МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ САХАРНОГО ДИАБЕТА ТИПА 1 И ЕГО ОСЛОЖНЕНИЙ

Балхиярова, Жанна Радиковна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ САХАРНОГО ДИАБЕТА ТИПА 1 И ЕГО ОСЛОЖНЕНИЙ
ВАК РФ 03.00.15, Генетика

Автореферат диссертации по теме "МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ САХАРНОГО ДИАБЕТА ТИПА 1 И ЕГО ОСЛОЖНЕНИЙ"

□□3485472

На правах рукописи

Балхнярова Жанна Радиковна

МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ САХАРНОГО ДИАБЕТА ТИПА 1 И ЕГО ОСЛОЖНЕНИЙ

03.00.15 - генетика 14.00.03 - эндокринология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

- 3 ДЕК »

Москва-2009

003485472

Работа выполнена в Институте биохимии и генетики Уфимского научного центра Российской академии наук и Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Башкирский г осударственный медицинский университет Росздрава»

Научные руководители: доктор медицинских наук, профессор

Моругова Татьяна Вячеславовна доктор биологических наук, профессор Мустафина Ольга Евгеньевна Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор

Кураева Тамара Леонидовна доктор медицинских наук, профессор Викторова Татьяна Викторовна

Ведущая организация. Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Московский государственный медико-стоматологический университет»

Защита диссертации состоится «16» декабря 2009 г. в «/^ » часов на заседании диссертационного совета Д 212.203.05 при ГОУ ВПО «Российский университет дружбы народов» по адресу: 117198, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 8.

С диссертацией можно ознакомиться в Научной библиотеке ГОУ ВПО «Российский университет дружбы народов» по адресу: 117198, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 6. Автореферат разослан «

/3 » ноября 2009 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат биологических наук, доцент

О.Б. Гигани

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Сахарный дна бет типа 1 (СД1) - хроническое заболевание, которое встречается у 0,4% населения до 30 лет, а в течение всей жизни риск заболевания составляет 1% (Кагуопеп М. е1 а1., 2000). Считается, что СД1 развивается вследствие аутоиммунной деструкции бета-клеток островков Лангерганса поджелудочной железы и абсолютной недостаточности выработки инсулина (Дедов И.И. и др., 2002). СД1 повышает риск ранней смертности в результате развития острых и хронических осложнений.

В России заболеваемость СД1 составляет 13,3 на 100 тыс. населения, в Башкортостане в 2008 году - 9,7 на 100 тыс. населения (Дедов И.И. и др., 2008; Байбурина Г.Г. и др., 2009).

СД1 - многофакторное полигенное заболевание. Оно развивается при воздействии факторов окружающей среды на генетически предрасположенный организм. Вклад генетических факторов в развитие СД1 составляет 60-80% (Дедов И.И. и др., 2002). К настоящему времени сформирован список генов-кандидатов СД1 (http://www.tldbase.org/page/CandidateGenes). С изучением молекулярно-генетических основ СД1 открываются перспективы в решении медицинских и социальных проблем, связанных с заболеванием. Центральным звеном аутоиммунной деструкции бета-клеток поджелудочной железы является нарушение регуляции процесса апоптоза. Активация программируемой клеточной смерти происходит под влиянием увеличенной выработки оксида азота (N0) и повышения экспрессии РАБ-рецепторов. Важную роль в апоптозе играют цитокины. Одним из основных механизмов прогрессирования СД1 является нарушение дифференцировки Т-клеток с увеличенным образованием Т-хелперов 1-го типа, вырабатывающих провоспалительные цитокины (ИЛ-6, ИЛ-12, ЛТА), оказывающие цитотоксическое воздействие на бета-клетки. Противовоспалительные цитокины (ИЛ-10) при этом синтезируются в недостаточном количестве. В связи с вышеизложенным, представляется актуальным изучить вклад генов цитокинов и апоптоза в развитие СД1.

При молекулярно-генетическом исследовании многофакгорных заболеваний, в том числе СД1, для расчета индивидуального прогноза и создания основанных на нем рекомендаций необходимо учитывать специфику конкретной популяции. Население республики Башкортостан

в целом, башкирский и татарский этносы в частности, с точки зрения генетической структуры популяций являются своеобразными: в состав их генофонда в разных пропорциях входят европеоидные и монголоидные компоненты. Поэтому важно обоснование генетического маркирования СД1 в Башкортостане, по крайней мере, по тем локусам, которые ассоциированы с риском заболевания в других популяциях и этносах.

Цель работы состояла в молекулярно-генетическом анализе предрасположенности к СД1 и его осложнениям с использованием полиморфных маркеров генов цитокиновой сети и апоптоза в этнически однородных группах (русские, татары и башкиры) населения Республики Башкортостан.

Задачи исследования:

1. Охарактеризовать клинические особенности пациентов с СД1 и оценить влияние отягощенного по СД1 и СД2 семейного анамнеза на риск развития осложнений у больных СД1 и возраст дебюта заболевания.

2. В группе больных и группе сравнения определить частоты аллелей и генотипов по полиморфным локусам генов интерлейкина 12 (IL12B, 1159А>С), интерлейкина 10 (ILIO, -627С>А), интерлейкина 6 (1L6, -572G>C), лимфотоксина (LTA, -252A>G), рецептора интерлейкина 1 типа 1 (IL1R1, 3653T>G), рецептора фактора некроза опухолей альфа типа 1 (TNFR1, ЗбТ>С), рецептора FAS (FAS, -670A>G), индуцибельной синтазы оксида азота (NOS2, 150С>Т), каспазы-1 (CASP1, -8770Т), гена рецептора витамина D (VDR, 352С>Т).

3. Провести анализ ассоциаций аллельных вариантов исследуемых генов с СД 1.

4. Оценить вклад аллельных вариантов перечисленных генов в развитие поздних осложнений СД1 (нефропатии, ретинопатии, дислипидемии).

Научная новизна исследования: Получены новые данные по ассоциациям полиморфных локусов генов цитокиновой сети (IL12B, IL6, ILIO), апоптоза (LTA, IL1R1, TNFR1, FAS) и гена VDR с СД1 и его клиническими проявлениями в трех этнических группах населения Республики Башкортостан (русских, татар и башкир). Обнаружены ассоциации аллельных вариантов генов LT А (252A>G), FAS (-670A>G) и TN FR I (36A>G) с СД1 у этнических русских и татар. Выявлены генотипы повышенного риска СД1 у женщин: ILIO -627*А/*А (татар), ILIO -627*С/*А (русских) и VDR 352*С/*С (башкир).

Найдены ассоциации с возрастом манифестации СД1 полиморфных маркеров генов 1L12B (1159А>С), ILIO (-627С>А), TNFR1 (36Г>С) у русских и IL1R1 (3653T>G) у башкир. Установлено, что у этнических русских генотип ILIO ~627*С/*А вовлечен в развитие нефропатии, повышенный, риск дислипидемии маркирует генотип 1L12B 1I59*AJ*A, а носители генотипа 1L6 -572*G/*G имеют повышенный риск развития диабетической ретинопатии.

Практическая значимость работы. Результаты работы могут быть использованы при разработке основ медико-генетического консультирования больных СД1 и членов их семей. Полученные данные позволят прогнозировать развитие СД1, формировать группы риска и осуществлять в них активный мониторинг.

1. В структуру наследственной предрасположенности к СД1 вносят вклад аллельные варианты генов цитокиновой сети и апоптоза.

2. Существуют этнические особенности в структуре наследственной предрасположенности к СД1 и его поздним осложнениям. В их развитие вносит вклад полиморфизм генов LTA, FAS, TNFR1, ILIO, ILI2B, IL6 у русских, генов LT А, FAS, TNFRJ, ILIRI у татар, гена VDR у башкир.

3. С возрастом дебюта заболевания ассоциированы полиморфные локусы: IL12B (I159A>Q, ILIO {-627О A\ IL6 (-572G>C), TNFR1 (36T>C), ILIRI (3653T>G).

4. Аллельные варианты генов ILIO (-627С>А) и VDR (352С>Т) ассоциированы с СД1 только у женщин.

эндокринологов (Rovinj, 2007), 40-й Европейской конференции по генетике человека (Barcelona, 2007), Научно-практической конференции эндокринологов Республики Башкортостан "Актуальные вопросы эндокринологии" (Уфа, 2008, 2009), Всероссийском Конгрессе "Диабет и почки" (Москва, 2009). Результаты работы отмечены дипломом 1-й степени на 4-м Всероссийском диабетологическом конгрессе (Москва, 2008), дипломом лауреата Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых и специалистов "Актуальные проблемы современной эндокринологии" (Москва, 2008).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 22 работы, из которых 1 статья в рецензируемом журнале ВАК, 1 учебное пособие, 1 патент на изобретение.

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа включает в себя следующие разделы: введение, обзор литературы, материал и методы, результаты исследования, обсуждение, выводы, список используемых источников, приложение. Работа изложена на 160 страницах машинописного текста, содержит 50 таблиц и 5 рисунков. Список используемых источников включает 254 ссылки на 50 работ отечественных и 220 работ зарубежных авторов.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Обследовано 339 пациентов с диагнозом СД1: 132 русских, 137 татар и 70 башкир (таблица 1). Различий между группами больных разной этнической принадлежности по календарному возрасту, возрасту манифестации заболевания, частотам осложнений СД1 не было.

Таблица 1 - Характеристика больных сахарным диабетом типа 1

Женщины, п=169

Мужчины, п=170

Средний возраст: 27,7±1,0 лет

Средний возраст 32,6±1,0 лет

Средний возраст начала заболевания:

18,4±0,8 лет

22,7±1,0 лет

Сахарный диабет типа 1 без осложнений, п=132 (38,9%) Диабетическая ретинопатия (ДР), п=132 (38,9%)

I стадия, п=60 (45,5%) [ II стадия, п=61 (46,2%) III стадия, n=l 1 (8,3%) Диабетическая нефропатия (ДН), п=114 (33,9%)

I стадия, п=41 (36,0%) II стадия, п=56 (49,1%) III стадия, п=17 (14,9%)

_Полинейропатия, п= 89 (26,3%)_

_Дислипидемия (ДЛП), п= 80 (23,6%)_

В контрольную группу вошли 970 практически здоровых лиц разной этнической принадлежности: русских (178 мужчин и 210 женщин), татар (233 мужчины и 119 женщин) и башкир (99 мужчин и 131 женщина), средний возраст составил у мужчин 36,2 (36,2±0,4) лет, у женщин 35,6 (35,6±0,5) лет, неродственных между собой, без клинических симптомов СД1 и наследственной отягощенности по изучаемому заболеванию. У всех обследуемых было получено письменное информированное добровольное согласие на проведение биомедицинских исследований.

Лабораторно-инструментальные методы исследования включали определение сахара в крови в течение суток глюкозооксидантным методом на анализаторе "Super GL"; гликированного гемоглобина жидкостной хроматографии под давлением на экспресс-системе "Glycomat DS5". Диагноз сахарного диабета устанавливался согласно критериям ВОЗ (1999): концентрация глюкозы в цельной капиллярной крови натощак >6,1 ммоль/л, постпрандиальная гликемия > 11,1 ммоль/л. Верификация диагноза СД1 основывалась на клинических признаках, свидетельствующих об абсолютном дефиците инсулина (похудание и кетоацидоз в дебюте заболевания), а также показателях гликемии. Диагноз аутоиммунного СД1 у впервые выявленных больных был подтвержден наличием иммунологических маркеров заболевания, а именно аутоантител к глютаматдекарбоксилазе, инсулину и бета-клеткам, а также снижением уровня С-пептида (менее 0,78 нг/мл натощак) и инсулина (менее 20 мкЕд/мл). Определение аутоантител, С-пептида и инсулина проводили на планшетном иммуноферментном анализаторе "Star Fax 3200".

Стадии ДН устанавливали согласно классификации М.В. Шестаковой (2000). Стадии ДР определяли по классификации E.Kohner и М. Porta (1991). СКФ определяли по формуле Кокрофта-Гольта (Cockcroft-Gault, 1976).

Содержание липидов (ТГ, ОХС, ХС-ЛПВП) и креатинина в плазме крови определяли спектрофотометрическим методом при помощи диагностических наборов фирмы "Cormay". Уровень ХС-ЛПНП, ХС-ЛПОНП вычисляли по формулам Фридвальда (Friedewold W. et al., 1972). Прогностический показатель КА определяли по формуле, предложенной А.Н. Климовым (1989). Параметры липидного обмена оценивали согласно критериям Международной федерации диабета (2005).

ДНК выделяли из цельной венозной крови методом фенольно-хлороформной экстракции (Mathew М. et al., 1984). Анализ генетического полиморфизма осуществляли методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) или ПЦР с последующим рестрикционным анализом. Анализ продуктов ПЦР проводили при помощи электрофореза в агарозном или полиакриламидном геле с последующим окрашиванием раствором бромистого этидия и визуализацией в УФ-свете.

Статистическая обработка полученных данных проводилась с использованием пакета прикладных программ Statistica for Windows V. 6.0, программного обеспечения MSExcel'98 (Microsoft) и компьютерной программы RxS (RowsxColumns) (Roff P.A. et al., 1989). Рассчитывали средние значения исследуемых величин, их стандартные отклонения, ошибку среднего и 95%-ый доверительный интервал. Частоты генотипов и аллелей сравнивали с использованием точного двустороннего критерия Фишера. Относительный риск заболевания (OR, соотношение шансов, odds ratio) вычисляли по формуле Bland J.M. (2000). Соответствие наблюдаемого распределения значений количественных показателей нормальному закону распределения оценивалось с использованием критерия Шапиро-Уилка. При сравнении групп по количественному признаку в случае соответствия его нормальному распределению использовался t-критерий Стьюдента для, независимых групп, равенство дисперсий распределений признаков проверялось при помощи критерия Левена, в противном случае применялся U-критерий Манна-Уитни (Гланц С., 1999; Реброва О.Ю., 2002).

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Исследование влияния наследственной предрасположенности к сахарному диабету на возраст манифестации заболевания и риск поздних осложнений

В результате изучения семейного анамнеза выявлено, что 32% больных СД1 имели наследственную отягощенность по СД1 или СД2. В связи с этим, нами был проведен корреляционный анализ для выявления возможной связи между наследственной предрасположенностью к СД1, возрастом дебюта заболевания и его поздними осложнениями. Выявлена обратная зависимость между возрастом манифестации заболевания и отягощенным семейным анамнезом по СД1 у пациентов (г=-0,20, р=0,001). У больных, имевших

родственников с СД1, заболевание возникало раньше (в 16,8±1,3 лет), чем у больных с неотягощенным семейным анамнезом (в 21,7±0,8 лет, р=0,002).

У больных СД1 с неотягощенным семейным анамнезом по СД1 уровень ХС-ЛПВП был значительно ниже, чем у пациентов, имевших больных родственников (1,29 и 2,39 ммоль/л, соответственно, р=0,001) (таблица 2).

