Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Научно-технологические основы использования методов фитопатологии и биотехнологии при селекции и семеноводстве картофеля в Приамурье

ВАК РФ 06.01.05, Селекция и семеноводство

Автореферат диссертации по теме "Научно-технологические основы использования методов фитопатологии и биотехнологии при селекции и семеноводстве картофеля в Приамурье"

РГ6 од

На правах рукописи

АННЕНКОВ Борис Глебович, кандидат сельскохозяйственных наук

УДК 635.21:631.52/.53+632.3/.4(571.62)

НАУЧНО-ТЕХНОЛОГИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ МЕТОДОВ ФИТОПАТОЛОГИИ И БИОТЕХНОЛОГИИ ПРИ СЕЛЕКЦИИ И СЕМЕНОВОДСТВЕ КАРТОФЕЛЯ В ПРИАМУРЬЕ

06.01.05 - Селекция и семеноводство

Д И ССЕРТАЦИЯ в виде научного доклада на соискание ученой степени доктора сельскохозяйственных наук

ХАБАРОВСК 1996

Экспериментальная работа выполнена в 19801995 гг. в Дальневосточном селекцентре при Дальневосточном научно-исследовательском институте сельского хозяйства Дальневосточного отделения Россельхозакадемии (г. Хабаровск).

Научный консультант -доктор сельскохозяйственных наук, профессор, академик РАСХН Е. П. КИСЕЛЕВ

Официальные оппоненты: доктор сельскохозяйственных наук, профессор,

академик РАСХН Р. Б. КОНДРАТЬЕВ, доктор биологических наук Р. В. ГНУТОВА, доктор биологических наук А. В. РЕУНОВ

Ведущее учреждение -Дальневосточный государственный аграрный университет (ДальГАУ)

Защита диссертации состоится " < / " 1996 года

в /О часов на заседании диссертационного совета

Д 020. у Ь, 0( при Дальневосточном НИИ сельского хозяйства ДВО Россельхозакадемии по адресу:

680009, г. Хабаровск, ул. Карла Маркса, 107.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ДальНИИСХ. Доклад разослан "Л?" ¿¿¿¿>*сД 1996 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат сельскохозяйственных наук

И. М. Шнидин

0БЩ1Я ХШШРИСША. РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Приамурье - огромная территория, расположенная в средней континентальной части Российского Дальнего Востока. Здесь находится 15 городов, население которых нуждается в стабильном обеспечения картофелем. Однако в связи со стрессовыми почвенно-кяимагичаскимя особенностями региона общая продуктивность местного картофелеводства не отвечает этим требованиям. Одна из серьезных причин, препятствующих получению высоких и устойчивых урожаев - широкое распространение возбудителей грибных и вирусных болезней картофеля.

Новые высокоурожайные сорта, хорошо приспособленные к местным почвенно-климатичвским условиям, высокому природному инфекционному фону и чистосортные, здоровые, высокопродуктивные семена - первооснова интенсификации отрасли картофелеводства.

Зональным центром селекционного обслуживания, первичного оздоровления и семеноводства по картофелю является Дальневосточный селекционный центр при Дальневосточном научно-исследовательском институте сельского хозяйства (ДальНИИСХ) в составе Дальневосточного отделения Россеяьхозакадзмии.

Для повышения результативности хабаровской селекции картофеля и внедрения в производство сортов, более полно отвечающих местным специфическим условиям и современным технологиям выращивания необходима разработка методических вопросов ведения селекционного процесса и организации семеноводства на принципах и способах, отвечав щих современным требованиям.

Теш исследований в 1980-1992 гг. соответствовала государственным заданиям по селекции, семеноведению, оздоровлении и биотехнологии картофеля, а с 1993 г. инвестируется АПК Хабаровского края и Еврейской автономной области.

Педь работы. Разработать надежные методы и способы создания приамурских сортов картофеля а их семеноводства с использованием современных достижений биотехнологии и фитопатологии.

Задачи исследований. Разработать и обосновать приоритетные принципы селекции на резистентность и организации семеноводства картофеля на оздоровленной основе, применительно к местным условиям. Выявить специфику формирования инфекционных фонов я внутривидовую неоднородность местных популяций возбудителей наиболее вредоносных болезней картофеля. Определить дучаше метода фитопатодогической

оценки картофеля в селекции и семеноводства. Разработать и оптимизировать способы клеточной селекция и сортоулучщенля картофеля по признакам болезнеустойчивости. Проанализировать и отобрать болезнеустойчивый исходны® и гибрддный материал для дальнейшей селекция и внедрения в производство. Апробировать и улучшить современные технологии оздоровления сортов и ведения первичного ж элитного семеноводасва.

На защиту выносятся теоретические положения, методические разработки и практические достижения в селекции и семеноводстве картофеля, в том числе: исходные формы для гибридизация и комбинация с еысоким выходом болезнеустойчивых гибридов; схемы и методики фатовато логической оценки исходного и селекционного материала; способы осуществления клеточкой селекции и получения высококачественного оздоровленного исходного саманного материала; схемы производства элиты; перспективные кутантные & гибридные образцы и культивируемые в производства copra, созданные с нашим участием, а гадка внедренная зональная систеш семеноводства на оздоровленной основе.

Научная новизна. В результате многолетних исследований изучены: бдологяя возбудителей, специфика проявления болезней и проконтролирован расовый состав наиболее вредоносных грибных болезней картофеля - фитофтороза и впервые аньторнариоза (синоним макроопо-риоз). На основе подученных линий разных сортов с остаточной инфекцией отдельных вирусов и различных их комбинаций уточнена истинная вредоносность виру сев для картофеая в Приамурье.

Цра научении в условиях Хабаровского района более 1,5 тыс. сортообразцов картофеля каровой и отечественной селекции выделены и рекомендована для селекционного использования наиболее устойчивые формы и дучшиэ доноры признаков болезнеустойчивости, а такав комбинации сяреднвааия с высоким выходом резистентных хозяйственно-ценных гибридов. Разработаны, усовершенствованы и апробирована эффективные методики фшеопатояогической оценки, применительно к этапаы традиционного селекционного процесса; обоснованы принципы и способы проведения клеточной селекция, биотехнологии ыеристешо-тканевого курса лечения сортов картофеля и технологии ведения первичного, элитного и индустриального семеноводства на оздоровленной основе.

Практическая значимость работы и внедрение гссявдозаяяй. С нашим участием создана новые болезнеустойчивые сорта - Милта, Амурац, Евгирия, Чвргая, Даяьвас: сорт Евгирия с 1994 г. включен

в реестр по Хабаровскому краю, по Аадурпу ведется промышленное семеноводство и имеются производственные посевы, а Чергая и Дальвас проходят Госсоргоиспытание. Для селекционной практики рекомендованы исходные формы картофеля я гибридные комбинации. Предложены способы лабораторной фягопатояогяческой оценки я выделения технического токсина альтернариоза для биотехнологических целей, оздоровления сортов картофеля и создания большей гетерогенности моно-меристомного материала, в пределах фенотипа. Организована зональная система научного бззвирусного семеноводства картофеля и впервые через меристемно-зжаневую культуру освобождены от вирусной инфекции сорта хабаровской селекции - Пионер, Даурский, Мариелла, Мяяга, Пряамурзц, Амурец, Евгирия, Дальвас и Чвргая. Вяегодно производятся свыше 50-75 тыс. клубней оздоровленного исходного матер®да 15 сортов картофеля для обеспечения элитного семеноводства в НИУ к эпаисозах систеш ДВО РАСХН. Внедрено использование иммуно-ферментных диагностикумов вирусов в процессе селекции, оздоровления и ведения первичного семеноводства картофеля. Для объединения усилий в борьбе с вирусами картофеля на российской и китайской сторонах Амура налажены научно-методические и производственные связи с лабораторией безвирусного картофеля Северо-Восточного аграрного университета в г.Харбине (КНР).

Подучено авторское свидетельство на сорт картофеля Евгирия и положи-гадь но е решение на патенты по выделению технического токсина возбудителя альтернариоза картофеля для биотехно логических целей и по оригинальному способу клеточной селекции картофеля. Материалы исследований отражены в 9 заключительных научных отчетах. Всего опубликовано 70 печатных работ, из них по теме диссертации - 59, 51 из которых приведены в диссертации.

Ааробадкя работа. Результаты исследований додояены и обеуадены на зональных координационных совещаниях оотрудаиков НИ7 Дальнего Востока (Хабаровск, 1981, 1982, 1983, 1985); Всесоюзной школе-семинаре молодых ученых "Актуальные вопросы теории и практики защиты с.-х.растений от вредителей и болезней (Сухуми, 1982); двух семинарах-совещаниях селекционеров в ВЙРе "Новые вида и сорта картофеля зарубежных стран - генетические источники высокой продуктивности и устойчивости к патогенам" и "Селекции высокопродуктивных сортов картофеля, устойчивых к болезням и вредителям" (Ленинград-Пушкин,, 1987, 1988); научно-производственном совещании "Селекционно-гене-

тяческие, фазколого-биохимические и технологические аспекты интенсификации производства картофеля (Уфа, 1939); Всеоаюзнои семинаре на ВДНХ "Соверкваствовакие системы семеноводства картофеля в СССР" (Москва, 1989); Всероссийских конференциях по проблемам фитопатологии и вирусологии в НМ дао РАН (Владивосток, 1986, 1990, 1992); Проблемном совете Сибири и Дальнего Востока по селекции,биотехнологии и семеноводству (Хабаровск, 1991); совещании ВАСХНШГ "Технология производства семенного безвирусного картофеля на индустриальной основе" (Хабаровск, 1989); годичных собраниях и научных сессиях ДВО РАСХН "Совершенствование селекции с.-х.культур на Дальнем Востоке" и "Технологии производства овощннх культур и картофеля в Дальневосточном регионе", "Аграрная реформа, изменение структуры производства АПК Дальнего Востока" (Хабаровск, 1994, 1995, 1996); региональном совещании по актуальным вопросам защиты растений на Дальнем Востока (Камень-Рыболов, 1994); на двусторонних китайско-российских семинарах в Хейдуддзякекой с.-х.академии, СевероВосточном агроуниверситете и Цзилинском НИИ овощей и картофеля (Харбин, 1989, 1991, 1993, 1995; Чакьчунь, 1995); Съезда сведущих людей Приамурья: секция - сельское хозяйство (Хабаровск, 1994); Юбилейной научной сессии, посвященной 60-детаз ДальНИйСХ (Хабаровск, 1995).

УСЛОВИЯ, МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДИКА ПРОВЕДЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЙ

Кршат Приамурья в основном континентальный, но с муссонннми признаками. Местные условия на отвечают биологическим потребностям культуры картофеля (тяжелые медленно оттаивавшие весной почвы, продолжительные летние периоды засухи и избыточного увжаянения, резкие, суточные температурные перепады и муссокные ливневые осадки, высочайший природный инфекционный фон, суровые условия зимнего хранения) .

Средний многолетний год (табл.1) - с сухой и каркой первой половиной вегетации, с влажной второй половиной лета и с "золотой" оевнм). Но фактически только одна год из десяти приближенно напоминает этот статистический результат. Девять из десяти диаметрально разнятся и специфичны за счет различной перекомбинации погодных условий. Это мешает плановому ведению отрасли картофелеводства. В таких условиях гарантированы от провалов урожайности только те сорта, которые прошли в местных условиях проверку на киэнеспособ-

нооть во все эти года.

Наиболее продуктивными в условиях Приамурья будут местные селекционные столовые сорта среднепоздней группы, но с хорошим стартозым ростом и ранним началом формирования клубней, с высокой комплексной болезнеустойчивостью, позволяющей максимально долго сохранять активный листовой аппарат, одинаково приспособленные к жаре, засухе, избытку влаги, к выращиванию при широком и узком 1лездурядьи, с мощным габитусом и имеющих много ровных крупных кдуб-неЭ.

Таблица I

Среднвмяогодетние метеорологические показатели вегетационного периода в Приамурье

Месяц Температура воздуха, °С Осадки, ш

Хабаровск Биробиджан Благове- Хабаровск Благове-

щенок щенск

Май ПД 10,8 10,9 53 46

Июнь 17,4 17,0 17,8 74 102

Июль 21,1 21,0 21,4 III 129

Август 20,0 19,8 19,1 118 120

Сентябрь 13,9 13,6 12,2 82 77

Исследования природных популяций рас патогенов, оценки на устойчивость к фитофторозу, альтернариозу я вирозам осуществлялись на базе селекционно-семеноводческих посевов отделов картофелеводства и биотехнологий ДадьНИИСХ (г.Хабаровск - пос.Восточный -с.Чистополье), с использованием материально-технических ресурсов и методик Дальневосточного селекцентра (ЕЛ.Киседев и др., 1990; Б.Г.Анненков и .др., 1990).

Фундаментом наших исследований явились стажировки 80-х годов з ведущих НИУ страны по специальностям: традиционная и новейшая селекция (ВИР, ВНИИКХ, ТСХА.), фитопатология и микробиология. (ВИЗР,

ЕеяНЖПО, ВНШС), семеноводство, оздоровление и вирусология (ВЯКИКХ, ЕЛИ ДВО РАН), клеточные технологии и генная инаенерия

( ШР РАН, ИЦГ СО РАН).

За года исследований (1980-1995) лабораторную и визуальную оценку в пола на фкгофгороз, аяьтернарноз и вирусы прошли около 9,5 тыс. образцов картофеля, проанализировано на фитофтороустойчи-

еосгь свыше 50 тыс. сеянцев на ранних этапах развития. Применялась общепринятая технология возделывания картофеля на грядах шириной 140 см с однострочной посадкой. Размера делянок, биометрические и фенологические наблюдения и учеты отработаны для условий Приамурья я проводились со схемам и в сроки, принятые в ДальНШСХ (Е.П.Киоелев, 1980) в соответствии с "Методическими указаниями по технологии селекционного процесса картофеля" (М., 1930).

Базой для дальнейшего совершенствования биотехники меристам-ио-тканевого лечения картофеля от хронических инфекций и сошклс-нального сортоулучтения послужили методические разработки биотехцентра ВНШКХа (Л.Н.Трофимец и др., 1985, 1988; Р.Г.Бугенко, Л,М.Хромова, Г.В.Седнина, 1984), а основой всех питательных сред -минеральные ингредиенты по прошей Мурасиге и Скуга (1982).

Цифровые данные обрабатывались по методике вариационной статистики (И.Й.Минкевич, Т.М.Хохрякова, 1968; Е.А.Доспехов, 1979). Приемы ядаятификации грибных рас и Й -генов у картофеля подробно описаны в кандидатской диссертации (Б.Г.Анненков, 1985). Все полевые фитояатологические оценки осуществлялись по пятибалльной шкапе, наиболее удобной для селекционера-практика. Для совмещения результатов с 9-балльной международной системой нами разработана специальная таблида 2.

Таблица 2

Шкала оценок никозоустойчивооти ботвы в поле

Степень

поражеаия ¿отвы

Оценка поранения Уценка .уатоЗР

___'ЩВОСТЯ_

Степень устой-

6-б8лль~л 9-балль- 5-баляь- 9-ба- чивостк

над шкала аая Вая - шкала

лльная шкала

Отсутствует 0-0 0 - - - непораженный

Очень слабое 1-10 I I 5 9 высокоустойчив

Слабое 11-25 2 3 4 7 устойчив

Среднее 26-50 3 5 3 5 слабоустойчив

Сильное 51-75 4 7 2 3 восприимчив

Очень сильное 76-100 5 9 т X I сильно восприимчив

В ходе исследований усовершенствованы методики лабораторной оценки картофеля на болезнеустойчивость. Для точной вирусологической диагностики освоен современный иммуно-ферментный анализ (Р.З.Гнутова, 1985) с использованием гест-наборов НИИКХа по 12 ' наименованиям вирусов и бактерий (Б.А.Писарев, Л.Н.Трофимец и др., 1991).

В селекции на болезнеустойчивость и при создании качественного семанного картофеля в Приамурье необходимо учитывать местную специфическую то на то логическую ситуацию. Главные грибные болезни здесь фагофтороз и альтэрнаряоз, вызывающие пятнистости листьев к способные при определенных условиях полностью уничтожить картофельную ботву задолго до естественного ее отмирания. Наряду с ними вредоносны, инициируемые разнообразными фитопатогевиыми вирусами, вирозные дегенерации ботвы и клубней. В пограничном Приамурье сорта картофеля должна также обладать устойчивостью к раку и нематодным инвазиям (Е.В.Сущинская, 1967; ЕЛ.Киселев, 1980; С.И.Фролов, 1983; Б.Г.Анненков, 1985).

исследований в сильной степени поражал картофель в годы о холодным н влажным летом (1981, 1984 и 1987 гг.). Первые пятна болезни на листьях в такие годы отмечаются уже в начале второй декады июля. Значительные вспышки фгтсфтороза происходят на олабоустойчивых средяеракпих и среднеспелых сортах в третьей декаде июля - первой декаде августа. В-дальнейшем, если показатели температуры и влажности воздуха благоприятствуют биологическим потребностям паразита, болезнь быстро прогрессирует, а к 15-20 августа поражение неустойчивых сортообразцов картофеля достигает 5 баллов (полная гибель ботвы), а более устойчивых - 1-3 балла. Однако в любой год во второй половине августа бывают сухие периода с температурой воздуха до плис 35-37°С. В этом случае развитие болезни замедляется или полностью прекращается. Среднеспелые и срвднепоздние сорта картофеля с высокой полевой устойчивостью, еще не затронутые болезнью к се-редаае августа, в последующем могут вообще не поражаться до уборки урожая. В результате депрессия эпифитогий в Приамурье возникает

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Изучение наиболее распространенных и вредоносных болезней картофеля в Приамурье

период наших

барьер, на пути инфекции от ботвы к клубням.

