Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Некоторые биохимические показатели крови и кожи полугрубошерстных и полутонкорунных овец, разводимых в Армении

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Некоторые биохимические показатели крови и кожи полугрубошерстных и полутонкорунных овец, разводимых в Армении"

ьрьчиъъ т^иадъ <иит1иишчгь

РГВ од

иигиирзт. адзиъь зпьо№ 2 5 ¿^з *

^изиизиьпиг РПН5*тЯ Щ^иШШ'ОЗиРПЬРа ь^ пэюигъьгь игзиъ ипс^ъ

ЛРЛС ЯПЬЗиЪЬСЪЬР

Ч-.00.04 - ^ьъииеьиш \5шийшо11шподш15р 1|Ь0ишршГ1ш1[шй qlшlnlpJnlGGbpll рЪ^Ош&пф д)ипш1|ш0 шиш11бш011 ЬиудгёшО шщЬОш|гтитр]шО

иьп.ипаьр

ьриша - 2000

ЕРЕВАНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ МАРМАРЯН ГАЯНЕ ЮРЬЕВНА

НЕКОТОРЫЕ БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ И КОЖИ ПОЛУГРУБОШЕРСТНЫХ И ПОЛУТОНКОРУННЫХ ОВЕЦ РАЗВОДИМЫХ В АРМЕНИИ

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук по специальности 03.00.04 — Биохимия

Ереван - 2000

UmbQujJimumpjujü pbtfuiG huiumium^bi t ^uijlpuljuiü q.jmi\uimGtnbuuiliUJG Uljuirihiifiuijmtf

цЬЦшфир' lJbGuaipujGuiliuiß qJunmpjniQGbpii цпЦ-

mnp, ицтфЪипр L.4. O-miJpjmfi

■Чш^шпйш^шй pür}t]fii!ui|unuübp' tiböu. qfiin. ipiliwnp, ищпфЬипр

U.U. Uniusuißjuifi

Uböu. qlun. unlpnnp, щрпфЬипр, ■Ь.Л. ипшрЬишй

Uniujuimuip Ipuqtfuiljbpuimpjmü' <■< Q-UU UnibljniimjliG

llbQuiupuiGmpjmfi ¡iQumfiinmin

i7lW2Uiiiiümpjmüp IjujjuiQuqni t 2000 p. Gnjbüpbjili -Jiß duitfp 1400 - Jiß bpUiußJi ujbmuil|UiG hiuiiuquiupuiGnuS qnpönn 051 UuiuQujqlnnuiliujQ tunphpqli Gtiummü (375049, bpUmG, ЩЬр UuißmljjUJG iJhiij. 1. b<Tl<, ЦЬйишршбшЦшй фшЦтрпЬт):

UinbGmJununipjmGp ЦшрЪ^ t öuißnpuißuq bpbuiüji щЬтш^шй hiutfuipiuipujfiji qpujrpiipujQmiS:

UbipSujqJipfi шпшр1}ш0 12000 р. hnljinbiSpbpji - Jiß

UaiuümqfiinmlimQ [unphpqli qjim. puipumupup, IjUQu. qjirn. рЬЦйшйт, qngbGrn U.U. Inßjiufi

Тема диссертации утверждена в Армянской Сельскохозяйственной Академии.

Научный руководитель доктор биологических наук,

профессор A.B. Давтян

Официальные оппоненты: доктор биологических наук,

проф. A.A. Агаджанян

доктор биологических наук, проф. Ф.Р. Аракелян

Ведущая организация: Институт Молекулярной Биологии HAH РА

Защита состоится — ноября 2000 г. в 1400 часов на заседании Специализированного Совета 051 при Ереванском государственном университете (375049, Ереван, ул. Алека Манукяна 1, ЕрГУ, Биологический факультет).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Ереванского Государственного университета.

Автореферат разослан 7? -го октября 2000 г

Ученый секретарь Специализированного Совета,

канд. биол. наук, доцент С.А. Гонян

/7 ^б^ИЩО

'о/э/о -7 У// ->

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность и обоснование темы. Животноводство играет существенную роль в сельскохозяйственном производстве. В познании закономерностей формирования организма животных наряду с генетическими, все больше внимания уделяется биохимическим методам исследования, позволяющим пополнять копилку селекционных тестов узловыми метаболитами обмена веществ.

У сельскохозяйственных животных специфичность обмена веществ характеризует направление их продуктивности и предостав/яет возможность промышленного использования регуляции метаболизма для получения различной животновсдческой продукции (мяса, шерсти, молока и др), так как тот или ш-ой вид продуктивности сельскохозяйственных животных связан с определенной специализацией и интенсивикацией обменных процессов. Поэтому характеристика типа обмена, установление связи его с продуктивностью, изыскание путей воздействия на обмен в желательном направлении представляет непосредственный интерес для практики. При изучении специализированной продуктивности наибольшее внимание привлекают те стороны обмена, которые для нее наиболее типичны.

Отбср по продуктивности - это, по существу, отбор индивидуумов с интенсивным обменом веществ, способных накапливать в организме необходимые биополимеры в большом количестве . Отсюда правомерно предполагать, что разному уровню продуктивности животных должен соответствовать определенный генетический и метаболический потенциал, отражающийся в скоростях реакций синтеза и распада соединений, активностях регуляторьых мобилизаций компенсаторных механизмов ферментоЕ и др. Следовательно, изучение связи между соответст-свующими продуктивными качествами и биохимическими показателями является насущной задачей животноводства, тем более, что имеющиеся данные по изучению обменных процессов в онтогенезе сельскохозяйственных животных не дают цельной картины их изменений на протяжении индивидуального развития организма.

Поскольку генетическая программа индивидуального развития затрагивает и параметры метаболизма, лежащего в основе разного типа продуктивности, использование последних в качестве селекционых показателей вполне обосновано, что подтверждено и сельскохозяйственной практикой. Поэтому выявление различия в

I

метаболических показателях у животных различных пород и типов, с использованием их в дальнейшем совершенствовании породы и улучшения ее продуктивных качеств представляет актуальный интерес для современного животноводства.

Цель и задачи исследований. Целью настоящего исследования явилось изучение некоторых биохимических показателей крови и кожи наиболее распространенных в республике овец в зависимости от возраста, пола и породы для последующей возможной в целенаправленном ведении селекционно-племенной работы в отрасли. Вместе с тем была предпринята попытка выявить связь этих показателей с некоторыми физико-техническими параметрами шерстного покрова овец.

Для достижения поставленной цели были запланированы следующие задачи:

1. изучение уровня общего белка и белковых фракций, глюкозы, лактата, а также активности ферментов АСТ, АЛТ и АДГ в крови Армянских полутрубошерстных и полутонкорунных овец.

2. исследование тех же показателей в коже вышеуказанных пород овец.

3. сравнительное количественное изучение фосфолипидных фракций в коже овец исследуемых пород.

4. выявление связи исследуемых биохимических показателей крови и кожи с одной стороны, и толщины шерстных волокон, с другой.

Научная новизна и практическое значение работы. Впервые нами были изучены некоторые биохимические показатели в крови и коже Армянских полугрубошерстных и полутонкорунных кроссбредных овец, а также их изменение в зависимости от возраста, пола и породы. Нами исследованы также фосфолипидные фракции кожи, которые играют существенную роль в ее структуре, а следовательно и в качестве. Наши исследования позволили установить определенную корреляционную связь между отдельными биохимическими показателями и толщиной шерстных волокон.

Обнаружено несколько высокое содержание у - глобулиновой фракции у более скороспелых полутонкорунных овец. Одновременно наблюдается повышение активности трансаминаз в зависимости от возраста. Констатируются возрастные, межпородные различия в динамике энергетических субстратов (глюкоза, МК) крови.

В коже овец наблюдается тенденция снижения содержания белка в зависимости от возраста. Обнаружены достоверные половые различия в активности ACT в коже; она выше у самцов всех половозрастных групп.

Полученные нами результаты выявили корреляционную связь между уровнем глюкозы и МК крови и кожи изучаемых пород. Эти показатели углеводного обмена превалируют у полутонкорунных овец.

Установлено, что в коже овец типа корридель фосфолипиды представлены в больших количествах, чем у полутрубошерстных.

Прослеживается также обратная корреляционная связь между некоторыми биохимическими параметрами кожи и крови (уровень глюкозы, МК, фосфолипиды) и физико-техническими показателями шерсти (толщина шерстных волокон).

Апробация работы. Основные положения диссертации были доложены и обсуждены на отчетных заседаниях кафедры биохимии АСХА, на конференциях.

Публикации. По теме диссертации опубликовано б научных трудов.

Структура и объем работы. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, заключения, выводов и списка литературы. Работа изложена на 134 страницах русского текста, содержит 15 таблиц, 6 рисунков и 12 фотоснимков. Библиографический указатель включает 225 ссылок (170 русских и 55 иностранных источников).

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Объектом исследований служили овцы Армянской полугрубошерстной породы (Арагацский тип) и Армянской полутонкорунной, тип корриде,1\ь. Подопытные животные в пределах породы были разделены на четыре группы, в каждой по пять голов, которые отобраны по принципу аналогов из числа животных желательного типа. Первую группу составляли 2,5 — месячные ярочки, вторую — 2,5- месячные баранчики, третью — матки, а четвертую — бараны — производители.

Материалом для исследования служили кровь, кожа и шерсть.

Образцы кожи брали методом биопсии на правом боку за лопаткой, на голодный желудок(Диамидова H.A., 1960).

Для приготовления экстракта кожи протирали 1 г кожи в фарфоровой ступке с 1 г. стеклянных шариков. Экстракцию проводили фосфатным буфером (4мл. 50мМ), при рН 7,0.

Общий белок определяли рефрактометрическим методом.

Белковые фракции определяли методом электрофореза на бумаге (Гурвич А.Е., 1964) в мединал — вероналовом буфере, рН 8,6. Электрофорез проводили при напряжении 127 в и силе тока 0,2 ма на 1см ширины полоски. Дальнейшее количественное определение фракций белков после элюации проводили колориметрическим методом.

Количество фракций белка определяли также методом электрофореза в полиакриламидном геле (ПААГ, Laimli U.K., 1986). Использовали трис-глициновый буфер, рН доводили до 6,3 НС1-ом. Объем трубки—2,5 мл. Электрический режим — 2 м.\/на гель, после 30 мин доводили до 4 мА/на гель. Красящий раствор - 0,1% кумаси бромфенолевый голубой R-250.

Гель хранили в 7% уксусной кислоте.

Уровень глюкозы определяли модифицированным методом Триндера Д. (1969) с применением ферментов глюкозооксидазы и пероксидазы. Реакционная среда содержала 100 мМ ацетатного буфера, рН 6,0; 50 мМ фенола, 0,3 мМ 4-аминоактипирина, 2 ед глюкозооксидазы и 0,5 ед пероксидазы. Инкубацию проводили в течение 30 мин при 37°С спектрофотометрировали при длине волны -550 НМ.

Активность АЛТ определяли модифицированным методом Segal H.L. et. al. (1962). Реакционная среда с конечным рН 7,4 содержала 20 мМ трис буфера, 400 мМ аланина, 12 мМ а -кетоглутарата и 5 мМ ЭДТА. Инкубацию проводили при 37° С в течение 30 мин. Образовавшуюся в ходе реакции пировияоградную кислоту определяли по убыли поглощения НАДН при длине волны 340 нм после добавления 1 ед. ЛДГ.

Активность ACT определяли модифицированным методом Shiio J. et.al (1982). Инкубационная смесь содержала 20 n.M трис — НС1 буфера, рН 7,8, 200 мМ аспарагиновой кислоты, '.2 мМ а -кетоглутарата и 5 мМ ЭДТА. Инкубацию проводили в "ечение 30 мин при 37°С. Количество образовавшейся щавелеьоуксусной кислоты регистрировали по убыли поглощения НАДН при длине волны 340 нм после добавления 1 ед. ЛДГ и 1 ед. МДГ.

Активность ЛДГ определяли модифицированным методом Scopes R.K. (1977) по скорости окисления НАДН. Реакционная среда содержала 50 мМ фосфатного буфера, рН 7,5, 1 мМ пирови-ноградной кислоты и 0,15 мМ НАДН. Инкубацию проводили 5 мин.

при 37°С. За единицу ферментной активности принимали количество фермента, катализирующее образование 1 мкмоль продукта за 1 мин.

Концентрацию МК определяли с помощью ЛДГ, методом, описанным Асатиани B.C. (1965). Реакционная среда содержала 0,2 М гидразин-глицинового буфера, pH 9,5; 0,5 мг/мл НАД и 1 ед АДГ. За образованием НАДН следили при длине волны 340 НМ.

Коэффищ ент молярной экстинкции НАДН — 6,22 • 103 .

Количественное определение фосфолипидов. Экстракцию фосфолип адов проводили по методу Фолча (Folch J. et.al. 1957) в модификации Карагезяна К.Г. (1969) метанолхлороформовой смесью 1:2. Промытые, выпаренные экстракты фосфолипидов наносили на мерковские пластины (Sigma), которые погружали в камеру, к} да заранее был налит растворитель метанол-хлороформ и аммиак (35:65:5). После поднятия фронта растворителя пластины доставали из камеры и помещали в камеру с йодом. После проявки пятен прс водили элюирование в среде подкисленного метанола. Минерализацию проводили в среде серной и азотной кислот.

После ставили цветную реакцию на определение фосфора (Зубер В.Л, 1982), спектрофотометрировали при длине волны 850 нм.

Толщину шерстных волокон измеряли по общепринятой методике, согласно которой, взятые с правой боковой части образцы персти после промывания исследовали под микроскопом при увели тении в 400 раз (10x40). С каждого животного измеряли по 100 волокон, после чего все материалы были обработаны по группам животных биометрически (Плохинский И.А., 1961). Всего была определена толщина 5400 волокон.

Обработку цифрового материала производили с использованием критерия вариационной статистики в системе Стъюдента.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

1. Содержание общего белка и белковых фракций в сыворотке крови полугрубошерстных и полутонкорунных

овец

Улучшение породных и повышение продуктивных качеств животных достигается путем познания биологических особенностей организма. Поскольку подавляющее большинство событий

ц 2,5 месячные ярочки

® 2,5 месячные баранчики Ш матки

Лбараны, производители__

1. Общий белок

2. Альбумины

3. а - глобулины

4. Р- глобулины

5. у - глобулины

Рис.1. Содержание общего белка и белковых фракций сыворотке крови Армянских голутонкорунных овец.

1.

2.

3.

4.

5.

Общий белок Альбумины а - глобулины ¡3- глобулины у- глобулины

02,5-месячные ярочки

□ 2,5-месячные баранчики

В матки

□бараны-производители

Рис.2. Содержание общего белка и белковых фракций в сыворотке крови Армянских полугрубошерстных овец.

на физиологическом уровне, а также продуктивность, в том числе и шерстная связаны, прежде всего, с накоплением белковой массы, то мы в данном разделе работы представили результаты содержания общего белка и белковых фракций в крови изучаемых пород овец.

Полученные нами данные показывают, что между изучаемыми породами и половозрастными группами большой разницы в содержании общего белка в сыворотке крови не наблюдается. По-видимому, это связано с тем, что полугрубошерстные овцы Арагацского типа были созданы на базе полутонкорунной Арагацской породной группы. Однако, несколько низкий уровень содержания общего белка в сыворотке крови полугрубошерстных овец, видимо, связан с более интенсивным использованием синтезируемых в организме белков для прироста мышечной масссы.

В биохимическом аспекте большой интерес представляют и белковые фракции сыворотки крови. По нашим данным несколько низкое содержание у полновозрастных животных обеих пород связано с продуктивностью, так как альбумины являются аминокислотным резервом организма. В зависимости от возраста достоверных различий мы не наблюдаем. Констатируется относительно более высокое содержание у—глобулиновой фракции у более скороспелых полутонкорунных овец. В сыворотке крови последних при электрофорезе в ПААГ фиксируется большее число белковых фракций (11), чем у полугрубошерстных овец (8), причем увеличение идет в зоне у — глобулиновой фракций. Как известно, скороспелость, хозяйственно-полезные признаки, в частности мясная, шерстная и молочная продуктивность коррелируют с уровнем у — глобулинов. Что касается различий в количестве фракций белков пород, она может быть связана с диссоциацией и ассоциацией биополимеров крови, модулирующей функциональные возможности организма.

Следует отметить, что в наших исследованиях отмечается обратная корреляция между содержанием у —глобулинов крови и толщиной шерстных волокон. Белковый коэффициент варьирует в пределах нормы.

1.1. Активность трапсаминаз в крови полугрубошерстных и

полутонкорунных овец

Трансаминазам принадлежит решающая роль в азотистом обмене. Именно благодаря процессам трансаминирования

Активность трансаминаз в крови овец (ед/мл)

! Армянская полугрубошерстна Показатели Группы животных

М ± m 2,5 — мес. ярочки 2,5 — мес. баранчики матки бараны-производители

ACT 0,102 ± 0,020 0,096 ± 0,012 0,230 ± 0,082 0,072 ± 0,008

АЛТ 0,082 ± 0,012 0078 ± 0,011 0,092 ± 0,01 0,088 + 0,009

Тип корридель ACT 0,208 ± 0,19 0,235 ± 0,033 0,247 + 0,012 0,307 ± 0,068

ААТ 0,037 ± 0,005 0,036 ± 0,005 0,033 + 0,0017 0,042 ± 0,005

осуществляется синтез всех заменимых аминокислот, перераспрэделения азота, синтез мочевины и компонентов, необходимых для фиксации азота. Активность трансаминаз в общем виде дает картину интенсивности белкового и азотистого обменов, неразрывно связанных между собой, а также отражающих уровень продуктивности сельскохозяйственных животных

Исходя из вышеизложенного мы представили результаты активности ACT и АЛТ в зависимости от пола, породы и возраста животных

Наши исследования показали, что активность трансаминаз с возрастом несколько повышается, что, видимо, объясняется активацией азотистого и энергетического обменов, сопряженным механизмов их регуляции, что, в конечном счете отражается на интенсивности синтеза белка и накоплении живой массы.

Высокая активность аминотрансфераз, их многосторонняя регуляция и взаимосвязь с продуктами углеводного и липидного обменов, делает их, с одной стороны, достаточно информативным показателем интенсивности метаболизма, с другой стороны требует генетической детерминации амплитуды их колебаний.

В пеших экспериментах активность трансаминаз в крови в целом не проявляет ярко выраженных половых различий. Более выражены межпородные различия. Так, активность ACT у полутонко эунных овец во все возрастные группы превосходит таковую полугрубошерстных. А активность АЛТ показывает обратную картину, достоверно повышается у животных полугрубошерстной породы. Такая межпородная разница вполне 'может отэажать особенности азотистого обмена, с большим или меньшим его сдвигом в сторону синтеза белка у овец с различным уровнем п юдуктивности.

1.2. Показатели углеводного обмена в крови полугрубошерстных и полутонкорунных овец

Учитывая, что основным энергетическим субстратом тканей организма является глюкоза, в процессе метаболизма которой генерируются также различные ингермедиаты азотистого и липидного обменов, способствующие координации потоков вещества л энергии, нами было исследовано содержание глюкозы, ее метаболита лактата и активность конечного фермента гликолиза ЛДГ в крови овец.

Урогень глюкозы крови можно рассматривать как результирующую интенсивности энергетического обмена тканей.

Показатели углеводного обмена в крови овец.

Породы Показатели Группы животных

- 2,5 — мес. ярочки 2,5 — мес. баранчики матки бараны — производители

§ as Глюкоза 1,80 ± 0,372 1,35 ± 0,368 1,12 ± 0,153 1,17 ±0,204

Армянская >лугрубошерст: ммоль/л

Лактат 1,93 ± 0,52 2,00 ± 0,348 7,93 ± 0,937 6,816 ± 1,165

ммоль/л

ЛДГ 0,786 ± 0,203 1,136 ± 0,084 1,076 ±0,112 0,918 ± 0,098

к ед/мл

Глюкоза 2,38 ± 0,324 2,146 + 0,238 2,806 ± 0,142 3,05 + 0,002

<Р ммоль/л

ä а Лактат 8,33 ± 0,732 9,894 ± 0,653 10,694 ± 1,279 7,726 ± 0,874

а о к ммоль/л

с я н ЛДГ 1,006 ± 0,152 0,892 ± 0,156 0,876 ± 0,169 0,576 ± 0,246

ед/мл

Наши исследования показали, что содержание глюкозы с возрастом уменьшается у полугрубошерстных овец и повышается у полутонкорунных. При этом у обеих пород с возрастом наблюдается некоторое снижение активности ЛДГ и достоверное повышение уровня МК.

Несмотря на некоторый разброс данных, можно говорить о более высокой интенсивности энергетического обмена у полутонкорунных овец как в молодом, так и в зрелом возрасте. При этом следует отметить параллелизм в уровне глюкозы и лактата, т.е. по обеим показателям овцы полутонкорунной породы превосходят полугрубошерстных. Причем межпородная разница в содержании лактата особенно выражена у молодняка. Так, ее концентрация у полугонкорунных ярочек и баранчиков более чем в 4 раза превышает таковую полугрубошерстных особей. В зрелом возрасте эта разница минимизируется: 1,3 раза у маток и 1,1 раза у баранов. Вместе с тем возрастная динамика лактата значительно более выражена у полугрубошерстных овец, что обуславливает выравнивание показателя с возрастом.

Нужно отметить, что интенсивность энергетического обмена полутонкорунных овец отражает породные особенности, связанные в основном с продуктивностью. Необходимо констатировать отсутствие корреляции между уровнем лактата крови с активностью ЛДГ, сдвиги в которой не столь выражены, как в половозрастном, так и в породном аспекте.

2. Биохимические показатели кожного покрова полугрубошерстных и полугонкорунных овец

Кожа является важным и весьма многосторонним в функциональном отношении органом. Течение жизненных процессов в организме животных тесно связано с нормальной деятельностью кожи. Изучение обменных процессов, которые лежат в основе шерстеобразования — один из важных путей целенаправленного воздействия на шерстную продуктивность овец, причем волосяной покров • играет важную роль в терморегуляторных свойствах кожи животных (Литовченко Г.Р., Есаулова П.А., 1972). В этом аспекте определенный интерес представляют результаты наших исследований, отражающие особенности течения обменных процессов в коже овец, зависящие от пола, возраста и породы.

Содержание общего белка в коже овец

(мг/мл экстракта кожи)

Породы овец Показатели Группы животных

Армянская полугрубошерстная 2,5 — мес. ярочки 2,5 — мес. баранчики матки бараны — производители

М ± ш 0,578 ± 0,475 0,268 ± 0,024 0,189 ± 0,011 0,174 ± 0,019

6 0,95 0,054 0,024 0,043

Тип корридель М ± ш б 0,314 ± 0,146 0,326 0,207 + 0,121 0,045 ± 0,002 0,420 ± 0,157

0,242 0,005 0,224

2.1. Содержание общего белка в коже овец

Между кровью и кожей происходит постоянный обмен жидкостью, ионами и метаболитами.

Кожа отличается высоким содержанием белков, что косвенно свидетельствует об интенсивном их синтезе и распаде в этом органе. В основе шерстной продуктивности лежат метаболические реакции в коже, в частности синтез белка и поддерживающие его энергопоставляющие процессы. Одним из показателей интенсивности синтеза белка в коже является наличие в этой ткани аминотрансфераз, регулирующих аминокислотный пул, приноравливая его к биосептическим процессам.

Результаты определения белка кожи показали тенденцию понижения его содержания с возрастом, за исключением самцов полутонкорунной породы, у которых наблюдается обратная картина. Поскольку сдвиги статистически недостоверны, можно лишь весьма условно говорить о направленности их.

Не наблюдается достоверной разницы в содержании общего белка в коже и в зависимости от пола. Аналогичное наблюдается в отношении межпородных различий. Несмотря на данные о наличии корреляции между синтезом белка и активностью трансаминаз в наших опытах с кожей не отмечается синхронных изменений этих показателей.

2.2. Активность трансаминаз в коже овец

В коже овец, как и в других органах, наиболее активными трансаминазами являются ACT и АЛТ, которые и здесь учавствуют в синхронизации процессов ассимиляции (трансреаминирование) вместе с митохондриальным (трансдезаминирование) ферментом глутаматдегидрогеназой. В зависимости от потребностей метаболизма направленность процесса сдвигается в ту или другую сторону. Повышение энергетического потенциала митохондрий кожи способствует активации челночных механизмов и поставке в цитозоль аминокислот, трансаминируемых цитоплазматическими изоформами ACT и АЛТ с соответствующими кетокислотами, оптимизируя, тем самым, соотношение аминокислот к потребностям синтеза белка.

К сожалению мы не проводили раздельного определения активности митохондриальных и цитоплазматических изоформ ACT и АЛТ, действие которых имеет различную функциональную направленность. Тем не менее определение суммарной активности

Активность трансаминаз в коже овец (ед/мг. белка)

Породы овец Показатели Группы животных

Армянская полугрубошерстная — 2,5 — мес. ярочки 2,5 — мес. баранчики матки бараны — производители

АСТ 0,023 ± 0,006 0,137 ± 0,069 0,058 ± 0,014 0,195 ± 0,046

АЛТ 0,022 ± 0,009 0,0044 ± 0,0001 0,027 ± 0,009 0,048 ± 0,017

Тлп корридель АСТ 0,088 + 0,034 0,131 ± 0,031 0,150 ± 0,034 0,062 ± 0,043

АЛТ 0,0029 ± 0,0003 0,0038 ± 0,0012 0,0538 ± 0,004 0,004 ± 0,0011

позволяет хонстагировать хотя и статистически недостоверное, но видимое повышение с возрастом активности ACT в коже полугрубошерстных овец, более заметное у самцов. Активность АЛТ существенных сдвигов с возрастом не претерпевает. У полутонкорунных овец наблюдается возрастная тенденция уменьшения активности ACT у самцов. Достоверные различия в активности ACT отмечаются между полами полугрубошерстной породы и в активности ААТ у молодняка той же породы. Межпородные различия более выражены у самок, особенно в молодом возрасте, причем активность ACT выше у полутонкорунных самок, а ААТ у толугрубошерстных. У баранчиков различий не отмечается. В эолее зрелом возрасте активность ACT и АЛТ превалирует у самок типа корридель и у баранов полугрубошерстной. Полученные результаты не выявляют каких либо закономерных половозрастных и породистых различий в активности трансаминаз кожи овец.

2.3. Показатели углеводного обмена в коже овец

Как и в других органах глюкоза в коже используется в качестве основного источника энергии для биосинтетических реакций, связанных с шерстеобразованием. Пути превращения глюкозы в коже окончательно не изучены. Однако имеющиеся данные показывают, что в коже аналогично другим органам происходит гликолитичекш! и окислительный метаболизм глюкозы.

Известно, что концентрация глюкозы в коже в пересчете на сырую массу ниже, чем в крови.

Наряду с уровнем глюкозы в коже нами изучались также уровень лектата и активность АДГ, что позволило бы получить более достоверную картину сдвигов в гликолизе.

Регуляторные механизмы организма обеспечивают своевременное переключение окислительного и анаэробного расщепления глюкозы в зависимости от потребностей и условий функционирования клетки. Такое переключение осуществляется и на уровне ЛДГ, что и обуславливает значение изучения активности этого фермента кожи овец разного пола, породы и возраста.

Результаты этой серии опытов не показывают синхронных изменений в исследованных показателях гликолиза, такие как глюкоза, лактат и ЛДГ. Так, содержание глюкозы существенно не изменяется ни с возрастом, ни с полом, но отмечается более высокий -/ровень глюкозы в коже кроссбредных овец, что коррелирует с таковым его состоянием в крови. Уровень лактата у животных эбеих пород с возрастом падает и выше у самок.

Показатели углеводного обмена в коже овец.

Породы Показатели Группы животных

Армянская полугрубошерстная - 2,5 — мес. ярочки 2,5 — мес. баранчики матки бараны — производители

Глюкоза ммоль/г.б. 0,624 ±0,192 0,718 ± 0,194 0,604 ± 0,176 0,842 ± 0,308

Лактат ммоль/ г. б 4,205 ± 1,391 2,043 ± 0,057 1,889 ± 0,237 0,983 ± 0,372

АДГ ед/мг.б. 0,702 ± 0,220 1,266 ± 0,051 1,0714 ± 0,331 0,423 ± 0,078

Тип корридель Глюкоза ммоль/г.б 1,388 ± 0,225 1,422 ± 0,452 1,201 ± 0,470 2,814 + 0,294

Лактат ммоль/г.б 5,936 ± 1,101 0,528 ± 0,192 1,516 ± 0,717 1,386 ± 0,466

ЛДГ ед/мг.б 0,570 ± 0,122 0,512 ± 0,138 0,651 ± 0,129 0,214 ± 0,027

Половозрастные различия отмечаются также в активности АДГ кожи: у самок обеих пород наблюдается тенденция к повышению активности с возрастом, у самцов — к понижению. В коже кроссбредных овец активность фермента ниже, чем полугрубошерстных, что в определенной степени коррелирует с данным по крови. В то же время у самцов с возрастом отмечается повышение как концентрации глюкозы, так и лактата и снижение активности АДГ, что можно предположительно приписать к функциональным особенностям метаболизма самок и баранов, отражающимся на соответствующих показателях кожи. Сравнение показателей между породами выявляет преобладание содержания глюкозы у полутонкорунных овец с тенденцией понижения у них АДГ активности.

Так как имеется связь между обменом веществ крови и кожи, то согласно нашим данным отмечается корреляция уровня глюкозы и МК крови и кожи изученных пород: у полутонкорунных содержание энергетичеких субстратов выше.

2.4. Фосфолипидиые фракции кожи полугрубошерстных и

полутонкорунных овец

Говоря о липидах кожного покрова, необходимо отметить, что они имеют двоякое происхождение: продуцируются сальными железами и образуются в эпидермисе при ороговении клеток (Калантаевская К. А., 1972). Анализ кожи овец при помощи тонкослойной хроматографии позволил идентифицировать следующие фракции фосфолипидов: МФИ, АЛ, СФМ, ФХ, ФЭА, ФС, КЛ. Фосфолипидам кожи придается исключительно важная роль в процессе кератинизации. В частности, установлена взаимосвязь между этерификацией стеролов и кератинизацией. Кератинизация сопроваждается уменьшением фосфолипидов и холестерина. В результате распада фосфолипидов освобождаются высшие жирные кислоты, которые в процессе кератинизации могут быть использованы в этерификации холестерина и восков.

К сожалению, еще мало известно о всех деталях липидного обмена в коже, однако не вызывает сомнения, что липидные компоненты имеют исключительно важное значение в процессах шерстеобразования.

Имея ввиду вышесказанное мы задались целью в этой серии опытов осуществить количественное определение фосфолипидных фракций в коже овец в зависимости от возрастных, половых и породных особенностей животных.

2,5 месячные ярочки у 2,5 месячные баранчики д матки

дбараны производители

Рис.3. Содержание фосфолипидных фракций в коже полугрубошерстных овец

млг/ г

70

60 -!

50

40 -

30 ч -

20 -

10

0 -

! □ 2,5 месячные ярочки | О 2,5 месячные баранчики |В матки

I □ бараны производители

1. Монофосфоинозитиды Рис.4. Содержание фосфолипидных фракций 1. Лизолецитины в коже полутонкорунных овец

3. Сфингомиелины

4. Фосфатидилхолины

5. Фосфагидилсерины .

6. Фосфатидилэтаноламины

7. Кардиолипины

Содержание фосфолипндов в коже у самок полутонкорунных овец с возрастом падает, а у самцов обеих пород-повышается, что, возможно, связано с физиологическими особенностями организма. Следует отметить, что в коже у самок наблюдается большее число фосфолипгдов, чем у самцов (исключение составляют единичные недостоверные данные).

В коже полутонкорунных овец фосфолипиды предоставлены в больших количествах, чем у полугрубошерстных, что коррелирует с шерстнсй продуктивностью, имунным статусом (у-глобулины) большим количеством белковых фракций, интенсивным углеводным обменом, а также толщиной подкожной клетчатки.

3. Толщина шерстных волокон.

В овцеводстве важное значение имеет толщина шерстных волокон. Это свойство имеет определенное значение как с технологической точки зрения, так с точки зрения конституцк ональных особенностей овец.

Шерстные волокна являются результатом метаболической деятельности волосяных фолликул. Биохимические основы шерстеобразования за последнее время являются предметом интенсивных исследований. Несмотря на это, многие аспекты биохимии шерстеобразования остаются неизученными до сих пор. Это касается, в частности, вопроса взаимосвязи обмена веществ в коже с процессами шерстеобразования и о роли в этих процессах различных факторов; породных, возрастных и индивидуальных особенностей организма животных, их физиологического состояния, действия сезона и т.д.

Анализ толщины шерстных волокон показал, что у баранов-производшелей обеих пород она несколько выше, чем у маток, с возрастом этот показатель достоверно повышается. Следует отметить, что у овец полутрубошерстной породы толщина переходных волокон значительно превышает таковую одновозрасгных групп овец типа корридель. Помимо этого наблюдаем обратную корреляционную связь между толщиной шерстных волокон и уровнем глюкозы, МК, у-глобулинов и фосфолипидов у обеих пород, т.е. с утолщением шерстных волокон понижается уровень выше указаных биохимических показателей, что потвер;кдает связь между обменом веществ, качеством шерсти и уровнем шерстной продуктивности.

Толщина шерстных волокон овец (¡л)

Пух Переходный волос Ость

Породь овец Группы животных п М+т 5 О п М±т 5 Су 11 М+т 5 СУ

к в бараны-производители 400 28,24±0,41 8,22 29,10 400 38,78+0,59 11,62 29,97 400 61,77+0,73 14,67 23,70

н

СО Рн и 01 у а я.Я матки 500 27,51+0,41 9,10 33,05 500 37,83+0,49 10,67 28,74 500 58,97±0,63 14,07 23,87

П о 2,5 мес. баранчики - - - - 500 30,06±0,42 9,45 31,48 - - - -

2,5 мес. ярочки 500 27,82+0,42 9,20 33,10

нЛ бараны-производители - - - - 300 28,10+0,52 9,11 32,40 - - - -

о < 5 С, матки — — — 400 28,49+0,45 9,87 34,64 — — —

О. О !<: с 2,5 мес. баранчики - - - - 500 24,67+0,39 8,82 35,72 - - - -

н 2,5 мес. ярочки - - - - 500 25,61+0,35 7,91 30,75 - - - -

Выводы

1. Содержание общего белка в сыворотке крови овец различных половозрастных групп и пород с различной шерстной продуктивностью не обнаруживает статистически значимой разницы.

Межпородные различия в уровне белка крови отмечаются лишь у 2,5 —месячных ярок: полутонкорунный тип отличается более высоким содержанием общего белка.

2. Белковый коэффициент во всех половозрастных группах варьирует в пределах нормы и существенно не отличается. Уровень у - глобулинов в крови самок несколько ниже, чем у самцов. Констатируется относительно более высокое содержание у -глобулиновой фракции у более скороспелых полутонкорунных овец.

В сыворотке крови последних при электрофорезе в ПААГ фиксируется большее число белковых фракций (11), чем у полугрубошерстных овец (8), что может быть связано с диссоциацией и ассоциацией биополимеров крови, модулирующей функциональные возможности (иммунитет, продуктивность и др.)

3. Активность ACT сыворотки крови повышается с возрастом животных, не проявляет зависимости от пола, несколько выше у полутонкорунных овец.

АЛТ, проявляя аналогичную с ACT возрастную динамику, отличается более высокой активностью у самок и у полугрубошерстной породы.

В отличии от трансаминаз активность ЛДГ в сыворотке крови с возрастом проявляет тенденцию к снижению, недостоверно выше у полутонкорунных овец и у самок обеих пород.

4. Констатируются возрастные межпородные различия в динамике энергетических субстратов (глюкоза, лактат) крови. Содержание глюкозы с возрастом уменьшается у полугрубошерстных овец и повышается у полутонкорунных, при этом у ярочек обеих пород уровень глюкозы несколько выше, чем у баранчиков, тогда как у полновозрастных животных наблюдается обратная картина.

Изменения уровня МК • в основном коррелируют с концентрационными сдвигами глюкозы и отражают породные особенности, связанные в основном с продуктивностью.

5. В коже овец обеих пород наблюдается тенденция уменьшения концентрации белка с возрастом. Половые и породные различия недостоверны.

Констатируются достоверные половые различия в активности трансаминаз, в частности ACT: активность выше у самцов всех

половозрастных групп. Возрастные колебания активности трансаминаз отражают, скорее всего, изменения интенсивности азотистого обмена, связанные с возрастным становлением специфических функций.

Половозрастные различия отмечаются также в активности АДГ кожи: у самок обеих пород наблюдается тенденция к повышению активности с возрастом, у самцов-к понижению.

Активность ЛДГ ниже в коже полутонкорунных овец, что в определенной степени коррелирует с данными по крови.

6. Отмечается корреляция уровня глюкозы и МК крози и кожи изученных пород овец: у полутонкорунных содержание энергетических субстратов выше. Возрастная динамике проявляет тенденцию к понижению у самок и повышению у самцов, что связано, по-видимому, со специфическими функциональными перестройками.

Возрастная динамика концентрации МК коррелирует с активностью АДГ, отмечается синхронность колебаний также между породами.

7. Характерные половозрастные и межпородные различия отмечаются в содержании фосфолипидов и их отдельных представителей.

В коже полутонкорунных овец фосфолипиды представлены в больших количествах, чем у полутрубошерстных, что коррелирует с шерстной продуктивностью, имунным статусом (у - глобулинов) и большим числом - белковых фракций крови, а также толщиной подкожной клетчатки.

Содержание фосфолипидов с возрастом у самок полутонкорунных овец падает, а у самцов обеих пород повышается.

Аналогичная картина, за исключением МФИ, ФС, ФЭА наблюдается и у полутрубошерстных овец.

8. Отмечается обратная корреляция между рядом исследованных биохимических параметров крови и кожи (глюкоза, МК, у -глобулины крови, фосфолипиды кожи) с физико-техническими показателями шерсти.

Толщина переходных волокон у полутрубошерстных пород значительно превышает таковую одновозрастных групп полутонкорунных овец. Разница более выражена у взрослых животных. Толщина пуховых и остевых волокон баранов-производителей несколько выше таковых маток.

Использование отдельно взятых метаболических параметров в качестве селекционного теста нецелесообразно, особенно с целью совершенствования типов и линий внутри породы. С этой целью

возможно применение комплекса узловых показателей метаболизма, показывающих достаточную степень корреляции как между собой, так и с рядом продуктивных качеств.

Список использованных сокращений АЛТ — аланинтрансаминаза ACT — аспартаттрансаминаза ЛДГ — лактатдегидрогеназа МК — молочная кислота МФИ — монофосфоинозитиды ЛЛ — лизолецитины СФМ — сфингомиелины ФХ — фосфатидилхолины ФС — фосфатидилсерины ФЭА — фосфатидилэтаноламины КЛ -- кардиолипины ФИ — фосфоинозитиды МДГ — малатдегидрогеназа

NAD — никотинамид — аденин — динуклеотид ЩУК — щавелевоуксусная кислота

Список опубликованных работ по теме диссертации

1. Ulujiüiu [ijiuQ Q-.3m. <uijlpuliiu(] liliuuiljniqwuipnipij ghijji n^uuipGhp]i iSlu^IjIi libüuiupJiüjimliiuQ npii2 gnigmGji;Qbp // U.qpnq|iiniiipjniG, N 3-4, bpUuiG 1998, 214-217:

2. IJmpiuuajiuQ Ч-.Зш'lunjpjuiCi L.4. йпшфп^шйщйЬр]! ириртйшЦтрри-ii[i ¡)шцш!{шО l}{]unjl(i]tquuupiiii(ii дЬц[1 п^шрйЬ^ф diu/linnl: // Llqpnqfi-uimpjnij, N7-8, bpbuiG 1998, t? 369-375:

3. Utupi$ui[ijuiG Q-.3ni., THuiJpjuiG L.4. <iujljml[mfl ЩшшйрршцЬгр! Ipipliqbi ui]iuj]i г^|ишрйЬр}1 i5iu2U)i libüuiup]iüliLuljmQ npiy gniguiQl^Gbp: II Uqpn-qliumip.niG, N9-10, bpUuiü 1998, t2 521-525 :

4. Uiu[iiIiu[)]UiG q..3m. Яшифпфи^щйЬр!! U}UipiuQmlimpjniQp luujlpuljuiG IjliuaiGppiuqhipS l|piiupphqmj[iQ inlmjji ji^fmupGhpli üu^ljniil: // Uqpnqli-minpjniQ, N1, bpbuiG 1999, t? 73-78:

5. Мармарян Г.Ю. Некоторые биохимические показатели крови армянских кроссбредных овец типа корридель. // <4-11-11 qliuiLuljmü iu2luiumui)ijniQQli]i. h(1 uiuршQuiЦшG q[iintupjinQQti]i[i ?mpp, pnqmpljimi I, bpl.uiG 1999, t§ 56-60:

6. Мармарян Г.Ю., Давтян A.B., Амбарцумян A.A. Некоторые биохимические показатели крови армянской полугруб эшерстной породы овец // <4-11-11 qliunuljuiQ ui2luuiumipjniüQbp. libGimipuiGuiljUiü qlimmpjiuGGbpli 2Ш1ЧЬ pnquiplpmS I, ЬрЬшй 1999, t? 91-96:

:qSi{$i i|iIqt]Zi|r|mßiuf) <Mm¿ i{ji gmJßTiqlqn q lummüqdji 1} nqfngfm 'ilmilil nqln?t)T| Sqp ijlnm]\ liqpiu gmf]mß]\rmlqdrnümqmgmq gq ркфдтЬ dgudu 'üjnuQiIubminbo di[lmjimq LjdqgZiIgmßiuß rjijfmfiuibrjrnq ijpbx[ludmdqp } ilulimdmgq JraT|mmmíng lifm ijmmu ifymgmpmp gm p çilubmlqilrmnmïi i]dqftii]m q ifdqçb gijfmlrqßdqg nqfnmlqfimum 'QmtI6dq{i gtfçgmiim ¡mfmiJ6ïiqlqn ïlpiUQiIubmmbo ildqdinqpmdmhi l^ludmdqji '4? dmpdmqmïimmmfnq ilu 'gq рштппфтц tliIqg3gtulMm ф^ддгаИгтаЩптдргипщ

:uiqq gmCdiu|immMd qmg dmdmqmqq ^gmfdiumnrrvq i\dqlqdmüild \ Qmjiïnml\ gifddqq 1Щ fliln 'flhimïj inilqn mljum q?i|p gmfdiuTimgmnlmfimdmfg tfliZmji q grafilm gq piufrnT){i dilqgdgiuffnlm ifilqgtjrafditnnubtninqq дт^тдуйиф

:giufdiuI\mt)mZg

дт1\ттт1ф\ q gmfynnqm duqdml\ ijgau çnufmi[f:>I\qlqn dçnuodubmmbo q flpiuinfmqmRmd ijilqgijlmi ïulqùbm md]i rrnlli dpmfdiublnu i|lmTigm() 'flninilfinxiuinil nilniJMqh ilmrnu 'mqq ijfnilm gmfdiuf]mgrrm[uTfimdiurg Zinlugd 'i iimfifnmf] ilgiufdiu|immilqdp gfm jimf\ nfm i{dqi)i[gmligql| iln i(tjmy-

:mqq фЬцШттп ¿udu g m Ij nuj рт{Й m ngql| i[ïiZmp \ îj m julu Jim gmpfmin üdu 'йдтаИшдт^ттЦифиф gmfdiuirmmq ijdqlqdmbdd q ühiml) g m f d tu !] m g m 111 и ifimdui f g ijï)Zmn q gmfilm lqilt|nmgpiumu qmg 3gq ïqçûmfi pra3gmmmn{?m gfraß :mup i[dqdpn] giJfmfimnmqmuqri tíqdtlmin ügmpZmlTi i{iIqgZi{gm6iuß gmíimi[gi¡c[mngqf\ Zrolu i[Fertig q gmfdm i[ilqgihrm[<u i[Ini[m ïqbi[dui\ phqbmdtígnmi[fi q (hu[m gijfmbqßdqg ilQmbtraÍQ) i[liq[> lidiudm!rdtiul\mnijl| üu|igiud piugnnnnmfm> 1 xmi}iili||ig ddgmmmnlZfl

:pmßmtjifaimiTqfi 'biflnf¡iflb 'aimmfjml 'lnfhiTjlut¡nu(£ 'giaCdiumnmq i¡bxli'dmnfiu üqamd д^ГтбтЬдт}

J^IbTlO 0ФЛТ1

ilqg?t(r]mß[uß ¿uüu r]tnf|m¡¡(i[{tímngqíi tfFi?mji q gmfdm ijdqgilmn[?u pliqbmJdgmm[l\ ц liiTiuiIminftiuf\rmu[t\ Imbuid praqmummfm^

*МтНие qaneriij anedimjiin