Морфологические аспекты взаимодействия гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной и тиреоидной осей при хроническом стрессе

Шараевская, Мария Викторовна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Морфологические аспекты взаимодействия гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной и тиреоидной осей при хроническом стрессе
ВАК РФ 03.03.04, Клеточная биология, цитология, гистология

Автореферат диссертации по теме "Морфологические аспекты взаимодействия гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной и тиреоидной осей при хроническом стрессе"

На правах рукописи

Шараевская Мария Викторовна

МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ ГИПОТАЛАМО-ГИПОФИЗАРНО-АДРЕНОКОРТИКАЛЬНОЙ И ТИРЕОИДНОЙ ОСЕЙ ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ СТРЕССЕ

03.03.04 клеточная биология, цитология, гистология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Волгоград 2011

4853817

Работа выполнена в Волгоградском государственном медицинском университете. Научные руководители:

член-корреспондент РАМН, профессор Кузнецов Сергей Львович; кандидат медицинских наук, доцент Емельянов Дмитрий Николаевич

Официальные оппоненты:

- доктор медицинских наук, профессор Павлов Алексей Владимирович

- доктор медицинских наук, профессор Хлопонин Петр Андреевич

Ведущая организация - Саратовский государственный медицинский университет им. В.И.Разумовского

Защита состоите« « '¡О 1 года в 10.00 часов на заседании Диссертационно

совета Д 208.008.01 при Волгоградском государственном медицинском университете по адресу: 400066 Волгоград, пл.Пааших борцов, 1.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Волгоградского государственного медицинского университета (400066 Волгоград, пл.Павших борцов, 1).

Ученый секретарь Диссертационного совет-

доктор медицинских наук

ОБШАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Нейроэндокринные системы являются ответственными за контроль гомеостатических процессов в организме, включая рост, метаболизм, энергетический баланс, репродуктивную функцию, а также стресс-респонсивность [E.Szerek е.а., 2008; L.Mebis е.а., 2009; S.A.Sower е.а., 2009; J.F.Leatherland е.а., 2010; R.M.Uribe е.а., 2010]. Однако обусловленные стрессом модуляции нейроэндокринных систем в их взаимодействии остаются мало изученными, а исследования влияния стресса на них сосредоточены главным образом на изменениях в их периферических мишенях [А.В.Павлов и др., 2007; СЛ.Кузнецов и др., 2008; R.J.Servatius е.а., 2001; A.C.Gore, 2010]. Это в полной мере относится к гипоталамо-гипофизарно-тиреоидной системе (ГТТС), участие которой в адаптации организма к стрессу описано в основном на уровне периферического звена, реже - на гипоталамическом уровне. Исследование влияния стресса на тиреоидный статус организма, как правило, ограничено изучением уровня тиреоидных гормонов или морфологии щитовидной железы без учета гипоталамо-гипофизарного контроля [МЛО.Капитонова и др., 2009; V.Rajkovic е.а., 2003; E.A.NiIIni е.а., 2010].

В немногочисленных сообщениях о влиянии стресса на щитовидную железу речь преимущественно идет либо о температурных и метаболических воздействиях (холод, голодание, дегидратация), к которым фолликулярный компартмент щитовидной железы чувствителен и вне стрессорной парадигмы, либо об ограничении движений, которые вызывают изменения парафолликулярных клеток, связанных с фолликулярным компартментом паракрштыми механизмами, что также не .позволяет оценить в полной мере стресс-реакцию щитовидной железы как периферического звена гипоталамо-гипофизарно-тиреоидной оси (ITTO) [Y.Pan et al., 2007; D.Sharma e.a., 2009; V.Sejian e.a., 2010]. Работы о влиянии других видов стресса, не связанных с перечисленными воздействиями, единичны, хотя именно они могли бы показать участие щитовидной железы как звена ГТТО в формировании стрессорного

3 х

ответа и во взаимодействии последней с гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной осью (ГТАО), обеспечивающей неспецифическую адаптационную реакцию организма на стресс [D.L.Helmreich е.а., 2005; E.Fliers е.а., 2006; P.P.Ray е.а., 2008]. Исследования о влиянии гетеротипических стрессоров на I I i О в растущем организме в литературе отсутствуют.

Ряд исследований продемонстрировали, что критическим периодом для развития головного мозга является ранний постнатальный онтогенез, во время которого необходимо поддержание эутиреоидного состояния, обеспечивающего нормальное формирование центральной нервной системы в различные периоды раннего детства и нарушение которого может приводить к усилению апоптоза нервных и глиальных клеток, нарушению нормального синаптогенеза, миелиногенеза, глиогенеза, а также нейрогенеза в отдельных частях головного мозга [KX.Howdeshell, 2002; R.T. Zoeller е.а., 2005]. В этой связи особый интерес представляет возможное влияние стресса на 11 ТО и тиреоидный статус организма, изменение которого может привести к нарушению развития головного мозга в раннем детстве.

Установлено, что стресс вызывает акцидентальную инволюцию тимуса, особенно разрушительную в растущем организме. Известно также, что гормоны тимуса важны для поддержания тиреоидного статуса в ходе раннего постнатального онтогенеза [G.R.Klein, 2006; G.Pearse, 2006; R.G.Goya е.а., 2004; G.Camihort е.а., 2008]. Влияние стресс-ассоциированной инволюции тимуса на морфологию щитовидной железы в различные периоды детства остаются практически неизученными, что не позволяет в полной мере оценить последствия стресса для ГТТО и нейроэндокринной системы в целом.

Все выше изложенное побудило нас предпринять данное исследование, посвященное модуляции гипофизарно-тиреоидной системы при адаптации растущего организма к хроническому стрессу.

Целью настоящего исследования является изучение структурных основ взаимодействия гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной и тиреоидной

осей при хроническом действии стрессоров на организм экспериментальных животных в различные возрастные периоды.

Задачи исследования: I .Исследовать хроническое действие гомотипического стрессора на морфо-функциональные характеристики гипофизарно-тиреоидной системы растущего организма экспериментальных животных в грудном, подсосном и инфантном периодах.

2. Изучить в сравнительном аспекте особенности активации гипофизарно-тиреоидной системы растущего организма при хроническом действии гетеротипического стрессора.

3. Выявить взаимосвязь между морфо-функциональными изменениями гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной и тиреоидной осей при хроническом стрессе на разных этапах раннего постнатального онтогенеза.

Научная новизна работы.

В исследовании впервые с применением иммуногистохимии и имидж-анализа были продемонстрированы закономерности адаптационных изменений и взаимодействия гипоталамо-пшофизарно-адренокортикальной и тиреоидной осей на ранних этапах постнатального онтогенеза при хроническом стрессе. Определены возрастные особенности адаптации гипофизарно-тиреоидной системы к хроническому действию гомо- и гетеротипических стрессоров в растущем организме.

Теоретическое значение работы заключается в определении онтогенетических закономерностей стресс-ассоциированного взаимодействия гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной и тиреоидной осей в растущем организме.

Практическая значимость работы заключается в предоставлении данных об адаптационном потенциале гипофизарно-тиреоидной системы при действии различных типов стрессоров (гомо- и гетеротипических), которые правомерно использовать при разработке профилактических мер борьбы с

нейроэндокринными и метаболическими последствиями хронического стресса в раннем возрасте.

Внедрение в практику: результаты диссертационного исследования внедрены в учебный процесс на кафедрах анатомии человека, нормальной физиологии, а также на кафедре анатомии и физиологии животных в Волгоградской государственной сельскохозяйственной академии.

Публикации и апробация материалов диссертации. Материалы диссертации докладывались на конференции «Внедрение новых образовательных технологий», медицинские науки, о.Бали (Индонезия), декабрь 2008; на VI международной научной конференции "Современные проблемы экспериментальной и клинической медицины", Камбоджа, февраль 2009; на VI съезде анатомов, гистологов и эмбриологов России, Саратов, сентябрь 2009; на конференции «Развитие научного потенциала высшей школы», Дубай (ОАЭ), март 2009; на IV международной научной конференции «Актуальные проблемы науки и образования», Варадеро (Куба), март 2009; на международной научной конференции «Современные проблемы экспериментальной и клинической медицины», Бангкок (Тайланд), декабрь 2009 года; на заседании Волгоградского отделения Всероссийского научного общества анатомов, гистологов и эмбриологов, ноябрь 2010. Результаты исследования отражены в 10 публикациях, 3 из которых - в изданиях, рекомендованных ВАК для опубликования материалов диссертаций.

Положения, выносимые на защиту:

1.Адаптация растущего организма к хроническому стрессу определяется эффективностью взаимодействия гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной и тиреоидной осей, обусловленной возрастными особенностями его нейроэндокринной системы.

2.Гомо- и гетеротипические стрессоры, действуя хронически, формируют различные адаптационные паттерны в гипофизарно-тиреоидной системе на разных этапах раннего постнатального онтогенеза.

Объем и структура диссертации. Текст диссертации изложен на 120 страницах машинописного текста и состоит из введения, части I - обзора литературы, посвященного морфо-функциональным особенностям гипоталамо-пшофизарно-тиреоидной системы и ее модуляциях при различных антропогенных воздействиях, включая стресс, и части П, с 3-мя главами, описывающими материал и методы исследования, результаты, обсуждение полученных данных и выводы. В качестве иллюстраций диссертация содержит 4 таблицы и 36 рисунков, из них 22 - микрофотографии гистологических препаратов. Библиографический указатель содержит 166 источников, в том числе 21 - из российской и 145 - из зарубежной литературы.

Содержание работы

Материалы и методы исследования.

Всего в данном экспериментальном исследовании было использовано 72 крысы-самца породы Sprague-Dawley, представляющие три возрастные подгруппы, соответствующие грудному возрасту, периоду перехода на самостоятельное питание и инфантному возрасту (T.B.Poole et al.. 1987). На момент окончания эксперимента, который длился 7 дней, возраст животных составил соответственно 20, 27 и 36 дней (1-я, 2-я и 3-я возрастные подгруппы соответственно). Животные были поделены на две группы: экспериментальную (48 крыс) и контрольную (24 крысы). Экспериментальная группа делилась на 2 подгруппы для моделирования хронического стресса с использованием гомо- и гетеротипического стрессоров. Обе экспериментальные и контрольная группы включали в себя по 3 возрастные подгруппы, численность каждой из которых составляла 8 особей. Животные 1-ой экспериментальной группы оказывались под действием стресса «избегания воды» [J.Santos е.а., 2000]. Стресс воспроизводился ежедневно на протяжении 7 дней по 5 часов в день, таким образом, данное стрессорное воздействие можно охарактеризовать как хроническое с применением гомотипического стрессора [A.Bartolomucci е.а. 2000]. Крысы 2-ой экспериментальной группы находились под действием

хронического гетеротшшческого непредсказуемого стрессора в модели [B.K.Choudhury et al., 2003] с некоторыми модификациями. Животные подгрупп возрастного контроля содержались в отдельном помещении вне зоны доступа к экспериментальным особям. Через 1 час после последнего стрессорного воздействия у животных определялась масса тела, они под анестезией забивались, у них извлекались гипоталамус, эндокринные железы (гипофиз, щитовидная железа, надпочечники), а также тимус и желудок (последние - для общей оценки наличия или отсутствия «триады» стресса). Определялась также масса гипофиза и надпочечника (правого, как более стресс-реактивного). Органы фиксировались формалином и заливались в парафин. Окрашивание гистологических срезов производилось гематоксилин-эозином и по Ван Гизону. Для иммуногистохимического исследования использовались серийные срезы, смонтированные на предметных стеклах Polylysine TM (Menzel-Glaser). Они окрашивались моноклональными антителами против: кортикотропин-рилизинг фактора (КРФ, Sigma, США) - гипоталамус; тироглобулина и кальцитонина (ДАКО, Дания) - щитовидная железа; тиротропина (Миллипор, США) и АКТГ (ДАКО, Дания) - гипофиз, PCNA и каспазы-3 (Серотек, США) - гипофиз и щитовидная железа. Применялся стрептавидин-биотин-пероксидазный метод, в котором цветной продукт реакции (окисленный диаминобензидин) окрашивал в коричневый цвет искомый антиген, специфически связанный с соответствующим первичным антителом, которое, в свою очередь, было связано с вторичным биотин-связанным антителом с ковалентно сцепленным стрептавидин-пероксидаз ным комплексом [JJVLPolak, 2003].

С применением имидж анализа (программа Leica QWin) определяли удельную площадь иммунореактивных клеток на препаратах, окрашенных иммуногистохимически. Кроме того, на препаратах щитовидной железы, окрашенных рутинными гистологическими методами, определяли морфометрические параметры фолликулов (площадь, высоту фолликулярного

эпителия, площадь коллоида, удельную площадь сосудистого русла). Рассчитывали индексы активности щитовидной железы, накопления коллоида, кровообращения [О.К.Хмелышцкий и др., 1998]. Вычисляли t-критерий Стыодента в программе Excel; проводили корреляционный анализ с использованием коэффициента Пирсона.

Полученные результаты и их обсуждение.

Триада стресса по Г.Селье (гипертрофия надпочечников, атрофия тимуса и кровоизлияния на слизистой оболочке желудка) наблюдалась у всех животных экспериментальных групп. У животных 2-ой группы она сочеталась с достоверным снижением массы тела во всех возрастных подгруппах (рис.1). Относительная .масса тимуса продолжала увеличиваться от грудного к подсосному периоду, после чего начинала уменьшаться. При стрессе акцидентальная инволюция тимуса была наименее выраженной в 3-ей возрастной подгруппе, достигая уровня достоверности лишь во 2-ой экспериментальной группе (рис.2).

Светооптическая оценка щитовидной железы показала, что у контрольных неполовозрелых крыс она выглядит высоко дифференцированной, уже начиная с группы грудного возраста. В ней присутствуют мелкие и средние фолликулы, выстланные главным образом кубическим эпителием, кроме периферических отделов, где эпителиальная выстилка бывает плоской. Коллоид в фолликулах бледно-оксифильный, во многих фолликулах имеются резорбционные вакуоли. Изредка в составе фолликулов определяются более крупные округлые светлые клетки, которые на серийных срезах, окрашенных иммуногистохимически, окрашиваются антитителами против кальцитонина, так же как и небольшое количество клеток в парафолликулярном пространстве, преимущественно в центральной части горизонтального среза железы. Тироглобулин-позитивность была выше у тироцитов, чем у слабо окрашенного коллоида. Окрашивание на PCNA выявило значительную долю

иммунореактивных клеток, достаточно равномерно распределенных по паренхиме железы, в то время как каспаза-3-позитивных клеток было мало, нередко они образовывали скопления. Это описание соответствует картине щитовидной железы контрольных крыс грудного и подсосного возраста, в то время как к инфантному периоду морфология ее претерпевала изменения, касающиеся размера фолликулов, пенистости коллоида, распределения кальцитонин-позитивных клеток и доли клеток, окрашенных на тироглобулин, маркеры пролиферации и апоптоза, что нашло свое отражение в изменении соответствующих морфометрических параметров оценки.

При хроническом стрессе светооптическая картина щитовидной железы менялась в зависимости от типа примененного стрессорного воздействия. При действии гомотипического стресса изменения были незначительными, они проявлялись больше всего в группе животных исходного грудного возраста и касались размеров фолликулов, состояния коллоида, распространения тироцитов, гибнущих апоптозом. При действии гетеротипического стресса изменения были выражены сильнее, они касались уже формы фолликулов, высоты фолликулярного эпителия, распределения пролиферирующих клеток, кальцитониноцитов, распространенности и интенсивности тироглобулин-позитивного окрашивания. Наименьшими эти изменения были в группе животных инфантного возраста.

Микроскопическая оценка надпочечника показала наличие его выраженной гипертрофии при стрессе в обеих экспериментальных группах всех возрастных подгрупп, которая проявлялась в расширении коркового вещества за счет пучковой зоны, а также увеличении размеров и пенистости кортикостероцитов, особенно заметном на границе пучковой и сетчатой зоны. Эти изменения были более выражены при действии гетеротипического стресса.

В аденопшофизе у животных разных возрастных подгрупп при стрессе отмечалось общее увеличение клеточности, в частности за счет базофилов, их гипертрофия, а также наличие полнокровия микрососудов, увеличение числа

кист и фолликулов, что было особенно очевидно во 2-ой экспериментальной группе. В паравентрикулярном ядре гипоталамуса у животных 2-ой экспериментальной группы отмечалась гипертрофия нейросекреторных клеток его мелкоклеточной фракции, несколько более выраженная в 1-ой и 2-ой возрастной подгруппах.

Таким образом, микроскопическая оценка выявила изменения как в центральных, так и в периферических звеньях гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной и тиреоидной систем, отражающие и вид примененного стрессора, и исходный возраст экспериментальных животных изменения, объективизация которых была обеспечена проведенным цифровым анализом гистологически и иммуногистохимически окрашенных срезов эндокринных желез.

Результаты имидж-анализа гистологических препаратов гипоталамуса, гипофиза, щитовидной железы и надпочечников представлены в рис. 3-12.

Как следует из рис.3, в паравентрикулярном ядре гипоталамуса достоверно повышалась доля КРФ+нейросекреторных клеток во всех возрастных подгруппах при действии гетеротипического стресса. При действии гомотипического стрессора этот показатель также возрастал во всех группах, но у животных грудного возраста - ниже уровня значимости различий.

Возрастная и стресс-ассоциированная динамика показателя активности ГГАО на уровне гипофиза по данным оценки иммуногистохимического окрашивания на АКТГ представлена в рнс.4. Этот показатель повышался у экспериментальных животных с различным уровнем значимости, кроме 1-ой экспериментальной группы 1-ой возрастной подгруппы.

Чрезвычайно интересно было сопоставить динамику данного показателя с изменениями в распространенности другой клеточной популяции аденопшофиза - тиротропоцитов. Данные количественного иммуногистохимического анализа гипофиза при окраске на тиротропный гормон (111) при стрессе получены нами впервые (рис.5). Анализ показал, что

Рис. 1. Масса тела крыс (г) при стрессе, Рис. 2. Относительная масса тимуса (%) М+/-Ш. при стрессе, М+/-ш.

100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 О

+++

гч

гЬ * г-ЭК

гЬ- *

гЪ- * -а-

т <ч ■н «п V© во в" +1 об Р

«1 •И «л •н ГЧ -н * Г-1 -Н к -Н гп •я

»л г! ¡К * чг р» 99 о\ К л во г- 04.49 Я р

0.6 0,5 0,4 0,3 0.2 0.1

контроль 1-я группа 2-я группа

Рис. 3. Удельная площадь КРФ-поло-жительных клеток (%) паравентрику лирного ядра гипоталамуса при стрессе, М+/-Ш

Рас. 4. Удельная площадь АКТГ-пози-тквных клеток (*/») аденогипофгоа при хроническом стрессе, М+/-Ш

кошроль 1 -я груша 2-я груша [ | - 14 дней

18 16 14 12 10 8 6 4 2 О

***

контроль 1-я группа 2-я группа

* -р <0,05

** .р <0,01

*** -р <0,001

И-21 день I 1-30;

при сравнении с + -р<0,05 | при сравнении с

возрастным контролем ~грудным возрастом

доля ТТГ+клеток в противоположность АКТГ+аденоцитам с возрастом увеличивается, и это увеличение к инфантному периоду становится достоверным (р<0,05). При стрессе этот показатель, также в противоположность АКТГ+клеткам, снижается: достоверно во всех возрастных подгруппах 2-ой экспериментальной группы и в 3-ей возрастной подгруппе 1-ой экспериментальной группы.

В рнс.6-11 собраны данные о том, как возрастная и стресс-ассоциированная динамика тиротропоцитов в передней доле гипофиза влияла на морфологические и функциональные параметры щитовидной железы.

Доля тироглобулин-иммунореактивных клеток у растущих крыс достаточно велика (рвс.б), она неуклонно увеличивается с возрастом, увеличение достигает уровня значимости к инфантному периоду (р<0,05). При стрессе она достоверно уменьшается у всех животных 2-ой экспериментальной группы, в то время как в 1-ой экспериментальной группе это снижение достоверно лишь в 1-ой возрастной подгруппе, проявляется в виде тенденции во 2-ой возрастной подгруппе, а в 3-ей возрастной подгруппе данный показатель изменяется мало. Данные о распределении клеток щитовидной железы, экспрессирущих маркеры апоптоза и пролиферации, в раннем постнатальном онтогенезе и при стрессе приводятся впервые (рнс.7,8). Как следует из рис.7, доля РСЖА+клеток в щитовидной железе увеличивается с возрастом (р<0,05 к инфантному возрасту). При действии гетеротипического стрессора она снижается во всех возрастных подгруппах, но в большей степени в 1-ой (р<0,01). Дня 1-ой экспериментальной группы это снижение было недостоверным. Рис.8 показывает, что доля каспаза-3+клеток в щитовидной железе заметно увеличивается с возрастом (р<0,05 к инфантному периоду). При стрессе она увеличивается во всех возрастных подгруппах, но в большей степени в 1-ой (р<0,05 и р<0,01 для 1-ой и 2-ой экспериментальных групп соответственно). Для 2-ой и 3-й возрастных подгрупп это увеличение было достоверно только во 2-ой экспериментальной группе (р<0,05).

Рис. 5. Удельная площадь ТТГ+клеток Рис. 6. Удельная площадь

(%) аденогипофиза при стрессе, М+/-Ш тироглобулнн-позитивных клеток (%) в

щитовидной железе при стрессе, М+/-Ю

9 8 7 6 5 4 3 2 1 О

4-,_**

11—т

контроль 1-я группа 2-я группа

90 50

17?

контроль 1-я груша 2-я группа П]

Рис.7. Удельная площадь РС^-иозитивиых клеток (%) в щитовидной железе при стрессе, М+/-Ш

Рис.8. Удельная площадь каспаза-3-положительных клеток (%) в щитовидной железе при стрессе, М+/-т

вг

ей

■н-

контроль 1-я группа 2-я группа

I I - 14 дней

+ т гЬ -Р п

р§ ♦ -5- 1

НЕ- й:'Н ;;

о\ ■ ? VI 00 р. 3 8.