- Ранние сорта в эпифитотийные года к началу августа успевают сформировать определенный урожай клубней, и поэтому им в местных условиях при полевой оценке зачастую присваивает статус относительно .устойчивых. Искусственные лабораторные заражения или испытания на жестком инфекционном фоне опорного пункта ВНИИ фитопатологии (о.Сахалин), как правило, это опровергают.

При разработке стратегии селекции картофеля на болезнеустойчивость, проведении селекционно-фитопатологнческих оценок и для понимания механизмов болезнеустойчивости у испытуемых образцов необходимо знание расового состава возбудителя заболевания.

На Дальнем Востоке углубленное изучение состава возбудителя фитофтороза было начато в 60-е годы. Исследования проводились на Сахалине с 1962 г. (Г.И.Локтина, 1969), в Приморье - с 1963 г. (Н.М.Коняева, 1968; БЛ.Киселев, 1930), з Пркавдрье _ с 1954 г. (В.Г.СторокбНко, 1965) и продолжены Е.В.Золотаревой (1970). Были выявлены разнообразные расы, в т.ч. впервые открыты очень сложные расы на Сахалине (А.И.Чумакова и др., 1978), Однако повсеместно были наиболее распространены разы 4; 1.4; 0 и 3.

В связи с сортосменой и возможным изменением разового состава Приамурской популяции фитофтороза возникла потребность в изучении ее современного состояния. В начале 80-х годов первоочередными наиболее распространенными (полевыми) расаш гриба была О, I, 4 и 1.4 (Б.Г.Анненков, 1982, 1985) а связи с широким культивированием старого сортимента картофеля с генотипом расоспэцифичвской фитофтороустойчивости Дд (Пионер) и Н^ (Столовнй-1Э, Гатчинский), и который в настоящее время выведен яз районирования. К концу 80-х годов, после того, как новый интенсивный сорт Невский

В^) занял в Приамурье 70? площадей картофельных плантаций, статус основной полевой приобрела раса 1.2. Другие расы стали появляться несколько позднее. Снижение инфекционной нагрузки рас о генами вирулентности I, 3 и 4 обусловило в последние годы воз-растение уровня резистентности к фитофторозу в покезых условиях

у новых сортов хабаровской селекции: Амурец, Даяьвас йвгярая £,), имещйх пока небольшое распространение. В районе Хабаровска расовый состав более разнообразен, что обусловлено широким спектром культивируемого здесь сортимента на больших площадях частного сектора.

Каыл обнарунена заметная связь между частотой присутствия . рас фитофтороза и возделываемыми сортами картофеля в Приамурской зоне. В связи с этим мы согласны с мнением известных отечественных селекционеров и фитопатологов (И.М.Яшина, 1968; С.М.Букасов, А.Я. Камераз, 1972; К.Б.Попкова, 1972; Е.П.Киселев, 1980 и др.) о бесперспективности селекцгш с упором только на сверхчувствительность. Наиболее надежную заздсту от фитофтороза в условиях Приамурья обеспечит сочетание сверхчувствительности и высокой полевой устойчивости. Чем больше различных генов устойчивости (больших и малых) алеет растение-хозяин, тем меньше вероятность, что патоген сможет быстро подавить их. Расширение дисперстно-куяьтгшируемого по территории сортимента до 25-30 и более наименований будет способствовать улучшению фитопатологической обстановки на картофеле в Приамурье. Б основном за счет замедленного распространения инфекции по сортам из-за их различного иммунного статуса и несовпадения стадий наибольшей восприимчивости к паразитам.

Альтаонариоз (синонимы - мавроспориоз, сухая концентрическая пятнистость, ранняя сухая пятнистость дистьев) - широко распространенное грибное заболевание картофеля в Приамурье. В местных условиях альтернариоз даге вредоноснее, чем фитофтороз, так как проявляется ежегодно и в ранние сроки.

Заболевание вызывается грибом Лёбегнали'Я название которого установлено в 1969 г. на XI Международном ботаническом конгрессе в Сиэтле (США). В отечественной научной литературе часто встречается под старым названием - (Мас2йф>С'г/ит

Патогенные свойства паразита в значительной мере связаны с продуцированием так называемой "альтернариавой кислоты", которая, обладая сильным фитотоксяческям действием, диффундирует внутрь живых тканей картофеля и убивает их, подготавливая субстрат для распространения и спороношания гриба.

Гриб хорошо растет на искусственных органических питательных средах и имеет слаборазветвленнкй септированный мицелий, состоящий аз тонких бесцветных или дымчатых гиф. Половой процесс у гриба отсутствует, а его способность к образованию анастомозов - источник новых форм. Возбудитель способен развиваться при широкой амплитуде температур (6-36°С), что позволяет альтернариозу ежегодно проявляться на картофеле. Наиболее оптимальная температура для развития патогена - 25-30°С.

Нами изучался расовый состав возбудителя и симптоматика заболе- -

вання на картофеле (Б Л" .Анненков, 1982, 1987, 1990). В популяции аяьтернарноза доминируют опороносяцие и агрессивные расы, а слабоагрессивные и со стерильным мицелием биокиш содержатся в небольшом количестве. В зависимости от года присутствие на сортах Пионер и Приекульсяяй ранний, хорошо спороносадей расы М-40 составило 54-60$, высокоагрессизЕ.ой расы М-30 - 22-31%, прочих рас -6-10?. Особенностью местной популяции гриба ваялось отсутствие в ней расы М-78.

Факт высокой насыщенности полевой популяции расами М-40 и М-30 согласуется с высокой вредоносностью болезни на Дальнем Востоке. Доминирование рас М-40 и М-30 в приамурской попудядиа объясняется их высокой конкурентной способностью. Они характеризуются большей приспособленностью s местным условиям, коротким инкубационным периодом, высокой спорогенностью и агрессивностью, что и обеспечивает ежегодное развитие альтернариоза на картофеле в той или иной степени.

Нами обнаружено четкое влияние растения-хозяина m частоту встречаемости рас альтериариоза (табл.3). Сорта картофеля с высокой полевой устойчивостью (Бяния, Дезире, Еза, Пажр, Эрдайн и др.) в начальный период заболевания поражаются в первую очэрздь высоко агрессивной расой М-30 (62$). Значительно меньше на таких сортах встречается среднеагрессивная раса М-40, а снабоагрессквная раса М-69 вообще не отмечена.

Таблица 3

Присутствие рас альтернаряоза ез сортах картофеля с различным уровнем болезнеустойчивости, %

Степень болезнеустойчивости сортов M-IO М-30 М-40 М-69

Устойчивые 4 62 34 0

Слабоустойчивыв 5 43 50 2

Восприимчивые 4 24 61 II

Первичным источником инфекции альтернариоза "является мицевяй и хламидоспоры на перезимовавших растительных остатках. В условиях Приамурья возбудитель болезни переносит зимой температуру до шву с 40°С не теряя жизнеспособности. Заболевание распространяется с помощью булавовидных конидий, образующихся на коввдиеносцах и имеющих

до 10 поперечных и нескольких продольных перегородок. Разносятся конадии ветром я, попав на здоровые листья картофеля, при наличии капельной влаги, через 1,5-2 часа прорастают. Ростовые трубочки через устьица проникают в ткани листа, разрастаются в грибницу," вызывая отмирание тканей растения.

Многолетние наблюдения за развитием альтернариоза на картофеле показали, что форма проявления болезни в значительной степени зависит от гвдрогермическях особенностей вегетационного периода. 3 года с сухим, жарким летом (1980, 1982, 1995 гг.) первые признаки заболевания появляются в середине июля на нижних листьях. Но в засушливых условиях развитие заболевания идет замедленно. Поражение сорта картофеля Пионер в 3 балла наблюдалось только к 20 августа. Альтернарнозныа пятна на листьях в такие годы сухие, незначительные по площади а имеют хорошо выраженную концентрическую зональность.

В года с избыточно-внажннм периодом вегетации (1981, 1984, 1985, 1987) первые признаки болезни проявлялись в начала июля, но нарастание заболевания проходило медленно,в связи со значительным ослаблением солнечной радиация, высокой влажностью я дефицитом летних температур. Такие погодные условия, как правило, способствуют интенсивному росту мицелия, но задерживают спороношеяяе гриба. Поражение сорта Пионер, равное 3 баллам, наблюдалось я 10 августа. Альтераариоз, вызывающий к этому времени сильное поражение листьев у некоторых неустойчивых сортов, исключает развитие на них фято-фтороза. Особенно интенсивное развитие альтернариоза (одновременно с развитием фитофтороза) наблюдалось в период с 10 по 20 августа, полностью уничтожая ботву неустойчивых сортов. К этощу времени накапливается достаточное количество инфекции, а влажная погода способствует прорастании конидий, заражению растений и интенсивному росту зон поражения.

Характер поражения ботвы в избыточно-влажные года существенно отличается от симптомов поражения в сухие года. Альтернариозные пятва на листьях в первой половине августа влажные и значительные по площади, часто с отсутствием концентричности, наблюдаемой в сухие годы и вызываемой суточными колебаниями влажности и различной янгенскзностьр роста гриба во времени. Во влажные годы наблюдается поражение альтернариозом черенков листьев, стеблей и ягод у картофеля.

В отдельные года (1983 г.) при чередовании солнечных и дождливая, но теплых периодов в июне-августе наблюдалось раннее заражение

(конец ж>ня) енотового аппарата. Пятяа многочисленные, крупные, сухие округло-угловатой формы с наличием внутри нескольких концентрических кругов. Они постепенно разрастаются и спеваются, полностью уничтожая в начале августа аистовые пластинки растений.

Многие даяьневосточаые фатопатояогн считали, что альтернариоз (макроспориоз) в местных условиях поражает только листовой аппарат.

Еамг выявлено сильное поражение клубней при "теплом" хранении (14-16°С), которое проявляется в виде округлых бурах язв. Товарный вид таких клубнеЗ значительно снижается, а потери достигают 15-20$. Заражение клубней происходит за счет инфекцш, попадавдей на них в период уборки.

Вирозы (вирусы картофеля). В Приамурье первое описание одиннадцати вирусных болезней картофеля приведено Н.ИДбрамовым (1953), а с 50-х годов - сотрудниками ЕЛИ ДЭО РАН (В.Г.Рейфман, 1966, 1973). На картофеле выявлено около .двух десятков наименований фитопатоген-ннх вирусов, вироидов и мякопяазм. Широкое распространение получили мозаичные вирусы X, .Г , М, 7, по отдельности обладающие умеренной или незначительной вредоносностью, но при тязеиой комплексной инфекции могущие снизить урожайный потенциал сортов в 2 раза (Б.Г.Анненков , 1990).

О вредоносности мозаичных вирусов говорят результаты выполненного нами вегетационного опыта (табл.4). Изучали следующие варианты: № I - полностью оздоровленные (безвирусные) растения; й 2 -линия регэнерант с остаточной инфекцией широко распространенного вируса X; й 3 - синтетически составленная популяция растений-реге-нерантов, несущих вирусы X, £ , М, У в различном сочетании, которая доякна была в какой-то мере отражать сильно запущенный, зараженный вирусами на 100$ з различной перекомбинаций, семенной материал в производстве.

Несмотря на мерисгемное омоложение, лнфвцированные растения уже в первый гол (через месяц после посадки) проявили симптомы болезней. Масса ботвы и высота растений перед уборкой были практически одинаковы во всех вариантах опыта. Однако у.растений, инъецированных вирусом X, в сравнении со здоровыми наблюдалось некоторое снижение количества клубней и юс размера, массы корневой системы, площади листового аппарата к интенсивности фотосинтеза. Это привело к снижении урожайности на 16$.

Еще более негативное воздействие на растения кархофздя сорта

Влияние вирусоносительотва на продуктивность растений картофеля сорта Пионор, рэгеиированных из меристем (ДальШйСХ, вегетационный опыт, 1986 г.)

Варианты

Урожай клуб- Кол-во

над!

г/сосуд

7» к

конг-

ррлю

клубней

Масоа одного

Развитие ботвы пе-оея уборкой_

шт./со- клубня, средн. сырая пло-суд г высота масса,щадь раста- г/со- линий, см суд стьев,

Сырая масса корней, г/ео-суд

Визуальная оценка на вярозы

ботвы

япубнёа

!1ЖН(конт- 562'5 100 39,0 роль)

Растения с вирусом X 475,0 84 35,0

Смесь растений с 303,8 54 24,3 различными вирусами (X, $ , М, У)

НСР,

05

58,6

14,4 54,5 302 100 90

13,6 55,3 308 89 75

12,5 53,6 299 64 57

Листовая пла- ^^ н стшша ровная, ^^Г' ^ темно-зеленая ^ичнм

Листовая пла- Кдубни стянка ровная, ровные, зелено-желтая круглые, типичные

Сильная крапча-1/5 всех тость, морщи- клубней нистая мозаика,корявые, скручивание и отдельные карликовость ПЙГ,ЙТЙгт0_ наказных раст姮^®

Пионер оказывала комплексная вируоная инфекция, которая снижала урожайность почти вдвое.

Самым вредоносным для каргофеяя в Приамурье оказался уиикаиь-ннй патоген-вирокд верэтеноЕкдноати клубней ОШКК), обладающий свойствами свободной нуклеиновой кислоты. При массовом заражении некоторых восприимчивых г неустойчивее к ВВКК сортов, особенно при сочетании с другой комплексной вирусной аьфакцеай, урозайноогь падала в 5-7 и более pas. Црл осзоекки биотехники ыеристешого лечения и ведения разшонения на оздоровленной основе нам удалось реанимировать и успешно куяьзжвирозать з маетные условиях некоторые интересные сорта. Их долгонегяю и элитному ейменоаодству способствует технология возделывания на гряде шириной 140 см с одворядаовш размещением по центру гряда. В stom случае механическое распространение вирусной инфекции в посадках вдет в 6-8 раз медленнее, чем при узкорядном (гребни 70 см) способе выращивания картофеля.

Разработка эффективных методик фитопато логической оценки картофеля

Успешному созданию новых сортов картофеля, устойчивых к грибным заболеваниям, во многом способствуют производительные и сравнительно точные метода фитопатологической экспертизы. Классический селекционный процесс предполагает очень большие объеш проработки материала, особенно в подевых первичЕш: питомниках. Для его ускорения наш усовершенствованы методики лабораторной фигопатояогя-чесхой оценки и экспресс-браковки неустойчивых гибридов. ййшаиФшда?

Нами разработан и использован простой, точный и производитедьанй способ лабораторной оценки селекционного материала на фатофторо-устойчшзость по отделенным листьям (Б.Г.Аннэнжов, 1984, 1985). Основан он на капельном заражении зшстьев дзуш инфекционными суспензиями: одна - на основе простой расы (1.4 иш 1.2) с еысокоЗ концентрацией (25 конидий в поле зрезик макроскопа при увеличении 100х) для обнаружения непораааемш; образцов широко распространенными полевыми расами; другая - на основе сложной расы, вкняащей гены вирулентности 1.2.3.4 и т.д. (концентрация 10 конвдяй) для выявления уровня полевой устойчивости к широкому комплексу рас патогена. . Учитывают результаты заражения на пятна сутки.

Каш установлено, что иккубаццошшй период и размер поражения

ка листе взаимосвязаны - чем больше размер поражения, там короче ■ иккубационаый период и наоборот.' Спороношениз гриба обычно пропорционально зоне поражения. Поэтому предложена балльная шкала учета. (табл.5). Доказана высокая идентичность показателей фитофгороус-тойчивостл (г - 0,975+0,041), определенных способами индексов и в баллах.

Таблица 5

Шкала балльной оценки фитофтороустойчивости листьев картофеля

Балл Класс пораяания устойчивости

Характерные признаки

0 нешранаешй*

1 очень устойчивый

2 устойчивый

3 слабоузтоЗчивый

4 восприимчивый

очень восприимчивый

Следа поражения отсутствуют иди точечный некроз в границах инфекционной капли (3-7 мм), спороношение отсутствует (0).

Поражение превышает границы инфекционной капли незначительно (8-12 мм), спороношение слабое (0,5-1)

Зона поражения превышает диаметр инфекционной капля в 2-3 раза (1317 мм), спороношение - 1-1,5 балла

Зона поражения превышает диаметр инфекционной капли в 4 раза и равна 18-22 мм, спороношааиэ среднее (1,5—2)

Диаметр поражения - 23-27 мм, спороношение - 2-2,5 балла

Диаметр поражения - 28-32 мм, спороношение сильное (2,5-3)

2 Недоражаэмый - определенной расой идя набором рас

Прэдяагаешя шкала универсальная. Ев можно пользоваться для определения сверхчувствительности, обусловленной Я -генами и полевой устойчивости, контролируемой полигонами.

Лабораторная опенка каРтосБеяя на ,.устойчивость к альгесна-ряозу сцосдбом куриального заражения отделенных листьев. 3 оценка сэлекционного материала на аяьтэрнариоз, так же как и при испытаниях на фитофюроустойчивость, самым надежным принято считать по дезой метод (Ю.А.Алексаядров, 1968; Н.А.Дорожкин и др., 1977; Б.Г.Анненков, 1985, 1990). Однако в связи с неодинаковыми

метеорологическими условиями дня развития Оодезни и неравномерным распространением заболевания на поле, объективные показатели устойчивости можно подучить только через дза-гри года. В селекционной практике нередко возникает необходимость определить устойчивость к аяьтернариозу в течение одного года. Нами разработан наиболее простой и достоверный способ искусственного зара«енгя альтер-нариозом отделенных листьев, удобный для использования в комплексной селекции на болезнеустойчивость, поскольку мокет осущесгвлягься параллельно лабораторной оценке на фитофтороустойчивость (Б.Г.Анненков, 1984, 1985; Е.П.Кисалев, Б.Г.Анненков, ISS5).

Важный показатель устойчивости к патогенам - отношение ¡астений к инфекционной нагрузке. Поэтому заражение листьев проводится параллельно двумя суспензиями расы М-40: одной - о низким содержанием спор гриба (2-3 конидии в поле зрения микроскопа при 120-кратном увеличении), второй - с высокой концентрацией (20-30 конидий). Инфекционную суспензию готовят перед самым заражением.

Метод работоспособен только при проведении. ежедневных равномерных увлажнений поверхности инфицированных листьев из пульверизатора для микрообъемного опрыскивания.

Учет поражения осуществляется на шестые сутки после заражения листьев. Показатели, необходимые для расчета среднего балла поражения, определяют по шкале, разработанной наш s ДальЕИИСХ (табл.6).

Средний балл поражения расчитывается по кашей формуле:

I = (а1+а2*а3* +ar) + (вт^-в3... + ад)__

в.

где I - средний балл поражения:

а - балл поражения листа пря заражении суспензией о низкой концентрацией конидий,

в - балл поражения листа при заражении суспенеией a высокой концентрацией конидий,

к.- число листьев, взятых для заражения.

Селекционные образцы в зависимости от величины среднего баапа яорааевия дифференцируют по степени устойчивости следующим образом:

Балл: поражения

ст О до 1,0

1,1-1,5

1,6-2,0

2,1-2,5

2,6-3,0

сзшпе 3;0

Степень устойчивости очень устойчив средне устойчив слабо устойчив слабо восприимчив средне восприимчив очень восприимчив

Лабораторный метод, предложенный нами, сравнительно прост и достоверен, и монет применяться также в генетических исследованиях по изучению наследования полевой устойчивости к альтэрнариозу.

Таблица 6

Шкала балльной оценки листьев картофеля на устойчивость к альтернариозу

Балл поражения Форма поражения Характерные признаки поражения

»__1

Следы поражения отсутствуют

Точечный некроз или поражение меньше диаметра инфекционной капли (2-4 мм;

Зона поражения совпадает с границами инфекционной капли (5-7 мм)

Зона поражения превышает границы инфекционной капли незначительно (8-10 мм)

Диаметр поражения - 11-13 мм, заметна двойная зональность пятна

Диаметр поражения - 14-16 мм, заметна тройная зональность пятна

Примечание. Пунктиром отмечены границы инфекционной капли, диаметр 5 мм.

Способ выделения токсина из возбудителя альтешариоза. Из фнто-

патологической практики известно (Мартин, Стробеп, Шепард, 1978; Сгробег, 1982; Р.Г.Бутенко, Л.М.Хромова, Г.В.Седнина, 1984; Н.Г. Иванова, 1987), что изолированные токсины некоторых возбудителей болезней можно применять в качестве селеклирупцего фактора в клеточной о а лекции и в качестве .диагностического теста при оценке устойчивости растений к болезни по функциональным физиологическим показателям.

Нами (Б.Г.Анненков, 1994, 1995) разработан способ получения сублимированного технического (неочищенного) токсического препарата из гриба •./?. So0a.ai для использования в селекции картофеля на болезнеустойчивость к альтернариозу.

Гриб при очень быстром росте на общеизвестном ЕГА продуцирует с диффузией в поверхностный оно2 питательной среда, фитотоксическаи продукт красно-бурого цвета. Поэтому процесс наработки токсина можно контролировать глазомерно.

Расплавленную и автокяавированиую КГА разливают на 1/3 высоты стандартных стерильных чашек Петри в микробиологическом боксе. Сразу после застывания среда в центр чашки помещают крупный кусочек мицелия и инкубируют в термостате при плюс 28°С. Гриб покрывает всю поверхность среда в чашках на десятые сутки. В качестве продуцентов токсина используют популяцию агрессивных изодктов, выделенных с высокоусгоЗчивых к болезни сортов.

Для получения вытяжки токсина из мицелия и верхнего сдоя питательной срады применяют стерильную дистиллированную зоду, заливая 20-суточныв культуры гриба по 25 мл на одну чашу. При этом не требуется соблюдения особых условий стерильности, поскольку в зрелой культуре накапливается достаточное количество токсина, обладающего широким бактерицидным, фунгястатичнкм и гидролитическим действием.

Максимальный выход сухого технического токсина (свыше 100 мг на чашку) удается подучить через десять суток лосзе заливки водой. Любые другие режимы вытяжки токсина водой из мицелия и среды, использование суперрасгвориталей (ацетона, гексана) менее эффективны.

Для выделения токсина кулыураяьную жидкость сливают до краев в крупные фарфоровые глазированные пяошни и выпаривают при 95°С на водаяых банях. Сухой остаток темно-бурого,почтя черного цвета счшдают металлическим шпателем.

Применяя нашу методику, можно быстро и в любых количествах получать токсичный препарат в лабораторных условиях без наличия специального биохимического оборудования для очистки. При эхом

неочищенный препарат, содержащий токсин я другие'продукты жизнедеятельности гриба, предпочтительнее .для селекционного использования, поскольку его действие на растительные клетки более тождественно влиянию живого патогена.

Токсин адьтеонариоза для опенки и отбора устойчивых сеянцев ■в стадии семедных проростков. Барааать семенные проростки в чашках

Петри живым патогеном, как это дадают в селекции на фитофтороус-тойчивость (Н.Я.Лебедева, В.А.Лебедев, 1976; Б.Г.Анненков, 1982, 1985), при селекции на устойчивость к альтернариозу, неприемлемо. При инфицировании семенных проростков суспензией конидий гриба живые (устойчивые) на десятые сутки посла инокуляции (табл.14) в дальнейшем погибают, поскольку расоспецифической устойчивости к альтернариозу у культурного картофеля не обнаружено. Развитие гриба на проростках невозможно остановить просушиванием иди прогреванием. Поэтому такой прием заражения альтернариозом ограниченного количества семяа следует рассматривать как исключительно рекогносцировочный, перед выбором устойчивых комбинаций для посева и получения сенцев. Для оценки и браковки гибридных комбинаций по устойчивости к альтернариозу на ранних стадиях перспективно использовать не живой возбудитель болезни, а токсин, выделенный из гриба, который добавляют в агаризованный "голодный" или минерализованный водный субстрат для прорацивания семян в чашках Петри (Б.Г.Анненков, 1995).

Наиболее контрастные результаты для оценки комбинаций по уровню болезнеустойчивости получаются при концентрации токсина - 100 ыг на литр субстрата я анализе результатов проращивания на седьмые сутки после посева семян. При этом варианте, норма явно развиващкх-ся проростков (без поражения корешка) было у самоопыяенных потомств Приекульского раннего - 39$, у Невского - 67$. Для отбора высокоустойчивых сеянцев концентрацию токсина в субстрате желательно увеличить до 0,5-1 г/л.

Методика искусственного формирования гибридных семей сеянцев картофеля с повышенным уровнем устойчивости к альтернариозу достаточно простая. Токсин растворяют в воде с агаром (10 г/литр), нагревают до 95°С и разливают в стерильные чашки Петри. После застывания субстрата, предварительно промытые в слабом спиртовом раствора и обсушенные электрическим феном, семена высевают в чашки Петри. Чашки закрывают, и проращивают семена в световом термостате при плюс 25°С. На десятые сутки после посева нормально развившиеся проростки снимают с субстрата и пикируют в ящики с землей для получения крепкой рассады сеянцев для посадки.

В полевых условиях обнаружено существенное повышение уровня болезнеустойчивости у кзоновых семей, сформированных под действием токсина, относительно родственных семей, на подвергавшихся браковке на ранних стадиях развития (Б.Г.Анненков, 1995).

Использование токсина А. &оЗап1 в градационном процессе селекции картофеля для рааавй массовой фигопагологической оценки и отбора на уровне семенных проростков болезнеустойчивых сеянцев позволяет селекционеру в дальнейшем с большей уверенностью выбирать перспективные продуктивные гибрида из искусственно сформированных кдоновых семей, с повышенным уровнем устойчивости к а ль тернарно зу.

Исходный и гибридный штеоиал для селекции картофеля на более неустойчивость

Основным методом селекционной работы с картофелем в мире стала межвидовая гибридизация, возводящая расширять генетический базис для оеяекционера-иммувопога при решения задач комплексной болезнеустойчивости. Селекционера при создании дальневосточных сортов а качестве основного дута выбрали подбор и вовлечение в гибридизацию сортов мвровой коллекции н гябрадоа других селекционеров страны, уже созданных на основе межвидовой гибридизации. Это позволяет значительно сократить селакщоаный цроцасс я повысить его тивность, на прибегая к начальным трудно удающимся скрещиваниям о дикими видами и последуадеад беккроссированию (Е.Н.Сущинская, 1971; Е.Я.Кисалев, 1980; Б.И.Уманец, НЛ.Сакара, 1982; С.И.Фропов, 1983; Б.Г.Анненков, 1985; ЕЛ.Киселев, Б.Г .Анненков, В.И.Кельчин, 1Э87; Е.Ц.Кяс8дев, А.К.Новосеюв, БЛ? .Анненков и др., 1990).

Устойчивость к йнтойтороз-У. Изучение устойчивости сортов к фитофторозу показало, что около 20$ сортов не восприимчивы к грибу в полевых условиях Хабаровского района (табя.7).

Таблица 7

Фитофтороусто&швость сортов и гибридов мировой селекции в условиях Приамурья (по данным полевой оценки), %

Год изучения Изучено сортов _Поражений, баллы

0-1 2-3 4-5

1983 398 54 25 . 21

1984 639 33 31 35

1985 550 39 25 36

Основная масса фятофтороустойчивык сортов происходит из России, Беларуси, Германии, Польш, Великобритании, Голландии - стран, где. традиционно и целенаправленно ведется отбор на фитофгороустойчивость.

Сильно (4-5 баллов) и в ранние сроки (первая декада августа) поражались фитофторозом сорта: Белинда, Бэта, Бона, Брента, Варта, Виляя, Гамма, Дружный, Заполярный, Игор, Изабелла, Карса, Кенаво, Кора, Краснопольский, Курганский улучшенный, Лори, Майя, Марфона, мираада, Московский ранний, Ростовский, Нега, Незабудка, Омский ранний, Пирмунес, Полна, Приекульский ранний, Приволжский, Оветица, Славянский, Совхозный, Тукуман, Уфимец, Эстина, Экуд. Они бесперспективны для селекции на фигофтороустойчивость.

Выделена группа сортообразцов с высокой полевой устойчивостью ботвы к фитофтороэу, большинство к тому же с К-генной. Среди сортов зарубежной селекции отмечены: Атцимба, Бертита, Беролина, Ваддор, Беви, Гитта, Грета, Дареза, Добро, Дорита, Ирис, Катук, Кульпа, Леандр, Мануепла, Монтана, МШ 49-540/2, Перл, Пентланд Дейдь, Пзнтланд Яаори, Оза, Ренова, Реузка, Рефени, Руно й 1512, Роткельхен, Сервена, Супер, Синельна, Гайга, Зенит, Эленита, Эрос, а из СНГ - Астра, Веселовский, Верба, Вита, Ганибал, Горизонт, Полесский розовый, Пригорскяй, Сотка. За года испытаний не отмечено их поражения местной популяцией гриба до конца августа.

Большое количество сортов (33$ от всех изученных) отнесэно к устойчивым: Амурец, Богатырь, Долинный, Домодедовский, Ивушка, Одев, Осенний, Приамурец, Приморец, Невский, Филаговский, Шушар-ский, Езгирпя и др. Заболевание на этих сортах появилось поздно а было незначительным - 1-2 балла.

К устойчивым можно отнести также сорта: Гатчинский, Матвеевский, Темп, Огонек, Украинский, которые заболевали фитофторозом рано (в начале августа), но развитие болезни шло медленно. К моменту уборки (начало сентября) поражение таких сортов не превышало 2-2,5 баллов. Наивысшее поражение в поде стандартного районированного сорта Пионер составляло 5 баллов.

Выделанные фитофтороустойчявые сорта рекомендованы для широкого использования при создании новых межсортовых гибридных комбинаций картофеля в Приамурье.

Создание гибридного материала, устойчивого к (ЕитосЬгорозу.

Наибольший практический интерес при гибридизации представляют фи-тофтороустойчивые сорта, выведенные или культивируемые на Дальнем Востоке: Амурец, Богатырь, Веселовский, Долинный, Одев, Приамурец, Приморец, Невский, Филатовский, Евгиряя. Они приспособлены к мастным условиям, и в них удачно сконцентрированы хозяйственно-цзнные признаки, включая достаточно высокую продуктивность и комплексную

болезнеустойчивость. Особую ценность для селекционеров-дальневосточников представляют сорта Веселовсквй (R¿) и, выведенные с его родительским участием, Невский (R jR ¿) и Приамурец (R jR ¿-1 > ко~ торые обладают достаточно редким генотипом устойчивости, содерка-ищм ген R r¿, и особенно хорошо передают половому потомству красивую форму клубней.

Генетический анализ цаавости copra Веселовокяй в качестве опылителя (В.Г.Анненков, 1985) в селекции на фитофтороустойчквость показан (табя.8), что этот родитель являемся хорошим донором признака полевой устойчивости, но недостаточно хорошо передает половому потомству ценный генотип в комбинациях ч х 8.2 (А-Нока х Весе-ловский, Катадан х Весааовский) я S j х R 2 (Камераз х Весеяовсккй, Пионер х Весеповский, У0 - 432 х Ве.селовский)Нормальная передача потомству R -генов с индексом 2 наблюдалась в комбинации R j R 3 х R 2 (Богатырь х Веседозский).

Из межсортовых комбинаций Антьз х Весеяовский, Корнелия х Ат-цшба, Хейко х Атцимба, Атцшба х ПриекуаьскяйДАтцшба х Формат) х Дорита, а также многих комбинаций с учаегием сорта Невский выделяется свыше '35% клонов с высокой полевой устойчивостью от всех изученных.

Опенка иакщдсвьцр щбрдащьа; .комбедааий ВКР. Гибридные комбинации, подученные на межвидовой основе, являются ценным исходным материалом для селекции картофеля на Дальнем Востоке. Межвидовой гибрид ВИРа У0 - 432 послужил основой получения первых дальневосточных сортов (Пионер, Матвеевский, йияатозский).

Наш изучалось свыше 100 образцов семян сложных гибридных популяций, подученных от профессора А.Я. Камераза (Б.Г.Анненков, 1985, 1990). По результатам заражения семенных проростков (Б.Г.Анненков, 1982) обнаружено четкое влияние опылителя на степень устойчивости изучаемых в экспериментах комбинаций (табл.9). Наибольшее количество проростков (в среднем около 40$), не пораженных грибом, обнаружено в комбинациях, порученных бедкроссированием на сорта Атцимба, Грета, Дорита, Арго, 30?0д(3), Пенгланд Айс, Пенг-

ланд Явори и гибрид (Гибрид 6 х Эрендяра) х Конкордая, особенно в сочетании с материнскими фобами, вкшвчанцши вицы X demissum, $[ stoéon¿fe>U(n и перечисленные сортообразцы.

Оценка расщепления по &-геН/-ам и полевой устойчивости в потомстве от скрещивания сорта-опылителя Веселовский с различными сортами картофеля (1981 г.)

Тип скрещивания

Гибридов в ■ семье,

ИТ,

Раса 1.4

Раса 1.2.3.4

оред-нае

пора же

нив,

балл

сверх-ЧУвст-вит, "гибридов, %

отношение непораженных к восприимчивым

теорати- фактически чески

пределы средний устой- средняя пораже- балл чивих, уст'ой-

ния, М + т. балл

с!

/о

чивость

родителей, балл

Анока х Веселовский

(гттг *

Катадин х Веселовский

(тгхг ' #хггг) Камэраз х Веселовский (Л/ггг - /¡¿гиг)

Пионер х Веселовский У -432 х Веселовский

68 2,9 16 1:1 0,2:1х 1-5 3,3+0,19 54 3,5

29 2,8 17 1:1 0,2:1х 2-4,5 3,3+0,16 58 3,5

37 3,1 14 2:2 0,3:2х 2-5 3,7+0,19 43 3,75

34 3,3 12 2:2 0,3:2х 2-5 3,6+0,20 50 3,5

30 3,1 13 2:2 0,3:2х 2=4,5 3,6+0,18 47 3,5

45 0,8 73 6:2 6:2 1-4 3,0+0,18 64 3,0

40 1,9 50 2:2 2:2 1-4,5 3,3+0,15 50 3,25

^¿ггг Я^ът ' Я2хг.*) 0-432 х Антьа (Ъггт >

Примечание, х - достоверно при Р=0,Э9

Си

Влияние сортоа-опылитэяей ка фптофтороустойчивость гибридных комбинаций ВИР при заражения семенных проростков грибом в чашках Петри (среднее за 1980-1981 гг.)

Сорт Изучено комбинаций, шт. Устойчивых . пределы псосостков. % сроднее

Атцимба 13 21-64 41,6

3070 д(з) 16 22-56 41,6

Грета 8 20-50 39,8

Эр лай н 9 10-42 23,1

Анока 14 2-31 19,8

Памир 7 10-31 17,3

Незначительное количество устойчивых проростков отмечено в комбинациях, где в качестве опылителя участвуют сорта Анока, Памир, Приекульсккй ранний, Фидедяо, Эриайн.

Отмеченные закономерности характерны не только для начального этапа развития, но и в стадии взрослых сеянцев (табл.10).

В 1982 г. методом генетического анализа определяли ценность межвидовых гибридов по признаку фитофтороустойчизосги. Комбинации ВИР насыщены гибридами, именциш К-гены с символом 3. Донорами этих генов являются сорта: Анко, Атцимба, Адвира, Дорита, Делос, 3070д(з), Петланд Айо, Хейко, Эрендара, Эпока и др. Вероятность выделения растений, имеющих в генотипа ген £3, из комбинаций, полученных с участием этих сортов, достигает 82$.

Гибриды, имекщие гены устойчивости с символом 2, встречаются только в комбинациях, подученных с участием сортов-опылителей Пентланд Явори и Веселовский. Не обнаружено растений со сложными генотипами, сочетающими гены 2, 3 и др.

В этом эксперименте (гак ка, как и в предыдущих) комбинации, полученные беккроссированием ка устойчгане .сорта Атцимба, Грета, Дорита, 3070д(з), Пентланд Айо, Ненглавд Яворя и др., особенно при сочетании с устойчивыми материнскими'формами, содержат большое количество сеянцев с высокой полевой устойчивостью и являются хорошими донорами признака полевой устойчивости к фитофторозу. Данный вывод подтвержден не только результатами лабораторных заражений сеянцев, но и полевыми испытаниями клонов в годы широкого естественного развития болезни (табл.II).

Лабораторная оценка гибридных комбинаций на фитофтороустойчивость в сга.дии взрослых сеянцев (1381 г.)

Происхождение комби- Поражение, балл

наций -

раса 1.4 словная раса

среднеа непора- пределы сред- устой-

женных нее чивых

гибри- гибри-

дов, % дов,^

Зп (<£ chucéense х

Атцимба) х Арго 0,3 90 1-4 2,1 90

Во (Сюзанна х Атцимба) х

Дорита 0,4 86 1-3 1,6 100

В2 ( <£ stoffoni/exam х

Камераз) х Нега 0,8 76 1-5 2,7 81

В.; (AJ30H х МОИ 44.1016/10 )х

л Грета 1,1 67 2-4 2,8 86

Во (Авон х МПИ 44.1016/10)х

" Фиаелио 1,3 67 2-5 3,9 24

B¿ ( vetfxscanum х

X с a nádense ) х

'¿иделио 3,1 13 1-5 3,6 38

Bj ( <£ simpñ'cíjo&'x/n х

canasenst ) x Аяока 3,1 14 2-5 3,7 29

Прщачаниа. I. Количество сеянцев в комбинациях колебалось от 21 до ПО шт.

2. Устойчивые гибриды с поражением до 3 баллов.

Сравнительный анализ показателей фитофтороустойчивости у сеянцев (1981 г.) и клонов (1982 г.) по некоторым гибридным комбинациям (табл.12) выявил, что степень устойчивости к грибу после

проведанных селекционных отборов по хозяйственно полезным признакам может существенно изменяться по сравнении с исходной гибридной популяцией (В.Г.Анненков, 1985; Е.П.Киселев, С.Н.Фролов, Б.Г.Анненков, 1987). После отбора процент невосприимчивых (сверхчувствительных) к расе 1.4 растений в отобранных семьях снижался. Наоборот, средний уровень полевой устойчивости у клонов значительно

возрастая. Это еще раз подтверждает приоратехную рожь полевого типа фитофтороустойчивостя в реализации общего хозяйственного по-гендаала гибридов в условиях Приамурья.

Таблица II

Устойчивость клонов к фитофторозу в полевых уолоашх (1983 г.)

Происхождение

Коляче- Поражение, Ус той-

отзо баяж_чивых

габри- пределы среднее клонов, дов в %

семье

х

X

95

86

80

71

30

Вт (Гибрид 6 х Эрендира) х Конкордия

В2 [(Гибрид 6 х Эрэндира) Конкорда] х Дроссель} АтцимЗа

(У. скассете х Атщшба) х Агро

[(Гибрид 4 х Гибрид 2) х Эрдайн] х Гущи} х Аноха> х Пентланд Явори

{Карда х [(£ сбясоеме х Аренза) х Аренза]} х Анока

{Делос х [(Дроссель х Л ъеваьсакипг ) х Атцимба!} х Бентяанд Айс _> х Эрлайн

Сорт Пионер, стандарт

Устойчивость к альтернаоиозу. До настоящего времени не создано иммунных (высокоустойчивых) сортов к этому заболеванию (Ы.С.Квасник ова, 1976; З.Г.Йванюк, 1980; Е .П.Дмитриева, 1938; Б.Г.Анненков, 1984, 1985, 1990). Адьтернариоз по маре внедрения в производство устойчивых к фитофторсэу сортов все больше-лимитирует уровайаость картофеля на Дальнем Востоке (Е.П.Киседэв, Б,Г.Анненков, 1983; Е.В.Саламагова, 1986; Е.П.Кисеяев, Б.Г.Анненков,'В.й.Кеяьчнн,1987). Отсутствие природного иммунитета и сверхчувствительной реакции у культурного картофеля к альтернарки предполагает выделение исходного материала, который бы поражался болезнью в минимальной степени (табл.13).

18

II

40

21

10

14

0-2

0-3

0-4

0-4

0-1

3-5

4-5

0,2

0,5 0,8

0,7 2,0

4.4

4.5

Изменение устойчивости сеянцев к фитофторозу при

отборе гкбрвдоз с комплексом хозяйственно-ценных признаков

Часто-

(питомники) дов 3 семье, шт. раса 1.4 раса 1 .'¿.2.4 та от-• бора клонов %

арен- непо-наэ' ражен-пора- ных яеншз.гябри-балл дов,$ сред- нее пора- некие балл устойчивых гибря-

Сложная комбинация 0 <£ ^¿¿'азсана/л 1381 (ракш) 63 0,6 86 3,7 29 II

1982 (клоны) 7 2,1 29 3,2 71

Сложная комбинация 0 6'. с/га.со€л*е 1981 (рамш) 84 1,4 67 4,1 10 8

1982 (клоны) 7 3,1 28 3,9 28

Сорг Пионер, стандарт _ - 4 - 4 - -

Табпица 13

Поракаяность сортов я гибридов мировой коллекции апьтернариозом в Хабаровском крае (по данным полевой оценки), %

Год Количество Поражение, балл

сортов ' 0,5-1 2-3 4-5

1983 398 52 40 8

1364 639 25 70 5

1985 550 - 33 61 6

1986 684 42 46 12

Ежегодно поражались альтэрнариозом в ранние сроки я в сильной Степана (4-5 баллов) сорта Акаг, Аней, Аря, Арка, Бета, Бирга, Воротынский ранний, Дружный, Монитор, Монгана, Омега, Орлик, Славянский, Христа, Умбра.

Фитопагологический анализ показал, что в настоящее время около 20-25$ мировых сортов стабильно обладают сравнительно высокой

по лаз ой устойчивостью к заболеванию. Наиболее устойчивы к аньтер-нариоэу сорта Биния, Венета, Гольда, Дезире, Ева, Леандер, Кайюга, Мануедла, Ыета, Ыимоза, Оза, Рима, Темп, Херкуяа, Эрос, Зрлайн. Наивысшее поражение этих сортов за годы испытания не превышало I балла (поражение контрольного сорта Пионер - 3,5 баяла. К устойчивым также отнесены сорта Авенир, Арго, Атол, Атцимба, Амзель, Богатырь, Брашовэан, Виктории, Вулкан, Виргиния, Грета,Гатчинский, Добрин, Доктор Ыак-йнгош, Олев, Евгирия, Катадин, Капелла, Козгма, Комсомолец 20, Линцер Розе, Памир, Пауль Вагнер, Пентяанд Айс, Пентланд Дейль, Пентяанд Явора, Мудьта, Маривлла, Невский, Сузаява, Энива, Эленита, Эверест, (штатовский.

Пригодность сортов в качестве исходного материала обусловлена их способность® передавать посла гибридизации нужные признаки половому потомству. Наш (Е.П.Киселев, Б.Г.Анненков, 1983; Б.Г.Анненков, 1984, 1985, I9S7) в процессе селекционной работы проведена полевая оценка на альтернариоз у 30 межсортовых гибридных комбинаций, созданных на Дальнем Востоке. Большое количество устоЁчявнх клонов (свыше 40/í) выделяется в комбинациях с участием сортов Атцимба, Бивия, Богатырь, Вулкан, Грета, Дезире, Добрин, Ева, Кайюга, Пауль Вагнер, Провита, Эверест, особенно при скрещиваниях по типу устойчивый на устойчивый. Они и а отцовской и в материнской формах хорошо передают потомству устойчивость к болезни. Наиболее низкое поражение альгернариозом гибридных семей от скрещивания Шдац х Ат-димба, Ту кума к х Агцимба, «елдесяон х Атцямба, Эрдманна х Атцимба, Биния х Атцимба, Брааовеан х Атцкмба, Брашозеан х Грета, Заа х Дезире, Боне Бодэнкрафт х Дезире, Каскад х Дезире, Биния х Вулкан, Вулкан х Эверест, Пауль Вагнер х Провита составило 0,3-0,8 баяла, при поражении контрольного сорта Пионер - 3 балла. Сорта, неустойчивые к грибу (Приекульский ранний, Пионер, £рияла, Кветник, Эссекс), имеют в потомстве широкий диапазон поражения гибридов и незначительное количество (0-25%) устойчивых клонов.

Самый высокий показатель невосприимчивости (60-96$) к аяьтер-нариозу был у сеянцев, полученных в комбинациях о участием яыос-коусгойчивого к заболеванию сорта Кайюга (Сафир х Кайюга, 196-5 х Кайюга, Гибридный х Кайюга). На Дальнем Востоке выведен районированный в Приморском крае сорт ^илатовокий (Кайога х У0-432), устойчивый к альтернарнозу и с повышенной полевей устойчивостью х срито-çproposy. Это подтверкдаег высокую эффективность сорта Кайюга, как ценного исходного материала для специализированной селекции кар-

гафеля на устойчивость к альгернариозу.

Кроме простых межсортовых комбинаций мы (Е.П.Киселев, Б.Г.Ан-ненкоз, 1963; Б.Г.Анненков, 1990) изучали сложные межвидовые образцы и популяция ВИР. Отмечена высокая устойчивость у всех клубневых образцов с участием в качестве опылителя сорта Эрлайн: 68-198 [(Гибрид 6 х Гибри.« 4) х Конкордкя] х Эрлайн; 69-86 {S.vePascanum х Аренза) х Эрлайа; 69-100 , 69-112 (K-62I3-8 аяЖ^еяш/г х Сафяр) х Эрлайн; 69-105 [к-6213-8 S. afíe/¿yem//i х (Гибрид 4 х шхтельгольд)] X Эрлайн; 70-5 [X c/t'acaetise х 3070д(з)] х Эрлайн; 70-126 (Радоза х S'.T-u/S-Jeékf&sic ) х Эрлайн; 71-122, 71-123 (МРИ 49 540/2 х

¿árcense ) х Эрлайн; 71-160, 72-162 сАасАасема/и х Оа-

. _ о/со

$ир) х Эрлайн и др.

Выделилось наибольшее количество кланов (свша 50$), слабо-поразЕЩШихся адьтернариозом в потомстве комбинаций из ВИР, полученных в процесса поглотительных и насыщающих скрещиваний с сортами Зряайн, Памир, Доктор Мак-Интош, Арго, Грета, Атцимба, Пентланд Айс, Пентданд Явори. Это хорошо заметно как в полевых экспериментах (табл.15), так и при лабораторном анализе жизнеспособности семанаых проростков (табл.14), инфецированных альтернариозом.

Незначительное количество живых проростков и устойчивых кдонов наблюдалось э комбинациях, где беккроссирование осуществлялось на сорта Анока, Дорита, Приекульсккй ранний.

Следовательно сорта Эрлайн, Кайюга, Дезире, Брашовеан, Памир, Провпта, Пауль Вагнер, Ева, Арго, Агцшба, Хейко, Виния являются хорошими донорами устойчивости к альтернариозу в любых комбинациях скрецивания. 3 то же время лучший опылитель - сорт Эрлайн неустойчив к фягоФторозу и передает эти качества потомству.

В 1982 году была одновременно проведена полевая и лабораторная оценка ва альтэряариоз свыше 100 образцов примитивных культурных и .диких видов картофеля, большинство из которых, являются гомозиготными линиями, созданными методом систематических отборов (Е.П.Киселев, 1980). Характеристика образцов приведена в каталоге (Е.П.Киселев, Н.Ы.Коаяева, Н.З.Виноградова, 1973) и в нашей работе (Б.Г.Анненков, 1985).

Обнаружена очень высокая невосприимчивость к адьтернариозу у всех имеющихся образцов вида <$. acaule : К-4252 (¿V), К-4257 ( is), K-5I34 {6tf) и др. Не отмечено их поражение болезнью в полевых условиях. Балл при искусственном заражении был минимально возможный (0,25-0,5), а место инокуляции на отделенных листьях (расой

]у1—40} очень напоминало сверхчувствительный иелкоточечный некроз, наблюдаемый при лабораторных капельных заражениях несовместимой расой фитофторы. Полученные результаты согласуются с данными Н.Д. Хробрых (по С.М„Букасову, А.Я.Камеразу, 1959), которая наблюдала при искусственном заражении очень слабое поражение образцов серии Лсаи&а..

Таблица 14

Устойчивость к альтернариозу семенных проростков (1981 г.)

Номер каталога Пп^.-^ттопио Устойчи-

вы? Происхождение вых про_

вых проростков, %

75-211 В- Биния х [(Авон X МПИ 44.1016/10) х 76+2

Доктор Мак-Ингош]

76-237 В2 (<£ сЬасог/М х Атцимба) х Арго 63+10 76-325 В2 (Авон х ЬШИ 44.1016/10) х Грета 70+5

76-334 В2 Хейко х Атцимба 80+3

77-84 Вт{Делос х {(Дроссель

Атцимба]^ х Пентланд Айс> х Эряайн 69+10

77-96 Зт [(К-6213-18 апЖяелит х ЭрлайнЬ

1 Грета ] х Эрлайн * 76+5

77-185 Вт [(Гибрид 6 х Гибрид 2) х Декама] х

х Пентланд Айс} х Пентланд Айс 60+14

77-214 Вт Г(Атцимба х Формат) х Дорита] х

Анока} х Приекульский ранний 20+2

77-263 В2 [(Атцимба х 6'. ) х

3070д(зП х (Детскосельский х Агцяыба) х Антье 66+1

77-293 Во (Гибрид 3 х Приекульский ранний) х

Пентланд Айо 68+2

78-682 в2 сЬассеще х Аызель) х Анока 13+5

Вполне возможно, что вид <У. асаи^е иммунен к приамурской популяции альтернариоза и может явиться источником нового типа устойчивости при селекции на устойчивость к грибу.

Устойчивость к альтернариозу клонов от межвидовой гибридизации

Происхождение

Гибри- Поражение в Кодя-дов в поле, балл чество

семье, ппятлн г-потт- Уотой-шх. пределы сред- 01ТПЫ1Г

нее

чивых клонов,

1981 г. (Ю/УШ)

В2 (ШИ 49.540/2 х £ иуе^е ) х Зрлайн е

Зп^вко х [(Полна х<£ с/1ас6асот&/г1) х Дария ]} х Памир

В2 {Анко х С (Пояна х Ех^ас^асспапс) х Дария ]} х Анока

1982 г. (20/УШ)

Вт {Грета х [(Авоя х №1 49.540/2) х 3070д(з) ]} х Доктор Как-Интои

В2 ( ¡¿>»р£1с1/оР<ит х У. cana.se/ise ) х Даре за

Во {Апта х[( сбагоеме х Арэнза) х Аренза]х Аренза_> х Анока

1983 г. (5/УШ)

Зт {Делос х [ (Дроссель )

х Атцимба]} х Пентланд Айс> х Эрлайн

3% (с/гасоеп$е х Атцимба) х Арго

Щ [(Гибрид 4 х Гибрид 2) х Эрлайн] х Гунда } х Анока > х Пентланд

Явори

Сорт Пионер, стандарт

10 0,5-4 1,8 50

10 0,5-3 1.6 60

II 1-4 2,7 9

7 1-3 1,6 57

13 1-4 2,0 46

7 1-5 2,8 14

1 14 0,1-2 0,5 86

40 0,1-2,5 0,9 77

21 0,1-2,5 1,0 71

2,5-3

С.М.Букасов иА.Я.Камераз (1959) отмечали сильное поражение болезвьв вида ¿¿емШияг, Однако в наших исследованиях этого не обнаружено. Многие образцы (К-8448/1-2, К-8463/1-2-1,

К-8465 и др.) проявили высокую устойчивость к адьтернариозу, хотя и в несколько меньшей степени, чем у вида 3. асаиР?.

Относительно устойчивые образцы встречались среда другах видов картофеля: S. c/iacaense д-830, K-3060-I; ^ ùifundiSuiefoгме ГД-8-86 кё$)\ simpftcifoéium К-2987; S, fniczodontum К-9725; S.êTen/KuCZOftatum К-9744 ( ) ; S. pamfiasensé K-4Ô72 [с3 ); g. spazsipcêum К-4435 K-9739-I; spefcizzinii К-6566;

<£ ver ne i K-9752 {/j);^ Auztzia/mm K-9720; S.famatiaae К-S749; Tap/>CMifo&um К-4446 (i^) и K-9699 ( ) ; S. papi ta, K-42I2-I; X aytc/iïoatfoéixfn K-5739. При искусственном заражении они имели балл поражения 1,2-2,0. Поражение болезнью в поле было до 2,5 балла.

Сильно поражались алыэраараоаом образцы S. yungasensc K-2S20 (ф, $. -âu£aJOV{( К-S706 cataz/Azum Д-307

c/rœcoense д-420-i.

Вируоо.устойчивооть. Статистическая обработка многолетних данных ДапьНШСХ (С.И.Фролов, 1983; Б.Г.Анненков, В.И.Кэльчиа, 1987; ЕЛ.Киселев, Б.Г .Анненков, В.И.Кеяьчин, 1987) показала,что в условиях Хабаровского края наиболее распространенными формами внешнего проявления вирусов на сортах шрозой коллекции картофеля (табл.16) являются крапчато с ть - обыкновенная мозаика (в среднем за года изучения - на 43Î сортов), закручивание листьев {11%) и морщинистая мозаика (9%). В засушливые года ка коллекционных сортах получают большее развитие вредоносные вирозы - курчавость и скручивание листьев.

Следовательно, ка сортименте картофеля в условиях Приамурья большое расцространение получили мозаичные вирусы Sf M, У и особенно X. Их накопление в вирусологическом балансе продолжается.

Поражение вирусными болезнями в слабой и средней степени наблюдалось у 20%, а в сильно выраженаой форма - у 8Qg восприимчивых сортов. В сильной степени (на 80-100$) были поражены следугацке сорта картофеля:

крапчагость - Арка, Беяинда, Вирга Вилия, Глордя, Заполярный, Зауральский, Игор, Кабардинский, Карса, Кенаво, Кора, Курганский улучшенный, Лори, Майя, Миранда, Монтана, Нега, Омский ранний, Орлик, Приволжский, Ревени, Сатурна, уаленский, Христа, Эзгяна, Экуд и др.;

морщинистая мозаика - Акат, Анетт, Воран, Воротынский ранний, Глория, Изабелла, Каролина, Ыайя, Миранда, Новякка, Орлкя, Проку-ра к .др.;

закручивание - Брента, Калрозе, Курганский удучшеняый, Лоря, Ыаркя, ?ларфона, Нега, Немея, Омский ранний, Полна, Фаленский, Христа, Экуд и др.;

скручивание - Зауральский, Кабардинский, Карса, Ояро и др.

Таблица 16

Распространение вирусных болезней на сортах мировой селекции (визуальная оценка)

Показатели Период исследований

1984 г. 1985 г. 1986 г.

Изучалось сортов 639 550 535

Выявлено сортов с явными впрозами, ¡о

крапчатая мозаика 66,8 37,3 24,3

морщинистая мозаика 12,8 5,5 7,3

курчавость листьев т I -с. , А 1,5 1.7

закручивание листьев 16,9 19,6 15,4

скручивание листьев 2,2 0,4 5,4

Нередко наблюдается смешанная инфекция и одновременное про-

явление на растениях различных форм вирозов. Лишь около 20$ изученных образцов не были затронуты вирусными дегенерацнями: Астра, Аурея, Бета, Валдор, Галина, Гамма, Гульба, Дезяре, Изола, Кадая, йардая, Ыануелла, Марамба, Мариелла, Марион, Невский, Пересвет, Пентланд Хафк, Разваристый, Рэнова, Реузка, Сазанка, Сянальда, Шу-шарскяй, Эндра, Юдика и другие. Но и в этих сортах серологический анализ показал скрытое присутствие вирусов X, S , М.

3 90-х годах при сильном и контрастном проявлении вирусных болезней в коллекционном питомнике наш для точного ишун^ермент-ного анализа было выбрано 93 сорта и гибрида, имеющих более здоровый вид. Шк показал полное отсутствие мозаичных вирусов только у растений 14 сортов и гибридов. Среди них Юдита (Бельгия), Вигро

{Нидерланды), межвидовые гибрида 49(85)-3, 68(85)-2, 88-I9I/I, сорта чехословацкой селекции Секунда, Ета, Вана и Боубин, а также гибриды кааей собственной селекции АЕГ-1, АЕГ-2, АБГ-3, АЕГ-4 и их прародитель - сомаклональный мутант Н-4 (из сорта Невский).

В селекционной работе на вирусоустойчивость попреннему первоочередное значение и?леег полевой тип и явление толерантности.

О виру coy стойчивости картофеля можно судить не только по отсутствию на растениях внешних симптомов вирусов, но и по способности сортов и гибридов сохранять высокую урожайность в процессе длительного репродуцирования в условиях Приавдрья (табл.17).

Выделение образцов с комплексной болезнеустойчивостью и другими хозяйственно-ценными признаками

Важным резервом при создании сортов картофеля является вовлечение в гибридизацию форы с комплексной устойчивостью к фитофторозу, альгервариозу и вредоносным вер о зам.

Нами видеяена большая группа сортов с повышенной устойчивости» к макроспориозу и обладающих высокой полевой устойчивостью ботны к фитофторозу (Б.Г.Анненков, 1984, 1985). Большинство из них Атцш-tía ( S 3S 4), Богатырь (К-^), Весна (В^) f невский (Br,). Дезире (%), Делос (í3), Мудьта (£jq), 0лав (Í^J, Пентланд ДЙЙь (J-S^Kg), Пентданд Явори ЕвгиРля и др. имеют цен-

ный генотип фитофтороустойчивости. Но она неравнозначны по урожайности, форме клубней, устойчивости к раку и другим показателям. Их целесообразно использовать в долгосрочных программах селекция, когда требуется создавать комбинации и сорта, сочетающие признаки с возможно большей сгепеньв выраженности.

По нашим данным, наибольший интерес .для селекции картофеля на болезнеустойчивость представляют выведанные или культивируемые на Дальнем Востоке сорта (Богатырь, Веселовский, Осенний, 0лев, Невский, Весна, Филатовпкий, Евгирвд, Долинный, Приамурец, Приморэц), поскольку они сочетают хозяйственно-ценные показатели с комплексной болезнеустойчивостью к фитофторозу, альтернариозу, отдельным вирусам, раку и другим болезням. Эти сорта имеют межвидовую природу и содержат разнообразные R-гены устойчивости к фитофторозу.

Б качестве исходного материала при создании новых гибридных комбинаций в Приамурье интересны также высокопродуктивные сорта мировой делекции с комплексной устойчивостью к грибным болезням и долговременной выносливостью к вирусам (табл.17).

За 1980-1985 года исследований с нашим участием был выделен для изучения в конкурсном испытании разнообразный гибридный материал, который в значительно меньшей степени, чем стандартный сорт Пионер, поражался фитофторозом, альгернариозом, вирусами (табл.18).

Таблица 17

Продуктивные болезнеустойчивые сорта картофеля

Сорт

Происхождение

Урожайность, г/куст Поражение прадеды среднее ^др7016'

|ито- альтер-фгириз наряоз

Изучено з 1981-1985 гг.

Супер Румыния 1060-1865 1512 0 2

Раменский СНГ 855-1920 1278 0,1 I

Эдзииа Нидерланды 730-1610 1141 3 I

Тайга Германия 710-1625 1088 0 2

Мариадла Германия 745-1375 1010 1,5 2

Сузанна Германия 820-1120 974 0 2

Ирис Германия 510-1325 949 I I

Синальда Нидерланды 645-1450 940 0 I

Зенит Австрия 520-1360 893 0 I

Долинный СНГ 575-2400 888 од 1,5

Руно й 1512 Германия 635-1160 871 0 I

Пионер (стандарт) СНГ 230-900 599 4 3,5

Изучено в 1983-1985 гг.

Сазанка Польша 890-1650 1281 3 I

Реуака Нидерланды 885-1680 1265 0 .2

Хейко Германия 1090-1580 1256 I 2

Невский СНГ 1030-1460 1250 0,5 I

Кульпа Германия 590-2165 1185 0 I

Ян тарный СНГ 975-1300 1178 3 I

Оза Польша 580-2030 1176 0 I

Бородина Германия 350-1250 1120 0 I

Переезаг СНГ 770-1245 1010 0 I

к Высший балл за года исследований.

Характеристика болезнеустойчивых гибридов из конкурсного испытания ДзяьШШСХ (1935 г.)

Пооисхоздение Наязысшее поранение ботвы в

поле (1980-1984 гг.)_

фитсФтоооз, альтерна- виоозы, оаяд* риоз, %

балл

77-15/4 (Камераз х Пионер) х,5 1.5 0

78-1/2 (Врашоваан х Атцимба) 2,5 I 0

78-2/13 (Каскад х Дезире) 2,5 I 0

78-3/3 (Ева х Дезире) I I 0

78-60/3 (Карда х [(Гибрид 6 %

Гибрид 4) х Конкорда] } х 3070ц(з) I I 0

79-68/16 (196-5 х Кайюга) 2 I 0

80-17/8 (Пауль Вагнер х Провита) 2 I 0

80-39/7 (Эмилия х ЫШ 49.540/2) х

Хейко I I 0

Сорт Пионер, стандарт 4,5 3,5 20

Выделенные гибриды обладали' комплексом хозяйственно-ценных признаков и качеств. Они рекомендованы для скрещивания в качестве доноров комплексной устойчивости к болезням.

Лучшие из них 79-68/16 (Милта), 77-15/4 (Амурзц) и 78-3/3 (Евгирия) прошли Госсортоиспытание. Среднепоздний, легкий, вкусный сорт Евгирия (Ева х Дезире) районирован с 1994 года по Хабаровскому краю (табл.19).

По уровню полевой устойчивости к фктофторозу он аналогичен мексиканскому фятофтороустойчивому сорту Дорита (имеет такой ке генотип устойчивости - %$з), но превосходит его по устойчивости к адьтернариозу, обладая высокой устойчивость» клубней к грибным и бактериальным заболеваниям, нематода и к расам рака картофеля. На Госсортоиспытание переданы еще .два новых сорта - Чергая

(1994 г.) и Даяьвас (1995 г.), созданные в ДадьКШСХ с нашел участием. Вероятность, что Дальвас успешно выдержит испытания, высокая, поскольку впервые выделен средаеранний образец, полностью свободный от основных вирусов (по данным Шк). Это поззолиг организовать его семеноводство в Приамурье без применения специальных приемов оздоровления.

Основные показатели сортообразцов Хабаровской селекции (среднее за 1982-1984 гг.)

Сорт

Наличие Урожайность, Товарность Средняя Содерка-К-генов ц/га клубней, масса ние крах-

кл^бня, мала, %

' в>

Пионеи, стандарт

Т/'илта

Амурец

Евгиряя

ч

358 366 448 452

91

93

94 96

97,5 99,0 152,0 104,5

14,3

15.2 14,8

14.3

Применение биотехнологий в селекции и семеноводстве картофеля

Дальнейшеезскореняа селекционного процесса при создании новых форм картофеля с улучшенными и модифицированными характеристиками устойчивости к болезням, различным стрессовым факторам и со стабильной продуктивностью, многие ученые связывают с применением метода клеточно-тканевой культуры "ин витро" (Р.Г.Бутенко, 1964, 1968), на котором основываются новейшие селекционные биотехнологии (Е.П.Киселев, Б.Г.Анненков, 1989; Б.Г.Анненков и др., 1990, 1990). Значительное место в нашей работе зашшают вопросы клеточной селекции, биотехники поддержания и микроклонального размножения ценных форм в сочетании с элиминацией возбудителей болезней.

Клеточная селекшя. За период исследований (1988-1992 гг.) нами детально изучен процесс каллусогенеза у разных генотипов картофеля (Б.Г.Анненков, Т.А.Белуга, 1991), определены типы эксплантов и режимы культивирования для ускоренного получения крупных потенциально морфогенных каллусов - источника мягкой сомаклонаяьной изменчивости. Путем параллельной посадки крупных каллусных эксплантов на морфогеннце среда НИИКХа и Шепарда удалось гарантированно получать регеяеранты от любых исходных соргообразцов картофеля (Т.А.Белуга, Б.Г.Анненков, 1993). Наш разработан способ ускоренного создания крупных и практически значимых популяций вариан&х клеточных ниниЦ -регеаераатов у сбразцоз, вовлеченных, в процесс сортоуяучшеняя по комплексу хозяйственно-ценных показателей методом сомаклональной клеточной селекции.

Это достигается (рис.1) последовательным осуществлением нескольких максимально сжатых но времени циклов клеточно-хканевых трансформаций "/я \ztti-o " (эксплантация, калл!'еогенез, морфогенез, укоренение первых двух-трех десятков регенерантов). При этом наблюдается ступенчатое накопление мягких и разнообразных эффектов, происходит постоянная браковка нежизнеспособных вариантов и накопление, за одинаковые временные рамки с прототипом, более крупной популяции регенерантов с ожидаемой коррекцией отдельных признаков и с сохранением в основном ранее удачно сложившихся параметров исходных сортообразцов (табл.20).

Таблица 20

Формирование популяций регенерантов на заключительном этапа клеточно-тканевых трансформаций " ¿п \zitro " в течение трехмесячного этапа морфогенеза по новому и общепринятому способам

Исходные сорта Общепринятый способ Новый способ ДальЕШС!

всего по- грубые аббе- всего по- грубые аб-

аучено ранты_ лучено бера^уа

регенеран- и % регене- «

тов на щ * рантов ^ двух средах на двух

средах

Евгирия 23 8 35 141 6 4

Пионер 20 6 30 79 2 3

Амурец 16 5 31 47 2 4

Примечание. Экспдавтироваяось 100 каллусов каждого сорта (50 шт. на среду НИИКХа и 50 шт. на среду Еапарда).

Способ ДадьШИСХ пригоден для решения семеноводческих задач, поскольку позволяет расширить гетерогенность сомакдонаяьного материала от оздоровленной меристешой линии, но в пределах фенотипа. Способ использован также для оперативного решения различных задач селекционного улучшения сортов картофеля. Наиболее удачным оказалось получение продуктивных и пластичных модифицированных форм сорта Евгиржя, объединенный матерка я которых и позволил превзойти стандарт Невский на заключительном этапе Госсортоиспытаний (Автор, свад. * 6470).

Использование сорта Невский ддя гибридизации при традиционной

39 Рисунок I

Схема ступенчатого создания селекционной попуяяции-регенвран-гоз, состоящая из трёх последовательных и ускоренных клеточно-ткане-вых циклов 1» уССт-о (эксплантация, калдусогенез, морфогенез, уко-рзнение),разработанная в ДадьШИСХ.

I. Эксплантация фрагментов лиога и каялусогенез

(30 сут.)

2. Эксплантация Фрагментов каллуса и морфогенез (60-90 сут.)

1-й ш1кл

3. Эксплантация и,укоренение побегов а подращивание р.вге нерантов (20-25 сут.)

2-й цикл

(аналогичный первому)

и т.д.

>44 « Т.?. у^ч

(подовой) селекции в Приамурье проблематично из-за стерильности пыльцы и ежегодного отсутствия ягод. Методом клеточной селекции от сорта Невский подучен сомаклональный мутант Н-4, сохранивший исходную высокую продуктивность и форму клубня. Этот мутант приобрел обильное и стабильное по годам ягодообразозание, что позволило нам приступить к использованию его сешн (от самсошленяя) для создания через клоновые отборы гетерозисной популяции семенного картофеля, которую модно использовать для оздоровительных мероприятий и получения в условиях фермерских хозяйств кормовнх клубнэй. В процессе этих исследований нами выделены,высокопродуктивные и вирусоустоачивые образцы (АБГ-1, АЕГ-2, АЕГ-3, АЕГ-4 и др.).

Использование спонтанной соиакяонаяьной вариабельности для отбора форм с повышенной устойчивостью к фнтопатогенам является наиболее простым методом, но из-за своей нвспецвфнчнооги он имеет низкую эффективность. Поэтов наш была поставнеяа задача - разработать специфические селективные условия для повышения результативности меточной селекции картофеля на болезнеустойчивость.

СПОСОБ ОРОТтУШТСИЯ KSPltóto ЯЗ К BKWPKq-

рдозу. В качестве селективного агента используема изолированный технический юксин гриба J. so£aní\ Самая высокая устойчивость к зтоад токсину обнаружена у каллуоных клеток вида картофеля S. асаи/е , высокоуотойчлвок? к заболеванию при искусственном и естественном заражениях живым возбудителем. Каллусы культурных сортов менее устойчивы к токсину. Однако токсин индуцирован в них направленные цутации, что хорошо заметно во втором пассаже (ia6sJ2I).

На среду дня кадауоогенеза с субяегагьаоп концентрацией токсина эхсплантируют фрагменты каста (или междоузлия) пробирочных растений исходных сортов. Через два-три месяца основная масса каллуса начинает отмирать. Если в отдельных клетках произошли положительные мутации, оин начинают размножаться, я на мертвом лепешкообразном буром каллусе появляются светлые гочкя (зоны) жизнеспособного каллуса, который вычленяют к пересаживают на свежую

среду с увеличенной концентрацией токсина. Посла подращивания живые каллусы снимают, делят на две часта и параллельно помещают для регенерации в пробирки с морфогенными средами НШЛа а Щеварда. При это« среда Шепарда, приспособленная для регенерации из протопластов более предпочтительна.

Рост я жизнеспособность каллусов картофеля на питательной среде с токсином

Сорт (вид) картофеля

Номер

варианта

среда

Концентрация токсина в срвдэ, мг/я

Оцашга каляуоогенеза

первичный каялусогенез

вторичный пассах живого каллуса, взятого с третьего варианта

S. acaule

раз

Пионер

I 250 + * + + •fc

2 500 + + + ■fc

3 1000 + + + + -fc

4 I50Q + + ■fc •fc ■fc +

I 250 •t -ь ■i

2 500 + •fc

3 1000 +

4 1500 - -fc -fc •fc

I 250 + + + ■fc

2 500 -fc -fc -fc

3 1000 •fc •fc

4 1500 - ■fc -fc -fc

Примечание. Интенсивный каядусоганез с твне роста (-).

(* + * + +), отсут-

Исподьзовааие при каядусоганезе ватно-маряевш: пробоя (а не традиционной фольги) и достаточно высоких температур культивирования позволяет за счет постепенного высыхания среды и повышения в верхней части концентрации токсина осуществлять плавный переход от сублетальных концентраций к летальным для всех генотипов, независимо от их исходного уровня болезнеустойчивости.

Рекомендуемый способ может дослужить моделью при решении ряда специализированных селекционных программ по повышению устойчивости картофеля к различным токсичным веществам (гербицидам, высоким концентрациям солей и т.д.).

В результате опытов с токсином нами подучен ряд сомакяональ-ных мутантов сортов Приекуяьский ранний и Пионер с возросшими на 1,5-2 балда показателями устойчивости к адьтернаряозу, без изменения основных апробационных признаков.

Методом клеточной селекции нами подучено свыше 1000 линий-регенерантов, прошедших визуальную, цитологическую и бшшшичоакук оценку. Клубневое потомство 283 линий прошло полевые селекционные испытания в отделе картофелеводства ДадьШйСХ. Непосредственно в отделе биотехнологий прошли трехлетние полевые испытания 176 номеров регенерантов от нескольких сортов. Среди отобранных форм наибольший практический интерес для решения селекционно-семеноводческих задач представляют образцы Е-8, Е-Э, Е-14, Е-26 с бодез высокими показателями продуктивности, чем у исходного оздоровденного сорта Ввгирия, а также образец Н-4 со стабильным и обильным ягодо-образоваюгак в отличие от исходного сорта Невский.

По результатам завершенных исследований на ми подано четыре заявки (Б.Г.Анненков а Т-А.Бедуга, 1992) на предполагаемые изобретения, по дзум уже подучены положительные решения.

Обоснование необходимости радикального оздоровления семенного картофеля в зоне Приамурья

Особенность сортового картофеля, как ботанического объекта, его вегетативное размножение, обусловливает относительно слабую вирусоустойчивость культуры. Поэтово» о.шеям кз важнейших резервов повышения урожайности картофеля'является его радикальнее освобождение от вирусов. Эта основная задача первичного и элитного семеноводства картофеля в Приамурье долгое время оставалась не решенной (Б.Г .Анненков, 1987, 1990). Использование в экитных хозяйствах метода визуального и оеродаагностического кдонового отбора для создания семян высших репродукций оказалось неэф|активным для снижения вирусно-вирозного фона на районированном сортименте картофеля. Основной сорт Пионер в начале 80-х годов (тайл.22) оказался почти на 100$ заселенным мозаичными вирусами и особенно сально -ссртовоспршшчявым вирусом Х-возбудитедем крапчатой (обыкновенной) мозаики. Одновременно наиболее урожайная супэрзяата скороспелого сорта Пряекудьский ранний поступала на грукконтродь в ДадьЕШСХ (Б.Г.Анненков, 1990) с Камчатки и из Приморья, где впервые на Дальнем Востоке стали использовать оздоровленный исходный материал,

где впервые на Дальнем Востоке стали использовать оздоровленный походный материал, полученный мерастемным методом в Биолого-почвенном института ДЮ РАЯ во Владивостоке (НЛЗЛСрндова, ЛД.Казач:-кова, 1976). Поэтоцу дальнейшее применение клонового отбора в условиях Приамурья нами было признано целесообразным только при организации первичного семеноводства новых (молодых) сортов или з комбинации с меристемно-тканевнм способом оздоровления картофеля.

Таблица 22

Заселенность оорта Пионер мозаичными вирусами при репродуцировании а хозяйствах Хабаровского края (данные ЙФА, 1989 г.)

Клубневая репродукция

ХозяЗстзо-раяродуктор

Хозяйств о-алнтопроизводите ль

шШ

.2Ц2Х

X

м

Элитные семена Опыта ДВШШСХ ОПХ "Восточное" 100 38 2

Третья репродукция Опыты ДБНИИСХ ОПХ "Восточное" 100 67 58

Элитные семена Совхоз "Пограничный" ОПХ "Даурское" 100 69 18

Третья ре- Совхоз "Амур- ОПХ "Даурское" 100 75 31

продукция

Массовая репродукция

Соахсз "Пузановский"

100 91 78

ОПХ "Даурское"

Примечание. Для получения элита применялся хдоновый отбор. ■

С сэре дины 80-х годов научное семеноводство картофеля в условиях Приамурья в возрастаниях масштабах базируется на исходном материале оздоровленным меристемно-тканевнм способом в ДальЕИИСХ. Другой альтернативы пока нет (Б.Г.Анненков, 1990, 1996).

В результате массированного внедрения меристемного оздоровленного исходного материала а элитное семеноводство картофеля Приамурской зона к началу 90-х годов потенциальная продуктивность высших сертифицируемых репродукций у большинства культивируемых сортов возросла з 1,3-2 раза, а по отдельным сортам - даже в 2,5 и более раз (Б.Г.Анненков, 1986, 1987, 1988).

В табл.23 показаны усредненные четырехлетние результаты сравнительного изучения в полевых условиях вредоносности некоторых

Влияние вирусной инфекции на продуктивность картофеля в полевых условиях (среднее за 1991-1994 гг.)

Вариант семенного материала

Сорт Амурац

Сорт Евгирия

урожвйвооть, количество масса урожайность, количество масса ц/га клубней, клубня, ц/га клубней, клубня, шт./куст г - шт./куст г

Объединенный к яоновый материал

Меристемный оздоровленный материал

Мериотемный, с остаточной (100/?) инфекцией вируса X

Мериотемный, с остаточной (100%) инфекцией вируса М

Мерястомный, с остаточной (ПШ инфекцией вирусов Х+М

Мвриот-емннй, с остаточной (100£) инфекцией ВВКК

186 (875?) 214 (1002)

6.4

7.5

145 (68?) 6,1

117

II]

187 (875?) 6,4 114

95

165 (1005?)

161 (98$)

160 (9750

61 (37*)

6,9 6,3 6,6

3,7

100

81

62

л

»(X

вирусов на двух новых сортах картофеля в условиях; Хабаровского района.

При внедрении оздоровленного картофеля в условиях Приамурья возникает опасность повторной векторной вщэусной инфекции. Лет и заселение всеми видами тлей картофеля в Хабаровском районе происходит с конца июня до конца августа, достигая максимума во второй-третьей декаде июля и начале августа. В отдельные благоприятные фактически безфитофторные года (один раз в четыре-пять лет) размножение тлей - основных местных переносчиков вирусов М, У на картофеле, достигает очень высоких значений (200-800 шт.й ловушке за декаду). Этоод предшествует длительный (не менее месяца) период с высокими (более плюс 20°С) среднесуточными температурами и отсутствием интенсивных осадков. 3 подобных ситуациях необходимо прибегать к масштабному превентивному опрыскиванию афшзддами семенных посевов картофеля в конце дшя-начаде ив ля.

Для снижения опасности повторных контактных инфекций на всех этапах семеноводства следует исключить возможность попадания в массу оздоровленных семян вирусных клубней. Нужно шире практиковать однострочное вцрапизанкэ семенного картофеля на широкой гряде - 140 см.

Биотехника мариствмно-тканеэого освобождения сортов картофеля от тгронргческой вирусной инфекции. Первичный процесс лечения хорошо освоен небольшим кругом специалистов крупных НИУ страны, и его детали малоизвестны семеноводам, занимающимся микрок локальным размножением и полезым репродуцированием уже оздоровленного материала. Нами существенно оптимизирована методика освобождения от вирусов применительно к местным условиям и возможностям (Б.Г.Анненков, 1986, 1989, 1990).

В ДальНИКСХ сформировалась двухлетняя научно обоснованная технология лечения новых сортов, включащая технологическую цепь от больных клубней до оздоровленных исходных семенных кдубней, пригодных для непосредственного использования в полевых схемах

элитного производства (рис.2). При проведении Шк исходных клубней мы стараемся найти для вычленения меристем клубни без вируса $ и аелатедьно X, что в значительной мере гарантирует успех полного оздоровления и позволяет при этом обойтись небольшим количеством экспдантов (40-60 шт.) (табл.24).

46 Рисунок 2

С X Е И А

освобождения сортов картофеля от вирусов (1-2 годы) и получения эталонного исходного клубневого материала для ведения элитного семеноводства на оздоровленной основе (применяется 'В ДальНЖСХ).

Оф <» О, О ф О >

Спецпроращивание клубней.

Вычленение меристем и их Имкуно-ферменткый ана. регенерация. яиэ и отбор безвкрус-

ках линий.

\27WW

Вегетативные испытания и отбор продуктивных сортотишчдах ли-«ий.

Хабаровская коллекция лучших линий (стерильные пробирочные расте-:ия или микроклубни).

Ежемесячное микро-клональное размножение (январь-апрель)

Пикировка пробирочной рассады (май).

Уборка клубней, хра-

Бысадка рассады на избточках и выращивание (июнь нение и сентябрь). весенняя реализация.

Частота оздоровления у сортов картофеля в зависимости от исходной вирусной инфекции и периода регенерации из меристем

Сорт

Вирусологическое состояние исходного со зда, по

Безвирусных растений от числа ных меряс

наличие отсутствие э первой во второй вирусов вирусов партии партии

Шояер

Евгирия

Амурвц

Маряелла

У 8,4 14,3'

1,5,7 А, />¿,14, 23,1 28,8

X, М (БИОС) 42,8

X, М 57,1

В результате лечебного процесса у сорта необходимо получить 10-12 оздоровленных линий, которые на завершавшем этапе включаются в конкурсное испытание по отбору лучшей высокопродуктивной, здоровой линии, используемой в последувдиэ годы в коллекция, микрокло-надьном и промышленном размножении.

Первоначально осуществляется "холодное" медленное и длительное прорацкзание кяубнеЗ (4-5 месяцев) при темпера туре 6-7°С (в холодальникв и в темноте). Получаются этиолированные тонкие вторичные ростки длиной 3,5-5 см с боковыми зачаточными игяообраз-ннми листочками, в основания дазухи которых находится микроскопическая точка роста (микропочка). Осенью, используя глазную (часовую) лупу, срезают горячим глазным скальпелем (для предупреждения со-козыделения) листовую чешуйку, а микропочку выщипывают при помощи узкого и острого скола отечественного бритвенного лезвия "Нева", вставленного в микробиологический зажим-держатель. Такой экспдант хорошо приживается в пробирках, заполненных на 1/2 объема питательной средой, и без пересадки начинает регенерировать ранней весной.

Наша методика в десятки раз позволяет ускорить процесс вычленения, что очень ваяно при массовом освобождении сортов от вирусов и объемных работах по депонированию коллекции, микроклональ-ному размножению и промышленному производству безвирусных клубней.

Ъ'ы используем всегда единую (для регенерации меристем и микро-к,тонального размножения или для клубнеобразования) питательную

среду» состоящую из минеральных элементов по МС и дополнительно включающую (на I л) 7 г агара, 20 г сахара, 2Q0 мг гидролизата казеина, по 0,2 мг тиамина и аскорбиновой кислоты, 0,1 мг пирцдокси-на, I мг ИУК, 0,04 мг кянегяна, 0,02 мг ферудозой кислоты. В среду добавляем 3-5 г/л тоакоизмезгьченного активного угля, для иоключе-кия каллусогенеза и снижения вероятности генотипической изменчивости (для непосредственного прорастания мерасзам).

В конце августа (второй год) размноженные безвирусные линии высаживаем по два-три растения в уравновешенные вегетационные сосуды с торфо-почвенной смесью при 20-30-кратной повторноеги и проводом в тепличных условиях оедакцентра ДальШИСХ конкурсное испытание на оздоровленность, продуктивность я сортотшичность. Против тлей опрыскиваем растения пиримором и другими афизддами. Уборку проводим в декабре. Клубневое потомство лучшей твш (или нескольких лучших линий) объединяем и храним в картофелехранилище. Б конце апреля оздоровленный материал передаем заказчику. Лучшие пробирочные диняи переводим в коллекцию безвирусных сортов ДальБШОХ.

После применения нашей технологии лечения картофеля от вирусов значение полевого клопового отбора полностью утрачивается. Факты (З.Н.Майл(ук, 1985; Л.Н.Трофшец, Г.И.Ыеличеако, 1989; И.И.Лааева, 1993) варьирования некоторых признаков у различных ыерястемных линий одного сорта могут обуславливаться остаточным присутствием в них не идентифицируемых Еадун^еркенгныы методом, внутриклеточных объектов дефектЕОВирусной, вироздной и микоплазменной природа иди даже бактериальной инфеедией. Это и обуславливает необходимость конкурсного испытания оздоровленных от хозяйственно значимых вирусов линий, браковки непродуктивных номеров.

Отлична признаков оздоровленной яжнш от исходной формы (ян-фецарованной) по скороспелости, интенсивности окраски растительных органов, форме листьев и клубней, мощности куста, возросшей клуб-невооти, арахма лис гостя, ыик о з оу с тойчлв ос w не расценивается нами как отступление от сортовой типичности, поскольку именно исходная форма может являться нетипичной по этим показателям в результате влияния системной вирусной инфекции.

Всегда необходимо помнить о возможности случайной, трудноразличимой сортопримеои во взятом для излечения образце, точно выявить которую удается лишь цутем бадково-ыаркерного анализа.

1ахвтгаив&ювйшва 1!}.ш£93.шш..,т9шш mAm%- большинство биоценгров России производят и реализуют потребителям яс-

ходкий оздоровленный материал в вида пробирочных минера с тений и мякроклубней. В контрастных климатических условиях Приамурья внед-рэние в полевые схема элитного производства оздоровленного материала в таком виде доляного эффекта яв дает. Нами освоено производство высококлассного адаптированного исходного материала - клубней нормального семенного размера (Б.ГЛннанков, АЛ.Ступина, 1994).

Технологическая цепочка по производству таких клубней начинается (рис.2) о получения пробирочного посадочного материала -мшшрастений или микроклубней. Пробирочные микроклубня получают осенью предыдущего года. Выход их зависит от сорта, освещенности, объема пробирок н питательной среда. Для стимуляции формирования микроклубней концентрацию оахарозн в среде увеличиваем вдвое (до 40 г/л).

Посадку пробирочной рассада или выведенных из покоя ыикро-кдубней осуществляем в полиэтиленовые стаканы с торфозеыляной смесью и выставляем на поддоны в середине мая в весеннем тепличном боксе.

Пикировка в стаканчики позволяет адаптировать пробирочную рассаду перед высадкой в открытый грунт в июне, когда в Приамурье устанавливается сухая и очень жаркая погода. Предварительное подращивание способствует приживаемости и ускорению развития растений. Зыращенные таким образом клубая, ровные я гладкие, чистые (без парши) с достаточным количеством глазков, хорошо хранятся и легко транспортируются в э/штхозн Приамурья дня непосредственного включения в полевые схемы элитного производства. Ежегодный имцуно-ферментный контроль подтверждает, что по степени оздоровленности, производимые в ДаяьНШСХ исходные семенные клубни практически на уступают пробирочное материалу.

Способ вашашонно-кдеточного создания исходного, семенного материала картос&еля. Большая вероятность генетических изменений при оздоровлении картофеля от вирусов через каллусогенез (Л.Н.Тро-фямец, П.А.Хикняк, А.П.Кучумов, 1978; Ю.Г.Тринклер, 1985) вывела на первое место в семеноводстве меристемный метод (Л.Н.Трофимец, В .В.Бойко и др., 1985; Л.Н.Трофимец, 1989; Ю.БДуравлев, Н.ФЛи-сецкая, В.Р.Руцкова, 1989; Б.Г .Анненков, 1990). Однако наши исследования показали, что при четком контроле уровня изменчивости, испытаниях и отборах нужных оздоровленных форм, прошедших через фазу каллусогенеза, клеточная технология может быть полезна для решения некоторых современных проблем семеноводства картофеля на оздоровленной основе.

Наш установлено, что с цель» получения стабильно продуктивного оздоровленного исходного материала необходим использовать для микроклопального размножения максимально бояьаое таодо (более 10) абсолютно безвирусаых ыеристемных линей одного сорта, но с различной родословной. Однако многие сорта картофеля освсбоадаяись от вирусов сравнительно давно и депонируется в стерильных коллекциях биоцентров России, как правило, в виде одной гак называемой "лучшей" линии. Производство оздоровленного материала, берущего своа начало от одного безэцрусного пробирочного рас тени, на наш взгляд, существенно сужает наследственную основу и потенциал сортов. Такой мономеристемный материал развивается синхронно и может подавляющим большинством растений попасть в критические условия высоких температур и сильной засухи ила резкой эпкфитотийной вспышки фатофторы. Поэтому в отдельные года (на отдельных участках, по отдельным сортам) он может уступить по количеству и качеству (массовое взрастание) урожая наоздоравяеяно:-?/ материалу, у которого разнокачестаанаость семян (по скорости прораотанш, развития и уровню болезнеустойчивости) задается разнообразной комбинацией вирусной инфекции.

Для преодоления этого негативного момента могут послужить возможности вариационно-клеточной селекции по получению более гетерогенного и жизненного исходного материала, состоящего из клубневого потомства сомаклонов (табд.25).

Для формирования оомаклонального исходного материала брали наиболее рано образующиеся на морфогенных пагатаяьнкх средах из каялуовнх агрегатов регенаракты, поскольку среди ранних регенерация маловероятно появление грубых абберантсв а малопродуктивных форм. В первый год проводили их покустное выращивание и отбор сортотшшч-ных .урожайных сошкдоаов в кошчестве примерно 70% от исходного чесда выборки, которая должна составлять не менее 100 регенераятов. Двухлетнее репродуцирование сошклокального исходного материала показало, что его урожайность была на 20-35$ выше (ь зависимости от сорта), чем у ранее поручаемого нами мовомвриствмного оздоровленного ыатериака.

Дальнейшее повынениэ на 10-12$ продуктивности исходного материала картофеля, получаемого с использованием технологии сомакяо-надьного сортоулучшения, вполне возможно, есди в результате сравнительного Еодеяяяочного испытания второго года выбрать 10-15!? лучших продуктивных и выровненных дикий и использовать дня получения

Сравнительная продуктивность марястемно-оздоровленного и вариационно-сомакяонального исходного семенного материала сортов картофеля Амурец и Евгария

Вариант исходного материала

Показатели _Сорт Амурец_ Сорт Евгирия_

продуктивности 1993 г> 1994 г> среднее 1993 г. 1994 г. среднее

ровленный материал исходные меристемы А-4 и Е-Ю)

Кол-во клубней, шт./куст

Масса клубня, г

ходной меристемы, с от- Кол_во ЙПубняй бором сортотипичных атакует

Масса клубня, г

клеточных клонов

торным отбором 10% наи- „тЛиой

более урожайных в срав- 52я752п5яу°нвй' нительном испытании ша./луо* линий Масса клубня, г

НСР05 ц/га

248,8 98,0 173,4 (100$) 165,2 90,1 127,7(10СВО

7,5 4,5 6,2 7,5 5,9 6,7

140 86 113 94 64 79

312,4 104,0 208,2(120$) 232,4 108,7 170,6(136/1)

3,5 5,5 7,5 8,7 5,0 6,9

137 80 109 НО У2 101

334,8 121,4 228,1(132$) 253,6 120,2 186,9(146$)

10,9 6,0 8,3 9,7 5,0 7,4

131 84 108 115 101 108

22,3 22,0 19,5 20,1

объединенного материала и суяер-суперзяягы.

Ускоренное размножение, зашита от подтэрнкх кайакщш и внедрений в промышланкое семеноводство оздоровившего ксхошюго_т?е-риапз картофеля. Для условий Пркавдрья на!,к: детально отработаны биотехника мзркстемно-тканевого курса леченая сортов картофеля, технология производства оздоровленного исходного материала и его дальнейшего внедрения в промышленное семеноводство.

Оздоровленный исходный материал поступает в первичное семеноводство нередко в ограниченном количества, поэтому возникает необходимость в отработке методов его ускоренного размножения до промышленных маситабов (Б.Г.Анненков, 1987). Впервые для ДальНШСХ оздоровленные исходные клубни и безвирусные пробирочные растения некоторых сортов получены в 1983 г. из НИйКХа (по 10-15 пт.). Ыы ускоренно размножай клубни, выявляли яегковыполяишэ и доступные для производства способы, посредством выращивания черенков, ростков и долей клубней позволяющие сохранить размножаемый материал в здоровом состоянии.

Б 1984 г. были изучены режимы .длительного проращивания клубней районированных и перспективных сортоз картофеля для получения росткового посадочного материала.

Продуктивность растений, выросших из черенков, невысокая. Несмотря на это, реальный коэффициент размножения в пересчете на исходный клубень резко возрастает и колеблется от 1:81-118 (крупноклубневые сорта), до 1:177-185 (многоклубневые сорта).

Длительность периода наработки оздоровленной элиты картофеля в местных условиях для конкретных сортов (в зависимости от их аи-русоустойчивоста) .установлена наш в специальном начатом с 1983 года опыте (Б.Г.Анненков, 1990, 1990). Проводилось сравнительное репродуцирование материала, оздоровленного через меристемы ж отобранного обычным (визуально-клоновым) одзем. В процессе репродуцирования (без особых мер защиты) старались определить время (год) потери преимущества в сродуктивности оздоровленного материала перед первоначально визуально здоровым, у разных сортов картофеля.

На пягый-шестой год (1988-1989 гг.) преимущество урожайности оздоровленного материала у сортов ПриекульскиЗ ранний и Гатчинский, перед клоновым семенным материалом стало снижаться, а у сортоз Весна и Невский сохранилось почти на прежнем уровне. Сорт Пионер занимал промежуточное положение. Однако у всех сортов, прошедших

меристемное оздоровление, остался повышенный уровень кдубнеобра-зованЕя, крахмалонакопления и микозоустойчивости.

Ишуно-ферментный анализ показал, что наиболее восприимчивым к повторным вирусным инфекциям, из районированных в Приамурье,- оказался оздоравлшзаемый скороспелый сорт Приекульский ранний. На шестой год выращивания без соблюдения специальных защитных мероприятий он достоверно был заражен на 100$ вирусом У и на 70$ - вирусом И (переносимых тлями).

В условиях Приамурья для сохранения высоких показателей уро-кайности семян сорта Приекульский ранний рекомендована 3-4-летняя схема производства элиты на оздоровленной основе.

I вариант П вариант Питомники

1 год - Размножение оздоров-

ленного исходного материала

2 год I год Супер-суперэлита

3 год 2 год Суперзлита

4 год 3 год Элита

Второй вариант схемы рекомендуется для южных районов Приамурья, первый - для более северных (Верхнебуреинский, Комсомольский, Зейскай) экологически более благоприятных, чем ганые.

Для ведения элитного семеноводства на оздоровленной основе всех других сортов используются 4-5-годичные схемы, с введением еще одного дополнительного питомника предварительного размножения оздоровленного материала. Сорта Весна и Невский в настоящее время размножаются до элиты также по 4-5-годичной схеме. Высокая вирусо-устойчавость этих сортов доцускает использование более длительных схем производства качественной элиты.

При использовании приемов спецзащиты, сохранение высокого уровня оздоровленности и продуктивности у производимой здесь элиты более гарантировано. Для Приамурья разработана система защитных

мероприятий от повторных инфекций, основные слагающие которой следующие: дзух-трехпетний пласт многолетних трав, широкая гряда 140 см, чистые от многолетних сорняков посадки, пространственная изоляция, хишацита и (или) применение долговременно действующих иммунизаторов (Б.Г.Анненков, Е.В.Болотарева, Н.Г.Кофан, 1990; Б.Г.Анненков, I9S5).

Первыз два года элитной схеш для пршосадочного замачивания исходных и семенных кдубнай используется биодогически активный препарат эмистям. Это практически защвдаэт в последействии здитныЗ материал от вредоносного вируса М и частично - от варуса Я . Количество полностью безвирусных кустов (по результатам ИЗА) возрастает, по сравнению с контролем а 1,5 раза.

У иммунизированного материала сорта ПркекудьскиЗ ранний урожайность была выше на 10-12?, развитие грнбннх листовых пятнисто-стей (фитофтороз я адьтернариоз - на середину августа) ниже на 10-20$, парша на клубнях - на 8-10$ слабее, чем у контрольного оздоровленного суперэлитного картофеля, выращенного без воздействия эмистима.

В целом эффективность применения эмистима для снижения повторных инфекций аналогична общепринятой в картофелеводстве химической защита. Однако эмистям более выгоден и экологически безопаснее, благодаря-безвредности иммунязатора для человека и окружающей среды в рекомендуемой малой концентрации (I мп на 100 л водного раствора).

На базе наших разработок в спецсемхозе "Екатеркно-Еикодьсксе" (ЕАО) по сорту Невский организовано ббзвирусноа производство семян. Это позвонило поднять урожайность картофеля аа площади 600 га до 220 ц/га. Урожайность в питомниках высших репродукций сорта Невский достигда 450-530 ц/га.

Хозяйство езегодно реализует свыше 1000 т высококачественной эпиты на оздоровленной основе. Благодаря этому сорт Невский занял свыше 75$ площадей в Хабаровском крае 2 ЕАО, быстро распространяется в Приморский край и Амурскую об пасть.

Наш в разные годы проведено первичное меристемное лечение от хронической инфекции сортов хабаровской селекции: Пионер, Даурский, Приакурец, Марле ада, Амурец, Евгирия, Мидта, а в настоящее время - Камая (Дальвас) и Чергая. Создана и депонируется коллекция наиболее урожайных безвярусншс пробирочных линяй 30 сортов картофеля.

На базе нашх исследований в Приамурье организована научно обоснованная система оздоровданного элитного семеноводства картофеля. Глазными заказчиками нашего исходного материала ежегодно явдаются эдитоцроизводящие хозяйства Приамурья: ОПХ "Восточное" ДадьНИЙСХ (6-9 сортов), Комсомольское опытное поде ДадьНИЙСХ (1-2

оорга), фермерский спецсекхоз "Скорик и Карпенко" (З-б сорта), 0Л1 "Даурское" БОСХОС (4-7 сорта), лСХД "Екатерино-Никольское" (3-4 сорта), ОПХ "Садовое" ВЫШсои (2-3 сорта). Эпизодически исход-нке оздоровленные клубни различных сортов поставляются в другие семеноводческие хозяйства Приамурья, Приморья и Магаданской области.

Несмотря на слохнув еконошческую ситуацию, мы ежегодно цро-язводем до 100 тыс. шг. исходных оздоровленных сеызнннх ядубней всех районированных э Приаодрье сортов картофеля, удовлетворяя потребности АПК зоны.

3 современных условиях идет перестройка структуры производства картофеля вблизи дальневосточных городов.

Учитывая йурный рост площадей под картофелем в частном сев-торе в последние два года, нами расширяется сортимент и производство исходного безвирусного материала для рамиэации огородникам. Поскольку запросы к сортименту у промышленного я индивидуального производителя различаются, наш банк пополняется коллекционными безвирусными растениями оригинальных и деликатесных сортов.

Для объединения усилий в борьбе с вирусами картофеля на российской я китайской сторонах Приамурья организованы научные связи ДапьНИйСХ с лабораторией безварусвого картофеля Северо-Восточного агроуиивзрсятега в г .Харбине (КНР). Налажено снабжение китайской стороны имвдцо-ферментшш диагностинумаш. Проводятся взаимные стажировки и совместные симпозиумы.

Технология оздоровления семенного картофеля от вирусов в условиях Приамурья на базе наших исследований постоянно совершенствуется и асе более завоевывает признание семеноводов, тas как способствует гарантированному производству элиты, снижению общего инфекционного фона в посадках, росту урожайности.

ОЩЕ ВЫШЛИ

I. Б почвенно-климатических условиях Приамурья уровень продуктивности картофелеводства определяется в значительной степени

широким распространением вредоносных грибных (фитофтороз, альтер-наряоз) я вирусных болезней. Наиболее эффективное направление в защите картофеля от патогенов - выведен® и внедрение в производство устойчивых сортов, особенно местной селекции, прошедших через многолетние испытания на фоне неустойчивых по годам агрометеорологических и фатопатологических условий.

2. Раннее появление и эоифитотяйное развитие фитофтороза а Приамурье набдвдается в среднем 3-4 раза за десятилетие, в года

с холодным и влажным детом, а аяиеряаряоз до pasa ег картофель ese-годно. Мозаичные вирусы X, S , U и У по отдельности обладают незначительной или умеренной вредоносность®, но при комплексной хронической инфекции сникают урожай вдвое. Наиболее опасна и вредоносна для неустойчивых сортов инфекция щроида варегеновндаосгк клубней.

3. Расовый состав местных популяций фитофтороза и альтеркарио-за щрок и агрессивен, способен поразить в той или иной степени любые сорта мировой, отечественной к местной селэ^сц&к. Наиболее долговременную защиту сортов от вредоносных болезней обеспечивает высокий уровень полевой устойчивости сочзтащийся с другими видами устойчивости.

4. Решение задачи ускорения селекционного процесса вызывает необходимость широкого использования лабораторных методов заражения и оценки болезнеустойчивости. Наиболее производителен способ браковки неустойчивых я фитофторозу (раса 1.4 или 1.2) семенных проростков. Для формирования устойчивых к альтернариозу популяций сеянцев при тестировании их проростков эффективен не живой возбудите дь, а изолированный из него технический токсин. Он кэ пригоден для создания селекционного давления при клеточной селекции. Лабораторную оценку устойчивости к фитофторозу и акьтернаряозу видов, сортов, сеянцев я клонов по отделенным листьям целесообразно осуществлять з баллах по шкале ДальВШСХ. Достоверным способом идентификации вирусов картофеля при овяешда, оздоровлении и семеноводстве является иммунс-фрментный анализ с использованием моновалент-ннх тест-наборов производства БНШКХа.

5. На основе многолетней визуальной полевой оцэнки и с применением усовершенствованных лабораторных способов рекомендованы для использования в качества исходных форм для селекции картофеля в условиях Приамурья: на устойчивость к фитофторозу 60 мировых сортов, а том числе лучшие из них АтцигдЗа, Гитта, Грета, Добро, Дорита, Катук, Лаандер, Монтааа, Перл, Яентланд Дейль, Пеягланд Яаори, Ренова, Рефени, 3070д(з) и др.; а альтарнариозу - 50 сортов* в том числе Арго, Бяния, Венета, Гвльда, Дезирэ, Ева, Кайюга, Мета, Кзтадан, Памир, Пауль Вагнер, Доктор Мак-Интош, Эверест, ЭрлаЙн и др.; на устойчивость к вирусам 40 сортов, а том «caiwíe Аурея, Бета, Бена, Боубин, Ваддор, Весна, Вягро, Галина, Гамма, Гульба, Ета,

Кардия, ь'арамба, 1«арион, Невский, Перэсввт, Пен'тланд Хафк, Секунда, Зндра, Юдоа и др.

6. По совокупности высокой продуктивности с комплексной устойчивостью к фитофторозу, альтернариозу и вирозам для селекции рекомендованы 30 сортов, лучшие из них яяорайонные сорта, прошед-кие долговременную культуру иди вновь созданные на Дальнем Востоке: Супер, Сазанка, Раменскяй, Реузка, Швувяла, Беродина, Тайга, Ma-риелла, Ирис, Синальда, Зенит, ?уно Ш 1512, Хейко, Одев, Е^льпа, Оза, Весна, Бородянский, Веседовский, Долинный, Приамурец, Невский, Пушкинец, Приморец и др., а также новые сорта, выведенные при нашем участии в Приамурье 1Лилта, Амурец, Евгирия, Дадьвас и Н-4.

7. Для резаная прикладных задач аксцресс-сеяекцяа по признаку болезнеустойчивости из арсенала новейших биотехнологий перспективна клеточная селекция с применением новой вариационно-клеточной технология сортоудучиения, а также модального способа направленного клеточного мутагенеза на питательных средах о токсином адьтернари-оза.

8. Повышение урожайности картофеля в условиях Приамурья лежит через радикальное оздоровление семенного материала от хронических вирусных инфекций. Из оздоровительных мероприятий (внедрение иммунных сортов, клоновый отбор через ®А, меристемная, каддусная

и генеративная элиминация вирусов) при создании региональных систем безвирусного семеноводства, ыеристешый метод в настоящее время является основным. Использование здорового меристемного исходного материала позволяет повысить уровень потенциальной продуктивности высших репродукций сортов картофеля, восприимчивых к мозаичным вирусам,в 1,5-2 раза, и почти на порядок у сортов, восприимчивых к ВЗЖ. Применительно к местным условиям и возможностям, оптимизирована биотехника первичного меристемного излечения новых сортов картофеля от хронической вирусной инфекции. Создана региональная коллекция из тридцати основных безвирусных генотипов картофеля, бодьаинсгво из которых ежегодно вовлекается в массовое микроклона льаое тиражирование.

9. При нестабильности агроклиматических условий Приамурья отработана и внедрена в ДальНШСК технология'производства адаптированных (крупных) безвирусных исходных кдубней, непосредственное внедрение которых в полевые схемы эдитхозов проходит более гарантировано. Ежегодно производится и предлагается потребителям до 100 тыс. шт. безвирусных исходных семенных клубней 15-ти основных сортов.

10. Дли Приамурья разработана технология производства сомен-ного картофеля на оздоровленной основе. Она основана аа применении в первом полевом питомнике простых, но эффективных способов ускоренного размножения оздоровленного исходного материала, посадкой асептически приготовленных долями клубной или ростков, что позволяет значительно увеличить коэффициент размножения, сократить схему производства элиты и снизить затраты. Качаогвенвые семена получаются на высоком агрофоне, при выращивании на широкой гряде (140 см) и с применением элементов защиты (агротехнических, биологических, химических) по 3-5-летним схемам наработки здиты, в зависимости от болезнеустойчивости сортов, экологической и фитоаатологической ситуации в элитопроизводящих районах. В условиях свободной торговли необходимо координировать работу по оздоровдешяо картофеля с китайской стороной Приамурья, строже контролировать фатопагологичаское состояние завозимого в регион китайского товарного картофеля, использование которого на посадку может усугубить вирусологическую ситуацию для картофелеводства Российского Приамурья.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ИЖОМЕЕДАДЖ

В селекционно-семеноводческой работа с картофелем на Дальнем Востоке предлагается использовать научно-матодачаскив и технологические разработки Дальневосточного селекциоиного центра, в их числе:

общие основные аргаципы селекции картофеля на болезнеустойчивость и зональные приоритеты;

фитопатологические методы и способы лабораторной экспресс-оцанки болезнеустойчивости;

биотехнологические метода и способы клеточной селекции а оздоровления сортов каргсфадя от вирусов;

исходный и селекционный материал, отобранные по признакам устойчивости к основным вредоносным болезням;

технологию ведения семеноводства картофеля (от пробирки до

элиты), схемы наработки высших репродукций и технологические элементы, разработанные для отдельных этапов семеноводства на оздоровленной основе.

ОСНОВНЫЕ ПЕЧАТНЫЕ РАБОТЫ ПО ТЕШ ДОСЕРТАЦИИ

1. Анненков Б.Г. Расовый состав Хабаровских популяций фито-фгороза и макроспорноза картофеля в 1981 г. //Всесоюзн. икола молод, ученых: Тез. докл., г .Сухуми, 3-12 ноября 1982 г. - М.,

1982. - С.6-7.

2. Анненков Б.Г. Устойчивость семенных проростков картофеля

о г меявидоэой гибридизации к фигофторозу // Пути увеличения производства картофеля иа Востоке страны: Науч. тр. / СО ВАСХНИЛ. -Новосибирск, 1982. - С.74-81.

3. Киселев ЕЛ., Анненков Б.Г. Характеристика гибридных, комбинаций картофеля по устойчивости к макроспориозу в условиях Приамурья // Бэсгник с.-х. науки. - 1983. - й 3. - С.88-90.

4. Анненков Б.Г. Выделение исходного материала картофеля о комплексной устойчивостью к грибным болезням: Информ. листок / ХаОар. ДЕТИ, - 1984. - № 179. - 4 с.

5. Анненков Б.Г. Лабораторный метод оценки картофеля на устойчивость к макроспоризу: Информ. листок Дабар. ЦНТИ. - 1984. -

Га 181. - 4 с.

6. Анненков Б.Г. Методика лабораторной оценки фитофгороусгой-чявости картофеля в условиях Приаедья // Науч.-техн. бюд, / ДальНИИСХ, СО БАСХНМ. - Новосибирск, 1984. - Вып.18: Защита растений от вредителей, болезней и сорняков на Дальнем Востоке. -

С.13-20.

7. Анненков Б.Г. Метод определения фитофгороустойчлвости картофеля в лабораторных условиях: Информ. листок /Хабар. ЦНТИ. - • 1934. - а 2Э0. - 4 о.

8. Киселев З.П., Анненков Е.Г. Методика ускоренной оценки картофеля на устойчивость к макроспориозу способом конвдиального заражения отдельных листьев // Сяб. вестн. с.-х. науки. - 1985. - й 3. - С.45-48.

9. Анненков Б.Г. Оценка исходного и селекционного материала картофеля на устойчивость к фятофгорозу и макроспориозу в Приамурье: Автореф. дис. ... канд. с.-х. наук. - Хабаровск, 1985. -25 с.

10. Анненков Б.Г. Оценка фитофтороустойчивости у сортов кар-то^еяя отечественной селекции в условиях Приагдурья // Науч.-техн. бил. /ДэльНйИСХ, СО ЗАСХКйЛ. - Новосибирск, 1986. - Зьш.5: Актуальные вопросы защиты растений от болезней и сорняков на Дальнем Востоке. - С.3-5.

11. Анненков Б.Г. Освобождение сорта картофеля Пионер от вирусной, бактериальной и грибной инфекции методом вычленения апикальных меристем // Науч.-техн. бюл. /ДальНИИСХ, СО ВАСХНйЯ. -Новосибирск, 1986. - Зш.5. - С.26-29.

12. Анненков Б.Г. Сорт картофеля Невский, сортовые особенности и организация семеноводства: Информ. листок /лабар. ЦНГИ» - IS86. -й 209. - 4 с.

13. Анненков Б.Г. Сорта и семеноводство картофеля // Индустриальные техно логик возделывания картофеля в Хабаровском крае: Рекомендации / ДальНИИСХ, СО ВАСХКМ. - Хабаровск, 1986. - С.97-106.

14. Анненков Б.Г., Кельчян В.И. Оценка сортимента картофеля на вирусоустойчивость: Информ. листок / Хабар. ЦНТЙ. - IS86. -

» 345. - 4 с.

15. Анненаов Б.Г. Селекция картофеля на устойчивость к гребным заболеваниям // 71 регион, конф. молод, ученых Сибири и Дальнего Востока: Тез. докл., г.Новосибирск, 16-19 декабря 1986 г. (секц. "Селекцая и семеноводство"). - Новосибирск, 1986. - С.53-54.

16. Киселев Е.П., Фролов С.И., Анненков Б.Г. Картофель / Селекция сельскохозяйственных растений на Дальнем Востоке.- Хабаровск: Кн. кзд-во, I9S7. - С.117-144.

17. Киселев Е.П., Анненков Б.Г., Кеяьчин З.И. Исходный материал для создания сортов картофеля в условиях Приамурья // Интенсификация производства картофеля на Дальнем Востока: Науч. тр. / ДадьНШСХ, СО ВАСХНИЛ. - Новосибирск, 1987. - С.20-23.

18. Анненков Б.Г. Организация элитного саленозрдства картофеля сорта Огонек в Хабаровском крае // Интенсификация производства картофеля на Дальнем Востоке: Науч. тр. /ДальНИИСХ, СО ВАСХНИЛ. -Новосибирск, 1987. - С.76-79.

19. Анненков Б.Г. Внутривидовая неоднородность Приамурской популяции возбудителя макроспориоза картофеля // Сиб.вестн. с.-х. науки. - 1987. - Л 2. - С.19-20.

20. Анненков Б.Г. Ускоренное размножение оздоровленного материала картофеля: Информ. листок /Хабар. ЩТИ. - 1987. - й 346. -

4 с.

21. Анненков Б.Г. Достичь стабильности урожаев картофеля позволяет интенсификация производства, внедрение индустриадьнкх технологий и перспективных сортов, устойчивых к заболеваниям (Ыакроопо-риоз картофеля в Приамурье и пути снижения его вредоносности) // Земля Сибирская, Дальневосточная. - 1987. - Л 12. - С.24.

22. Анненков Б.Г., Павленкович О.В., Герасиму И.Е. Продук-. ■гиввоегь семенного материала картофеля, оздоровленного от вирусов через культуру тканей: Информ. листок /Хабар. ЦВЗИ. - 1988. -

£ 76. - 4 с.

23. Анненков Б.Г. Семена из ... пробирки // Земля Сибирская, Дальневосточная. - IS88. - Л 5, - С.24.

24. Киселев Е.П., Анненков Б.Г., Золотарева З.В. и др. Технология производства семенного картофеля на индустриальной основе в Хабаровском крае: Рекомендации /ДальНИйСХ, СО ВАСХНИЛ. - Новосибирск, I988. - 84 с.

25. Киселев Е.П., Анненков Б.Г., Дофан Н.Г. Энергосберегающая, грядовая, индустриальная технология возделывания картофеля // Науч.-дроизвод. совещ.: Тез. докл., г .Уфа, 28 февраля-2 марта 1989 г. -Уфа, 1989. - C.I2G-I2I.

26. Анненков Б.Г., Федоров А.Ф. Что посеем в XXI веке // Земля Сибирская, Дальневосточная. - 1989. - И 7. - C.I7-I8.

27. Анненков Б.Г., Павленкович О.В. Метод меристемно-тканево-го освобождения картофеля от вирусов: Информ. листок /Хабар. ЩТИ.-

1989. - & 342. - 4 с.

28. Киселев Е.П., Анненков Б.Г. Особенности и перспективы использования методов биотехнологии в селекции картофеля на Дальнем Востоке //Сельскохозяйственная биология. - 1989. - 1 5,-

С.11-16.

29. Киселев Е.П., Анненков Б.Г. Селекция картофеля, устойчивого к грибным болезням в условиях Приамурья // Науч-техн.бюл. / ДаяьШИСХ, СО ВАСХЕИЯ. - Новосибирск, 1990. -Вып.1: Селекция, семеноводство и агротехника овощей и картофеля на Дальнем Востоке.-

С.3-5.

30. Анненков Б.Г., Белуга Т.А., Павленкович О.В. Использование культуры клетскитканей для селекции и семеноводства картофеля в Хабаровском крае //Науч.-техн. бюл. /ДальЕШСХ СО Б&СХНЙЯ. - Новосибирск, 1990. - Вып.1. - С.6-9.

31. Киселев Е.П., Анненков Б.Г., Фролов С.И. Картофель // Возделывание сельскохозяйственных культур по интенсивным технологиям: Метод, рекомендации /СО ВАСХНИЛ. - Новосибирск, 1990. -C.I3I-I4I.

32. Анненков Б.Г. Схеш элитного семеноводства сортов картофеля на оздоровленной основе: Информ. листок Дабар. ЦНТИ. -1920. - И 115. - 4 с.

33. Анненков Б.Г., Золотарева Е.В., Кофан Н.Г. Путь к самообеспечению (Агробиологические резервы высокой продуктивности картофелеводства в Приамурье) // Земая Сибирская, Дальневосточная. -1990. - & 6. - С.10-13.

34. Анненков Б.Г. Оценка межвидовых гибридов картофеля на устойчивость к фигофторозу в Приамурье //Науч.-техн. б» д. / ДапьНИИСХ,СО ВАСХНЙЛ. - Новосибирск, 1990. - Вш.2: Иммунитет и защита картофеля и овощей от болезней и вредителей на Дальнем Востоке. - С.3-9.

35. Анненков Б.Г. Макроспораоз картофеля в Хабаровском крае // Науч.-техн. бюд. / ДальНШСХ,СО БАСШ1Л. - Новосибирск, 1990. -Ввп .2. - С .9-14.

36. Анненков Б.Г. Биотехника меристемно-тканевого курса лечения сортов картофеля от хронической вирусной инфекция //Саб. зестн. с.-х. науки. - 1390. - S 3. - С.110-116.

37. Анненков Б.Г. Теория и практика оздоровления сеьгааного картофеля от вирусов в Приамурье // Промышленное производство саманного картофеля на бвзвирусной основе в Дальневосточной зоне: Науч. хр./ДальНШСХ,СО ВАСХШИ. - Новосибирск, 1990. - C.I4-38.

38. Аннанков Б.Г. Оценка исходного и гибридного материала картофеля в селекции на устойчивость к ыакроспориозу //Селекция, семеноводство и технология возделывания сельскохозяйственных культур в Приморье: Науч.тр. /ПримКИИСХ.СО ВАСХШД. - Новосибирск, 1980. - С.55-66.

39. Киселев ЕЛ., Новоселов А.К., Анненков Б.Г., Кеяьчин Б.И. Картофель //Методика селекционных работ до 2010 г. по созданию высокопродуктивных, комплексно-ценных сортов зерновых, сои, многолетних трав, картофеля, овощей и плодово-ягодных культур в зоне Дальнего Востока /ДальШШСХ.СО ВАСХНИ1. - Новосибирск, I9S0. -

С.102-142.

40. Анвааков Б.Г., Белуга Т.А., Рубан З.С. и др. Перспективы сэдакодоаных биотехнологий //Методика селекционных работ до 20IG г. ... - Новосибирск, 1990. - С.195-207.

41. Анненков Б.Г., Белуга Т.А. Кавлусообразованиэ у сортов картофеля //Доклады ВАСХНШЕ. - I9SI. - ü 3. - С.14-17.

42. Анненков Б.Г., Грязез А.О. Клеточно-Еканевая культура томатов //Сиб. вестн. с.-х.науки. - 1993. - J5 I, - С.15-20.

43. Белуга Ï.A., Анненков Б.Г. Регенерация растений в культуре каллусаой ткашг картофеля //Науч.-техн.бюд. /ДааьНКИСХ,СО

РАСХН. - Новосибирск, 1993. - Вып.1-2: Использование клеточно-тка-невых культур и селекционных биотехнологий в растениеводстве. -

С. 16—21.

¿4. Аннзнкоб Б.Г., Сгушша А.К. Технология производства оздоровленных исходных клубней для элитного семеноводства картофеля в Приамурье: Информ. листок /Хабар. ВДТИ. - 1994. - й 23. - 5 с.

45. Анненков Б.Г. Способ получения технического токсина аль-гернариоза картофеля для бкотехнологических целей: Информ. листок/ Хабар. ЦНТИ. - 1994. - Д 24. - 5 с.

45. Анненков Б.Г., Киселев Е.П., Золотарева Е.В. и др. Сорт картофеля Евгирия. Автор, свид. РФ й 6470. - 1994 / по заявке А 5003651 от 09.11.68.

47. Анненков Б.Г. Методика выделения и использования токсина

¿аРап1 в традиционной и клеточной селекции картофеля на болезнеустойчивость // Селекция и технология возделывания о.-х. культур на Дальнем Востоке: Науч. тр./ ДБО РАСХН. - Хабаровск, 1995. - С.106-120.

48. Анненков Б.Г. Меристемно-тканевое оздоровление семенного картофеля в Приамурье // Защита растений на Дальнем Востоке: Науч. тр./ ДЗО РАСХН. - Хабаровск, 1995. - С.113-126.

49. Анненков Б.Г. Проблемы я перспективы влияния оздоровительных мероприятий на продуктивность Дальневосточного картофелеводства: Науч.тр. /ДЗО РАСХН. - 18 стр. машинописи (в печати).

50. Анненков Б.Г. Развитие биотехнологий в ДальНШСХ: Науч. тр. /ДальНШСХ, ДВО РАСХН. - 21 стр. машинописи (в печати).

51. Анненков Б.Г. Методические основы сортоулучшения картофеля с использованием культуры эксплантов, калдусов и регенератов иг VI ¿?-о : Рекомендация /ДальНШСХ, ДВО РАСХН. - 30 стр. машинописи (в печати).

ОСНОВНЫЕ РУКОПИСНЫЕ! МАТЕРИАЛЫ ПО ГШ ИССЛЕДОВАНИЕ

1. Аняэнков Б.Г. Оценка исходного и селекционного материала картофеля на устойчивость к фитофторозу и макроспориозу в Приамурье: Дис. ... канд. с.-х.наук. - Хабаровск, 1985. - 183 с.

2. Разработать и внедрить технологические схеш, приемы я методы производства элитного и семенного картофеля высших репродукций на безвирусной основе в условиях специализированных хозяйств

/ Б.Г .Анненков, И.Д.Мильченко, В.С.Зашгшагова, С Л.Клевцова: Отчет

о ЕЛ? (заядючиг.) /ДальНЖЗХ. - Хабаровск, 1385. - 45 с.

3. Создать и внедрить сорт картофеля среднеспелый /З.П.Киселев, С.й.Фролов, Е.В.Бояотарава, Б.Г. Анненков, 0.А.Вику лова: Отчет о

НИР (заключит.) /ДальНШСХ. - Хабаровск, 1385. - 27 с.

4. Разработать и внедрять в специализированных хозяйствах технологический процесс и метода производства элитного и семенного картофеля высших репродукций на оздоровленной основе /5.Г.Анненков, И.Д.Мияьченко, П.С.Ляшов, В.С.Ззллхыатова, С.А.Кяевцова, О.ВЛав-ленковкч: Отчет о ШГР (заключит.) /ДальНШСХ. - Хабаровск, 196?.-45 с.

5. Создать и передать в ГСИ среднеспелый - среднелоздний сорт картофеля /Е.П.Кзселез, Е.З.Золотарева, В.И.Кеяьчин, Г.М.Черепанова, Т.О .Ермолаева, Б.Г .Анненков: Отчет о НИР (закшчит.) /ДальШ'МОХ. -Хабаровск, 1388. - 39 с.

6. Разработать метод использования мутагенных факторов и селективных сред на различном урознэ регенераций растений картофеля/

Б.Г.Анненков, Т.А.Белуга, З.В.Ш'езченко, Е.З.Ыарппова: Отчет о КИР (заключит.) / ДальНШСХ. - Хабаровск, 1988. - 34 с.

7. Освобождение районированных и перспективных сортов картофеля от вирусов и размножение оздоровленного исходного материала для обеспечения первичного и элитного семеноводства картофеля з Хабаровском крае / Б.Г.Анненков, О.В.Павленковяч, О.А.Попова, А.И.Ступина

и др.: Отчет для Хаб. АПК (заключит.) / ДальКйШХ» - Хабаровск, 1939. - 24 с.

8. Разработать н внедрить технологический процесс производства элитного и "сортового картофеля на оздоровленной основе и системы иммунодиагностики вирусных болезней картофеля / Б.Г .Анненков, С.А. Клевцова, Т.ПЛепига, В.С.Баляхмагова, О.В.Рощина: Отчет о НИР (заключит.) / ДальНШСХ. - Хабаровск, 1990. - 23 с.

9. Анненков Б.Г., Белуга Т.А., Шевченко В.З. Разработать и усовершенствовать для селекции картофеля методы к способы, основанные

на использовании клеточно-тканевзй культуры: Отчет о ИКР (заключит.)/ ДальНЕКСХ. - Хабаровск, 1992. - 47 с.

1С. Аннеккс-в Б.Г. Способ получения токсина мшсромицега паг(а ¿oPa.ni. Заявка на предполагаемое изобретение й 5062634/13 (043019), 21.09.52 // С положат, решением о выдаче патента от 27.04.95.

11. Анненков Б.Г., Бэадга Т.А. Способ сортоулучшения карго-феля на устойчивость к альгэрнариозу. Заявка на предполагаемое изобретение 5 5053338/13 ( 043198), 23.09.92.

12. Анненков Б.Г. Способ формирования гибрвдних популяций сзянцез картофеля, устойчивых к альтернаркозу. Заявка шпредполагаема изобретение й 5063339/13 ( 043199), 23.C9.S2.

13. Анненков Б.Г., Белуга Т.А. Способ подученая ¿я VIIто селекционной популяции регвнерантов при сомаклональном сортоулуч-шенпл картофеля. Заявка на предполагаемое изобретение № 52-0002583/ 13 (045409), 27.10.92 // С положит, решением о выдаче патента

от 15.06.55,

14. Е.П.Киозлез, Б.Г .Анненков, Г .Ы .Черепанова и др. Заяэка на сорт картофеля Дальзаз $ 9602470 от 07.12.95.