Морфофункциональные изменения сетчатки при воздействии лазерным излучением пороговой интенсивности и их коррекция дипептидом

Аникина, Елена Юрьевна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Морфофункциональные изменения сетчатки при воздействии лазерным излучением пороговой интенсивности и их коррекция дипептидом
ВАК РФ 03.03.04, Клеточная биология, цитология, гистология

Автореферат диссертации по теме "Морфофункциональные изменения сетчатки при воздействии лазерным излучением пороговой интенсивности и их коррекция дипептидом"

На правах рукописи

Аникина Елена Юрьевна

004605575

МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ СЕТЧАТКИ ПРИ ЛАЗЕРНОМ ВОЗДЕЙСТВИИ ПОРОГОВОЙ ИНТЕНСИВНОСТИ И ИХ КОРРЕКЦИЯ ДИПЕПТИДОМ (экспериментальное исследование)

03.03.04 -клеточная биология, цитология, гистология 14.03.03 - патологическая физиология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Томск-2010

1 0 НЮН 2010

004605575

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Сибирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» (г. Томск) и Государственном научно-испытательном институте военной медицины Министерства обороны Российской Федерации (г. Москва)

Научные руководители:

доктор медицинских наук, профессор

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор

Логвинов Сергей Валентинович

Бухтияров Игорь Валентинович

Плешко Раиса Ивановна

доктор медицинских наук Скурихин Евгений

Германович

Ведущая организация:

Новосибирский государственный медицинский университет

Защита состоится «_»_2010 г. в_часов, на заседании

диссертационного совета Д 208.096.03 при ГОУ ВПО Сибирский государственный медицинский университет Росздрава по адресу: 634050, г. Томск, Московский тракт, 2.

С диссертацией можно ознакомиться в научно-медицинской библиотеке ГОУ ВПО Сибирский государственный медицинский университет Росздрава. Автореферат разослан «_»_2010 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

Герасимов А.В.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ АКТУАЛЬНОСТЬ

В современной офтальмологии лазерное излучение используется для лечения заболеваний, связанных с патологией сосудов глазного дна и отслойкой сетчатки [Пасечникова Н.В., 2007]. Соседние с коагулируемыми лазером участки сетчатки подвергаются воздействию с меньшей интенсивностью, приводящему к осложнениям и снижению зрительной функции [Гундорова P.A., Нероев В.В., Кашников В.В., 2009]. Экспериментально было показано, что высокоинтенсивное лазерное воздействие вызывает деструкцию всех структурных компонентов сетчатки с выпадением ее слоев. Наблюдается повреждение пигментного эпителия, нейросенсорных клеток сетчатки с их последующей гибелью, значительная деструкция внутренних слоев и глиального компонента [Song Q, Risco R., 2008; Framme С., Walter A., 2009; Tackenberg M.A., Tucker B.A., 2009; Krahne. T.U., Hunt S., Holz FG., 2009]. Отмечается повреждение ге-маторетинального барьера и гемодинамические нарушения [Ахмедьянова З.У., 1982; Glaser В.М., Campochiaro P.A., Davis J.L. et all., 1985; Glaser B.M., 1988]. При низкоинтенсивном воздействии наблюдается стимулирующий эффект на сохранную область сетчатки, что немаловажно при лечении некоторых дистрофических заболеваний [Сотникова Е.В., Исманкулов O.A., 2002]. Влияние пороговых интенсивностей лазерного излучения на структурные компоненты сетчатки на сегодняшний день мало изучено.

В последние годы все больший интерес вызывают препараты из группы регуляторных белков или цитомединов [Кузник Б.И., Морозов В.Г., Хавинсон В.Х., 1998; Дьяконов М.М., 2005; Морозов В.Г., Рыжак Г.А., Малинин В.В. и др., 2006]. Наиболее распространенным в офтальмологии является ретинала-мин. Он, обладая выраженным протекторным действием в отношении сосудистого эндотелия и коллагеновых волокон периваскулярной соединительной ткани, способствует восстановлению нарушенных структур сосудистой стенки. Пептидные биорегуляторы увеличивают фагоцитарный показатель, фагоцитарный индекс и степень завершенности фагоцитоза [Кузник Б.И., Будажабон Г.Б., Хавинсон В.Х. и др., 1989; Лысенко A.B., Арутюнян A.B., Козина Л.С., 2005; Коркушко О.В., Хавинсон В.Х., Шатало В.Б., 2006]. Это обусловливает широкое применение ретиналамина в офтальмологии при различных заболеваниях сетчатки. Синтетический дипептид АВ-17 является одной из последних разработок ученых Санкт-Петербургского института биорегуляции и геронтологии РАМН. Это синтетический аналог ретиналамина относящийся к новому классу пептидных биорегуляторов - синтетических пептидов (цитогенов) и обладающий соответствующими ретинопротекторными свойствами.

Влияние синтетического дипептида АВ-17 на изменения сетчатки при воздействии лазерного излучения пороговых интенсивностей не изучено.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ Изучить морфофункциональные изменения сетчатой оболочки глаза и механизмы их развития при воздействии пороговых интенсивностей лазерного из-

лучения, оценить возможность коррекции структурных нарушений синтетическим дипептидом АВ-17.

ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ

1. Изучить морфологические изменения нейронов сетчатки при воздействии лазерным излучением пороговых интенсивностей и на фоне коррекции синтетическим дипептидом АВ-17.

2. Выявить изменения синаптоархитектоники сетчатки на фоне вышеуказанных воздействий.

3. Оценить реакцию глиалыюго компонента при воздействии лазерным излучением пороговых интенсивностей и на фоне коррекции синтетическим дипептидом АВ-17.

4. Изучить морфологические изменения сосудов и гематоретинального барьера при воздействии указанных факторов.

5. Установить характер реакций структурных компонентов и их последовательность при воздействии указанных факторов для выявления механизмов повреждения и репарации.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА

С помощью гистологических и электронномикроскопических методов впервые изучено влияние лазерного излучения пороговой интенсивности на все слои сетчатки. Доказано, что наиболее чувствительными к указанному воздействию являются нейросенсорные клетки, пигментный эпителий и синапти-ческий аппарат сетчатки. Лазер вызывает увеличение количества пикнотичных клеток и уменьшение численной плотности ядер в наружном ядерном слое. Пигментный эпителий характеризуется деструкцией органелл и вакуолизацией цитоплазмы, отмечается поврежедние и снижение количества синапсов. Во внутренних слоях сетчатки возрастает количество пикноморфных нейронов. В ассоциативных и ганглионарных нейронах отмечено снижение удельной площади органелл. Установлено, что лазерное излучение пороговой интенсивности вызывает поврежедение гематоретинального барьера и глиального компонента сетчатки. Излучение с длиной волны 450 нм вызывает больший деструктивный эффект, чем воздействие с длиной волны 535 нм, что проявляется более выраженным повреждением компонентов сетчатки. К 14 суткам отмечается нарастание патологических изменений. Синтетический дипептид АВ-17 впервые был применен в качестве ретинопротектора при воздействии лазера на область сетчатки. Доказано модифицирующее защитное влияние препарата на сетчатку, выражающееся в снижении деструктивных изменений ее структурных компонентов во все сроки эксперимента.

ТЕОРЕТИЧЕСКАЯ И ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ

Получены новые фундаментальные знания о морфофункциональных изменениях структурных компонентов сетчатки при воздействии лазерным излучением пороговых интенсивностей и возможности их коррекции синтетическим дипептидом АВ-17. Результаты могут быть использованы для разработки новых подходов к комплексному лечению лазерных ожогов сетчатки и осложнений

лазерной терапии. Материалы работы используются в учебном процессе при чтении лекций на кафедрах гистологии, эмбриологии и цитологии; морфологии с курсом общей патологии Сибирского государственного медицинского университета по разделу «Органы чувств».

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ

1. Лазерное воздействие пороговых интенсивностей вызывает повреждение всех слоев сетчатки, в механизмах которого важную роль играют нарушения гема-торетинального барьера. Наиболее чувствительны к данному фактору нейро-сенсорные клетки.

2. Под влиянием лазера нейроны внутреннего ядерного и ганглионарного слоев подвергаются пикноморфным и хроматолитическим изменениям. Существенную роль в данных процессах играет поврежедение радиальной глии сетчатки. Поражение синапсов влечет снижение их численной плотности и нарушение межнейронных связей. Деструкция компонентов сетчатки более выражена при длине волны 450 нм, чем при 535 нм.

3. Синтетический дипептид АВ-17 снижает повреждающий эффект лазерного воздействия пороговой интенсивности.

АПРОБАЦИЯ. Материалы диссертации доложены на IX конгрессе Международной ассоциации морфологов (г. Бухара, 2008) и VI всероссийском съезде анатомов, гистологов и эмбриологов (г. Саратов, 2009).

ПУБЛИКАЦИИ. По теме диссертации опубликовано 8 печатных работ, из них 1 статья в журнале, рекомендованном ВАК РФ для опубликования основных результатов диссертации на соискание ученой степени кандидата наук.

ОБЪЕМ И СТРУКТУКРА ДИССЕРТАЦИИ. Диссертация изложена на 171 странице и состоит из введения, четырех глав, выводов и библиографического списка. Работа иллюстрирована 4 таблицами, 64 рисунками (20 микрофотографий, 31 электронограммы, 12 графиков и 1 схема). Библиографический указатель включает 227 источников, из них 135 на русском и 92 на иностранных языках.

СОБСТВЕННЫЕ НАБЛЮДЕНИЯ

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Эксперимент проведен на базе Государственного научно-исследовательского испытательного института военной медицины Министерства обороны Российской Федерации (г. Москва) на 60 половозрелых кроликах-самцах породы шиншилла с массой 900-1200 грамм. Перед экспериментом всех животных выдерживали на протяжении двухнедельного карантинного срока в условиях вивария на обычном пищевом рационе. Начало экспериментальных воздействий и взятие материала осуществляли в одно и то же время суток - в 10-12 часов. Животных содержали в стандартных условиях вивария при световом режиме 12 часов день и 12 часов ночь с искусственным дневным освещением средней интенсивности (100 лк).

Животных разделили по сериям экспериментов в соответствии с данными в таблице 1.

Воздействие проводили на центральную область сетчатой оболочки глаза транспупиллярно. Для расширения зрачка использовали 1% раствор атропина. Животных фиксировали с помощью садков, изготовленных из дерева. Для фиксации верхнего и нижнего века использовали векорасширители. На каждой сетчатке получено 5-6 коагулятов.

Восемнадцати кроликам в течение 7 суток до облучения лазером и на протяжении всего эксперимента проводили пероральное введение синтетического дипептида АВ-17 в дозе 10 мг/кг массы тела 1 раз в сутки. Суточная доза препарата на одно животное составляла 100 мг. Четырем животным вводили синтетический дипептид АВ-17 по вышеуказанной схеме без воздействия лазером.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПОРОГОВЫХ УРОВНЕЙ ЛАЗЕРНОГО ИЗЛУЧЕНИЯ

Опытам на животных предшествовала относительная тарировка измерительного комплекса, целью которой было определение коэффициентов пересчета. После этого на место фотометра помещали глаз лабораторного животного (кролика) и проводили облучение со следующими параметрами: длина волны излучения - 450, 535 нм; длительность импульса - 10 не; режим работы - моноимпульсный; расходимость лазерного пучка - 19,2 угл. мин.

При каждом облучении контроль энергии на облучаемой поверхности осуществляли вторым измерительным комплексом. Величину энергии подбирали с помощью калиброванных светофильтров. При каждом фиксированном значении энергии (вариации энергии в каждом случае были только за счет нестабильности работы установки) проводилась серия облучений.

Эксперименты начинали при таких значениях плотности энергии, при которых достигали гарантированное поражение глазного дна. Затем энергетические параметры снижали, добиваясь полного отсутствия очагов на сетчатке глаза кроликов.

Значения пороговых уровней энергии определяли исходя из построенных зависимостей размера очага от плотности энергии.

Наблюдение очагов осуществляли с помощью цифровой фундус-камеры с возможностью фотографировать глазное дно с 20-40 кратным увеличением, позволяющим регистрировать очаги поражения размером от 50-100 мкм. Измерение очагов производили на экране монитора компьютера в относительных «экранных» единицах путем анализа изображений при помощи специально разработанного программного обеспечения (программа «Image Analyzer»). Относительные «экранные» единицы выражались формулой:

О0ча J Отображения = ОТН.еДИНИЦа.

Перевод полученных относительных значений в абсолютные производили следующим образом: методом сравнительной оценки данных из различных источников был выведен коэффициент пересчета (к пересчета), который составил величину равную 6383 [Линник Л.А., 1973; Симоненкова В.А., Мясников А.П., 1986; Преображенский П.В., 1986]. Например, перевод относительной единицы, полученной при анализе компьютерного изображения, в абсолютные (в микро-

метрах, мкм) осуществляли путем умножения данной относительной величины на коэффициент пересчета (к пересчета). Измерение каждого очага осуществляли трехкратно в относительных единицах (О!, 02, 03), затем определяли среднее значение (Осреднее) по формуле: (Э^ 02+ 03)/3= Осреднее которое и использовали в дальнейших расчетах. Затем, относительные значения, переводили в абсолютные (в мкм), как описано выше.

Взятие материала производили через 1 и 14 суток после облучения. Для морфологического исследования забирали оба глаза каждого кролика после выведения животных из эксперимента посредством декапитации под эфирным наркозом. Контрольным материалом служили сетчатые оболочки кроликов (п=5), которых содержали в идентичных условиях вивария с экспериментальными животными.

Таблица 1. Распределение животных по сериям эксперимента

Серия эксперимента Количество животных Количество сетчаток Сроки взятия материала

Лазерное воздействие 0,1 сек, 0,08 мДж/см2,450 нм 9 18 1,14 сут

Лазерное воздействие 0,1 сек, 0,08 мДж/см2, 450 нм на фоне введения синтетического дипептида АВ-17 9 18 1,14 сут

Лазерное воздействие 0,1 сек, 0,08 мДж/см2, 535 нм 9 18 1,14 сут

Лазерное воздействие 0,1 сек, 0,08 мДж/см2, 535 нм на фоне введения синтетического дипептида АВ-17 9 18 1,14 сут

Введение синтетического дипептида АВ-17 4 8 1,14 сут

Контроль 5 10 1,14 сут

Определение порогов поражения сетчатки 15 30 1 сут

МИКРОСКОПИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ Глазные яблоки после энуклеации фиксировали в жидкости Карнуа и заливали в парафин. Готовили отвесные срезы задней стенки глаза толщиной 5-7 мкм, которые окрашивали гематоксилином и эозином [Ромейс Б. 1954]; крези-ловым фиолетовым по Нисслю для выявления хроматофильного вещества в пе-рикарионах нейронов.

Для изучения ультраструктурных изменений сетчатки заднюю стенку глаза фиксировали в 2,5% растворе глютаральдегида на кокадилатном буфере (рН=7,4). Материал постфиксировали в 2% растворе четырехокиси осмия в те-

чение трех часов на холоду, дегидратировали в спиртах возрастающей концентрации и заливали в эпон.

Для количественного изучения синаптического пула на этапе дегидратации, без предварительного осмирования, сетчатки контрастировали в 5% растворе фосфорновольфрамовой кислоты (ФВК) на абсолютном спирте в течение 3 часов. На ультратоме LKB-4 (Швеция) готовили полутонкие и ультратонкие срезы. На полутонких срезах, окрашенных толуидиновым синим, производили подсчет нейросенсорных клеток с пикнозом ядра на 1000 фоторецепторов с каждой сетчатки. Определяли количество слоев ядер в наружном ядерном слое. Определяли процентное содержание пикноморфных глиоцитов, нейронов внутреннего ядерного слоя и ганглионарных нейронов на 200 клеток с каждой сетчатки. Измеряли с помощью окулярной линейки высоту пигментоэпителиоци-тов. Ультратонкие срезы помещали на медные сетки. Осмированные препараты, докрашенные уранилацетатом и цитратом свинца [Reynolds Р., 1963], изучали в электронном микроскопе JEM-7A. На ультратонких срезах определяли удельную площадь органелл в клетках внутреннего ядерного и ганглионарного слоев.

Для оценки изменений синаптоархитектоники фотографировали по 15 случайно выбранных полей зрения внутреннего сетчатого слоя с 5 срезов каждой сетчатки при стандартном увеличении 8500. При конечном увеличении 30000, полученном при помощи фотоувеличителя, определяли количество межнейронных контактов (площадь поля зрения - 50 мкмг) и высчитывали численную плотность синапсов на 100 мкм2 нейропиля.

Выявленные на электронограммах ФВК-позитивные контакты в зависимости от плоскости среза подразделяли на ряд категорий. Подсчитывали количество определенных контактов с асимметричной и симметричной организацией ССЕ. Для асимметричных контактов характерно дискретное расположение ФВК-позитивного материала пресинаптической зоны в виде плотных проекций (ПП) пресинаптической решетки, а в симметричных контактах электронноп-лотный материал пресинаптической зоны не организован в отдельные фила-ментозные образования. Ассиметричные контакты по степени выраженности ПП дифференцировали на типы: А, В, С [Семченко В.В., Степанов С.С., 1987]. Длину активной зоны контакта (АЗК), которая на ФВК-контрастированном материале соответствовала всему синаптическому профилю, определяли с помощью тестовой решетки с шагом 3 мм. По протяженности АЗК все контакты делили на очень мелкие (<100 нм), мелкие (100-200 нм), малые (200-300 нм), средние (300-500 нм), крупные (500-700 нм) и очень крупные (>700 нм).

Цифровой материал был обработан методами вариационной статистики [Автандилов Г.Г., 1990]. Для оценки достоверности различий при сравнении средних величин использовали непараметрический критерий Манна-Уитни. Статистическая обработка проводилась с помощью программы Statistica for Windows Release 6.0.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПОРОГОВ ПОРАЖЕНИЯ СЕТЧАТКИ

Фотокоагулят на глазном дне после лазерного воздействия представлял собой круглый или овальный очаг, цвет которого варьировал, в зависимости от энергетической экспозиции, от серовато-розового до интенсивно серого. В центре очага при больших энергетических экспозициях наблюдали истечение крови в виде «растекающегося пятна» из центральной части лазерного ожога. Обычно, через 24 часа после лазерного воздействия, каких-либо изменений в очаге повреждения отметить не удавалось, за исключением более отчетливых границ фотокоагулята.

По своему характеру изменения оболочек глаза, вызванные воздействием импульсного наносекундного лазера, могут быть разделены на два основных типа:

1) хориоретинальные ожоги без заметных механических изменений сетчатки;

2) хориоретинальные ожоги с механическими повреждениями оболочек глазного дна, сопровождающиеся интраретинальным или преретинальным кровоизлиянием, а также выбросом крови в стекловидное тело (гемофтальм).

Некоторые ретинальные кровоизлияния имели радиальную исчерчен-ность, которая свидетельствует о наличии крови в слое нервных волокон.

При воздействии на сетчатку кроликов импульсного лазерного излучения в видимом диапазоне с длительностью импульса 10~9с и энергетическими экспозициями 0,13-0,23 мДж/см2 наблюдалось комбинированное поражение глазного дна, - механическое повреждение оболочек глаза с ожогом и геморрагическими изменениями (интраретинальное, субретинальное, преретинальное кровоизлияние, а также - кровоизлияние в стекловидное тело). При увеличении энергии лазерного излучения, наблюдалось увеличение размеров очагов повреждения сетчатки до 800—1300 мкм. Эти повреждения всегда сопровождались геморрагическими осложнениями. Картина повреждений на глазном дне в целом укладывается в представления о механизме поражающего действия лазерного излучения с наносекундной длительностью импульсов [Краснов М. М., 1980]. Наносекундный импульс вызывает поражения, относящиеся к фотомеханическому типу, проявляющиеся в виде повреждений только тонкого поверхностного слоя материала при сравнительно меньших плотностях энергии, обусловленных отсутствием влияния теплопроводности.

При высокой плотности мощности в пятне облучения и при очень малой длительности воздействия фотомеханические повреждения в виде отрыва наружных и внутренних элементов фоторецепторов, разброса клеток пигментного эпителия могут наблюдаться при воздействии излучения во всем диапазоне видимого спектра. В этом случае разрыв тканей связан с гидродинамическим ударом, вызванным акустической волной, вследствие ионизации в тканях и развития электрического пробоя.

Анализ зависимостей размеров очагов от плотности энергии воздействующего излучения показал, что при изменении энергетической экспозиции в среднем на 30 % (в диапазоне 0,13 - 0,23 мДж/см2) размеры очагов изменяются в среднем на 18%.

Таким образом, для последующих экспериментов с оценкой морфофунк-циональных изменений сетчатки было выбрано лазерное излучение с мощностью 0,08 мДж/'см2, являющееся пороговым по критерию повреждения. Размер очагов составил 200-300 мкм, коагулят имел серовато-розовую окраску и характеризовался отсутствием кровоизлияний.

МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ СЕТЧАТКИ ПРИ ЛАЗЕРНОМ ВОЗДЕЙСТВИИ ПОРОГОВОЙ ИНТЕНСИВНОСТИ

Настоящее исследование показало, что при воздействии лазерного излучения с длиной волны 535 нм максимум повреждающего влияния приходится на сосудистую оболочку, пигментный эпителий и фотосенсорный слой. При лазерном воздействии с длиной волны 450 нм наблюдается выраженное повреждение всех слоев сетчатки. При этом деструкция внутреннего ядерного слоя и слоя ганглионарных нейронов значительно более выражена, чем при длине волны 535 нм.

Ранее были изучены морфологические изменения сетчатки после подпо-рогового и надпорогового воздействия лазерного излучения нескольких длин волн [L Esperance F. А., 1969; 1972; 1985]. Было замечено, что отдельные слои подвергаются различной степени повреждающего влияния лазерного излучения при изменении длины его волны. Авторы связывают данный факт с наличием в сетчатке хромофоров, к которым относятся зрительные пигменты, ферментные системы, флавопротеиды и другие вещества. Они содержатся в слоях сетчатки в неодинаковых концентрациях и по-разному поглощают свет. Также было отмечено, что глубина проникновения лазерного излучения находится в прямой зависимости от длины волны. Чем больше длина волны, тем на большую глубину сетчатка подвергается повреждающему воздействию [Измайлов А.С., 1993; Geeraets W., 1977; Sliney D.H., 1988; L Esperance F. A., 1989]. Световая энергия лазера преобразуется в тепловую на пигментосодержащих структурах и вызывает деструктивный эффект. К естественным пигментам относятся меланин, липофусцин, гемоглобин. Все они очень активно поглощают свет с длинами волн, соответствующим сине-зеленой области спектра [Зиаширова Г. Г., Ахмедьянова З.У., Переверзина О. К. и др., 1981; Ахмедьянова 3. У., 1982; Волков В. В., 1989; Измайлов А.С., 1993; Waidelich W., 1977; Bahr F„ 1986; Puliafi-to C.A., Deutsch T.F., Boíl J., 1987; L'Esperance F. A., 1989]. Это обусловливает селективность в поражении слоев сетчатки и разную глубину повреждений при использовании длин волн 535 и 450 нм.

Механизм повреждения сетчатки лазерным излучением сложен и включает в себя 3 основных компонента: термический, механический и фотохимический [Ахмедьянова З.У., 1982; Преображенский П.В., Шостак В.И., Балашевич

Л.И., 1986; Pollack A., Heriot W.J., Henkind P., 1986; Корочкин И.М., Бабенко Е.В., 1990].

При пороговых интенсивностях наиболее значимым является фотохимический механизм повреждения. Он основан на фотосенсибилизированном сво-боднорадикальном окислении мембранных структур клеток, которое происходит в результате образования синглетного кислорода. В обычных условиях антиокислительная система в сочетании с процессами биосинтеза создают необходимый уровень репарации поврежденных компонентов. В экстремальных условиях данные системы не могут полноценно функционировать на достаточном уровне и в полном объеме и обеспечивать адекватную защиту от свободнора-дикального окисления. Большинство природных фотосенсибилизаторов локализуются в мембранах клеток, что объясняет их первичное повреждение при воздействии лазером. Все это вызывает нарушение гомеостаза клетки и ее мем-браносвязанных функций, что приводит к деструкции и возможной гибели [Зуева М.В., Иванина Т.А., 1980; Островский М.А., Федорович И.Б., 1982; 1994; Красновский A.A., 1988; Черницкий Е.А., Воробей A.B., 1988; Островский М.А., 1991; Kriechbaum К., Bolz M., Deak G.G. et all., 1995].

По данным нашего исследования наиболее чувствительными к воздействию лазерного излучения являются нейросенсорные клетки. Повреждения наружных сегментов в очагах лазерной коагуляции нейросенсорных клеток проявляются на вторые сутки и нарастают к четырнадцатым суткам при всех длинах волн. Выраженность их меняется в зависимости от спектральных характеристик излучения. Синий свет обладает более высокой фототоксичностью и вызывает значительную деструкцию мембран. На 14-е сутки отмечается нарушение связей наружных сегментов с пигментоэпителиоцитами, что является дополнительным фактором, снижающим степень эффективного функционирования защитных систем фоторецепторов и вызывающим их дегенеративные изменения в виде разрыва мембран, их лизиса и вакуольного перерождения. Данные повреждения не являются специфическими для воздействия лазерным излучением. Указания на наличие подобных деструктивных проявлений имеются у авторов, изучающих влияние на сетчатку высокоинтенсивного света, сахарного диабета, ионизирующей радиации, интоксикации солями тяжелых металлов и др. [Артыгалиева Д.М., 1975; Логвинов C.B., 1996, 1998; Логвинов C.B., Потапов A.B., 1998; 2000; Варакута Е.Ю., 2003; Дробатулина Д.А., 2004; Жданки-на A.A., 2006].

Внутренние сегменты по данным настоящего исследования подвергаются изменениям в виде отека и набухания митохондрий и цистерн эндоплазматиче-ской сети, а также последующей деструкции. К 14-м суткам после лазерного воздействия выявляются внутренние сегменты, полностью лишенные органелл. Это свидетельствует о нарушении энергообразующей и синтетической функции в фоторецепторах и их последующей гибели. Повреждение митохондрий и эн-доплазматической сети, вероятно, является следствием фотоокислительных процессов в их мембранах и обусловлено снижением защитных функций анти-

окислительной системы. Это приводит к гибели фотосенсорных клеток, которая проявляется пикнозом ядра, кариорексисом и кариолизисом. Через сутки после воздействия лазерного излучения количество пикнотичных нейронов значимо увеличивается в 7 раз при длине волны 450 нм и в 5 раз при длине волны 535 нм по сравнению с контрольным значением 0,4±0,01% (р<0,05). Гибель клеток также обусловливает снижение количества рядов ядер нейросенсорных клеток в наружном ядерном слое до 2-3 и 4-3 соответственно (контроль 7-8 рядов). Через 14 суток нарастают деструктивные изменения нейросенсорных клеток, что сопровождается увеличением процента пикнотичных клеток до 3,82±0,3% при длине волны 535 нм и до 5,88±0,43% при длине волны 450 нм. Количество пикнотичных клеток во все сроки достоверно выше при воздействии с длиной волны 450 нм. Повышенная чувствительность нейросенсорных клеток к лазерному облучению объясняется, помимо прямого фототоксического влияния лазерного излучения, также повреждением пигментного эпителия.

Пигментоэпителиоциты выполняют защитную функцию за счет наличия веществ с мощными антиоксидантными свойствами: меланина, пероксидазы, каталазы [Норре1аег Т., НепсШквоп Р., 1988; Когак I, 1992; 1995]. Вместе с тем, фагоцитоз разрушенных наружных сегментов нейросенсорных клеток способствует накоплению в цитоплазме пигментоэпителиоцитов большого количества ненасыщенных жирных кислот и ретиналя, что в совокупности с наличием большого количества молекул кислорода потенцирует процессы фотоокисления и снижает активность ферментов антиоксидантной системы. Таким образом, происходит повреждение мембранных структур клеток пигментного эпителия, что влечет за собой дальнейшее усиление деструктивных изменений нейросенсорных клеток в связи с нарушением компенсаторно-приспособительных механизмов.