Таблица 2 - Показатели липидного обмена у больных сахарным диабетом типа 1 в зависимости от семейного анамнеза по данному заболеванию

Показатель Больные с неотягощенным анамнезом по СД1, ммоль/л Больные с отягощенным анамнезом по СД1, ммоль/л Р

ОХС 4,69±0,10 4,72±0,32 0,50

ХС-ЛПВП 2,39±0,67 1,29±0,25 0,001

хс-лпнп 2,44±0,13 2,32±0,28 0,86

хс-лпонп 0,58±0,03 0,63±0,10 0,93

тг 1,25±0,06 1,38±0,22 0,57

КА 2,66±0,13 3,20±0,32 0,10

Обнаружена ззаимосвязь между отягощенным семейным анамнезом по СД2 и наличием диабетической нефропатии у больных СД1 (г=0,16, р=0,029). Показатель OR составил 2,08 (CI: 1,02-4,26). В работах других авторов также показано, что у больных СД1, у ближайших родственников которых выявлен СД2. предрасположенность к нефропатии 3 раза выше (Lin J. et al., 2008).

Анализ ассоциаций аллельных вариантов генов-кандидатов с

сахарным диабетом типа 1

Выявлены статистически значимые различия между группой больных СД1 и контрольной группой в распределении частот аллелей и генотипов по полиморфным локусам генов LTA (252A>G), FAS(-670A>G) и TNFR1 (36A>G).

У этнических татар генотип LTA 252*А/*А и аллель LTA 252*А встречаются достоверно реже, чем в контрольной группе (36,80% против 51,90%, Р=0,01 и 60,80% против 70,46%, Р=0,01, соответственно) (рисунок 1).

татары русские

Нконтроль □ больные

*А/*А *A/*G

7,0

*G/»G

14,9

1 Генотип

Рисунок 1 - Распределение частот генотипов по полиморфному локусу 252A>G гена LTA у больных СД1 и контрольной группе

Показатель OR заболевания составляет по генотипу LT А 252*А/*А 0,54 (С1: 0,35-0,84) и аллелю LTA 252*А - 0,65 (CI: 0,47-0,90). Это дает основания считать генотип LT А 252*А/*А и аллель LT А 252*А маркерами пониженного риска в отношении развития СД1 у татар, У больных СД1, русских по этнической принадлежности, генотип LT А 252*G/*G и аллель LT А 252*G наблюдается чаще, чем в контрольной группе (14,96% против 6,96%, Р=0,01 и 34,25% против 24,96%, Р=0,04 соответственно) (рисунок 1). Поэтому генотип LTA 252 *G/*G и аллель LT А 252*G можно отнести к маркерам повышенного риска развития СД1 у русских, OR по данному генотипу и аллелю составляет 2,35 (CI: 1,24-4,46) и 1,41 (CI: 1,04-1,92). У этнических башкир не выявлено ассоциации полиморфного локуса LT А 252A>G с СД1.

В таблице 3 представлены распределения частот генотипов и аллелей по полиморфному локусу -670A>G гена FAS.

У больных СД1 по сравнению с контрольной группой, татар по этнической принадлежности, Частота генотипа FAS -670*A/*G повышена (Р=0,03), а частота генотипа FAS -670*А/*Л - понижена (Р=0,049). Соответственно, OR по генотипу FAS -670*A/*G составляет 1,66 (CI: 1,08-2,55) и по генотипу FAS -670*А/*А OR=0,63 (CI: 0,41-0,98). Среди больных СД1 (русских по этнической принадлежности) по сравнению с группой контроля чаще встречаются носители генотипа FAS -670*G/*G (Р=0,01), что позволяет отнести данный генотип к предрасполагающим к заболеванию (OR=2,38,

С1: 1,28-4,45). Группа больных СД1, башкир по этнической принадлежности, по частотам аллелей и генотипов не отличается от контрольной группы.

Таблица 3 - Результаты анализа ассоциаций полиморфного локуса -670A>G гена FAS с сахарным диабетом типа 1

Этническая группа Генотип/ аллель Контроль Больные P

n p±sp(%) n p±sp(%)

Татары *А/*А 131 45,02±2,92 42 34,43±4,3 0,049

*A/*G 104 35,74±2,81 58 47,54±4,52 0,03

*G/*G 56 19,24*2,31 22 18,03±3,48 0,89

*А 366 62,89±2,0 142 58,2±3,16 0,21

*G 216 37,11±2,0 102 41,8±3,16

Русские *А/*А 164 46,99±2,67 44 36,97±4,43 0,07

*A/*G 157 44,99±2,66 55 46,22±4,57 0,83

*G/*G 28 8,02±1,45 20 16,81 ±3,43 0,01

*А 485 69,48±1,74 143 60,08±3,17 0,01

*G 213 30,52±1,74 95 39,92±3,17

Примечание здесь и далее: п - численность, р- частота генотипа или аллеля; бр- ошибка частоты; Р- уровень значимости различий.

Обнаружены ассоциации полиморфного локуса 36A>G гена TNFR1 сСД1. У больных по сравнению с группой контроля, татар по этнической принадлежности, наблюдается значимое снижение частоты генотипа TNFR1 36*А/*А (16,15% против 26,00%, Р=0,04). Показатель OR заболевания по данному генотипу составляет 0,55 (CI: 0,32-0,95), что позволяет отнести его к маркерам пониженного риска в отношении развития СД1 у татар. В то же время, не выявлено статистически значимых различий по частотам генотипов между группами больных СД1 и контрольной, ни у русских, ни у башкир.

Анализ ассоциаций полиморфизма генов ILIO и VDR с сахарным диабетом типа 1 в зависимости от тендерной принадлежности

При анализе ассоциаций полиморфного локуса -627С>А гена ILIO с СД1 выявлено следующее. Частота генотипа ILJ0~627*C/*A у больных СД1 женщин,

русских по этнической принадлежности, повышена (55,22% по сравнению с 37,11% в контрольной группе, Р=0,01); OR СД1 составляет 2,09 (CI: 1,17-3,73), что позволяет сделать заключение о значении данного генотипа как маркера риска заболевания у женщин (таблица 4). Также обнаружено снижение частоты генотипа ILIO -627*А/*А у больных женщин, татарок по этнической принадлежности 1,64% (по сравнению с 12,38% в контрольной группе, Р=0,02); показатель OR по генотипу ILIO -627*А/*А составляет 0,12 (CI: 0,02-0,94), следовательно, этот генотип можно оценивать как маркер пониженного риска СД1 у женщин (татары). У мужчин, русских и татар по этнической принадлежности, не выявлено ассоциации полиморфного локуса -627С>А гена ILIO с СД1. Не обнаружено ассоциаций этого локуса с СД1 у башкир.

Таблица 4 - Распределение частот генотипов и аллелей полиморфизма -6270А гена JL10 в группе больных сахарным диабетом типа 1 женщин и в контрольной группе

Этническая группа Генотип/ аллель Контроль Больные Р

п p±sp(%) п p±sp(%)

Татары *С/*С 52 49,52±4,88 32 52,46±6,39 0,75

*С/*А 40 38,1±4,74 28 45,9±6,38 0,33

*А/*А 13 12,38±3,21 1 1,64±1,63 0,02

*С 144 68,57±3,20 92 75,41±3,90 0,21

*А 66 31,43±3,20 30 24,59±3,90

Русские *С/*С 88 55,35±3,94 28 41,79±6,03 0,08

*С/*А 59 37,1 Ш,83 37 55,22±6,08 0,01

*А/*А 12 7,55±2,10 2 2,99±2,08 0,24

*С 235 73,9±2,46 93 69,4±3,98 0,36

*А 83 26,1±2,46 41 30,6±3,98

В группе больных женщин, башкирок по этнической принадлежности, при сравнении с группой контроля, выявлена более высокая частота аллеля ¥ВЯ352*Т (37,20 и 21,20%, Р=0,04, соответственно), и более низкая частота генотипа УОЯ352*С/*С (39,70 и 60,60%, Р=0,048) (рисунок 2). Показатель СЖ по аллелю КШ 352*Т составил 2,01 (С1: 1,05-3,86), а по генотипу УйЯ 352*С/*С -

0,43 (С1: 0,21-0,90). Таким образом, выявлены ассоциации с СД1 у этнических русских и татар (1Ы0 -627С>А), а также башкир (КОЛ 3520Т).

Рисунок 2 - Распределение частот генотипов полиморфного локуса 352С> Т гена VDR у больных СД1 и в контрольной группе жешцин, этнических башкирок

Анализ ассоциаций полиморфных вариантов генов-кандидатов

с возрастом дебюта сахарного диабета типа 1 Представляет интерес проведение анализа ассоциаций полиморфных локусов с СД1 с учетом возраста его манифестации. Среди этнических русских обнаружено следующее. Генотип IL12B 1159*С/*С встречается в группе больных с поздним развитием заболевания чаще (16,28%), чем в группе больных с ранним дебютом заболевания (1,92%, Р=0,02), поэтому его можно отнести к маркерам риска позднего начала заболевания (рисунок 3). Генотип ILIO -627*А/*А выявлен только у больных СД1 с развитием заболевания в возрасте до 18 лет, тогда как у больных с началом СД1 после 18 лет он не обнаружен (11,54% и 0%, Р=0,03). Отмечается повышение частоты генотипа ILIO -627*С/*А в группе больных с ранним возрастом манифестации СД1 (59,62%) по сравнению с таковым в контрольной группе (37,12%, Р=0,03). Генотип IL10~627*C/*C значительно реже встречался в группе больных с началом заболевания в возрасте 18 лет и младше (28,85%) чем в группе сравнения (55,52%, Р=0,01) и у пациентов с поздним дебютом СД1 (59,09%, Р=0,04). Соответственно, частота аллеля IL10-627*A выше у больных с ранним началом заболевания (41,35%), чем в контрольной группе (25,92%, Р=0,003) и у пациентов в поздним дебютом СД1 (20,45%, Р=0,03). В группе пациентов

с ранним развитием СД1 по сравнению с теми, у кого отмечено позднее начало заболевания частота встречаемости генотипа И6-572*С/*С выше (88,68% против 71,11%, Р=0,04), а генотипа 1Ь6-572Ю/*С ниже (29,89% и 11,32% соответственно, Р=0,04).

ILI2B 1159А>С

65,5

67,3

Iii

29,5 27,9 30.»

5,0 1.»

59,1 59,в

IL6-S270C

100 80 «0 40 20

83,7

1-4 0,0 0,0

*Gi*G *G/*C *СГС

В контроль П больные СД 1 с ранним дебютом 0 больные СД1 с поздним дебютом

Рисунок 3 - Распределение частот генотипов полиморфных локусов генов 1L12B, ILIO, 1L6 и TNFRI в группах контроля и больных СД1 с ранним и поздним дебютом заболевания (русских по этнической принадлежности)

В группе больных СД1, русских по этнической принадлежности, генотип 36*А/*А встречается существенно чаще у лиц с поздним (после 18 лет) дебютом заболевания (26,98%) по сравнению с пациентами, которые заболели в 18 лет и младше (4,00%, Р=0,001). В то же время, частота аллеля ТуУ/^У 36*() достоверно выше в группе больных с ранним началом СД1 (69,00%), чем у больных с поздним дебютом СД1 (50,00%, Р=0,004) и в группе сравнения (47,13%, Р=0,0).

Выявлена ассоциация полиморфного локуса 3653С>Т гена IL1R) с СД1 в зависимости от возраста манифестации у этнических башкир. Генотип ILIR13653*T/*T встречается значительно реже в группе больных с ранним началом заболевания (3,30%), чем у больных с поздним дебютом СД1 (32,00%, Р=0,003); генотип IL1R13653*G/*G у пациентов с ранней манифестацией СД1 встречался значительно чаще (53,30%), чем у больных с поздним началом СД1 (24,00%, Р=0,01).

Анализ ассоциаций генов-кандидатов с поздними осложнениями сахарным диабетом типа 1

Осложнения СД1 - причина инвалидизации и ранней смертности пациентов. Проведен анализ ассоциаций полиморфизма 1159С>А гена IL12B сСД1 с учетом поздних осложнений заболевания. Оказалось, что генотип IL12BI 159*А/*А значительно чаще встречается в группе больных СД1, у которых повышено содержание ОХС, по сравнению с больными, имеющими нормальный уровень ОХС (68,97% против 40,62% у татар, 74,19% против 45,83% у русских, соответственно). У русских аллель IL12B ]]59*А в группе больных с ДЛП встречается достоверно чаще (85,48%), чем у больных без нарушения липидного обмена (66,67%). Можно полагать, что полиморфный локус П59С>А гена JLJ2B ассоциирован с риском развития ДЛП у больных СД1.

Обнаружено, что у больных СД1 с диабетической нефропатией, этнических русских, частота генотипа ILIO -627*С/*А выше (68,29%), чем у больных без данного осложнения (20,0%, Р=0,004) (рисунок 4). Таким образом, генотип ILIO - 627*С/*А можно отнести к маркерам риска диабетической нефропатии у больных СД1, русских по этнической принадлежности.

Выявлено, что у больных СД1, этнических русских, генотип IL6 -572*G/*G и аллель IL6 -572 *G чаще встречаются у пациентов с диабетической ретинопатией (88,46% и 94,23% соответственно), чем у пациентов без данного осложнения (42,86% и 71,43%, Р=0,12 и Р=0,18 соответственно). Это позволяет отнести генотип IL6 -572*G/*G к маркерам повышенного риска развития диабетической ретинопатия у больных СД1, русских по этнической принадлежности. У татар и башкир не выявлено подобных ассоциаций. Полиморфные локусы других рассмотренных в данном исследовании генов не ассоциированы с осложнениями СД1.

ь,

55,5

Л]

223

"СГС

*С/*А

ES контроль

0больныеСД1 6ei нефропатпи ^больные СД1 с нефропятпеп

□ контроль

□ больные СД1 без ретннопатни О больные СД1 с ретинопатией

Рисунок 4 - Распределение частот генотипов полиморфных локусов -627С>А гена ILIO и IL6 -572G>C в контрольной группе и у больных СД1 в зависимости от наличия микрососудистых осложнений (русские)

ВЫВОДЫ

1. На возраст манифестации сахарного диабета типа 1 и развитие его поздних осложнений оказывает влияние семейный анамнез по СД1 и СД2. У больных, имевших родственников с сахарным диабетом типа 1, заболевание возникало раньше, и уровень ХС-ЛПВП был значительно ниже, чем у пациентов с неотягощенным семейным анамнезом. Частота диабетической нефропатпи у больных сахарным диабетом типа 1, имевших родственников с сахарным диабетом типа 2, была существенно выше, чем у пациентов с неотягощенным семейным анамнезом.

2. Впервые в популяциях трех этнических групп, русских, татар и башкир, охарактеризован полиморфизм генов-кандидатов сахарного диабета типа 1: IL12B (1159А>С), ILIO (-6270А), IL6 (-572G>C), LT A (-252A>G), IL1R1 (.3653T>G), TNFRl (36T>C), FAS (-670A>G), NOS2 (1500Г), CASP1 {-877C>T) и VDR (352C>T). Показано, что предрасположенность к СД1 и его поздним осложнениям формируется в связи с полиморфизмом генов LT А, FAS, TNFRl,

ILIO, IL12B, 1L6 у русских, генов LT А, FAS, TNFR1, ILIR1 - у татар, гена VDR -у башкир.

3. Аллельные варианты генов LT А, FAS и TNFRI ассоциированы с сахарным диабетом типа 1 (у русских и татар). Риск развития заболевания повышен у носителей генотипа LTA 252*G/*G, генотипа FAS~670*G/*G (русских), генотипа FAS-670*A/*G (татар), и понижен у носителей генотипов FAS-670*A/*A, LTA 252*А/*А и TNFR1 Зб*А/*А (татар по этнической принадлежности).

4. Значимость аллельных вариантов генов-кандидатов для определения риска развития сахарного диабета типа 1 проявляется в зависимости от тендерной принадлежности. У женщин с генотипом VDR 36*С/*С (башкирок) и у женщин с генотипом IL10~627*A/*A (татарок) риск СД1 понижен, в то время, как у женщин (башкирок), имеющих аллель VDR352*T, и женщин (русских) с генотипом ILI0-627*C/*A риск сахарного диабета типа 1 повышен.

5. С возрастом манифестации сахарного диабета типа 1 ассоциированы аллельные варианты генов IL12B, ILIO, IL6, TNFRI и IL1RI. Риск позднего (после 18 лет) развития заболевания повышен у носителей генотипа IL12B 1159*С/*С, IL6 -572*G/*C, TNFRI 36*А/*А, а риск раннего (до 18 лет) дебюта заболевания повышен у носителей генотипов ILIO -627*С/*А, IL6 -572*G/*G иаллеля TNFRI 36*G (русских), генотипа IL1R13653*T/*T (башкир по этнической принадлежности).

6. Поздние осложнения сахарного диабета типа 1 ассоциированы с полиморфными вариантами генов IL6, ILIO, ILI2B. Маркером повышенного риска развития нефропатии является генотип ILIO -627*С/*А (у русских), повышенный риск дислипидемии имеют носители генотипа IL12B 1159*А/*А, повышенный риск развития диабетической ретинопатии - носители генотипа IL6 -572*G/*G (русские).

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Для оценки риска развития СД1 в популяциях башкир, русских и татар Башкортостана целесообразно исследовать полиморфные варианты генов системы цитокинов (IL 12В (1159А>С), ILIO (-6270А), 1L6 (-572G>C)), апоптоза (LTA (-252A>G), ILIRl (3653T>G), TNFRI (36T>C), FAS (-670A>G), VDR (352C>T)). С целью оценки риска поздних осложнений рекомендовано

проводить генотипирование по полиморфниым маркерам генов IL12B (1159А>С), IL10 (-6270А), IL6 (■-5720С).

2. При выявлении генетических маркеров повышенного риска СД1 необходимо проводить раннюю профилактику заболевания у лиц, относящихся к группе риска развития СД1, выбор адекватных методов терапии у лиц с диагностированным заболеванием.

АННОТАЦИЯ ДИССЕРТАЦИИ

Диссертация посвящена актуальной научной проблеме изучения молекулярно-генетических основ сахарного диабета типа 1 (СД1). Исследование проведено на обширной выборке больных (п=339) с использованием клинико-лабораторных, биохимических и молекулярно-генетических методов. Автором получен значительный объем оригинального фактического материала. Установлено, что в структуру наследственной предрасположенности к СД1 и его осложнениям вносят вклад аллельные варианты генов цитокинов и апоптоза: IL12B (1159А>С), IL10 (-627С>А), IL6 (-572G>C), LTA (-252A>G), IL1R1 (3653T>G), TNFRl (36Т>С), FAS (-670A>G), CASPl (-877C>T) и VDR (352C>T). Выявлены маркеры, предрасполагающие к развитию заболевания, а также протективные маркеры. Показано, что на характер ассоциаций аллельных вариантов генов с СД1 влияют этническая и тендерная принадлежности. Полученные результаты характеризуются научной новизной и могут быть рекомендованы для медико-генетического консультирования по СД1. При генетическом тестировании риска развития СД1 и его осложнений с использованием аллельных вариантов генов необходимо учитывать этническую и тендерную принадлежность пациентов и членов их семей.

The thesis is devoted to an actual scientific problem of molecule-genetic bases of type 1 diabetes mellitus (T1D) studying. An extensive sample of patients (n=339) was examined by clinical, laboratory, biochemical and molecule-genetic methods. The author has received a considerable volume of original actual material. It has established that in structure of hereditary predisposition to T1D and its complications the allelic variants contribution of cytokine and apoptosis-genes bring: IL12B (1159A>C), IL10 (-6270Л), IL6 (-572G>C), LTA (-2S2A>G), ILIR1

(3653T>G), TNFR1 (36T>C), FAS (-670A>G), CASP1 (-877C>T) and VDR (352C>T). The markers contributing to disease development and also protective markers are revealed. It is shown that genes allelic variants associated with T1D are influenced by ethnic and gender accessories. Received results are characterized by scientific novelty and can be recommended for medico-genetic consultation for T1D. The genetic analysis of T1D and its complications risk using genes allelic variants are necessary to consider an ethnic and gender accessory of patients and relatives.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Генетические аспекты сахарного диабета типа 1 в Республике Башкортостан / Д.Ш. Хамзина-Каримова, Ж.Р. Балхиярова. О.Е. Мустафина, Т.В. Моругова // Материалы Республиканской научно-практической конференции эндокринологов. - Уфа, 2003. - С. 54-56.

2. Авзалетдинова, Д.Ш. Связь сочетаний полиморфного маркера -5I1T/C гена интерлейкина 1 и специфичностей гена DRB1 с сахарным диабетом типа 1 у татар Башкортостана / Д.Ш. Авзалетдинова, Ж.Р. Балхиярова // Вопросы теоретической и практической медицины: матер. 69-й итоговой науч.-практич. конф. - Уфа, 2004. - С. 5-7.

3. Исследование Fokl полиморфизма гена рецептора витамина Д при сахарном диабете типа 1 в популяциях народов Башкортостана // Ж.Р. Балхиярова. Д.Ш. Авзалетдинова, Т.В. Моругова, О.Е. Мустафина / Высокие медицинские технологии в эндокринологии: Материалы V Всероссийского конгресса эндокринологов. - Москва, 2006. - С. 22.

4. DNA typing in Russian patients with type 1 diabetes mellitus / D. Avzaletdinova, Z. Balhiyarova. T. Morugova, O. Mustafina / Diabetologia: 42th Annual Meeting of the European Association for the Study of Diabetes. - Copenhagen/Malmoe, 2006. -Vol. 49, №1.-P. 176.

5. The IL6 -572G/C and IL12B -1159C/A polymorphisms and type 1 diabetes mellitus in Tatars of Bashkortostan / Z. Balhiyarova. T. Morugova, D. Avzaletdinova, O. Mustafina // 7lhBMHG. - Skopje, 2006. - P. 99.

6. Анализ ассоциаций полиморфизма C11S9A гена интерлейкина 12В с сахарным диабетом типа 1 в этнических группах Башкортостана /

Ж.Р. Балхиярова, Т.В. Моругова, Д.Ш. Авзалетдинова, О.Е. Мустафина // Сахарный диабет. - 2007. - №4. - С.3-5.

7. The interleukine-6 -572G/C polymorphism is associated with type 1 diabetes mellius in Russians and Tatars // J. Balhiyarova. T. Morugova, D. Avzaletdinova, O. Mustafina / Endocrine Abstracts: 9th European Society of Endocrinology. -Birmingham, 2007. - P. 13.

8. Association between interleukin-10 627C/A gene polymorphism and Type 1 Diabetes Mellitus in Russians and Tatars / Z.R. Balhiyarova. T.V. Morugova, D.S. Avzaletdinova, O.E. Mustafina // Fourth Croatian Congress of Endocrinology with international participation. - Rovinj, 2007. - P. 109.

9. Polymorphisms of the NOS2, TNFB and TNFR1 genes are associated with Type 1 Diabetes Mellitus in Tatars and Russians from Bashkortostan / Z. R. Balkhiyarova, D. S.Avzaletdinova, T. V. Morugova, О. E. Mustafina // European Journal of Human Genetics: 40th European Human Genetics Conference. - Barselona, 2008. - Vol. 9, №2-P. 356.

10. Исследование -627C/A полиморфизма гена интерлейкина-10 при сахарном диабете типа 1 в популяциях народов Башкортостана / Ж.Р. Балхиярова. Т.В. Моругова, Д.Ш. Авзалетдинова, О.Е. Мустафина // Материалы 4-й Всероссийского диабетологического конгресса. - Москва, 2008. - С. 6.

11. Анализ ассоциаций 252G/A полиморфизма гена лимфотоксина при сахарном диабете типа 1 в популяциях народов Башкортостана / Ж.Р. Балхиярова. Т.В. Моругова, Д.Ш. Авзалетдинова, О.Е. Мустафина // Материалы 4-й Всероссийского диабетологического конгресса - Москва, 2008. - С. 340.

12. Association between TNFR1 gene 36A/G polymorphism and Type 1 Diabetes Mellitus in Tatars and Russians / Balkhiyarova Z.R.. Avzaletdinova D.S., Morugova T.V., Mustafina O.E // 19th International Congress of Genetics. - Berlin, 2008. - P. 65.

13. Исследование генов апоптоза при сахарном диабете типа 1 в популяциях народов Башкортостана / Балхиярова Ж.Р.. Авзалетдинова Д.Ш., Моругова Т.В., Мустафина О.Е // Материалы Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых и специалистов "Актуальные проблемы современной эндокринологии", - Москва, 2008. - С. 127.

14. Особенности генетической предрасположенности к диабетической нефропатии у больных сахарным диабетом типа 1 проживающих в республике Башкортостан / Ж.Р. Балхиярова, Т.В. Моругова, Д.Ш. Авзапетдтнова,

O.E. Мустафина // Материалы I съезда терапевтов Республики Башкортостан «Актуальные вопросы внутренних болезней». - Уфа, 2008. - С. 133-134.

15. Генетические аспекты сахарного диабета: Учебное пособие. / Д.Ш. Авзалетдтнова, Т.В. Моругова, Ж.Р. Балхиярова, O.E. Мустафина // -Уфа, 2008. - 80 с.

16. Особенности течения сахарного диабета типа 1 в зависимости от наследственной предрасположенности / Ж.Р. Балхиярова. Т.В. Моругова, Д.Ш. Авзалетдинова, O.E. Мустафина // Материалы научно-практической конференции «Актуальные вопросы эндокринологии». - Уфа, 2009. - С. 35-38.

17. Роль гена апоптоза FAS в развитии диабетической полинейропатии / Ж.Р. Балхиярова. Т.В. Моругова, Д.Ш. Авзалетдинова, O.E. Мустафина Материалы научно-практической конференции "Актуальные вопросы эндокринологии". - Уфа, 2009. - С. 19-21.

18. Патент на изобретение № 2368325 «Способ прогнозирования развития сахарного диабета типа 1 в популяциях народов Башкортостана», 2008.

19. Медико-генетическое консультирование по сахарному диабету типа 1 в республике Башкортостан: достижения, проблемы, перспективы / Д.Ш. Авзалетдинова, Т.В. Моругова, Ж.Р. Балхиярова. Т.Р. Насибуллин, O.E. Мустафина // Материалы научно-практической конференции эндокринологов Республики Башкортостан. - Уфа, 2008. - С. 4-6.

20. Основные эпидемиологические показатели сахарного диабета у взрослых в Республике Башкортостан за 2001-2007 гг. / Г.Г. Байбурина, Т.В. Моругова, Г.Х. Мустафина, Ж.Р. Балхиярова // Материалы научно-практической конференции эндокринологов Республики Башкортостан. - Уфа, 2008. - С. 8-14.

21. Особенности генетической предрасположенности к сахарному диабету типа 1 / Ж.Р. Балхиярова. Т.В. Моругова, Д.Ш. Авзалетдинова, O.E. Мустафина // Съезд генетиков и селекционеров, посвященный 200-летию со дня рождения Ч. Дарвина и Пятый съезд Вавиловского общества генетиков и селекционеров. - Москва, 2009. - с. 388.

22. Роль генов цитокиновой сети в развитии нефропатии у пациентов с сахарным диабетом типа 1 / Ж.Р. Балхиярова. Д.Ш. Авзалетдинова, Т.В. Моругова, O.E. Мустафина // Всероссийский конгресс "Диабет и почки". -Москва, 2009.-с. 11.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ

ДН - диабетическая нефропатия

ДР - диабетическая ретинопатия

ИЛ - интерлейкин

КА - коэффициент атерогенности

ОХС - общий холестерин

ПЦР - полимеразная цепная реакция

СД - сахарный диабет типа

СКФ - скорость клубочковой фильтрации

ТГ - триглицериды

ХС-ЛПВП - холестерин липопротеидов высокой плотности

ХС-ЛПНП - холестерин липопротеидов низкой плотности

ХС-ЛПОНП - холестерин липопротеидов очень низкой плотности

CI - (confidence interval) - 95%-й доверительный интервал

NOS - (nitric oxide synthase) - синтаза оксида азота

IL - (interleukin) - интерлейкин

OR - (odds ratio) - показатель соотношения шансов

г - коэффициент корреляции

VDR - (vitamin D receptor) - рецептор витамина D

Издательская лицензия № 06788 от 01.11.2001 г. ООО «Издательство «Здравоохранение Башкортостана» 450000, РБ, г. Уфа, а/я 1293; тел./факс (347) 250-13-82.

Подписано в печать 11.11.2009 г. Формат 60x84/16. Гарнитура Times New Roman. Бумага офсетная. Отпечатано на ризографе. Усл. печ. л. 1,4. Уч.-изд. л. 1,5. Тираж 100. Заказ № 505.

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Балхиярова, Жанна Радиковна

Введение.7

1 Обзор литературы

1.1 Современная концепция этиопатогенеза сахарного диабета типа 1. 14

1.1.1 Роль системы цитокинов в развитии сахарного диабета типа 1.18

1.1.2 Механизм апопотоза бета-клеток поджелудочной железы.26

1.2 Роль наследственных факторов в развитии сахарного диабета типа 1. 31

1.2.1 Полиморфизм гена интерлейкина-12 и риск сахарного диабета типа

1.2.2 Полиморфизм гена интерлейкина-10 и риск сахарного диабета типа

1.2.3 Полиморфизм гена интерлейкина-6 и риск сахарного диабета типа 1.

1.2.4 Полиморфизм гена лимфотоксина альфа и риск сахарного диабета ^ типа 1.

1.2.5 Полиморфизм гена рецептора интерлейкина-1 и риск сахарного диабета типа 1.

1.2.6 Полиморфизм гена рецептора фактора некроза опухолей альфа типа

1 и риск сахарного диабета типа 1.

1.2.7 Полиморфизм гена каспазы-1 и риск сахарного диабета типа 1.43

1.2.8 Полиморфизм гена индуцибельной синтазы оксида азота и риск ^ сахарного диабета типа 1.

1.2.9 Полиморфизм гена FAS и риск сахарного диабета типа 1.

1.2.10 Полиморфизм гена рецептора витамина D и риск сахарного диабета типа 1.

2 Материалы и методы исследования

2.1 Общеклинические методы исследования.48

2.2 Лабораторно - инструментальные методы исследования.52

2.3 Молекулярно-генетические методы

2.3.1 Выделение ДНК из периферической крови человека.

2.3.2 Метод полимеразной цепной реакции.

2.4 Методы статистического анализа результатов исследования. 59

3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1 Клинико-биохимическая характеристика больных сахарного диабета типа 1.

3.2 Исследование влияния наследственной предрасположенности на возраст манифестации сахарного диабета типа 1 и развитие его поздних 65-66 осложнений.

3.3.1 Анализ ассоциаций полиморфизма 1159 А>С гена IL12B с сахарным диабетом типа 1.

3.3.2 Анализ ассоциаций полиморфизма 627 С>А гена ILIO с сахарным диабетом типа 1.

3.3.3 Анализ ассоциаций полиморфизма -572 G>C гена IL6 с сахарным диабетом типа 1.

3.3.4 Анализ ассоциаций полиморфизма 252 A>G гена LTA с сахарным диабетом типа 1.

3.3.5 Анализ ассоциаций полиморфизма 3653 T>G гена 1L1R1 с сахарным диабетом типа 1.;.

3.3.6 Анализ ассоциаций полиморфизма 36Т>С гена TNFR1 с сахарным диабетом типа 1.

3.3.7 Анализ ассоциаций полиморфизма -670 A>G гена FAS с сахарным диабетом типа 1.

3.3.8 Анализ ассоциаций полиморфизма -877С>Тгеиа CASP1 с сахарным диабетом типа 1.

3.3.9 Анализ ассоциаций полиморфизма 150С>Т гена NOS2 с сахарным диабетом типа 1.

3.3.10 Анализ ассоциаций полиморфизма 352 С>Тгена VDR с сахарным диабетом типа 1.

3.3.11 Анализ сочетанного влияния генетических и средовых факторов на 114

4 Обсуждение результатов. 120

5 Выводы. 131

Введение Диссертация по биологии, на тему "МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ САХАРНОГО ДИАБЕТА ТИПА 1 И ЕГО ОСЛОЖНЕНИЙ"

Актуальность проблемы. Сахарный диабет типа 1 (СД1) — хроническое заболевание, которое встречается у 0,4% населения в возрасте до 30 лет, а в течение всей жизни риск заболевания составляет 1% [123]. СД1 возникает в результате деструкции бета-клеток поджелудочной железы и абсолютной недостаточности выработки инсулина [28]. Считается, что в большинстве случаев заболевание развивается вследствие иммунной деструкции инсулинпродуцирующих клеток островков Лангерганса. Небольшой процент составляют идиопатические случаи СД1, при которых доступными методами иммунологические маркеры не идентифицируются. СД1 повышает риск ранней смертности в результате острых и хронических осложнений. Согласно эпидемиологическим данным, распространенность СД1 в мире неодинакова. Наблюдается географический градиент с юга на север и с востока на запад [20]. Заболеваемость СД1 у разных народов широко варьирует: от 0,1 на 100 тыс. в год в Китае до 40 на 100 тыс. в год в Финляндии [252]. Количество вновь выявленных случаев СД1 повсеместно увеличивается примерно на 3% ежегодно [114].

В России заболеваемость СД1 составляет 13,3 на 100 тыс., в Башкортостане в 2008 году - 9,6 на 100 тыс. [30, 34].

СД1 - многофакторное полигенное заболевание. Оно развивается постепенно при воздействии факторов окружающей среды на генетически предрасположенный организм. К триггерным факторам относят вирусные инфекции (цитомегаловирус, вирус Коксаки, краснухи, эпидемического паротита и др.), стресс, протеин коровьего молока, химические вещества (нитрозамины, стрептозоцин, вакор). Клинические симптомы появляются только после разрушения 80% бета-клеток поджелудочной железы. Латентный период СД1 может продолжаться в течение нескольких лет.

Центральным звеном аутоиммунной деструкции бета-клеток является нарушение регуляции процесса апоптоза. С одной стороны, замедляется элиминация аутореактивных клонов лимфоцитов, с другой — увеличивается скорость гибели бета-клеток поджелудочной железы. При СД1 активация апоптоза происходит при стимуляции образования N0 и увеличении скорости экспрессии РА8-рецептора. Важную роль в программируемой клеточной смерти играют цитокины - секреторные белки, выполняющие функцию медиаторов межклеточных сигналов и основных регуляторов активности иммунной системы. Одним из основных механизмов прогрессирования СД1 является нарушение дифференцировки Т-клеток с усиленным образованием Т-хелперов 1-го типа. Последние вырабатывают провоспалительные цитокины (ИЛ-6, ИЛ-12, ЛТА), оказывающее цитотоксическое воздействие на бета-клетки. Противоспалительные цитокины (ИЛ-10) при этом вырабатываются в недостаточных количествах.

Вклад генетических факторов в развитие СД1 составляет 60-80%; конкордантность для монозиготных близнецов 27-60%, а для дизиготных - 213% [3, 114]. Представления о возможных генах-кандидатах СД1 формируются на основании знаний нормальной физиологии организма, этиологии и патогенетических механизмов заболевания. К настоящему времени сформирован список генов-кандидатов СД1 http://www.tldbase.org/page/CandidateGenes]. В геноме человека выявлены локусы, сцепленные с заболеванием, однако большая часть из них не отождествлена с какими-либо генами. В результате широкомасштабных полногеномных скринингов выявлено более 40 полиморфных маркера СД1, локализованных на 20-ти аутосомных хромосомах и Х-хромосоме [204]. Следует отметить, что данные анализов сцепления локусов предрасположенности к заболеванию, проведенных в разных странах, являются противоречивыми. В частности, не обнаружено ассоциации с СД1 локусов ЮБМ5 (6я25), ЮИМв (6д27) и ЮБМ15 (6д21) у басков [167].

Сцепление с СД1 локусов IDDM1 (6р21.3) и IDDM2 (11р15.5) признают окончательно доказанными [36]. Локус IDDM1 включает гены HLA, которые контролируют процессинг антигенов в антигенпредставляющих клетках [40]. Подавляющее большинство работ посвящено исследованию полиморфизма генов HLA у больных СД1 в различных популяциях [11, 22, 129, 177]. И только в весьма немногих исследованиях обращают внимание на гены цитокиновой сети и апоптоза как потенциальные гены заболевания [106, 149]. В настоящее время получены данные об ассоциации генов ILIO, IL19, IL20, IL27, IL1R1, IL2RÁ, FAS с СД1 в некоторых популяциях [110, 149].

С изучением молекулярно-генетических основ СД1 открываются перспективы в решении медицинских и социальных проблем, связанных с заболеванием. Программы первичной профилактики СД1 проводятся в США, Канаде, Австралии, странах Западной Европы и в России [3, 180, 209]. В США, например, действует широкомасштабная программа прогнозирования и профилактики СД1 (Diabetes Prognosis and Prevention Trial Type 1), которая охватывает все штаты и некоторые провинции Канады [180]. Цель программы заключается в генетическом, иммунологическом и гормональном обследовании ближайших родственников больных СД1 для выявления лиц на поздней стадии доклинического периода и в профилактике заболевания. В рамках программы выполняется анализ полиморфизма аллелей HLA DQA1 и DQB1. В развитых странах в ближайшем будущем планируется проведение массового тестирования новорожденных по генетическим маркерам риска СД1. В Финляндии и на Острове Сардния в Италии, где отмечена наибольшая распространенность заболевания, новорожденных проверяют на носительство аллелей DO Al и DQB1 [209].

Обобщая результаты многочисленных исследований отечественных и зарубежных авторов, необходимо отметить следующее. При молекулярно-генетическом изучении любых многофакторных заболеваний, в том числе СД1, для расчета индивидуального прогноза и создания основанных на нем рекомендаций необходимо учитывать специфику конкретной популяции. Население республики Башкортостан в целом, башкирский и татарский этносы в частности, с точки зрения генетической структуры популяций являются своеобразными: в состав их генофонда в разных пропорциях входят европеоидные и монголоидные компоненты. Поэтому важно обоснование генетического маркирования СД1 в Башкортостане, по крайней мере, по тем локусам, которые ассоциированы с риском заболевания в других популяциях и этносах. Следует подчеркнуть, что своеобразие климатогеографических особенностей, техногенные влияния на экологию могут иметь отношение к риску заболевания в сочетании с особенностями генофонда населения республики Башкортостан.

В соответствии с вышесказанным, цель настоящего исследования состояла в молекулярно-генетическом анализе предрасположенности к СД1 и его осложнениям с использованием полиморфных маркеров генов цитокиновой сети и апоптоза в этнически однородных группах (русские, татары и башкиры) населения республики Башкортостан.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

1. Охарактеризовать клинические особенности пациентов с СД1. Оценить влияние отягощенного по СД1 или СД2 семейного анамнеза на риск развития осложнений у больных СД1 и возраст дебюта заболевания.

2. В группе больных и группе сравнения определить частоты аллелей и генотипов по полиморфным локусам

- интерлейкина 12 (.IL12B, 1159А>С),

- интерлейкина 10 {ILIO, -627С>А),

- интерлейкина 6 {ILб, -572G>C),

- лимфотоксина {LTА, 252A>G),

- рецептора интерлейкина 1 типа 1 {IL1R1, 3653T>G),

- рецептора фактора некроза опухолей альфа типа 1 (TNFR1,36Т>С),

- рецептора FAS (FAS, -670A>G),

- индуцибельной синтазы оксида азота (NOS2, 150С>Т),

- каспазы-1 (CASP1, -8770Т),

- гена рецептора витамина D ( VDR, 352 С>Т).

3. Провести анализ ассоциаций аллельных вариантов исследуемых генов с СД1, возрастом дебюта заболевания.

4. Оценить вклад аллельных вариантов перечисленных генов с поздними осложнениями СД1.

Научная новизна исследования: Получены новые данные по ассоциациям полиморфных локусов генов цитокиновой сети (IL12B, IL6, ILIO), апоптоза {LTA, IL1R1, TNFR1, FAS) и гена VDR с СД1 и его клиническими проявлениями в трех этнических группах населения Республики Башкортостан (русских, татар и башкир). Обнаружены ассоциации аллельных вариантов генов LT A (252A>G), FAS (■-670A>G) и TNFR1 (36A>G) с СД1 у этнических русских и татар. Выявлены генотипы повышенного риска СД1 у женщин: ILIO ~627*А/*А (татар), ILIO -627*С/*А (русских) и VDR 352*С/*С (башкир). Найдены ассоциации с возрастом манифестации СД1 полиморфных маркеров генов IL 12В (1159А>С), ILIO (-6270А), TNFR1 (ЗбТ>С) у русских и IL1R1 (3653T>G) у башкир. Установлено, что у этнических русских генотип ILIO -627*С/*А вовлечен в развитие нефропатии, повышенный риск дислипидемии маркирует генотип IL12B 1159*А/*А, а носители генотипа IL6-572*G/*G имеют повышенный риск развития диабетической ретинопатии.

Внедрение в практику. Результаты и основные положения диссертационной работы внедрены в диагностическую и лечебно-профилактическую деятельность МУ ГКБ№21 ГО г. Уфы и включены в учебный процесс кафедры эндокринологии и ИПО ГОУ ВПО "Башкирский государственный медицинский университет Росздрава". Получен патент на изобретение "Способ прогнозирования развития сахарного диабета типа 1 в популяциях народов Башкортостана". По материалам диссертации разработано методическое пособие для студентов и врачей "Генетические аспекты сахарного диабета".

Положения, выносимые на защиту:

2. Существуют этнические особенности в структуре наследственной предрасположенности к СД1 и его поздним осложнениям. В их развитие вносит вклад полиморфизм генов LTA, FAS, TNFR1, ILIO, IL12B, IL6 у русских, генов LTA, FAS, TNFR1, IL1R1 у татар, гена VDR у башкир.

3. С возрастом дебюта заболевания ассоциированы полиморфные локусы: IL 12В (.1159А>С), ILIO (-6270А), IL6 (■-572G>Q, TNFR1 (.36T>Q, IL1R1 СS653T>G).

4. Аллельные варианты генов ILIO (-627С> А) и VDR (352С>Т) ассоциированы с СД1 только у женщин.

Апробация работы. Материалы диссертационной работы были представлены на V Всероссийском конгрессе эндокринологов "Высокие медицинские технологии в эндокринологии" (Москва, 2006), 42-м Ежегодном съезде Европейской ассоциации по изучению диабета (Copenhagen/Malmoe, 2006), 9-м Европейском обществе эндокринологов (Birmingham, 2007), 4-м Конгрессе эндокринологов (Rovinj, 2007), 40-й Европейской конференции по генетике человека (Barcelona, 2007), Научно-практической конференции эндокринологов Республики Башкортостан "Актуальные вопросы эндокринологии" (Уфа, 2008, 2009), Всероссийском Конгрессе "Диабет и почки" (Москва, 2009). Результаты работы отмечены дипломом 1-й степени на 4-м Всероссийском диабетологическом конгрессе (Москва, 2008), дипломом лауреата Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых и специалистов "Актуальные проблемы современной эндокринологии" (Москва, 2008).

1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение Диссертация по теме "Генетика", Балхиярова, Жанна Радиковна

5 ВЫВОДЫ

1. На возраст манифестации сахарного диабета типа 1 и развитие его поздних осложнений оказывает влияние семейный анамнез по СД1 и СД2. У больных, имевших родственников с сахарным диабетом типа 1, заболевание возникало раньше, и уровень ХС-ЛПВП был значительно ниже, чем у пациентов с неотягощенным семейным анамнезом. Частота диабетической нефропатии у больных сахарным диабетом типа 1, имевших родственников с сахарным диабетом типа 2, была существенно выше, чем у пациентов с неотягощенным семейным анамнезом.

2. Впервые в популяциях трех этнических групп, русских, татар и башкир, охарактеризован полиморфизм генов-кандидатов сахарного диабета типа 1: IL12B (1159А>С), ILIO (-6270А), IL6 (■-572G>Q, LTA (-252A>G), IL1R1 (3653T>G), TNFR1 (36T>Q, FAS (■-670A>G), NOS2 (1500T), CASP1 (-8770T) и VDR (3520T). Показано, что предрасположенность к СД1 и его поздним осложнениям формируется в связи с полиморфизмом генов LTA, FAS, TNFR1, ILIO, IL12B, IL6 у русских, генов LT А, FAS, TNFR1, IL1R1 - у татар, гена VDR - у башкир.

3. Аллельные варианты генов LT А, FAS и TNFRI ассоциированы с сахарным диабетом типа 1 (у русских и татар). Риск развития заболевания повышен у носителей генотипа LT A 252*G/*G, генотипа FAS~670*G/*G (русских), генотипа FAS—670*A/*G (татар), и понижен у носителей генотипов FAS" 67 О *А/*А, LT А 252*А/*А и TNFR1 Зб*А/*А (татар по этнической принадл ежно сти).

4. Значимость аллельных вариантов генов-кандидатов для определения риска развития сахарного диабета типа 1 проявляется в зависимости от тендерной принадлежности. У женщин с генотипом VDR 36*С/*С (башкирок) и у женщин с генотипом IL10—627*A/*A (татарок) риск СД1 понижен, в то время, как у женщин (башкирок), имеющих аллель VDR352*T, и женщин (русских) с генотипом ILIO —627*С/*А риск сахарного диабета типа 1 повышен.

5. С возрастом манифестации сахарного диабета типа 1 ассоциированы аллельные варианты генов IL12B, ILIO, IL6, TNFR1 и IL1R1. Риск позднего (после 18 лет) развития заболевания повышен у носителей генотипа IL 12В 1159*С/*С, IL6 -572*G/*C, TNFR1 36*А/*А, а риск раннего (до 18 лет) дебюта заболевания повышен у носителей генотипов ILIO -627*С/*А, IL6 -572*G/*G и аллеля TNFR1 36*G (русских), генотипа IL1R13653*T/*T (башкир по этнической принадлежности).

6. Поздние осложнения сахарного диабета типа 1 ассоциированы с полиморфными вариантами генов IL6, ILIO, IL 12В. Маркером повышенного риска развития нефропатии является генотип ILIO ~627*С/*А (у русских), повышенный риск дислипидемии имеют носители генотипа IL12B 1159*А/*А, повышенный риск развития диабетической ретинопатии -носители генотипа IL6 -572*G/*G (русские).

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Балхиярова, Жанна Радиковна, Москва

1. Балаболкин, М.И. Диабетология / М.И. Балаболкин. М., 2000. - 155 с.

2. Возианов, А.Ф. Цитокины. Биологические и противоопухолевые свойства / А.Ф. Возианов, А.К. Бутенко, К.П. Зак. Киев: Научная мысль, 1998. - 315 с.

3. Генетика сахарного диабета у детей и подростков: пособие для врачей / И.И. Дедов, T.JI. Кураева, О.В. Ремизов и др.. — М., 2003. 72 с.

4. Гены антиоксидантной защиты и предрасположенность к сахарному диабету / Д.А. Чистяков, К.В. Савостьянов, Р.И. Туракулов и др. // Сахарный диабет. 2000. - № 3. - С. 21-22.

5. Гланц, С. Медико-биологическая статистика / С. Гланц. М.: Практика, 1998.-459 с.

6. Животовский, Л.А. Популяционная биометрия / Л.А. Животовский. М.: Наука, 1991.-250 с.

7. Зак, К.П. Цитокины и сахарный диабет 1-го типа у человека (обзор с включением собственных данных) / К.П. Зак, В.В. Попова // Укр. мед. вестник.-2006.-Т. 51, № 1.-С. 78-88.

8. Иванов, В.И. Геномика медицине / В.И. Иванова, Л.Л. Кисилева. - М.: Академкнига, 2005. - 392 с.

9. Иванюшина, В.А. Молекулярные шапероны: новые белки новые функции / В.А. Иванюшина // Молекуляр. биология. - 1991. - Т. 25. - С. 869-882.

10. Идентификация генетических маркеров, сцепленных с сахарным диабетом типа 1 / В.В. Носиков, Ю.А. Серегин, Е.В. Титович и др. // Пробл. эндокринологии. 2002. - № 4. - С. 10-13.

11. Кетлинский, С.А. Цитокины / С.А. Кетлинский, A.C. Симбирцевю -Спб.: Фолиант, 2008. 550 с.

12. Клиническое руководство по лабораторным тестам / под ред. Н.У. Тица. М.: Юнимед - пресс, 2003. - 960 с.

13. Ляйфер, А.И. Система перекисное окисление липидов — антиоксидантная защита и роль ее нарушений в патогенезе сахарного диабетаи ангиопатий / А.И. Ляйфер, М.Н. Солун // Пробл. эндокринологии. 1993. — Т. 39, № 1.-С. 57-60.

14. Маниатис, Т. Методы генетической инженерии. Молекулярное клонирование / Т. Маниатис, Э. Фрич, Дж. Сэмбрук. М.: Мир, 1984. — 399 с.

15. Медико-генетическое консультирование в семьях больных сахарным диабетом 1 типа: метод, рекомендации / И.И. Дедов, Т.Д. Кураева, В.А. Петеркова и др.. М., 2000. - 56 с.

16. Межпопуляционный подход в установлении ассоциированной с HLA генетической предрасположенности к инсулинзависимому сахарному диабету / Л.П. Алексеев, И.И. Дедов, A.B. Зилов и др. // Сахарный диабет. — 1998. -№ 1.-С. 12-14.

17. Межэтнические различия генов HLA II класса при СД 1 типа / A.B. Зилов, М.Н. Болдырева, Л.П. Алексеев, И.И. Дедов // Актуальные проблемы современной эндокринологии: матер. IV Всерос. конгр. эндокринологов. -СПб., 2001.-С. 75.

18. Мохорт, Т.В. Апоптоз роль в развитии сахарного диабета типа 1 / Т.В. Мохорот, С.Б. Мельнов, В.А. Горанов // Пробл. эндокринологии. — 2000. - № 2. - С. 8-13.

19. Назаров, П.Г. Реактанты острой фазы воспаления / П.Г. Назаров. -СПб.: Наука, 2001. 423 с.

20. Науменко, С.Л. Эпидемиологическая характеристика сахарного диабета 1-го типа у детей и подростков Калининградского региона / С.Л. Науменко, Т.Л. Кураева // Сахарный диабет. 2004. - Т 3. - С. 8-13.

21. Полторак, В.В. Профилактика сахарного диабета 1 типа: патофизиологическое обоснование, стратегия и клиническая реализация /

22. B.В. Полторак // Укр. мед. вестник. 2001. - Т. 22, № 2. - С. 83-91.

23. Распределение HLA-аллелей и гаплотипов в популяции коми / Л.П. Алексеев, P.M. Хаитов, Р.Г. Василов и др. // Иммунология. 1996. - № 2.1. C. 16-18.

24. Растворимый Fas-антиген в сыворотке крови онкологических больных / С.Г. Аббасова, Н.Е. Кушлинский, А.Н. Мурашев и др. // Бюл. эксперим. биол. и мед. 1999. - Т. 27, № 3. - С. 375-378.

25. Реброва, О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ Statistica / О.Ю. Реброва. — М.: МедиаСфера, 2002. -312 с.

26. Робинсон, М.В. Апоптоз и цитокины / М.В. Робинсон, В.А. Труфакин // Успехи совр. биологии. 1999. - № 4. - С. 352.

27. Ройт, А. Иммунология / А. Ройт, Дж. Бростофф, Д. Мейл. М.: Мир, 2000. - 592 с.

28. Роль цитокинов в регуляции иммунного ответа и механизмы гибели р-клеток при различных вариантах течения сахарного диабета типа 1 / И.И. Дедов, Т.В. Никонова, О.М. Смирнова и др. // Пробл. эндокринологии. -2005.-Т. 51, №3.-С. 3-7.

29. Сахарный диабет у детей и подростков / И.И. Дедов, T.JI. Кураева, В.А. Петеркова, JI.H. Щербачева. М., 2002. - 205 с.

30. Содержание цитокинов в крови в доклиническую и раннюю клиническую стадии развития сахарного диабета у детей / В.В. Попова, C.B. Мельниченко, Т.Н. Малиновская и др. // Пробл. эндокрин. патологии. — 2004.-Т. 2.-С. 53-59.

31. Сунцов, Ю.И. Значение государственного регистра больных сахарным диабетом в развитии диабетологической службы / Ю.И. Сунцов, C.B. Кудрякова, JI.JI. Болотская // Сахарный диабет. 2002. - Т. 1. - С. 28-31.

32. Шестакова, М.В. Диабетическая нефропатия: механизм развития, клиника, диагностика, лечение: пособие для врачей / М.В. Шестакова; под ред. И.И. Дедова. М., 2003. - 240 с.

33. Эндокринология / пер. с англ. В.И. Кандрора и др.; под ред. Н. Лавина. М.: Практика, 1999. - 1128 с.

34. Эпидемиология инсулинзависимого сахарного диабета / И.И. Дедов, Ю.И. Сунцов, С.В. Кудрякова, С.Г. Рыжкова // Пробл. эндокринологии. — 1998.-№2. -С. 48.

35. Эпидемиология сахарного диабета в Республике Башкортостан / Г.Г. Байбурина, Т.В. Моругова, Г.Х. Мустафина, Ж.Р. Балхиярова // Актуальные вопросы эндокринологии: матер, науч.-практич. конф. эндокринологов Республики Башкортостан. Уфа, 2008. - С. 8-14.

36. A functional variant of lymphoid tyrosine phosphatase is associated with type I diabetes / N. Bottini, L. Musumeci, A. Alonso et al. // Nat. Genet. 2004. -Vol. 36, №4.-P. 337-8.

37. A genome-wide search for human type 1 diabetes susceptibility genes / J.L. Davies, Y. Kawaguchi, S.T. Bennett et al. // Nature. 1994. - Vol. 371. - P. 130136.

38. A novel polymorphism within vitamin D receptor (VDR) is associated with type 1 diabetes mellitus in Germans / K. Badenhoop, E. Ramoz Lopez, G. Meyer et al. // Diabetologia. 2004. - Vol. 47. - P. A 131.

39. A search for type 1 diabetes susceptibility genes in families from the United Kingdom / C.A. Mein, L. Esposito, M.G. Dunn et al. // Nature Genet. 1998. -Vol. 19.-P. 297-300.

40. A second-generation genome screen for linkage to type 1 diabetes in a Bedouin Arab family / S.R. Babu, G.C. Conant, E. Eller et al. // Ann. N. Y. Acad. Sci.-2004.-Vol. 1037.-P. 157-160.

41. A second-generation screen of the human genome for susceptibility to insulin-dependent diabetes mellitus / P. Concannon, K.J. Gogolin-Ewens, D.A. Hinds et al. // Nature Genet. 1998. - Vol. 19. - P. 292-296.

42. A TNFR1 genotype with a protective role in familial rheumatoid arthritis / P. Dieude, J. Osorio, E. Petit-Teixeira et al. // Arthritis & rheumatism. 2004. -Vol. 50, №2.-P. 413-419.

43. A vitamin D receptor gene polymorphism in the translation initiation codon: effect on protein activity and relation to bone mineral density in Japanese women /

44. H. Arai, K. Miyamoto, Y. Taketani et al. // J. Bone Miner. Res. 1997. - Vol. 12.-P. 915-921.

45. Adorini, L. Interleukin-12, a key cytokine in Thl -mediated autoimmune diseases / L. Adorini // Cell. Mol. Life Sci. 1999. - Vol. 55. - P. 1610-25.

46. Affected-sib-pair mapping of a novel susceptibility gene to insulin-dependent diabetes mellitus (IDDM8) on chromosome 6q25-q27 / D.-F. Luo, M.M. Bui, N.K. Maclaren et al. // Am. J. Hum. Genet. 1995. - Vol. 57. - P. 911-919.

47. Aggarwal, B.B. Characterization of receptors for human tumor necrosis factor and their regulation by gamma-interferon / B.B. Aggarwal, T.E. Eessalu, P.E. Hass //Nature. 1985. - Vol. 318. - P. 665-667.

48. Allele associations reveal four prominent haplotypes at the human interleukin-6 (IL-6) locus / N. Jordanies, J. Eskdale, R. Stuart, G. Gallagher // Gen. Immunol.-2000.-Vol. l.-P. 451-455.

49. An association between type 1 diabetes and the interleukin-receptor type 1 gene / K.A. Metcalfe, G.A. Hitman, F. Pociot et al. // Hum. Immunol. 1996. -Vol. 51.-P. 41-48.

50. Analysis of IL-12 p40 subunit gene and IFN-y G5644A polymorphisms in Idiopathic Pulmonary Fibrosis / P. Latsi, P. Pantelidis, D. Vassilakis et al. // Respiratory Research. 2003. - Vol. 4, №6. - P. 10-15.

51. Analysis of N-acetyl-transferase 2 gene variants in type 1 diabetes / C. Guja, S. Nutland, E. Tuomilehto-Wolf et al. // Diabetologia. 2004. - Vol. 47. - P. A133.

52. Analysis of polymorphisms in 16 genes in type 1 diabetes that have been associated with other immune-mediated diseases / D.J. Smyth, J.M. Howson, F. Payne et al. // BMC Med. Genet. 2006. - Vol. 7. - P. 20.

53. Analysis of the vitamin D receptor gene sequence variants in type 1 diabetes / S. Nejentsev, J.D. Cooper, L. Godfrey et al. // Diabetes. 2004. - Vol. 53. - P. 2009-12.

54. Assessment of inflammatory markers in patients with diabetes mellitus and chronic hepatitis C virus infection / M. Skowronski, D. Zozulinska, J. Juszczyk et al. // Diabetologia. 2004. - Vol. 47, № 1. - P. A296.

55. Association between bone loss and promoter polymorphism in the IL-6 gene in elderly Japanese women with hip fracture / D. Feng, H. Ishibashi, S. Yamamoto et al. // J. Bone Miner. Metab. 2003. - Vol. 21. - P. 225-228.

56. Association between FAS polymorphism and prostate cancer development / L. Lima, A. Morais, F. Lobo et al. // Prostate Cancer and Prostatic Diseases. — 2008.-Vol. 11.-P. 94-98.

57. Association between interleukin 6 promoter variants and chronic hepatitis B progression / B.L. Park, H.S. Lee, Y.J. et al. // Exp. Mol. Med. 2003. - Vol. 35. -P. 76-82.

58. Association between LTA, TNF and AGER polymorphisms and late diabetic complications / E. Lindholm, E. Bakhtadze, C. Cilio et al. // PLoS One. -2008. — Vol. 25. e2546.

59. Association between vitamin D gene polymorphisms and renal osteodystrophy in patients on maintenance hemodialysis / K. Kohama, J. Uemasu, H. Kawasaki et al. // Yonago Acta Medica. 2000. - Vol. 43. - P. 27-38.

60. Association of Fas/Apol gene promoter (-670 A/G) polymorphism in Tunisian patients with IBD / W.B. Aleya, I. Sfar, L. Mouelhi et al. // World J. Gastroenterol. 2009. - Vol. 15, №29. - P. 3643-3648.

61. Association of the tumor necrosis factor a —308 but not the interleukin 10 -627 promoter polymorphism with genetic susceptibility to primary sclerosing cholangitis / S.A. Mitchell, J. Grove, A. Spurkland et al. // Gut. 2001. - Vol. 49.-P. 288-294.

62. Association of the vitamin D receptor (VDR) gene with type 1 diabetes mellitus and celiac disease / J.R. Bilbao, J.I. San Pedro, J.C. Vitoria et al. // Diabetologia. 2004. - Vol. 47. - P. A 131.

63. Association of tumor necrosis factor receptor 1 gene polymorphism with bone mineral density / S. Hoshino, T. Hosoi, M. Shiraki et al. // Geriatrics and Gerontology International. 2003. - Vol. 3. - P. 101-105.

64. Association of two tumor necrosis factor gene polymorphisms with the incidence of severe intraventricular haemorrhage in preterm infants / A. Heep, A.C. Schueller, E. Kattner et al. // J. Med. Genet. 2005. - Vol. 42. - P. 604608.

65. Association of vitamin D receptor gene polymorphism with type 1 diabetes mellitus in two Spanish populations / G. Marti, L. Audi, C. Esteban et al. // Med. Clin. (Bare). 2004. - Vol. 11. - P. 286-290.

66. Atkinson, M.A. The pathogenesis of insulin-dependent diabetes mellitus / M.A. Atkinson, N.K. MacLaren // New Engl. J. Med. 1994. - Vol. 331. - P. 1428-1436.

67. Balding, J. Cytokine gene polymorphisms: associations with psoriatic arthritis susceptibility and severity / J. Balding, D. Kane, W. Livingstone // Arthritis. Reum. 2003. - Vol. 48. - P. 1408-1413.

68. Bell, G.I. A polymorphic locus near the human insulin gene is associated with insulin-dependent diabetes mellitus / G.I. Bell, S. Harita, J.H. Karam // Diabetes.-1984.-Vol. 33.-P. 176-183.

69. Bell, G.I. The highly polymorphic region near the human insulin gene is composed of simple tandemly repeating sequences / G.I. Bell, M.J. Selby, WJ. Rutter // Nature. 1982. - Vol. 295. - P. 31-35.

70. Bland, J.M. The odds ratio / J. M. Bland, D. G. Altman // Br. Med. J. -2000.-Vol. 320.-P. 1468.

71. Brown, D.L. Apoptosis down-regulates inflammation under the advancing epithelial wound edge: delayed patterns in diabetes and improvement with topical growth factors 1 / D.L. Brown, W. Kao, D.G. Greenhalgh // Surgery. 1997. -Vol. 121.-P. 372-380.

72. Caspase-1 Is not required for type 1 diabetes in the NOD mouse / W.H. Schott, B.D. Haskell, H.M. Tse et al. // Diabetes. 2004. - Vol. 53. - P. 99-104.

73. Characterization of human Fas gene. Exon/intron organization and promoter region / J. Cheng , C. Liu , WJ. Koopman et al. // J. Immunol. 1995. - Vol. 154.-P. 1239-1245.

74. Chromosome 6q25 is linked to susceptibility to leprosy in a Vietnamese population / M.T. Mira, A. Alcais, N. Van Thuc et al. // Nature Genet. 2003. -Vol. 33.-P. 412-415.

75. Cloning of a novel member of the low-density lipoprotein receptor family / P.J. Hey, R.C. Twells, M.'S. Phillips et al. // Gene. 1998. - Vol. 216. - P. 103111.

76. Cloning of cDNA for natural killer cell stimulatory factor, heterodimeric cytokine with multiple biologic effects on T and natural killer cells / S.F. Wolf, P.A. Temple, M. Kobayashi et al. // J. Immunol. 1991. - Vol. 146. - P. 307481.

77. Coexpression of two distinct genes is required to generate secreted bioactive cytotoxic lymphocyte maturation factor / U. Gubler, A.O. Chua, D.S. Schoenhaut et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. 1991. - Vol. 88, № 10. - P. 4143-47.

78. Colucci, F. Programmed cell death in the pathogenesis of murine IDDM: resistance to apoptosis induced in lymphocytes by cyclophosphamide / F. Colucci, C.V. Cilio, K. Lejon et al. // J. Autoimmunity. 1996. - Vol. 9, № 2. - P. 271276.

79. Comparison of serum NO, TNF-alpha, IL-1 beta, sIL-2R, IL-6 and IL-8 levels with grades of retinopathy in patients with diabetes mellitus / S. Doganay, C. Evereklioglu, H. Er et al. // Eye. 2002. - Vol. 16, № 2. - P. 163-170.

80. Complete molecular scanning of the human Fas gene: mutational analysis and linkage studies in families with type I diabetes mellitus / R.L. Nolsoe, O.P. Kristiansen, K. Sangthongpitag et al. // Diabetologia.- 2000. Vol. 43. - P. 800808.

81. Complete mutation scan of the human Fas ligand gene / R.L. Nolsoe, O.P. Kristiansen, Z.M. Larsen et al. // Diabetologia. 2002. - Vol. 45, №1. -P. 134-9.

82. Concentration of insulin autoantibodies at onset of type I diabetes. Inverse log-linear correlation with age / P. Vardi, A.G. Ziegler, J.H. Mathews et al. // Diabetes Care. 1988. - Vol. 11, № 9. - P. 736-9.

83. Convincing statistical support for association of the Arg620Trp polymorphisms in PTPN22 locus with type 1 diabetes / A. Vella, D. Smyth, J.D. Cooper et al. // Diabetologia. 2004. - Vol. 47. - P. A 133.

84. Cytokine overproduction in healthy first degree relatives of patients with IDDM / M.J. Hussain, J. Maher, T. Warnock et al. // Diabetologia. 1998. - Vol. 41, №3.-P. 343-349.

85. Davoodi-Semiromi, A. IL-12p40 is associated with type 1 diabetes in caucasian-american families / A. Davoodi-Semiromi, J. Yang, J. She // Diabetes. -2002.-Vol. 51.-P. 2334-36.

86. Defective expression of the apoptosis-inducing CD95 (Fas/APO-1) molecule on T and B cells in IDDM / C. Giordano, R. De Maria, G. Stassi et al. // Diabetologia. 1995. - Vol. 38. - P. 1449-54.

87. Elevated glucose and diabetes promote Interleukin 12 cytokine gene expression in mouse macrophages / Y. Wen, J. Gu, S. Li et al. // Endocrinology. 2006. - Vol. 2. - P. 2518-25.

88. Elevated interleukin-10 levels correlated with disease activity in systemic lupus erytematosus / Y.B. Park, S.K. Lee, D.S. Kim et al. // Clin. Exp. Rheumatol. 1998. - Vol. 16. - P. 283-288.

89. Evidence for a novel type 1 diabetes susceptibility locus on chromosome 8 / M.M. Sale, L.M. Fitzgerald, J.C. Charlesworth et al. // Diabetes. 2002. - Vol. 51, №3.-P. 316-319.

90. Evidence for linkage to and association with type 1 diabetes at the 3q21 region in the Finnish population / A.P. Laine, H. Turpeinen, R. Veijola et al. // Genes Immun. 2006. - Vol. 7. - P. 69-72.

91. Familial association between type 1 diabetes and other autoimmune and relateddiseases / K. Hemminki, X. Li, J. Sundquist, K. Sundquist et al. // Diabetologia. -2009. Vol. 52, № 9. - P. 1820-28.

92. Family-based analysis of tumor necrosis factor and lymphotoxin-alfa tag polymorphisms with type 1 diabetes in the population of South Croatia / V. Boraska, E. Zeggini, C.J. Groves et al. // Hum Immunol. 2009. - Vol. 70, №3. -P. 195-9.

93. Fas Antigen and Sporadic Alzheimer's Disease in Southern Italy. Evaluation of Two Polymorphisms in the TNFRSF6 Gene / V. Andreoli, G. Nicoletti, N. Romeo et al. // Neurochemical Research. 2007. - Vol. 32, №9. - P. 1445-1449.

94. Fas promoter -670 polymorphism is associated with development of anti-RNP antibodies in systemic lupus erythematosus / Y.H. Lee, Y.R. Kim, J.D. Ji et al. // J. Rheumatol. 2001. - Vol. 28, № 9. - P. 2008-11.

95. FAS promoter polymorphisms and cancer risk: a meta-analysis based on 34 case-control studies / Z. Zhang, H. Xue, W. Gong et al. // Carcinogenesis. -2009. Vol. 30, № 3. - P. 487-493.

96. Fehsel, K. Islet cell DNA is a target of inflammatory attack by nitric oxide / K. Fehsel, A. Jalowy, S. Qi // Diabetes. 1993. - Vol. 42. - P. 496-500.

97. Field, L. A locus on chromosome 15q26 (IDDM) produces susceptibility to insulin-dependent diabetes mellitus / L. Field, R. Tobias, T. Magnus // Nature Genet. 1994. - Vol. 8. - P. 189-194.

98. Fine mapping of the diabetes-susceptibility locus, IDDM4, on chromosome 1 lql3 / Y. Nakagawa, Y. Kawaguchi, R.C. Twells et al. // Am. J. Hum. Genet. -1998.-Vol. 63.-P. 547-556.

99. Fokl polymorphism, vitamin D receptor, and interleukin-1 receptor haplotypes are associated with type 1 diabetes in Dalmatian population / T.

100. Zemunik, V. Skrabic, V. Boraska et al. // J. Mol. Diagn. 2005. - Vol. 7. - P. 600-604.

101. Follow-up analysis of genome-wide association data identifies novel loci for type 1 diabetes / S.F. Grant, H.Q. Qu, J.P. Bradfield et al. // Diabetes. 2009. -Vol. 58, №1.-P. 290-5.

102. Frayling, T.M. Genetic studies of diabetes following the advent of the genome-wide association study: where do we go from here? / T.M. Frayling, M.I. McCarthy // Diabetologia. 2007. - Vol. 50. - P. 2229-33.

103. Freshly isolated tumor-infiltrating T-lymphocytes have a high cytotoxic potential, as measured by their ability to induce apoptosis in the target cell / B. Ostenstad, M. Sioud, E. Schlichting et al. // Scand. J. Immunol. 1995. - Vol. 41.-P. 42-48.

104. Functional polymorphisms of the FAS gene associated with risk of vitiligo in Chinese populations: a case-control analysis / M. Li, D. Sun, C. Li et al. // J. Invest. Dermatol. -2008. Vol. 128, № 12. - P. 2820-4.

105. Functional SNPs in the lymphotoxin-alpha gene that are associated with susceptibility to myocardial infarction / K. Ozaki, Y. Ohnishi, A. Iida et al. // Nature Genet. 2002. - Vol. 32. - P. 650-654.

106. Gender-specific association of vitamin D receptor polymorphism combinations with type 1 diabetes mellitus / B. Gyorffy, B. Vasarhelyi, D. Krikovszky et al. // Eur. J. Endocrinol. Vol. 147. - P. 803-808.

107. Genetic and functional evaluation of an interleukin-12 polymorphism (IDDM18) in families with type 1 diabetes / R. Bergholdt, P. Ghandil, J. Johannesen et al. // J. Med. Genet. 2004. - Vol. 41. - P. e39.

108. Genetic lability of type 1 diabetes and the onset age among 22,650 young Finnish twin pairs: a nationwide follow-up study / V. Hyttinen, J. Kaprio, L. Kinnunen et al. // Diabetes. 2003. - Vol. 52. - P. 1052-1055.

109. Genetic mapping of a susceptibility locus for insulin-dependent diabetes mellitus on chromosome llq / L. Hashimoto, S. Habita, J.P. Beressi et al. // Nature. 1994.-Vol. 371.-P. 161-164.

110. Genetic polymorphism of IL-12 p40 gene in immune-mediated disease / M.A. Hall, E. McGlinn, G. Coakley et al. // Genes. Immun. 2000. - Vol. 1. - P. 219-224.

111. Genetic variation in the interleukin-1 p-converting enzyme associates with cognitive function. The PROSPER study / S. Trompet, AJ.M. de Craen, P. Slagboom et al. // Brain. 2008. - Vol. 10. - P. 1093.

112. Genetic variation in the interleukin-10 gene promoter in Polish patients with systemic lupus erythematosus / A. Sobkowiak, M. Lianeri, M. Wudarski et al. // Rheumatol Int. 2009. - Vol. 29. - P. 921-925.

113. Genome-wide association study and meta-analysis find that over 40 loci affect risk of type 1 diabetes / J.C. Barrett, D.G. Clayton, P. Concannon et al. // Nat Genet. 2009. - Vol. 41. - P. 703 - 707.

114. Grant, S.F. Genome-wide association studies in type 1 diabetes / S.F. Grant, H. Hakonarson // Curr. Diab. Rep. 2009. - Vol. 9, №2. - P. 157-63.

115. Hammes, H.P. Nerve growth factor prevents both neuroretinal programmed cell death and capillary pathology in experimental diabetes / H.P. Hammes, H.J. Federoff, M. Brownlee //Mol. Med. 1995. - Vol. 1, № 5. - P. 527-534.

116. Haplotypes of the Caspase-1 gene, plasma Caspase-1 levels, and cardiovascular risk / S. Blankenberg, T. Godefroy, O. Poirier et al. // Circ. Res. -2006.-Vol. 99.-P. 102-108.

117. Height growth velocity, islet autoimmunity and type 1 diabetes development: the diabetes autoimmunity study in the young / M.M. Lamb, X. Yin, G.O. Zerbe et al. // Diabetologia. -2009. Vol. 52, № 10. - p. 2064-71.

118. Hitman, G.A. Type 1 (insulin-dependent) diabetes and a highly variable locus close to the insulin gene on chromosome 11/ G.A. Hitman, A.C. Tarn, R.M. Winter // Diabetologia. 1985. - Vol. 28. - P. 218-222.

119. Holla, L.I. Analysis of the Interleukin-6 Gene Promoter Polymorphisms in Czech Patients with Chronic Periodontitis / L.I. Holla // Journal of Periodontology. 2004. - Vol. 75, №1. - P. 30-36.

120. Hoorens, A. Nicotinamide protects human beta cells against chemically-induced necrosis, but not against cytokine-induced apoptosis / A. Hoorens, D. Pipeleers // Diabetologia. 1999. - Vol. 42. - P. 55-59.

121. Identification and gene organization of three novel members of the IL-1 family on human chromosome 2 / S.J. Busfield, C.A. Comrack, G. Yu et al. // Genomics. 2000. - Vol. 66. - P. 213-216.

122. Immunologic and biochemical factors of coincident disease and type 1 diabetes mellitus in children / M. Mysliwiec, A. Balcerska, K. Zorena et al. // Pediatr Res. 2008. - Vol. 64, №6. - P. 677-81.

123. Immunology of IDDM / N. Noorchasm, W. Kwok, A. Rabinovitch, L.C. Harrison // Diabetologia. 1997. - Vol. 40. - P. B50-57.

124. Importance of family history in type 2 black South African diabetic patients / R.T. Erasmus, E. Blanco, A.B. Okesina et al. // Postgrad. Med. J. 2001. - Vol. 77.-P. 323-325.

125. Incidence of childhood type 1 diabetes worldwide / M. Karvonen, M. Viik-Kajander, E. Moltchanova et al. // Diabetes Care. 2000. - Vol. 23. - P. 15161526.

126. Incidence trends for childhood type 1 diabetes in Europe during 1989-2003 and predicted new cases 2005-20: a multicentre prospective registration study / C.C. Patterson, G.G. Dahlquist, E. Gyurus et al. // Lancet. 2009. - Vol. 373. -P. 2027-33.

127. Increased interleukin-12 plasma concentrations in both, insulin-dependent and non-insulin-dependent diabetes mellitus / G. Winkler, O. Dworak, F. Salamon et al. // Diabetologia. 1998. - Vol. 41, № 4. - P. 488.

128. Induction of apoptotic DNA fragmentation and cell death by natural ceramide / L. Ji, G. Zhang, S. Uematsu et al. // FEBS Lett. 1995. - Vol. 358. -P. 211-214.

129. Inflammation and apoptosis genes and the risk of restenosis after percutaneous coronary intervention / P.S. Monraats, F. Vries, L.W. Jong et al. // Pharmacogenet. Genomics. 2006. - Vol. 16, № 10. - P. 747-754.

130. Influence of vitamin D deficiency and itamin D receptor polymorphisms on tuberculosis among Gujarati Asians in West London: a case-control study / R.J. Wilkinson, M. Llewelyn, Z. Toossi et al. II Lancet. 2000. - Vol. 355. - P. 618621.

131. Insulin gene region-encoded susceptibility to type 1 diabetes is not restricted to HLA-DR4-positive individuals / C.S. Bain, J.B. Prins, C.M. Hearme et al. // Nature Genet. 1992. - Vol. 2 - P. 212-215.

132. IL-1 Receptor Deficiency Slows Progression to Diabetesin the NOD Mouse / H.E. Thomas, W. Irawaty, R. Darwiche et al. // Diabetes. 2004. - Vol. 53. - P. 113-121.

133. Interleukin 10 promoter region polymorphisms and susceptibility to advanced alcoholic liver disease / J. Grove, A.K. Daly, M.F. Bassendine et al. // Gut. 2000. - Vol. 46. - P. 540-545.

134. Interleukin 6-174 (G>C) gene polymorphism is related to celiac disease and autoimmune thyroiditis coincidence in diabetes type 1 children / M. Mysliwiec, J. Mysliwska, K. Zorena et al. // Diabetes Res. Clin. Pract. 2008. -Vol. 82, № l.-P. 108-12.

135. Interleukin-10 gene promoter region polymorphisms in patients with type 1 diabetes and autoimmune thyroid disease / A. Ide, E. Kawasaki, H. Abiru et al. // Ann. N.Y. Acad. Sci. -2003. Vol. 1005. - P. 344-347.

136. Interleukin-10 and transforming growth factor-b promoter polymorphisms in allergies and asthma / K. Hobbs, J. Negri, M. Klinnert et al. // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 1998.-Vol. 158.-P. 1958-1962.

137. Interleukin-10 and tumor necrosis factor gene polymorphisms and risk of coronary artery disease and myocardial infarction / W. Koch, A. Kastrati, C. Bottiger et al. // Atherosclerosis. 2001. - Vol. 159. - P. 137-144.

138. Interleukin-10 is associated with resistance to febrile seizures: genetic association and experimental animal studies / Y. Ishizaki, R. Kira, M. Fukuda et al. // Epilepsia. 2009. - Vol. 50, №4. - P. 761-7.

139. Interleukin-10 regulation in normal subjects and patients with asthma / L. Borish, A. Aarons, J. Rumbyrt et al. // J. Allergy Clin. Immunol. 1996. - Vol. 97.-P. 1288-96.

140. IL-10, TGF-B, IL-2, IL-12, and IFN- cytokine gene polymorphisms in asthma / M. Movahedi, S. A. Mahdaviani, N. Rezaei et al. // Journal of Asthma. -2008. Vol.45, №9. - P. 790-794.

141. Interleukin-4 but not interleukin-10 protects against spontaneous and recurrent type 1 diabetes by activated CD ld-restricted invariant natural killer T-cells / Q.S. Mi, D. Ly, P. Zucker et al. // Diabetes. 2004. - Vol. 53, № 5. - P. 1303-10.

142. Interleukin-6 gene polymorphisms and susceptibility to myocardial infarction: the ECTIM study / J. Georges, V. Loukaci, O. Poirier et al. // J. Mol. Med. 2001Vol. 79. - P. 300-305.

143. Interleukin-12 p40 genotype plays a role in the susceptibility to multiple sclerosis / T. Van Veen, J.B.A. Crusius, H.M. Schrijver et al. // Ann. Neurol. -2001. Vol. 50. - P. 275-276.

144. Is puberty an accelerator of type 1 diabetes in IL6-174CC females? / K.M. Gillespie, R . Nolsoe, V.M. Betin et al. // Diabetes. 2005. - Vol. 54, №4. - P. 1245-8.

145. Jahromia, M.M. Cellular and molecular pathogenesis of type 1A diabetes / M.M. Jahromia, G.S. Eisenbarth // Cell. Mol. Life Sci. 2007. - Vol. 64. - P. 865872.

146. Kukreja, A. Autoimmunity and diabetes / A. Kukreja, N.K. Maclaren // J. Clin. Endocrinol. Metab. 1999. - Vol. 84, № 12. - P. 4371-78.

147. Lack of association between cytokine gene polymorphisms and silicosis and pulmonary tuberculosis in Chinese iron miners / F. Wu, Y. Qu, Y. Tang et al. // J. Occup. Health. 2008. - Vol. 50. - P. 445-454.

148. Lack of association between tumor necrosis factor receptor superfamily gene polymorphisms and the risk of Alzheimer's disease in a Chinese population / S.L. Ma, N.L.S. Tang, L.C.W. Lam et al. // Hong Kong J. Psychiatry. 2006. -Vol. 16.-P. 128-31.

149. Lack of association of IL-10 promoter gene variants with type 1 diabetes in a French Population / F. Reynier, M.-A. Cazalis, A. Lecoq et al. // Hum. Immunol. 2006. - Vol. 67, № 4, 5. - P. 311-7.

150. Large-scale genetic fine mapping and genotype-phenotype associations implicate polymorphism in the IL2RA region in type 1 diabetes / C.E. Lowe, J.D. Cooper, T. Brusko et al.J // Nat Genet. 2007. - Vol. 39, №9. - P. 1074-82.

151. Lee, K.-U. Evidence for initial involvement of macrophage in development of insulitis in NOD mice / K.-U. Lee, K. Amano, H.-H. Yoon // Diabetes. 1988. -Vol. 37.-P. 989-991.

152. Linkage disequilibrium of a type 1 diabetes susceptibility locus with a regulatory IL12B allele / G. Morahan, D. Huang, S.I. Ymer et al. // Nat. Genet. -2001.-Vol. 27.-P. 131-132.

153. Linkage of type 1 diabetes to 15q26 (IDDM3) in the Danish population / M. Zamani, F. Pociot, P. Raeymaekers et al. // Human Genetics. 1996. - Vol. 98, №4.-P. 491-496.

154. Localization of a type 1 diabetes locus in the IL2RA/CD25 region by use of tag single-nucleotide polymorphisms / A. Vella, J.D. Cooper, C.E. Lowe et al. // Am. J. Hum. Genet. 2005. - Vol. 76, № 5. - P. 773-9.

155. Lucotte, G. Fokl polymorphism at the human vitamin D receptor gene locus in Europeans and Africans / G. Lucotte, G. Mercier, A. Burckel // Clin. Genet. -1999. Vol. 55. - P. 281-282.

156. Lymphotoxin beta receptor-dependent control of lipid homeostasis. / J. C. Lo, Y. Wang, A. V. Tumanov et al. // Science. 2007. - Vol. 316. - P. 285-288.

157. Mandrup-Poulsen, T. Apoptotic signal transduction pathways in diabetes / T. Mandrup-Poulsen // Biochem. Pharmacol. 2003. - Vol. 66, № 8. - P. 1433-40.

158. Mandrup-Poulsen, T. Beta cell death and protection / T. Mandrup-Poulsen // Ann. N.Y. Acad. Sci. 2003. - Vol. 1005. - P. 32-42.

159. Mandrup-Poulsen, T. The role of interleukin-1 in the pathogenesis of IDDM / T. Mandrup-Poulsen // Diabetologia. 1996. - Vol. 39, № 9. - P. 100529.

160. Mediators of inflammation in children with type I diabetes mellitus: cytokines in type I diabetic children / A.B. Erbagci, M. Tarakcioglu, Y. Coskun et al. // Clin. Biochem. 2001. - Vol. 34, № 8. - P. 645-650.

161. Mironczuk, K. Intracellular adhesion molecule-1 gene polymorphisms in type 1 diabetes / K. Mironczuk, A. Kretowski, I. Kinalska // Diabetologia. 2004. -Vol. 47.-P. A 133.

162. Monocytic expression behavior of cytokines in diabetic patients upon inflammatory stimulation / A. Giulietti, K. Stoffels, B. Decallonne et al. // Ann. N. Y. Acad. Sci. 2004. - Vol. 1037. - P. 74-78.

163. Mosser, D.M. Interleukin-10: new perspectives on an old cytokine / D.M. Mosser, X. Zhang // Immunol. Rev. 2008. - Vol. 226. - P. 205-218.

164. Mutational screening of the human CBLB gene in individuals with several autoimmune diseases and evaluation of association to type 1 diabetes / R. Bergholdt, C. Taxvig, J. Nerup et al. // Diabetologia. 2004. - Vol. 47. - P. A 132.

165. Nanclares, G.P. No association of IDDM5, IDDM8 nor IDDM15 loci in Basque families with type 1 diabetes / G.P. de Nanclares, J.R. Bilbao, L. Castano // Diabetologia. 2000. - Vol. 43. - P. A 78.

166. Nejentsev, S. Intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) K469E polymorphism: no association with type 1 diabetes among Finns / S. Nejentsev // Tissue Antigens. 2000. - Vol. 55, № 6. - P. 568-70.

167. New polymorphisms in the interleukin-10 gene relationships to myocardial infarction / C. Donger, J-L. Georges, V. Nicaud et al. // European Journal of Clinical Investigation. - 2001. - Vol. 31. - P. 9-14.

168. Nishant, J. Tumor necrosis factor-a-induced caspase-1 gene expression: role of p73 / J. Nishant, Ch. Sudhakar, G. Swarup // FEBS Journal. 2007. - Vol. 274, № 17.-P. 4396-407.

169. Nitric oxide contributes to cytokine-induced apoptosis in pancreatic beta cells via potentiation of JNK activity and inhibition of Akt / I. Storling, J. Binzer, A.K. Andersson et al. // Diabetologia. 2005. - Vol. 48, № 10. - P. 2039-50.

170. No evidence for association between the polymorphism in the 31 untranslated region of interleukin-12B and human susceptibility to tuberculosis / X. Ma, R. Reich, O. Gonzalez et al. // J. Infect Dis. 2003. - Vol. 188, №8. - P. 1116-1118.

171. No Evidence for Linkage of a Novel CA Repeat Polymorphism for Apoptosis Antigen 1 (APO-1 or Fas) with Type I Diabetes in a Caucasian Population / K. Sangthongpitaga, K.R. Moorea, N.M. Lapsysa et al. // Hum. Hered. 1998. - Vol. 48. - P. 343-345.

172. Olomolaiye, O.O. Identification of a novel polymorphism in the human IL-6 promoter region / O.O. Olomolaiye, N.P. Wood, J.L. Bidwell // Immunology. -1997.-Vol. 92.-P. 66.

173. Ortiz, A. Expression of apoptosis-regulatory genes in renal proximal tubular epithelial cells exposed to high ambient glucose and in diabetic kidneys / A. Ortiz, F.N. Ziyadeh, E.G. Neilson // J. Investig. Med. 1997. - Vol. 45. - P. 50-56.

174. Owerbach, D. Multigenic basis for type I diabetes. Association of HRAS1 polymorphism with HLA-DR3, DQw2/DR4, DQw8 / D. Owerbach, C. Gunn, K.H. Gubbay // Diabetes. 1990. - Vol. 39. - P. 1504-509.

175. Participant and parent experiences in the parenteral insulin arm of the diabetes prevention trial for type 1 diabetes / S.B. Johnson, A.E. Baughcum, R. Hood et al. // Diabetes Care. 2007. - Vol. 30, №9. - P. 2193-8.

176. PD-1 gene haplotype is associated with the development of type 1 diabetes mellitus in Japanese children / R. Ni, K. Ihara, K. Miyako et al. // Hum. Genet. —2007.-Vol. 121.-P. 223-232.

177. Pirot, P. Mediators and mechanisms of pancreatic beta-cell death in type 1 diabetes / P. Pirot, A. Cardozo, L.D. Eizirik // Arq. Bras. Endocrinol. Metab.2008.-Vol. 52, №2.-P. 156-165.

178. Polymorphism A36G of the tumor necrosis factor receptor 1 gene is associated with HDL cholesterol, TNFR1 and PAI-1 levels in obese women / A. Mavri, D. Bastelica, S. El Ayachi et al. // Thrombosis and haemostasis. 2007. -Vol. 97, №1.-P. 62-6.

179. Polymorphism discovery and association analyses of the interferon genes in type 1 diabetes / G.A. Morris, C.E. Lowe, J.D. Cooper et al. // BMC Genet. -2006.-Vol. 7.-P. 12.

180. Polymorphisms in the tumor necrosis factor- a gene promoter may predispose to severe silicosis in black South African miners / E.L. Corbett, N. Mozzato-Chamay, A.E. Butterworth et al. // Am. J. Respir. Crit. Care Med. -2002. Vol. 165. - P. 690-693.

181. Polymorphisms of interferon-y gene CA-Repeat and interleukin-10 promoter region (-592A/C) in Japanese type I diabetes / H. Tegoshi, G. Hasegawa, H. Obayashi et al. // Hum. Immunol. 2002. - Vol. 63, № 2. - P. 121-128.

182. Polymorphisms of the tumor necrosis factor receptors: no association with narcolepsy in German patients / S. Wieczorek, N. Dahmen, P. Jagiello et al. // J. Mol. Med. 2003. - Vol. 81. - P. 87-90.

183. Polymorphisms within the tumor necrosis factor locus and prevalence of coronary artery disease in middle-aged men / T. Keso, M. Perola, P. Laippala et al. // Atherosclerosis. 2001. - Vol. 154. - P. 691-697.

184. Porta, M. Screening for diabetic retinopathy in Europe / M. Porta, E.M. Kohner // Diabetic Medicine. 1991. - Vol. 8.- P. 197-198.

185. Predictive value of cytokine gene polymorphisms for the development of end-stage renal disease / N. Babel, L. Gabdrakhmanova, M.H. Hammer et al. // J. Nephrol. 2006. - Vol. 19. - P. 802-807.

186. Prevention of islet allograft rejection with engineered myoblasts expressing FasL in mice / H.T. Lau, M. Yu, A. Fontana, C.J. Stoeckert // Science. 1996. -Vol. 5.-P. 109-112.

187. Procardis consortium. A trio family study showing association of the lymphotoxin-alpha N26 (804A) allele with coronary artery disease // Eur. J. Hum. Genet. 2004. - Vol. 12. - P. 770-774.

188. Protection from type 1 diabetes by vitamin D receptor haplotypes / E. Ramos-Lopez, T. Jansen, V. Ivaskevicius et al. // Ann. N. Y. Acad. Sci. 2006. -Vol. 1079.-P. 327-34.

189. Psoriasis is not associated with IL-12p70/IL 12p40 production and IL12B promoter polymorphism / N.H.R Litjens, M. J.A. van der Plas, B. Ravensbergen et al. // J. of Investigative Dermatology. 2004. - Vol. 122. - P. 923-926.

190. Rabinovitch, A. Immunoregulation by cytokines in autoimmune diabetes / A. Rabinovitch // Adv. Exp. Med. Biol. 2003. - Vol. 520. - P. 159-193.

191. Ramos, E. Single nucleotide polymorphisms in the gene CYP24 are associated with type 1 diabetes mellitus in Germans / E. Ramos // Diabetologia. -2004.-Vol. 47.-P. A 132.

192. Redondo, MJ. Genetic control of autoimmunity in type 1 diabetes and associated disorders / MJ. Redondo, G.S. Eisenbarth // Diabetologia. 2002. -Vol. 45.-P. 605-622.

193. Regulation of apoptosis in the immune system / P.H. Krammer, I. Behrmann, P. Daniel et al. // Curr. Opin. Immunol. 1994. - Vol. 6. - P. 279289.

194. Regulation of IL-10 release from peripherial blood cells by epinephrine in disturbed in DM type 1 / A. Geissler, M.L. Schneider, B. Bochow, I. Koop // Diabetologia. 1999. - Vol. 42, № 1. - P. A 101.

195. Regulatory effects of micronutrient complex on the expression of Thl and Th2 cytokines in diabetic C57BL mice / Y. Chang, S.L. Piao, S. Gao et al. // Wei. Sheng. Yan. Jiu. 2005. - Vol. 34, №1. - P. 64-66.

196. Report on IL-10 gene polymorphism at position -819 for major depression and schizophrenia in Korean population / T. Jun, C. Pae, J. Chae et al. // Psychiatry and Clinical Neurosciences. 2002. - Vol. 56. - P. 177-180.

197. Resistance of T-cells to apoptosis in autoimmune diabetic (NOD) mice is increased early in life and is associated with dysregulated expression of Bcl-x / S.E. Lamhamedi-Cherradi, J.J. Luan, L. Eloy et al. // Diabetologia. 1998. -Vol. 41.-P. 178.

198. Robertson, M. Interleukin 12: basic biology and potential applications in cancer treatment / M. Robertson, J. Ritz // Oncologist. 1996. - Vol. 1. - P. 88-97.

199. Robust associations of four new chromosome regions from genome-wide analyses of type 1 diabetes / J.A. Todd, N.M. Walker, J.D. Cooper et al. // Nature Genet. 2007. - Vol. 39, № 7. - P. 857-864.

200. Roff, P.A. The statistical analysis of mitochondrial DNA polymorphisms chi 2 and the problem of small samples / P.A. Roff, P. Bentzen // lyfol. Biol. Evol. 1989. - Vol. 6. - P. 539-545.

201. Sehgal, P.B. Regulation of IL6 gene expression / P.B. Sehgal // Res. Immunol. 1992. - Vol. 143. - P. 724-734.

202. Seven regions of the genome show evidence of linkage to type 1 diabetes in a consensus analysis of 767 multiplex families / NJ. Cox, B. Wapelhorst, V.A. Morrison et al. // Am. J. Hum. Genet. 2001. - Vol. 69. - P. 820-830.

203. Shared and distinct genetic variants in type 1 diabetes and celiac disease / D.J. Smyth, V. Plagnol, N.M. Walker et al. // N. Engl. J. Med. 2008. - Vol. 359.-P. 2767-77.

204. Short-term exclusive breastfeeding predisposes young children with increased generic risk of type 1 diabetes to progressive beta-cell autoimmunity / T. Kimpimaki, M. Erkkola, S. Korhonen et al. // Diabetologia. 2001. - Vol. 44. -P. 63-69.

205. Significant association of the interleukin-6 gene polymorphisms C-174G and A-598G with type 2 diabetes / T. Illig, F. Bongardt, A. Schopfer et al. // J. Clin. Endocrinol. Metab. 2004. - Vol. 89. - P. 5053-5058.

206. Single-nucleotide polymorphisms in tumor necrosis factor receptor genes / S. L. Bridges, G. Jenq, M. Moran et al. // Arthritis & rheumatism. 2002. - Vol. 46, № 8. - P. 2045-2050.

207. Stepwise replication identifies a low-producing lymphotoxin-alpha allele as a major risk factor for early-onset leprosy / A. Alcais, A. Alter, G. Antoni et al. // Nature Genet. 2007. - Vol. 39. - P. 517-522.

208. Sternesjo, J. Effects of interleukin-12 in vitro on pancreatic islets isolated from normal rodents and from non-obese diabetic mice / J. Sternesjo, S. Sandler // J. Endocrinol. 1998. - Vol. 158. - P. 69-75.

209. Strong association of the insulin gene locus (IDDM2) with type 1 diabetes in the Romanian population / L. Guja, C. Guja, C. Ionescu-Tirgovi§te et al. // Diabetologia. 2004. - Vol. 47. - P. A 134.

210. Suppressor of cytokine signalling (SOCS-3) inhibits the beta-cytotoxic IL-1 signalling by targeting the TRAF6/TAK1 complex / H. Frobose, S.G. Ronn, P.E. Heding et al. // Diabetologia. 2005. - Vol. 48, № 1. - P. A 37.

211. Tatsuta, T. The prodomain of caspase-1 enhances Fas-mediated apoptosis through facilitation of Caspase-8 activation / T. Tatsuta, A. Shiraishi, J.D. Mountz // J. Biol. Chemistry. 2000. - Vol. 275, № 19. - P. 14248-254.

212. Th/Th2 cytokine secretion of first degree relatives of T1DM patients / M.J. Rapoport, T. Bistritzer, D. Aharoni et al. // Cytokine. 2005. - Vol. 30, № 5. - P. 219-227.

213. Thland Th2 cell responses of type 1 diabetes patients and healthy controls to human heat-shock protein 60 peptides AA437-460 and AA394-408 / A. Szebeni, N. Schloot, V. Kecskemeti et al. // Inflamm. Res. 2005. - Vol. 54, № 10. - P. 415-419.

214. The candidate genes TAF5L, TCF7, PDCD1, IL6 and ICAM1 cannot be excluded from having effects in type 1 diabetes / J.D. Cooper, D.J. Smyth, R. Bailey et al. // BMC Med. Genet. 2007. - Vol. 8. - P. 71.

215. The CTLA-4 gene region of chromosome 2q33 is linked to, and associated with, type 1 diabetes. Belgian diabetes registry / L. Nistico, R. Buzzetti, L.E. Pritchard et al. // Hum. Mol. Genet. 1996. - Vol. 5. - P. 1075-80.

216. The gene polymorphism of tumor necrosis factor-P, but not that of tumor necrosis factor-a, is associated with the prognosis of sarcoidosis. / E. Yamaguchi, A. Itoh, N. Hizawa et al. // Chest. 2001. - Vol. 119. - P. 753-761.

217. The IL12B gene is associated with asthma / A.G. Randolph, C. Lange, E.K. Silverman et al. // Am. J. Hum. Genet. 2004. - Vol. 75. - P. 709^715.

218. The interleukin-6-174 G/C promoter polymorphism is associated with risk of coronary heart disease and systolic blood pressure in healthy men / S.E. Humphries, L. Luong, M. Ogg et al. // Eur. Heart J. 2001. - Vol. 22. - P. 224352.

219. The involvement of fas-fas ligand pathway in fibrosing lung diseases / K. Kuwano, H. Miyazaki, N. Hagimoto et al. // Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. -1999. Vol. 20, № 1. - P. 53-60.

220. The role of cytokine gene polymorphisms in colorectal cancer and their interaction with aspirin use in the Northeast of Scotland / M. Macarthur, L. Sharp, G. L. Hold et al. // Cancer Epidemiology Biomarkers & Prevention. 2005. -Vol. 14.-P. 1613-1618.

221. The role of enteroviral infections in the development of IDDM / P.M. Graves, J.M. Norris, M.A. Pallansch et al. // Diabetes. 1997. - Vol. 46. - P. 161-168.

222. The role of Fas in autoimmune diabetes / A.V. Chernovsky, Y. Wang, F.S. Wong et al. // Cell. 1997. - Vol. 89. - P. 17-24.

223. The study of CTLA-4 and vitamin D receptor polymorphisms in the Romanian type 1 diabetes population / C. Guja, S. Marshall, K. Welsh et al. // J. Cel. Mol. Med. 2002. - Vol. 6. - P. 75-81.

224. The vitamin D receptor gene start codon polymorphism: a functional analysis of Fokl variants / C. Gross, A.V. Krishnan, P.J. Malloy et al. // J. Bone Miner. Res. 1998. - Vol. 13. - P. 1691-99.

225. Thomasset, M. Vitamin D and the immune system / M. Thomasset // Patol. Biol. 1994. - Vol. 42. - P. 163-172.

226. TNF, TNF receptor type 1, and allograft inflammatory factor-1 gene polymorphisms in Japanese patients with type 1 diabetes / M. Nishimura, H. Obayashi, I. Mizuta et al:. // H. Hum. Immunol. 2003. - Vol. 64. - P.302-309.

227. TNF-a and -|3 gene polymorphisms in multiple sclerosis: a highly significant role for determinants in the first intron of the TNF- P gene / J. A. Fernandes Filho, C. A. Vedeler, K. M. Myhr et al. // Autoimmunity. 2002. -Vol. 35.-P. 377-380.

228. TNFA and TNFB polymorphisms in myasthenia gravis / G. O. Skeie , J. P. Pandey, J. A. Aarli et al. // Arch. Neurol. 1999. - Vol. 56. - P. 457-461.

229. TNF-a RII in relation to type 1 diabetes and latent autoimmune diabetes in adults / C. Torn, M. Hillman, C.B. Sanjeevi, M. Landin-Olsson // Diabetologia. -2003. Vol. 46, № 2. - R. A108.

230. Tumour necrosis factor family genes in a phenotype of COPD associated with emphysema /1. Ferrarotti, M. Zorzetto, M. Beccaria et al. // Eur. Respir. J. -2003.-Vol. 21.-P. 444-449.

231. Type 1 diabetes is associated with increased cyclooxygenase- and cytokine-mediated inflammation / S. Basu, A. Larsson, J. Vessby et al. // Diabetes Care. -Vol. 28(6).-P. 1371-1375.

232. Type 1 diabetes and the control of dexamethazone-induced apoptosis in mice maps to the same region on chromosome 6 / C. Penha-Goncalves, K. Leijon, L. Persson, D. Holmberg // Genomics. 1995. - Vol. 28. - P. 398-404.

233. Type-2 diabetes family history delays the onset of type-1 diabetes / P.A. Zalloua, H. Shbaklo, G. Halaby et al. // The Journal of Clinical Endocrinology and metabolism. 2002. - Vol. 87, №7. - P. 3192-3196.

234. Uitterlinden, A. Genetics and biology of vitamin D receptor polymorphisms / A. Uitterlinden, Y. Fang, J.B. van Meurs // Gene. 2004. - Vol. 338. - P. 143156.

235. Variations of the interleukin-6 promoter are associated with features of the metabolic syndrome in Caucasian danes / Y.H. Hamid, C.S. Rose, S.A. Urhammer et al. // Diabetologia. 2005. - Vol. 48, № 2. - P. 251-260.

236. Vitamin D and 1,25-dihydroxyvitamin D3 as modulators in the immune system / C. Mathieu, E. van Etten, B. Decallonne et al. // J. Steroid Biochem. Mol. Biol. 2004. - Vol. 89-90. - P. 449-452.

237. Vitamin D receptor (VDR) mRNA and VDR protein levels in the relation to vitamin D status, insulin secretory capacity, and VDR genotype in Bangladeshi Asians / B.-W. Ogunkolade, B.J. Boucher, J.M. Prahl et al. // Diabetes. 2002. -Vol. 51.-P. 2294-300.

238. Vitamin D receptor allele combinations influence genetic susceptibility to type 1 diabetes in Germans / M.A. Pañi, M. Knapp, H. Donner et al. // Diabetes. 2000. - Vol. 49. - P. 504-507.

239. Vitamin D receptor polymorphisms as markers in prostate cancer / L. Correa-Cerro, P. Berthon, J. Haussler et al. // Hum. Genet. 1999. - Vol. 105. -P. 281-287.

240. Vitamin D receptor polymorphisms: no association with type 1 diabetes in the Finnish population / H. Turpeinen, R. Hermann, S. Vaara et al. // Eur. J. Endocrinol. 2003. - Vol. 149. - P. 591-596.

241. Vulnerability of islets in the immediate posttransplantation period. Dynamic changes in structure and function / A.M. Davalli, L. Scaglia, D.H. Zangen et al. // Diabetes. 1996. - Vol. 45. - P. 1161-1167.

242. Williams, M.S. Apoptosis cell death induced by intracellular proteolysis / M.S. Williams, P.A. Henkart // J. Immunol. 1994. - Vol. 1997. - P. 137-139.

243. Worldwide increase in incidence of Type I diabetes the analysis of the data on published incidence trends / P. Onkamo, S. Vaananen, M. Karvonen, J. Tuomilehto // Diabetologia. - 1999. - Vol. 42, № 12. - P. 1395-403.

244. X-chromosomal linkage study of Finnish type 1 diabetes mellitus / A.-P. Laine, T. Kokko, T. Kakko et al. // Diabetologia. 2004. - Vol. 47. - P. A 129.

245. Zdanov, A. Structural features of the interleukin-10 family of cytokines / A. Zdanov // Curr. Pharm. Design. 2004. - Vol. 10. - P. 3873-84.

Информация о работе

Балхиярова, Жанна Радиковна
кандидата медицинских наук
Москва, 2009
ВАК 03.00.15

Диссертация

МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ САХАРНОГО ДИАБЕТА ТИПА 1 И ЕГО ОСЛОЖНЕНИЙ - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы