Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Молекулярно-генетическая характеристика клинических штаммов Staphylococcus aureus у больных фурункулом челюстно-лицевой области
ВАК РФ 03.02.03, Микробиология
Автореферат диссертации по теме "Молекулярно-генетическая характеристика клинических штаммов Staphylococcus aureus у больных фурункулом челюстно-лицевой области"
ФАЙЗУЛЛИНА ГУЗЕЛЬ АХТЯМОВНА
МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА КЛИНИЧЕСКИХ ШТАММОВ STAPHYLOCOCCUS AUREUS У БОЛЬНЫХ ФУРУНКУЛОМ ЧЕЛЮСТНО-ЛИЦЕВОЙ ОБЛАСТИ
03.02.03 - «Микробиология» 14.01.14 - «Стоматология»
АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук
О з И А Р.,2011
УФА-2011
4856407
Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Башкирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию».
Научные руководители: доктор медицинских наук, профессор
Мавзютов Айрат Радикович; доктор медицинских наук, профессор Мингазов Гайдар Гилязович
Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор
Калуцкий Павел Вячеславович;
доктор медицинских наук, профессор Мирсаева Фания Зартдиновна
Ведущая организация - - Государственное образовательное учреждение
нии Объединенного диссертационного Совета ДМ 208.006.05 при Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Башкирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» по адресу: 4500 Щ г. Уфа, ул. Ленина, 3.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Башкирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию».
высшего профессионального образования «Московский государственный медико-стоматологический университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»
Защита диссертации состоится «28» февраля 2011 г. в часов на заседав
Автореферат разослан «_> января 2011 г.
Учёный секретарь диссертационного совета
Лукманова К.А.
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность проблемы
Актуальность проблемы фурункула в практике челюстно-лицевого хирурга связана с широкой распространенностью указанной патологии среди пациентов с гнойно-воспалительными заболеваниями, которые занимают одно из ведущих мест в структуре хирургических болезней, несмотря на повсеместно проводимые оздоровительные и профилактические мероприятия. Научно-практический интерес к данной проблеме обусловлен высокой частотой внутричерепных осложнений фурункула челюстно-лицевой области (4JIO) (5-14 % случаев), что связывают с недостаточной исследованностью этиопатогенетиче-ских взаимосвязей данной нозологии [Багаутдинова В.И., 2004; Бобров В.М., 2005; Вернадский Ю.И., 2007].
В качестве основных предикторов, определяющих формирование фурункула, рассматривают нарушения эндокринной, иммунной систем организма, но наиболее значимыми из них считают особенности микрофлоры [Сетдикова Н.Х. и др., 2000; Галкина Т.С. и др., 2001; Гурьев В.Н., 2003; Бабушкин A.A., 2004; Волкова E.H. и др., 2004; Кабаева Т.И. и др., 2004; Мохаммед К.С., 2004; Дашкова H.A. и др., 2006]. Последнее, объясняет необходимость более детального исследования биологических свойств возбудителя, что позволит проводить эффективную этиотропную и патогенетическую терапию.
Учитывая, что основными факторами в этиологии фурункула являются условно-патогенные микроорганизмы, в ходе диагностики всегда встает проблема оценки их этиологической значимости. До настоящего времени при этом оценивались фенотипические признаки, которые могли варьировать в широких пределах. В этой связи представляется актуальной и своевременной молекуляр-но-генетическая характеристика патогенного потенциала выделяемой при фурункуле челюстно-лицевой области микрофлоры.
Селекция культур с этиологически значимыми при фурункуле признаками, безусловно, происходит под давлением факторов иммунитета макроорганизма,
поэтому представилось оправданным рассмотрение указанных выше вопросов в контексте с клинико-иммунологическими особенностями течения фурункула челюстно-лицевой области.
Цель исследования
Молекулярно-генетическая характеристика микрофлоры фурункула челюстно-лицевой области, оценка сопряженных с этим клинико-иммунологических особенностей заболевания для адекватной коррекции выявленных нарушений.
Задачи исследования
1 Исследовать микробиологический пейзаж кожи, раневого отделяемого и слизистой оболочки переднего отдела носа и зева больных фурункулом челюстно-лицевой области.
2 Молекулярно-генетическая характеристика клинических штаммов Staphylococcus aureus, выделенных при фурункуле челюстно-лицевой области.
3 Установить клинико-эпидемиологические особенности фурункула че-люстно-лицевой области.
4 Оценить иммунологический статус больных фурункулом челюстно-лицевой области и установить особенности, предрасполагающие к развитию указанного заболевания.
5 Провести комплексную клиническую оценку эффективности иммуномоду-лятора «Бестим» в терапии больных фурункулом челюстно-лицевой области на основании результатов исследований микрофлоры и оценки иммунного статуса.
Научная новизна исследования
Впервые при фурункуле челюстно-лицевой области выявлены фрагменты ДНК, специфичные соответствующим детерминантам факторов патогенно-сти S. aureus.
Наиболее распространенными генетическими маркерами этиологической значимости S. aureus, выделенных при фурункуле 4JIO, по результатам исследования, являются фрагменты ДНК метициллин-резистентности (MRSA), цито-
литического токсина Рап1оп-Уа1еп1ше лейкоцидина (РУЬ-Р) и энтеротоксина С (ЭЕСЗ) (р<0,05).
Впервые исследована эпидемиология фурункула челюстно-лицевой области в г. Уфе.
Впервые для иммунокоррегирующей терапии патогенетически обосновано и предложено включение в схему комплексного лечения больных фурункулом челюстно-лицевой области иммуномодулятора «Бестим».
Практическая значимость работы
Впервые у больных фурункулом челюстно-лицевой области определены и предложены для типирования культур и молекулярно-генетической оценки их этиологической значимости генетические маркеры (МЯБА, РУЬ-Р, БЕСЗ) Б.аигеиэ.
На основании клинико-иммунологического и микробиологического мониторинга установлена эффективность препарата «Бестим» в комплексном лечении больных фурункулом челюстно-лицевой области.
Внедрение результатов исследования в практику
Результаты исследования внедрены в практическую деятельность отделения челюстно-лицевой хирургии МУ «Городская клиническая больница № 21» Городского округа г. Уфа. Основные положения диссертации используются в учебном процессе при проведении практических занятий у студентов и курсантов на кафедрах хирургической стоматологии и челюстно-лицевой хирургии, лабораторной диагностики ИПО ГОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет Росздрава».
Положения, выносимые на защиту
1 Особенность микробиоценоза больных фурункулом челюстно-лицевой области, заключается в появлении патогенных штаммов Б.аигеиз, несущих фрагменты ДНК метициллин-резистентности (МЯвА), Раг^оп-Уакпйпе лейкоцидина (РУЬ-Р), энтеротоксина С (вЕСЗ). Для установления этиологической значимости микрофлоры оптимальной является полимеразная цепная реакция.
2 Иммунный статус больных фурункулом челюстно-лицевой области характеризуется дисбалансом Т-клеточного (CD3+), гуморального (IgA, IgG) звеньев системы иммунитета и подавлением поглотительной активности фагоцитирующих клеток.
3 Применение препарата «Бестим» в комплексном лечении фурункула челюстно-лицевой области положительно влияет на состояние клеточных и гуморальных факторов иммунной системы, а также повышает эффективность терапевтических мероприятий при данной патологии.
Апробация работы
Материалы диссертационной работы представлены на Международных, Всероссийских, региональных научно-практических конференциях: XII Международной научной конференции и III Международной научной онкологиче- • ской конференции «Здоровье семьи — XXI век, онкология — XXI век» (Пермь, 2008); 73-й итоговой Республиканской научной конференции студентов и молодых ученых Республики Башкортостан (Уфа, 2008); II Международной студенческой научной конференции с участием молодых ученых «Клинические и теоретические аспекты современной медицины» (Москва, 2010); VII Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Молекулярная диагностика - 2010» (Москва, 2010); II ежегодном Всероссийском конгрессе по инфекционным болезням (Москва, 2010); Всероссийской научно-практической конференции «Актуальные вопросы стоматологии» (Уфа, 2010); Республиканской конференции молодых ученых Республики Башкортостан с международным участием «Медицинская наука - 2010», посвященной Году Республики, Дню Медицинского работника (Уфа, 2010).
Диссертация доложена и обсуждена на совместном заседании кафедр лабораторной диагностики ИПО, фундаментальной и прикладной микробиологии, оториноларингологии, стоматологии и челюстно-лицевой хирургии ИПО, госпитальной педиатрии и ЦНИЛ Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Башкирский государственный ме-
дицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» (протокол от «17» ноября 2010 г. № 87).
Диссертация апробирована на заседании Объединенного диссертационного совета ДМ 208.006.05 при Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Башкирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» (протокол от «29» декабря 2010 г. № 7).
Соответствие диссертации паспорту научной специальности
Научные положения диссертации соответствуют формуле специальностей 03.02.03 — «Микробиология», 14.01.14 - «Стоматология» (медицинские науки). Результаты проведенного исследования соответствуют области исследования данных специальностей, конкретно пунктам 2 и 3 паспорта микробиологии и пункту 3 - стоматологии.
Публикации
По материалам диссертации опубликовано 11 научных работ, в том числе 3 -в рецензируемых изданиях, рекомендованных Высшей аттестационной комиссией Министерства образования и науки Российской Федерации для публикации основных результатов диссертаций на соискание ученой степени кандидата медицинских наук.
Объем и структура диссертации
Диссертационная работа изложена на 120 страницах текста, содержит 20 таблиц, 17 рисунков. Она состоит из введения, обзора литературы (одна глава), собственных исследований (5 глав), заключения, выводов, практических рекомендаций, списка использованной литературы. Список литературы содержит 194 источника (98 - отечественных и 96 - зарубежных).
Работа выполнена в соответствии с федеральной целевой программой «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 гг., в рамках реализации мероприятия 1.2.1. Государственный контракт № П 385 от 30 июля 2009 г.
СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ
Материалы и методы исследования
В соответствии с поставленной целью и задачами были выделены следую-
щие основные этапы исследования
Этапы и задачи исследования Объект и объем исследования Методы исследования
Микробиологическое исследование отделяемого раны, слизистой оболочки переднего отдела носа, зева и кожи ЧЛО Материал (отделяемое фурункула, слизистой оболочки носа, зева и кожи лица) 45 больных фурункулом ЧЛО, 26 человек контрольной группы Бактериоскопические и бактериологические методы
Молекулярно-генетическое исследование клинических изолятов S. aureus ПЦР
Анализ встречаемости фурункулов среди общего числа гнойно-воспалитсльных заболеваний 931 «медицинская карта стационарного больного» (форма №003/у) Статистическая обработка данных
Обследование контрольной группы лиц 26 практически здоровых лиц Общеклинические, клинико-лабораторные, иммунологические методы исследования
Обследование больных основной группы 45 больных фурункулом ЧЛО
Анализ результатов лечения, выбор наиболее информативных показателей для оценки эффективности лечения 45 больных фурункулом ЧЛО традиционная терапия (п=22), введение препарата «Бестим» (п=23) Статистическая обработка данных с помощью пакета программ Statistica 6 for Windows
Исследован материал от 71 пациента, поступившего на стационарное лечение в Республиканский центр челюстно-лицевой хирургии ГКБ № 21 в 2008 году. Из них 45 больных фурункулом челюстно-лицевой области составили основную группу и 26 практически здоровых лиц, не страдающие фурункулом, — контрольную.
Пробы биоматериала больных для исследования брались: из гнойного очага — основная проба, слизь из зева, слизь переднего отдела полости носа, с поверхности кожи в области фурункула.
Микробиологические методы исследования включали качественную и количественную (КОЭ/мл) оценку микрофлоры. Идентификацию микроорганизмов осуществляли по морфологическим, биологическим и биохимическим признакам в соответствии с нормативными документами. Идентификация выделенных этиологически значимых микроорганизмов проводилась на микроанализаторе АТВ «Expression» («BioMerieux», Франция). У выделенных культур микроорганизмов определялись чувствительность к антибактериальным препаратам дискодиффузионным методом к 12 антибиотикам различных групп в соответствии с положениями МУК 4.2.1890-04.
Компьютерный анализ нуклеотидных последовательностей, полученных посредством Интернета в обновляемых версиях «GenBank» для подбора прай-меров и оптимальных условий для ПЦР, сайтов эндонуклеаз рестрикции, выравнивания сиквенсов, проводили с помощью пакета компьютерных программ Lasergene (DNASTAR, Inc., США) с использованием IBM-совместимых персональных компьютеров. Молехулярно-генетическое исследование клинических штаммов S.aureus осуществлялось с помощью полимеразой цепной реакции (ПЦР) на амшшфикаторе MC-16 («ДНК-технология», Россия).
Наряду с указанным всем больным проводилось комплексное обследование, включавшее клинические, инструментальные и лабораторные методы исследования. Общеклиническое обследование проводилось традиционными методами и включало сбор анамнеза заболевания, оценку общего и локального статуса. Клинико-лабораторное обследование проводилось в соответствие с медико-экономическими стандартами (МЭС).
Иммунологические исследования проводили на основе комплекса стандартизированных тестов, включающих оценку: концентрации иммуноглобулинов основных классов (А, М, G) в сыворотке крови методом гетерогенного твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА) («Вектор-Бест», Россия) [Фримель Г., 1987]; фагоцитирующей активности нейтрофилов в тесте с латексом, размером 1,5-2 мкм (ВНИИ биологического приборостроения, Россия) [Федосеева В.Н., 1993]; уровня циркулирующих иммунных комплексов методом преципитации
в 3,5% полиэтиленгликоле (ПЭГ) с молекулярным весом 6000 (ФРГ) [Гудина Р.В., 1988]; содержания иммунокомпетентных клеток (CD3+; CD4+; CD8+) методом непрямой иммунофлюоресценции с использованием моноклональных антител и антимыщиных иммуноглобулинов, меченных флуоресцеинизотиоцианатом (ФИТЦ) («Сорбент», Россия). Иммунологический мониторинг проводился всем больным на 1 и 15 сутки лечения.
При выявлении нарушений в различных звеньях системы иммунитета в базисный комплекс терапии больных фурункулом 4JIO, был включен иммуномо-дулятор «Бестим», вводимый по схеме, рекомендуемой производителями: один раз в сутки внутримышечно в терапевтической дозе 100 мкг, курс лечения составил 5 инъекций.
Лекарственный препарат «Бестим» (у-О-глутамил-Ь-триптофан натриевая соль) разработан в Гос. НИИ ОЧБ, г. С-Петербурга. «Бестим» разрешен МЗ РФ для медицинского применения и промышленного выпуска, регистрационное удостоверение № 003335/03 от 01.06.2004 г.
Статистическую обработку результатов исследования проводили с помощью пакета программ Statistica 6.0 for Windows. Предварительный анализ данных включал проверку на гомогенность с использованием критерия Фишера и нормальность распределения выборок ио Колмогорову-Смирнову. Для количественных данных в независимых группах применялся t-критерий Стьюдента, сравнение качественных переменных проводилось с применением критерия %г с коррекцией по Йетсу. Для статистического анализа по малым группам использовали методы непараметрической статистики: тест Манна-Уитни, парный тест Уилкоксона и ранговый дисперсионный анализ по Краскел-Уоллису [Зайцев В.М., 2006; Герасимов А.Н., 2007; Котов Ю.Б., 2007].
Результаты собственных исследований и их обсуждение
Для оценки роли микробного фактора в развитии фурункула челюстно-лицевой области проведено исследование видового и количественного состава микрофлоры раневого отделяемого гнойно-некротических очагов 45 больных основной группы.
В результате бактериологического исследования биоматериала больных фурункулом установлено, что микрофлора раневого отделяемого в 86,6 % случаев представлена S. aureus в виде монокультуры. В 9,0 % случаев в ассоциации со S. epidermidis, в 4,4 % - со S. saprophyticus. Микробная обсемененность составила: S. aureus - 16,7±7,5x10s КОЕ/мл; S. epidermidis - 7±2,Зх103 КОЕ/мл; S. saprophytics-2,1±0,8x103 КОЕ/мл.
В ходе исследования вирулентных свойств S.aureus, выделенных из раневого отделяемого больных основной группы, выявлено, что все штаммы обладали выраженными патогенными свойствами: 100 % культур вызывали гемолиз эритроцитов, продуцировали фибринолизин и лецитовителазу (97,6±3,9 %). В 85,4±4,6 % случаев коагулировали плазму, интенсивно разрушали гиалуроно-вую (100 %) и дезоксирибонуклеиновую кислоту (75,6±5,1 %). В 92,7±2,8 % случаев проявляли способность редуцировать нитраты. При этом подавляющее количество штаммов (75,6 %) обладали всеми изученными характеристиками.
Анализ микробиологического статуса окружающих тканей показал наличие высокой плотности колонизации S. aureus (10s—i О7 КОЕ/мл) слизистой оболочки носовых ходов у 33 (73,3 %), зева у 36 (80 %) и кожи лица у 32 (71Д %) больных фурункулом челюстно-лицевой области, существенно превышающий уровень данного состояния в группе клинически здоровых лиц 4 (15,4 %), 4 (15,4 %), 3 (11,5 %) соответственно (рисунок 1).
100,0%-80,0%' 60,0%-40,0%-
го, 0%-0,0%-
Рисунок 1 - Частота изоляции S. aureus из различных участков организма у больных фурункулом челюстно-лицевой области
При исследовании фенотипических свойств S. aureus, вегетирующих на слизистой оболочке носа и зева установлена их выраженная патогенность и схожесть с характеристиками штаммов раневого отделяемого фурункула, что свидетельствует об этиологической значимости S. aureus, колонизирующих носоглотку, в развитии заболевания (р<0,05).
Определение спектра антибиотикорезистентности S.aureus выявило окса-циллин-чувствительность в 98,1 % случаев.
По результатам бактериологического исследования секрета слизистой оболочки носоглотки и кожи лица больных контрольной группы выявлено, что микрофлора в 88,5 % случаев представлена S. saprophytics и S. epi-dermidis. Плотность обсемененности поверхности кожи лица S. saprophytics составила 2,5±1,4х104 КОЕ/мл, S. epidermidis - 6,0±0,3х104 КОЕ/мл, дрожже-подобными грибами рода Candida spp. — 3,5±1,5х106 КОЕ/мл, S. aureus -4,2±2,3х104 КОЕ/мл.
В результате проведенных в последние годы исследований было установлено, что в основе патогенеза ряда заболеваний лежит способность возбудителей экспрессировать целый ряд других факторов патогенности. В этой связи нами проводилось выявление фрагментов ДНК S. aureus, специфичных соответствующим детерминантам факторов патогенности, у больных фурункулом челюстно-лицевой области.
Для решения поставленной задачи, были подобраны праймеры к ряду генетических маркеров факторов патогенности (sea, seb, sec, tst, LukS-PV, LukF-PV, agr, mecA, hemM) клинических штаммов S.aureus (таблица 1).
Тестирование на наличие фрагментов ДНК, специфичных соответствующим детерминантам факторов патогенности клинических штаммов S.aureus, выделенных у больных основной и контрольной группы осуществлялось с помощью полимеразно-цепной реакции.
Таблица 1 — Наборы праймеров для идентификации генов sea, seb, sec, tst,
LukS-PV, LukF-PV, agr, IcaA, mecA, hemM
№ № Ген Праймер Олигонуклеотидная последовательность (5'-3') Размер продукта, п.н.
1 SEA F:5'-ATGTATGGAGGTGTAACGTTACATG-3' R: 5 ' -TGT AG A AGT ATG A A ACACG ATTAATCC-3 ' 370
2 LukS-PV F: 5 '-AATATTGGTGATGGCGCTGAG-3 ' R: 5 '-TACCTCCTGTTGATGGACCACT-3 ' 360
3 LukF-PV F: 5 '-GTTGATGCAGCTCAACATATCAC R: 5 ' -T ATCTCC ACC AT A AG A AT A ACCT ACC-3 ' 373
4 Agr F: 5'-TAGGCAGTGAAATTCGTAAGCA-3' R: 5 '-СATACACTGAATTACTGCCACGT-3 ' 248
5 SEB F: 5'-ATACTTTTTGGGAATGTTGGATA-3' R: 5 '-AAGTTTTTCGTTTGTCAGTTTG-3 ' 454
6 SEC3 F: 5 '-AGCAAAGAAGTACAAAGATGAAGT-3 ' R: 5 '-AAAAGGCAAGCACCGAAGTA-3 ' - 578
7 TSST F: 5'-ATGGCAGCАТСAGCTTGATA-3' R: 5'-TTTCCAATAACCACCCGTTT-3 ' 350
8 IcaA F: 5 '-GATTATGTAATGTGCTTGGA-3 ' R: 5 '-ACTACTGCTGCGTTAATAAT-3 ' 770
9 MecA F: 5 '-ACGAGTAGATGCTC AATAT A A-3 ' R: 5 ' -CTTAGTTCTTTAGCGATTGC-3 ' 293
10 HemM F: 5 '-AGCAGCGTCCATTGTGAGA-3' R: 5 ' -ATTCTCAGATATGTGTGG-3 ' 759
Молекулярно-генетическое исследование гнойного отделяемого в основной группе больных позволило выявить наиболее распространенные генетические маркеры факторов патогенности клинических штаммов S. aureus, в частности, фрагменты ДНК метициллин-резистентности (MRSA, в 58,54 % случаев); цитолитического токсина Panton-Valentine лейкоцидина (PVL-F), биологический эффект которого определяется действием двух отдельных экзопротеинов — S (lukS-PV в 19,5 1%) и F (lukF-PV в 58,54 % случаев) компонентами; а также энтеротоксина С (SEC3, в 41,46 %) (таблица 2).
Таблица 2 — Частота встречаемости ряда фрагментов генов патогенности
S. aureus, выделенных из различных источников (п=45)
Генетические маркеры патогенности S. aureus Отделяемое раневое (n=41) Отделяемое носа (n=33) Отделяемое зева (п=36) Отделяемое кожи (п=32)
абс. <%) абс. (%) х2 абс. (%) х2 абс. (%) х2
SEA 0 (0) 0 (0) - 0 (0) - 0 (0) -
LukS-PV 8 (19,51) 5 (15,15) 0,0338, р=0,8558 6 (16,67) 0,0012, р=0,9792 7 (21,88) 0,0005, р=1,00
LukF-PV 24 (58,54) 7 (21,21) 8,98*, р=0,0036 6 (16,67) 12,42*, р=0,0011 7 (21,88) 8,44*, р=0,0046
Agr 16 (39,02) 19 (57,58) 1,83, р=0,1761 32 (88,89) 18,23», р=0,0005 21 (65,63) 4,08*, р=0,0435
SEB 0 (0) 0 (0) - 0 (0) - 0 (0) -
SEC3 17 (41,46) 6 (18,18) 3.60, р=0,0577 3 (6,67) 9,29*, р=0,0032 2 (6,25) 9,82*, р=0,0026
TSST 1 (2,44) 1 (3,03) 0,0005, р=1,00 1 (2,78) 0,0005, р=1,00 1 (3,13) 0,0005, р=1,00
IcaA 0 (0) 3,03 (1) 0,01, р=0,9137 1 (2,78) 0,0047, р=0,9486 1 (3,13) 0,02, р=0,9013
MecA 24 (58,54) 17 (51,51) 0,042 р=0,1532 19 (52,78) 0,001 р=0,1712 17 (53,13) 0,05 р=0,1402
* Различие со значениями показателей раневого отделяемого статистически значимо (р<0,05).
Сопоставление частоты встречаемости генетических маркеров патогенности (LukS-PV, TSST, МесА) S.aureus раневого отделяемого и штаммов, колонизирующих слизистую оболочку носоглотки и кожи лица, позволило констатировать их совпадение.
В тоже время для частот встречаемости генетических маркеров S. aureus: PVL, энтеротоксина СЗ и регулятора синтеза MRSA (Agr), характерна статистически значимая обратная связь - при повышенной выявляемое™ перечисленных фрагментов ДНК S. aureus в гнойном отделяемом отмечалось их снижение в других изучаемых областях. Так, найдены значимые различия для LukF-PV, кодирующего синтез экзопротеина F цитолитического токсина
Panton-Valentine лейкоцидина, а также для гена SEC3, кодирующего синтез стафилококкового энтеротоксина. Частота встречаемости штаммов S. aureus гнойного отделяемого с фрагментом ДНК LukF-PV, SEC3 статистически значимо выше, чем в слизистой оболочке переднего отдела носа, зева и кожи лица (р<0,05). Однако, частота встречаемости штамма с Agr в гнойном отделяемом ниже, чем в слизистой оболочке носоглотки и кожных покровов (р>0,05), (р<0,05), (р<0,05) соответственно. В контрольной группе также выявлены указанные варианты S. aureus с частотой 15,4 % со слизистой оболочки носа и зева, 11,5 % случаев — с кожных покровов лица.
С целью оценки частоты и структуры заболеваемости фурункулом челюст-но-лицевой области нами был проведен анализ 931 «медицинской карты стационарного больного» (форма № 003/у) с фурункулами 4JIO Республиканского центра челюстно-лицевой хирургии ГКБ № 21 г. Уфы, РБ за период 2004-2007 гг.
Динамика заболеваемости фурункулом челюстно-лицевой области среди населения г. Уфы за наблюдаемые годы (2004—2007 гг.) характеризовалась различной направленностью линии тренда. С 2004 по 2006 гг. она имела выраженную неблагоприятную тенденцию. С 2006 года в динамике заболеваемости наметилась тенденция к снижению (р<0,05). За наблюдаемые годы выявление фурункула отмечалось как среди женщин - 400 (42,9 %) случаев, так и среди мужчин — 531 (57,1 %). Изучение частоты встречаемости больных фурункулом ЧЛО, при помощи однофакторного дисперсионного анализа с расчетом критерия Фишера, показал, что наибольшее количество больных фурункулом наблюдается в возрастной группе от 15 до 30 лет (F = 66,9-75,79, р<0,001). Уровень заболеваемости среди них, статистически значимо, превосходил значения в возрастных группах 30-40 лет (F = 15,8, р<0,01) и 40-50 лет(Р = 8,2-8,7, р<0,05).
Для определения степени воздействия на характеристики микробиоценоза кожи, секрета слизистой оболочки носоглотки различных экзо- и эндогенных факторов нами из анамнестических данных проанализированы социально-гигиенические и медико-биологические особенности пациентов двух групп.
Средний возраст больных в основной группе составил (24,9±11,43) лет, в контрольной группе - (25,27±9,30) лет (р>0,05). Мужчины составляли 55,6 % больных, женщины - 44,4 %. В возрасте 15-30 лет было 35 (77,8 %) больных, 30-40 лет - 7 (15,6 %), старше 40 лет - 3 (6,7 %) больных. Обследуемые группы были идентичны по возрастному и половому признаку (р>0,05).
В ходе проведенных исследований было установлено, что большинство больных фурункулом работали в закрытых помещениях. Больные не работали на «вредных» производствах и не занимались физическим трудом. Это были учащиеся и лица, относящиеся к категории служащих.
Преимущественное большинство пациентов 24 (53,3 %) не знали причины заболевания и рецидива, 13 (29,0 %) больных указывали на переохлаждение, 6 (13,3 %) - на неудовлетворительную личную гигиену, 3 (4,4 %) — на нарушение диеты.
При анализе состояния здоровья больных фурункулом челюстно-лицевой области в анамнезе при сравнении со здоровыми пациентами статистически значимо чаще встречались заболевания органов дыхания (хронический тонзиллит, хронический верхнечелюстной синусит, хронический фарингит) и пищеварения (хронический гасгродуоденит, дисбактериоз кишечника, язвенная болезнь желудка и 12-перстной кишки, хронический холецистит) (р<0,01).
Клинически фурункул челюстно-лицевой области характеризовался болезненным инфильтратом кожи лица различной локализации, с более или менее выраженными симптомами интоксикации. При этом имело место увеличение среднего содержания лейкоцитов (р>0,05), нейтрофилов периферической крови (р<0,05), лимфоцитопения (р<0,05), ускорение СОЭ (р<0,05), свидетельствуя об остром воспалительном процессе.
Исследование иммунологического профиля проводилось в двух группах больных фурункулом челюстно-лицевой области: в 1-ю группу вошли 22 пациента с острым фурункулом, 2-ю группу составили 23 пациента с хроническим рецидивирующим течением. В том же объеме проводилось обследование здоровых пациентов группы контроля.
В результате проведенного исследования установлено статистически достоверное снижение средних показателей относительного количества лимфоцитов у больных острым и хроническим рецидивирующим фурункулом (24,14±2,66 %; 23,61±2,48 % соответственно) относительно лиц контрольной группы (28,88±2,67 %) (р<0,001). При сопоставлении средних значений СОЗ+-, С04+-, С08+-лимфоцитов больных отмечалось статистически значимое снижение содержания СОЗ+-клеток (в первой группе — 49,68±4,91 % и 1,06±0,15; во второй - 49,87±4,5 % и 0,99±0,29) относительно группы контроля (66,65±7,58 % и 1,30±0,27) (р<0,001). Фагоцитарная активность нейтрофилов у больных основной группы (в первой группе — 50,50±4,92 %; во второй — 52,96±4,86 %) была ниже контрольного уровня (57,62±5,87 %) (р<0,001). Среднее значение уровня ЦИК при фурункуле (в первой группе - 39,68±10,85 ед.опт.пл.; во второй — 42,30±12,51 ед.опт.пл.) достоверно повышалось относительно данных здоровых лиц (23,12±6,70 ед.опт.пл.) (р<0,002).
Определение исходных сывороточных уровней иммуноглобулинов А, М, О показало, что у больных фурункулом челюстно-лицевой области наблюдалось достоверное снижение содержания ^А (в первой группе — 1,44±0,39 г/л; во второй группе — 1,40±0,33 г/л) относительно контроля (1,99±0,37 г/л) (р<0,05), что свидетельствовало об ослаблении механизмов иммунной защиты слизистых оболочек, в т.ч. носоглотки. При этом содержание ^М, как правило, увеличивающееся при острых воспалительных процессах, у больных обеих исследуемых групп существенно не отличалось от показателей контрольной группы (р>0,05), однако, установлено статистически значимое увеличение концентрации (14,45±3,53 г/л) в группе больных с хроническим рецидивирующим течением фурункула челюстно-лицевой области по сравнению с контролем (10,17±1,73 г/л) (р<0,05).
Полученные нами данные свидетельствуют о мобилизации факторов защиты на дисбиатический процесс в микроэкосистеме кожи, полости носа и зева, наблюдающийся при фурункуле ЧЛО, однако некоторые показатели сигнализируют об угнетении механизмов естественной защиты, что и нашло свое отражение в низких значениях основных тестов естественной резистентности.
9 настоящее время известно, что частые рецидивы фурункула, служащие маркерами иммунных нарушений, требуют выработки общепризнанных единых взглядов на возможность их коррекции. В этой связи нами проведена сравнительная оценка эффективности терапии фурункула в соответствие со стандартной схемой и при использовании лекарственного препарата, направленного на восстановление дисбаланса иммунной системы.
В зависимости от проводимой терапии больные фурункулом челюстно-лицевой области были разделены на две клинические группы. 1-ю группу составили больные, страдающих острым фурункулом (п=22), которые получали традиционное лечение. 2-ю группу сформировали больные хроническим рецидивирующим течением фурункула (п=23), которым дополнительно к традиционному лечению был назначен иммуномодулятор «Бестим», вводимый по схеме, рекомендуемой производителями. 1 Динамика изменений отдельных иммунологических параметров до и после лечения представлена в таблице 3.
Таблица 3 — Сопоставление значений некоторых иммунологических показа-
телей у больных фурункулом челюстно-лицевой области до и после лечения
Параметр До лечения После лечения
1-я группа (п=22) 2-я группа (п=23) 1-я группа (п=22) 2-я группа (п=23)
Лимфоциты (л): % Абс. 24,14±2,66 2,16±0,32 23,61±2,48 2,17±0,29 24,77±2,76 2,31±0,27 26,17±2,93** 2,69±0,42**
СБЗ+: % Абс. 49,68±4,91 1,06±0,15 49,87±4,50 0,99±0,29 50,86±5,14 1,09±0,25 68,04±6,39** 1,35±0,22**
СЭ4+: % Абс. 41,55±3,90 0,43±0,10 41,04±3,11 0,83±0,17 40,23±2,02 0,49±0,10 43,61±1,80** 0,93±0,13*
С08+: % Абс. 24,64±1,81 0,26±0,11 24,61±1,99 0,58±0,12 23,95±1,46 0,23±0,09 27,00±1,62** 0,73±0,13*
Фагоцитоз, % 50,50±4,92 52,9б±4,86 52,23±3,52 58,74±4,80**
ЦИК, у .е. 39,68±10,85 42,30±12.51 35,73±6,53 29,35±9,15**
^А, г/л 1,44±0,39 1,40±0,33 1,50±0,25 1,79±0,31*
г/л 1,19±0,39 1,26±0,39 1,27±0,31 1,32±0,34
ДО, г/л 12,21±3,10 14,45±3,53 12,94±2,66 13,25±3,40
* Различие с показателями до лечения статистически значимо (р<0,05).
** Различие с показателями до лечения статистически значимо (р<0,005).
В результате проведенного исследования установлено увеличение средних значений относительного и абсолютного числа лимфоцитов у больных фурункулом лишь после иммунокоррегирующей терапии относительно начала лечения (р<0,005).
Из таблицы 3 следует, что средние значения СОЗ+-, СБ4+-, С08+-лимфоцитов больных до и после лечения статистически значимо увеличиваются в процентном и абсолютном выражении после терапии препаратом «Бестим» (р<0,05), свидетельствуя об активации клеточного звена иммунитета.
Результаты измерения уровня фагоцитарной активности нейтрофилов выявили значимое повышение значения показателя в группе больных с иммуно-коррекцией относительно параметров до лечения (р<0,005).
Среднее содержание ЦИК у больных, получавших иммуномодулирующий препарат, статистически значимо понижалось относительно его значения в начале лечения (р<0,005).
Изучение динамики сывороточных уровней 1§А, ^М, ^О показало, что после лечения наблюдалось статистически значимое повышение содержания ^А во 2-й группе больных относительно значений показателей до лечения (р<0,05), косвенно отражая улучшение состояния слизистых оболочек. Статистически значимых изменений уровней и ^М после соответствующей терапии выявлено не было (р>0,05).
При исследовании микробиологического статуса отмечена положительная динамика в изменении общего микробного числа секрета слизистой оболочки носоглотки в группе больных с иммуномодулирующей терапией, которое монотонно уменьшалось от 1-го к 5-му дню лечения (р<0,01).
Таким образом, учитывая современные аспекты патогенеза данной нозологии и особенности препарата «Бестим», можно говорить об иммунопатогенети-чески обоснованной терапии, что позволит улучшить результаты лечения и уменьшить риск развития рецидивов.
выводы
1 Бактериальная флора кожи (в 71,1 %), раневого отделяемого (в 91,1 %), слизистой оболочки переднего отдела носа (в 73,3 %) и зева (в 80 %) больных фурункулом челюстно-лицевой области представлена преимущественно S.aureus в высокой степени микробной обсемененности (Ю5-107КОЕ/мл).
2 Наиболее распространенными генетическими маркерами клинических штаммов S. aureus, выделенных при фурункуле челюстно-лицевой области, являются фрагменты ДНК метициллин-резистентности (MRSA), цитолитического токсина Panton-Valentine лейкоцидина (PVL-F) и энтеротоксина С (SEC3).
3 Наиболее высокий уровень заболеваемости фурункулом челюстно-лицевой области1 отмечен среди мужчин в возрастной группе от 15 до 30 лет (р<0,001), из категории учащихся и служащих, имеющих в анамнезе сопутствующую патологию органов дыхания и пищеварения.
4 К особенностям иммунологической реактивности больных фурункулом челюстно-лицевой области относится: лимфопения, снижение уровня общих Т-лимфоцитов (CD3+), подавление фагоцитарной активности нейтрофилов, селективная недостаточность иммуноглобулина А и увеличение концентрации иммуноглобулина G в группе больных с хроническим рецидивирующим течением (р<0,05).
5 Комплексная терапия больных фурункулом челюстно-лицевой области с включением иммуномодулятора «Бестим», способствует активации клеточного и фагоцитарного звена иммунитета; повышению содержания иммуноглобулина А в крови и снижению уровня микробной колонизации слизистой оболочки носоглотки.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
1 В качестве эпидемиологически значимых маркеров патогенности клинических штаммов S. aureus при фурункуле челюстно-лицевой области могут выступать фрагменты ДНК метициллин-резистентности (MRSA), цитолитического токсина Panton-Valentine лейкоцидина (PVL-F) и энтеротоксина С (SEC3), для детекции которых рекомендуется применение полимеразной цепной реакции.
2 Для прогнозирования риска рецидивирования фурункула челюстно-лкцевой области целесообразно включение в комплекс обследования больных фурункулом челюстно-лицевой области определения состава и биологических свойств микрофлоры носоглотки на наличие факторов патогенности.
3 У больных фурункулом челюстно-лицевой области рекомендуется применение иммуномодулятора «Бестим», вводимого по схеме, один раз в сутки внутримышечно в терапевтической дозе 100 мкг, на курс 5 инъекций в период ранней реконвалесценции.
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
1 Файзуллина, Г.А. Анализ распространенности фурункулеза в структуре гнойно-воспалительных заболеваний челюстно-лицевой области / Г.А. Файзуллина, Г.Г. Мингазов // Вопросы теоретической и практической- медицины: материалы 73-й Итоговой Республиканской научной конференции студентов и молодых ученых. - Уфа, 2008. - Т. 2. - С. 75-77.
2 Фурункулез в структуре гнойно-воспалительных заболеваний челюстно-лицевой области / Г.А. Файзуллина, А.Р. Мавзютов, Г.Г. Мингазов и др. // Медицинский вестник Башкортостана. - 2008. - Т. 3, № 5. - С. 286-287.
3 Файзуллина, Г.А. Комплексные механизмы развития хронического рецидивирующего фурункулеза / Г.А. Файзуллина, A.M. Сулейманов // Медицинский вестник Башкортостана. - 2008. - Т. 3, № 5. - С. 289-290.
4 Мавзютов, А.Р. Анализ распространенности фурункулеза челюстно-лицевой области у жителей Республики Башкортостан / А.Р. Мавзютов, Г.Г. Мингазов, Г.А. Файзуллина // Здоровье семьи - XXI век, онкология -XXI век: материалы XII Международной научной конференции и III Международной научной онкологической конференции. - Пермь, 2008. - Часть II. - С. 5-8.
5 Файзуллина, Г.А. Особенности микрофлоры раневого отделяемого при фурункулезе челюстно-лицевой области / Г.А. Файзуллина, А.Р. Мавзютов // Инфекционные болезни. - 2010. -№ 1. - С. 335-336.
6 Мингазов, Г.Г Редкий случай осложнения карбункула челюстно-лицевой области / Г.Г. Мингазов, Г.А. Файзуллина, A.M. Сулейманов // Актуальные вопросы стоматологии: материалы Всероссийской научно-практической конференции. - Уфа, 2010. - С. 47-48.
7 Давлетова, А.А. Разработка способов молекулярной качественной и количественной характеристики микрофлоры для диагностики гнойно-воспалительных процессов (фурункулы, абсцессы, флегмоны и др.), обусловленных условно-патогенными бактериями / А.А. Давлетова, Г.А. Файзуллина, Б.Н. Постригань // Клинические и теоретические аспекты современной медицины. материалы И Международной студенческой научной конференции с участием молодых ученых. - М., 2010. - С. 180-181.
8 Файзуллина, ГА. Особенности иммунного статуса больных с фурункулезом челюсгао-лицевой области / Г.А. Файзуллина, А.Р. Мавзютов // Материалы II еже-годйого Всероссийского конгресса по инфекционным болезням. - М., 2010: - С. 335.
9 Файзуллина, Г.А. Иммуномодулирующая терапия в лечении больных фурункулом и карбункулом челюстно-лицевой области в остром периоде заболевания / Г.А. Файзуллина, Г.Г. Мингазов, А.Р. Мавзютов // Медицинский вестник Башкортостана. — 2010. - № 5. - С. 23-27.
10 Давлетова, А.А. Разработка способов молекулярной качественной и количественной характеристики микрофлоры для диагностики гнойно-воспалительных процессов, обусловленных условно-патогенными бактериями рода Staphylococcus / А.А. Давлетова, Г.А. Файзуллина, Б.Н. Постригань // Медицинская наука — 2010: материалы Республиканской конференции молодых ученых Республики Башкортостан с международным участием, посвященной Году Республики, Дню Медицинского работника. - Уфа, 2010. - С. 83-84.
11 Геномный полиморфизм Staphylococcus aureus, выделенного от больных фурункулезом челюстно-лицевой области / Г.А. Файзуллина, Б.Н. Постригань, А.А. Давлетова, А.Р. Мавзютов // Клиническая лабораторная диагностика.-2010.-№ 10.-С. 435-436.
ФАЙЗУЛЛИНА ГУЗЕЛЬ АХТЯМОВНА
МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА КЛИНИЧЕСКИХ ШТАММОВ STAPHYLOCOCCUS AUREUS У БОЛЬНЫХ ФУРУНКУЛОМ ЧЕЛЮСТНО-ЛИЦЕВОЙ ОБЛАСТИ
Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук
Издательская лицензия № 06788 от 01.11.2001 г. ООО «Издательство «Здравоохранение Башкортостана» 450000, РБ, г. Уфа, а/я 1293, тел. (347) 250-81-20, тел./факс (347) 250-13-82.
Подписано в печать 26.01.2011 г. Формат 60x84/16. Гарнитура Times New Roman. Бумага офсетная. Отпечатано на ризографе. Усл. печ. л. 1,4. Уч.-изд. л. 1,5. Тираж 100. Заказ №581.
Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Файзуллина, Гузель Ахтямовна
ВВЕДЕНИЕ.
ГЛАВА 1. СОВРЕМЕННОЕ СОСТОЯНИЕ ПРОБЛЕМЫ ФУРУНКУЛА ЧЕЛЮСТНО-ЛИЦЕВОЙ ОБЛАСТИ (обзор литературы).
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.
2.1. Общая характеристика клинических наблюдений.
2.2. Методы исследования.
2.2.1. Микробиологические методы.
2.2.2. Молекулярно-генетический метод (полимеразно-цепная реакция)
2.2.3. Клинико-лабораторные и иммунологические методы.
2.3. Лечение больных фурункулом челюстно-лицевой области.
2.4. Статистические методы обработки полученных результатов.
ГЛАВА 3. МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЙ ПЕЙЗАЖ КОЖИ, РАНЕВОГО ОТДЕЛЯЕМОГО, СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ НОСА И ЗЕВА БОЛЬНЫХ ФУРУНКУЛОМ ЧЕЛЮСТНО-ЛИЦЕВОЙ ОБЛАСТИ.
3.1. Сравнительная характеристика микрофлоры раневого отделяемого у больных фурункулом челюстно-лицевой области.
3.2. Особенности микрофлоры слизистой оболочки зева, переднего отдела носа и кожи лица у больных фурункулом челюстно-лицевой области
ГЛАВА 4. МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ КЛИНИЧЕСКИХ ШТАММОВ STAPHYLOCOCCUS AUREUS.
ГЛАВА 5. ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ФУРУНКУЛА ЧЕЛЮСТНО-ЛИЦЕВОЙ ОБЛАСТИ
ГЛАВА 6. ОСОБЕННОСТИ КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКОГО СТАТУСА БОЛЬНЫХ ФУРУНКУЛОМ ЧЕЛЮСТНО-ЛИЦЕВОЙ ОБЛАСТИ.
6.1. Клинико-иммунологическая характеристика больных фурункулом челюстно-лицевой области.
6.2. Оценка эффективности лечения больных фурункулом челюстно-лицевой области по традиционной схеме и с применением иммуномодулятора «Бестим».
Введение Диссертация по биологии, на тему "Молекулярно-генетическая характеристика клинических штаммов Staphylococcus aureus у больных фурункулом челюстно-лицевой области"
Актуальность проблемы. Актуальность проблемы фурункула в практике челюстно-лицевого хирурга связана с широкой распространенностью указанной патологии среди пациентов с гнойно-воспалительными заболеваниями, которые занимают одно из ведущих мест в структуре хирургических болезней, несмотря на повсеместно проводимые оздоровительные и профилактические мероприятия. Научно-практический интерес к данной проблеме обусловлен высокой частотой внутричерепных осложнений фурункула челюстно-лицевой области (ЧЛО) (5-14% случаев), что связывают с недостаточной исследован-ностью этиопатогенетических взаимосвязей данной нозологии [6, 7, 9].
В качестве основных предикторов, определяющих формирование фурункула, рассматривают нарушения эндокринной, иммунной систем организма, но наиболее значимыми из них считают особенности микрофлоры [5, 13, 15, 19, 20, 21, 31, 57, 70]. Последнее, объясняет необходимость более детального исследования биологических свойств возбудителя, что позволит проводить эффективную этиотропную и патогенетическую терапию.
Учитывая, что основными факторами в этиологии фурункула являются условно-патогенные микроорганизмы, в ходе диагностики всегда встает проблема оценки их этиологической значимости. До настоящего времени при этом оценивались фенотипические признаки, которые могли варьировать в широких пределах. В этой связи представляется актуальной и своевременной молекулярно-генетическая характеристика патогенного потенциала выделяемой при фурункуле челюстно-лицевой области микрофлоры.
Селекция культур с этиологически значимыми при фурункуле признаками, безусловно, происходит под давлением факторов иммунитета макроорганизма, поэтому представилось оправданным рассмотрение указанных выше вопросов в контексте с клинико-иммунологическими особенностями течения фурункула челюстно-лицевой области.
Цель исследования. Молекулярно-генетическая характеристика микрофлоры фурункулов челюстно-лицевой области, оценка сопряженных с этим клинико-иммунологических особенностей заболевания для адекватной коррекции выявленных нарушений.
Задачи исследования:
1. Исследовать микробиологический пейзаж кожи, раневого отделяемого и слизистой оболочки переднего отдела носа и зева больных фурункулом челюстно-лицевой области.
2. Молекулярно-генетическая характеристика клинических штаммов Staphylococcus aureus, выделенных при фурункуле челюстно-лицевой области.
3. Установить клинико-эпидемиологические особенности фурункула челюстно-лицевой области.
4. Оценить иммунологический статус больных фурункулом челюстно-лицевой области и установить особенности, предрасполагающие к развитию указанного заболевания.
5. Провести комплексную клиническую оценку эффективности имму-номодулятора «Бестим» в терапии больных фурункулом челюстно-лицевой области на основании результатов исследований микрофлоры и оценки иммунного статуса.
Научная новизна исследования. Впервые при фурункуле челюстно-лицевой области выявлены фрагменты ДНК, специфичные соответствующим детерминантам факторов патогенности S. aureus.
Наиболее распространенными генетическими маркерами этиологической значимости S.aureus, выделенных при фурункуле 4JIO, по результатам исследования, являются фрагменты ДНК метициллин-резистентности (MRSA), цитолитического токсина Panton-Valentine лейкоцидина (PVL-F), а также энте-ротоксина СЗ (SEC3) (р<0,05).
Впервые исследована эпидемиология фурункула челюстно-лицевой области в г. Уфе.
Впервые для иммунокорригирующей терапии патогенетически обосновано и предложено включение в схему комплексного лечения больных фурункулом челюстно-лицевой области иммуномодулятора «Бестим».
Практическая значимость работы. Впервые у больных фурункулом челюстно-лицевой области определены и предложены для типирования культур и молекулярно-генетической оценки их этиологической значимости генетические маркеры (MRSA, PVL-F, SEC3) S.aureus.
На основании клинико-иммунологического мониторинга установлена эффективность препарата «Бестим» в комплексном лечении больных фурункулом челюстно-лицевой области.
Основные положения, выносимые на защиту:
1. Особенность микробиоценоза больных фурункулом челюстно-лицевой области, заключается в появлении патогенных штаммов S.aureus, несущих фрагменты ДНК метициллин-резистентности (MRSA), Panton-Valentine лейкоцидина (PVL-F), энтеротоксина СЗ (SEC3). Для установления этиологической значимости микрофлоры оптимальной является полимеразно-цепная реакция.
2. Иммунный статус больных фурункулом челюстно-лицевой области характеризуется дисбалансом Т-клеточного (CD3+), гуморального (IgA, IgG) звеньев системы иммунитета и подавлением поглотительной активности фагоцитирующих клеток.
3. Применение препарата «Бестим» в комплексном лечении фурункула челюстно-лицевой области положительно влияет на состояние клеточных и гуморальных факторов иммунной системы, а также повышает эффективность терапевтических мероприятий при данной патологии.
Апробация. Материалы диссертационной работы представлены на Международных, Всероссийских, региональных научно-практических конференциях: XII Международной научной конференции и Ш Международной научной онкологической конференции «Здоровье семьи - XXI век, онкология - XXI век» (Пермь, 2008); 73-й итоговой Республиканской научной конференции студентов и молодых ученых Республики Башкортостан (Уфа, 2008); II Международной студенческой научной конференции с участием молодых ученых «Клинические и теоретические аспекты современной медицины» (Москва, 2010); VII Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Молекулярная диагностика - 2010» (Москва, 2010); II ежегодном Всероссийском конгрессе по инфекционным болезням (Москва, 2010); Всероссийской научно-практической конференции «Актуальные вопросы стоматологии» (Уфа, 2010); Республиканской конференции молодых ученых Республики Башкортостан с международным участием «Медицинская наука - 2010», посвященной Году Республики, Дню Медицинского работника (Уфа, 2010).
По теме диссертации опубликовано 11 научных работ, в том числе 3 -в рецензируемых изданиях, рекомендованных Высшей аттестационной комиссией Министерства образования и науки Российской Федерации для публикации основных результатов диссертаций на соискание ученой степени кандидата медицинских наук.
Внедрение результатов исследования в практику. Результаты исследования внедрены в практическую деятельность отделения челюстно-лицевой хирургии МУ «Городская клиническая больница № 21» Городского округа город Уфа. Основные положения диссертации используются в учебном процессе при проведении практических занятий у студентов и курсантов на кафедрах хирургической стоматологии и челюстно-лицевой хирургии, лабораторной диагностики ИПО ГОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет Росздрава».
Объем и структура дйссертации. Диссертационная работа изложена на 120 страницах текста, содержит 20 таблиц, 17 рисунков. Она состоит из введения, обзора литературы (одна глава), собственных исследований (5 глав), заключения, выводов, практических рекомендаций, списка использованной литературы.
Заключение Диссертация по теме "Микробиология", Файзуллина, Гузель Ахтямовна
ВЫВОДЫ
1. Бактериальная флора кожи (в 71,1%), раневого отделяемого (в 91,1%), слизистой оболочки переднего отдела носа (в 73,3%) и зева (в 80%) больных фурункулом челюстно-лицевой области представлена преимущественно с п
S.aureus в высокой степени микробной обсемененности (10-10 КОЕ/мл).
2. Наиболее распространенными генетическими маркерами патогенно-сти клинических штаммов S. aureus, выделенных при фурункуле челюстно-лицевой области, являются фрагменты ДНК метициллин-резистентности (MRSA), цитолитического токсина Panton-Valentine лейкоцидина (PVL-F) и энтеротоксина СЗ (SEC3).
3. Наиболее высокий уровень заболеваемости фурункулом челюстно-лицевой области отмечен среди мужчин в возрастной группе от 15 до 30 лет (р<0,001), из категории учащихся и служащих, имеющих в анамнезе сопутствующую патологию органов дыхания и пищеварения.
4. К особенностям иммунологической реактивности больных фурункулом челюстно-лицевой области относится: лимфопения, снижение уровня общих Т-лимфоцитов (CD3+), подавление фагоцитарной активности нейтрофи-лов, селективная недостаточность иммуноглобулина А и увеличение концентрации иммуноглобулина G в группе больных с хроническим рецидивирующим течением (р<0,05).
5. Комплексная терапия больных фурункулом челюстно-лицевой области с включением иммуномодулятора «Бестим», способствует активации клеточного и фагоцитарного звена иммунитета; повышению содержания иммуноглобулина А в крови и снижению уровня микробной колонизации слизистой оболочки носоглотки.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
1. В качестве эпидемиологически значимых маркеров патогенности клинических штаммов S. aureus при фурункуле челюстно-лицевой области могут выступать фрагменты ДНК метициллин-резистентности (MRSA), цитолитического токсина Panton-Valentine лейкоцидина (PVL-F) и энтеротоксина С (SEC3), для детекции которых рекомендуется применение полимеразной цепной реакции.
2. Для прогнозирования риска рецидивирования фурункула челюстно-лицевой области целесообразно включение в комплекс обследования больных фурункулом челюстно-лицевой области определения состава и биологических свойств микрофлоры носоглотки на наличие факторов патогенности.
3. У больных фурункулом челюстно-лицевой области рекомендуется применение иммуномодулятора «Бестим», вводимого по схеме, один раз в сутки внутримышечно в терапевтической дозе 100 мкг, на курс 5 инъекций в период ранней реконвалесценции.
Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Файзуллина, Гузель Ахтямовна, Уфа
1. Абаев, Ю.К. Раневая инфекция в хирургии: учеб. пособие / Ю.К. Абаев. -Минск: Беларусь, 2003. 293 с.
2. Агапов, B.C. Инфекционные воспалительные заболевания челюстно-лицевой области / B.C. Агапов, С.Д. Арутюнов, В.В. Шулаков. М.: Медицинское информационное агентство, 2004. - 183 с.
3. Арзуманян, В.Г. Оценка стафилококковой и нелипофильной дрожжевой микрофлоры кожи у больных с патологией при контактном способе посева / В.Г. Арзуманян // Вестн. дерматол. венерол. 2004. - № 6. - С. 3-6.
4. Бабушкин, A.A. Угревая болезнь и сексуальность человека / A.A. Бабушкин // Здоровье мужчины. 2004. - № 4. - С. 24-25.
5. Багаутдинова, В.И. Клиника и лечение осложненных фурункулов и карбункулов лица: автореф. дис. . канд. мед. наук: 14.00.21 / В.И. Багаутдинова. Харьков, 2004. - 23 с.
6. Вернадский, Ю.И. Основы челюстно-лицевой хирургии и хирургической стоматологии / Ю.И. Вернадский. М.: Медицинская литература, 2007. -С. 163-167.
7. Благосклонная, Я.В. Эндокринология: учебник для студ. мед. вузов / Я.Р. Благосклонная, Е.В. Шляхто, А.Ю. Бабенко. СПб.: Спец. Лит, 2004.-398 с.
8. Бобров, В.М. Фурункул носа, осложненный тромбофлебитом кавернозного синуса / В.М. Бобров // Рос. оториноларингол. 2005. - № 5. - С. 131-3.
9. Брискин, Б.С. Энтеросорбция и ранняя нутритивная поддержка пектин-содержащим препаратом в лечении хирургического эндотоксикоза / Б.С. Брискин, Д.А. Демидов // Эфферентная тер. 2005. - № 2. - С. 3-9.
10. Бубнова, Н. Нормальная кожная микрофлора Электронный ресурс. / Н. Бубнова, С. Шляпников. М., 2008. - Режим доступа: http://www.disbacterioz.ru.
11. Ваганова, H.A. Применение баллонной дермотензии для хирургического лечения рубцовых поражений волосистой части головы, лица и шеи у обоженных / H.A. Ваганова, В.И. Шаробаро, П.В. Сарыгин и др. // Комбустиология. -2009. № 36 - С. 15-16.
12. Волкова, E.H. К проблеме иммунопатогенеза гнойничковых заболеваний кожи / E.H. Волкова, Ю.С. Бутов, С.Г. Морозов // Вестн. дерматол. вене-рол. 2004. - № 1. - С. 20-22.
13. Воронина, В.Р. Особенности микробиоценоза кожи больных атопиче-ским дерматитом и терапия его осложнений / В.Р. Воронина, А.Н. Пам-пура // Российский аллергологический журнал. 2007. - № 3. - С. 3-11.
14. Галкина, Т.С. Лечение фурункулов и карбункулов лица у больных сахарным диабетом / Т.С. Галкина, A.B. Лепилин, В.А. Булкин // Сахарный диабет.-2001.-№ 1.-С. 120-124.
15. Герасимов А.Н. Медицинская статистика: учеб. пособие / А.Н. Герасимов. М.: Медицинское информационное агентство, 2007. - 480 с.
16. Грудянов, А.И. Применение пробиотиков в комплексном лечении воспалительных заболеваний пародонта / А.И. Грудянов, H.A. Дмитриева, Е.В. Фоменко. М.: Медицинское информационное агентство, 2006. - С. 13-18.
17. Гудина, Р.В. Использование ФЭК-нефелометра при определении циркулирующих иммунных комплексов/ Р.В. Гудина // Лабораторное дело. -1988. № 7. - С.67-68.
18. Гурьев, В.Н. Состояние эндокринной системы у женщин больных Acne vulgaris. Методы гормональной коррекции: автореф. дис. . канд. мед. наук. М., 2003.-20 с.
19. Дашкова, H.A. Акне: природа возникновения и развития, вопросы систематизации и современные ориентиры в выборе терапии / H.A. Дашкова, М.Ф. Логачев // Вестн. дерматол. венерол. 2006. - № 4. - С. 8-13.
20. Дашкова, H.A. Клинические варианты и лабораторные характеристики ювенильных гиперандрогенных дерматопатий / H.A. Дашкова, М.Ф. Логачев // Вестн. дерматол. венерол. 2006. - № 3. - С. 18-21.
21. Дедов, И.И. Эндокринология: учебник для студ. мед. Вузов / И.И. Дедов, Г.А. Мельниченко, В.В. Фадеев. М., 2007. - 422 с.
22. Дерябин, Д.Г. Стафилококки. Экология и патогенность / Д.Г. Дерябин. — Екатеринбург, 2000. 155 с.
23. Дурново, Е.А. Воспалительные заболевания челюстно-лицевой области: диагностика и лечение с учетом иммунореактивности организма / Е.А. Дурново. Н. Новгород: Изд-во НГМА, 2007. - 193 с.
24. Ершова, Л.В. Опыт применения ультракаина при амбулаторных стоматологических вмешательствах / Л.В. Ершова // Бюл. Вост.-Сиб. науч. центра Сиб. отд-ния Рос. акад. мед. Наук. 2000. - № 1. - С. 89-90.
25. Зайцев, В.М. Прикладная медицинская статистика: учеб. пособие / В.М. Зайцев, В.Г. Лифляндский, В.И. Маркин. СПб.: Фолиант, 2006. - 432 с.
26. Закиева, И.В. Стационарзамещающие технологии в лечении гнойно-воспалительных заболеваний мягких тканей у работников предприятия нефтехимического комплекса: автореф. дис. . канд. мед. наук. Уфа, 2006. - 20 с.
27. Зубков, М.Н. Практическое руководство по клинической микробиологии антимикробной терапии для врачей стационаров / М.Н. Зубков. М., 2002. - 246 с.
28. Иванова, В.В. Микрофлора: роль, нарушения, коррекция. Становление микрофлоры у детей первого года жизни /В.В. Иванова. Новосибирск, 2005.-34 с.
29. Иммунологические методы / под ред. Г. Фримеля, пер. с нем. М.: Медицина, 1987. - 472 с.
30. Кабаева, Т.И. Роль состава кожного сала в патогенезе акне / Т.И. Кабае-ва, Г.А. Осипов // Вестн. дерматол. венерол. 2004. - № 2. - С. 28—30.
31. Каплина, Э.Н. Деринат природный иммуномодулятор для детей и взрослых / Э.Н. Каплина, Ю.П. Вайнберг. —М.: Научная книга, 2005. — 212 с.
32. Карабинская, A.B. Ликопид в лечении рецидивирующего фурункулеза у детей / A.B. Карабинская, Л.Ф. Чернецова, П.Б. Зотов // Тюмен. мед. журн. 2000. - № 2. - С. 20-21.
33. Катунина, O.P. Иммунная система кожи и ее роль в патогенезе псориаза / O.P. Катунина // Вестн. дерматол. и венерол. 2005. - № 1. - С. 19-21.
34. Кирюшенкова, C.B. Характеристика биологических свойств штаммов золотистого стафилококка, выделенного из ран у больных гнойным маститом / C.B. Кирюшенкова // Вестн. Смол. мед. Акад. 2001. - № 1. - С. 51-54.
35. Ковшов, В.В. Оптимизация антибактериальной терапии острых гнойно-воспалительных заболеваний челюстно-лицевой области и шеи: автореф. дис. канд. мед. наук: 14.00.21 / В.В. Ковшов. Иркутск, 2007. - 23 с.
36. Королюк, A.M. Медицинская микробиология / A.M. Королюк. СПб., 1999.-251 с.
37. Короткий, Н.Г. Псориаз как следствие включения бета-стрептококков в микробиоценоз кишечника с повышенной проницаемостью (концепция патогенеза) / Н.Г. Короткий, М.Ю. Песляк // Вестник дерматологии и венерологии. 2005. - № 1. - С. 9-18.
38. Котов, Ю.Б. Новые математические подходы к задачам медицинской диагностики / Ю.Б. Котов. М., 2004. - 328 с.
39. Котов, Ю.Б. Практические методы статистического анализа медицинских данных / Ю.Б. Котов // Рос. вестн. акушера-гинеколога. 2007. -№ 3. - С. 67-76.
40. Кошевенко, Ю.Н. Кожа человека: рук. для врачей и студентов / Ю.Н. Кошевенко. -М.: Медицина, 2007. Т. 1. - 360 с.
41. Латюшина, Л.С. Оценка влияния локальной иммунокоррекции циклофе-роном на показатели местного иммунитета гнойной раны у больных с одонтогенными флегмонами / Л.С. Латюшина, И.И. Долгушин // Мед. иммунол. 2006. - Т. 8, № 2-3. - С. 445.
42. Латюшина, Л.С. Клинико-иммунологическая оценка локальной иммунокоррекции ронколейкином в комплексном лечении больных с флегмонами челюстно-лицевой области / Л.С. Латюшина // Вестник новых медицинских технологий.'- 2008. Т. XV, № 2. - С. 182-185.
43. Лебедев, К.А. Конфликт человека с его микрофлорой Электронный ресурс. / К.А. Лебедев, И.Д. Понякина. М., 2007. - Режим доступа: http://www.vivovoco.HTM.
44. Малимон, Т.В. Фурункулы лица у детей и подростков. Методы профилактики и лечения: автореф. дис. . канд. мед. наук. — Пермь, 2006. 19 с.
45. Медведева, О.В. Дезогестрел-содержащий оральный контрацептив в терапии акне у женщин: автореф. дис. . канд. мед. наук. М., 2005. — 21 с.
46. Менжулов, М.М. Интеграция общей хирургии и стоматологии в решении основных вопросов гнойной хирургии лица и шеи: автореф. дис. . канд. мед. наук. — Воронеж, 2000. 20 с.
47. Меньшиков, В.В. Клиническая лабораторная аналитика / В.В. Меньшиков. -М., 2003.-Т. IV.
48. Метляева, Н.Б. Состояние системы цитокинов у женщин с угревой болезнью и обоснование комплексной патогенетической терапии: автореф. дис. . канд. мед. наук. Владивосток, 2007. - 22 с.
49. Михайлов, Ю.Х. К вопросу о бактериологических особенностях гнойных риносинуситов / Ю.Х. Михайлов, В.И. Егоров, O.A. Алимов // Военно-медицинский журнал. 2006. - № 9. - С. 60.
50. Мохаммед, К.С. Фурункулы и карбункулы лица и шеи, иммунологические аспекты и эффективность иммуномодулирующей терапии в комплексном лечении: автореф. дис. . д-ра мед. наук: 14.00.21 / К.С. Мохаммед. Кишинев, 2004. - 24 с.
51. Оганесян, A.A. Внутривенные инфузии озонированного раствора в комплексном лечении гнойных заболеваний лица и шеи: автореф. дис. . канд. мед. наук. Воронеж, 2002. - 20 с.
52. Панюшин, С. Микрофлора желудочно-кишечного тракта и проблемы современного питания Электронный ресурс. / С. Панюшин. М., 2008. -Режим доступа: http://www.selfcare.ru.
53. Пинегин, Б.В. Общие вопросы иммунитета, иммунодиагностики и иммунотерапии на модели хирургических инфекций / Б.В. Пинегин, Т.П. Юдина, М.И. Карсонова // Тезисы докладов 2-ого национального конгресса РААКИ.-М., 1998.-С. 160-191.
54. Поздеев, O.K. Медицинская микробиология / O.K. Поздеев. М., 2002. - 766 с.
55. Покровский, В.И. Медицинская микробиология / В.И. Покровский. М., 1999.-184 с.
56. Потемкин, В.В. Эндокринология: учебник для мед. вузов / В.В. Потемкин. -М.: Медицина, 1999. 639 с.
57. Робустова, Т.Г. Локализованная гнойная инфекция у детей раннего возраста / Т.Г. Робустова, Л.К. Губина // Российский стоматологический журнал. 2005. - № 6. - С. 11-15.
58. Роюк, В.А. Оптимизация диагностики и лечения больных с травмами и воспалительными заболеваниями челюстно-лицевой области: автореф. дис. . канд. мед. наук. -М., 2000. 24 с.
59. Самгин, М.А. Акне (лекция) / М.А. Самгин, С.А. Монахов // Рос. журн. кож. венерол. бол. 2005. - № 3. - С. 55-65.
60. Свистин, A.M. Функциональное состояние фагоцитов и опсонической способности сыворотки при одонтогенных гнойно-воспалительных заболеваниях челюстно-лицевой области: автореф. дис. . канд. мед. наук. -Новосибирск, 2006. 21 с.
61. Сетдикова, Н.Х. Комплексные механизмы развития хронического реци-дивируещего фурункулеза и пути их коррекции / Н.Х. Сетдикова, Т.В. Латышева // Иммунология. 2000. - № 3. - С. 48-50.
62. Сетдикова, Н.Х. Принципы диагностики и лечения хронического рецидивирующего фурункулеза / Н.Х. Сетдикова, К.С. Манько, Т.В. Латышева // Лечащий врач. 2005. - № 6. - С. 44-47.
63. Сидоренко, C.B. Антибиотикограмма: диско-диффузионный метод / C.B. Сидоренко. М., 2001.-116 с.
64. Смирнов, С.Н. Применение медицинского озона в комплексном лечении ограниченных вялотекущих воспалительных процессов мягких тканей челю-стно-лицевой области: автореф. дис. . канд. мед. наук. М., 1999. - 22 с.
65. Соколов, В.В. Вариантная анатомия артерий кожи / В.В. Соколов // Морфология. 1999. - Т. 115, № 3. - С. 73-79.
66. Солнцева, В.К. К вопросу микробиоценоза кожи больных хроническими дерматозами / В.К. Солнцева, A.C. Быков, A.A. Воробьев // Рос. журн. кож. и венер. Болезней. 2000. — № 5. — С. 28-31.
67. Сорокина Е.В. Особенности иммунного статуса у больных пиодермией / Е.В. Сорокина, Е.А. Курбатова, С.А. Масюкова // Вестн. дерматол. вене-рол. 2005. - № 5. - С. 4-10.
68. Сорокина, Е.В. Иммунотерапия в комплексном лечении пиодермии / Е.В. Сорокина и др. // Мед. иммунол. 2006. - Т. 8, № 2-3. - С. 289-290.
69. Стенько, А.Г. Морфо-физикальные изменения у пациентов с келоидами головы и шеи и метод их коррекции с использованием сверхнизких температур: автореф. дис. . канд. мед. наук. -М., 2001. — 17 с.
70. Степанян, М.А. Оптимизация лечения гнойных ран челюстно-лицевой области у детей с использованием препаратов морских водорослей: автореф. дис. канд. мед. наук. Архангельск, 2004. - 18 с.
71. Страчунский, JI.C. Антибактериальная терапия: практическое руководство / Л.С. Страчунский. М., 2000. - 207 с.
72. Страчунский, Л.С. Внебольничные MRSA новая проблема антибиоти-корезистентности / Л.С. Страчунский, А.В. Дехнич, Ю.А. Белькова // Клиническая микробиология. - 2005. - Т. 7, № 1. - С. 26-29.
73. Ступин, В.А. Применение иммуномодуляторов в хирургической практике / В.А. Ступин, И.Е. Гридчик, А.Л. Коваленко. М., 2005. - 56 с.
74. Суворова, К.Н. Пубертатные акне: прогноз и рациональное лечение / К.Н. Суворова, Т.А. Сысоева // Вестн. дерматол. венерол. 2004. -№4.-С. 49-51.
75. Тельнюк, Я.И. Особенности иммунной системы больных хроническим рецидивирующим фурункулезом и влияние на нее иммунотропной терапии / Я.И. Тельнюк, Н.Х. Сетдикова, М.И. Карсонова // Иммунология -2003. № 1.-С. 20-23.
76. Торгашова, O.E. Фурункулы, карбункулы лица и их лечение с применением озонотерапии и коротких лимфотропных новокаиновых блоков: автореф. дис. канд. мед. наук. Казань, 2005. - 21 с.
77. Фадеев, С.Б. Анализ изменения видового состава возбудителей хирургической инфекции мягких тканей за 1994-2004 гг. / С.Б. Фадеев, С.А. Гла-зева, Е.В. Чевычалова // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. — 2005. Том 7, № 2. - С. 55.
78. Федосеева, В.Н. Руководство по иммунологическим и аллергологиче-ским методам в гигиенических исследованиях / В.Н. Федосеева, Г.В. По-рядин, Л.В. Ковальчук. М.: Пропедек, 1993. - 317 с.
79. Хаитов, P.M. Вторичные иммунодефицита: клиника, диагностика, лечение / P.M. Хаитов, Б .В. Пинегин // Иммунология. 1999. - № 1. - С. 14—17.
80. Чабашвили, Т.Г. Безбелковое питание и реакция на него кожного микробиоценоза у молодых людей / Т.Г. Чабашвили // Рос. морфол. Ведомости. 2000. - № 3-4. - С. 180-182.
81. Чепель, Э. Основы клинической иммунологии: пер. с англ. / Э. Чепель, М. Хейни, С. Мисбах М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. - 416 с.
82. Чернышов, В.А. Послеоперационный болевой синдром и операционный стресс-ответ в гнойной хирургии лица и шеи: автореф. дис. . канд. мед. наук. Воронеж, 2005. - 20 с.
83. Шульга, И.А. К вопросу о патогенезе фурункула носа и верхней губы / И.А. Шульга, Дерябин Д.Г. // Российская ринология. 1994. - № 3. - С. 28.
84. Щербакова, О.А. Галавит в комплексной терапии больных хроническим рецидивирующим фурункулезом с измененными показателями аффинности иммуноглобулинов / О.А. Щербакова, Т.В. Латышева, Н.Х. Сетди-кова // Иммунология. 2003. - № 4 - С. 245-249.
85. Aires-de-Sousa, М. High interlaboratory reproducibility of DNA sequence-based typing of bacteria in a multicenter study / M. Aires-de-Sousa, K. Boye, H. de Lencastre et al. // J. Clin. Microbiol. 2006. - Vol. 44. - P. 619-621.
86. Al-Talib, H. A pentaplex PCR assay for the rapid detection of methicillin-resistant Staphylococcus aureus and Panton-Valentine Leucocidin / H. Al-Talib, C.Y. Yean, A. Al-Khateeb // BMC Microbiology. 2009. - № 9. - P. 113.
87. Aminzadeh, A. Prevention of chronic furunculosis with low-dose azithromycin / A. Aminzadeh 2007. - Режим доступа: http://www.informworld.com.
88. Aucken, H.M. Irish-1 and Irish-2: UK epidemic methicillin-resistant Staphylococcus aureus strains associated with Northern Ireland / H.M. Aucken, G. O'Neill, M. Ganner // J. Hosp. Infect. 2006. - Vol. 63. - P. 170-178.
89. Bahrain, M. Five cases of bacterial endocarditis after furunculosis and an going saga of community-acquired methicillin-resistant Staphylococcus aureus infections Электронный ресурс. / M. Bahrain 2008. - Режим доступа: http://www.informworld.com.
90. Baker, B.S. The role of microorganisms in atopic dermatitis / B.S. Baker // Clin. Experim. Immunol. 2006. - Vol. 144. - P. 1-9.
91. Bernard P. Management of common bacterial infections of the skin / P. Bernard // Ann. Dermatol. Venerol. 2008. - Vol. 135, № 1. - P. 13-19.
92. Bohach, G.A. Staphylococcus aureus exotoxins / G.A. Bohach, T.J. Foster // Gram positive bacterial pathogens / eds: V.A. Fischetti, R.P. Novick, J.J. Fer-retti Washington, 1999. - P. 367-378.
93. Bork, K. Efficacy and safety of 2% mupirocin ointment in the treatment of primary and secondary skin infections an open multicentre trial / K. Bork, J. Brauers, M. Kresken // Brit. J. Clin. Pract. 2000. - № 5. - P. 284-288.
94. Brook, I. Microbiology and management of soft tissue muscle infections / I. Brook // Clin. Infect. Dis. 2007. - Vol. 44, № 1. - P. 88-95.
95. Brown, D.F. MWD: Guidelines for the laboratory diagnosis and susceptibility testing of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) / D.F. Brown, D.I. Edwards, P.M. Hawkey // J. Antimicrob. Chemother. 2005. - Vol. 56. -P. 1000-1018.
96. Cogen, A.L. Skin microbiota: A source of disease or defence? / A.L. Colgen, V. Nizet, R.L. Gallo // Br. J. Dermatol. 2008. - Vol. 158. - P. 442-455.
97. Cooper, B.S. Methicillin-resistant Staphylococcus aureus in hospitals and the community: stealth dynamics and control catastrophes /B.S. Cooper, G.F. Medley, S.P. Stone // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2004. - Vol. 101. - P. 10223-8.
98. Crossley, K.B. The Staphylococci in human disease / K.B. Crossley, G.L. Archer. Churchill Livingstone, 2000.
99. Dada-Adegbola, H.O. Cutaneous myiasis presenting as chronic furunculosis-case report / H.O. Dada-Adegbola, O.A. Oluwatoba // West Afr. J. Med. -2005. Vol. 24, N 4. - P. 346-7.
100. Daines, R.F. Health advisory: Prevention and control of community associated methicillin-resistant Staphylococcus aureus (CA-MRSA) / R.F. Daines. Режим доступа: http://www.health.state.ny.
101. Dancer, SJ. Outbreak of staphylococcal scalded skin syndrome among neonates / SJ. Dancer, N.A. Simmons, S.M. Poston // J. Infect. 1999. - Vol. 16. - P. 87-103.
102. Demir, C. Phagotocytosis and oxidative burst by neutrophils in patients with recurrent furunculosis / С. Demir // Int. J. Clin. Pract. 2005. - Vol. 59, Is. 3. -P. 370-373.
103. Diekema, D.J. Rapid detection of antimicrobial-resistant organism carriage: an unmet clinical need / D.J. Diekema, K.J. Dodgson, B. Sigurdardottir // J. Clin. Microbiol. 2004. - Vol. 47, № 2. - P. 2879-2883.
104. Ding, Y. NorB, an efflux pump in Staphylococcus aureus strain MW2, contributes to bacterial fitness in abscesses / Y. Ding, Y. Onodera, J.C. Lee // J. Bacteriol. -2008. Vol. 190. - P. 7123-7129.
105. El-Gilany, A.H. Risk factors of recurrent furunculosis I A.H. El-Gilany, H. Fathy // Dermatol. Online J. 2009. - Vol. 15, № 1. - P. 16.
106. Enright, M.C. The evolutionary history of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) / M.C. Enright // Proc. Natl. Acad. Sei. U.S.A. 2002. -Vol. 99.-P. 7687-7692.
107. Fernandez, O.A.C. Azithromycin for the treatment of acne / O.A.C. Fernandez. 2007. - Режим доступа: http://www.informworld.com.
108. Foster, T.J. The Staphylococcus aureus «superbug»/ T.J. Foster // J. Clin. In-vestig. -2004. Vol.114, N 12. - P. 1693-1696.
109. Francois, P. Rapid detection of methicillin-resistant Staphylococcus aureus directly from sterile or nonsterile clinical samples by a new molecular assay / P. Francois, D. Pittet, M. Bento // J. Clin. Microbiol. 2003. - P. 254-60.
110. Gadepalli, R. Mupirocin resistance in Staphylococcus aureus in an Indian hospital / R. Gadepalli, B. Dhawan, S. Mohanty // Diagn. Microbiol. Infect. Dis. 2007. - Vol. 58. - P. 125-127.
111. Giammarinaro, P. Development of a new oligonucleotide array to identify staphylococcal strains at species level / P. Giammarinaro, S. Leroy, J.P. Cha-cornac // J. Clin. Microbiol. 2005. - Vol. 43, № 8. - P. 3673-3680.
112. Gillet, Y. Association between Staphylococcus aureus strains carrying gene for Panton-Valentine leukocidin and highly lethal necrotising pneumonia in young immunocompetent patients / Y. Gillet // Lancet. 2002. - P. 753-59.
113. Haas, C.J. Chemotaxis inhibitory protein of Staphylococcus aureus, a bacterial antiinflammatory agent / C.J. Haas // J. Exp. Med. 2004. - Vol. 199. -P. 687-695.
114. Hamilton, S.M. In vitro production of Panton-Valentine Leukocidin among strains of methicillin-resistant Staphylococcus aureus causing diverse infections / S.M. Hamilton, A.E. Bryant, K.C. Carrol // Clin. Infect. Dis. 2007. -P. 1550-58.
115. Hiramatsu, K. The emergence and evolution of methicillin-resistant Staphylococcus aureus / K. Hiramatsu, L. Cui, M. Kuroda // Trends Microbiol. 2001. — №9.-P. 486-493.
116. Hiramatsu, K. Vancomycin-resistant Staphylococcus aureus: a new model of antibiotic resistance / K. Hiramatsu // Lancet Infect. Dis. 2001. - № 1. - P. 147-9.
117. Holt, K.E. High-throughput sequencing provides insights into genome variation and evolution in Salmonella Typhi / K.E. Holt, J. Parkhill, C.J. Mazzoni // Nat. Genet. 2008. Vol. 40. - P. 987-993.
118. Hsu, C.T. The hyperimmunoglobulin E syndrome / C.T. Hsu, Y.T. Lin, Y.H. Yang // J. Microbiol. Immunol. Infect. 2004. - Vol. 37, № 2. - P. 121-3.
119. Hsu, L.Y. High incidence of Panton-Valentine leukocidin-producing Staphylococcus aureus in a tertiary care public hospital in Singapore / L.Y. Hsu, Т.Н. Koh, A. Kurup // Clin. Infect. Dis. 2005. - Vol. 40, № 3. - P. 486-489.
120. Huletsky, A. Identification of methicillin-resistant Staphylococcus aureus carriage in less than 1 hour during a hospital surveillance program / A. Huletsky, P. Lebel, F.J. Picard // Clin. Infect. Dis. 2005. - Vol. 40. - P. 976-981.
121. Huygens, F. Staphylococcus aureus genotyping using novel real-time PCR formats / F. Huygens, J. Inman-Bamber, G.R. Nimmo // J. Clin. Microbiol. -2006. Vol. 44. - P. 3712-3719.
122. Iandolo, J.J. Genetic analysis of extracellular toxins of Staphylococcus aureus / J.J. Iandolo // Ann. Rev. Microbiol. 2003. - Vol. 43. - P. 375-402.
123. Ito, T. Novel type V staphylococcal cassette chromosome mec driven by a novel cassette chromosome recombinase, ccrC / T. Ito // Antimicrob. Agents Chemother. 2004. - Vol. 48. - P. 2637-2651.
124. Iwatsuki, K. Staphylococcal cutaneous infections invasion, evasion and aggression Электронный ресурс. / К. Iwatsuki 2006. — Режим доступа: http://www.informworld.com.
125. Kuhn, G. Double-locus sequence typing using clfB and spa, a fast and simple method for epidemiological typing of methicillin-resistant Staphylococcus aureus / G. Kuhn, P. Francioli, D.S. Blanc // J. Clin. Microbiol. 2007. -Vol. 45.-P. 54-62.
126. Ladhani, S. Clinical, microbial, and biochemical aspects of the exfoliative toxins causing staphylococcal scalded-skin syndrome / S. Ladhani, C.L. Joan-nou, D.P. Lochrie // Clin. Microbiol. Rev. 2005. - № 2. - P. 224-242.
127. Levi, К. Evaluation of an isothermal signal amplification method for rapid detection of methicillin-resistant Staphylococcus aureus from patient-screening swabs / K. Levi, C. Bailey, A. Bennett // J. Clin. Microbiol. 2003. - Vol. 41. -P. 3187-91.
128. Levy, R. Vitamin С for the treatment of recurrent furunculosis in patients with imparied neutrophil functions / R. Levy 2006. - Режим доступа: http://www.cmaj .ca.
129. Leyden, J.J. Staphylococcus aureus in thee lesions of atopic dermaatitis / J.J. Leyden, R.R. Marpless, A.M. Kligman // Brit. J. Dermaatol. 2006. -Vol. 90, №5.-P. 525-530.
130. Lina, G. Involvement of Panton-Valentine leukocidin-producing Staphylococcus aureus in primary skin infections and pneumonia / G. Lina // Clin. Infect. Dis. 2003. - Vol. 29. - P. 1128-1132.
131. Lina, G. Staphylococcal chromosome cassette evolution in Staphylococcus aureus inferred from ccr gene complex sequence typing analysis / G. Lina, G. Durand, C. Berchich // Clin. Microbiol. Infect. 2006. - № 12. - P. 1175-1184.
132. Logar, J. Cutaneous myiasis caused by Cordylobia anthropophagi / J. Logar, B. Soba, Z Parac // Wien Klin. Wochenschr. 2006. - Vol. 118, № 5-6. - P. 180-2.
133. Ma, X.X. Novel type of staphylococcal cassette chromosome mec identified in community-acquired methicillin-resistant Staphylococcus aureus strains / X.X. Ma // Antimicrob. Agents Chemother. 2002. - Vol. 46. - P. 1147-1152.
134. Mazmanian, S.K. Passage of heme-iron across the envelope of Staphylococcus aureus / S.K. Mazmanian // Science. 2003. - Vol. 299. - P. 906-909.
135. McCalla, C. Microbiological and Genotypic Analysis of Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus Bacteremia / C. McCalla, D.S. Smyth, D.A. Robinson // Antimicrob. Agents Chemother. 2008. - Vol. 52. - P. 3441-3443.
136. McCormick, J.K. Toxic shock syndrome and bacterial superantigens: an update / J.K. McCormick, J.M. Yarwood, P.M. Schlievert // Ann. Rev. Microbiol.-2001.-Vol. 55.-P. 77-104.
137. Melles, D.C. Natural population dynamics and expansion of pathogenic clones of Staphylococcus aureus / D.C. Melles // J. Clin. Invest. 2004. - P. 1732-40.
138. Miller, L.G. Necrotizing fasciitis caused by community-associated methicillin-resistant Staphylococcus aureus in Los Angeles / L.G. Miller, F. Perdreau-Remington, G. Rieg // N. Engl. J. Med. 2005. - Vol. 352, № 14. - P. 1445-53.
139. Mohanasoundaram, K.M. Comparison of phenotypic versus genotypic methods in the detection of methicillin resistance in Staphylococcus aureus / K.M. Mohanasoundaram, M.K. Lalitha // Indian J. Med. Res. 2008. -Vol. 127, №1.-P. 78-84.
140. Naidu, A.S. Human lactoferrin binding in clinical isolates of Staphylococcus aureus / A.S. Naidu, J. Miedzobrodzki, J.M. Musser // J. Med. Microbiol. -2005. Vol. 34. - P. 323-328.
141. Narita, S. Phage conversion of Panton-Valentine leukocidin in Staphylococcus aureus: molecular analysis of a PVL-converting phage, phiSLT / S. Narita // Gene. 2004. - Vol. 268. - P. 195-206.
142. Nilsson, E. Density of the microflora in hand eczema before and after topical treatment with a potent corticosteroid / E. Nilsson, C. Henning, M. Hjorleifs-son // J. Am. Acad. Dermatol. 2006. - Vol. 15. - P. 192-197.
143. Novick, R.P. Mobile genetic elements and bacterial toxinoses: the superanti-gen-encoding pathogenicity islands of Staphylococcus aureus / R.P. Novick // Plasmid. 2003. - Vol. 49. - P. 93-105.
144. Novick, R.P. Pathogenicity factors of Staphylococcus aureus and their regulation / R.P. Novick // Gram-positive pathogens / ed. by V. Fischetti. Washington, 2000. - P. 392-07.
145. Oliveira, A.D. Laboratory detection methods for methicillin resistance in coagulase negative Staphylococcus isolated from ophthalmic infections / A.D. Oliveira, P.A. d'Azevedo, L.B. de Sousa // Arq. Bras. Oftalmol. 2007. -Vol. 70, №4.-P. 667-675.
146. Paule, S.M. Direct detection of Staphylococcus aureus from adult and neonate nasal swab specimens using real-time polymerase chain reaction / S.M. Paule, A.C. Pasquariello, D.M. Hacek // J. Mol. Diagn. 2004. - № 6. - P. 191-196.
147. Peacock, S.J. What determines nasal carriage of Staphylococcus aureus? / S J. Peacock, I. de Silva, F.D. Lowy // Trends Microbiol. 2001. - № 9. - P. 605-10.
148. Raboud, J. Modeling transmission of methicillin-resistant Staphylococcus aureus among patients admitted to a hospital / J. Raboud, R. Saskin, A. Simor // Infect. Control Hosp. Epidemiol. 2005. - Vol. 26. - P. 607-615.
149. Rich, R.R. Superantigens: interaction of staphylococcal enterotoxins with MHC class II molecules / R.R. Rich, J.A. Mollick, R.G. Cook // Trans Am. Clin. Climatol. Assoc. 1999. - Vol. 101.-P. 195-204.
150. SampuraR. Staphylococcal infection / R. Sampura. 2008. - Режим доступа: http://www.histopathology-india.net.
151. Shittu, A.O. Antimicrobial susceptibility patterns and characterization of clinical isolates of Staphylococcus aureus in KwaZulu-Natal province, South Africa / A.O. Shittu, J. Lin // BMC Infect. Dis. 2006. - Vol. 6, № 1. - P. 125.
152. Shittu, A.O. Phenotypic and molecular characterization of Staphylococcus aureus isolates expressing low- and high-level mupirocin resistance in Nigeria and South Africa / A.O. Shittu, E.E. Udo, J. Lin // BMC Infect. Dis. 2009. -Vol. 28, №9.-P. 10.
153. Slinger, R. Facial furuncle on 3-year-old boy camping in Ontario / R. Slinger, T. Scholten // Canad. Med. Assoc. J. 2003. - Vol. 168, № 9. - P. 1159.
154. Smith, H. Nasal carriage of Staphylococcus aureus in diabetes rnellitus / H. Smith, J J. O'Connor, A.T. Willis // Lancet. 2001. - № 1. - P. 776.
155. Staphylococcus aureus. — Режим доступа: http://www.ncbi.nlm.nih.gov.
156. Struelens, M.J. Rapid molecular detection of methicillin-resistant Staphylococcus aureus: a cost-effective tool for infection control in critical care? / M.J. Struelens, O. Denis // Crit. Care. 2006. - Vol. 10, № 2. - P. 128.
157. Swenson, J.M. Results of disk diffusion testing with cefoxitin correlate with presence of mecA in Staphylococcus spp / J.M. Swenson, F.C. Tenover // J. Clin. Microbiol. 2005. - Vol. 43, № 8. - P. 3818-3823.
158. Van Poucke, S. What is your diagnosis? Canine eosinophilic furunculosis (folliculitis) of the face / S. Van Poucke // J. Small Anim. Pract. 2000. -Vol. 41, № 11.-P. 524-5.
159. Vandenesch, F. Community-acquired methicillin-resistant Staphylococcus aureus carrying Panton-Valentine leukocidin genes: worldwide emergence / F. Vandenesch et al. // Emerging Infect. Dis. 2003. - № 9. - P. 978-984.
160. Vonc, A.G. Methycillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) in the community / A.G. Vonc, CM. Vanderbroucke. Grauls, 2008. - Режим доступа: http://www.informworld.com.
161. Warren, D.K. Detection of methicillin-resistant Staphylococcus aureus directly from nasal swab specimens by a real-time PCR assay / D.K. Warren, R.S. Liao, L.R. Merz // J. Clin. Microbiol. 2004. - Vol. 42. - P. 5578-81.
162. Weigel, L.M. Genetic analysis of a high level vancomycin-resistant isolate of Staphylococcus aureus / L.M. Weigel // Science. 2003. - Vol. 28. - P. 1569-1571.
163. Wright, J.D. The effect of cell density and specific growth rate on accessory gene regulator and toxic shock syndrome toxin-1 gene expression in Staphylococcus aureus / J.D. Wright, K.T. Holland // FEMS Microbiol. Lett. 2003. -Vol. 218.-P. 377-383.
164. Yarwood, J.M. Evidence for the involvement of bacterial superantigens in psoriasis, atopic dermatitis, and Kawasaki syndrome / J.M. Yarwood, D.Y. Leung, P.M. Schlievert // FEMS Microbiol. Lett. 2000. - Vol. 192. - P. 1-7.
165. Yotis, W. Responses of staphylococci to androgens / W. Yotis, T. Fitzgerald // Appl. Microbiol. 1999.-№5. -P. 1512-1517.
-
Файзуллина, Гузель Ахтямовна
-
кандидата медицинских наук
-
Уфа, 2011
-
ВАК 03.02.03
- Молекулярно-генетические аспекты эпидемиологии внутрибольничных инфекций, вызванных представителями вида Staphylococcus aureus, устойчивыми к метициллину/оксациллину
- Изучение комплексного влияния лазерного излучения и искусственных магнитных полей на золотистый стафилококк
- Некоторые биологические свойства монокультур и сокультивируемых вариаций бактерий рода Enterobacter и Staphylococcus aureus и особенности их действия на перитонеальные макрофаги мышей.
- Биологические характеристики метициллинорезистентных стафилококков, циркулирующих в Саратовском регионе
- Характеристика антигенных препаратов, выделенных из вакцинных штаммов Staphylococcus aureus, культивируемых в различных условиях