По данным настоящего исследования через сутки после воздействия лазером в очагах коагуляции отмечается преобладание реактивных процессов, что проявляется увеличением высоты пигментоэпителиоцитов и выбуханием их в субретинальное пространство. Микроворсинки захватывают разрушенные мембраны дисков наружных сегментов нейросенсорных клеток. Через 14 суток высота клеток снижается и отмечается вакуолизация цитоплазмы, обусловленная разрушением органелл, что свидетельствует в пользу преобладания деструкции над реактивными изменениями. Ядра большинства пигментоэпителиоцитов характеризуются гиперхромией. Вне очагов лазерного воздействия отмечается компенсаторная умеренная гипертрофия клеток пигментного эпителия.

В нейронах внутреннего ядерного слоя наибольшие изменения наблюдаются при воздействии с длиной волны 450 нм. Проявляется деструкция снижением удельной площади органелл и их значительной деформацией, а также появлением пикноморфных нейронов с гиперконденсированным хроматином в ядре и повышенной осмиофилией цитоплазмы. Через одни сутки процент пикноморфных клеток при воздействии с длиной волны 535 нм составил 3,53±0,09 %, что достоверно ниже значения при воздействии с длиной волны 450 нм, со-

ставляющем 4,5±0,09% при контрольном показателе 1,4±0,06% (р<0,05). Через 14 суток отмечается нарастание деструктивных изменений при всех длинах волн. Увеличивается количество пикноморфных нейронов до 6,39±0,5% при воздействии с длиной волны 535 нм и до 7,07±0,6% при 450 нм.

Данные изучения удельной площади органелл в биполярных нейронах через одни сутки после воздействия лазерным излучением с длиной волны 535 нм свидетельствуют о снижении удельной площади комплекса Гольджи до 1,8±0,2% и митохондрий до 6,6±0,4% по сравнению с контрольными значениями 3,1±0,2% и 15,6±0,5% соответственно, а эндоплазматической сети до 20,0±0,5% при контрольном значении 41,3±0,7% (р<0,05). В амакринных нейронах удельная площадь комплекса Гольджи снижается до 1,9±0,1%, митохондрий до 10,6±0,3%, а эндоплазматической сети до 20,5±0,4% при контрольных значениях 2,9±0,1 %, 15,4±0,4% и 39,9±0,4% соответственно (р<0,05).

При воздействии лазерным излучением с длиной волны 450 нм в биполярных нейронах отмечается снижение удельной площади комплекса Гольджи по сравнению с контрольными значениями до 0,8±0,1%, митохондрий до 4,6±0,3% и эндоплазматической сети до 6,0±0,3% (р<0,05). В амакринных нейронах снижение происходит до 0,6±0,09%, 7,1±0,2% и 12,4±0,3% соответственно (р<0,05). В горизонтальных нейронах площадь комплекса Гольджи и митохондрий уменьшается по сравнению с контрольными показателями до 1,4±0,3% и 8,1±0,5%, а эндоплазматической сети до 26,1±0,8% (р<0,05).

Через 14 суток после воздействия лазерным излучением с длиной волны 535 нм при сравнении с контролем отмечается снижение удельной площади комплекса Гольджи в биполярных нейронах в 3 раза, митохондрий и эндоплазматической сети - в 2 раза (р<0,05). В амакринных нейронах данные показатели снижаются в 1,9; 1,6 и 2,6 раза соответственно по сравнению с контрольными (р<0,05). В горизонтальных нейронах наблюдается снижение удельной площади всех органелл в 1,3 раза по сравнению с контрольными показателями (р<0,05).

Через 14 суток воздействие лазером с длиной волны 450 нм вызывает в биполярных нейронах снижение площади комплекса Гольджи и эндоплазматической сети на 77 и 86% , а митохондрий - на 80% по сравнению с контрольными данными (р<0,05). В амакринных нейронах эти показатели снижаются на 79, 70 и 60% соответственно (р<0,05). В горизонтальных нейронах на 50 и 36% происходит уменьшение площади комплекса Гольджи и митохондрий, а эндоплазматической сети - на 34% (р<0,05).

Во все сроки и во всех типах нейронов снижение удельной площади органелл более выражено при воздействии с длиной волны 450 нм, чем при воздействии с длиной волны 535 нм (р<0,05).

Поражение нейронов внутреннего ядерного слоя при воздействии патологических факторов, по мнению некоторых авторов, обусловлено также нарушением синаптических связей с нейросенсорными и ганглионарными клетками [\Vasowicz М., 2002].

По мнению ряда авторов, немаловажным является факт деструкции гли-ального компонента сетчатки, который принимает участие в транспорте веществ, а также регулирует уровень глутамата, способного оказывать нейроток-сическое действие. Радиальная глия формирует наружную и внутреннюю пограничные мембраны, а также осуществляет активный транспорт метаболитов на всех уровнях сетчатки [Давыдова Т.В., 1985]. Через сутки после воздействия лазерным излучением с длиной волны 535 нм отмечается увеличение пикно-морфных глиоцитов в 4 раза, а при воздействии с длиной волны 450 нм - в 4,4 раза по сравнению с контролем, составляющим 2,8±0,3% (р<0,05). Через 14 суток количество пикноморфных клеток в 3 раза выше контрольных значений при воздействии с обеими длинами волн (р<0,05). Изменения органелл способствуют вакуольному перерождению цитоплазмы и последующей гибели глиоцитов.

Изменения ганглионарных нейронов проявляются преимущественно снижением содержания и перераспределением хроматофильной субстанции, представленной цистернами гранулярной эндоплазматической сети. Через одни сутки после лазерного воздействия в очагах коагуляции наблюдалось возрастание процента нейронов с явлениями очагового и тотального хроматолиза. Количество нейронов с явлениями тотального хроматолиза составило 20,5±0,8% при длине волны 450 нм и 17,0±1,5% при длине волны 535 нм при контрольном значении 7,1±0,5%, (р<0,05). Число нейронов с очаговым хроматолизом составило 52,0±2,9% и 41,9±2,2% соответственно при контрольном значении 16,3±1,0%, (р<0,05). Помимо этого, увеличивалось количество пикноморфных клеток до 5,6±0,3% и 3,8±0,23% соответственно при контроле 3,1±0,1% (Р<0,05).

Данные процессы прогрессируют и к 14-м суткам процент ганглионарных нейронов с явлениями очагового хроматолиза возрастает по сравнению с контрольными значениями в 3 и 3,2 раза соответственно при длине волны 535 и 450 нм (р<0,05). Увеличивается количество пикноморфных клеток. Количество пикноморфных нейронов при воздействии с длиной волны 450 нм во все сроки достоверно выше, чем при воздействии с длиной волны 535 нм. В сохранных нейронах и клетках с очаговым хроматолизом отмечается наличие приспособительных компенсаторных реакций, которые проявляются увеличением ядрышка и глубокими многочисленными инвагинациями кариолеммы.

Анализ изменения удельной площади органелл свидетельствует, что лазерное излучение с длиной волны 450 нм через 1 сутки вызывает снижение площади комплекса Гольджи в 1,8 раза, митохондрий в 1,7 раза, эндоплазматической сети в 1,3 раза по сравнению с контрольными значениями (р<0,05).

Через 14 суток после аппликации лазерной энергии с длиной волны 450 нм снижается площадь комплекса Гольджи и эндоплазматической сети по сравнению с контрольными значениями в 1,5 и 1,6 раза соответственно (Р<0,05).

Воздействие лазерного излучения с длиной волны 535 нм во все сроки эксперимента не вызывает изменений показателей удельной площади комплек-

са Гольджи и митохондрий, значимо отличающихся от контроля. Удельная площадь эндоплазматической сети снижается во все сроки по сравнению с контрольными значениями в 1,3 раза (р<0,05).

Во все сроки снижение удельной площади органелл более выражено при воздействии с длиной волны 450 нм, чем при воздействии с длиной волны 535 нм (р<0,05).

Немаловажное влияние на развитие деструктивных изменений на фоне воздействия лазерным излучением оказывает повреждение синаптического аппарата сетчатки. Так как синапсы представлены мембранными образованиями, то, очевидно, что они являются основной мишенью перекисного окисления и воздействия свободных радикалов. Также происходит дестабилизация синапти-ческих мембран и активация протеолитических ферментов в синаптических отростках. Это приводит к блокаде энергетической системы синапсов. Через одни сутки после лазерного воздействия при обеих длинах волн наблюдались неспецифические изменения синапсов в виде набухания отростков, дезагрегации везикул и отека митохондрий.

Через 14 суток в очагах аппликации лазерной энергии нарастают деструктивные изменения синапсов и появляются контакты, измененные по темному типу, что проявляется повышенной осмиофилией отростков. Подобная картина наблюдается не только при воздействии лазером, но и на фоне облучения высокоинтенсивным светом, гипоксии, ионизирующей радиации, а также при введений различных токсических веществ [Фельдман Н.Г., Вендило М.В., 1976; Бо-голепов H.H., 1979; Абдрахманов A.A., 1987; Потапов A.B., Логвинов C.B., 1999; Пугаченко Н.В., 2000, Варакута Е.Ю., 2003; Жданкина A.A., 2006].

Через сутки после воздействия отмечается значительное снижение численной плотности контактов в 2 и 3 раза соответственно при длине волны 535 и 450 нм (контроль 16,6±0,23 на 100 мкм2, р<0,05). В большей степени это связано с резким снижением количества симметричных синапсов до 1,2±0,19 при длине волны лазера 535 нм и до 1,3±0,22 при длине волны 450 нм (контроль 4,2±0,59, р<0,05). Система субсинаптических единиц характеризуется снижением высоты плотных проекций, размытостью их контуров и неравномерным прокрашиванием. Это приводит к нарушению нормальной передачи импульса и межклеточных взаимодействий. Данная реакция не является специфической и наблюдается при воздействии других патологических факторов, в частности, высокоинтенсивного света [Акерт К., 1972; Степанов С.С., 1986; Семченко В.В., Боголепов H.H., Степанов С.С., 1995]. На фоне лазерного воздействия по нашим данным снижается количество синапсов типов А и С. Также увеличивается длина активной зоны контакта, что является компенсаторной реакцией синапсов на повреждение.

Через 14 суток после воздействия лазерным излучением с длиной волны 535 и 450 нм не отмечается возрастания общей численности контактов по сравнению с показателями первых суток, но увеличивается количество симметричных синапсов в 3 и 2 раза соответственно, что связано с процессами неосинап-

тогенеза. При воздействии с длиной волны 535 нм по сравнению с показателями первых суток возрастает число зрелых асимметричных положительно изогнутых синапсов с высотой плотных проекций >60 нм и синапсов с АЗК <100 нм. При воздействии лазером с длиной волны 450 нм значимо увеличивается количество синапсов с АЗК <100 нм, 500-700 нм и >700 нм, что связано с не-осинаптогенезом и гипертрофией сохранных синапсов. По сравнению с показателями первых суток возрастает число асимметричных синапсов типа А с высотой плотных проекций <50 нм.

Характер патологических изменений клеточных элементов сетчатки при лазерном воздействии во многом зависит от степени повреждения сосудов хо-риоидеи и интраретинальных сосудов, а также от состояния кровотока в них. Через сутки после воздействия лазером отмечается вакуолизация цитоплазмы эндотелиоцитов и увеличение процента сосудов хориоидеи с явлениями стаза и тромбоза до 21,4±0,07% при длине волны 450 нм и до 30,2±0,7% при длине

волны 535 нм при контрольном значении 0,9±0,08%, (р<0,05). Данные изменения не являются специфичными для лазерного воздействия и встречаются при многих патологических состояниях [Давыдов Г.А., Ушаков И.Б., 1987; Логвинов С.В.,1993; Буймова Н.П., 1993].

Через 14 суток при всех длинах волн возрастает количество тромбиро-ванных сосудов до 23,1±0,8% и 34,3±0,8% (р<0,05) соответственно, что влечет за собой нарушение гемоциркуляции и ишемические изменения структурных компонентов сетчатки. При лазерном воздействии с длиной волны 535 нм процент сосудов с явлениями стаза и тромбоза во все сроки выше, чем при длине волны 450 нм (р<0,05).

РЕЗУЛЬТАТЫ ПРИМЕНЕНИЯ СИНТЕТИЧЕСКОГО ДИПЕПТИДА ПРИ ЛАЗЕРНОМ ВОЗДЕЙСТВИИ

При лазерном воздействии на фоне введения синтетческого дипептида AB-17 нами было отмечено снижение повреждающего воздействия последнего на фотосенсорные клетки, что проявляется большей сохранностью мембран дисков и полудисков наружных сегментов, менее выраженными деструктивными изменениями внутренних сегментов и снижением количества клеток с явлениями кариопикноза. Количество пикнотичных нейронов через одни сутки значимо в 1,3 раза меньше, чем в группах без коррекции при обеих длинах волн (р<0,05). К 14-м суткам эти показатали ниже, чем аналогичные в группе без применения препарата в 1,6 раза при обеих длинах волн.

Немаловажным является улучшение функционального взаимодействия наружных сегментов нейронов и пигментоэпителиоцитов. В результате этого происходит активизация защитных функций пигментного эпителия. На фоне введения синтетического дипептида АВ-17 увеличивается высота клеток пигментного эпителия, что свидетельствует о реактивной гипертрофии и фагоцитарной активности, а также снижается степень деструкции органелл. За счет этого эпителиоциты содержат меньшее количество вакуолей. Микроворсинки

гипертрофированы и активно участвуют в захвате разрушенных наружных сегментов. Сохранность пигментного эпителия обеспечивает меньшую деструкцию нейросенсорных клеток и подлежащих слоев сетчатки.

На фоне введения синтетического дипептида АВ-17 отмечается снижение повреждений в ассоциативных нейронах. Это проявляется уменьшением количества пикноморфных нейронов во все сроки и при обеих длинах волн, а также увеличением удельной площади органелл в них по сравнению с группой без коррекции. При воздействии лазером с длиной волны 535 нм через одни сутки отмечается достоверное увеличение площади комплекса Гольджи, митохондрий и эндоплазматической сети в цитоплазме биполярных нейронов по сравнению со значениями в группе без коррекции до 2,4±0,1%, 16,8±0,5% и 36,4±0,7%. Через 14 суток в биполярных нейронах отмечается увеличение площади митохондрий и эндоплазматической сети в 2 раза по сравнению со значениями в группе без коррекции, а в амакринных в 1,4 раза (р<0,05). В горизонтальных нейронах не происходит достоверных изменений.

Через 1 сутки после воздействия с длиной волны 450 нм введение препарата вызывает увеличение данных показателей в биполярных нейронах в 1,8; 1,4; 1,5 раза соответственно по сравнению со значениями в группе без коррекции (р<0,05). В амакринных - в 1,7; 1,3; 1,5 раза соответственно (р<0,05). В горизонтальных нейронах достоверно увеличивается удельная площадь эндоплазматической сети в 3,4 раза (р<0,05).

Через 14 суток происходит увеличение площади органелл в биполярных нейронах. В 1,3 раза повышается данный показатель для митохондрий и эндоплазматической сети, в 1,6 - для комплекса Гольджи (р<0,05). В амакринных нейронах прирост удельной площади органелл идет в 1,6; 1,4 и 1,5 раза соответственно (р<0,05). В горизонтальных нейронах наблюдается увеличение только площади эндоплазматической сети в 1,4 раза (р<0,05).

В данном исследовании также отмечалось снижение повреждающего влияния лазерного излучения на глиоциты на фоне введения в качестве ретино-протектора синтетического дипептида АВ-17, что проявлялось снижением количество пикноморфных клеток в 1,4 раза при обеих длинах волн и во все сроки эксперимента при сравнении с группами без коррекции (р<0,05). Вероятно, это связано с мембранопротекторным действием препарата и, следовательно, с большей сохранностью органелл глиоцитов. Это способствует нормализации их функциональной активности, что приводит к повышению сохранности нейронов внутреннего ядерного слоя.

Слой ганглионарных нейронов на фоне введения препарата характеризуется появлением в кариолемме нейронов глубоких многочисленных складок. Данное явление может быть расценено как компенсаторно-приспособительная реакция клеток на патологическое воздействие и способствует репаративным процессам. Помимо этого, во все сроки отмечается достоверное снижение количества пикноморфных нейронов и клеток с явлениями очагового и тотального хроматолиза по сравнению с группами без введения синтетического дипеп-

тида. Все это приводит к большей сохранности ганглионарных нейронов и их оптимальной функциональной активности в патологических условиях. Через 1 сутки после воздействия лазером с длиной волны 450 нм на фоне введения препарата отмечается увеличение площади комплекса Гольджи в цитоплазме ганглионарных нейронов в 1,3 раза, митохондрий в 1,4 раза и эндоплазматической сети в 1,7 раза по сравнению с предыдущей серией эксперимента (р<0,05).

Через 14 суток происходит возрастание по сравнению с показателями вгруппе без коррекции удельной площади комплекса Гольджи в 1,3 и эндоплазматической сети в 1,7 раза (р<0,05).

Эффективность препарата по данным определения удельной площади органелл выше при лазерном воздействии с длиной волны 450 нм, чем при 535 нм (р<0,05).

Со стороны синаптического аппарата сетчатки при введении синтетического дипептида АВ-17 на фоне воздействия лазерным излучением с длинами волн 450 и 535 нм через сутки отмечается увеличение количества симметричных синапсов по сравнению с данными в группах без коррекции в 3 раза.

На 14-е сутки показатель численности симметричных синапсов продолжает возрастать и увеличивается в 2 и 3 раза соответственно по сравнению с показателями первых суток. Так как симметричные синапсы являются незрелыми, функционально неполноценными и, в дальнейшем, при созревании переходят в ассиметричные, то наиболее вероятным в данной ситуации является наличие процессов синаптогенеза. Данные процессы обеспечивают восстановление межклеточных контактов. Помимо этого, отмечается большая сохранность зрелых асимметричных синапсов, среди которых преобладают положительно изогнутые синапсы с высотой плотных проекций 50-60 нм и синапсы с большей длиной активной зоны контакта. Появление гипертрофированных синапсов происходит в результате выполнением ими большого объема функции, вследствие гибели части контактов. Данная реакция является компенсаторно-приспособительной и встречается при многих видах патологических воздействий на сетчатку [Майоров В.Н., 1977; Степанов С.С., 1986; Логвинов C.B., 1993; Логвинов C.B., 1998; Малиновская И.С., 1998].

Таким образом, наиболее вероятной представляется следующая схема па-томорфогенеза сетчатки при воздействии лазерным излучением пороговых ин-тенсивностей и на фоне коррекции синтетичеким дипептидом (рис.1). Имеется три механизма повреждения структурных компонентов сетчатки: фотохимиче-кий, термический механизмы и повреждение ударной волной. Учитывая параметры воздействия, наиболее значимым является фотохимический механизм. Происходит повреждение всех слоев сетчатки. Пигментный эпителий подвергается деструкции и утрачивает свои защитные свойства, в результате чего нарастает повреждение фоторецепторных клеток. Поражается синаптический аппарат сетчатки. Количество синапсов снижается, и они подвергаются дегенеративным изменениям. Данные процессы приводят к нарушению межклеточных контактов и усиливают деструктивные процессы в клетках наружного и внут-

реннего ядерных слоев, а также в гангионарных нейронах. Не менее важным оказывается поражение глиалыюго компонента, выполняющего трофическую, защитную и метаболическую функции. В результате гибели глиоцитов происходит нарушение глионейральных отношении и нарастание повреждения нейронов. Увеличивается количество пикноморфных ассоциативных клеток. Ганг-лионарные нейроны подвергаются очаговому и тотальному хроматолизу. Часть клеток гибнет. Большую роль в развитии патологических изменений структурных компонентов сетчатки играет гипоксия, развивающаяся вследствие стаза и тромбоза в капиллярах хориоидеи и интраретинальных сосудах. Причиной данных изменений служат нарушение реологических свойств крови и деструктивные изменения эндотелиоцитов. Синтетический дипептид обладает протекторным действием в отношении клеточных мембран, что снижает деструкцию нейросенсорных клеток. Пигментный эпителий сохраняет в большем объеме свои защитные функции. Синаптический аппарат характеризуется большей сохранностью и обеспечивает межклеточные взаимодействия. Глионсйралыте отношения нарушаются в меньшей степени, и глиоциты выполняют свои функции, необходимые для обеспечения нормальных процессов жизнедеятельности нейронов. Синтетический дипептид и препараты из группы нейропептидов способны оказывать влияние на гемостаз и фибринолитическую активность крови, за счет чего нормализуются реологические показатели, и сохраняется адекватная перфузия всех слоев сетчатки. Это способствует снижению деструктивных изменений структурных компонентов сетчатки.

ВЫВОДЫ

1. Лазерное воздействие пороговой интенсивности в неодинаковой степени повреждает все клеточные элементы сетчатки, вызывая наиболее выраженную деструкцию нейросенсорных клеток, в механизмах которой важную роль играют нарушения гематоретинального барьера.

2. Влияние лазерного излучения на нейроны внутреннего ядерного и ганглионар-ного слоев влечет выраженные пикноморфные и хроматолитические изменения, приводит к ультраструктурным нарушениям и снижению удельной площади гранулярного эндоплазматического ретикулума, митохондрий и комплекса Гольджи, степень которых варьирует в зависимости от типа нейронов. Существенным звеном в механизмах лазерного поражения нейронов сетчатки являются структурные изменения радиальной глии и глионейральных взаимоотношений.

3. Лазер поражает синапсы сетчатки, что приводит к снижению их численной плотности с преимущественным уменьшением количества асимметричных активно функционирующих контактов.

4. Агрессивное действие лазера пороговых интенсивностей на сетчатку более выражено при длине волны 450 нм, чем при 535 нм. Структурные нарушения нарастают в течение двух недель после воздействия.

5. Синтетический дипептид АВ-17 снижает повреждающее влияние лазерного излучения на структурные компоненты сетчатки, что проявляется уменьшени-

ем деструктивных изменений пигментного эпителия, нейросенсорных клеток, гематоретинального барьера, синаптического аппарата и клеток внутренних слоев сетчатки.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Структурные изменения сетчатки при комбинированном воздействии ионизирующей радиации и яркого света /C.B. Логвинов, A.B. Потапов, Е.Ю. Варакута, Д.А. Дробатулина, Е.П. Михуля, И.С. Малиновская, A.A. Жданкина, Е.Ю. Аникина // Морфология. — 2004. — Том 126, N 4 . — С. 69.

2. Изменения сетчатки и зрительного нерва при комбинированном воздействии ионизирующей радиации и света /С. В. Логвинов, A.B. Потапов, Е.Ю. Варакута, Е.П. Михуля, A.A. Жданкина, Е.Ю. Аникина // Морфология. -— 2006. — Том 129, N4 . — С. 76.

3. Изменения синапсов сетчатки глаза при комбинированном воздействии ионизирующей радиации и постоянного низкоинтенсивного света /A.B. Потапов, C.B. Логвинов, Е.Ю. Варакута, Е.П. Михуля, A.A. Жданкина, Е.Ю. Аникина // Морфология. — 2006. — Том 130,N 5 . — С. 72.

4. Морфологические изменения сетчатки глаза при воздействии лазерным излучением пороговой интенсивности и их коррекция синтетическим дипептидом АВ-17 /C.B. Логвинов, A.B. Потапов, Е.Ю. Варакута, Е.Ю.Аникина, Е.П. Михуля, A.A. Жданкина, И.В. Бухтияров, Ю.Ю. Кисляков, А.Б. Прокофьев, Е.А. Каменкова//Морфология.—2008,—Том 134, N5 . — С. 51.

5. Общие закономерности поражения сетчатки и зрительного нерва при комбинированном воздействии ионизирующей радиации и света /A.B. Потапов, Е.Ю. Варакута, A.A. Жданкина, Е.П. Михуля, Е.Ю. Аникина // Морфология. — 2008. — Том 133, N 3 . — С. 92.

6. Морфологические изменения сетчатки при воздействии лазерным излучением пороговых интенсивностей с длиной волны 450 нм и их коррекция синтетическим дипептидом / Е.Ю. Аникина, A.B. Потапов, Е.Ю. Варакута и др.// Бюллетень Сибирской медицины. — 2009. — Том 8, N 2 . — С. 5-9.

7. Изменения синапсов сетчатки при воздействии лазерного излучения пороговой интенсивности и их коррекция синтетическим дипептидом / Е.Ю. Аникина, A.B. Потапов, Е.Ю. Варакута, И.В. Бухтияров, Ю.Ю. Кисляков, А.Б. Прокофьев, Е.А. Каменкова, C.B. Логвинов //"Нейрогуморальные механизмы регуляции висцеральных органов и систем в норме и при патологии": Материалы научной конференции, посвященной 120-летию кафедры нормальной физиологии Сиб-ГМУ (ТМИ) и кафедры физиологии ТГУ. - Томск: СибГМУ, 2009. - С. 111 -112.

8. Морфофункциональные изменения пигментного эпителия и нейросенсорных клеток сетчатки при воздействии лазерного излучения пороговой интенсивности и их коррекция синтетическим дипептидом/ Е.Ю. Аникина, A.B. Потапов, Е.Ю. Варакута, И.В. Бухтияров, Ю.Ю. Кисляков, А.Б. Прокофьев, Е.А. Каменкова, C.B. Логвинов // "Нейрогуморальные механизмы регуляции висцеральных органов и систем в норме и при патологии": Материалы научной конференции,

посвященной 120-летию кафедры нормальной физиологии СибГМУ (ТМИ) и кафедры физиологии ТГУ. - Томск: СибГМУ, 2009. - С. 113-114.

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ АЗК - активная зона контакта нм - нанометр ПП - плотные проекции сут - сутки

ФВК- фосфорно-вольфрамовая кислота ССЕ - субсинаптическая единица

-j Лазерное воздействие f-

Фотохимический механизм

Термический механизм

Активация перекисного окисления липидов

Снижение антиоксидантной защиты

Повреждение мембран

Механическое повреждение ударной волной

] Ci эуктурные компоненты сс

Пигментный эпителий

Деструкция органелл в клетках, гиперхромия ядра

Синапсы Радиальная

глия

Нейросенсорные клетки

□ Механизмы повреждающего действия лазерного излучения (по данным Ахмедьяновой З.У., 1982; Островского М.А., Федоровича И.Б., 1994 и др.).

В Структуры, подвергающиеся воздействию.

■ Эффекты, вызываемые лазерным воздействием.

□ Механизмы действия синтетического дипептида АВ-17 и его зффекты{по данным Хавинсона В.Х., Трофимовой C.B., 2000; Харинцевой C.B. и др., 2 0 0 4 и др.).

тчатки, повреждаемые лазером Г

Ассоциативные Ганглионарные Гематоретинальный

нейроны нейроны барьер

Дегенерация и снижение количества

Деструкция глиоцитов

Дегенерация и гибель клеток

Увеличение числа пикноморфных клеток и снижение уд. площади органелл

Очаговый и тотальный хроматолиз, пикноз

Деструкция эндотелиоцитов и нарушение реологических свойств крови

Нарушение защитных функций

Нарушение межклеточных взаимодействий

Нарушение глионейральных отношений

Мембранорупаративное

Активация внутриклеточного синтеза белка-

и ме

Нарушение перфузии, гипоксия

Нейтрализация продуктов перекисного окисления липидов

Нормализация показателей гемостаза J ~

Рис.1. Схема патоморфогенеза сетчатки при лазерном воздействии и на фоне коррекции синтетическим дипептидом АВ-17

Синтетический дипептид АВ-17

Отпечатано в ООО "Вайар" . Томск, Московский тракт, 2г. Тел./факс: 52-98-1 1 Тираж 100 Заказ №273 от 07 мая 2010 г.

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Аникина, Елена Юрьевна

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1 Разновидности лазеров и области их применения.

1.2 Морфологические изменения сетчатки при воздействии различными интенсивностями лазера.

1.3 Нейропептиды и их применение.

1.4 Биологические эффекты нейропептидов и их использование в офтальмологии.

1.5 Ретиналамин, как представитель класса нейропептидов, его применение при различной патологии органа зрения.

1.6 Характеристика синтетического дипептида АВ-17 и перспективы его применения в офтальмологии.

1.7 Резюме.

Глава 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ. МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ СТРУКТУРНЫХ КОМПОНЕНТОВ СЕТЧАТКИ ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ ЛАЗЕРНОГО ИЗЛУЧЕНИЯ ПОРОГОВОЙ ИНТЕНСИВНОСТИ И ИХ КОРРЕКЦИЯ СИНТЕТИЧЕСКИМ ДИПЕПТИДОМ АВ-17.

3.1 Результаты исследований по определению порогов поражения сетчатки лабораторных животных при воздействии наносекундного импульсного лазера с длинами волн 450, 535 нм

3.2 Пигментный эпителий.

3.3 Нейросенсорные клетки.

3.4 Внутренний ядерный слой.

3.5 Мультиполярные нейроны.

3.6 Межнейронные синапсы.

3.7 Глиальные реакции.

3.8 Сосуды и гематоретинальный барьер.

Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ.

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Морфофункциональные изменения сетчатки при воздействии лазерным излучением пороговой интенсивности и их коррекция дипептидом"

АКТУАЛЬНОСТЬ. В современной офтальмологии лазерное излучение используется для лечения заболеваний, связанных с патологией сосудов глазного дна и отслойкой сетчатки [Пасечникова Н.В., 2007]. Соседние с коагулируемыми лазером участки сетчатки подвергаются воздействию с меньшей интенсивностью, приводящему к осложнениям и снижению зрительной функции [Гундорова Р.А., Нероев В.В., Кашников В.В., 2009]. Экспериментально было показано, что высокоинтенсивное лазерное воздействие вызывает деструкцию всех структурных компонентов сетчатки с выпадением ее слоев. Наблюдается повреждение пигментного эпителия, нейросенсорных клеток сетчатки с их последующей гибелью, значительная деструкция внутренних слоев и глиального компонента [Song Q., Risco R., 2008; Framme С., Walter A., 2009; Tackenberg M.A., Tucker B.A., 2009; Krohne. T.U., Hunt S., Holz FG.,2009]. Отмечается повреждение гематоретинального барьера и гемодинамические нарушения [Ахмедьянова З.У., 1982; Glaser В.М., Campochiaro Р.А., Davis J.L. et all., 1985; Glaser B.M. 1988]. При низкоинтенсивном воздействии наблюдается стимулирующий эффект на сохранную область сетчатки, что немаловажно при лечении некоторых дистрофических заболеваний [Сотникова Е.В., Исманкулов О.А., 2002]. Влияние пороговых интенсивностей лазерного излучения на структурные компоненты сетчатки на сегодняшний день мало изучено.

В последние годы все больший интерес вызывают препараты из группы регуляторных белков или цитомединов [Кузник Б.И., Морозов В.Г., Хавинсон В.Х., 1998; Дьяконов М.М., 2005; Морозов В.Г., Рыжак Г.А., Малинин В.В., Григорьев Е.И., Рутовская В.Н., 2006]. Наиболее распространенным в офтальмологии является ретиналамин. Он, обладая выраженным протекторным действием в отношении сосудистого эндотелия и коллагеновых волокон периваскулярной соединительной ткани, способствует восстановлению нарушенных структур сосудистой стенки. Пептидные биорегуляторы увеличивают фагоцитарный показатель, фагоцитарный индекс и степень завершенности фагоцитоза [Кузник Б.И., Будажабон Г.Б., Хавинсон В.Х., Морозов В.Г., 1989; Лысенко А.В., Арутюнян А.В., Козина Л.С., 2005; Коркушко О.В., Хавинсон В.Х., Шатило В.Б., 2006]. Это обусловливает широкое применение ретиналамина в офтальмологии при различных заболеваниях сетчатки. Синтетический дипептид АВ-17 является одной из последних разработок ученых Санкт-Петербургского института биорегуляции и геронтологии РАМН. Это синтетический аналог ретиналамина, относящийся к новому классу пептидных биорегуляторов — синтетических пептидов (цитогенов) и обладающий соответствующими ретинопротекторными свойствами.

Влияние синтетического дипептида АВ-17 на изменения сетчатки при воздействии лазерного излучения пороговых интенсивностей не изучено. ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ. Изучить морфофункциональные изменения сетчатой оболочки глаза и механизмы их развития при воздействии пороговых интенсивностей лазерного излучения, а также оценить возможность коррекции структурных нарушений синтетическим дипептидом АВ-17.

ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ.

1. Изучить морфофункциональные изменения нейронов сетчатки при воздействии лазерным излучением пороговых интенсивностей и на фоне коррекции синтетическим дипептидом АВ-17.

2. Выявить изменения синаптоархитектоники сетчатки на фоне вышеуказанных воздействий.

3. Оценить реакцию глиального компонента при воздействии лазерным излучением пороговых интенсивностей и на фоне коррекции синтетическим дипептидом АВ-17.

4. Изучить морфофункциональные изменения сосудов и гематоретинального барьера при воздействии указанных факторов.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА. С помощью гистологических и электронномикроскопических методов впервые изучено влияние лазерного излучения пороговой интенсивности на все слои сетчатки. Доказано, что наиболее чувствительными к указанному воздействию являются нейросенсорные клетки, пигментный эпителий и синаптический аппарат сетчатки. Лазер вызывает увеличение количества пикнотичных клеток и уменьшение численной плотности ядер в наружном ядерном слое. Пигментный эпителий характеризуется деструкцией органелл и вакуолизацией цитоплазмы, отмечается повреждение и снижение количества синапсов. Во внутренних слоях сетчатки возрастает количество пикноморфных нейронов. В ассоциативных и ганглионарных нейронах отмечено снижение удельной площади органелл. Установлено, что лазерное излучение пороговой интенсивности вызывает поврежедение гематоретинального барьера и глиального компонента сетчатки. Излучение с длиной волны 450 нм вызывает больший деструктивный эффект, чем воздействие с длиной волны 535 нм, что проявляется более выраженным повреждением компонентов сетчатки. К 14 суткам отмечается нарастание патологических изменений. Синтетический дипептид АВ-17 впервые был применен в качестве ретинопротектора при воздействии лазера на область сетчатки. Доказано модифицирующее защитное влияние препарата на сетчатку, выражающееся в снижении деструктивных изменений ее структурных компонентов во все сроки эксперимента.

ТЕОРЕТИЧЕСКАЯ И ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ. Получены новые фундаментальные знания о морфофункциональных изменениях структурных компонентов сетчатки при воздействии лазерным излучением пороговых интенсивностей и возможности их коррекции синтетическим дипептидом АВ-17. Результаты могут быть использованы для разработки новых подходов к комплексному лечению лазерных ожогов сетчатки и осложнений лазерной терапии. Материалы работы используются в учебном процессе при чтении лекций на кафедрах гистологии, эмбриологии и цитологии; морфологии и общей патологии Сибирского государственного медицинского университета по разделу «Органы чувств».

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ.

1. Лазерное воздействие пороговых интенсивностей вызывает повреждение всех слоев сетчатки, в механизмах которого важную роль играют нарушения гематоретинального барьера. Наиболее чувствительны к данному фактору нейросенсорные клетки.

2. Под влиянием лазера нейроны внутреннего ядерного и ганглионарного слоев подвергаются пикноморфным и хроматолитическим изменениям. Существенную роль в данных процессах играет повреждение радиальной глии сетчатки. Поражение синапсов влечет снижение их численной плотности и нарушение межнейронных связей. Деструкция компонентов сетчатки более выражена при длине волны 450 нм, чем при 535 нм.

3. Синтетический дипептид АВ-17 снижает повреждающий эффект лазерного воздействия пороговой интенсивности.

ПУБШЖАЦИИ. По теме диссертации опубликовано 8 печатных работ, из них 1 статья в журнале, рекомендованном ВАК РФ для опубликования основных результатов диссертации на соискание ученой степени кандидата наук.

ОБЪЕМ И СТРУКТУКРА ДИССЕРТАЦИИ. Диссертация изложена на 171 странице и состоит из введения, четырех глав, выводов и библиографического списка. Работа иллюстрирована 4 таблицами, 64 рисунками (20 микрофотографий, 31 электронограмма, 12 графиков и 1 схема). Библиографический указатель включает 227 источников, из них 135 на русском и 92 на иностранных языках.

Заключение Диссертация по теме "Клеточная биология, цитология, гистология", Аникина, Елена Юрьевна

ВЫВОДЫ

2. Влияние лазерного излучения на нейроны внутреннего ядерного и ганглионарного слоев влечет выраженные пикноморфные и хроматолитические изменения, приводит к ультраструктурным нарушениям и снижению удельной площади гранулярного эндоплазматического ретикулума, митохондрий и комплекса Гольджи, степень которых варьирует в зависимости от типа нейронов. Существенным звеном в механизмах лазерного поражения нейронов сетчатки являются структурные изменения радиальной глии и глионейральных взаимоотношений.

5. Синтетический дипептид АВ-17 снижает повреждающее влияние лазерного излучения на структурные компоненты сетчатки, что проявляется уменьшением деструктивных изменений пигментного эпителия, нейросенсорных клеток, гематоретинального барьера, синаптического аппарата и клеток внутренних слоев сетчатки.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Аникина, Елена Юрьевна, Томск

1. Автандилов, Г. Г. Медицинская морфометрия / Г. Г. Автандилов // М. -Медицина, 1990.-383 с.

2. Акерт, К. Ультраструктура синапсов / К. Акерт // Архив анатомии. -1972. Т. 62, вып. 5. - С. 5—8.

3. Александрова, Т. Е. Лечение больных туберкулезом органа зрения с применением пептидного биорегулятора ретиналамина / Т. Е. Александрова, Е. И. Александров // Проблемы туберкулеза и болезней легких. 2008. — № 2. -С. 15—20.

4. Александрова, Т. Е. Результаты применения ретиналамина в лечении туберкулезных хориоретинитов / Т. Е. Александрова, Е. И. Александров // Вестн. офтальмол. 2007. - № 2. - С. 25—28.

5. Анисимов, В. Н. «Горячие точки» современной геронтологии / В. Н. Анисимов // Материалы Международного конгресса «Социальная адаптация, поддержка и здоровье пожилых людей в современном обществе». Санкт-Петербург, 2007. С. 46—47.

6. Анциферова, Н. Г. Комплексное лечение детей с врожденной М1т&аз;<^>п;ией / Н. Г. Анциферова // Ретиналамин. Нейропротекция в офтальмол:'<^^>ж^хтц — СПб. Наука, 2007. - С. 148—153.

7. Артыгалиева, Д. М. Морфологические изменения в сетчатке иплаза у экспериментальных животных при хронической свинцовой интоксисг&сг^хции / Д. М. Артыгалиева // Автореф. дисс. канд. мед. наук. Актюбинск,, ц S>75. — 26 с.

8. Астахов, Ю. С. Ретиналамин в лечении сосудистых и Дистроф»>з1&агческих заболеваний сетчатки глаза / Ю. С. Астахов, Е. В. Бутин, Н. В. Морсг^г^ова, В О. Соколов // Окулист. 2003. №8. - С. 12—13.

9. Астахов, Ю. С. Современные направления медикаментозного лечения непролиферативной диабетической ретинопатии (обзор данных /

10. Ю. С. Астахов, Ф. Е. Шадричев, А. Б. Лисочкина // Terra Medica.--120042. С. 35—37.

11. Ахмедьянова, 3. У. Повреждение структур гемато-ретрг^&^зг^лъ ного барьера при различных режимах аргоновой лазерной коагуляции *<=етчаткикролика / 3. У. Ахмедьянова // IV Всерос. съезд офтальмологов: Те;^^. докл —1. М.- 1982.-С. 303—304.

12. Байбак, А. В. Препараты, оказывающие нейропротекторное д<^^:йОТВие / А. В. Байбак, С. И. Шрам // II Российский симпозиум по химии и: х^иологии пептидов, 2005. С. 14.

13. Боголепов, Н. Н. Ультраструктура мозга при гипоксии / Н. Н. Боголепов // М. Медицина, 1979. - 168 с.

14. Большунов, А. В. Роль метода лазеркоагуляции в лечении ранних проявлений неэкссудативной формы возрастной макулодистрофии / А. В. Большунов, К. А. Миразбекова // Вестник офтальмологии. 2008. - №3. - С. 53—56.

15. Ботабекова, Т. К. Воздействие лазеров на парах металлов на ткани глаза / Т. К. Ботабекова // Русский медицинский журнал . 2003. — №1. — С. 32—36.

16. Ботабекова, Т. К, Сочетание лазерной и офтальмодинамической терапии в лечении сосудистых заболеваний глаза / Т. К. Ботабекова, Э. М. Касимов, М. И. Прокофьева, А. Е. Егоров, Е. А. Егоров // Клиническая офтальмология. 2002. - Т. 3, №3. - С. 28—29.

17. Буймова, Н. П. Структурные нарушения сетчатки глаза при нейтронном облучении / Н. П. Буймова II Структурно-функциональные единицы и их компоненты в органах висцеральной системы в норме и патологии: Тез. док. Харьков. — 1993. — С. 36.

18. Варакута, Е. Ю. Структурные изменения сетчатки глаза на ранней стадии аллоксоидного диабета при воздействии света высокой интенсивности / Е. Ю. Варакута // Автореф. дисс.канд. мед. наук. — Томск, 2002.-21 с.

19. Васильева, JI. А. Применение ретилина для лечения пигментной периферической абиотрофии сетчатки / J1. А. Васильева // Автореф. дис. .канд. мед. наук. — Санкт-Петербург, 1992. — 20 с.

20. Волков, В. В. Лазерное лечение внутриглазной меланомы / В. В. Волков // Клиническая офтальмология. — 2000. Т. 2, №1. — С. 11—12.

21. Волков, В. В. Лазеры и электрооптика в медицине / В. В. Волков // Военно-мед. журн. 1989. - №3. - С. 76—77.

22. Гангстрем, О. К. Последние новости о Кортексине (нейропротекция на молекулярном уровне) / О. К. Гангстрем, Е. Г. Сорокина, Т. П. Сторожевых, Г. В. Штучная, В. Г. Пинелис, М. М. Дьяконов // Terra Medica Nova. №5. -2008. - С. 40—44.

23. Гармаева, А. Ш. Применение ретилина для лечения диабетической ретинопатии / А. Ш. Гармаева // Регуляторные пептиды в норме и патологии (цитомедины). — Чита. — 1991. С. 72—73.

24. Головкин, В. И. Геронтологические аспекты биорегулирующей терапии заболеваний центральной нервной системы / В. И. Головкин, В. В. Малинин, Г. Ф. Рыжак // СПб. ИКФ "Фолиант", 2000. - 40 с.

25. Гундорова, Р. А. Травмы глаза / Р. А. Гундорова, В. В. Нероев, В. В. Кашников // М. ГЭОТАР-Медиа, 2009. - 560 с.

26. Давыдов, Б. И. Ранние изменения гематоэнцефалического барьера после облучения / Б. И. Давыдов, И. Б. Ушаков // Итоги науки и техники. Сер. : радиационная биология. 1987. - Т. 8. - С. 118—149.

27. Давыдова, Г. А. Результаты использования тиклида у пациентов с тромботической ретинопатией / Г. А. Давыдова, А. И. Муха // Вестник офтальмологии. 1992. №2. - С. 22—24.

28. Давыдова, Т. В. Особенности ультраструктуры мюллеровских клеток в сетчатке водных и наземных черепах / Т. В. Давыдова // Цитология. — 1985. — Т. 27, №6.-С. 647—651.

29. Даниличев, В. Ф. Патология глаз. Ферменты и ингибиторы / В. Ф. Даниличев // СПб, 1996. С. 240.

30. Даниличев, В. Ф. Современная офтальмология / В. Ф. Даниличев // Санкт-Петербург. Питер, 2000. - 580 с.

31. Даниличев, В. Ф. Современная офтальмология. Руководство (изд:2) / В. Ф. Даниличев // Питер, 2009. 688 с.

32. Даниличев, В. Ф. Травмы и заболевания глаз: применение ферментов и пептидных биорегуляторов / В. Ф. Даниличев, И. Б. Максимов // Минск. — Наука и техника, 1994. 223 с.

33. Дробатулина, Д. А. Морфология сетчатки при длительном ярком освещении в комбинации с воздействием рентгеновского излучения / Д. А. Дробатулина // Автореф. дисс. .канд. мед. наук. Томск, 2004. — 21 с.

34. Дьяконов, М. М. Отечественные биорегуляторы цитамины входят в повседневную врачебную практику / М. М. Дьяконов // Terra Medica nova. — 2000. -№3.- С. 18—19.

35. Егоров, Е. А. Полипептидные биорегуляторы в лечении различных форм абиотрофии сетчатки у детей. В кн. офтальмофармакология / Е. А. Егоров, Ю. С. Астахов, Т. В. Ставицкая // М. : ГЭОТАР-Медиа, 2005. С. 290—292.

36. Жданкина, А. А. Морфофункциональные изменения сетчатки глаза при фотоповреждении на фоне аллоксанового диабета и их коррекцияасковертином / А. А. Жданкина // дисс. канд. мед. наук. Томск, 2006. - 179 с.

37. Журавлева, А. В. Пептидные биорегуляторы цитомедины / А. В. Журавлева // СПб, 1992. - 15 с.

38. Журавлева, JI. В. Сосудистые и дистрофические заболевания сетчатки глаза: эффективность ретиналамина / JI. В. Журавлева // Вестник Российской Военно-медицинской Академии. 2005. №1. - С. 34-—37.

39. Журавлева, JI. В. Фармакологическое исследование нейропротекторов пептидной природы в культуре клеток / J1. В. Журавлева // Terra Medica. -2005.-№4.-С. 73—76.

40. Зиангирова, Г. Г. Некоторые аспекты биологического действия аргонового лазера на гематоретинальный барьер сетчатки / Г. Г. Зиангирова, 3. У. Ахмедьянова, О. К. Переверзина// М. Медицина, 1981. - 17 с.

41. Зозуля, Т. А. Применение пептидных биорегуляторов при заболеваниях и травмах глаза / Т. А. Зозуля, С. А. Игнатьев, С. В. Трофимова, В. В. Малинин // Методические рекомендации. СПб, 1998.

42. Зуева, М. В. Повреждающее действие видимого света на сетчатку в эксперименте (электрофизиологические и электронномикроскопические исследования) / М. В. Зуева, Т. А. Иванина // Вестник офтальмологии. 1980. - №4. - С. 48—51.

43. Измайлов, А. С. Обоснование лечебного применения в офтальмологии полупроводникового (0,8 мкм) минилазера. Экспериментально-клиническоеисследование / А. С. Измайлов // Автореферат дисс.канд. мед. наук — М, 1993.-26 с.

44. Кацнельсон, JI. А. Сосудистые заболевания глаз // JI. А. Кацнельсон, Т. И. Форофонова, А. Я. Бунин / М. Медицина, 1990.

45. Константинова, А. В. Терапия первичной открытоугольной глаукомы /

46. A. В. Константинова // Здоровье. — Омск. — 2006. — №12. — С. 5.

47. Коркушко, О. В. Пинеальная железа: пути коррекции при старении / О.

48. B. Коркушко, В. X. Хавинсон, В. Б. Шатило // СПб. Наука, 2006. - 204 с.

49. Корочкин, И. М. Механизмы терапевтической эффективности излучения гелий-неонового лазера / И. М. Корочкин, Е. В. Бабенко // Советская медицина. 1990. - №3. — С. 3—8.

50. Красновский, А. А. Механизм образования и роль синглетного кислорода в фотобиологических процессах / А. А. Красновский // В кн. Молекулярные механизмы биологического действия оптического излучения. М. : Наука, 1988. - С. - 23—37.

51. Кропотов, Ю. Д. Применение пептидных биорегуляторов в лечении синдрома нарушения внимания с гиперактивностью у детей и подростков / Ю. Д. Кропотов, JI. С. Чутко, Г. А. Рыжак, В. А. Гринь-Яценко, Е. А. Яковенко // СПб. ИКФ «Фолиант», 2001. —32 с.

52. Кузник, Б. И. Цитомедины: 25—летний опыт экспериментальных и клинических исследований / Б. И. Кузник, В. Г. Морозов, В. X. Хавинсон // СПб. Наука, 1998. - 310 с.

53. Линник, Л. А. Сравнительная оценка влияния излучений ОКГ различного типа на ткани глаза и перспективы их использования в офтальмологии / Л. А. Линник // V съезд офтальмологов УССР: Тез. докл. — Киев: Здоровье. 1973. - С. 271—272.

54. Линник, Л. Ф. Лазерная транспупиллярная термотерапия меланом хориоидеи / Л. Ф. Линник, Д. А. Магарамов, А. А. Яровой, Т. С. Семикова // Офтальмохирургия. 2002. - №3. - С. 45 -50.

55. Логвинов, С. В. Закономерности поражения и репарации зрительного анализатора при воздействии микроволн и ионизирующей радиации / С. В. Логвинов // Автореф. дисс. .док. мед. наук. Томск, 1993. - 43 с.

56. Логвинов, С. В. Радиация и зрительный анализатор: нейроморфологические аспекты / С. В. Логвинов // Томск. — НЛТ, 1998. 138 с.

57. Логвинов, С. В. Фотоповреждение нейросенсорных клеток сетчатки после предварительного рентгеновского облучения / С. В. Логвинов, А. В. Потапов // Бюл. экспериментальной биологии и медицины. — 2000. — Т. 130, №8.-С. 237—240.

58. Лысенко, А. В. Пептидная регуляция адаптации организма к стрессорным воздействиям / А. В. Лысенко, А. В. Арутюнян, Л. С. Козина // Под редакцией В. X. Хавинсона. СПб. - Изд-во ВМедА, 2005. — 208 с.

59. Львова, Л. В. Старая панацея на новый лад / Л. В. Львова // Провизор. -2005. -№17.

60. Майдан, В. А. Применение цитаминов в военно—медицинской практике / В. А. Майдан, С. Г. Кузьмин, Г. А. Рыжак // СПб. : ИКФ «Фолиант», 2000. —56 с.

61. Майоров, В. Н. Пластические свойства синаптической передачи как возможный механизм обучения / В. Н. Майоров // В кн. : Пластичность нервных клеток. М. -Наука, 1977. - С. 70—97.

62. Максимов, И. Б. Состояние и перспективы использования пептидных биорегуляторов в офтальмологии / И. Б. Максимов // Геронтологические аспекты пептидной регуляции функций организма: Сипозиум. Спб. - 1996. - С. 55—56.

63. Максимов, И. Б. Биорегулирующая терапия — новое направление в современной клинической офтальмологии / И. Б. Максимов, Л. К. Мошетова, В. В. Нероев, В. X. Хавинсон // Российские медицинские вести. 2003. - Том 8, №2.-С. 15—18.

64. Максимов, И. Б. Влияние препаратов сетчатки и мозга на электрофизиологические показатели сетчатки и зрительного нерва при повреждениях и заболеваниях / И. Б. Максимов, О. Н Нестеренко // Пептидные биорегуляторы-цитомедины. СПб. - 1992. - С. 95—96.

65. Максимов, И. Б. Инволюционные центральные хориоретинальные дистрофии: применение пептидных биорегуляторов в комплексном лечении / И. Б. Максимов, Г. В. Анисимова // СПб, 2002. 88 с.

66. Максимов, И. Б. Использование мягких контактных линз при повреждениях и заболеваниях глаза / И. Б. Максимов // Воен. мед. журн. 1992. - №8. - С. 54—55.

67. Максимов, И. Б. Комплексная пептидная коррекция при микрохирургическом лечении травм глаз и их последствий / И. Б. Максимов // Дисс. докт. мед. наук. — М, 1996. — 318 с.

68. Максимов, И. Б. Пептидные препараты в современной клинической офтальмологии / И. Б. Максимов, JI. К. Мошетова, В. В. Нероев // Ретиналамин. Нейропротекция в офтальмологии. Сборник научных статей. — СПб. Наука, 2007. - С. 8—12.

69. Максимов, И. Б. Перспективы применения цитомединов в офтальмологии. В кн. Регуляторные пептиды в норме и патологии (цитомедины) / И. Б. Максимов // Чита, 1991. С. 81—82.

70. Максимов, И. Б. Применение препарата ретиналамин в офтальмологии / И. Б. Максимов, В. В. Нероев, В. Н. Алексеев // Пособие для врачей. — СПб, 2003.-20 с.

71. Максимов, И. Б. Применение препарата ретиналамин в офтальмологии / И. Б. Максимов, В. В. Нероев, В. Н. Алексеев, М. И. Разумовский, С. В. Трофимова // Пособие для врачей. СПб. - ИКФ «Фолиант», 2002. — 20 с.

72. Максимов, И. Б. Применение ретилина для лечения заболеваний сетчатки глаз / И. Б. Максимов, В. X. Хавинсон // Воен. мед. журн. — 1994. — № 7. С. 62.

73. Максимов, И. Б. Эффективность пептидных биорегуляторов при лечении травм сетчатки, зрительного нерва и их последствий / И. Б. Максимов, С. А. Игнатьев, Т. А. Зозуля // Актуальные проблемы военной и экстремальной медицины. — М. 1997. — С. 58—61.

74. Малиновская, И. С. Структурные изменения нервных элементов глаза при комбинированном воздействии света и циклофосфана / И. С. Малиновская // Автореф. дисс. .канд. мед. наук. — Томск, 1998. 20 с.

75. Миленькая, Т. М. Результаты применения аргоновой лазерной коагуляции в лечении диабетической ретинопатии / Т. М. Миленькая, В. С. Терентьев, Е. Г. Бессмертная, И. И. Дедов // проблемы эндокринологии. — 1998. Т. 44, №4. - С. 35—38.

76. Морозов, В. Г. ЦИТОГЕНЫ. Биологически активные добавки к пище. Методические рекомендации / В. Г. Морозов, Г. А. Рыжак, В. В. Малинин, Е. И. Григорьев, В. Н. Рутковская // Под ред. чл. -корр. РАМН В. X. Хавинсона. СПб. : «Фирма КОСТА», 2006. - 40 с.

77. Налобнова Ю. В. Электрофизиологическая оценка эффективности пептидного биорегулятора — ретиналамина у больных ПОУГ / Ю. В. Налобнова, Е. JI. Егоров, Т. В. Ставицкая // Клин, офтальмология. — 2003. — Т. 4, №3. — С. 110—113.

78. Нероев, В. В. Эффективность применения Ретиналамина при абиотрофии сетчатки у детей / В. В. Нероев // Ретиналамин. Нейропротекция в офтальмологии. СПб. - Наука. - 2007. - С. 119—128.

79. Нероев, В. В. Достижения в научно-практическом здравоохранении. Материалы Всероссийской конференции / В. В. Нероев, С. В. Трофимова, В. X. Хавинсон // Москва. 2002. - С. 43—44.

80. Нероев, В. В. Опыт применения ретиналамина в лечении диабетической ретинопатии / В. В. Нероев, М. В. Рябина // Ретиналамин. Нейропротекция в офтальмологии. Под. ред. И. Б. Максимова, В. В. Ыероева. СПб. - Наука. - 2007. - С. 76—79.

81. Новиков, В. С. Биорегуляция в медицине катастроф / В. С. Новиков, Г. М. Яковлев, В. С. Смирнов, В. X. Хавинсон // СПб. Наука, 1992. - 47 с.

82. Новиков, В. С. Методы исследования в физиологии военного труда (Руководство) / В. С. Новиков // Под ред. проф. В. С. Новикова. — М. : Военное изд-во, 1993. 240 с.

83. Островский, М. А. Исследование про- и антиоксидантных свойств липофусциновых гранул из клеток ретинального пигментного эпителия глаза человека / М. А. Островский // Биологические мембраны. — 1991. — Т. 8, №11. -С. 1198—1200.

84. Островский, М. А. Механизмы повреждающего действия света на фоторецепторы сетчатки глаза / М. А. Островский, И. Б. Федорович // Физиология человека. 1982. - Т. 8, №4. - С. 572—577.

85. Островский, М. А. Ретиналь как сенсибилизатор повреждения ретинальсодержащих белков сетчатки глаза / М. А. Островский, И. Б. Федорович // Биофизика. -1994. Т. 39, №1. - С. 13—15.

86. Пасечникова, Н. В. Лазерное лечение патологии глазного дна / Н. В. Пасечникова // М. Наукова думка, 2007. — 17 с.

87. Платонова, Т. Н. Применение кортексина при лечении заболеваний центральной нервной системы у детей / Т. Н. Платонова, Рыжак // СПб. : ИКФ «Фолиант», 2000. —32 с.

88. Плюхова, О. А. Эффективность аргонлазерной коагуляции при диабетической ретинопатии и ее влияние на функциональные показатели глаза / О. А. Плюхова // Автореф. дисс. . . канд. мед. наук. — М, 1988 — 26 с.

89. Преображенский, П. В. Световые повреждения глаз / П. В. Преображенский, В. И. Шостак, Л. И. Балашевич // Л. : Медицина, 1986. -200 с.

90. Рыбников, В. Ю. Пептидная регуляция функций мозга / В. Ю. Рыбников, Н. Г. Закуцкий // СПб. ИКФ "Фолиант", 2000. - 40 с.

91. Рыжак, Г. А. Безопасность пептидных биорегуляторов природного происхождения / Г. А. Рыжак // СПб, 2002. — 38 с.

92. Сайдашева, Э. И. Нейроретинопротекция после лазерного лечения ретинопатии недоношенных / Э. И. Сайдашева, О. А. Соловьева, В. А. Любименко // Журнал «Медицинские новости» . №5. - 2009. - С. 15—18.

93. Сапрыкин, П. И. Лазеры в офтальмологии / П. И. Сапрыкин // Саратов. Саратовский университет, 1982. — 188 с.

94. Семченко, В. В. Синаптоархитектоника коры большого мозга / В. В. Семченко, Н. Н. Боголепов, С. С. Степанов // Омск, 1995. — 167 с.

95. Симоненкова, В. А. Размеры участка повреждения сетчатки при лазерном воздействии (электронно—микроскопическое исследование) / В. А. Симоненкова, А. П. Мясников // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. 1986. - Т. 10, № 3. - С. 33—34.

96. Скоромец, А. А. Новые возможности нейропротекции в лечении ишемического инсульта / А. А. Скоромец, JI. В. Стаховская, А. А. Белкин, К.

97. B. Шеховцова, О. Б. Кербиков, Д. В. Буренчев, О. В. Гаврилова, В. И. Скворцова // Журнал неврологии и психиатрии им. С. С. Корсакова. — 2008. — Т. 108, №522.-С. 32—38.

98. Соловьева, Д. В. Молекулярная диагностика и биорегулирующая терапия полигенных заболеваний в гериатрии / Д. В. Соловьева // СПб. -ИКФ "Фолиант", 2000. 40 с.

99. Сотникова, Е. В. Опыт использования направленного стимулирующего лазерного воздействия на сохранную область сетчаткиу больных с центральной хориоретинальной дистрофией / Е. В. Сотникова, О. А. Исманкулов // Офтальмохирургия. 2002. - №4. - С. 14—16.

100. Ставицкая Т. В. Сравнение ретинопротекторных свойств ретиналамина и эмоксипина / Т. В. Ставицкая, Е. А. Егоров, Г. В. Топчиева, А. А. Древаль, М. X. Кадырова // Клиническая офтальмология. 2004. - Т. 5, №3. - С. 13— 14.

101. Степанов, С. С. Синаптоархитектоника коры большого мозга в восстановительном периоде после кратковременной тотальной ишемии / С.

102. C. Степанов // Автореф. дисс. .канд. мед. наук. — Новосибирск, 1986. — 16 с.

103. Степанова, E. А. Ретиналамин в терапии острой фазы рети нотегц атии недоношенных / Е. А. Степанова // Ретиналамин. Нейропротеюл^р^ в офтальмологии. СПб. - Наука, 2007. - С. 140—144.

104. Стрижкова, А. В. Применение различных видов лазерной энзг^ии в лечении возрастной макулярной дегенерации / А. В. Стрижк:с1>^а ц Клиническая офтальмология. 2005. - Т. 6, №1. — С. 23—25.

105. Терещенко, А. В. Транспупиллярная лазерокоагуляция сетчо.щпси в лечении пороговых стадий ретинопатии недоношенных / А. В. Терехжценко Ю. А. Белый, П. JI. Володин, И. Г. Трифаненкова, Ю. И. Гончаров // офтальмологии. 2004. - №4. - С. 24—25.

106. Трофимова, С. В. Возрастные особенности регуляторного Действия пептидов при пигментной дегенерации сетчатки / С. В. Трофизчос<2>Ва // Автореф. дисс.докт. мед. наук. СПб, 2003. - 36 с.

107. Федорук, Н. А. Патоморфологические и гистохимические проя:в;Л7ения взаимодействия лазерного излучения с тканями хориоретинахп>ного комплекса / Н. А. Федорук, А. А. Федоров, А. В. Болынунов // Е£<2^стник офтальмологии. 2009. - N 3. - С. 61—64.

108. Хавинсон, В. X. Биорегуляторные пептиды в лечении диабетической ретинопатии / В. X. Хавинсон, С. В. Трофимова // VII съезд офтальмологов России. Тез. докл. Ч. 1. М. 2000. - С. 335.

109. Хавинсон, В. X. Влияние пептидных биорегуляторов на морфологию паренхиматозных органов / В. X. Хавинсон, А. А. Горбунов, Г. А. Рыжак // СПб. ИКФ «Фолиант», 2000. - 79 с.

110. Хавинсон, В. X. Пептидные биорегуляторы в лечении диабетической ретинопатии / В. X. Хавинсон, В. М. Хонканен, С. В. Трофимова // Методические рекомендации. СПб, 1999.

111. Хавинсон, В. X. Пептидные биорегуляторы в офтальмологии / В. X. Хавинсон, С. В. Трофимова // СПб, 2004. 48 с.

112. Хавинсон, В. X. Прорываясь в тайны старения / В. X. Хавинсон // Здоровый образ жизни — вестник ЗОЖ. 2009. - N 2. - С. 6—7.

113. Хавинсон, В. X. Репаративное действие эпиталона на ультраструктуру пинеальной железы g-облученных крыс / В. X. Хавинсон // Бюлл. Эксп. Биол. Мед.-2001.-Т. 131.-С. 98- 103.

114. Харинцева, С. В. Влияние ретилина на течение экспериментального тромбоза сосудов конъюнктивы и сетчатой оболочки / С. В. Харинцева // Регуляторные пептиды в норме и патологии (цитомедины) — Чита, 1996. С. 28—30.

115. Харинцева, С. В. Некоторые аспекты макулярной дегенерации / С. В. Харинцева, JI. А. Голуб // Геронтология. 2006. - №18. - С. 71—75.

116. Харинцева, С. В. Регуляторные пептиды в норме и патологии / С. В. Харинцева // Чита. 1991. - С. 90—91.

117. Харинцева, С. В. Современные методы лечения макулярной дегенерации / С. В. Харинцева, А. Ш. Гармаева, JI. А. Голуб, Н. А. Логунов //

118. Бюллетень сибирского отделения Российской академии медицинских наук. 2004. прил. № 1. - С. 80—82.

119. Хватова, А. В. Ретиналамин новый этап в. лечении абиотрофии сетчатки у детей / А. В. Хватова, О. В. Хлебникова, Г. И. Мешкова, А. О. Тарасенкова, Е. JT. Шуватова, О. В. Стромова // Terra medica. — 2004. —№2. -С. 42—45.

120. Хватова, А. В. Состояние и перспективы исследований по проблеме ретинопатии недоношенных / А. В. Хватова, JI. А. Катаргина // Мат. симпозиума под ред. А. М. Южакова «Профилактика и лечение ретинопатии недоношенных». М. - 2000. - С. 3—16.

121. Черницкий, Е. А. Фотосенсибилизированные повреждения биологических мембран / Е. А. Черницкий, А. В. Воробей // В кн. Молекулярные механизмы биологического действия оптического излучения. -М. : Наука, 1988.-С. 102—131.

122. Чиж, JI. В. Оценка эффективности микрофотокоагуляции в лечении диабетического макулярного отека / J1. В. Чиж, М. В. Гацу, JI. И. Балашевич // Офтальмохирургия. 2005. - №4. - С. 24—27.

123. Чирков В. Д. Лазеры и их применение в биологии и медицине / В. Д. Чирков, Н. Е. Яхонтов, А. Н. Щелоков // Учебно-методическое пособие. -Горький, 1978.-201 с.

124. Шрам, С. И. Цитопротекторное и нейротрофическое действие кортексина и ретиналамина в культуре клеток феохромоцитомы крысы PC 12

125. С. И. Шрам // II Российский симпозиум по химии и биологии пептидов. 2005. - С. 140.

126. Яковлев, Г. М. Механизмы биорегуляции / Г. М. Яковлев, В. С. Новиков, В. С. Смирнов, В. X. Хавинсон, В. Г. Морозов // СПб. Наука, 1992.-40 с.

127. Adams, D. О. The histopathology of chorioretinal lesions produced by the Gallium-Arsenide laser / D. O. Adams // Philadelfia. 1973. - Vol. 15, №5— P. 148—152.

128. Bahr, F. Laser und Biologische Systeme / F. Bahr // Akupunktur. 1986 -№3. - P. 3—10.

129. Bass, M. Laser for use in medicine / M. Bass // Endoscopy. 1986. - Vol. 18. — suppl. l.-P. 2—5.

130. Birch, J. Xenon arc and argon laser photocoagulation in the treatment of diabetic disc neovascularization. Part 2. Effect on colour vision / J. Birch, A. M. Hamilton // Trans. Ophthalmol. Soc. U. K. 1981. - Vol. 101, №1. - P. 93—99.

131. Birngruber, R. Fundus reflectometry: a step towards optimization of the retina photocoagulation / R. Birngruber, V. P. Gabel, F. Hillenkamp // Mod. Probl. Ophthalmol. -1977. №18. - P. 383—390.

132. Birngruber, R. Theoretical investigations of laser thermal retinal injury / R. Birngruber, F. Hellencamp, V. P. Gabell // Health. Physics. 1985. - Vol. 48 - P. 781—796.

133. Blankenship, G. W. Red krypton and blue-green argon panretinal laser photocoagulation for proliferative diabetic retinopathy: a laboratory and clinical comparison / G. W. Blankenship // Trans. Am. Ophthalmol. Soc. 1986. - №84. -P. 967—1003.

134. Borges, J. M. A clinicopathologic study of dye laser photocoagulation on primate retina / J. M. Borges, H. C. Charles, С. M. Lee, R. T. Smith, J. G. Cunha-Vaz, M. F. Goldberg, M. O. Tso // Retina. Vol. 7, №1. - P. 46—57. - 1987.

135. Brancato, R. Tunable lasers in ophthalmology. A waveguide dye laser photocoagulator / R. Brancato, P. Burlamacchi, R. Pratesi, U. Vanni // Ophthalmologica. 1975. - Vol. 171, №2. - P. 146—156.

136. Brancato, R. Applications of diode lasers in ophthalmology / R. Brancato, R. Pratesi // Lasers in Ophthalmology. 1987. - Vol. 1, №3. - P. 119—129.

137. Bresnick, G. H. Diabetic macular edema. A review / G. H. Bresnick // Ophthalmology. 1986. - Vol. 93, №7. - P. 989—997.

138. Brooks, H. L. Clinicopathologic study of organic dye. Laser in the human fundus / H. L. Brooks, R. C. Eagle, R. P. Schroeder // Ophthalmology. 1989. -Vol. 96, №6. - P. 822—834.

139. Carverley R. K. S. Contribution of dendritic spines and perforated synapses to synaptic plasticity / R. K. S. Carverley, D. G. Jones // Brain Res. Rev. 1990. -Vol. 15.-P. 215—249.

140. Cho H. K. Histopathologic and ultrastructural findings of photocoagulation lesions produced by transpupillary diode laser in the rabbit retina / H. K. Cho, Y.

141. W. Park, Y. J. Kim, К. H. Shyn // J. Korean Med. Sci. 1993. - Vol. 8, №6. -P. 420—430.

142. Connolly, B. P. The histopathologic effects of transpupillary thermotherapy in human eyes / B. P. Connolly, C. D. Regillo, R. C. Jr. Eagle, C. L. Shields, J. A. Shields, H. Moran // Ophthalmology. 2003. - Vol. 110, №2. - P. 415—420.

143. Coscas, G. Treatment of diabetic retinopathy by laser photocoagulation (author's transl) / G. Coscas, G. Chaine // J. Fr. Ophtalmol. Vol. 2, №8—9. - P. 477-91.-1979.

144. Davidescu, L. Diabetic maculopathy-therapeutic results and causes of failure / L. Davidescu // Oftalmologia. Vol. 51, №1. - P. 68—73. - 2008.

145. Doft, В. H. Augmentation laser for proliferative diabetic retinopathy that fails to respond to initial panretinal photocoagulation / В. H. Doft, D. J. Metz, S. F. Kelsey// Ophthalmology.- 1992.-Vol. 99,№11.-P. 1728—1734.

146. Figueroa, M. S. Laser photocoagulation for macular soft drusen. Updated results / M. S. Figueroa, A. Regueras, J. Bertrand, M. J. Aparicio, M. G. Manrique // Retina. 1997. - Vol. 17, №5. - P. 378—384.

147. Frennesson, I. C. Effects of argon (green) laser treatment of soft drusen in early age-related maculopathy: a 6 month prospective study / I. C. Frennesson, S. E. Nilsson // Br. J. Ophthalmol. 1995. - Vol. 79, №10. - P. 905—909.

148. Gamberino, W. C. Role of pyruvate carboxylase in facilitation of synthesis of glutamate and glutamine in cultured astrocytes / W. C. Gamberino, D. A. Berkich, C. S. Lynch // Jn. Rochem. 1997. - Vol. 69. - P. 2312—2375.

149. Geeraets, W. Current diagnosis and management of chorioretinal diseases. Photochemical, thermal and nonline effects of retinal irradiation / W. Geeraets // Под ред. F. A. L'Esperance Saint Louis: The С. V. Mosby Company.- 1977.-P. 103—119.

150. Glaser, В. M. Retinal pigment epithelial cells release an inhibitor of neovascularization / В. M. Glaser, P. A. Campochiaro, J. L. Davis // Arch. Ophthalmol. 1985.-Vol. 103, №12.-P. 1870—1875.

151. Glaser, В. M. Extracellular modulating factors and the control of intraocular neovascularization. An overview / В. M. Glaser // Arch. Ophthalmol. — 1988. — Vol. 106, №5. P. 603—607.

152. Greenstein, V. C. Retinal function in diabetic macular edema after focal laser photocoagulation / V. C. Greenstein, H. Chen, D. C. Hood, K. Holopigian, W. Seiple, R. E. Carr // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2000. - Vol. 41, №11. - P. 3655—3664.

153. Ham, W. T. Flash burns of the rabbit retina / W. T. Ham, H. Wiesinger, F. H. Schmidt // Amer. J. Ophthalmol. 1958. - Vol. 46, №5. - P. 700—723.

154. Hirst, L. W. Dunkelberger G. Corneal endothelial changes after argon-laser iridotomy and panretinal photocoagulation / L. W. Hirst, A. L. Robin, S. Sherman, W. R. Green, S. D'Anna // Am. J. Ophthalmol. 1982. - Vol. 93, №4. - P. 473— 481.

155. Hoppelaer, T. Morphology and time-course of defined photochemical lesions in the rabbit retina / T. Hoppelaer, P. Hendrikson // Curr. Eye. Res. 1988.- Vol. 7, №9. P. 849—860.

156. Johnson , M. W. Laser photocoagulation of the choroid through experimental subretinal hemorrhage / M. W. Johnson, T. S. Hassan, V. M. Elner // Arch. Ophthalmol. 1995. - Vol. 113, № 3. - P. 364—370.

157. Johnson, R. Delayed choroidal vascular filling after krypton laser photocoagulation / R. Johnson, H. Schatz // Am. J. Ophthalmol. — Vol. 99, №2. -P. 154—158. 1985.

158. Ivanisevic, M. Photocoagulation of diabetic maculopathy / M. Ivanisevic // Acta Med. Croatica. 1992. - Vol. 46, №2. - P. 113—117.

159. Izola,V. Transpupillary retinopexy of chorioretinal lesions predisposing to retinal detachment with the use of diode (810 nm) microlaser / V. Izola, G. Spinelli // Retina. 2001. - Vol. 21, №5. - P. 453-^59.

160. Katoh, N. Effects of laser wavelengths on experimental retinal detachments and retinal vessels / N. Katoh, G. A. Peyman // Jpn. J. Ophthalmol. 1988. - Vol. 32, №2.-P. 196—210.

161. Kohner, E. M. Diabetic retinopathy / E. M. Kohner, N. W. Oakley // Metabolism. 1975. - Vol. 24, №9. - P. 1085—1102.

162. Kozaki, J. Light-induced retinal damage in pigment rabbit—2. Effect of alfa-tocopherol / J. Kozaki, M. Takeuchi, K. Takehachi, K. Yamagishi, H. Ohkuma, M. Uyama // Jpn. J. Ophthalmol. -1992. Vol. 36, №3. - P. 315—322.

163. Kozaki, J. Light-induced retinal damage in pigment rabbit. Effect of alfa-tocopherol / J. Kozaki, M. Takeuchi, K. Takehachi, K. Yamagishi, H. Ohkuma, M. Uyama // Nippon. Ganka Gakki Zasshi. 1994. - Vol. 98, №10. - P. 948—954.

164. Kriechbaum, K. High-Resolution Imaging of the Human Retina In Vivo after Scatter Photocoagulation Treatment Using a Semiautomated Laser System / K. Kriechbaum, M. Bolz, G. G. Deak, S. Prager, C. Scholda, U. Schmidt-Erfurth // Ophthalmology. 2009.

165. Krohne, T. U. Effect of 308 nm excimer laser irradiation on retinal pigment epithelium cell viability in vitro / T. U. Krohne , S. Hunt, F. G. Holz // Br. J. Ophthalmol. Vol. 93, №1. - P. 91—95. - 2009.

166. Landers, M. В. The current status of laser usage in ophthalmology / M. B. Landers, M. L. Wolbarsht, H. E. Shaw // Ann. N. Y. Acad. Sci. 1976. - Vol. 30, №267.-P. 230—246.

167. Li, T. Histopathologic and immunohistochemical studies on retina after laser photocoagulation / T. Li, Q. L. Luo, H. Y. Wu // Sichuan Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban. 2004. - Vol. 35, №4. - P. 512—515.

168. L'Esperance, F. A. The ocular histopathologic effect of krypton and argon laser radiation / F. A. L'Esperance // Amer. J. Ophthalmol. — 1969. — Vol. 68, №2. -P. 263—273.

169. L'Esperance, F. A. Argon and Ruby laser photocoagulation of disciform macular disease / F. A. L'Esperance // Trans. Amer. Acad. Otolar. Ophthalmol. -1972.-Vol. 75.-P. 609.

170. L'Esperance, F. Ophthalmic lasers: Photocoagulation, photoradiation and surgey. 2—nd ed. / F. A. L'Esperance // St. Louis. Mosby. - 1983. - P. 606.

171. L'Esperance, F. A. Clinical applications of the organic dye laser / F. A. L'Esperance // Ophthalmology. 1985. - Vol. 92, №11. - P. 1592—1600.

172. L'Esperance, F. A. Technical Considerations for Ocular photocoagulation: Ophthalmic Lasers. 3—rd edition / F. A. L'Esperance // St. Louis-Baltimore-Toronto: The С. V. Mosby Company. 1989. - Vol. 1. - Part 1. - P. 78—112.

173. Loewenstein, A. Macular hemorrhage after excimer laser photorefractive keratectomy / A. Loewenstein, I. Lipshitz, D. Varssano, M. Lazar // J. Cataract. Refract. Surg. 1997. - Vol. 23, №5. - P. 808—810.

174. Ludwig, К. Changes in the visual field in diabetic retinopathy after grid laser coagulation of the posterior pole of the eye / K. Ludwig, B. J. Lachenmayr, M. Bonnici, O. Plachta // Fortschr. Ophthalmol. 1991. - Vol. 88, №6. - P. 824— 828.

175. Lund, D. J. Ocular hazard of the Ga-As laser / D. J. Lund, С. C. Carver, R. B. Bedell // Letterman Army Inst, of Research. San Francisco: Frankford Arsenal. - 1972.-P. 135—137.

176. Maia, О. O. Jr. Examination of the retinal nerve fiber layer in diabetic retinopathy treated by argon laser panphotocoagulation / О. O. Jr. Maia, R. M. Vessani, W. Y. Takahashi, R . Jr. Susanna // Arq. Bras. Oftalmol. Vol. 71, №2. -P. 187—190.-2008.

177. Marshall, J. A comparative histopathological study of argon and krypton laser irradiations of the human retina / J. Marshall, A. C. Bird // Brit. J. Ophthalmol. 1979. - Vol. 63, №10. - P. 657—668.

178. McHugh, J. D. A. Transpupillary retinal photocoagulation in the eyes of rabbit and human using a diode laser / J. D. A. McHugh, J. Marshall, M. Capon // Lasers & Light in Ophthalmology. 1988. - Vol. 2, №2. - P. 125—143.

179. Mizukawa, A. Histopathological study on the monkey retina and choroid by diode laser endophotocoagulation / A. Mizukawa, S. Okisaka, L. G. Jing // Nippon Ganka Gakkai Zasshi. 1991. - Vol. 95, №2. - P. 114—122.

180. Moshfeghi, D. M. «Raising the bar in Retinopathy of prematurity: new approaches to meet standard-of-care requirements in ROP screening» D. M. / Moshfeghi // J. of Perinatology-Neonatology. 2006. - Vol. 19, №3. - P. 34—36.

181. Odehnal, M. Transcleral laser photocoagulation and cryocoagulation of the retina in children with retinopathy of prematurity / M. Odehnal, K. Gergelyova, P. Pochop, M. Hlozanek // Cesk. Slov. Oftalmol. 2003. - Vol. 59, №2. - P. 80—85.

182. Ohkoshi, К. Subthreshold micropulse diode laser photocoagulation for diabetic macular edema in Japanese patients / K. Ohkoshi, T. Yamaguchi // Am. J. Ophthalmol. 2010. - Vol. 149, №1. -P. 133—139.

183. Ohsawa, E. Scanning electron microscopic observation of glial cells following xenon arc photocoagulation / E. Ohsawa, T. Miki // Graefes Arch. Clin. Exp. Ophthalmol. Vol. 218, №2. - P. 64—69. 1982.

184. Okisaka, S. The effects of laser photocoagulation in the retinal capillaries / S. Okisaka, T. Kuwabara, L. M. Aiello // Am. J. Ophthalmol. 1975. - Vol. 80,№4. - P. 591—601.

185. Park, D. H. A case of accidental macular injury by Nd: YAG laser and subsequent 6 year follow-up / D. H. Park, I. T. Kim // Korean J. Ophthalmol. Vol. 23, №3. P. 207—209. 2009.

186. Park, D. W. Grid laser photocoagulation for macular edema in bilateral juxtafoveal telangiectasis / D. W. Park, H. Schatz, H. R. McDonald, R. N. Johnson //Ophthalmology. 1997. -Vol. 104, №11.-P. 1838—1846.

187. Pavljasevi, P. Argon laser photo-coagulation complications in diabetic retinopathy / P. Pavljasevi, J. Pranji, T. Sarajli // Bosn. J. Basic. Med. Sci. 2004. -Vol. 4, №2.-P. 41—44.

188. Perry, D. D. Choroidal microvascular repair after argon laser photocoagulation. Ultrastructural observations / D. D. Perry, R. L. Reddick, J. M. Risco // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. Vol. 25, №9. - P. 1019—1026. 1985.

189. Peyman, G. A. A neodimium — YAG endolaser / G. A. Peyman, M. D. Conway, S. Ganti // Ophthalmic Surgery. 1983. - Vol. 14, №3. - P. 309—313.

190. Peyman, G. A. Intraocular photocoagulation with the argon-krypton laser / G. A. Peyman, J. M. Grisolano, M. N. Palatio // Arch. Ophthalmol. 1980.-Vol. 98, №11.-P. 2062—2064.

191. Pollack, A. Cellular processes causing defects in Bruch's membrane following krypton laser photocoagulation / A. Pollack, W. J. Heriot, P. Henkind // Ophthalmology. 1986. - Vol. 93, №8. - P. 1113—1119.

192. Porrini, G. Photodynamic therapy of circumscribed choroidal hemangioma / G. Porrini, A. Giovannini, G. Amato, A. Ioni, M. Pantanetti // Ophthalmology. -2003. Vol. 110, №4. - P. 674—680.

193. Pozdnyakov, S. Retina remodeling following diode laser / S. Pozdnyakov, N. Gupta, J. Yeung, Y. Yiicel // Can. J. Ophthalmol. 2008. - Vol. 43, №2. P. 203—207.

194. Puliafito, C. A. Semiconductor laser endophotocoagulation of the retina / C. A. Puliafito, T. F. Deutsch, J. Boll, K. To // Arch. Ophthalmol. 1987. - Vol. 105, №5— P. 424—427.

195. Richard, G. Effect of laser therapy in diabetic retinopathy on the hemodynamics of retinal vessels / G. Richard, I. Kreissig // Klin. Monbl. Augenheilkd. — Vol. 186, №2.-P. 107-109.- 1985.

196. Ritenour, R. J. The effect of panretinal photocoagulation for diabetic retinopathy on retinal nerve fibre layer thickness and optic disc topography / R. J. Ritenour, V. Kozousek, В. C. Chauhan // Br. J. Ophthalmol. Vol. 93, №6. - P. 838-839.-2009.

197. Robertson, D. M. Argon laser photocoagulation treatment in central serous chorioretinopathy / D. M. Robertson//Ophthalmology. 1986. - Vol. 93, №7. - P. 972—974.

198. Singerman, L. J. Red krypton laser therapy of macular and retinal vascular diseases / L. J. Singerman // Retina. Vol. 2, №1. - P. 15—28. - 1982.

199. Sliney, D. H. Interaction mechanisms of laser radiation with ocular tissues / D. H. Sliney // Lasers & Light in Ophthalmology. 1988. - Vol. 2, №1. - P. 122.

200. Sturm, V. Early laser photocoagulation treatment as an option in central serous chorioretinopathy /V. Sturm // Ophthalmic Surg. Lasers Imaging. Vol. 40, №5. P. 453—460. - 2009.

201. Townes, D. E. Xenon photocoagulation of the papillo-macular bundle. An experimental study / D. E. Townes, R. C. Watzke // Arch. Ophthalmol. 1972.-Vol. 87, № 6.-P. 679—683.

202. Tso, M. O. Repair and late degeneration of the primate foveola after injury by argon laser / M. O. Tso, B. S. Fine // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. Vol. 18, №5.-P. 447-461.- 1979.

203. Waidelich, W. Der Laser und seine Anwendungsmoglichkeit in der Medizin / W. Waidelich // Therapiewoche. 1977. - №27. - P. 5236—5240.

204. Wallow, I. H. Repair of the pigment epithelial barrier following photocoagulation /1. H. Wallow // Arch. Ophthalmol. Vol. 102, №1. - P. 126— 135. - 1984.

205. Wasowicz, M. Long-term effects of light damage on the retina of albino and pigmented rats / M. Wasowicz, C. Morice, P. Ferrari // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2002. - Vol. 43. - P. 813—820.

206. Weinberg, W. Controlling retinal photocoagulation by light reflection / W. Weinberg, B. Lorenz, R. Birngruber // Docum. Ophthalmol. Proc. Series. — 1984. -Vol. 36,P. 299—311.

207. Weinstein, G. W. Photocoagulation of the fovea / G. W. Weinstein, H. G. Rylander // Trans. Am. Ophthalmol. Soc. №76. - P. 278—295. - 1979.

208. Yew, D. T. Changes in laser-irradiated retina in the first 24 h after irradiation / D. T. Yew, C. L. Wong, Y. W. Chan // Acta. Anat. (Basel). Vol. 103, №3. - P. 301—304. - 1979.Q

Информация о работе

Аникина, Елена Юрьевна
кандидата медицинских наук
Томск, 2010
ВАК 03.03.04

Диссертация

Морфофункциональные изменения сетчатки при воздействии лазерным излучением пороговой интенсивности и их коррекция дипептидом - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Морфофункциональные изменения сетчатки при воздействии лазерным излучением пороговой интенсивности и их коррекция дипептидом - тема автореферата по биологии, скачайте бесплатно автореферат диссертации

Похожие работы