-и -н -н "1 -н т I -н

«П !<51; г- 2 <4 г- мэ

контроль 1-я группа 2-я группа

* - р < 0,05 ** - р < 0,01 ***-р<0,001

при сравнении с возрастным контролем

iliS-8.il - 21 день +

Г" I - 30 дней

•р<0,05 -р<0,01 -р <0,001

при сравнении с грудным возрастом

Морфологические изменения щитовидной железы при стрессе также нашли свое отражение в морфометрических критериях оценки, среди которых один из наиболее информативных - высота тироцитов. Она не значимо увеличивалась с возрастом, имела тенденцию к уменьшению при действии гомотопического стрессора и достоверно уменьшалась при действии гетеротипического стрессора у животных грудного и подсосного возраста (р<0,01 и р<0,05 соответственно), но не у крыс инфантного периода (рис.9).

Соответственно увеличению размеров фолликулов с возрастом увеличивался и объем коллоида (р<0,05 при сравнении крыс инфантного возраста с исходным грудным возрастом) (рис.10). При стрессе наибольшие изменения данного параметра отмечались у животных 1-ой возрастной подгруппы: р<0,05 и р<0,01 в 1-ой и 2-ой экспериментальной группах соответственно. У остальных животных 1-ой экспериментальной группы данный показатель увеличивался незначительно, а во 2-ой экспериментальной группе - лишь у животных 2-ой возрастной подгруппы увеличение достигало уровня значимости (р<0,05).

Показатель активности щитовидной железы (рис.11) продемонстрировал недостоверное увеличение с возрастом, достоверное снижение при действии гетеротипического стрессора с уровнем достоверности, уменьшающимся с возрастом. Снижение показателя у животных 1-ой экспериментальной группы достигало уровня значимости в 1-ой и 2-ой возрастных подгруппах (р<0,05)

Рис.12 показывает, как увеличивается с возрастом и при хроническом стрессе кортико-мозговое соотношение в надпочечнике (показатель его активации): достоверно во 2-ой экспериментальной группе с высшим уровнем значимости различий в 3-ей возрастай подгруппе (р<0,01); в последней также достоверно в 1-ой экспериментальной группе (р<0,05).

Корреляционный анализ параметров активации/ингибирования звеньев гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной и тиреоидной осей выявил

Рис. 9. Высота тироцитов (мкм) при Рис. 10. Площадь коллоида (кв.мкм) в стрессе, М+/-Ш. фолликулах щитовидной железы при

хроническом стрессе, М+/-Ш

1000 1 900 ■

-И

-н 3

-м

контроль 1-я группа 2-я группа

700 ■ 600 ■ 500 ■ 400 1 300 ■ 200 -190 ■

•н

•ЙГ1:

'г

5$Й '.

контроль 1-я группа 2-я группа

Рис. 11. Индекс активации щитовидной железы при хроническом стрессе, М+/-Ш

Рис. 12. Корково-мозпшое соотношение надпочечника при хроническом стрессе, М+7-т

контроль

* - р < 0,05 ** - р < 0,01

1 -я группа 2-я группа | - 14 дней

***

- р < 0,001

4.8

1 3.5

3 2,5

2 1,5 1

0.5

при сравнении с возрастным контролем

контроль 1-я группа 2-я группа ■ 21 день I I - 30 дней

+ -р<0,05

-р<0,01 -р <0,001

}

при сравнении с грудным возрастом

следующие закономерности. Отрицательная корреляционная зависимость между кортико-мозговым соотношением в надпочечнике и экспрессией Г11 в аденогипофизе была сильной и достоверной во 2-ой экспериментальной группе 3-ей возрастной подгруппы (г=-0,71 при р<0,05) и умеренной достоверной - во

2-ой экспериментальной группе 2-ой возрастной подгруппы (г=-0,64 при р<0,05) и 1-ой экспериментальной группе 3-ей возрастной подгруппы (г=-0,67 при р<0,05). При этом у контрольных животных эта зависимость была средней по силе положительной у животных 2-ой и 3-ей возрастной подруппы (г=0,56 при р<0,05 и г=0,62 при р<0,05). В других группах/подгруппах она была слабой и недостоверной. Достоверная отрицательная корреляционная зависимость между экспрессией КРФ в ПВЯ гипоталамуса и 111 в аденогипофизе выявлена лишь у животных 2-й экспериментальной группы 3-ей возрастной подгруппы (г=-0,63 при р<0,05), у которых в контрольной группе эта связь была слабой положительной. Таким образом, стресс отчетливо изменял характер взаимоотношений между двумя нейроэндокринными осями - ГТАО и 11 10, переключая его с положительной корреляции на отрицательную, что свидетельствует об изменении реакции НТО на резко усиливающуюся активность коры надпочечников [D.G.Moreira е.а., 2005]. Отсутствие достоверной корреляции между этими параметрами в 1-ой возрастной подгруппе свидетельствует о том, что взаимоотношения эти устанавливаются в более позднем возрасте — после перехода на самостоятельное питание. Об этом же свидетельствует характер корреляционной связи между показателями активации/угнетения на уровне центральных звеньев гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной и тиреоидной осей, достоверной и умеренно сильной при гетеротипическом стрессе лишь у животных инфантого возраста — старшей из изучаемых возрастных подгрупп.

Между иммунореактивностью по тироглобулину и ТТГ связь была отрицательной достоверной и средней по силе у контрольных животных 2-ой и

3-й возрастных подгрупп (г=-0,60; г=-0,68 при р<0,05 соответственно) и

экспериментальных животных 1-ой группы 3-ей возрастной подгруппы (г=-0,62 при р<0,05), но положительной у экспериментальных животных 2-ой группы 2-ой и 3-ей возрастных подгрупп (г=0,63 и г=0,66 при р<0,05 соответственно). Интересно было сопоставить данное наблюдение с исследованиями [D.L.Helmreich е.а., 2005], в которых отмечена сходная направленность корреляционной связи между уровнем Т4 в периферической крови и иРНК ТРФ при стрессе. Вместе с тем авторы не приводят данные относительно содержания ТТГ ни в крови, ни в самом аденогипофизе. Кроме того, в цитируемом исследовании не рассматривается возрастной аспект данной проблемы, в то время как наши данные дают дополнительную информацию о возрастной динамике формирования взаимоотношений между центральным и периферическим звеном 11 "10.

Обнаружена средняя по силе прямая корреляционная связь между иммунореактивностью по ТТГ в аденогипофизе и PCNA-позитивностью в щитовидной железе у контрольных животных во 2-ой и 3-й возрастных подгруппах (г=0,55 при р<0,05 и 1=0,62 при р<0,05 соответственно). У контрольных животных 1-ой возрастной подгруппы и у всех животных экспериментальных групп эта корреляция была слабой. Данное наблюдение свидетельствует о том, что уровень ТТГ влияет на пролиферативный потенциал тироцитов, и что это влияние также модулируется возрастом и стрессом.

Прямая корреляционная зависимость также выявлена между степенью акцидентальной инволюции тимуса и иммунореактивностью щитовидной железы по тироглобулину. Она была средней по силе достоверной (р<0,05) у животных в 1-ой и 2-ой возрастных подгруппах при действии гетеротипического стрессора (г=0,56 и г=0,53 при соответственно), а также у животных 1-ой возрастной подгруппы при действии гомотшшческого стрессора (г=0,51). Эта зависимость показывает важность тимуса для нормального развития щитовидной железы на ранних этапах постнатального онтогенеза и

показывает возможный дополнительный фактор развития первичного гипотироидизма при хроническом стрессе в растущем организме.

Таким образом, проведенное исследование показало, что в раннем постнатальном онтогенезе хронический стресс оказывает значительное влияние на гипофизарно-тиреоидную ось, как на центральное, так и на периферическое ее звено, определяемое как типом примененного стрессора (гомо- или гетеротипического), так и периодом жизни экспериментального животного, на который приходилось соответствующее стрессорное воздействие.

Иммуногистохимическое исследование гипофиза показало наличие у экспериментальных животных вторичного (центрального) гипотироидизма [ТЧ.вЫЬдоаота е.а., 2000], выраженного у всех животных после применения гетеротипического стрессора и только у животных исходного инфантного возраста при действии стрессора гомотопического. Снижение численности популяции тиротропоцитов в аденогипофизе при стрессе могло быть связано с угнетением пролиферации, усилением апоптоза или снижением уровня их дифференцировки. Однако корреляция численности данной клеточной популяции с распространенностью РСИА- и каспаза-3-иммунореактивных клеток была слабой и недостоверной, что позволяет предположить, что С01фащение представительства тиротропоцитов было связано с нарушением их дифференцировки.

Изменения на уровне периферического звена тиреоидной оси свидетельствовали о наличии первичного гипотироидизма, также связанного с типом примененного стрессора и возрастом животных. Из литературных данных известно, что гипотироидизм при стрессе способствует «консервированию ресурсов в непредсказуемой среде» [К.Расак et а1., 2001; С.Ь.Не1шгекЬ е.а., 2005]. Наше исследование показало, что наивысший уровень первичного тироидизма отмечен в возрастной группе исходного грудного возраста. Он проявлялся как функциональными сдвигами (изменение иммунореактивности по тироглобулину, индекса активации), так и

морфологическими (размерами фолликулов, площадью коллоида, высотой тироцитов). При этом уровень центрального гипотироидизма был значительно ниже, особенно при действии гомотопического стрессора, что свидетельствует об отсутствии параллелизма в формировании стресс-ассоциированных модуляционных изменений на уровне центрального и периферического звеньев ГГТО. При этом в инфантном возрасте изменения морфологических параметров фолликулярного компартмента щитовидной железы при стрессе были незначительными, в то время как функциональные параметры изменялись достоверно, и эти изменения развивались на фоне наивысшей среди возрастных подгрупп активации ГГАО, что позволяет в полной мере считать данные модуляционные сдвиги адаптационными, направленными «на консервирование ресурсов в непредсказуемой среде». Изменения функциональных параметров тиреоидного статуса в отсутствие морфологических изменений в фолликулярном компартменте щитовидной железы при различных воздействиях, включая действие стрессоров, описаны также другими авторами [Т.С.Смирнова, 2008; A.Zaki et al., 2004], однако наши исследования впервые демонстрируют эту закономерность в «непривыкаемой» стрессорной парадигме в ее онтогенетической динамике.

В наших экспериментах не была отмечена обнаруженная другими исследователями корреляционная связь между параметрами ингибирования 11 ТО и массой тела, уменьшающейся при стрессе [D.L.Helmre¡ch с.а., 2005], что вероятно связано с особенностями изучаемого нами возрастного периода, во время которого продолжается интенсивный рост тела, и стресс не прекращает, а лишь замедляет его, что делает связь между весовыми и нейроэндокринными сдвигами при хроническом стрессе более сложной.

Полученные нами результаты относительно изменения корреляционной связи между иммунореактивностью по тироглобулину и ТГГ с отрицательной в контроле на положительную при стрессе наряду с таким же изменением корреляционной зависимости между уровнем адреналовой активации,

экспрессии КРФ и степенью вторичного гипотироидизма отчетливо демонстрирует наличие тесной взаимосвязи между стресс-ассоциированными модуляциями гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной и тиреоидной осей, а также онтогенетическую динамику становления этой взаимосвязи - данные корреляции достигают уровня значимости и становятся сильными не ранее середины инфантного периода жизни. Среди механизмов взаимосвязи этих двух важнейших нейроэндокринных осей при стрессе важнейшими считаются прямое влияние повышенной концентрации кортикостерона на выработку тиротропин-рилизинг фактора (ТРФ) и уровня секреции КРФ на продукцию ТРФ [КРасак е.а., 2001; G.L.Helmreich, 2005; D.G.Moreira, 2005]. Оценка корреляционной связи между параметрами активации/угнетения центральных звеньев гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной и тиреоидной осей, позволила выявить достаточные по силе корреляции лишь в одной экспериментальной группе старшей возрастной подгруппы, что вероятно связано со сложными стресс-ассоциированными модуляционными изменениями ГТАО, включая ее диссоциацию, в остальные возрастные периоды, что согласуется с исследованиями других авторов [В.Л.Загребин, 2007; M.Yu.Kapitonova е.а., 2010].

Таким образом, у крыс грудного возраста, в противоположность животным инфантного периода, при гомотипическом стрессе вторичный гипотироидизм выражен не был, в то время как первичный гипотироидизм имел отчетливые морфо-функциональные проявления, хотя и менее значимые, чем при действии гетеротипического стрессора, характеризующегося отличным от гомотипического стрессора паттерном модуляции ГТАО. У животных инфантного возраста, напротив, вторичный гипотироидизм был отмечен как при действии гомо-, так и гетеротипического стрессора, а первичный гипотироидизм проявлялся функциональными параметрами только при действии гетеротипического стрессора, в то время как морфологические изменения не были значимыми. У животных подсосного возраста модуляции

тиреодной оси при действии гетеротипического стресса были аналогичны таковым у крыс грудного возраста, а в условиях действия гомотипического стрессора - у животных инфантного возраста. Данное наблюдение свидетельствует о том, что в раннем постнатальном онтогенезе возраст усиливал проявления постстрессового центрального пшотироидизма и нивелировал признаки периферического гипотироидизма, что подтверждает возрастную опосредованность стресс-ассоциированной модуляции ПТО в раннем постнатальном онтогенезе и ее зависимость от стрессорной парадигмы.

ВЫВОДЫ:

1. В растущем организме хронический стресс оказывает модулирующее действие на гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальную и тиреоидную оси, характер взаимодействия которых определяется видом стрессорного воздействия и этапом онкогенетического развития.

2.В грудном возрасте стресс-ассоциированная активация гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной оси приводит к формированию первичного гипотироидизма, выраженного при действии как гомо-, так и гетеротипического стрессора; в подсосном периоде морфологические признаки угнетения щитовидной железы отмечаются при действии гетеротипического стрессора, в то время как в инфантном периоде о снижении ее секреторной активности свидетельствуют функциональные показатели, что демонстрирует возрастные закономерности формирования респонсивности периферического звена гипоталамо-гипофизарно-тиреоидной оси при хроническом стрессе.

3.В инфантном периоде вторичный пшотироидизм развивается при хроническом действии как гомо-, так и гетеротипического стрессора, и его выраженность связана с интенсивностью активации ГТАО отрицательной корреляционной зависимостью. В подсосном и грудном возрасте вторичный пшотироидизм возникает при действии гетеротипического стрессора, при этом корреляционная зависимость с активностью ГТАО выявляется лишь в подсосном периоде, что отражает онтогенетическую последовательность

формирования взаимосвязи между гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной и тиреоидной осями на ранних этапах постнатального развития организма.

4. При хроническом действии гетеротипического стрессора на ранних этапах постнатального онтогенеза отмечается угнетение пролиферации фолликулярного эпителия, которая в норме, начиная с подсосного возраста оказывается связанной с уровнем экспрессии тиротропина в аденогипофизе.

5.Уровень акцидентальной инволюции тимуса влияет на выраженность признаков первичного пшотироидизма при хроническом действии гомо- и гетеротипического стрессора в грудном возрасте и при действии гетеротипического стрессора в подсосном возрасте, в то время как к инфантному периоду эта зависимость ослабевает.

6.Хронический стресс изменяет взаимоотношения между периферическим и центральным звеном гипофизарно-тиреоидной оси, свидетельствующие о нарушении отрицательной обратной связи у животных подсосного и инфантного возраста при действии гетеротипического стрессора, что демонстрирует ее повышенную чувствительность к непривыкаемой стрессорной парадигме.

Практические рекомендации

1.Для характеристики адаптационного потенциала нейроэндокринных осей при хроническом стрессе пригодны количественные иммуногистохимические показатели, характеризующие как их центральные, так и периферические звенья.

2.Возрастные особенности взаимодействия гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной и тиреоидной осей при стрессе следует учитывать при разработке программы комплексных мероприятий по профилактике нейроэндокринных и метаболических нарушений в раннем постнатальном онтогенезе.

СПИСОК РАБОТ. ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Шараевская, М.В. Морфо-функциональные особенности щитовидной железы при хроническом стрессе / Д.Н.Емельянов, М.В.Шараевская, Т.С.Смирнова, Ю.В.Дегтярь, М.Ю.Капитонова // Успехи современного естествознания.- 2008.-N12.- С.44-45

2. Шараевская, М.В. Иммуногистохимическая характеристика щитовидной железы при хроническом стрессе / Т.С.Смирнова, Ю.В.Дегтярь, М.В.Шараевская, М.Ю.Капитонова // Вестник ВодГМУ,-

2008.- №4.- С.48-51

3.Шараевская, М.В. Возрастные аспекты адаптации щитовидной железы к хроническому стрессу / Т.С.Смирнова, М.Ю. Капитонова, Ю.В.Деггярь, М.В.Шараевская // Совр. наукоем. технол.- 2008,- № 10.- С.46-47.

4. Шараевская, М.В. Динамика клеточной популяции калыщтониноцитов щитовидной железы при хроническом стрессе. / М.Ю.Капитонова, М.В.Шараевская, Н.И.Кокин, Т.С.Смирнова, Ю.В.Дегтярь // Успехи современного естествознания.- 2009.- N4.- С.21-22.

5.Шараевская, М.В. Морфометрическая характеристика компартментов щитовидной железы при хроническом действии различных по силе стрессоров / Капитонова М.Ю., Деггярь Ю.В., Шараевская М.В., Смирнова Т.С., Иванаускене Н.Ю., Нестерова А.А., Краюшкина Н.Г., Мураева Н.А., Демидович ИЛ. II Морфология.- 2009.- Vol.136.- N4.- С.71.

6. Шараевская, М.В. Особенности действия мягкого стресса на морфологию щитовидной железы в возрастном аспекте / Н.И.Кокин, Т.С.Смирнова, КХВ.Деггярь, М.В.Шараевская, М.Ю.Капитонова // Успехи современного естествознания.- 2009,- N5.- С.71-72.

7.Sharaevskaya, M.V. Image analysis of the stress-related changes in the follicles of the thyroid gland / M.V.Sharaevskaya, N.LKokin, Yu.V.Khlebnikov, T.S.Smirnova, M.Yu.Kapitonova // International Journal of Applied and Fundamental Research.-

2009.-N2.- P.4-8.

8. Шараевская, М.В. Морфология стресс-ассоциироваыных изменений фолликулярного компартмента щитовидной железы при действии жесткого стрессора / Т.С.Смирнова, Ю.В^Деггярь, Н.И.Кокин, М.В.Шараевская, М.Ю.Капитонова // Вестник ВолГМУ.- 2009.- N2(30).-С.82-84.

9. Шараевская, М.В. Адаптационные изменения в щитовидной железе при действии физического и психологического стрессоров / М.Ю.Капитонова, Ю.В.Дегтярь, Т.С.Смирнова, Н.И.Кокин, М.В.Шараевская // Успехи современного естествознания.- 2009.- N6.- С.71-72

10. Sharaevskaya, M.V. Influence of the Processive Stressors on the structure of the thyroid gland / S.P.Gupalo, N.LKokin, Yu.V.Degtyar, Yu.V.Khlebnikov, Ragil Sekarindra, M.V.Sharaevskaya, M.Yu.Kapitonova // InternatJ. Exp. Educat. 2009.-N2.-P.3-5.

Шараевская Мария Викторовна

03.03.04 клеточная биология, цитология, гистология АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Формат 60x84 1/16. Бумага офсетная №1-65 гр. Печать офсетная. Тираж 100 экз. Заказ №1083

Отпечатано ООО "Эстамп 1" г. Волгоград, ул. Мира, 11

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Шараевская, Мария Викторовна

Список сокращений.

Оглавление.

Введение.

Глава 1. Обзор литературы. Гипоталамо-гипофизарно-тиреоидная система и ее взаимодействие с другими нейроэндокринными системами у человека и экспериментальных животных в норме и при различных воздействиях.

1.1. Понятие об нейроэндокринных системах.

1.1.1. Общая характеристика гипоталамо-гипофизарно-тиреоидной системы.

1.1.1.1 Морфо-функциональная характеристика центрального звена гипоталамо-гипофизарно-тиреоидной системы.

1.1.1.2 Морфо-функциональная характеристика периферического звена гипоталамо-гипофизарно-тиреоидной системы.

1.2 Взаимодействие гипоталамо-гипофизарно-тиреоидной оси с другими нейроэндокринными осями в организме человека и экспериментальных животных.

1.2.1 Взаимодействие гипоталамо-гипофизарно-тиреоидной оси с гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной осью.

1.2.2 Взаимодействие гипоталамо-гипофизарно-тиреоидной оси с гипоталамо-гипофизарно-гонадной осью.

1.3 Возрастные аспекты взаимодействия нейроэндокринных осей

1.4 Стресс-ассоциированная модуляция взаимодействия нейроэндокринных осей.

Глава 2. Материал и методы исследования.

Глава 3. Результаты исследования.

3.1. Общая характеристика экспериментальных и контрольных животных с анализом органометрических параметров в возрастном аспекте.

3.2. Микроскопическая характерстика изменений центральных и периферических звеньев гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой и тиреоидной систем при хроническом стрессе

3.3. Имидж анализ микроскопических и иммуногистохимических изменений в центральных и периферических звеньях гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой и тиреоидной систем при хроническом стрессе.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Морфологические аспекты взаимодействия гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной и тиреоидной осей при хроническом стрессе"

Нейроэндокринные системы являются ответственными за контроль гомеостатических процессов в организме, включая рост, метаболизм, энергетический баланс, репродуктивную функцию, а также стресс-респонсивность [E.Szerek е.а., 2008; L.Mebis е.а., 2009; S.A.Sower е.а., 2009; J.F.Leatherland е.а., 2010; R.M.Uribe е.а., 2010]. Однако обусловленные стрессом модуляции нейроэндокринных систем в их взаимодействии остаются мало изученными, а исследования влияния стресса на них сосредоточены в основном на изменениях в их периферических мишенях [А.В.Павлов и др., 2007; Д.Н.Емельянов и др., 2008; С.Л.Кузнецов и др., 2008; R.J.Servatius е.а., 2001; A.C.Gore, 2010]. Это в полной мере относится к гипоталамо-гипофизарно-тиреоидной системе (ГГТС), участие которой в адаптации организма к стрессу описано главным образом на уровне периферического звена, реже - на гипоталамическом уровне. Исследования влияния стресса на тиреоидный статус организма как правило ограничены изучением изменения уровня тиреоидных гормонов или морфологии щитовидной железы без учета его гипоталамо-гипофизарного контроля [М.Ю.Капитонова и др., 2009; Н.И.Кокин и др., 2009; Т.С.Смирнова и др., 2009; V.Rajkovic е.а., 2003; E.A.Nillni е.а., 2010].

В немногочисленных сообщениях о влиянии стресса на щитовидную железу речь, как правило, идет либо о температурных и метаболических воздействиях (холод, голодание, дегидратация), к которым фолликулярный компартмент щитовидной железы чувствителен и вне стрессорной парадигмы, либо об ограничении движений, которые вызывают изменения парафолликулярного компартмента, связанного с фолликулярным компартментом паракринными механизмами, что также не позволяет оценить в полной мере стресс-реакцию щитовидной железы как периферического звена гипоталамо-гипофизарно-тиреоидной оси (ГГТО) [Y.Pan et al., 2007; D.Sharma е.а., 2009; V.Sejian е.а., 2010]. Работы о влиянии других видов стресса, не связанных с перечисленными 5 воздействиями единичны, хотя именно они могли бы показать участие щитовидной железы в составе ГГТО в формировании стрессорного ответа и во взаимодействии последней с гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной осью (ГГАО), обеспечивающей неспецифическую адаптационную реакцию организма на стресс [D.L.Helmreich е.а., 2005; E.Fliers е.а., 2006; P.P.Ray е.а., 2008]. Исследования о влиянии гетеротипических стрессоров на ГГТО в раннем постнатальном онтогенезе в литературе отсутствуют.

Ряд исследований продемонстрировали, что критическим периодом для развития головного мозга является ранний постнатальный онтогенез, во время которого необходимо поддержание эутиреоидного состяния, обеспечивающего нормальное формирование центральной нервной системы в различные периоды раннего детства и нарушение которого может приводить к усилению апоптоза нервных и глиальных клеток, нарушению нормального синаптогенеза, миелиногенеза, глиогенеза, а также нейрогенеза в отдельных частях головного мозга, таких как гиппокамп и обонятельная луковица [Howdeshell K.L., 2002; R.T. Zoeller е.а., 2005; J.E.Reser е.а., 2006]. В этой связи особый интерес представляет возможное влияние стресса на ГГТО и тиреоидный статус организма, изменение которого может привести к нарушению развития головного мозга в раннем детстве.

Известно, что стресс вызывает акцидентальную инволюцию тимуса, особенно разрушительную в растущем организме. Известно также, что гормоны тимуса важны для поддержания тиреоидного статуса в ходе раннего постнатального онтогенеза [G.R.KIein, 2006; G.Pearse, 2006; R.G.Goya е.а., 2004; G.Camihort е.а., 2008]. Влияние стресс-ассоциированной инволюции тимуса на морфологию щитовидной железы в различные периоды детства остаются практически неизученными, что не позволяет в полной мере оценить последствия стресса для ГГТО и нейроэндокринной системы в целом.

Целью настоящего исследования является изучение структурных основ взаимодействия гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной и тиреоидной осей при хроническом действии стрессоров на организм экспериментальных животных в различные возрастные периоды.

Задачи исследования:

1. Исследовать хроническое действие гомотипического стрессора на морфо-функциональные характеристики гипофизарно-тиреоидной системы растущего организма экспериментальных животных в грудном, подсосном и инфантном периодах.

Материалы и методы исследования.

Всего в данном экспериментальном исследовании было использовано 72 крысы-самца породы Sprague-Dawley, представляющие три возрастные группы, соответствующие грудному возрасту, периоду перехода на самостоятельное питание и инфантному возрасту. Животные были поделены на две группы: экспериментальную (48 крыс) и контрольную (24 крысы). Экспериментальная группа делилась на 2 подгруппы для моделирования хронического стресса с использованием гомо- и гетеротипического стрессоров. Животные 1-ой экспериментальной группы оказывались под действием стресса «избегания воды» [J.Santos е.а., 2000]. Стресс воспроизводился ежедневно на протяжении 7 дней по 5 часов в день, таким образом данное стрессорное воздействие можно охарактеризовать как хроническое с применением гомотопического стрессора [A.Bartolomucci е.а. 2000]. Крысы 2-ой экспериментальной группы находились под действием хронического гетеротипического непредсказуемого стрессора [B.K.Choudhury et al., 2003, с некоторыми модификациями]. Гистологически и иммуногистохимически изучались гипоталамус, эндокринные железы (гипофиз, щитовидная железа, надпочечники), а также тимус и желудок (последние - для общей оценки наличия или отсутствия «триады» стресса). Использовалось окрашивание моноклональными антителами против: кортикотропин-рилизинг фактора гипоталамус; тироглобулина и кальцитонина - щитовидная железа; тиротропина и АКТГ - гипофиз, PCNA и каспазы-3 - гипофиз и щитовидная железа - с последующим имидж-анализом препаратов (программа Leica QWin) Статистическая обработка (определение нормальности распределений, средних и различий средних) осуществлялась в программе Excel; корреляционный анализ проводился с использованием коэффициента Пирсона.

Результаты исследования.

Получена детальная морфо-функциональная характеристика центральных (на уровне гипоталамуса и гипофиза) и периферических звеньев гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной и тиреоидной осей в раннем постнатальном онтогенезе при хроническом действии «привыкаемого» - гомотипического и «непривыкаемого» гетеротипического стрессора. Показано установление связей между центральными звеньями гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной и тиреоидной осей после перехода экспериментальных животных на самостоятельное питание, которому предшествует установление связей между периферическим звеном ГГАО и центральным звеном гипофизарно-тиреоидной 8 системы. Подтверждено влияние тиреоидной активности аденогипофиза на интенсивность пролиферативных процессов в щитовидной железе. Продемонстрировано ' влияние акцидентальной инволюции тимуса на морфо-функциональные показатели активности щитовидной железы в возрастном аспекте при действии различных по типу стрессоров (гомо- и гетеротипических).

Научная новизна работы.

В исследовании впервые с применением иммуногистохимии и имидж-анализа были продемонстрированы закономерности адаптационных изменений и взаимодействия гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной и тиреоидной осей на ранних этапах постнатального онтогенеза при хроническом стрессе. Определены возрастные особенности адаптации гипофизарно-тиреоидной системы к хроническому действию гомо- и гетеротипических стрессоров в растущем организме.

Внедрение в практику: результаты диссертационного исследования внедрены в учебный процесс на кафедрах анатомии человека, пропедевтики внутренних болезней и факультетской терапии (в курсе эндокринологии), а также на кафедре анатомии и физиологии животных в Волгоградской государственной сельскохозяйственной академии и в Пермской государственной медицинской академии.

Публикации и апробация материалов диссертации. Материалы диссертации докладывались на конференции «Внедрение новых образовательных технологий», медицинские науки, о.Бали (Индонезия), 10 декабря 2008 г.; на VI международной научной конференции "Современные проблемы экспериментальной и клинической медицины", Камбоджа, 18 февраля 2009 г.; на VI съезде анатомов, гистологов и эмбриологов России, Саратов, 23 сентября 2009 г. ; на конференции «Развитие научного потенциала высшей школы», Дубай (ОАЭ), 4 марта 2009 г.; на IV международной научной конференции «Актуальные проблемы науки и образования», Варадеро (Куба), 20 марта 2009 г.; на международной научной конференции «Современные проблемы экспериментальной и клинической медицины», Бангкок (Тайланд) 20 декабря 2009 г.; на заседании Волгоградского отделения Всероссийского научного общества анатомов, гистологов и эмбриологов 27 ноября 2010 г. Результаты исследования отражены в 10 публикациях, 3 из которых - в изданиях, рекомендованных ВАК для опубликования материалов диссертаций.

Положения, выносимые на защиту:

1. Адаптация растущего организма к хроническому стрессу определяется эффективностью взаимодействия гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной и тиреоидной осей, обусловленной возрастными особенностями его нейроэндокринной системы.

2. Гомо- и гетеротипические стрессоры, действуя хронически, формируют различные адаптационные паттерны в гипофизарно-тиреоидной системе на разных этапах раннего постнатального онтогенеза.

Практические рекомендации.

1. Для характеристики адаптационного потенциала нейро-эндокринных осей при хроническом стрессе пригодны количественные иммуногистохимические показатели, характеризующие как их центральные, так и периферические звенья.

2. Возрастные особенности взаимодействия гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной и тиреоидной осей при стрессе следует учитывать при разработке программы комплексных мероприятий по профилактике нейроэндокринных и метаболических нарушений в раннем постнатальном онтогенезе.

Заключение Диссертация по теме "Клеточная биология, цитология, гистология", Шараевская, Мария Викторовна

выводы

1. В растущем организме хронический стресс оказывает модулирующее действие на гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальнуто и тиреоидную оси, характер взаимодействия которых определяется видом стрессорного воздействия и этапом онтогенетического развития.

2. В грудном возрасте стресс-ассоциированная активация гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной оси приводит к формированию первичного гипотироидизма, выраженного при действии как гомо-, так и гетеротипического стрессора; в подсосном периоде морфологические признаки угнетения щитовидной железы отмечаются при действии гетеротипического стрессора, в то время как в инфантном периоде о снижении ее секреторной активности свидетельствуют функциональные показатели, что демонстрирует возрастные закономерности формирования респонсивности периферического звена гипоталамо-гипофизарно-тиреоидной оси при хроническом стрессе.

3. В инфантном периоде вторичный гипотироидизм развивается при хроническом действии как гомо-, так и гетеротипического стрессора, и его выраженность связана с интенсивностью активации ГГАО отрицательной корреляционной зависимостью. В подсосном и грудном возрасте вторичный гипотироидизм возникает при действии гетеротипического стрессора, при этом корреляционная зависимость с активностью ГГАО выявляется лишь в подсосном периоде, что отражает онтогенетическую последовательность формирования взаимосвязи между гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной и тиреоидной осями на ранних этапах постнатального развития организма.

5. Уровень акцидентальной инволюции тимуса влияет на выраженность признаков первичного гипотироидизма при хроническом действии гомо- и гетеротипического стрессора в грудном возрасте и при действии гетеротипического стрессора в подсосном возрасте, в то время как к инфантному периоду эта зависимость ослабевает.

6. Хронический стресс изменяет взаимоотношения между периферическим и центральным звеном гипофизарно-тиреоидной оси, свидетельствующие о нарушении отрицательной обратной связи у животных подсосного и инфантного возраста при действии гетеротипического стрессора, что демонстрирует ее повышенную чувствительность к непривыкаемой стрессорной парадигме.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Шараевская, Мария Викторовна, Волгоград

1. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия. Руководство.- М.: Медицина, 1990.-384с.

2. Бойко Е.Р., Евдокимов В.Г., Потолицина H.H. Система гипофиз-щитовидная железа и показатели потребления кислорода в условиях хронического охлаждения у человека на Севере // Физиология человека -2008.-T.34.-N2 . С.93-98.

3. Брюхин Г.В. Николина О.В., Барышева C.B. Морфофункциональная характеристика щитовидной железы потомства самок крыс с хроническим экспериментальным поражением печени различной этиологии // Морфология.- 2005. Т. 127,- N5. - С.56-59.

4. Воронина Р.К., Колобаев A.B., Ухова А.Ю. Особенности тинкториальных свойств коллоида щитовидной железы у женщин и мужчин в разном возрасте // Рос. мед.-биол. вестник им. акад. И. П. Павлова. 2008. - N 2 . - С. 72-78.

5. Воронцова 3. А. Реакция щитовидной железы на длительное воздействие электромагнитного излучения // Вестник новых медицинских технологий. -2003.-№3.- С.44.

6. Емельянов Д.Н., Шараевская М.В., Смирнова Т.С., Дегтярь Ю.В., Капитонова М.Ю. Морфо-функциональные особенности щитовидной железы при хроническом стрессе // Успехи современного естествознания.-2008.-N12.- С.44-45

7. Капитонова М.Ю., Дегтярь Ю.В., Смирнова Т.С., Кокии Н.И., Шараевская М.В. Адаптационные изменения в щитовидной железе при109действии физического и психологического стрессоров // Успехи современного естествознания.- 2009.- N6.- С.71-72.

8. Кокин Н.И., Смирнова Т.С., Дегтярь Ю.В., Шараевская М.В., Капитонова М.Ю. Особенности действия мягкого стресса на морфологию щитовидной железы в возрастном аспекте // Успехи современного естествознания.- 2009.- N5.- С.71-72.

9. Криштоп В.В. Сравнительная морфофункциональная характеристика щитовидной железы в условиях динамической и статической физических нагрузок//Морфология.- 2007. Том 131.- N1. - С.49-53.

10. Логинов В.И. Угнетение тиреоидной и кальцитонин продуцирующей функции щитовидной железы у крыс в невесомости // Авиакосм.Эколог.Мед,- 1999.- Т.ЗЗ.- Тб,- С.12-16.

11. Павлов A.B., Александров Ю.К., Беляков И.Е., Кораблева Т.В.

12. Морфологический анализ генетически поврежденных тироцитов в нодулярной патологии щитовидной железы // Вестн.хир.им.И.И.Грек.-2007.- Т. 166.-N2.- С.58-61.

13. Плохинский H.A. Биометрия. Москва: Издательство МГУ, 1970.- 268 С.

14. Смирнова Т.С., Дегтярь Ю.В., Кокин Н.И., Шараевская М.В., Капитонова М.Ю. Морфология стресс-ассоциированных изменений фолликулярного компартмента щитовидной железы при действии жесткого стрессора // Вестник ВолГМУ.- 2009.- N2(30).- С.82-84.

15. Трошина Е.А., Абдулхабирова Ф.М., Егорычева Е.К., Мартиросян И.Т. Рецептор тиреотропного гормона и его роль в формировании функциональной автономии щитовидной железы // Молекулярная медицина. 2005. - N2 . - С.26-32.

16. Фабрикантов О. JL, Каплан М.А., Бродский P.A. Морфофункциональные особенности действия импульсного низкоинтенсивного лазерного излучения на щитовидную железу // Лазерная медицина.- 2006,- Т. 10.- N2. С.28-31.

17. Федорова O.B. Морфологическая и иммуногистохимическая характеристика тимуса при различных видах хронического стресса на ранних этапах постнатального онтогенеза // Дисс.соиск.уч.ст.канд.мед.наук, Волгоград, 2005, 160 с.

18. Хмельницкий O.K., Иванова А.Ю. Морфофункциональная характеристика щитовидной железы плодов и новорожденных по секционным материалам Санкт-Петербурга // Арх.патол.- 2001.- Т.63.- N5.- С.13-18.

19. Хлебников В.В. Возрастная модуляция фенотипической пластичности гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы при хроническом действии стрессоров. Дисс.соиск.уч.ст.к.м.н., Волгоград, 2010.

20. Хмельницкий O.K., Третьякова М.С. Щитовидная железа как объект морфометрического исследования // Арх.пат. 1998. - Том 60.-N 4 . - С. 4749.

21. Яглова Н.В. Морфофункциональный анализ развития синдрома нетиреоидных заболеваний при экспериментальном эндотоксикозе // Бюллетень эксп.биол.мед. 2009. - Т. 148.- N11. - С.584-588.

22. Abel E.D., Ahima R.S., Boers М.Е., Elmquist J.K., Wondisford F.E. Critical role for thyroid hormone receptor beta2 in the regulation of paraventricular thyrotropin-releasing hormone neurons // J. Clin. Invest. 2001.- Vol.107.- N8.-P.1017-1023.

23. Aguilera G. Regulation of pituitary ACTH secretion during chronic stress //

24. Front. Neuroendocrinol.- 1994.- Vol.15.- N4.- P.321-350.

25. Alkemade A., Friesema E.C., Unmehopa U.A., Fabriek B.O., Kuiper G.G.,1.onard J.L., Wiersinga W.M., Swaab D.F., Visser T.J., Fliers E.

26. Neuroanatomical pathways for thyroid hormone feedback in the human hypothalamus //J. Clin. Endocrinol. Metab.- 2005,- Vol. 90.- N7.- P. 4322-4334.

27. Alkemade A., Vuijst C.L., Unmehopa U.A., Bakker O., Vennstrom B., Wiersinga W.M., Swaab D.F., Fliers E. Thyroid hormone receptor expression in the human hypothalamus and anterior pituitary // J. Clin.Endocrinol. Metab.-2005.- Vol.90.- N2.- P.904-912.

28. Bahegi N., Brown T.R. Adaptation of male and female rats to iodine deficiency // Horm.Metab.Res.-1986.- Vol.18.- P.811-813.

29. Bakker J., Baum M.J. Role for estradiol in female-typical brain and behavioral sexual differentiation // Front. Neuroendocrinol.- 2008.- Vol.29.- P.l-16.

30. Bakker J., De Mees C., Douhard Q., Balthazart J., Gabant P., Szpirer J., Szpirer C. Alpha-fetoprotein protects the developing female mouse brain from masculinization and defeminization by estrogens // Nat. Neurosci. -2006.- Vol.9.-P.220-226.

31. Banu K.S., Aruldhas M.M. Sex steroids regulate TSH-induced thyroid growth during sexual maturation in Wistar rats // Exp. Clin. Endocrinol. Diabetes.- 2002.-Vol.ll0.-P.37-42.

32. Banu S.K., Arosh J.A., Govindarajulu P., Aruldhas M.M. Testosterone and estradiol differentially regulate thyroid growth in Wistar rats from immature to adult age // Endocr. Res.- 2001.- Vol.27.- N4.- P.447-463.

33. Banu K.S., Govindarajulu P., Aruldhas M.M. Testosterone and estradiol modulate TSH-binding in the thyrocytes of Wistar rats: influence of age and sex // J. Steroid Biochem. Mol. Biol.- 2001,- Vol.78.- N4.- P.329-342.

34. Barden N. Implication of the hypothalamic-pituitary-adrenal axis in the physiopathology of depression // J. Psychiatry Neurosci.- 2004.- Vol.29.- P.185-193.

35. Bauer M., Whybrow P.C. Thyroid hormone, neural tissue and mood modulation //World J. Biol. Psychiatry.- 2001.- Vol.2.- P.59-69.

36. Baumann C.T., Maruvada P., Hager G.L., Yen P.M. Nuclear cytoplasmic shuttling by thyroid hormone receptors. Multiple protein interactions are required for nuclear retention. J. Biol. Chera. 2001.- Vol.276.- N14.- P.l 1237-11245.

37. Baumgartner A. Thyroxine and the treatment of affective disorders: An overview of the results of basic and clinical research // Int. J. Neuropsychopharmacol.-2000.-Vol. 3.-P.149-165.

38. Bianco A.C., Saivatore D., Gereben B., Berry M.J., Larsen P.R. Biochemistry, cellular and molecular biology, and physiological roles of the iodothyronine selenodeiodinases // Endocr. Rev.- 2002.- Vol.23.- N1.- P.38-89.

39. Bschor T., Baethge C., Adli M., Lewitzka U., Eichmann U., Bauer M. Hypothalamic-pituitary-thyroid system activity during lithium augmentation therapy in patients with unipolar major depression // J. Psychiatry Neuosci.-2003.- Vol.28.- P.210-216.

40. Cizza G., Brady L.S., Esclapes M.E., Blackman M.R., Gold P.W., Chrousos G.P. Age and gender influence basal and stress-modulated hypothalamic-pituitary-thyroidal function in Fischer 344/N rats // Neuroendocrinology.- 1996.-Vol.64.-N6.- P.440-448.

41. Cizza G., Brady L.S., Pacak K., Blackman M.R., Gold P.W., Chrousos G.P. Stress-induced inhibition of the hypothalamic-pituitary-thyroid axis is attenuated in the aged Fischer 344/N male rat // Neuroendocrinology.-1995.- Vol.62.- N5,-P.506-513.

42. Christianson D., Roti E., Vagenakis A.G., Braverman L.E. The sex-related difference in serum thyrotropin concentration is androgen mediated. Endocrinology.- 1981.- Vol.108.- N2.- P.529-535.

43. Colman E., Hedin R., Swann J., Orloff D. A brief history of calcitonin // Lancet.- 2002.- Vol.359.- P.885-886.

44. DeLany J.P., Bray G.A., Harsha D.W., Volaufova J. Energy expenditure in preadolescent African American and white boys and girls: the Baton Rouge Children's Study // Am. J. Clin. Nutr.- 2002.- Vol.75.- P.705-713.

45. DeMoranville B.M., Jackson I.M.D. Psychoneuroendocrinology. In: Fogel B.S.,Schiffer R.B., Rao- S.M., editors. Neuropsychiatry. Baltimore, MD, USA: Williams A & Wilkins; 1996. p. 173-92.

46. Diamanti-Kandarakis E., Bourguignon J.P., Giudice L.C., Hauser R., Prins G.S., Soto A.M., Zoeller R.T., Gore A.C. Endocrine-disrupting chemicals: An endocrine society scientific statement // Endocrine Reviews.- 2009. Vol.30.-P.293-342.

47. Dull Q.Y., Grossman R.F. Thyroid Growth Factors, Signal Transduction Pathways and Oncogenes // Surg. Clin. North. Am.- 1995.- Vol.75.- P.421-437.

48. Duick DJS., Wahner H.W. Thyroid axis in patients with Cushing's syndrome // Arch.Intern.med.- 1979.- Vol.139.- P.762-772.

49. Fava M., Labbate L.A., Abraham M.E., Rosenbaum J.F." Hypothyroidism and hyperthyroidism in major depression revisited // J. Clin. Psychiatry.- 1995.-Vol.56.- P.186-192.

50. Finuncane P., Anderson C. Thyroid disease in old patients // Drugs Aging 1995.-Vol.6.- P.268-277.

51. Fliers E., Alkemade A., Wiersinga W.M., Swaab D.F. Hypothalamic thyroid hormone feedback in health and disease // Prog. Brain Res. 2006.- Vol. 153.-P. 189-207.

52. Fliers E., Noppen N.W., Wiersinga W.M., Visser T.J., Swaab D.F.

53. Distribution of thyrotropin-releasing hormone (TRH)-containing cells and fibers in the human hypothalamus // J. Comp. Neurol. 1994.- Vol.350.- N2.- P.311-323.

54. Fliers E., Swaab D.F., Pool C.W., Verwer R.W. The vasopressin and oxytocin neurons in the human supraoptic and paraventricular nucleus; changes with aging and in senile dementia // Brain Res.- 1985.- Vol.342.- N1.- P.45-53.

55. Fliers E., Unmehopa U.A., Alkemade A. Functional neuroanatomy of thyroid hormone feedback in the human hypothalamus and pituitary gland // Mol. Cell Endocrinol.- 2006.- Vol.251.- N1-2.- P. 1-8.

56. Forger N.G. Cell death and sexual differentiation of the nervous system // Neuroscience.- 2006.- Vol.138.- P.929-938.

57. Fountoulakis K.N., Iacovides A., Grammaticos P., St Kaprinis G., Bech P. Thyroid function in clinical subtypes of major depression: an exploratory study // BMC Psychiatry.- 2004.- Vol.4.- P.6.

58. Gartner L.P., Hiatt J.L. Color Textbook of Histology. 3rd Edition. Philadelphia: WB Saunders Company, 2007.-573 P.

59. George A.J.T , Ritter M.A. Thymic involution with ageing: obsolescence or good housekeeping? // Immunology today.- 1996.- Vol.17.- N6.- P.267-272.

60. Gore A.C. In: Endocrine-disrupting chemicals: From basic research to clinical practice. Ed.by Gore A.C., Humana Press; Totowa, NJ, 2007.

61. Gore A.C. Developmental exposures and imprinting on reproductive neuroendocrine systems // Front. Neuroendocrinol.- 2008.- Vol.29.- P.:358-374.

62. Gore A.C., Patisaul H.B. Neuroendocrine disruption: historical roots, current progress, questions for the future // Front. Neuroendocrinol.- 2010.- Vol.31.- N4,-P.395-399.

63. Gould E., Tanapat P., Hastings N.B., Shors T.J. Neurogenesis in adulthood: a possible role in learning // Trends Cogn. Sci. 1999.- Vol. 3.- N5.- P. 186-192.

64. Goya R.G., Brown O.A., Pleau J.M., Dardenne M. Thymuiin and the neuroendocrine system // Peptides.- 2004.- Vol. 25.- P. 139-142.

65. Griebel G., Simiand J., Serradeil-Le Gal C., Wagnon J., Pascal M., Scatton

66. Grippo A.J., Francis J., Beltz T.G., Felder R.B., Johnson A.K. Neuroendocrine and cytokine profile of chronic mild stress-induced anhedonia // Physiol. Behav.-2005.- Vol.84.- P.697-706.

67. Guldenaar S.E., Veldkainp B., Bakker O., Wiersinga W.M., Swaab D.F., Fliers E. Thyrotropin-releasing hormone gene expression in the human hypothalamus //BrainRes.- 1996.- Vol.743.- N1-2.- P.93-101.

68. Hager G.L., Lim C.S., EIbi C., Baumann C.T. Trafficking of nuclear receptors in living cells. J. Steroid Biochem. Mol. Biol. 2000.- Vol.74.- N5.- P.249-254.

69. Heber D. Endocrine responses to starvation, malnutrition and illness. In: DeGroot, L.J. (Ed.), Endocrinology, 1995.- Vol. 3.- Philadelphia: Saunders, P.2663-2685.

70. Helmreich D.L., Parfitt D.B., Lu X.Y., Akil H., Watson S.J. Relation between the hypothalamic-pituitary-thyroid (HPT) axis and the hypothalamic-pituitary-adrenal (HPA) axis during repeated stress //Neuroendocrinology.- 2005.- Vol.81.-N3.- P.183-192.

71. Hisano S., Fukui Y., Chikamori-Aoyama M., Aizawa T., Shibasaki T.,

72. Reciprocal synaptic relations between CRF-immunoreactive- and TRHimmunoreactive neurons in the paraventricular nucleus of the rat hypothalamus // Brain Res.- 1993.- Vol.620.- P.343-346.

73. Howdeshell K.L. A model of the development of the brain as a construct of the thyroid system // Environ. Health. Perspect.- 2002,- Vol.110.- Suppl. 3. P.337-348.

74. Ibarrola N., Rodríguez-Peña A. Hypothyroidism co-ordinately and transiently affects myelin protein gene expression in most rat brain regions during postnatal development // Brain Res.- 1997.- Vol.752.- P.285-293.

75. Irmak M.K., Kirici Y. Time to reevaluate the therapeutic use of calcitonin and biological role attributable to parafollicular (C) cells // Med. Hypotheses.- 2004.-Vol.62.- N3.- P.425-430.

76. Irmak M.K., Ozcan O. Human diversity, environmental adaptation, and neural crest // Med. Hypotheses.- 1997.- Vol.48.- P.407-410.

77. Jirtle R.L., Skinner M.K. Environmental epigenomic and disease susceptibility //Nature Rev. Genet.- 2007.- Vol.8.- P.253-262.

78. Khan M.A., Hansen L.G. Ortho-substituted polychlorinated biphenyl (PCB) congeners (95 or 101) decrease pituitary response to thyrotropin releasing hormone // Toxicol. Lett.- 2003.- Vol.144.- P. 173-182.

79. Kikusui T., Nakamura K., Kakuma Y., Mori Y. Early weaning augments neuroendocrine stress responses in mice // Behav.Brain Res.- 2006.- Vol. 175.-N1,- P.96-103.

80. Kioukia-Fougia N., Bekris S., Antoniou K., Papadopoulou-Daifoti Z., Christofidis I. Effects of chronic mild stress (CMS) on thyroid hormone function in two rat strains // Psychoneuroendocrinology.- 2000.- Vol.25.- P.247-257.

81. Klug T.L., Adelman R.C. Altered hypothalamic-pituitary regulation of thyrotropin in male rats during aging // Endocrinology.- 1979.- Vol.104.- N4.-P.l 136-1142.

82. Kmiec' Z., Kotlarz G., Mysliwski A., Smiechowska B. Thyroid hormones homeostasis in rats refed after short-term and prolonged starvation. J. Endocrinol. Invest. 1996- Vol.19.- P.304-311.

83. Kmiec Z., Kotlarz G., Smiechowska B., Mysliwski A. The effect of fasting and refeeding on thyroid follicule structure and thyroid hormone levels in young and old rats //Arch. Gerontol. Geriatr.- 1998.- Vol.26.- N2.- P.161-175.

84. Kornack D.R., Rakic P. The generation, migration, and differentiation of olfactory neurons in the adult primate brain // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 2001,-Vol. 98.- N8.- P.4752-4757.

85. Kruijver F.P., Balesar R., Espila A.M., Unmehopa U.A., Swaab D.F. Estrogen receptor-alpha distribution in the human hypothalamus in relation to sex and endocrine status // J. Comp. Neurol.- 2002.- Vol.454.- P.l 15-113.

86. Kurihara H., Uchida K., Fujita H. Distribution of microtubules and microfilaments in thyroid follicular epithelial cells of normal, TSH-treated, aged and hypophysectomized rats // Histochemistry.- 1990.- Vol.93.- P.335-345.

87. Kuriyama S.N., Wanner A., Fidalgo-Neto A.A., Talsness C.E., Koerner W., Chahoud I. Developmental exposure to low-dose PBDE-99: tissue distribution and thyroid hormone levels // Toxicology.- 2007.- Vol.242.- P.80-90.

88. Langer P., Kocan A., Tajtakova M., Trnovec T., Klimes I. What we learned from the study of exposed population to PCBs and pesticides // Open Environ. Pollution & Toxicol. Journal.- 2009.- Vol.1.- P.54-65.

89. Lechan R.M., Fekete C. The TRH neuron: a hypothalamic integrator of energy metabolism //Prog. Brain Res.- 2006.- Vol.153.- P.209-235.

90. Lechan R.M., Qi Y., Jackson I.M., Mahdavi V. Identification of thyroid hormone receptor isoforms in thyrotropin-releasing hormone neurons of the hypothalamic paraventricular nucleus. Endocrinology 1994.- Vol.135.- N1.- P.92-100.

91. Lechan R.M., Segerson T.P. Pro-TRH gene expression and precursor peptides in rat brain. Observations by hybridization analysis and immunocytochemistry // Ann.N.Y.Acad.Sci.-1989.- Vol.553.- P.29-59.

92. Legradi G., Lechan R.M. The arcuate nucleus is the major source for neuropeptide Y-innervation of thyrotropin-releasing hormone neurons in the hypothalamic paraventricular nucleus // Endocrinology 1998.- Vol.139.- N7.-P.3262-3270.

93. Leatherland J.F., Li M., Barkataki S. Stressors, glucocorticoids and ovarian function in teleosts // J. Fish Biology.- 2010.- Vol.76.- N1,- P.86-111.

94. Lu C.C., Chen J.J., Tsai S.C., Chien E.J., Chien C.H., Wang P.S. Increase of thyrotropin response to thyrotropin-releasing hormone (TRH) and TRH release in rats during pregnancy // Chin. J. Physiol.- 1998.- Vol.41.- N4.- P.211-216.

95. Maleta K., Virtanen S.M., Espo M., Kulmala T., Ashorn P. Seasonality of growth and the relationship between weight and height gain in children under three years of age in rural // Malawi. Acta Paediatr.- 2003.- Vol.92:491-497.

96. Martin J.B., Reichlin S. Clinical Neuroendocrinology.- 1987: Philadelphia, Davis.-P. 116-120.

97. Maruvada P., Bauinann C.T., Hager G.L., Yen P.M. Dynamic shuttling and intranuclear mobility of nuclear hormone receptors // J. Biol.Chem.- 2003.-Vol.278.-N14.-P.12425-124329.

98. Massol J., Martin P., Chatelain F., Puech A.J. Tricyclic antidepressants, thyroid function, and their relationship with the behavioral responses in rats // Biol.Psychiatry.- 1990.- Vol.28.- N11.- P.967-978.

99. Moreira D.G., Marassi M.P., Correa da Costa V.M., Carvalho D.P., Rosenthal D. Effects of ageing and pharmacological hypothyroidism on pituitary-thyroid axis of Dutch-Miranda and Wistar rats // Exp. Gerontol.-2005.- Vol.40.-N4.- P.330-334.

100. Musselman D.L., Nemeroff C.B. Depression and endocrine disorders: focus on the thyroid and adrenal system // Br. J. Psychiatry.- Suppl.- 1996.- Vol.30.-P.123-128.

101. Newbold R.R., Padilla-Banks E., Jefferson W.N. Adverse effects of the model environmental estrogen diethylstilbestrol (DES) are transmitted to subsequent generations //Endocrinology.- 2006;147:S11-S17.

102. Nguon K., Baxter M.G., Sajdel-Sulkowski E.M. Perinatal exposure to polychlorinated biphenyls differentially affects cerebellar development and motor functions in male and female rat neonates // Cerebellum.- 2005.- Vol.4.- P. 112122.

103. Nillni E.A. Regulation of the hypothalamic thyrotropin releasing hormone (TRH) neuron by neuronal and peripheral inputs // Front. Neuroendocrinol.- 2010.-Vol.31.- N2.- P.134-156.

104. Oliver C., Eskay R.L., Porter J.C. Developmental changes in brain TRH and in plasma and pituitary TSH and prolactin levels in the rat // Biol. Neonate.-1980.-Vol. 37.-N3-4.-P. 145-152.

105. Pacak K., Palkovits M. Stressor specificity of central neuroendocrine responses: implications for stress-related disorders // Endocr.Rev.- 2001.- Vol. 22.- N4.-P.502-548.

106. Pan Y., Kong L.D., Xia X., Zhang W.Y., Xia Z.H., Jiang F.X. Antidepressant-like effect of icariin and its possible mechanism in mice // Pharmacol. Biochem. Behav.- 2005.- Vol.82.- P.686-694.

107. Papp M., Gruca P., Boyer P.A., Mocaer E. Effect of agomelatine in the chronic mild stress model of depression in the rat // Neuropsychopharmacology.- 2003.-Vol.28.- P.694-703.

108. Papp M., Nalepa I., Antkiewicz-Michaluk L., Sanchez C. Behavioural and biochemical studies of citalopram and WAY 100635 in rat chronic mild stress model // Pharmacol. Biochem. Behav.- 2002,- Vol.72.- P.465-474.

109. Polak J.M. Introduction to immunohistochemistry. 3rd edition. London, Bios Scientific Publishers, 2003.

110. Rajkovic V., Matavulj M., Gledic D., Lazetic B. Evaluation of rat thyroid gland morphophysiological status after three months exposure to 50 Hz electromagnetic field // Tissue Cell.- 2003.- Vol.35.- N3.- P.223-231.

111. Rao U., Ott G.E., Lin K.M., Gertsik L., Poland R.E. Effect of bupropion onunocturnal urinary free Cortisol and its association with antidepressant response // J.Psychiatr. Res.- 2005,- Vol.39.- P.183-190.

112. Ray P.P., Sengupta A., Chaudhuri-Sengupta S., Maiti B.R. Thyroidal inhibition following diverse stress in soft-shelled turtle, Lissemys punctata punctata bonnoterre // Acta Biol. Hung.- 2008.- Vol.59.- N4.- P.403-412.

113. Reser J.E. Evolutionary neuropathology & congenital mental retardation: environmental cues predictive of maternal deprivation influence the fetus to minimize cerebral metabolism in order to express bioenergetic thrift // Med.

114. Hypotheses.- 2006.- Vol.67.- N3.- P.529-544.

115. Reymonds M.J. Age-related loss of responsiveness of the tuberoinfundibulardopaminergic neurons to prolactin in the female rats // Neuroendocrinology.-1990.-Vol.52.-P.490-496.

116. Rivier C., Vale W. Involvement of corticotropin-releasing factor and somatostatin in stress-induced inhibition of growth hormone secretion in the rat // Endocrinology.- 1985.- Vol.117.- N6.- P.2478-2482.

117. Rodríguez-Peña A. Oligodendrocyte development and thyroid hormone // J. Neurobiol.- 1999.- Vol. 40.- N4.- P.497-512.

118. Romeo R.D., Lee S.J., Chua N., McPherson C.R., McEwen B.S. Testosterone cannot activate an adult-like stress response in prepubertal male rats // Neuroendocrinology.- 2004,- Vol.79.- P. 125-132.

119. Rothfuchs D., Saeger W., Bajanowski T., Freislederer A. Morphology, immunohistochemistry and morphometry of the thyroid gland in cases of sudden infant death syndrome (SIDS) // Int. J. Legal Med.- 1995.- Vol.107.- N4.- P. 187192.

120. Rubin R.T., Poland R.E., Lesser I.M., Martin D.J. Neuroendocrine aspects of primary endogenous depression—IV. Pituitary-thyroid axis activity in patients and matched control subjects // Psychoneuroendocrinology.- 1987.- Vol. 12.-P.333-347.

121. Sakaue K. Studies on the factors affecting serum thyrotropin levels in healthy controls and on the thyroid function in depressed patients using a highly sensitive immunoassay // Nippon Naibunpi Gakkai Zasshi.- 1990.- Vol.66.- P.1094-1107.

122. Sarkar D.P., Miki N., Meites J. Failure of prolactin short loop feedback mechanism to operate in old as compared to young female rats // Endocrinology.-Vol.l 13.- P.1452-1458.

123. Schule C., Baghai T.C., Tsikolata V., Zwanzger P., Eser D., Schaaf L. The combined T3/TRH test in depressed patients and healthy controls // Psychoneuroendocrinology.- 2005.- Vol.30.- P.341-356.

124. Schwarz J.M., McCarthy M.M. Steroid-induced sexual differentiation of the developing brain: multiple pathways, one goal // J.Neurochem.- 2008.- Vol. 105.-P.1561-1572.

125. Segerson, T.P., Kauer, J., Wolfe, H.C., Mobtaker, H., Wu, P., Jackson, I.M., Lechan, R.M. Thyroid hormone regulates TRH biosynthesis in the paraventricular nucleus of the rat hypothalamus // Science.- 1987.- Vol. 238.-N4823.- P.78-80.

126. Sharma D., Chaturvedi C.M. Effects of thyroid status on arginine vasotocin receptor VT2R expression and adrenal function in osmotically stimulated domestic fowl // J.Comp.Physiol. B.- 2009.- Vol.179.- N7.- P.811-819.

127. Shi Z.X., Levy A., Lightinan S.L. Thyroid hormone-mediated regulation of corticotropin-releasing hormone messenger ribonucleic acid in the rat // Endocrinology.- 1994.- Vol.134.-P.1577-1580.

128. Silberman D.M., Wald M., Genaro A.M. Effects of chronic mild stress on lymphocyte proliferative response. Participation of serum thyroid hormones and corticosterone//Int. Immunopharmacol.- 2002.-Vol.2.- N4.- P.487-497

129. Simpkins J.W., Hodson C.A., Meites J. Differential effects of stress on release of thyroid-stimulating hormone in young and old male rats // Proc. Soc. Exp. Biol. Med.- 1978.- Vol.157.-P. 144-147.

130. Sower S.A., Freamat M., Kavanaugh S.I. The origins of the vertebrate hypothalamic-pituitary-gonadal (HPG) and hypothalamic-pituitaiy-thyroid (HPT) endocrine systems: new insights from lampreys // Gen. Comp. Endocrinol.-2009.- Vol.161.- N1.- P.20-29.

131. Swaab D.F., Bao A.M., Lucassen P.J. The stress system in the human brain in depression and neurodegeneration // Aging Res. Rev.- 2005.- Vol.4.- N2.- P. 141194.

132. Szarek E., Farrand K., McMillen I.C., Young I.R., Houghton D., Schwartz J.

133. Hypothalamic input is required for development of normal numbers ofthyrotrophs and gonadotrophs, but not other anterior pituitary cells in late gestation sheep // J. Physiol.- 2008.- Vol.586.- N4.- P. 1185-1194.

134. Thompson C.C. Thyroid hormone-responsive genes in developing cerebellum include a novel synaptotagmin and a hairless homolog // J. Neurosci.- 1996.- Vol. 16.- N24.- P.7832-7840.

135. Tichomirowa M.A., Keck M.E., Schneider H.J., Paez-Pereda M., Renner U., Holsboer F., Stalla G.K. Endocrine disturbances in depression // J. Endocrinol.Invest.- 2005.- Vol.28.- P.89-99.

136. Tohei A., Watanabe G., Taya K. Hypersecretion of corticotrophin-releasing hormone and arginine vasopressin in hypothyroid male rats as estimated with push-pull perfusion // J. Endocrinol.- 1998.- Vol.156.- P.395-400.

137. Tsigos C., Chrousos G.P. Hypothalamic-pituitary-adrenal axis, neuroendocrine factors and stress // J. Psychosom. Res.- 2002.- Vol.53.- P.865-871.

138. Tsujio M., Watahiki Y. Yoshioka K, Mutoh K. Morphology of thyroid follicular cells of methimazole-treated rats // Anat. Histol. Embryol.- 2007.-Vol.36.- N4.- P.290-294.

139. Vassart G., Dumont J.E. The thyrotropin receptor and the regulation of thyrocyte function and growth // Endocr. Rev.- 1992.- Vol.13.- P.596-611.

140. Viau V., Meaney M.J. Variations in the hypothalamic-pituitary-adrenal response to stress during estrous cycle in the rat // Endocrinology.- 1991.- Vol. 129.-P.2503-2511.

141. Watanobe H., Takebe K. Role of postnatal gonadal function in the determination of thyrotropin (TSH) releasing hormone-induced TSH response in adult male and female rats // Endocrinology.- 1987. Vol.120.-P.1711-1718.

142. Watson S., Gallagher P., Del-Estal D., Hearn A., Ferrier I.N., Young A.H. Hypothalamic-pituitary-adrenal axis function in patients with chronic depression //Psychol. Med.- 2002.- Vol.32.- P.1021-1028.

143. Weintraub B.D. Molecular Endocrinology: Basic Concepts and Clinical Correlations.N.Y., Raven Press, P. 1-11.

144. Welberg L., Thrivik'raman K.V., Plotsky P.M. Combined pre- and postnatal environmental enrichment programs the HP A axis differentially in male and female rats // Psychoneuroendocrinology.- 2006.- Vol.31.- N5.- P.553-564.

145. Willner P. Chronic mild stress (CMS) revisited: consistency and behavioural-neurobiological concordance in the effects of CMS // Neuropsychobiology.-2005.-Vol.52.-P.90-110.

146. Xiao Q., Nikodem V.M. Apoptosis in the developing cerebellum of the thyroid hormone deficient rat // Front. Biosci. 1998.- Vol.3.- a52-a57.

147. Yoshida C., Ishikawa T., Michiue T., Zhao D., Komatsu A., Quan L., Maeda H. Immunohistochemical distribution of chromogranin A in medicolegal autopsy materials // Leg. Med. (Tokyo).- 2009.- Suppl 1.- S231-233.

148. Young E.A., Altemus M., Lopez J.F., Kocsis J.H., Schatzberg A.F., DeBattista C. et al. HPA axis activation in major depression and response tofluoxetine: a pilot study // Psychoneuroendocrinology.- 2004.- Vol.29.-P.1198—

149. Zaki A., Chaoui A.A., Talibi A., Derouiche A.F., Aboussaouira T., Zarrouck K., Chait A., Himmi T. Impact of nitrate intake in drinking water on the thyroid gland activity in male rat // Toxicol. Letters.- 2004.- Vol.147.- P.27-33.

150. Zhu X.G., Hanover J.A., Hager G.L., Cheng S.Y. Hormone-induced translocation of thyroid hormone receptors in living cells visualized using a receptor green fluorescent protein chimera. J. Biol. Chem. 1998,- Vol.273.- N42.-P.27058-27063.

151. Zirkin B.R., SantuIIi R., Strandberg J.D., Wright W.W., Ewing L.L.

152. Testicular steroidogenesis in the aging brown Norway rat // J.Androl.-1993.-Vol.14.-N2.-P.l 18-123.

Информация о работе

Шараевская, Мария Викторовна
кандидата медицинских наук
Волгоград, 2011
ВАК 03.03.04

Диссертация

Морфологические аспекты взаимодействия гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной и тиреоидной осей при хроническом стрессе - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Морфологические аспекты взаимодействия гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной и тиреоидной осей при хроническом стрессе - тема автореферата по биологии, скачайте бесплатно автореферат диссертации

Похожие работы