Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Микофлора нестерильных лекарственных средств

ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Автореферат диссертации по теме "Микофлора нестерильных лекарственных средств"

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РФ САНКТ-ПЕТЕРБУРГСКИЙ ХИМИКО-ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЙ ИНСТИТУТ

На правах рукописи

ГУНАР

Ольга Викторовна

МИКОФЛОРА НЕСТЕРИЛЬНЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ

(03.00.07 — микробиология)

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва — 1992

Работа выполнена в Государственном научно-исследовател ском институте по стандартизации и контролю лекарственнь средств МЗ РФ.

Научный руководитель: кандидат биологических наук К. А. Каграманова

Официальные оппоненты:

доктор химических наук Козлов Э. И. кандидат биологических наук Соколова И. П.

Ведущая организация — Всесоюзный научно-исследовател ский институт фармации.

Защита состоится «с*?'7'» ок^т^уг^ 1992 г. в ^^ час. I заседании специализированного совета К 084.63.01 при Санк Петербургского химико-фармацевтического института (г. Санк Петербург, ул. Проф. Попова, д. 14).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке СПбХФИ

Автореферат разослан « л/г^-е»^«- 1992 г

Ученый секретарь специализированного совета

Кирилова Н.

ОБШАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность та ми. С середины 60-х годов нашего столетия эсле того, как в нестерильных лекарственных средствах были выяв-ены микроорганизмы ,представляющие опасность для здоровья челове-а , практически во всех развитых странах началось изучение мик-эбиологической чистоты, различных лекарственных форм медицинских репаратов. Однако основное внимание было .сосредоточено на выделе-ии и идентификации бактерий .содержащихся в НЖ.Что касается гри-ов , то в настоящее время в методах микробиологического анализа екарственных препаратов имеется только их количественное опредё-ение( Госфармакопея'СССР XI изд., 1990) .Причиной некоторого от-тавания в изучении микофлоры НЛС .вероятно, следует считать неостаточную информацию об опасности контаминации грибами как ля человека, гак и для самих препаратов,а также отсутствие сведе-ий о широком распространении и о богатых адаптивных возможностях рибов-контаминантов.

В литературе авторы буквально вскользь упоминают о загрязне-ии грибами НЛС ( Иванова Л. А. ,1969, Кендерфи Й.1976, Веуег1с1®е .6., 1975, ВеШ.Й. .1967. Л. ,197б,3аеа№ У., 1974). Лишь еди-

ичные исследователи проводили микологическую экспертизу грибов, ыделенных из лекарственного растительного сырья(Осипян Л. Л.,1989).

Опасность контаминации лекарственных средств связана с озможной "лекарственной инфекцией " особенно для новорожденных . слабленных пациентов , для больных пожилого возраста . с хрони-ескими заболеваниями и после применения современной терапии, реди случаев "лекарственной инспекции" , связанной с грибами, в итературе упоминалось заражение новорожденных в одном из роддо-юв Японии . приведшее к летальному исходу , е результате исполь-ования контаминированной грибами детской присыпкиС Курага X. 1980). [меются описания кожных заболеваний. вызванных применением меди-.инского крема, загрязненного патогенным дрожжеподобным грибом

Candida albicans и синегнойной папочкой Pseudomonas-aeruginosa (Bruck К.A.,1971). В настоящее время большое внимание уделяется исследованию микрофлоры глазных контактных линз и растворов для и: промывания, так как из-за контаминации грибами резко увеличиваете; риск возникновения микозов глаз (Aureli Р.,1985, Butrus S.,1986, Pitsigavdaki E.)19gO,Simmans R.,1986)

Микозы и микогенная аллергия являются актуальной медико-социальной проблемой для многих стран мира , в той числе и для России .Достаточно отметить что по данным ВОЗ ими страдает 1/5 часть населения земли При этом за последние 50-60 лет смертность от глубоких микозов повысилась в 10 раз ( от 0,3% до 3,0%) Доказаны мутагенные , тератогенные и канцерогенные свойства метаболитов грибной клетки , а именно микотоксиновСТутельян В.А., 1985). Не исключена реальность попадания и опасность развития гр* бов в лекасгвенных средствах

Цель и задачи исследования. Целью диссертационной работ явилосьизучение количественного и качественного состава микофлор!

контаминируюпей нестерильные лекарственные средства . Для реализации поставленной цели были конкретизированы задачи исследования -разработать различные методы количественного определени! грмбоЕ-контаминантое ;

гиспользовать разработанные методы для изучения микологической чистоты НЛС:

-установить уровень контаминации различные лекарственных форм и фармакологических групп препаратов;

-провести микологическую экспертизу выделенных видов грибов; -проанализировать эффективность питательных сред , используемых для выделения грибов-,

-изучить жизнеспособность грибов-контаминантов в НЛС и вспомогательных материалах, применяемых для их производства.

Научная новизна. Разработаны методы количественного опреде-ения плесневых и дрожжевых грибов -контаминантов HJTC, озволяюшие получитьрезультаты в более короткие сроки и исключаю-иеслияние колоний миКромицетов.

Установлен высокий уровень контаминации грибами НЛС различ-ых лекарственных форм и фармакологических групп 28,9% изучен-ых серий НЛС не соответствуют требованиям Госфармакопеи СССР XI зд. по показателю "Микробиологическая чистота"

Определен видовой состав выделенных грибов : 69% культур от-осится к родам Pénicillium, Aspergillus, Mucor.

Изучен срок сохранения жизнеспособности грибов во вспомога-ельных материалах и НЛС. Установлен факт переливания грибов в вердых лекарственных формах в течение нескольких лет.

Практическая значимость. На основе методов количественного пределения грибов в НЛС составлен проект ведомости изменений к Зщей чстатье Госфармакопеи СССР XI изд. "Испытание на микробио-эгическую чистоту".Составлена справка с указанием количественно-э и качественного содер.жания грибов-конташнантов в НЛС. правка направлена в Минздрав РФ.

Апробация работы. Диссертация апробирована на заседании Учено-о Совета Государственного научно-исследовательского института по гандартизации и контролю лекарственных средств МЗ РФ и на засе-энии кафедры микробиологии Санкт-Петербургского химико-фармацев-лческого института.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 7 научных работ.

Объси 'работы. Диссертация состоит из введения , обзора лите-этуры ,5 глав собственных исследований . обсуждения результатов ыводов и списка используемой литературы 200 источников ). Ра-эта изложена на 160 страницах машинописного текста и включает 16 ясунков и 23 таблицы.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Определение микробиологической чистоты нестерильных

лекарственных средств и сырья .

Количественное содержание грибов определяли в 152 наименова ниях 5?0 серий ГЛС , относящихся к 21 фармакологической группе в 141 партии 24 наименований вспомогательных материалов и сырья применяемых для их производства . а также в 49 партиях 23 наим< нований ЛРС.

Из 570 серий ИЛС . относящихся к 21 фармакологической групп 28,9% не соответствовало требованиям Госфармакопеи СССР XI изд предъявляемым к препаратам по показателю "Микробиологическая чи( тота", так как содержали в 1г более 100 микромицетов и дрожжевых грибов

Таблица 1

Уровень микробной загрязненности сырья вспомогательных материалов и ЛРС

Наименование Количество ОЧГ в 1 г образца

наимен партий 0-10 11-100 >100

1. Основное сырье 12 51

2. Вспомогательные материалы 12 90

29 121 10

(56.9%) (23,5%) (19,62

26 22 42

(28.9Х> (24. АХ) (46,7

3. ЛРС

49

1

(2,0%)

48

(98,0Z)

При определении уровня контаминации грибами сырья . вспомо-ательных материалов и ЛРС .(таблица 1) установлено, что 19.6 % ис-педованных партий основного сырья и 46.? X партий гспомогатель-ж материалов не соответствовали требованиям . предъвляемым к ГЛС. дарственное растительное сырье в 98 % случаев было контаминиро-зно грибами >100 /г . в некоторых случаях до iO6 КОЕ/г.

В таблице 2 преДЬтавЛЪны д,энные о контаминации Н.ПС , изго-эвленных из синтетического и природного сырья Последние вставляли 62,1% от числа всех испытанных серий.

Таблица £

Уровень микробной загрязненности HJ5C из различного основного сырья

;ноЕное сырье Количество ОЧГ в 1 г образца

серий НЛС 1-10 11-100 : 100

Природного

происхождения 354 170 86 98

(раст.и жив. > (62. IX) '59;ü

Синтетического С16 99 50 с?

происхождения 137". 9%) < 31 '-i

Итого : Ь70 269 136

'Р' ъ контаминации грибами образцов НЛС иг попрекнет- уыргя вы-1 ьрецельно допустимого в 69 X случаев . Дгя пргсмр-згое кг осно-> синтетического сырья! 37,9 X исследованных серии .ЧТ . рксокий

- б -

уровень - (более 100 КОЕ/г ) контаминации наблюдался в 31% случ£ ев.

Безопасность для здоровья человека лекарственных препаратов, контаминированных дрожжевыми и плесневыми грибами, определяете? не только количеством грибов-контаминантов , но и их видовым составом.

Всего было исследовано 228 серий 41 наименования препаратов 36 партий 5 наименований вспомогательных материалов ,а также 31 партий 15 наименований JPC.

Для идентификации грибов применяли стандартные методы определения микромицетов и систему API 20С AUX ( Франция ) для дрожжевых грибов

Выделены в аксенические культуры и идентифицированы 183 штамма грибов из НЛС и сырья. Полученные культуры относятся боле! чем к 70 видам из 17 родов.Специфическими и монопольными культурами являлись грибы родов Pénicillium. Aspergí lus, Mucor ,нескольк< реже встречались р. Cladosporiutn, Trichoderma. Alternaría, Rhízopus иэредоа-Fusarium, Botrytis.Доминируют виды Aspergillus flavus L.K..A. niger v.Tilgh. , P.verrueosum.Dierckx var. cyclopiui tWest ling ) Samson. St-olk et Hadlok, A.orysa (Ahlburg/Cjhn.),Mucor sp. .многие из которых известны как потенциальные продуценты иикотскеинов.

Разработка методов количественного определения грибов.

При контроле качества НГС по показателю"Микробиологическая чистота" особое значение имеет правильный выбор метода количест венного определения микроорганизмов. Жесткая регламентация допус тимсго в ! г НЛС количества микроорганизмов, в частности грибов, требует использования методов,позволяющих получать достоверны хороио воспроизводимые количественные характеристики микофлоры . содержащейся в исследуемых образцах При этом следует учитывать

ак видовые морфологические особенности выделенных штаммов , так лекарственную форму и природу испытуемого объекта.

Наиболее стандартными методами количественного определения рибов в НЛС ,рекомендованными фармакопеями , являются :

- глубинный чашечный метод , применяемый за рубежом , и

- двухслойный агаровый , включенный в Госфармакопею XI изд. >днако в ряде случаев их использование неэффективно Например , рибы из родов Mucor, Rhizopus и др.. рост которых не заметен че-ез 24 ч инкубации , а через 48 ч покрывает всю поверхность агара

чашке Петри, делая невозможным подсчет отдельных колониесбразу-|щих единиц. Медленно растущие организмы , напротив, образуют ко-;онии лишь через 5-7 суток инкубации , удлиняя таким образом сро-:и микробиологического контроля НЛС.

Трудности подобного рода количественного определения грибов : НЛС побудили нас изыскать методы , позволяющее получать досто-:ерные результаты контроля в том случае , когда рутинные методы ^эффективны.

В качестве тест-культуры использовали плесневые грибы ispergillus niger ВКМ F - 1119 и Pénicillium verrucosum var. :yclopium ВКМ F - 265, дрожжевые грибы Saccharomyces cereviseae SKM Y - 56 . дрожжеподобные патогенные виды Candida albicans NCTC 185-653. Candida albicans ATCC 1-0/11, C. albicans CCM 55/79.

С целью создания условий для формирования локальных, неслива-«цихся колоний, была предложена модификация чашечного агарового (етода, названного нами "малым глубинным" : в стерильную чашку Пет >и вносят 1 мл исследуемого раствора С эмульсии, суспензии ) об->аэца препарата, добавляют расплавленную и охлажденную до темпера-'уры 45-50 С питательную среду Сабуро в количестве 5 мл и тшд-'ельно перемешивают.После застывания агара чашки Петри переворачи-¡ают и инкубируют при температуре 20-25 С в течение 3-5 суток

Таблица 3

Количественное определение плесневых грибов в контаминированных препаратах различными методами ( КОЕ/г )

Наименование М е т о д ы посева

препарата ЬГ вг г -х сл. поверх.

1. Аллохол

табл. 236±2 £04±5 • 222±6 194+4

2. Гипозоль

С обр. 15 260+1 190i3 210 ti 250+4

3. Гипозоль

(обр.2) 230+4 100+2 190+1 200+8

4. Желчь мед.

консерв. 105+1 72+4 85+6 100+1

5. Парацетамол

3 3 ■3

таблетки (Г.1+0.3)10 16,0+0.2)10 (6.2+0,1)10 (6,3+0,1)'

6. Финлепсин

таблетки (6.910.1)10* (6.6+0,l)10V (6.3+0,2) 10* (1,8+0,5)

7. Холензим

таблетки 350*8 300+2 300i6 250+4

После рзссчета коэффишнта прорастания грибов . выделяемы из Аллохола. Гипозоля1 обр. 1). Гипозоля ( обр.2) .Желчи медици: кой консервированной , Парацетамола табл., Финлепсина табл.. : лензима табл. получили следующие значения :122%. ií?Z, 1242, 1 И ОХ. 115%. соответственно . Кроме того достоверный, поде максимально изолированных колоний был возможен на 3 сутки инку цми образцов.

Лро^-Сг-нние иепы.янил показали перспективность приметь-

/алого глубинного метода ( как варианта чашечного агароЕого > для подсчета КОЕ плесневых грибов евиду ускоренного обрззов.анил коло-4ий , четкого , компактного их формирования , облегчающего коли-<ественный учет , а также экономичности , позволяющей использовать в 4-5 раз меньше питательной среды . чем в остальных зариантах агарового метода.

Ввиду того , что допустимое количество грибов в 1г препарата ¡огласно Госфармакопее XI изд. не должно превышать 100 . т.е. ^значительно . для количественного определения грибов использо-!али метод наиболее вероятных чисел в полужидкой среде с 0.3% 5Г ар-агара

Таблица 4

Количественное определение тест-штаммов грибов различными методами

"ест- Теор.число метод НВЧ метод НВЧ "малый глубинный" сультура КОЕ/мл жид.среда п/ж среда метод

!апсИо1а

11Ысапз 0,5- 10г ЮТС 0.5-102 ¡85-653

40

24

45 24

49 39

крегдИ- 0.5»103 иэ твег ! 0 2 ¡КМ И- 1119

46 110

Приведенные в таблице 4 данные свидетельствуют о корреляции гезультатов , полученных с помощью пробирочного метода НВЧ и ча-

вечного агарового- малогого глубинного . Однако рост в пробирках с полужидким агаром можно было видеть уже на 2 сутки в виде хорошо различимых белых вкраплений дрожжевых грибов в верхней трети среды или белого поверхностного нитевидного мицелия микромицетов.

Сравнительное изучение питательных сред, рржвиякарягея дл.

культивирования грибов.

Большое значение для количественного определения грибовнаря-ду с методами выделения имеют питательные среды , используемые для этой цели.

В работе использовали б модификаций среды Сабуро ,сухой Казо агар .производства фирмы Мерк , Германия (агаризованный палаиновый гидролизат соевых бобов с добавлением казеина'). сухие среды Кандида-агар и агар для дрожжеподобных грибов С производства НПО "Питательные среды", г.Махачкала), сухой Молт экстракт .агар С фирма "Дифко", США).сусло агар и среду Чале"'

Контролем служил агар Сабуро , рекомендуемый для контроля микробной загрязненности НЛС Госфармакопеей СССР XI изд.

Таблица 5

Рост тест-штаммсЕ грибов нч различных питетеньиьх средах

( КТ гр /чашка Петри)

Наименование Т е с т - и т а м м ы

среды A.merer P. '/errucov.-im С.albicans ?.i\ eiut inis

1. Сабуро 4°4 37±2 46+5 121+3 98+2 глюкозы

2.Сабуро 2% 34+1 39+2 116-2 92+3 глюкозы

1 о 3 4 5

¡.Сабуро 4Z 47+4 59-1 122t2 107+5

мальтозы

1. Сабуро 41+4 57^3 115+4 85+4

глюк, -мальт.

5. N2,сухая 38+6 50^4 '120+3 109+1

5. Сабуро ф.

Ди4«о 44±4 54+1' 130+6 101+5

С i/oлякс?~

ракт агар 37^7 45+3 118+1 93+5

3.Суслс

р ^ £ 107J3 104+2

9.Кало

ал1 ар Г3.:3 67*1 112+3 100tl

10.Среда

Чапека 45zß 52+1 ■ -- --

Для сравнительной оценки ростовых свойств питательных сред-польз овапись коэффициентом прорастания КОЕ грибов . который в данном случае представлял собой отношение среднего числа КОЕ на чашках с испытуемой средой к среднему числу КОЕ на чашках с контрольной средой . выраженное в процентах

В результате экспериментов были выявлены различия в росте дрожжевых и плесневых грибов на одной и той же среде . Например, наилучший рост плесневых грибов ( Кпр =198 %) наблюдали на Казо -агаре фирмы Merk , Германия . не имеющим аналогов в нашей стране. В то же время дрожкеподобные патогенные грибы имели Кпр ниже контрольной среды t Q'3%). Аналогичные данные наблюдались на Сусло-ага-

ре С Клр=120 % для плесневых и 88,4%- для дрожжевых ). На среде Чапека рост дрожжевых замедлен и учет практически невозможен.

Сбалансированные результаты , позволяющее эффективно выде лить как плесневые , так и дрожжейые грибы наблюдались на сре) Сабуро с различными источниками углерода

Таблица 6

Коэффициент прорастания дрожжевых и плесневых грибов, выделенных из естественно контаминированных НЛС ( % )

Модификации среды Сабуро

НЛС глюкоза глюкоза мальтоза мальтоза- Sabouram

dZaaap 2%агар 4%агар глюкоза dextrose Контроль агар agar

Финлепсин.т. :

P. verrucosum,. 100 98 101 101 100

A. repens

Пиперазина ,

адипинат 5X 100 103 102 99 102

Candida spp

Т.Сенадексин 100 93 93 .96 98

Pénicillium sp.

Для грибов , выделяемых из НЛС С таблица 6 ) , Кпр колеб лется в пределах 93-103% . Максимальная выявляемость гриб Pénicillium sp. из препарата Сенадексин таблетки зафиксирована контрольной среде . Незначительные колебания коэффициента прорс талия ( не более 3 % ) отмечались для препаратов Финлепсин та летки, раствор Пипераэина адипината 5 % для детей

Принимая во внимание несложный состав и простоту изготовле-ля среды Сабуро , а также выпуск ее в настоящее время в сухом ви-э , целесообразно применение этой питательной среды для коли-s-ственного определения грибов в НЛС .

Сохранение жизнеспособности дрояхевых и грибов в образцах ИЛС и вспомогательных материалах

Одним из актуальных вопросов , стоящих перед производителями армацевтических препаратов , - дальнейшая судьба ГЛС , общее исло микроорганизмов в которых превышает допустимые пределы , собенно если это превышение не очень значительно.

Для решения вопроса о возможности применения контаминирован-ых грибами сырья или препаратов имеет значение сохранение жиз-еспособности грибов в этих объектах .С этой целью изучалась воз-южность переживания дрожжевых и плесневых грибов в НЛС и ¡скусственно контаминированных образцах вспомогательных материа-1ов и некоторых препаратах

Выявлено, что дрожжеподобные грибы быстрее плесневых грибов ■еряли жизнеспособность в твердых лекарственных формах , а также >о вспомогательных материалах

Снижение количества плесневых грибов зависело от природы ;ырья .Микромицеты исчезали в тальке уже через 1 мес. хранения сонтаминированнных образцов. В образцах муки пшеничной и крахмала «артофельного через 4 мес. наблюдения происходило снижение коли-!ества грибов в среднем на порядок .Такие данные находят подтвер-кдение в литературе.

Установлен факт сохранения жизнеспособности дрожжевых и 1лесневых грибов в естественно контаминированных препаратах .

На рис.1 показано количественное содержание грибов-контами--¡антов на протяжении 2-4 лет , т.е. наблюдается сохранение жизнеспособности как дрожжевых рода Candida ( в растворе Пиперазина

рис 1 Сохранение жизн^с^ос^^сс/^^ /

_________j éxjy/^owAetfs/ó/x

12

—ipufa/ аз Лс/леразинс?

24

--b— îpc/ш l/J /¿wâajs/

^ - tfit/iñ/ îsj /flievj^

____J__

48

Spew яра//е/я/я СAfee. J.

»

/s-

!

I I

-ï

-1

-j 1С

t i

CO

m

M

1

1 V

^ à 4 я s ^ îf

адилината 5Z ) , так и плесневых грибов из родов Aspergillus, Pénicillium,Mucor (в порошке Ронидазы и таблетках Холензима . покрытых оболочкой ). Количество грибов в 1 г(мл) исследованных образцов оставалось практически неизменным на протяжении срока нг шего наблюдения , а главное срока годности препарата.

На рисунке 2 показано снижение количественного содержания •грибов в 1г (мл) аэрозольного препарата- Гипозоль и жидкого лекарственного средства с консервантом- Желчи медицинской консервированной . По всей вероятности, лекарственная форма и компонентный состав данных НЛС не способствует сохранению лизнеспособное™ грибов, контаминируюших лекарственные средства.

Результаты свидетельствуют о стабильности количественного содержания грибов при хранении или же о снижении на порядок , характерном для таблетированных , порошкообразных, жидких лекарственных форм.

Особое внимание обращает на себя внимание факт сохранения грибов родов Aspergillus, Pénicillium в препарате из сырья синтетического происхождения Финлепсин таблетки, выпущенным немецко! фирмой в 1983г. и забракованным в ГНИИСКЛС по показателю "Шкро-биологическая чистота". Содержание плесневых грибов в препарате сохранилось практически в исходном количестве до настоящего врем! ни . кроме того образцы НЛС не соответсвуют требованиям норматив-нотехнической документации по показателям "Внешний вид" и "Прочность" . Вероятно. эти изменения на прямую связаны контамйнацие! данного препарата грибами.

ОСНОВНЫЕ вьвопы

1. Разработан метод количественного определения плесневых ■рибов ( микромицетов ) в нестерильных лекарственных средствах, сличающийся высокой эффективностью и экономичностью. Метод предс-'авлен в виде изменений к общей статье Госфармакопее XI изд. "Испы-ание на микробиологическую чистоту" и рекомендован для полу-ения неиболее достоверных , хорошо воспроизводимых результатов ри количественном определении грибов в НЛС.

2. Модифицирован метод наиболее вероятных чисел с использо-анием полужидкой среды Сабуро с антибиотиком . Метод может быть спользован для подсчета грибов родов Mucor, Rhizopus , характери-ующихся слиянием колоний на поверхности агаризованной среды.

3. При определении качественного состава грибов , выделен-ых. из НЛС , установлено , что 69£ штаммов относилось к родам enicillium, Aspergillus, Mucor. Наличие среди грибов - контами-антов потенциально токсигенных видов может представлять опасность ля здоровья человека.

4. Высокий уровень контаминации НЛС грибами ( максимально до

6

О в 1 г (мл) ) был обусловлен в основном сырьем природного происхождения , а также некачественными вспомогательными материалами, связи с этим целесообразно включение в нормативно-техническую окументацию требований , ограничивающих предельно допустимый ровень микробной загрязненности компонентов для производства НЛС Ю 100 KDE/r.

5. Установленный факт сохранения жизнеспособности дрожжевых плесневых грибов в течение длительного времени как в твердых ,

жив жидких НЛС , делает невозможным повторный контроль гото-эй продукции.

6. Коэффициенты прорастания дрожжевых и плесневых грибов на

- IS -

исследуемых питательных средах практически не отличались . В cbs зи с этим для определения общего числа грибов в НЛС предпочти тельно использавоть агар Сабуро с 4% глюкозой , принимая ео bhv мание несложный состав среды, простоту изготовления , а таю налаженный выпуск ее в сухом виде.

СПИСОК

НАУЧНЫХ РАБОТ- ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1.Гунар О.В., Награманова К.А., Прохоров B.C. Методические особенности определения микробиологической чистоты аэрозольн: препаратов// Фармация .- J991.-NS .- с. TL-72.

2.Гунар О.В.. Награманова К.А. Усовершенствование метода количественного определения плесневых грибов в нестерильных Л' карственных средствах./V Тез. докладов : "Резервы совершенствов, ния лекарственного обеспечения населения PCiCP".- Владимир, -1991,- с: 57-58 ^ ; •

' 3. Гунар 'б. В.' Сравнительная характеристика питательных сред, применяющихся для количественного определения грибов , ко таминирующиХ лекарственные средства В сб.: "Проблемы стандартизации и контроля качества лекарственных средств" Том 3 : "Биолог ческие методы стандартизации и контроля лекарственных средств средств медицинского микроанализа".- М. ,1991.- с.25-26

4.Гунар О.'В. .Каграманова К.А. .Кивман Г.Я., Шуб Т.А. Шкроб ная загрязненность лекарственного растительного сырья и подходь ее нормированию : С5. науч. трудов "Проблемы качества лекарстве ных средств".-М.,1991.-с.115-117

5.Гунар О.В.. Каграманова К.А. Сравнительная характеристик методоЕ количественного определения грибов в медицинских препг

- 19 -

х//Хим.-фарм. ж.-1991 -Nil -с 74-75

6.Гунар О.В., Каграманова К.А.Различные модификации среды буро для количественного определения грибов, контаминирующих стерильные лекарственные средства// Хим. -фарм.л.-1992.-N6.-67-68

7. Шуб Т. А., КаграманоЕ'а К. А., КивманГ.Я., Бухарцева Е.В., нар О.В., Николаенко А.Н. Пути контаминации лекарственных едств// Хим.-фарм. ж.-1991.-N12. -с.лГ-ЛГ

Материалы диссертации докладывались на конференции молодых еных и специалистов ГНИИСКЛС МЗ РФ ( Москва, 1990 , 1991 гг.),. также на конференции "Проблемы стандартизации и контроля ка4 ■ства лекарственных средств" ( г.Москва).