Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Нервная и субстратная регуляция мембранного пищеварения у здоровых и больных паразитарным гастроэнтеритом овец

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Нервная и субстратная регуляция мембранного пищеварения у здоровых и больных паразитарным гастроэнтеритом овец"

министагтгш СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ САЬ^'-ГГлТЕРБУРГаМ ВЕГЕРЙНАРЖй ИНСТИТУТ

Р Г Б ОД правах рукописи

: 3 С:. ■ • ■"' '

ЗИНАЛИЕВА МУВИНА ЗУЛЬШРОВНА

. УДК: 612.338:616.3:616.993:636.3

НЕРВНАЯ И СУБСТРАТНАЯ РЕГУЛЯЦИЯ МЕЖРАЖОГО ПИЩЕВАРЕНИЯ У ЗДОРОВЫХ И БОЛЬНЫХ ПАРАЗИТАРНЫМ ГЛСТГОЭНГЕШШ ОВЕЦ.

^3.00.13 - физиология человека и животных

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание учёной степени кандидата биологических наук

Санкт-Петербург 1994

Работа выполнена ка кафедре физиологи*: сельскохозяйственных животных Санкт-Петербургского ветеринарного института.

Научный руководитель - Заслуженный деятель туки РСфСР,

доктор ветеринарных наук, %/Офзссо] КУЗНЕЦОВ А.К.

Официальные оппоненты: старший научный сотрудник, доктор

биологических наук ИЕЗУИГОВА H.H.

докто! ветеринарных наук, профессор: ДЕРЕДАГТ)8 Г.Г. '

Ведущая организация - Екатеринбургский сельскохозяйственный И1 'чтут.

/з

Защита диссертации состоится " в 13 часов на заседании Специализированного совета К 120.20Л'] в Санкт-Петербургском ветеринарном институте (194084, С.Петербург, ул, Черниговская, 5). ' .

С диссертацией можно ознакомиться а библиотеке Санкт-Петер бургекого ветеринарного института.

Автореферат разослан " L t ' Х994 ro<aa

Учёный секретарь Специализированного совета доцент

ЗЯСЫДОНГ Т.А.

- з -

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Физиология пищеварения является важнейшим разделом биологической науки,неразрывно связанным с решением вопросов повышения продуктивности сельскохозяйственных животных,профилактики и лечения их заболеваний.

Классические исследования И.П.Павлова и его учеников явились основой для изучения физиологии пищеварения. Большой вклад в развитие этой проблемы внесли Н.Ф.Попоа,Д.Я.Криницин, А.Д.Синещёков,П.П.Деребцов,Н.В.Курилов,Д,иСодцатенковД.А,Али-ев,В.И.Георгиевский,В.5.Лысое,К.П.Михальцоз.Ц.Ж.Батоев,Г.И.Горшков, A.M.Емельянов и многие другие исследователи.

После открытия в IS58 году А.М.Уголевым мембранного пищеварения были развёрнуты исследования закономерностей его проявления у сельскохозяйственных животных как в норме (А.Р.Щусов,К. Рахимов.,З.Н.Якуш, 1957; А.К.Кузнецов,Г.Г.Щербаков,1971; Т.У.Измайлов ,1972,1977; В.Г.Стояновский,1975; В.В.Дегтярёв,1981; А.Я. Озолс,1984; В.В.Котомцев,1992 и др.),так и при патологии (Г.Г. Щербаков,1984; С.А.Ширяев,1985; Г.Г.Ложкина,1989; Авас Ахмад, 1990; В.А.Панкин,1993 и др.). В результате исследований было установлено, что мембранное пищеварение является универсальным механизмом, присущим разным видам сельскохозяйственных животных, изучено влияние на мембранный гидролиз кормовых факторов,гормо-. нальных препаратов и ряд других вопросов. '

Вместе с тем многие вопросы мембранного пищеварения у сельскохозяйственных животных изучены недостаточно. В частности, слабо исследованы механизмы нервной регуляции,базирующиеся до сих пор,в основном, на общей концепции нервно-гуморальной регуляции полостного пищеварения. Особенно слабо изучены полисубстратные взаимодействия лицевых субстратов на стадии мембранного гидролиза,имеющие по данным А.М.Уголева.Н.Н.ИезуитовоЙ,Н.М.Тимофеевой и др.(1967),А.М.Уголева,В.В.Егоровой и др.(1974) исключительное значение при переваривании многокомланеитной пищевой массы на поверхности тонкой кишки млекопитающих (на примере лабораторных животных). У сельскохозяйственных животных полисубстратные процессы изучались у здоровых и больных диспепсией телят (Г.Г.Щербаков,I9S4),у кур (Г.Г.Щербаков,1969),А.Я.Озолс (1984) и Р.И.Кушак (1980). Полисубстратные процессы в тонкой киике у здоровых и больных овец не исследовались.

В связи с вышеизложенным основной целью диссертационной работы являлось изучение нервной и субстратной регуляции мембранного пищеварения в тонкой кишке овец. Основными задачами исследования при этом были:

I.Исследование влияния функционального состояния симпатического и парасимпатического отделов вегетативной нервной систте-ш и ретикулярной формации мозга на гидролиз бета-глицерофосфата натрия щелочной фосфатазой в тонкой кишке здоровых овец;

. 2,Изучение полисубстратных взаимодействий при мембранном гидролизе белков (ггрилептида диглицилглицина),углеводов (мальтозы) и эфиров фосфорной кислоты (бега-глицерофосфата натрия) I тонкой кипке здоровых и больных паразитарным гастроэнтеритом овец и ягнят;

3.Выяснить влияние дегельминтизации больных паразитарным гастроэнтеритом овец и ягнят на полисубстратные взаимодействия при мембранном гидролизе;

4.Сопоставить особенности полисубстратных процессов в тонкой кишке у взрослых овец и ягнят.

Научная новизна. В модельных опытах изучено влияние функционального состоянии адрен- и холинергических структур вегетатив ной нервной системы на ферментативные процессы (на примере щелочной фосфатазы) в тонкой кишке взрослых овец. 'Установлено,что для динамики влияния адрен- и холинергических препаратов характерно максимальное изменение активности фермента в первые 30-60 минут и продолжительность действия в течение б часов,а также бо лее раннее,в пределах одного часа,изменение активности первоначально в слизистой кишки,а затем в её полости. Показано,что кем бранный гидролиз превышает полостной. Торможение ретикулярной формации аминазином ингибирует щелочно-фосфатазную активность.

Впервые исследованы моно.би- и лолисубстратные взаимодействия пищевых веществ в тонкой кишке у здоровых и больных паразитарный гастроэнтеритом овец и ягнят. Показано,что трипептидаза, мальтаза и щелочная йосфатаза изменяют свою активность в присут ствии субстратов-модификаторов,не являющихся субстратами данных ферментов. Установлено,что у больных животных существуют сложные взаимодействия компонентов пищи.направленность которых (сти цуляция,торможение) и активность ферментов зависят от природы субстрата,его комбинации с модификатором,возрастом овец и их фи зиологическим состоянием. Выявлено положительное влияние дегель1

минтизации больных овец и ягнят на восстановление у них нарушений мембранного гидролиза.

Практическая ценность. Экспериментальные данные об участии адрен- и холинергических препаратов в регуляции мембранного пищеварения могут,5ь:ть использованы при профилактике и лечении функциональных нарушений кишечника. Материалы исследований моно, би- и полисубстратных взаимодействий пищевых субстратов следует учитывать при организации сбалансированного кормления овец. Теоретические положения работы используются в учебном процессе С. Петербургского ветеринарного института.

Апробация работы. Основные результаты диссертационной работы доложены на 5-й межгосударственной мёжвузоьокой научно-практической конференции (С.Петербург,1993); на 47-й научной конференции йолодых учёных и аспирантов С.Петербургского ветеринарного института (1993); на научных конференциях профессорско-преподавательского состава,научных сотрудников и аспирантов института (1993-1994).

. Публикация. По теме диссертации опубликовано 4 работы в тематических сборниках института и в материалах конференций.

Структура и объём работы. Диссертация содержит 162 страницы машинописного текста и состоит из введения,обзора литературы,методов исследования,4 глав результатов экспериментальных исследований,выводов и указателя литературы,включающего 251 источник, из них 57 иностранных авторов. Работа иллюстрирована 19 рисунками и 12 таблицами.

Вопросы,выносимые на защиту.

1.Влияние функционального состояния адрен- и холинергических систем и ретикулярной формации мозга на мембранный и полостной гидролиз пищевых компонентов и активность ферментов (на примере щелочной фосфатазы) в тонкой кишке у овец.

2.Характеристика моно.би- и полисубстратных взаимодействий пищевых компонентов на стадии мембранного гидролиза в тонкой кишке у здоровых и больных паразитарным гастроэнтеритом овец и ягнят.

3.Влияние дегельминтизации больных овец и ягнят на восстановление ферментативной активности и нормализацию полисубстраткых взаимодействий.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Опыты выполнены в 1992-1994гг на 15 взрослых овцах в возрасте

2-4 лет и 13 ягнятах 3-4 месячного возраста,содержащихся в клинике института. Кормление овец и ягнят проводили по рационам, включающим злаково-разнотравное сено,комбикорм и минеральную подкормку в соответствии с "Нормами и рационами сельскохозяйственных животных" (ВАСХНИЛ,1985). Доступ животных к сену и воде был свободным.

В соответствий с задачами исследований проведено 4 серии опытов. 8 первой серии.,в условиях хроьлческих опытов на 6 взрос лых оацах,исследовалась-активность щелочной фосфатазы при возбуждении альфа- и 'бета-адренорэцепторог внутримышечным введение адреналина гад;'"»хлорида в дозе 0,55-0,{Ю мг/кг и их торможении обзидаисм в доз.' 0,14-0,20 мг/кг. Возбуждение М и Н-холинореак-тивных структур вызывалй""ацетилхолин-хлорид^ в дозе 0,5 мг/кг, ¡IX торыокенио - етропина суйьфатом в дозе 0,45-0,50 мг/кг. Торможение ретикуяяркой.формации мозга осуществлялось внутримихеч-нш введением аминазина в дозе 5,0 кг/кг.

Овцам предварительно оперативным пу:ём .накладывали фистулу не тонкий отдел кишечника в месте перехода двенадцатиперстной в тощую. Исследования проводились на животных после 12-14 часовой голодной диеты. Биопсию слизистой кишки проводили с помощью зон да с асплрационной капсулой,а химус получали шприцем Канэ. .Взятие проб для исследований проводили перед введением адрен- и хо линвргических препаратов (контроль),а затем через 0,5, 1,2,3 и I часов после их применения. Повторные опыты с применением других адрен-и холинергических препаратов проводились через неделю.

Вс второй серии опытов на 3 овцах и 4 ягнятах изучались мо-нс,би-и полисубстратные взаимодействия пшцевых веществ при мембранном гидролизе у здоровых животных. В основу метода исследования положена экспериментальная модель гидролиза пептидов,углеводов и эфиров фосфорной кислоть как таковых (моно~убстратный гидролиз ),а такяе в присутствии других субстратов-модификаторов, разработанная А.М.Уголевш (1966), Исследования проводились в условиях острых опытов. Животных после 12-14 часового голодания убквали и сразу же брали отрезки слизистой тонкой кишки длиною • 10 см при переходе двенадцатиперстной в тощую. Слизистую кишки гомогенизировали и исследовали активность ферментов.

Исследования гомогенатов слизистой позволяло судить об общем запасе ферментов в слизистой и уровне их синтеза в энтероци-тах. Энзимная активность химуса отражает усовень поступления

ообетвенно-кшечных ферментов со слизистой в полость в результате I..; десорбции и дескЕамации эктероцитов.а такие ферментов,поступающих в составе поджелудочного сока.

В третьей серии опытов изучались моно.би- и полисубстратные взаимодействия различных пищевых компонентов у овец и ягнлт, больных паразитарным гастроэнтеритом. Заражение животных проводили ассоциацией трёх родов юпечных нематод: Зсиюз¿огтш-т-1ъсдоп*>се/иьаАсгк.,у/цпа^о^'Ш! Тъсс&м^/г^у&б. Животных

заражали орально смесыо личинок 3 стадии развития из расчёта 18 тысяч ягнятам и 30 - взрослым овцам. Диагноз гастроэнтерита подтверждался результатами клинических,гематологических и гистологических исследований.Х/

В четвёртой серии опытов изучалось влияние дегельминтизации на моно- и полисубстратные процессы при мембранном пищеварении в тонкой кишке. Опыты выполнены на .3 овцах и 5 ягнятах,больных паразитарным гастроэнтеритом, которым на 30-45 дни после заражения гельминтами вводили орально фонкур в дозе 16 мг/иг в форме оуспензии однократно в течение двух дней. Через 10 дней после введения антигельминтика при отрицательных резульатах копрологи-ческих исследований, животных убивали и проводили исследования активности ферментов в гомогенатах слизистой тонкой крглки.

В качестве критерия исследования было взято исследование активности ферментов по приросту образовавшихся „продуктов гидролиза субстратов: трипептидазы - по приросту глицина,мальтазы - по приросту глюкозы и щелочной фосфэтаэы - по приросту неорганического фосфора.освобождённого при гидролизе бета-глицерофосфата натрия. Активность трипептидазы определялась колориметрическим глициновым методом А.М.Уголева и Н.М.Тимофеевой (1969), мальтазы - глюкозооксидазным методом В.К.Городецкого (1964) в модификации А.М.Уголева и Н.Н.Иезуитовой (1969), щелочной фосфатазы - по методу Фиске и Суббароу (1925). Активность трипептидазы и мальтазы выражалась в ыиллимолях (мМ),а щелочной фосфатазы - в микромолях (мкМ) гидролизованного субстрата,за X минуту инкубации на 1г влажного веса слизистой тонкой колики или в процентах к контролю, принятому за 100.

х) Заражение животных гельмлнтамд.копрологические и гематологические исследования проводились аспирантом кафедры внутренних незаразных болезней института Аль Слиман Хосином.

- о -

Всего в опытах исследовано 426 проб гомогената и содержимого полости ккпки и проведено сеют 4200 анализов.

Полученные данные статистически обработаны методом Стыоден-та и Фясгера,вычислялись: средняя арифметическая (М),её среднее квадратичное отклонение (М-) и показатель достоверности (Р).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Влияние функционального состояния адрек- и холинерги-ческях структур вегетативной нервной системы и ретикулярной формации мозга на мембранное и полостное пищеварение в тонкой к;;пке овец.

Результаты исследований,представленные в табл.1 и 2,показывают, что возбуждение адренорсактивных структур адреналина гидро хлоридом снижает активность «елочной фосфатазы,а их торькккеиие обэиданом - повышает. Возбуждение хожшореактквних структур аце тилхолин-хлоридом сопровождалось говдаекиеи активности фермента как б гоыогенате,так и в содержимом полости,а при торможении ат ролина сульфатом - снижением. Следовательно общепринятое представление о стимулирующем влиянии парасимпатической нервной сис теш и тормозящем симпатической на гидролитические процессы ке-лудочко-кклечного тракта в общем плане применимо и для регуляци мембранного пищеварения в тонкой кизке спец.

Шесте с тем наш выявлен ряд особенностей слияния а,арен- и хслинергических препаратов на меибраняый 'гидролиз пищевых вещее В частности, активность щелочной фосфатазы первоначально нзменп ется в структурах слизистой килки,а через 0,5-1 vac - •ъ содержи мем полости. Указанная особенность несомненно связана с переходом ферментов со слизистой в полость кишкн путём десорбции и до скваыации энтероцитов,требующим некоторого времени. Далее выяснилось, что на долю мембранного пищеварения у инт ктных овец приходится 92,6-53,3 %,а гюисстного - 6,7-7,4 % гидролиза -чще-вых веществ. Это соотношение, в основном, сохраняется л при изменении функционального состояния адрен- и холинергических стру ктур. Динамика активности щелочной фосфагазн под влиянием иссле дованных препаратов изменяется одинаково как при мембранном,так и при полостном пищеварении. Причина указанного явления, по нашему мнению,заключается в том, что щелочная фосфатаза еннтезиру ется одним источником - структурами слизистой j пки.

Нами установлено также, что аминазин в дозе 5 мг/кг тормоои

¿аи;шца ¿.

Динамика щелочно-фосфатазной активности в тонкой кишке у овец при возбуждении адреналина гидрохлоридом и торможении обзиданом адренергкческих структур, (л-= 6)

Ферментативная активность (ьшМ/мин/г)

Время ' Гомогенат слизистой (Г) Содержимое полости (СП) Общая активность (ОЛ) исследований - Шт. % к Ц+т. % к Ч±т, % Г от ОЛ

контролю ■ контролю

Адреналина гкдоохлоонд

Контроль ' 79,54+2,19 100,0 6,32+0,29 100,0 85,86+2. ,04 92,6+2,6

через 30 минут 37,87+1,42х 47,6+1,7 4,69+0,20х 74,2+3,2 42,56+1, |28 68,9+3, .3

через I час 43,51+0,84х 61,0+1,0 4,04+0,19х £3,9+3,0 52,55+0, ,79 92,3+1, ,6

через 2 часа 53,61+2,09х 67,4+2,6 4,91+0,24х 77,7+3,8 58,52+1,90 91,6+3,

через 3 часа 57,58+0,79х 72,5+1,0 5,08+0,37х 80,4+5,8 62,76+0, ,75 91,9+1,

через 6 часов 74,28+2,09 93,4+2,6 6,20+0,29 93,1+4,6 80,48+1. 92,3+2,

Об; ;и.пан

Контроль 82,46+2,31 100,0 6,15+0,23 100,0 83,61+2. Д6 93,0+2. ►б

через 30 мину? 96,21+2,74х •116,7+3,3 6,87+0,23 III,7+3,6 103,08+2, ,57 93,3+2,

через 1 час 122,61+4,62х 148,7+5,6 7,77+0,28х 126,3+4,6 .130,33^4, ,35 94,0+3; ,5

через 2 часа III,21+3,45х 134, 8,86+0,27х 144,4+4,4 120,09+3,21 92,6+2. >

через 3 часа ИЗ, 51+3,35х 136,2+4,1 7,88+0,29х 128,1+4,7 113,39+3, ,14 93,0+2, .9 Т

через б часов 88,77+2,25 107,6+2,8 6,65+0,20 ' 108,3+3,2 95,43+2, до 93,0+2, ,4

Примечание: знак х свидетельствует о там, что разница по отношении к контролю достоверна.

Таблица 2.

Динамика щелочно-фосфатазной активности в тонкой кишке у овац при возбуждении ацетил-холин-хлоридом и торможении, атропина сульфатом холинергических структур. (л-= 6)

Ферментативная активность (мкМ/мин/г)

Время Гомогенат слизистой (Г) Содержимое полости (СП) Общая активность (ОА)

исследования \л+т % К М+ га- % к М+ /71 % Г от ОА

контролю контролю

Аиетилхолин - хлорид

Контроль 83,63+3,49 100,0 ' 6,51+0,23 100,0 90,14+3,26 92,8+3,8

через 30 минут 100,89+2,14х 120,6+2,6 7,37+0,15х 113,2+2,3 108,26+2,00 93,2+1,9

через I час 127,74+1,01х 152,7+1,2 8,63+0,33х 132,6+5,0 135,37+0,97 93,7+0,7

через 2 часа ПО,56+3,84х . 132,2+4,6 9,45+0,22х 145,2+3,3 120,01+3,55 92,1+3,2

через 3 часа 108,80+3,10х 130,1+3,7 8,51+0,25х 130,7+3,9 117,31+2,89 92,7+2,7

через 6 часов 87,19+3,23 104,2+3,9 7,37+0,24 113,2+3,7 94,56+2,99 92,2+3,4

Атропина- сульйят

Контроль 81,94+2,22 100,0 5,94+0,13 100,0 87,88+2,08 93,3^2,5

через 30 минут 72,58+1,02х 88,6+1,2 .5,18+0,24х 87,2+4,0 77,76+1,02 94,1+0,5

через I час 43,58+1,38х 53,2+1,7 4,27+0,19х 71,9+3,2 ' 47,85+1,27 91,1+2,8

через 2 часа 55,77+1,38х 68,1+1,6 3,54+0,20х 59,6+3,4 59,31+1,31 §4,0+2,3

через 3 часа '55,14+1,54х 67,3+1,9 4,68+0,16х 78,8+2,7 59,82+1,43 92,2+2,5

через 6 часов 77,05+2,29 94,0+2,8 5,54+0,23 93,3+3,8 82,59+2,15 93,3+2,7

Примечание: знак х свидетельствует о том, что разница по отношению к контролю достоверна.

активность щелочной фосфатагы в гомогеиатэ слизистой на 42,8 %, а в содержимом полости - на 32,4 % от исходного уровня и контроле ,принятому за 100. Следует отметить, что максимальное снижение активности щелочной фосфатазы при торможении ретикулярной формации мозга отмечалось на 2 часу исследований одновременно при мембранном и полостном гидролизе.

Взаимодействие пищевых субстратов при мембранном гидролизе з тонкой киике здоровых овец.

В опытах кг 3-х взрослых овцах и 4-х ягнятах определена активность ферментов, участвующих в мембранном гидролизе пищевых •субстратов. Активность трипептидазы у овец равнялась 7,06+0,68 мМ/мин/г,у ягнят - 4,£8+0,56уД/мин/г; активность мальтазы соответственно 1,48+0,08 и 2,02+0,12м!;1./мин/г; - щелочной фосфатазы - 96,33+2,55 и 98,36+2,16 мкМ/мин/г. Установлено, что в условиях би- и полксубстратных взаимодействий пищевых веществ,по сравнению с их моносубстратнш пищеварением,гидролиз трипептида ди-глицилглицина трипептидазой стимулировался у овец в присутствии мальтозы (на 97,2 $5),бета-глицерофосфата натрия (на 40,6 %) и их смеси (на 140,1 %),'л у ягнят соответственно на 161,2, 30,6 и 56,3 %. Гидролиз мальтозы ингибировался' в присутствии трипептида у ягнят (на 45,1 бета-глицерофосфата натрия у овец (на 42,6 %) и у ягнят (на 57,4 смеси указанных модификаторов как у овец (на 41,9 %), так и, у ягнят (на 16,2 %). Гидролиз бета-глицерофосфата натрия щелочной фосфатазой ингибировался в присутствии трипептида у овец (на 32,7 %) и у ягнят (на 33,5 %) и 'смеси модификаторов-у овец (на 37,8 %) и у ягнят (на 34,2 %).

Следовательно, при мембранном гидролизе .пищевых веществ в тонкой кишка у здоровых овец и ягнят наблюдаются сложные взаимодействия пищевых субстратов! Направленность и уровень гидролитических эффектов находятся в зависимости от природы исследуемых субстратов и возраста ответных.В большинстве случаев наблюдается стимуляций гидролиза пищевых субстратов в присутстпиия модификаторов.Достоверное торможение энзимных'процессов имело место только при гидролизе мальтозы в присутствии бета-глицерофосфата натрия и смеси модификаторов.

Взаимодействие пищевых субстратов при мембранном гидролизе з тонкой кияке больных овец.

В данной серил опытов первоначально были выявлены различия

показателей активности ферментов при мокосубстратном гидролизе пищевых веществ. У больных-овец,го сравнении со здоровыми,снижалось активность трипеитидазы (на 38,8 $),мальтазы (на 33,8 %) и незначительно щелочной фосфатазы. У больных ягнят, по сравнению со здоровьем,повышалась активность трипоптидазы (на 29,4$), мальтази (па 37,6 %),но снижалась щелочно-фосфатазная активность.

В условиях полисубстратного пищеварения,по сравнению с моно-субстратным.у больных овец и ягнят гидролиз трипептида достоверно сткцулировался мальтозой (соответственно на 80,5 и 25,8 %), бета-глицерофосфатом натрия (на 9,5 и 18,9 %)и их смесью (на 220,1 и 178,1 %). Гидролиз мальтозы у больных овец к ягнят ингибировался бета-глицерофосфатон натрия (на 19,4 и 0,7 %),у овец -трипептидом (на 52,1 %)и смесью модификаторов (на 2,1 %), но стимулировался у ягнят в присутствии трипептида (на 10,8 %)и смеси модификаторов (на 22,3%). Гидролиз бета-глицерофосфата-натрия ингибировался у овец и ягнят в присутствии трипептида (на 48,9и 19,6 %) и смеси.модификаторов.

Гидролиз пищевых веществ при мембранном пищеварении у больных овец,по сравнению со здоровыми,ингибироЕалея,а у ягнят при одних сочетаниях пищевой смеси ингибировался,а при других - стимулировался. Так;гидролиз трипептида у овец и ягнят ингибировался в присутствии мальтозы (на 44,0 и 37,7 %), у" овец в присутствии бета-глицерофосфата натрия-(на '52,4 %) и смеси модификаторов (на 18,2 %). Гидролиз мальтозы у овец ингибировался трипептидом . (на 72,7 %), и незначительно бета-глицерофосфатом натрия.-Гидролиз бета-глицеоофосфата натрия у овец ингибировался трипептидом, у овец и ягнят -.мальтозой и смесью модификаторов. У больных ягнят, по сравнению со здоровыми, стимулировался гидролиз трипептида смесью модификаторов (на 130,3 %), гидролиз мальтозы трипептидом (на 177,5 %),бета-глицерофосфатом натрия (на 220,9 $) и смесью модификаторов (на 203,6 %).

Таким образом, результаты исследований 2-й и 3-й серий опытов свидетельствуют о весьма сложных взаимодействиях пищевых субстратов при мембранном гидролиге в тонкой кишке здоровых и больных овец.Уетановлено*что ферменты меняют свою активность в присутствии различных субстратов-модификаторов,не являющихся субстратами дшшого фермента.Выяснилось, что направленность (стимуля-ниа.мнгисирование) и уровни активности ферментов зависят от припиши гидролнзуеного субстрата,его комбинации с модификаторам.!,

- 13 -

возраста овец и их физиологического состояния.

Влияние дегельминтизации овец на процессы взаимодействия лицевых субстратов в тонкой ккшке. Е результате исследований 4-й серии опытов установлено,что при моносубстратном гидролизе у дегелыляитизированиых овец и яг-1'ят активности трипептидазы,у ягнят - мальтзлн сто оставались на более тпкев уровне по сравнению с больными,но бпяи более гчеокнмл активности мальтазы у овец (па 22.4 %) и щелочной фос-сТатазн у овец (на 19,3 %) и ягнят (па Х0,2 %).

СЧсанне взаимодействия лицевых веществ наблюдались при их .полисубстратном мембранном гидролизе в тонкой кшке у дегелъмн.ч-•гкзирозанных овец и ягнят. У взоослых дегвлышггизироваапшх «гец.по сравнению с больны?,«и.активность гальтазы была ьыпе d псчсутствии трипептида (ira 153,2 %) , бето-длнпррсфосф.тга натрил (па с9,2 $) и смеси модификаторов (на со.2 %) ,а такме,по ерзв-1штото со здоровыми,в присутствии бета-глицерофосфата иатрпя <иа £9,4$) и смеси модификаторов (на' 74,4 %). Активность трч-пзптндази у дегедьмпнтизироЕакнщ: ягнят в присутствия мальтоом была гото на '¿"7,7 у бояыпас. Активность щелочном фосфато-

вы Сила выше у дегелывштнзнровамтгх с::оц п ягнят,по сровнен:::: о больными,в присутствии всех модификаторов. Одиатю „постоверп"! изменения наблюдались только при гидролизе бета-гдицерофоейзта натрия а. присутствии трипептида и мальтозы у овец п смеси недм-íiJitaTopoB у овец п ягнят.

!.олее низкие показатели активности ферментов'у дегсльпннти-оированных овец при полисубстратных.Езаимодействшгх п::тпевых г:~ ьоств наблюдались при гидролизе трипептида в присутствии мальтозы а сравнении с больными (на 17,1 %) и здоровыми í:;a 53,5 '/,}, и тайме - смеси модификаторов "яак по сравнении с больными (на £9,0 $),так и здоровыми (на 50,1.$). I- дегельминтизировашгых ягнят активность трипептида была иняе по сравнении со здоровыми о присутствии мальтозы (на 20,4 %) и по сравнению с бальными в присутствии смеси модификаторов (на 41,2 %). Лктпсность ггальта-:?ы у дегсльмпнтизировапных овец в присутствии трипептида била meso по сравнению со здоровыми (на 20.8 %),а у ягия? з присуг-стппп сизси модификаторов по сравнению с большим (па 25,2 ':,),

••■чалнз гьглеприведеннмх данных свидетельствует о теп,что дегельминтизация овец и ягнят, больных параэятапш«! гостроэнтсрл-

том,оказывает стимулирующее влияние на активность большинства ферментов,участвующих при мембранном пищеварении. Повышение активности ферментов наблюдается не только по сравнению с больными, но в ряде случаев и по сравнению со здоровыми животными.Вместе с тем актицность трилепгидазк при ыоносубстратном гидролизе у больных овец и ягнят были вше, чем у дегельминтизированных. Наличие более низких показателей активности ферментов у дегельминтизированных животных,по сравнению с больными,видимо,обусловлено тем, что восстановление секреторной функции энтероцитов после дегельминтизации для некоторых ферментов продолжается более продолжительное время,чем в исследованный нами 10-ти дневный период.

ВЫВОДЫ

1.В нервной регуляции мембранного пищеварения важная роль принадлежит вегетативной нервной системе и ретикулярной формации мозга,оказывающих стимулирующее или тормозящее влияние на гидролитические и ферментативные процессы в тонкой кишке у овец.

2.В хронических опытах на изолированных от организма препаратах тонкой кивки здоровых овец (биопсийной слизистой,содержимом полости) установлено снижение активности щелочной фосфатазы . при возбуждении альфа- и бета~адренореактивных_структур адреналина гздрохлоридоы (на 52,4 %) и повышение активности фермента при торможении' бета-адренергических структур обзиданом (на 48,7%) На фоне возбуждения М а Н-холинореактивных структур ацетилхолин--хлоридзм активность фермента повышается (на 52,7 %),а при блокаде М-холинорецепторов атропина сульфатом снижается (на 46,8 %).

' З.Для динамики влияния адрен- и холинергических структур на активность кишечных ферментов (на примере щелочной фосфатазы) характерно максимальное изменение наблюдаемых эффектов в первые . 30-60 минут после введения препаратов,продолжительность действия в течение 6'часов,и более раннее,в пределах, одного часа,изменение активности первоначально в слизистой кишки,а затем в полости. Мембранный гидролиз бета-глицерофосфата натрия превышает полостной в 12-14 раз.

4.Торможение ретикулярной формации мозга аминазином в дозе Ь мг'кг сопровождается снижением щелочно-фосфатазной активности как в зоне мембранного (на 42,8 %),так и полостного (на 32,4 пищеварения в тгнкой килже овен.

5.В условиях моно.би- и полисубстратного меыбрашюго гидролиза пищевых веществ в тонной кишке здоровых а больных овец существуют сложные взаимодействия различных компонентов пищи,направленность которых (стимуляция,ингибирование) и активность ферментов зависят от природы гидролизуемого субстрата,его комбинации с модификаторами,возраста овец и их физиологического состояния.

а) Активность трипептидазы при моносубстратном гидролизе трипептида диглицилглицина у здоровых овец равняется 7,06+0,68 мМ/мин/г,у ягнят 4,28+0,56 мМ/мин/г; активность мальтазы при гидролизе мальтозы - соответственно 1,48+0,08 и 2,02+0,12 мМ/мин/г; активность щелочной фосфатазы при гидролизе бета-глицерофосфата натрия - 96,33+2,95 и 98,36+2,16 мкМ/мин/г.

б) У здоровых овец и ягнят при би- и полисубстратном мембранном пищеварении достоверно отполируется активность трипептида в присутствии мальтозы,бета-глицерофосфата натрия и их смеси,но ингибируется:активность мальтазы бета-глицерофосфатом натрия и смесью модификаторов, активность щелочной фосфатазы трипоптидом и смесью модификаторов. У ягнят активность мальтазы _в присутствии трипептида ингибируется.а у взрослых овец незначительно стимулируется.

в) У больных взрослых овец,по-сравнению со здоровыми,при би-- и полисубстратном мембранном'гидролизе достоверно ингибирует-ся активность трипептидазы,мальтазы и щелочной фосфатазы в присутствии всех исследуишх модификаторов.У ягнят достоверно ин-гкбируются активности трипептидазы и щелочной фосфатазы малью--' зой и смесью модификаторов,но стимулируются активности трипептидазы в присутствии смеси модификаторов,мальтазы - трипептидом, бета-глицерофосфатом натрия и .смесью модификаторов.

6.На 10-й день после дегельминтизации больных овец и ягнят фенкуром в дозе 16 мг/кг активность форматов,участвующих в моно, би- и полисубстратных мембранных гидролизах пищевых веществ в тонкой кишке в большинстве случаев повидается.

а) При моносубстратном гидролизе у дегельнгагеиэированных овец,по сравнению с иедегельмдаизированнымивповшшт;ся активность мальтазы (на 22,4 %),щелочной фосфатазы у овец и ягнят (на 19,3 и 10,2 %), но снижается активность мальтазы у ягнят (на 42,8 %) и трипептидазы как у овец (на 12,1 %),так и у ягнят (на 26,2 %).

.6) При би- и полисубстратных взаимодействиях пищевых субстратов у дегельшнтизированных взрослых овец повышается активность мальтазы в присутствии трипептида,бета-глицерофосфата натрия и смеси модификаторов,у ягнят - активность трипептидазы в присутствии мальтозы. На достоверно более низком уровне оставалась у овец активность трипептвдазы при взаимодействии с мальтозой,у овец и ягнят - со смесью модификаторов,у ягнят - активность мальтазы в присутствии трипептида,бета-глицерофосфата натрия и смеси модификаторов.

в) У дегельминтизированных ягнят,по сравнению со здоровыми, повышалась активность трипептидазы смесью модификаторов (на 35,4 %), активность мальтазы - трипептидом (71,2 %),у овец и ягнят - бета-глицерофосфатом натрия (на 29,4 и 94,2 %) и смесью модификаторов (на 74,4 и 124,1 %).активность щелочной фосфатазы - в присутствии смеси модификаторов (на 39,4 и 8,4 %).

7.Сопоставление эффектов взаимодействия пищевых.веществ при их моно.би- и полисубстратных гидролизах в тонкой кишке-здоро-вых,больных и дегельминтизированных овец и ягнят показывает наличие их связи с возрастом животных. При этом наиболее часто наблюдаются изменения активности мальтазы,трипептидазы и более редко - щелочной фосфатазы. ^ . -

8.Указанные выше сложные моно.би- и полисубстратные взаимодействия пищевых веществ свидетельствуют о том.что исследованные нами ферменты;участвующие'на стадии мембранного гидролиза в тонкой кишке у овец,также как и у других животных,имеот не только каталитические,но и регуляторные центры,то есть являются ал-лостерическими регуляторными системами.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ^

1.Результаты опытов о влиянии адрен- и холинергических препаратов и аминазина на активность кишечных ферментов могут быть использованы в клинической практике при нарушениях мембранного пищеварения у овец.

2.Данные о взаимодействиях пищевых субстратов в процессе ыоно- и полисубстратного гидролиза в тонкой кишке здоровых и больных энтеритом паразитарной этиологии овец и ягнят необходимо учитывать при нормировании и организации рационального питания овец и ягнят.

- 17 -

3. В целях стимуляции восстановления активности кишечных ферментов при энтерите гельминтозной этиологии целесообразно применять дегельминтизацию овец и ягнят фенкуроы в дозе 16 мг/кг.

4. Теоретические и практические разработки диссертационной работы рекомендуется использовать в учебном процессе ветеринарных и зоотехнических ВУЗов.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ Ш ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ:

1. Зиналиева М.З. Адрен- и холинергизесная регуляция мембранного пищеварения в тонкой кишке у овец.//Тез.докл.научн.кон-фер.СПб. вет. гама.-СПб,1993.-С.25. ,

2. Зиналиева М.З. Взаимовлияние различных пищевых субстратов при их гидролизе в тонкой кшкз у здоровых и больных паразитарный гастроэнтеритом овец./Дез.докл.научн.конфар. СПб.вет. :ш-та.-СПб,1993.-С.27.

3„ Зиналиева М.З. Полисубстратные'процессы на стадии мембранного гидролиз? у здоровых и больных паразитарным гастроэнтеритом овец.- В сб.: Морфология,физиология и патология у шшот-ш.'-СПб., 1993.-№120.-2 часть.-С.67-72;

4. Зиналиева М.З., Аль Слиман X. Влияние дегельминтизации на полясубстратные взаимоотношения в процессе, мембранного гидролиза в.тонком кишечнике у овец.//Тез.дота, к 5-й.межгосударственной межвузовской научно-йрактической конференции.-СПб., I993.-G.72. • '