Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Морфо-функциональное состояние костной ткани, коры надпочечников и иммунокомпетентных органов при введении препаратов гидроксиапатита

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Морфо-функциональное состояние костной ткани, коры надпочечников и иммунокомпетентных органов при введении препаратов гидроксиапатита"

На правах рукописи

СУНДУКОВА НАТАЛЬЯ ВЛАДИМИРОВНА

МОРФО-ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ КОСТНОЙ

ТКАНИ, КОРЫ НАДПОЧЕЧНИКОВ И ИММУНОКОМПЕТЕНТНЫХ ОРГАНОВ ПРИ ВВЕДЕНИИ ПРЕПАРАТОВ ГИДРОКСИАПАТИТА

03 00 13-физиология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

А/

/

о

Самара - 2007

003163092

Работа выполнена в Самарском государственном университете

Научный руководитель доктор биологических наук, профессор Подковкин Владимир Георгиевич

Официальные оппоненты

доктор биологических наук, профессор Козупица Геннадий Степанович, кафедра физвоспитания и спорта, «Самарская государственная академия путей сообщения»,

профессор Зайцев Владимир Владимирович, заведующий кафедрой физиологии и биохимии сельскохозяйственных животных ГОУ ВПО «Самарская государственная сельскохозяйственная академия»

Ведущая организация ГОУ ВПО «Ульяновский государственный университет»

Защита состоится " 2007 г в -У^ часов на заседании

диссертационного совета К212 718 02 в Самарском государственном университете по адресу 443011, г Самара, ул академика Павлова, 1

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Самарского государственного университета

Автореферат разослан

Ученый секретарь диссертационного совета

Ведясова О А

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность проблемы. Основными причинами заболеваний опорно-двигательной системы являются нарушения обменных процессов в организме, сопровождающиеся деструкцией костной ткани Процессы метаболизма последней обеспечиваются сложными взаимосвязанными механизмами регуляции, существенное значение среди которых имеют центральные механизмы, в частности, система "гипоталамус-гипофиз" В связи с этим актуальным представляется поиск возможностей управления регенерацией костной ткани на системном уровне В литературе появились экспериментальные данные демонстрирующие остеогенные свойства синтетического кальций-фосфатного соединения - гидроксиапатита - и биосовместимых материалов на его основе Введение гидроксиапатит-содержащих препаратов может являться одним из способов управления физиологической регенерацией соединительной ткани

Существенным недостатком ранее выполненных исследований является отсутствие системного подхода в изучении нормализации костного ремодели-рования на уровне организма Недостаточное внимание уделено изменениям со стороны эндокринной системы и их влиянию на минеральный обмен и метаболизм коллагена при использовании ГАП

В ЦНИЛ СамГМУ предложен и запатентован новый способ получения гидроксиапатита путем выделения его непосредственно из костной ткани (Во-лова Л.Т, Подковкин ВГ, 2001) Разработан способ стимуляции остеогенеза помощью данного препарата (Волова Л Т и соавт , 2003) Получены данные о высокой остеоиндуктивной активности ксеногенного гидроксиапатита (Власов и соавт, 2002) При этом было обнаружено, что ксеногенный препарат вызывает образование соединительнотканной капсулы в месте введения (Власов М Ю , 2003), это может свидетельствовать о его иммуногенных свойствах Предполагается, что гидроксиапатит, органического происхождения обладает большей биосовместимостью по сравнению с искусственными препаратами

Цель исследования Разработать технологию производства гидроксиапатита, обладающего выраженными остеоиндуктивными свойствами в сочетании с низкими антигенными характеристиками материала и произвести в эксперименте комплексную оценку реакции организма при эктопическом введении данного препарата

Основные задачи исследования

1 Усовершенствовать технологию выделения минерального компонента из костной ткани и проанализировать химический состав полученного препарата

2 Исследовать влияние внутримышечных инъекций гидроксиапатита на функциональное состояние коры надпочечников, периферических органов иммуногенеза, морфо-функциональное состояние и метаболизм костной ткани

3 Проанализировать физиологическую реакцию организма животных на введение минерального компонента костной ткани в условиях экспериментальной модели усиления резорбции костной ткани

4 Выявить особенности физиологической реакции организма животных на введение минерального компонента костной ткани с повышенным содержанием магния

Научная новизна

Усовершенствована технология получения минерального компонента костной ткани и проанализирован химический состав полученного препарата

Установлено, что введение минерального компонента костной ткани не вызывает у животных существенных морфологических изменений периферических органов иммуногенеза - селезенки и лимфатических узлов, что свидетельствует об отсутствии у изучаемого препарата иммуногенных свойств Изменения функционального состояния коры надпочечников не являются стрессовой реакцией

Доказано, что введение гидроксиапатита уменьшает деминерализацию кости, включая потери ряда микроэлементов в условиях искусственного усиления костной резорбции с помощью многократного термического воздействия

Выявлено усиление остеогенеза при увеличении концентрации магния в препарате минерального компонента костной ткани, вводимого животным на фоне повышенной температуры окружающей среды

Теоретическое и практическое значение работы. Результаты исследований дополняют современные представления о системной реакции организма на введение минеральных компонентов костной ткани

Установлено, что реакция организма на инъекции гидроксиапатита носит комплексный характер и включает физиологические изменения ряда систем функционального состояния гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы, морфо-функционального состояния и метаболизма костной ткани, перекис-ного окисления липидов

Выявлены особенности реакции гипоталамо-гшюфизарно-надпочечниковой системы, изменения метаболизма коллагена и минерального обмена костной ткани после введения различных по составу препаратов гидроксиапатита в условиях искусственной стимуляции резорбции костной ткани в эксперименте

Полученные данные дают дополнительное физиологическое обоснование для применения препаратов на основе минерального компонента костной ткани при лечении остеопороза и других заболеваний опорно-двигательного аппарата Усовершенствована технология получения гидроксиапатита из костной ткани, сходного по составу с минеральным компонентом кости и низкими антигенными свойствами На его основе созданы новые препараты, эффективность которых подтверждена в эксперименте В дальнейшем предполагается их использование в практическом здравоохранении в комплексном лечении остеопороза Установлено, что внутримышечное введение этих материалов не вызывает отрицательных сдвигов в состоянии гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы, периферических органов иммуногенеза, исследо-

ванных показателей метаболизма костной ткани, перекисного окисления липи-дов

Основные положения, выносимые на защиту

1 Однократные инъекции гидроксиапатита на фоне многократного термического воздействия вызывают изменения метаболизма костной ткани, свидетельствующие об активизации остеогенеза Эти изменения не выходят за пределы физиологической нормы

2 Введение гидроксиапатита компенсирует минеральный дефицит, возникающий при повторяющихся тепловых воздействиях

3 Изменения гормональных показателей гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы после внутримышечной инъекции гидроксиапатита характерны для физиологической реакции организма животных, не носящей характер стрессовой

4 Морфологические исследования периферических органов иммуногенеза при внутримышечных инъекциях гидроксипатита не свидетельствуют о наличии у исследуемого препарата иммуногенных свойств

Апробация работы. Апробация работы проведена на кафедре биохимии Самарского государственного университета Материалы диссертации доложены на итоговых научных конференциях Самарского военно-медицинского института (Самара, 2005 - 2007), на 3-й международной научно-практической конференции Тамбовского государственного технического университета (Тамбов, 2007) и на научно-практической конференции Тольяттинского государственного университета (Тольятти, 2007)

Публикации По теме диссертации опубликовано 6 научных работ

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 136 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания использованных методов, результатов собственных исследований, анализа и обсуждения полученных данных, выводов, списка цитированной литературы и приложения Работа содержит 38 рисунков и 20 таблиц Список литературы включает 168 источников, в том числе 82 зарубежных

Эксперименты на животных выполнены на базе ЦНИЛ СамГМУ

вписок использованных сокращений ГАП - гидроксиапагиг

ГГНС - гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковая система 11-ОКС - 11-оксикортикостероиды

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Исследования проведены на 150 белых беспородных половозрелых крысах-самцах массой 150-200 г Схема экспериментов представлена в таблице 1

Таблица 1

Схема экспериментов

№ серии Срок Ко-

Условия экс- Группы животных экспе- личе-

перимента римента ство живо тных в группах (П)

1 Ежеднев- - Нагрев (70 иС 10 минут) 7 16

ное тепловое - Контроль и 12 16

воздействие дней

2 Ежеднев- - ГАП рН 12 костной ткани крыс 12 8

ные тепловые - ГАП рН 5 ^ дней

воздействия 8

на фоне од- - ГАП рН 7 8

нократных -ГАПрН 10 крупного 8

внутримы- - ГАП рН 12 рогатого 8

шечных инъ- - ГАП рН 5 не прокаленный скота 8

екции ГАП -ГАПрН 5 - ГАП рН 5 обогащенный магнием - ГАП рН 5 искусственный - ГАП рН 5 осажденный карбонатом - смесь ГАП рН 5 и рН 12 - ГАП рН 5 удвоенное количество - ГАП рН 5 костной ткани крыс - Контроль 7 дней 7 дней 8 8 8 8 8 8 8 16

3 Однократ- - ГАП рН 5 крупного рогатого скота 12 8

ные внутри- дней

мышечные - Контроль 8

инъекции

ГАП

Все опытные животные были разделены на 3 основные группы, соответствующие следующим сериям экспериментов

1 Изучение функции коры надпочечников, показателей обмена костной ткани и морфо-функционального состояния бедренной кости после однократных внутримышечных инъекций суспензии ГАП

2 Моделирование усиления процесса костной резорбции у животных в лабораторных условиях с помощью повышенной температуры

3. Изучение активности коры надпочечных желез, показателей обмена костной ткани и морфо-функционального состояния бедренной кости после повторяющихся тепловых воздействий и однократных внутримышечных инъекций препаратов ГАП

Для воспроизведения усиленной резорбции костной ткани использовали экспериментальную модель, разработанную в ЦНИЛ СГМУ Она заключается в ежедневном воздействии на животных горячего воздуха с температурой 70 °С в течение 10 минут Температурному воздействию крыс подвергали 7 и 12 суток

В эксперименте осуществлялась комплексная оценка функционального состояния ряда систем организма животных, имеющих отношение к регуляции морфо-функционального состояния костной ткани Для оценки реакции ГГНС в условиях введения исследуемых препаратов нами определялись относительная масса надпочечника и концентрация 11-ОКС в плазме крови, ткани надпочечника и печени животных Определение глюкокортикостероидов проводили по методу Ю А Панкова, И Я Усватовой, в модификации В Г Подковкина (Под-ковкин В Г, 1988) на флуориметре БИАН-130

Для исследования морфо-функционального состояния костной ткани определяли относительную массу бедренной кости

Для оценки процессов деминерализации костной ткани условиях искусственно вызванной костной резорбции определяли содержание кальция, а также серебра, кобальта, хрома, меди, цинка, ртути, железа и магния в золе кости, полученной после сжигания в муфельной печи при температуре 750 °С Минеральные элементы определяли атомно-абсорционным методом (Ермаченко JI А, 1997) на приборе фирмы"Vanan" SpectrAA 200 с помощью гидридной приставки VGA 77

Состояние метаболизма коллагена костной ткани оценивали по содержанию свободного и белковосвязанного оксипролина в реакции с п-диметиламинобензальдегидом, образующим с аминокислотой окрашенное соединение (Крель А А , Фурцева JI Н, 1968)

Морфологические проявления костной резорбции выявляли в препаратах бедренных костей животных Срезы толщиной 4-5 мкм готовили на роторном микротоме Окраска гематоксилин-эозином по Майеру (Меркулов Г А , 1969)

Реакция периферических органов иммуногенеза на введение препаратов ГАП оценивалась по %-ному соотношению лимфоидных фолликулов с активными центрами к общему числу фолликулов лимфатических узлов и селезенки животных

Процессы антиоксидантной защиты в условиях повторяющихся тепловых воздействий и инъекций препаратов ГАП исследовали в печени по уровню

МДА и каталазы Концентрацию МДА определяли по реакции с 2-тиобарбитуровой кислотой, в результате которой образуется окрашенный комплекс (Стальная И Д , Гаришвили Т Г , 1977) В гомогенатах печени определяли активность каталазы (Королюк М А с соавт, 1988)

Полученные в экспериментах результаты подвергали статистической обработке стандартным способом, используя I критерий Стьюдента (Фролов Ю П, 1996) Изменения исследуемых показателей считались статистически значимыми при р<0,05

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

1 Получение биосовместимых препаратов ГАП с низкими антигенными

свойствами

Исходя из цели работы, на первом этапе мы усовершенствовали метод получения ГАП путем нейтрализации деминерализатов костной ткани животных и снижения его антигенности за счет сжигания примесей органических веществ в муфельной печи Преимущества данного способа получения заключаются в значительной дешевизне производства по сравнению с синтетическими аналогами ГАП Использованный в наших экспериментах ГАП содержит кальций, магний, железо, серебро, кобальт, хром и цинк в соотношении, близком к составу минерального компонента кости, что является немаловажным фактом, поскольку микроэлементы необходимы для нормального протекания многих физиологических и биохимических процессов Результаты представлены в таблице 2

Таблица 2

Содержание микроэлементов в образцах ГАП, полученных из компактной

костной ткани, мг/г

Источник получения Микроэлементы

Ag Со Сг Fe Mg Zn Hg

Человек 0,02 0,024 0,02 0,013 3,2 0,13 0,22

Крыса 0,01 0,02 0,011 0,03 2,7 0,34 0,106

Свинья 0,012 0,019 0,011 0,017 3,5 0,82 0,076

Крупный рогатый скот 0,014 0,02 0,014 0,009 2,8 0,64 0,162

С целью снижения антигенных свойств ГАП мы прожигали его в муфельной печи при температуре 400 °С и 750 °С в течение 5 часов Влияние высокой температуры не сказывалось на содержании серебра, кобальта, хрома, магния,

цинка и ртути в образцах ГАП (таб 3), поэтому в дальнейшем для инъекций нами использовался ГАП, обработанный в муфеле при температуре 750 °С в течение 5 часов

Таблица 3

Содержание микроэлементов в образцах ГАП, полученных из костной ткани человека, после деминерализации в течение одних суток и последующего обжига в муфельной печи, мг/г

Условия получения Микроэлементы

Ag Со Сг Fe Mg Zn

400иС 0,010 0,021 0,008 0,026 1,800 0,016

750иС 0,010 0,019 0,009 0,026 1,700 0,014

Без прокаливания 0,010 0,011 0,008 0,020 1,300 0,011

Данные, по содержанию микроэлементов демонстрируют незначительные отличия в образцах ГАП, полученных из костной ткани человека и животных, осаждаемого при разных значениях рН (таб 4)

Таблица 4

Содержание микроэлементов в образцах ГАП, полученных из костной ткани человека, осажденные при разных значениях рН, после деминерализации в течение одних суток, мг/г

Условия получения Микроэлементы

Ag Co Cr Fe Mg Zn

pH 5 0,009 0,023 0,007 0,030 1,830 0,037

pH 7 0,010 0,023 0,006 0,032 1,300 0,026

pH 10 0,011 0,021 0,008 0,038 1,700 0,016

pH 12 0,009 0,025 0,007 0,029 2,760 0,096

Получение ГАП при различных значениях pH ведет к избирательному осаждению тех или иных микроэлементов, которые, в дальнейшем, могут неспецифически влиять на обменные процессы (Уильяме Д, 1998, Nielsen FH, 1992, Pallares I еа, 1996, Campos MS еа, 1998), поэтому следующий этап

наших исследований был направлен на изучение влияния однократных инъекций ГАП на организм животных.

2. Влияние инъекций ГАП на морфо-функциональное состояние костной ткани, коры надпочечников и механизмы антиоксидантной защиты

При исследовании реакций организма на введение полученного нами препарата ГАП обращает на себя внимание отсутствие каких-либо отрицательных изменений исследуемых нами систем. Реакция ГГНС характеризовалась некоторой активизацией функции коры надпочечников. Это проявилось в увеличении уровня 11-ОКС в надпочечниках и плазме крови животных (рис. 1) при возрастании относительной массы желёз. Статистически значимых изменений содержания гормонов в печени не выявлено. Наблюдаемые изменения характерны для адаптивной реакции организма на слабые раздражители и не свидетельствуют о развитии стрессовой реакции.

95,00 70,00 45,00 20,00 -5,00 % -30,00 -1

110,37*

-25,31

Печень

Плазма

53,54*

| И инъекции ГАп] Надпочечник

Рис. 1. Влияние инъекций ксеногенного ГАП рН 5 на функцию коры надпочечников (в % от контроля) - отличия достоверны по сравнению с контролем (р< 0,05)

Обращает на себя внимание отсутствие существенных морфологических изменений периферических органов иммуногенеза - селезёнки и лимфатических узлов. Это даёт основание считать, что исследуемый препарат не обладает иммуногенными свойствами. Наши исследования выявили увеличение относительной массы нативной бедренной кости на 43,12% через две недели после однократной внутримышечной инъекции ксеногенного ГАП, осажденного при рН 5. Внутримышечное введение препарата способствует развитию компенсаторных реакций в ответ на кратковременное повышение уровня кальция в крови. Известно, что С-клетки щитовидной железы реагируют на изменение концентрации ионов кальция в крови выделением кальцитонина, который снижает активность лизосомальных ферментов остеокластов. Кроме того, угнетается секреция паратиреоидного гормона при введении в организм

секреция паратиреоидного гормона при введении в организм кальция. Реализация данного механизма может способствовать стимуляции остеогенеза.

Показателем активизации механизмов антиоксидантной защиты стало достоверное возрастание каталазной активности в печени на 258,25% и незначительное увеличение концентрации МДА при внутримышечных инъекциях ксеногенного ГАП.

3. Морфо-функциональное состояние костной ткани в условиях стимуляции

резорбции

В целях исследования влияния созданных нами препаратов ГАП на процессы костной резорбции и стимуляции остеогенеза, мы использовали ранее разработанную в нашей лаборатории модель усиления резорбции костной ткани с помощью воздействия горячего воздуха (Власов М.Ю., 2003, Грибкова О.В., 2005). Авторы показали, что усиление резорбции костной ткани происходит вследствие усиления стрессовых воздействий гипертермии, вызывающей активизацию функции коры надпочечников, в результате чего происходит выделение глюкокортикоидов надпочечниками. Гормоны вызывают изменение активности остеокластов в костной ткани. Изменения функции коры надпочечников имели волнообразный характер (Иванов Д.Г., 2007). В группе, подвергавшейся тепловому воздействию в течение 12 суток, мы выявили достоверное уменьшение относительной массы нативной бедренной кости на 13,37% по отношению к контролю. Морфологически активизация резорбции костной ткани проявилась в расширении гаверсовых каналов за счёт рассасывания их костных стенок, истончении костных балок спонгиозы, увеличении количества остеокластов. Нам удалось выявить, что ежедневно повторяющиеся температурные нагрузки способствовали деминерализации костной ткани (рис. 2, 3). о ■

-5 -10 -15 -20 -25 % -30

-12,01

-24,87*

Ag

■

-10,97

-16,1*

-19,58 ■И -21,82*

Со Сг

□ 7 суток Ш12 суток

Рис. 2. Влияние длительности температурных воздействий на содержание серебра, кобальта и хрома в костной ткани (% от контроля) - отличия достоверны по сравнению с контролем (р< 0,05)

После 7 дней теплового воздействия в пересчёте на единицу массы на-тивной кости концентрация кальция снизилась на 35,92% и магния - на 27,65%. После 12 дней термических воздействий отмечалось достоверное снижение содержания железа и магния, а также серебра, кобальта, хрома и цинка.

Наши исследования выявили активизацию процессов остеогенеза (рис. 4) и антиоксидантной защиты (статистически значимое увеличение активности каталазы на 44,31% по сравнению с контролем) после 7 суток ежедневных тепловых воздействий.

_!Ш_

-20 -25

% -35

-77/К*

-23,64*

-33,7*

Бе

□ 7 суток ПО 12 суток

Ъа.

Рис. 3. Влияние длительности температурных воздействий на содержание железа, магния и цинка в костной ткани (% от контроля) - отличия достоверны по сравнению с контролем (р< 0,05)

60 50 40 30 20 10 о -10 -20 -30

Оксипролин свободный

51,10* 50,30*

И

-26,60

Оксипролин связанный

0 7 суток в 12 суток

Рис. 4. Влияние длительности температурных воздействий на содержание свободного и белковосвязанного оксипролина в плазме (в % от контроля) *- отличия достоверны по сравнению с контролем (р< 0,05)

Результаты исследований показали, что температурные воздействия слабо отражаются на содержании первичных продуктов перекисного окисления ли-пидов в печени, поэтому можно говорить о сохранении антиоксидантных свойств, спустя 7-12 суток температурных воздействий.

4. Морфо-функциональное состояние костной ткани, коры надпочечников, иммунокомпетентных органов и механизмов антиоксидантной защиты в условиях введения препаратов ГАП

Дальнейшие исследования ставили своей целью выявление особенностей влияния препаратов ГАП на процессы костной резорбции. Несмотря на наличие обширных литературных данных по применению подобного рода препаратов, физиологические и биохимические аспекты проблемы остаются не выясненными. Именно поэтому, в наших исследованиях была предпринята попытка выявить изменения не только в метаболизме костной ткани, но и изменения со стороны ГГНС, а также в уровне процессов перекисного окисления при введении препаратов ГАП.

Повторяющиеся тепловые нагрузки в сопровождении инъекций ксено-генного ГАП рН 5 вызывали изменения реакции ГГНС, носившие волнообразный характер, что согласуется с ранее выполненными исследованиями (Иванов Д.Г., 2007). На седьмые сутки теплового воздействия отмечалось снижение уровня гормонов коры надпочечников. Спустя двенадцать суток воздействия выявлено возрастание данного показателя в крови, характеризующее стимуляцию функции коры надпочечников.

При введении ГАП отмечалось уменьшение морфологических проявлений резорбции костной ткани и потери минеральных компонентов, из которых сохранялось только слабовыраженное снижение уровня кальция (рис. 5).

-21,65*

ЕЗ 7 суток

Ш 7 суток и инъекции ксеногенного ГАП

прокаленного И 7 суток и инъекции не прокаленного ГАП (рН 5)

Рис. 5. Влияние инъекций ГАП на содержание кальция и магния в костной ткани животных, подвергшихся температурным нагрузкам - отличия достоверны по сравнению с контролем (р< 0,05)

Процессы деминерализации костной ткани в группе животных подвергавшихся воздействию температурного фактора в течение 12 суток на фоне инъекций аллогенного ГАП, осажденного в щелочной среде, характеризовались не значительным снижением относительно контроля содержания магния, серебра, хрома, железа, цинка и кобальта (рис.6,7).

5 52 -0,62

-14,05

-И оп* -21,80*

-33,70*

П 12 суток И 12 суток и инъекции аллогенного ГАП (рН 12)

Лй Сг Ре

Рис. 6. Влияние температурных воздействий в течение 12 суток и инъекций аллогенного ГАП (рН 12) на содержание серебра, хрома и железа в костной ткани (% от контроля) - отличия достоверны по сравнению с контролем (р< 0,05)

| 3,27

1 -23,60*

-5,49

-15,70 * -16,10*

-33,20* 0 12 суток И 12 суток и инъекции аллогенного ГАП (рН 12)

Ме со гп

Рис. 7. Влияние температурных воздействий в течение 12 суток и инъекций аллогенного ГАП (рН 12 ) на содержание магния, кобальта и цинка в костной ткани (% от контроля) - отличия достоверны по сравнению с контролем (р< 0,05)

Об усилении механизмов антиокисидантной защиты свидетельствует увеличение активности каталазы в печени (174,93%), что вполне коррелирует с повышенным содержанием МДА относительно контроля.

В последующих экспериментах изучались свойства ксеногенного ГАП, осаждённого в кислой, щелочной, сильнощелочной и нейтральной среде. Все четыре препарата ГАП влекли за собой реакцию гипоталамо-гипофизарной системы (рис. 8).

90

65

40

15

-10

-35 -60

Рис. 8. Влияние ежедневных тепловых нагрузок и инъекций ксеногенного ГАП, осаждённого при разных значениях рН, на уровень 11-ОКС (% от контроля) * - отличия достоверны по сравнению с контролем (р< 0,05)

Полученные результаты демонстрируют стимуляцию функции коры надпочечников, что свидетельствует о комплексной реакции организма. Известные биохимические и физиологические эффекты глюкокортикоидов в данных условиях могут увеличить обеспечение регенерирующих тканей пластическим и энергетическим материалом.

Исследования показателей метаболизма коллагена выявили влияние кислотности среды при получении препарата на содержание оксипролина. в плазме крови животных. Введение препарата ксеногенного ГАП, осажденного при рН 7, вызывало достоверное увеличение содержания свободного оксипролина на 57,83. Инъекции ГАП, осаждённого в щелочной среде, способствовали снижению связанного оксипролина на 28%, что указывает на преобладание процессов катаболизма коллагена в костной ткани при введении препаратов ГАП, осаждённых при указанных значениях рН.

-55,91*

В плазме В надпочечниках

При использовании препаратов ГАП необходимо учитывать степень их иммуногенности, то есть степень общей реакции организма. Для этого мы изучали реакцию периферических органов иммуногенеза на внутримышечное введение препаратов, содержащих ГАП. Исследования гистологических микропрепаратов селезенки и региональных лимфатических узлов свидетельствуют о незначительном повышении числа лимфоидных фолликулов с большими реактивными центрами, что по данным Л.Т. Воловой (1988) является признаком низкой иммуногенности.

5. Физиологические эффекты ГАП, обогащенного магнием

Функциональное состояние ГГНС после 7 суток температурных нагрузок на фоне инъекций препарата ГАП, обогащенного магнием, характеризовалось снижением уровня кортикостероидов в крови и печени животных.

В условиях искусственно вызванной резорбции костной ткани, инъекции ГАП, обогащённого магнием, компенсировали процессы деминерализации и способствовали увеличению содержания кальция в нативной кости на 24,08%, меди на 254,5% и серебра на 39,2%.

На фоне термического воздействия внутримышечные инъекции этого препарата способствовали стимуляции процессов синтеза коллагена, о чём свидетельствует достоверное снижение концентрации свободного оксипролина в плазме крови на 24,04% (рис. 9).

0 7 суток нагрева И 7 суток и ГАП, обогащенный магнием И 7 суток и ГАП в удвоенной дозе

51, И 50,30*

12.68*

-47,62* ¡¡¡¡¡■В -20,87*

1 1 ж

-24,04*

Оксипролин Оксипролин

свободный связанный

Рис. 9. Влияние повторяющихся температурных нагрузок и инъекций ксеногенного ГАП, различного по составу и дозе, на содержание свободного и связанного с белком оксипролина (% от контроля) - отличия достоверны по сравнению с контролем (р< 0,05)

Биологическая роль магния связана с его участием в энергетическом, пластическом и электролитном обмене Магний обеспечивает механизмы возбуждения в нервных клетках, способствует торможению сократительной активности гладкой и поперечнополосатой мускулатуры за счет расслабления миоцитов путем блокады кальцийзависимого взаимодействия сократительных белков

Разработанная технология получения минерального компонента костной ткани отличается доступностью и простотой получения препарата, содержащего кальций, фосфат, магний, железо, цинк, кобальт, хром, серебро и ртуть в количествах близких к их физиологическим концентрациям Препарат, обладает остеогенными свойствами, отсутствием антигенности, и может быть использован для стимуляции регенерации костной ткани при выраженной резорбции

ВЫВОДЫ

1 Разработанная технология получения минерального компонента костной ткани позволяет получить препарат, обладающий свойством стимулировать остеогенез, содержащий кальций, фосфат, магний, железо, цинк, кобальт, хром, серебро, ртуть в количествах, близких к их реальным концентрациям в натив-ной костной ткани Различия по составу и физиологической активности препаратов, полученных из костной ткани человека, крысы, свиньи и крупного рогатого скота, незначительны

2 Внутримышечное введение ксеногенного гидроксиапатита, полученного из костной ткани крупного рогатого скота, вызывает физиологическую реакцию гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы, характерную для слабых раздражителей и не носящую характера стрессовой, что проявляется в небольшом увеличении концентрации глюкокортикоидов в надпочечниках Отсутствие существенных морфологических изменений периферических органов иммуногенеза - селезенки и лимфатических узлов, свидетельствует об отсутствии у данного препарата выраженных иммуногенных свойств Возрастание ка-талазной активности в печени животных является показателем активизации механизмов антиоксидантной защиты

3 Воздействие горячего воздуха с температурой 70 °С на протяжении 10 минут ежедневно в течение 12 суток приводит к значительной активизации резорбции костной ткани животных, выражающейся в расширении гаверсовых каналов за счет рассасывания их костных стенок, истончении костных балок спонгиозы, увеличении количества остеокластов, что сопровождается уменьшением концентрации кальция на 7 сутки экспериментального воздействия, а также магния, цинка, железа, хрома, кобальта и серебра на 12 сутки

4 Внутримышечное введение гидроксиапатита на фоне термического воздействия приводит к уменьшению морфологических проявлений резорбции и потери минеральных компонентов костной ткани, из которых сохраняется только слабовыраженное снижение уровня магния Реакция гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы в этих условиях характеризуется сни-

жением уровня 11-оксикортикостероидов в надпочечниках и печени животных на 7 сутки и возрастанием данного показателя в крови на 12 сутки воздействия

5 Введение гидроксиапатита с повышенным содержанием магния приводит к уменьшению процессов распада коллагена на фоне термического воздействия, о чем свидетельствует понижение концентрации свободного оксипроли-на в крови животных при сохранении уровня белковосвязанного оксипролина, а также к увеличению содержания кальция, меди и серебра в костной ткани животных Функциональное состояние гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы характеризуется в этих условиях снижением уровня 11-оксикортикостероидов в крови и печени животных

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1 Сундукова Н В Микроэлементы при деминерализации костной ткани (сообщение первое) (тезисы) / В Г Подковкин, Н В Сундукова// Сборник тезисов и статей 38 итог научно-практич конф Самарского воен -мед ин-та Самара, 2005 С 399-400

2 Сундукова Н В Микроэлементы при деминерализации костной ткани (сообщение второе) (тезисы) / В Г Подковкин, Н В Сундукова// Сборник тезисов и статей 38 итог научно-практич конф Самарского воен-мед ин-та Самара, 2005 С 400-401

3 Сундукова Н В Влияние повышенной температуры окружающей среды на метаболизм микроэлементов костной ткани (тезисы) /В Г Подковкин, Н В Сундукова// Актуальные вопросы военной медицины Сборник тезисов и статей 40-й итог научно-практич конф Самарского воен -мед ин-та Самара, 2007. С 276

4 Сундукова Н В Влияние повышенной температуры воздуха и инъекций гидроксиапатита на показатели минерального обмена костной ткани/ В Г Подковкин, Н В Сундукова // Вестник Самарского государственного университета Естественнонаучная серия 2007 №8(58) с Принята в печать 26 12 2006

5 Сундукова Н В Влияние внутримышечных инъекций гидроксиапатита, полученного из натуральной кости, на коэффициент плотности костной ткани при тепловых нагрузках // Глобальный научный потенциал Сборник материалов 3-й международной научно-практической конференции Тамбов, 2007 С.187-188

6 Сундукова НВ Влияние температурных нагрузок и инъекций гидроксиапатита, полученного из костной ткани, на показатели минерального обмена // Глобальный научный потенциал Сборник материалов 3-й международной научно-практической конференции Тамбов, 2007 С 189-190

Подписано в печать 8 октября 2007 г Формат 60x84/16 Бумага офсетная Печать оперативная Объем 1 п л Тираж 100 экз Заказ № /439 443011 г Самара, ул Академика Павлова, 1 Отпечатано УОП СамГУ

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Сундукова, Наталья Владимировна

Введение.

Глава 1. Современные представления о физиолого-биохимических механизмах функционирования костной ткани (обзор литературы).

1.1. Морфо-функциональная характеристика костной ткани.

1.2. Общая характеристика органического компонента и его роли в формировании костной ткани.

1.3. Общая характеристика неорганического компонента костной ткани.

1.4. Нейроэндокринная регуляция минерального обмена.

Глава 2. Материалы и методы исследований.

2.1. Объект исследований и условия постановки эксперимента.

2.2. Методы исследований

Глава 3. Результаты собственных исследований.

3.1. Получение биосовместимых препаратов ГАП с низкими антигенными свойствами.

3.2. Морфо-функциональное состояние костной ткани в условиях стимуляции резорбции.

3.3. Влияние инъекций ГАП на морфо-функциональное состояние костной ткани, коры надпочечников и механизмы антиоксидантной защиты.

3.4. Морфо-функциональное состояние костной ткани, коры надпочечников, иммунокомпетентных органов и механизмов антиоксидантной защиты в условиях введения препаратов ГАП.

3.4.1. Биологические эффекты инъекций препарата аллогенного ГАП в условиях резорбции костной ткани.

3.4.2. Биологические эффекты препарата ксеногенного ГАП, осажденного при рН 5 и прокалённого в муфельной печи, в условиях резорбции костной ткани.

3.4.3. Биологические эффекты препаратов аллогенного и синтетического ГАП, осажденного при рН 5 и прокалённого в муфельной печи,в условиях резорбции костной ткани.

3.4.4. Биологические эффекты инъекций ксеногенного ГАП, осажденного при различных значениях рН в условиях резорбции костной ткани.

3.4.5. Физиологические эффекты ГАП, обогащенного магнием.

3.4.6. Биологические эффекты инъекций ксеногенного ГАП, осаждённого карбонатом натрия и смеси ГАП рН 5 и рН 12 в условиях резорбции костной ткани.

Глава 4. Обсуждение результатов.

Выводы.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Морфо-функциональное состояние костной ткани, коры надпочечников и иммунокомпетентных органов при введении препаратов гидроксиапатита"

Актуальность проблемы. Основными причинами заболеваний опорно-двигательной системы являются нарушения обменных процессов в организме, сопровождающиеся деструкцией костной ткани. Процессы метаболизма последней обеспечиваются сложными взаимосвязанными механизмами регуляции, существенное значение среди которых имеют центральные механизмы, в частности, система "гипоталамус-гипофиз". В связи с этим актуальным представляется поиск возможностей управления регенерацией костной ткани на системном уровне. В литературе появились экспериментальные данные демонстрирующие остеогенные свойства синтетического кальций-фосфатного соединения - гидроксиапатита (ГАП) - и биосовместимых материалов на его основе. Введение гидроксиапатит-содержащих препаратов может являться одним из способов управления физиологической регенерацией соединительной ткани.

Существенным недостатком ранее выполненных исследований является отсутствие системного подхода в изучении нормализации костного ремо-делирования на уровне организма. Недостаточное внимание уделено изменениям со стороны эндокринной системы и их влиянию на минеральный обмен и метаболизм коллагена при использовании ГАП.

В ЦНИЛ СамГМУ предложен и запатентован новый способ получения ГАП путем выделения его непосредственно из костной ткани (Волова Л.Т., Подковкин В.Г., 2001). Разработан способ стимуляции остеогенеза помощью данного препарата (Волова Л.Т. и соавт., 2003). Получены данные о высокой остеоиндуктивной активности ксеногенного ГАП (Власов и соавт., 2002). При этом было обнаружено, что ксеногенный препарат вызывает образование соединительнотканной капсулы в месте введения (Власов М.Ю., 2003), это может свидетельствовать о его иммуногенных свойствах. Предполагается, что ГАП, органического происхождения обладает большей биосовмести-мостыо по сравнению с искусственными препаратами.

Цель исследования. Разработать технологию производства ГАП, обладающего выраженными остеоиндуктивными свойствами в сочетании с низкими антигенными характеристиками материала и произвести в эксперименте комплексную оценку реакции организма при эктопическом введении данного препарата.

Основные задачи исследования.

1. Усовершенствовать технологию выделения минерального компонента из костной ткани и проанализировать химический состав полученного препарата.

2. Исследовать влияние внутримышечных инъекций ГАП на функциональное состояние коры надпочечников, периферических органов иммуногенеза, морфо-функциональное состояние и метаболизм костной ткани.

3. Проанализировать физиологическую реакцию организма животных на введение минерального компонента костной ткани в условиях экспериментальной модели усиления резорбции костной ткани.

4. Выявить особенности физиологической реакции организма животных на введение минерального компонента костной ткани с повышенным содержанием магния.

Научная новизна.

Усовершенствована технология получения минерального компонента костной ткани и проанализирован химический состав полученного препарата.

Установлено, что введение минерального компонента костной ткани не вызывает у животных существенных морфологических изменений периферических органов иммуногенеза - селезенки и лимфатических узлов, что свидетельствует об отсутствии иммуногенных свойств у изучаемого препарата. Изменения функционального состояния коры надпочечников не являются стрессовой реакцией.

Доказано, что введение ГАП уменьшает деминерализацию кости, включая потери ряда микроэлементов в условиях искусственного усиления костной резорбции с помощью многократного термического воздействия.

Выявлено усиление остеогенеза при увеличении концентрации магния в препарате минерального компонента костной ткани, вводимого животным на фоне повышенной температуры окружающей среды.

Теоретическое и практическое значение работы. Результаты исследований дополняют современные представления о системной реакции организма на введение минеральных компонентов костной ткани.

Установлено, что реакция организма на инъекции ГАП носит комплексный характер и включает физиологические изменения ряда систем: функционального состояния ГГНС, морфо-функционального состояния и метаболизма костной ткани, перекисного окисления липидов.

Выявлены особенности реакции ГГНС, изменения метаболизма коллагена и минерального обмена костной ткани после введения различных по составу препаратов ГАП в условиях искусственной стимуляции резорбции костной ткани в эксперименте.

Полученные данные дают дополнительное физиологическое обоснование для применения препаратов на основе минерального компонента костной ткани при лечении ОП и других заболеваний опорно-двигательного аппарата.

Усовершенствована технология получения ГАП из костной ткани, сходного по составу с минеральным компонентом кости и низкими антигенными свойствами. На его основе созданы новые препараты, эффективность которых подтверждена в эксперименте. В дальнейшем предполагается их использование в практическом здравоохранении в комплексном лечении ОП. Установлено, что внутримышечное введение этих материалов не вызывает отрицательных сдвигов в состоянии ГГНС, периферических органов иммуногенеза, исследованных показателей метаболизма костной ткани, перекисного окисления липидов.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Однократные инъекции ГАП на фоне многократного термического воздействия вызывают изменения метаболизма костной ткани, свидетельствующие об активизации остеогенеза. Эти изменения не выходят за пределы физиологической нормы.

2. Введение ГАП компенсирует минеральный дефицит, возникающий при повторяющихся тепловых воздействиях.

3. Изменения гормональных показателей ГГНС после внутримышечной инъекции ГАП характерны для физиологической реакции организма животных, не носящей характер стрессовой.

4. Морфологические исследования периферических органов иммуногенеза при внутримышечных инъекциях ГАП не свидетельствуют о наличии у исследуемого препарата иммуногенных свойств.

Апробация работы. Апробация работы проведена на кафедре биохимии Самарского государственного университета. Материалы диссертации доложены на итоговых научных конференциях Самарского военно-медицинского института (Самара, 2005 - 2007), на 3-й международной научно-практической конференции Тамбовского государственного технического университета (Тамбов, 2007) и на научно-практической конференции Тольят-тинского государственного университета (Тольятти, 2007).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 6 научных работ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 139 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания использованных методов, результатов собственных исследований, анализа и обсуждения полученных данных, выводов, списка цитированной литературы и приложения. Работа содержит 38 рисунков и 20 таблиц. Список литературы включает 168 источников, в том числе 84 зарубежных.

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Сундукова, Наталья Владимировна

ВЫВОДЫ

1. Разработанная технология получения минерального компонента костной ткани позволяет получить препарат, обладающий свойством стимулировать остеогенез, содержащий кальций, фосфат, магний, железо, цинк, кобальт, хром, серебро, ртуть в количествах, близких к их реальным концентрациям в нативной костной ткани. Различия по составу и физиологической активности препаратов, полученных из костной ткани человека, крысы, свиньи и крупного рогатого скота, незначительны.

2. Внутримышечное введение ксеногенного гидроксиапатита, полученного из костной ткани крупного рогатого скота, вызывает физиологическую реакцию гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы, характерную для слабых раздражителей и не носящую характера стрессовой, что проявляется в небольшом увеличении концентрации глюкокортикоидов в надпочечниках. Отсутствие существенных морфологических изменений периферических органов иммуногенеза - селезенки и лимфатических узлов, свидетельствует об отсутствии у данного препарата выраженных иммуногенных свойств. Возрастание каталазной активности в печени животных является показателем активизации механизмов антиоксидантной защиты.

3. Воздействие горячего воздуха с температурой 70 °С на протяжении 10 минут ежедневно в течение 12 суток приводит к значительной активизации резорбции костной ткани животных, выражающейся в расширении га-версовых каналов за счет рассасывания их костных стенок, истончении костных балок спонгиозы, увеличении количества остеокластов, что сопровождается уменьшением концентрации кальция на 7 сутки экспериментального воздействия, а также магния, цинка, железа, хрома, кобальта и серебра на 12 сутки.

4. Внутримышечное введение гидроксиапатита на фоне термического воздействия приводит к уменьшению морфологических проявлений резорбции и потери минеральных компонентов костной ткани, из которых сохраняется только слабовыраженное снижение уровня магния. Реакция гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы в этих условиях характеризуется снижением уровня 11-оксикортикостероидов в надпочечниках и печени животных на 7 сутки и возрастанием данного показателя в крови на 12 сутки воздействия.

5. Введение гидроксиапатита с повышенным содержанием магния приводит к уменьшению процессов распада коллагена на фоне термического воздействия, о чем свидетельствует понижение концентрации свободного ок-сипролина в крови животных при сохранении уровня белковосвязанного ок-сипролина, а также к увеличению содержания кальция, меди и серебра в костной ткани животных. Функциональное состояние гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы характеризуется в этих условиях снижением уровня 11-оксикортикостероидов в крови и печени животных.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Сундукова, Наталья Владимировна, Самара

1. Авцын А.П. Микроэлементозы человека (этиология, классификация, органопатология) / А.П. Авцын, A.A. Жаворонкова, М.А. Риш, JI.C. Строчко-ва. -М. Медицина, 1991. 496 с.

2. Александров В.Н. Гуморальный иммунный ответ после травмы различной тяжести / В.Н. Александров // Патол. физиология и эксперим. терапия. 1983. №4. С. 70-73.

3. Ахкубекова Н.К. Показатели кальций-фосфорного обмена и костного метаболизма у больных диффузным токсическим зобом / Н.К. Ахкубекова // Проблемы эндокринологии. 1997. Т. 43. № 5. С. 12-16.

4. Безруков, В.М. Гидроксиапатит как субстрат для костной пластики: теоретические и практические аспекты проблемы // В.М. Безруков, A.C. Гри-горьян. Стоматология. 1996. Т. 75. № 5. С. 7-12.

5. Березин И.В. Основы биохимии / И.В. Березин, Ю.В. Савинов М.: Изд-во МГУ, 1990. 252 с.

6. Брус И.Г. Костная пластика формализованными трансплантатами / И.Г. Брус, Б.М. Топор, O.E. Беденкова. Кишинев: Штиинца, 1989. 48 с.

7. Власов М.Ю. Влияние эктопической имплантации аллогенного гид-роксиапатита на показатели метаболизма костной ткани, функцию коры надпочечников и состояние иммунокомпетентных органов у животных / М.Ю. Власов // Дис.канд. биол. наук. Самара.2003.134 с.

8. Волова JT.Т. Способ приготовления и свойства деминерализованного костного матрикса из костей плодов // Вопросы клинической и экспериментальной медицины / Л.Т. Волова. Куйб. мед. ин-т. Куйбышев, 1986. С 7679.

9. Волова Л.Т. Биологические свойства деминерализованных костей плода и особенности регенерации костной ткани реципиента при их трансплантации / Л.Т. Волова // Материалы областной конференции ВОИР. Куйбышев, 1988. С.22-24.

10. Волова Л.Т. Способ получения аллогенного гидроксилапатита (патент) / Л.Т. Волова, В.Г. Подковкин // Патент на изобретение № 2168998 (Россия). Зарегистрирован 20 июня 2001г.

11. Волова Л.Т. Способ стимуляции остеогенеза (патент) / Л.Т. Волова, В.Г. Подковкин, М.Ю. Власов // Патент на изобретение № 2219933 (РФ). Зарегистрирован 27.12.2003 г.

12. Воробьёв Ю.И. Клинико-рентгенологическая оценка эффективности гидроксиапатита с коллагеном при лечении пародонтита и радикулярных кист / Ю.И.Воробьёв, А.И. Воложин, В.Б. Богдашевская, В.П. Трутень, И.И. Трутень // Стоматология 1995. - С. 35-37.

13. Гончаров И.Ю. и др. Применение гидроксиапатита при восполнении костных дефектов челюстей и стимуляция остеогенеза / И.Ю. Гончаров // Стоматология. - №5. - 1996. - С.54-60.

14. Григорьян A.C. Остеопластическая эффективность различных форм гидроксиапатитов по данным экспериментальных морфологических исследований / A.C. Григорьян, А.И. Волошин, B.C. Агапов и др. // -Стоматология. №3. - 2000. - С.4-9.

15. Дедов И.И. Первичный и вторичный остеопороз: патогенез, диагностика, принципы профилактики и лечения / И.И. Дедов, Л.Я. Рожинская, Е.И. Марова // Методическое пособие для врачей, 2-е издание. М.: Медицина, 2002. 143 с.

16. Дедух H.B., Панков Е.Я. Скелетные ткани/ Н.В. Дедух, Е.Я. Панков //В кн.: Руководство по гистологии, Т.1, СПб., Спец. Лит., 2001. С.284-336.

17. Држевецкая И.А. Основы физиологии обмена веществ и эндокринной системы / И.А. Држевецкая. М.: Высшая школа, 1983. - 272 с.

18. Дубок В.А. Синтез, свойства и применение остеотропных заменителей костной ткани на основе керамического гидроксилапатита / В.А. Дубок,

19. H.В. Ульянин // Ортопедия, травматология и протезирование. 1998. - №3. -С. 26-30.

20. Ермакова И.П. Лабораторная диагностика обмена минеральных веществ / И.П. Ермакова /Юстеопороз и остеопатия. 2000 - №2 - С. 41-47.

21. Ермаченко Л.А. Атомно-абсорбционный анализ в санитарно-гигиенических исследованиях / Л.А. Ермаченко //под ред. Подуновой Л.Г. Москва: Изд-во Чувашия, 1997.207 с.

22. Жилкин Б.А. Распределение минеральных частиц в матриксе пластинчатой кости / Б.А. Жилкин, A.A. Докторов, Ю.И. Денисов-Никольский, И.В. Матвейчук // Морфология. 2000. Т. 117. № 3. с. 47-48.

23. Измайлова В.Н. Структурообразование в белковых системах / В.Н. Измайлова, П.А. Ребиндер. -М.: Наука, 1974. ).

24. Исаева В.А Изучение роли витамина D в обмене коллагена костной ткани белой крысы / В.А. Исаева, Е.А. Базанов // Вопросы питания. 1974. №1.С. 45-59.

25. Кадурина Т.И. Наследственные коллагенопатии. Клиника, диагностика, лечение, диспансеризация / Т.И. Кадурина. -СПб.: Невский диалект, 2000. 270 с.

26. Клишов A.A. Гистогенез, регенерация и опухолевый рост скелетномышечной ткани / A.A. Клишов. М.: Медицина, 1971. 196 с .

27. Капланский Я.С. Минеральный обмен / Я.С. Капланский. М.: Медиздат, 1966. 120 с.

28. Лысенок Л.Н. Остеогенез и возможности остеозамещения / Лысе-нок Л.Н. Лысенок // Клиническая имплантология и стоматология. 1998. №4,- С.70-73,2000.-№1-2. -С.63-65, 2001. - №1-2. -С. 107-1 И.

29. Мазуров В.И. Биосинтез коллагеновых белков / Мазуров В.И. Мазуров // Успехи биологической химии. -М.: Медицина, 1974. №15. С.85-99.

30. Мазуров В.И. Биохимия коллагеновых белков / В.И. Мазуров. М.: Медицина, 1974. 290 с.

31. Мазуров В.И. Изучение а- и 5-компонентов проколлагенов / В.И. Мазуров, В.Н. Орехович // Биохимия. 1980. Т. 25. С. 814-824.

32. Мари Р., Греннер Д., Мейес П., Родуэлл В. Биохимия человека: В 2-х томах / Р. Марри, Д. Греннер, П. Мейес, В. Родуэлл. М.: Мир, 1998. Т. 1. 360 с.

33. Мельничук Д.А. Метаболическая система кислотно-щелочного го-меостаза в организме человека и животных / Д.А. Мельничук // Украинский биохимический журнал 1989. - Т.65 - №3- С.3-21

34. Меркулов Г.А. Курс патогистологической техники / Г.А. Меркулов -М.: Медицина, 1969.

35. Насонов Е.Л. Локальная терапия глюкокортикоидами / Е.Л. Насонов, Н.В. Чичасова, В.Ю. Ковалев // Русский Медицинский Журнал. 1999. Т. 7. №8. С. 45-53.

36. Никитинская O.A. Результаты исследования маркеров костного метаболизма у больных с первичным остеопорозом / O.A. Никитинская, Т.И. Лебедева, Л.И. Беневоленская // Остеопороз и остеопатии. 1998. № 3. С. 2123.

37. Нестеров Ю.В. Перекисное окисление липидов в легочной ткани крыс разного возраста в условиях эмоционально-болевого стресса / Ю.В. Нестеров // Вестник ОГУ. 2003. № 6. С. 152-155.

38. Орехович В.Н. Проколлагены, их химический состав и биологическая роль / В.Н. Орехович. -М.: Медицина, 1966. 256 с.

39. Островский А. Остеогенные материалы в современной пародонто-логии и имплантологии / А. Островский // Dent-Inform. 2001. - №8. - с. 2230.

40. Павлов О.Б. Нарушения водно-электролитного обмена и кислотно-основного состояния / О.Б. Павлов, В.М. Смирнов // Инфузионная терапия. -Мн.: БГМУ, 2003.-45 с.

41. Пахомова В.А. Роль метаболического ацидоза в патогенезе паро-донтита и пути его коррекции / В.А. Пахомова //Автореферат дисс hellip; д.м.н. Киев, 1992- 51с.

42. Подковкин В.Г. Микромодификация метода определения 11-окси-кортикостероидов / В.Г. Подковкин // Деп. в ВИНИТИ 4.7.1988 №5348-В 88 (а).

43. Подрушняк Е.П. Методы исследования костной системы / Е.П. Подрушняк, Е.И. Суслов. Киев: Здоров'я, 1975. 110 с.

44. Попов Е.М. Структурная организация белков / Е.М. Попов М.: Наука, 1989.354 с.

45. Прохончуков А.А. Гомеостаз костной ткани в норме и при экстремальном воздействии / А.А. Прохончуков, Н.А. Жижина, Р.А. Тигронян // Проблемы космической биологии. Т. 49. М., 1984. С. 136 162.

46. Рабинович В.А., Хавин З.Я. Краткий химический справочник / В.А. Рабинович, З.Я. Хавин. Ленинградское отделение: Химия, 1978. - 392 с.

47. Ринге И.Д. Стероидный остеопороз / И.Д. Ринге //Материалы 12 Европейского Конгресса по ревматологии. Будапешт, 1991, с. 1-3.

48. Родионова С.С. Остеопороз: патогенез, диагностика и лечение / С.С. Родионова, Л.Я. Рожинская, Е.И. Марова // Регионарная организация врачей и ученых по изучению проблем, связанных с остеопорозом. М., 1997, С. 1117,29-43.

49. Рожинская Л.Я. Системный остеопороз: Практическое руководство для врачей / Л.Я. Рожинская. М.: Издатель Мокеев, 2000. 195 с.

50. Розен В.Б. Основы эндокринологии / В.Б. Розен -М.: Наука, 1994.386 с.

51. Савельев В.И. Трансплантация костной ткани / В.И. Савельев, E.H. Родюкова. Новосибирск: Наука, 1992. 220 с.

52. Силман А. Европейское исследование остеопороза позвоночника / А. Силман // Тезисы лекций и докладов I Российского симпозиума по остео-порозу. М., 1995, с.56-58.

53. Скальный A.B. Микроэлементозы человека (диагностика и лечение)/ A.B. Скальный. М., 1999 - С. 96.

54. Скоблин А.П. Микроэлементы в костной ткани / А.П. Скоблин, A.M. Белоус. -М.: Медицина, 1968. 217с.

55. Сметник В.П. Постменопаузальный остеопороз: принципы заместительной гормонотерапии / В.П. Сметник //Остеопороз и остеопатии 1998. N2. С. 21-24.

56. Слутский Л.И. Органический матрикс кости: Новые биохимические данные / Л.И. Слутский, H.A. Севастьянова // Ортопедия, травматология и протезирование. 1986. № 6. С.69-73.

57. Снетков А.И. Использвание гидроксиапатит-содержащего материала при переломах у детей / А.И. Снетков, Т.Н. Берченко, А.И. Касымов, А.Р. Франтов // Сб. тез. междунар. симпоз. "Биоимплантология на пороге XXI века". М.; 2001. С.103.

58. Современные методы в биохимии / Под ред. В.Н. Ореховича. М.: Медицина, 1977. - 392 с.

59. Стекольников Л.И. Современные представления о химическом строении и механизме действия тиреокальцитонина / Биохимические исследования в травматологии и ортопедии: Сб. науч. трудов. / Л.И. Стекольников. -М.: Медицина, 1972. С. 153-155.

60. Степанов В.М. Молекулярная биология. Структура и функции белков / Под ред. A.C. Спирина / В.М. Степанов. М.: Высшая школа, 1996. 335 с.

61. Степанов В.М. Структурная организация коллагенов / В.М. Степанов // Структурно-функциональная организация белков: Сб. науч. тр. М.: МГУ, 1992. С.138-149.

62. Страйер Н. Биохимия. В 3-х томах. Перевод с англ / Н. Страйер. -М.: Мир, 1985. Т.2.-445 с.

63. Торбенко В.П. Функциональная биохимия костной ткани / В.П. Торбенко, Б.С. Касавина -М.: Медицина, 1977. 272 с.

64. Уильяме Д. Металлы жизни / Д. Уильяме. М., 1998. С.72-83

65. Фаяко-Тибаренко В.Ф. Водно-электролитный обмен и кислотно-основное состояние в норме и патологии / В.Ф. Фаяко-Тибаренко. К.: Здоровье, 1989. 195с.

66. Форман Г.В. Физиология кислотно-щелочного состояния в норме и патологии. Ранняя диагностика болезней обмена веществ / Г.В. Форман. М.: Медицина, 1986 - 638с.

67. Филиппович Ю.Б. Основы биохимии / Филиппович Ю.Б. Филиппович. М.: Высшая школа, 1985. 503 с.

68. Форман Г.В. Физиология кислотно-щелочного состояния в норме и патологии. Ранняя диагностика болезней обмена веществ / Форман Г.В. Форман. М.: Медицина, 1986. 638с.

69. Франке Ю. Остеопороз / Ю. Франке, Г. Рунге. -М.: Медицина, 1995. С.97-101, 171-236.

70. Фролов Ю.П. Математические методы в биологии. ЭВМ и программирование: Теоретические основы и практикум / Ю.П. Фролов. Самара: Самарский университет, 1997. 265с.

71. Фролькис В.В. Стресс-возраст-синдром / В.В. Фролькис //Физиол. Журн.-1991,-Т.37, С.З.-11.

72. Хилькин A.M. Коллаген и его применение в медицине / A.M. Хиль-кин, А.Б. Шехтер. -М.: Медицина, 1976. 228 с.

73. Хит Д. Нарушение обмена кальция / Д. Хит, С. Дж. Маркс. -М.: Медицина, 1985. 334 с.

74. Хмельницкий O.K. Общая патоморфология костно-суставного аппарата / O.K. Хмельницкий, В.В. Некачалов, A.C. Зиновьев. Новосибирск: Наука, 1983.192с.

75. Хьюз Р. Гликопротеины. Перевод с англ / Р. Хьюз. -М.: Мир, 1985.140 с.

76. Чекман И.С. Магний в медицине / И.С. Чекман, H.A. Горчакова, С.Л. Николай. Кишинев: 1992. 101с.

77. Чечурин P.E. Сахарный диабет I типа и остеопороз: Обзор литературы / P.E. Чечурин, A.C. Аметов //Остеопороз и остеопатии. 1999. N1. С.2-5.

78. Шульц Г. Принципы структурной организации белков. Перевод с англ. / Под ред. Е.М. Попова / Г. Шульц, Р. Ширмер, Б. Хайнер. М.: Мир, 1982.354 с.

79. Щепёткин И.А. Полипептидные факторы остеогенеза / И.А. Щепёт-кин // Успехи современной биологии. 1994.Т Л 44, вып.4. С.466-474.

80. Юрина H.A. Морфофункциональная гетерогенность ивзаимодейст-вие клеток соединительной ткани / H.A. Юрина, А.И. Радостина. -М.: Медицина, 1990.210с.

81. Якубке X. Аминокислоты, пептиды, белки. Перевод с англ. / X. Якубке, X. Ешкайт. М.: Мир, 1985. 456 с.

82. Abu Е.О. The expression of thyroid hormone receptors in human bone / E.O. Abu, S. Bord, A. Horner e.a. // Bone. 1997. Vol. 21. No. 2. P.137-142.

83. Agerbaek M.O. A reconstruction of the remodeling cycle in normal human cortical iliac bone / M.O. Agerbaek, E.F. Eriksen, J. Kragstrup, L. Masekilde, F. Melsen//J. Bone Miner. Res. 1991. V. 12. P. 101-112.

84. Altura BM. Basic biochemistry and physiology of magnesium: a brief review/ BM. Altura //Magnesium & Trace Elements. 1991. -v.10. P. 167-171.

85. Anderson H.C. Normal and abnormal mineralization in mammals / H.C. Anderson //Trans. Am. Soc. Artif. Intern. Organs. 1981. Vol. 27. P. 702-708.

86. Banovac K. Triiodothyronine stimulates the release of membrane-bound alkaline phosphatase in osteoblastic cells / K. Banovac, E. Koren // Calcif. Tissue Int. 2000. Vol. 67. No. 6. P. 460-465.

87. Bellows C. Aluminum accelerates osteoblastic differentiation but is cytotoxic in long-term rat calvaría cell cultures / C. G. Bellows, J. N. M. Heersche, J. E. Aubin // Calcif. Tissue Int. 1999. V. 65. No. 3. P. 59-65.

88. Bockman R.S. Steroid-induced osteoporosis / R.S. Bockman, S.A. Wein-erman // Orthop. Clin. North. Am. 1990. V. 21. No. 1. P. 97-107.

89. Boissy P. Transcriptional activity of nuclei in multinucleated osteoclasts and its modulation by calcitonin / P. Boissy, F. Saltel, C. Bouniol // Endocrinology. 2002. V. 143. No. 5. P. 115-120.

90. Bonjourj-F. Importance of preclinical studies in the development of drugs for treatment of osteoporosis: a review related to the 1998: WHO guidelines / Bonjourj-F, F Ammann, R. Rizzoli // Osteoporos /- 1999/- N9/- P.379-393.

91. Bonucci E. Osteogenic response to hydroxyapatite-fibrin implants in maxillofacial bone defects / E. Bonucci, E. Marini, F. Valdinucci, G. Fortunato // Eur. J. Oral Sci. 1997. Vol. 105. No. 6. P. 557-561.

92. Boskey A.L. Mineral-matrix interactions in bone and cartilage / A.L. Boskey // Clin. Orthop. 1992. No. 281. P. 244-274.

93. Campos M.S. Interactions among iron, calcium, phosphorus and magnesium in the nutritionally iron-deficient rat / M.S. Campos, M. Barrionuevo, M.J. Alferez e.a. // Exp. Physiol. 1998. Vol. 83. No. 6. P. 771-781.

94. Care A.D. Development of endocrine pathways in the regulation of calcium homeostasis / A.D. Care // Baillieres Clin. Endocrinol. Metab. 1989. Vol. 3. No. 3. P. 671-688.

95. Chai B. Ultrastructural investigation of calcification and ossification in experimental fracture healing with special reference to osteogenic role of fibroblasts B. Chai, X., Li H. Tang // Chin. Med. J. 1997. Vol. 110. No. 4. 274-278.

96. Chen Q. Testosterone inhibits osteoclast formation stimulated by parathyroid hormone through androgen receptor / Q. Chen, H. Kaji, T. Sugimoto, K. Chihara//FEBS Letters. 2001. V. 491. № 1-2. P. 91-93.

97. Cummings S.R. Lifetime risks of hip, Colles', or vertebral fracture and coronary heart disease among white postmenopausal women / S.R. Cummings, D.M. Black, S.M. Rubin. Arch. Intern. Med. 1989; 149: 2445-2448.

98. Czerwiec F.S. Absence of androgen-mediated transcriptional effects in osteoblastic cells despite presence of androgen receptors / F.S. Czerwiec, J.J. Liaw, S.B. Liu // Bone. 1997. V. 21. No. 1. P. 49-56.

99. Delany A.M. Mechanisms of glucocorticoid action in bone cells / A.M. Delany, Y. Dong, E.J. Canalis // Cell Biochem. 1994. V. 56. No. 3. P. 295-302.

100. Defranco D.J. Differential effects of glucocorticoid on recruitment and activity of osteoclasts induced by normal and osteocalcin-deficient bone implanted in rats / D.J. Defranco, J.B. Lian, J. Glowacki // Endocrinology 1992.Vol. 131. No. LP. 114-121.

101. Delmas P.D. Biochemical markers of bone turnover / P.D. Delmas // J. Bone Miner. Res. 1993. V. 8. P. 549-555.

102. Delmas P.D. Markers of bone turnover for monitoring treatment of osteoporosis with antiresorptive drugs / P.D. Delmas // Osteoporos. Int. 2000. V. 11. No. 6. P. 66-76.

103. Dempster D.W. Bone remodeling. In: Coe F.L., Favus M.J. Disorders of bone and mineral metabolism / D.W. Dempster. New York: Raven Press, 1992. P. 355-380.

104. Dempster D.W. Anabolic actions of parathyroid hormone on bone / D.W. Dempster, F. Cosman, M. Parisien, V. Shen, R. // Endocr. Rev. 1993. V. 14. P. 690-709.

105. Dinkel K. Glucocorticoids and central nervous system inflammation / K. Dinkel, W.O. Ogle, R.M. Sapolsky // J. Neurovirol. 2002. Vol. 8. No. 6. P. 513528.

106. Dinkel K. Novel glucocorticoid effects on acute inflammation in the CNS / K. Dinkel, A. MacPherson, R.M. Sapolsky // J. Neurochem. 2003. Vol. 84. No. 4. P. 705-716.

107. Duan X. Bone Morphogenese Proteins influence to differentiation of human bone marrow cells into osteoblasts in vitro / X. Duan, L. Yang, T. Wang, Z. Tan // Acta Acad. Med. Mil. Tertiae. 2002. V. 24. No. 5. P. 603-605.

108. Ebel H. Magnesium metabolism: a review / H. Ebel, T. Gunther // J. Clin. Chem. & Clin. Biochem. 1998. - v. 18. P. 257-270.

109. Erdmann J. Effects of estrogen on the concentration of insulin-like growth factor-I in rat bone matrix / J. Erdmann, S. Storch, J. Pfeilschifter // Bone. 1998. V. 22. No. 5. P. 503-507.

110. Fernandez M. Hydrocortisone regulates types I and III collagen gene expression and collagen synthesis in human marrow stromal cells / M Fernandez., J.J Minguell // Biol. Res. 1997. V. 30. No. 2. P.85-90.

111. Frost H.M. Perspectives applications of a biomechanical model of the endochondral ossification mechanism / H.M. Frost, W.S. Jee // Anatomic Record. 1994. V. 240. No. 4. P. 447-455.

112. Gehron R.P. Bone biochemistry. Skeletal Biology Section, Bone Research Branch, Institute of Dental Research, National Institutes of Health, Be-thesda, Maryland / R.P. Gehron. 2005. http:// www.osteoporosis.ru/

113. Goto T. Resorption of synthetic porous hydroxyapatite and replacement by newly formed bone / T. Goto, T. Kojima, T. Iijima e.a. // Orthop. Sci. 2001.Vol. 6. No. 5. P. 444-447.

114. Greenspan S.L. The effect of thyroid hormone on skeletal integrity S.L. Greenspan, F.S. Greenspan // Ann Intern Med.- 1999.- Vol. 130,- P.750-758.

115. Heersche J.N. Mechanism of osteoclastic bone resorption: a new hypothesis / J.N. Heersche //Calcif. Tissue Res. 1998. V. 26. No. 1. P. 81-44.

116. Henri H.L. Vitamin D: metabolism and biological actions / H.L. Henri, A.W. Norman // Ann. Rew. Nutr. 1984. No. 4. P. 493-520.

117. Irie K. Changes of osteopontin distribution and matrix mineralization during remodeling in experimental bone formation / K. Irie, H. Takeishi, E. Tsu-ruga//Acta Histochem. et Cytochem. 2002. V. 35. No. 2. P. 113-118.

118. Jones G. Low bone mass in premenopausal parous women / G. Jones, F.S. Scott // C/in Densitometry.- 1999.- Vol.9.- N2.-P. 109-115.

119. Kahn A.J. New concepts in bone remodeling: an expanding role for the osteoblast / A.J. Kahn, N.C. Partridge // Am. J. Otolaryngol. 1987. Vol. 8. No.5. 258-264.

120. Kameda Y. Calcium-sensing receptor in mature osteoclasts, which are bone resorbing cells / Y., Kameda H Mano., Y. Yamada // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1998. V. 245. P. 419-421.

121. Keaveny T.M. Biomechanics of trabecular bone / T.M. Keaveny, E.F. Morgan, G.L. Niebur, O.C. Yeh // Annual Rewiew of Biomedical Engineering. 2001. V.3. No. 3. P. 307-333.

122. Kimmel P.L. Zinc nutrional status modifies renal osteodystrophy in uremic rats / P.L. Kimmel, C.B. Langman, B.B. Bognar, M.C. Faugere, L.S. Chawla, H.H. Malluche // Clin. Nephrol. 2001. V. 56. No. 6. P. 445-458.

123. Kivirikko K.I. Biosynthesis of collagen and its alterations in pathological states / K.I. Kivirikko, L. Risteli // Med. Biol. 1976. Vol. 54. No. 23. P. 159186.

124. Kong Y.-Y. Molecular control of bone remodeling and osteoporosis / Y.Y. Kong, J.M. Penninger// Exp. Gerontol. 2000. V. 35. No. 8. P. 947-956.

125. Lee T.C. Bone remodeling: should we cry Wolff? / T.C. Lee, D. Taylor. Ir.J.Med.Sci. 1999. 168(2): 102-5.)

126. Lindsay D.W. Osteoporosis / D.W. Lindsay, R. Dempster // Lancet, 1993, vol. 341, H3,p.341-386.

127. Ma Z. J., Yamaguchi M. Role of endogenous zinc in the enhancement of bone protein synthesis associated with bone growth of newborn rats / Z. J. Ma,

128. M. Yamaguchi //J. Bone Metab. 2001. V. 19. No. 3. P. 38-44.

129. Majeska R.J. Direct modulation of osteoblastic activity with estrogen / R.J. Majeska, J.T. Ryaby, T.A. Einhorn // J. Bone Joint. Surg. Am. 1994. V. 76. No. 5. P. 713-721.

130. Malone A.M.D. Primary culia: mechanosensory on cells / A.M.D. Malone, C.T. Anderson, S. Temiyasathit et al. J.Bone Min Res.2006; 21: S39.

131. Mauras N. Growth hormone therapy in the glucocorticosteroid-dependent child: metabolic and linear growth effect / N. Mauras // Horm. Res. 2001.No. 56 Suppl LP. 13-18.

132. Meghji S. Bone remodelling / S. Meghji // Br. Dent. J. 1992. Vol. 172. No. 6. P. 235-542.

133. Mundy G.R. Boning up on ephrin signaling / G.R. Mundy, F. Elefte-riou. Cell 2006; 126(3): 441-3

134. Naukkarinen A. Histologiset varjaykset / A. Naukkarinen. Moodi 45.153-158.2000.

135. Nishimura Y. Bone turnover and calcium metabolism during 20 days bed rest in young healthy males and females / Y. Nishimura, H. Fukuoka, M. Kiri-yama // Acta Physiol. Scand. 1994. Vol. 616. P. 27-35.

136. Pallares I. Effects of iron replenishment on iron, calcium, phosphorus and magnesium metabolism in iron-deficient rats /1. Pallares, I. Lopez-AIiaga, F. Lisbona e.a. // Int. J. Vitam. Nutr. Res. 1996. Vol. 66. No. 2. P. 158-165.

137. Parfitt A.M. Bone-forming cells in clinical conditions / A.M. Parfitt // Bone. 1990. V. l.No. l.P. 351-429.

138. Pepene C.E. The effects of triiodothyronine on human osteoblast-like cells metabolism and interactions with growth hormone / C.E. Pepene, T. Seek, J.

139. Pfeilschifter e.a. // Exp. Clin. Endocrinol. Diabetes. 2003. Vol. 111. No.2. P. 6672.

140. Potts J.T. Parathyroid hormone: chemistry, biosynthesis and mode of action / J.T. Potts, H.M. Kronenberg, M. Rosenblatt // Adv. Protein Chem. 1982. Vol. 35. No. 323. P. 323-396.

141. Rey C. The carbonate environment in bone mineral: a resolution-enhanced. Fourier transform infrared spectroscopy study / C. Rey, B. Collins, T. Goehl e.a. // Calcif. Tiss. Int. 1989. Vol. 45. No. 2. P. 157-164.

142. Riggs B.L. Are biochemical markers for bone turnover clinically useful for monitoring therapy in individual osteoporotic patients / B.L. Riggs // Bone. 2000. V. 26. No. 6. P. 551-552.

143. Roach H. Why does bone matrix contain noncollagenous proteins? The possible roles of osteocalcin, osteonectin, osteopontin and bone sialoprotein in bone mineralization and resorption / H. Roach // Cell Biol. Int. 1994. Vol. 18. No. 6. P. 617-628.

144. Rodan G.A. Bone cells / G.A. Rodan, S.B. Rodan. Department of Bone Biology and Osteoporosis Research, Merck Research Laboratories, West Point, Pennsylvania. 2005. http://www.osteoporosis.ru/.

145. Sasano Y. Expression of major bone extracellular matrix proteins during embryonic osteogenesis in rat mandibles / Y. Sasano, J-X. Zhu, S. Kamakura, S. Kusunoki, I. Mizoguchi, M. Kagayama // Anat. Embriol. 2000.V. 202. No. 6. P. 31-37.

146. Sela J. The effect of bone injury on extracellular matrix vesicle proliferation and mineral formation / J. Sela, Z. Schwartz, D. Amir e.a. // Bone Miner. 1992. Vol. 17 No. 2. P. 163-167.

147. Seto H. Trabecular bone turnover, bone marrow cell development, and gene expression of bone matrix proteins after low calcium feeding in rats / H. Seto, K. Aoki, S. Kasugai, K. Ohya. Bone. 1999. V. 25. No. 6. P. 687-695.

148. Sodek J. Regulation of bone sialoprotein gene transcription by steroid hormones / J. Sodek, R.H. Kim, Y. Ogata, J. Li, M. Yamauchi, Q. Zhang, L.P. Freedman // Connect. Tissue Res. 1995. V. 32. No. 14. P. 209-217.

149. Tomomura A. Rat brain expresses serum calcium-decreasing factor (caldecrin) / A. Tomomura, H. Yamada, K. Itagaki e.a. // Neurosci. Lett. 2002. Vol. 317. No. l.P. 17-20.

150. Tran Van P. An electron microscopic study of the bone-remodeling sequence in the rat / P. Tran Van, A. Vignery, R. Baron // Cell Tissue Res. 1982. V. 225. No. 12. P. 283-292.

151. Underwood E. J. Trace elements in human and animal nutrition / E. J. Underwood. New York. 1979. p.7-14.

152. Vaananen H.K. Estrogen and bone metabolism / H.K. Vaananen, P.L. Harkonen // Maturitas. 1996. V. 23. No. 8. P. 65-69.

153. Xiao Z. Cilia-like structures and polycystin-1 in osteoblastes associated abnormalities in skeletogenesis and Runx2 expression / Z. Xiao, S. Zhang, J. J Mahlios et al. Biol.Chem.2006; 281(41):30884-95.

154. Yukya R.A. Six month evalution of Calcitite (Hydroxyapatite Ceramic) in periodontal Osseous defects / R.A. Yukya, R.J. Cassingham, R.F. Candill // J. Periodont. Restorative Dent. 1986. - Vol. 6. P. 35-46.

155. Zambonin G. Biomaterials in orthopaedic surgery: effects of different hydroxyapatites and demineralized bone matrix synthesis by human osteoblasts / G. Zambonin, M. Grano // Biomaterials. 1995. Vol. 16. No. 5. P. 397-402.

156. Zhao C. Bidirectional ephrinB2-EphB4 signaling controls bone homeostasis / C. Zhao, N. Irie, Y. Takada. Cell Metab. 2006; 4(2): 111-21.

157. Zhu X.-L. Synthesis and processing of bone sialoproteins during de novo bone formation in vitro / X.-L. Zhu, B. Ganss, H.A. Goldberg, A. Sodek // Biochem. and Cell Biol. 2001. V. 79. No. 6. P. 737-746.

158. Содержание минеральных элементов в костной ткани при тепловом воздействии в течение семи сутоки инъекциях ГАП, мг/г1. Са Аё Си

159. Контроль 112,24± 1,92± 0,00236 0,00165п=8 10,15 0,19 ±0,00027 ±0,00017

160. Нагрев 71,93± 1,39± 0,00207 0,00422п=8 5,03* 0,13* ±0,00011 ±0,00152

161. Прокаленный п=8 91,45±4,67 1,60±0,09 0,00221 ±0,00010 0,00286 ±0,00080

162. Не прокаленный п=8 87,08± 5,49* 1,71± 0,10 0,00245 ±0,00012 0,00647 ±0,00169*

163. Аллогенный 91,74± 1,76± 0,00207 0,00241п=8 1,22 0,04 ±0,00011 ±0,000701. X Осажденный а С карбонатом 82,90± 1,62± 0,00204 0,00288±0,00г, натрия 3,72* 0,06 ±0,00023 0661. X я к п=8

164. Удвоенная доза 73,30± 1,41± 0,00200 0,00250со 0) & п=8 8,10* 0,18 ±0,000300 ±0,00026*я я Искусственный 92,82± 1,68± 0,00223 0,00533п=8 11,02 0,20 ±0,00024 ±0,0095

165. С MgCl2 139,27± 2,57± 0,00328 0,00584п=8 16,72* 0,29 ±0,00024* ±0,00091*

166. Смесь 84,66± 1,59± 0,00242 0,00211п=8 9,76 0,22 ±0,00032 ±0,0046

167. Примечание: * отличие от контроля статистически значимо (р<0,05)

168. Содержание минеральных элементов в костной ткани при тепловом воздействии в течение семи сутоки инъекциях ГАП, мг/г1. Со Сг Ге гп Н8

169. Контроль п=8 0,00291 ±0,00033 0,00184 ±0,00018 0,06809 ±0,00193 0,12820 ±0,01281 0,10463 ±0,00607

170. Нагрев п=8 0,00234 ±0,00022 0,00164 ±0,00014 0,06818 ±0,01247 0,10294 ±0,00983 0,04599 ±0,00708*

171. Нагрев и вид ГАП рН 5 Прокаленный п=8 0,00209 ±0,00020 0,00173 ±0,00015 0,05516 ±0,01155 0,09892 ±0,00438* 0,04230 ±0,00199*

172. Не прокаленный п=8 0,00253 ±0,00035 0,00216 ±0,00035 0,05682 ±0,01305 0,10285 ±0,00496 0,04378 ±0,00342*

173. Аллогенный п=8 0,00226 ±0,00024 0,00213 ±0,00021 0,05413 ±0,00383* 0,12213 ±0,00219 0,05347 ±0,00146*

174. Осажденный карбонатом натрия п=8 0,00162 ±0,00022* 0,00156 ±0,00067 0,05586 ±0,00297* 0,12392 ±0,00611 0,03027 ±0,00875*

175. Удвоенная доза п=8 0,00235 ±0,00031 0,00105 ±0,00015 0,04089 ±0,00617* 0,09460 ±0,00971 0,05084 ±0,00342*

176. Искусственный п=8 0,00273 ±0,00030 0,00195 ±0,00021 0,05883 ±0,01117 0,12367 ±0,01432 0,05858 ±0,01084*

177. С МбС12 п=8 0,00366 ±0,00049 0,00314 ±0,00042 0,10587 ±0,00495 0,17321 ±0,02003 0,05793 ±0,00708

178. Смесь п=8 0,00213 ±0,00062 0,00156 ±0,0023 0,04539 ±0,01458 0,10221 ±0,01330 0,03521 ±0,00058*

179. Влияние семи суток теплового воздействия и инъекций различных видов ГАП на обмен соединительной ткани у крыс

180. Свободный оксипролин в плазме, мкмоль/л Связанный с белком оксипролин в плазме, мкмоль/л

181. Контроль п=8 61,45±1,975 65,672±3,124*

182. Нагрев п=8 92,857±2,565* 98,718±9,78*

183. Прокаленный п=8 88,783±9,464* 71,359±3,946

184. Не прокаленный п=8 104,814±6,175* 85,224±7,228*1Л Аллогенный п=8 46,189±3,677* 63,905±4,117

185. X а С < и Осажденный карбонатом натрия п=8 54,882±5,675 79,371±3,751*

186. И к га и & 03 X Удвоенная доза п=8 32,186± 1,943* 51,969±2,642*

187. Искусственный п=8 95,539±5,200* 43,996±2,374*

188. С М%С\2 п=8 46,678±3,299* 73,998±4,338

189. Смесь п=8 47,019±1,603* 72,310±9,917

190. Влияние семи суток теплового воздействия и инъекций различных видов ГАП на коэффициент плотности костной ткани (хЮ-З)1. Контроль п=8 3,412±0,291. Нагрев п=8 2,951±0,332

191. Нагрев и вид ГАП рН 5 Прокаленный п=8 3,186±0,125

192. Не прокаленный п=8 2,932±0,275

193. Аллогенный п=8 2,737±0,378

194. Осажденный карбонатом натрия п=8 3,523±0,423

195. Удвоенная доза п=8 3,208±0,401

196. Искусственный п=8 3,758±0,4151. С МёС12 п=8 2,295±0,218*1. Смесь п=8 3,111±0,147

197. Примечание: * отличие от контроля статистически значимо (р<0,05)

198. Влияние семи суток теплового воздействия и инъекций различных видов ГАП на нейро-гуморальную реакцию

199. ОКС в надпочечниках, мкг/г 11-ОКС в плазме, мкмоль/г 11-ОКС в печени, мкг/г

200. Контроль п=8 495,855±13,453 29,891±4,533 33,284±2,834

201. Нагрев п=8 491,094±94,865 24,588±6,870 32,178±1,266

202. Прокаленный п=8 281,814±43,347* 29,747±6,954 26,353±1,178*

203. Не прокаленный п=8 289,197±29,526* 33,47±2,117 25,758±0,771*

204. Аллогенный п=8 568,785±117,296 16,285±3,142* 20,192±0,602*

205. Л X а X < и се к Осажденный карбонатом натрия п=8 528,269±38,692 23,667±2,490 44,265±0,882*м К И <и & 03 Удвоенная доза п=8 196,525±16,663 33,867±6,401 36,470±1,340

206. X Искусственный п=8 334,946±5,807* 20,356±1,272 43,578±0,343*

207. С М§С12 п=8 505,076±14,247 19,185±1,291* 21,325±0,289*

208. Смесь п=8 530,245±62,150 35,416±10,767 44,745±5,148

209. ОКС в надпочечниках, мкг/г 327,724 ±63,522 503,181 ±43,754* 416,115 ±96,814 378,037 ±37,044 464,039 ±71,162 380,531 ±81,907

210. ОКС в плазме, мкмоль/л 21,877 ±2,830 46,022 ±8,352* 39,997 ±5,365* 14,032 ±1,854* 26,710 ±4,447 27,664 ±0,559

211. ОКС в печени, мкг/г 32,443 ±4,811 24,166 ±2,366 26,148 ±2,443 27,151 ±3,630 25,920 ±3,438 29,765 ±2,756

212. МДА в печени, м км оль/г 19,500 ±1,375 21,654 ±2,640 26,618 ±1,584* 23,088 ±0,277* 26,481 ±2,248* 26,715 ±1,420*

213. Активность каталазы в печени, нмоль/г/мин 8,575 ±1,246 30,72 ±6,391* 23,575 ±4,638* 10,909 ±1,458 14,580 ±3,481 17,334 ±2,514*

214. Примечание: * отличие от контроля статистически значимо (р<0,05)

215. Влияние теплового воздействия, повторяющегося в течение 12 суток и инъекций ГАП,осаждённых при разных рН наобмен соединительной ткани у крыс

216. Контроль п=8 Инъекции ксеногенного ГАП п=8 Нагрев и ксеногенный ГАПрН 5 п=8 рН 7 п=8 рНЮ п=8 рН 12 п=8

217. Свободный оксипролин в плазме, мкмоль/л 23,725±5,694 16,284±2,392 22,419±1,613 37,446±1,236* 31,537±1,367 23,373±1,042

218. Связанный с белком оксипролин в плазме, мкмоль/л 86,644±2,250 67,124±3,764* 84,473±2,015 93,056±5,726 62,74±3,358* 62,347±1,956*

219. Влияние теплового воздействия, повторяющегося в течение 12 суток и инъекций аллогенного ГАП на содержание микроэлементов в костной ткани у крыс, мг/г

220. Экспериментальные группы и способ воздействия

221. Контроль Нагрев Нагрев и ГАП аллогенный рН 12

222. Аё 0,00997 ±0,0005 0,00749±0,0004* 0,00942±0,00046

223. Со 0,00826±0,0003 0,00693±0,0006* 0,00853±0,0003

224. Сг 0,00811±0,00027 0,00634±0,00049* 0,00806±0,00039

225. Ре 0,01964±0,00134 0,01302±0,00218* 0,01688±0,00086м8 2,61531±0,05989 1,7488±0,1313* 2,20474±0,07487*0,2831±0,0177 0,21618±0,0146* 0,26756±0,01259

226. Примечание: * отличие от контроля статистически значимо (р<0,05)

227. Влияние температурных воздействий, сопровождаемых инъекциями аллогенного ГАП на обмен коллагена, содержание МДА и активность каталазы

228. Контроль п=8 Нагрев и аллогенный ГАП рН 12 п=8

229. Свободный оксипролин в плазме, мкмоль/л 11,602±2,800 10,573±1,386

230. Связанный с белком оксипролин в плазме, мкмоль/л 76,755±6,812 88,435±14,229

231. МДА в печени, мкмоль/г 13,085±1,091 9,809±0,950*

232. Активность каталазы в печени, нмоль/г/мин 14,977±1,790 15,577±2,448

233. Влияние температурных воздействий, сопровождаемых инъекциями аллогенного ГАПна активность коры надпочечников

234. Контроль п=8 Нагрев и аллогенный ГАП рН 12 п=811 -ОКС в плазме, мкмоль/л 9,527±1,320 12,263±1,509

235. ОКС в печени, мкмоль/г 28,077±3,395 52,555±6,929*

236. ОКС в надпочечниках, мкмоль/г 334,259±20,796 325,750±25,677

237. Примечание: * отличие от контроля статистически значимо (р<0,05)

238. Влияние температурных воздействий на активность коры надпочечников

239. Контроль Нагрев две неделип=16 п=1611 -ОКС в плазме, мкмоль/л 15,702±2,195 15,970±2,821

240. ОКС в надпочечниках, мкмоль/г 330,992±32,298 361,226±41,654

241. ОКС в печени, мкмоль/г 30,260±2,899 39,182±3,501

242. Примечание: * отличие от контроля статистически значимо (р<0,05)

243. Влияние температурных воздействий на обмен коллагена, содержание МДА и активность каталазы

244. Контроль п=16 Нагрев две недели п=16• Свободный оксипролин в плазме, мкмоль/л 17,663±3,441 11,47± 1,999

245. Связанный с белком оксипролин в плазме, мкмоль/л 81,825±3,503 60,021±5,638*

246. МДА в печени, мкмоль/г 14,879±0,793 16,508±2,787

247. Активность каталазы в печени, нмоль/г/мин 11,776±1,339 16,994±1,403*

248. Примечание: * отличие от контроля статистически значимо (р<0,05)1. Относительная масса кости

249. Контроль п=8 0,03778±0,0000712 дней нагрева п=8 0,003273±0,00007*12 дней нагрева и ГАП рН 5 п=8 0,004167±0,0005912 дней нагрева и ГАП рН 7 п=8 0,004725±0,00001*12 дней нагрева и ГАП рН 10 0,004341±0,000612 дней нагрева и ГАП рН 12 п=8 0,003355±0,00003*

250. Примечание: * отличие от контроля статистически значимо (р<0,05)