рК 10,1, находящейся вблизи от активного центра. С помощью метода электрофореза в ПААГ в присутствии ДСН показано, что аргиназа печени крупного рогатого скота состоит из двух идентичных субъединиц, с М.м. 71000 д, в связывании которых дисульфидные связи участия не принимают.

Полученные данные позволяют определить дальнейшие, направления в изучении строения и свойств активного центра и механизма действия аргиназы, что является необходимым для разработки способов целенаправленного регулирования активности фермента при использовании его в качестве противоопухолевого препарата.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Геворкян, Маргарита Левоновна

- 127 -ВЫВОДЫ

1. Исследованы инактивация и фотолиз остатков триптофана в растворах аргиназы при ультрафиолетовом облучении. Показано, что фотохимическое разрушение остатков триптофана происходит с образованием свободных радикалов, о чем свидетельствует фотохемилюминес-ценция, возникающая при ультрафиолетовом облучении растворов аргиназы. С помощью измерения интенсивности фотохемилюминесценции и флуоресценции в облученных растворах аргиназы установлена связь инактивации с фотолизом остатков триптофана.

2. Разрушение остатков триптофана с образованием свободных . радикалов при сенсибилизированном фотоокислении растворов аргиназы в присутствии эозина не отражается на активности фермента.

3. Исследованы некоторые закономерности фотохемилюминесценции, индуцированной ультрафиолетовым облучением, а также сенсибилизированной эозином фотохемилюминесценции растворов аргиназы / кинетика ФХД, зависимость интенсивности ФХ1 от времени облучения/. Установлена связь между стационарной интенсивностью ФХД и фотораспадом остатков триптофана в аргиназе.

4. Изучение скорости фотолиза триптофановых остатков, а также измерение спектров флуоресценции в растворах аргиназы с рН 7 и 9,5 показало, что изменений конформации аргиназы вблизи остатков триптофана в этой области рН не происходит.

5. Взаимодействие аргиназы с И- бромсукцинимидом при рН 9,5 приводит к инактивации и модификации остатков триптофана. Определение числа модифицированных в данных условиях триптофанилов показало, что основная часть этих аминокислотных остатков расположена во внутренних гидрофобных участках молекулы аргиназы и недоступна для реагента. Снижение активности аргиназы при взаимодействии с

N - бромсукцинимидом является результатом сложных взаимодействий. В процессы инактивации вносит вклад модификация и других чу ветви

- 128 тельных к реагенту функциональных групп.

6. С помощью изучения влияния субстрата и ингибиторов на процессы инактивации и модификации остатков триптофана при ультрафиолетовом облучении и взаимодействии с N - бромсукцинимидом установлено, что эти аминокислотные остатки не входят в состав активного центра аргиназы. Предполагается, что они участвуют в поддержании нативной конформации фермента.

7. Методом химической модификации специфическими реагентами показано, что свободные бн - группы и дисульфидные связи, остатки серина и лизина не существенны для проявления активности аргиназы.

8. Нитрование остатков тирозина аргиназы с помощью тетранит-рометана приводит к снижению активности на 50$ только при использовании высоких концентраций реагента. На основании этих данных, а также изучения влияния субстрата на инактивацию аргиназы сделано заключение о том, что остатки тирозина не входят в состав активного центра фермента, а снижение активности происходит, по-видимому, за счет нарушения общей конформации молекулы аргиназы в результате модификации остатков тирозина.

9. Исследование инактивации аргиназы при сенсибилизированном метиленовым синим фотоокислении, а также химической модификации диэтилпирокарбонатом показало, что остатки гистидина играют важную роль в проявлении активности аргиназы. На основании изучения влияния субстрата и ингибиторов на процессы инактивации и модификации остатков гистидина сделан вывод о том, что остаток гистидина участвует в формировании активного центра аргиназы, что подт-тверждают также данные по определению величины кш модифицированного фермента. Анализ зависимости инактивации аргиназы от времени и концентрации реагента показал, что этот остаток гистидина не принимает участия в каталитическом акте реакции, но играет, по

- 129 видимому, важную роль в связывании субстрата.

10. Исследование зависимости величины к^ от рН показало, что ионизирующиеся в области рН 6-11,5 группы аргиназы и аргинина не участвуют в образовании связи между ферментом и субстратом. В результате образования фермент-субстратного комплекса происходит изменение значений рК аминогруппы аргинина и неидентифицированной группы в аргиназе с рК 10,1 , находящейся вблизи от активного центра. Предполагается, что наиболее эффективно аргиназа взаимодействует с непротонированной формой субстрата.

11. Методом электрофореза в ПААГ с ДСН показано, что аргиназа печени крупного рогатого скота состоит из двух идентичных субъединиц с М.м. 71000 д, в связывании которых дисульфидные связи участия не принимают.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Несмотря на большое количество исследований по выделению и очистке изоферментов аргиназы, изучению их физико-химических свойств и регуляции, структура активного центра и механизм действия этого фермента в настоящее время остаются неизученными. Ферменты, выделенные из разных тканей и организмов, отличаются друг от друга не только по аминокислотному составу и физико-химическим свойствам /см. Обзор литературы/, но и по строению и свойствам активного центра. Так в отличие от большинства печеночных аргиназ млекопитающих (83,127,178,227), аргиназы из растений и микроорганизмов (231,254), из печени цыплят (178) и почек крыс (147) содержат существенные для проявления активности эн - группы. Фермент из печени кролика полностью инактивируется в присутствии реагентов, расщепляющих дисульфидные связи (248), в то время, как на аргиназу печени лошади они влияния не оказывают (127). Триптофано-вые остатки аргиназы из стафилококков не связаны с проявлением активности (231), но модификация этих аминокислотных остатков является по мнению авторов (82) причиной инактивации аргиназы печени крыс при взаимодействии с н - бромсукцинимидом. Эти отличия указывают на необходимость изучения особенностей строения и функционирования каждого фермента в отдельности. Аргиназа печени крупного рогатого скота с этой точки зрения относится к наименее изученным ферментам. Показано только, что аргиназа печени быка не чувствительна к сульфгидрильным реагентам /ПЖБ, к- ЗМ/ (178), так как не содержит важных для проявления активности бн- групп.

Проведенные нами исследования позволяют составить представление о роли некоторых аминокислотных остатков в аргиназе печени крупного рогатого скота, о некоторых особенностях строения и функционирования этого фермента.

Исследование влияния ультрафиолетового облучения на растворы аргиназы показало, что процесс инактивации связан с фотохимическим разрушением остатков триптофана с образованием свободных радикалов. Скорость фотолиза этих аминокислотных остатков контролировалась с помощью измерения интенсивности фотохемилюминесценции, воз- . никающей в растворах фермента под действием УФ облучения, а также интенсивности флуоресценции в облученных растворах. Изучение влияния конкурентного ингибитора аргиназы - лизина на процессы инактивации и фотолиза остатков триптофана позволило заключить, что эти аминокислотные остатки, по-видимому, не входят в состав активного центра фермента. Можно было предположить, что активные продукты, образующиеся в растворе при фотолизе триптофанилов, взаимодействуют с аминокислотными остатками, ответственными за проявление активности, что и приводит к инактивации. Однако, как показали наши эксперименты, по изучению сенсибилизированного эозином фотоокисления аргиназы, присутствие активных продуктов фотохимического разрушения остатков триптофана в растворе не отражается на активности фермента. С помощью определения кинетических констант /к2 и К2/ снижения интенсивности ФХЯ при разных временах облучения показано, что существенных изменений конформации под действием УФ света в данных условиях в аргиназе не происходит. На основании полученных результатов можно предположить, что причиной снижения активности является некоторое изменение конформации аргиназы в области активного центра, вызванное фотолизом остатков триптофана. Это изменение конформации не отражается на параметрах ФХЛ и ФЛ, но, очевидно, существенно для проявления активности аргиназы.

Возможное разрушение дисульфидных связей, а также фотолиз БН -групп в аргиназе при УФ облучении, по-видимому, не играют роли в процессах инактивации, так как эти аминокислотные остатки не су

- 123 щественны для проявления активности фермента. Модификация свободных бн - групп с помощью ПЖБ почти не влияет на активность аргиназы. Б присутствии МЭ или ДТТ активность аргиназы не только не снижается, но при высоких концентрациях этих реагентов наблюдается повышение аргиназной активности.

Как известно, остатки тирозина в белках также чувствительны к УФ облучению. Однако, возможный фотолиз этих аминокислотных остатков в аргиназе, по-видимому, не является основной причиной инактивации при УФ облучении. Изучение химической модификации остатков тирозина с помощью ТНМ показало, что эти аминокислотные остатки удалены от активного центра аргиназы. Инактивация при взаимодействии с ТНМ, по всей видимости, происходит вследствие нарушения общей конформации белковой глобулы при модификации остатков тирозина.

Исследование химической модификации аргиназы с помощью БОИ позволило заключить, что снижение активности при взаимодействии с этим реагентом является результатом нескольких типов реакций. БСИ модифицирует чувствительные аминокислотные остатки как в составе активного центра аргиназы, так и участвующие в поддержании натив-ной конформации фермента. С помощью изучения влияния субстрата и ингибиторов на процессы инактивации и модификации остатков триптофана, показано, что эти аминокислотные остатки не входят в состав активного центра аргиназы, но, возможно, участвуют в поддержании конформации. Учитывая полученные нами данные можно предположить, что при взаимодействии аргиназы с БСИ кроме модификации триптофа-новых остатков происходит окисление также и остатков гистидина и тирозина, которые чувствительны к этому реагенту. Возможно, их разрушение вносит вклад в процессы инактивации аргиназы при взаимодействии с БСИ.

Принимая во внимание, что в молекуле аргиназы печени быка содер

- 124 жится около 10 остатков триптофана (133), на основании полученных данных можно заключить, что основная часть этих аминокислотных остатков находится внутри молекулы и недоступна для реагента.

Молекула аргиназы сравнительно устойчива к воздействию денатурирующих реагентов, таких, как ДСН и 8 М мочевина. Наибольшее разворачивание полипептидных цепей этого фермента происходит в кислой среде /рН 2,8-3,6/. В этих условиях становятся доступными для химических модификаторов наибольшее количество эн- групп и остатков триптофана в аргиназе.

Исследование сенсибилизированного метиленовым синим фотоокисления аргиназы, а также химической модификации с помощью диэтилпи-рокарбоната показало, что остатки гистидина играют важную роль в проявлении активности этого фермента. Важная роль этих аминокислотных остатков в проявлении активности обнаружена также у аргиназы печени крыс (82) и дрожжевой аргиназы (67). Изучение зависимости степени инактивации аргиназы при фотоокислении в присутствии метиленового синего от рН среды показало, что инактивация в этих условиях связана с фотоокислением остатков гистидина. Исследование зависимости числа модифицированных остатков гистидина и инактивации аргиназы от концентрации ДПК в присутствии субстрата или ингибиторов позволило установить, что один из остатков гистидина участвует в формировании активного центра фермента. Этот остаток не принимает непосредственного участия в катализе, но, по-видимому, играет важную роль в связывании субстрата. Конкурентный характер взаимодействия ДПК с аргиназой также подтверждает участие остатка гистидина в процессах связывания субстрата.

С помощью ДПК в аргиназе модифицируется ещё около 12 остатков гистидина, которые не связаны с активностью, но находятся в доступных для реагента участках макромолекулы.

При сенсибилизированном фотоокислении аргиназы в присутствии ме

- 125 тиленового синего наблюдается более глубокая инактивация, чем при химической модификации остатков гистидина ДПК. По-видимому, в этих условиях происходит также модификация и других функциональных групп в аргиназе, чувствительных к фотоокислению, среди которых остатки тирозина и триптофана, которые по нашему предположению участвуют в поддержании конформации фермента. Анализ зависимости р!^ от рН показал, что ионизирующиеся в области рН 6 - 11,5 группы аргиназы не участвуют в образовании связи между ферментом и субстратом. При образовании фермент-субстратного комплекса происходит лишь изменение значений рК аминогруппы аргинина и неидентифицированной группы в аргиназе с рК 10,1 , находящейся вблизи от активного центра. Величина к^ аргиназы печени крупного рогатого скота при рН 9,5 по нашим данным равна 2,5шМ . При низких значениях рН величина к^ значительно возрастает. Можно было предположить, что это связано с обратимым изменением конформации аргиназы в этой области рН, которое может влиять на сродство фермента к субстрату. Однако, измерение спектров ФЛ, а также некоторых параметров ФХЛ при УФ облучении в растворах аргиназы с рН 7 и 9,5 не выявило существенных нарушений в структуре аргиназы. У аргиназы печени крыс в данной области рН с помощью метода кругового дихроизма также не обнаружено существенных изменений конформации (143). Возможно, в этих процессах важную роль играет протонирование аминогруппы аргинина /рК 9,0 (42)/. Учитывая полученные данные, можно также предположить, что увеличение сродства фермента к субстрату с ростом значений рН связано с участием в процессах связывания субстрата остатков гистидина аргиназы в непротонированной форме, так как в исследуемой области рН происходит изменение заряда остатков гистидина /рК 68 (29) и доля непротонированной формы их увеличивается.

Методом электрофореза в ПААГ в присутствии ДСН показано, что

- 126 аргиназа печени крупного рогатого скота является димером. В отличие от других печеночных аргиназ млекопитающих этот фермент после обработки ЭДТА и выдерживания в растворе с рН 2,8 в течение суток распадается на идентичные субъединицы с М.м. 71000 д, в связывании которых дисульфидные связи не участвуют.

Взаимодействие аргиназы с фенилметилсульфонилфторидом - реагентом, избирательно модифицирующим остатки серина в ферментах, не отражается на активности фермента. Не оказывает влияния на ферментативную активность также обработка аргиназы янтарным ангидридом. Это позволяет заключить, что остатки лизина, с которыми взаимодействует янтарный ангидрид, и остатки серина в аргиназе не играют роли в проявлении активности и поддержании конформации.

Полученные данные позволяют определить дальнейшие направления в исследовании структуры и свойств активного центра аргиназы.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Геворкян, Маргарита Левоновна, Ереван

1. Агаджанян А.Х. Взаимосвязь аргиназы и ферментов биосинтезапролина у гусениц и куколок фасолевой зерновки Acantho-scelides obtectus Say . Биолог, ж. Армении, 1981, т. 34, № 8, с. 845-850.

2. Агаджанян А.Х., Арутюнян Л.М. Динамика аргиназы и ферментовбиосинтеза пролина различных органов в онтогенезе крыс. Биолог, ж. Армении, 1979, т. 32, № 12, с. II79-II84.

3. Аксенцев С.Л., Нисенбаум Г.Д., Конев C.B. Зависимость длительного послевсечения белков от вторичной структуры их молекул. Биофизика, 1968, т. 13, lb 3, с. 428-432.

4. Алчуджян Н.Х. Исследование изоферментного спектра аргиназыпечени крыс. Биолог, ж. Армении, 1979, т. 32, № 12, с. II85-II88.

5. Алчуджян Н.Х. Очистка и физико-химические свойства изоэнзимоваргиназы печени крыс. Автороферат канд. дисс., Ереван, 1983.

6. Арутюнян Л.М., Агаджанян А.Х. Ингибирование аргиназы различных органов крыс аминокислотами в течение онтогенеза. -Биолог, ж. Армении, 1981, т. 34, № 2, с. 176-182.

7. Асланян Г.А. Свойства изоферментов почечной аргиназы крыс.

8. Автореферат канд. дисс., Ереван, 1979.

9. Асланян Г.А.Давтян М.А. Влияние гидрокортизона на изоферменты аргиназы почек крыс. Биолог, ж Армении, 1976, т.29, № 5, с. 104-105.

10. Барсегян Э.Х., Никогосян Ф.Ц., Давтян М.А. Сравнительная характеристика изоэнзимов аргиназы печени лягушек Rana ridibunda в онтогенезе. Биолог, ж. Армении, 1977, т. 30, № 12, с. 73-76.

11. Бдума P.K., Вина И.А., Жагат P.A. Химическая модификация остатков триптофана L аспарагиназы Е. coli N - бромсук-цинимидом. - Химия природа, соед., 1975, т.4, № 2, с. 228 -231.

12. Блума Р.К., Вина И.А., Кирстукас И.П., Милман И.А., Гейман И.

13. И., Жагат P.A. Химическая модификация L аспарагиназы. I. Нитро- и аминотирозиласпарагиназы E.coli. - Биоорг. химия, 1978, т. 4, $ 9, с. 1264-1272.

14. Бурштейн Э.А. Люминесценция белка. Природа и применение. Вкн.: Молекулярная биология, М. : ВИНИТИ, 1973, т.З, с. 127-215.

15. Варданян Д.А. Аргиназная активность при прорастании гороха.

16. Биолог, ж. Армении, 1980, т. 33, №8, с. 853-856.

17. Веденкина Н.С., Бурштейн Э.А. Триптофановая флуоресценциябелков в растворах. Положение максимума спектроЕ флуоресценции. Молек. биол., 1970, т. 4,№ 5, с. 743-748.

18. Владимиров Ю.А., Рощупкин Д.И., Фесенко Е.Е. О механизме действия ультрафиолетовой радиации на белки. Биофизика, 1970, т. 15, № 2, с. 254-264.

19. Воскресенская Л.Г., Волотовский И.Д. О зависимости фотоинактивации белков от межмолекулярных взаимодействий и температуры. В сб.: Тезисы 1У научн. конф. молодых ученых по соврем, проблемам биологии, Минск, 1970, с. 33-34.

20. Габриелян Г.А., Акопян Б.А., Давтян М.А. Изоэнзимы аргиназыу дрожжей Candida guillermondii ВКМ-У-42. Биолог, ж. Армении, 1977, т. 30, № 8, с. 30-35.

21. Гончар H.A., Мардашев С.Р. Торможение бактериальной гистидиндекарбоксилазы производными гидроксиламина. Биохимия, 1970, т. 35, № 2, с. 224-228.

22. Давтян М.А. О роли орнитиноЕого цикла и его компонентов.

23. Еопр. биохимии мозга, 1968, т. 4, с. 237-266.

24. Давтян М.А., Агаджанян А.Х., Гасспарян Х.Г. Взаимосвязь аргиназы и ферментов биосинтеза пролина кишечника при регенерации дождевого червя 1»итЪг1еив terrestris. Биолог, ж. Армении, 1982, т. 35, №8, с. 631-636.

25. Давтян М.А., Арутюнян Т.Г., Хачатрян М.А. Некоторые физико-химические свойства изоферментов аргиназы мозга, печени и почек в эмбриогенезе кур. В сб.: Вопросы биологии, Ереван, 1981, № 2, с. 75-89.

26. Давтян М.А., Арутюнян Т.Г., Хачатрян М.А., Петросян А.Р. Некоторые кинетические свойства изоферментов аргиназы в онтогенезе тутового шелкопряда. Биолог, ж. Армении, 1981, т. 34, № 9, с. 956-961.

27. Давтян М.А., Асланянц Ж.К., Алчуджян Н.Х., Добрынин Я.В. Торезможение включения Н -тимидина раковыми клетками человека под влиянием аргиназы. Биолог, ж. Армении, 1982, т. 35, № 4, с. 256-259.

28. Давтян М.А., Бунятян Г.Х. Очистка и свойства аргиназы головного мозга крыс. Биохимия, 1970, т. 35, с. 412-417.

29. Давтян М.А., Бунятян Г.Х., Геворкян Д.М., Петросян Л.А. Двемолекулярные формы аргиназы. Вопр. биохимии мозга, 1970, т. 6, с. 15-22.

30. Демидкина Т.В., Бочаров А.Л., Поляновский О.Л., Карпейский М.

31. Я. Модификация функциональных групп аспартат-аминотранс-феразы тетранитрометаном. Молек. биол., 1973, т. 7, № 3, с. 461-471.

32. Денисова Г.Ф. Множественные формы ферментов. Успехи соврем.биологии, 1977, т. 84, с. 22-37.

33. Дертингер Г., Юнг X. Молекулярная радиобиология. М. :Атомиз~дат, 1973, с. 184.- 133

34. Диксон M., Уэбб Э. Ферменты . М.: Мир, 1982.

35. Заробян Т.Н., Агаджанян А.Х., Давтян М.А. Пути катаболизмааргинина у аэробных инфузорий Paramecium multimicronucle-atum . Биолог, ж. Армении, 1976, т. 29, № 10, с. 43-47.

36. Исаченков В.А. Антитела к аргиназе и их влияние на активностьфермента in vitro и in vivo. Труда Всесоюзн. научно-ис-след. инст. физиол. и биохимии с/х животных, Боровск, 1967, т. 4, с 274.

37. Казарян P.P., Давтян М.А. Влияние белкового питания и введение аминокислот на аргиназную активность печени крыс. -Биолог, ж. Армении, 1979, т. 32, №12, с. 1226-1228.

38. Калабухова Т.Н., Кондакова Н.В., Эйцус Л.Х. Анализ причин различной светочувствительности триптофановых остатков в некоторых белках. Молек. биол., 1973, т. 7, № 6,с. 829832.

39. Карпейский М.Я. Активные центры ферментов: стереохимия и динамика. -Молек. биол., 1976, т. 10, №6, с. II97-I2I0.

40. Ковальский В.В., Дубинская Н.И. Субклеточное распределениеаргиназы в печени быка и свиньи. ДАН СССР, 1968, т.182, с.1435-1438.

41. КонеЕ C.B., Волотовский И.Д., Воскресенская Л.Г. К вопросу оконформационной зависимости фоточувствительности некоторых белков к ультрафиолетовому свету. Молек. биол.,1970, т. 4, № 3, с. 395-400.

42. Конев C.B., Воскресенская Л.Г. Волотовский И.Д., Шейко Л.М.

43. Влияние фермент-субстратных взаимодействий на ультрафиолетовую фоточувствительность аргиназы. ДАН БССР, 1971, т. 15, № 12, с. II33-II35.

44. Конев C.B., Мажуль В.М., Черницкий Е.А. О конформационной гетерогенности нативных белков. ДАН БССР, 1968, т. 12,с. II22-II26.

45. Кочетов Г.А., Кобылянская К.Р. Природа и функция аминокислотных остатков транскетолазы, существенных для проявления ее активности. Биохимия, 1970, т. 35, № I, с. 3-II.

46. Кравченко Н.А. Химическое и энзиматическое изучение лизоцима.- Докт. дисс., М., 1976.

47. Левин Ф.Б., Сорокина Л.В., Березов Т.Т. Адсорбционная иммобилизация ферментов на клетках крови. ДАН СССР, 1979, т. 249, с. 235-237.

48. Ленинджер М. Биохимия. М.: Мир, 1974, с. 85.

49. Лысогорская Е.Н., Степанов В.М. Химическая модификация как метод изучения функциональных групп карбоксильных протеиназ.- Химия природных соед., 1980, т. 9, с. 591-607.

50. Мардашев С.Р., Семина Л.А., Гончар Н.А., Митрофанова И.Д.,

51. Александрова С.С. Флуоресцентные свойства гистидиндекарбо-ксилазы Micrococcus Sp.N. Биохимия, 1975, т. 40, № 4, с. 783-792.

52. Наградова Н.К. О стабильности ферлентов в присутствии субстратов. Успехи биол. химии, 1968, т. 9, с. 95-106.

53. Найдан Д., Сапежинский И.И. Фотохемилюминесценция триптофансодержащих пептидов и белков при фотоокислении. 1У. Кинетические закономерности сенсибилизированной эозином фото-хемилюминесценции растворов САЧ. Биофизика, 1977, т.22, № 4, с. 571-575.

54. Нисенбаум Г.Д., Аксенцев С.Л., Конев С.В. Исследование конформационных превращений сывороточного и яичного альбуминов методом фотохемилюминесценции. Биофизика, 1969, т. 14, № 3, с. 402-406.

55. Новые методы анализа аминокислот, пептидов и белков, М.:1. Мир, 1974, с. 418.- 135

56. Окада Ш. Радиационная биохимия клетки. М.:Мир, 1974,с. 53.

57. Петросян Л.А. Внутриклеточная локализация и адаптивные свой*ства аргиназ тканей уреотелических и урикотелических животных. Автореферат канд. дисс., Ереван, 1972.

58. Петросян Л.А., Баблоян Р.С., Давтян М.А. Адаптивные свойстваизоферментов аргиназ печени крыс. Биолог, ж. Армении, 1974, т. 27, с. 86-88.

59. Попова И.А., Северин С.Е., Фотоинактивация (Щ ) и (Иа+к)зависимой АТФ-азы цитоплазматических мембран мышцы сердца крысы. Вопр. мед. химии, 1971, т. 17, № 6, с. 575578.

60. Рощупкин Д.И. Молекулярные механизмы повреждения биомембран,липидов и белков под действием ультрафиолетового излучения. Докт. дисс., М., 1979.

61. Сапежинский И.И. Ооновные параметры фотохемилюминесценциирастворов белков. Химия высоких энергий, 1969, т.З, & 4, с. 325-330.

62. Сапежинский И.И. Исследования радиационных превращений в растворах белков методом хемилюминесценции. В кн.: Молекулярная радиобиология. - М.: Атомиздат, 1972, т. 3, с. 9595-128.

63. Сапежинский И.И., Донцова Е.Г., Силаев Ю.В., Ширяев В.М.

64. Сравнительное исследование радиационного окисления и рен-тгенохемилкминесценции некоторых белков. Биофизика, 1981, т. 26, № 4, с. 581-586.

65. Сапежинский И.И., Силаев Ю.В. Кинетические исследования фотохемилюминесценции растворов сывороточного альбумина. -Биофизика, 1967, т. 12, № I, с. 38-44.

66. Северин Е.С., Курочкин С.Н., Кочетков С.Н. Изучение ферментов и их активных центров методом химической модификации.- 136

67. Успехи биол. химии, 1974, т. 15, с. 65-84.

68. Силакова А.И., Труш Г.П., Явилякова А. Микрометод определенияаммиака в тканевых трихлоруксусных экстрактах. Вопр. мед. химии, 1962, т. 8, № 5, с. 538-546.

69. Степуро И.И., Яковлева Г.М., Гайко Т.П. Изучение роли ароматических аминокислот в активности дрожжевой пируватдекар-боксилазы. Весци АН БССР, сер.биол., 1979, Л 1,с. 75-79.

70. Торчинский Ю.М. Существенные функциональные группы ферментови методы их идентификации. Успехи соврем, биол., 1968, т. 66, с. 13-32.

71. Торчинский Ю.М. Сера в белках. М.: Наука, 1977, с.86.

72. Трапезникова С.С., Навасардянц Д.Г., Давтян М.А. Множественные формы аргиназы печени крыс. Биохимия, 1982, т. 47, № 12, с. 2022-2027.

73. Туманян Л.Р., Чубарян C.B., Торчян P.O., Мовсесян A.C. Значение SH групп и гистидиновых остатков в проявлении активности дрожжевой аргиназы. - Биолог, ж. Армении, 1983, т.36, № 6, с. 485-489.

74. Фёршт Э. Структура и механизм действия ферментов. М. : Мир,1980, с. 165-189.

75. Черницкий Е.А. Люминесценция и структурная лабильность белковв растворе и в клетке. Минск,: Наука и техника, 1972.

76. Чубарян C.B., Туманян Л.Р., Торчян P.O. Некоторые свойствачастично очищенной дрожжевой аргиназы. Биолог, ж. Армении, 1983, т. 36, № 3, с. 233-238.

77. Чуракова Н.И., Кравченко H.A., Серебряков Э.П., Каверзнева Е.

78. Д. О характере продуктов фотоокисления триптофана в лизо-циме в присутствии метиленовой сини. Биохимия, 1976, т. 41, & 5, с. 822-826.

79. Ширяев В.М. Изучение фотохемилшинесценции растворов белков.- 137 - Автореферат канд. дисс., 1972.

80. Abdelal А.Т. Arginine catabolism by microorganisms. Ann.

81. Rev. Microbiol., 1979, v. 33, p. 139-168.

82. Alberty R.A. Some mechanism for the interpretation of the effects of pH and buffer salts on a enzymatic reaction. -J. Am. Chem. Soc., 1954, v. 76, H 9, p. 2494-2498.

83. Aldrich J.E., Cundall R.B. The radiation-induced inactivationof lysozyme. J. Radiat. Biol., 1969, v. 16, N 4, p.343-358.

84. Aoshima H. Inactivation of Streptomyces subtilisin inhibitorby chemical modifications. Biochim. Biophys. Acta, 1976 v. 453, N 1, p. 139-150.

85. Bach S.J., Hawkins R.A., Swaine D. A short method for the purification of arginase from ox liver. Biochem. J.,1963, v. 89, N 2, p. 263-265.

86. Bach S.J., Killip J.D. Purification and crystallisation ofarginase. Biochim. Biophys. Acta, 1958, v. 29, N 2, p. 273-280.

87. Bach S.J., Killip J.D. Studies on the purification and thekinetic properties of arginase from beef sheep and horse liver. Biochim. Biophys. Acta, 1961, v. 47, N 2, p. 336-343.

88. Baranczyk-Kuzma A., Porembska Z., Mochnacka I. Oligomericstructure of A.j arginase from rat liver and A^ from kidney. Difference in charge of subunits. Acta biochim. polon., 1976, v. 23, N 2-3, p. 151-163.

89. Baret R., Girard С., Riou J. Sur certaines propriétés desarginases du tissu hepatopancreatique d'Hélix pomatia lin. et Helix aspersa miïll. Biochimie, 1972, v. 54, N 4, p. 421-430.- 138

90. Bascur L., Cabello J., Veliz M., Gonzalez A. Molecular formsof human-liver arginase. Biochim. Biophys. Acta, 1966, v. 128, N 1, p. 149-154.

91. Bedino St. Allosteric regulation of beef liver arginase activity by L ornithine, - Ital. J. Biochem., 1977, v. 26, N 4, p. 264-276.

92. Bell J.E., Castellino F.J., Trayer I.P., Hill R.L. Modification of bovine oC-lactalbumine with N-bromosuccinimide and 2-hydroxy-5-nitrobenzylbromide. J. Biol. Chem., 1975, v. 250, N 19, p. 7579-7585.

93. Beriiter J., Colombo J-P., Bachmann C. Purification and properties of arginase from human liver and erythrocytes, -Biochem. J., 1978, v. 175, N 2, p. 449-454.

94. Bhagwat A.s., Ramakrishna J., Sane P.V. Specific inhibitionof oxygenase activity of ribulose-1,5-diphosphate carboxylase by hydroxylamine. Biochem. Biophys. Res. Commun. 1978, v. 83, N 3, p. 954-962.

95. Bond J.S. Effect of manganese and amino acids on proteolyticinactivation of beef liver arginase. Biochim. Biophys. Acta, 1973, v. 327, N 1, p» 157-165.

96. Borcic 0., Straus B. Separation of arginase isoenzymes fromhuman tissues by agar gel electrophoresis. Z. Klin. Chem. Klin. Biochem., 1976, v. 14, N 11, p. 533-535.

97. Cabello J., Basilio C., Prajoux V. Kinetic properties of erythrocyte and liver arginase (human). Biochim. Biophys. Acta, 1961, v. 48, N 1, p. 148-152.

98. Carlisky N.J., Sadnik I.L. Properties of amphibian renal arginase. 1. The effect of dialysis and sulfhydryl compaunds. Comp. Biochem. Physiol., 1972, v. B 41, N. 4,p. 785-792.

99. Carulli N., Kaihara S., Wagner H.N. Radioisotopic assay of arginase activity. Anal. Biochem., 1968, v. 24, N 3, p. 515-522.

100. Carvajal N., Martinez J., De Oca P.M., Rodriguez J., Fernandez M. Subunit interaction and immobilised dimers of human liver arginase. Biochim. Biophys. Acta, 1978, v.527, N 1, p. 1-7.

101. Carvajal N., Martinez J., Fernandez M. Immobilised monomersof human liver arginase. Biochim. Biophys, Acta, 1977, v. 481, N 1, p. 177-183.

102. Carvajal N., Venegas A., Oestreicher G., Plaza M. Effect ofmanganese on the quaternary structure of human liver arginase. Biochim. Biophys. Acta, 1971, v. 250, N 2, p. 437442.

103. Charles R., De Graaf A., Lamers W.H., Moorman A.F.M. Immunochemical determination of arginase in adult rat liver. - 140

104. Biochem. Soc. Trans., 1981, v. 9, N 2, p. 279.

105. Chatterjee G.C., Noltman E.A. Dye sensitized photooxidationas a tool for the elucidation of critical amino acid residues in phosphoglucose isomerase. Eur. J. Biochem., 1967, v. 2, N 1, p. 9-18.

106. Chen P.C., Broome J.D. Mouse macrophage arginase (40777).

107. Proc. Soc. Exp. Biol. Med., 1980, v. 163, N 3, p. 354359.

108. Chou P. Y., Fasman G.D. Prediction of protein conformation.- Biochemistry, 1974, v. 13, N 2, p. 222-245.

109. Clarke D.E., Price N.C. The reaction of rabbit muscle creatine kinase with diethyl pyrocarbonate. Biochem. J., 1979, v. 181, N 2, p. 467-475.

110. Clementi A. L'arginasi epatica i suoi rapporti con a genesidell'urea durante l'autolisi del fegato nella serie dei vertebrati. Enzymologia, 1937, v. 4, p. 205.

111. Cvancara V.A. Liver arginase activity in the sockeye salmon

112. Oncorhynchus nerka. Comp. Biochem. Physiol., 1971, v. B 40, N 3, p. 819-822.

113. Dahlig E., Porembska Z. Reactivation of the EDTA-treated arginase from rat and.calf liver. Acta biochim. polon., 1977, v. 24, N 3, p. 187-196.

114. Danson M.J., Y/eitzman P., David J. Functional groups in theactivity and regulation of Escherichia coli citrate synthase. Biochem. J., 1973, v. 135, N 3, p. 513-524.

115. Davis B.J. Disc electrophoresis. II. Method and applicationto human serum proteins. Ann. N-Y. Acad. Sci., 1964, v. 121, p. 404-437.

116. Dixon M. The effect of pH on the affinities of enzymes forsubstrates and inhibitors. Biochem. J., 1953, v. 55,1. N 1, p. 161-170.

117. Dubois E.L., Wiame J-M. Hon specific induction of arginasein Saccharomyces cerevisiae. Biochimie, 1976, v. 58, N 1-2, p. 207-211.

118. Farooqui J.Z., Saxena K.C., Sharma R.N. Purification & properties of guinea pig liver arginase. Indian J. Biochem. Biophys., 1978, v. 15, N 3, P. 200-205.

119. Farooqui J.Z., Sharma R.N., Saxena K.G. Purification andproperties of guinea pig skin arginase. Indian J. Biochem. Biophys., 1980, v. 17, N 2, p. 122-126.

120. Farron F. Arginase isozymes and their detection by catalyticstaining in starch gel. Anal. Biochem., 1973, v. 53, N 1, p. 264-268.

121. Feldhoff R.C., Peters Th. Determination of the number andrelative position of tryptophan residues in various albumins. Biochem. J., 1976, v. 159, N 3, p. 529-533.

122. Feldman F., Butler L.G. Photoinactivation of microsomal glucose-6-phosphatase. Biophys. Biochim. Acta,.1972, v. 268, N 3, p. 690-697.

123. Fujimori H., Ohnishi M., Hiromi K. The effect of chemicalmodification by NBS of saccharifying cC- amilase from Bacillus subtilis on various substrates. J. Biochem.,1974, v. 75, N 4, p. 767-777.

124. Fujimoto M., Kameji T., Kanaya A., Hagihira H. Purificationand properties of rat small intestinal arginase. J. Biochem., 1976, v. 79, N 2, p. 441-449.

125. Garland R.C., Cori C.F., Chang H.W. The effect of p-hydroxymercuribenzoate and congeners on microsomal glucose-6-phosphatase. Mol. Cell.Biochem., 1976, v. 12, N 1, p. 2331.

126. Gasiorowska I., Porembska Z., Jachimowicz J., Mochnacka I.1.oenzymes of arginase in rat tissues. Acta biochim. po-lon., 1970, v. 17, N 1, p. 19-30.

127. Gasiorowska I., Porerabska Z., Mochnacka I. Studies on oxbrain arginase. Acta biochim. polon., 1969, v. 16, N 2, p. 175-184.

128. Geyer J. W., Dabich D. Rapid method for determination of arginase activity in tissue homogenates. Anal. Biochem., 1971, v. 39, N 2, p. 412-417.

129. Glass R.D., Knox W.E. Arginase isozymes of rat tissues. J.

130. Biol. Chem., 1973, v. 248, N 16, p. 5785-5789.

131. Gopalakrishna R., Nagarajan B. Arginase in human saliva.1.dian J. Biochem. Biophys., 1978, v. 15, N 6, p. 488-490.

132. Grazi E. Molecular properties and metabolic control of theureotelic" arginase from chicken liver. Acta Vitaminol. Enzymol., 1973, v. 27, N 1-4, p. 37-50.

133. Grazi E., Magri E. Molecular characteristics of chicken liver arginase. Biochem. J., 1972, v. 126, N 3, p. 667674.

134. Grazi E., Magri E., Sangiorgi G. Stimulation by Cortisol andinsulin of the "ureotelic" arginase activity of chicken liver. Biochem. J., 1972, v. 128, N 4, p. 735-736.

135. Grazi E., Sangiorgi G. Protein synthesis regulation by arginase in chicken liver. Experimentia, 1971, v. 27, N 3, p. 255-256.

136. Greenberg D.M. Arginase. In : The enzymes.- ed. Boyer P.D.,1.rdy H., Myrback K., li.-Y., London : Acad. Press., 1960, v. 4, p. 257-267.

137. Greenberg D.M., Bagot A.E., Roholt O.A. Liver arginase. III.

138. Properties of highly purified arginase. Arch. Biochem.

139. Biophys., 1956, v. 62, N 2, p. 446-453.

140. Greenberg D.M., Mohamed M.S. Liver arginase. II. Kineticproperties. Arch. Biochem., 1945, v. 8, H 1, p. 365-375.

141. Greengard 0., Sahib M.K., Knox W.E. Developmental formationand distribution of arginase in rat tissues. Arch. Biochem. Biophys., 1970, v. 137, N 2, p. 477-482.

142. Grossweiner L.I. Photochemical inactivation of enzymes.

143. Radiat. Res., 1973, v. 55, N 3, p. 593-602.

144. Haider M., Segal H.L. Some characteristics of the alanineaminotransferase and arginase inactivating system of li-sosomes. Arch. Biochem. Biophys., 1972, v. 148, N 1, p. 228-237.

145. Harrel D., Sokolovsky M. Beef liver arginase. Isolation andmolecular properties. Eur. J. Biochem., 1972, v. 25, N 1, p. 102-108.

146. Hartenstein R. Characteristics of arginase from the frechwater crayfish Cambarus bartoni. Comp. Biochem. Physiol., 1971, v. B 40, N 3, P. 781-795,

147. Hellerman L., Perkins M.E. Activation of enzymes. III. Therole of metal ions in the activation of arginase. The hydrolysis of arginine induced by certain metal ions with urease. J. Biol. Chem., 1935, v. 112, N 1, p. 175-194.

148. Herzfeld A., Raper S.M. The heterogeneity of arginases inrat tissues. Biochem. J., 1976, v. 153, N 2,p.469-478.- 144

149. Hirsch-Kolb H., Greenberg D.M. Molecular characteristics ofrat liver arginase. J. Biol. Chem., 1968, v. 243, N 23, p. 6123-6129.

150. Hirsh-Kolb H., Heine J.P., Kolb H.J., Greenberg D.M. Comparative physical-chemical studies of mammalian arginases.-Comp. Biochem. Physiol., 1970, v. 37, N 3, p. 345-359.

151. Hirsh-Kolb H., Kolb H.J., Greenberg D.M. Nuclear magnetic resonance studies of manganese binding of rat liver arginase. J. Biol. Chem., 1971, v. 246, N 2, p. 395-401.

152. Hopkins T.R., Spikes J.D. Conformational changes in ribonuclease during photodynamic inactivation. Radiat. Res., 1972, v. 51, N 2, p. 293-301.

153. Hopkins T.R., Spikes J.D. Conformation measurments on bovinetrypsin and alpha-chymotrypsin during photodynamic inactivation. Radiat. Res., 1973, v. 53, N 2, p. 315-325.

154. Hosoyama Y. The reversible inactivation of rat liver arginase at low pH. Eur. J. Biochem., 1972, v. 27, N 1, p.48-52.

155. Hosoyama Y. Spectral properties of acid denaturation of rat "liver arginase. Afr. Biol. Chm., 1982, v. 46, N 6, p. 1675-1677.

156. Hunter A., Downs С. E. The inhibition of arginase by aminoacids. J. Biol. Chem., 1945, v. 157, N 2, p. 427-446.

157. Irie M. pH profiles of the kinetic parameters of ribonuclease from Aspergillus saitoi. J. Biochem., 1969, v. 65, N 1, p. 133-140.

158. Jori G., Galiazzo G. Proflavine-sensitized selective photooxidation of the tryptophyl residues in papain. Photo-chem. Photobiol., 1971, v. 14, N 5, p. 607-619.- 145

159. Kaysen G. A., Strecker H. J. Purification and properties ofarginase of rat kidney. Biochem. J., 1973, v. 133, N 4, p.779-788.

160. Kearns D.R., Khan A.U. Sensitized photooxygenation reactionsand role of singlet oxygen. Photochem. Photobiol., 1969, v. 10, N 3, p. 193-210.

161. Kepka A.G., Grossweiner L.I. Photodynamic inactivation oflysozyme by eosin. Photochem. Photobiol., 1973, v. 18, N 1, p. 49-61.

162. Kesava R.K.V., Talageri V.R., Bhide S.V. Properties of partially purified arginase from mouse lung tumors. Indian J. Biochem. Biophys., 1978, v. 15, N 1, p. 32-33.

163. Kiefer J., Gocke E., Koester K. Synhesis of inducible enzymes in irradiated yeast cells: inhibition by ionizing radiation. Int. J. Radiat. Biol., 1980, v. 38, N 3, p. 267-275.

164. Konarska L., Tomaszewski L. Studies on L-arginase of thesmall intestine. I. Topographical distribution and some properties of the small intestine L arginase in the rat. Biochem. Med., 1975, v. 14, N 3, p. 250-262.

165. Kossel A., Dakin H.D. Über die arginase. Z. Physiol. Chem.1904, v. 41, p. 321-331.

166. Krebs H.A., Henseleit K. Untersuchen über die harnstof bildung im tierkörper. Z. Physiol. Chem., 1932, v. 210, p. 33-38.

167. Kuchel P.W., Nichol L.W., Jeffrey P.D. Interpretation ofthe kinetic of consecutive enzyme-catalized reaction-J. Biol. Chem., 1975, v. 250, N 20, p. 8222-8227.

168. Lee G.D., Van Etten R.L. Evidence for an essential histidine residue in rabbit liver aryl sulfatase A. Arch. Bio- 146 chem. Biophys., 1975, v. 171, N 2, p. 424-434.

169. Lisowska-Myjak В., Tomaszewski L., Hryckiewicz L. Intestinal arginase in vertebrates and invertebrates. Сотр. Biochem. Physiol., 1978, v. В 61, N 4, p. 545-552.

170. Little C. The histidine residues of phospholipase С from

171. Bacillus cereus. Biochem. J., 1977, v. 167, N 2, p. 399 - 404.

172. Lowry O.H., Rosebrough N.J., Parr A.L., Randell R.J. Protein measurment with the folin phenol reagent. J. Biol. Chem., 1951, v. 193, N 1, p. 265-275.

173. Mac Knight M.L., Spikes J.D. Investigation of the quantumyield of the dye-sensitized photoinactivation of ribonuc-lease. Experimentia, 1970, v. 26, N 3, p. 255-256.

174. Madsen N. P., Hegarty M. P. Inhibition of rat liver homogenate arginase activity in vitro by the hepatotoyic amino acid indospicine. Biochem. Pharmacol., 1970, v. 19, N 7, p. 2391-2393.

175. Mc Dermott J.R. Studies on the catabolism of N methylar1. G *Gginine N ,N dimethylarginine in the rabbit. - Biochem. J., 1976, v. 154, N 1, p. 179-184.

176. Melchior W.B., Fahrney D. Ethoxyformylation of proteins. Reaction of ethoxyformic anhydride with об- chymotrypsin, pepsin and pancreatic ribonuclease at pH 4. Biochemistry, 1970, v.9, N 2, p. 251-257.

177. Menezes L.C., Grouselle M., Fudles J. Structural and enzymicstudies on the process of dye sensitized photoinactivation of yeast hexokinase. Eur. J. Biochem., 1972, v. 30, N 1, p. 81-92.

178. Mezl V.A., Knox W.E. Metabolism of arginine in lactatingrat mammary gland. Biochem. J., 1977, v. 164, N 1, p.105.113.

179. Middelhoven W.J. The ferrous ion as the cofactor of arginasein vivo. I. Properties of yeast arginase metallocomplexes of known composition and of native arginase. Biochim. Biophys. Acta, 1969, v. 191, N 1, p. 110-121.

180. Miller J. H., White P.H., Riwsz P., Kon H. Distribution offree radicals among amino acids from lyophilized ultraviolet-irradiated proteins. Photochem. Photobiol., 1971,v. 14. N 5, P. 577-588.

181. Mohamed M.S., Greenberg D.M. Liver arginase. I. Preparationof extracts of high potency, chemical properties, activation-inhibition and pH-activity. Arch. Biochem., 1945, v. 8, N 1, p. 349-364.

182. Mohanachari V., Neeraja P., Indira K., Swami K.S. Inhibitionof sheep liver arginase by malation. Bull. Environ. Contain. Toxicol., 1980, v. 24, N 6, p. 875-878.

183. Mora J., Martuscelli J., Ortiz-Pineda J., Soberon G. The regulation of urea biosinthesis enzymes in vertebrates. -Biochem. J., 1965, v. 96, N 1, p. 28-35.

184. Mora J., Tarrab R., Bojalil L.P. On the structure and functionof different arginases.- Biochim. Biophys. Acta, 1966, v. 118, N 1, p. 206-209.

185. Mora J., Tarrab R., Martuscelli J., Soberon G. Characteristics of arginases from ureotelic and non-ureotelic animals. Biochem. J., 1965, v. 96, N 3, p. 588-594.

186. Mopukaba U. Hapa ugaky dsaccu. J. Nara Med. Assoc., 1968,v. 19. N 4, p. 558-565.

187. Muszynska G., Ber E. Circular dichroic properties of rat liver arginase. Int. J. Biochem., 1978, v. 9, N 10, p.757-759.

188. Muszynska G., Reifer I. The arginase inhibition from sunflower seeds: purification and inhibitory properties. Acta biochim. polon., 1970, v. 17, N 4, p. 247-252.

189. Muszynska G., Severina L.O., Lobyreva L.W. Characteristicsof arginases from plant, ureotelic and uricotelic organisms. Acta biochim. polon., 1972, v. 19, N 2, p. 109116.

190. Muszynska G., Wojtczak M. Influence of immobilization on conformation of rat liver arginase. Int. J. Biochem., 1979, v. 10, N 8, p. 665-668.

191. Nagami K. The participation of a tryptophan residue in thebinding of ferric iron to pyrocatechase. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1973, v. 51, N 2, p. 364-369.

192. Nagarajan B., Gopalakrishna R. Isolation & characterisationof arginase from rat submaxillary gland. Indian J. Biochem. Biophys., 1980, v. 17, p. 202-206.

193. Nakamura N., Kimura K., Fujita M. Purification and propertiesof L-arginase from Bacillus subtilis. Agr. Biol. Chem., 1973, v. 37, N 1,2,p. 2827-2833.

194. Nelson J.A., Carpenter J. W., Morris H.P. Growth inhibitoryand arginase activities in liver and hepatoma extracts (38923). Proc. Soc. Exp. Biol. Med., 1975, v. 149, N 4, p. 900-902.

195. North J.A., Schwebach G., Mangum I.H. Properties of arginase- 149 from SV 40-induced hamster liver tissues. J. Nat. Cancer. Inst., 1971, v. 46, N 3, p. 615-620.

196. Ohara A., Fujimoto S., Kanazawa H., Nakagawa T. Studies onthe active site of papain. V. Photooxidation of histidine residues. Chem. Pharm. Bull., 1975, v. 23, N 5, p. 967970.

197. Okumura K., Murachi T. Photooxidation of histidine and tryptophan residues of papain in the presens of methylene blue. J. Biochem., 1975, v. 77, N 5, p. 913-918.

198. O'Malley K.L., Terwillinger P.C. Structure and properties ofarginase from the polychaete annelid Pista pacifica Berkeley. Biochem. J., 1974, v. 143, N 3, p. 591-597.

199. Orfanos A. P., Naylor E.W., Guthrie R. Fluorometric micromethod for determination of arginase activity in dried blood spots on filter paper. Clin. Chem., 1980, v. 26, N 8, p. 1198-1200.

200. Ovadi J., Libor S., Elodi P. Spectrophotometric determinationof histidine in proteins with diethylpyrocarbonate. Acta Biochim. Biophys. Acad. Sci. Hung., 1968, v. 2, N 4, p. 455-458.

201. Patnaik S. K., Paulose C.S., Srivastava S.K., Manjula M.,

202. Singh A.K., Kumar D. Comparative studies on arginase of the liver of some vertebrates. Indian J. Exp. Biol., 1976, v. 14, N 1, p. 29-30.

203. Penninckx M., Wiame I-M. Affinity of arginase for ornithinecarbamoyltransferase in Saccharomyces cerevisiae. J. Mol. Biol., 1976, v. 104, N 4, p. 819-831.

204. Porembska Z. Arginasa z tkanek ureotelicznich i uricotelicznych kregowcow. Post. Biochem., 1971, v. 17, N 3, p. 451-459.

205. Porembska Z. Different spiecies of arginase in animal tissues. Enzyme, 1973, v. 15, p. 198-209.

206. Porembska Z., Baranczyk A., Jachimowicz J. Arginase isoenzymes in liver and kidney of some mammals. Acta biochim. polon., 1971, V. 18, N 1, p. 77-85.

207. Porembska Z., Jachimowicz J., Gasiorowska I. Arginase isoenzymes in electrophoresis. Bull. Acad. Polon. Sci. ser. sci. biol., 1971, v. 19, N 1, p. 27-30.

208. Porembska Z. , Kedra M. Arginase isoenzymes in human tissues. Bull. Acad. Polon. Sci. ser. sci. biol., 1971, v. 19, N 10, p. 633-637.

209. Ramaley R.P., Bernlohr R.W. Apparent induction of ornithinetranscarbamylase and arginase by arginine in Bacillus li-cheniformis. J. Mol. Biol.,1965, v. 11, N 4, p.842-844.

210. Rao M.V.R., Mishra O.P., Santhanam K., Vijayaraghavan P.K.- 151

211. Studies on dermal wound healing in experimentally injured rates: role of arginase. Nutr. Repts. Int., 1980, v. 22, N 2, p. 167-172.

212. Rao K.V.K., Reddy R.R., Swami K.S. The inhibition of sheepliver arginase by some L aminoacids. - Int. J. Biochem., 1973, v. 4, N 19, p. 62-70.

213. Ratner S. Enzymatic synthesis of arginine. In : Methods inenzymology., ed. Colowick S.P., Kaplan N.O., N-Y,London : Acad. Press., 1955, v. 2, p. 356-367.

214. Ratner S., Pappas A. Biosynthesis of urea. I. Enzymatic mechanism of arginine synthesis from citrulline. J. Biol. Chem., 1949, v. 179, N 3, p. 1183-1198.

215. Ray W.J. Photochemical oxidation. In : Methods in enzymology, ed. Colowick S.P., Kaplan N.O., N-Y, London : Acad. Press., 1967, v. 11, p. 490-497.

216. Ray W.J., Koshland D.E. A method for characterizing the tjrpeand number of groups involved in enzyme action. J. Biol. Chem., 1961, v. 236, N 7, p. 1973-1979.

217. Reddi. S.R.R., Campbell J. A low molecular weight arginasein the earthworm. Biochim. Biphys. Acta, 1968, v. 159, N 3, p. 557-560.

218. Reddi S.R.R., Campbell J.W. Arginine metabolism in insects:properties of insect fat body arginase. Comp. Biochem. Physiol., 1969, v. 28, N , p. 515-534.

219. Reddi S.R.R., Campbell J.W. Arginine metabolism in insects.

220. Role of arginase in proline formation during silkmoth development. Biochem. J., 1969, v. 115, N 3, p. 495-503.

221. Reddi P.K., Knox W.E., Herzfeld A. Types of arginase in rattissues. Enzyme, 1975, v. 20, p. 305-314.

222. Reyero C. Dorner P. Purification of arginases from human- 152 leukemic lymphocytes and grantxlocytes : study of their physicochemical and kinetic properties. Eur. J. Biochem. 1975, v. 56, N 1, p. 137-147.

223. Riordan J.P., Christen P. Syncatalytic modification of a functional tyrosyl residue in aspartate aminotransferase. -Biochemistry, 1970, v. 9, N 16, p. 3025-3034.

224. Riordan J.P., Sokolowsky M., Yallee B.L. The functional tyrosyl residues of сarboxypeptidase A. Nitration with tet-ranitromethane. Biochemistry, 1967, v. 6, N 11, p. 36093617.

225. Roholt O.A., Greenberg D.M. Liver arginase. IV. The effectof pH on kinetics of manganese-activated enzyme. Arch. Biochem. Biophys., 1956, v. 62, N 2, p. 454-470.

226. Rosenfeld J.L., Dutta S.P., Chheda G.B., Tritsch G.L. Purineand pyrimidine inhibitors of arginase. Biochim. Biophys. Acta, 1975, v. 410, N 1, p. 164-166.

227. Riiegg U.T., Russel A.S. A rapid and sensitive assay of arginase. Anal. Biochem., 1980, v. 102, N 1, p. 206-212.

228. Sanda A., Irie M. Evidence for the presens of a histidineresidue having pK 7 in the active site of a rihonucleaase from a Rhizopus sp. Chem. Pharm. Bull., 1979, v. 27, N 10, p. 2310-2315.

229. Savoca K.V., Abuchowski A., Van Es Т., Davis P.P., Palczuk

230. N.C. Preparation of a nonimmunogenic arginase by the co-valent attachment of polyethylene glycol. Biochim. Biophys. Acta, 1979, v. 578, N 1, p. 47-53.

231. Scallan C., Clynes M., Joyce P. The effects of shark liverarginase on the growth of cells in culture. Biochem. Soc. Trans., 1981, v. 9, N 4, p. 317.

232. Schimke R.T. Adaptive characteristics of urea cycle enzymes- 153 in the rat. J. Biol. Chem., 1962, v.237, N 1, p.459-468.

233. Schimke R.T. Differential effects of fasting and proteinfree diets on levels of urea cycle enzymes in rat liver.-J. Biol. Chem., 1962, v. 237, N 6, p. 1921-1927.

234. Schimke R.T. The importance of both synthesis and degradationin the control of arginase level in rat liver. J. Biol. Chem., 1964, v. 239, N 11, p. 3808-3817.

235. Scoffone E., Jori G., Galazzo G. Selective photooxidation ofamino acids in proteins. Chem. Reactiv. Biol. Role func. groups enzymes, Biochem. Soc. Symp., Oxford, 1970, N 31, p. 163-170.

236. Seligson D., Selison H. A microdiffusion method for the determination of nitrogen liberated as ammonia. J. Lab. Clin. Med., 1951, v. 38, p. 324.

237. Simon I-P., Stalon V. Purification and structure of arginaseof Bacillus licheniformis. Biochimie, 1976, v. 58, M 1112, p. 1419-1421.

238. Soberon G., Ortiz-Pineda J., Tarrab R. Characteristics ofthe ureotelic arginase and its role in the advent of ureo-telism during the metamorphosis in the mexican axolotl. -Wat. Cancer. Inst., 1967, v. 27, p. 283-295.

239. Sokolovsky M., Riordan J.P., Vallee B.L. Tetranitromethane.

240. A reagent for the nitration of tyrosyl residues in protein. Biochemistry, 1966, v. 5, N 11, p. 3582-3589.

241. Soon Ch.Y., Shepherd M.G., Sullivan P.A. Modification of lactate oxidase with diethyl pyrocarbonate.Evidence for an active site histidine residue. Biochem. J., 1977, v. 165, N 2, p. 385-393.

242. Sorof S., Kish V.M. On molecular sites of rat liver arginase. Cancer Res., 1969, v. 29. N 1, p. 261-264.- 154

243. Soru E,,Zah.aria 0. Staphylococcal arginase. Purificationand properties. Rev. roum. biochim,, 1976, v. 13, N 1, p. 49-60.

244. Spande T.F., Witcop B.W. Determination of the tryptophan content of proteins with N-bromosuccinimide. In : Methods in enzymology, ed. Hirs C.H.W., N-Y, London : Acad. Press. 1967, v. 11, p. 498-506.

245. Spisani S., Benassi G., Melandri P., Traniello S. Biochemical characteristics and hormonal stimulation of mice hepatoma arginase. Bull. Molec. Biol. Med., 1980, v. 5, N 1, p. 24-32.

246. Stefanac Z., Morf W.E., Thonet U.,Mostert I., Dorig R.,Jenny

247. H.B., Simon W. Recent development in the field of enzyme membrane electrodes. Progr.Enzyme Ion-selective Electrodes, Berlin, 1981, p. 61-66.

248. Steiner R.G., Edelhoch H, The ultraviolet fluorescence ofproteins. 1. The influence of pH and temperature. Biochim. Biophys. Acta, 1963, v. 66, N 3, p. 341-355.

249. Stewart J.A., Caron H. Arginases of mouse brain and liver.

250. J. Neurochem., 1977, v. 29, N 4, p. 657-663.

251. Storr J.M., Burton A.P. The effects of arginine deficiencyon limphoma cells. Brit.J. Cancer., 1974, v. 30, N 1, p. 50-59.- 155

252. Tarrab R., Rodrigues J., Huitron C., Palacios R., Soberon G.

253. Molecular forms of rat liver arginase. Isolation and characterization. Eur. J. Biochem., 1974, v. 49, N 2, p. 457-468.

254. Terasaki K., Spector E.B., Hendrickson R., Cederbaum S.D.

255. Properties of arginase from liver of Macaca fascicularis: comparison of normals with red blood cell arginase deficient mokeys. Biochem. Genet., 1980, v. 18, N 9-10, p. 829-841.

256. Thome-Beau P., Le-Thi-Lan, Olomucki A., Nguyen van Thoai

257. Essential histidyl residues in arginine oxygenase. Eur. J. Biochem., 1971, v. 19, N 2, p. 270-275.

258. Traniello S., Barsacchi R., Magri E., Grasi E. Molecular characteristics of chicken kidney arginase . Biochem. J., 1975, v. 145, N 2, p. 153-157.

259. Tsukamoto I., Yoshinaga T., Sano S. Evidence for histidineas another functional group of S"-aminolevulinic acid dehydratase from beef liver. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1975, v. 67, N 1, p. 294-300.

260. Van Elsen A.P., Leroy J.G. Arginase isoenzymes in human diploid fibroblasts. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1975, v. 62, H 2, p. 191-198.

261. Velea St. Paramagnetic centres in the irradiated bacterialarginase. In: Abstr. contr. papers. IV Int. Biophys.

262. Congress, Moscow, 1972, v. 1, p. 180-181.60

263. Velea St., Soru E., Nicolau CI. Co gamma radiation damage in extracted and in intracellular bacterial arginase. A free radical and enzymic activity study., Stud. Biophys. 1971, v. 29, p. 82.

264. Vielle-Breitburd P., Orth G. Rabbit liver L arginase. Pu- 156 rification, properties and subunit structure. J. Biol. Chem., 1972, v. 247, N 4, p. 1227-1235.

265. Volkert W.A., Carlstedt R.E., Grossweiner L.I. Plash photolysis studies of ribonuclease A and insulin. Radiat, Res., 1972, v. 51, N 2, p. 46o-46i.

266. Weber K., Osborn M. The reliability of molecular weght determinations by dodecylsulfate polyacrilamide gel electrophoresis. J. Biol. Chem., 1969, v. 244, H 8, p. 44064412.

267. Weil L. On the mechanism of the photooxidation of amino acidssensitized by methylene blue. Arch. Biochem. Biophys., 1965, v. 110, N 1, p. 57-68.

268. Weiss R.L., Davis R.H. Control of arginine utilization in

269. Neurospora. J. Bacterid., 1977, v. 129, N 2, p. 866873.

270. Wright L.C., Brady C.J., Hide R.W. Purification and properties of the arginase from Jerusalem artichoke tubers. -Phytochemistry, 1981, v. 20, p. 2641-2645.

271. Yanogibashi N., Arakawa M., Eodo T. Effect of water-solublepolymers on enzyme activity of microencapsulated arginase. In: Microencaps. new techn. appl. proc.,3rd. Int. Symp. Microencaps., Tokyo, 1979, p. 325-337.

272. Yip M.C.M., Knox W.E. Function of arginase in lactating mammary gland. Biochem. J., 1972, v. 127, N 5, p. 893-899.