Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Морфофункциональная характеристика печени матери, плода и потомства при воздействии вибрации промышленной частоты во время беременности

ВАК РФ 03.00.25, Гистология, цитология, клеточная биология

Автореферат диссертации по теме "Морфофункциональная характеристика печени матери, плода и потомства при воздействии вибрации промышленной частоты во время беременности"

На правах рукописи

Кузьменко Дмитрий Борисович

Морфофункциональная характеристика печени матери, плода и потомства при воздействии вибрации промышленной частоты во время беременности

03.00.25- гистология, цитология, клеточная биология 14.00.15- патологическая анатомия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Новосибирск-2005

Работа выполнена на кафедре морфологии человека и ЦНИЛ ГОУ ВПО Новосибирской государственной медицинской академии МЗ и СР РФ

Научные руководители: доктор медицинских наук, профессор доктор медицинских наук, профессор

Склянов Юрий Иванович Мичурина Светлана Викторовна

Официальные оппоненты: чл. корр. РАМН,

доктор медицинских наук, профессор кандидат медицинских наук, доцент

Шкурупий Вячеслав Алексеевич Баланчук Владимир Карпович

Ведущая организация: НИИ региональной патологии и патоморфологии СО РАМН (г. Новосибирск)

Защита состоится » 2005 г. на заседании

диссертационного совета Д 208.062.05 Новосибирской государственной медицинской академии МЗ РФ (630091, г. Новосибирск, Красный проспект, 52)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Новосибирской государственной медицинской академии МЗ РФ(630091, г. Новосибирск, Красный проспект, 52).

Автореферат разослан « 2005 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

доктор медицинских наук,

профессор

Волков А.В.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность исследования.

Вибрация относится к факторам, обладающим большой биологической активностью. Многочисленными экспериментальными исследованиями доказаны изменения практически во всех органах и тканях при воздействии вибрации различных режимов и характеристик. Даже в условиях сокращения виброопасных производств и вынужденных простоев на долю вибрационной болезни приходится 25-26% от общего количества хронических профзаболеваний. В последнее время большое внимание уделяется изучению возможностей адаптации организма человека. Особую значимость приобретает рассмотрение влияния дестабилизирующих факторов на организм беременной женщины, развивающегося плода и последующего потомства. Репродуктивный период характеризуется активностью всех специфических функций организма женщины, направленных на деторождение. Состояние женского организма в этот период, а также особенности течения беременности и родов во многом зависят от эколого-производственных условий жизни и труда. Особую роль приобретают данные необходимые для оценки последствий воздействия вредных производственных факторов. Несомненно, что прогрессивное развитие антенатальной медицины не может обойтись без комплекса

экспериментальных и клинических сведений о взаимосвязи в цепи мать-плод-потомство и понимания патогенеза ее нарушений. В связи с этим возникает особый интерес к проблеме дестабилизирующего влияния вибрации на развитие потомства и, в частности, на развитие и дальнейшее формирование основного гомеостатического органа - печени.

Реакция организма на длительное воздействие вибрационного фактора как «хронического стрессорного агента» подчиняется общебиологическим закономерностям и вызывает развитие ответных реакций органов и систем по типу общего адаптационного синдрома. В связи с этим становится актуальным изучение биологического действия вибрации, как стрессирующего воздействия, в модели мать-плод-потомство.

Цель исследования:

Выявить и охарактеризовать морфологические изменения в печени беременных крыс, печени их плодов и половозрелых потомков от этих крыс (отдаленные результаты) при экспериментальном воздействии вибрации частотой 32 гц и виброскоростью 50 м/с (промышленная вибрация категории За).

Задачи исследования:

1. Выявить влияние воздействия вибрации промышленной частоты на эмбриональную смертность у крыс.

2. Изучить воздействие вибрации промышленной частоты на печень крыс в период беременности.

3. Изучить воздействие вибрации промышленной частоты на печень плода.

4. Проанализировать отдаленные последствия (3-х месячные потомки) влияния вибрации промышленной частоты.

Научная новизна исследования:

Впервые получены данные о структурно-функциональных изменениях в печени беременных животных подвергавшихся воздействию вибрации, печени их плодов, печени потомков с антенатальным воздействием вибрации.

Впервые выявлены некоторые закономерности воздействия вибрации на развитие плода и дальнейшее потомство - увеличение общей эмбриональной смертности, отставание у потомков массы тела. Теоретическая и практическая значимость работы:

Полученные данные рекомендованы к использованию в лекционном курсе кафедр морфологии человека, экологии, гистологии Новосибирской государственной медицинской академии.

Полученные данные о нарушениях внутриутробного развития при воздействии вибрации должны учитываться в женских консультациях при постановке на учет беременных женщин и обращать внимание акушеров-

гинекологов и педиатров из-за риска развития антенатальной патологии и патологии детского возраста.

Положения выносимые на защиту:

1. Воздействие вибрации промышленной частоты на крыс с 9 по 18 сутки беременности приводит к увеличению внутриутробной гибели плодов.

2. Воздействие вибрации промышленной частоты на крыс с 9 по 18 сутки беременности сопровождается значительными изменениями «структурного гомеостаза» в печени на тканевом, клеточном и субклеточном уровнях (расстройства микроциркуляции - стаз и сладж-феномен в синусоидных капиллярах, лимфогенный отек; дистрофические изменения в гепатоцитах -жировая инфильтрация цитоплазмы, набухание митохондрий с дискоординацией крист).

3. Воздействие вибрации промышленной частоты на крыс с 9 по 18 сутки беременности приводит к «отставанию» тканевой дифференцировки в печени плодов (замедляется формирование балочного строения, замедляется формирование стенки кровеносных сосудов), расстройству микроциркуляции в виде сладж-феномена

4. Воздействие вибрации промышленной частоты на крыс с 9 по 18 сутки беременности приводит к нарушению онтогенеза потомков (уменьшение массы тела и печени, уменьшение диаметра венозных сосудов печени, истончение эндотелиальной выстилки).

Апробация результатов исследования:

Основные положения диссертации доложены и обсуждены на научной конференции с международным участием посвященной 75-летию со дня рождения и 50-летию научно-педагогической деятельности академика РАМН Ю.И. Бородина «Проблемы лимфологии и интерстициального массопереноса» (Новосибирск, 2004), на ежегодной конкурс-конференции молодых ученых и студентов «Авиценна 2002, 2003, 2004» (Новосибирск, 2002, 2003, 2004), международной конференции «Проблемы саногенного и

патогенного эффектов экологического воздействия на внутреннюю среду организма» (Чолпон-Ата, 2004).

Публикации: По теме диссертации опубликовано 6 научных работ. Структура и объем диссертации:

Диссертация изложена на 140 страницах, из которых 121 занимает тексТ работы. В тексте имеется рисунков 94 (из них 89 микрофотографии) и 14 таблиц. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, главы с описанием использованных методик, главы, в которой изложены результаты собственных исследований, обсуждения результатов и выводов. Указатель литературы включает 180 источников, из которых 133 отечественных и 47 иностранных.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Материал и методы исследования

Работа выполнена на белых половозрелых самках крыс линии Wistaг массой 180-200 гр., плодах, полученных от них на 19-е сутки внутриутробного развития, и 3-месячных половозрелых крысах-потомках. Всего использовали 226 крыс. Для оплодотворения самок в стадии проэструс-эструс подсаживали к самцам в соотношении 4:1. Первый день беременности определяли по наличию сперматозоидов в вагинальных мазках (Дыбан А.П. с соавт., 1974, 1975). Беременные самки подвергались общей вертикальной вибрации категории За (частотой 32 Гц, виброскоростью 50 м/с ) в специальной клетке, установленной на площадке вибратора от вибростенда ВЭДС-ЮОБ в течение 1 часа (амплитуда колебаний составляла 3 мм). Распределение животных по группам (см. Табл.1) проходило в зависимости от суммарной длительности вибровоздействия.

Сроки воздействия вибрации выбраны с учетом периодизации эмбриогенеза и развития внезародышевых органов. С 9-11 - этап завершения гаструляции и обособления основных зачатков; 9-15 - появление зачатка печени и очагов кроветворения в ней; 9-18 сутки - этап интенсивного печеночного кроветворения. С 7-х по 18-е сутки - самый широкий, включает завершение имплантации, гаструляцию и весь период органо- и гистогенеза

(Кнорре А.Г.,1971; Склянов Ю.И., 1974; Сайфутдинов А.И, 1994). На 19-е сутки беременности часть животных, после предварительного взвешивания выводили из опыта под эфирным наркозом. 19-е сутки выбраны для взятия материала в связи с тем, что на 21 сутки происходят роды. В яичнике подсчитывали число желтых тел, определяли число мест имплантаций в матке, количество живых и мертвых плодов, забирали околоплодные воды. Рассчитывали показатель эмбриональной смертности по формуле (Щербак Б. И., 1976):

общая эмбриональная смертность (%)=(ж. т - ж. п.)/ж. т* 100% (I)

ж. т .- количество желтых тел ж. п. - количество живых плодов

Извлеченные плоды взвешивали и измеряли их кранио-каудальный размер.

Другую часть животных оставляли в опыте для получения потомства. Через 30 дней после рождения крысят - самочек отсаживали от матерей (Западнюк И.П. с соавт., 1983) и выращивали на стандартном лабораторном рационе до половозрелого возраста (3 месяца). Затем, после предварительного взвешивания, также выводили из опыта.

Таблица 1. Характеристика подопытных групп и количество объектов

исследования, включенных в эксперимент

Подопытные группы Экспериментальная модель Количество животных в группах

самки плоды

КОНТРОЛЬ

Группа 1 Физиологическая беременность 25 20

ОПЫТ

Группа 2 Воздействие вибрации с 9 по 11 сутки беременности 15 25

Группа 3 Воздействие вибрации с 9 по 15 сутки беременности 20 27

Группа 4 Воздействие вибрации с 9 по 18 сутки беременности 28 26

Группа 5 Воздействие вибрации с 7 по 18 сутки беременности 12 нет

ОПЫТ - ПОТОМСТВО, возраст 3 месяца

Группа 6 Контроль 20

Группа 7 Последствия воздействия вибрации с 9 по 18 сутки внутриутробного развития 18

Для гистологического изучения использовали образцы левой хвостатой доли печени беременных самок, половозрелых крыс-потомков и образцы печени плодов. Забранный материал помещали в 10% нейтральный формалин, который после обезвоживания в серии спиртов возрастающей концентрации заключали в парафин по общепринятой методике. На микротоме (Micгom НМР ПО, Карл Цейс) готовили гистологические срезы толщиной 5-6 мкм, их окрашивали гематоксилином Майера и эозином и заключали в канадский бальзам (Волкова О.В., Елецкий Ю.К., 1982). Препараты изучались на микроскопе МБИ - 15. Для электронно-микроскопического изучения кусочки печени фиксировали в 4% параформальдегиде и затем в 1% растворе четырехокиси осмия. Фиксаторы готовились на фосфатном буфере при рН 7,4 (Milloning G., 1961). Материал после фиксации обезвоживали и заливали в эпон-812 (Уикли Б., 1975). Полутонкие и ультратонкие срезы получали на ультратоме LKB 8800.

Ультратонкие срезы толщиной 50-80 нм контрастировали водным раствором уранилацетата (Уикли Б., 1975) и цитратом свинца (Reunolds E.S., 1963). Затем срезы напыляли углеродом путем его испарения в вакууме, просматривали и фотографировали в электронных микроскопах JEM-7A. Светооптическую морфометрию проводили при увеличении микроскопа х900 с помощью вмонтированной в окуляр сетки, состоящей из 49 точек. Площадь используемой сетки составляла 10677 мкм2. Для определения относительной объемной плотности структур (Уи) использовали формулу: Vvi=Pi/Pт x Ю0%, (II)

Где Pi - число точек, попавших на тканевую или клеточную структуру, Рт - общее число точек тестовой системы (Автандилов Г. Г., 1980).

Объемную плотность цитоплазмы гепатоцитов, ядер гепатоцитов, паренхимы, синусоидальных капилляров, синусоидальных клеток рассчитывали относительно тестовой сетки. Число изученных полей в одной печени составляло 4-5, а в каждой выделенной группе - от 75 до 225.

Измерение диаметров сосудов проводили при увеличении микроскопа х400 помощи окулярной линейки, содержащей 100 делений, общая длина линейки составляла 155 мкм.

У беременных самок и половозрелого потомства обсчитывались печеночные дольки, сосуды портальных трактов. Учитывая органо- и гистогенез эмбриональной печени, у плодов подсчетам подвергались гепатоциты и размеры очагов кроветворения.

Полученные цифровые данные подвергали статистической обработке на персональном компьютере IBM PC (Intel Pentium 2,8) с помощью пакета программ SPSS 11.2. Определялись средние величины, ошибка среднего, среднее квадратичное отклонение. Достоверность различия сравниваемых величин определяли на основании критерия Стьюдента. Значимыми считали различия при р<0,05. Результаты собственных исследований

Результаты влияния вибрации на выживаемость плодов крыс, массу и длину плодов.

Воздействие вибрации с 9 по 11 сутки беременности

Общая эмбриональная смертность (ОЭС), рассчитанная по формуле (I) уменьшалась с 11, 06 ± 2,86% до 13,86 ± 5,81% Прибавка массы тела за беременность снизилась на 25,5% Воздействие вибрации с 9 по 15 сутки беременности

Имеется тенденция уменьшения ОЭС с 11,06 ± 2,86% до 13,86 ± 5,81% Воздействие вибрации с 9 по 18 сутки беременности

Общая эмбриональная смертность (ОЭС), возрастает в 2 раза с 11,06 ± 2,86%до22,65±3,0%

Воздействие вибрации с 7 по 18 сутки беременности

Общая эмбриональная смертность плодов в опытной группе возрастала в 5 раз и составила 90,5±9,3% Группы потомства

Было установлено отставание общей массы тела у животных опытной группы с 207,5±7,8% до 181±2,4% гр.

Данные массометрии печени беременных крыс, плодов и потомков в контрольных группах и при воздействии вибрации с 9 по 18 день беременности.

В группе беременных самок крыс при воздействии вибрации не произошло достоверного увеличения массы органа. В группе плодов при воздействии вибрации масса печени выросла на 12,66%. В группе потомков от матерей подвергавшихся вибрации во время беременности произошло снижение массы органа на 15,36%.

Морфология печени беременных крыс и беременных крыс при воздействии вибрации с 9 по 18 день беременности.

Данные световой микроскопии и морфометрии.

При микроскопическом исследовании печени крыс в сравниваемых группах было выявлено, что в опытной группе происходит резкое расширение сосудов портальных трактов - как артерий (на 144%), так и вен (на 136%), а так же желчных протоков (на 108%). В соединительной ткани портальных трактов увеличивается содержание клеточных элементов, в основном лимфоцитов и гистиоцитов. В соединительной ткани портальных трактов развиваются явления обводнения, резкого расширения периваскулярных пространств (на 587%). В центральных венах так же выявилось заметное расширение (на 75%), но обращает на себя внимание мозаичность - в некоторых дольках это действительно выраженное расширение сосуда, а в некоторых дольках вены имели обычный диаметр. Синусоидальные капилляры расширились на 9%, однако общая пропускная способность увеличивается минимум на 20%, что подтверждают математические расчеты - при увеличении диаметра сосуда в 1,5 раза его объем увеличивается в 2,25 раза. Столь незначительное расширение синусоидных капилляров вероятно обусловлено большим количеством самих капилляров, что приводит к значительному росту пропускной способности

при незначительном расширении каждого из них. Поддольковые вены не претерпели каких-либо видимых изменений. Гепатоциты в дольках имели выраженную зернистость, а кое-где, особенно в центре долек и признаки перенакопления липидов (жировая дистрофия). Синусоидальных клеток становится заметно меньше, особенно в центре долек. При гистохимических окрасках на коллаген (по Ван-Гизону) и на гликоген (реактивом Шиффа), соответственно не было выявлено коллагенизации пространств Диссе и выявилось резкое уменьшение количества гликогена в цитоплазме гепатоцитов опытной группы животных. При воздействии вибрации в печени происходит дискомплексация балок, особенно выраженная в центре долек. Количество гепатоцитов на единицу площади уменьшилось на 5,8%, по-видимому, за счет расширения синусоидных капилляров. Объемная плотность цитоплазмы гепатоцитов уменьшилась на 2%, т.е. практически не изменилась, а объемная плотность ядра увеличилась на 11%, а объем гепатоцитов практически не изменился, увеличился на 1%. Количество 2-ядерных гепатоцитов увеличилось на 24,4%. Количество синусоидальных клеток уменьшилось на 34%. Объемная плотность синусоидальных клеток уменьшилась на 54%, по нашему мнению это сопряжено с прямым повреждающим действием вибрации. Коэффициент 2-ядерных

гепатоцитов (отношение 2-ядерных ко всем гепатоцитам) составил 6% в контрольной группе и 8,5% в опытной. Коэффициент синусоидальных клеток (отношение синусоидальных клеток к гепатоцитам) в контрольной группе 32,8%, а в опытной группе 29,5%. Коэффициент Укгойо (отношение площади синусоидальных капилляров к площади гепатоцитов) составил в контрольной группе 0,37 и 0,4 в опытной группе - это говорит либо об увеличении объема протекающей через паренхиму жидкости, либо о развитии застойных явлений. При гистохимической окраске на наличие гликогена (реактив Шиффа) в группе вибрированных самок было выявлено содержание гликогена меньшее на 87%, чем в контрольной группе беременных самок.

Данные электронной микроскопии

Группа контроля (нормально протекающая беременность)

Расширение синусоидов, что способствует интенсификации трофики и оксигенации гепатоцитов. Отмечается значительное расширение пространств Диссе, видимо необходимое в для повышения метаболизма в печени. Крупные поля ГЭР и эксцентричность ядрышек характеризуют повышение белкового синтеза. Сравнительно небольшое содержание гранул гликогена в гепатоцитах.

Опытная группа (беременные самки крыс подвергавшиеся вибровоздействию с 9 по 18 дни беременности).

Пространства Диссе сильно сжаты (видимо за счет набухания гепатоцитов). Просветов в желчных капиллярах, образованных плазмолеммами смежных гепатоцитов не видно, за счет гипертрофии ворсинок. Отмечается нечеткая контурированность плазмолемм стыков между гепатоцитами. Просветы синусоидов выявляются весьма редко и зазоры между клетками паренхимы и стромы минимальны. Расширенные диктиосомы и вакуоли комплекса Гольджи - свидетельство секреторного блока. Отмечается набухание митохондрий с дискоординацией крист и локальными просветлениями матрикса - это характерно для подавляющего большинства гепатоцитов. Компактизация цитоплазмы за счет утраты воды, что характерно для апаптозных клеток. Выраженное увеличение количества АЭР. Часто видны признаки жировой дистрофии гепатоцитов. Наблюдается обеднение гепатоцитов гранулами гликогена, набухание митохондрий и накопление гранул фосфата кальция в матриксе. Усиление плотных межклеточных контактов и десмосомальных комплексов на плазмолеммах смежных гепатоцитов, причем имеет место их аномальность. Морфология печени плодов беременных крыс и плодов беременных крыс при воздействии вибрации с 9 по 18 дни беременности. Данные световой микроскопии и морфометрии

В обеих группах отсутствует дольчатость печени, балочное строение долек, нет портальных трактов со свойственными им сосудами. В контрольной группе гепатоциты выстраивались в цепочки, являясь предшественниками будущих печеночных балок, в опытной группе такой тенденции к выстраиванию гепатоцитов в цепочки практически не наблюдалось, здесь печеночные клетки располагались в основном группами наподобие округлых скоплений. Сосуды со сформированной эндотелиальной выстилкой встречались в контрольной группе, и не наблюдались в опытной. Синусоидальные капилляры не выявлены в обеих группах. Эти факты вероятно можно трактовать как замедление дифференцировки органа, так как с ходом дифференцировки гепатоциты формируют балки, а количество очагов кроветворения уменьшается. Явных различий в клеточном составе очагов кроветворения не выявлено. Дифференцированных форм синусоидальных клеток не выявлено в обеих группах. Масса печени в опытной группе на 15,66% больше, вероятно за счет увеличения кровенаполнения органа. Количество гепатоцитов на единицу площади в опытной группе на 28,7% меньше чем в контрольной, что по нашему мнению связано с замедлением дифференцировки органа. Площадь формирующихся синусоидных капилляров практически не изменяется. Площадь очагов экстраваскулярного кроветворения практически не меняется, однако количество и размер каждого очага меняется - очагов больше, но они мельче. Объемная плотность ядра в опытной группе уменьшается на 11%, по нашему мнению это свидетельствует о снижении активности генетического аппарата и замедлении дифференцировки органа. В то же время объемная плотность цитоплазмы увеличивается на 6,7%, но объемная плотность гепатоцитов остается прежней. В опытной группе средний диаметр сосудов со сформированной стенкой больше на 27,3%, это вероятно связано с развитием застойного полнокровия в органе. В опытной группе ширина периваскулярного пространства больше на 30,5%. Количество мегакариоцитов на единицу площади остается без изменений в сравниваемых

группах. Индекс Vizzotto (отношение площади синусоидных капилляров к площади гепатоцитов) в сравниваемых группах равен 0,8. В контрольной группе в сосудах наблюдалась лучшая дифференцировка сосудистой стенки, что выражалось в непрерывности эндотелиальной выстилки и формировании остальных слоев.

Данные электронной микроскопии

Группа контроля (плоды от крыс с физиологической беременностью)

Синусоиды расширены, между отростками эндотелоцитов плотных межклеточных контактов еще нет. Зачатки еще не оформившихся плотных контактов видны в области желчных капилляров. Характерно отсутствие межклеточных контактов между отростками клеток эндотелиальной выстилки. В гепатоцитах обилие свободных рибосом и полисом, локальные зоны гранул гликогена, скомпонованные совместно с липидными каплями, иногда довольно крупных размеров.

Опытная группа (плоды от крыс подвергавшихся вибрации с 9 по 18 дни беременности)

В просвете синусоидов определяется сладжирование эритроцитов, отмечается адгезия эритроцитов к плазмолеммам эндотелиоцитов, сильно округленных и имеющих утолщенные отростки. Повышение синтеза вещества внеклеточного матрикса эндотелиоцитами, которое накапливается по периметру капилляров. Видно образование множественных плотных контактов между отростками эндотелиоцитов, вероятно ответ на вибрационные воздействия, разобщающие клетки. Образуются аномальные желчные капилляры с деформацией апикальных полюсов клеток холангиол. Сглаженные микроворсинки в холангиолах, измененные межклеточные контакты. Характерно явление холестаза. В гепатоцитвх характерно накопление большого количества гранул гликогена, состоящего из обособленных гранул. В цитоплазме гепатоцитов липидная инфильтрация -следствие нарушения выведения триглицеридов (р-липопротеинов) из клеток. Митохондрии преимущественно конденсированной конфигурации.

Миелиноподобные осмиофильные, аномальные включения в цитоплазме гепатоцитов.

Морфология печени потомков крыс с естественным развитием беременности и при воздействии вибрации с 9 по 18 дни беременности

Данные световой микроскопии и морфометрии.

В обеих группах печень животных имела типичное строение, и не выявила значимых различий при общегистогогическом исследовании. Однако обращала на себя внимание некоторая мозаичность (неоднородность), диаметров сосудов, особенно центральных вен в опытной группе. Так же обращала на себя внимание некоторая "смазанность" балочного строения, выражаемая в кривизне и неоднородном просвете синусоидальных капилляров.

При морфометрическом исследовании ткани печени потомков крыс подвергнутых вибрационному воздействию выявлено, что объемная плотность цитоплазмы гепатоцитов и паренхимы в опытной группе практически не изменилась, в то же время объемная плотность ядра увеличилась на 5,9%.При этом ядерно-цитоплазматическое соотношение практически не изменилось (0,62 в контрольной группе и 0,64 в опытной). Обращает на себя внимание, что объемная плотность синусоидных капилляров больше на 3,6%, а объемная плотность синусоидальных клеток меньше на 29,1%. Одновременно с этим количество синусоидальных клеток больше на 11,9%. При подсчете количества гепатоцитов отмечалось их увеличение в опытной группе на 8,4%.Однако, количество двуядерных гепатоцитов уменьшилось на 21,8%. При исследовании сосудистого

компонента было выявлено что, диаметр междольковых артерий в среднем уменьшился на 6,7%, диаметр вен портальных трактов уменьшился 33,5%, диаметр желчных протоков портальных трактов в опытной группе уменьшился 11,6%. Так же в опытной группе отмечалось сужение поддольковых вен в среднем на 4,3%. Данные электронной микроскопии.

Контрольная группа (3-месячные потомки от крыс с физиологической беременностью).

На электронограммах в различных гепатоцитах митохондрии находятся в разных энергетических состояниях. Все субклеточные особенности клеток паренхимы и стромы находятся в пределах физиологической нормы. Опытная группа (3-месячные потомки от крыс с беременностью на фоне вибрации с 9 по 18 дни эмбрионального развития).

Сладжирование эритроцитов. Заужение капилляров, торможение кровотока. Выстилка синусоидов образована истонченными осмиофильными отростками, в которых мало пиноцитозных пузырьков, что характеризует снижение трансэндотелиального обмена. Часто наблюдаемый клеточный детрит в синусоидах - свидетельство повышенной повреждаемости клеток печени у особей подвергавшихся вибрации в эмбриогенезе. Характерны апоптозно измененные эндотелиоциты. В эндотелиоцитах с гипертрофированной цитоплазмой, гигантские включения Вейбеля-Паллада, что свидетельствует об отсутствии экзоцитоза. Между эндотелиоцитами и гепатоцитами хлопьевидные скопления внеклеточного матрикса. Эритроциты сладжируются и слипаются с эндотелиальной выстилкой. Часто обнаруживалась адгезия тромбоцитов к отросткам эндотелиоцитов. В гепатоцитах признаки перенакопления гликогена. Пустоты на месте липидных капель, как показатель их резобции для целей использования как энергетического субстрата в условиях невозможности расщепления гликогена. Выводы

1. Воздействие вибрации промышленной частоты на крыс с 9 по 18 сутки беременности приводит к увеличению внутриутробной гибели плодов.

2. Воздействие вибрации промышленной частоты на крыс с 9 по 18 сутки беременности сопровождается значительными изменениями «структурного гомеостаза» в печени на тканевом, клеточном и субклеточном уровнях (расстройства микроциркуляции - стаз и нарушение целостности

эндотелиальной выстилки в синусоидных капиллярах, лимфогенный отек; дистрофические изменения в гепатоцитах - жировая инфильтрация цитоплазмы, набухание митохондрий с дискоординацией крист).

3. Воздействие вибрации промышленной частоты на крыс с 9 по 18 сутки беременности приводит к «отставанию» тканевой дифференцировки в печени плодов (замедляется формирование балочного строения, замедляется формирование стенки кровеносных сосудов), расстройству микроциркуляции в виде сладж-феномена.

4. Воздействие вибрации промышленной частоты на крыс в антенатальный период приводит к нарушению онтогенеза, которое проявляется и в половозрелом возрасте (уменьшение массы тела и печени, уменьшение диаметра венозных сосудов печени), повреждению эндотелиальной выстилки синусоидов печени (истончение выстилки, апоптоз, нарушение экзоцитоза), расстройствам микроциркуляции в печени (торможение капиллярного кровотока, сладж-феномен), дистрофическим изменениям в гепатоцитах (переполнение цитоплазмы гепатоцитов гликогеном).

Практические рекомендации:

Полученные данные рекомендованы к использованию в лекционном курсе кафедр морфологии человека, экологии, гистологии Новосибирской государственной медицинской академии.

Полученные данные о нарушениях внутриутробного развития при воздействии вибрации должны учитываться в женских консультациях при постановке на учет беременных женщин и обращать внимание акушеров-гинекологов и педиатров из-за риска развития антенатальной патологии и патологии детского возраста.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Кузьменко Д.Б. Экспериментальное исследование влияния вибрации на беременность/Склянов Ю.И., Потеряева Е.Л., Кузьменко Д.Б., Залавина СВ., Апраксина Е.Ю., Гулюкина Т.В., Саматова И.М., Дровосеков М.Н., Терехова О.И..//Тезисы докладов научной сессии, посвященной 65-летию Новосибирской государственной медицинской академии.- Новосибирск, 19-20 декабря 2000. -С.91.

2. Кузьменко Д.Б. Влияние длительности вибрационного воздействия на эмбриогенез/Гулюкина Т.В., Апраксина Т.В., Кузьменко Д.Б., Дровосеков М.Н., Балуева О.И., Савельева Т.В., Ефимов Ю.В., Кузькин С.А.//Ежегодная конференция студентов и молодых ученых «Авиценна».-Новосибирск, 2004.-С.58-59.

3. Кузьменко Д.Б. Влияние вибрации промышленных частот на течение беременности у крыс и на их потомство/Склянов Ю.И., Правоторов Г.В., Кузьменко О.И., Балуева О.И., Залавина СВ., Саматова И.М., Апраксина Е.Ю., Гулюкина Т.В., Дровосеков М.Н., Савельева Т.В.//Журнал экспериментальной и клинической медицины.- 2003, №4.-С6-8.

4. Кузьменко Д.Б. Экспериментальное исследование влияния вибрации на структуры печени/Кузьменко Д.Б., Апраксина Е.Ю., Гулюкина Т.В., Саматова И.М.//Ежегодная конференция студентов и молодых ученых «Авиценна».- Новосибирск, 2001.-С.73.

5. Кузьменко Д.Б. Экспериментальные данные о гемоциркуляции печени плодов крыс при воздействии вибрации/Кузьменко Д.Б., Склянов Ю.И., Мичурина СВ.//Материалы научной конференции с международным участием, посвященной 75-летию со дня рождения и 50-летию научно-педагогической деятельности академика РАМН Ю.И.Бородина.- Новосибирск, 2004.-С220.

6. Кузьменко Д.Б. Печень плода при воздействии вибрации в эксперименте/Кузьменко Д.Б., Гулюкина Т.В., Апраксина Е.Ю., Дровосеков М.Н., Савельева Т.В., Балуева О.И., Попова Н.С.// Ежегодная конференция студентов и молодых ученых «Авиценна».-Новосибирск, 2004.-С63.

Подписано к печати 03 03 2005 формат - 60x84 -1 печатный лист

Бумага: офсетная Печать: Duplo DP-43S Тираж: 100 экз Номер заказа № 456 Типография ООО "Югус" г. Новосибирск, ул. Залесского, 4

22 !.'iP2I35 \

1267

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Кузьменко, Дмитрий Борисович

Список сокращений;.

ВВЕДЕНИЕ.:.-.:.

Глава 1; ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР:.„

1:1: Общая характеристика вибрационных воздействий наорганнзм.9"

1.2. Современные представления о патогенезе и патоморфологи'и вибрационной& болезни.№

1:3. Структура печени, несовременные представления о патоморфологических изменениях клеток,печени при. воздействии вибрации:.

1:3. Г. Морфология печени и ее основные функции:.:.:.:.:.

1.3.2. Структурные изменения в печени при воздействии вибрации:.—.

1.4 Влияние неблагоприятных;факторов на.систему мать-плод-потомство и критические период ывнутриутробного развития.

1;4:1 Влияние неблагоприятных факторов^среды на систему-мать-плодпотомство.

Г.4:2 Динамикашрёнатального развития: Критические периоды.

Глава 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

ИССЛЕДОВАНИЯ:.

2.1 Объект исследования.

2:2 Светооптический метод;.;.:.

2:3 Метод электронной микроскопии.;.

2.4 Метод!морфометрии;.:.

Глава 3. СОБСТВЕННЫЕ

ИССЛЕДОВАНИЯ;.;.

ЗЛ'Рёзультатьивлияния-вибрации навыживаемость плодов?крыс;.массу ш длину плодов:. —

З.ТШДанные массометрии печени беременных крыс, плодов и.потомков.в контрольиых группах и при воздействии вибрации с 9 но 18 день беременности.

3:2: Морфологияшечени беременных крыс и беременных крыс при воздействии вибрации с 9 по 18 день беременности:.

3.2:1 Данные световой микроскопии и морфометрии:.

3.2:2. Данные; электронной микроскопи и.

3:3 Морфология печени плодов беременных крыс и плодов беременных крыс при воздействии вибрации с 9 по 18 дни беременности.

3.3.1 Данные световой-микроскопии и морфометрии:.

3.3.2: Данные электронной микроскопии:.

3.4 Морфология печени потомков крыс с естественным развитием беременности и при воздействии вибрации с 9 но 18 дни беремен ности:.

3.4:1Данные световой микроскопии! и? морфометрии.

3:4:2'Данные электронной микроскопии.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Морфофункциональная характеристика печени матери, плода и потомства при воздействии вибрации промышленной частоты во время беременности"

Актуальность проблемы:. Человек в< отличие от животных не только пользуется природными ресурсами, но, и,,действуя; на нее целенаправленно й осознанно, господствует над ней; адаптируя условия к своим потребностям. Создание: вокруг себя искусственной? среды кардинально; отличает человека от других форм жизни/ Факторы искусственной- среды, оказывают на человека постоянное: влияние (Агаджанянг Н>.А., Торшин: ЩИ':.' 1994); Во многих отраслях промышленности и сельского хозяйства рабочие остаются: в сфере- хронического4 воздействия? вредных воздействий; производства (Артамонова; BtF.,1988)f. КС одному из: таких вредных производственных-воздействий относится- вибрационное воздействие: Даже в условиях, сокращениям виброопасных производств и вынужденных простоев на долю-вибрационной5 болезни приходится 25-26% от общего5 количества; хронических профзаболеваний (Потапов А.И., 2001; Измеров Н.Ф., 1997).

В последнее время, большое внимание уделяется изучению адаптационных возможностей' организма человека. Особую значимость» приобретает, рассмотрение влияния дестабилизирующих факторов на организм беременной женщины, развивающегося- плода и последующего потомства. Репродуктивное здоровье ;' определяется' как отсутствие: заболеваний' репродуктивной, системы, или нарушений репродуктивной функции- и возможность осуществлять процессы репродукции; при полном физическом; психическом : и социальном - благополучии- (Агаджанян Н.А., Торшин В .И. 1994). Репродуктивный период характеризуется активностью всех специфических функций организма женщины, направленных на деторождение. Состояние женского организма в этот период, а также особенности течения беременности и родов во многом зависят от эколого-производственных условий: жизни и труда (Баличева Д.В;, 1991). Беременность и материнство являются объектом изучения целого ряда- наук

Кнорре A.F., 1967): Особую роль приобретают данные необходимые для оценки последствий воздействия- вредных производственных факторов; Несомненно, что прогрессивное развитие: антенатальной медицины не может обойтись без комплекса экспериментальных и клинических сведений: о взаимосвязи в цепи: мать-плод-потомство и понимания? патогенеза ее нарушений; В связи- с этим: возникает особый интерес: к проблеме дестабилизирующего влияния вибрации на развитие- потомства и, в частности, на развитие и дальнейшее . формирование основного гомеостатического органа:-печени.

Поэтому изучение влияние вибрационногогвоздействия;на:развитие плода и здоровье потомства является особенно актуальным. Тем более, что на практике совершенствование и внедрение новых видов,- машин и оборудования, технологических средств с увеличенными, мощностями и скоростями создает предпосылки к возрастанию доли вибрации в комплексе факторов* производственной' среды, что повышает процент сталкиваемости женщин-работниц: с этим фактором: Корреляционно-регрессивный анализ заболеваемости мужчин и женщин показал, что степень влияния неблагоприятных- производственных факторов: в 2,5 - 4,5 раза больше на женщин, чем на мужчин (Баличива Д.В.,1988, 1991). Существует целый ряд «женских» . виброопасных профессий: Установлено, что общей технологической' вибрации подвергается': женский организм в животноводстве, при очистке и сортировке зерна. В промышленности работницы-вышивальщицы, использующие в технологическом процессе вышивки тамбурные машины» «Киев», «Полтава», испытывают вибрацию превышающую предельно допустимые уровни на 7,8 - 9,7 дБ и предельно допустимые дозы- в 5,5 - 9 раз, в зависимости от. рабочей позы, (Баличива Д-В., 1985).

В настоящее время не вызывают сомнения факты, свидетельствующие о том, что многие заболевания человека могут формироваться в течение внутриутробного периода (Тюрин Н.А., 1974, Ивановская Т.Е., 1976,

Рачинский С.В., Таточенко В.К., Капранов В.И., 1974, Исаков Ю.Ф., Тихонов Ю.А., 1974, Лелис И.И., 1970, Клиорин А.И., 1981), при этом характер и. выраженность отклонений в состоянии; здоровья плодаи новорожденного во многом-зависит от состояния здоровья материнского организма (Ивановская Т.Е., 1976).

Вибрация относится к факторам; обладающим большой биологической активностью; Характер, глубина и направленность функциональных сдвигов со стороны -различных систем- организма- определяется, прежде всего уровнями, спектральным .составом и продолжительностью воздействия вибрации, а также физиологическими свойствами тела, человека. Длительное влияние вибрации может приводить к стойким патологическим нарушениям в организме работающих, развитию вибрационной болезни (Тарасова JI.A. и др. 2000): Первое описание заболевания, этиологическим , фактором которого являлась призводственная вибрация, было дано Zoriga еще в 1911 г., но по-прежнему остаются актуальными вопросы ранней диагностики, лечения, прогнозирования и профилактики, профессионального отбора и профессиональной- пригодности- в «виброопасных» условиях. Многочисленными экспериментальными исследованиями (Сухаревская Т.М., 1990, 1994; Болотова Т.В.,1997 и др.) доказаны изменения практически во всех органах и тканях при* воздействии? вибрации, различных режимов и характеристик. Данные, литературы показывают развитие вибрационной болезни с позиций' адаптации организма к измененным условиям среды (Бутковская 3:М:,1990; Колесов?В^., 1995, 1991;. Сухаревская Т.М., 1991; Молоканов К.П., 1975, Налча И.Ф., 1971). Реакция организма на длительное воздействие, вибрационного? фактора как «хронического стрессорного фактора» подчиняется общебиологическим закономерностям и вызывает развитие ответных реакций органовш систем по типу общего адаптационного синдрома,(стресс по Селье). В связи с этим становится актуальным изучение биологического действия^ вибрации, как стрессирующего воздействия на одну из важнейших систем - репродуктивную, в модели мать-плод-потомство.

Цель исследования: выявить и охарактеризовать морфологические изменения в печени беременных крыс, печени их плодов и половозрелых потомков от этих крыс (отдаленные результаты) при экспериментальном воздействии вибрации частотой 32 гц и виброскоростью 50 м/с (промышленная вибрация категории За).

Задачи исследования:

1. Выявить влияние воздействия вибрации промышленной частоты на эмбриональную смертность у крыс.

2. Изучить воздействие вибрации промышленной частоты на печень крыс в период беременности.

3. Изучить воздействие вибрации промышленной частоты на печень плода.

4. Проанализировать отдаленные последствия (3-х месячные потомки)-влияния вибрации промышленной частоты.

Научная новизна результатов исследования:

Впервые получены данные о структурно-функциональных изменениях в печени беременных животных подвергавшихся воздействию вибрации, печени их плодов, печени потомков с антенатальным воздействием вибрации.

Впервые выявлены некоторые закономерности воздействия вибрации на развитие плода и дальнейшее потомство - увеличение общей эмбриональной смертности, отставание у потомков массы тела.

Практическое значение работы:

Изучено влияние вибрации промышленных частот на течение беременности, развитие плода и развитие потомства.

Полученные данные должны учитываться в женских консультациях при постановке- на учет беременных женщин и настораживать акушеров-гинекологов и педиатров из-за риска развития антенатальной патологии и патологии детского возраста.

Полученные данные рекомендованы к использованию в лекционном курсу на кафедрах, гистологии, морфологии человека, экологии.

Апробация материалов диссертации

Основные положения диссертации доложены и обсуждены на научной конференции с международным» участием посвященной 75-летию со дня рождения и 50-летию научно-педагогической деятельности академика РАМН Ю.И. Бородина «Проблемы лимфологии и интерстициального массопереноса» (Новосибирск, 2004), на ежегодной конкурс-конференции молодых- ученых и студентов «Авиценна 2002, 2003, 2004» (Новосибирск, 2002, 2003, 2004), международной конференции «Проблемы саногенного и патогенного эффектов5 экологического' воздействия на внутреннюю среду организма» (Чолпон-Ата, 2004). f

Положения выносимые на защиту:

1. Воздействие-вибрации промышленной частоты на крыс с 9 по 18 сутки беременности приводит к увеличению внутриутробной гибели плодов.

2. Воздействие вибрации промышленной частоты на крыс с 9 по 18 сутки беременности сопровождается значительными изменениями «структурного гомеостаза» в печени на тканевом, клеточном и субклеточном уровнях- (расстройства микроциркуляции - стаз и сладж-феномен в синусоидных капиллярах, лимфогенный отек; дистрофические изменения в гепатоцитах - жировая инфильтрация цитоплазмы, набухание митохондрий с дискоординацией крист).

3. Воздействие вибрации промышленной частоты на крыс с 9 по 18 сутки беременности приводит к «отставанию» тканевой дифференцировки в печени плодов (замедляется формирование балочного строения, замедляется формирование стенки кровеносных сосудов), расстройству микроциркуляции в виде сладж-феномена.

4. Воздействие вибрации промышленной частоты на крыс с 9 по 18 сутки беременности приводит к нарушению онтогенеза потомков (уменьшение массы тела и печени, уменьшение диаметра венозных сосудов печени, истончение эндотелиальной выстилки).

Заключение Диссертация по теме "Гистология, цитология, клеточная биология", Кузьменко, Дмитрий Борисович

выводы

1. Воздействие вибрации промышленной частоты на крыс с 9 по 18 сутки беременности приводит к увеличению внутриутробной гибели плодов.

2. Воздействие вибрации промышленной частоты на крыс с 9 по 18 сутки беременности сопровождается значительными изменениями «структурного гомеостаза» в печени на тканевом, клеточном и субклеточном уровнях (расстройства микроциркуляции - стаз и нарушение целостности эндотелиальной выстилки в синусоидных капиллярах, лимфогенный отек; дистрофические изменения в гепатоцитах - жировая инфильтрация цитоплазмы, набухание митохондрий с дискоординацией крист).

3. Воздействие вибрации промышленной частоты на крыс с 9 по 18 сутки беременности приводит к «отставанию» тканевой дифференцировки в печени плодов (замедляется формирование балочного строения, замедляется формирование стенки кровеносных сосудов), расстройству микроциркуляции в виде сладж-феномена.

4. Воздействие вибрации промышленной частоты на крыс в антенатальный период приводит к нарушению онтогенеза, которое проявляется и в половозрелом возрасте (уменьшение массы тела и печени, уменьшение диаметра венозных сосудов печени), повреждению эндотелиальной выстилки синусоидов печени (истончение выстилки, апоптоз, нарушение экзоцитоза), расстройствам микроциркуляции в печени (торможение капиллярного кровотока, сладж-феномен), дистрофическим изменениям в гепатоцитах (переполнение цитоплазмы гепатоцитов гликогеном).

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Кузьменко, Дмитрий Борисович, Новосибирск

1. Автандилов Г.Г Введение в количественную патологическую морфологию. -М.: Медицина, 1980. -216с.

2. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия. М.: Медицина, 1990. -383с.

3. Агаджанян Н.А., Торшин В.И. Экология человека. Избранные лекции. -М.: «КРУК», 1994.-256с.

4. Алехина Т.В., Теплова С.Н., Налимова Т.А.// Журнал Гиг.труда.- 1990.-N4.- С.51-52.

5. Анохин П.К. Узловые вопросы теории функциональной системы. М., 1980. 196с.

6. Андреева-Галанина Е.Ц., Дрогичина Э.А., Артамонова В.Г. Вибрационная болезнь. М.: Медицина, 1961. - 175с.

7. Андреева-Галанина Е.Ц. Вибрация и ее значение в гигиене труда. Л.: Медицина, 1956.- 190с.

8. Артамонова В.Г. Современные аспекты клиники вибрационной болезни от общих вибраций // Общая вибрация. Действие на организм и гигиеническое нормирование: Мат-лы международного совещания. М., 1985. - С. 112-116.

9. Артамонова В.Г. Современные проблемы вибрационной болезни // Вибрация, шум и здоровье человека: Сборник науч. трудов. Л., 1988. - С. 106-111.

10. Артамонова В.Т. Актуальные проблемы диагностики и профилактики профессиональных заболеваний // Медицина труда и промышленная экология, 1996. №5. - С. 4-6.

11. Артамонова В.Г., Кускова Л.В.//Гиг.труда.- 1991.- N4.- С. 18-20.

12. Артамонова В.Г., Кускова Л.В., Никон И.О. и др. Клинико-гигиенические аспекты ранней диагностики, лечения и профилактики вибрационной болезни // Материалы 7 Всеросийского съезда гигиенистов и санитарных врачей.-М., 1991.-С. 134-135.

13. Артамонова В.Г., Колесова Е.Б., Кускова J1.B. Некоторые современные аспекты патогенеза вибрационной болезни // Медицина труда и промышленная экология, 1999. №2. - С. 1-3.

14. Артамонова В.Г., Лагутина Г.Н. Вибрационная болезнь // Руководство по профессиональным заболеваниям / Под ред. академика РАМН Н.Ф. Измерова. М.: Медицина, 1996. - Т.2. - С. 141-162.

15. Артамонова В.Г. Актуальные проблемы прогнозирования профессиональных заболеваний // Тез. докладов 1 Всероссийского съезда профпатологов. Тольятти, 2000. - С. 103-104.

16. Артамонова В.Г., Шаталов Н.Н. Профессиональные болезни. М., 1988. -416с.

17. Архипенко В.И., Маленков А.Г., Гербильский Л.В. и др. Структура и функции межклеточных контактов,- Киев: Здорвья, 1982.- 168с.

18. Балан Г.М. // В кн.: Материалы 3 Всесоюзной конф. по борьбе с шумом и вибрацией. — Челябинск, 1980. С. 40-42.

19. Балан Г.М., Кушелевский С.Г. Определение содержания в крови ренина, альдостерона в крови при вибрационной болезни // Гигиена труда. 1987. -№3.-С. 23-26.

20. Балан Г.М. //В кн.: Материалы 3 Всесоюзной конф. по борьбе с шумом и вибрацией. — Челябинск, 1980. С. 40-42.

21. Баличева Д.В. Медико-биологические аспекты влияния вибрации рабочих мест на репродуктивную систему // Гигиена труда и профзаболеваний. Изд-во ТашГосМИ. - Ташкент, 1991. - С. 17-20.

22. Бекенева Т.И. Нарушение транскапиллярного обмена в патогенезе и клинике вибрационной болезни: Автореф. дис. . канд. мед. наук. -Новосибирск, 1974.-27с.

23. Бережков Н.В. Pit-клетки тканевая форма больших гранулосодержащих лимфоцитов с естественной киллерной активностью// Арх.анат., гистол. И эмбриол.- 1991.- Т.100, N3.- С.5-15.

24. Бобрик И.И., Шевченко Е.А., Черкасов В.Г. Развитие кровеносных лимфатических сосудов.- Киев: Здоровье, 1991.- 205с.

25. Боброва С.В. Патоморфологическое и клинико-эндоскопическое исследование желудка при вибрационной болезни: Автореф. дис. .канд. мед. наук. Новосибирск, 1997. - 25с.

26. Боброва С.В. Органы лимфатической системы при вибрационной патологии: Дис. .докт. мед. наук. Новосибирск, 2002. - 542с.

27. Болотнова Т.В. Вибрационная болезнь в условиях тюменского промышленного региона (региональные особенности, клеточно-мембранные механизмы патогенеза, лечение): Автореф. Дис. . докт. Мед. Наук. -Новосибирск, 1997. 50 с.

28. Буеверов А.О. «Жирная печень»: причины и последствия.// Практикующий врач. 2002. - №1. - С. 36-38.

29. Бутковская З.М. Изучение проблемы вибрации ручных машин в Санкт-Петербургском научно-исследовательском институте гигиены труда и профессиональных заболеваний // Медицина труда и промышленная экология.-2001.-№10.-С. 18-21.

30. Бутковская З.М., Соболева Г.И. Адаптационный процесс при воздействии вибрации // Актуальные вопросы проф. Патологии. М., 1990. - Т.1. - Вып. 42.-С. 78-83.

31. Вартанян JI.C., Рагиба Ю.Э., Каглер Л.Г. и соавт.// Бюлл. Эксперим. Биол. И мед. 1990. - Т. 109, №6. - С. 550-552.

32. Власов А.Д., Мурин Б.П. Единицы физических величин в науке и технике.- Справочник.- М: Энергоатомиздат.- 176с.

33. Вогулкина В.В., Каштанова E.JI. Профессиональная адаптация к вибрации, ранняя диагностика и профилактика вибрационной болезни // Актуальные вопросы проф. Патол. М., 1990. - Т.1. - Вып 42. - С. 127-128.

34. Волкова О.В., Елецкий Ю.К. Основы гистологии и гистологической техники. М.: Медицина. - 1971. - С. 243-254.

35. Войтюк В.П. Морфофункциональные и биофизические аспекты влияния вибрации на микрососудистое русло: Автореф. дис. . канд. биол. наук. -Новосибирск, 1987. 16с.

36. Голованева Г.В. Здоровье беременных женщин в городах с различной техногенной нагрузкой // Медицина труда и промышленная экология, 2002. -№8. С. 5-9.

37. Герасименко О.Н. Лейкоцитарно-эндотелиальные взаимодействия при сосудистых нарушениях у больных вибрационной болезнью: Автореф. дис. . канд. мед. наук. Новосибирск, 2000. - 19с.

38. Гоголева О.И., Малютина Н.Н. Механизмы нарушения гомеостаза, индуцированного стресс-вибрационным повреждением // Медицина труда и пром. Экол. 2000. - №4. - С. 20-24.

39. Гохберг С.Л., Расулев Н.И., Фрсланова Н.А. Влияние некоторых экстремальных воздействий на субмикроскопическую организацию печени крыс при отравлении четыреххлористым углеродом//Бюл.экспер.биол.и мед.-1978. -N9. -С.498-501.-С. 29-31.

40. Динерман А.А. Роль загрязнителей окружающей среды в нарушении эмбрионального развития. М.:, 1980. - 192 с.

41. Дыбан А.П., Пучков В.Ф., Баранов B.C., Самошкина Н.А., Чеботарь Н.А. Лабораторные млекопитающие: мышь Mus vuskulus, крысы Rattus norvegikus, кролик Oryctolatus cuniculus, хомячок criceous. Методы биологии развития.-М., Наука, 1974.-С. 505-566

42. Дыбан А.П., Пучков В.Ф., Баранов B.C. и др. Лабораторные млекопитающие // Объекты биологии развития. М.: Наука, 1975. - С. 505563.

43. Западнюк И.П. Лабораторные животные. Киев: Наука, 1974. - №2. - С. 109-114.

44. Западнюк И.П., Западнюк В.И., Захария Е.А. Лабораторное животноводство. Киев: Вища школа. - 1974. - С. 148-175.

45. Западнюк И.П. и др. Лабораторные животные. Киев: Вища школа. -1983.-380с.

46. Ивановская Т.И., Цинзерлинг А.В. Патологическая анатомия. М.: Медицина, 1976.-321с.

47. Измеров Н.Ф. Медицина труда на пороге 21 века // Медицина труда и промышленная экология. 2000. - №10. - С. 1-5.

48. Измеров Н.Ф. Несравненно легче настоящее здравие соблюсти, нежели потерянное сохранить // Мед. курьер. 2001. - №3-4. - С. 16-18.

49. Измеров Н.Ф., Денисов Э.М., Молодкина Н.Н., Радионова П.К. Методология оценки проф. риска в медицине труда // Медицина труда и промышленная экология. 2001. - №12. - С. 1-7.

50. Измеров Н.Ф., Панкова В.Б. Современные актуальные проблемы профпатологии // Актуальные вопросы профпатологии. — М.: 1990. Т.1. -Вып. 42. - С. 5-7.

51. Измайлов Д.В. Периферические гемодинамические нарушения и их лечение у рабочих виброопасных профессий: Автореф. дис. . канд. мед. наук. Самара, 1997. - 21с.

52. Исаков Ю.Ф., Тихонов Ю.А. Врожденные пороки периферических сосудов у детей. М.: Медицина, 1974.- С.5-14.

53. Клиорин А.И. Атеросклероз в детском возрасте .- Л.: Медицина.- 1981.-С.54-62.

54. Кнорре А.Г. Краткий очерк эмбриологии человека. «Медицина», 1967. -268 с.

55. Колесов В.Г. Функциональная диагностика доклинических проявлений вибрационной патологии // Актуальные вопросы проф. патологии. М., 1990. - Т. 1. — Вып. 42.-С. 125-126.

56. Колесов В.Г. и др. Особенности периферической и центральной гемодинамики при вибрационной болезни у рабочих горнодобывающей промышленности Восточной Сибири // Гигиена труда. 1985. - №10. - С.25-28.

57. Коломец В.В. О патофизиологической роли нарушений обмена кальция в развитии ангиодистонического синдрома в развитии вибрационной болезни // Гигиена труда. 1987. -№10. - С. 21-24.

58. Колесов В.Г., Лахман О.Л. Вибрационная болезнь у горнорабочих крайнего севера // Медицина труда и промышленная экология, 2001. №2. -С. 7-11.

59. Косых М.И., Коломина С., Ченцов Ю.С. Некоторые стректурно-функциональные свойства светлвх и темных гепатоцитов мышей// Биологические науки, 1990.- N7.- С.46-52.

60. Куприянов В.В., Бородин Ю.И., Караганов Я.Л., Выренков Ю.Е. Микролимфология. -М.: Медицина, 1983. -288с.

61. Лелис И.И. Красная волчанка.- Л.: Медицина, 1970. С.142-150.

62. Лабадзе П.Ф. Состояние некоторых функций печени и желудка при вибрационной болезни: Автореф. дис. . канд. мед. наук. Тбилиси, 1969. -17с.

63. Лосева М.И., Сухаревская Т.М., Бекенева Т.И. Вибрационная болезнь в условиях современного производства // Вибрационная болезнь в условиях современного производства. Новосибирск, 1980 - Т. 103. - С. 10.

64. Лосева М.И., и др. Кордафен и его клиническая эффективность при вибрационной болезни // Новости фармации и медицины. М., 1990. - №5. -С. 136-138.

65. Лоскутова З.Ф. Виварий. М.: Медицина. 1980. - 93с.

66. Мак-Мюррей У. Обмен веществ у человека: Пер с англ. м: Мир, 1980. -С. 274-317, 348-352.

67. Макаров В.Г.//В кн.: Воздействие физико-химических факторов внешней среды на организм и поддержание гомеостаза.- Л., 1988.- С.86-89.

68. Малинская Н.Н., Разумова И.К. О корреляции симптоматики вибрационной болезни со спектром вибрации // Гигиена труда. 1969. - №2. -С. 7-12.

69. Маянский Д.Н. Клетка Купфера и система мононуклеарных фагоцитов.-Новосибирск: Наука, 1981.-169с.

70. Маянский Д.Н., Виссе Э., Деккер К. Новые рубежи гепатологии.-Новосибирск, 1992.-246с.

71. Мельникова М.М. Вибрационная болезнь // Медицина труда и промышленная экология, 1995. -N 5. С. 36-41.

72. Минасян С.М. Функциональное состояние специфических и неспецифических структур мозга и симпатоадреналовой системы в условиях воздействия вибрации: Автореф. Дисс. . докт. Биол. Наук. Ереван, 1987. -47с.

73. Минасян С.М., Саакян С.Г., Адамян Ц.И. // Гиг.труда. 1991. - №2. - С. 28-30.

74. Молоканов К.П., Соколик Л.И. Влияние производственной вибрации на костно-суставную систему, М., 1975. 208 с.92.

75. Налча И.Ф. О сосудистых нарушениях и их патогенезе при вибрационной болезни // Сов. Медицина, 1971. №9. - С. 11-14.

76. Охнянская Л.Г., Никифорова Н.А., Николаева JI.H. К механизму действия вибрации на человека // Гигиена труда. 1987. - №1. - С. 27-29.

77. Поликар А. Молекулярная цитология мембран животной клетки и ее микроокружение.- Новосибирск: Наука, 1975.- 183с.

78. Потеряева. E.JL, Лосева М.И., Бекенева Т.И., Таранов А.Г. Нарушение гормональной регуляции в патогенезе вибрационной болезни // Медицина труда и промышленная экология, 2001. №9. - С. 10-12.

79. Потеряева Е.Л., Сухаревская Т.М., Головнев В.А, Гулюкина Т.В., Нестеров В.В., Вакулин Г.М. Морфофункциональные характеристики органных изменений при воздействии вибрации в эксперименте// Морфология и хирургия.- Новосибирск 1999.- С.151-154.

80. Потеряева Е.Л. Вибрационные висцеропатии в контексте системных микроангиопатий (патоморфогенез, особенности клиники, вопросы терапии): Автореф. дис. . докт. мед. наук. Новосибирск, 1999. - 52с.

81. Преображенский В.Н., Меркулов В.Н., Васильев А.Ю. и др. Особенности формирования патологии желчного пузыря и желчевыводящих путей под влиянием вибрации // Тер. архив. 1995. - №2. - С. 16-17.

82. Рамазанов Р.Г. Влияние общей вертикальной вибрации на морфологические и гистохимические особенности печени в условиях сбалансированного питания // Шум и вибрация : Труды Ленинградск. Сан. -гигиен. Мед. Ин-та. Т. 116. - 1977. - С. 30-31.

83. Рахимов Я.А., Сапин М.Р., Белкин В.Ш., Этинген Л.Е. Морфология внутренних органов при действии вибрации. Душанбе: Дониш, 1979. — 163с.

84. Рачев P.P., Ещенко Н.Д. Тиреоидные гормоны и субклеточные структуры.- М: Медицина, 1975. 200с.

85. Рачинский С.В., Таточенко В.К., Капранов Н.И. Муковисцидоз у детей.-М.: Медицина, 1974.- С.9-36.

86. Сайфутдинов А.И. Структурные изменения гепатоцитов белых крыс разного возраста при пребывании в условиях высокогорья.-Автореф.дисс.канд.мед.наук.- Новосибирск, 1994.- 20с.

87. Селье Г. Очерки об адаптационном синдроме: пер с англ.- Мосва. Медицина. 1960.

88. Секамова С.М., Бекетова Т.П. О функциональном значении темных и светлых клеток//Арх.пат.- 1975.-Вып.5.- С.57-64.

89. Серов В.В., Лапиш К.Морфологическая диагностика заболеваний печени.-М: Медицина, 1989. -336с.

90. Серова Л.В. Влияние неблагоприятных факторов среды на систему мать-плод // Успехи физиологических наук, 1999, том 30 № 3. - С.62-72.

91. Серова Л.В. Система мать-плод как объект для изучения механизмов физиологического действия несовместимости // Космическая биология. -1987. Т.21. - № 3. - С. 63-67.

92. Серова Л.В. и др. Показатели репродуктивной функции животных, характеристики плодов и плацент // Онтогенез млекопитающих в невесомости. М.,1988. С.71-74.

93. Серова Л.В.', Чальная Н.А. и др. Общее состояние животных. Масса тела органов // Онтогенез млекопитающих в невесомости. М., 1988. С. 38-39.

94. Серова Л.В. Влияние неблагоприятных факторов среды на систему мать-плод // Успехи физиологических наук, 1999, том 30 N 3. - С.62-72.

95. Склянов Ю.И. // Материалы по морфологии эпителиальных структур плаценты белой крысы в условиях физиологической беременности -Новосибирск, 1974.- 214с.

96. Склянов Ю.И. Взаимообусловленность структурных перестроек внезародышевых органов при гемохориальной плацентации: Автореф. дисс. . докт. мед.наук. Новосибирск, 1987. - 41 с.

97. Суворов Г.А., Артамонова В.Г. Современные аспекты этиологии, патогенеза, клиники и профилактики вибрационных болезней от локально вибрации //Вест. АМН СССР. 1992. -№ 1. - С. 28-32.

98. Суворов Г.А. и др. Проблемы локальной вибрации в гигиене труда // Гигиена труда. 1987. - №11. - С. 32-38.

99. Суворов И.М., Карпов В.А., Кормушина В.В. Состояние нейрогуморальной регуляции у больных вибрационной болезнью от воздействия локальной вибрации // Гиг. и санитария. 1985. - №2. - с. 75.

100. Суворов Г.А., Старожук И.А., Цейтлина Г.С., Лагутина А.В. Прогностическая оценка и риск развития вибрационной патологии от воздействия общей вибрации // Медицина труда и промышленная экология, 1996. -№12.- С. 1-5.

101. Сухаревская Т.М. Патогенез, клинические варианты и профилактика поражений сердца при вибрационной болезни от локального воздействия: Автореф. дисс. . докт. мед. наук. Новосибирск, 1990. - 47 с.

102. Сухаревская Т.М., Ефремов А.В., Непомнящих Г.И. Микроангиопатии и висцеропатии при вибрационной болезни. Новосибирск, 2000. - 238 с.

103. Тарасова Л.А., Комлева Л.М. Современные формы вибрационной болезни, клиника, варианты течения // Тезисы докладов 1 Всероссийского съезда профпатологов. Тольятти, 2000. - С. 283.

104. Тюрин Н.А. Бронхиальная астма у детей.- М.: Медицина, 1974.- С.7-16.

105. Уикли Б. Электронная микроскопия для начинающих. М., «Мир», 1975.-328с.

106. Усенко В.Р., Якубович Т.Г., Комаков В.Н. О механизме биологического действия вибрации // Вибрация, шум и здоровье человека: сборник науч. трудов.-Л., 1988.-С. 16-19.

107. Фактор В.М., Урываева И.В., Коган В.Г. Гетерогенность распределения цитохрома Р-450 в печеночной дольке, выявляемая при действии четыреххлористого углерода//Бюл.экспер.биол. и мед. 1979.- N4.C.364-366.

108. Хаджиев А.К.//Мед. Жернал Узбекистана.- 1982.-N6.- С.22-26. 118. Хаджиев А.К.//Мед. Жернал Узбекистана.- 1982.-N6.- С.26-28.119. ' Хлыстова З.С. Становление системы иммуногенеза плода человека.- М: Медицина, 1987.- 256с.

109. Хлюпина О.В. Перекисное окисление липидов в мембранах тромбоцитов у больных вибрационной болезнью: Автореф. дисс. канд. мед. наук. -Тюмень, 1995.-24с.

110. Хэм А., Кормак Д. Гистология. В пяти томах Москва, «Мир». 1983.

111. Челидзе П.В., Мантейфель В.М. Ультраструктура и возможная роль вакуолярного компонента ядрышек гепатоцитов.// Цитология. 1989. — 31, №1. - С. 23-28.

112. Шкурупий В.А. Количественное исследование ультраструктурной организации гепатоцитов печени интактных мышей в условиях острого отравления ССЬ4//Бюл.экспер.биол.- 1973.- N2.- с. 110-113.

113. Шкурупий В.А., Ультраструктура клеток печени при стрессе. Новосибирск, "Наука", Сибирское отделение, 1989., 143с.

114. Шубочкин А.И. Влияние вибрации на липидный состав мембранных структур клетки на фоне экспериментальной гиперхолестеринемии // Биохимия экспериментального атеросклероза. Куйбышев, 1981. - С. 14-18.

115. Щербак Б.И. Гигиеническая оценка поливини л ацетатных дисперсий // Автореферат дисс. на соиск. уч. степ, к.м.н. Кемерово, 1976. - 27 с.

116. Энгельгардт Н.В., Полторанина B.C., Лазарева М.Н., Перова С.Д., Глейберман А.С. Синтез и локализация а-фетопротеина при регенерации печени у мышей//Бюл.экспер.биол.и мед.- 1976. -N10.- С.1251-1254.

117. Якубович Т.Г., Полякова Т.И. Гистоавторадиографическое изучение влияния общей вибрации на уровень синтеза ДНК в островках Лангерганса белых крыс // Шум и вибрация: Труды Ленинградск. сан.-гигиен. Мед. Ин-та. 1977. - Т. 114.-С. 86-89.

118. Яньшина Е.Н. Психовегетативные и нервно-мышечные нарушения при вибрационной болезни от воздействия локальной вибрации: Дисс. . канд. мед. наук. М., 1998. - 123с.

119. Azuma Т., Ohashi Т. Pathogenesis of local circulatori in sufficiency in vibration disease // J. Jap. Coll. Angiol. 1980. - Vol.20. - №2. - P. 132-133.

120. Bankston P., Pino R.M. The development of the sinusoids of fetal rat liver: morphology endothelial cells, Kupffer cells and the transmular migration of blood cells into the sinusoids//Am.J.Anat.- 1980.- 159.- P.l-15.

121. Boel E.J., Nicholas J.S. 1939, цит. по: Азшавский B.A. Очерки no возрастной физиологии. - M.: Медицина, 1967. — С. 31-37.

122. Borredon J. Le phenomen de Raynhaud vibrationnel // Arch. Malad. prof. -1986.-Vol. 47.-№8.-P. 621-622.

123. Bucher N. Experimental aspects of hepatic regeneration// N.Engl.J.Med.-1967.-277.-P.686-696.

124. Campbell P.N. The Biosynthesis of proteins//Progr.Biophys. Mol.Biol.-1965.-15.-3.

125. Callea F., Desmet V. Transformation of fat-stouring cells (Ito-cells) to myofibroblasts//!. Hepatol.- 1985.-Vol.2-P.205.

126. Crotz M., Nyiteau M., Druga A., Hajdo E. Control data of Wistar rats// Teratology.- 1995.-V.5 l.-№6.-P.-34-50.

127. Dasgupta A.K., Harrison J. Effects of vibration on the hand-arm system of miners in Jndia I I Occup. Med. Oxf. 1996. - Vol.46. -№1. - P. 131-152.

128. Deninger M.N.// Pathol. Biol. 1999. - 47, №9. - P. 1006-1015.

129. Dimmeler S., Rippmann V., Weiland U., Hendeler J., Zeiher A.M. Circ.Res. -1997. 81, №6. - C. 970-976.

130. Famer R. Occupational diseases due vibration to pneumatic picks and drille. Pathologic professional^ proveques paries vibratione des marteaus-piquere et du perforatrices // Arch. Malad. prof. 1976. - Vol. 37. - №10. - P. 739-760.

131. Freudenberg N., Freudenberg M.A., Hoess C.D. et all. Investigation into the origin off moise liver sinusoidal cells// Virch.Arch.(abt.A).path.Anat.- 1986.-Vol.410.- P.1-7.

132. Fudjita Т., Kashimura M. Reticulo- endothelial system rewiewed by SEM.Scaning Electron Microscopy. Cell. Biol.and Med.Proc.Int.Symp. Kyoto. 1980.- P.159-171.

133. Futatsuka M., Pyyrro L. Вllod pressure flow and peripheral resistance of digital arteries in vibration syndrome // Britan. J. industr. Med. 1983. - Vol. 40. -№4.-P. 434-441.

134. Heath Т., Jowden S. Pathways of interstitial fluid and limph flow in the liver acinus off the sheep and moise.// J. Anat. 1998. - 192, №3. C. 351-358.

135. Ito Т., Nemoto M. Uber die Kupfferschen sternzellen und die "Fettspiecherungszellen" in der Blutkapillarenwand der menschlichen liber// Okajimas Folia Anat.Japan.-1952.-Vol.24.-P.243-258.

136. Johnson W., Nohria A., Janz P., Creager M.A. Amer. J. Phisiol.- 2002. 283, №2.-P. 568-575.

137. Jones R.A., Summefield J.A.// Liver biology and pathobiology.-N.Y.:Raven Press, 1982.-Ch.2.-P.507-523.

138. Kaneda K., Wake K. Pitcells in extrahepatic organs of the rat// Anat.Rec.1985.- Vol.211, N2.- P. 192-197.

139. Kaneda K., Yona I., Sumi Y. et all. Kupffer cell Pit cell contact ant granuloma formation in the liver by mycolic acid-contaiining glycolipids from nocardia rubra// In: Cell of the hepatic sinusoid. Rijswijk, Kupffer cell foundation,1986.- P.421-426.

140. Krones A., Keithmann Т., Jungermann К.// FEBS Lett. 1998. - 421, №2. -P. 136-140.

141. Leser H.G., Holstage A., Gerots W. Jn: Cells of the Hepatic sinusoid Vol. 2. -Eds. Wisse E., Knook D., Decker K. Kupffer cell found. - 1989, P. 257-259.

142. Louhe A. Die arterielle obliterierende angiopathic der Finger beim Vibrations-Syndrome // Radiologic. 1985. -Bd. 25. -№12. - S. 582-586.

143. Milloning G. Advantages of phosphate buffer for 0s04 solution in fixation// J.Appl.Phisiol.- 1961.- V.32.-N3.-P.1637-1639.

144. Mine S., Jabata J., Wada Y., et all.// Atherosclerosis. 2002. - 160, №2. - P. 281-288.

145. Motta P. A scanning electron microscopic study of the rat liver sinusoid: endothelial end Kupffer cells.- Cell. Tissue Res, 1975, vol.164, N3, p.371-385.

146. Novikoff P. Intracellulars and lipoprotein metabolism in normal1 and fatty livers//The liver: biology and pathology. New York, 1982.- P.-143-168.

147. Okada A., Inaba R., Furuno T. et al. Usefuiness of blood parameters, especially viscosity of the hand-arm vibration syndrome // Scand. J. Work. Environ .and Health.- 1987.-Vol. 13. №4.-P. 358-362.

148. Okada J., Inaba R., Furuno T. Occurrense of intimal thickening of the peripheral arteries in response to local vibration // Brit. J. Industr. Med. 1987. -Vol. 44. - №7. - P. 470-475.

149. Olas В., Wachowies В.//Post. biol. 2003. - 30, №2. - P. 325-337.

150. Paronetto F. Cell-mediated immunity in liver deseaes// Numan pathology.-1986.- Vol.17, N2.- P.168-178.

151. Pfeifer U.//Actabiol.Med.Derm.- 1978a.- V.40, N10.- P.1619-1624.

152. Pfeifer U.//J.cell boil.- 1978b.-V.78, N1.-P152-167.

153. Rappaport A.M. The microcirculatory hepatic unit/ Adv.Microcirc., 1975.

154. Rappaport A.M., Borowy Z.} Lowgheed W. a. Lotts W. Subdivision of hexagonal liver lobules into a structural and functional unit// Anat.Rec.- 1964.-Vol.ll9.-P.ll-33.

155. Reunolds E.S. The use of lead citrate at high pH as an elctronopaque stain in electron microscopy // J. Cell. Boil. 1963. - V. 17. - N2. - P. 208-212.

156. Romani W. Т., et all. // Atherosclerosis. Thrombosis and Vase. Biol. 2003. -23, №5.-P. 755-761.

157. Sixma I.I., M Groot Ph. G. Platelet adhesion to the vissel wall. Coagul. And Blood Transfus.: Pru. 15-th Anat. Symp. Blood Tranfus. Gronignen., 1991. P. 125-134.

158. Small J.-V., Rottner K., Hahne P., Anderson К. I. Microsc. Res. And Tehn. -1995.-47,№1.-P. 3-17.

159. Starck Y., Farkkila M. Vibration syndrome and vibration in pedestal grinding // Brut. J. Industr. Med. 1983. - Vol.40. - №4. - P. 426-439.

160. Takemasa Т., Yamaguchi Т., Yamamoto I., Sugimoto K., Yamashito K. Eur. J. Cell Biol. 1998. - 77, №2. - C. 91-99.

161. Wagner D.D., Olmsted I.B., Marder V.J. Immunolocalisation of von Villebrand protein in Weibell-Pallade bodies of human endothelial cells// J. Cell.biol.- 1982.- V.95.- P.355.

162. Wisse E.} Daems W.Th. Fine structural study on sinusoidal lining cells of rat liver//In: Mononuclear fagocites. Oxford, Blackwell.- 1970.- P.200-215.

163. Wisse E.//J. Ultrastructure Res/- 1972.- Vol.38, N5-6. -P.528-562.

164. Yokooi Y., Namihisha A.T., Curoda H., Komatsu J., Miyazaki A., Watanabe S., Jsui K. Immunocytohemical detection of desmin in fat-storing cells (Ito-cells)//Hepatology.-1984.-Vol.4. P.709-714.