Моделирование и коррекция психомоторных расстройствах новорожденных

Абдаладзе, Нино Симоновна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Моделирование и коррекция психомоторных расстройствах новорожденных
ВАК РФ 03.03.01, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Моделирование и коррекция психомоторных расстройствах новорожденных"

На правах рукописи

АБДАЛАДЗЕ

Нино Симоновна

МОДЕЛИРОВАНИЕ И КОРРЕКЦИЯ ПСИХОМОТОРНЫХ РАССТРОЙСТВ НОВОРОЖДЕННЫХ

03.03.01 -физиология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Санкт-Петербург 2011

1 2 МАЙ 2011

4846259

Диссертационная работа выполнена в Физиологическом отделе им. И.П. Павлова Учреждения Российской академии медицинских наук Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины Северо-Западного отделения РАМН

Научный руководитель: профессор, доктор медицинских наук

Виктор Матвеевич Клименко

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук

Игорь Игоревич Степанов

доктор биологических наук Наталья Эдуардовна Ордян

Ведущее научное учреждение: Учреждение Российской

академии наук Институт эволюционной физиологии и биохимии имени И. М. Сеченова РАМ

Защита диссертации состоится 26 мая 2011 г. в 13 часов на заседании Диссертационного совета Д001.022.03 Учреждения Российской академии медицинских наук Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины Северо-Западного отделения РАМН, 197376, Санкт-Петербург, Каменноостровский проспект, 69/71.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Учреждения Российской академии медицинских наук Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины Северо-Западного отделения РАМН, 197376, Санкт-Петербург, ул. Акад. Павлова, 12.

Автореферат разослан апреля 2011 года

Ученый секретарь Диссертационного совета профессор, доктор биологических наук

Л.В. Пучкова

ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Аюуальность проблемы. В структуре причин перинатальной заболеваемости и смертности одно из ведущих мест занимают гипоксические повреждения головного мозга плода. Гипоксические поражения центральной нервной системы в антенатальный период жизни вызывают широкий спектр отдаленных психомоторных расстройств у детей: синдром дефицита внимания, детский церебральный паралич с двигательными, коммуникативными и интеллектуальными расстройствами (Saigal et al., 2000; Hack, Fanoroff, 2000; Delobel-Ayoub et al, 2006; Барашнев, 2007; Савельева и соавт., 2008; Berger et al., 2009).

Одной из главных причин перинатальных гипоксических поражений является плацентарная недостаточность, которая имеет мультифакторную природу (Шниткова и соавт., 2000; Радзинский и соавт., 2007). Многочисленные этиологические факторы реализуют свое действие на плод через нарушение кровообращения первоначально в плаценте, а в последующем и у плода. Морфофункциональные изменения в плаценте клинически проявляются внутриутробной гипоксией и задержкой развития плода (Кулаков и др., 2004; Rees, Jnder, 2005). Группу риска развития плацентарной недостаточности составляют больные с невынашиванием беременности, гестозами, экстрагенитальными и нейроэндокринными заболеваниями, недостаточностью питания, перенесшие или находящиеся в состоянии стресса (Стрижаков и соавт., 2000; Чернуха, 2001; Кошелева и соавт., 2002; Sibai, 2003; Jackson et al., 2004; Ananth et al., 2006).

При осложненной беременности (преэклампсии, невынашивании, сахарном диабете, анемии) в плаценте наблюдается тканевая гипоксия, обусловленная явлениями окислительного стресса. Гипоксия любого генеза реализуется через активацию процессов перекисного окисления мембранных фосфолипидов и снижения активности антиоксидантных систем защиты. Физиологическое значение перекисного окисления липидов многогранно: активные формы кислорода являются вторичными посредниками регуляторных влияний (пролиферации, апоптоза и дифференцировки, участвует в процессах обновления мембранных клеточных структур). Механизм перекисного окисления липидов лежит в основе синтеза тканевых регуляторов - простагландинов и лейкотриенов. Накопления продуктов переокисления приводят к повреждениям мембран отдельных клеток, тканей и целого органа, что вызывает морфофункциональные изменения в плаценте и развитие патологических состояний в последующем у плода (Erez et al., 2008; Амиров и Фролова, 2009; Сидорова и Унанян, 2009; Haque et al., 2010). Окислительный стресс приводит к повреждению эндотелия сосудов, мембран форменных элементов крови, нарушению реологических и коагуляционных свойств крови, микроциркуляции, что вызывает поражение плаценты и головного мозга плода (Wang, Alexanderb, 2000; Roberts, Hubel, 2004; Лехович и соавт., 2006). Параллельно с этими изменениями возникает нарушение синтеза и дисбаланс простаноидов материнского и плодового

происхождения (простагландины класса Е и F, простациклин, тромбоксан). Возникающий дисбаланс определяется концентрацией вазоактивных веществ (недостаточная продукция простациклина и простагландинов класса Е или гиперпродукция тромбоксана и простагландинов класса F) сопровождается спазмом сосудов в маточно-плацентарно-плодовом комплексе, вносит существенный вклад в нарушение кровотока между матерью и плодом и, следовательно, влияет на весь ход обменных процессов между ними (Крукиер, 2008; Мозговая и Зайнулина, 2008).

Для испытания и выбора новых методов лечения нами разработана модель психомоторных поражений у новорожденных детей, реализуемая путем введения амниотической жидкости женщин с осложнениями беременности или сыворотки крови их детей беременным крысам, что вызывает морфофункциональные нарушения у потомства. С целью профилактики и коррекции осложнений, возникающих при беременности и гипоксических поражений мозга плода, мы провели исследование влияния курса введений ю-3 полиненасыщенных жирных кислот (со-3 ПНЖК) в эксперименте, а также в клинике на показатели акушерских и перинатальных исходов. Основные эффекты влияния данных веществ обусловлены тем, что они участвуют в нейрогенезе, подавляют активность перекисного окисления липидов, повышая активность ферментов антиоксидантной системы защиты крови, оказывают мембраностабилизирующее действие, нормализуют реологические и коагуляционные свойства крови, и тем самым улучшают кровоток в системе «мать-плацента-плод» (Bourre, 2004; Мозговая и Зайнулина, 2008; Громова и соавт., 2009; Кошелева и соавт., 2009).

Цель работы: изучение эффективности применения со-3 ПНЖК в эксперименте на крысах и в клинике для профилактики и коррекции психомоторных нарушений новорожденных, родившихся от матерей с осложненным течением беременности.

В задачи исследования входило:

1. Воспроизвести на потомстве крыс модель психомоторных нарушений новорожденных детей, родившихся от матерей с осложненным течением беременности, путем введения беременным самкам амниотической жидкости женщин или сыворотки пуповинной крови их детей.

2. Оценка эмбрионального развития, морфологических изменений моторной области коры и психомоторного поведения экспериментальных крысят в постнатальный период.

3. Исследование эффективности пренатального воздействия со-3 ПНЖК для коррекции и предотвращения структурных и функциональных нарушений у крысят в модели психомоторных нарушений новорожденных детей.

4. Изучение эффектов включения оо-З ПНЖК в комплексную терапию беременных женщин для снижения частоты и тяжести осложнений, возникающих при беременности и перинатальной заболеваемости.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Внутриамниотическое введите крысам на 14-й день эмбриогенеза амниотической жидкости женщин с осложненным течением беременности (невынашиванием, гестозом, плацентарной недостаточностью) или сыворотки крови их новорожденных детей с церебральной ишемией вызывает у крысят эмбриологические, морфологические и психомоторные нарушения.

2. Введение крысам со-3 ПНЖК на 14-й, 15-й и 16-й дни беременности при моделировании психомоторных нарушений новорожденных, корригирует структурные и функциональные нарушения у крысят. Профилактическое введение в рацион беременных крыс со-3 ПНЖК, т. е. на 9-й, 12-й, 13-й и 14-й дни беременности, оказывает выраженное нейропротективное действие.

3. Включение со-3 ПНЖК в комплексную терапию осложнений беременности у женщин (невынашивание, гестозы, плацентарная недостаточность) способствует снижению частоты и тяжести осложнений гестационного периода и улучшению перинатальных исходов.

Научная новизна исследования. Впервые показано, что внутриамниотическое введение беременным крысам амниотической жидкости женщин с осложнениями беременности (гестозами, невынашиванием, плацентарной недостаточностью) или сыворотки крови новорожденных с церебральной ишемией вызывает у потомства эмбриотоксический, тератогенный эффекты, морфологические изменения в моторной области коры и нарушение психомоторного поведения. Впервые показано, что введение в рацион беременных крыс со-3 ПНЖК оказывает корригирующее действие на структурные и функциональные нарушения у крысят в модели психомоторных нарушений новорожденных детей. Установлено, что нейропротекторный эффект наиболее выражен при профилактическом приеме со-3 ПНЖК. Своевременное проведение курсовой терапии со-3 ПНЖК позволяет снизить частоту, длительность и тяжесть осложнений, возникающих при беременности (гестозов, плацентарной недостаточности, невынашиваний) у женщин и перинатальную заболеваемость.

Научно-практическое значение результатов работы.

Амниотические жидкости женщин с осложнениями, возникающими при беременности, или сыворотки крови новорожденных с церебральной ишемией способны при внутриамниотическом введении беременным крысам вызвать у их потомства структурные и функциональные нарушения. На данной модели показана эффективность применения со-3 ПНЖК в период беременности для коррекции морфофункциональных нарушений у потомства. Это позволило включить ш-3 ПНЖК в комплексную терапию

женщин для снижения частоты и тяжести осложнений, возникающих при беременности (невынашивания, гестозов, плацентарной недостаточности), пролонгирования беременности и улучшения перинатальных исходов.

Личный вклад соискателя. Автором проведен аналитический обзор отечественной и зарубежной литературы по изучаемой проблеме. Самостоятельно проведены экспериментальные и клинические исследования, статистическая обработка и изложение полученных данных. Экспериментальная часть исследования выполнена на базе Физиологического отдела им. И.П. Павлова и Отдела эмбриологии НИИЭМ СЗО РАМН. Морфологический анализ проводился совместно с к.б.н. Г.П. Обуховой (Физиологический отдел им. И.П. Павлова НИИЭМ СЗО РАМН). Клинические исследования проведены на базе женских консультаций № 9, 36, родильных домов № 9, 13, 16, 18 и НИИ акушерства и гинекологии РАМН имени Д. О. Отта.

Апробация результатов работы. Результаты работы были представлены и обсуждались на Междисциплинарной научной конференции с международным участием «Новые биокибернетические и телемедицинские технологии 21 века для диагностики и лечения заболеваний человека», Петрозаводск, 27-29 июня 2002 г.; на 2-й Всероссийской конференции «Актуальные вопросы функциональной межполушарной асимметрии» Москва, май 2003 г.; на Научной конференции «Актуальные вопросы клинической и экспериментальной медицины» СПбМАПО, Санкт-Петербург, 2003 г.; на Международной конференции «Физиология развития человека», Москва, 22-24 июня, 2009 г. Материалы диссертационной работы докладывались на научных заседаниях Физиологического отдела им. И.П. Павлова НИИЭМ СЗО РАМН.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 12 научных работ, в том числе 6 статей в рецензируемых журналах, рекомендованных перечнем ВАК.

Структура и объем работы. Работа содержит введение, обзор литературы, описание материалов и методов исследований, результаты собственных исследований, их обсуждение, заключение, выводы и список цитируемой литературы, включающий 302 источника. Материалы диссертации изложены на 155 страницах печатного текста. Работа содержит 11 таблиц и 7 рисунков.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Экспериментальная часть работы выполнена на 145 белых крысах (самки и самцы) породы Вистар массой 180-200 г. и на их потомстве (899 крысят). Животных содержали в стандартных условиях вивария при естественном освещении и свободном доступе к воде и пище, исследования проводили в соответствии с правилами, принятыми Европейской конвенцией по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных целей (Страсбург, 1986).

В работе использовали амниотические жидкости 21-й беременной женщины и сыворотки пуповинной крови их новорожденных детей, которые получали из родильных домов № 9,13,16,18 и ПИИ акушерства и гинекологии РАМН имени Д.О. Отта Санкт - Петербурга.

У 11 женщин имело место физиологическое течение беременности и родов, оценка новорожденных по шкале Алгар 8-9 баллов. У 10 женщин беременность протекала с осложнениями (гестозом, угрозой прерывания беременности, предлежанием плаценты). Оценка новорожденных по шкале Апгар составила 5-7 баллов (у одного новорожденного), 6-7 баллов (у двух новорожденных), 6-8 батлов (у семи новорожденных). Биологические жидкости центрифугировались в течение 15 минут со скоростью 3000 об /минуту, хранились при -18°С.

Метод оценки э.мбриотоксического эффекта и действие на постнатальное развитие крысят

Самок на стадии эструс-проэструс подсаживали к самцам в соотношении 3:1 во второй половине дня (после 17-18 часов). Критерием 1-го дня беременности у крыс считали наличие сперматозоидов во влагалищном мазке (Чеботарь, 1985). На 14-й день беременности крыс оперировали и в каждую амниотическую полость рога матки вводили по 0,03 мл амниотической жидкости женщины или сыворотки пуповинной крови новорожденных. Детали проведения методики описаны ранее (Абдаладзе и соавт., 1994). После эвтаназии и вскрытия самок на 20-й день беременности оценивали эмбриотоксический эффект. Определяли число живых и погибших плодов, массу тела плодов, пороки развития (Чеботарь и соавт., 1995). Для обнаружения внешних видимых аномалий развития все живые плоды обследовали под бинокулярным микроскопом типа МБС (Хабриев, 2005). Для выявления патологии внутренних органов исследование проводили по методике Вильсона в модификации А. П. Дыбана (Отдел эмбриологии НИИЭМ АМН СССР) (Чеботарь, 1985; Хабриев, 2005). 20-ти дневные плоды фиксировали в жидкости Буэна не менее 1-й недели, затем переносили в 70° спирт. Перед проведением исследований плоды в течение 10 минут отмачивали в дистиллированной воде и затем подвергали микроанатомическому сечению. Для целей исследования плоды разрезали бритвой по 9-ти сагиттальным срезам, которые изучали под бинокулярной лупой (Дыбан, 1967). В постнатальном периоде жизни наблюдали за физическим развитием потомства. У родивших самок подсчитывали число живых и мертвых новорожденных крысят, измеряли массу тела крысят на 1-е, 4-е и 21-е сутки жизни (Котин, 1985; Методические указания по изучению эмбриотоксического действия фармакологических веществ и влияния их на репродуктивную функцию, 1986; Хабриев, 2005). Для оценки физического развития определяли индексы жизнеспособности, лактации, прироста массы тела. Индекс жизнеспособности (ИЖ) -отношение числа живых крысят на 4-е сутки жизни к числу родившихся крысят (в процентах). Индекс лактации (ИЛ) - отношение числа живых крысят на 21-е сутки жизни к числу живых на 4-е сутки (в процентах). Индекс прироста массы тела (ИПМТ) - отношение массы крысенка на 21 -е сутки жизни к его массе на 4-е сутки жизни (в процентах).

Морфологический анализ V слоя моторной области коры мозга крысят

Морфологический анализ больших пирамидных нейронов V слоя моторной области коры мозга крысят, подвергшихся воздействию сывороткой крови новорожденных детей в раннем онтогенезе, проводили на 23-е и 46-е сутки жизни, с использованием 2-х методов -количественного и качественного. Для количественной оценки больших пирамидных нейронов использовали метод, основанный на ретроградном аксональном транспорте пероксидазы хрена. Детали проведения анатиза описаны ранее (Обухова и соавт., 1992). 30% раствор пероксидазы хрена («Олайна») в объеме 2 мкл вводили билатерально в люмбальное утолщение. Через 2 суток животное подвергали эвтаназии, мозг фиксировали in situ путем перфузии физиологическим раствором, а затем 2,5%-ым раствором глутаральдегида на фосфатном буфере (рН 7,4). Мозг фиксировати в этом растворе течение 5 часов при +4 С затем его перекладывали на 48 часов в 30%-й раствор сахарозы на фосфатном буфере. На микротоме изготавливаш серию фронтальных срезов мозга толщиной 60 мкм. Пероксидазу хрена выявляли по методике М.М. Мезулам (Mesulam, 1982). По атласу фронтальных срезов мозга крысы, в моторной области коры отбирали уровни, соответствующие представительству задних лап (Paxinos, Watson, 1982; 2005). Подсчитывалось количество нейронов на 3-х уровнях в правом и левом полушариях мозга.

отдельно по каждой крысе и суммарно по всем крысам.

Для анализа, отражающего развитие дендритной системы больших пирамидных нейронов, был применен метод Гольджи-Копш (Озирская и Туманова, 1992; Мелик-Мусян и Фанарджяя, 2003). Мозг 23-х и 46-ти суточных крысят фиксировали смесью формалина и 3,5%-го бихромата калия в течение 3-4 суток. После серебрения 0,75%-ным раствором нитрата серебра в течение 3-х суток мозг животных заливали целлоидином и изготавливали на микротоме серии фронтальных срезов толщиной 100-120 мкм из моторной области коры мозга крысят, соответствующей представительству задних конечностей. С препаратов сделаны рисунки 82-х больших пирамидных нейронов при увеличении в 400 раз. Рисунки были морфометрически проанализированы на специальном приборе МОР-ЗО. Определяли следующие характеристики больших пирамидных нейронов V слоя моторной области коры: площадь дендритного ареала, длину апикального дендрита, суммарную длину дендритов и суммарное число ветвлений дендритов для каждого нейрона.

Метод оценки психомоторного поведения крысят

Анализ психомоторного поведения животных проводили по ранее разработанной в лаборатории методике (Атаева и др., 1993). На 21-30-е сутки жизни контрольные и экспериментальные крысята тестировались на переходных сооружениях. Установка включала две одинаковые площадки размером 20x20 см, расположенные на высоте 35 см, между которыми помещались различные переходные сооружения длиной 120 см:

а) лестница, изготовленная из металлической проволоки диаметром 0,2 см, шириной 1,0 см, с расстоянием между ступенями 2 см; б) рельсы, состоящие из 2 параллельных металлических реек, шириной 0,3 см, расстоянием между рейками 2 см; в) эстакада - рейка шириной 1 см.

На одной из площадок находился съемный домик с норковым отверстием и пищевым подкреплением, который переставлялся в зависимости от направления движения животного. Животным предоставляли последовательно усложняющиеся варианты перехода с одной площадки на другую (лестница, рельсы, эстакада). Каждый тест проводился 4 раза в день в течение 3-х дней. Во время эксперимента регистрировали следующие показатели: время от начала опыта до начала пробежки по переходным сооружениям (латентный период), время пробежки крысят по переходным сооружениям, количество срывов лапок.

Метод коррекции морфофункциональных нарушений у потомства крыс, путем пренаталыгого воздействия со-3 ПНЖК

Для коррекции структурных и функциональных нарушений у крысят, вызванных введением амниотической жидкости женщин с осложнениями беременности или сыворотки крови новорожденных детей с церебральной ишемией, использовали эпаден. Препарат разработан в НИИ биотехнологий (Москва), представляет собой 30% концентрат ш-3 ПНЖК, содержащий эйкозапентаеновую и докозагексаеновую кислоты. Жирные кислоты, входящие в состав препарата, участвуют в нейрогенезе, являются естественными элементами функционирования клеток, обладают антиагрегационной, антитромботической активностью и мембраностабилизирующим действием, оказывают антиоксидантное воздействие, улучшают микроциркуляцию и метаболизм в тканях. Препарат утвержден Госкомсанэпиднадзором России, сертификат № 63 от 10. 11. 1993 г. Регистрационное удостоверение № 002600. Р. 643.02.2001 от 21,02. 2001 г. выдан Министерством здравоохранения Российской Федерации.

Беременным крысам ш-3 ПНЖК вводили внутрижелудочно в дозе 0,5 мл. Использовали 2 варианта введения: 1-й вариант - после воздействия амниотической жидкости или сыворотки крови новорожденных, на 14-й, 15-й и 16-й дни беременности и 2-й вариант - до воздействия амниотической жидкости или сыворотки крови, на 9-й, 12-й, 13-й и 14-й дни беременности. Контрольную группу составили крысята, матерям которых в те же сроки беременности и тем же способом вводили физиологический раствор.

Клинические исследования. Обследованы 149 женщин с осложнениями, возникшими при беременности, в возрасте от 18 до 34 лет, которые были разделены на 2 группы. 1 -я группа

- 97 беременных, получили только традиционное лечение. 2-я группа - 52 беременных, получили комплексную терапию, т. е. одновременно с традиционной терапией принимали эпаден. В каждой капсуле содержится 300 мг эйкозапентаеновой и докозагексаеновой кислоты. Беременные получали препарат с их письменного информированного согласия по 2 капсулы 3 раза в день или 1,8 г/сутки. Проводилось 2 курса лечения - с 20 по 24 неделю и повторно через 1,5 месяца с 30 по 34 недели беременности. Обследование беременных женщин включало клинический и биохимический анализы крови, ультразвуковое исследование, кардиотокографию, допплерометрию маточных, плацентарных и плодовых сосудов.

Клиническое обследование новорожденных детей включало оценку состояния по шкале Апгар и неврологический осмотр. Оценку тяжести состояния ребенка при рождении проводили с использованием критериев, предложенных В. Апгар (Шабалов и соавт., 2003; Володин, 2007). Оценивали по балльной системе каждый из 5-ти показателей: частота сердечных сокращений, дыхание, мышечный тонус, рефлексы, цвет кожи в конце 1 -й и 5-й минуты после рождения. Согласно шкале, при отсутствии сердечных тонов, дыхания, мышечного тонуса, рефлексов, бледности кожи ставили оценку «0» баллов. При частоте сердцебиения в 1 минуту менее 100 ударов, нерегулярном и медленном дыхании, умеренно сниженном мышечном тонусе (слабые движения), легкой гримасе на лице, цианотичности конечностей по «1» баллу. Сердцебиение в 1 минуту более 100 ударов, регулярное дыхание, активные движения, физиологическая поза новорожденного, громкий крик, розовые кожные покровы оценивали на «2» балла. В зависимости от суммарной оценки по шкале Апгар в конце 1-й минуты жизни выделяли умеренную и тяжелую формы асфиксии. Оценку 7 баллов и более через 1 минуту после рождения имели здоровые новорожденные дети, что свидетельствовало об отсутствии асфиксии, 4 - 6 баллов - признак умеренной асфиксии, 1-3 балла - тяжелая асфиксия.

При неврологическом осмотре проводили оценку поведенческого состояния, коммуникабельности, мышечного тонуса, спонтанной двигательной активности, физиологических рефлексов периода новорожденности, сухожильных рефлексов, активности сосания и глотания, наличия патологических симптомов. Лабораторные исследования заключались в изучении клинического анализа крови, общего анализа мочи, определении величины гематокрита, содержания глюкозы в крови, показателей кислотно-основного состояния и газов крови, нейросонографии, компьютерной томографии. Все дети до 1 года жизни находились под наблюдением невропатолога и неонатолога.

Методы статистической обработки данных. Оценку достоверности данных эмбриологических изменений, морфометрии, психомоторного поведения, в том числе показатели срывов лапок проводили с помощью t-критерия Стьюдента для независимых выборок. Частоты появления той или иной патологии у беременных женщин и новорожденных детей, приведенные в таблицах 4, 5, 6, 7 сравнивали путем анализа таблиц сопряженности с использованием точного метода Фишера (Бююль, Цёфель, 2002). Все статистические расчеты проводили с помощью компьютерной программы SPSS 11.5. Результаты оценивали как статистически значимые при р<0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Эмбриотоксический эффект и постнатальнос развитие крысят

Оценка показателей эмбриотоксического эффекта и постнатального развития крысят показала, что введение амниотической жидкости женщин с физиологическим течением беременности не оказывало эмбриотоксического и тератогенного эффектов и не влияло на физическое развитие крысят (группа А) (табл. 1 и 2). Воздействие амниотической жидкостью женщин с осложнениями беременности (группа Б) вызывало внутриутробную гибель, аномалии развития и снижало массу плодов (табл. 1).

Таблица 1. Эмбриотоксический эффект у плодов крыс, вызванный введением амниотической жидкости женщин на 14-е сутки эмбрионального развития.

Группы крысят Количество плодов, подвергшихся воздействию Количество плодов, выживших на 20-е с\тки беременности Количество плодов, погибших внутриутробно (абс. число % ± ст. опсг) Средняя масса плода (г) Частота пороков развития плода (абс. число %± ст. огкл.)

К 304 278 26(8,7*1,6)% 2,04±0,3 0

А 58 58 0 2,01±0,04 0

Б 61 26 35 (57,416,4)%« 4 1,65±0,0** 8 (30,7± 1,2)%**

В 62 30 32(51,6± 6,3)%** 2,0!±0,03* 0

Г 44 33 11(25,517,5)%* 2,16+0,04* 0

Обозначения: К - внутриамниотическое воздействие физиологическим раствором на 14-й день беременности.; А - воздействие амниотической жидкостью женщин с физиологическим течением беременности; Б - воздействие амниотической жидкостью женщин с осложненным течением беременности (АЖ2); В - воздействие ЛЖ2 и внутрижелудочное введение ш-3 ПНЖК на 14-й, 15-й, 16-й дни беременности; Г - воздействие АЖг и внутрижелудочное введение ю-3 ПНЖК на 9-й, 12-й, 13-й, 14-й дни беременности.

* - р<0,05 статистически значимые различия по сравнению с контролем К. ж- р20,05 статистически значимые различия по сравнению с группой А.

# - р20,05 статистически значимые различия по сравнению с группой Б.

Таблица 2. Физическое развитие крысят, подвергшихся воздействию амниотической жидкости женщин на 14-е сутки эмбрионального развития.

Группы крысят Количество плодов, подвергшихся воздействию Количество живорожденных крысят Количество плодов, погибших внутриутробно (абс. число % ± ст. огкл.) ил% ИПМТ% ИЖ%

К 76 69 7 (9,2 ±1,6)% 100 374 97.1

А 50 44 6(12,044,6)% 100 460 100

Б 77 52 25(32,5±5,3)%*4 75*'* 452 55,1**

В 86 43 43(50.0±5,4)%** 100* 591 48,7**

Г 40 31 9(22,5±4,8)%й 100" 582 87,9*

Обозначения: ИЛ - индекс лактации; ИПМТ - индекс прироста массы тела; ИЖ - индекс жизнеспособности. Остальные обозначения те же, что и в таблице 1.

* - р<0,05 статистически значимые различия по сравнению с контролем К. А- р50,05 статистически значимые различия по сравнению с группой А.

# - р<0,05 статистически значимые различия по сравнению с группой Б.

Данные показатели крысят группы Б достоверно отличались от соответствующих показателей крысят контрольной группы К и группы А. Оценка постнатального развития показала, что крысята отставали в физическом развитии, наблюдалось достоверное повышение эмбриолетального эффекта, снижение индексов лактации и жизнеспособности по сравнению с контрольной группой крысят К и группой А, а индекс прироста массы тела не претерпевал значительных изменений (табл. 2).

Добавление в рацион беременным крысам со-3 ПНЖК, независимо до или после воздействия на 14-й день эмбриогенеза амниотической жидкостью женщин с осложнениями беременности, не только предотвращало возникновение пороков развития, но и сопровождалось увеличением массы плодов, индексов лактации до контрольных показателей (табл. 1 и 2).

Достоверных отличий от контрольной группы К и группы А не наблюдалось, однако, отмечалось достоверное увеличение показателей по сравнению с группой Б. Только профилактическое (за 3 дня до моделирования патологии) добавление в рацион беременным крысам со-3 ПНЖК снижало внутриутробную гибель плодов и увеличивало индекс жизнеспособности (табл. 2). Эти показатели были сопоставимы с показателями крысят группы К и А и достоверно отличались от показателей крысят группы Б.

Таким образом внутриамниотическое введение на 14-й день эмбриогенеза крыс амниотической жидкости женщин с физиологическим течением беременности не оказывало эмбриотоксического, тератогенного эффектов и не влияло на физическое развитие крысят. Аналогичное воздействие амниотической жидкостью женщин с осложненным течением беременности вызывало эмбриотоксический и тератогенный эффекты, снижало жизнеспособность потомства.

Известно, что рост и развитие плода зависят от функционирования плаценты, возможности поступления кислорода и питательных веществ от матери к плаценте, и изменений в ней, непосредственно связанных с нарушениями кровотока. Последующие метаболические нарушения в системе «матъ-плацента-плод», активация процессов перекисного окисления липидов с накоплением конечных продуктов приводят к гипоксии клеток и тканей, являясь пусковым механизмом структурных и функциональных нарушений в плаценте, а также в жизненно важных органах плода (Кулаков и др., 2004). Нарушения функции плаценты (транспортной, дыхательной, эндокринной) приводят к внутриутробной гибели, возникновению пороков развития, снижению массы плодов и жизнеспособности потомства (Rees, Jnder, 2005; Назарова и др., 2007; Eixarch et. al, 2009).

Введение в рацион беременных крыс со-3 ПНЖК на 14-й, 15-й и 16-й дни предотвращало тератогенный и снижало эмбриотоксический эффекты. Профилактическое добавление в рацион беременных самок препарата, снижало эмбриолетальность и повышало жизнеспособность потомства. Можно предположить, что благодаря мембраностабилизирующему действию, влиянию на перекисное окисление липидов и повышению антиоксидантной активности крови, со-3 ПНЖК улучшают перфузию плаценты (Степанян и соавт, 2010). Корригирующий эффект может вызываться также изменением состояния сосудистого тонуса и системы микроциркуляции вследствие устранения дисбаланса простагландинов и лейкотриенов (Smuts et. al, 2003; Серов и Сидельникова, 2008).

Морфологические изменения моторной области коры мозга крысят при воздействии сывороткой крови новорожденных с церебральной ишемией

Морфометрические исследования показали, что организация дендритной системы больших пирамидных нейронов моторной коры на 23-е и 46-е сутки жизни у контрольных животных и крысят группы А (перенесших пренатальное

воздействие сыворотки крови здоровых новорожденных) оказалась сходной. На 23-е сутки жизни крысят группы Б (крысята, подвергшиеся пренатальному воздействию сывороток крови новорожденных детей с церебральной ишемией), в организации дендритной системы нейронов коры были отмечены изменения, чего не наблюдалось среди контрольных животных и крысят группы А. В V слое моторной коры выявлено достоверное уменьшение площади дендритного ареала (в 2-2,2 раза), суммарной длины дендритов и суммарного числа дендритных разветвлений (на 50-70%) пирамидных нейронов. Длина апикального дендрита крысят группы Б была сопоставима с контрольной группой животных и группой А. На 46-е сутки постнатального онтогенеза у животных группы Б, статистически значимых различий в организации дендритной системы нейронов V слоя коры в сравнении с контролем и группой А не наблюдалось.

У 23 суточных крысят, перенесших воздействие сывороткой крови здоровых новорожденных на 14-й день эмбриогенеза (группа А), достоверных отличий в количестве пирамидных нейронов от контрольной группы (интактные крысята) не наблюдалось (табл. 3). В левом полушарии мозга на уровне -2.3 (Paxinos, Watson, 2005) достоверно снизилось количество больших пирамидных нейронов по сравнению с интактными животными. На 23-е сутки жизни крысят группы Б (после пренатального воздействия сывороткой крови новорожденных с церебральной ишемией) наблюдалось достоверное снижение количества нейронов на всех уровнях и в обоих полушариях мозга по сравнению с контрольной группой и группой А. На 46-е сутки жизни статистически значимого снижения количества больших пирамидных нейронов в левом и в правом полушариях мозга на всех уровнях зоны представительства задних лап у крысят группы Б по сравненшо с крысятами контрольной группы и группы А не выявлено.

Таблица 3. Среднее количество нейронов моторной области коры мозга на разных уровнях в зоне представительства задней лапы после пренатального воздействия ш-3 ПНЖК (х±5х).

Группы крысят Возраст крысят (сутки жизни) Уровни по стереолгаксическому атласу [Paxinos & Watson, 2005]

0 2 -0.8 -2.3

Левая Правая Левая Правая Левая Правая

К 20-23 95,5±(3.0 76=10 П2±!2,0 &Ш1.0 139±9,0 118±!0.0

К 46 110*13.0 105±2,5 140±16,0 117±12,0 149*105 123±14.0

А 23 79,4±8.0 75±12.0 105.4±7,0 107±8,3 78±7,0* 92±8.0

Б 23 12-2±5,2** 10,4±5" 23±7.0*4 9±3,0*** 9±4,0***

В 23 52,2±И,0" мдаи.о* 4з±ю,о»А 45±11,0*4 27±5,0*А 44±10.0'4

В 46 100*11,6 9ВД3.0 132±14,0 113±14,0 121±12,4 100±14.0

Обозначения: К - интактные крысята; А - воздействие на 14-й день эмбриогенеза крыс сывороткой крови здоровых новорожденных; Б - воздействие на 14-й день эмбриогенеза крыс сывороткой крови новорожденных с церебральной ишемией (СКг); В - воздействие на 14-й день эмбриогенеза крыс СК2 и внугрижелудочное введение ш-3 ПНЖК на 14-й, 15-й, 16-й дни беременности.

* - р<0,05, ** - р<0,01 статистически значимые различия по сравнению с контролем К. А - р20,05 статистически значимые различия по сравненшо с группой А.

# - рй),05 статистически значимые различия по сравнению с группой Б.

Анализ дендритной системы нейронов на 23-е сутки жизни крысят группы В показал, что введение беременным крысам со-3 ПНЖК на 14-й, 15-й и 16-й дни эмбриогенеза, после воздействия сывороткой крови новорожденных с церебральной ишемией восстанавливает площадь дендритного ареала, суммарную длину дендритов и суммарное число дендритных разветвлений. Морфометрические показатели были достоверно выше, чем в группе Б и не отличались от контроля и группы А. Количество больших пирамидных нейронов на 23-е сутки постнатального онтогенеза у крысят группы В на уровне 0.2 в левом и в правом полушариях, мозга не отличалось от контроля (интактные крысята) и группы А, и было достоверно выше, чем в группе Б (табл. 3). На уровнях -0.8 и -2.3 коры в данной группе несмотря на значительное увеличение количества нейронов по сравнению с группой Б, количество нейронов оставалось достоверно меньше, чем у крысят группы Айв контроле. На 46-е сутки постнатального онтогенеза крысят, матерям которых вводили в рацион со-3 ПНЖК (группа В), различий в количестве и в организации дендритной системы нейронов V слоя моторной коры с контрольной группой и группой А не выявлено.

Полученные факты свидетельствуют о том, что пренатальное воздействие сывороткой крови новорожденных с церебральной ишемией нарушает развитие моторной коры мозга в постнатальном онтогенезе крысят. Уменьшение количества нейронов и изменения в структуре дендритной системы моторной области коры обнаружено только у крысят группы Б на 23-е сутки постнатального онтогенеза. К 46-м суткам жизни различия в количественном составе и в строении дендритной системы нивелируются. Так как обе группы (23-х и 46-ти суточные крысята) подвергались в пренатальный период воздействию сыворотки крови новорожденных с церебральной ишемией, можно предположить, что задерживается нормальное по временным характеристикам образование синаптического аппарата пирамидных нейронов, проявляющееся уменьшением количества нейронов и их дендритной системы. Пренатальное введение в рацион беременных самок со-3 ПНЖК восстанавливало в постнатальном онтогенезе животных количество и структуру дендритной системы нейронов, что способствовало нормальному формированию и развитию двигательной области коры.

Психомоторное поведение крысят в норме и при моделировании патологии

Для оценки психомоторного поведения крысят на 21-30 сутки жизни использованы тесты лестница, рельсы, эстакада. У интакгных крысят время от начала опыта до начала пробежки по сооружениям и время прохождения животных по переходным сооружениям в 1-й день исследований во всех тестах было больше, чем в последующие дни и снижалось по мере обучения. Усложнение задания (предъявление более сложного теста «эстакада») вызывало значительное увеличение времени от начала опыта до начала пробежки и времени прохождения по переходным сооружениям (рис. 1, 2). Количество срывов лапок

по мере обучения и усложнения тестов у интактных крысят уменьшалось (рис. 3).

После пренатального воздействия сывороткой крови здоровых новорожденных (группа А) время от начала опыта до начала пробежки по сооружениям у крысят во всех тестах соответствовало контрольным показателям. Показатели двигательной активности (время прохождения по переходным сооружениям) в тестах «лестница» и «рельсы» соответствовали показателям у контрольных крысят. По мере усложнения задания (предъявление теста «эстакада») отмечалось достоверное снижение времени прохождения по переходному сооружению по сравнению с животными контрольной группы, т. е. выявлялось достоверное увеличение двигательной активности (рис. 2). Несмотря на выявленное нами повышение двигательной активности в тесте «эстакада», количество срывов лапок не только не увеличилось, а также как и в тестах «лестница», «рельсы», снижалось и соответствовало контрольным показателям (рис. 3). Нарушение психомоторного поведения регистрировалось в группе крысят, подвергшихся воздействию в раннем онтогенезе сывороткой крови новорожденных с церебральной ишемией (группа Б). Особенности психомоторного поведения заключались в том, что по мере усложнения тестов («эстакада») время от начала опыта до начала пробежки и время пробежки по переходным сооружениям не только не возрастало, а даже достоверно было ниже, чем в контрольной группе (интактные крысята) (рис. 1, 2). Динамика количества срывов лапок у крысят в тестах («рельсы», «эстакада») совпадала: выявлялось их достоверное увеличение во все дни опытов по отношению к группе А и к контролю. На 3-й день исследования, несмотря на процесс обучения, количество срывов лапок у животных было выше, чем в 1-й день (рис. 3).

Снижение времени от начала опыта до начала пробежки по сооружениям свидетельствует о том, что крысята не способны выделять новизну ситуации, у них нарушена ориентировочная реакция. Новизна ситуации (усложнение тестов) влечет за собой ориентировочную реакцию, в которой присутствует эмоциональная компонента. Выявленное уменьшение времени пробежки по переходным сооружениям при усложнении тестов указывает на повышенную двигательную активность крысят. Несмотря на процесс обучения, количество срывов лапок по мере усложнения теста увеличивалось, т. е. тренировки не приводили к снижению числа срывов лапок, что говорит об ухудшении способности крысят к обучению. Полученные результаты свидетельствуют о том, что воздействие в пренатальный период сывороткой крови новорожденных с церебральной ишемией, приводит к изменениям ориентировочной реакции, эмоциональности, двигательного поведения и когнитивным нарушениям у потомства.

сек

лестница

рельсы

эстакада

60 1 *

I 2 3 1 2 3 1 2 3 дни

Рисунок 1. Динамика средних показателей времени от начала опыта до начала пробежки по переходным сооружениям.

Обозначения: по оси ординат - время от начала опыта до начала пробежки по сооружениям в секундах, по оси абсцисс - дни исследований. □ - интактные крысята

В - воздействие на 14-й день эмбриогенеза крыс сывороткой крови здоровых новорожденных, в - воздействие на 14-й день эмбриогенеза крыс сывороткой крови новорожденных с церебральной ишемией (СК2).

И -воздействие на 14-й день СК2 и внутрижелудочноевведениеш-З ПНЖК на 14-й, 15-й, 16-йд.э. к. ® - воздействие на 14-й день СК2 и внутрижелудочное введение ю-З ПНЖК на 9-й, 12-й, 13-й, 14-й д. э. к.

* - р£0,О5, **- р<0,01 статистически значимые различия по сравнению с контролем К.

# - рЗ),05 статистически значимые различия по сравнению с группой Б

сек лестница рельсы эстакада

20 -I »

12 3 12 3 1 2 3 Д"И

Рисунок 2. Динамика средних показателей времени пробежки по переходным сооружениям. По оси ординат - время пробежки по переходным сооружениям в секундах, по оси абсцисс - дни исследований. Остальные обозначения те же. что на рисунке 1.

* - р<0,05, ** - р<0,01 статистически значимые различия по сравнению с контролем К.

# - р£0,05 статистически значимые различия по сравнению с группой Б.

10 я 6 4 2

12 3 12 3 12 ЗДИ"

Рисунок 3. Динамика средних показателей количества срывов лапок у крысят. По оси ординат - количество срывов лапок, по оси абсцисс - дни исследований. Остальные обозначения те же, что и на рисунке I.

* - р<0,05, ** - р<0,01 статистически значимые различия по сравнению с контролем К. А - р£0,05 статистически значимые различия по сравнению с группой А.

# - р^0,05 статистически значимые различия по сравнению с группой Б.

У крысят после пренатального введения беременным самкам со-3 ПНЖК на !4-й, 15-й, 16-й дни эмбриогенеза показатели времени от начала опыта до начала пробежки, времени пробежки по сооружениям и количество срывов лапок достоверно отличались от крысят группы Б и были сопоставимы с контролем и группой А (рис. 1, 2, 3). Динамика показателей психомоторного поведения у крысят, матери которых получили со-3 ПНЖК на 9-й, 12-й, 13-й и 14-й дни эмбриогенеза, выявила, что наиболее успешная коррекция достигалась при профилактическом приеме препарата.

Таким образом проведенные исследования показали, что у крысят, перенесших воздействие на 14-й день эмбриогенеза сыворотки крови новорожденных с церебральной ишемией, наблюдаются уменьшение объема дендритной системы и количества больших пирамидных нейронов в раннем постнатальном онтогенезе, т. е. нарушается процесс развития сенсомоторной коры. Уменьшение количества больших пирамидных нейронов может быть одной из причин нарушения формирования двигательных реакций крысят. Изменение структуры коры мозга в раннем онтогенезе может нарушать нормальный процесс формирования межнейронных связей и приводить к нарушению двигательного поведения, эмоциональности и к ухудшению процессов обучения. Добавление в рацион беременных крыс ю-3 ПНЖК корректировало нарушения психомоторного поведения крысят. Наиболее выраженный нейропротекторный эффект достигался при профилактическом введении препарата беременным самкам.

Эффективность коррекции осложнений беременности и перинатальных исходов с помощью ю-3 ПНЖК

Полученные экспериментальные данные указывают на эффективность применения со-3 ПНЖК для профилактики и коррекции структурных и функциональных нарушений у крысят при моделировании психомоторных

нарушений новорожденных детей, что и определило целесообразность применения 0)-3 ПНЖК при осложнениях беременности у женщин одновременно с патогенетической терапией. Обследованы 149 беременных женщин: 1-я группа 97 беременных, которые получали только традиционное лечение; 2-я группа 52 беременных, получавших комплексную терапию, т. е. одновременно с традиционной терапией принимали со-3 ПНЖК - эпаден по 2 капсулы 3 раза в день или 1,8 г/сутки (1 капсула содержит 300 мг эйкозапентаеновой и докозагексаеновой кислоты). Проводилось 2 курса лечения с 20 по 24 неделю и повторно через 1,5 месяца с 30 по 34 недели беременности.

К причинам, способствующим развитию перинатальных гипоксических поражений мозга плода, относят соматические заболевания, осложнения беременности и родов, частота которых была одинаково высока среди всех обследованных женщин. Результаты нашего анализа показали отсутствие достоверных различий влияний социально-биологических факторов, акушерско-гинекологического анамнеза и соматических болезней на развитие патологии беременности (табл. 4).

Таблица 4. Структура и частота выявленных факторов риска развития осложнений беременности.__

Факторы риска 1 группа 2 группа

I. Социально-Биологические факторы

Возраст матери моложе 20 лет 4(4,1%) 3 (5,7%)

32 года и старше 9(93%) 4(7.6%)

Вредные привычки 12(12,4%) 12(23%)

11. Акущерско-гинекологический анамнез

Миома матки 6(6,2%) 4(7.6%)

Мергворождение, антенатальные потери плодов 11(11,3%) 4(7,6%)

Самопроизвольные и искусственные аборты 58(59.7%) 24(46,1%)

III. Соматическая патология

Сердечно-сосудистые заболевания 40(41.2%) 19(36,5%)

1. Гипертоническая болезнь I, И.111 ст. 7 (7,2%) 5 (9,6%)

2. Вегетососудистая дистопия по гипотоническому типу 24(24,7%) 12(23%)

3. Миокардиодистрофия без НКО 9(93%) 2 (3,8%)

Заболевания мочевьшелнгельиой системы 31(32%) 11(21,2%)

1. Хронический пиелонефрит 24(24,7%) 9(17.3%)

2. Мочекаменная болезнь 7(7,2%) 2(3,8%)

Заболевания >вдокрииной системы 16(16,5%) 10(19,2%)

1. Ожирение 1, И. III степени 11(11,3%) 6(11,5%)

2. Дисфункции щитовидной железы 5(5.1%) 4(7.7%)

Железодефицитиая анемия (НЬ 80-110 г/л) 36(37,1%) 20(38.4%)

Примечание: 1 группа - беременные, получавшие традиционную терапию (п=97). 2 группа - беременные, получавшие комплексную терапию (п=52).

Большинство беременных отмечали в анамнезе самопроизвольные выкидыши (в 1-й группе 59,7% и во 2-й группе 46,1%, р>0,2), мертворождения и

антенатальные потери плодов (11,3% и 7,6%, р>0,2). Результаты исследования экстрагенитальной патологии в группе женщин получивших комплексную терапию показали, что по структуре они не отличались от данных у женщин получивших традиционную терапию (р>0,2), при этом ведущее место в обеих группах занимали анемии, заболевания сердечно-сосудистой, эндокринной и мочевыделительной систем (табл. 4).

Таблица 5. Структура и частота осложнений в период беременности и родов.

Факторы риска 1 группа 2 группа

Угроза прерывания во II и в III триместре беременности 37(38,1%) 15(28.8%)

Гестозы 77 (79,3%) 30(57.6%)«*

1. Отеки беременых 34(35%) 14(26,9%)

2. Преэклачпсия легкой степени 27(27.8%) 10(19,2%)

3. Преэклампсия средней тяжести 12(12,4%) 6(11,5%)

4. Тяжелая преэклампсия 4(4,1%) 0

Задержка развития плода 21 (21,6%) 8(15,4%)

Маловодие 14(14,4%) 4(7,7%)

Преждевременное излитас околоплодных вод 36(37,1%) 20(38,4%)

Аномалии родовой деятельности 43 (44,3%) 23(44.2%)

1. Первичная и вторичная слабость 24(24,7%) 11(21,1%)

2. Дискоординация родовой деятельности 6(6,2%) 5(9.6%)

3. Стремительные роды 8(8,3%) 4 (7,7 %)

4. Затяжные роды 5(5,2 %) 3(5.8%)

Родостимуляция 24(24.7%) 11(21,1%)

Преждевременные роды 23 (23,7%) 6(11,5%)

Срочные ролы 74(76,3%) 46(88,5%)

Примечание: 1 группа - беременные, получавшие традиционную терапию (п=97). 2 группа - беременные, получавшие комплексную терапию (п=52). ** -р<0,01 достоверность отличий от показателей женщин 1-й группы.

Частота интранатальных факторов риска (преждевременное излитие околоплодных вод, аномалии родовой деятельности, родостимуляция) в группах сравнения достоверно не отличались (табл. 5). Наиболее частыми осложнениями беременности были гестозы, угроза прерывания беременности, преждевременные роды (табл. 5). Среди женщин, которые получали традиционную терапию, доля гестозов была достоверно выше, чем среди женщин, получивших комплексную терапию (р=0,007). Снижение гестозов было обусловлено отсутствием случаев тяжелой преэклампсии, а также снижения частоты легких форм гестоза (отеков беременных и преэклампсии легкой степени). Неэффективность традиционной терапии, нарастание тяжести гестоза и симптомов плацентарной недостаточности приводило к увеличению преждевременных родов (явилось причиной родоразрешения беременных женщин в 33-34 недели гестации) и негативно отражалось на состоянии здоровья новорожденного. У детей выявлялись тяжелые неврологические нарушения,

которые требовали длительного лечения. В группе женщин, принимавших ш-З ПНЖК, случаев прерывания беременности по причине тяжелого течения гестоза не отмечено. Досрочное родоразрешение потребовалось при длительном течении гестоза и проводилось на более поздних сроках (36-37 недель гестации), что способствовало увеличению числа случаев своевременных родов и снижению перинатальной заболеваемости.

Частота угрозы прерывания беременности в группе женщин, получивших традиционную терапию, была в 1,3 раза выше, чем в группе женщин, получивших комплексную терапию. После проведения комплексной терапии отмечалась тенденция к более частому завершению беременности своевременными родами по сравнению с группой женщин получивших традиционную терапию (88,5% во 2-й группе против 76,3% в 1-й группе, р=0,085). У женщин, получивших традиционную терапию, беременность осложнялась преждевременными родами в 2 раза чаще, чем у женщин, получивших комплексную терапию (выявлена тенденция повышения числа преждевременных родов в отличие от женщин получивших комплексную терапию - 23,7% и 11,5% соответственно, р=0,085). Это закономерно и обусловлено высокой частотой угрозы прерывания беременности (38,1%), а также гестозами у беременных этой группы. Установлено, что в группе беременных, получивших комплексную терапию, гестационный возраст плода к моменту рождения колебался от 34 до 36 недель. Наибольшая частота потерь беременности, после традиционной терапии пришлась на сроки 29-32 недели, в связи с этим исход для плода в данной группе беременных представляется наиболее неблагоприятным. Полученные результаты показали, что включение ш-З ПНЖК в комплексную терапию беременных женщин дало возможность улучшить клиническое течение беременности, пролонгировать ее продолжительность, снизить угрозу прерывания беременности, долю преждевременных родов и увеличить количество своевременных родов.

Таким образом включение ш-З ПНЖК в комплексную терапию приводило к тому, что симптомы невынашивания, гестозов и плацентарной недостаточности, выявленных на ранних сроках не прогрессировали или прогрессировали медленно. Это способствовало пролонгированию беременности до оптимальных сроков родоразрешения и, тем самым, снижало риск развития перинатальной патологии.

Прием беременными ш-З ПНЖК оказывал положительное воздействие и на состояние новорожденных детей, несмотря на наличие материнских, антенатальных и интранатальных факторов риска. Данные, представленные в таблице 6, свидетельствуют о наибольшем проценте недоношенных детей, отмечаемом среди женщин, получивших традиционную терапию, и составляющим 23,7%, что объясняется высокой частотой угрозы невынашиваний, преждевременных родов и гестозов. Применение женщинами ю-3 ПНЖК во время беременности выявило тенденцию к снижению случаев рождения недоношенных детей (11,5% во 2-й группе и 23,7% в 1-й группе, р=0,085). Частота рождения недоношенных детей была в 2 раза ниже, чем среди женщин, получивших только традиционную терапию. Необходимо отметить, что в структуре недоношенных

детей у беременных, получивших традиционную терапию, доля глубоконедоношенных (менее 32 недель) встречалась достоверно чаще, чем среди женщин, получивших комплексную терапию (р=0,007) (табл. 6). Таблица 6. Частота рождения доношенных и недоношенных детей.

Срок гесташш 1 группа 2 группа

Доношенные дети 74(76,3%) 46 (8&5%)

Недоношенные лети 23 (23,7%) 6(11,5%)

Глубоконедоношенные дети (срок гесташи 28-32 недели) 20(20,6%) 2 (3,8%)**

Примечание: 1 группа - дети, родившиеся от матерей, получавших традиционную терапию (п=97); 2 группа - дети, родившиеся от матерей, получавших комплексную терапию (п=52).

** - р <0,01 достоверность отличий от показателей 1-й группы.

Это также вносит негативный вклад в показатели перинатальной и детской заболеваемости у детей, родившихся от матерей, получивших традиционную терапию. Данный факт является доказательством негативного влияния осложненного течения беременности, в том числе, развития плацентарной недостаточности, на внутриутробное развитие плода. Положительное влияние комплексной терапии беременных на состояние новорожденных при рождении проявлялось в оценке их состояния по шкале Апгар. Включение со-З ПНЖК в комплексную терапию беременных женщин привело к тому, что достоверно увеличилось число детей, родившихся в удовлетворительном состоянии (р=0,043) (табл. 7).

Таблица 7. Оценка состояния новорожденных детей при рождении.

Состояние новорожденных при рождении 1 группа 2 группа

Удовлетворительное состояние 8 баллов в конце 1-й минуты 9 баллов в конце 5-й минуты 69(71,1%) 45 (82,7%) *

Умеренная асфиксия 4-6 баллов в конце 1-й минуты 7-8 баллов в конце 5-Й минуты 25 (25,8%) 9(17.3%)

Тяжелая асфиксия 1-3 баллов в конце 1-Й минуты 5-6 баллов в конце 5-й минуты 3 (3,1%) 0

Примечание: 1 группа - дети, родившиеся от матерей, получавших традиционную терапию (п=97); 2 группа - дети, родившиеся от матерей, получавших комплексную терапию (п=52). * - р <0,05 достоверность отличий от показателей 1-й группы.

Большинство детей, родившихся от матерей, принимавших со-З ПНЖК во время беременности, родились в удовлетворительном состоянии или имели умеренную асфиксию. Детей, родившихся в тяжелой асфиксии, не отмечено. В то время как в группе матерей, получивших только традиционную терапию, лишь 71,1% имели нормальную (8-9 баллов) оценку состояния по шкале Апгар, 28,9%-родилось в асфиксии различной степени тяжести, в том числе 3,1% в асфиксии тяжелой степени. Это связано с осложненным течением беременности у данной группы женщин, высокой частотой гестозов, преждевременных родов (недоношенностью), отсутствием комплексной терапии и нарушениями состояния новорожденных, выявленных впоследствии при проведении обследования.

Новорожденные обеих исследуемых групп женщин имели различные по степени выраженности неврологические нарушения в неонаталыюм периоде. Неврологическая симптоматика в раннем неонатальном периоде, обусловленная внутриутробной гипоксией при осложнениях беременности (угроза прерывания беременности, гестозы, плацентарная недостаточность), чаще диагностировались у детей, матери которых получили традиционную терапию, чем у детей, матери которых получили комплексную терапию (28,9% и 17,3%, соответственно). Гипертензионно-гидроцефальный, судорожный синдромы, синдром двигательных нарушений и общего угнетения центральной нервной системы в 1,5-2 раза чаще отмечались среди детей, родившихся от матерей, получивших традиционную терапию, в связи с высокой частотой появления недоношенных детей и случаев развития асфиксии. При этом если среди детей, родившихся от матерей, прошедших курсовую терапию со-3 ПНЖК, преобладали легкие формы, то среди детей, родившихся от матерей, получивших традиционную терапию, установлены нарушения тяжелые и среднетяжелые, что указывает на отрицательное влияние внутриутробной пшоксии на развитие плода и становление организма новорожденного.

Интерес представляют отдаленные последствия осложнений, возникающих при беременности для новорожденных. Для этого совместно с неонаталогом и невропатологом были изучены особенности нервно-психического развития наблюдавшихся детей до 1 года. Результаты наблюдений показали, что на фоне проводимой традиционной терапии во время беременности, отклонения в нервно-психическом развитии к концу 1 года жизни выявлены у 35,4% детей (п=34 из 97, р=0,002) и, в основном, у недоношенных. У детей, родившихся преждевременно, имелись тяжелые неврологические нарушения, которые требовали длительного лечения. Отклонения в нервно-психическом развитии проявлялись в виде гипертензионного синдрома, перинатальной энцефалопатии. Проведение курсовой терапии со-3 ПНЖК во время беременности приводило к ранней регрессии признаков перинатальной энцефалопатии (нормализации двигательных реакций, регрессии признаков внутричерепной гипертензии, нормализации сна). Признаки гипертензионного синдрома и повышенной нервно-рефлекторной возбудимости к концу 1 года жизни сохранялись лишь в 11,5 % случаев (п=6 из 52), что достоверно меньше, чем в группе детей, родившихся от матерей, получавших традиционную терапию (р=0,002).

Полученные нами результаты указывают на то, что наличие у беременных осложнений (невынашивания, гестозов, плацентарной недостаточности) неблагоприятно сказывается на внутриутробном развитии плода, состоянии ребенка при его рождении и течении неонатального периода. У новорожденных, родившихся от матерей с осложнениями беременности, чаще отмечаются недоношенность, асфиксия различной степени тяжести, реализация неврологических нарушений в раннем и позднем неонатальном периоде. Несмотря на воздействие многочисленных антенатальных и интранатальных факторов на центральную нервную систему плода, включение со-3 ПНЖК в комплексную терапию позволяет снизить частоту осложнений при беременности

(невынашивания, гестозов, плацентарной недостаточности), облегчает клиническое течение и тяжесть, способствует пролонгированию беременности до оптимальных сроков родоразрешения. Следует также полагать, что снижение показателей перинатальной заболеваемости (недоношенности, асфиксии и неврологических расстройств в неонатальном периоде у новорожденных) находится в прямой связи с приемом ю-З ПНЖК на фоне применения общепринятых препаратов для терапии осложнений, возникающих при беременности.

Учитывая изменения, происходящие в сосудах системы «мать-плацента-плод» и в системе гемостаза у пациенток при осложнениях беременности, можно сделать вывод о том, что лечебный эффект со-З ПНЖК связан с их влиянием на патогенетическое звено развития гестозов, невынашивания, плацентарной недостаточности. Клинико-фармакологические эффекты обусловлены суммарным действием докозагексаеновой и эйкозапентаеновой кислот. Докозагексаеновая кислота, в первую очередь необходима плоду для синтеза всех клеток и мембран организма, клеток иммунной системы, сетчатки глаза, прежде всего для структур мозга, увеличивая активность синтеза астроцитов, дендритов и их разветвленность (William, 2000; Catatan et al., 2002; Серов и Сидельникова, 2008). Положительный эффект эйкозапентаеновой кислоты обусловлен мембраностабилизирующим действием, воздействием на сосудисто-тромбоцитарное звено гемостаза, а также, снижением интенсивности свободнорадикального окисления и повышением антиоксидантной активности крови (Fürst, Kuhn, 2000; Breanne, David, 2009). При достаточном поступлении в организм (о-З ПНЖК частично вытесняет арахидоновую кислоту, вступая в конкурентное замещение в фосфолипидах клеточных мембран на циклооксигеназном и 5-липооксигеназном уровне метаболизма (Marangell et al., 2004; Мозговая и Зайнулина, 2008). Изменение соотношения ùj-6/оэ-З ПНЖК приводит к изменению отношений концентраций различных лейкотриенов и простагландинов, вызывая тем самым различные физиологические эффекты. Конкурируя с арахидоновой кислотой как субстрат реакции с участием фермента циклооксигеназы, они ингибируют продукцию простагландинов (ПГЕ2), тромбоцитами тромбоксана (Тх2) (сильного активатора агрегации тромбоцитов и эритроцитов), и вместо него продуцируется физиологически неактивный тромбоксан (ТхЗ) (Rupp et al., 2002; Громова и соавт., 2009). В дополнение этому из эйкозапентаеновой кислоты синтезируется простациклин (ПЦЗ), который также содействует вазодилатации (Fisher, Weber, 1985). Результатом изменения баланса между арахидоновой кислотой и м-3 ПНЖК в сторону эйкозапентаеновой и докозагексаеновой кислот является увеличение вазодилатации и уменьшение агрегации тромбоцитов, эритроцитов. Немаловажное значение имеет противовоспалительное действие. Превращения со-З ПНЖК с участием фермена 5-липоксигеназы проявляется в повышении концентрации лейкотриена (LT5) и в ингибировании синтеза лейкотриена (LT4), мощного

индуктора воспаления, хемотаксиса, адгезии лейкоцитов, а также провоспалительных цитокинов-фактора некроза опухоли (ФНОа), интерлейкинов1|3 и 6 (ИЛ-ip, ИЛ-6) (Rupp et al., 2002; Calder, 2008; Richard et al., 2009).

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Воздействие амниотической жидкостью женшцн с осложнениями беременности или сывороткой крови их детей с церебральной ишемией на 14-й день беременности крыс вызывает у потомства структурные и функциональные расстройства У крысят выявляются эмбриотоксический и тератогенный эффекты, снижается жизнеспособность, задерживается нормальное формирование и созревание нервной системы, что приводит к психомоторным изменениям и когнитивным нарушениям. Добавление в рацион беременных самок о>-3 ГТНЖК снижает патогенное воздействие амниотической жидкости или сыворотки крови детей, что способствует нормализации структурных и функциональных расстройств у потомства. Наиболее успешная коррекция достигается при добавлении со-З ПНЖК в пищу в профилактических целях. Полученные экспериментальные результаты позволили применить о>3 ПНЖК при осложнениях беременности женщин. Проведение своевременной курсовой терапии о>-3 ПНЖК у женщин позволило снизить частоту, длительность и тяжесть осложнений, возникающих при беременности, а также улучшить перинатальные исходы.

ВЫВОДЫ

1. Разработана на крысах модель психомоторных нарушений у новорожденных детей воспроизводимая путем внутриамниотического введения беременным самкам амниотической жидкости женщин с осложнениями беременности или сыворотки пуповинной крови их дётей с церебральной ишемией.

2. Внутриамниотическое введение крысам амниотической жидкости женщин с осложнениями, возникающими при беременности или сыворотки пуповинной крови их детей, вызывало у их потомства эмбриотоксический и тератогенный эффекты, уменьшение дендритной системы и количества нейронов в сенсомоторной области коры, а также психомоторные нарушения в постнатальный период.

3. Ведение в рацион беременных крыс ш-3 ПНЖК снижало эмбриотоксический эффект, предупреждало возникновение пороков развития, оказывало корригирующее действие на структурные и функциональные нарушения у потомства. Наиболее выраженный нейропротекторный эффект отмечен при профилактическом пренатальном введении ш-3 ПНЖК в рацион беременных крыс.

4. Включение ш-3 ПНЖК в комплексную терапию беременных женщин с гестозами, невынашиваниями, плацентарной недостаточностью способствовало снижению частоты и тяжести осложнений, возникающих при беременности и улучшению перинатальных исходов.

СТАТЬИ, ОПУБЛИКОВАННЫЕ В ЖУРНАЛАХ РЕКОМЕНДОВАННЫХ ВАК

1. Обухова Г.П., Селиверстова С.Г., Варлинская Е.И., Авалиани Т.В., Абдаладзе Н.С., Тер-Карапетян В.А., Богданов О.В. Нейроморфологический анализ моторной области коры мозга крысят, подвергшихся пренатальному воздействию нормальной и патологической сыворотки крови. // Журнал эволюционной биохимии и физиологии. 1992. Т. 28. №4. С. 510-517.

2. Атаева О.В., Абдаладзе Н.С., Лазаренко Н.С., Авалиани Т.В., Богданов О.В. Локомоторное и пространственно-ориентировочное поведение крысят в норме и при экспериментальной патологии. //Журнал высшей нервной деятельности. 1993. Т. 43. № 1. С. 150-156.

3. Авалиани Т.В., Незговорова И.В., Абдаладзе Н.С., Богданов О.В. Биотестирование беременных как метод оценки риска двигательных нарушений у новорожденных. II Экология человека. 1994. № 1. С. 33-36.

4. Абдаладзе Н.С.. Авалиани Т.В., Чеботарь H.A., Богданов О.В. Эмбриотоксический эффект у крыс при воздействии сыворотки крови новорожденных детей, тестируемых на наличие трансферных факторов. // Онтогенез. 1994. № 1. С. 38-43.

5. Чеботарь H.A., Конописцева Л.А., Доросев Н.В., Абдаладзе Н.С., Пучков В.Ф. Токсический эффект серотонина при прямом действии на эмбрионы крысы. // Морфология. 1995. Т. 108. № 1. С. 22-24.

6. Авалиани Т.В., Абдаладзе Н.С.. Лазаренко Н.С., Клименко В.М. Полиненасыщенные жирные кислоты предотвращают развитие локомоторных нарушений, вызванных изменением нейрогуморального фона у крысят. // Онтогенез. 2010. Т. 41. К» 3. С. 1-7.

7. Авалиани Т.В., Абдаладзе Н.С., Обухова Г.П., Чеботарь H.A., Тер-Катапетян В.А., Богданов О.В. Коррекция внутриутробного патогенного воздействия на развитие крысят введением ЭПК-ДГК в период беременности крыс. // «Нейрофармакология на рубеже двух тысячелетий» Международная конференция, посвященная 100-летию со дня рождения академика C.B. Аничкова 6-8 октября 1992, С-Петербург, С.1.

8. Людыно М.И., Абдаладзе Н.С.. Спирина О.В. Трансферные факторы сыворотки крови беременных как маркеры нейрогуморальных нарушений у новорожденных детей. // «Механизмы регуляции физиологических функций». Тезисы докладов. С-Петербург, конференция молодых ученых и специалистов. 1992. Изд-во Военно-Медицинской академии им. С.М. Кирова С. 132-133.

9. Белобокова Н.К., Абдаладзе Н.С., Авалиани Т.В. Полиненасыщенные жирные кислоты предотвращают развитие грубых двигательных и эмоциональных нарушений у потомства. // Материалы междисциплинарной научной конференции с международным участием «Новые биокибернетические и телемедицинские технологии 21 века для диагностики и лечения заболеваний человека», Петрозаводск, 27-29 июня, 2002. С.26.

10. Белобокова Н.К., Абдаладзе Н.С.. Авалиани Т.В., Цикунов С.Г. Профилактика нарушения эмбрионального развития плода у крыс полиненасыщенными жирными кислотами. // Материаты Научной конференции «Актуальные вопросы клинической и экспериментальной медицины». С - Пб СПбМАПО, 2003. С. 321-322.

11. Авалиани Т.В., Огурцов Р.П., Серякова O.P., Белобокова Н.К., Пузырева В.П., Абдаладзе Н.С.. Цикунов С. Г. Влияние латерализованного структурного повреждения мозга матерей на иммунные и двигательные паттерны их потомства // Сборник статей и тезисов Второй Всероссийской конференции «Актуальные вопросы функциональной Межполушарной асимметрии» Москва, май 2003. С. 5.

12. Абдаладзе Н.С.. Авалиани Т.В., Клименко В.М. Снижение риска развития перинатальной патологии препаратами омеш-3 полиненасыщенных жирных кислот. И Материалы международной конференции «Физиология развития человека», Москва, 21-24 июня, 2009 г. С. 4-5.

Формат бумаги 60*90 1/16. Бумага офсетная. Печать ризографическая. Тираж 100 экз. Отпечатано в ПК «Объединение Вента» с оригинал-макета заказчика. 197198, Санкт-Петербург, Большой пр. П. С., д. 29а, тел.718-46-36.

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Абдаладзе, Нино Симоновна

Страница

Список сокращений.

Введение.

I Глава 1. Обзор литературы.

1.1. Этиология, частота осложнений физиологического течения беременности и перинатальные исходы.

1.1.1. Факторы риска развития плацентарной недостаточности.

1.1.2. Влияние плацентарной недостаточности на постнатальное развитие детей.

1.2. Характер нарушений маточно-плацентарного кровообращения при плацентарной недостаточности.

1.3. Гемодинамические и структурные изменения в ЦНС новорожденных детей после воздействия гипоксии в раннем онтогенезе.

1.4. Современные методы исследования в акушерстве и неонатологии.

1.4.1. Биофизические показатели функционального состояния плода и новорожденного.

1.4.2. Биохимические маркеры диагностики и прогнозирования перинатальных гипоксических поражений ЦНС у новорожденных детей.

1.5. Экспериментальное воспроизведение перинатальных гипоксических поражений ЦНС.

1.6. Перекисное окисление липидов при плацентарной недостаточности и гипоксических поражениях ЦНС.

1.7. Коррекция акушерских осложнений и гипоксических поражений головного мозга новорожденных детей.

Глава 2. Материалы и методы исследования.

2.1. Материал исследования.

2.2. Метод оценки эмбриотоксического эффекта и действие на постнатальное развитие крысят.

2.3. Морфологический анализ V слоя моторной области коры мозга крысят в норме и при экспериментальной патологии.

2.3.1. Анализ структурной организации нейронов V слоя моторной области коры мозга крысят.

2.3.2. Количественная оценка структурной организации нейронов

V слоя моторной области коры крысят.

2.4. Метод оценки психомоторного поведения крысят.

2.5. Метод коррекции структурных и функциональных нарушений у потомства крыс при воздействии со-З ПНЖК в пренатальный период.

2.6. Обследование беременных женщин и новорожденных детей.

2.7. Методы статистического анализа полученных данных.

Глава 3. Результаты исследования морфологических и функциональных нарушений при экспериментальной патологии.

3.1. Показатели эмбриотоксического эффекта и постнатального развития крысят в норме и при экспериментальной патологии ЦНС.

3.2. Морфологические изменения V слоя моторной области коры мозга при экспериментальной патологии.

3.2.1. Дендритная система нейронов моторной области коры при моделировании патологии.

3.2.2. Количественные изменения нейронов моторной области коры при моделировании патологии.

3.3. Психомоторное поведение крысят в норме и при экспериментальной патологии.

Глава 4. Коррекция структурных и функциональных нарушений у потомства крыс путем пренатального воздействия ю-3 ПНЖК.;.

4.1. Коррекция эмбриональных нарушений крысят введением ю-3 ПНЖК в рацион беременных крыс.

4.2. Нейроморфологический анализ моторной области коры животных после пренатального воздействия ю-3 ПНЖК.

4.3. Коррекция нарушений психомоторного поведения крысят введением в рацион беременных крыс ю-3 ПНЖК.

Глава 5. Эффективность коррекции осложнений беременности и перинатальных исходов с помощью <о-3 ПНЖК.

Глава 6. Обсуяадение.

Выводы.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Моделирование и коррекция психомоторных расстройствах новорожденных"

АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ

Здоровье будущего ребенка во многом определяется здоровьем i матери и течением антенатального периода. Только одна треть новорожденных рождается здоровыми, а остальные имеют отклонения. Из них у 20% диагностируются врожденные аномалии развития, а у 80% новорожденных регистрируется патология перинатального периода, как следствие неблагополучия здоровья матери (Шарапова, 2003). Считается, что психоневрологические расстройства и низкое интеллектуальное развитие детей в большей степени связаны с неблагополучным течением антенатального периода и в меньшей степени с острой асфиксией в родах. Гипоксические поражения центральной нервной системы в антенатальный период жизни составляют широкий спектр неврологических осложнений у детей: синдром дефицита внимания, детский церебральный паралич с двигательными, коммуникативными и интеллектуальными расстройствами (Saigal et al., 2000; Matsuda et al., 2003; Bardin et al., 2004; Ньюэлл и Джаймс, 2004; Delobel-Ayoub et al., 2006; Барашнев, 2007; Landmann et al., 2008).

Одной из основных причин развития перинатальной заболеваемости и смертности является плацентарная недостаточность, которая имеет мультифакторную природу (Шниткова и соавт., 2000; Радзинский и соавт., 2007). Многочисленные этиологические факторы реализуют свое действие на плод непосредственно через нарушение кровообращения первоначально в плаценте, а в последующем и у плода. Несмотря на большое число факторов, способствующих развитию плацентарной недостаточности, действие их на конечном этапе однотипно и заключается в проявлении внутриутробной f гипоксии и синдрома задержки развития плода (Hales, Barker, 2001; Hendler et i al., 2005; Захарова и Нимаева, 2007; Кузнецова, 2007).

Плацентарная недостаточность может развиться на фоне ряда заболеваний женщины, которыми могут быть заболевания почек (Sanders,

Lucas, 2001; Morgan, 2004; Орджоникидзе и соавт., 2009), крови, сердца, сосудистой (Sibai, 2003; Шехтман и Козинова, 2006) и эндокринной систем (Бурумкулова и соавт., 2009). Среди причин, следует отметить акушерские осложнения: гестозы, угроза прерывания беременности, предлежание плаценты (Чернуха, 2001; Стрижаков и соавт., 2000; Buchbinder et al. 2002; Кошелева и соавт., 2002).

При осложненной беременности (преэклампсии, невынашивании, сахарном диабете, анемии) в плаценте наблюдается тканевая гипоксия, обусловленная явлениями окислительного стресса. Повреждающее действие гипоксии любого генеза проявляется неспецифическими реакциями, в частности активацией перекисного окисления липидов. В организме человека образование свободных радикалов является физиологической реакцией и необходимо для нормального функционирования клеток (Хавинсон и соавт., 2003; Сейфулла и соавт., 2009). Физиологическое значение перекисного окисления липидов многогранно: активные формы кислорода являются вторичными посредниками регуляторных влияний (пролиферации, апоптоза и дифференцировки, участвуют в процессах обновления мембранных клеточных структур, синтеза нуклеиновых кислот и ДНК). Механизм перекисного окисления липидов лежит в основе синтеза тканевых регуляторов - простагландинов и лейкотриенов (Хавинсон и соавт., 2003; Галкина и соавт., 2009; Сейфулла и соавт., 2009). Равновесие про- и антиоксидантных систем является одним из важных факторов физиологического существования любой ткани и особенно нервной (Зенков и соавт., 2001; Галкина и соавт., 2009).

Окислительный стресс приводит к повреждениям мембран отдельных клеток, тканей и целого органа, что вызывает морфофункциональные изменения в плаценте и развитие патологических состояний плода в последующем (Кульчимбаева, 2006; Erez et al., 2008;

Амиров и Фролова, 2009; Сидорова и Унанян, 2009; Haque et al., 2010). Накопление продуктов переокисления приводит к повреждению эндотелия сосудов, мембран форменных элементов крови, нарушению реологических и коагуляционных свойств крови, микроциркуляции, что вызывает поражение плаценты и головного мозга плода (Wang, Alexanderb, 2000; Зенков и соавт., 2001; Roberts, Hubel, 2004; Лехович и соавт., 2006). Параллельно с этими изменениями возникают нарушения синтеза и дисбаланс простаноидов материнского и плодового происхождения (простагландины класса Е и F, простациклин, тромбоксан). Возникающий дисбаланс определяется концентрацией вазоактивных веществ (недостаточная продукция простациклина и простагландинов класса Е или гиперпродукция тромбоксана Тх2 и простагландинов класса F), сопровождается спазмом сосудов в маточно-плацентарно-плодовом комплексе, вносит существенный вклад в нарушение кровотока между матерью и плодом и, следовательно, влияет на весь ход обменных процессов между ними (Крукиер, 2008; Мозговая и Зайнулина, 2008).

Для снижения перинатальной заболеваемости и отдаленных последствий гипоксических поражений мозга наиболее актуальными становятся своевременная диагностика развивающихся при беременности осложнений, лекарственная терапия и проведение профилактических мероприятий. Традиционные методы профилактики и лечения часто не дают должного эффекта, в связи с чем одной из актуальных задач современного акушерства и перинатологии является поиск новых методов предупреждения и терапии данной патологии. Для испытания и выбора новых методов лечения нами разработана модель психомоторных поражений у новорожденных детей, реализуемая путем введения амниотической жидкости женщин с осложнениями беременности или сыворотки крови их детей беременным крысам, что вызывает морфофункциональные нарушения у потомства. Данная модель позволяет расширить возможности перинатологии, экспериментально апробировать и оценить эффективность использования лекарственных препаратов. I

Прием лекарственных препаратов в период беременности ограничен, так как их влияние недостаточно исследовано, и они могут оказать негативное влияние на развитие плода. С этой точки зрения огромный интерес вызывает применение препаратов природного происхождения, к которым, в частности, относятся омега-3 полиненасыщенные жирные кислоты (со-З ПНЖК). С целью профилактики и коррекции осложнений, возникающих при беременности и гипоксических поражений мозга плода, мы провели исследование влияния курса введений со-З ПНЖК в эксперименте, а также в клинике на показатели акушерских и перинатальных исходов. При достаточном поступлении в организм со-З ПНЖК частично вытесняют арахидоновую кислоту, вступая в конкурентное замещение в фосфолипидах клеточных мембран на циклооксигеназном и 5-липооксигеназном уровне метаболизма (Marangell et al., 2004; Мозговая и Зайнулина, 2008).

Основные клинико-фармакологические эффекты влияния данных веществ обусловлены тем, что они участвуют в нейрогенезе, подавляют активность перекисного окисления липидов, повышая активность антиоксидантной системы крови, оказывают мембраностабилизирующее действие, нормализуют реологические и коагуляционные свойства крови, и тем самым улучшают кровоток в системе «мать-плацента-плод» (Bourre, 2004; Мозговая и Зайнулина, 2008; Кошелева и соавт., 2009).

Эффективность пренатального воздействия со-З ПНЖК оценивали на основании предотвращения морфологических и функциональных нарушений у крысят после внутриамниотического воздействия амниотической жидкостью женщин с осложнениями беременности или сывороткой крови их детей. В результате полученных экспериментальных данных была разработана тактика лечебных мероприятий со-З ПНЖК во время беременности женщин. Это позволило снизить частоту и тяжесть осложнений беременности, а также улучшить перинатальные исходы.

ЦЕЛЬ РАБОТЫ: изучение эффективности применения ю-3 ГТНЖК 1 в эксперименте на крысах и в клинике для профилактики и коррекции психомоторных нарушений новорожденных, родившихся от матерей с осложненным течением беременности.

В ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ ВХОДИЛО

4. Изучение эффектов включения со-3 ПНЖК в комплексную терапию беременных женщин для снижения частоты и тяжести осложнений, возникающих при беременности и перинатальной заболеваемости.

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ

1. Внутриамниотическое введение крысам на 14-й день эмбриогенеза амниотической жидкости женщин с осложненным течением беременности (невынашиванием, гестозом, плацентарной недостаточностью) или сыворотки крови их новорожденных детей с церебральной ишемией вызывает у крысят эмбриологические, морфологические и психомоторные нарушения. '

НАУЧНАЯ НОВИЗНА ИССЛЕДОВАНИЯ

Впервые показано, что внутриамниотическое введение беременным крысам амниотической жидкости женщин с осложнениями беременности гестозами, невынашиванием, плацентарной недостаточностью) или сыворотки крови новорожденных с церебральной ишемией вызывает у потомства эмбриотоксический, тератогенный эффекты, морфологические изменения в моторной области коры и нарушение психомоторного поведения. Впервые показано, что введение в рацион беременных крыс со-3

ПНЖК оказывает корригирующее действие на структурные и функциональные нарушения у крысят в модели психомоторных нарушений новорожденных детей. Установлено, что нейропротекторный 1 эффект наиболее выражен при профилактическом приеме со-3 ПНЖК.

Своевременное проведение курсовой терапии со-3 ПНЖК у женщин позволяет снизить частоту, длительность и тяжесть осложнений, возникающих при беременности (гестозов, плацентарной недостаточности, невынашивания), и перинатальную заболеваемость.

НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ I

РАБОТЫ Амниотические жидкости женщин с осложнениями, возникающими при беременности, или сыворотки крови новорожденных с церебральной ишемией способны при внутриамниотическом введении беременным крысам вызвать у их потомства структурные и функциональные нарушения. На основе данной модели показана эффективность применения ю-3 ПНЖК в период беременности для коррекции морфофункциональных нарушений у потомства. Это позволило включить оо-З ПНЖК в комплексную терапию женщин для снижения частоты и тяжести осложнений, возникающих при беременности (невынашивания, гестозов, плацентарной недостаточности), пролонгирования беременности и улучшения перинатальных исходов.

ЛИЧНЫЙ ВКЛАД СОИСКАТЕЛЯ

Автором проведен аналитический обзор отечественной и зарубежной литературы по изучаемой проблеме. Самостоятельно проведены I экспериментальные и клинические исследования, статистическая обработка и изложение полученных данных. Экспериментальная часть исследования выполнена на базе Физиологического отдела им. И.П. Павлова и Отдела эмбриологии НИИЭМ СЗО РАМН. Нейроморфологический анализ проводился совместно с к.б.н. Г.П. Обуховой (Физиологический отдел имени И.П. Павлова НИИЭМ СЗО РАМН). Клинические исследования проведены на базе женских консультаций № 9, 36, родильных домов № 9, 13, 16, 18 и НИИ акушерства и гинекологии РАМН им. Д.О. Отта.

АПРОБАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ РАБОТЫ

Результаты работы были представлены и обсуждались на Междисциплинарной научной конференции с международным участием «Новые биокибернетические и телемедицинские технологии 21 века для диагностики и лечения заболеваний человека», Петрозаводск, 27-29 июня 2002 г.; на 2-й Всероссийской конференции «Актуальные1 вопросы функциональной межполушарной асимметрии» Москва, май 2003 г.; на

Научной конференции «Актуальные вопросы клинической и экспериментальной медицины» СПбМАПО, Санкт-Петербург, 2003 г.; на Международной конференции «Физиология развития человека», Москва, 2224 июня, 2009 г.; материалы диссертационной работы неоднократно докладывались на научных заседаниях Физиологического отдела им. И.П. Павлова НИИЭМ СЗО РАМН. ПУБЛИКАЦИИ

По материалам диссертации опубликовано 12 научных работ, в том числе 6 статей в рецензируемых журналах, рекомендованных перечнем ВАК.

СТРУКТУРА И ОБЪЕМ РАБОТЫ

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Абдаладзе, Нино Симоновна

выводы

1. Разработана на крысах' модель психомоторных нарушений у новорожденных детей, воспроизводимая путем внутриамниотического введения беременным самкам амниотической жидкости женщин с осложнениями беременности или сыворотки пуповинной крови их детей с церебральной ишемией.

2. Внутриамниотическое введение крысам амниотической жидкости женщин с осложнениями, возникающими при беременности или сыворотки пуповинной крови их детей, вызывало у потомства крыс эмбриотоксический и тератогенный эффекты, уменьшение дендритной системы и количества нейронов в сенсомоторной области коры, а также психомоторные нарушения в постнатальный период.

3. Ведение в рацион беременных крыс со-З ГТНЖК снижало эмбриотоксический эффект, предупреждало возникновение пороков развития, оказывало корригирующее действие на структурные и функциональные нарушения у потомства. Наиболее выраженный нейропротекторный эффект отмечен при профилактическом пренатальном введении со-3 ПНЖК в рацион беременных крыс.

4. Включение со-3 ПНЖК в комплексную терапию беременных женщин с гестозами, невынашиваниями, плацентарной недостаточностью способствовало снижению частоты и тяжести осложнений, возникающих при беременности и улучшению перинатальных исходов.

МЕТОДИЧЕСКИЕ И ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Разработанная модель психомоторных нарушений у новорожденных детей, родившихся от матерей с осложненным течением беременности, позволяет апробировать новые лекарственные препараты и методы лечения с целью профилактики и коррекции психомоторных нарушений новорожденных.

2. Для улучшения акушерских и перинатальных исходов в комплексную терапию беременных женщин с гестозами, невынашиванием и плацентарной недостаточностью целесообразно включение со-З ПНЖК.

3. Раннюю комплексную терапию следует проводить в соответствии с разработанным курсом. Прием со-З ПНЖК (эпаден) должен назначаться по 2 капсулы 3 раза в день с 20 по 24 неделю и повторно через 1,5 месяца с 30 по 34 недели беременности. Применение со-З ПНЖК требует строгого контроля показателей коагулограммы, в первую очередь времени свертывания крови в динамике и прекрашения введения препарата задолго до родоразрешения.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Абдаладзе, Нино Симоновна, Санкт-Петербург

1. Абдагтадзе Н.С., Авалиани Т.В., Чеботарь H.A., Богданов О.В. Эмбриотокеический эффект у крыс при воздействии сыворотки крови новорожденных детей, тестируемых на наличие трансферных факторов. // Онтогенез. 1994. № 1. С. 38-43.

2. Абрамченко В.В. Активное введение родов: руководство для врачей. С-Петербург; специальная литература, 1996. 668 с.

3. Абрамченко В.В., Шабалов Н.П. Клиническая перинаталогия. Петрозаводск. ООО Издательство «ИнтелТек», 2004. 424 с.

4. Авалиани Т.В., Белобокова Н.К., Цикунов С.Г. Двигательные нарушения у потомства от самок крыс-амбидекстров с психогенной травмой. // Журнал эволюционной биохимии и физиологии. 2005. Т. 41. № 5. С. 436-441.

5. Авруцкая В.В. Динамика продукции интерлейкинов у женщин с осложненным течением беременности. // Российский вестник акушера-гинеколога. 2008. Т. 8. № 3. С. 45-48.

6. Аккер JT.B., Варшавский Б.Я., Ельчанинова С.А., Нагайцев В.М., Чекрий О.В., Кореняк H.A. Показатели оксидантного и антиоксидантного стресса у беременных с гестозом. // Акушерство и гинекология. 2000. № 4. С. 17-20.

7. Амиров Н.Х., Фролова O.A. Антиоксидантный статус женщин вовремя беременности. // Вопросы детской диетологии. 2009. Т. 7. № 3. С. 12-15.

8. Аронскинд Е.В., Уфимцева J1.A., Курова Э.Г., Бахарева Э.Ш., Сагутдинова Э.Ш. Состояние здоровья детей, перенесших критические состояния в периоде новорожденное™. // Педиатрия. 2004. № 1. С. 39-42.

9. Архипов В.В., Хайруллина Ф.Л., Радутный ВН. Течение беременности и исход родоразрешения при локализации плаценты в области рубца на матке. Материалы первого регионального научного форума «Мать и дитя». 20-22 марта 2007 года. С. 14.

10. Атаева О.В., Абдаладзе Н.С., Лазаренко Н.С., Авалиани Т.В., Богданов О.В. Локомоторное и пространственно-ориентировочное поведение крысят в норме и при экспериментальной патологии. // Журнал высшей нервной деятельности. 1993. Т. 43. № 1. С. 150-156.

11. Айламазян Э.К. Антенатальная диагностика и коррекция нарушений развития плода. // Российский вестник перинатологии и педиатрии. 1999. № 3. С. 6-11.

12. Барашнев Ю.И., Бубнова Н.И., Соркина З.Х., Рымарева О.Н., Гудимова В.В. Перинатальная патология головного мозга: предел безопасности, ближайший и отдаленный прогноз. // Российский вестник перинатологии и педиатрии. 1998. № 4. С. 6-12.

13. Барашнев Ю.И. Принципы реабилитационной терапии перинатальных повреждений нервной системы у новорожденных и детей первого года жизни. // Российский вестник перинатологии и педиатрии. 1999. № 1. С. 7-13.

14. Барашнев Ю.И. Перинатальная неврология. Москва: Триада -X. 2005. 672 с.

15. Барашнев Ю.И. Ключевые проблемы перинатальной неврологии. Материалы первого регионального научного форума «Мать и дитя» 20-22 марта 2007. Казань. С. 375-376.

16. Бурумкулова Ф.Ф., Петрухин В.А., Коваленко Т.С., Титова Т.В., Головченко М.А. Гестационный сахарный диабет -междисциплинарная проблема. Материалы X юбилейного Всероссийского научного форума «Мать и дитя». 29 сентября-2 октября 2009. Москва. С. 30-31.

17. Бююль А., Цефель П. SPSS: Искусство обработки информации. М.: DiaSoft 2002. 608 с.

18. Васильева Е.М., Гордеева Г.Ф., Баканов М.И., Поддубная А.Е., Шор Т.А. Изменение содержания общих липидов и фосфолипидов в эритроцитах при неврологических нарушениях у детей. // Педиатрия. 2003. №2. С. 116-117.

19. Васильев А.П., Стрельцова H.H., Секисова М.А. Влияние омега-3 жирных кислот на липидный спектр крови и микроциркуляцию у больных артериальной гипертонией при метаболическом синдроме. // Клиническая медицина. 2009. № 4. С. 37-40.

20. Васильев Д.С., Туманова H.JL, Журавин И.А Структурные изменения в нервной ткани новой коры в онтогенезе крыс после гипоксии на разных сроках эмбриогенеза. //Журнал эволюционной биохимии и физиологии. 2008. Т. 44. № 3. С.258-267.

21. Великанова Л.П. Клинико-эпидемиологический мониторинг состояния нервно-психического здоровья детей и подростков. // Педиатрия. 2004. № 1. С. 67-70.

22. Видеркер Т.В, Ремнева О.В, Фадеева Н.И. Клинические, инструментальные и биохимические маркеры гипоксии плода в прогнозировании поражений центральной нервной системы у новорожденного. // Российский вестник акушера-гинеколога. 2008. Т. 8. № 6.С. 4-8.

23. Володин H.H., Румянцев А.Г., Владимирская Е.Б., Дегтярева М.В. Цитокины и преждевременные роды. // Педиатрия. 2002. № 4. С. 7277.

24. Володин H.H., Медведев М.И., Горбунов A.B. Компьютерная томография в комплексной диагностике при гипоксически-ишемических поражениях головного мозга новорожденного. // Российский вестник перинатологии и педиатрии. 2003. Т. 48. №.1. С. 19-25.

25. Володин H.H. Неонатология. Национальное руководство.

26. Москва. Издательская группа «ГЭОТАР-Медиа». 2007. 847 с.

27. Воскресенский C.JI. Оценка состояния плода. Кардиотокография. Допплерометрия. Биофизический профиль. Минск. «Книжный Дом».2004. 304 с.

28. Габидуллина Р.И., Хайруллина Г.Р., Габитова Н.Х., Чехонин В.П. Нейроспецифические белки мозга в прогнозировании перинатальных поражений ЦНС у новорожденных при невынашиввании беременности. // Казанский медицинский журнал. 2004. Т. 85. № 4. С. 269-271.

29. Галкина О.В., Путилина Ф.Е., Романова A.A., Ещенко Н.Д. Изменения перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы головного мозга крыс в ходе раннего постнатального развития. // Нейрохимия. 2009. Т. 26. № 2. С. 111-11.6.

30. Гастева C.B., Замуруев О.Н. Зависимость обмена фосфолипидов разных отделов мозга крыс от степени нарушения кровообращения в них (при перевязке сонных артерий). // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1977. Том LXXXÏV. № 10. С. 539-541.

31. Глебовский В. Д. Физиология плода и детей. Москва. «Медицина». 1988. 223 с.

32. Глуховец Б.И., Белоусова H.A., Попов Г.Г. Основные причины смерти новорожденных с экстремально низкой массой тела. // Российский вестник перинатологии и педиатрии. 2004. Т. 49. № 5. С. 61.

33. Голосная Г.С., Петрухин A.C., Маркевич К.А., Трифонова O.E.

34. Изменение уровня белка S-100 у новорожденных с перинатальным гипоксическим поражением ЦНС. // Педиатрия. 2004. № 1. С. 10-15.

35. Гончарова О.В. Последствия перинатальных гипоксических поражений центральной нервной системы у детей и методы их медикаментозной коррекции. // Consilium Medicum. Педиатрия. 2009. № 3. С. 6-9.

36. Граф А.В., Гончаренко Е.Н., Соколова Н.А., Ашмарин И.П. Антенатальная гипоксия: участие в развитии патологий ЦНС в онтогенезе. //Нейрохимия. 2008. Т. 25. № 1-2. С. 11-16.

37. Граф А.В., Маслова М.В., Маклакова А.С. Биохимические корреляты острой пренатальной гипоксии у беременных самок крыс и их потомства. // Нейрохимия. 2004. Т. 21. № 4. С. 307-310.

38. Громова О.А., Торшин И.Ю., Юргель И.С. Систематический анализ биохимических эффектов эйкозапентаеновой и докозагексаеновой омега 3 ПНЖК на физиологию беременной и развитие плода. // Трудный пациент. 2009. Т. 7. № 1-2. С. 10-16.

39. Дашичев В.В., Андреев А.А., Олендарь Н.В. Особенности развития пищеварительной системы и усвоения липидов у недоношенных детей. // Вопросы современой педиатри. 2006. Т. 5. № 5. С. 51-56.

40. Дмитриева Н.И. О периодах развития структур головного мозга в онтогенезе крысы. // Журнал эволюционной биохимии и физиологии. 1981. Т. XVII. № 3. С. 287-291.

41. Доброхотова Ю.Э., Иванова Т.А., Гуляева М.В., Онуфриев М.В., Джобава А.Б., Гехт А.Б. Окислительный стресс в плаценте при физиологически и патологически протекающей беременности. // Российский вестник акушера гинеколога. 2008. Т. 8. № 6. С. 33-36.

42. Додхоев Д.С., Евсюкова И.И., Байбородов Б.Д. Проницаемость эритроцитарных мембран и сорбционная способность эритроцитов уноворожденных, перенесших гипоксию. // Педиатрия. 2000. № 1. С. 101102.

43. Додхоев Д.С., Евсюкова И.И., Тумасова Ж.Н., Арутюнян A.B. Активность мозгового изофермента креатинкиназы у новорожденных с задержкой внутриутробного развития. // Журналъ акушерства и женскихъ болъзней. 2003. T. LII. № 4. С. 28-32.

44. Дыбан А.П., Акимова И.М. Особенности эмбриогенеза млекопитающих при блокаде синтеза РНК. (опыты с актиномицином D на крысах). // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. 1967. T. LII. № 5. С. 36-50.

45. Евсюкова И.И., Кошелева Н.Г. Сахарный диабет: беременные и новорожденные. Санкт-Петербург; «Специальная литература». 1996. 270 с.

46. Енгибарян Д.А., Котова Ю.С., Константинова О.Д. Течение и исход беременности после экстракорпорального оплодотворения. // Материалы первого регионального научного форума «Мать и дитя». Казань 20-22 марта 2007 года. С. 48-49.

47. Журавин И.А. Роль условий эмбрионального развития в формировании молекулярно-клеточных механизмов обуения и памяти в онтогенезе млекопитающих. Шестой Международный Междисциплинарный Конгресс «нейронаука для медицины и психологии»,

48. Судак, Крым, Украина, 5-15 июня 2010 года, С. 125.

49. Журавин И.А., Туманова H.JL, Васильев Д.С. Структурные изменения нервной ткани гиппокампа в онтогенезе крыс после пренатальной гипоксии. // Журнал эволюционной биохимии и физиологии. 2009. Т.45. №1.С. 138-140.

50. Журавин И.А., Туманова H.J1., Дубровская Н.М., Федосеева К.Н. Нарушение формирования старой и новой коры при изменении условий эмбрионального развития. // Журнал эволюционной биохимии и физиологии. 2003. Т. 39. № 6. С. 608-617.

51. Заманская Т.А. Особенности гемоциркуляции в, межворсинчатом пространстве при физиологическом и осложненном течении беременности. // Российский вестник акушера-гинеколога. 2008. Т. 8. № 3. С. 49-51.

52. Захарова J1.B., Нимаева С.Ц. Течение беременности, родов и послеродового периода у женщин с артериальной гипертензией. // Материалы первого регионального форума «Мать и дитя». 20-22 марта 2007 года. С. 52-53.

53. Зенков Н.К., Ланкин В.З., Меньшикова Е.Б. Окислительный стресс: Биохимический и патофизиологический аспекты. М.:МАИК «Наука-Интерпериодика», 2001. 343с.

54. Измайлова Т.Д., Петричук C.B., Агейкин В.А., Кузнецова Е.Ю.,' Кузнецова H.A., Никодимова С.А. Цитохимическая оценка адаптации новорожденных и детей грудного возраста с гипоксическим поражением ЦНС. // Педиатрия. 2003. № 5. С. 119-120.

55. Ильенко Л.И., Бахмутова Л.А., Гужвина E.H. Применение препаратов природного происхождения в перинатологии. // Педиатрия. 2009. Т. 88. № 5. С. 90-97.

56. Калашников С.А. Беременность тройней: современный взгляд на проблему. // Вопросы гинекологии, акушерства и перинатологии. 2009. Т. 8. № 4. С.50-54.

57. Кахиани М.И., Луфт В.М., Беженарь В.Ф. Особенности состояния трофологического статуса и фактического питания у беременных женщин. // Журналъ акушерства и женскихъ болъзней. 2008.1. T. LVII. № 4. С. 22-30.

58. Клементе X.M. Использование показателей перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы защиты > для прогнозирования и диагностики хронической фетоплацентарной недостаточности. // Российский вестник акушера-гинеколога. 2009. № 6. С. 69.

59. Коган В.Е. Молекулярные механизмы повреждения биомембран при перекисном окислении липидов. В сборнике. Острая ишемия органов и тканей и ранние постишемические расстройства. М: АМН СССР. 1978. 108 с.

60. Козина Л.С., Арутюнян A.B., Стволинский C.JL, Степанова М. С., Маклецова М.Т., Хавинсон В.Х. Регуляторные пептиды защищают от гипоксии в экспериментах in vivo. // Доклады Академии Наук. 2008. Т. 418. №3. С. 419-421.

61. Конь И.Я., Шилина Н.М., Вольфсон С.Б. Омега-3 полиненасыщенные жирные кислоты в профилактике и лечении болезней детей и взрослых. // Лечащий врач. 2006. № 4. С. 55-59.

62. Конь И.Я., Гмошинская М.В. Питание женщин в период беременности. // Приложение к журналу Consilium Medicum. 2006. T. 8. № 1. С. 57-61.

63. Конь И.Я., Шилина Н.М., Коростелева М.М., Буданцева C.B. Исследование влияния рыбьего жира как источника шЗ полиненасыщенных жирных кислот на когнитивные функции дошкольников 5-6 лет. // Педиатрия. 2009. Т. 87. № 1. С. 84-88.

64. Кошелева Н.Г., Аржанова О.Н., Плужникова Т.А., Сельков С.А., Башмакова М.А. Профилактика и лечение невынашивания беременности: учебное пособие. СПб. «Издательство Н-Л», ООО, 2009. 76 с.

65. Крукиер И.И. Плацентарная продукция простациклинов и тромбоксанов в динамике физиологической и осложненной беременности. // Российский вестник акушера-гинеколога. 2008. Т. 8. № 3. С. 9-11.

66. Крылов Ю.Ф., Любимов И.Б., Муляр А.Г. Перспективы использования эйкозапентаеновой и докозагексаеновой кислот как лекарственных средств. // Химико-фармацевтический журнал. 1991. Т. 25. № 9. С. 4-9.

67. Крымшокалова З.С., Орлов В.И., Подгорная О.А., Шенатурина Е.В. Оценка маточно-плацентарного и фетоплацентарного кровотока при задержке роста плода. // Российский вестник акушера-гинеколога. 2008. Т. 8. № з. С. 67-70.

68. Кузнецова В.А., Гарусова Е.В. Клиническое значение показателей гликолиза в оценке состояния плода и новорожденного. // Педиатрия. Москва. Медицина. 1990. № 10. С. 12-16.

69. Кузнецова А.В. Артериальная гипертензия фактор развития плацентарной недостаточности. // Материалы первого регионального1 форума «Мать и дитя». 20-22 марта 2007 года. С. 82-83.

70. Кулаков В.И., Орджоникидзе Н.В., Тютюнник В.Л. Плацентарная недостаточность и инфекция. Руководство для врачей. Москва. 2004. 494 с.

71. Кульчимбаева С.М. Показатели оксидантного статуса в динамике индуцированной беременности. // Журналъ акушерства и женскихъ болъзней. 2006. Т. LV. № 4. С. 46-50.

72. Лазебник Л.Б., Голованов Е.В., Ковязина И.О., Шапошникова Н.А. Эссенциальные фосфолипиды в терапии неалкогольных стеатогепатитов. // Журнал Consilium medicum, 2007. Т. 9. № 7. С. 23-28.

73. Левченко М.В., Орлов В.И., Светличная C.B. Роль субстанции Р и цитокинов в развитии угрозы прерывания беременности. // Российский вестник акушера-гинеколога. 2008. Т. 8. № 3. С. 5-8.

74. Ледяйкина Л.В., Балыкова А.В., Герасименко А.В., Науменко Е.И. Клинические проявления и патоморфологическая картина внутрижелудочковых кровоизлияний гипоксического генеза у новорожденных. // Вопросы современной педиатрии. 2009. Т. 8. № 2. С. 124-125.

75. Лехович В.В., Вавилин В.А., Зенков Н.К., Меньшикова Е.Б. Активная защита при окислительном стрессе. Антиоксидант-респонсивный элемент. //Биохимия. 2006. Т. 71. № 9. С. 1183-1197.

76. Маршал К. и Греннерт Л. Амбулаторное акушерство. Санкт-Петербург. 2009. 434 с.

77. Мелик А.Б., Фанарджян В.В. Морфологические особенности клеток Лугаро коры мозжечка. // Морфология. 2003. Т. 123. № 2. С. 42-47.

78. Методические указания по изучению эмбриотоксического действия фармакологических веществ и влияния их на репродуктивную функцию. Москва, Фармакологический комитет, 1986. 25 с.

79. Мозговая Е.В., Зайнулина М.С. Новые решения вопросов гестоза: современная классификация и комплекс профилактических мер для беременных группы риска. // Журналъ акушерства и женскихъ болъзней. 2008. T. LVII. № 4. С. 3-14.

80. Муляр А.Г. Лекарственная регуляция агрегации тромбоцитов. Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук. Москва. 1995. 39 с.

81. Мустафина O.K. Экспериментальное обоснование соотношения поли ненасыщенных жирных кислот семейств омега 6 и омега 3 в рационе. Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук. Москва. 1998. 23 с.

82. Николаидес К. Ультразвуковое исследование в 11-13 недель беременности. Санкт-Петербург. ИД «Петрополис». 2007. 144 с.

83. Ньюэлл М. Л. и Джаймс М. И. Врожденные и перинатальные инфекции: предупреждение, диагностика и лечение. С-Петербург: ИД «Петерполис». 2004. 442 с.

84. Озирская Е.В., Туманова П.Л. Светооптическое и электронно-микроскопическое исследование амигдалоидного комплекса, черепахи. //

85. Журнал эволюционной биохимии и физиологии. 1992. Т. 28. С. 65-72.

86. Орджоникидзе Н.В., Емельянова А.И., Панов В.О., Кесова М.И., Потапова С.Ю. Беременность и роды при заболеваниях мочевыводящих органов. Москва. 2009. 432 с.

87. Основы перинатологии. Под редакцией проф. Шабалова Н.П. и проф. ЦвелеваЮ.В. Москва. МЕД-пресс-Информ. 2002. 575 с.

88. Отеллин В.А. Формирование патологии головного мозга в эмбриональный период. Природа. 2003. № 9. С. 23-28.

89. Павлова Н.Г., Константинова H.H. Неврология плода-возможности и перспективы исследования. // Журналъ акушерства и женскихъ болъзней.'2003. T. LI1. выпуск 2. С. 86-94. i

90. Пагава К.И., Оболадзе Э.Д., Чикобава Е.А., Суконян Г.В. Система энергетического обеспечения и антиоксидантной защиты у новорожденных при острой и хронической гипоксии. // Педиатрия. 2003. № 1.С. 34-38. 1

91. Пальчик А.Б. Скрининг-схема оценки состояния нервной системы новорожденного. Издательство. СПб. 1995. 88 с.

92. Пальчик А.Б., Шабалов Н.П. Гипоксически-ишемическая энцефалопатия новорожденных. Москва. «Медпресс-информ». 2006. 256 с.

93. Пальчик А.Б., Шабалов Н.П. Токсические энцефалопатии новорожденных. Москва. "МЕДПРЕСС Информ". 2009. 156 с.

94. Прахин Е.И., Терещенко С.Ю. Липиды плазматическихмембран и липидные медиаторы воспаления у детей с атопическими заболеваниями- роль в патогенезе и возможные пути коррекции. // Педиатрия. Москва. 2000. № 2. С. 82-88.

95. Радаева Т.М., Танеев К.Г., Чекалова С.А. Перинатальные поражения нервной системы. Клиника. Диагностика. Лечение. Издательство НГМА. Нижний Новгород. 2009. 127 с.

96. Радзинский В.Е., Ордиянц И.М., Коршунова Л.П. Перспективные пути патогенетически обоснованной профилактики и лечения фетоплацентарной недостаточности. // Русский Медицинский Журнал. Человек и лекарство. 2007. Т. 15. № 4. С. 325-327.

97. Резник Б. Я., Пасенюк Т А., Артеменко И.П. Фосфолипидный спектр и показатели перекисного окисления липидов спинномозговой жидкости у новорожденных с перинатальными поражениями ЦНС. // Педиатрия. Москва. Медицина 1990. № 10. С. 20-24.

98. Репина М.А., Сумская Г.Ф. Анемия беременных (подходы к диагнозу и лечению). Методические рекомендации. ООО «НЕВА -ЛЮКС». 2001.22 с.

99. Рыжавский Б.Я. Развитие головного мозга в ранние периоды онтогенеза: последствия некоторых воздействий. // Соросовский образовательный журнал. 2000. Том 6. № 1. С. 37-42.

100. Савельева Г.М., Сичинава Л.Г., Панина О.Б., Куцер М.А. Пути снижения перинатальной заболеваемости и смертности. // ЮжноРоссийский медицинский журнал. 1999. № 2-3. С. 13-18.

101. Савельева Г.М., Сичинава Л.Г., Шалина Р.И., Клименко П.А., Панина О.Б., Трофимова O.A. Улучшение перинатальных исходов одна из основных проблем современного акушерства. // Российский вестник акушера-гинеколога. 2008. Т. 8. № 6. С. 57-60.

102. Сейфулла Р.Д., Рожкова Е.А., Ким Е.К. Антиоксиданты. // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2009. Т. 72. № 3. С. 60-64.

103. Сергеев П.В., Ухина Т.В., Метелькова H.H. Влияние дексаметазона на фосфолипидный спектр кожи лабораторных животных. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1993. Т. CXV. № 4. С. 378-380.

104. Серов В.Н., Сидельникова В.М. Омега-3 полиненасыщенные жирные кислоты в практике врача акушера-гинеколога. Методические рекомендации для врачей акушеров-гинекологов и врачей общей практики. Москва. 2008. 24 с.

105. Сидорова И.С. Поздний гестоз. Москва. 1996. 222 с.

106. Сидорова И.С., Галинова И.Л. Эндотелиальная дисфункция в развитии гестоза. // Вопросы гинекологии, акушерства и перинатологии. 2006. Т. 5. № 1. С.75-81.

107. Сидорова И.С., Макаров И.О. Клинико-диагностические аспекты фетоплацентарной недостаточности. М: МИА. 2005. 296 с.

108. Сидорова И.С., Унанян А.Л. Невынашивание беременности: нарушение антиоксидантной защиты и ее коррекция. // Российский вестник акушера-гинеколога. 2009. Т. 9. № 1. С. 14-16.

109. Скворцов И.А., Ермоленко H.A. Развитие нервной системы удетей в норме и патологии. Москва. «Медпресс-информ». 2003. 367 с.i

110. Смолянинов Г.В., Орлов A.B. Комплексная диагностика гипоксических поражений мозга плода. // Российский вестник акушера-гинеколога. 2008. Т. 8. № 3. С. 56-57.

111. Стаховская Л.В., Шеховцева К.В., Кербиков О.Б. Антиоксидантная терапия в раннем восстановительном периоде ишемического инсульта. // Consilium medicum. Неврология. 2009. № 1. С. 27-30.

112. Степаничев М.Ю. Цитокины как нейромодуляторы в центральной нервной системе. // Нейрохимия. 2005. Т. 22. № 1. С. 5-11.

113. Стрижаков А.Н., Давыдов А.И., Белоцерковцева Л.Д. Клинические лекции по акушерству и гинекологии. Медицина. Москва. 2000. 379 с.

114. Тер-Карапетян В.А. Фармакологическая коррекция Эпаденом липидного обмена, систем гемостаза и гемореологии при цереброваскулярных заболеваниях. // Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук. Санкт-Петербург. 1993.39 с.

115. Третьякова М.Б., Опарина Т.П., Фоменко Б.А. Особенности функциональной активности тромбоцитов у новорожденных детей с задержкой внутриутробного развития. // Журнал акушерства и женскихъ болъезней. 2004. T. LUI. № 3. С. 15-17.

116. Нейрохимия. 2008. T. 25. №1-2. С. 86-89.

117. Хабриев Р.У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. // Под общей редакцией члена-корреспондента РАМН, профессора Р.У. Хабриева. Москва, 2005. 832 с. Издание 2-е.

118. Хавинсон В.Х., Баринов Б.А., Арутюнян A.B., Малинин В.В. Свободнорадикальное окисление и старение. Спб.: Наука. 2003. 327 с.

119. Хайруллина Г.Р., Габидуллина Р.И. Роль нейроспецифических белков мозга в прорыве гематоэнцефалического барьера при невынашивании беременности. Материалы первого регионального научного форума «Мать и дитя». 20-22 марта 2007. Казань. С. 170-171.

120. Цинзерлинг A.B. Современные инфекции. Патологическая анатомия и вопросы патогенеза. Руководство. Санкт-Петербург. 1993. 363 с.

121. Чеботарь H.A., Конописцева Л.А., Доросев Н.В., Абдаладзе Н.С., Пучков В.Ф. Токсический эффект серотонина при прямом действии на эмбрионы крысы. //Морфология. 1995. Т. 108. № 1. С. 22-24.

122. Чернуха Е. А. Родовой блок. Триада-Х. Москва. 2001. 532 с.

123. Чухловина М. Л. Диагностическое значение биохимических методов при заболеваниях нервной системы. СПб. 1995. 32 с.

124. Шабалов Н.П., Пальчик А.Б. Гипоксически-ишемическая энцефалопатия новорожденных (острый период). Санкт-Петербург. 1996. 31 с.

125. Шабалов Н.П., Любименко В.А., Пальчик А.Б., Ярославский В.К. Асфиксия новорожденных. Москва. «МЕДпресс-информ». 2003. 368 с.I

126. Шарапова О.В. Государственная политика в области охраны здоровья детей. // Российский вестник перинатологии и педиатрии. 2003. Т. 48. № 6. С. 6-8.

127. Шехтман М.М., Козинова О.В. Артериальная гипотензия и беременность. //Consilium Medicum. Акушерство. 2006. Т. 8. № 6. С. 5-8.

128. Шифман Е.М. Преэклампсия, эклампсия, HELLP-синдром. Петрозаводск. Издательство «ИнтелТек». 2002. 428 с.

129. Шниткова Е.В., Бурцев Е.М., Новиков А.Е., Философова М.С. Нервно-психическое здоровье детей, перенесших перинатальное поражение нервной системы. // Журнал неврологии и психиатрии. 2000. № 3. С. 57-59.

130. Яковлева Т.В., Баранов А.А. Государственная политика в области охраны здоровья детей: проблемы и задачи. // Вопросы современной педиатрии. 2009. Т. 8. № 2. С. 6-10.

131. Abel Н.Т., Kleinhaus F., Lamme W., Korb C., Koditz H. Intracerebral hemorrhage and its seguelae in high risk newborn infants in relation to oxygen deficiency status. // Kinderarztl Praz. 1992. Vol. 60. № 2. P. 40-42.

132. Ahmad A., Murthy M., Greiner R.S. A decrease in cell cize accoupanies a loss of DHA in rat hyppocamous. // Nutr. Neurosci. 2002. 116. 1022-1031.

133. Ananth C.V., Getahun D., Peltier M.R., Salihu H.M., Vintzileos A.M. Recurrence of spontaneous versus medically indicated preterm birth. // American Journal of Obstetrics and Gynecology. 2006. Vol. 195. P. 643-50.

134. Ananth C.V., Joseph K.S., Oyelese Y., Demissie K., Vintzileos A.M. Trends in preterm birth and perinatal mortality among singletons: United States, 1989 through 2000. // Obstetrics & Gynecology. 2005. Vol. 105. P. 1084-1091.

135. Andronikou S., Bairaktari E., Vasiliadou A.D. Clinical significance of creatine kinase isoenzymes for fetal asphyxia in women at labor. // Fetal Diagn Ther. 1995. Vol. 10 №1. P. 1-6.

136. Bardin C., Piuze G., Papageorgiou A. Outcome at 5 years of age of SGA and AGA infants born less than 28 weeks of gestation. // Seminars in Perinatology. 2004. Vol. 28. № 4. P. 288-294.

137. Baulon E., Fraser W.D.,' Piedboluf B., Buekens P., Xiong X. Pregnancy induced hypertension and infant growth at 28 and 42 days postpartum. // BMC Pregnancy Childbirth. 2005. 20. 5-10.

138. Borrel A., Martinez J. M., Seres A., Borobio V., Cararach V., Fortuny A. Ductus venosus assessment at the time of nuchal translucency measurement in the detection of fetal aneuploidy. // Prenat Diagn. 2003. № 23. P. 921-6.

139. Bourre J.M. Roles of Unsaturated Fatty (Especially Omega-3Fatty Acids) in the Brain at Various Ages and During Ageing. // Journal of Nutrition, Health & Aging. 2004. Vol. 8. № 3. P. 163-74.

140. Boutet M., Roland L., Thomas N., BilodeauJ. F. Specific systemic antioxidant response of the mother and the fetus to preeclampsia. // American Journal of Obstetrics & Gynecology. 2006. Vol. 195. № 6. P. S141.

141. Breanne M.A., David W.M. Are all n-3 polyunsaturated fatty acids created egual? // Lipids in Health and Disease. 2009. 8:33.

142. Buonocore G., Perrone S., Bracci R. Free Radicals and Brain Damage in the Newborn. //Neonatology. 2001. Vol. 79. № 3-4. P. 180-186.

143. Burlingame J.M., Esfandiari N., Sharma K.R., Mascha E., Falcone T. Total antioxidant capacity and reactive oxygen species in amniotic fluid. // Obstetrics & Gynecology. 2003. Vol. 101. № 4. P. 756-761.

144. Calder P.C. Polyunsaturated fatty acids and inflammation. // Prostodlandins, Leukotrienes and Essential Fatty Acids. 2006. Vol 75. № 3. P. 197-202.

145. Calder P.C. Polyunsaturated fatty acids inflammaroty processes and inflammatory bowel diseases. // Mol Nutr Food Res. 2008. Vol. 52. № 8. P. 885-897.

146. Calder P.C. Does Early Exposure to Long Chain Polyunsaturated Fatty Acids Provide Immune Benefits? // The Journal of Pediatrics. 2010. Vol 156. №6. P. 869-871.

147. Capper J., Wilkinson R.G., Mackenzie A.M. Polyunsaturated Fatty Acids Supplementation during Pregnancy Alters Neonatal Behavior in Sheep. // Journal Nutr. 2006. №136. P. 397-403.

148. Catatan J., Moriguchi T., Slotnick B., Mahadev M., Greiner R.S.,

149. Norman S.J. Cognitive deficitis in doeosahexaenoic acid-deficient rats. // Behavioral Neuroscience. 2002. Vol. 116. № 6. P. 1014-1021.

150. Chard T., Yoong A & Macintosh M. The myth of fetal growth retardation at term. // Br Journal Obstetrics and Gynecology. 1993. № 100. P. 1076-81.

151. Coughlan M.T., Vervaart P.P., Permezel M., Georgiou H.M., Rice G.E. Altered placental oxidative stress status in gestational diabetes mellitus. // Placenta. 2004. Vol. 25. № 1. P. 78-84.

152. Crauford M.A. Docosahexaenoic acid in neural signaling systems. // Nutr Health, 2006. Vol. 18. № 13. P. 263-73.

153. Crauford M.A., Bazinet R.P., Sinelair A.J. Fat Intake and CNS Functioning: Ageing and Disease. // Anals of Nutrition & Metabolism. 2009. 55. P. 200-228.

154. Dammann O., Leviton A. Brain damage in preterm newborns: Biological response modification as a stategy to reduce disabilities. // The Journal of Pediatrics. 2000. Vol. 136. № 4. P. 433- 438.

155. Daniel G.K., Keeler S.M., Rust O.A., Wayock C.P, Vintzileos A.M., Hanna N. Is midrimester short cervix a sing of intraamniotic inflammation? // American Journal of Obstetrics and Gynecology. 2009. Vol. 200. №4. P. 374-5.

156. Deborah R., Berman,, Mozurkewich E., Li Y., Barks J. Docosahexaenoic acid pretreatment confers neuroprotection in a rat model of perinatal cerebral hypoxia-ischemia. // American Journal of Obstetrics and Gynecology. 2009. Vol. 200. № 3. P. 305-306.

157. Delobel-Ayoub M., Kaminski M., Marret S. Behavioral outcome at 3 years of age in very preterm infants: the EPIPAGE study. // Pediatrics. 2006. 117: P. 1996-2005.

158. Delzell J.E., Lefevre M.L. Urinary tract infections during pregnancy. //Am Fam Physician. 2000. Vol. 61. №3. P. 713-721.

159. Dubrovskaya N.M., Zhuravin I.A. Ontogenetic characteristics of behavior in rats subjected to hypoxia on day 14 or day 18 of embryogenesis. // Behavioral Neuroscience Physiol. 2010. Vol. 40. № 2. P. 231-8 .

160. Dudkiewicz J., Urban G., Oslislo A., Bazowska G. Urinary tract infections in pregnancy perinatal problem. // Ginec Pol, 1998. Vol 69. № 12. P. 1077-1081.

161. Dunstan J.A., Simmer K., Dixon G., Prescott S. L. Cognitive assessment of children at age 2Vi years after maternal fish oil supplementation in pregnancy: a randomised controlled trial. // Arch Dis Child Fetal Neonatal Ed, 2008. Vol. 93. P. 45-50.i

162. Ennen C., Savage W., Nortington F., Everett A., Craham E. Glial fibrillary acidic protein (GFAP) may serve as a biomarker for neonatal neurologic injuary. // American Journal of Obstetrics & Gynecology. 20091 Vol. 201. №6. P. S80.

163. Ergaz Z., Avgil M., Ornoy A. Intrauterine grouth restriction-etiology and conseguences: what do we know about the human situation and experimental animal models? // Reprod Toxicol. 2005. Vol. 20. № 3. P. 30-1-22.

164. Fedorova I., Hussein N., Baumann M. H., Martino C., Norman S.J. An n-3 fatty acid deficiency impairs rat spatial learning in the Barnes maze. //

165. Behavioral Neuroscience. 2009. Vol. 123. № 1. P. 196-205.

166. Fischer S., Weber P.C. Tromboxane (TX)A3 and prostaglandin (PG)I3 ecosapentaenoic acid: identification and guantification by capillary gas chr spectometry. // Biomed Mass Spectom. 1985. Vol. 12.№ 9. P. 470-476.

167. Fürst P., Kuhn K.S. Fish oil emulsions what benefits can they bring ? // Clin Nutr. 2000. № 19. P. 7-14.

168. Gamo S., Hashimoto M., Sugioka R., Shahathossan M., Hatn N., Misawa Y., Masumura S. Chronic administration of docosahexaenoic acid improves reference memory related learing ability in joung rats. // Neuroscience. 1999. Vol. 93. № l.p. 237-341.

169. Gennaro S., Fender W., Nuaman I.F., Campbell D.E., Douglas S.D. Caregiving to very low birthweight infants: a model of stress and immune response. // Brain Behav Immun. 1997. № 11. P. 201-15.

170. Gifford R.W., August P.A., Cunningham G. Peport of the National High Blood Pressure Education Program Workihg Group on High Blood Pressure in Pregnancy. // American Journal of Obstetrics and Gynecology. 2000. Vol. 183.№1. P. 22.

171. Goldenberg R.L., Hauth J.C., Andrews W.W. Intrauterine infection and preterm delivery. // N Engl J Med. 2000. 342: 1500-07.

172. Graham E.M., Mishra O.P., Delivoria-Papadopoulos M. Antioxidants and oxidative stress injuries to the brain in the perinatal period. // Seminars in Neonatology. 1998. Vol 3. № 2 .P. 75-85.

173. Green P., Yavin E. Mechanisms of docosahexaenoic acid accretion in the fetal brain. // Journal Neurosci Res. 1998. Vol. 52. № 2. P. 129-36.

174. Habek D., Hodek B., Herman R. Fetal biophysical profile and cerebro-umbilical ratio in assesment of perinatal outcome ingrowth-restricted fetuses. // Fetal. Diagn. Ther, 2003. Vol.18, № 1. P. 12-16.

175. Hack M., Fanoroff A.A. Outcomes of children of extremely low birthweight and gestational age in the 1990s. // Seminars in Neonatology. 2000. Vol. 5. P. 89-106.

176. Hadders-Algra M. Prenatal long-chain polyunsaturated fatty acid status: the importance of a balanced intake of docosahexaenoic acid and arachidonic acid. // Journal Perinat Med. 2008. Vol. 23. 18211254

177. Haque S.K., Siddiqui M.U., Islam N., Moin S. Erythrocyte markers of oxidative stress in higher age-group preeclamptic and normal pregnant mothers. // Hypertens Pregnancy. 2010. Vol. 29. № 1. P. 69-81.

178. Hales C.N., Barker D.J. The thrifty phenotype hypotesis. // BMJ, 2001. 60: 5-20.

179. Hannah C.K., Stephen A.B. Human oligodendroglial development: Relationship to periventricular leukomalacia. // Seminars in Pediatric Neurology. 1998. Vol. 5. № 3. P. 180-189.

180. Hemming K., Hutton J.L., Bonellie S., Kurinczuk J.J. Intrauterine growth and survival in cerebral palsy. // Arch Dis Child Fetal Neonatal Ed. 2008. Vol. 93. №2. P. 121-126.

181. Hendler I, Goldenberg R.L., Mercer B.M. The preterm prediction study: association between maternal body mass index (BMI) and spontaneous preterm birth. // American Journal of Obstetrics & Gynecology. 2005. 192. P.882-86.

182. Herraiz M.A., Hernandez A., Asenjio E., Herraiz I. Urinary tract infection in pregnancy. // Enferm Infect Microbiol Clin. 2005. Vol. 23. № 4. P. 40-46.i

183. Homer C.J., James S.A., Siegel E. Work-related psychosocial stress and risk of preterm, low birthweight delivery. // Am Journal Public Health. 1990. Vol. 80. №2. 173-7.

184. Huizink A.C., Muilder E.J., Buitelaar J.K. Prenatal stress and risk for psychopathology specific effects or induction of general susceptibility. // Psychol Bull. 2004. Vol. 130. № 1. P. 115-142.

185. Jackson R.A., Gibson K.A., Wu Y.W., Croughan M.S. Perinatal outcomes in singletons following in vitro fertilization: a meta-analysis. // Obstetrics & Gynecology. 2004. Vol. 103. № 3. P. 551-63.i

186. Jensen F., Tsuji M., Offutt M. Profound reversible energy loss in the hypoxic rat brain. // Dev Brain Res. 1993. 73: P. 99-105.

187. Judith L., Capper, Wilkinson R.G., Mackenzie A.M., Sinclair L.A. Polyunsaturated Fatty Acid Supplementation during Pregnancy Alters Neonatal Behavior in Sheep" // J. Nutr. 2006. 136: P. 397-403.

188. Juurlink B.H., Thorburne S.K., Hertz L. Peroxide-scavenging deficit underlies oligodendrocyte susceptibility to oxidative stress. // Glia. 1998. Vol. 22. №4. P. 371-8.

189. Kendall G., Peebles D. Acute fetal hypoxia: the modulating effect of infection. // Early Human Development. 2005. Vol.81. № 1. P. 27-34.

190. Kim S.Y., Kim S.K, Lee J.S. The predicion of adverse pregnancy outcome using low unconjugated estriol in the second trimester of pregnancy without risk of Down s syndrome // Yonsei Med J. 2000. Vol. 41. № 2. P. 226-229.

191. Ko C.H, Wong R., Cung P., Li K, Chui K.M., Yen P.M., Fok T. F. Oxidative Challenge and Glucose-6-Phosphate Dehydrogenase Activity of Preterm and Term Neonatal Red Blood Cells. // Neonatolog. 2009. Vol. 96. № 2. P. 96-101.

192. Kris-Etherton P.M., Taylor D.S., Yu-Poth S., Huth P., Moriarty K., Fishell V., Hargrove R.L., Zhao G., Etherton T.D. Polyunsaturated fatty acids in the food chain in the United States. // Am J Clin Nutr. 2000. 71: P. 179-188.

193. Kumar A., Ramakrishna S.V.K., Basu S. Oxidative Stress in Perinatal Asphyxia. //Pediatr Neurol. 2008A. Vol. 38. № 3. P. 181-185.

194. Kumar A., Ranjan R., Basu S., Khanna IT., Bhargava V. i Antioxidant Levels in Cord Blood of Low Birth Weight Newborns. // Indian

195. Pediatr. 2008E. 7; 45 (7):583-585.

196. Ladipo O.A. Nutrition in pregnancy mineral and vitamin supplements. // American Journal Clin Nutr. 2000. Vol. 72. № I. P. 280S-90S.

197. Landmann E., Misselwitz B., Steiss J.O., Gortner L. Mortality and morbidity of neonates born at <26 weeks of gestation (1998-2003). A population-based study. // Journal of Perinatal Medicine. 2008. Vol. 36. № 2. P. 168-174.

198. Lee Y.S., Chou Y.H. Antioxidant profiles in full term and preterm neonates. // Chang Gung Med Journal. 2005. Vol. 12. № 28. P. 846-51.

199. Lianos A., Li Y., Mena P., Salem N.Jr., Uauy R. Infants with intrauterine growth restriction have impaired formation of docosahexaenoic acid in early neonatal life: a stable isotope study. // Pediatr Res. 2005 . Vol. 58. № 4. P. 735-40.

200. Lystova S.N., Stephanov V.E. Phosphagen Kinases. Florida; Boston. CRS Press. 1991. P. 222.

201. Makrides M., Gibson R.A. Long-chain polyunsaturated fatty acid requirements during pregnancy and lactation. // American Journal of Clinical Nutrition. 2000. Vol. 71. № 1. 307 S-311S.

202. Marangell LB, Martinez JM, Zboyan HA, Chong H, Puryear U.

203. Omega-3 fatty acids for the prevention of postpartum depression: negative data from a preliminary, open label pilot study. Depress Anxiety. 2004; 19:20-23.

204. Matias A., Gomes C., Flack N., Montenegro N., Nicolaides K.H. Screening for chromosomal abnormalities at 11-14 weeks: the role of ductus venosus blood flow. // Ultrasound Obstet Gynecol. 1998. 2: P. 380-4.

205. Matsuda Y., Maeda T., Kouno S. Comparison of neonatal outcome including cerebral palsy between abruptio placentae and placenta previa. // European Journal of Obstetrics & Gynecology and Reproductive Biology. 2003. Vol. 106. № 2. P.125-129.

206. Matsuno H., Tokuda H., Ishisaki A. Receptors play a significantrole in the development of platelet microaggregation in patients with diabetes .//

207. Journal Clin Endocrinol Metabol. 2005. Vol. 90. № 2. P. 920-927.i

208. Mesulam M. M. The blue reaction product in horseradish peroxidase neurochemistry; incubation parameters and visibility. // Journal Neurochem Cytochem. 1976. Vol. 24. № 12. P. 1273-1280.

209. Mesulam. M.M. Prinpiples of horseradish peroxidaze neurohistochemistry and their alication for tracing neural pathways. In: Tacing neural connections with HRP. N.Y.J. Wiley, 1982. P. 1-151.

210. Mondal N., Bhat B.V., Banupriya C., Konner B.C. Oxidative stress in perinatal asphyxia in relation to outcome. // Indian Journal Pediatr. 2010. № 4. P.17.

211. Moretti M., Phillips M., Abouzeid A., Cataneo R. N., Greenberg J. Increased breath markers of oxidative stress in normal pregnancy and in preeclampsia. // American Journal of Obstetrics & Gynecology. 2004. Vol. 190. №5. P. 1184-1190.

212. Morgan K.L. Management of UTI during pregnansy. // American Journal Child Nurs. 2004. Vol. 29. № 4. P. 254-258.

213. Mulder E.J., Medina P.G., Huizink A.C., Bergh B.L., Buitelaar

214. J.K., Visser G.H. Prenatal maternal stress effects on pregnancy and the (unborn)child. // Early Hum Dev. 2002. Vol. 70. № 1-2. P. 3-14.i

215. O'Connor A.R, Stephenson T., Johnson A. Long-term ophthalmic outcome of low birth weight children with and without retinopathy of prematurity. //Pediatrics. 2002. № 109. P. 12-18.

216. Olsen S.F., Secher N.J., Tabor A. Randomised clinical trials of fish oil supplementation in high risk pregnancies. Fish Oil Trials In Pregnancy (FOTIP) Team. // BJOG. 2000. 107: P. 382-95.

217. Olsen S.F., Sorenson J.D., Secher N.J. Randomised controlled trial of effect of fish-oil supplementation on pregnancy duration. // Lancet. 1992. 339: P. 1003-07.

218. Ott W.J. Diagnosis of intrauterine growth restriction: comparison of ultrasound parameters. // Am. J. Perinatol. 2002. Vol. 19. № 3. P. 133-137.

219. Paxinos G., Watson C. The rat brain in stereotaxic coordinats. London: Acad. Press. Ltd. 1982.

220. Paxinos G., Watson C. The rat brain in stereotaxic coordinats. San Diego: Elsevier Academic Press. 2005. Compact Third Edition. P. 207.

221. Perlman J.M. White matter injury in the preterm infant: an important determination of abnormal neurodevelopment outcome. // Early Human Development. 1998. Vol. 53. № 2. P. 99-120.

222. Raygada M., Cho E., Hilakivi-Clarke L. High Maternal Intake of Polyunsaturated Fatty Acids During Pregnancy in Mice Alters Offspring' Aggressive Behavior, Immobility in the Swim Test, Locomotor Activity and

223. Brain Proteinkinase C Activity. // The Journal of Nutrition. 1998. Vol. 128. № 12. P. 2505-2511.

224. Rees S., Jnder T. Fetal and neonatal origins of altered brain development. //Early Human Development. 2005. Vol. 81. № 9. P. 753-761.

225. Rhone S.A., Magee F. Remple V. Money D. The association of placental abnormalities with maternal and neonatal clinical findings. // Journal Obstetrics & Gynecology. Can. 2003. Vol. 25. № 2. P. 123-128.

226. Roberts J.M, Hubel C.A. Oxidative stress in preeclampsia. //American Journal of Obstetrics & Gynecology. 2004. Vol. 190. № 5. P. 1177-1178.

227. Roberts J.M., Pearson G., Cutler J., Lindheimer M. Summary of the NHLBI Worbing Group on Research on Hypertension During Pregnancy. // Hypertension. 2000. 41: P. 437.

228. Robles R., Palomino N., Robles A. Oxidative stress in the neonate. // Early Human Development. 2001. Vol. 65. № 2. P. S75-S81.

229. Roland E.H., Poskitt K., Rodriguez E. Perinatal hypoxic-ischemic thalamic injury: clinical features and neuroimaging. // Ann Neurol. 1998. № 44. P.161-166.

230. Romero R., Espinoza J., Kusanovic J. The preterm parturition syndrome. // Br Journal Obstetrics Gyneacology. 2006. № 113. P. 17-42.

231. Ruetzler K., Buhrer C., Grimmer J., Muller C., Nagdyman N., Obladen M. Urinary S-100 B Concentrations in Term and Preterm Infants at Risk for Brain Damage. // Biology of Neonate. 2006. Vol. 89. № 4. P.260-264.

232. Rump P., Merisink R.P., Kester A.D.M., Homstra G. Essential fatty acids composition of plasma phospholipids and birth weight: a study in term neonates. // Am J Clin Nutr. 2001. V.ol 73. P. 797-806.

233. Rupp H , Verboom C.N., Jäger B. Saving lives post MI: highly purified omega-3 PUFA for prevention of sudden death. // Journal Clin and Basic Cardiology 2002; 5: 209-11.

234. Saigal S., Hoult L. A., Streiner D. L., Stoskopf B. L., Rosenbaum P. L. School difficulties at abolescence in a regional cohort of children who were extremely low birth weight. // Pediatrics. 2000. № 105. P. 325-31.

235. Sanders C.L., Lucas M.J. Renal disease in pregnancy. // Obstet Gynecol Clin North Am. 2001. Vol. 28. № 3. P. 593-600.

236. Schuchardt J. P., Huss M., Stauss-Grabo M., Hahn A. Significance of long- chain polyunsaturated fatty acids (PUFAs) for the development and behavior of children. //European Journal of Pediatrics. 2010. Vol. 169. № 2. P. 149-164.

237. Sebire N.J., Carvalho M., D' Ercole C., Souka A., Nicolai des IC. H. Intertwin disparity in fetal size in monochorionic and dichorionic twin pregnancies. // Obstetrics & Gynecology. 1998. 91: P. 82-5.

238. Sebire N.J., Snijders R.J. M., Hughes K., Sepulveda W., Nicolaides K.H. The hidden mortality of monochorionic twin pregnancies. // BJOG.1997.104: P.1203-7.

239. Sheldon J., Riches P., Gooding R., Soni N., Hobb J.R. C- reactive protein and its cytokine mediators in intensive-care patients. // Clin Chem, 1993. 39: 147-50.

240. Sibai B.M. Diagnosis and management of gestational hypertension and preeclampsia. // Obstetrics & Gynecology. 2003. 102: P. 181-92.

241. Gynecology. 2000. Vol.182. № 4. P. 938-942.

242. Siciaz A. Urinary thiobarbituric acid-reacting substances as potentional biomarkers of intrauterine hypoxia. // Arch Pediat Adolesc Med. 2001. 155: P. 718-722.

243. Smuts C.M., Huang M., Munday D., Plasse T., Major S., Carlson S.E. A randomized trial of docosahexaenoic acid supplementation during the third trimester of pregnansy. // Obstetrics & Gynecology. 2003. Vol. 101. P. 469-479.

244. Spickett C.M., Reglinski J., Smith W.E., Wilson R., Walker J.J., McKillop J. Erythrocyte glutathione balance and membrane stability during preeclampsia. // Radic Biol Med. 1998. Vol. 24. № 6. P. 1049-1055.

245. Thorngren-Jerneck K., Ailing C., Herbst A., Amer-Wahlin I., Marsal K.I. SI00 protein in serum as a prognostic marker for cerebral injury in term newborn infants with hypoxic ischemic encephalopathy. // Pediatr Res. 2004.Vol. 55. № 3. P. 406-12.

246. Treem W.R. Beta oxidation defects: Biochemistry and Clinical. // Clinics in Liver Disease, 1999. Vol. 3. №1. P. 49-67.

247. Udipi S.A., Ghugre P., Antony U.J. Nutrition in pregnancy and lactation. // Indian Med. Assoc. 2000. Vol. 98. № 9. P. 48-57.

248. Viscardi R.M., Hashmi N., Gross G.W., Sun C.C., Rodriguez A., Fairchild K.D. Incidence of invasive Ureaplasma in VLBW infants: relationship to severe intraventricular hemorrhage. // Journal Perinatol. 2008. № 3. P 352-359.

249. Vural P., Akgul C., Canbaz M. Urinary PGE 2 and PGF 2alpha levels and renal function in preeclampsia. // Gynecol Obstet Invest. 1998. Vol. 45. №4. P. 237-241.

250. Wang M.L., Dorer D.J., Fleming M.P., Catlin E.A. Clinical outcomes of near-term infants. // Pediatrics. 2004. 114:P. 372-76.

251. Wang Y., Alexanderb J.S. Placental pathophysiology in preeclampsia. //Pathophysiology. 2000. Vol. 6. № 4. P. 261-270.

252. Warner D.S., Sheng H., Batini-Haberle I. Oxidants, antioxidantsand the ischemic brain. 11 Journal Exper Biol. 2004. Vol. 6. № 207. P. 3221-31.t

253. Weiss E., Ulrich S., Berle P., Picard-Maureau A. CK-BB as indicator of prenatal brain-cell injury in fetuses withabsent of reverse end-diastolic flow velocities in the umbilical arteries. // Journal Perinat Med. 1994. Vol. 22. №3. P. 219-226.

254. William E.C. Importance of n-3 fatty acids in health and disease. // American Journal Clin Nutr. 2000. 71: P. 171-175.

255. Yavin E. Versatile roles of docosahexaenoic acid in the prenatal brain: fom pro- and anti-oxidant features to regulation of gene expression. // Prostodlandins, Leukotrienes and Essential Fatty Acids. 2006. Vol. 75. № 3. P. 203-211.

256. Yavin E., Glosman S., Green P. Docosahexaenoic acid accumulation in the prenatal brain: prooxidant and antioxidant features. // Journal Mol Neurosci. 2001. Vol. 16. № 2-3. P. 229-35.

257. Yavin E., Himovichi E., Eilam R. Delayed cell migration in the developing rat brain following maternal omega 3 alpha linolenic acid dietary deficiency. //Neuroscience. 2009. Vol. 162. № 4. P. 1011-22.

Информация о работе

Абдаладзе, Нино Симоновна
кандидата медицинских наук
Санкт-Петербург, 2011
ВАК 03.03.01

Диссертация

Моделирование и коррекция психомоторных расстройствах новорожденных - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы