Морфо-анатомические и биохимические особенности некоторых представителей семейства Asteraceae Dumort. в условиях Белгородской области

Третьяков, Михаил Юрьевич

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Морфо-анатомические и биохимические особенности некоторых представителей семейства Asteraceae Dumort. в условиях Белгородской области
ВАК РФ 03.00.05, Ботаника

Автореферат диссертации по теме "Морфо-анатомические и биохимические особенности некоторых представителей семейства Asteraceae Dumort. в условиях Белгородской области"

На правах рукописи

Третьяков Михаил Юрьевич

МОРФО-АНАТОМИЧЕСКИЕ И БИОХИМИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ НЕКОТОРЫХ ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ СЕМЕЙСТВА АБТЕЯАСЕАЕ ШМОКТ. В УСЛОВИЯХ БЕЛГОРОДСКОЙ ОБЛАСТИ

03.00.05-ботаника 03.00.04 - биохимия

Автореферат диссертации на соискание учёной степени кандидата биологических наук

иио

Саратов 2009

003458927

Работа выполнена в государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Белгородский государственный университет» на кафедре ботаники и методики преподавания биологии

Научные руководители: доктор сельскохозяйственных наук, профессор,

Сорокопудов Владимир Николаевич

доктор химических наук, доцент, Дейнека Виктор Иванович

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор,

Коннова Светлана Анатольевна

доктор сельскохозяйственных наук, профессор, Маланкина Елена Львовна

Ведущая организация Белгородский филиал Государственного

учреждения Всероссийского научно-исследовательского института лекарственных и ароматических растений (ВИЛАР)

Защита состоится «5» февраля 2009 г. в _ часов на заседании

диссертационного совета Д 212.243.13 при государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Саратовский государственный университет им. Н.Г. Чернышевского» по адресу: 410012, г. Саратов, ул. Астраханская, д. 83, E-mail: biosovet@sgu.ru.

С диссертацией можно ознакомиться в Зональной научной библиотеке ГОУ ВПО «Саратовский государственный университет им. Н.Г. Чернышевского».

Автореферат разослан <4% декабря 2008 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

С.А. Невский

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования. Первые сведения о растительном покрове Белгородской области появились в конце XVIII столетия (Зуев, 1787). В настоящее время флора Белгородской области насчитывает от 1167 (Еленевский и др., 2004) до 1457 (Колчанов, 1995) видов. Охватить все это разнообразие достаточно трудно, однако изучение отдельных семейств наиболее перспективно, так как позволяет в короткие сроки собрать достаточно информации обо всех или почти всех представителях, произрастающих на территории области. Именно такие данные являются основой флористических исследований флоры области в целом (Полуянов, 2005).

Сложноцветные - самое крупное семейство двудольных растений. В нем от 1250 до 1300 родов и более 25 000 видов (Яковлев и др., 1997). Особый интерес представляют некоторые представители этого семейства в связи с их практической значимостью как возможные источники биологически активных веществ. В частности растения рода Tagetes L. (бархатцы) накапливают в цветках беспрецедентно высокое количество лютеина, что делает их главным промышленным источником этого ксантофилла (Bosma et al., 2003; Rodriguez-Carmona et al., 2006). Многочисленные исследования свидетельствуют о связи между поступлением лютеина в организм человека, увеличением плотности макулярного пигмента и снижением риска развития возрастной макулярной дегенерации (ВМД) (Snodderly et al., 1984; Bone et al., 1988; Seddon et al., 1994; Hammond et al., 1997; Landrum et al., 1997; Sommerburg et al., 1998; Mohammedshah et al., 1999; Beatty et al., 2001; Johnson, 2002). Однако бархатцы во всех частях растения накапливают политиофены, токсичные по отношению к некоторым грибам и нематодам (Mukundan et al., 1991) и вызывающие контактный дерматит у человека (Towers et al., 1979), поэтому очистка ксантофиллов от тиофенов является необходимым условием получения чистых препаратов.

Ряд высокодекоративных сортов бархатцев отклоненных (Т. patula L.) имеют цветки с темно-вишневыми пятнами, наличие которых связано с биосинтезом антоцианов. Однако никаких упоминаний об исследовании этих пигментов и их влиянии на накопление ксантофиллов при совместном присутствии в лепестках цветков антоцианов и каротиноидов в литературе нами обнаружено не было. Важность этого вопроса связана с тем, что антоцианы существуют в кислой среде, в то время как в кислых средах каротиноиды не отличаются устойчивостью.

Бархатцы, несмотря на достаточно высокую перспективность, не дают в нашем регионе самосева и не содержат в достаточном (для поддержания сохранности макулы) количестве производных зеаксантина. Поэтому поиск других источников ксантофиллов и других биологически активных веществ во флоре Белгородской области, в том числе и среди дикорастущих и культивируемых представителей семейства Asteraceae является важной и актуальной задачей.

Цель исследования. Выявление морфо-анатомических и биохимических особенностей некоторых представителей семейства Asteraceae в условиях Белгородской области.

Задачи исследования:

1. Уточнить видовой состав и ареалы представителей семейства Asteraceae по территории Белгородской области.

2. Провести анализ жизненных форм семейства Asteraceae.

3. Поиск биологически активных веществ (ксантофиллов и тиофенов) в дикорастущих и культивируемых растениях семейства Asteraceae.

4. Выявить морфо-анатомические особенности репродуктивных органов рода Tagetes в условиях Белгородской области, связанные с накоплением ксантофиллов.

5. Исследовать особенности биосинтеза ксантофиллов и антоцианов в лепестках цветков некоторых видов и сортов растений рода Tagetes.

Научная новизна. Выявлены новые места произрастания ряда видов семейства Asteraceae на территории Белгородской области, проведен анализ их жизненных форм. Изучены морфо-анатомические особенности репродуктивных органов рода Tagetes, определены особенности локализации и накопления пигментов. Впервые исследованы интенсивность и особенности биосинтеза ксантофиллов в лепестках некоторых видов и сортов растений рода Tagetes в условиях Белгородской области. Установлены особенности биосинтеза для цветков различной окраски. Выявлены сорта рода Tagetes, содержащие значительное количество ксантофиллов (лютеина), которые можно рекомендовать для промышленного выращивания в условиях Белгородской области. Впервые выполнено исследование совместного биосинтеза ксантофиллов и антоцианов в цветках некоторых сортов вида Т. patula L. и политиофенов в различных частях растений рода Tagetes в условиях Белгорода. Проведен поиск источников ксантофиллов и политиофенов в некоторых культурных и дикорастущих растениях семейства Asteraceae. Установлена потенциальная возможность выращивания Tagetes erecta L., Cosmos sulphureus Cav. для промышленного получения лютеина и Tagetes ssp. и Echinops sphaerocephalus L. как источника политиофенов.

Практическая ценность работы. Результаты работы могут применяться в природоохранной деятельности для сохранения мест произрастания редких и исчезающих видов семейства Asteraceae, включенных в Красные книги России и Красную книгу Белгородской области, а также позволяют уточнить биологические запасы и расширить представления о распространении изученных видов. Материалы по содержанию ксантофиллов в цветках рода Tagetes представляют практический интерес, так как позволяют рекомендовать перспективные сорта для получения сырья для фармации. Получены данные по сезонной динамике накопления ксантофиллов и биопродуктивности разных видов рода Tagetes, необходимые для внедрения промышленной технологии выращивания этих растений. Найден источник зеаксантина (Physalis alkekengi L.), позволяющий дополнить комплекс ксантофиллов до необходимого для здоровья человека соотношения лютеин : зеаксантин (4:1), что позволило создать эффективную кормовую добавку для птицеводства. Предложенные методы очистки ксантофиллов от политиофенов повысят качество получаемой продукции.

Получено положительное решение № 207113094 по заявке на получение патента РФ «Биологически активная добавка для кур и способ ее получения», который был награжден серебряной медалью на VIII Московском международном салоне инноваций и инвестиций в 2008 г. Опыты по использованию добавки подтвердили ее эффективность - уровень накопления ксантофиллов в желтке яиц повышался в 2 — 2,5 раза.

Апробация работы. Основные положения и результаты работы были представлены на: II Всероссийской конференции «Новые достижения в химии и химической технологии растительного сырья» (Барнаул, 2005); Международной научно-практической конференции (Белгород, 2006); IV Всероссийской научной конференции «Химия и технология растительных веществ» (Сыктывкар, 2006); I (IX) Международной Конференции Молодых Ботаников в Санкт-Петербурге (Санкт-Петербург, 2006); Международной научно-практической конференции: «Нетрадиционные и редкие растения, природные соединения и перспективы их использования». VII Международный симпозиум, Материалы научной конференции «Флора и растительность Центрального Черноземья» (Курск, 2007; 2008), чтениях, посвященных 300-летию со дня рождения К. Линнея (Луганск, 2007), Международной научной конференции «Современные проблемы интродукции и сохранения биоразнообразия растений» (Воронеж, 2007), Материалы 2-й международной научно-практической конференции «Наука и устойчивое развитие общества. Наследие В.И. Вернадского» (Тамбов, 2007), Международной научно-практической конференции посвященной Дню Российской науки «Лекарственные растения и биологически активные вещества: фитотерапия, фармация, фармакология» (Белгород, 2008), V Всероссийской научной конференции «Химия и технология растительных веществ» (Сыктывкар-Уфа, 2008), Международной научной конференции «Современное состояние, проблемы и перспективы региональных ботанических исследований» (Воронеж, 2008).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 18 работ, две из которых в изданиях перечня ВАК РФ, заявка на изобретение и две коллективные монографии «Красная книга Белгородской области» и «Дикорастущие лекарственные растения Белгородской области (ареал, биология, химический состав, препараты, применение)».

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, пяти глав, выводов, списка литературы и приложения. Общий объем работы составляет 200 страниц, содержит 9 таблиц и 56 рисунков. Список литературы включает 248 источников отечественных и зарубежных авторов. В приложении приведен список дикорастущих видов семейства Asteraceae во флоре Белгородской области с морфологическим описанием.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Наиболее эффективными из исследованных растений семейства Asteraceae по накоплению лютеина являются Cosmos sulphureus Cav. и виды Tagetes patula L., Tagetes erecta L. с оранжевой окраской цветков.

2. В условиях г. Белгорода наивысшее накопление ксантофиллов в лепестках цветков найдено для сортов Tagetes erecta L. «Сиера оранжевый» и «Родос».

3. Tagetes ssp накапливают тиофены во всех частях растения, включая лепестки цветков; наивысшее накопление тиофенов происходит в боковых корнях и коре главного корня Tagetes и Echinops sphaerocephalus L.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ ВВЕДЕНИЕ

Во введении обозначены актуальность темы, цель и задачи исследования, научная новизна, практическая значимость исследования, сведения об апробации работы и основные положения, выносимые на защиту.

Глава 1. ИСТОРИЯ ИЗУЧЕНИЯ ВО ФЛОРЕ БЕЛГОРОДСКОЙ ОБЛАСТИ И БИОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА СЕМЕЙСТВА ASTERACEAE

(обзор литературы)

В главе дается обзор литературных данных по исследованию семейства Asteraceae во флоре Белгородской области. Приведена краткая биологическая характеристика семейства Asteraceae, дано описание некоторых биологически активных веществ (ксантофиллов и политиофенов), встречающихся у представителей этого семейства, анализируется их применение в медицине и сельском хозяйстве.

Глава 2. ФИЗИКО-ГЕОГРАФИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА БЕЛГОРОДСКОЙ ОБЛАСТИ

Дана характеристика природно-климатических условий Белгородской области: рельефа, климата, почвы, погодных условий в годы проведения исследований. Рассмотрено современное состояние растительности.

Глава 3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Флористическая часть работы выполнена традиционным маршрутно-флористическим методом (Алехин и др., 1926) в течение 2003-2008 гг. Кроме собственных сборов, были изучены гербарные образцы, хранящиеся в коллекциях участка «Лес на Ворскле» заповедника «Белогорье» (WORSKL), в гербарных фондах Белгородского государственного университета (BSU), а также опубликованные работы по флоре области за последние четыре года. При установлении видовой принадлежности собранных экземпляров был использован морфолого-географический метод, основанный на исследовании морфологических признаков гербарных экземпляров и растений в природе. Номенклатура таксонов выверена по П.Ф. Маевскому (2006).

При определении жизненных форм растений использовали системы К. Раункиера (1934), И.Г. Серебрякова (1962, 1964), а также собственные наблюдения автора (Миркин и др., 2002).

Для определения влияния условий произрастания на рост и развитие Tagetes выполнен морфометрический анализ, в качестве биометрической характеристики использовали следующие параметры: количество соцветий (Ь), масса соцветий и цветков (ш и mi соответственно), высота стебля (h) (Моисейченко и др., 1996). Анатомическое изучение структуры лепестков цветков проводили по методике Н.М. Паушевой (1988).

Образцы цветков и корней для биохимического анализа собирали в течение вегетационного периода растений 2006-2008 гг. в ботаническом саду БелГУ и некоторых районах Белгорода и области.

Количественное и качественное определение биологически активных веществ проводили в жидких экстрактах с использованием методов спектрофотометрии, тонкослойной, нормально-фазовой и обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), ГЖХ с масс-спектрометрическим детектированием. Очистка ксантофиллов от тиофенов проводилась методом флэш-хроматографии в нормально-фазовом и обращенно-фазовом вариантах на концентрирующих патронах ДИАПАК. Спектры в УФ и видимой области электромагнитного спектра записывали на приборе КФК-3-01 с использованием кварцевых кювет с длиной оптического пути 0,1; 0,3 и 1 см.

Хроматографические исследования проводили на хроматографе фирмы «Gilson» со спектрофотометрическим и рефрактометрическим детекторами, с использованием насосов Altex 110А или Beckman 110В, крана дозатора Rheodyne 7200 с петлей объемом 20 мкл.

Статистическую обработку экспериментальных данных проводили общепринятым методом с определением среднего арифметического, стандартного отклонения и доверительного интервала (Моисейченко и др., 1996). Для обработки результатов использовали программный продукт. Microsoft Office Excel 2003.

Глава 4. СЕМЕЙСТВО ASTERACEAE (COMPOSITAE) DUMORT.

ВО ФЛОРЕ БЕЛГОРОДСКОЙ ОБЛАСТИ

К настоящему моменту на территории Белгородской области зарегистрировано 56 родов и 197 видов растений семейства Asteraceae (Compositae). В Красную книгу Белгородской области занесены 12 видов, имеющих следующие категорию и статус: редкие виды III - Senecio schvetzovii Korsh. (S. doria L. ssp. doria), Centaurea orientalis L., Centaurea ruthenica Lam., Artemisia santonica L. (A. cretacea Kotov, A. lerchiana Web. ex Stechm. A. monogyna Waldst. et Kit., A. nutans Willd.), Artemisia salsoloides Willd. (последний вид занесен в основной список Красной книги Российской Федерации); - неизученные виды (неопределенный статус) IV - Antennaria dioica (L.) Gaertn., Xeranthemum annum L., Centaurea taliewii Kleop., Centaurea pineticola lljin (последние два вида занесены в основной список Красной книги Российской Федерации); - уязвимые виды V — Scorzonera purpurea L., Galatella villosa (L.) Reichenb. [Aster oleifolius (Lam.) Wagenitz; Linosyris villosa (L.) DC.;

Crinitaria villosa (L.) Cass.]; - особо ценные виды VI - Artemisia hololeuca Bieb. ex Bess, (занесена в основной список Красной книги Российской Федерации).

К кандидатам на включение в Красную книгу Белгородской области относятся 15 видов: Artemisia, armeniaca Lam., Artemisia pontica L., Centaurea carbonata Klok., Centaurea majorovii Dumb., Chondrilla gramínea Bieb., Crepis paludosa (L.) Moench, Crepis pannonica (Jack.) C. Koch (C. rigida Waldst. et Kit.), Echinops ritro L. [E. ruthenicus Bieb., E. meyeri (DC.) Iljin], Galatella angustissima (Tausch) Novopokr. (A. angustissimus Tausch), Galatella linosyris (L.) Reichenb. fil. [Aster linosyris Bernh., Linosyris vulgaris Cass, ex Less.; Crinitaria linosyris Less.], Lactuca saligna L., Scorzonera austriaca Willd, Scorzonera ensifolia Bieb., Senecio paucifolius S. G. Gmel. [5. kirghiisicus DC., S. racemosus (Bieb.) DC., S. doria L. ssp kirghisicus (DC.) Chater], Taraxacum bessarabicum (Hörnern.) Hand-Mazz.

Впервые для Белгородской области отмечены следующие 8 видов: Achillea micrantha Willd., Ambrosia trífida L., Anthémis arvensis L., Chartolepis glastifolia (L.) Cass. (Ch. intermedia Boiss.; Centaurea glastifolia L.), Jurinea ewersmanii Buge, Jurinea multiflora (L.) B. Fedtsch., Pilosella x floribunda (Wimm, et Grab.) Fries [P. lactucella x P. onegensis > P. praealta » P. officinarum; Hieracium floribundum Wimm, et Grab., H. suecicium Fries], Tanacetum millefolium (L.) Tzvel.

К видам, исчезнувшим и нахождение которых вызывает сомнение на территории области, относятся 7 представителей: Achillea ptarmica L. (Ptarnica vulgaris Blakw. ex DC.), Centaurea trinervia Steph., Crepis praemorsa Tausch., Gnaphalium sylvaticum L. [Omalotheca sylvatica (L.) Sch. Bip. et F. W. Schultz], Pilosella x colima (Goschn.) Sojak (Hieracium collinum Gochn., H. fallax Willd), Tragopogon pratensis L., Xanthium strumarium L.

К культивируемым на территории Белгородской области относится 32 вида, однако это далеко не все, а только лишь те, которые получили широкое распространение. Также в список не внесены произрастающие на территории области дикорастущие (адвентивные) и окультуренные виды, формы которых широко распространены, например, Astra, Centaurea, Tanacetum и др.

Преобладающими среди растений семейства Asteraceae биоморфами по К. Раункиеру на территории Белгородской области являются гемикриптофиты -58,88%, на долю криптофитов и терофитов приходится по 21,83% и 16,75% соответственно, незначительную долю от общего числа составляет процент хамефитов - 2,54%. Такое соотношение биоморф свидетельствует о приближении к биологическому спектру растений умеренно холодной зоны.

Изучение жизненных форм семейства Asteraceae по И.Г. Серебрякову свидетельствует о том, что наибольшее количество видов - 58,38% приходится на травянистые поликарпики, которым значительно уступают монокарпики -39,59% и совсем мала доля полукустарников и полукустарничков - 0,51% и 1,52% соответственно. Среди поликарпиков выделялись корневищные -66,96%, стержнекорневые - 24,35% и внесшие незначительный вклад корнеотпрысковые и клубневые - по 6,96% и 1,74%. Такое соотношение биоморф характерно в условиях фонового влияния аборигенных видов и умеренной антропогенной нагрузке.

По продолжительности жизненного цикла на первое место выходят многолетники — 64,97%, что свидетельствует о преобладании степных типов сообществ. Однолетники и двулетники составляют по - 15,23% и 12,69%

соответственно, а одно- двулетники всего 7,11%. Такие значения отчасти объясняются наличием адвентивных и синантропных видов.

На долю безрозеточных приходится 54,92%, полурозеточных - 38,34%, а розеточные составляют лишь 6,74% от общего количества видов. Такой характер распределения в спектре жизненных форм характерен для сообществ, формирующихся в условиях степной зоны.

Глава 5. ОСОБЕННОСТИ НАКОПЛЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ

ВЕЩЕСТВ НЕКОТОРЫМИ ПРЕДСТАВИТЕЛЯМИ СЕМЕЙСТВА ASTERАСЕАЕ

В ходе выполнения флористической части работы определился новый самостоятельный аспект - поиск растений семейства Asteraceae белгородской флоры, которые можно рассматривать, как перспективные источники ксантофиллов.

В результате проведенных исследований было установлено, что в условиях Белгородской области наиболее интенсивный биосинтез ксантофиллов осуществляется в цветках рода Tagetes, которому уступает Cosmos sulphureus Cav. В остальных исследованных цветках растений семейства Asteraceae (Achillea tomenlosa L., Anthemis tinctoria L., Calendula officinalis L., Gazania x hybrida hort., Hellianthus annus L., Helichrysum arenarium (L.) Moench, Inula britannica L., Inula ensifolia L., Inula helenium L., Inula salicina L., Lactuca serriola L., Senecio erucifolius L., Solidago canadensis L., Sonchus asper (L.) Hill., Sonchus oleraceus L., Taraxacum officinalis L.) биосинтез ксантофиллов не останавливается на стадии образования лютеина и идет вплоть до образования продуктов эпоксидирования.

Анатомическое изучение особенностей накопления ксантофиллов в цветках Т. erecta L. показало, что диэфиры лютеина накапливаются в хромопластах, имеющих шарообразную форму. Хромопласты присутствуют во всех клетках мезофилла, но концентрируются в основном в эпидермальных, рис. 1-2.

Рис. 1. Поперечный срез лепестков цветков Рис. 2. Сосочковые клетки верхнего

Т. erecta L. 10/0,25 х 10/18 эпидермиса с хромопластами лепестков

цветков Т. erecta L.40/0,065 х 10/18

Проведенные исследования свидетельствуют о том, что синтез ксантофиллов возрастает при увеличении их степени этерификации (Эагпазо Ногпего-МеМег е1 а1., 2000). Так ксантофиллы цветков бледно-желтой окраски представлены неэфирными фракциями, а цветки с интенсивной темно-оранжевой окраской накапливают в основном диэфиры, рис. 3, таблица 1.

абрикосовые (3), светло-оранжевые (4), оранжевые (5) 250*4 мм Кромасил-С18, 5 мкм; 10 об.% ацетонитрила в ацетоне; 445 нм.

Таблица 1

Жирнокислотный состав диэфирной фракции ксантофиллов_

Вид Tagetes temiifolia L. Tagetes erecta L.

Окраска лепестков Желто-оранж. Оранж. Светло-оранж. Абрик. Лим,-жслт.

Моль доля диэфиров трш/с-лютеина в сумме каротиноидов, %

Сумма | 58.8 | 79.9 | 83.7 | 61.6 | <30%

Моль доля индивидуальных диэфи ров в сумме диэфиров тракс-лютеина, %

дилаурат (12+12) 1.3 0.9 0.5 0.8 <0,1

лаурат-мирисгат (12+14) 12.7 6.3 5.5 5.6 <0,1

димиристат (14+14), (12+16) 27.6 183 18.7 22.4 <0,1

миристаг-пальмитат (14+16), (12+18) 27.2 28.4 30.5 28.6 <0,1

дипальмитаг (16+16), (14+18) 19.2 30.2 29.1 28.1 <0,1

пальмитат-сгеарат (16+18) 8.1 12.5 122 12.0 <0,1

дистеарат (18+18) 3.9 3.2 3.5 2.5 <0,1

Следовательно, с технологической точки зрения (для увеличения выхода лютеина), следует выбирать сорта с интенсивной оранжевой окраской цветков. Высокая степень этерификации характерна и для лютеина, накапливаемого в лепестках цветков С. ли/рАига« Сау., но с отличающимся от бархатцев жирнокислотным составом - 69,6 % радикалов миристиновой и 30,4 % — пальмитиновой кислот.

Принципиальных отличий между составом ксантофиллов исследованных сортов обнаружено не было. Основным ксантофиллом в цветках бархатцев был

полностью транс-лютеин (в виде диэфиров). Минорные пики на рис. 3 соответствуют г/ыс-формам диэфиров лютеина и диэфирам зеаксантина, который, наряду с лютеином, необходим для профилактики и лечения ВМД.

При выращивании в условиях Белгородской области уровень биосинтеза ксантофиллов сопоставим с такими же показателями для других регионов мира, для сортов двух видов бархатцев: Т. paíula L. и Т. erecta L. рис. 4.

мг/г

3 2 1

123456789

Рис. 4. Содержание ксантофиллов (в пересчете на лютеин) в свежих лепестках цветков различных сортов бархатцев

На рис. 4 представлены данные о бархатцах, выращенных в сезоне 2006 г. сорта: 1 - Сиера оранжевый {Т. erecta L.), 2 - Родос (Т. erecta L.), 3 -Оранжевый снег (Т. erecta L.), 4 - Оранжевое пламя - краевые цветки (окрашены антоцианами) (Т. patula L.), 5 - Коландо абрикосовый (Т. erecta L.), 6 - Оранжевое пламя - центральные оранжевые цветки (Т. patula L.), 7 -Оранжевое пламя махровые (Т. patula L.), 8 - Гармония - цветки с различной интенсивностью окраски на одном соцветии (среднее содержание) {Т. patula L.), 9 - Лимонные {Т. erecta L.). Наивысшее накопление ксантофиллов было найдено для сортов видов Т. patula L. и Т. erecta L. с оранжевой окраской цветков - порядка 3-4 мг/г свежих лепестков. При переходе к сортам с желтой и особенно лимонно-желтой окраской уровень содержания ксантофиллов снижался более чем на порядок, оставляя за ними лишь декоративную ценность. При сохранении оранжевой окраски содержание ксантофиллов было выше у сортов Т. erecta L.

В 2006 - 2008 гг. была проведена комплексная оценка по урожайности цветков двух видов Т. erecta L. и Т. patula L. Выбор именно этих двух видов был связан с тем, что размеры цветков Т. tenuifolia L. настолько малы, что не представляют технологического интереса. Несмотря на более высокое содержание лютеина в цветках Т. erecta L., урожайность определялась не только степенью накопления ксантофиллов, но и густотой посева, количеством соцветий на одно растение и массой цветков. Биопродуктивность Т. erecta L. «Сиера оранжевый» и Т. patula L. «Мандарин» и некоторые морфологические показатели за вегетационный период 2006-2008 гг. представлены в таблице 2.

Ч!

rfa

rti

Таблица 2

Урожайность цветков и некоторые морфологические показатели Tagetes_

Вид NL, шт. h, см п, шт. ш, г ш*. г ImVL, г/м M(lu)/L, г/м

Сезон 2006 г.

Сиера оранжевый 34,5 ± 10,0 61,3 ± 5,42 4,64 ± 2,05 9,67 ±0,78 4,93 ± 0,63 790 3,1

Мандарин 30,6 ± 12,5 29,03 ± 11,76 32,5 ± 9,91 2,37 ±0,22 1,61 ± 0,2 1600 3,6

Сезон 2007 г.

Сиера оранжевый 24,16 ± 7,69 76,87 ± 13,23 3,77±1,3 12,27 ± 1Д5 6,32 ± 0,88 580 1,9

Мандарин 30,68 ± 7,30 40,25 ± 5,96 24,0 ± 11,88 2,57 ±0,4 1,36 ± 0,24 1000 2,2

Сезон 2008 г.

Сиера оранжевый 69,89 ± 17,49 59,20 ± 4,45 2,67 ± U3 7,02 ±0,67 3,34 ± 0,4 620 2,6

Мандарин 49,31 ± 7,05 27,15 ± 3,16 11,71 ± 5,04 1,61 ±0,15 0,62 ± 0,09 360 1,1

Nl- количество растений на 1 погонный метр, шт; h - высота растения, см; п - количество соцветий на одном растении; m - масса соцветия, г; ш* - масса цветков в соцветии, г; Im*/L - продуктивность вида по свежим лепесткам, г/м;

IM(Iu)/L- продуктивность по лютеину, г на 1 погонный метр

На цветки приходится 50 - 60% от массы соцветий у видов Т. erecta L. и Т. patula L., причем «полезная масса» в случае цветков первого вида в 5 - 6 раз больше. При сушке цветков в сухом и прохладном месте без доступа света в течение недели масса цветков существенно уменьшается и составляет для Т. erecta L. 14-17% от массы влажных и 23% для вида Т. patula L.

Динамика накопления диэфиров лютеина в цветках Т. erecta L. сортов «Сиера оранжевый» и «Коландо абрикосовый» и Т. patula L. сорта «Мандарин» за 2008 год представлена на рис 5. б

мг/г

о'-■-■---------'

11.07 31.07 20 08 09 09

Рис. 5. Накопление ксантофиллов в лепестках цветков двух видов бархатцев (2008 г.), сорта: 1 - Сиера оранжевый (Т. erecta L.) (*); 2 - Коландо абрикосовый (Г. erecta L.) (■); 3 - Мандарин (Г. patula L.) (•)

Динамика накопления свидетельствует о снижении содержания ксантофиллов к концу сентября, что может быть связано с обычным в этот период для Белгородского региона снижением средней суточной температуры. Некоторое варьирование концентрации ксантофиллов в течение цветения растений связано с изменением количества влаги в лепестках. Достаточно стабильное содержание ксантофиллов в лепестках цветков растений рода Tagetes позволяет осуществлять сбор соцветий с начала цветения до первых заморозков. Оптимальным сроком является середина августа, так как в этот период высок процент цветущих растений и содержание диэфиоров лютеина находится на высоком уровне.

Проведенные исследования позволяют рекомендовать для промышленного использования в условиях Белгородской области сорта, цветки которых наиболее интенсивно окрашены в оранжевый цвет. В нашем случае это сорта — «Сиера оранжевый», «Родос» и «Оранжевый снег». Несмотря на то, что урожайность цветков Т. patula L. выше (исключением стал 2008 год, наиболее засушливый), более предпочтительными для выращивания в условиях Белгородской области в промышленных масштабах является Т. erecta L. Это связано с тем, что технологически выгоднее убирать более крупные соцветия, которые зацветают на одном растении практически одновременно, в отличие от Т. patula L., цветение которого сильно растянуто. Отметим, что высокая густота посева в 2008 г. привела к снижению биопродукгивности для обоих видов, что связано с уменьшением площади питания, а засушливые условия лета позволили Т. erecta L. увеличить урожайность за счет более развитой корневой системы.

Для увеличения биопродуктивности необходимо рекомендовать сорта с более плотными соцветиями, что позволит получить более высокий процент цветков от массы соцветий. Исходя из вышеуказанных соображений, из всех исследованных сортов наибольшей урожайностью соцветий и содержанием диэфиров лютеина выделяется сорт Т. erecta L. «Сиера оранжевый», который необходимо рекомендовать для промышленного выращивания в условиях Белгородской области.

Для решения проблемы повышения доли зеаксантина в цветках известно получение мутантов с измененным биосинтезом ксантофиллов, альтернативой этому может быть использование других растений, которые могут быть источниками зеаксантина. Среди растений семейства Asteraceae таких источников нами найдено не было и в качестве поставщика зеаксантина был предложен физалис декоративный Physalis alkekengi L. (Solanaceae), который может с успехом быть использован в условиях Белгорода.

Отличительной особенностью Т. patula L. (и Т. tenuifolia L.) по сравнению с Т. erecta L. является накопление в цветках не только ксантофиллов, но и антоцианов, обеспечивающих появление пятен темно-вишневого цвета. Несмотря на то, что одновременный биосинтез каротиноидов и антоцианов характерен для целого ряда растений, необычность этого явления связана с тем, что каротиноиды чувствительны к кислой среде, необходимой для существования антоцианов, т.е. аккумуляция этих пигментов должна происходить в разных частях клетки.

На рис. 6-7 представлены фотографии поперечных срезов лепестков цветков Т. patula L. с бордовыми пятнами. Ксантофиллы накапливаются в хромопластах, так же как и у Г. erecta L. в то время как антоцианы растворены в цитоплазме клетки. Именно поэтому при разрушении клеточной стенки антоцианы будут экстрагироваться первыми, а для экстракции каротиноидов необходимо разрушение мембраны хромопластов. Тогда становится понятным почему при помещении лепестков цветков в ацетон первыми извлекаются именно антоцианы, а для экстракции ксантофиллов необходимо механическое

Рис. 7. Сосочковые клетки верхнего эпидермиса с хромопластами (в цитоплазме антоцианы) лепестков цветков Т. раЫа Ь. 40/0,065 х 10/18

Практический интерес представляло исследование влияния накопления антоцианов на уровень содержания ксантофиллов. Так на рис. 8 представлены спектры солянокислого экстракта цветков бархатцев светло-вишневой и темно-вишневой окраски.

Рис. 8. Спектры солянокислых экстрактов лепестков цветков Т. patula L: 1 - экстракт с пятнами светло-вишневой окраски; 2 - экстракт с пятнами темно-вишневой окраски

Рис. 6. Поперечный срез лепестков цветков Т. раШ1а Ь. с красной окраской цветков 10/0,25 х 10/18

Оба спектра практически идентичны, хотя записаны с интервалом в полмесяца. Но особо обращает внимание на себя тот факт, что, во-первых, виден шлейф от относительно коротковолнового поглощения, во-вторых, сам пик поглощения довольно широк и максимум смещен в длинноволновую область. Такой характер спектра может свидетельствовать о возможности копигментации антоцианов цветков бархатцев с сопутствующими экстрактивными веществами.

По данным ВЭЖХ исследований основным компонентом антоцианового комплекса является цианидина-З-глюкозид, хотя вклад других производных цианидина достаточно велик. При пересчете на цианидина-З-глюкозид (в^й е! а1., 2000) содержание антоцианов в лепестках цветков с вишнево-красными пятнами различной интенсивности составило в среднем 1.40 мг/г лепестков. При этом анализ показал необычайно высокое накопление ксантофиллов (в пересчете на лютеин (Иос^иев-Атауа й а1., 2004)), в среднем 2.9 мг/г свежих лепестков цветков. Важно, что при довольно большом разбросе показателей по содержанию пигментов никакой корреляции между содержанием антоцианов и ксантофиллов обнаружено не было. В 2006 году для образцов Т. раш1а Ь. были получены другие результаты - 1.45 мг/г антоцианов и лишь порядка 2 мг/г ксантофиллов свежих лепестков цветков. Вполне возможно, что причина такого различия кроется в погодных условиях - данные этого года получены для образцов, собранных в начале августа, в то время как прошлогодние результаты датируются началом октября.

Соотношение между диэфирами практически не зависит от накопления антоцианов в лепестках (таблица 3).

Таблица 3

Относительное содержание различных видов диэфиров в днэфирной фракции

№ Радикалы кислот Относительная доля диэфиров, моль %, ± 0,7%

Т. patula L. Т. erecta L.

а б в г

1 С12 + С14 6.1 5.8 5.8 6.5 2.6

2 С14 + С14 20.6 20.6 19.2 20.5 11.6

3 С14 + С16 30.9 32.7 31.4 31.8 23.2

4 С16 + С16 28.4 28.5 29.9 28.8 38.1

5 С16 + С18 11.5 10.6 11.7 10.3 18.9

6 С18 + С18 2.5 1.9 2.0 2.0 5.6

С12 - лауриновая, С14- миристиновая, С16 - пальмитиновая и С18 - стеариновая кислоты; окраска цветков Т. patula L.: а - темно вишнево-красная, б - вишнево-красная; в - бледно вишнево-красная; г - оранжевая; Т. erecta L. - оранжевая.

Обнаруженные закономерности по характеру совместного накопления антоцианов и каротиноидов диктуют важную особенность подготовки образца к анализу. Растирание лепестков цветков с кварцевым песком приводит к возможности быстрой и полной экстракции каротиноидов. Впрочем, по ряду причин (включая необходимость отделения экстракта от мелкодисперсных частиц центрифугированием) предпочтение было отдано разминанию лепестков цветков под слоем экстрагента. Для определения антоцианов растирание свежих образцов лепестков цветков бархатцев с кварцевым песком недопустимо. Дело в том, что рН внутриклеточной жидкости лепестков цветков

равно примерно 5, а антоцианы уже при рН = 4.5 превращаются в неокрашенные псевдооснования (Goto, 1987). Последние подвержены превращению в г/нс-халконы (далее в транс-хшаошл, обратное превращение которых в антоцианы при подкислении - процесс медленный) и окислению. Вследствие указанных превращений было установлено, что выход антоцианов падает до 30%, а в некоторых случаях антоцианы терялись полностью при экстракции ацетоном.

К числу важнейших соединений, специфичных для некоторых растений семейства сложноцветные, а поэтому даже используемых в хемосистематике, относятся серосодержащие гетероциклические соединения - производные тиофенов и (или) тиарубринов (Gommers et al., 1976). Известно, что бархатцы во всех частях растения накапливают политиофены (Vasudevan et al., 1997). Эти соединения представляют большой интерес для регулирования численности нематод в почве, уничтожения некоторых насекомых, для борьбы с грибными заболеваниями и т.д. (Mukundan et al., 1990; Kyo et al., 1990; Fokialakis et al., 2006). Наиболее важными из политиофенов являются четыре соединения:

g-O-g gu^

Q Ю

ш V=o rv

cHi

Липофильность, выраженная логарифмом коэффициента распределения вещества между октанолом-1 и водой, и коррелирующая с биологической активностью соединений (Hansch et al., 1964), достаточно высока для соединений I - IV и убывает в ряду I > II > III > IV. По литературным данным (Stitfeld et al., 1982) первые два соединения (самые липофильные из рассмотренного ряда) являются основными тиофенами, накапливающимися в боковых корнях бархатцев (Т. patula L.). В других частях растений могут преобладать соединения III и IV. Хроматограммы экстрактов боковых корней бархатцев трех видов представлены на рис. 9.

sphaerocephalus L.. Колонка: 250><4 мм, Диасфер-110-С18, 5 мкм; подвижная фаза: вода-ацетонтрил (20 : 80 об.), 1 мл/мин., детектор: 340 нм.

Для трех изученных видов Tagetes основным тиофеном является второй компонент при переходе от Т. tenuifolia L. к Т. erecta L. увеличивается доля менее липофильного соединения III и более липофильного I. Вещества I-III были идентифицированы с использованием разделения экстракта на три фракции тиофенов с последующим определением соединений методом ГЖХ с масс-спектрометрическим детектированием.

Проблему количественного определения тиофенов решали комбинацией спектрофотометрического и хроматографического методов с учетом того, что молярные коэффициенты экстинкции тиофенов (I - III) различаются не более чем на 1-2% (Norton et al., 1985). В работе был использован молярный коэффициент экстинкции для соединения I, е(1) = 24100 моль",-дм3-см"' (Sease et al., 1947). Для количественного определения тиофенов в условиях ВЭЖХ выделяли концентрированную фракцию суммы соединений I + II, в полученном концентрате определяли концентрацию тиофенов спектрофотометрическим методом; этот же концентрат затем использовали для градуировки отклика детектора, используя в дальнейшем этот же градуировочный коэффициент для веществ I - III. Результаты определения тиофенов в некоторых объектах представлены в таблице 4.

Таблица 4

Содержание тиофенов I - III в корнях бархатцев и мордовника_

Объект Содержание тиофенов, г на 100 сухого материала

I III Сумма

Tagetes tenuifolia L. (бархатцы тонколистные)

боковые корни 0,079 ± 0,005 0,722 ±0,012 0,158 ±0,003 0,959 ±0,020

Т. patula L. (бархатцы отклоненные)

боковые корни 0,114 ±0,007 0,535 ± 0,020 0,035 ± 0,005 0,684 ± 0,032

Т. erecta L. (бархатцы прямостоячие)

боковые корни 0,122 ±0,005 0,172 ±0,010 ОД 16 ±0,010 0,418 ±0,025

кора основного корня 0,012 0,071 0,827 0,911

основной корень 0,013 0,011 0,114 0,138

Echinops sphaerocephalus L. (мордовник шароголовый)

боковые корни 0,394 ± 0,020 0,957 ± 0,005 0,018 ±0,002 1,269 ±0,027

кора основного корня 0,121 4,177 1,482 5,780

основной корень 0,002 0,113 0,041 0,156

Исследуя экстракты боковых корней других растений семейства Asteraceae (Ambrosia artemisiifolia L., Echinops sphaerocephalus L., Solidago canadensis L., Tanacetum vulgare L.), которые по литературным данным накапливают тиофены, мы только в экстракте Echinops sphaerocephalus L. обнаружили их в значительных количествах. Изучая особенности накопления тиофенов в главных корнях, нами было установлено, что большая часть этих соединений накапливается в коре, что связано с их биологической ролью в отпугивании вредителей.

выводы

1. Видовой состав семейства Asteraceae на территории Белгородской области составляет 56 родов и 197 видов растений, из которых 12 видов занесены в Красную книгу Белгородской области, 15 являются кандидатами на включение, В видов впервые отмечены для Белгородской области, 7 видов относятся к исчезнувшим, нахождение которых вызывает сомнение, и 32 вида произрастают в культуре.

2. Типологическая структура дикорастущих растений семейства Asteraceae на территории Белгородской области соответствует биологическому спектру умеренно холодных зон, преимущественно степного типа и характеризующихся как умеренно антропогенно трансформированные.

3. В качестве эффективных источников для промышленного получения биологически активных веществ предложены растения рода Tagetes как источник лютеина, тиофенов; Cosmos sulphureus Cav. как источник лютеина, и Echinops sphaerocephalus L. как источник тиофенов.

4. У растений рода Tagetes ксантофиллы накапливаются в хромопластах, имеющих шарообразную форму, присутствуют во всех клетках мезофилла, но концентрируются в основном в эпидермальных; на цветки приходится 50 - 60% от массы соцветий, полезная масса выше у Tagetes erecta L.

5. Накопление ксантофиллов усиливается при увеличении их степени этерификации, следовательно, более предпочтительными для выращивания в условиях Белгородской области в промышленных масштабах являются растения с оранжевыми цветками вида Tagetes erecta L. сорта «Сиера оранжевый», содержащего до 4 мг/г диэфиров лютеина.

6. Накопление антоцианов не коррелирует с накоплением ксантофиллов, что позволяет рассматривать Tagetes patula L. как источники и ксантофиллов, и антоцианов.

СПИСОК ОСНОВНЫХ РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕДИССЕРТАЦИИ

* - работы, опубликованные в рекомендованных ВАК РФ изданиях

1. Колчанов А.Ф. Инвентаризация охраняемых территорий и сохранение видов / А.Ф. Колчанов, P.A. Колчанов, A.A. Немыкин, М.Ю. Третьяков // Сборник студенческих научных работ: В 3-х ч. - Белгород: Изд-во БелГУ, 2004. - Вып. VII. -Ч. I. С. 103-107.

2. Красная книга Белгородской области. Редкие и исчезающие растения, грибы, лишайники и животные. Официальное издание / Общ. науч. ред. A.B. Присный. -Белгород, 2004. - с. 53-264.

3. Третьяков М.Ю. Дикорастущие лекарственные растения семейства Asteraceae на территории Белгородской области/ М.Ю. Третьяков, Ю.В. Захарова // Материалы Международной научно-практической конференции, 14 апреля 2006 г. -Белгород: ИПЦ «ПОЛИТЕРРА», 2006. - С. 140-144.

4. Третьяков М.Ю. Некоторые дикорастущие лекарственные растения семейства Asteraceae на территории Белгородской области / М.Ю. Третьяков //

Материалы Международной Конференции Молодых Ботаников в Санкт-Петербурге (21-26 мая 2006). - СПб. Издательство ГЭТУ, 2006, С. 276.

5. Третьяков М.Ю. Род Tagetes L. — перспективы его изучения / М.Ю. Третьяков, В.Н. Сорокопудов, В.И. Дейнека, H.H. Нетребенко // Материалы чтений, посвященных 300-летию с дня рождения К. Линнея / Ред. Соколов И.Д. - Луганск: Элтон-2, 2007.-С. 97-99.

6. Дейнека Л.А. Ксантофиллы лепестков цветков бархатцев: сорбционное концентрирование и сохранность при хранении / Л.А. Дейнека, A.A. Коробанова, М.Ю. Третьяков // Наука и устойчивое развитие общества. Наследие В.И. Вернадского: Сборник материалов 2-й международной научно-практической конференции 28-29 сентября 2007. - Тамбов: Издательство ТАМБОВПРИНТ, 2007. -С. 66-67. #

7. Дейнека В.И. Исследование цветков Tagetes sp. как источника лютеина / В.И. Дейнека, В.Н. Сорокопудов, Л.А. Дейнека, М.Ю. Третьяков // Химико-фармацевтический журнат. Том 41, №10, Москва: «Фолиум», 2007. - С. 30-32.

8. Дейнека В.И. Исследование плодов Physalis alkekengi L. как источника ксантофиллов / В.И. Дейнека, В.Н. Сорокопудов, Л.А. Дейнека, М.Ю. Третьяков, В.В. Фесенко // Химико-фармацевтический журнал. Том 42, №2, Москва: «Фолиум», 2008 -С. 36-37.

9. Дейнека В.И. Некоторые особенности накопления пигментов в цветках Tagetes sp. / В.И. Дейнека, М.Ю. Третьяков, Л.А. Дейнека, В.Н. Сорокопудов // Научные ведомости Белгородского государственного университета серия естественные науки №5 (36) Вып. 5., 2007 - С. 123-129.

10. Коробанова A.A. Пищевой дизайн: Композиции ксантофиллов на основе растительных и животных жиров / A.A. Коробанова, М.Ю. Третьяков, Л.А. Дейнека, В.И. Дейнека И Лекарственные растения и биологически активные вещества: фототерапия, фармация, фармакология: матер, междунар. научн.-практич. конф., посвященной Дню Российской науки, Белгород, 8 февраля 2008 г. / Под ред. профессора В.Н. Сорокопудова. - Белгород: «Политерра», 2008. - С. 87-91.

11. Сорокопудов В.Н. Дикорастущие лекарственные растения Белгородской области (ареал, биология, систематический состав, применение, препараты): монография / В.Н. Сорокопудов, О.О. Новиков, H.H. Нетребенко, М.Ю. Третьяков, Д.И. Писарев, Е.Ю.Тимошенко. Белгород: ИПЦ «Политерра», 2008. - 289 с.

12. Биологически активная добавка для кур и способ ее получения: заявка на патент № 2007113094. Дата приоритета 09.04.2007. Решение о выдаче патента от 28 января 2008 г.

Подписано в печать 15.12.2008. Гарнитура Times New Roman.

Формат60x84/16. Усл. п. л. 1,0. Тираж 100 экз. 3ахаз318. Оригннал-макет подготовлен и тиражирован в издательстве Белгородского государственного университета 308015, г. Белгород, ул. Победы, 85

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Третьяков, Михаил Юрьевич

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ИСТОРИЯ ИЗУЧЕНИЯ ВО ФЛОРЕ БЕЛГОРОДСКОЙ ОБЛАСТИ И БИОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА СЕМЕЙСТВА А8ТЕ11АСЕАЕ.

1.1. Краткая история изучения растительного покрова и семейства АБ1егасеае Белгородской области.

1.2. Биологическая характеристика семейства АБ1егасеае.

1.3. Некоторые биологически активные вещества растений семейства Аз1егасеае.

1.3.1. Особенности строения, синтеза ксантофиллов и их биологическая активность.

1.3.2. Особенности строения, синтеза тиофенов и их биологическая активность.

Глава 2. ФИЗИКО-ГЕОГРАФИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА БЕЛГОРОДСКОЙ ОБЛАСТИ.

2.1. Физико-географические условия.

2.2. Погодные условия в годы проведения исследований.

2.3. Современное состояние флоры.

Глава 3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

3.1. Биологические методы.

3.2. Химические методы.

3.2.1. Методики приготовления экстрактов ксантофиллов. Выбор условий экстракции ксантофиллов из растительного сырья.

3.2.2. Методики изучения сохранности ксантофиллов в маслах.

3.2.2.1. Методика изучения сохранности ксантофиллов в сливочном масле.

3.2.2.2. Методика изучения сохранности ксантофиллов в подсолнечном масле.

3.2.3. Получение образцов ксантофиллов, сорбированных на силикагеле, для изучения сохранности при различных условиях.

3.2.4. Хроматографические методы.

3.3. Статистические методы.

Глава 4. СЕМЕЙСТВО ASTERACEAE (COMPOSITAE) DUMORT. ВО ФЛОРЕ БЕЛГОРОДСКОЙ ОБЛАСТИ.

4.1. Дикорастущие представители семейства Asteraceae во флоре Белгородской области.

4.1.1. Виды, произрастающие на территории области.

4.1.2. Виды исчезнувшие и нахождение которых вызывает сомнение.

4.1.3. Таксономический анализ.

4.1.4. Биоморфологичесикй анализ конспекта дикорастущих представителей семейства Asteraceae.

4.2. Культивируемые представители семейства Asteraceae во флоре Белгородской области.

Глава 5. ОСОБЕННОСТИ НАКОПЛЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ НЕКОТОРЫМИ ПРЕДСТАВИТЕЛЯМИ СЕМЕЙСТВА

ASTERACEAE.

5.1. Ксантофиллы.г.:.

5.1.1. Исследование ксантофиллов методом ВЭЖХ.

5.1.2. Качественный анализ ксантофиллов некоторых растений семейства Asetraceae Белгородской флоры.

5.1.3. Исследование экстракции ксантофиллов.

5.1.3.1. Влияние степени измельчения лепестков бархатцев на степень экстракции диэфиров ксантофиллов.

5.1.3.2. Влияние растворителя на степень экстракции ксантофиллов.

5.1.3.3. Влияние соотношения: сырьё экстрагент на степень экстракции ксантофиллов.

5.1.4. Количественный анализ ксантофиллов некоторых представителей рода Tagetes.Ill

5.1.5. Морфо-анатомические особенности некоторых представителей рода

Tagetes.

5.1.5.1. Морфологические особенности.

5.1.5.2. Анатомические особенности.

5.1.6. Влияние антоцианов на синтез ксантофиллов в цветках Tagetes patula L.

5.1.7. Сохранность ксантофиллов на силикагеле и в композициях на основе масел.

5.1.7.1. Зависимость от поверхностной концентрации ксантофиллов и условий хранения на силикагеле.

5.1.7.2. Сохранность ксантофиллов в сливочном масле.

5.1.7.3. Сохранность ксантофиллов в подсолнечном масле.

5.2. Тиофены.

5.2.1. Качественный анализ тиофенов хроматографическими методами

5.2.1.1. ВЭЖХтиофенов.

5.2.1.2. Тонкослойная хроматография.

5.2.1.3. ГЖХ и масс-спектрометрия.

5.2.2. Количественный анализ тиофенов некоторых представителей семейства Asteraceae.

5.2.3. Разработка метода очистки ксантофиллов от тиофенов.

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Морфо-анатомические и биохимические особенности некоторых представителей семейства Asteraceae Dumort. в условиях Белгородской области"

Актуальность исследования. Первые сведения о растительном покрове Белгородской области появились в конце ХУШ столетия (Зуев, 1787). В настоящее время флора Белгородской области насчитывает от 1167 (Еленевский и др., 2004) до 1457 (Колчанов, 1995) видов. Охватить все это разнообразие достаточно трудно, однако изучение отдельных семейств наиболее перспективно, так как позволяет в короткие сроки собрать достаточно информации обо всех или почти всех представителях, произрастающих на территории области. Именно такие данные являются основой флористических исследований флоры области в целом (Полуянов, 2005).

Сложноцветные - самое крупное семейство двудольных растений. В нем от 1250 до 1300 родов и более 25 000 видов (Яковлев и др., 1997). Из 125 семейств во флоре области именно это семейство занимает лидирующее положение (11,7%) (Колчанов, 2004), (13,4% от общего числа) (Еленевский и др., 2004). Особый интерес представляют некоторые представители этого семейства в связи с их практической значимостью как возможные источники биологически активных веществ. В частности растения рода Tagetes L. (бархатцы), которые накапливают в цветках беспрецедентно высокое количество лютеина, что делает их главным промышленным источником этого ксантофилла (Bosma et al., 2003; Rodriguez-Carmona et al., 2006). Многочисленные исследования свидетельствуют о связи между поступлением лютеина в организм человека, увеличением плотности макулярного пигмента и снижением риска развития возрастной макулярной дегенерации (ВМД) (Snodderly et al., 1984; Bone et al., 1988; Seddon et al., 1994; Hammond et al., 1997; Landrum et al., 1997; Sommerburg et al., 1998; Mohammedshah et al., 1999; Beatty et al., 2001; Johnson, 2002). Однако бархатцы во всех частях растения накапливают политиофены, токсичные по отношению к некоторым грибам и нематодам

Mukundan et al., 1991) и вызывают контактный дерматит у человека (Towers et al., 1979), поэтому очистка ксантофиллов от тиофенов является необходимым условием получения чистых препаратов.

Известно, что биодоступность лютеина из желтка куриных яиц выше, чем из растений (Chung, 2004), это, вероятно, связано с лучшей адгезией жировых капель стенками кишечника, что представляет практический интерес для создания жировых композиций, обогащенных лютеином, что значительно сокращает путь ксантофиллов до макулы. На основе ксантофиллов Tagetes созданы кормовые добавки для кур («ОРОГЛО»). В них используют сорбенты, концентрирующие на поверхности ксантофиллы, закрытые стабилизирующими добавками и закрывающими компонентами. Следовательно, поиск сорбентов, пригодных для создания основы капсулированных форм, представляет не только теоретический, но и практический интерес (Дейнека JI.A. и др., 2007).

Ряд высокодекоративных сортов бархатцев отклоненных (Г. patula L.) имеют цветки с темно-вишневыми пятнами, наличие которых связано с биосинтезом антоцианов. Однако никаких упоминаний об исследовании этих пигментов и их влиянии на накопление ксантофиллов при совместном присутствии в лепестках цветков антоцианов и каротиноидов в литературе нами обнаружено не было. Важность этого вопроса связана с тем, что антоцианы существуют в кислой среде, в то время как в кислых средах каротиноиды не отличаются устойчивостью.

Цель исследования. Выявление морфо-анатомических и биохимических особенностей некоторых представителей семейства Asteraceae в условиях Белгородской области. Задачи исследования:

1. Уточнить видовой состав и ареалы представителей семейства Asteraceae по территории Белгородской области;

2. Провести анализ жизненных форм семейства Asteraceae;

3. Поиск биологически активных веществ (ксантофиллов и тиофенов) в дикорастущих и культивируемых растениях семейства Asteraceae;

4. Выявить морфо-анатомические особенности репродуктивных органов рода Tagetes в условиях Белгородской области, связанные с накоплением ксантофиллов;

Научная новизна. Выявлены новые места произрастания ряда видов семейства Asteraceae по территории Белгородской области, проведен анализ их жизненных форм. Изучены морфо-анатомические особенности репродуктивных органов рода Tagetes, определены особенности локализации и накопления пигментов. Впервые исследованы интенсивность и особенности биосинтеза ксантофиллов в лепестках некоторых видов и сортов растений рода Tagetes в условиях Белгородской области. Установлены особенности биосинтеза для цветков различной окраски. Выявлены сорта рода Tagetes, содержащие значительное количество ксантофиллов (лютеина), которые можно рекомендовать для промышленного выращивания в условиях Белгородской области. Впервые выполнено исследование совместного биосинтеза ксантофиллов и антоцианов в цветках некоторых сортов вида T.patula L. и политиофенов в различных частях растений рода Tagetes в условиях Белгорода. Проведен поиск источников ксантофиллов и политиофенов в некоторых культурных и дикорастущих растениях семейства Asteraceae. Установлена потенциальная возможность выращивания Tagetes erecta L., Cosmos sulphureus Cav. для промышленного получения лютеина и Tagetes ssp. и Echinops sphaerocephalus L. как источника политиофенов.

Практическая ценность работы. Результаты работы могут применяться в природоохранной деятельности для сохранения мест произрастания редких и исчезающих видов семейства Asteraceae, включенных в Красные книги России и Красную книгу Белгородской области, а также позволяют уточнить биологические запасы и расширить представления о распространении изученных видов. Материалы по содержанию ксантофиллов в цветках рода Tagetes представляют практический интерес, так как позволяют рекомендовать перспективные сорта для получения сырья для фармации. Получены данные по сезонной динамике накопления ксантофиллов и биопродуктивности разных видов рода Tagetes, необходимые для внедрения промышленной технологии выращивания этих растений. Найден источник зеаксантина (Physalis alkékengi L.), позволяющий дополнить комплекс ксантофиллов до необходимого для здоровья человека соотношения лютеин : зеаксантин (4:1), что позволило создать эффективную кормовую добавку для птицеводства. Предложенные методы очистки ксантофиллов от политиофенов повысят качество получаемой продукции.

Ботаников в Санкт-Петербурге (Санкт-Петербург, 2006); Международной научно-практической конференции: «Нетрадиционные и редкие растения, природные соединения и перспективы их использования». VII Международный симпозиум; Материалы научной конференции «Флора и растительность Центрального Черноземья» (Курск, 2007; 2008); чтениях, посвященных 300-летию со дня рождения К. Линнея (Луганск, 2007); Международной научной конференции «Современные проблемы интродукции и сохранения биоразнообразия растений» (Воронеж, 2007); Материалы 2-й международной научно-практической конференции «Наука и устойчивое развитие общества. Наследие В.И. Вернадского» (Тамбов, 2007); Международной научно-практической конференции, посвященной Дню Российской науки «Лекарственные растения и биологически активные вещества: фитотерапия, фармация, фармакология» (Белгород, 2008); V Всероссийской научной конференции «Химия и технология растительных веществ» (Сыктывкар - Уфа, 2008); Международной научной конференции «Современное состояние, проблемы и перспективы региональных ботанических исследований» (Воронеж, 2008).

Заключение Диссертация по теме "Ботаника", Третьяков, Михаил Юрьевич

выводы

1. Видовой состав семейства Asteraceae на территории Белгородской области составляет 56 родов и 197 видов растений, из которых 12 видов занесены в Красную книгу Белгородской области, 15 являются кандидатами на включение, 8 видов впервые отмечены для Белгородской области, 7 видов относятся к исчезнувшим, нахождение которых вызывает сомнение, и 32 вида произрастают в культуре.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Третьяков, Михаил Юрьевич, Белгород

1. Агафонов В.А. К охране растительного покрова Белгородской и

2. Курской областей // Проблемы интродукции и экологии Центрального Черноземья: Сб. науч. Тр., посвящ. 60-летию Бот. сада им проф. Б.М. Козо-Полянского. Воронеж. 1997. - С. 65-69.

3. Александрова К.И., Барабаш Г.И. Растительность некоторых урочищ Белгородской меловой гряды. // Флора и растительность Средней России: Материалы науч. конф., 3-5 окт. 1997 г., 1997. С. 94-95.

4. Алехин В.В. Растительность Курской губернии. Курск. 1926 - 122 с.

5. Алехин В.В. Флора Центрально-Черноземного заповедника // ТР. Центр.-Черноз. гос. заповедника. М., 1940, вып. 1. - С. 8-144.

6. Антимонов H.A. Природа Белгородской области. Белгородское книжное издательство, 1959,- С. 6-106.

7. Арбузова М.В. Некоторые дополнения к флоре Белгородской области // Флора и растительность Центрального Черноземья 2005: Материалы научной конференции (Курск, 24 марта 2005 г.). Курск: Изд-во ИПКиПРО, 2005. - С. 10.

8. Билич Г.Л. Биология полный курс. В 3-х т. Том. 2 Ботаника // Г.Л. Билич, В.А. Крыжановский. — 3-е стер. Изд. М.: ООО «Издательство Оникс», 2005. -С. 199.

9. Бриттон Г. Биохимия природных пигментов: Пер. с англ. М - Мир, 1986. -422 с.

10. Бородина А.П., Колчанов А.Ф. Редкие растения Белгородской области, подлежащие охране // Охрана и рациональное использование компонентовгеосферы: Метод, указания для студ. заоч. отделения по курсу «Охрана природы». Белгород. 1990 — С. 9-21.

11. Виноградов Н.П., Голицын C.B. Послевоенное состояние наиболее интересных местонахождений реликтовых растений Верхнего Поосколья и Северо-Донского реликтового района (к организации заповедников) // Тр. Воронежск. гос. ун-та, 1949. Т. 15. С. 164-205.

12. Виноградов Н.П., Голицын C.B. Реликты северного Дона. // Бот. журн., 1950. Т. 35. №1.- С. 70-71.

13. Виноградов Н.П., Голицын C.B. «Сниженные альпы» и тимьянники Среднерусской возвышенности. // Бот. жур. 1954. Т. 39, № 3. С. 423-430.

14. Виноградов Н.П., Голицын C.B. К истории флоры сниженных альп Среднерусской возвышенности. // Проблемы филогении и филогенеза: Хроника 5 совещания по филогении растений ВБО в марте 1958 г., JI. 1960. -С. 48-49.

15. Виноградов Н.П., Голицын C.B. К истории флоры сниженных альп Среднерусской возвышенности. // Матер, по ист. флоры и растительности СССР. М.; Л.: Изд-во АН СССР, 1963, вып. 4. - С. 426-437.

16. Владимиров B.JL, Шапошников A.A., Дейнека Д.В., Вострикова С.И., Дейнека В.И. Исследование каротиноидного состава желтка куриных яиц. // Доклады РАСХН. 2005. № 6. С. 46-48.

17. Высочина Г.И. Биохимические подходы к познанию биоразнообразия растительного мира//Сиб. экол. журн., 1999. Т. 3. С. 207-211.

18. Галинская К.К. География Белгородской области. Воронеж: Центрально-Черноземное книжное издательство, 1976. - 104 с.

19. Голицын C.B. «Сниженные альпы» и меловые иссопники Среднерусской возвышенности // Докл. по опубл. работам. Воронеж. 1956. -16 с.

20. Голицын C.B. К флоре восточного крыла верхнего Поосколья // Бот. журн. 1956, а, Т. 41. № 10-С. 1428-1438.

21. Григорьевская АЛ. Современное состояние растительного покрова мелового бора Стенки-Изгорья (юг Среднерусской возвьппенности) и его охрана// Самарская Лука: Бюл. -1993. № 4. С. 136-162.

22. Григорьевская А Л. Растительный покров уникальных реликтовых лесов Центрально-Черноземного района (ЦЧР) // Проблемы сохранения разнообразия природы степных и лесостепных регионов: Материалы Рос. -Укр. науч. конф. 22-27 мая 1995г. -М. 1995. С. 98-100.

23. Гроссет Г.Э. Лес и степь в их взаимоотношениях в пределах лесостепной полосы Восточной Европы. Воронеж: Изд-во Облплана ЦЧО, 1930 - 91 с.

24. Гроссет Г.Э. Пути и время миграции лесных крымско-кавказских видов на территорию Русской равнины и последующие изменения их ареалов в связис эволюцией ландшафтов // Бюл. МОИП. Отд. биол .- 1967. Т. 72, вып.5. С. > 47-76.1 I (

25. Губанов И.А., Киселева К.В., Новиков B.C., Тихомиров В.Н. Определитель сосудистых растений центра европейской России. — М.: Аргус, 1995.-560 с.

26. Гудвин Т. Сравнительная биохимия каротиноидов. пер. с англ. — М.: Иностранная литература, 1954. 374 с.

27. Гусев A.B., Гарнат A.B., Федотов А.Н. Нахождение Cypripedium calceolus L. и других редких растений в Новооскольском р-не // Экологическая безопасность и здоровье людей в 21 веке: Матер. VI Всерос. научн.-практич. конференции. Белгород. 2000. С. 33-34.

28. Гусев A.B. Флористический состав иссопников Новооскольского района // Флора и растительность Центрального Черноземья — 2004: Материалы научной конференции (Курск, 23 марта 2004 г.). Курск: Изд-во ИПКиПРО, 2004. С. 65-68.

29. Гусев A.B. Редкие растения Новооскольского района // Флора и растительность Центрального Черноземья 2005: Материалы научнойконференции (Курск, 24 марта 2005 г.). Курск: Изд-во ИПКиПРО, 2005. С. 17-20.

30. Гусев A.B. Флора верховьев бассейна реки Усердец. Балка грибная // Актуальные проблемы ботаники и методики преподавания биологии. Материалы II Международной научно-практической конференции. 24-26 сентября 2007 г. Белгород: ПОЛИТЕРРА, 2007. - С. 38-40.

31. Гусев A.B., Ермакова Е.И. Флора окрестностей с. Маломихайловка Шебекинского района Белгородской области // Флора и растительность Центрального Черноземья 2007: Материалы научной конференции (Курск, 28 марта 2007 г.). Курск, 2007. - С. 11-12.

32. Гусев A.B. К вопросу о мониторинге растений Красной книги Белгородской области // Флора и растительность Центрального Черноземья -2007: Материалы научной конференции (Курск, 28 марта 2007 г.). Курск, 2007.-С. 9-10.

33. Гусев A.B. Охраняемые растения Белгородской области во флоре правобережья р. Айдар // Флора и растительность Центрального Черноземья 2008: Материалы научной конференции (Курск, 27 марта 2008 г.). Курск, 2008. - С. 20-22.

34. Гусев A.B., Ермакова Е.И. Охраняемые растения Белгородской области во флоре Ровеньского района // Флора и растительность Центрального Черноземья 2008: Материалы научной конференции (Курск, 27 марта 2008 г.). Курск, 2008. - С. 28-29.

35. Гусев A.B. Флора верховьев бассейна р. Усердец (балка Долинская) // Флора и растительность Центрального Черноземья 2008: Материалы научной конференции (Курск, 27 марта 2008 г.). Курск, 2008. — С. 18-20.

36. Гусев A.B., Ермакова Е.И. Виды Красной книги Белгородской области во флоре бассейна р. Сарма // Флора и растительность Центрального Черноземья 2008: Материалы научной конференции (Курск, 27 марта 2008 г.). Курск, 2008. - С. 22-26.

37. Гусев A.B., Ермакова Е.И. Флористические находки в бассейне р. Айдар (окрестности с. Нижняя Серебрянка) // Флора и растительность

38. Центрального Черноземья 2008: Материалы научной конференции (Курск, 27 марта 2008 г.). Курск, 2008. - С. 26-28.

39. Гусев A.B., Ермакова Е.И. Флора и растительность урочища Борки Валуйского района Белгородской области // Флора и растительность Центрального Черноземья 2008: Материалы научной конференции (Курск, 27 марта 2008 г.). Курск, 2008. - С. 29-31.

40. Гусев A.B., Ермакова Е.И. Флора и растительность урочища Белая гора (Корочанский район Белгородской области) // Флора и растительность Центрального Черноземья 2008: Материалы научной конференции (Курск, 27 марта 2008 г.). Курск, 2008. - С. 31-33.

41. Дейнека В.И., Староверов В.М., Фофанов Г.М., Балятинская JI.H. Инкрементный подход при определении состава триглицеридов. //Хим.-фарм. ж. 2002. т. 36. - № 7. - С.44-47.

42. Дейнека В.И., Фофанов Г.М., Хлебников В.А., Балятинская JI.H. Инкрементный подход в расчете жирнокислотного состава триглицеридов. // Хранение и переработка сельхозсырья. 2002. № 11. С.20-23.

43. Дейнека В .И., Дейнека Л. А., Габрук Н.Г., Фофанов Г.М., Манохина Л.А., Сидельникова Н.А. Анализ растительных масел с использованием ВЭЖХ. // Ж. аналит. химии. 2003. Т. 58. № 12. С. 1294-1299.

44. Дейнека В.И. Карта хроматографического разделения и инкрементные зависимости в методе относительного анализа удерживания в ВЭЖХ // Ж. физ. химии. 2006. т. 80. № 3. С. 511-516.

45. Дейнека В.И. Экспериментальное обоснование метода относительного анализа удерживания в ВЭЖХ // Ж. физ. химии. 2006. т. 80. № 3. С. 507-510.

46. Дейнека В.И., Сорокопудов В.Н., Дейнека Л.А., Третьяков М.Ю. Исследование цветков Tagetes sp. как источника лютеина // Хим.-фарм. ж. 2007. Т. 41. №10. С. 30-32.

47. Дейнека В.И., Третьяков М.Ю., Сорокопудов В.Н. Флэш-хроматография: Очистка ксантофиллов бархатцев от тиофенов // Хроматография и хромато-масс-спектрометрия. Всероссийский симпозиум. Москва, 14-18 апр. 2008 г., Тезисы. М.: Граница. С. 114.

48. Джеффри Ч. Систематика сложноцветных (Compositae) в начале XXI века / /Ботанический журнал том 87, № 11, 2002 — С. 1-15.

49. Джоуль Дж, Смит Г. Основы химии гетероциклических соединений. М.: Издательство «Мир» 1975. С. 399.

50. Доронин Ю.А. Остатки мелового бора в урочище «Стенки-Изгорье» и его значение // Тр. Воронеж, обл. краевед, музея. 1960, вып. 1. - С. 94-110.

51. Доронин Ю.А. Современное состояние меловых боров Среднерусской возвышенности // Изв. Воронеж, гос. пед. ин-та, 1970. Т. 112. — С. 28-35.

52. Доронина Ю.А., Нешатаев Ю.Н., Ухачева В.Н. Сосудистые растения заповедника «Лес на Ворскле»: Аннотированный список видов / Под ред. В.Н. Тихомирова. — М., 1992. — 46 с.

53. Доронина Ю.А., Нешатаев Ю.Н., Ухачева В.Н. Флористический список степной балки «Астрасьев Яр» (Борисовский район Белгородской области) // Вестник СПб. ин-та. Серия 3, Биол. 1993, вып. 4 (№ 24). - С. 50-55.

54. Еленевский А.Г., Радыгина В.И., Чаадаева H.H. О некоторых редких и новых видах Белгородской области // Флора и растительность Средней России: Материалы науч. конф., 3-5 окт. 1997 г. Орел, 1997. - С. 19-20.

55. Еленевский А.Г., Радыгина В.И., Чаадаева H.H. Растения Белгородской области: Конспект флоры. М.: МПГУ, 2004. - 120 с.

56. Еленевский А.Г. Ботаника. Систематика высших, или наземных растений: учеб. для студ. высш. пед. учеб. Заведений / А.Г Еленевский, М.П. Соловьева, В.Н. Тихомиров. 4-е изд., испр. - М.: Издательский центр «Академия», 2006. - С. 387-393.

57. Жизнь растений под ред. А.Л. Тахтаджяна Том 5 (2) М.: «Просвещение» 1981 С. 462-476.

58. Золотухин Н.И., Золотухина И.Б. Сосудистые растения // Тр. Центр.-Чернозем. заповед. М. 1995, вып. 14: Природа Лысых Гор — нового заповедного участка в Белгородский области. - С. 29-44.

59. Золотухин Н.И. Второе дополнение к флоре участка Лысые Горы заповедника «Белогорье» // Флора и растительность Центрального Черноземья 2005: Материалы научной конференции (Курск, 24 марта 2005 г.). Курск: Изд-во ИПКиПРО, 2005. - С. 32-35.

60. Золотухин Н.И. Новые материалы по адвентивным и сорным травянистым растениям заповедника «Белогорье» // Антропогенное влияние на флору и растительность. Материалы II научно-практической региональной конференции. — Липецк, 2007 — С. 26-32.

61. Золотухин Н.И. Дополнения и уточнения к флоре участка Лес на Ворскле заповедника «Белогорье» // Флора и растительность Центрального Черноземья 2008: Материалы научной конференции (Курск, 27 марта 2008 г.). Курск, 2008. - С. 34-37.

62. Зуев В.Ф. Путешественные записки от Петербурга до Херсона в 1781 и 1782 гг. СПб., 1787. - 275 с.

63. Казакова М.В., Тихомиров В.Н. О мнимых реликтах на Среднерусской возвышенности // Бюл. МОИП. Отд. биол., 1984. Т. 89, вып. 5. С. 102-117.

64. Камелин Р.В. Сложноцветные (краткий обзор системы). СПб.; Барнаул, 2000. 60 с.

65. Катасонова Т.В, Людникова В.А., Пасешниченков В.А. Бисинтез терпеноидов в бесклеточных экстрактах некоторых штаммов Neurospora crassa. Биохимия, 1993, т. 58, № 6, с. 891-895.

66. Келлер Б.А. Флористические, геоботанические и экологические заметки // Исчезающая меловая сосна в Валуйском уезде Воронеж. Губ. // Зап. Воронеж, с.-х. ин-та. 1927. Т. 8. С. 157-184.

67. Келлер Б.А. В Хреновской степи. Типчаково и ковыльно-луговые степи (около станции Хреновой) // Степи Центрально-Черноземной области. (Степные сенокосы и пастбища) / Под ред. Б.А. Келлера. — М., Л. 1931. С. 2633.

68. Келлер Б.А. Степи на рендзинном черноземе и черноземновидной почве. // Степи Центр.-Черноз. области. (Степные сенокосы и пастбища) / Под. ред. Б.А. Келлера. М, Л. 1931а. - С. 50-53.

69. Кеппен Ф.П. Географическое распространение хвойных деревьев в Европейской России и на Кавказе. — Спб. 1885. — XX. 634 с.

70. Кислухина О.В. Выделение биологически активных липидов из низкомасличного сырья. М.: АгроНИИТЭИПП, 1995. - С. 10-17.

71. Козо-Полянский Б.М. К флоре верховьев р. Оскола // Тр. НИИ при Воронеж, ун-те. 1927, № 1. С. 97-110.

72. Козо-Полянский Б.М. В стране живых ископаемых. Очерк из истории горных боров на степной равнине Центр.-Черноз. области. — М.: Учпедгиз. 1931.-184 с.

73. Колчанов А.Ф. Флора Белгородской, области и ее анализ // Флористические исследования в Центр. России: Материалы науч. конф. «Флора Центральной России», Липецк, 1-3 февр. 1995 г. М. 1995. - С 123124.

74. Колчанов А.Ф., Колчанов P.A., Немыкин A.A., Третьяков М.Ю. Инвентаризация охраняемых территории и сохранение видов//Сборник студенческих научных работ: В 3-х ч. — Белгород: Изд-во БелГУ, 2004. -Вып. VII. -Ч. I. С. 103-107.

75. Колчанов А.Ф., Ищенко Т.А. Семейство Rosaceae во флоре Белгородской области // Флора и растительность Центрального Черноземья — 2005: Материалы научной конференции (Курск, 24 марта 2005 г.). Курск: Изд-во ИПКиПРО, 2005. С. 38-39.

76. Колчанов А.Ф. Степная растительность Белгородской области // Научные ведомости Белгородского государственного университета, серия естественные науки № 5 (36) Вып. 5,2007 С. 3-9.

77. Котов M.I. Флора крейдяних видслонень в бассейн! Оверьского Донца в межах УРСРу звязку в геологичним вжом та лшшогичним складом пород // Бот. журн. АН УРСР. 1953. -Т. 10, № 2. - С. 325-374.

78. Красная книга Белгородской области. Редкие и исчезающие растения, грибы, лишайники и животные. Официальное издание/ Общ. науч. ред. A.B. Присный. Белгород, 2004. — 532 с.

79. Лавренко Е.М. Степи и сельскохозяйственные земли на месте степей // Растительный покров СССР: Пояснит, текст к «геоботанической карте СССР». М.; Л.: Изд-во АН СССР, 1956. Т. 2. - С. 595-730.

80. Левицкий С.С. Список сосудистых растений Центрально-Черноземного заповедника // Тр. Центр.-Чернозем. заповед. — Курск, 1957, вып. 4. С. 110173.

81. Литвинов Д.И. Геоботанические заметки о флоре Европейской России // Bull. Soc.Nat. Mose. 1891. Nouv. ser. T. 4 (1890 г.), № 3.-P. 322-434.

82. Литвинов Д.И. О реликтовом характере флоры каменистых склонов в Европейской России // Тр. бот. муз. импер. АН. СПб., 1902, вып. 1. — С. 76109.

83. Литвинов Д.И. О значении произрастании сосны и торфяной березы на меловых горах ЦЧО // Бюл. о-ва естествоисп. при Воронеж, ун-те. 1913. Т. 2., вып. 1 — С. 54-56.

84. Литвинов Д.И., Горшкова О.С. Об ареалах трех эндемичных видов меловых обнажений Русской равнины // Проблемы экологии, геоботаники, ботанической географии и флористики. Л., 1927. - С. 151-155.

85. Ловкова М.Я., Рабинович A.M., Пономарева С.М. и др. Почему растения лечат. М.: Наука, 1990. С. 6.

86. Лукнер М. Вторичный метаболизм у микроорганизмов, растений и животных. М.: Мир, 1979. 548 с.

87. Маевский П.Ф. Флора средней полосы европейской части России. 10-е изд. Москва: Товарищество научных изданий КМК. 2006. С. 463-600.

88. Мальцев А.И. Водная растительность в бассейне реки Корочи Курской 1убернии//Протоколы О-ва естество-испыт. при Юрьев, ун-те. 1906Т. 15, вып. 1. С. 1-36.

89. Мальцев А.И. К флоре Корочанского уезда Курской губернии // Тр. Бот. сада Юрьев, ун-та. 1907. Т. 7 (1906 г.), вып. 1. - С. 7-10.

90. Мальцев А.И. Очерк растительности Корочанского уезда Курской губернии // Протоколы О-ва естество-испыт. при Юрьев, ун-те. 1907 г. — 1907. Т. 16, вып.1.-С. 1-56.

91. Мальцев А.И. Растительность лугов (по наблюдениям в Корочанском у. Курской губ.) // Тр. Бот. сада Юрьев, ун-та. 1908. Т. 8 (1907 г.) вып. 1. - С. 1-10.

92. Мальцев А.И. Распространение в России важнейших видов полевых растений // Тр. Бюро по прикл. бот. СПб. 1909. - Год 2, № 5-6. - С. 251-311.

93. Мешков А.Р. Очерк истории изучения флоры и растительности Среднерусской возвышенности // Изв. Воронеж, пед. ин-та. 1948. Т. 9, вып. 2. -С. 1-39.

94. Мешков А.Р. Физико-географические районы Среднерусской возвышенности. Воронеж, 1948. - 214 с.

95. Мешков А.Р. Очерк истории флоры и растительности Черноземного 1 Центра // Изв. Воронеж, ин-та. 1953. Т. 13, вып. 1. - С. 3-73.

96. Мильков Ф.Н. Лесные реликты в степи // Экология реликтовых ландшафтов среднерусской лесостепи. Воронеж, 1994. - С. 88-92.

97. Мильков Ф.Н., Двуреченский В.Н., Дроздов К.А. и др. Экологияреликтовых ландшафтов среднерусской лесостепи. Воронеж, 1994. — 240 с.

98. Миркин Б.М., Наумова Л.Г., Соломец А.И. Современная наука о растительности: Учебник. — Москва. Логос, 2002. С. 8-15.

99. Михно В.Б. Меловой карст юга Черноземного центра и некоторые вопросы практики//Земледелие. 1976.-Т. 11. —С. 151-159.

100. Моисейченко В.Ф., Трифонова М.Ф., Заверюха А.Х., Ещенко В.Е. Основы научных исследований в агрономии — М.: Колос, 1996. — 336 с.

101. Никитин A.A., Панкова И.А. Анатомический атлас полезных и некоторых ядовитых растений. Л.: Наука, Ленингр. отд-ние, 1982. — С. 103106.

102. Овчаренко Н.Е., Колчанов А.Ф. Особенности флоры растительности юго-востока Белгородской области // Материалы Международной научно-практической конференции, 14 апреля 2006 г. Белгород: ИПЦ «ПОЛИТЕРРА», 2006. - С. 43-46.

103. Овчаренко Н.Е. Антропогенное влияние на степные территории // Флора и растительность Центрального Черноземья 2007: Материалы научной конференции (г. Курск, 28 марта 2007 г.). Курск, 2007. - С. 82-84.

104. Овчаренко Н.Е. Распространение ковылей в Белгородской области // Флора и растительность Центрального Черноземья 2008: Материалы научной конференции (Курск, 27 марта 2008 г.). Курск, 2008. - С. 49-51.

105. Овчаренко Н.Е. Эндемики степной флоры в пределах Белгородской области // Флора и растительность Центрального Черноземья — 2008:

106. Материалы научной конференции (Курск, 27 марта 2008 г.). Курск, 2008. — С. 51-52.

107. Пасешниченко В.А. Растения продуценты биологически активных веществ // Соросовский образовательный журнал. Т. 7. № 8. 2001. - С. 13-19.

108. Паушева Н.М. Практикум по цитологии растений. 4-е изд., перер. и доп. - М. Агропромиздат, 1988. — 272 с.

109. Пачоский И.К. Основные черты развития флоры юго-западной России. Херсон. 1910.-430 с.

110. Полуянов A.B. Флора Курской области Курск: Курский гос. ун-т, 2005.-С. 3.

111. Полуянов A.B. Флора Курской области: Дис. канд. биол наук. М.: 1997. - 443 с. (Рукопись).

112. Попов В.И. Почвы Белгородской области. Белгород, 1958. - 105 с.

113. Попов Т.И. К вопросу о происхождении характерных растений меловых обнажений юго-востока европейской части СССР // Изв. Рос. географ, о-ва, 1938. Т. 70. вып. 1. — С. 50-67.

114. Прозоровский H.A. К изучению растительности Ямской степи. Курск: Изд-во Курского о-ва краеведения и госмузея. 1929 18 с.

115. Радыгина В.И. Кальцефильная флора Среднерусской и Приволжской возвышенностей и некоторые вопросы ее истории: Дис. . докт. биол. наук. — М. 2003. 690 с.

116. Серебряков И.Г. Экологическая морфология растений. М.: Высш. школа, 1962.

117. Серебряков И.Г. Жизненные формы высших растений и их изучение // Полевая геоботаника. М.-Л. Изд-во АН СССР. 1964. Т.З. С. 146-205.

118. Скорбач В.В., Куркина Ю.Н., Третьяков М.Ю. Полевая практика по ботанике на I курсе: Учебное пособие для студентов высших учебных заведений по специальности «Биология». Белгород: Изд-во БелГУ, 2004. -С. 177-179.

119. Скорбач В.В., Третьяков М.Ю. Флора Волоконовского района вблизи села Ютановка // Флора и растительность Центрального Черноземья 2007: Материалы научной конференции (Курск, 28 марта 2007 г.). Курск, 2007. - С. 50-53.

120. Солнышкина E.H. Дополнение к конспекту флоры Белгородской области // Флора и растительность Центрального Черноземья 2005: Материалы научной конференции (Курск, 24 марта 2005 г.). Курск: Изд-во ИПКиПРО, 2005. - С. 74-75.

121. Солнышкина E.H. Характеристика видового состава балки Суры // Флора и растительность Центрального Черноземья 2007: Материалы научной конференции (г. Курск, 28 марта 2007 г.). Курск, 2007. - С. 53-54.

122. Солнышкина E.H. Влияние режимов заповедования Ямская степь заповедника «Белогорье» // Флора и растительность Центрального Черноземья 2008: Материалы научной конференции (Курск, 27 марта 2008 г.). Курск, 2008. - С. 80-82.

123. Сукачев В.Н. Несколько слов о курской Daphne altaica Pall. (Daphne sophia Kaien.) // Тр. Бот. сада Юрьевск. Ун-та. 1900. Т. 1, вып. 3. - С. 137139.

124. Сукачев В.Н. К флоре Курской губернии // Тр. СПб. о-ва естествоисп. 1901-1902. Т. 32, вып.1: Протоколы заседаний за 1901 г., № 1. - С. 22-23.

125. Сукачев В.Н. О болотной и меловой растительности юго-восточной части Курской губернии // Тр. О-ва испыт. природы при Харьков, ун-те. 1903. -Т. 37.-С. 225-256.

126. Сукачев В.Н. Ботанико-географические исследования в Грайворонском и Обоянском уездах Курской губернии // Тр. О-ва испыт. природы при Харьков, ун-те. 1903а. Т. 37. - С. 319-355.

127. Сукачев В.Н. Очерк растительности юго-восточной части Курской губернии. СПб., 19036. - 226 с.

128. Сукачев В.Н. и др. Материалы по изучению растительности меловых боров Курской области // Учен. зап. Ленингр. ун-та. Серия биол. наук. 1939, вып. 7 (№ 28): Тр. Лесостеп. н.-и. станции «Лес на Ворскле». С. 68-80.

129. Тихомиров В.Н., Губанов И.А., Калиниченко И.М., Лозарь P.A. Флора Средней России (Аннотированная библиография). М., 1998. -197 с.

130. Чаадаева Н.И. Флора Белгородской области (к западу от реки Оскол): Дис. канд. биол. наук.-М. 2000. 160 с.

131. Чаадаева H.H. Современное состояние степной растительности Белгородской области И Флора и растительность Центрального Черноземья -2008: Материалы научной конференции (Курск, 27 марта 2008 г.). Курск, 2008.-С. 134-135.

132. Чаадаева H.H. Список видов, давно не собиравшихся на территории правобережья р. Оскол Белгородской области // Флора и растительность

133. Центрального Черноземья — 2005: Материалы научной конференции (Курск, 24 марта 2005 г.). Курск: Изд-во ИПКиПРО, 2005. С. 78-80.

134. Чаадаева H.H. Сосновые леса правобережья реки Оскол Белгородской области // Флора и растительность Центрального Черноземья 2005: Материалы научной конференции (Курск, 24 марта 2005 г.). Курск: Изд-во ИПКиПРО, 2005.-С. 105-107.

135. Чаповская JI.JI. Гидрогеология СССР. Москва, 1972. - Т. 4. - 198 с.

136. Черняев В.М. О произведениях растительного царства Курской губернии // Журн. Министерства внутренних дел. СПб., 1836. Ч. 22, № 12. -С. 505-514.

137. Черняев В.М. Конспект растений, дикорастущих и разводимых в окр. Харькова и на Украине. Харьков, 1859 90 с.

138. Шипчинский A.B. Климат ЦЧО. Воронеж, 1929. - Вып. 1-2. - 177 с.

139. Шмальгаузен И.Ф. Флора Средней и Южной России, Крыма и Северного Кавказа. Киев. 1895. Т. 1.-468 е., 1897. Т. 2. - 752 с.

140. Шнайдман JI.O. Производство витаминов. М.: Пищевая промышленность. 1963. —438 с.

141. Яковлев Г.П., Аверьянов JI.B. Ботаника для учителя. В 2 ч. Ч. 2. -М.: Просвещение: Учебн. Лит. 1996. С. 255-260.

142. Яковлев Г.П., Челомбитько В.А. Ботаника: Учебник для вузов / Под ред. Р.В. Камелина. СПб.: СпецЛит, Издательство СПХФА, 2003. - С. 492-497.

143. Barkman Т. Character coding of secondary chemical variation for use in phylogenetic analysis // Biochem. Systematics and Ecology, 2001. Vol. 29. P. 120.

144. Beatty S., Murray J., Henson D.B., Garden D., Koh H., Boulton M.E. Macular pigment and risk for age-related macular degeneration in subjects from a Northern European population // Invest. Ophthalmol. Vis. Sei. 2001. - № 2. - P. 43-46.

145. Beyer P., Kleining H. Degidrogination and cyclization reactionsin carotene byosyntesis // Biol. Role Plant Lipids: Proc. 8th Int. Symp., Budapesht, July 25-28., 1988. Budapesht, 1989. P. 287-292.

146. Bone R.A., Landrum J.T., Fernandez L., Tarsis S.L. Analysis of the macular pigment HPLC: retinal distribution and age study. Invest Ophtalmol. Vis. Sci. — 1988.-V. 29. P. 843-849.

147. Bosma T.L., Dole J.M., Maness N.O. Optimizing Marigold (Tagetes erecta L.) Petal and Pigment Yield // Crop Sci. 2003. V.43. P. 2118-2124.

148. Bowen P.E., Herbst-Espinosa S.M., Hussain E.A., Stacewicz-Sapuntzakis M. Esterification Does Not Impair Lutein Bioavailability in Humans // J. Nutr. 2002. v. 132. P. 3668-3673.

149. Bremer K. Major clades and grades of the Asteraceae // Compositae: Systematics. Proceeding of the International Compositae conference, Kew, 1994 / Ed. by D.J.N. Hind, H.J. Beentje Kew, 1996 Vol. 1. P. 1-7.

150. Britton G. (1976). Biosynthesis of carotenoids. In: Chemistry and biochemistry of plant pigments, 2nd edition, vol. 1, ed. T. W. Goodwin, p. 262, London, New York and San Francisco, Academic Press.

151. Britton G. (1979). Carotenoids and polyterpenoids. In: Specialist Periodical Reports: Terpenoids and steroids, vol. 9, ed. J. R. Hanson, p. 218, London, The Chemical Society.

152. Britton G., Goodwin T. W. (1981). Biosynthesis of carotenoids, Methods Enzy-mol., 180,654.

153. Brody S.S., Lemoin Y. Distribution of chlorophylls, carotenoids and their isomers in the complexes of photosystem II / Physiol. Plants. 1989. - 79. № 3. -P. 104.

154. Carlquist S. Wood anatomy of Compositae; a summary and comments on factors controlling wood evolution // Aliso. 1966. Vol. 6. P. 25-44.

155. Carlquist S. Tribal interrelationships and phylogeny of the Asteraceae // Aliso. 1976. Vol. 8. P. 465-492.

156. Chamovitz D., Pecker I., Sandmann G., Hirchberg I. Molecular analysis ofcarotenoid biosynthesis // Keystone Symp. Mol. And Cell Biol., Apr. 3-9., 1992 / J. Cell Biochem. 1992. - Suppl. 16 A. - P. 230.

157. Chung H.-Y., Rasmussen H.M., Johnson E.J. Lutein bioavailability is higher from lutein-enriched eggs than from supplements and spinach in man // J. Nutr. 2004. v. 134. P. 1887-1893.

158. Cheesman D.F., Lee W.L., Zagalsky P.F. (1967). Carotenoproteins in invertebrates, Biol. Rev., 42,131.

159. Croes A.F., van den Berg A.J.R., Bosveld M., Breteler H., Wullems G.J. Thiophene accumulation in relation to morphology in roots Tagetes patula. Effects of auxin and transformation by Agrobacterium // Planta. 1989. V.179. P.43-50.

160. Damm I., Steinmetz D., Grimme L. Host. Multiple function of ß-carotene in photosistem I // Physiol. Plant. 1989. V. 76. №3. Pt. 2 P. 85.

161. Davies B.H. (1976). Carotenoids. In: Chemistry and biochemistry of plant pigments, 2nd edition, vol. 2, ed. T.W. Goodwin, p. 38, London, New York and San Francisco, Academic Press.

162. Deineka V.l., Sorokopudov V.N., Deineka L.A., Shaposhnik E.I., Koltsov S.V. Anthocyans from Fruit of Some Plants of the Caprifoliaceae Family // Chem. Nat. Comp. 2005. v. 41 (2). - P. 162-164.

163. Demming-Adams Ию Carotenoids and photoprotections in plants: A role for the xanthiphill zeaxantin // Biochem et Biophys. Acta Bioenergy. 1990. - V. 1020. №4754.-P. 1106.

164. Downum K.R., Towers G.H.N. Analysis of thiophenes in the Tageteae (Asteraceae) by HPLC // J. Nat. Prod. 1983. V.46. P.98 103.

165. Fletcher D.L. A method for estimating the relative degree of saponification of xanthophylls sources and feedstuffs // Poultry Sei. 2006. v. 85. P. 866-869.

166. Garther H. Лютеин и зеаксантин новые перспективы для сохранения здоровья глаз // Клиническая офтальмология. - 2005. — Т. бюл. № 1. - С. 1316.

167. Giusti М.М. and Wrolstad R.E. Characterization and Measurement of Anthocyanins by UV-Visible Spectroscopy / In: Current Protocols in Food

168. Analytical Chemistry, S. King, M. Gates, and L. Scaletter, eds., John Wiley & Sons, Inc., New York (2000).

169. Gommers F.J., Voorin'tholt D.J.M. Chemotaxonomy of Compositae related to their host suitability for Pratylenchus penetrans // Neth. J. PI. Path. 1976. V.82. P. 1-8.

170. Goto T. Structure, stability and color variation of natural anthocyanins. // Fortschr. Chem. org. Naturst. 1987. -V. 52. P. 113-158.

171. Gregory G.K., Chen T.-S., Philip T. Quantitative analysis of lutein esters in marigold flowers {Tagetes erecta) by high performance liquid chromatography. // J. Food Sci. 1986 v.51. — P. 1093-1094.

172. Goodwin T. W. Chemistry and biochemistry of plant pigments / № 4 Academic Press. 1976. V. 1. - P. 230-241.

173. Hammond B.R., Johnson E.J., Russell R.M., et al Dietary modification of human macular pigment density. Invest Ophtalmol. Vis. Sci. 1997. 38. - P. 17951801.

174. Harborne J.B., Turner B.L. Plant chemosystematics. London: Academic press, 1984. 562 p.

175. Harris E.M. Inflorescence and floral ontogeny in Asteraceae: a synthesis of historical and current concepts // Bot. Rev. 1995. Vol. 61. № 4. P. 93-278.

176. Harris E.M. Capitula in the Asteridae: a widespread and vared phenomenon // Bot. Rev. 1999. Vol. 65. № 4. P. 348-369.

177. Harrison D.M. The biosynthesis of triterpinoids, steroids and carotenoids // Natur. Prod. Rept. -1988. V. 5. - № 4. - P. 387-415.

178. Johnson E.J. The role of carotenoids in human health // Nutr. Clin. Care. 2002. v. 5. P. 56-65.

179. Krinsky N.I. Antioxidant functions of carotene // Free radicals. Biol Med., 1989. №7. P. 617-635.

180. Landrum J.T., Bone R.A. Kilburn M.D. The macular pigment: a possible role in protection from age-related macular degeneration. Adv Pharmacol. 1997. -38.-P. 537-556.

181. Leins P., Erbar C. Die fruhesten Entwicklungsstadien der Bluten bei den Asteraceae (The earliest developmental stages in the flowers of Asteraceae) Bot. Jahrb. 2000. Vol. 122. № 4. P. 503-515.

182. Li W., Gao Y., Zhao J., Wang Q. Phenolics, flavonoid, and lutein ester content and antioxidant activity of 11 cultivars of Chinese marigold // J. Agric. Food Chem. 2007. V. 55. P.8478-8484.

183. Liaaen-Jensen S., Jensen A. (1965). Recent Progress in carotenoid chemistry, Prog. Chem. Fats other Lipids, 8,129.

184. Liaaen-Jensen S. (1971). Isolation, reactions. In: Carotenoids, ed. 0. Isler, p. 61, Basel and Stuttgart, Birkhauser-Verlag.

185. Lindemann E. Addenda ad novam revisionem Florae Kurskianae // Bull. Soc. Nat. Mosc, 1865. T. 38, №2. -P. 600-601.

186. Lindemann E. Nova revis'o Florae Kurskianae // Bull. Soc. Nat. Mosc, 1865a. T. 38, №1. P. 172-206.

187. Mohammedshah F., Douglas J.S, Ammann A.M.M., Heimbach J.M. Dietaty intakes of lutein and zeaxanthin and total carotenoids among Americans age 50 and above. 1999. - 13 (4): P. 554.

188. Moss G. P., Weedon B. C. L. (1976). Chemistry of the carotenoids. In: Chemistry and biochemistry of plant pigments, 2nd edition, vol. 1, ed. T. W. Goodwin, p. 149, London, New York and San Fancisco, Academic Press.

189. Munkundan U., Hjorsto M.A. Effect of fungal elicitor on thiophene production in hairy root cultures of Tagetes patula // Appl. Microbiol. Biotechn.1990. V. 33. P. 145-147.

190. Mukundan U., Hjorso M.A. Growth and thiophene accumulation by hairy root cultures of Tagetes patula in media of varying initial pH // Plant Cell Rep.1991. V. 9. P. 627-630.

191. Norton R.A., Finlayson A.J., Towers G.H.N. Thiophene production by crown galls and callus tissues of Tagetes patula // Phytochemistry. 1985. V. 24. P. 719-722.

192. Piccaglia R., Marotti M., Grandi S. Lutein and lutein ester content in different types of Tagetes patula and T. erecta I I Ind. Crop Prod. 1998. V. 8.45-51.

193. Rampone W.M., McCullough J.L., Weinstein G.D., Nail Towers G.H., Berns M.W., Abeysekera B. Characterization of cutaneous phototoxicity induced by topical alpha-terthienyl and ultraviolet A radiation // J. Invest. Dermatol. 1986. V. 87. P. 354-357.

194. Riga E., Hooper C., Potter J. In vitro effect of marigold seed exudates on plant parasitic nematodes // Phytoprotection. 2005. V. 86. P. 31-35.

195. Rivas J.D. Reversed-phase high-performance liquid chromatographic separation of lutein and lutein fatty acid esters from marigold flower petal powder. // J. Chromatogr. 1989. v. 464. - P. 442-447.

196. Rodrigues-Amaya D.B., Kimura M. / HarvestPlus handbook for carotenoid analysis. HarvesPlus Technical Monograph 2. Washington, DC and Cali: EFPRI and CIAT. 2004. 48 p.

197. Rodriguez-Carmona M., Kvansakul J., Harlow J.A., Kopcke W., Schalch W., Barbur J.L. The effects of supplementation with lutein and/or zeaxanthin on human macular pigment density and colour vision // Ophthal. Physiol. Opt. 2006. V. 26. P. 137-147.

198. Sandmann G., Kovalezuk S. In vitro carotenegenesis and characterization of phytoene desaturase reaction in Anacystis // Biochem. And Biophys. Re. Common. 1989. 163. № 2. - P. 916-921.

199. Sease J.W., Zeichmeister L. Chromatographic and spectral characteristics of some polythienyls. // J. Amer. Chem Soc. 1947. V.69. P.270-273.

200. Seddon J.M., Ajani U.A., Sperduto R.D. et al // JAMA. 1994. - V.272. -№ 18.-P. 1413.

201. Snodderly O.M., Aran J.D., Delori F/C/ The macula pigment // Invest OpthaL. Vis. Sc. -1984. 25. - P. 674-685.

202. Sommerburg O., Keunen J.E.E., Bird A.C., van Kuijk FJ.G.M. Fruits and vegetables that are sources for lutein and zeaxanthin: the macular pigment in human eyes //Br. J. Ophthalmol. 1998. v. 82. P. 907-910.

203. Sowbhaya H.B., Sampathu S.R., Krishnamurthy N. Natural colorants from marigold-chemistry and technology. // Food Rev. Internat. 2004. v. 20. № 1. - P. 33-50.

204. Subagio A., Wakaki H., Morita N. Stability of lutein and its myristate esters //Biosci. Biotechnol. Biochem. 1999. v. 63. P. 1784-1786.

205. Szarka Sz., Hethelyi E., Lemberkovics E., Kuzovkina I.N., Banyai P., Szoke E. GC and GC-MS studies on the essential oil and thiophenes from Tagetes patula L. // Chromatographia. 2006. V.63. S67 S73.

206. Takashi S., Furihata K., Ishidsu J., Shimada K. Carotenoids sulphates from the aerobic photosynthetic bacterium Erytrobacteria logus // Phynochemestry. — 1991. V. 30. № 10. - P. 3411-3415.

207. The Foundation for Innovative Medicine, The Nutraceutical Initiative: A Proposal for Economic and Regulatory Reform. December 1991.

208. Towers G. N. H., Arnason T., Wat C.-K., Graham E. A., Lam J., Mitchell J. C. Phototoxic polyacetylenes and their thiophene derivatives Effects on human skin. // Contact Dermatitis., Volume 5, Issue 3, Pages 140-144 Munksgaard 1979

209. Weller P., Breithaupt D.E. Identification and Quantification of Zeaxanthin Esters in Plants Using Liquid Chromatography-Mass Spectrometry // J. Agric. Food Chem. 2003. v.51. -P. 7044-7049.

210. Wright G.S., Cruidl M.E. Early detection, and prevention of lung cancer // Curr. Opin. in Oncol. 2000. V. 12. № 2. - P. 143-148.

211. Zeichmeister L., Sease J.W. A blue-fluorescing compound, terthienyl, isolated from marigolds // J. Amer. Chem. Soc. 1947. V. 69. P. 273 275.

Информация о работе

Третьяков, Михаил Юрьевич
кандидата биологических наук
Белгород, 2008
ВАК 03.00.05

Диссертация

Морфо-анатомические и биохимические особенности некоторых представителей семейства Asteraceae Dumort. в условиях Белгородской области - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы