"Морфофункциональная характеристика печени в условиях отдаленных последствий однократного перорального введения обедненного урана"

Набродов, Георгий Михайлович

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
"Морфофункциональная характеристика печени в условиях отдаленных последствий однократного перорального введения обедненного урана"
ВАК РФ 03.03.04, Клеточная биология, цитология, гистология

Автореферат диссертации по теме ""Морфофункциональная характеристика печени в условиях отдаленных последствий однократного перорального введения обедненного урана""

На правах рукописи

Набродов Георгий Михаилович

МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ПЕЧЕНИ В УСЛОВИЯХ ОТДАЛЕННЫХ ПОСЛЕДСТВИЙ ОДНОКРАТНОГО ПЕРОРАЛЬНОГО ВВЕДЕНИЯ ОБЕДНЕННОГО УРАНА

03.03.04 клеточная биология, цитология, гистология

ВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Волгоград 2011

2 ИЮН 2011

4848929

Работа выполнена на кафедре гистологии ГОУ ВПО «Воронежская государственна медицинская академия им. H.H. Бурденко» Минздравсоцразвития РФ совместно с ГосНИИИ военной медицины Минобороны России (г. Москва)

Научные руководители:

доктор биологических наук, профессор Воронцова Зоя Афанасьевна кандидат медицинских наук, доцент Афанасьев Роман Владимирович

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Дубовая Татьяна Клеониковна доктор медицинских наук, доцент Смирнов Алексей Владимирович

Ведущая организация - ГОУ ВПО «Ярославская государственная медицинская академия» Минздравсоцразвития РФ

Защита состоится .2011 г. в 10.00 часов на заседании

Диссертационного совета Д.208.008.01 при ГОУ ВПО «Волгоградский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития РФ по адресу: 400131, г. Волгоград, пл. Павших Борцов, I.

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке ГОУ ВПО «Волгоградский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвити РФ (400131, г. Волгоград, пл. Павших Борцов, 1).

Автореферат разослан «. № » 2011 г.

Ученый секретарь Диссертационного совет^

доктор медицинских наук Григорьева Наталья Владимировна

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Во всех объектах биосферы: почве, воде, воздухе, минералах, живых организмах содержатся в естественной форме природные радионуклиды. Одним из трех существующих в природе радионуклидов и представляющих подавляющую часть, является уран 238 (99,3%). Обеднённый уран состоит почти полностью из U238 и его радиоактивность составляет около 60 % от радиоактивности природного урана. Причинная значимость эффектов облучения обеднённого урана не установлена, но сказывается на состоянии здоровья людей, проживающих в зонах вооружённого конфликта, попадая в организм вместе с водой в виде оксида, образующегося при взрывах снарядов. С этих позиций, он может представлять серьезную опасность при производстве и испытании ядерного оружия, авариях на атомных электростанциях в результате его расщепления (Головко А.И., 2000; Белоус Д.А., 2004; Гребенюк А.Н.,

2009). Обеднённый уран может вызвать как функциональные, так и органические изменения при попадании в организм. Острая урановая интоксикация характеризуется политропным действием на различные системы и механизм действия его соединений весьма разнообразен (Кулиева Г.А., 2004; Грачев H.H., Мырова Л.О., 2005; Логановский К.Н., 2008).

В связи с выделением из окружающей среды большого количества токсических веществ, интерес к фактору интоксикации резко возрос. Проблема токсических поражений, возникающих как реактивный ответ на воздействие факторов его вызывающих, их причинность рассматривается как сложный многофакторный патологический процесс, ведущей ролью которого является эндогенная интоксикация, обусловленная метаболическими нарушениями. Печень как центральный орган метаболизма объединяет весь организм. По мощности ферментативных систем детоксика-ции, печень является крупным барьером на пути чужеродных и токсических веществ из просвета кишки во внутреннюю среду организма (Комарова Д.В., Цинзер-линг В.А., 1999; Зайчик А.Ш., Чурилов Л.П., 2005; Ивашкин В.Т., Маевская М.В., 2007). Ацинус печени, представляющий топографическую характеристику трех зон по мере уменьшения в них градиента кислорода и концентрации метаболитов, поможет выявить степень и причину поражаемости на основе комплексного морфо-функционального анализа структурно-метаболических изменений гепатоцитов с учетом их внутриацинарной локализации (Комарова Д.В., Цинзерлинг В.А., 1999; Мишнев О.Д., Щеголев А.И., 2001; Мишнев О.Д., 2003; Панфилов С.А., Панфилова Е.В., 2003). На фоне эндогенной интоксикации нарушается иммунологическая резистентность организма, активируются процессы свободнорадикального окисления липидов, угнетается активность антиоксидантной системы (Мишнев О.Д., 2003; Скляр Л.Ф., 2006; Щеголев А.И., 2006; Герок В., Блюм Х.Е., 2009; Черний В.И.,

2010).

Исследования на животных, и особенно на крысах, являются основой и необходимым звеном для установления токсичности, а комплексное морфологическое исследование с применением математических методов анализа и моделирования изменений позволит выявить весь объем эффектов, нарушающих физиологические механизмы (Платонов А.Е., 2000; Автандилов Г.Г., 2002; Кулаичев А.П., 2006; Герасимов А.Н., 2007; Гринхальх Т., 2008; Хадарцев A.A., 2008; Хай Г.А., 2009).

Таким образом, экспериментальная модель морфофункционального состояния печени после однократного перорального введения водного раствора оксидов обедненного урана в алгоритме математических решений позволит интерпретировать ее нарушения.

Цель исследования

Изучить морфофункциональное состояние печени в хронодинамике экспериментальной модели после однократного перорального введения водного раствора оксидов обедненного урана.

Задачи исследования

1. Создать информационный алгоритм по морфометрическим исследованиям гистохимических реакций ацинусов печени с особенностями по зонам и проанализировать динамические изменения с использованием кластерного анализа в хронодинамике последствий однократного перорального введения водного раствора оксидов обедненного урана.

2. Выявить морфологические изменения, определяющие функциональность ге-патоцитов зон ацинуса печени по ядерному тесту после перорального введения водного раствора обедненного урана в отдаленные сроки наблюдения.

3. Проанализировать морфофункциональные особенности изменений желчных канальцев и холангиол системы желчевыведения, а также стромального компонента по качественным и количественным характеристикам в хронодинамике экспериментальной модели.

4. Определить степень риска поражения печени в хронодинамике наблюдения после однократного перорального введения водного раствора оксидов обедненного урана.

Научиая новизна исследования

Впервые на основе компьютерной гистофотометрии с применением имидж-анализа, морфологостатистического и кластерного анализа проведено комплексное исследование структурных образований ацинуса печени с характеристикой зон, определивших функциональные особенности возрастного контроля и экспериментальных крыс после перорального однократного введения водного раствора оксидов обедненного урана с отдаленными сроками наблюдения.

Продемонстрирован пролонгированный процесс морфоэнзиматических изменений ацинусов печени в хронодинамике наблюдений, констатирующий радиотоксический характер одноразового перорального применения водного раствора оксидов обедненного урана.

Впервые определен обусловленный риск поражения печени при воздействии обедненного урана по ядерному тесту и структурным характеристикам желчевыво-дящей системы.

Теоретическая значимость работы заключается в выявлении морфологических закономерностей, вызывающих риск поражений печени после однократного введения водного раствора оксидов обедненного урана.

Практическая значимость работы заключается в предоставлении информации на основе морфоэнзиматических исследований печени о кумулятивном характере обедненного урана и его радиотоксичности необходимой для разработки профилактических мероприятий предупреждающих возникновение заболеваний.

Спектр общегистологических, гистохимических, специальных, гистофотомет-рических и дополнительных методов математической статистики во многом определяют тактику и алгоритм дальнейших диагностических исследований.

Внедрение в практику

Результаты диссертационного исследования внедрены в учебный процесс кафедры гигиены, кафедры мобилизационной подготовки здравоохранения и медицины катастроф ВГМА им. H.H. Бурденко, а также кафедры анатомии, гистологии и общей биологии ВГАУ им. К.Д. Глинки. Выявленные закономерности обусловленного риска поражения по ядерному тесту внедрены в патологоанатомическое отделение МУЗ «Дорожная клиническая больница на ст.Воронеж-1 ОАО «РЖД».

Публикации и апробация результатов диссертации

Основные результаты диссертации докладывались на Международной научно-практической конференции «Развитие производственной и экологической безопасности в XXI веке. Проблемы и решения» (Санкт-Петербург - Владикавказ, июнь 2009 г.); научной конференции «Актуальные вопросы теоретической, экспериментальной и клинической морфологии» (Иваново, май 2009 г.); V съезде радиобиологического общества Украины (Ужгород, сентябрь 2009 г.); отчетной конференции в ГосНИИИ военной медицины Минобороны России «Радиационные факторы и защита» (Москва, февраль 2009 г.); X международном конгрессе «Здоровье и образование в XXI веке» «Инновационные технологии в биологии и медицине» (Москва, декабрь 2009 г.); XVIII Международной конференции «Новые информационные технологии в медицине, биологии, фармакологии и экологии» (Украина, июнь 2010 г.); межкафедральной научной конференции кафедр гистологии, нормальной анатомии человека, общей гигиены, патологической физиологии, оперативной хирургии с топографической анатомией Воронежской государственной медицинской академии им. H.H. Бурденко; радиологического отдела ГосНИИИ военной медицины Минобороны России (Воронеж, ноябрь 2010).

Результаты исследования отражены в 11 научных публикациях, 4 из которых -в изданиях, рекомендованных ВАК для опубликования материалов диссертации.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту

1. Морфофункциональное состояние печени после однократного перорального введения обедненного урана определяется динамичностью изменений гистоэнзима-тических реакций паренхимы ацинусов и отдаленностью сроков наблюдения в эксперименте.

2. Исследования по ядерному тесту определят функциональность гепатоцитов в ацинусах и по зонально-топографическим особенностям их распределения сформирует представление о характере и риске поражения после однократного перорального применения обедненного урана в эксперименте.

3. Продолжительный период наблюдения после однократного введения обедненного урана определит характер изменений стромального компонента ацинусов печени крыс на реакцию паренхимы.

Объем и структура диссертации

Материал диссертации изложен на 120 страницах машинописного текста, и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, обсуждения полученных данных, выводов и списка литературных источников. Иллюстративный материал содержит 54

микрофотографий, 5 таблиц, 18 рисунков. Библиографический указатель содержит 205 источников, в том числе 151 из российской и 54 зарубежной литературы.

Содержание работы

Материалы и методы исследования

В экспериментальном исследовании было использовано 180 половозрелых белых беспородных крыс-самцов с начальным возрастом 4 месяца. Экспериментальным животным однократно перорально вводили водный раствор оксидов обедненного урана (ОУ) в дозе 0,1 мг на 100 г массы животного. Период наблюдения после введения ОУ составил 1, 3 и 6 месяцев и этим срокам соответствовал возрастной контроль 5, 7 и 10 месяцев. Таким образом, было сформировано 6 групп (табл.1). Эвтаназию экспериментальных и контрольных животных осуществляли декапита-цией.

Таблица 1.

Модель эксперимента_

сроки взятия материала (мес) количество животных в группах

контрольные экспериментальные

1 10 50

3 10 50

6 10 50

всего 30 150

Итого животных: 180

Протокол эксперимента в разделах выбора, содержания и выведения животных из опыта был составлен в соответствии с принципами биоэтики и правилами лабораторной практики, которые представлены в «Руководстве по содержанию и использованию лабораторных животных» (1996) и приказе МЗ РФ № 267 от 19.06.2003г «Об утверждении правил лабораторной практики», а также с соблюдением правил гуманного обращения с животными (Report of the AVMA Panel on Euthanasia JAVMA, 2001).

Для исследования извлекали фрагменты правой доли печени. Одни из них замораживали и формировали блоки с заливкой в Kilik для гистохимических исследований, другие - фиксировали в жидкости Буэна и осуществляли стандартную проводку, с последующей заливкой в парафин. На криостатных срезах были проведены гистохимические реакции для выявления активности фосфомоноэстераз и дегидро-геназ по светооптической плотности распределения ферментов, определяющих функциональность паренхимы ацинусов печени и желчевыводящих структур, представленных желчными канальцами (ЖК) и желчными проточками или холангиола-ми (X). Щелочная фосфатаза (ЩФ) является маркерным ферментом ЖК, образованных билиарным полюсом гепатоцитов и определяет активность экскреции желчи, а также холангиол, построенных из холангиоцитов - камбиальных клеток, представляющих соединительный участок между терминальными желчными проточками и портальным желчным протоком (Комарова Д.В., Цинзерлинг В.А., 1999; Мишнев О.Д., Щеголев А.И., 2001; Панфилов С.А., Панфилова Е.В., 2003, Непомнящих Д.Л., 2006). Глюкоза 6-фосфатдегидрогеназа (Г6-ФДГ) - маркерный фермент, определяющий содержание гликогена и окислительное повреждение мембран. Сукци-

натдегидрогеназа (СДГ) и лактатдегидрогеназа (ЛДГ) - для выявления активности ферментов аэробного и анаэробного процессов цикла Кребса в гепатоцитах (Боро-дюк Н.Р., 2003; Герок В., Блюм Х.Е., 2009; Пасечник И.Н., Кутепов Д.Е., 2009). Для обзора и качественной оценки структурной организации, кровенаполнения в ацину-сах, изменения структуры цитоплазмы геиатоцитов парафиновые срезы печени окрашивали гематоксилином-эозином. Специальный метод полихроматофильной окраски ядер гепатоцитов по методике Balogh G., модифицированной А.Н. Яцков-ским, использован для выявления хромосомного аппарата с оценкой его биосинтетической активности гепатоцитов по морфофункциональным особенностям хроматина: эухроматин (ЭХ) - деконденсированный участок хромосом, содержащий дес-пирализованную ДНК, окрашивается альциановым синим в синий цвет; гетерохро-матин (ГХ) - конденсированный участок хромосом, эквивалентный спирализован-ной ДНК, окрашивается сафранином в красный цвет и считается признаком неактивной клетки, а также может быть признаком начального процесса апоптоза при плотной его упаковке по периферии ядра (Лушников Е.Ф., Абросимов А.Ю., 2001; Барышников А.Ю., Шишкин Ю.В., 2002; Черний В.И., 2010). Методы окраски по Маллори и Ван-Гизону использованы для выявления фиброзирования паренхимы печени соединительной тканью, способствующей возникновению функциональной недостаточности гепатоцитов и нарушению архитектоники сосудистого русла (Ке-лина Н.Ю., Безручко Н.В., 2006; Герок В., Блюм Х.Е., 2009; Коржевский Д.Э., Гиля-ров A.B., 2010). Для оценки портального гомеостаза проводили качественную и количественную оценку тучных клеток (ТК) при окраске основным коричневым по Шубичу М.Г. с докраской гематоксилином. В выборе критериев для оценки морфо-функционального состояния печени учитывался клинико-лабораторный подход (Панфилов С.А., Панфилова Е.В., 2003; Герок В., Блюм Х.Е., 2009).

Качественная и количественная характеристика микрообъектов органов была проведена от каждого животного с использованием бинокулярного микроскопа OPTIKA Serie DM-15&20, снабженного цифровой видеофотокамерой и применением имидж-анализа. Объем материала, необходимого для исследования, определен методом аккумулированных средних. Полученные данные статистически обрабатывали с использованием методов вариационной статистики и корреляционного анализа с учетом коэффициента диагностической значимости морфоэнзиматических критериев. С целью выявления индивидуальных особенностей реагирования, позволяющих сделать корректную оценку проведенных исследований, использован дополнительный статистический метод - кластерный анализ по иерархическому алгоритму показателей. Для интерпретации компартментных характеристик был использован итеративный алгоритм среднесвязывающих (Медик В.А., 2000; Платонов А.Е., 2000; Назаренко Г.И., Осипов Г.С., 2003; Кулаичев А.П., 2006; Банержи А., 2007; Герасимов А.Н., 2007; Гринхальх Т., 2008; Криштопенко C.B., 2008). Для выявления степени развития риска поражения печени был вычислен коэффициент обусловленного риска (Юи Цао, Атраментова Л.А., 2006; Иванов В.К., Цыб А.Ф., 2006).

Полученные результаты и их обсуждение

Результаты светооптической оценки гистоэнзиматических исследований долек печени у экспериментальных крыс показали изменение гетерогенности распределения ферментов во всех группах по сравнению с контрольными.

Большое количество животных позволило провести кластерный анализ для выявления в экспериментальных группах индивидуальных особенностей реагирования на инкорпорацию обедненного урана. Показатели средних значений кластеров определили степень их близости с контролем и между собой, а также количественное распределение животных внутри кластера. Кластерный анализ показал неоднородное распределение ферментов внутри кластеров по показателям их светооптической плотности, и несмотря на некоторое стремление к единообразию, обнаружена несогласованность процессов функционирования (табл.2).

Таблица 2.

Модель количественного распределения крыс в кластерах по результатам гистоэнзиматических исследований ацинусов печени

критерии

кластеры месяцы ЩФЖК ГЦФХ Г6-ФДГ СДГ ЛДГ

1 37 27 23 28 28

I 3 23 2 - : 23; I 12 25

6 29 27 24 25

1 12 20 18 16 16

11 3 17 18 18 16 19

6 18 17 14 16 19

1 1 3 9 6 6

III 3 10 10 9 12 6

6 3 9 9 10 6

Примечание: количественное совпадение крыс в кластерах \ \ по горизонтали

Самая многочисленная группа крыс кластера I испытывала разнонаправленные изменения в печени по характеристике светооптической плотности Г6-ФДГ в хро-нодинамике наблюдения после воздействия ОУ, повышением - спустя один и три месяца и ее снижением через шесть (рис.1). В кластерах II и III наблюдалась аналогичная динамика, но с большей выраженностью спустя три месяца. К завершению эксперимента судьба Г6-ФДГ характеризовалась смещением ее показателей ниже контрольных значений (рис.1).

Светооптическая плотность СДГ в кластере I спустя один месяц была на уровне контроля, а через три и шесть - снижалась. Кластер 111 констатировал повышение активности во все сроки наблюдения, а в кластере II - было резкое повышение СДГ спустя один и три месяца и резкое снижение до показателей контроля, через шесть месяцев (рис. 1). Единообразие в реакции ЛДГ по всем трем кластерам проявлялось в ее повышении спустя один и три месяца, и спустя шесть - в кластере I. Кластеры II и III показали снижение светооптической плотности ЛДГ (рис. 1). Можно отметить, что аэробные и анаэробные процессы в реакциях на СДГ и ЛДГ в кластере I констатировали реверсивную направленность изменений спустя три и шесть месяцев повышением активности ЛДГ и снижением СДГ относительно контроля.

услид.

1000

0 ........................................,................................................................,.....................,..............-....................................................,.................................

136 136 136 мес -Контроль —*— IJ —a— hi кластеры

Рис. 1. Динамика изменений светооптической плотности дегидрогеназ в паренхиме ацинусов печени по результатам кластерного анализа.

Таким образом, были установлены закономерности нарушений модульности гистоэнзиматических характеристик ацинусов печени с разнонаправленным эффектом внутри кластеров и между ними в хронодинамике наблюдений.

В системе желчевыведения светооптическая плотность распределения ЩФЖК по результатам кластерного анализа показала равномерное ее снижение в кластере I синхронно возрастному контролю во все сроки наблюдения (рис.2). Кластеры II и особенно III спустя месяц превышали значения контроля, а через три месяца не отличались от него и к последующему сроку наблюдения сохранились для кластера II, а кластер III вновь констатировал повышение. Динамика изменений светооптической плотности ЩФХ в кластере I была ниже значений возрастного контроля. Кластеры II и III отличались повышением распределения ЩФХ и лишь кластер III был на уровне контроля спустя три месяца (рис. 2).

усл.ед

К.Iи | ро.и, —ш—I ......—II ——III 1.. i.it i t |ii.i

Рис. 2. Динамика изменений светооптической плотности ЩФ желчных канальцев и холангиол по результатам кластерного анализа.

Таким образом, светооптическая плотность распределения ЩФ желчных канальцев и холангиол испытывала снижение активности самого многочисленного кластера I. Динамика изменений в других кластерах имела разнонаправленный и об-

ратимый характер в зависимости от сроков наблюдения после однократного перо-рального введения водного раствора оксидов обедненного урана.

Анализ светооптической плотности Г6-ФДГ в зонах ацинуса показал изменение ее динамики после ОУ. Однако, наблюдалась однонаправленная закономерность реакций в повышении ее активности спустя один и три месяца центральной и промежуточной зон (рис.3). Нормализация распределения Г6-ФДГ отмечалась спустя три месяца в перивенулярной зоне и ее понижение спустя один и шесть месяцев (рис.3).

■контроль

- I > I 11.1 I

Рис. 3. Динамика изменений светооптической плотности Г6-ФДГ в ацинусах печени по зонам.

Условные обозначения: Ц - центральная зона, ПР - промежуточная зона, ПВ -перивенулярная зона.

Анализ светооптической плотности СДГ ацинусов печени в хронодинамике эксперимента показал ее снижение и топографическая направленность соответствовала возрастному контролю (р<0,05), с максимальной выраженностью в перивенулярной зоне, а спустя три месяца совпадала с контролем (рис. 4).

МН1 500 400 ЗОО 200 100

| ПР | ПВ

■к-онтрлль

—--<>111-11

Рис. 4. Динамика изменений светооптической плотности СДГ в ацинусе печени по зонам.

Условные обозначения: Ц - центральная зона, ПР - промежуточная зона, ПВ -перивенулярная зона.

Светооптическая плотность ЛДГ также снижалась спустя месяц, исключая перивенулярную зону, где показатели соответствовали контрольным, а в последующие сроки ее активность была повышенной (р<0,05) и с меньшей выраженностью распределения в центральной зоне (рис. 5).

350 300 2Я0 100 150 100 50

Ц | ПР | пв 1 мес

ПР пв

3 мес

ПР ПВ

€ мес

мвы ацпнуса

(роль ---опыт

Рис. 5. Динамика изменений светооптической плотности ЛДГ в ацинусе печени по зонам.

Условные обозначения: Ц - центральная зона, Г1Р - промежуточная зона, ПВ -перивенулярная зона.

Резюмируя полученные данные, можно отметить продолжительный в хронодинамике наблюдения дисбаланс светооптической плотности распределения дегидрогеназ зон ацинусов после однократного перорального введения оксидов ОУ, несмотря на признаки устойчивости паренхимы ПВ зоны спустя один месяц по реакции ЛДГ и через три месяца - по реакциям Г6-ФДГ и СДГ.

При исследовании возрастного контроля на уровне ЖК, образованных билиар-ным полюсом гепатоцитов. было обнаружено снижение светооптической плотности ЩФ по убывающей функции (Р<0,05) (рис. 6). Причем, при качественном анализе четко определяемый рисунок канальцев, вдающийся в окружающие гепатоциты, был больше выражен по направлению к центральной зоне ацинуса.

600 ,..........................................................................................................-................................................................................................................................................................

3 мес ] 6 мес

ЖЧ' ЧЧНЬИ »1.1 И:111>1(1»1

-контроль

1 мес | 3 мес Ь мес

Хол-лнгоолхь! — — - опыт

Рис. 6. Динамика изменений светооптической плотности ЩФ желчных канальцев и холангиол.

Экспериментальная динамика исследований показала снижение светооптической плотности ЩФЖК (р<0,05) спустя один и шесть месяцев и повышение через три месяца после наблюдения, относительно соответствующего контроля (рис. 6). Холангиолы, образующие начало желчных ходов, незначительно повышали активность ЩФ по показателям ее светооптической плотности в контроле с прямой зависимостью от сроков наблюдения (рис. 6).

В хронодинамике эксперимента ЩФХ возрастала через один и шесть месяцев (р<0,05), и снижалась через три месяца (р<0,05), причем, изменения показателей оптической плотности ЩФ определялись протяженностью холангиол на срезах по числу их образований. Это можно объяснить образованием ложных желчных ходов (ЛЖХ), на фоне снижения ЩФЖК, видимо индуцирующей увеличение транспортной поверхности холангиол спустя один и шесть месяцев. Количественный и качественный анализ желчевыводящих структур перипортального пространства показал пролонгированный характер изменений.

Таким образом, разнонаправленные биоэффекты обедненного урана в хронодинамике наблюдения после его воздействия позволяют отметить морфофункциональ-ные изменения желчевыводящих структур перипортального пространства с образованием ложных желчных ходов но светооптической характеристике распределения ЩФ.

Представленная модель обусловленного риска поражения ацинусов печени (рис.7) позволила определить его высокую степень за счет образования ложных желчных ходов, изменяющих протяженность холангиол с усилением эффекта до 100

% спустя шесть месяцев, и желчных канальцев с показателями выше 60 % (рис.7).

1«« 90

Жслшш капальцы Холапгполы

вЩФ контроль : 11 ('I' iriri.It

Рис. 7. Модель обусловленного риска поражения по показателям светооптической плотности ЩФ желчевыводящих структур перипортального пространства долек печени.

Таким образом, изменение светооптической плотности щелочной фосфатазы определило динамику событий повышающих риск поражения печени после однократного перорального введения оксидов обедненного урана.

Анализируя морфологические особенности хромосомного аппарата ядер гепа-тоцитов долек печени контрольных крыс необходимо отметить, что большинство ядер гепатоцитов были синие - ЭХ, лишь отдельные из них красные - ГХ. В дву-ядерных гепатоцитах, как правило, ядра окрашены неодинаково, также были обнаружены ядра полихроматичные (ПХ) - содержащие ЭХ и ГХ одновременно. Возрастной контроль не показал достоверных различий в соотношении морфофункцио-нальных типов ядер, а зональный контроль показал достоверное возрастание числа ЭХ ядер от 70 до 75% от центральной к перивенулярной зоне за счет снижения ГХ в пределах 5 % (рис.8).

| ! | | | I | К 1мес Змес!6мес| К 11мес 13 мес 16 мес

центральная ищи промежтточная юна пернвенулярная пят

Эухромтпн ■ Гстерохроматпн ^Эу+Гетерохроматпн

Рис. 8. Соотношение ядер гепатоцитов в зонах ацинуса.

Условные обозначения: * - р<0,05 по отношению к центральной зоне ацинуса в контроле, * - р<0,05 по отношению к контролю соответствующей зоны.

Хронодинамика наблюдения в эксперименте показала снижение числа ядер гепатоцитов содержащих ЭХ (р<0,05) по отношению к контрольным показателям с обратной зависимостью (рис. 8). Зональная характеристика показывала снижение содержания ЭХ ядер (р<0,05) и возрастание ГХ и ПХ ядер (р<0,05) в хронодинамике наблюдения (рис. 8).

Таким образом, характеристика гепатоцитов по ядерному тесту на основе соотношения функциональных форм хроматина показала изменение их перераспределения во всех зонах ацинуса, с повышением ГХ и ПХ ядер, предполагающих снижение активности гепатоцитов.

100%

90%

70% 60% 50% 40% 30% 20% 1»% 0%

# л

>г7 ---------

шЛ.. - в И

т ---- „ # -----------------------—...... ____ л

■

..................... ..........

аос.ет 90 80 70

ло 50 40 30 20 10 о

Контроль

ишяндгтк гэ п тк I—1вктк — очтк Рис. 9. Динамика тучных клеток после однократного перорального введения водного раствора оксидов обедненного урана.

Условные обозначения: * - р<0,05 по отношению к I месяцу, * - р<0,05 по отношению к контролю; ОЧТК - общее число тучных клеток; НДГТК - недегранулиро-ванные тучные клетки; ДГТК - дегранулированные тучные клетки; ВКТК - вакуо-лизированные тучные клетки.

Анализируя состояние стромы портальной зоны у контрольных крыс, было отмечено, что ТК окружали сосуды, желчные протоки, располагались диффузно и, изредка, вдоль пограничной пластинки гепатоцитов. Абсолютные показатели их общего числа и процентное содержание дегранулированных ТК возрастали с прямой зависимостью от наблюдаемых сроков. Обратную зависимость испытывали неде-гранулированные ТК спустя три и шесть месяцев (р<0,05), а вакуолизированные ТК через шесть (р<0,05) (рис. 9). В эксперименте ОЧТК увеличивалось (р<0,05). Перераспределение морфофункциональных типов ТК имело однонаправленный характер независимо от динамики наблюдаемых сроков и характеризовалось возрастанием вакуолизированных ТК за счет снижения недегранулированных (рис. 9).

Резюмируя полученные данные, необходимо отметить участие портальных тучных клеток в модификации биоэффектов обедненного урана, как изменением их общего числа, так и характера высвобождаемых биологически активных веществ путем лизиса гранул вакуолизированными ТК. Причем, наблюдалась миграция тучных клеток, и транслокация волокнистого компонента из портального пространства в паренхиму печени. Наблюдалась инфильтрация портальных зон и очаговая активизация макрофагально-лимфоцитарной системы.

Можно заключить, что реакция стромальных компонентов гомеостатической и детоксикационной систем при нарушении метаболических процессов паренхимы констатирует приспособительный механизм на эффекты обедненного урана.

Таким образом, выявленные морфологические изменения тканей печени крыс после однократного перорального введения водного раствора оксидов обедненного урана лежат в основе нарушений функций и развития риска поражаемости. По мощности ферментативных систем и детоксикации печень является вторым крупным барьером на пути чужеродных и токсических веществ из просвета кишки во внутреннюю среду организма. Клиницисты-гепатологи уже давно убедились в том, что симптоматика заболевания проявляется через определенный период времени от момента начала патологического процесса в его морфологическом оформлении. В связи с этим не клинические, а морфологические изменения должны быть диагностическим критерием начальных стадий развития патологических процессов (Мишнев О.Д., 2003; Герок В., 2009). Резервные возможности печени служат причиной того, что повреждение даже большей массы гепатоцитов может не проявиться клинически и биохимически, а возникает тогда, когда суммарный объем пораженных клеток достигнет определенной критической массы. Результаты гистологического исследования оказываются более объективными, независимыми и расширяют диагностические возможности клиницистов. Анализируя морфологические признаки начального периода поражения печени, можно предположить, что механизм действия урана является результатом сложного переплетения функциональных и структурных нарушений, возникающих в результате прямого или опосредованного воздействия фактора, или продукта их взаимодействия. Крайне затруднительным является однозначно оценить морфофункциональное состояние печени при токсических поражениях, ввиду чего используются информационные характеристики зон ацину-сов (Мишнев О.Д., Щеголев А.И., 2001; Мишнев О.Д., 2003; Щеголев А.И., 2006). Их динамическая гетерогенность изменений была подтверждена в данном исследовании по состоянию хромосомного аппарата, отражающего содержание генетических потенций, которые проявлялись в преимущественном поражении центральной

зоны, непосредственно связанной с системой притока крови, возрастанием числа ге-терохроматичных ядер гепатоцитов, предполагающих развитие апоптотического процесса. Именно степень конденсации хроматина дает возможность адекватно судить о клеточной активности гепатоцитов, и модифицированная Янковским А.Н. методика полихроматофильной окраски ядер позволила идентифицировать их по наличию эухроматина или гетерохроматина, на основе использования красителей, имеющих разную молекулярную массу. Различие размеров молекул определило их способность диффундировать в неодинаковые по плотности структуры ядра. Распределение плотно упакованного хроматина по краям ядра констатирует апоптоз, который проявляет себя, как правило, при незначительных повреждениях ткани печени, при более выраженных нарушениях в печени возникает некроз (Черния В.И., 2010). В условиях инкорпорации обедненного урана не обнаружено апоптотических телец, которые могут длительно сохранять жизнеспособность, однако ядра гепатоцитов с признаками апоптоза изредка обнаруживались вблизи возникающих инфильтратов. Можно было наблюдать некоторую дезинтеграцию клеток в области инфильтрации паренхимы преимущественно центральной зоны с просматривающимися в ней лейкоцитами. Для более доказательных выводов о повреждении печени был проведен гистоэнзиматический анализ по количественной оценке состояния паренхимы, позволяющий выявить с морфофункциональных позиций характер и степень ее поражения (Автандилов Г.Г., 2002; Панфилов С.А., Панфилова Е.В., 2003; Скляр Л.Ф., 2006; Герок В., Блюм Х.Е., 2009; Пасечник И.Н., Кутепов Д.Е., 2009; Черний В.И., 2010). В работе были установлены изменения активности ферментов с нарушением внутриацинарного градиента дегидрогеназ со смещением к центральной зоне, что не противоречит исследованиям Мишнева О.Д. (2003) по изучению печени при эндотоксинемии. При исследовании желчевыводящих структур перипо-ртального пространства по ферментативной активности ЩФ было обнаружено значительно большее число холангиол (р<0,05), констатирующих образование ложных желчных ходов, что видимо индуцировало фиброзирование паренхимы с последующим нарушением ее метаболизма, и такая трактовка совпадала с данными других исследований в работах Комаровой Д. В., Цинзерлинга В.А. (1999), Панфилова С.А., Панфиловой Е.В. (2003), Мишнева О.Д., Щсголева А.И. (2001). Именно эта ситуация предполагает возможность транслокации соединительной ткани по проложенному пути дополнительными желчевыводящими структурами с формированием ба-зальной мембраны, наличие которой характерно только для эпителия желчевыводя-щего участка - холангиолы, связанного с портальными протоками. В этой связи, обнаруженные признаки фиброзирования паренхимы подтверждены двумя методиками окраски по Маллорл и Ван-Гизону, однако не было обнаружено псевдодолек и деструкции портальных желчных протоков, несмотря на очаги инфильтрации. Таким образом, только некоторые морфологические признаки идентичны признакам, предполагающим развитие вторичного билиарного цирроза, представленного в диагностике заболеваний печени в книге Панфилова С. А. (2003). Взаимодействие стро-мы и паренхимы печени также подтверждалось динамическим изменением тучных клеток и лимфоцитарно-макрофагального компонента. В зависимости от воздействующих факторов может происходить дегрануляция или лизис гранул тучных клеток с высвобождением гепарина или гистамина (Бардыхчьяна Э.А., 1999; Должа-нов А.Я., 2003; Лукашин Б.П., 2007). В условиях эксперимента данной работы пре-

обладал лизис гранул с высвобождением вазоактивного вещества - гистамина, который определял динамику структур портальной зоны и паренхиматозных компонентов при миграции, вызывая повышенную сосудистую проницаемость. Особую чувствительность к токсинам проявляли макрофаги. В работах Бабаевой А.Г. (2009) показана морфогенетическая активность лимфоцитов при воздействии гепатотроп-ных ядов, где была отмечена их способность усиливать пролиферацию гепатоцитов и ретикулоэндотелиоцитов печени. Присутствующий радиационный эффект, имеющий митогенный характер, также может усиливать этот процесс (Гриневич Ю.А., Демина Э.А., 2006). Таким образом, макрофагально-лимфоцитарная система является непременным участником в управлении всеми процессами метаболизма и деток-сикации, что представляет перспективное направление в решении возможных проблем распознавания и выведения из организма избытка эндогенных веществ (Кели-на И.Ю., Безручко Н.В., 2006). Реакция стромы в данном исследовании проявляла активность как портальную, так и на уровне паренхимы. Именно в печени, являющейся главной частью ретикулоэндотелиальной системы, локализована значительная часть лимфоцитов, обеспечивающих иммунологическую толерантность к различным веществам (Dixon F.S., 2001; Скляр Л.Ф., 2006). Вполне оправданным явилось использование качественных и количественных характеристик на основе морфологической статистики, подчеркивающей сущность явлений при инкорпорации обедненного урана, что было показано при исследовании оптической плотности Г6-ФДГ, где нормализация ее по средним значениям в перивенулярной зоне не решила судьбу гомеостаза, на фоне мозаичности ее распределения и дисгармонии других гистоэнзиматических реакций. Проведенный корреляционный анализ является математическим обоснованием для предшествующих наблюдений за динамикой мор-фофункциональных характеристик структур ацинусов печени. Полученные при помощи анализа данные свидетельствуют о том, что общее число тучных клеток стромы и их морфофункциональные типы, определяющие местные регуляторные механизмы, коррелируют с изменением показателей характеризующих функциональность паренхимы на уровне общего статуса органа в условиях эксперимента. Комплексный подход с позиций выявления особенностей реагирования исследуемых критериев позволил обобщить биоэффекты инкорпорированного обедненного урана на морфофункциональное состояние печени, определив исход отдаленных последствий.

ВЫВОДЫ

1. Проведение кластерного анализа по светооптической плотности распределения ферментов на основе их средних значений позволило обнаружить дисбаланс и несогласованность процессов функционирования по количественному представлению животных, несмотря на стремление к единообразию некоторых гистоэнзиматических критериев в самом многочисленном кластере I: СДГ и ЛДГ у 28 крыс спустя один месяц; ¿ЦФЖК и Г6-ФДГ у 23, а также ЩФХ и СДГ у 22 - спустя три месяца и через шесть месяцев после однократного воздействия обедненного урана у 24 крыс.

сяцев и соответствием контрольному уровню спустя три месяца; снижением СДГ спустя один и шесть месяцев и приближением к значениям контроля в перивенуляр-ной зоне спустя три месяца; снижением ЛДГ спустя один месяц и повышением через три и шесть месяцев по всем зонам.

3. Анализ паренхимы по ядерному тесту констатировал перестройку ядер гепа-тоцитов преобладанием в них гетерохроматина и определил максимально обусловленный риск поражения спустя три месяца после однократного применения обедненного урана.

4. Изменения светооптической плотности ЩФЖК и ЩФХ перипортального пространства ацинусов печени в модели эксперимента показали зеркальное отражение динамики возрастного контроля: снижением активности ЩФЖК спустя один и шесть месяцев (р<0,05) и незначительным повышением через три месяца; ЩФХ наоборот, повышением активности спустя один и шесть и ее снижением (р<0,05) спустя три месяца постуранового периода наблюдения.

5. Динамика стромального компонента ацинусов характеризовалась признаками фиброзирования паренхимы, перераспределением морфофункциональных типов тучных клеток с возрастанием их общего числа, очаговой активизацией макрофагов, возникновением инфильтратов в портальных зонах и паренхиме ацинусов, констатируя стабильный эффект однократного воздействия обедненного урана в условиях эксперимента.

6. Качественные и количественные методы оценки исследуемых критериев с разнообразием подходов после однократного перорального введения водного раствора оксидов обедненного урана предполагают кумулятивный радиотоксический характер поражения пролонгированностью изменений структурно-функциональных долек - ацинусов и определяют морфофункциональное состояние печени как необратимое.

Практические рекомендации

1. Полученные данные могут быть рекомендованы для разработки системы мероприятий по обеспечению безопасности при ликвидации последствий уранового загрязнения в экстремальных ситуациях и разработке программы комплексных мероприятий по профилактике поражаемости.

2. Представленные подходы в изучении биоэффектов обедненного урана могут быть рекомендованы при проведении морфологических, цитологических, гистохимических и других исследований с позиций диагностической значимости.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1.Набродов Г.М. Гистохимические исследования эффектов обедненного урана на некоторые органы крыс в аспекте причинных поведенческих реакций / Г.М. Набродов [и др.] // Вестник новых медицинских технологий. Периодический теоретический и научно-практический журнал. - Тула: ТулГу, 2009. - Т. XVI, № 1.-С. 244-246.

2.Набродов Г.М. Причинные взаимодействия в эффектах обедненного урана / З.А. Воронцова, Г.М. Набродов // Развитие производственной и экологической безопасности в XXI веке. Проблемы и решения. «Белые ночи - 2009» : материалы меж-

дунар. научно-практической конференции. - СПб.-Владикавказ, 2009. - Т. 14, №5. -С. 193-195.

3.Набродов Г.М. Исследование фосфатазной активности органов пищеварительной системы при воздействии обедненного урана в аспекте причинных поведенческих реакций / З.А. Воронцова, Е.Е. Проскурякова, Г.М. Набродов // Актуальные вопросы теоретической, экспериментальной и клинической морфологии : сб. науч. тр., посвящ. 65-летию ивановской школы лимфологов. - Иваново, 2009. - С. 72-75.

4.Набродов Г.М. Качественная оценка эффектов обедненного урана на фосфа-тазную активность печени / З.А. Воронцова, В.И. Болотских, Г.М. Набродов // Од-нораловские морфологические чтения : сб. науч. тр. - Воронеж, 2009. - Вып. 8. - С. 257-258.

5.Набродов Г.М. Биотропное воздействие обедненного урана на органы пищеварительной системы / З.А. Воронцова, Е.Е. Проскурякова, Г.М. Набродов // «Здоровье и образование в XXI веке» «Инновационные технологии в биологии и медицине» : сб. науч. тр. X международного конгресса. - М.: РУДН, 2009. - С. 432-434.

6. Набродов Г.М. Гистохимическое исследование активности щелочной фосфа-тазы некоторых органов крыс при воздействии обедненного урана / Г.М. Набродов [и др.] // Актуальные проблемы и опыт практической работы в военно-лечебных учреждениях : сб. науч. тр. научно-практической конференции врачей, посвященной 60-летию 878 ОВГ КСпН. - Солнечногорск, 2009. - С. 114-117.

7. Набродов Г.М. Биоэффекты отдаленных последствий обедненного урана в эксперименте / З.А. Воронцова, Г.М. Набродов, Е.Е. Проскурякова // «Экологические проблемы XXI века» : монография. - Польша, Варшава, 2010. - С. 261-266.

8. Набродов Г.М. Сравнительная характеристика отделов пищеварительной системы при инкорпорации обедненного урана / Г.М. Набродов [и др.] // Вестник новых медицинских технологий. Периодический теоретический и научно-практический журнал. - Тула: ТулГу, 2010. - Т. XVII, №2. - С. 50-52.

9. Набродов Г.М. Морфофункциональные аспекты количественной оценки эффектов обедненного урана на интестинальную систему и гепатолиенальную системы / Е.Е. Проскурякова, Г.М. Набродов, З.А. Воронцова // «Новые информационные технологии в медицине, биологии, фармакологии и экологии» : труды XVIII международной конференции. - Украина, 2010. - Т. II. - С. 85-86.

10. Набродов Г.М. Реакция органов-мишеней на пероралыюе воздействие обедненного урана / Е.Е. Проскурякова, Г.М. Набродов, З.А. Воронцова // Журнал «Морфология». - СПб, 2010. - Т. 137, № 4. - С. 157-158.

11. Набродов Г.М. Радиотоксический биоэффект обедненного урана в мор-фофункционалыюй характеристике печени / Г.М. Набродов, З.А. Воронцова // Вестник новых медицинских технологий. Периодический теоретический и научно-практический журнал. - Тула: ТулГу, 2011. - Т. XVIII, №2. - С. 71-73.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ГХ - гетерохроматин;

Г6-ФДГ - глюкоза 6- фосфатдегидрогеназа;

ДГТК - дегранулированные тучные клетки;

КФ - кислая фосфатаза;

ЛДГ - лактатдегидрогеназа;

ВКТК - вакуолизированные тучные клетки;

НДГТК - недегранулированные тучные клетки;

ОУ - обедненный уран;

ОР - обусловленный риск;

ОЧТК - общее число тучных клеток;

ПВ - перивенулярная зона ацинуса печени;

ПР - промежуточная зона ацинуса печени;

СДГ - сукцинатдегидрогеназа;

ТК - тучная клетка;

Ц - центральная зона ацинуса печени;

ЩФХ - щелочная фосфатаза холангиол;

ЩФЖК - щелочная фосфатаза желчных канальцев;

ЭХ - эухроматин;

ЭХ+ГХ - эухроматин+гетерохроматин;

Подписано в печать 10.05.11. Формат 60><84 1/16. Усл. печ. л. 1. Тираж 120 экз. Заказ 638.

Отпечатано с готового оригинал-макета в типографии Издагельско-полнграфического центра Воронежского государственного университета. 394000, Воронеж, ул. Пушкинская, 3

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Набродов, Георгий Михайлович

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Предпосылки к исследованию биологических эффектов обедненного урана на организм. 1.2. Информационная характеристика морфологических исследований печени при воздействии урановых соединений.

1.3. Морфофункциональная характеристика печени.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Модель эксперимента.

2.2. Материалы исследования.

2.3. Методы гистологической и морфометрической обработки.

-2.4. Методы компьютерной и статистической обработки.

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Характеристика морфофункциональных особенностей ацинуса печени контрольных крыс в хронодинамике эксперимента.

3.2. Морфофункциональная характеристика структурных образований ацинуса печени по показателям гистоэнзиматических реакций на основе кластерного анализа после однократного перо-рального введения водного раствора оксидов обедненного урана.

3.3. Характеристика морфофункциональных особенностей зон аци-нусов печени по результатам гистоэнзиматических реакий после однократного перорального введения водного раствора оксидов обедненного урана.

3.4. Характеристика системы желчевыведения перипортального пространства ацинусов печени по результатам гистоэнзиматических исследований после однократного перорального введения водного раствора оксидов обедненного урана.

3.5. Ядерный тест в оценке морфофункционального состояния паренхимы печени после однократного перорального введения водного раствора оксидов обедненного урана.

3.6. Качественная и количественная характеристика стромы ацинуса печени после однократного перорального введения водного раствора оксидов обедненного урана.

3.7. Диагностическое значение исследуемых морфологических и гистоэнзиматических критериев печени в эксперименте и корреляционный анализ между ними.

Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ.

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему ""Морфофункциональная характеристика печени в условиях отдаленных последствий однократного перорального введения обедненного урана""

Актуальность исследования. Во всех объектах биосферы: почве, воде, воздухе, минералах, живых организмах содержатся в естественной форме природные радионуклиды. Одним из трех существующих в природе радионуклидов и представляющих подавляющую часть, является уран 238 (99,3%). Обеднённый уран состоит почти полностью из U238 и его радиоактивность составляет около 60 % от радиоактивности природного урана. Причинная значимость эффектов облучения обеднённого урана не установлена, но сказывается на состоянии здоровья людей, проживающих в зонах вооружённого конфликта, попадая в организм вместе с водой в виде оксида, образующегося при взрывах снарядов. С этих позиций, он может представлять серьезную опасность при производстве и испытании ядерного оружия, авариях на атомных электростанциях в результате его расщепления (Головко А.И., 2000; Белоус Д.А., 2004; Гребенюк А.Н., 2009). Обеднённый уран может вызвать как функциональные, так и органические изменения при попадании в организм. Острая урановая интоксикация характеризуется политропным действием на различные системы и механизм действия его соединений весьма разнообразен (Кулиева Г.А., 2004; Грачев H.H., Мырова JI.O., 2005; Логановский К.Н., 2008).

В связи с выделением из окружающей среды большого количества токсических веществ, интерес к фактору интоксикации резко возрос. Проблема токсических поражений, возникающих как реактивный ответ на воздействие факторов его вызывающих, их причинность рассматривается как сложный многофакторный патологический процесс, ведущей ролью которого является эндогенная интоксикация, обусловленная метаболическими нарушениями. Печень как центральный орган метаболизма объединяет весь организм. По мощности ферментативных систем детоксикации, печень является крупным барьером на пути чужеродных и токсических веществ из просвета кишки во внутреннюю среду организма (Комарова Д.В., Цинзерлинг В.А., 1999; Зайчик А.Ш., Чурилов Л.П., 2005; Ивашкин В.Т., Маевская М.В., 2007). Ацинус печени, представляющий топографическую характеристику трех зон по мере уменьшения в них градиента кислорода и концентрации метаболитов, поможет выявить степень и причину поражаемости на основе комплексного морфофункционального анализа структурно-метаболических изменений гепатоцитов с учетом их внутриацинарной локализации (Комарова Д.В., Цинзерлинг В.А., 1999; Мишнев О.Д., Щеголев А.И., 2001; Мишнев О.Д., 2003; Панфилов С.А., Панфилова Е.В., 2003). На фоне эндогенной интоксикации нарушается иммунологическая резистентность организма, активируются процессы свободнорадикального окисления липидов, угнетается активность антиоксидантной системы (Мишнев О.Д., 2003; Скляр Л.Ф., 2006; Щеголев А.И., 2006; Герок В., Блюм Х.Е., 2009; Черний В.И., 2010).

Исследования на животных, и особенно на крысах, являются основой и необходимым звеном для установления токсичности, а комплексное морфологическое исследование с применением математических методов анализа и моделирования изменений позволит выявить весь объем эффектов, нарушающих физиологические механизмы (Платонов А.Е., 2000; Автанди-лов Г.Г., 2002; Кулаичев А.П., 2006; Герасимов А.Н., 2007; Гринхальх Т., 2008; Хадарцев A.A., 2008; Хай Г.А., 2009).

Цель исследования.

Задачи исследования:

1. Создать информационный алгоритм по морфометрическим исследованиям гистохимических реакций ацинусов печени с особенностями по зонам и проанализировать динамические изменения с использованием кластерного анализа в хронодинамике последствий однократного перорально-го введения водного раствора оксидов обедненного урана.

2. Выявить морфологические изменения, определяющие функциональность гепатоцитов зон ацинуса печени по ядерному тесту после перо-рального введения водного раствора обедненного урана в отдаленные сроки наблюдения.

3. Проанализировать морфофункциональные особенности изменений желчных канальцев и холангиол системы желчевыведения, а также стро-мального компонента по качественным и количественным характеристикам в хронодинамике экспериментальной модели.

Научная новизна исследования.

Продемонстрирован пролонгированный процесс морфоэнзиматиче-ских изменений ацинусов печени в хронодинамике наблюдений, констатирующий радиотоксический характер одноразового перорального применения водного раствора оксидов обедненного урана.

Впервые определен обусловленный риск поражения печени при воздействии обедненного урана по ядерному тесту и структурным характеристикам желчевыводящей системы.

Спектр общегистологических, гистохимических, специальных, гисто-фотометрических и дополнительных методов математической статистики во многом определяют тактику и алгоритм дальнейших диагностических исследований.

Внедрение в практику: результаты диссертационного исследования внедрены в учебный процесс кафедры гигиены, кафедры мобилизационной подготовки здравоохранения и медицины катастроф ВГМА им. H.H. Бурденко, а также кафедры анатомии, гистологии и общей биологии ВГАУ им. К!Д. Глинки. Выявленные закономерности обусловленного риска поражения по ядерному тесту внедрены в патологоанатомическое отделение МУЗ «Дорожная клиническая больница на ст. Воронеж-1 ОАО «РЖД».

Публикации и апробация результатов диссертации.

Основные результаты диссертации докладывались на Международной научно-практической конференции «Развитие производственной и экологической безопасности в XXI веке. Проблемы и решения» (Санкт-Петербург - Владикавказ, июнь 2009 г.); научной конференции «Актуальные вопросы теоретической, экспериментальной и клинической морфологии» (Иваново, май 2009 г.); V съезде радиобиологического общества Украины (Ужгород, сентябрь 2009 г.); отчетной конференции в ГосНИИИ военной медицины Минобороны России «Радиационные факторы и защита» (Москва, февраль 2009 г.); X международном конгрессе «Здоровье и образование в XXI веке» «Инновационные технологии в биологии и медицине» (Москва, декабрь 2009 г.); ХУНТ Международной конференции «Новые информационные технологии в медицине, биологии, фармакологии и экологии» (Украина, июнь 2010 г.); межкафедральной научной конференции кафедр гистологии, нормальной анатомии человека, общей гигиены, патологической физиологии, оперативной хирургии с топографической анатомией Воронежской государственной медицинской академии им. H.H. Бурденко; радиологического отдела ГосНИИИ военной медицины Минобороны России (Воронеж, ноябрь 2010).

Результаты исследования отражены в 11 научных публикациях, 4 из которых - в изданиях, рекомендованных ВАК для опубликования материалов диссертации.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

1. Морфофункциональное состояние печени после однократного пе-рорального введения обедненного урана определяется динамичностью изменений гистоэнзиматических реакций паренхимы ацинусов и отдаленностью сроков наблюдения в эксперименте.

2. Исследования по ядерному тесту определят функциональность ге-патоцитов в ацинусах и по зонально-топографическим особенностям их распределения сформирует представление о характере и риске поражения после однократного перорального применения обедненного урана в эксперименте.

Объем и структура диссертации. Материал диссертации изложен на 120 страницах машинописного текста, и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, обсуждения полученных данных, выводов и списка литературных источников. Иллюстративный материал содержит 54 микрофотографий, 5 таблиц, 18 рисунков. Библиографический указатель содержит 205 источников, в том числе 151 из российской и 54 зарубежной литературы.

Заключение Диссертация по теме "Клеточная биология, цитология, гистология", Набродов, Георгий Михайлович

ВЫВОДЫ

1. Проведение кластерного анализа по светооптической плотности распределения ферментов на основе их средних значений позволило обнаружить дисбаланс и несогласованность процессов функционирования по количественному представлению животных, несмотря на стремление к единообразию некоторых гистоэнзиматических критериев в самом многочисленном кластере I: СДГ и ЛДГ у 28 крыс спустя один месяц; ЩФЖК и Г6-ФДГ у 23, а также ЩФХ и СДГ у 22 - спустя три месяца и через шесть месяцев после однократного воздействия обедненного урана у 24 крыс.

2. Однократное воздействие обедненного урана вызывало нарушение зональной гетерогенности распределения энзимов паренхимы ацинусов печени в динамике сроков наблюдения: повышением Г6-ФДГ в центральной и промежуточной зонах дольки, снижением ее активности в перивенуляр-ной зоне спустя один и шесть месяцев и соответствием контрольному уровню спустя три месяца; снижением СДГ спустя один и шесть месяцев и приближением к значениям контроля в перивенулярной зоне спустя три месяца; снижением ЛДГ спустя один месяц и повышением через три и шесть месяцев по всем зонам. 1

3. Анализ паренхимы по ядерному тесту констатировал перестройку ядер гепатоцитов преобладанием в них гетерохроматина и определил максимально обусловленный риск поражения спустя три месяца после однократного применения обедненного урана.

4. Изменения светооптической плотности ЩФЖК и ЩФХ перипор-тального пространства ацинусов печени в модели эксперимента показали зеркальное отражение динамики возрастного контроля: снижением активности ЩФЖК спустя один и шесть месяцев (р<0,05) и незначительным повышением через три месяца; ЩФХ наоборот, повышением активности спустя один и шесть и ее снижением (р<0,05) спустя три месяца постуранового периода наблюдения.

5. Динамика стромального компонента ацинусов характеризовалась признаками фиброзирования паренхимы, перераспределением морфофунк-циональных типов тучных клеток с возрастанием их общего числа, очаговой активизацией макрофагов, возникновением инфильтратов в портальных зонах и паренхиме ацинусов, констатируя стабильный эффект однократного воздействия обедненного урана в условиях эксперимента.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Набродов, Георгий Михайлович, Волгоград

1. Автандилов Г.Г. Компьютерная микрофотометрия в диагностической гистоцитопатологии / Г.Г. Автандилов. - М.: РМАПО, 1996.-265 с.

2. Автандилов Г.Г. Основы количественной патологической анатомии: учебное пособие / Г.Г. Автандилов. М.: Медицина, 2002. - 240 с.

3. Автандилов Г.Г. Системный подход в проведении морфометрических исследований / Г.Г. Автандилов. М., 1996. - 163 с.

4. Алексахин P.M. 55-я сессия Научного комитета ООН по действию атомной радиации / Алексахин P.M. // Радиационная биология. Радиоэкология. 2008. - Т. 48, № 2. - С. 234-250.

5. Анатомия крысы (Лабораторные животные) / под ред. академика А.Д. Ноздрачева. СПб.: Лань, 2001. - 464 с.

6. Андреева О.С. Некоторые вопросы безопасности при работе с металлическим ураном / О.С. Андреева // Сб. рефератов по радиац. медицине за 1958 год. М., 1959.- С. 115.

7. Андрейченко C.B., Общая характеристика ультраструктурныхизменений гепатоцитов печени рыб из водоема-охладителя Чернобыльской

8. Банержи А. Медицинская статистика понятным языком / пер. с англ. Под ред. В.П. Леонова. М.: Практическая медицина, 2007. - 287 с.

9. Барышников А.Ю. Иммунологические проблемы апоптоза / А.Ю. Барышников, Ю.В. Шишкин. М.: Эдиториал УРСС, 2002. - 320 с.

10. Белоус Д.А. Радиация, биосфера, технология / Д.А. Белоус. — СПб.: Издательство ДЕАН, 2004. 448 с.

11. Белоцкий С.М. Воспаление. Мобилизация клеток и клинические эффекты / С.М. Белоцкий, Р.Р. Авталион. М.: БИНОМ, 2008. -240 с.

12. Бородюк Н.Р. Адаптация и гуморальная регуляция / Н.Р. Бородюк. -М., 2003. 152 с.

13. Бруно Комби Защитники природы за атомную энергию. / Комби Бруно -Русский перевод с канадского издания «Environmentaist For Nuclear Energy» TNR Edition M 2009,400 с.i

14. Быков В.JI. Развитие и гетерогенность тучных клеток / В.Л. Быков И Морфология. 2000. -№ 3. - С. 86-92.

15. Валенкевич Л.Н. Клиническая гастроэнтерология / Л.Н. Валенкевич, О.И. Яхонтова. СПб.: Гиппократ, 2001. - 288 с.

16. Василенко И.Я. Хроническое радиационное поражение продуктами ядерного деления урана / И.Я. Василенко, О.И. Василенко // Радиационная биология. Радиоэкология, Т.- 46., №6. 2006. - С. 735-740.

17. Владимирская Е.Б. Апоптоз и его роль в регуляции клеточного равновесия / Е.В. Владимирская // Клиническая лабораторная диагностика.-2002. №11.- С. 25-32.

18. Галибин Г.П. Распределение урана в организме при однократном и хроническом поступлении окиси-закиси урана / Г.П. Галибин // Гигиена и санитария. 1974. - №6. - С. 37-40.

19. Герасимов А.Н. Медицинская статистика: учебное пособие /

20. A.Н. Герасимов. — М.: ООО Медицинское информационное агентство, 2007. 480 с.

21. Герок В. Заболевания печени и желчевыделительной системы / Вольфган Герок, Хуберт Е. Блюм; пер. с нем.; под общ. ред. акад. РАМН

22. B.Т.Ивашина, проф. A.A. Шептулина. М.: МЕДпресс-информ, 2009. - 200 с.

23. Гистология : в 5 т. / под ред. А. Хэма, Д. Кормака. М. : Мир, 1983.- Т. 2.-254 с.

24. Гистохимические исследования эффектов обедненного урана на некоторые органы крыс в аспекте причинных поведенческих реакций / З.А. Воронцова и др. // Вестник новых медицинских технологий. 2009. - Т. 16, №1.- С. 244-246.

25. Гладкова Е.В. Профессиональные заболевания / Е.В. Гладкова, Е.Б. Гурвич / под ред. Н.Ф. Измерова. М.: Медицина, 1996. - С.383-403.

26. Гланц С. Медико-биологическая статистика / С. Гланц. М.: Практика, 1999. - 500 с,

27. Грачев H.H. Защита человека от опасных излучений / H.H. Грачев, JLO. Мырова М.: БИНОМ. Лаборатория знаний, 2005. - 317 с.

28. Гребенюк А.Н. Задачи медицинской службы в области обеспечения токсико-радиологической безопасности военнослужащих / А.Н. Гребенюк, В.В. Бояринцев, Д.А. Сидоров // Военно-медицинский журнал. 2009. - Т. 330, №4. - С. 12-16.

29. Гриневич Ю.А. Иммунные и цитогенетические эффекты плотно- и редкоионизирующих излучений / Ю.А. Гриневич, Э.А. Демина // под.ред. A.A. Ярилина. К.: Здоровье, 2006. - 200 с.

30. Гринхальх Т. Основы доказательной медицины : пер. с англ. / под ред. И.Н. Денисова, К.И. Сайткулова. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. -288 с.

31. Громоковская Т.С. Тканевые базофилы и местные адаптационные реакции / Т.С. Громоковская // Морфогенез и регенерация: сб. тр., посвящ. 80-летию со дня рождения Д.А. Смалевича. Курск: КГМУ, 1999.-С. 108.

32. Гурьев Д.В. Особенности регенерации печени крыс Wistar при радиационном воздействии: Автореф.дис.канд.биол.наук/ Д.В. Гурьев-Москва, 2003 24 с.

33. Давыдов Б.И Авиакосмическая радиобиология: основные итоги, люди, события / Б.И Давыдов / под ред. И.Б. Ушакова. — М.; Воронеж : Истоки, 2007. —164 с.

34. Дамианов И. Секреты патологии / И. Дамианов. М.: МИА, 2006.-816с.

35. Действие обедненного урана на сельскохозяйственные культуры / A.A. Касьяненко и др. // Актуальные проблемы экологии и природоиспользования: сб. науч. тр. М.: Изд-во РУДН, 2004. - Вып. 6, 4.1.-С. 168-171.

36. Долгов В.В. Лабораторная диагностика нарушений гемостаза/

37. B.В. Долгов, П.В. Свирин, М-Тверь, Триада. - 2005. -227с.

38. Должанов А.Я. Мофофункциональные основы радиобиологии / А.Я. Должанов, З.А. Воронцова, Д.А. Атякшин // под.ред. Должанова А.Я. Воронеж, Истоки. - 2003. - 112 с.

39. Доунс А.Л. Действие урана на ферменты и белки / А.Л. Доунс, Тянь Хо Лань. // Фармакология и токсикология урановых соединений. -М., 1951.-С. 94-168.

40. Доунс А.Л. Химия урановых соединений / А.Л. Доунс, Дж.Ф. Фланг// Фармакология и токсикология урановых соединений. М., 1951.1. C. 7-58.

41. Жижин К.С. Медицинская статистика Учебное пособие / К.С. Жижин. Ростов н/Д: Феникс, 2007. - 160 с.

42. Зайцев В.М Прикладная медицинская статистика / В.М. Зайцев, ВТ. Лифляндский, В.И. Маринкин. СПб.; Фолиант, 2003. - 432 с.

43. Закутинский Д.И. Справочник по токсикологии радиоактивных изотопов / Д.И. Закутинский, Ю.Д. Парфенов, Л.Н. Селиванова. М., 1962. -116с.

44. Закутинский Д.И. Токсикология урановых соединений / Д.И. Закутинский, О.С. Андреева // Медицинская радиология. 1959. - Т.4, №4 -С. 81-85.

45. Иванов В.К. Медицинские радиологические последствия Чернобыля для населения России: оценка радиационных рисков / BJC. Иванов, А.Ф. Цыб. М.: Медицина, 2006. - 392 с,

46. Ивашкин В.Т. Алкогольно-вирусные заболевания печени/ В.Т. Ивашкин, М.В, Маевская. М.: Литтерра, 2007. - 160с.

47. Ильин Л.А. Радиационная гигиена / Л.А. Ильин, В.Ф. Кириллов, И.П. Коренков М.: Медицина, 1999. - 384 с.

48. Камышников B.C. Клинические лабораторные тесты от А до Я и их диагностические профили: Справ, пособие / B.C. Камышкиков. — М.; МЕДпрес-информ, 2007. 320с.

49. Касьяненко A.A. Экологические последствия применения обедненного урана в боезарядах / A.A. Касьяненко, Г.А. Кулиева // Вестник Российского университета дружбы народов. Серия: Экология и безопасность жизнедеятельности. М.: РУДН, 2002. - № 6. - С. 90-99.

50. Келина Н.Ю. Токсикология в таблицах и схемах / Н.Ю. Келина, Н.В. Безручко. Ростов н/Д: Феникс, 2006. - 144 с.

51. Кладиенко Д.П. К вопросу о биологической роли урана в организме млекопитающих животных / Д.П. Кладиенко // Бюллетень эксперим. биологии и медицины. 1959. - Т. 48, №11. - С. 73-75.

52. Клиническая гастроэнтерология / A.B. Никитин и др.. -Старый Оскол: ИПК Кириллица, 2007. 224 с.

53. Клиническая радиобиология / под ред. С.П. Ярмоненко, А.Г. Конопляникова, A.A. Вайсона. М. : Медицина, 1992. - 320 с.

54. Комарова Д.В. Морфологическая диагностика инфекционных поражений печени: Практическое руководство / Д.В. Комарова, В.А. Цинзерлинг. СПб.: Сотис, 1999. - 248с.

55. Компьютерные системы , гистологической диагностики / В.Н. Михайлов и др.. М.; МИФИ, 2002. - 108 с.

56. Коржевский Д.Э. Основы гистологической техники / Д.Э. Коржевский, A.B. Гиляров СПб.: СпецЛит, 2010. - 95 с.

57. Кристич Р.В. Иллюстрированная энциклопедия по гистологии человека / Р. В. Кристич. СПб.: СОТИС, 2001.-536 с.

58. Криштопенко C.B. Доза-эффект / C.B. Криштопенко, М.С. Тихов, Е.Б. Попова. М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2008. 288 с.

59. Кулаичев А:П. Методы и средства комплексного анализа данных. 4-е изд., перераб. и доп / АП Кулаичев. М.: ФОРУМ: ИНФРА-М, 2006.-512 с.

60. Кулиева Г.А. Транслокация урана-238 из почвы в растения (на примере ячменя): дис. канд. биол. наук / Г.А. Кулиева; РУДН. М., 2004.-112 с.

61. Куценко С. А. Проблемы медицинского обеспечения радиационной и химической безопасности Вооруженных Сил в современных условиях / С.А. Куценко, МЛ5. Мурин, А.Н. Гребенюк // Военно-медицинский журнал. 2001. - Т. 322, №L - С. 4-10.

62. Лебкова Н.П. Современные представления о внутриклеточных механизмах обеспечения энергетического гомеостаза в норме и при патологии / Н.П. Лебкова // Вестник РАМН. 2000. - №9. - С. 16-22

63. Логановский К.Н. Нейротоксичность урана и трансурановых элементов / К.Н. Логановский, С.Ю. Нечаев, И.В. Перчук Электронный ресурс. // Укр. Мед. Часопис, 2 (64) ШДV 2008. - (www.umj.com.ua) •

64. Логинов A.C., Е. Хронические гепатиты и циррозы печени / A.C. Логинов, Ю.Е. Блок,- М.: «Медицина», 1987.

65. Лукашин Б.П. Гепарин и радиорезистентность / Б.П. Лукашин. СПб,: ООО Изд-во ФОЛИАНТ, 2007. - 128 с.

66. Лукашин Б.П. Противолучевая эффективность- гепарина- в, сверхмалых дозах/ Б.П. Лукашин, В.Г. Улитин // 4 съезд по радиационным исследованиям : тезисы докл., Москва 20-24 нояб. 2001, М., 2001, - Т. 2. -С. 428.

67. Лушников Е.Ф. Гибель клеток (апоптоз) / Е.Ф. Лушников, А.Ю. Абросимов. М.: Медицина, 2001. - 192 с.

68. Люлина Н.В. Клинико-эпидемиологические особенности воздействия эколого-гигиенических факторов на опухолевые заболевания желудочно-кишечного тракта: Автореф. дис. канд. мед. наук / Н.В. Люлина; Новосиб. Мед. акад. Новосибирск, 2004. - 26 с.

69. Лысова Н.Л. Морфологическая характеристика ацинусов печени при системной эндотоксемии и эндотоксиновом шоке. Автореф.диссер. . канд.мед.наук. М., 2000.

70. Ляхович В.В. Фармакогенетика и современная медицина/ В.В. Ляхович, В.А. Вавилин, А.Ю. Гришанова // Вестник РАМН. 2004. - №10. -С. 40-45.

71. Майнард Е.А. Длительное кормление крыс урановыми соединениями / Е.А. Майнард, Х.С. Ходж В // Фармакология и токсикология урановых соединений. -1951. Т.2. — С.36-62.

72. Маянский Д.Н. Новые рубежи гепатологии / Д.Н. Маянский, Э. Виссе, К. Декер. Новосибирск. 1992

73. Медик В.А. Статистика в медицине и биологии. Прикладная статистика здоровья / В.А. Медик, М.С. Токмачев, Б.Б. Фишман. М.: Медицина, 2000. -Т. 2. - 352 с.

74. Медик В.А. Статистика в медицине и биологии. Теоретическая статистика / В.А. Медик, М.С. Токмачев, Б.Б. Фишман. М.: Медицина, 2000.-Т. 1.-412 с.

75. Международные термины по цитологии и гистологии человека с официальным списком русских эквивалентов / под ред. В.В. Банина, В.Л. Быкова. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. - 272 с.

76. Митрофанова Е.Э. Исследование гетерогенного распределения цитохромов Р4501А1 и Р45011В1 (+В2) в дольке печени крыс: автореф.дис.канд.биол.наук/Е.Э. Митрофанова. — Новосибирск, 1990 — 24 с.

77. Мишнев О.Д. Печень при эндотоксикозах / О.Д. Мишнев, А.И. Щегол ев. М.: Издательство РАМН, 2001. - 236 с.

78. Мишнев О.Д. Печень и почки при эндотоксинемии / О.Д. Мишнев, А.И. Щеголев, Лысова Н.Л., Тинькова И.О. М.: Издательство «Виртуальная хирургия», Издательство РГМУ, 2003. - 212 с.

79. Мордашева В. В. Длительность поступления урана и его распределение в органах и тканях человека/ В. В. Мордашева // Медицинская радиология и радиационная безопасность: Двухмесячный научный журнал. -М.: РАДЭКОН, 2004. -Том49, N2. 5-12 с.

80. Мордберг Е.Л. Переход изотопов уран-радиевого ряда в зерно некоторых сельскохозяйственных культур / Е.Л. Мордберг, В.М. Александрук // Гигиена и санитария. 1976. - № 2. — С. 58-61.

81. Москалев Ю.И. Радиобиология инкорпорированных радионуклидов / Ю.И. Москалев. — М.: Энергоатомиздат, 1989. — 264 с.

82. Некоторые показатели здоровья персонала, контактирующего с высокообогащенным ураном / М.В. Сумина и др. // Медицина труда и промышленная экология. — 2005. — №11. — С. 24-30.

83. Непомнящих Д.Л. Биопсия печени: Патоморфогенез хронического гепатита и цирроза/ Д.Л. Непомнящих, C.B. Айдагулова, Г.И. Непомнящих. М.: РАМН, 2006. - 368с.

84. Новиков Ю.В. Гигиенические исследования по изучению влияния малых концентраций урана на организм человека / Ю.В. Новиков, H.H. Пушкина, A.M. Тамбовцева // Гигиена и санитария. 1968. - №6. - С. 39-44.

85. Новиков Ю.В. Исследование влияния малых концентраций природного урана питьевой воды на организм в опытах на животных / Ю.В. Новиков, М.В. Малышева // Сб. науч.-практ. работ. 1969. — Вып. 2. - С. 182-205

86. Новиков Ю.В. Исследование содержания урана в различных органах и биоматериалах человека / Ю.В. Новиков, Л.Н. Абрамова // Гигиена и санитария. 1969. — №9. — С. 71-74.

87. Новиков Ю.В. К вопросу о содержании урана в питьевой воде грунтового происхождения и выделении его с мочой и калом / Ю.В. Новиков, ИИ. Резанов // Гигиена и санитария. — 1962. №10. - С. 103-105.

88. О влиянии радиационно-химических и ядерно-химических реакций на окружающую среду / В.М. Федосеев и др. // Вестник Московского университета. Серия 2: Химия. 2001. - Т. 42, № 6. — С. 402404.

89. О возможном влиянии на здоровье военнослужащих Российского воинского контингента в Косово обедненного урана / C.B. Воробьев и др. // Военно-медицинский журнал. 2003. - Т. 324, №2. — С. 58-59.

90. О прогнозировании номенклатуры болезней, этиологически связанных с воздействием ионизирующих излучений / М.А. Пронин и др. // Военно-медицинский журнал. 1993. - №4. - С. 59-62

91. Панин Л.Е. Структурно функциональные изменения в гепатоцитах и клетках Купфера при совместном действии глюкокортикоидов и липопротеинов низкой плотности // Цитология. -2002.- Т. 43.-№ 12.- С. 1150-1158.

92. Панфилов С.А. Диагностика заболеваний печени, билиарного тракта, поджелудочной железы, селезенки и надпочечников с курсом патологической анатомии / С.А. Панфилов, Е.В. Панфилова. М.: БИНОМ. Лаборатория знаний, 2003. - 215 с.

93. Парфенов А.И. Энтерология / А.И. Парфенов. — М.: Триада-Х,2009. 774 с.

94. Пасечник И.Н. Печеночная недостаточность: современные методы лечения / И.Н. Пасечник, Д.Е. Кутепов. М.: ООО «Медицинское информационное агентство», 2009. — 240 с.

95. Петри А. Наглядная статистика в медицине / А. Петри, К. Себин. М., 2003. - 144 с.

96. Печень и почки при эндотоксинемии / О.Д. Мишнёв и др.- -М.: Виртуальная хирургия, РГМУ, 2003. 212 с.

97. Платонов А.Е. Статистический анализ в медицине и биологии: задачи, терминология, логика, компьютерные методы.- М.: Издательство РАМН, 2000. 52 с.

98. Полиорганный микроядерный тест в экологогигиенических исследованиях / под ред. Ю.А. Рахманина, Л.П. Сычевой. М.: Гениус, 2007.-312 с.

99. Пономаренко Г.Н. Физические методы лечения в гастроэнтерологии / Г.Н. Пономаренко, Т.А. Золотарева. СПб.: ИИЦ Балтика, 2004. - 287 с.

100. Практическая гепатология / Под. ред. H.A. Мухина. — М. — 2004. -294 с.

101. Приказ Министерства здравоохранения Российской, Федерации №266 от 19.06.2003

102. Проскурякова Е.Е, Морфофункциональное состояние слизистой оболочки'тощей и толстой кишки при однократном введении водного раствора обедненного урана: дисс. канд. мед. наук / Е.Е. Проскурякова; -Волгоград. 2010. С.135.

103. Радиационная медицина: Руководство для врачей-исследователей и организаторов здравоохранения / Г.Н. Гастева и др. Ч Радиационные поражения человека. — 2001. Т.2. С. 369-388.

104. Радиация и риск / А.Ф. Цыб и др. // Бюлл. Нац. Радиационно-эпидемиологического регистра. М.} 1995.— Вып 6.-С. 78-122.

105. Радиация, экология, здоровье / М.П. Захарченко и др.. — СПб : Гуманистика, 2003. 336 с.

106. Радиобиология человека и животных: учеб. пособие / С.П. Ярмоненко, A.A. Вайнсон; Под ред. С.П. Ярмоненко. М.: Высш. шк., 2004. - 549 с.

107. Ретроспективная оценка доз в отдаленный пострадиационный период разными биологическими методами / А. В. Севанькаев, Е. В. Голуб, И. К. Хвостунов и др.// Радиационная биология. Радиоэкология. 2004. - Т. 44,N6.-С. 637 - 652.

108. Решетняк В.И. Механизмы желчеобразования и первичный билиарный цирроз / В.И. Решетняк. М.: Красная площадь, 2003. - 144 с.

109. Руководство по содержанию и использованию лабораторных животных, 1996 Электронный ресурс. — (ht1p://www.nap.edu/openbook.php?recordid:=10498&page=Rl)

110. Рыжов С. А. Обеспечение радиационной безопасности в условиях Москвы / С.А. Рыжов // Гигиена и санитария. -2009. №6. - С. 23-26

111. Святкина Н.С. К вопросу о всасывании природного урана в желудочно-кишечном тракте человека / Н.С. Святкина, Ю.В. Новиков // Гигиена и санитария. 1975. — №1. - С. 43 - 45.

112. Секамова С.М. Морфология печени при экспериментальном шоке// С.М. Секамова, Бекетова Т.П./ Арх.пат. №12., 1985. - С. 3-13

113. Серов В.В., Морфологическая диагностика заболеваний печен / / В.В. Серов, К. Лапиш. АМН СССР.- М.: Медицина, 1989,336 е., ил.

114. Сергиенко В.И. Математическая статистика в клинических исследованиях / В.И. Сергиенко, И.Б. Бондарева. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2006. - 304 с.

115. Скляр Л.Ф. Хроническая НСУ-инфекция: современные иммуноморфологические аспекты: Монография/ Л.Ф. Скляр, Е.В.

116. Маркелова, О.Г. Полушин, А.К. Токмалаев, А.Ф. Попов// Под ред. Ю.В. Каминского. М.: Изд-во РУДН, 2006. - 213с.

117. Смирнова O.A. Радиация и организм млекопитающих: модельный подход / O.A. Смирнова. — М. : Ижевск: НИЦ Регуляторная и хаотическая динамика, Институт компьютерных исследований, 2006. — 224 с.

118. Смит Д.М. Математические идеи в биологии: Пер. с англ. / под ред. и с предисл. Ю.И. Гильдермана: изд. 2-е, стереотипное. М.: КомКНИГА, 2005. - 176 с.

119. Степанов С.А. Морфологические изменения органов животных при экспериментальном изучении всасывания урана / С.А. Степанов // Материалы научной конференции, посвященной итогам работы инстшута за 1962 1963 годы. - 1965. -С. 64-66.

120. Стрельцова В.Н. Сравнительная морфология лучевого поражения некоторыми радиоактивными осколками урана: дис. канд. мед. наук / В.Н. Стрельцова. 1952. - 455 с.

121. Теория вероятностей и математическая статистика. Базовый курс с примерами и задачами / А.И. Кибзу и др. — М.; ФИЗМАТЛИТ, 2002. 224 с.

122. Трусова Н.Е. Действие азотнокислого уранила на собак в хроническом эксперименте / Н.Е. Трусова // Сборник рефератов по радиационной медицине. 1962. - Т. 5. - С. 92-93.

123. Филиппенко Г.В. Перекисное окисление липидов и ферменты антиоксидантной системы печени при действии ионизирующего излучения и различных гепатотропных повреждающих факторов: автореф.дис.канд.мед.наук / Г.В. Филипенко. Минск, 1996-20 с.

124. Черний В.И. Фульминантная печеночная недостаточность, под ред. В.И. Черния. / В.И. Черний, С.Г. Тюменцева, Е.К. Шраменко и др.; -Донецк: Издатель Заславский А.Ю., 2010. 132 с.

125. Хадарцев A.A. Избранные технологии диагностики: Монография/ A.A. Хадарцев, В.Г. Зилов, H.A. Фудин Тула.: ИНФРА,2008.-296с.

126. Хаитов P.M. Иммунология / P.M. Хаитов, Г.А. Игнатьева, И.Г. Сидорович М.: Медицина 2000.156 с.

127. Хаитов P.M. Физиология иммунной системы. — М.,2001.219с.

128. Хай Г.А. Информатика для медиков/ Г.А. Хай М.: СпецЛит,2009. 224с.

129. Харланова Н.Г., Ломов Ю.М., Бардыхчьян Э.А. Ультраструктурные особенности изменений печени крыс в динамике экспериментальной эндотоксемии // Цитол. и генет. 1993, №3. С. 68-71

130. Цыб А.Ф. Радиация и патология : учеб. пособие / А.Ф. Цыб, P.C. Будагов, И,А. Замулаева. М.: Высш. ж., 2005. - 341 с.

131. Шамов В.П. К вопросу о предельно допустимых концентрациях урана в воде и воздухе / В.П. Шамов // Гигиена и санитария. — 1964. — Ж11—С.104-111.

132. Шаппо В.В. Медицинское обеспечение Вооруженных Сил России: итоги и перспективы / В.В. Шаппо // Военно-медицинский журнал. 2008. - Т. 329, № 1. - С. 4-12.

133. Шерлок Ш. Заболевания печени и желчных путей. Пер. с англ./ Под ред. З.Г. Апросиной, Н.А. Мухина / Ш. Шерлок, Дж. Дули.- М.: Геотар Медицина. 1999. 864 с.

134. Щеголев А.И., Мишенев О.Д., Тинькова И.О. Онкоморфология печени. М.: Издательство РГМУ, 2006. - 252с.

135. Эпидемиологические и радиобиологические особенности опухолевых заболеваний респираторного и желудочно-кишечного тракта у больных, работавших в контакте с ураном / Л.А. Шпагина и др. // Медицина труда и промышленная экология. 2005. - №11. - С. 43-47.

136. Юи Цао. Генетико-эпидемиологическое изучение рака пищевода в Китае / Цао Юи, Л.А. Атраментова // Вестн. Харьковского национального университета им. В.Н. Карадина. Сер. Биология. 2006. -Вып. 3, № 729. - С. 141-146.

137. Ягода А.В. Патология печени и функция тромбоцитов (клинико-патогенетический анализ) / А.В. Ягода, П.В. Корой. -Ставрополь: СтГМА, 2008. 273 с.

138. Ярмоненко С.П. Радиобиология человека: Актуальные и дискуссионные вопросы / С.П. Ярмоненко, А.А. Вайсон // 4 съезд по радиационным исследованиям : тезисы докл., Москва 20-24 нояб. 2001 г. -М., 2001. —Т.З. С. 876.

139. A new empirical potential for simulating the formation of defects4 <and their mobility in uranium dioxide / N.D. Morelon et al. } // Philosophical Magazine. 2003. - Vol. 83, N13. - P. 1533 - 1555.

140. Absorption of uranium through the entire gastrointestinal tract of the rat / I. Dublineau et al. // International journal of radiation biology. 2005. -Vol. 81, N6.-P. 473-482.

141. Adinolfi L.E., Giordano M.G., Andreana A. et al. Hepatic fibrosis plays a central role in the pathogenesis of thrombocytopenia in patiets with chronic viral hepatitis // Br. J. Haematol. 2001. - Vol. 113 (3). - P. 590-595.

142. Arif A., Levine R., Sanderson s. et al. Regression of fibrosis in chronic hepatitis C after therapy with interferon and ribavirin // Dig. Dis. Sci. -2003. Vol. 48. - P. 1425-1430.

143. Armed Forces Institute of Pathology: Laboratory Methods in histotechnology. Washington D.C., A.F.I.P., 1994

144. Benyon R.C., Iredale J.P. Is liver fibrosis reversible? // Gut. 2000. -Vol. 46.-P. 443-446.

145. Boryo A. Isotopes of polonium (2I0Po) and uranium (234U and 238U) in the industrialised area of Wislinka (North Poland) / A. Boryo, W. Nowicki, B. Skwarzec // Solvent Extraction and Ion Exchange. 2009. - Vol. 89, N 8-12. -P. 677 - 685.

146. Brown J. M. The mast cell and allergic diseases: role in pathogenesis and implications for therapy / J.M.Brown , T.M. Wilson, D.D. Metcalfe // Clinical Experimental Allergy. 2007. - Vol. 38, N 1. - P. 4-18.

147. De Duve C. Subcellular particles / ed. T. Hayashi New York, 1959.-P. 128-159.

148. Denburg J.A. Differentiation of human basophils and mast cells / J.A. Denburg // Chem. Immunol. 1995. - Vol. 61. - P. 49-71.

149. Depleted uranium in Kosovo. Post-conflict environmental assessment -UNEP, 2001. 184 p.

150. Desmet V.J., Roskams T. Cirrhosis reversal: A duel between dogma and myth // J. Hepatol. 2004. - Vol.40. - P. 860-867.

151. Diagnostic value of serum type IV collagen test in comparison with platelet count for predicting the fibrotic stage in patients with chronic hepatitis C / Y/ Murawaki. et al. // J. Gastroenterol. Hepatol. 2001. - Vol. 16 № 7. - P. 777-781.

152. Dixon F.J. Advances in Immunology // Academic Press.- 2001.-Vol. 77.-P. 226-256.

153. Effects of Depleted Uranium on Survival, Growth, and Metamorphosis in the African Clawed Frog (Xenopus laevis) / S. Mitchell et al.} // Journal of Toxicology and Environmental Health, Part A. — 2005. — Vol. 6&,N 11-12.— P. 951-965.

154. Eng F.J., Friedman S.L. Fibrogenesis. I. New insights into hepatic stellate cell activation the simple becomes complex // Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 2000. - Vol. 279. - P.G7-G11

155. Evaluation of the Effect of Implanted. Depleted Uranium (DU) on Adult Rat Behavior and Toxicological Endpoints / D. P. Arfsten et al.} // Journal of Toxicology and Environmental Health. Part A. 2007. - Vol. 70 , N 23. - P. 1995-2010.

156. Environmental Radioactivity/ ed. Merril Eisenbud, Thomas Gessel. New York: Academic Press, 1997. - 656 p.

157. Fairlie I. Depleted uranium: properties, military use and health risks /1. Fairlie // Medicine, Conflict and Survival. 2009. - Vol. 25, N 1. - P. 41 -64.

158. Fajardo L.F. Radiation patholoqy / L.F. Fajardo, M. Berthronq, R.E. Anderson // Oxford University press. — 2001. — P. 165—180.

159. Friedman S.L. Liver fibrosis from bench to bedside / S.L. Friedman // J.Hepatol. - 2003. - Vol. 38. - P.S38-S53.

160. Friedman S.L. The cellular basis of hepatic fibrosis — Mechanisms and treatment strategies / S.L Friedman // N.EnglJ.Med. 1993. - Vol. 328. -№25. — P. 1828-1835

161. Fujita S. Participation of hepatic macrophages and plasma factors in endotoxin-induced liver injuru/ S. Fujita, S. Arii, K. Monden//J. Surg. Res. 1995. Vol. 59., №2.-P. 263-270

162. Galli S. J. Mast cells and basophils /S. J. Galli // Curr. Opin. Hematol. 2000. - Vol. 7. - P. 32-39.

163. Hammel P., Couvelard A., O'Toole D. et al. Regression of liver fibrosis after biliery drainage in patients with chronic pancreatitis and stenosis of the common bile duct // N.EnglJ.Med. 2001. - Vol. 344. - №6. - P.418-423

164. Health Effects of Depleted Uranium on Exposed Gulf War Veterans: A 10-Year Follow-Up / M. A. McDiarmid et al. } // Journal of Toxicology and Environmental Health. Part A. 2004. - Vol. 67, N4. - P. 277296.

165. Hirata K. Effect of endotoxin on rat liver/ K. Hirata, A. Kaneko, K. Ogawa // Lab. Invest.,1980. Vol. 43., №2. P. 165-17

166. Icenhour A.S. Behavior of Uranium oxides and oxyfiuorides exposed to moisture and 244Cm alpha radiation / A.S. Icenhour, L.M. Toth // Radiation Effects and Defects in Solids.-2004.-Vol. 159,N5.-P. 281 -292

167. Jungermann K., Kietzmaann T., Oxygen: modulator of metabolic zonation and dieses of the liver. Hepatololgy. -2000. Vol.31- №20. P. 255 -260.

168. Kazy S.K. Studies on Uranium Removal by the Extracellular Polysaccharide of a Pseudomonas aeruginosa Strain / S.K. Kazy, P. Sar, S.F. D'Souza // Bioremediation Journal. 2008. - Vol. 12, N2. - P. 47-57.

169. La Touche Y.D. Absorption and biokinetics of U in rats following an oral administration of uranyl nitrate solution / Y.D. La Touche, D.L. Willis, O.I. Dawydiak // Health Physics. 1987. - Vol. 53, N2. - P. 147-162.

170. Lottermoser B.G. Physical dispersion of radioactive mine waste at the rehabilitated Radium Hill uranium mine site, South Australia / B.G. Lottermoser, P.M. Ashley // Australian Journal of Earth Sciences. 2006. — Vol. 53, N3.-P. 485-499.

171. Man-Caused Uranium Contamination of Biosphere Objects in the Territory of Kyrgyzstan / E.I. Bykova et aLJ // Journal of Environmental Science and Health, Part A. 2006. - Vol. 41, N11. - P. 2665-2682.

172. Metzler D.E. Biochemistry The Chemical Reaction of Living Cells//Harcourt Academic Press.-2001 .-Vol. 1.

173. Molecular and cellular biology of mast cells and basophils / G. Marone et al. // Int. Arch. Allergy Immunol. 1997. - Vol. 114. - P. 207-217.

174. Panikkar B. The Ethical Issues in Uranium Mining Research in the Navajo Nation / B. Panikkar, D. Brugge // Accountability in Research. — 2007. -Vol. 14, N2.-P. 121-153.

175. Pockros P.J. Noninvasive markers of fibrosis in chronic hepatitis patients / P.J. Pockros // J. Clin. Gastroenterol. 2006. - Vol. 40 № 6. - P. 461463.

176. Rich R.R. Clinical Immunology Principles and Practice / R.R. Rich //Mosby. 2002.- Vol. 3. - P. 32-39

177. Rodriguez-Yoldi M.J. Uranyl action on sugar transport across rat jejunum / M.J. Rodriguez-Yoldi, F, Ponz // Revista espanola de fisiologia. -1986. Vol. 42, N 3. - P. 359-364.

178. Schwartz L. Heterogeneity of human mast cells / L. Schwartz // The Mast Cell in health and Disease. New York: Dekker, 1993. - P. 219-236.

179. Stepwise combination algorithms of non-invasive markers to diagnose significant fibrosis in chronic hepatitis C / G. Sebastiani. et aL // J. Hepatol. 2006. - Vol. 44. - P. 686-693.

180. Shahlaei M. Application of Adsorptive Stripping Voltammetry for Determination of Uranium in the Presence of 3-Hydroxy-2-Naphthoic Hydrazide / M. Shahlaei, M.B. Gholivand, A Pourhossein // Analytical Letters. 2009. -Vol. 42, N 18 - P. 3085 - 3095.

181. Short-term effects of Depleted Uranium on immune status in rat intestine / I. Dublineau et al. . // Journal of Toxicology and Environmental Health. Part A// Current Issues. 2006.- Vol. 69, N 17. - P. 1613-1628.

182. Siddique I., El-Naga H.A., Madda J.P. et al. Sampling variability on percutaneous liver biopsy in patients with chronic hepatitis C viral infection // Scand J. Gastroenterol. 2003. - Vol. 38. - P. 427-432.

183. Taylor D.M. Environmental uranium and human health / D.M. Taylor, S.K. Taylor // Reviews on environmental health. 1997. - Vol. 12, N 3. -P. 147-157.

184. The Effect of Repeated Inhalation on the Distribution of Uranium in Rats / M. Monleau et al. . // Journal of Toxicology and Environmental Health. Part A. 2006. - Vol. 69, N 17. - P. 1629-1649.

185. Wanless I., Regression of human cirrhosis. Morphologic features and the genesis of incomplete septal cirrhosis / I. Wanless, E. Nakashima, M. Sherman//Arch. Pathol. Lab. Med. 2000. - Vol. 124№11.-P. 1599-1607

186. Weksler B.B. Review article: he pathophysiology of thrombocytopenia in hepatitis C virus infection and chronic liver disease/B.B. Weksler // Aliment. Pharmacol. Ther. 2007. - Vol. 26, Suppl. 1. - P. 13-19

187. White M. V. Mast Cell Secretagogues / M. V. White // The Mast Cell in Health and Disease. New York: Dekker, 1993. - P. 109-128.1. АКТ

188. Внедрения по материалам диссертационной работы на соискание ученой степени кандидата медицинских наук..название предложения)

189. Автор Набродов Георгий Михайлович — соискатель кафедры гистологии

190. Ф.И.О., место работы, должность)диссертационной работы «Морфофункциональная характеристика печени в условиях отдаленных последствий однократного перорального введения обедненного урана».тема НИР, название диссертации и др.)

191. Председатель (проф. д.м н. Попов В.И)

192. Члены комиссии ,/tff/y (к.м.н. Фертикова Т.Юк.м.н. Каменев В.И.)1. ВЕРЖДАЮ»олотских В.И. 2011 г.1. АКТ

193. Внедрения по материалам диссертационной работы на соискание ученой стедШШ кандидата медицинских наук.название предложении)

194. Автор Набродов Георгий Михайлович соискатель кафедры гистологии.

195. Ф.И.О., место работы, должность)диссертационной работы «Морфофункциональная характеристика печени в условиях отдаленных последствий однократного перорального введения обедненной) урана».—тема НИР, название диссертации и др.) ^

196. Полученный от внедрения эффект повысил интеллектуальное развитие будущих врачей для принятия своевременных и грамотных мер безопасности, защиты и профилактики в экстремальных ситуациях.

197. Количество специалистов, освоивших предложение 8 сотрудников кафегЩЫ мобилизационной подготовки здравоохранения и медицины катастроф

198. Председатель Члены комиссиипроф., д.м.н. Механтьева Л.Е.) (к.м.н. Бережнова Т.А.) (к.м.н. Сапронов Г.И.)1. УТВЕРЖДАЮ»ача по медчасти В.П. Логунов «05» мая 2011 г.1. АКТ

199. Внедрения по материалам диссертационной работы на соискание ученой степени кандидата медицинских наук.название предложения)

200. Автор Набродов Георгий Михайлович — соискатель кафедры гистологии

201. Ф.И.О., место работы, должность)диссертационной работы «Морфофункциональная характеристика печени в условиях отдаленных последствий однократного перорального введения обедненного урана».тема НИР, название диссертации и др.)

202. Комиссия в составе: председателя Б.Е. Лейбовича зав. патологоанатомическим отделениеми членов: В.А. Стогова врача патологоанатома

203. Количество специалистов, освоивших предложение 5 сотрудников ПАР1. Председатель1. Члены комиссии1. Б.Е. Лейбович зав. ПАР)

204. В.А. Стогов— врач патологоанатом-) ^^ (H.A. Уткина врач патологоанатом)йГ||Бухтояров Н.И. мая 2011 г.1. АКТ

205. Внедрения по материалам диссертационной работы ьшсоискание ученой степени кандидата медицинских наук.название предложении)

206. Авт°р Набродов Георгий Михайлович соискатель кафедры гистологии

207. Ф.И.О., место работы, должность)диссертационной работы «Морфофункциональная характеристика печени в условияхотдаленных-последствийоднократного перорального введения обедненногоурана».' ~и.о. зав. кафедройтема НИР, название диссертации н др.)

208. Комплексность и полнота исследовательских методик позволит всесторонне изучать паренхиматозный и стромальный компоненты печени с учетом диагностической значимости выявляемых морфоэнзиматических критериев.

209. Полученный от внедрения эффект расширил представления в подходах к исследованию структур печени.

210. Количество специалистов, освоивших предложение 7 сотрудников кафедры анатомии-гистологии и обшей биологии1. Председательи.о. зав. кафедрой, д.в.н. проф. Торгуй П.МЛ (к.в.н. доцент Шевченко Н.А)к.в.н. доцент Кудрин Л.П.)к.в.н. доцент Обрывков В.АЛ

Информация о работе

Набродов, Георгий Михайлович
кандидата медицинских наук
Волгоград, 2011
ВАК 03.03.04

Диссертация

"Морфофункциональная характеристика печени в условиях отдаленных последствий однократного перорального введения обедненного урана" - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы