Грибы родов Candida и Saccharomyces в фекальном микробиоценозе пациентов с сахарным диабетом

Герасимова, Елена Владимировна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Грибы родов Candida и Saccharomyces в фекальном микробиоценозе пациентов с сахарным диабетом
ВАК РФ 03.02.03, Микробиология

Автореферат диссертации по теме "Грибы родов Candida и Saccharomyces в фекальном микробиоценозе пациентов с сахарным диабетом"

На правах рукописи

ГЕРАСИМОВА Елена Владимировна

ГРИБЫ РОДОВ CANDIDA И SACCHAROMYCES В ФЕКАЛЬНОМ МИКРОБИОЦЕНОЗЕ ПАЦИЕНТОВ С САХАРНЫМ ДИАБЕТОМ

03.02.03 - микробиология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

2 ИЮН 2011

Москва-2011

4848687

Работа выполнена в ГОУ ВПО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Министерства здравоохранения и социального развития России

Научный руководитель:

Доктор медицинских наук,

профессор Юрий Владимирович Несвижский

Официальные оппоненты:

Доктор медицинских наук,

профессор Людмила Ивановна Кафарская

Доктор медицинских наук,

профессор Леонид Абрамович Ряпис

Ведущая организация: ФГУН Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени Г.Н. Габричевского Роспотребнадзора

Защита состоится « » 2011 года, в_часов на

заседании диссертационного совета Д 208.040.08 при ГОУ ВПО Первый МГМУ имени И.М. Сеченова Минздравсоцразвития России по адресу: 119991, Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2.

С диссертацией можно ознакомиться в ГЦНМБ ГОУ ВПО Первый МГМУ имени И.М. Сеченова Минздравсоцразвития России по адресу: 117998, Москва, Нахимовский проспект, д. 49.

Автореферат разослан «/5» о^-аЯ-У 2011 г.

Ученый секретарь

Диссертационного Совета Д 208.040.08

доктор медицинских наук, профессор Миронов Андрей Юрьевич

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность темы

В последние годы внимание медицинского сообщества привлекают оппортунистические микозы, самыми частыми из которых являются кандидозы. Это вызвано все более широким распространением иммунодефицитных, онкологических и обменных заболеваний, развитие и прогрессировала которых ассоциировано с кандидозами (Garber G., 2001; Соколова Г.А., 2001; Овсянникова JI.B., 2002; Кулько А.Б. 2007; Pcrlroth J., Choi В. at al., 2007, Маланичева Т.Г., 2009). Самым значимым из обменных заболеваний в настоящее время является сахарный диабет, заболеваемость которым неуклонно растет (Балаболкин М.И., 2000, Дедов И.И., Мельниченко Г.А., 2008, Анциферов Н.Б., 2010). Совершенствование сахароснижающей терапии привело не только к увеличению продолжительности жизни пациентов, но и к повышению частоты развития осложнений сахарного диабета, ассоциированных с кандидозной инфекцией (Бажукова Т.А., 1996; Сергеев АЛО., 2001; Garber G., 2001; Richardson М, Las-Florl С., 2008; Groll А.Н., 2009). Кандидоз способствует декомпенсации сахарного диабета, усилению глюкозотоксичности и потенцированию ее негативного влияния на факторы иммунологической резистентности, что утяжеляет течение инфекции (Соколова Г.А., 2001; Новиков Д.К., Новиков П.Д., 2009).

Поскольку основным источником грибов рода Candida в организме человека является желудочно-кишечный тракт (Сергеев А.Ю., 2001; Шупелькова Ю.О., 2002; Хавкин А.И., 2006), степень колонизации этими грибами считается показателем уровня персистенции Candida spp. (Ван-дер Ваай Д, 1992; Сергеев А.Ю, Сергеев Ю.В., 2001). Учитывая, что большинством авторов признается прямая зависимость степени колонизации дрожжеподобными грибами от гипергликемии, присутствие этих микроорганизмов в фекальном микробиоценозе представляется основным фактором риска развития оппортунистической инфекции (Бажукова Т.А., 1996; Соколова Г.А., 2001; Федотов В.П., 2004; Маланичева Т.Г., 2009).

Что касается других дрожжевых грибов, то грибы рода Saccharomyces, обладающие сходными с Candida spp. метаболическими и популяционными характеристиками, традиционно не рассматривают как условно-патогенный микроб (Шендеров Б.А., 2001, Saegusa S. et al., 2007; Ashorn S et al., 2008). Тем не менее, существуют данные о присутствии этого микроба на коже и слизистых пациентов с сахарным диабетом (Liu Н., 2002; Mlinaric-Missoni Е. et al., 2005). Также была отмечена положительная связь наличия грибов рода Saccharomyces с гипергликемией (Liu Н., 2002).

Таким образом, кандидоз у пациентов с сахарным диабетом является актуальной проблемой. Совершенно очевидно, что присутствие грибов родов Candida и Saccharomyces в фекальном микробиоценозе связано с течением этого заболевания, однако остается спорной зависимость персистирования этих грибов от клинико-лабораторных характеристик сахарного диабета. Вышесказанное определило цель работы.

Цель исследования Изучение особенностей персистирования грибов родов Candida и Saccharomyces в фекальном микробиоценозе пациентов с различными клинико-лабораторными проявлениями сахарного диабета.

Задачи исследования

1. Изучить частоту встречаемости грибов родов Candida и Saccharomyces в фекальном микробиоценозе пациентов с сахарным диабетом и здоровых лиц.

2. Изучить видовой состав грибов рода Candida и рода Saccharomyces в фекальном микробиоценозе пациентов с сахарным диабетом и здоровых лиц.

3. Изучить зависимость частоты встречаемости Candida spp. и Saccharomyces spp. от пола, возраста обследуемых и клинико-лабораторных характеристик сахарного диабета.

4. Изучить временные характеристики персистирования грибов рода Candida и рода Saccharomyces spp. в фекальном микробиоценозе пациентов с сахарным диабетом и здоровых лиц.

5. Изучить влияние пола, возраста обследуемых и клинико-лабораторных характеристик сахарного диабета на временные особенности персистирования Candida spp. и Saccharomyces spp. в фекальном микробиоценозе пациентов с сахарным диабетом и здоровых лиц.

Научная новизна

1. Впервые обнаружена более высокая частота встречаемости Saccharomyces spp. в фекальном микробиоценозе пациентов с сахарным диабетом по сравнению с лицами без нарушения углеводного обмена.

2. Впервые установлена связь частоты встречаемости Saccharomyces spp. с клинико-лабораторными характеристиками сахарного диабета: тяжестью и развитием поздних осложнений.

3. Впервые выявлена неоднородность популяции грибов родов Candida и Saccharomyces по временной характеристике персистирования в фекальном микробиоценозе при сахарном диабете и у здоровых лиц.

4. Впервые определена диагностическая и прогностическая значимость грибов родов Candida и Saccharomyces с различными временными характеристиками персистирования в фекальном микробиоценозе при сахарном диабете.

Практическая значимость работы Выявленная неоднородность популяции грибов рода Candida по временной характеристике персистирования в фекальном микробиоценозе позволяет прогнозировать появление Candida spp. при сахарном диабете, что может использоваться для профилактики кандидоза при данном заболевании.

Высокая индикативность грибов рода Saccharomyces при сахарном диабете и при развитии поздних осложнений сахарного диабета может быть использована для прогноза тяжести течения заболевания и профилактики поздних осложнений.

Положения, выносимые на защиту

1. Частота встречаемости и удельная концентрация грибов рода Candida не зависит от наличия сахарного диабета, тем не менее, при сахарном диабете резко возрастает высеваемость видов, не принадлежащих к С. albicans.

2. Частота встречаемости и удельная концентрация грибов рода Saccharomyces зависит от пола, возраста пациентов и клинико-лабораторных особенностей течения сахарного диабета.

3. В фекальном микробиоценозе пациентов с сахарным диабетом и здоровых лиц грибы рода Candida и рода Saccharomyces высеваются преимущественно независимо друг от друга.

4. Популяции грибов рода Candida и Saccharomyces пациентов с сахарным диабетом и здоровых лиц имеют различные варианты временного персистирования в фекальном микробиоценозе, которые зависят от пола и возраста пациентов и клинико-лабораторных особенностей течения сахарного диабета.

Внедрение результатов в практике

На основе полученных данных разработана и запатентована основа для выделения и культивирования микроорганизмов (Патент на изобретение №RU 2279469, 2006 г.).

Полученные результаты позволили прогнозировать дестабилизацию микробиоценоза организма млекопитающего, что было реализовано в виде патента (патент на изобретение №(19) RU(11) 2 377 311 (13) С2,2009 г.).

Апробация работы

Результаты работы доложены и обсуждены на V Всероссийском конгрессе эндокринологов (Москва, 2006 г.); XIV Российском национальном конгрессе "Человек и лекарство" (Москва, 2007); Всероссийском научно-практическом обществе эпидемиологов, микробиологов и паразитологов (Москва, 2007 г.); Итоговой научной конференции с международным участием «Татьянин день» посвященной 250-летию ММА им. И.М.Сеченова (Москва, 2009); I Ежегодном Всероссийском Конгрессе по инфекционным болезням (Москва, 2009); III Ежегодном Всероссийском Конгрессе по инфекционным болезням (Москва, 2011); XVIII Российском Национальном конгрессе «Человек и лекарство» Москва, 2011.

Работа апробирована на научной конференции кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии медико-профилактического факультета ГОУ

ВПО Первый МГМУ имени И.М. Сеченова Минздравсоцразвития России 22.04.11. (протокол №8).

Личный вклад автора

Автору принадлежит ведущая роль в выборе направления исследования, анализе и обобщении полученных результатов. В работах, выполненных в соавторстве, автором лично проведено моделирование процессов, мониторинг основных параметров, аналитическая и статистическая обработка, научное обоснование и обобщение полученных результатов. Вклад автора является определяющим и заключается в непосредственном участии на всех этапах исследования: от постановки задач, их экспериментально-теоретической и клинико-микробиологической реализации до обсуждения результатов в научных публикациях и докладах и их вЕ1едрения в практику.

Публикации

По теме диссертации опубликовано 16 работ, в числе которых: два патента на изобретения, четыре публикации в журналах, рекомендуемых ВАК.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 120 страницах машинописного текста, включает 39 таблиц. Библиография содержит 95 отечественных и 123 зарубежных источника литературы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов собственных исследований (3 главы), заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы.

СОДЕРЖАНИЕ ДИССЕРТАЦИИ Материалы и методы В соответствии с поставленными целью и задачами было проведено исследование фекалий, полученных от 64 пациентов с сахарным диабетом и 54 здоровых лиц. Все пациенты с сахарным диабетом находились на амбулаторном приеме поликлиники №1 МУЗ Павлово-Посадской ЦРБ с 01.09.2006 по 01.12.2006.

Для исследования были отобраны лица от 18 до 75 лет; без клинических признаков кандидоза любой локализации, в течение 6 месяцев до обследования не получавшие антимикотические препараты, в течение 1 месяца не принимавшие антибактериальные препараты или эу- и пробиотики; лица без острых инфекционных заболеваний в течение месяца до обследования; без нарушений эвакуаторной функции кишечника (запоров более 1 суток, диареи); лица без сопутствующей патологии из группы риска развития кандидозов (патологии щитовидной железы, надпочечников, околощитовидных желез, гинекологических заболеваний, воспалительных заболеваний толстой кишки, аутоиммунных процессов, онкологических заболеваний, иммунодефицитов).

Из 64 пациентов с сахарным диабетом 22 (34,37%) были моложе 50 лет, 42 (65,63%) - старше; 20 мужчин (31,25%), 44 женщины (68,75%). 16 пациентов (25,0%) имели отягощенный по кандидозу анамнез. 14 (21,9%) страдали сахарным диабетом типа 1, 50 (78,1%) - типа 2; у 29 (45,3%) пациентов длительность заболевания не превышала 5 лет, у 35 (54,7%) составила более 5 лет. 26 (40,6%) пациентов имели удовлетворительную компенсацию углеводного обмена, 38 (59,4%) - неудовлетворительную; 31 пациент (48,4%) получал интенсифицированную инсулинотерапию, 33 пациента (51,6%) принимали пероральные сахароснижающие препараты. Поздние осложнения сахарного диабета были обнаружены у 29 пациентов с СД (45,3%).

В группу здоровых лиц вошли индивидуумы без нарушения углеводного обмена: 44 женщины (84,5%), 10 мужчин (15,5%); 38 человек до 50 лет (70,4%), 16 - старше (29,6%), 25 человек с отягощенным по кандидозу анамнезом (46,3 %), 29-е неотягощенным (53,7%).

Материалом исследования служили фекалии, которые забирали сразу же после дефекации, помещали в стерильные флаконы и заливали стерильным вазелиновым маслом слоем 1 см для предотвращения оксигенации при транспортировке. Не позднее, чем через 2 часа после забора материала в стерильных колбах готовили взвесь фекалий, для чего нативный образец суспендировали в 100-кратном объеме жидкой питательной срсды

(Сабуро). 10 мл полученной взвеси заливали стерильным вазелиновым маслом слоем 1 см и культивировали при температуре 37°С в течение суток.

Микробиологическое исследование фекалий проводили на первые (не позднее 2 часов после забора материала) и вторые (через 24 часа культивирования взвеси) сутки. Выделение микроорганизмов из исследуемого материала проводили по стандартной методике (Митрохин С.Д. и др., 1997 г.). Определяли высевасмость (%) и удельную концентрацию (Ig КОЕ/г) грибов рода Candida, а также грибов рода Saccharomyces.

Дифференцировали культуры грибов, высевавшиеся только на первые сутки исследования, только на вторые сутки, а также и на первые и на вторые сутки исследования. Культуры, имевшие фиксированный срок персистснции в системе фекального микробиоценоза были определена как «хронотипы». Так, культуры грибов, имевшие короткий срок персистенции в системе (высевались либо на первые, либо на вторые сутки) были определены как «короткоживущие хронотипы», а имевшие длительный срок персистенции (высевались и на первые, и на вторые сутки) - как «долгоживущие хронотипы». Исследовали частоту встречаемости и удельную концентрацию «хронотипов» по описанной методике.

Статистическую обработку полученных данных проводили с использованием вариационного, сравнительного, дисперсионного и корреляционного методов анализа (Урбах В.Ю., 1976; Стентон Гланц, 1999).

Результаты и обсуждение

Было выявлено, что высеваемость грибов рода Candida в фекальном микробиоценозе как среди пациентов с сахарным диабетом, так и среди здоровых лиц была достаточно высока: 54,7% и 44,4% случаев соответственно, что подтверждало данные отечественных и зарубежных авторов (Глушак C.B., 1994 г.; Сергеев А.Ю, 2001; Соколова Г.А, 2001; Belazi M. at al., 2005). При этом не было выявлено статистически значимых отличий по частоте встречаемости Candida spp. при сахарном диабете по сравнению с контрольной группой, что противоречило мнению большинства авторов

(Бажукова Т.А., 1996; Сергеев А.Ю., 2001; Garber G., 2001; Richardson M, Las-Flori С., 2008; Groll A.H., 2009).

Грибы рода Saccharomyces высевались при сахарном диабете в 42,2%, что в 2,2 раза превышало (р<0,05) частоту встречаемости в контрольной группе (19,4%).

Грибы родов Candida и Saccharomyces в пределах одного фекального микробиоценоза высевались главным образом независимо друг от друга (42,2% и 29,7% соответственно при сахарном диабете и 36,1% и 11,1% соответственно - в контрольной группе), реже образовывали ассоциацию, частота которой статистически не различалась в обследуемых группах: 12,5% при сахарном диабете и 8,3% у здоровых лиц (рис. 1).

Ш ассоциации

В независимые

Saccharomyces spp. ■ независимые Candida spp.__

□ без грибов

Рис. 1. Популяционная архитектура грибов рода Candida и рода Saccharomyces в фекальном микробиоценозе пациентов с сахарным диабетом (1) и здоровых лиц (2). * - р<0,05, ** - р<0,01

Анализ популяционного спектра исследуемых грибов выявил существенные различия (р<0,01) при сахарном диабете и в контрольной группе. Так, суммарная частота встречаемости исследуемых грибов у пациентов с сахарным диабетом (84,4%) была в 1,5 раза выше (р<0,01) по

сравнению с контрольной группой (55,56%). При этом увеличение высеваемости дрожжевых грибов при сахарном диабете происходило преимущественно за счет Saccharomyces spp. (р<0,05), в частности, за счет субпопуляции, высевавшейся независимо от Candida spp. (р<0,05).

Удельная концентрация грибов рода Candida не имела существенных различий в исследуемых группах и составляла 4,08±0,10 Ig КОЕ/г у пациентов с сахарным диабетом и 4,24±0,24 lg КОЕ/г в контрольной группе. Удельная концентрация совокупных Saccharomices spp. в фекальном микробиоценозе пациентов с сахарным диабетом составляла 5,41±0,21 IgKOE/r и была в 1,19 раза выше (р<0,05), чем у здоровых лиц (4,54±0,20 lgKOE/r).

Что касается видового состава, то всего в ходе эксперимента было выделено 72 культуры грибов рода Candida: 42 от пациентов с сахарным диабетом и 30 от здоровых лиц. Исследование видового состава популяций грибов рода Candida в фекальном микробиоценозе пациентов с сахарным диабетом и в контрольной группе показало, что в большинстве случаев выделялся вид С. albicans - 72,1% и 93,3% соответственно. Другие виды встречались значительно реже: С. krusei (25,8% и 3,6% соответственно) C.parapsylosis (9,7% и 3,6% соответственно), С. glabrata (3,2% и 0,0% соответственно). Было отмечено, что колонизация фекального микробиоценоза другими видами Canida возрастала в 4,2 раза при сахарном диабете по сравнению со здоровыми лицами (р<0,05), что отличалось от данных некоторых авторов (Соколова Г.А, 2001). Выявленный феномен позволяет предположить наличие при сахарном диабете факторов настолько благоприятных для персистенции грибов рода Candida, что виды, менее приспособленные к макроорганизму, чем С. albicans, чаще заселяют фекальный микробиотоп. Видовой состав Candida spp. не зависел от присутствия в системе Saccharomyces spp. Удельная концентрация разных видов Candida spp. также существенно не различалась в обследуемых группах.

Грибов рода Saccharomyces было выделено 42 культуры: 27 от пациентов с сахарным диабетом и 15 от здоровых лиц. Все выделенные культуры принадлежали к одному виду - S. cerevisiae.

Были изучены особенности взаимодействия Candida spp. и Saccharomyces spp. с другими представителями микрофлоры фекального микробиоценоза у пациентов с сахарным диабетом и в контрольной группе. В качестве представителей облигатной микрофлоры рассматривались Bifidobacterium spp., Lactobacterium spp., Enterococcus spp., E. coli. В качестве представителя транзиторной микрофлоры рассматривались Staphylococcus spp..

Существенных различий по частоте встречаемости исследуемых представителей фекальной нормофлоры и Staphylococcus spp. при сахарном диабете и в контрольной группе выявлено не было. Так, при сахарном диабете частота встречаемости Bifidobacterium spp., Lactobacterium spp., Enterococcus spp., E. coli составляла 100,00%, Staphylococcus spp. - 45,00%. У здоровых лиц частота встречаемости Bifidobacterium spp. составляла 96,00%, что не различалось статистически с показателем в группе сахарного диабета. Lactobacterium spp., Enterococcus spp., E. coli у здоровых лиц выявлялись с частотой 100,00%, Staphylococcus spp. - 35,00%.

Что касается количественных характеристик, то при сахарном диабете отмечалось существенное повышение удельной концентрации Bifidobacterium spp. (р<0,05) - 8,68±0,23 lg КОЕ/г, по сравнению с контрольной группой (7,66±0,37 lg КОЕ/г). Удельная концентрация Lactobacterium spp. (7,72±0,251g КОЕ/г при сахарном диабете, 7,81+0,18 lg КОЕ/г у здоровых лиц), Enterococcus spp. (6,84±0,26 lg КОЕ/г и 7,13±0,19 lg КОЕ/г соответственно), E.coli (7,32±0,22 lg КОЕ/г и 7,68±0,16 lg КОЕ/г соответственно), а также Staphylococcus spp. (4,51+0,3llgKOE/r и 3,92+0,18 lgKOE/r) статистически не различались при сахарном диабете и в контрольной группе.

Анализ корреляционных взаимодействий представителей фекального микробиоценоза не выявил значимых связей между Candida spp. и

Saccharomyces spp., а также между исследуемыми грибами и другими представителями фекального микробиоценоза.

Частота встречаемости Candida spp. при сахарном диабете не зависели от пола (56,82% у женщин, 50,00% у мужчин), возраста пациентов (59,09% у лиц моложе 50 лет, 52,38% - старше), отягощенного по кандидозу анамнеза (73,33% при отягощенном анамнезе, 48,98% - при неотягощениом), типа сахарного диабета (64,29% при 1 типе и 52,08% - при 2 типе), длительности заболевания (62,07% при длительности менее 5 лет, 48,57% - более), степени компенсации (46,15% при удовлетворительной компенсации, 60,53% - при неудовлетворительной), типа сахароснижающей терапии (48,39% при инсулинотерагши, 57,58% - при терапии пероральными сахароснижающими препаратами) и наличия поздних осложнений сахарного диабета (44,83% у пациентов с осложнениями, 62,86% - без осложнений). При этом у здоровых лиц было отмечено увеличение в 1,8 раза (р<0,05) частоты встречаемости Candida spp. при отягощенном по кандидозу анамнезе (68,00%) по сравнению с неотягощенным (37,93%). Удельная концентрация грибов рода Candida в фекальном микробиоценозе пациентов с сахарным диабетом и здоровых лиц не имела статистически значимых различий в обследуемых группах.

Что касается грибов рода Saccharomyces (рис. 2), то частота их встречаемости при сахарном диабете по сравнению с контрольной группой была в 5 раз выше (р<0,05) у пациентов старше 50 лет (50,0%); в 2,6 раза выше(р<0,05) у пациентов с неотягощенным по кандидозу анамнезом (44,90%); в 2,3 раза выше (р<0,05) у лиц с сахарным диабетом типа 2 (43,75%), в 2,8 раза выше (р<0,05) при длительности сахарного диабета более 5 лет (54,28%); в 2,4 раза выше (р<0,05) при удовлетворительной компенсацией углеводного обмена (46,15%); в 2,8 раза выше (р<0,01) у пациентов с поздними осложнениями сахарного диабета (55,17%).

60,00% 50,00% 40,00% 30,00% 20,00% 10,00% 0,00%

исд

Е!ЗЛ

Рис. 2. Клинико-лабораторные ассоциации частоты встречаемости Saccharomyces spp. при сахарном диабете. СД - сахарный диабет, ЗЛ -здоровые лица. 1 - лица в возрасте более 50 лет, 2 - лица с неотягощенным по кандидозу анамнезом, 3 - сахарный диабет типа 2, 4 - длительность сахарного диабета более 5 лет, 5 - удовлетворительная компенсация сахарного диабета, 6 - пациенты с поздними осложнениями сахарного диабета.

Удельная концентрация Saccharomyces spp. существенно (р<0,05) повышалась у женщин с сахарным диабетом (5,50±0,23 lgKOE/r) по сравнению со здоровыми женщинами (4,54±0,20 lg КОЕ/г).

Исследование частоты встречаемости грибов рода Candida и рода Saccharomyces на разных сроках культивирования выявило временную неоднородность персистирования этих грибов в фекальном микробиоценозе. Культуры исследуемых грибов, обладавшие сходными сроками персистирования в конкретном фекальном микробиоценозе, были условно названы «хронотипами». Для культур, высевавшихся только на первые или только на вторые сутки было введено условное понятие «короткоживущий хронотип», для культур, высевавшихся и на первые и на вторые сутки -«долгоживущий хронотип». Было отмечено, что при сахарном диабете

существенно менялся характер персистирования исследуемых грибов в фскалы-юм микробиоценозе на разных сроках культивирования (рис. 3).

Так, «долгоживущие хронотипы» грибов рода Candida в группе пациентов с сахарным диабетом встречались в 40,62% случаев, у здоровых лиц - в 25,00%; «короткоживущие» - в 14,06 и 19,44% случаев соответственно. При этом «долгоживущие хронотипы» Candida spp. высевались в 2,9 раза чаще «короткоживущих» (р<0,01) при сахарном диабете, в отличие от контрольной группы.

Рис. 3. Частота встречаемости «хронотииов» Candida spp. и Saccharomyces spp. в фекальном микробиозенозе пациентов с сахарным диабетом и здоровых лиц. «КХТ» - «короткоживущие хронотипы», «ДХТ» -«долгоживущие хронотипы»; 1 - Candida spp. при сахарном диабете, 2 -Candida spp. в контрольной группе, 3 - Saccharomyces spp. при сахарном диабете, 4 - Saccharomyces spp. в контрольной группе.

Для Saccharomyces spp. при сахарном диабете было отмечено увеличение частоты встречаемости «долгоживущих хронотипов» в 3 раза (25,00%, р<0,05) по сравнению с контрольной группой (8,33%), при этом соотношение «долгоживущих» и «короткоживущих хронотипов» в популяции Saccharomyces spp. существенно не менялось.

ИСД

■ зл

Частота встречаемости и соотношение «хронотипов» исследуемых грибов зависели от пола, возраста обследуемых и клинико-лабораторных характеристик сахарного диабета.

Для Candida spp. при сахарном диабете по сравнению с контрольной группой (рис. 4) частота встречаемости «долгоживущих хронотипов» была в 2,1 раза (р<0,05) выше у женщин с сахарным диабетом (47,73%); в 2,2 раза выше (р<0,05) у пациентов моложе 50 лет (50,00%); в 2,5 раза выше (р<0,05) у пациентов с отягощенным по кандидозу анамнезом (60,00%); в 2,3 раза выше (р<0,05) у пациентов с сахарным диабетом 1 типа (57,14%); в 1,9 раза выше при неудовлетворительной компенсации углеводного обмена (47,37%).

Рис. 4. Клинико-лабораторные ассоциации частоты встречаемости «долгоживущих хронотипов» Candida spp. в фекальном микробиоценозе пациентов с сахарным диабетом. СД - сахарный диабет, ЗЛ - здоровые лица. 1 - женщины, 2 - лица моложе 50 лет, 3 - лица с отягощенным по кандидозу анамнезом, 4 - сахарный диабет 1 типа, 5 - декомпенсация сахарного диабета.

Частота встречаемости «короткоживущих хронотипов» Candida spp. была выше в 3,2 раза (р<0,05) у здоровых лиц с отягощенным по кандидозу анамнезом (44,00%) по сравнению с неотягощенным (13,79%).

Частота встречаемости «долгоживущих хронотипов» ЗассИаготусез ярр. при сахарном диабете по сравнению с контрольной группой (рис. 5) была в 3,7 раза выше (р<0,05) у пациентов старше 50 лет (33,33%); в 3,5 раза выше (р<0,05) у пациентов с неотягощенным по кандидозу анамнезом (24,49%); в 3,2 раза выше (р<0,05) при сахарном диабете 2 типа (27,08%); в 3,4 раза выше (р<0,05) при длительности сахарного диабета более 5 лет (28,57%); в 4,1 раза выше (р<0,05) при компенсации углеводного обмена (34,61%); в 3,6 раза выше (р<0,05) при терапии пероральными сахароснижающими средствами (30,30%); в 4,1 раза выше (р<0,01) при развитии поздних осложнений сахарного диабета (34,48%).

вСД яЗЛ

Рис. 5. Клинико-лабораторные ассоциации частоты встречаемости «долгоживущих хронотипов» Басскаготусез зрр. в фекальном микробиоценозе пациентов с сахарным диабетом. 1 - лица старше 50 лет, 2 -- лица с неотягощенным по кандидозу анамнезом, 3 - сахарный диабет 2 типа, 4 - длительность заболевания более 5 лет, 5 -компенсация сахарного диабета, 6 - терапия пероральными сахароснижающими средствами, 7 -развитие поздних осложнений сахарного диабета.

Частота встречаемости «короткоживущих хронотипов» Басскаготусез зрр. в фекальном микробиоценозе пациентов с сахарным диабетом по сравнению с контрольной группой была в 3,7 раза выше (р<0,05) при

35,00% 30,00% 25,00% 20,00% 15,00% 10,00% 5,00% 0,00%

длительности заболевания более 5 лет (25,71%), а также в 2,0 раза выше (р<0,05) при инсулинотерапии (22,58%).

Таким образом, в организме человека, как здорового, так и больного, реализуются условия для персистенции транзиторных грибов родов Candida и Saccharomyces, частота встречаемости которых в фекальном микробиоценозе ассоциирована с полом, возрастом и клинико-лабораторными характеристиками сахарного диабета. Так, у лиц с сахарным диабетом, в отличие от здоровых, существенно меняется картина заселенности фекального микробиоценоза дрожжевыми грибами: значимо повышается суммарная частота встречаемости Candida spp. и Saccharomyces spp., изменяется архитектура микробного сообщества за счет увеличения частоты встречаемости Saccharomyces spp., меняется видовой состав популяции Candida spp. за счет повышения частоты встречаемости видов, не относящихся к С. albicans. Для Saccharomyces spp. эти изменения более выражены, а главное, ассоциированы с клинико-лабораторными характеристиками тяжелого течения сахарного диабета, развитием поздних осложнений,

Дифференцированная оценка персистирования Candida spp. и Saccharomyces spp. в фекальном микробиоценозе на разных сроках культивирования позволила предложить подход к повышению эффективности лабораторной диагностики персистенции этих грибов при сахарном диабете. Так, частота встречаемости «долгоживущих хронотипов» Candida spp. четко ассоциирована с отягощенным по кандидозу анамнезом при сахарном диабете, а частота встречаемости «долгоживущих хронотипов» Sccharomyces spp. - с тяжелым течением заболевания и развитием поздних осложнений сахарного диабета.

Обращает внимание повышение частоты встречаемости Saccharomyces spp., особенно «долгоживущих хронотипов» этого микроба, при тяжелом течении сахарного диабета и развитии поздних осложнений, что может свидетельствовать как о патогенетической вовлеченности Saccharomyces spp. в развитие и течение заболевания, так и о выраженных индикаторных свойствах этих грибов при сахарном диабете.

Выводы

1. Грибы родов Candida и Saccharomyces в фекальном микробиоценозс пациентов с сахарным диабетом и здоровых лиц в подавляющем большинстве случаев встречаются независимо друг от друга.

2. Частота встречаемости и удельная концентрация грибов рода Saccharomyces в фекальном микробиоценозе пациентов с сахарным диабетом существенно выше, чем у здоровых лиц.

3. Грибы рода Candida в фекальном микробиоценозе пациентов с сахарным диабетом и здоровых лиц представлены главным образом C.albicans. При этом в фекальном микробиоценозе пациентов с сахарным диабетом по сравнению со здоровыми лицами другие виды Candida встречаются значимо чаще.

4. Высокая частота встречаемости грибов рода Saccharomyces при сахарном диабете ассоциируется с тяжелым течением заболевания и развитием поздних осложнений; высокая удельная концентрация - с женским полом при сахарном диабете.

5. Популяции Candida spp. и Saccharomyces spp. неоднородны по временным характеристикам персистирования в фекальном микробиоценозе и высеваются в форме «долгоживущих» и «короткоживущих хронотипов».

6. Высокая частота встречаемости «долгоживущих хронотипов» Candida spp. в фекальном микробиоценозе пациентов с сахарным диабетом ассоциируется с декомпенсацией углеводного обмена и развитием кандидоза в анамнезе, а «долгоживущих хронотипов» Saccharomyces spp.- с тяжелым течением заболевания и развитием поздних осложнений сахарного диабета.

Список работ, опубликованных по теме диссертации 1. Несвижский Ю.В., Богданова Е.А., Корнсев М. JL, Майорова Е.В. Исследование фекалыю-просветной микрофлоры при экспериментальном моделировании нарушения эвакуаторной функции желудочно-кишечного тракта // Материалы юбилейной научно-практической конференции, посвященной 80-летию образования кафедры инфекционных болезней ММА им. И.М. Сеченова Инфекционные и паразитарные болезни в современном

обществе. Клинико-лабораторное обеспечение инфектологии. - Москва, 2223 мая 2003, с.31-32.

2. Герасимова Е.В., Воробьев A.A., Несвижский Ю.В., Богданова Е.А. Изучение фекального микробиоценоза человека при кспериментальном моделировании запора // Вестник Российской академии медицинских наук.-2006.-1.-с. 15-18.

3. Воробьев A.A., Несвижский Ю.В., Алешкин В.А., Богданова Е.А., Афанасьев С.С., Рубальский О.В., Герасимова Е.В., Воропаева Е.А., Давыдкин И.Ю., Давыдкин В.Ю. Основа для выделения и культивирования микроорганизмов. // Патент на изобретение RU № 2279469 С1. Официальный бюллетень Федеральной службы по интеллектуальной собственности, патентам и товарным знакам Изобретения. Полезные модели. - 2006. -№19. - с. 590-591.

4. Герасимова Е.В., Богданова Е.А., Майорова Н.М., Брюхова М.В., Несвижский Ю.В. Анализ персистенции Candida spp. у пациентов с сахарным диабетом 1 и 2 типов // Материалы V Всероссийского конгресса эндокринологов (Москва, 30 октября - 2 ноября 2006 г.) - с. 94.

5. Герасимова Е.В., Богданова Е.А., Несвижский Ю.В., Совершенствование выявления грибов рода Candida в фекалиях человека. Материалы II Международной (XII Всероссийской) Пироговской научной конференции студентов и молодых ученых (Москва, 15 марта 2007 г.) // Вестник Российского государственного медицинского университета. - 2007. -№2 /55/ (приложение). - с. 17.

6. Богданова Е.А. Несвижский Ю.В., Герасимова Е.В., Зверев В.В. Фазовое состояние и временной фактор в изменчивости фекальной микрофлоры человека // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2007. - N 6. - с. 64—68.

7. Богданова Е.А., Герасимова Е.В., Несвижский Ю.В. Интерпретация данных анализа на дисбактериоз ЖКТ и временной фактор // Материалы IX Всероссийского научно-практического общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов (Москва, 26-27 апреля 2007 г.)-с. 291-292.

8. Несвижский Ю.В., Богданова Е.А., Герасимова Е.В., Алленов М.Н. Выявление персистенции грибов рода Candida в фекалиях пациентов с сахарным диабетом // XIV Российский национальный конгресс "Человек и лекарство", тезисы докладов. - Москва, 16-20 апреля 2007, с. 570.

9. Грачев C.B., Несвижский 10. В., Алешкин В.А., Афанасьев С. С., Рубальский О. В., Богданова Е. А., Воропаева Е. А., Рубальский Е. О., Герасимова Е.В. Способ прогнозирования дестабилизации микробиоценоза организма млекопитающего. // Патент на изобретение (19)RU(11)2377311(13)C2. Официальный бюллетень Федеральной службы по интеллектуальной собственности, патентам и товарным знакам Изобретения. Полезные модели. - 2009. - №36. - с. 1006.

10. Богданова Е.А., Герасимова Е.В. Изменчивость микробного состава фекалий человека // Тезисы итоговой научной конференции с международным участием «Татьянин день» посвященной 250-летию ММА им. И.М.Сеченова, М., 24-25 января 2009. - с. 32-33.

11. Герасимова Е.В., Несвижский Ю.В., Майорова Н.М. Клинико-лабораторная характеристика больных с сахарным диабетом с персистенцией грибов рода Candida // Материалы I Ежегодного Всероссийского Конгресса по инфекционным болезням (Москва, 30 марта - 1 апреля 2009 г.). - с. 48.

12. Герасимова Е.В., Несвижский Ю.В., Майорова Н.М., Богданова Е.А. Клинико-лабораторные ассоциации кандидозной персистенции при сахарном диабете // Вестпик Российской академии медицинских наук. -2010,-№2.-с. 13-16.

13. Герасимова Е.В., Богданова Е.А. Особенности персистенции грибов рода Candida и Saccharomyces в фекальном микробиоценозе пациентов с сахарным диабетом. Материалы V Международной (XIV Всероссийской) Пироговской научной конференции студентов и молодых ученых (Москва, 18 марта 2010 г.) // Вестник Российского государственного медицинского университета. - 2010. - №2 (приложение). - С. 474-475.

14. Герасимова Е.В., Несвижский Ю.В., Майорова Н.М., Богданова Е.А. Ассоциации грибов рода Candida и Saccharomyces spp. в фекальном

микробиоценозе пациентов с сахарным диабетом и здоровых лиц // Вестник Российской академии медицинских наук. -2010.- №12. - с. 30-33.

15. Герасимова Е.В., Несвижский Ю.В., Богданова Е.А. Влияние отягощенного кандидозного анамнеза на длительность персистенции грибов рода Candida у пациентов с сахарным диабетом и здоровых лиц // Материалы III Ежегодного Всероссийского Конгресса по инфекционным болезням (Москва, 28 - 30 марта 2011 г.) - с. 80-81.

16. Герасимова Е.В., Богданова Е.А., Несвижский Ю.В. Влияние сахароснижающих препаратов на персистенцию дрожжеподобных грибов в фекальном микробиоценозе пациентов с сахарным диабетом // Материалы XVIII Российского Национального конгресса «Человек и лекарство» (Москва, 11-15 апреля2011 г).-с. 179.

Подписано в печать:

17.05.2011

Заказ № 5558 Тираж - 100 экз. Печать трафаретная. Типография «11-й ФОРМАТ» ИНН 7726330900 115230, Москва, Варшавское ш., 36 (499) 788-78-56 \л'и'и'.аи1огеГега1. ги

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Герасимова, Елена Владимировна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Кандидозы в системе оппортунистических микозов.

1.2. Особенности морфологии, физиологии и микроэкологии грибов рода Candida и рода Saccharomyces.

1.3. Грибы родов Candida и Saccharomyces в фекальном микробиоценозе.

1.4. Персистенция грибов рода Candida в норме и патологии.

1.5. Грибы рода Candida при сахарном диабете.

1.6. Грибы рода Saccharomyces при сахарном диабете.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Грибы родов Candida и Saccharomyces в фекальном микробиоценозе пациентов с сахарным диабетом"

АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ

В последнее десятилетие возрос интерес к дрожжевым грибам рода Candida как к одним из возбудителей оппортунистических микозов при иммунодефицитных состояниях, тяжелых травмах, обменных заболеваниях (сахарный диабет). Это связано с повышением частоты развития кандидозной инфекции, широким распространением патологий, приводящих к стойкому или транзиторному иммунодефициту, что способствует диссеминации грибов из биотопов макроорганизма, а также утяжелению течения уже существовавшей кандидозной инфекции. Кроме того, возросла актуальность профилактики кандидозов в виду прогрессирования устойчивости этого микроба к антимикотическим препаратам, что ведет к снижению эффективности лечения и разитию осложнений [70, 83, 88].

В настоящее время прогрессирует рост числа пациентов с сахарным диабетом (СД), что акцентирует внимание медицинского сообщества на данной патологии. Возрастающая актуальность этого заболевания также связана с пролонгированием продолжительности жизни пациентов с СД на фоне совершенствования медикаментозного лечения, что, в свою очередь, ассоциировано с развитием поздних осложнений сахарного диабета (ПОСД), таких как диабетические макро- и микроангиопатии (нефропатия, ретинопатия), диабетическая полинейропатия [1, 10]. Все эти осложнения связаны с повышенным риском инфекционного процесса, в частности с развитием локализованной или генерализованной оппортунистической инфекции. В ряде работ была отмечена большая частота встречаемости кандидозной инфекции различной локализации у пациентов с сахарным диабетом по сравнению с общей популяцией [4, 9, 69, 70, 95, 134, 145, 156, 187, 192]. При этом выявление данной патологии происходило, как правило, на стадии выраженных клинических проявлений, требующих длительной и интенсивной антимикозной терапии, что у пациентов с сахарным диабетом связано с высоким риском лекарственных осложнений из-за развития хронической почечной недостаточности на фоне диабетической нефропатии или стеатогепатоза. Развитие инфекционных осложнений у пациентов с СД в свою очередь приводит к ухудшению компенсации углеводного обмена, что ведет к повышению глюкозотоксичности и потенцированию ее негативного влияния на факторы иммунологической резистентности. Учитывая это, многие авторы считают необходимым проведение профилактики кандидозной инфекции, предлагая назначение антимикотической терапии даже в случае персистенции данного микроба в биотопах макроорганизма. С другой стороны, было показано, что персистенция Candida spp. далеко не всегда приводит к развитию инфекционного процесса. Учитывая этот факт, а также побочные эффекты лекарственной терапии у пациентов с развитием поздних осложнений СД, назначение антимикотиков в данном случае не всегда является целесообразным.

Поскольку основным источником грибов рода Candida в организме человека является желудочно-кишечный тракт, степень колонизации этими грибами фекального микробиотопа является показателем персистенции Candida spp. Учитывая, что большинством авторов признается прямая зависимость степени колонизации дрожжеподобными грибами от гипергликемии [75, 100, 104, 118, 125, 142, 154, 171, 209], обнаружение этих микроорганизмов в фекальном микробиоценозе представляется основным фактором риска диссеминации оппортунистической инфекции.

Что касается других дрожжевых грибов, то грибы рода Saccharomyces, обладающие сходными метаболическими и популяционными характеристиками с Candida spp., традиционно не рассматриваются как условно-патогенный микроб [93, 103, 196]. При этом имеются данные о присутствии этого микроба на коже и слизистых пациентов с сахарным диабетом [167, 168]. Также была отмечена положительная связь персистирования грибов рода Saccharomyces с декомпенсацией при сахарном диабете [179].

Таким образом, проблема кандидоза является актуальной при сахарном диабете. Совершенно очевидно, что присутствие грибов родов Candida и Saccharomyces в фекальном микробиоценозе связано с течением этого заболевания, однако остается спорной зависимость персистирования этих грибов от клинико-лабораторных характеристик сахарного диабета.

Вышесказанное определило цель работы.

ЦЕЛЬ РАБОТЫ

Изучение особенностей персистирования грибов родов Candida и Saccharomyces в фекальном микробиоценозе пациентов с различными клинико-лабораторными проявлениями сахарного диабета.

ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ

4. Изучить временные характеристики персистирования грибов рода Candida и рода Saccharomyces в фекальном микробиоценозе пациентов с сахарным диабетом и здоровых лиц.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ

Полученные результаты позволили прогнозировать дестабилизацию микробиоценоза организма млекопитающего, что было реализовано в виде патента (патент на изобретение (19) RU(11) 2 377 311 (13) С2, 2009 г.).

Выявленная неоднородность популяции грибов рода Candida по временной характеристике персистирования в фекальном микробиоценозе позволяет прогнозировать развитие кандидозной инфекции при сахарном диабете, что может использоваться для профилактики кандидоза при данном заболевании.

Высокая индикативность грибов рода Saccharomyces при сахарном диабете и при развитии поздних осложнений сахарного диабета может быть использована^ для прогноза тяжести течения заболевания и профилактики поздних осложнений.

ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ

1. Частота встречаемости и удельная концентрация грибов рода Candida не зависит от наличия сахарного диабета, тем не менее, при сахарном диабете резко возрастает частота встречаемости видов, не принадлежащих к С. albicans.

2. Частота встречаемости и удельная концентрация грибов рода Saccharomyces зависели от пола, возраста пациентов и клинико-лабораторных особенностей течения сахарного диабета.

4. Популяции грибов рода Candida и Saccharomyces у пациентов с сахарным диабетом и здоровых лиц имеют различные варианты временного персистирования в фекальном микробиоценозе, которые зависят от пола и возраста пациентов и клинико-лабораторных особенностей течения сахарного диабета.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ Результаты работы доложены и обсуждены на V Всероссийском конгрессе эндокринологов (Москва, 2006 г.); XIV Российском национальном конгрессе "Человек и лекарство" (Москва, 2007); Всероссийском научног практическом обществе эпидемиологов, микробиологов и паразитологов (Москва, 2007 г.); Итоговой научной конференции с международным участием «Татьянин день», посвященной 250-летию ММА им. И.М.Сеченова (Москва, 2009); I Ежегодном Всероссийском Конгрессе по инфекционным болезням (Москва, 2009); III Ежегодном Всероссийском Конгрессе по инфекционным болезням (Москва, 2011); XVIII Российском Национальном конгрессе «Человек и лекарство» Москва, 2011.

Работа апробирована на заседании кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии медико-профилактического факультета ГОУ ВПО Первый МГМУ имени И.М. Сеченова Минздравсоцразвития России 22.04.11. (протокол №8).

ПУБЛИКАЦИИ

ОБЪЕМ И СТРУКТУРА ДИССЕРТАЦИИ

Заключение Диссертация по теме "Микробиология", Герасимова, Елена Владимировна

выводы

1. Грибы родов Candida и Saccharomyces в фекальном микробиоценозе пациентов с сахарным дебетом и здоровых лиц в подавляющем большинстве случаев встречаются независимо друг от друга.

2. Частота встречаемости и удельная концентрация грибов рода Saccharomyces в фекальном мигкробиоценозе пациентов с сахарным диабетом существенно выше, чем у здоровых лиц:

3. Грибы рода Candida в фекальном микробиоценозе пациентов с сахарным диабетом и здоровых лиц представлены- главным образом C.albicans. При этом в фекальном микробиоценозе пациентов с сахарным диабетом по сравнению со здоровыми лицами другие виды Candida встречаются значимо чаще.

6. Высокая частота встречаемости «долгоживущих хронотипов» Candida spp. в фекальном зчткробиоценозе пациентов с сахарным диабетом ассоциируется с декомпенсацией углеводного обмена и развитием кандидоза в анамнезе, а «долгоживущих хронотипов» Saccharomyces, spp.- с тяжелым течением заболевания и развитием поздних осложнений сахарного диабета.

ВНЕДРЕНИЕ В ПРАКТИКУ

На основе результатов проведенной работы были получены патенты

1. 1. Воробьев A.A., Несвижский Ю.В., Алешкин В.А., Богданова Е.А., Афанасьев С.С., Рубальский О.В., Герасимова Е.В., Воропаева Е.А., Давыдкин И.Ю., Давыдкин В.Ю. Основа для выделения и культивирования микроорганизмов. // Патент на изобретение RU № 2279469 Cl.

2. Грачев C.B., Несвижский Ю. В., Алешкин В.А., Афанасьев С. С., Рубальский О. В., Богданова Е. А., Воропаева Е. А., Рубальский Е. О., Герасимова Е.В. Способ прогнозирования дестабилизации микробиоценоза организма млекопитающего. // Патент на изобретение (19)RU(11)2377311(13)С2.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Таким образом, было выявлено, что грибы рода Candida и Saccharomyces встречались с высокой частотой в фекальном биотопе пациентов с сахарным диабетом и здоровых лиц (54,67% и 42,19% соответственно), что соответствовало данным литературы [8, 28, 52, 69, 162].

Грибы рода Candida и Saccharomyces в фекальном микробиоценозе высевались главным образом независимо друг от друга. Частота их ассоциаций была невысока: 12,5% при сахарном диабете и 8,3% в контрольной группе (р>0,05).

Частота встречаемости Saccharomyces spp. при сахарном диабете повышалась в 2,2 раза (р<0,05) по сравнению со здоровыми лицами, в то время как частота встречаемости Candida spp. существенно не менялась. Удельная концентрация Saccharomyces spp. также существенно повышалась в группе пациентов с сахарным диабетом по сравнению с контрольной группой (р<0,05). Повышение и частоты встречаемости Saccharomyces spp., и их удельной концентрации свидетельствовало о большей чувствительности этих грибов к благоприятным факторам, реализующимся при сахарном диабете по сравнению с Candida spp.

В фекальном микробиоценозе пациентов с сахарным диабетом и здоровых лиц встречались разные виды Candida spp., самый> частый из которых - C.albicans, что соответствовало данным литературы [69, 75, 98, 111, 149, 183]. Колонизация «прочими» видами Candida существенно возрастала при сахарном диабете по сравнению со здоровыми лицами (р<0,05), что отличалось от данных некоторых авторов [75]. Выявленный феномен позволяет предположить наличие при сахарном диабете факторов, настолько благоприятных для персистенции грибов рода Candida, что менее приспособленные к макроорганизму, чем C.albicans, виды чаще заселяют фекальный микробиотоп.

Анализ корреляционных взаимодействий представителей фекального микробиоценоза не выявил значимых связей между Candida spp. и Saccharomyces spp., а также между исследуемыми грибами и другими представителями фекального микробиоценоза

Что касается влияния пола, возраста обследуемых и клинико-лабораторных показателей'на частоту встречаемости исследуемых грибов; то для Candida spp. не- было выявлено четкой' зависимости ни с одной из исследуемых характеристик. Выявленное подтверждало данные ряда источников, опровергавшие влияние пола, возраста [112, 141, 171], уровня гликированного гемоглобина [112, 181, 197, 210], длительности течения заболевания [171, 207, 210], типа сахароснижающей терапии [171, 210], развития поздних осложнений сахарного диабета [75], и опровергало данные других авторов [3, 23, 56, 63, 75, 102, 106, 114, 125, 154, 190, 194, 217]. При этом для здоровых лиц отмечалась четкая связь повышения частоты встречаемости Candida spp. с отягощенным по кандидозу анамнезом, что подтверждалось большинством авторов [69, 75].

При сахарном диабете по сравнению со здоровыми лицами было отмечено повышенние частоты встречаемости грибов рода Saccharomyces в 5 раз (р<0,05) у пациентов старше 50 лет; в 2,6 раза (р<0,05) - при неотягощенном по кандидозу анамнезе; в 2,3 раза4 (р<0,05) - при сахарном диабете 2 типа; в 2,8 раза (р<0,05) - при длительности заболевания более 5 лет (54,28%); в 2,4 раза (р<0,05) - при компенсации сахарного диабета (46,15%); в 2,8 раза (р<0,01) - у пациентов с поздними осложнениями сахарного диабета. Все выявленные изменения при сахарном диабете (особенно — развитие поздних осложнений) ассоциированы с признаками тяжелого течения сахарного диабета, которые и определяют прогноз при данном заболевании.

В-фекальном микробиоценозе как пациентов с сахарным диабетом, так и здоровых лиц, популяции грибов родов Candida и Saccharomyces неоднородны по длительности' персистирования, что проявляется; в форме «короткоживущих» и «долгоживущих хронотипов». При сахарном диабете существенно повышалась частота встречаемости «долгоживущих хронотипов» как Candida spp. (р<0,01), так и Saccharomyces spp; (р<0,05).

При этом частота встречаемости и соотношение «хронотипов» исследуемых грибов зависели: от пола, возраста обследуемых и клинико-лабораторных характеристик сахарного диабета.

Для Gandida spp. при сахарном диабете по сравнению с контрольной группой частота встречаемости «долгоживущих хронотипов» была в 2,1 раза (р<0,05) выше у женщин с сахарным диабетом; в 2,2 раза выше (р<0,05) у пациентов моложе 50 лет; в 2,5 раза выше (р<0,05) у пациентов с отягощенным по кандидозу анамнезом; в 2,3 раза выше (р<0,05) у пациентов с сахарным диабетом: 1 типа; в 1,9 раза выше при декомпенсации углеводного обмена; Частота встречаемости «короткоживущих хронотипов» Gandida spp. повышалась; в 3,2 раза у здоровых лиц с отягощенным по кандидозу анамнезом по сравненшо с неотягощенным:

Частота: встречаемости «долгоживущих хронотипов» Saccharomyces spp. при сахарном диабете по сравнению с контрольной группой повышалась в 3,7 раза (р<0,05) у пациентов старше 50 лет; в 3,5 раза. (р<0,05) при неотягощенном по кандидозу анамнезе; в 3,2 раза (р<0,05) при сахарном диабете 2 типа (27,08%); в 3,4 раза (р<0,05) при длительности сахарного диабета более 5 лет (28,57%); в 4,1 раза (р<0,05) при компенсации углеводного обмена (34,61%); в 3;6 раза (р<0,05) при терапии пероральными сахароснижающими: средствами (30,30%); в 4,1 раза (р<0,01) при развитии поздних осложнений; сахарного диабета (34,48%). Частота встречаемости «короткоживущих хронотипов» Saccharomyces spp. в фекальном микробиоценозе пациентов с сахарным диабетом по сравнению с контрольной группой" повышалась в 3,7 раза (р<0,05) при длительности заболевания более 5 лет, а также в 2,0 раза (р<0,05) при инсулинотерапии.

Таким образом, в организме человека, как здорового, так и больного, реализуются условия для персистенции транзиторных грибов родов Candida и Saccharomyces, частота- встречаемости которых в фекальном микробиоценозе ассоциирована с полом, возрастом и клинико-лабораторными^характеристиками сахарного диабета. Так, у лиц с сахарным диабетом, в отличие- от здоровых, существенно Me^ercaf картина-заселенности фекального микробиоценоза дрожжевыми грибами: значимо повышается« суммарная частота встречаемости Candida spp. и Saccharomyces spp., изменяется архитектура микробного сообщества за счет увеличения частоты встречаемости Saccharomyces spp., меняется видовой состав популяции Candida spp. за счет повышения частоты встречаемости видов, не относящихся к C.albicans. Для Saccharomyces spp. эти изменения более выражены, а главное, ассоциированы с клинико-лабораторными характеристиками тяжелого течения сахарного диабета, развитием поздних осложнений.

Дифференцированная оценка персистирования Candida spp. и Saccharomyces spp. в- фекальном микробиоценозе на разных сроках культивирования позволила предложить подход к повышению эффективности- лабораторной диагностики персистенции этих грибов* при сахарном диабете. Так, частота встречаемости «долгоживущих хронотипов» Candida spp. четко ассоциирована с отягощенным по кандидозу анамнезом при сахарном диабете, а частота встречаемости «долгоживущих хронотипов» Saccharomyces spp. — с тяжелым течением заболевания и развитием поздних осложнений сахарного диабета.

Обращает внимание повышение частоты встречаемости грибов» рода Saccharomyces, особенно «долгоживущих хронотипов» этого микроба, при тяжелом течении сахарного диабета и развитии поздних осложнений, что может свидетельствовать как о патогенетической вовлеченности

8ассЬагошусез 5рр. в развитие и течение заболевания, так и о выраженных индикаторных свойствах этих грибов при сахарном диабете.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Герасимова, Елена Владимировна, Москва

1. АнтоновВ.Б., Сильницкий П.А., Соколова F.A. и др. Кандидоз желудка при эндокринных нарушениях // Клиническая медицина. -1996. № 2 . -С.49-50.

2. Ахапкина И1 Г., Изучение иммунной активности; аллергенного экстракта Candida albicans // Иммунология. 2009. - Т. 30. - № 1. - С. 27-30.

3. Ахмедова Ф.Д., Бабаджанова С.Ю. Иммуногенетический анализ у больных инсулинзависимых детей в- Узбекистане // Проблемы эндокринологии. 1992. - № 4. - С.31.

4. Бажукова Т.А. Уровень носительства грибов рода Candida в условиях производства и использования кормовых дрожжей: Депонированная рукопись. Архангельск, 1996.

5. Бажукова Т1 А. Этиологическая значимость грибов рода Candida при гнойно-септических заболеваниях. // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии.- 1997. № 3: - С. 101-102.

6. Балаболкин М.И. Диабетология. М.: Медицина, 2000. - 670 с.

7. Белобородов В. Б., Нозокомиальная кандидурия: алгоритм диагностики и лечения // Венерология. 2005. - № 11. - С. 63-70.

8. Белоусова Е. JI. Saccharomyces boulardii в гастроэнтерологической практике // Лечащий врач. 2009. - № 5. - С. 78-79.

9. Белуха У.К., Лукьянова A.C., Епишева Л.В., Арушанова И:Р. Поражение кожи при сахарном диабете // Медицинский журнал Узбекистана. -1990:-№12.-С. 4109-51.

10. Белянин В. Л. Характеристика бактериально-грибковых ассоциаций кишечника в условиях колонизации дрожжеподобными грибами рода Candida // Современная микология в России: тез. докл. I съезда микологов. М., 2002. - С. 378.

11. Бикбулатова H.H. Разработка патогенетически обоснованного метода лечения больных кожным кандидозом с применением фототерапии: Автореф. дисс. канд. мед. наук. -М., 1995 16 с.

12. Богомолова Т.С. Морфобиологические свойства и патогенность Candida albicans: Автореф. дисс. канд. мед. наук. Л., 1990. - 18 с.

13. Бойков С. С. Ассоциации грибов Candida albicans с некоторыми условно патогенными микроорганизмами при дисбактериозе кишечника у пациентов разных возрастных групп // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2005. - № 2. - С. 65-69.

14. Борисова A.M., Ефуни С.С., Матюков А.Э. и др. Иммунный статус при различных клинических формах инсулинзависимого сахарного диабета // Терапевтический архив. 1993. - №10. - С. 17-20.

15. Быков В.Л., Караев З.О. Кандидоз слизистых оболочек при местном воздействии кортикостероидов // Вестник дерматологии 1987. -№10. - С. 9-10.

16. Быков' В.Л. Патоморфогенез кандидоза при эндокринных нарушениях. Дисс. д.м.н. Ленинград, 1988.

17. Быков В.JI. Морфофункциональный анализ состояния некоторых эндокринных желез при кандидоинфекции // Проблемы эндокринологии. -1993. -№-2-С. 46-48.

18. Ван-дер-Ваай Д. Пищеварительный тракт как главный эндогенный источник бактериальных и грибковых инфекций, важность поддержания колонизационной резистентности // Антибиотики и химиотерапия. 1992. -№ 6. - С.36-41.

19. Величко Е.В., Быков В.Л. Адгезия грибов рода Candida к эпителию слизистых оболочек при сахарном диабете // Вестник дерматологии. 1988. - №6. - С.20-22.

20. Воронин А. А., Тараненко Л.А., Сидоренко C.B. Лечение дисбактериоза у детей, больных сахарным диабетом // Антибиотики и химиотерапия. -1999. Т. 44. - №3. - С. 22-24.

21. Галенок В.А., Жук Е.А. К характеру моноцитов периферической крови у больных сахарным диабетом // Терапевтический архив. 1997. - №2. -С. 59-61.

22. Гальцевич Э.М. Функциональное состояние системы гипофиз-гонады у мужчин и подростков, страдающих хроническим кандидозом: Автореф. дисс. канд. мед. наук. СПб, 1995.- 19 с.

23. Генетика сахарного диабета у детей и подростков: Пособие для врачей / И.И. Дедов, Т.Л. Кураева, О.В. Ремизов, В.А. Петеркова, В.В. Носиков, Л.Н. Щербачева. М.: МЗ РФ ГУ ЭНЦ РАМН, 2003. - 72 с.

24. Глушак C.B. Диагностика кандидозного поражения толстой кишки инструментальными методами: Дисс. на соискание ученой степени канд. мед. наук. Владивосток, 1994. - 24 с.

25. Голикова Е.А. Активность естественных и антителозависимых киллеров при кандидозе: Автореф. на соискание степени канд. мед. наук. -Ленинград, 1989. 18 с.

26. Головозин M.B. Периферизация процессов тимической селекции Т-лимфоцитов как, причина развития аутоиммунных заболеваний • // Иммунология. 1993. - №5. - С.4-7.

27. Гордонова И. К., Сравнительное изучение ЛПС Saccharomyces cerevisiae // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 2002. -Т. 134. - №10. - С. 430-434.

28. Гриневич В .Б. Взаимосвязь выраженности хеликобактериоза желудка и состояния кишечной микробиоты у больных язвенной; болезнью двенадцатиперстной кишки // Проблемы медицинской микологии ., — 2003.-№2. С. 48-60/

29. Дедов И.И., Чазова Т.Е., Сунцов Ю.И. Эпидемиология сахарного диабета: Пособие для врачей. М.:МЗ РФ ГУ ЭНЦ РАМН, 2003; - 68 с.

30. Блинов Н. П., Candida. Кандидозы. Лабораторная диагностика;— М., 2010.- 235 с.

31. Зарнадзе Т. И., Антагонистическая активность природных сахаромицетов // Медицинские новости Грузии. 2001. - №1. - С. 48-51.

32. Златкина А.Р., Исаков В.А., Иваников И.О. Кандидоз кишечника как новая- проблема гастроэнтерологии. // Российский; журнал Гастроэнтерологии^ гепатологии, колопроктологии. — 2001 г. №6. - T.XI. — С. 33 - 39.

33. Зуева E.B¿,Федосеев Г.Б., Соболев А.В: Современные проблемы аллергологии, иммунологии, иммунофармакологии . М.,1998 - 689 с.

34. Казначеева Л.Ф., Ишкова Н.С., Молокеев A.B. Методы коррекции дисбиотических нарушений? кишечника у детей. Новосибирск, 2006. - 48 с.

35. Калистратов К.Г., 1'омес Л.А., Запруднов А.М., Щербаков П.А., Ярцев М.Н. Исследование желудочно-кишечного тракта у детей с первичными иммунодефицитными состояниями (клинико-эндоскопические сопоставления) // Педиатрия. 1993. - №5. - С. 39-41.

36. Касаткина ЭЛ., Траненко Л.А., Воронин? A.A. Бактериологическая диагностика; дисбактериоза кишечника у детей,, больных сахарным диабетом: Методические рекомендации (№18). М. - 1996. - 14 с.

37. Корнишева В.Г. Микозы кожи и подкожной клетчатки: Автореф. дисс. докт.мед.наук.- СПб, 1998 34 с.

38. Крючкова З.В. Значения иммунологических особенностей в процессе становления ранних стадий сахарного диабета у лиц с отягощенной наследственностью: Автореф. дисс. канд. мед. наук. СПб, 1994- 19 с.

39. Кубась В.Г. Механизмы защиты макроорганизма при кандидозе //Материалы Кашкинских чтений. СПб, 1998.- С.24-25.

40. Кулько А. Б. Условно-патогенные грибы, выделенные от больных туберкулезом легких (характеристика; видов) // Проблемы туберкулеза и болезней легких. 2007. - № 10. - С. 61-62.

41. Лебедева: Т.Н. Гуморальный иммунный ответ при кандидозе: Автореф. дисс. докг. мед. наук.- СПб, 1992.- 39 с.

42. Макдермогт М.Т. Секреты эндокринологии. М.: ЗАО Издательство Бином, 1998: - С. 57-62.

43. Маланичева Т.Г., Саломыков Д.В., Денисова> С.Н. Атопический дерматит и хроническая гастродуоденальная патология у детей, ассоциированные с грибами рода Candida: монография. Казань: Медицина, 2009. -144 с.

44. Мартынова М.И., Петряйкина Е.Е., Пилютик В.Ф. Особенности нарушения кожных покровов при инсулинзависимом сахарном диабете // Лечащий врач. 2000. - № 8. - С. 50-53.

45. Мельниченко Г. А., Калашникова М.Ф., Рашидова Е.Ю. Эффективность препарата микосист при лечении кандидозного вульвовагинита у больных, страдающих сахарным диабетом // Акушерство и гинекология. 2006. - №3. - С. 42-45.

46. Мирзабалева А.К. Клинико-иммунологическая характеристика кандидоза гениталий у женщин репродуктивного возраста: Автореф.на к.м.н. Санкт-Петербург, 1992.

47. Митрохин С. Д., Ардатская Е.В., Никушкин Е.В. и др. Комплексная диагностика, лечение и профилактика дисбактериоза (дисбиоза) кишечника в клинике внутренних болезней: Методические рекомендации. -М., 1997.-45 с.

48. Мороз А.Ф., Снегирёва А.Е. Грибы рода Candida (методы выявления, идентификации на видовом уровне и определение чувствительнсти к противогрибковым препаратам): Методические рекомендации. -М.: НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи РАМН, 2009. 60 с.

49. Наумова Е. С., Молекулярно-генетическая дифференциация культурных дрожжей Saccharomyces // Микробиология. 2005. - Т. 74, № 2. -С. 215-223.

50. Нерсесян С.А. Дерматофитии при эндокринной патологии: Автореф. дисс. докт. мед. наук. — СПб., 1997. 39 с.

51. Новиков Д.К., Новиков П.Д. Клиническая иммунопатология. Руководство. -М.: Мед. лит., 2009: 464 с.

52. Овсянникова JI. В., Оппортунистические микозы у больных бронхиальной астмой на фоне базисной терапии. Диагностика, профилактика, лечение, автореф. дис. канд. мед. наук : 14.00.05 2002.

53. Одинцова'О.Н. Исследование клеточного иммунитета у больных инсулинзависимым сахарным диабетом с помощью реакции торможения миграции лейкоцитов // Проблемы эндокринологии -1990. № 1.- С. 8-11.

54. Орлова Е. В. Разработка и экспериментальное обоснование клинического применения комплексного нуклеотидного препарата- из дрожжей Saccharomyces cerevisiae: Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биол. наук. М.5 2007. - 46 с.

55. Осипенко М. Место пробиотиков в лечении синдрома диареи // Врач. 2009. - № 7. - С. 68-71.

56. Пилипенко В. И., Применение Saccharomyces boulardii в терапии больных синдромом раздраженной кишки // Российский медицинский журнал. 2009. - № 5. - С. 38-42.

57. Пущенко А.И., Щербак A.B. Состояние полости рта у больных сахарным диабетом //Проблемы эндокринологии. 1991. -№3. - С.39-43.

58. Римарчук Г. В., Эффективность применения энтерола в коррекции дисбиозов толстой кишки у больных с хроническим гастродуоденитом // Российский педиатрический журнал. — 2002. №3. - С. 44-46.

59. Риор С.Е., Левайк У.К., Макнейл М.М. Лечение вульвогенитального кандидоза // Заболевания, передаваемые половым путем. -1996.-№5-С. 18-27.

60. Ройт Л., Бростофф Дж., Мейл Д. Иммунология. М.: Издательство Мир.-2000-581с.

61. Росту Х.Д. Мочевые инфекции у пациентов с сахарным диабетом // Диабетография. 1995.- №4. - С.4.

62. Самсыгина Г.А., Буслаева Г.Н. Кандидоз новорожденных и детей первых месяцев жизни. М., «ГЭОТАР-Медиа», 2008. - 112 с.

63. Сергеев А.Ю. Клинико-иммунологические и этиологические особенности кандидоза и совершенствование методов его терапии: Дисс. на соискание ученой степени к.м.н. Москва, 2000. - 148 с.

64. Сергеев А.Ю., Сергеев Ю.В. Кандидоз. М. - 2001. - С. 322-345.

65. Сергеев А.Ю., Караулов A.B., Новиков П.Д., Иванов О.Л. Хронический кандидоз кожи и слизистых оболочек: иммунный статус, гиперчувствительность и современные подходы к терапии // Российский журнал кожных и венерических болезней. 2002. - №3. - С. 40-41.

66. Соболев А.В: Микосенсибилизация w микоаллергия у жителей городов, и сельской местности. Кандидопатия. Инвазивный кандидоз //Проблемы медицинской микологии.- 2000. Т.2. -№ 2. - G.42.

67. Соколова Г.А., Сильницкий П.А. Кандидоз мочеполовых органов у мужчин // Вестник дерматологии. 1997. -№3.-С. 11-13.

68. Соколова Г. А. Кандидоз при эндокринных заболеваниях (особенности патогенеза, клиники, терапии): Дисс. на соискание ученой степени д.м.н. Санкт-Петербург, 2001. — 246 с.

69. Стентон Гланц. Медико-биологическая статистика. Пер. с англ. -М., Практика, 1998.- 459 с.

70. Татарова Н. А., Особенности течения^ и профилактика кандидозного вульвовагинита у женщин репродуктивного возраста, использующих комбинированную гормональную контрацепцию // Проблемы репродукции. 2009. - Т. 15, № 5. - С. 66-69.

71. Тэруо Н., Хисаки К., Фукио К. и др. Желудочная бактериальная флора у больных с диабетическим парезом желудка // Клиническая медицина 1992.-№ 9-10-С.50-51.

72. Усик С.Ф., Дисбактериоз кишечника; (диагностика, лечение, эпидемиология и профилактика): Монография; М1,- 2005иС. 12-18(;

73. Федотов В.11., Рыбалкин С.Б., Романцов М.Г. Очерки по иммунокоррекции в дерматовенерологии: Пособие для врачей. -;СПб.,. 2005. -80 с.

74. Хавкин А. И., Микрофлора пищеварительного тракта. М., 2006.86; Хаитов Е1М., Пинегин. Б.В. Современные представления озащите организма от инфекции // Иммунология. — 2000; №1. - С 61-64.

75. Хаитов Р.М. Клиническая аллергология. М., 2002. - 264 с.

76. Хмельницкий О. К. Кандидоносительство. Просветная кандидопатия. Инвазивный кандидоз//Пробл. мед. микологии. -1999.-Т. 1, № 1-С. 12-17.

77. Хмельницкий 0.К., Хмельницкая Н.М. Патоморфология микозов человека. Санкт-Петербург, 2005. - 431с.

78. Чугунова Л.А. Аутоиммунные'аспекты патогенеза, диагностики, лечения впервые выявленного ИЗСД: Автореф. дисс.канд.мед. наук.-М., 1994 19с. ' " : ■

79. Г. Шабашова Н.В. Новый взгляд на иммуногенез хронического кандидоза7/Пробл. мед. микологии.- 1999.-T.1,№ 1.-С. 18-23.

80. Шевяков М.А. Кандидоз слизистых оболочек пищеварительного тракта // Пробл.мед.микологии 2000 - Т.2,№ 2 - С.6-9.93*. Шендеров Б.А. Медицинская4 и микробная экология и-функциональное питание. T.III. - М. - 2001.- С. 107-109.

81. Шупелькова Ю.О: Кандидоз кишечника // Русский медицинский журнал. 2002.-№1.-С. 14-19.

82. Яробкова Н.Д., Антоновым В.Б. Варианты кандидосепсиса и их лечение // Вестник дерматологии и венерологии -1994.-№ 2.-С.8-9.

83. Agatenci L., Franchi F., Mondello F., Bevilacqua R.L., Ceddia Т., De Bernardis F., Cassone A. Vaginopathic and proteolytic Candida species in outpatients attending a gynecology clinic //J.Glin.Pathol 199Г Oct. 44:10 826-30.

84. Agrawal V, Gupta, RK, Jain M. Invasive fungal infections in renal, allograft recipients. // Indian J Pathol Microbiol. 2005 Oct;48(4):448-52 Indian J Pathol Microbiol. 2005 Oct;48(4):448-52.

85. Ahmad A, Khan AU. Prevalence of Candida species and potential risk factors for vulvovaginal candidiasis in Aligarh, India./ European journal of obstetrics and gynecology, and reproductive biology. 2009 May;144(l):68-71.

86. Ahonen P.,Perheentupa K., Mienttinen №. Clinical variation of autoimmune polyendocrinopathy-candidiasis-ectodermal dystrophy in series of 68 patients. //№.Engl. J. Med.- 1991.-V. 322.-P. 1829-1836.

87. Al-Attas SA, Amro SO. Candidal colonization, strain diversity, and antifungal susceptibility among adult diabetic patients./ Annals of Saudi medicine. 2010 Mar-Apr;3 0(2): 101 -8.

88. Aly F.Z., Blackwell C.C., Mackenzie D.A., Weir D.M., Clarke B.F. Factors influence oral carriage of yeasts among individuals with diabetes mellitus. //Epidemiol. Infect-1992.-V.109-№ 3-P. 507-518.

89. Bader MS, Hinthorn D, Lai SM, Ellerbeck EF. Hyperglycaemia and mortality of diabetic patients with candidaemia./Diabetic medicine: a journal of the British Diabetic Association. 2005 Sep;22(9): 1252-7.

90. Bai K.Y., Reddy C.D., Abu-Talib SH. Oral candidal carriage in young insulin dependent diabetics. J. Indian. Soc. Pedod. Prev. Dent. 1995 Aug 13:1 20-3.

91. Barnes RA, White PL, Bygrave C, Evans N, Healy B, Kell J. Clinical impact of enhanced diagnosis of invasive fungal disease in high-risk haematology and stem cell transplant patients // J Clin Pathol. 2009. - Jan;62(l):64-69.

92. Barnett J.L., Vinik A.I. Gastrointestinal Disturbances in Textbook "Therapy for Diabetes Mellitus & Related Disorders. H.E. Lebovitz 2d ed.USA-1994.- P. 288-296.

93. Barns S.M., Lane D.J., Sogin M.L., Bibeau C., Weisburg W.G. Evolutionary relationships among pathogenic Candida species and relatives. J. Bacteriol. 1991 Apr 173:7 2250-5.

94. Battle M., Martin T.,Fulton J.: Lactulose may help prevent urinary tract infections. BMF2001; 323 (7318):936.

95. Battle M., Martin T.,Fulton J: Probiotics and antibiotics associated diarrhea: Lactulose is effective. BMJ 2002, 325: 901-2.

96. Bahukova T.A., Dobrodeeva L.K. Role of fungi belonging to the genus Candida in the etiology of nonspecific pulmonary diseases. Antibiot Khimioter 1996 Jun 41:6 44-8.

97. Bessman A.N., Sapico F.L. Infections in the diabetic patients: The role of immune dysfunction and pathogenvirulence factors. //J. Diabetic Complications 1992- V.6-P.258-262.

98. Broda W. Fungal stomach ulcer. Wiadomosci Lekarskie- 1992-V. 45-№ 11-12 -P.448-449.

99. Cannon R.D., Holmes A.R., Mason A.B., Monk B.C. Oral Candida: clearance, colonization, or candidiasis? //J.Dent.Research.-1995.,-V.74.-№5.-P.l 152-1161.

100. Carr B.R., Wilson J.D. Disorders of the ovary & female reproductive tract in Harrison's prinsiples of internal- medicine, K. J.Isselbacher, E.Braunwald, J.D. Wilson. New York-1994.-P. 2017-2036.

101. Cater R.E. Chronic intestinal candidiasis as a possible etiological factor in the chronic fatique syndrom. //Medical Hypotheses. -1995-V.44-№ 6-P.507-515.

102. Celik AD,\ Yulugkural Z, Kuloglu F, Akata F. Candida glabrata: etiologic agent of soft tissue abscess in a diabetic patient./ Indian journal of pathology & microbiology. 2010 Jul-Sep;53(3):590-1.

103. Chang FY, Lee JH, Yang YH, Yu HH, Wang LC, Lin YT, Chiang BL. Analysis of the serum levels of fungi-specific immunoglobulin e in patientswith allergic diseases./ International archives- of allergy and immunology. 2011;154(l):49-56.

104. Gole Y.T., Lynn K.T., Seshan K.R. et al. Gastrointestional and systemic candidosis in immunocompromised mice. //J:Med.and Vet.Mycol.-1989:-V.6-P.363-386:

105. Cotclr M.F., Hiller S.L., Gibbs R.S., Eschenbach D.A. Epidemiology and** outcomes associated with moderate to heavy Candida- colonization during pregnancy, Vaginal infection and Prematurity Study Group. Am.J. Obstet.Gynecol. 1998 Feb 178:2 374-80.

106. Darwazeh A.M. Mixed salivary glocose levels & candidal« carriage in patients with diabetes mellitus. //J.Oral. Pathol.Med. -1991.-№6.-P.280-283.

107. Darwazeh« AM, MacFarlane TW, McCuish A, Lamey PJ. Mixed salivary glucose levels and candidal carriage in patients with diabetes mellitus//Journal of oral pathology&medicine.l991 Jul; 20(6):280-3.

108. Darwazeh A.M. al-Bashir A. Oral candidal flora in helthy infants. J. Oral. Pathol. Med. 1995 Sep 24:8 361-4.

109. Fridkin S.K., Jarvis W.R: Epidemiology of nosocomial fungal infections // Clinical Microbiology Reviews. 1996 Oct. - P. 499 - 512.

110. Gandhi R.T., Tollin S.R., Seely E.W. Diagnosis of Candida Thyroiditis by needle aspiration.// J. of Infection 1994 V. 28. №1 P. 77-81.

111. Gibb D., Hockey S., Brown L., Lunt H. Vaginal symptoms & insilin dependent diabetes mellitus. //New Zealand Medical J.1995.№. 108 P.252-253.

112. Gibson J., Lamey P.J., Lewis M., Frier B. Oral manifestations of previosly undiagnosed non-insulin dependent diabetes mellitus//J.oral Pathol.-Med.l990.-V.19.-№6-P.284-287.

113. Ginter G., Soyer H.P., Reiger E. Vaginal yeast colonization and promiscuity. A study of 197 prostitutes. Mycoses 1992 Jul-Aug. 35:7-8. 177-80.

114. Goldman DL, Huffnagle GB. Potential contribution of fungal infection and colonization to the development of allergy./ Medical mycology: official publication of the International Society for Human and Animal Mycology. 2009;47(5):445-56.

115. Gon^alves RH, Miranda ET, Zaia JE, Giannini MJ. Species diversity of yeast in oral colonization of insulin-treated diabetes mellitus patients./ Mycopathologia. 2006 Aug;162(2):83-9.

116. González-Pedraza Avilés A, Luís Hernández R, Luna Avila J, Dávila Mendoza R, Ortiz Zaragoza C. Urinary tract infection by Candida species./ Atención Primaria. 2006 Jul-Aug;38(3): 147-53.

117. Greenspan J.S. Oral manifestation of disease. In: Harrison's Prinsiples of Internal Medicine K.J.Jsselbacher, E.Braunwald, J.D. Wilson et al. 13th ed. New York. McGraw-Hill 1994. P. 199-208;

118. Guler S, Ural O, Findik D, Arslan U. Risk factors for nosocomial candiduria./Saudi medical journal. 2006 Nov;27(l 1):1706-10.

119. Hauman C.H., Tompson I.O., Theunssen F., Wolfaardt P. Oral carriage of Candida in healthy and HIV-seropositive persons/ Oral. Surg. Oral. Med. Oral. Pathol. 1993 Nov 76:5 570-2.

120. Kaye W.A., Adri N.N;, Soelder LS; et al. Acqured defect in interleukin-2 production in patients with type I diabetes mellitus. //N.Engl J.Med.-1986.-V.315-P.920-924. ■ '

121. Kwon-Chung K.J., Bennet J.E., Medical Mycology. Philadelphia, Lea &»Febiger, 1992. 678 p.

122. Lebovitz H.E. Therapy for Diabetes Mellitus & Related Disorders. 2d Ed.USA 1994.-710 p.

123. Lisboa C, Santos A, Dias C, Azevedo F, Pina-Vaz C, Rodrigues A. Candida balanitis: risk factors./ Journal of the European Academy of Dermatology and Venereology. 2010 Jul;24(7):820-6. Epub 2009 Dec 11.

124. Liu H. Co-regulation of pathogenesis with dimorphism and phenotypic switching* in Candida albicans, a commensal and a pathogen. // Int J Med Microbiol. 2002 Oct;292(5-6):299-311.

125. Maciejewska A, Jaskölowska A, Kwasniewska J. Fungi in patients with diabetes mellitus type 2: prevalence, species of isolated strains./Wiadomosci parazitologiczne. 2004;50(2): 163-70.

126. Maertens J, Vrebos M, Boogaerts M. Assessing risk factors for systemic fungal infections // Eur J Cancer Care (Engl). 2001 Mar;10(l):56-62.

127. Malazy OT, Shariat M, Heshmat R, Majlesi F, Alimohammadian M, Tabari NK, Larijani B., Vulvovaginal candidiasis and its related factors in diabetic women./Taiwanese journal of obstetrics and gynecology. 2007 Dec;46(4):399-404.

128. Marquez-Marqes R.N., Madrigal B.E., Vera-Gutierrez E.J. et al. Evaluación genotoxica de la inactivación con Saccharomyces cerevisiaede aflatoxina B1 //Reunion Nacional de Investigation Pecuaria. Cuernavaca, Morelos, Mexico. 1996, 2-4 Dec, 284-286.

129. Marsh P., Martin M., The normal oral flora. In Oral Microbiology (van Nostrand R., ed.) Wokingham? Berkshire, UK., 2004., P. 11-25.

130. Meunier F. Invasive fungal infections: a challenge for the nineties. //Acta Clin.Belg., 1993,V.48,№1, P. 1-4.

131. Mlinaric-Missoni E, Kalenic S, Vazic-Babic V. Species distribution and frequency of isolation of yeast./ Acta Dermatovenerol Croat. 2005;13(2):85-92.s and dermatophytes from toe webs of diabetic patients.

132. Niewerth M., Korting H.C. Phospholipases of Candida albicans. // Mycoses. 2001 Nov;44(9-10):361-7.

133. Nighingale J.M., Simpson A.J., Towler H.M., Lennard-Jones J.E. Fungal feeding-line infections: beware the eyes & teeth. //J.of the Royal Society of Medicine 1995, V.88 -Xs5-P.258-263.

134. Nowakowska D, Kurnatowska A, Stray-Pedersen B, Wilczyñski J., Species distribution and influence of glycemic control on fungal infections in pregnant women with diabetes/ J Infect. 2004 May;48(4):339-46.

135. Nowakowska D, Gaj Z, Nowakowska-Glab A, Wilczynski J. Occurrence of fungal infections in pregnant women and non-pregnant women with diabetes and without diabetes./ Ginekologia polska. 2009 Mar;80(3):207-12.

136. Nyirjesy P. Postmenopausal vaginitis./ Current Infectious disease reports. 2007 Nov;9(6):480-4.

137. Odds F.C., Webster C.E., Rilay V.C., Fisk P.G. Epidemiology of vaginal Candida infection: significance of numbers of vaginal yeasts and their biotypes.EurJ.Obstet.Gynecol.Reprod.Biol 1987 May 25:1 53-66.

138. Odds F. C. Candida and candidosis. 2nd ed- London- C. Bailliere TindalL- 1988.-P. 120-134.

139. Perlroth J, Choi B, Spellberg B. Nosocomial fungal infections: epidemiology, diagnosis, and treatment// Med Mycol. 2007 Jun;45(4):321-46.

140. Peters NC. Vulvovaginitis in the postmenopausal woman./ Nurse practitioner forum. 1992 Sep;3(3):152-4.

141. Pfaller MA. Infection control: opportunistic fungal infections—the increasing importance of Candida species. // Infect Control Hosp Epidemiol. 1989 Jun;10(6):270-3.

142. Pfaller MA. Epidemiology of candidiasis // J Hosp Infect. 1995 Jun;30 Suppl:329-38.

143. Proto G., Leoni S., Torrosi L. et al. Polyendocrinopatia autoimmune candidiasi mucocutanea cronica. //Fr.J.Med.-l 992. -Jfe 7-8.-P.47.

144. Radin D.R., Johnson M.B. Candida cholangitis in a diabetic woman//Am. J. Roentqenol.-1992.-V.158.-JV° 5.- P.1029-1030.

145. Richardson- M, Lass-Florl C. Changing epidemiology of systemic fungal infections. // Clin Microbiol Infect. 2008'May; 14 Suppl 4:5-24.

146. Rosen F.S. Primary immunodeficiency diseases -A report of af WHO Scientific Group.//Immunodeficiency Rev 1992 V.3.-P195.

147. Rothstein R.D. Gastrointestinal motility disorders in diabetes mellitus. //Am J.Gastroenterol.-1990.-V.85 .-P.782-785.

148. Sack T.L., Sleisenger N.H. Effects of systemic & extraintestinal disease on the gut. In: Gastrointestinal Disease, 4th ed. Sleisenger N.H., Fordtran J.S., Eds.Philadelphia, PA, Saunders,-1989,-P .488-528.

149. Saegusa S, Totsuka M, Kaminogawa S, Hosoi T. Cytokine responses of intestinal epithelial-like Caco-2 cells to non-pathogenic and opportunistic pathogenic yeasts in the presence of butyric acid./ Biosci BiotechnoL Biochem. 2007 Oct;71(10) :2428-34.

150. Sahin I, Oksuz S, Sencan I, Gulcan A, Karabay O, Gulcan E, Yildiz O. Prevalance and risk factors for yeast colonization in' adult diabetic patients./ Ethiopian medical journal. 2005 Apr;43(2): 103-9.

151. Sajadi MM, Roddy KM, Chan-Tack KM, Forrest GN. Sajadi MM, Roddy KM, Chan-Tack KM, Forrest GN.Risk factors for mortality from primary cryptococcosis in patients with HIV.// Postgrad Med. 2009 Mar; 121(2): 107-13;

152. Saral R. Candida & Asper infections in immunocompromissed patients: Rev.infec. Diseases.-1991.-13-№3.-P.487-492.

153. Sawyer R.G., Adams R.B., Posenljf L.K. et all The role of Candida albicans in the pathogenesis of experimental fungal/bacterial peritonitis & abscess formation: //American Surgeon 1995.-V.61.-.N°8.-P.726-731.

154. Shas D.T., Glove D.D.', Larsen B. In situ mycotoxin production by Candida albicans in women with vaginitis. //Gynecological & Obstetric Investigation-1995 V.39.-N21.-P.67-69.

155. Singh N. Trends in the epidemiology of opportunistic fungal infections: predisposing factors and the impact of antimicrobial use practices // Clin Infect Dis. 2001 Nov 15;33(10):1692-6. Epub 2001' Oct 12.

156. Sobel J. Genital candidiasis in Sexually Transmitted Diseases, 2d ed, K.K.Holmes et al. //New York, McGraw-Hill, 1990.

157. Sohle P.G. Neutrophil adherence in diabetes mellitus. //J. Lab. Clin. Med.-l 988.-V. 111-P.2634.

158. Soli D.R., Galask R., Schmid J., Hanna C., Mac K., Morrow B.J. Genetic dissimilarity of commensal strains of Candida spp. carried in different anatomical locations of the same healthy women. Clin. Microbiol. 1991 Aug- 29:8 1702-10.

159. Sonoyama K, Miki A, Sugita R, Goto H, Nakata M, Yamaguchi N., Gut colonization by Candida albicans aggravates inflammation in the gut and extra-gut tissues in mice./. 2010 Aug 31.

160. Soysa NS, Samaranayake LP, Ellepola AN. Diabetes mellitus as a contributory factor in oral candidosis./ Diabetic medicine: a journal of the British Diabetic Association. 2006 May;23(5):455-9.

161. Tao RC, Chen B, Li YL, Ma F. Logistic regression analysis for the risk factors of oral candidosis among patients with non-insulin dependent diabetes mellitus./ West China journal of stomatology. 2010 Feb;28(l):41-4.

162. Tapper-Jones LM, Aldred MJ, Walker DM, Hayes TM. Candidal infections and populations of Candida albicans in mouths of diabetics./ Journal of clinical pathology. 1981 Jul;34(7):706-ll.

163. Thai A.C., Eisenbarth G.S.: Natural history of IDDM. //Diabetes Rev.-1993.-V.1.-P.10:

164. Tisher B.M., Lamey P.J., Samaranayake L.P. et al. Carriage of Candida species in the oral cavity in diabetic patients: ralationship to glycaemic control. //J.Oral Pathol-1987-V. 16-P.282-286. ^

165. Unger R.H., Foster D.W. Diabetes mellitus's. In. Williams Textbook of Endocrinology, 8th ed, J.D.Wilson, D.W.Foster (eds), Philadelphia, Saunders, -1992.-P.1255-1333.

166. Valerius N.H., Hausen N.E. et al. Neutrophil and lymphocyte function in patients with diabetes mellitus. //Acta Med:Scand-1982-V.21 l-P.463-467.

167. Vartivarian S.E. Virulence properties & nonimmune pathogenic mechanisms of fungi. //Clin.Infec.Diseases.- 1992. -V.14. -Jfe 1, suppl.-P.30-36.

168. Wildhaber T.L., Soltys R.C., Kitz D.L. Cytokine enhancement of immune response in diabetic mice to opportunistic fungal pathogens. //Trans.III, State Acad.Sei- 1993, № 86, P.53.

Информация о работе

Герасимова, Елена Владимировна
кандидата медицинских наук
Москва, 2011
ВАК 03.02.03

Диссертация

Грибы родов Candida и Saccharomyces в фекальном микробиоценозе пациентов с сахарным диабетом - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы