Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Механизмы радиопротекторного действия некоторых зоотоксинов на систему кроветворения крыс при однократном и фракционированном гамма-облучении

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Механизмы радиопротекторного действия некоторых зоотоксинов на систему кроветворения крыс при однократном и фракционированном гамма-облучении"

На правах рукописи

ГАМОВА ОЛЬГА НИКОЛАЕВНА

МЕХАНИЗМЫ РАДИОПРОТЕКТОРНОГО ДЕЙСТВИЯ НЕКОТОРЫХ ЗООТОКСИНОВ НА СИСТЕМУ КРОВЕТВОРЕНИЯ КРЫС ПРИ ОДНОКРАТНОМ И ФРАКЦИОНИРОВАННОМ ГАММА-ОБЛУЧЕНИИ

03.00.13 — физиология 03.00.04 - биохимия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Нижний Новгород 2007

2 з МАЙ 2007

003063073

Работа выполнена на кафедре физиологии и биохимии человека и животных Нижегородского государственного университета им НИ Лобачевского

Научные руководители

доктор биологических наук, профессор, заслуженный деятель науки РФ Крылов Василий Николаевич

кандидат биологических наук, доцент Корягин Александр Сергеевич

Официальные оппоненты

доктор биологических наук, профессор Гелашвили Давид Бежанович

доктор биологических наук, профессор Конторщнкова Клавдия Николаевна

Ведущая организация:

Нижегородская государственная медицинская академия

Защита состоится^З 1Л-гХЬсР2007 г в _часов на заседании

диссертационного совета Д 212 166 15 при Нижегородском государственном университете им Н И Лобачевского (603950, Нижний Новгород, пр Гагарина, 23)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ННГУ

Автореферат разослан

_<Я Ъ _2007 г

Ученый секретарь диссертационного совета доцент, к б н

А

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность проблемы

Проблема снижения радиочувствительности биологических объектов является одной из центральных в современной радиобиологии Обострение радиоэкологической ситуации ставит новые задачи в поиске средств защиты от однократного, фракционированного (многократного), а также хронического облучения Эффективность классических радиопротекторов резко снижается в условиях фракционированного облучения, а также при снижении мощности воздействия (Гончаренко, Кудряшов, 1996, Ярмоненко, Вайнсон, 2004) В решении указанной проблемы важная роль принадлежит поиску противолучевых средств природного происхождения, объединенных в группу адаптогенов, которая включает зоо- и фитопрепарты, в том числе и зоотоксины (Васин, 1999, Кудряшов, Гончаренко, 1999)

Зоотоксины представляют собой сложные, многокомпонентные смеси, которые могут одновременно воздействовать на многие регуляторные и исполнительные системы организма и обладают высокой биологической активностью, а также способностью вызывать общие адаптационные ответные реакции стресс, активация, тренировка (Крылов, 1990, Корягин, Ерофеева, 2004) Это позволило предположить наличие у них адаптогенных свойств и способность повышать неспецифическую резистентность при воздействии неблагоприятных факторов различной природы

Костный мозг является критическим органом, состояние которого определяет глубину радиационного поражения и вероятность гибели облученного организма (Материй и др, 2003) Количество выживших кроветворных клеток, степень ингибирования процессов клеточного деления, а также уровень хромосомных аберраций определяют способность кроветворной ткани к регенерации (Ярмоненко, Вайнсон, 2004) Возможное радиозащитное действие ядов животных на процессы пролиферации и генетический материал кроветворных клеток практически не исследовано

В связи с вышесказанным в работе эти показатели были выбраны в качестве критериев оценки противолучевых эффектов зоотоксинов

На основании существующих предпосылок была изучена возможность многократного введения животным малых (в десятки раз ниже летальных) доз ядов пчелы медоносной (Apis melliferä), жабы зеленой (Bufo viridis) и саламандры пятнистой (Salamandra salamandra) для защиты системы кроветворения в условиях однократного и фракционированного у-облучения Кроме того, исследовано состояние красного костного мозга и активность свободнорадикальных процессов в сыворотке крови при курсовом введении зоотоксинов экспериментальным животным в условиях относительной нормы

Цель работы

Изучить механизмы радиозащитного действия курсового введения малых доз ядов пчелы, жабы и саламандры на систему кроветворения лабораторных животных в условиях однократного и фракционированного (многократного) у-облучения в дозах 1,5 и 3,0 Гр Задачи

1 Исследовать влияние курсового введения малых доз ядов пчелы, саламандры и жабы на состояние красного костного мозга (общее количество кроветворных клеток, уровень их пролиферативной активности, процентное содержание аберрантных метафаз) и процессы свободнорадикального окисления (СРО) (определение параметров индуцированной хемилюминесценции) в сыворотке крови крыс в условиях относительной нормы

2 Оценить профилактическое радиозащитное действие ядов пчелы, жабы и саламандры на систему кроветворения лабораторных животных в условиях общего однократного у-облучения в дозах 1,5 и 3,0 Гр по количеству клеток красного костного мозга, митотическому индексу, уровню хромосомных аберраций и концентрации малонового диальдегида (МДА) в крови

4

3 Определить радиопротекторное действие предварительного введения ядов пчелы, жабы и саламандры на красный костный мозг лабораторных животных при фракционированном у-облучении в суммарных дозах 1,5 и 3,0 Гр по количеству кроветворных клеток, их митотической активности, проценту аберрантных клеток и уровню МДА в крови Научная новизна исследования

Впервые показано, что многократное введение ядов пчелы, жабы и саламандры в дозах, вызывающих формирование адаптационной реакции устойчивой активации, сопровождается снижением активности свободнорадикальных процессов в сыворотке крови и ингибированием (за исключением яда жабы) активности процессов пролиферации в кроветворной ткани костного мозга лабораторных животных Установлено, что исследуемые зоотоксины не оказывают повреждающего действия на генетические структуры кроветворных клеток

Впервые выявлено, что многократное профилактическое введение крысам малых доз ядов пчелы, жабы и саламандры сопровождается развитием резистентности, позволяющей успешно защищать красный костный мозг в условиях однократного у-облучения в дозах 1,5 и 3,0 Гр К наиболее значимым среди выявленных механизмов радиозащитного действия исследуемых зоотоксинов можно отнести повышение устойчивости кроветворных клеток, уровня их пролиферативной активности и снижение активности процессов перекисного окисления липидов в крови животных

Впервые обнаружено, что введение зоотоксинов сопровождается развитием длительной радиорезистентности и снижает повреждающее воздействие ионизирующей радиации на систему кроветворения, в частности на генетический материал кроветворных клеток в условиях фракционированного у-облучения

Практическая и теоретическая значимость работы Исследование радиозащитного действия курсового введения малых доз ядов саламандры, пчелы и жабы на пролиферативную активность и

генетический материал кроветворных клеток в условиях однократного и фракционированного у-облучения позволяет расширить представления о механизмах неспецифической радиорезистентности и предполагает возможность создания на основе этих биологически активных веществ препаратов-адаптогенов, повышающих радиорезистентность организма Практическая значимость применения зоотоксинов в малых дозах заключается в том, что они могут рассматриваться как препараты выбора в условиях фракционированного и, возможно, хронического воздействия ионизирующей радиации

Основные положения, выносимые на защиту

1 Адаптационная реакция устойчивой активации, вызванная многократным введением крысам зоотоксинов, сопровождается возникновением состояния радиорезистентности системы кроветворения в условиях общего однократного у-облучения в дозах 1,5 и 3,0 Гр

2 Состояние радиорезистентности, развивающееся в ответ на многократное введение ядов пчелы, жабы и саламандры, является длительным и позволяет успешно защищать систему кроветворения в условиях фракционированного у-облучения в суммарных дозах 1,5 и 3,0 Гр, увеличивая количество выживших кроветворных клеток (за исключением яда саламандры) и повышая их пролиферативную активность у крыс

3 Курсовое введение малых доз зоотоксинов саламандры, пчелы и жабы, приводящее к развитию адаптационной реакции устойчивой активации, снижает активность свободнорадикальных процессов, не оказывает мутагенного действия, ингибирует (за исключением яда жабы) пролиферативную активность кроветворной ткани красного костного мозга у интактных животных

Апробация работы

Результаты работы были обсуждены на III Международной научно-практической конференции «Фундаментальные и прикладные исследования в системе образования» (Тамбов, 2005, 2006), VIII Всероссийском 6

популяционном семинаре «Популяции в пространстве и времени» (Нижний Новгород, 2005), конференции Сибирского государственного медицинского университета «Естествознание и гуманизм» (Томск, 2005), III Европейском конгрессе «European Congress on Social Insects» (Санкт-Петербург, 2005), 10-й международной Пущинской школе-конференции молодых ученых «Биология - наука XXI века» (Пущино, 2006), VIII международном конгрессе «International society for adaptive medicine (ISAM)» (Москва, 2006), XII Всероссийской научно-практической конференции «Апитерапия сегодня» (Рыбное, 2006), XI Нижегородской сессии молодых ученых (Нижний Новгород, 2006)

Структура и объем диссертации

Диссертационная работа в объеме 111 листов состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследований, собственных результатов и их обсуждения, заключения, выводов, приложения и списка литературы Библиографический указатель включает 177 источников литературы (137 отечественных и 40 иностранных) Диссертация иллюстрирована 25 таблицами и 9 рисунками

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Работа была проведена на 216 нелинейных крысах обоего пола массой 200-250 г В опытах использовали яд пчелы медоносной (Apis melhfera L), саламандры пятнистой (Salamandra salamandra L) и жабы зеленой {Bufo viridis Laur) Животным внутрибрюшинно, ежедневно в течение 7 дней вводили яд саламандры в дозе 0,5 мг/кг, яды жабы и пчелы — в дозе 0,1 мг/кг Яд пчелы растворяли в физиологическом растворе, яды жабы и саламандры -в 12 % этаноле, приготовленном на физиологическом растворе Объем вводимой дозы составлял 0,2 мл Животным контрольных групп вводили соответствующий растворитель (для пчелиного яда - физиологический раствор, для ядов жабы и саламандры - 12 % этанол) в том же объеме

Выбор доз, вызывающих развитие адаптационной реакции устойчивой активации, обусловлен соответствующими данными литературы (Корягин, Ерофеева, 2004) Зоотоксины различаются по токсичности на уровне полулетальной дозы (DL5q) Для мышей такие дозы составляют 8-10 мг/кг яда пчелы, 28-30 мт/кг яда саламандры и 58-60 мг/кг жабьего яда (Крылов, 1990)

Было проведено 5 серий экспериментов в опытах in vivo Общее распределение животных по сериям представлено в табл 1

Таблица 1

Общее количество экспериментальных животных и их распределение по

сериям

Серии исследований Доза у-облучения, Гр Количество животных

Исследование влияния курсового введения малых доз зоотоксинов на состояние красного костного мозга и процессы СРО в сыворотке крови — 36

Изучение радиозащитного действия профилактического курсового введения зоотоксинов при однократном общем у-облучении 1,5 42

3,0 42

Изучение радиозащитного действия профилактического курсового введения зоотоксинов при фракционированном у-облучении 0,3х 5 дней (суммарная доза 1,5) 54

0,6х 5 дней (суммарная доза 3) 42

В первой серии экспериментов для исследования влияния малых доз зоотоксинов на состояние красного костного мозга и процессы СРО в крови крыс яды пчелы, саламандры и жабы вводили в исследуемых дозах в течение 7 дней с периодичностью 1 раз в сутки На следующие сутки после окончания инъекций определяли митотический индекс, процентное содержание клеток с хромосомными аберрациями и общее количество клеток костного мозга Используя метод Нг02 и Ре2+-индуцированной хемилюминесценции (БХЛ), оценивали интенсивность процессов СРО и активность антиоксидантных систем в сыворотке крови

Задачей второй и третьей серии экспериментов было исследование радиопротекторных свойств зоотоксинов в условиях однократного общего у-облучения Яды вводили предварительно перед облучением в течение 7 дней с периодичностью 1 раз в сутки На следующие сутки после окончания инъекций животные подвергались однократному общему у-облучению (б0Со) на терапевтической установке «АГАТ-С» на базе Нижегородского городского онкологического диспансера Во второй серии экспериментов доза облучения составляла 1,5 Гр, в третьей - 3,0 Гр Мощность дозы - 1,0 Гр/мин Через сутки после облучения определяли митотический индекс, процентное содержание клеток с хромосомными аберрациями и общее количество клеток костного мозга, а также концентрацию МДА в крови Известно, что у-облучение в дозе 1,5 Гр приводит к развитию лучевой реакции у крыс, а доза однократного облучения 3,0 Гр вызывает костномозговую форму лучевой болезни легкой степени тяжести (Бесядовский и др, 1978) Таким образом, выбранные нами дозы не вызывают значительного опустошения красного костного мозга, что позволяет исследовать состояние кроветворной ткани уже в ранние сроки после воздействия радиации

Четвертая и пятая серии экспериментов были посвящены изучению защитных свойств ядов саламандры, пчелы и жабы при фракционированном у-облучении Зоотоксины в исследуемых дозах вводили крысам

профилактически в течение 7 дней Животных подвергали облучению в течение 5 дней ежедневно в дозе 0,6 Гр в день - четвертая серия и 0,3 Гр -пятая серия экспериментов Мощность дозы - 1 Гр/мин Первому облучению животные подвергались на следующие сутки после введения последней инъекции Через сутки после последнего облучения определяли митотический индекс, процентное содержание клеток с хромосомными аберрациями и общее количество клеток костного мозга, а также концентрацию МДА в крови

Через сутки после окончания воздействий осуществляли забор крови из подъязычной вены и выделяли красный костный мозг из бедренных костей Определение всех показателей проводили по стандартным методикам

1 Подсчет общего количества клеток костного мозга проводили по методу Горизонтова (Горизонтов и др , 1983)

2 Для проведения цитогенетического анализа готовили препараты метафазных хромосом клеток костного мозга крыс (Макгрегор, Варли, 1986)

3 Для определения митотического индекса подсчитывали долю клеток красного костного мозга в стадии метафазы (Методы , 1974)

4 Определение концентрации МДА в крови проводили по стандартной методике (Владимиров, Арчаков, 1972)

5 Оценку интенсивности процессов СРО проводили методом БХЛ на биохемилюминометре БХЛ-06 (Кузьмина, 1983)

Статистическую обработку полученных результатов проводили с помощью пакета программ ВТОЯТАТ и 51аП8Пса V 6 0 Нормальность распределения данных проверяли с использованием критерия Шапиро-Уилка При расчете ^критерия Стьюдента применяли поправку Бонферрони, позволяющую устранить ошибку первого рода, возникающую при сравнении более чем двух выборок данным методом При статистической обработке данных цитогенетических исследований использовали критерий х2 (биквадрат) (Гланц, 1999, Реброва, 2003)

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

1. При исследовании влияния многократного введения малых доз

ядов саламандры, пчелы и жабы на состояние красного костного мозга лабораторных животных в условиях относительной нормы было показано, что яды пчелы и саламандры статистически значимо снижали уровень пролиферативной активности кроветворных клеток по отношению к интактным и контрольным животным (р <0 05) (табл 2)

Таблиг(а 2

Митотический индекс клеток костного мозга крыс после курсового

введения зоотоксинов

Группы животных Митотический индекс, %о

Интактные 23,0 ± 1,0

Контроль для пчелиного яда (физ р-р) 19,0 ± 1,0

Яд пчелы (0,1 мг/кг) 5,5 ± 0,9 * +

Контроль для ядов жабы и саламандры (12 % этанол) 24,0 ± 2,0

Яд жабы (0,1 мг/кг) 27,0 ± 2,0

Яд саламандры (0,5 мг/кг) 14,0 ± 1,5 * +

Примечания статистически значимые отличия * - р <0 05 по отношению к интактным животным, + - р <0 05 по отношению к контролю

Вероятно, компоненты этих зоотоксинов оказывают активирующее действие на гипоталамо-гипофизарную систему, в результате чего увеличивается секреция АКТГ, что приводит к повышению уровня глюкокортикоидов, которые снижают митотическую активность кроветворных клеюк костного мозга

При исследовании влияния малых доз зоотоксинов на активность свободнорадикальных процессов в сыворотке крови методом БХЛ показано, что курсовое введение ядов жабы и саламандры снижало активности СРО, о

чем свидетельствовало уменьшение параметра светосуммы (8) по сравнению с интактными животными (р <0 05) (табл 3)

При введении пчелиного яда наблюдалась тенденция к снижению данного показателя (0 05< р <0 1) Исследуемые яды не оказывали влияния на значение максимальной интенсивности сигнала (Г1ШХ) и антиоксидантный потенциал сыворотки крови ^2) (р >0 05) (табл 3)

ТаблщаЗ

Параметры хемилюминесценции сыворотки крови крыс после курсового введения зоотоксинов

Группы животных Б ^шах

Интактные 92,38 ±5,21 26,59± 3,17 14,30± 1,92

Контроль для пчелиного яда(физ р-р) 92,32 ±1,58 27,72± 1,57 15,87± 1,46

Яд пчелы (ОД мг/кг) 79,05 ±2,70 27,38± 1,89 14,76 ±2,27

Контроль для ядов жабы и саламандры (12 % этанол) 90,75 ±2,36 25,93± 1,50 14,80 ±1,08

Яд жабы (0,1 мг/кг) 75,12± 2,35* + 24,21± 2,17 12,94 ±1,36

Яд саламандры (0,5 мг/кг) 76,76 ±6,65* 20,48 ±1,80 10,74± 1,40

Примечания статистически значимые отличия *— р <0 05 по отношению к интактным животным, + - р <0 05 по отношению к контролю

Малые дозы исследуемых зоотоксинов при многократном введении не

оказывали влияния на общее количество кроветворных клеток и не обладали

мутагенным действием, не увеличивая уровень хромосомных аберраций в

клетках костного мозга крыс (р >0 05)

Таким образом, первая серия экспериментов показала, что курсовое

введение малых дозы ядов саламандры, пчелы и жабы, вызывающих

развитие общей адаптационной реакции устойчивой активации,

сопровождалось снижением активности свободнорадикальных процессов и 12

ингибированием (за исключением яда жабы) пролиферативлой активности кроветворных клеток. Зоотоксины не оказывали мутагенного действия на клетки кроветворной ткани красного костного мозга.

2. При исследовании радиопротекторных свойств малых доз ядов пчелы, жабы и саламандры в условиях однократного у-облучения, у животных группы «контроль на облучение» наблюдалось снижение общего количества клеток костного мозга приблизительно на 45 % при облучении в дозе 1,5 Гр (рис. 1 А) и на 35 % - в дозе 3,0 Гр (рис. 1 Б).

Яд саламандры

□ интактные ■ контроль (облучение) □ контроль ропыт

т

Яд пчелы

Яд жабы

Яд сапам а^ры

□ интактные ■ контроль {облучение) □ контроль □ опыт

Рис. 1, Общее количество кроветворных клеток костного мозга в ] бедренной кости крыс, облученных однократно в дозе 1,5 (А) и 3,0 Гр (Б) после курсового введения зоотоксинов

Примечания: статистически значимые отличия: *- р <0.05 по отношению к интактным животным; * - р <0.05 по отношению к группе контроль (облучеиие);р <0.05 по отношению к контролю.

Все исследуемые зоотоксины приводили к увеличению количества выживших кроветворных в среднем на 40-60 % по сравнению с контролем при облучении в дозе 1,5 Гр (рис 1 А) Профилактическое применение малых доз ядов пчелы, жабы и саламандры перед однократным общим у-облучением в дозе 3,0 Гр также статистически значимо увеличивало выживаемость кроветворных клеток на 20-30 % по сравнению с контрольными группами животных (рис 1 Б)

Однократное облучение крыс в дозах 1,5 и 3,0 Гр сопровождалось угнетением процессов пролиферации в кроветворной ткани красного костного мозга приблизительно в два раза по сравнению с интактными животными (р <0 05) (табл 4)

Таблица 4

Митотический индекс клеток костного мозга крыс, облученных

однократно в дозах 1,5 и 3,0 Гр после курсового введения зоо токсинов

Группы животных Митотический индекс, %с

Облучение в дозе 1,5 Гр Облучение в дозе 3 Гр

Интактные 26,5 ± 2,1 23,7 ± 1,9

Контроль(облучение) 14,2 ± 1,5* 11,8 ± 1,5*

Контроль для пчелиного яда (физ р-р) 17,0 ± 1,7 * 3,5 ± 0,2* #

Яд пчелы (0,1 мг/кг) 20,7+ 1,8 * 8,2 ± 1,1* +

Контроль для ядов жабы и саламандры (12 % этанол) 19,3 ± 1,8 * 10,3 ±0,3*

Яд жабы (0,1 мг/кг) 16,8 ±1,7 7,8 ± 1,4*

Яд саламандры (0,5 мг/кг) 21,3 ± 1,9* 21,3 ± 2,4 # +

Примечания статистически значимые отличия *- р <0 05 по отношению к интактным животным, # - р <0 05 по отношению к группе контроль (облучение), + - р <0 05 по отношению к контролю

Наиболее выраженное защитное действие на делящиеся клетки в условиях однократного у-облучения оказывал яд саламандры, статистически значимо увеличивая митотический индекс по сравнению с контрольными животными при облучении в обеих дозах (р <0 05) Пчелиный яд наиболее эффективно оказывал защитное действие на процессы пролиферации в красном костном мозге при облучении в дозе 1,5 Гр -Яд жабы не влиял на пролиферативную активность кроветворной ткани в условиях однократного у-облучения (р >0 05) Вероятно, это обусловлено снижением митотической активности кроветворных клеток под действием курсового введения ядов пчелы и саламандры (табл 2) Известно, что кратковременное ингибирование митотической активности родонач^льных кроветворных клеток способствует их защите и сохранности и в последствии приводит к увеличению скорости восстановления гемопоэза (Романцев и др, 1980, Вернигорова, Лебедев, 1986)

Как известно, ионизирующая радиация является мощным мутагенным фактором и вызывает разнообразный спектр повреждений в генетическом материале клеток Показано, что однократное облучение оказывало мутагенное действие на кроветворные клетки костного мозга и вызывало увеличение частоты аберрантных клеток в костном мозге приблизительно в 5 раз при облучении в дозе 1,5 Гр и в 10 раз - в дозе 3,0 Гр в контрольных группах по сравнению с интактными животными (р <0 05)

При облучении в дозе 1,5 Гр в группах животных, которым вводили яды пчелы и саламандры, процентное содержание аберрантных метафаз не отличалось от контрольных и интактных животных (р >0 05) При курсовом введении жабьего яда наблюдалась тенденция к снижению уровня хромосомных аберраций в костном мозге по отношению к группе «контроль на облучение» (0 05< р <0 1) При однократном облучении в дозе 3,0 Гр в опытных и контрольных группах животных не было обнаружено статистически значимых отличий по отношению к «контролю на облучение» (р >0 05)

Для оценки активности процессов перскисиого окисления липидов (ПОЛ) использовали определение концентрации МДА, являющегося количественным маркером данного процесса.

Однократное у-облучение в дозе 3,0 Гр увеличивало содержание МДА в крови крыс по сравнению с интактными животными (р <0,05) (рис. 2). Все исследуемые зоотоксины снижали активность процессов ПОЛ, уменьшая концентрацию МДА в крови крыс по отношению к группе «контроль на облучение» (р <0.05).

Яд пчелы Яд жабы Яд саламандры

□ интактные ■ контроль (облучение) в контроль р опыт

Рис, 2, Содержание МДА а крови крыс, облученных однократно в дозе 3,0 Гр после курсового введения зоотоксинов

Примечания: статистически значимые отличия р <0,05 гто отношению к интактным животным; " - р <0.05 по отношению к группе контроль (облучение); + - р <0.05 по отношению к контролю.

При определении концентрации МДА в крови крыс, облученных однократно в дозе 1,5 Гр статистически значимых отличий между опытными и контрольными группами обнаружено не было (р >0,05).

Таким образом, применение малых доз ядов саламандры, пчелы и жабы в условиях однократного у-облученмя в дозах 1,5 и 3,0 Гр снижало выраженность радиационных поражений красного костного мозга. Все исследуемые зоотоксины повышали устойчивость кроветворных клеток к

повреждающему действию радиации, а яды саламандры и пчелы снижали степень торможения митозов Это способствовало увеличению клеточного фонда, который являлся источником последующей регенерации гемопоэза и ускорял нормализацию клеточного состава крови Кроме того, исследуемые зоотоксины снижали активность процессов ПОЛ в крови животных при облучении в дозе 3,0 Гр и повреждающее действие радиации на генетические структуры кроветворных клеток при облучении в дозе 1,5 Гр

Состояние радиорезистентности, вызванное курсовым введением малых доз исследуемых зоотоксинов, в основном обусловлено формированием адаптационной реакции устойчивой активации (Корягин, Ерофеева, 2004), которая сопровождается повышением неспецифической резистентности к действию повреждающих факторов различной природы Это связано с индукцией защитных систем организма антиоксидантной, системы цитохрома Р450, системы белков теплового шока (Меерсон, 1992, Гаркави и др , 1998)

3. Состояние неспецифической резистентности при реакции устойчивой активации может длительно сохраняться (от 1-2 недель до 6 месяцев) и после прекращения воздействия (Гаркави и др, 1990) Это послужило предпосылкой для исследования радиозащитных свойств малых доз зоотоксинов в условиях фракционированного у-облучения

Показано, что под действием фракционированного у-облучения в суммарной дозе 1,5 Гр в группе «контроль на облучение» происходит снижение общего количества клеток костного мозга в среднем на 35 % (рис 3 А), при облучении в суммарной дозе 3,0 Гр на 45 % (рис 3 Б) по сравнению с интактными животными (р <0 05)

Курсовое введение пчелиного яда и жабьего яда оказывало защитный эффект на красный костный мозг в обеих сериях экспериментов, увеличивая количество выживших кроветворных клеток в среднем на 35^0 % (р <0 05) (рис 3 А, Б) Яд саламандры не проявлял радиозащитных свойств в

отношении системы кроветворения, не увеличивая общее количество клеток костного мозга по сравнению с контрольными группами животных (р>0.05).

Яд пчелы

Яд жа&ы

Яд саламандры

□ интактные о контроль(об;тучение} □ контроль □ опыт

Яд пчелы Яд экэбы Яд саламандры

□ иктактные ■ контроль (облучение) и контроль аопыт

Б

Рис. 3 Общее количество клеток костного мозга в I бедренной кости крыс, облученных фракционирование в суммарных дозах 1,5 (А) и 3,0 Гр (Б) после курсового введения зоотоксииов

Примечания: статистически значимые отличия: *- р <0.05 по отношению к интактным животным; * - р <0.05 по отношению к группе контроль (облучение);р <0.05 по отношению к контролю.

Вероятно, отсутствие протекторного действия на кроветворные клетки в условиях длительного ионизирующего облучения радиации при использовании яда саламандры связано с недостаточной мощностью защитных систем, индуцированных введением этого зоотоксина.

Фракционированное у-облучение в суммарной дозе 1,5 Гр не оказывало влияния на митотическую активность клеток костного мозга При облучении в суммарной дозе 3,0 Гр у контрольных животных наблюдалось снижение уровня пролиферации кроветворных клеток в среднем на 30 % по отношению к интактным животным (р <0 05) Яды пчелы, жабы и саламандры статистически значимо увеличивали митотический индекс по сравнению с контрольными группами крыс (р <0 05)

Таким образом, исследуемые зоотоксины, сохраняя на должном уровне процессы пролиферации в кроветворной ткани костного мозга, будут способствовать восстановлению гемопоэза, увеличивая скорость восполнения погибших кроветворных клеток

Цитогенетический анализ клеток костного мозга показал, что фракционированное облучение в суммарной дозе 1,5 Гр увеличивало процент аберрантных метафаз в среднем в 4 раза в группе «контроль на облучение» по сравнению с интактными животными (р <0 05)

При облучении в суммарной дозе 1,5 Гр в опытных и контрольных группах животных не было обнаружено статистически значимых отличий по отношению к интактным животным и к группе «контроль на облучение» (р >0 05) При введении яда пчелы наблюдалась тенденция к снижению содержания аберрантных метафаз в костном мозге по отношению к группе контроль (облучение) (0 05 <р <0 1)

В условиях фракционированного облучения в суммарной дозе 3,0 Гр наблюдалось увеличение частоты хромосомных аберраций приблизительно в 6 раз по сравнению с интактными животными (р <0 05) (табл 5) В группах лабораторных животных, которым вводили яды пчелы, жабы и саламандры наблюдалось снижение уровня хромосомных аберраций по отношению к «контролю на облучение» (р <0 05) (табл 5) Подобный эффект был отмечен и при введении животным растворителей этих зоотоксинов физиологического раствора и 12 % этанола, что свидетельствует о неспецифическом механизме данного явления

Таблгща 5

Частота хромосомных аберраций в клетках костного мозга крыс, облученных фракционировано в суммарной дозе 3 Гр (0,6 Гр х 5 дней) после курсового введения зоотоксинов

Группы животных Общее количество клеток Аберрантные клетки, %

Интактные 253 1,2 ±0,7

Контроль (облучение) 362 6,9 ± 1,3*

Контроль для пчелиного яда (физ Р-Р) 277 1,4 ± 0,7 #

Яд пчелы (0,1 мг/кг) 658 2,1 ±0,8*

Контроль для ядов саламандры и жабы (12 % этанол) 333 1,8 ±0,5*

Яд жабы (0,1 мг/кг) 309 1,0 ±0,6*

Яд саламандры (0,5 мг/кг) 99 1,6 ±0,7*

Примечания статистически значимые отличия *- р <0 05 по отношению к интактным животным, * - р <0 05 по отношению к группе контроль (облучение)

Исследование интенсивности процессов ПОЛ в крови крыс на следующие сутки после окончания фракционированного облучения в суммарной дозе 1,5 Гр и суммарной дозе 3,0 Гр не показало увеличения уровня МДА Предварительное введение крысам ядов жабы и саламандры снижало концентрацию МДА в крови животных при фракционированном облучении в суммарной дозе 3,0 Гр по отношению к интактным и контрольным группам (р <0 05)

На основании полученных результатов можно заключить, что при профилактическом курсовом введении крысам малых доз ядов пчелы, жабы и саламандры развивается состояние радиорезистентности, позволяющее эффективно защищать систему красного костного мозга в условиях однократного у-облучения в дозах 1,5 и 3,0 Гр Состояние радиорезистентности является длительным и позволяет успешно защищать кроветворную ткань костного мозга и генетический материал клеток от воздействия фракционированного у-облучения Радиозащитное действие зоотоксинов обусловлено их способностью повышать устойчивость кроветворных клеток, снижать уровень ингибирования их пролиферативной активности и интенсивность свободнорадикальных процессов

Результаты исследования подтверждают адаптогенные свойства малых доз зоотоксинов и предполагают возможность создания на их основе препаратов, повышающих резистентность организма при воздействии ионизирующей радиации в дозах, вызывающих костномозговую форму лучевой болезни, а также в условиях длительного облучения

ВЫВОДЫ

1 Курсовое введение крысам ядов пчелы (0,1 мг/кг), жабы (0,1 мг/кг) и саламандры (0,5 мг/кг) в условиях относительной нормы снижало активность свободнорадикальных процессов, не оказывало мутагенного действия, ингибировало (за исключением яда жабы) митотическую активность кроветворных клеток лабораторных животных

2 Многократное введение малых доз зоотоксинов оказывало радиозащитный эффект на систему красного костного мозга лабораторных животных в условиях общего однократного у-облучения в дозах 1,5 и 3,0 Гр, о чем свидетельствовало статистически значимое по сравнению с контрольными животными

а) увеличение количества выживших кроветворных клеток красного костного мозга,

б) снижение уровня ингибирования митотической активности кроветворных клеток у животных, которым вводили яды пчелы и саламандры

3 Яды пчелы, жабы и саламандры оказывали радиопротекторное действие в условиях фракционированного у-облучения в суммарных дозах 1,5 и 3,0 Гр, статистически значимо увеличивая, по сравнению с контрольными животными, количество выживших клеток красного костного мозга (за исключением яда саламандры) и уровень их пролиферативной активности

4 Профилактическое курсовое введение малых доз ядов пчелы, жабы и саламандры оказывало защитное действие на генетический материал кроветворных клеток костного мозга в условиях фракционированного облучения, снижая уровень хромосомных аберраций по отношению к группе контроль (облучение)

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1 Корягин А С Продолжительность радиорезистентности системы крови крыс, возникающей при многократном введении малых доз некоторых зоотоксинов /АС Корягин, Е А Ерофеева, О.Н. Гамова, О Ю Ванеева // Фундаментальные и прикладные исследования в системе образования Материалы III Междунар научн-практ конф Тамбов Першина-2005 - С 93-95

2 Корягин А С Повышение устойчивости популяции лабораторных крыс к повреждающему действию фракционного гамма-облучения с помощью многократного введения животных ядов в нетоксических дозах / А С Корягин, Е А Ерофеева, О.Н. Гамова // Популяции в пространстве и времени Сборник материалов VIII Всероссийского популяционного семинара Нижний Новгород -2005 - С 167-169

3 Корягин А С Использование нетоксических доз ядов саламандры и жабы для защиты от фракционного гамма-излучения /АС Корягин, Е А 22

Ерофеева, О.Н. Гамова, В В Логинов, О Ю Ванеева // Естествознание и гуманизм Сборник научных работ Томск Изд-во сибирского мед ун-та -2005 - Т 2 - № 2 - С 8-9

4 Корягин А С Сравнительная оценка противолучевых свойств животных ядов по состоянию системы крови в условиях многократного гамма-облучения /АС Корягин, Е А Ерофеева, В Н Якимов, В В Логинов, О.Н. Гамова //Поволжский экологический журнал -2005 -№2 - С 137— 146 ч

5 Gamova O.N. The use of nontoxic doses of bee venom for protection from fractional gamma-radiation /ON Gamova, A S Korjagin, E A Yerofeeva, О U Vaneeva // Proceedings 3rd European Congress on Social Insects St Petersburg, Russia -2005 - P 140

6 Корягин А С Исследование продолжительности состояния радиорезистентности кроветворной ткани костного мозга крыс, вызываемого действием зоотоксинов /АС Корягин, Е А Ерофеева, О.Н. Гамова, О Ю Ванеева // Вестник Нижегородского университета им НИ Лобачевского Серия биология -2005 -Вып 2(10) - С 145-152

7 Корягин А С Яды жабы зеленой (Bufo viridis) и саламандры пятнистой (Salamandra salamandra) как радиопротекторы длительного действия /АС Корягин, Е А Ерофеева, О.Н. Гамова, А Д Синелыциков, О Ю Ванеева // Актуальные проблемы герпетологии и токсикологии Сб науч тр - Вып 8 -Тольятти - 2005 - С 67-74

8 Гамова О.Н. Оценка антимутагенных свойств саламандры пятнистой Salamandra salamandra при фракционном гамма-облучении /ОН Гамова // Тез докл 10-й Международной Пущинской школы - конференции молодых ученых «Биология - наука XXI века» Пущино —2006 - С 132

9 Korjagin A S Venoms of the bee, salamander and toad as adaptogens of long action to extreme factors (on the example of ionizing radiation) /AS Korjagin, E A Yerofeeva, O.N. Gamova, E V Kuznetsov, V S Suhov //

Proceedings of the VIII World Congress «International society for adaptive medicine (ISAM)» Moscow, Russia -2006 -P 191

10 Корягин А С Сравнительный анализ противолучевых свойств ядов пчелы, саламандры и жабы в условиях однократного гамма-облучения /АС Корягин, Е А Ерофеева, О.Н. Гамова, Е В Кузнецов // Естествознание и гуманизм Сборник научных работ Томск -2006 - Т 3 -№1 -С 60-61

11 Гамова О.Н. Сравнительная оценка радиопротекторного действия некоторых зоотоксинов на систему кроветворения при однократном и фракционном у-облучении / ОН Гамова, ЕВ Кузнецов // Тез докл 11-ой Нижегородской сессии молодых ученых (естественнонаучные дисциплины) Нижний Новгород - 2006 - С 177

12 Корягин А С Экспериментальный и теоретический анализ адаптогенного действия ядов пчелы, саламандры и жабы в условиях фракционированного гамма-облучения /АС Корягин, Е А Ерофеева, О.Н. Гамова, В С Сухов // Вестник Нижегородского университета им Н И Лобачевского Серия биология -2006 -Вып 1(11) - С 166-169

13 Корягин А С Радиозащитные свойства пчелиного яда при многократном действии гамма-излучения в низких дозах /АС Корягин, Е А Ерофеева, О.Н. Гамова, Е В Кузнецов // Материалы XII Всероссийской научн -практ конференции «Апитерапия сегодня» Рыбное НИИ пчеловодства РАСХН -2006 - Сб 12 - С 75-79

Формат 60x84 1/16 Бумага офсетная Печать офсетная Уел печ л 1 Заказ 420 Тираж 100

Типография Нижегородского госуниверситета им Н И Лобачевского Лицензия № 18-0099 603000, Н Новгород, ул Б Покровская, 37

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Гамова, Ольга Николаевна

Введение.

1. Обзор литературы.

1.1 Действие ионизирующей радиации на организм.

1.1.1 Опустошение красного костного мозга.

1.1.2 Влияние облучения на пролиферацию клеток костного мозга.

1.1.3 Мутагенное действие ионизирующего излучения.

1.2 Адаптогены - противолучевые средства природного происхождения

1.3 Химический состав и физиологические основы действия зоотоксинов на организм.

1.3.1 Яд пчелы.

1.3.2 Яд саламандры.

1.3.3 Яд жабы.

1.4 Общие адаптационные реакции организма.

2. Материалы и методы исследований.

3. Результаты и их обсуждение.

3.1 Состояние красного костного мозга и процессов СРО в сыворотке крови после курсового введения зоотоксинов интактным животным.

3.2 Радиозащитное действие зоотоксинов на систему кроветворения при однократном гамма - облучении.

3.3 Противолучевые свойства зоотоксинов в условиях фракционированного гамма - облучения.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Механизмы радиопротекторного действия некоторых зоотоксинов на систему кроветворения крыс при однократном и фракционированном гамма-облучении"

Актуальность проблемы

Проблема снижения радиочувствительности биологических объектов является одной из центральных в современной радиобиологии. Обострение радиоэкологической ситуации ставит новые задачи в поиске средств защиты от однократного, фракционированного (многократного), а также хронического облучения. Эффективность классических радиопротекторов резко снижается в условиях фракционированного облучения, а также при снижении мощности воздействия (Гончаренко, Кудряшов, 1996; Ярмоненко, Вайнсон, 2004). В решении указанной проблемы важная роль принадлежит поиску противолучевых средств природного происхождения, объединенных в группу адаптогенов, которая включает зоо- и фитопрепарты, в том числе и зоо-токсины (Васин, 1999; Кудряшов, Гончаренко, 1999).

Зоотоксины представляют собой сложные, многокомпонентные смеси, которые могут одновременно воздействовать на многие регуляторные и исполнительные системы организма и обладают высокой биологической активностью, а также способностью вызывать общие адаптационные ответные реакции: стресс, активация, тренировка (Крылов, 1990; Корягин, Ерофеева, 2004). Это позволило предположить наличие у них адаптогенных свойств и способность повышать неспецифическую резистентность при воздействии неблагоприятных факторов различной природы.

Костный мозг является критическим органом, состояние которого определяет глубину радиационного поражения и вероятность гибели облученного организма (Материй и др., 2003). Количество выживших кроветворных клеток, степень ингибирования процессов клеточного деления, а также уровень хромосомных аберраций определяют способность кроветворной ткани к регенерации (Ярмоненко, Вайнсон, 2004). Возможное радиозащитное действие ядов животных на процессы пролиферации и генетический материал кроветворных клеток практически не исследовано. В связи с вышесказанным в работе эти показатели были выбраны в качестве критериев оценки противолучевых эффектов зоотоксинов.

На основании существующих предпосылок была изучена возможность многократного введения животным малых (в десятки раз ниже летальных) доз ядов пчелы медоносной {Apis mellifera), жабы зеленой (Bufo viridis) и саламандры пятнистой {Salamandra salamandra) для защиты системы кроветворения в условиях однократного и фракционированного у-облучения. Кроме того, исследовано состояние красного костного мозга и активность свобод-норадикальных процессов в сыворотке крови при курсовом введении зоотоксинов экспериментальным животным в условиях относительной нормы.

Цель работы

Изучить механизмы радиозащитного действия курсового введения малых доз ядов пчелы, жабы и саламандры на систему кроветворения лабораторных животных в условиях однократного и фракционированного (многократного) у-облучения в дозах 1,5 и 3,0 Гр.

Задачи

1. Исследовать влияние курсового введения малых доз ядов пчелы, саламандры и жабы на состояние красного костного мозга (общее количество кроветворных клеток, уровень их пролиферативной активности, процентное содержание аберрантных метафаз) и процессы свободнорадикального окисления (СРО) (определение параметров индуцированной хемилюминесцен-ции) в сыворотке крови крыс в условиях относительной нормы.

2. Оценить профилактическое радиозащитное действие ядов пчелы, жабы и саламандры на систему кроветворения лабораторных животных в условиях общего однократного у-облучения в дозах 1,5 и 3,0 Гр по количеству клеток красного костного мозга, митотическому индексу, уровню хромосомных аберраций и концентрации малонового диальдегида (МДА) в крови.

3. Определить радиопротекторное действие предварительного введения ядов пчелы, жабы и саламандры на красный костный мозг лабораторных животных при фракционированном у-облучении в суммарных дозах 1,5 и 3,0 Гр по количеству кроветворных клеток, их митотической активности, проценту аберрантных клеток и уровню МДА в крови.

Научная новизна исследования

Впервые показано, что многократное введение ядов пчелы, жабы и саламандры в дозах, вызывающих формирование адаптационной реакции устойчивой активации, сопровождается снижением активности свободноради-кальных процессов в сыворотке крови и ингибированием (за исключением яда жабы) активности процессов пролиферации в кроветворной ткани костного мозга лабораторных животных. Установлено, что исследуемые зооток-сины не оказывают повреждающего действия на генетические структуры кроветворных клеток.

Впервые выявлено, что многократное профилактическое введение крысам малых доз ядов пчелы, жабы и саламандры сопровождается развитием резистентности, позволяющей успешно защищать красный костный мозг в условиях однократного у-облучения в дозах 1,5 и 3,0 Гр. К наиболее значимым среди выявленных механизмов радиозащитного действия исследуемых зоотоксинов можно отнести повышение устойчивости кроветворных клеток, уровня их пролиферативной активности и снижение активности процессов перекисного окисления липидов в крови животных.

Впервые обнаружено, что введение зоотоксинов сопровождается развитием длительной радиорезистентности и снижает повреждающее воздействие ионизирующей радиации на систему кроветворения, в частности на генетический материал кроветворных клеток в условиях фракционированного у-облучения.

Практическая и теоретическая значимость работы

Исследование радиозащитного действия курсового введения малых доз ядов саламандры, пчелы и жабы на пролиферативную активность и генетический материал кроветворных клеток в условиях однократного и фракционированного у-облучения позволяет расширить представления о механизмах неспецифической радиорезистентности и предполагает возможность создания на основе этих биологически активных веществ препаратов-адаптогенов, повышающих радиорезистентность организма. Практическая значимость применения зоотоксинов в малых дозах заключается в том, что они могут рассматриваться как препараты выбора в условиях фракционированного и, возможно, хронического воздействия ионизирующей радиации.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Адаптационная реакция устойчивой активации, вызванная многократным введением крысам зоотоксинов, сопровождается возникновением состояния радиорезистентности системы кроветворения в условиях общего однократного у-облучения в дозах 1,5 и 3,0 Гр.

2. Состояние радиорезистентности, развивающееся в ответ на многократное введение ядов пчелы, жабы и саламандры, является длительным и позволяет успешно защищать систему кроветворения в условиях фракционированного у-облучения в суммарных дозах 1,5 и 3,0 Гр, увеличивая количество выживших кроветворных клеток (за исключением яда саламандры) и повышая их пролиферативную активность у крыс.

3. Курсовое введение малых доз зоотоксинов саламандры, пчелы и жабы, приводящее к развитию адаптационной реакции устойчивой активации, снижает активность свободнорадикальных процессов; не оказывает мутагенного действия; ингибирует (за исключением яда жабы) пролиферативную активность кроветворной ткани красного костного мозга у интактных животных.

Апробация работы

Результаты работы были обсуждены на III Международной научно-практической конференции «Фундаментальные и прикладные исследования в системе образования» (Тамбов, 2005, 2006), VIII Всероссийском популяци-онном семинаре «Популяции в пространстве и времени» (Нижний Новгород, 2005), конференции Сибирского государственного медицинского университета «Естествознание и гуманизм» (Томск, 2005), III Европейском конгрессе «European Congress on Social Insects» (Санкт-Петербург, 2005), 10-й международной Пущинской школе-конференции молодых ученых «Биология -наука XXI века» (Пущино, 2006), VIII международном конгрессе «International society for adaptive medicine (ISAM)» (Москва, 2006), XII Всероссийской научно-практической конференции «Апитерапия сегодня» (Рыбное, 2006), XI Нижегородской сессии молодых ученых (Нижний Новгород, 2006).

Структура и объем диссертации

Диссертационная работа в объеме 111 листов состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследований, собственных результатов и их обсуждения, заключения, выводов, приложения и списка литературы. Библиографический указатель включает 177 источников литературы (137 отечественных и 40 иностранных). Диссертация иллюстрирована 25 таблицами и 9 рисунками.

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Гамова, Ольга Николаевна

выводы

1. Курсовое введение крысам ядов пчелы (0,1 мг/кг), жабы (0,1 мг/кг) и саламандры (0,5 мг/кг) в условиях относительной нормы снижало активность свободнорадикальных процессов; не оказывало мутагенного действия; инги-бировало (за исключением яда жабы) митотическую активность кроветворных клеток лабораторных животных.

2. Многократное введение малых доз зоотоксинов оказывало радиозащитный эффект на систему красного костного мозга лабораторных животных в условиях общего однократного у-облучения в дозах 1,5 и 3,0 Гр, о чем свидетельствовало статистически значимое по сравнению с контрольными животными: а) увеличение количества выживших кроветворных клеток красного костного мозга; б) снижение уровня ингибирования митотической активности кроветворных клеток у животных, которым вводили яды пчелы и саламандры.

3. Яды пчелы, жабы и саламандры оказывали радиопротекторное действие в условиях фракционированного у-облучения в суммарных дозах 1,5 и 3,0 Гр, статистически значимо увеличивая, по сравнению с контрольными животными, количество выживших клеток красного костного мозга (за исключением яда саламандры) и уровень их пролиферативной активности.

4. Профилактическое курсовое введение малых доз ядов пчелы, жабы и саламандры оказывало защитное действие на генетический материал клеток костного мозга в условиях фракционированного облучения, снижая уровень хромосомных аберраций по отношению к группе контроль (облучение).

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Таким образом, в результате исследований было установлено, что курсовое введение лабораторным животным малых доз ядов пчелы, жабы и саламандры, вызывающих развитие адаптационной реакции устойчивой активации (Корягин, Ерофеева, 2004), сопровождается снижением активности свободнорадикальных процессов и ингибированием (за исключением яда жабы) пролиферативной активности кроветворных клеток. Установлено, что исследуемые зоотоксины не влияют на общее количество кроветворных клеток костного мозга и уровень хромосомных аберраций в них.

Наши исследования показали, профилактическое курсовое введение крысам малых доз зоотоксинов пчелы, жабы и саламандры повышает резистентность системы кроветворения к действию ионизирующей радиации в дозах вызывающих лучевую реакцию (1,5 Гр) и костномозговую форму лучевой болезни легкой степени тяжести (3,0 Гр). К наиболее значимым среди выявленных механизмов радиозащитного действия исследуемых зоотоксинов можно отнести повышение устойчивости кроветворных клеток и снижение активности процессов перекисного окисления липидов в крови животных. Кроме того, яды пчелы и саламандры повышают уровень пролиферативной активности клеток красного костного мозга.

Было показано, что состояние радиорезистентности, развивающееся в ответ на многократное введение лабораторным животным ядов пчелы, жабы и саламандры, является длительным и позволяет успешно защищать систему кроветворения в условиях общего фракционированного у-облучения в суммарных дозах 1,5 и 3,0 Гр. Зоотоксины пчелы и жабы повышают количество выживших кроветворных клеток и уровень их пролиферативной активности. Яд саламандры снижает степень ингибирования пролиферативной активности клеток красного костного мозга, но не влияет на их устойчивость к воздействию фракционированного облучения. Все исследуемые зоотоксины оказывают защитное действие на генетический материал кроветворных клеток, снижая в них уровень хромосомных аберраций по отношению к группе контроль (облучение).

Результаты проведенных исследований подтверждают адаптогенные свойства малых доз ядов пчелы, жабы и саламандры при их курсовом введении и предполагают возможность создания на основе этих биологически активных веществ, препаратов, повышающих резистентность организма к повреждающему действию ионизирующей радиации в дозах вызывающих костномозговую форму лучевой болезни, а также в условиях длительного облучения.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Гамова, Ольга Николаевна, Нижний Новгород

1. Ажуцкий Д.Г., Ажуцкий Г.Ю., Борисенко С.Н. Взаимодействие ме-литтииа пчелиного яда с альбумином крови человека // Украинский биохимический журнал. - 1995. - Т. 67, №4. - С. 54-62.

2. Алейникова T.JL, Авдеева J1.B., Андрианова J1.E. Биохимия. М.: ГЭТАР - МЕД, 2003. - 784 с.

3. Альферович А.А., Готлиб В.Я., Пелевина И.И. Изменение пролиферативной активности клеток после воздействия облучения в малых дозах // Известия АН. Сер. биологическая. 1995. - № 1. - С. 15-18.

4. Андреев С.Г., Эйдельман Ю.А., Хвостунов И.К., Сальников И.В., Талызина Т.А. Биофизическое моделирование радиационных повреждений генетических структур клетки // Радиац. биология. Радиоэкология. 2005. - Т. 45, № 45 с. 549-560.

5. Артемов Н.М, Образцов И.В., Побережная Т.И., Сергеева Л.И. Холи-нолитические свойства животных ядов // Матер. II Поволж кон. физиол., био-хим., фармакол. Казань, 1961. - С. 39^10.

6. Артемов Н.М. Дезинтеграция и дезинтегрирующие факторы в эволюции // X съезд Всесоюзного физиол. об-ва Ереван, 1964. - Т.2, вып.1.- С. 55.

7. Артемов Н.М. Физиологические основы действия на организм пчелиного яда. Автореф. дисс. д-ра биол. наук Горький, 1969. - 55 с.

8. Байдан А.В., Жолос А.В. Апамин высокоспецифичный и эффективный блокатор некоторых кальцийзависимых и калиевых проводимостей // Нейрофизиология. - 1988. - Т.20, №6. - С. 843-846.

9. Барабой В.А. Стресс: природа, биологическая роль, механизмы, исходы- Киев: Фитосоциоцентр, 2006. 424 с.

10. Барабой В.А. Хемилюминесценция крови в экспериментальной онкологии. В кн.: Хемилюминесценция крови в экспериментальной и клинической онкологии / ред. В.А. Барабой, Е.Е. Чеботарев.- Киев: Наук, думка. 1984.-С. 111-116.

11. Барабой В.А., Орел В.Э. Влияние некоторых биогенных аминов на триболюминесценцию и показатели перекисного окисления в крови собак // Физиол. журн. 1987. - Т.ЗЗ, №4. - С. 108-111.

12. Барсукова Л.П., Котляревская Е.С., Марьяновская Г.Я. К вопросу об энергетическом гомеостазе организма при развитии различных адаптационных реакций // Гомеостатика живых и технических систем. Иркутск, 1987. -С. 49-50.

13. Белоусова О.И., Горизонтов П.Д., Федотова Н.И. Радиация и система крови (к проблеме радиочувствительности в условиях внешнего облучения).- М.: Атомиздат, 1979. 128 с.

14. Бесядовский Р.А., Иванов К.В., Козюра А.К. Справочное руководство для радиобиологов. -М.: Атомиздат, 1978. 128 с.

15. Биохимия человека. Марри Р., Греннер Д., Мейес П., Родуэлл В. В 2-х т. Т.2.-М.:Мир, 1993.-С. 210

16. Бонд В., Флиднер Т., Аршамбо Д. Радиационная гибель млекопитающих. Нарушение кинетики клеточных популяций. М.: Атомиздат, 1971. -320 с.

17. Бочков Н.П. Анализ типов аберрантных клеток необходимый элемент биологической индикации облучения // Медиц. радиология. - 1993. -№2.-С. 32-35.

18. Бочков Н.П. Хромосомы человека и облучение. М.: Атомиздат, 1971.- 168 с.

19. Бурлакова Е.Б., Михайлов В.Ф., Мазурик В.К. Система окислительно-восстановительного гомеостаза при радиационно-индуцированной нестабильности генома // Радиац. биология. Радиоэкология. 2001. - Т. 41, № 5. -С. 489-499.

20. Ванеева О.Ю. Влияние ядов пчелы, жабы и саламандры на систему крови при фракционном гамма-облучении. Автореф. дис. .канд. биол. наук.- Н.Новгород, 2006. 20 с.

21. Васин М.В. Классификация средств профилактики лучевых поражений как формирование концептуального базиса современной радиационной фармакологии // Радиац. биология. Радиоэкология. 1999. - Т. 39, № 2 - 3. -С.212-222.

22. ВахонинаТ. В. Пчелиная аптека. Л.: ЛГУ, 1992. - 190 с.

23. Вернигорова Л.А., Лебедев В.Г. Радиозащитная эффективность некоторых зоотоксинов // Радиобиология. 1986. - Т. 26, № 4. - С. 532-535.

24. Владимиров В.Г., Джаракьян Т.К. Радиозащитные эффекты у животных и человека. -М.: Энергоиздат, 1982. 88 с.

25. Владимиров Ю.А. Свободные радикалы в биологических системах // Соросовский образовательный журн. ISSEP. 2000. - Т.6, № 12. - С. 13-19.

26. Владимиров Ю.А., Арчаков А.И. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. М.: Наука, 1972. - 252 с.

27. Гаркави Л.Х. Адаптационная "реакция активации" и ее роль в механизме противоопухолевого влияния раздражителей гипоталамуса. Автореф. дисс. . док-pa мед. наук. Донецк, 1969. - 30 с.

28. Гаркави Л.Х., Квакина Е.Б. О критериях оценки неспецифической резистентности организма при действии различных биологически активных факторов с позиции теории адаптационных реакций // Миллиметровые волны в биологии и медицине. 1995. - №6. - С. 11-21.

29. Гаркави Л.Х., Квакина Е.Б., Кузьменко Т.С. Антистрессорные реакции и активационная терапия. Реакция активации как путь к здоровью через процессы самоорганизации. М.:"ИМЕДИС", 1998. - 656 с.

30. Гаркави Л.Х., Квакина Е.Б., Уколова М.А. Адаптационные реакции и резистентность организма. Ростов-на-Дону: из-во Ростовского ун-та, 1990. -375 с.

31. Гелашвили Д.Б., Силкин А.А., Сиднее Б.Н. К нейрофизиологической характеристике судорожного действия яда саламандры. // Механизмы действия зоотоксинов. Межвуз. сб. Горький, 1986. - С. 32-37.

32. Гелашвили Д.Б., Силкин А.А., Сиднев Б.Н. Нейрогуморальные механизмы судорожного действия яда саламандры на организм // Механизмы действия зоотоксинов. Межвуз. сб. Горький, 1987. - С. 30-38.

33. Гераськин С.А., Севанькаев А.В. Цитогенетические эффекты малых доз: результаты Н.В. Лучника и современное состояние вопроса // Радиац. биология. Радиоэкология. 1996. - Т. 36, № 6. - С. 860-863.

34. Гланц С. Медико-биологическая статистика. М.: Практика, 1998. -459 с.

35. Голиков П.П. Рецепторные механизмы глюкокортикоидного эффекта. М.: Медицина, 1989. - 288 с.

36. Гончаренко Е.Н., Кудряшов Ю.Б. Гипотеза эндогенного фона радиорезистентности. М.: Изд-во Моск. ун-та, 1980. - 176 с.

37. Гончаренко Е.Н., Кудряшов Ю.Б. Проблема химической защиты от хронического действия ионизирующей радиации // Радиац. биология. Радиоэкология. 1996. - Т. 36, № 4. - С. 573-586.

38. Гончаренко Е.Н., Кудряшов Ю.Б. Противолучевые средства природного происхождения // Успехи соврем, биол. 1991. - Т. 111, № 2. - С. 302316.

39. Гончаренко Е.Н., Кудряшов Ю.Б. Химическая защита от лучевого поражения. М.: Изд-во Моск. ун-та, 1985. - 248 с.

40. Горизонтов П.Д., Белоусова О.И., Федотова М.И. Стресс и система крови. М.: "Медицина", 1983. - 823 с.

41. Груздев Г.П. Проблема поражения кроветворной ткани при острой лучевой патологии. -М.: Медицина, 1968. 140 с.

42. Демченко А.Н., Костаржевская Е.Г. Мелиттин: структура, свойства, взаимодействие с мембраной //Украинский биохимический журнал. 1986. -Т. 58, №5.-С. 74-90.

43. Добротина Н.А., Афонина Т.В., Улитин И.Б. Иммуномодулирующие свойства пчелиного яда // Пчеловодство. 1994. - №6. - С. 8-9.

44. Евстигнеева З.Г., Соловьева Н.А., Сидельникова Л.И. Структура и функции шаперонов и шаперонинов // Прикладная биохимия и микробиология.-2001.-Т. 37, № 1.-С. 5-18.

45. Засухина Г.Д. Нерешенные вопросы систем защиты клеток человека от радиации // Радиац. биология. Радиоэкология. 2006. - Т.46, №4. - С. 389392.

46. Захаров В.И. Жабий яд. Кишинев: Карта молдов., 1960. - 104 с.

47. Зоров Д.Б., Банникова С.Ю., Белоусов В.В., Высоких М.Ю., Зорова Л.Д., Исаев Н.К., Красников Б.Ф., Плотников Е.Ю. Друзья или враги. Активные формы кислорода и азота // Биохимия. 2005. - Т. 70, № 2. - С. 265-272.

48. Ильюхин А.В., Шашков B.C., Бурковская Г.Е., Зубенкова Э.С. Цито-кинетика и морфология кроветворения при хроническом облучении. М.: Энергоиздат, 1982. - 136 с.

49. Квакина Е.Б. Повышение неспецифической противоопухолевой резистентности с помощью бесконтактного раздражения гипоталамуса: Автореф. дис. д-ра биол. наук.-М.: ВОНЦ, 1972.-41 с.

50. Квачева Ю.Е., Власов П.А. Патоморфологическая характеристика раннего некробиоза миелокариоцитов при остром лучевом поражении // Радиац. биология. Радиоэкология. 1997. - Т. 37, № 1.- С. 76-81.

51. Конькова Л.Г., Сергеева Л.Н. Влияние пчелиного яда на каталазную активность эритроцитов // Механизмы действия зоотоксинов. Межвуз. сб. -Горький, 1973.-С. 34-35.

52. Корнева Е.А., Шхинек Э.К. Гормоны и иммунная система. J1.: Наука, 1988. -251 с.

53. Корнева Н.В. Физиологический анализ рефлекторного действия некоторых животных ядов. Автореф. дис. . канд. биол. наук Горький, 1970. -24 с.

54. Корягин А.С., Ерофеева Е.А. Исследование адаптогенных свойств животных ядов к действию повреждающих факторов (на примере ионизирующей радиации) // Поволжский экологический журнал. 2004. - №3. - С. 52-58.

55. Котляревская Е.С. Исследование функционального состояния гипота-ламической области головного мозга при противоопухолевом действии магнитных полей: Автореф. дис. . канд. биол. наук. Ростов-на-Дону, 1974. -24 с.

56. Крылов В.Н. Действие пчелиного яда на коронарное кровообращение //Мех. деист, биол. актив, в-в. Горький, 1974. - Вып. 175. - С. 125-130.

57. Крылов В.Н. Механизмы изменения некоторых функций нормального и альтерированного сердца под влиянием зоотоксинов. Автореф. дис. . док-ра биол. наук. Горький, 1990. - 39 с.

58. Крылов В.Н. Пчелиный яд. Свойства, получение, применение: научно- справочное издание. Н.Новгород: изд-во ННГУ, 1995. - 224 с.

59. Крылов В.Н., Ошевенский JI.B. Сравнительный анализ кардиотропно-го действия некоторых зоотоксинов // Механизмы действия зоотоксинов. Межвуз. сб. Горький, 1984. - С. 3-10.

60. Кудряшов Ю.Б. Основные принципы в радиобиологии // Радиац. биология. Радиоэкология.-2001.-Т. 41,№5.-С. 531-547.

61. Кудряшов Ю.Б. Радиационная биофизика (ионизирующие излучения). М.: Физ.-мат. лит, 2004. - 448 с.

62. Кудряшов Ю.Б. Химическая защита от лучевого поражения // Соросов. журн. ISSEP. 2000. - Т. 6, № 6. - С. 21-26.

63. Кудряшов Ю.Б., Беренфельд Б.С. Основы радиационной биофизики. -М.: изд-во Москов. ун-та, 1982. 304 с.

64. Кудряшов Ю.Б., Гончаренко Е.Н. Современные проблемы противолучевой химической защиты организмов // Радиац. биология. Радиоэкология. 1999.-Т. 39,№2-3.-С. 197-211.

65. Кузьмина Е.И. Перекисное окисление липидов в комплексной оценке гиперлипопротеидемий. Автореф. дис. .канд. биол. наук. М., 1985.- 19 с.

66. Легеза В.И., Владимиров В.Г. Новая классификация профилактических противолучевых средств // Радиац. биология. Радиоэкология. 1998. -Т. 38, №3.-С. 416-425.

67. Ли Д.Е. Действие радиации на живые клетки. М.: Атомиздат, 1963. -287 с.

68. Лобачевский П.Н., Фоминых Е.В. Учет радиационно-индуцированной задержки деления клеток при исследовании индукции хромосомных аберраций // Радиобиология. 1991. - Т. 31, № 1. - С. 59-64.

69. Мазурик В.К. Роль регуляторных сетей ответа клеток на повреждения в формировании радиационных эффектов // Радиац. биология. Радиоэкология. 2005. - Т. 45, № 1.-С. 26^15.

70. Мазурик В.К., Михайлов В.Ф. О некоторых молекулярных механизмах основных радиобиологических последствий действия ионизирующих излучений на организм млекопитающих // Радиац. биология. Радиоэкология. -1999.-Т. 39, № 1.-С. 89-96.

71. Мазурик В.К., Михайлов В.Ф. Радиационно-индуцированная нестабильность генома; феномен, молекулярные механизмы, патогенетическое значение // Радиац. биология. Радиоэкология. 2001. - Т. 41, № 3. - С. 272289.

72. Мазурик В.К., Мороз Б.Б. Проблемы радиобиологии и белок р53 // Радиац. биология. Радиоэкология. 2001. - Т. 41, № 5. - С. 548-572.

73. Макгрегор Г., Варли Дж. Методы работы с хромосомами животных. Пер. с англ. М.: Мир, 1986. - 268 с.

74. Материй Л.Д., Ермакова О.В., Таскаев А.И. Морфофункциональная оценка состояния организма мелких млекопитающих в радиоэкологических исследованиях (на примере полевки экономки). - Сыктывкар, 2003- 164 с,

75. Меерсон Ф.З. Адаптационная медицина: механизмы и защитные эффекты адаптации. -М.: Издание Hypoxia Medical LTD, 1992.-331 с.

76. Меерсон Ф.З. Феномен адаптационной стабилизации структур и защита сердца // Кардиология. 1990. - №3. - С. 3-12.

77. Меньщикова Е.Б., Зенков Н.К., Реутов В.П. Оксид азота и N0-синтазы в организме млекопитающих при различных функциональных состояниях// Биохимия. 2000. - Т. 65, № 4. - С. 485-503.

78. Методы биологии развития / Детлаф Т.А., Бродский В.Я., Гаузе Г.Г. -М.: Наука, 1974.-С. 134.

79. Микоян В.Д., Воеводская Н.В., Кубрина JI.H., Маленкова И.В., Ванин А.Ф. Экзогенное железо и у облучение индуцируют синтез NO-синтетазы в печени мышей // Биохимия. - 1994. - Т. 59, № 5. - С. 732-738.

80. Миронов А.А. Влияние буфотина на устойчивость ЦНС крыс к острой гипобарической гипоксии. Автореф. дисс. . канд. биол. наук-Н.Новгород, 2000. 22 с.

81. Митрофанов Ю.А., Лесникова Л.Н., Восканян А.З., Отраднова В.В. Альтернативные и неальтернативные процессы возникновения аберраций хромосом//Радиобиология. 1991.-Т. 31, №4.-С. 585-592.

82. Мороз Б.Б., Омельчук Н.Н. Нарушение связывания кортикостероидов с белками плазмы при острой лучевой болезни у различных видов экспериментальных животных// Радиобиология. 1979. - Т. 19, № 4. - С. 512 - 515.

83. Мулатова А.К. Морфофункциональная характеристика лимфоидных органов крыс при адаптационных реакциях // Функциональная морфология лимфоузлов и других органов иммунной системы. М.: Медицина, 1983. - С. 120-126.

84. Назаренко С.А., Тимошевский В.А. Сравнительный анализ частоты анеуплоидии в покоящихся и делящихся клетках человека при воздействии вредных внешнесредовых факторов // Генетика. 2005. - Т. 41, № 3. - С. 391-395.

85. Нефедов И.Ю., Нефедова И.Ю., Палыга Г.Ф. Актуальные аспекты проблемы генетических последствий облучения млекопитающих // Радиац. биология. Радиоэкология. 2000. - Т. 40, № 4. - С. 358 - 372.

86. Нугис В.Ю., Дудочкина Н.Е. Закономерности элиминации аберраций хромосом у людей после острого облучения по данным культивирования лимфоцитов периферической крови в отдаленные сроки // Радиац. биология. Радиоэкология. 2006. - Т. 46, № 1. - С. 5-15.

87. Обатуров Г.М. Биофизические модели формирования радиационно-индуцированных хромосомных аберраций // Радиац. биология. Радиоэкология. 1996. - Т.36, № 6. - С. 834-839.

88. Обатуров Г.М., Потетня В.И. Хромосомные аберрации и репродуктивная гибель клеток млекопитающих. Количественные соотношения между этими эффектами // Радиобиология. 1986. - Т. 26, № 4. - С. 465-472.

89. Окада Ш. Радиационная биохимия клетки. М.: Мир, 1974. - 408 с.

90. Омаров Ш.М. Патофизиологические аспекты антикоагуляционного действия пчелиного яда и его компонентов // Механизмы действия зоотоксинов. Межвуз. сб. Горький, 1986. - С. 54-61.

91. Омельчук Н.Н. К механизму снижения связывающей способности кортикостероидсвязывающего глобулина плазмы крови при острой лучевой болезни // Радиобиология. 1987. - Т. 27, № 4. - С. 544-546.

92. Орлов Б. Д., Гелашвили Д. Б., Ибрагимова Л. К. Ядовитые животные и растения СССР. -М: Высш. школа, 1990.-272 с.

93. Орлов Б. Д., Гелашвили Д. В. Зоотоксинология. Ядовитые животные и их яды. М.: Высш. школа, 1985. - 280 с.

94. Орлов Б.Н., Гелашвили Д.Б., Ушаков В.А. Ядовитые позвоночные животные и их яды. Горький: ГГУ, 1982. - 92 с.

95. Орлов Б.Н., Конькова Л.Г. Зоотоксины и радиация // Механизмы действия зоотоксинов. Межвуз. сб. Горький, 1978. - С. 52-69.

96. Орлов Б.Н., Корнева Н.В., Омаров Ш.М., Крылов В.Н. Биологические основы действия яда жабы на организм // Успехи соврем, биологии. 1980. -Т. 80, № 2. - С. 302-315.

97. Орлов Б.Н., Крылов В.Н. Жабий яд. Химический состав, физико-химические свойства // Механизмы действия зоотоксинов. Межвуз. сб. -Горький, 1978.-С. 3-8.

98. Орлов Б.Н., Черепнов В.Л. Электронномикроскопическое исследование действия пчелиного яда на нервную ткань // Междунар. сипозиум по прим. продуктов пчеловодства в мед. и ветеринарии. Бухарест: Апимондия, 1972.-С. 75-77.

99. ЮЗ.Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. М.: Медиа Сфера, 2003.-218 с.

100. Репин М.В., Говорун Р.Д., Лукашова Е., Красавин Е.А., Козубек С. Стабильные и нестабильные хромосомные аберрации в лимфоцитах кровичеловека in vitro после у-облучения // Радиац. билогия. Радиоэкология. -1996.-Т. 36,№6.-С. 848-851.

101. Романова Е.Б., Голубева О.Е. Действие пчелиного яда и мелиттина на антителосинтезирующие клетки селезенки мышей // Механизмы действия зоотоксинов. Межвуз. сб. Горький, 1980. - С. 37-45.

102. Юб.Романцев Е.Ф., Блохина В.Д, Жуланова З.И., Кащенко Н.Н., Филиппович И.В. Биохимические основы действия радиопротекторов. М.: Атом-издат, 1980.- 168 с.

103. Рябченко Н.И. Радиация и ДНК. М.: Атомиздат,1979. - 192 с.

104. Сапронов Н.С. Фармакология гипофизарно-надпочечниковой системы. СПб.: Специальная Литература, 1998. - 336 с.

105. Селье Г. Концепция стресса как мы ее представляем в 1976 году // Новое о гормонах и механизме их действия. Киев: Наукова Думка, 1977. -С. 27-51.

106. Селье Г. На уровне целого организма. М.: Наука, 1972. - 121 с.

107. Ш.Сергеева Л.И. Влияние пчелиного яда на Н- и М-холинорецепторысердца лягушки // Уч. зап. ГГУ. Горький, 1967. - Вып. 82. - С. 119-127.

108. Сергеева Л.И. Холинолитические свойства пчелиного яда по данным электрофизиологических исследований // Биол. науки. 1965. - №3. - С. 4044.

109. ПЗ.Скулачев В.П. Эволюция, митохондрии и кислород // Соросов, журн. ISSEP. 1999. - Т. 5, № 9. - С. 4-10.

110. Солодухо И.Г., Нестерова Г.Н., Бирюкова О.В. Образование агглютининов в сыворотке крови животных, иммунизированных протеем, и влияние на этот процесс пчелиного яда // Мех. действ, биол. актив, в-в Горький: ГГУ, 1970.-Вып. 101.-С. 160-167.

111. Сусков И.И., Кузьмина Н.С. Проблема индуцированной геномной нестабильности в детском организме в условиях длительного действия малых доз радиации // Радиац. биология. Радиоэкология. 2001. - Т. 41, № 5. - С. 606-614.

112. Тимофеев Ресовский Н.В., Иванов В.И., Корогодин В.И. Применение принципа попадания в радиобиологии. - М.: Атомиздат, 1968. - С. 3-228.

113. Тимошин С.С. Биологическая роль реактивного торможения митозов при стрессе // Арх. патологии. 1983. - Т.45, № 4. - С. 83-87.

114. Тинякова О. П., Парин С. Б., Крылов В. Н. Исследование антиноцеп-тивного действия яда саламандры пятнистой Salamandra salamandra // Журн. эволюц. биохим. и физиол. 1999. - № 2. - С. 111-116.

115. Тиунов J1. А., Жербин Е. А., Жердин Б. А. Радиация и яды. М.: Атомиздат, 1977. - 144 с.

116. Филаретов А.А., Т.Т. Подвигина, Л.П. Филаретова Адаптация как функция гипофизарно-адренокортикальной системы. СПб.: Наука, 1994. -131с.

117. Филиппович И.В., Романцев Е.Ф. Влияние ионизирующей радиации, сульфгидрильных соединений и гипоксии на фосфорилирование тимидина в зобной железе и селезенке крыс // Радиобиология. 1968. - Т. 8, № 6. - С. 800-805.

118. Хавинсон В.Х., Баринов В.А., Арутюнян А.В., Малинин В.В. Свобод-норадикальное окисление и старение. СПб.: Наука, 2003. - 327 с.

119. Халиков С.К., Туракулов Я.Х., Рахимов М.М. О радиозащитных свойствах ядов змей средней Азии // Радиобиология. 1975. - Т. 15, № 6. - С. 910-913.

120. Халиков С.К., Туракулов Я.Х., Рахимов М.М., Байзакова Н.Т. Действие радиопротектора ядов среднеазиатских змей и радиации на аденилат-циклазную систему // Радиобиология. - 1977. - Т. 17, № 3. - С. 428-431.

121. Хансон К.П., Комар В.Е. Молекулярные механизмы радиационной гибели клеток. М.: Энергоатомиздат, 1985. - 152 с.

122. Холл Э. Дж. Радиация и жизнь. М.: Медицина, 1989. - 256 с.

123. Хомутов А.Е. Гепарин и зоотоксины // Механизмы действия зоотоксинов. Межвуз. сб. Горький, 1987. - С. 13-30.

124. Хомутов А.Е., Орлов Б.Н. Физиологическая роль гепарина. Горький: Изд-во ГГУ, 1987. - 77 с.

125. Шарова Н.П. Как клетка восстанавливает поврежденную ДНК? // Биохимия. 2005. - Т. 70, № 3. - С. 341-359.

126. Шарпатый В.А. Радиационная модификация сахарного фрагмента в ДНК: образование разрывов, изменение конформаций полимера, передача повреждений на основание // Радиобиология. 1992. - Т. 32, № 2. - С. 180193.

127. Шилова О.П., Парин С.Б. Некоторые механизмы болеутоляющего действия яда пятнистой саламандры // Первая конференция герпетологов Поволжья (тез. док.). Тольятти, 1995. - 68 с.

128. Шкендеров С., Иванов Ц. Пчелиные продукты. София: Земиздат, 1985.-456 с.

129. Шхинек Э.К. Влияние общего рентгеновского облучения на содержание 17-оксикортикостероидов в периферической крови собак // Радиобиология. 1966. - Т. 6, № 1. - С. 46-49.

130. Юрин В.М. Основы ксенобиологии. Минск. ООО «Новое знание», 2002.-267 с.

131. Ярмоненко С.П. Противолучевая защита организма. М.: Атомиздат, 1969.-264с.

132. Ярмоненко С.П., Вайнсон А.А. Радиобиология человека и животных. М.: Высш. шк., 2004. - 549 с.

133. Chen С.С., Lin-Shiau S.Y. Mode of inhibitory action of melittin on K+-ATPase activity of the rat synaptic memrane.// Biochem. Pharmacol. -1985. -Vol.34, №13.-P. 2335-2341.

134. Collins A., Blum M. Boiassay of compounds derived from the honeybee sting // J. Chem. Ecol. 1982. - V. 8, №2. - P. 463-470.

135. HO.Cuppoletti J., Blumenthal K.M., Malinovska D.H. Melittin inhibition of the gastric ET-K*- ATPase and photoaffinity labeling with azidosalicylyl melittin // Arch. Biochem. Biophys. 1989. - Vol.275, №1. - P. 263-270.

136. De Bony I., Dufoureg I., Clin B. Lipid-protein interactions: NMR-study of melittin and its binding to lysophosphatidylcholine //Ibid. 1979. - Vol.552, №3. -P. 531-534.

137. Diaz-Achirica P., Pristo S., Ubach J. et al. Permeabilization of mitochondrial inner membrane by short cecropin-A-melittin hybrid peptides // Eur. J.Biochem. 1994. - Vol. 224, №1. - P. 257-263.

138. Eliasson J. F., Vassali P. Bone marrow physiology and radiobiology // Blood cells. 1988. - №14. - P. 339-354.

139. Gevod V.S., Birdi K.S. Mellittin and the 8-26 fragment. Differences in ionophoric properties as measured by monolayer method // Biophys. J. 1984. -Vol.4, №6.-P. 1079-1083.

140. Gong В., Chen Q., Almasan A. Ionizing radiation stimulates mitochondrial gene expression and activity // Radiat. Res. 1998. - V. 150, № 5. - P. 505-512.

141. Habermann E. Apamin // Pharmacol, and Fher. 1984- V. 25. №2 - P. 255-270.

142. Habermann E. Bee and wasp Venoms // Science. 1972. - V. 177, № 4046.-P. 314-322.

143. Habermann E., Hardt K. A sensitive and specific plate fest for the guantita-tion of phospolipases // Anat. Biochem. 1972. - V. 50. - P. 163-173.

144. Habermehl G. Chemie und Biochemie von Amphbiangifiten // Naturwis-senschaften. -1969a. -№12. -P.615-622.

145. Habermehl G. Salamandanine, a minor alkaloid from Salamandra macu-loza Laur. // Toxicon. 1969b. - V.7. - P. 163-170.

146. Jackson J.F., Hill F.S. Polyploidy in Human Leucocyte Cultures treated with Cysteamine and Irradiation // Nature. 1967. - V. 214, № 5093. - P. 1155 -1156.

147. Kaijita S., Iizuka H. Melittin-induced alteration of epidermam adenilate cyclase responses // Acta. Derm. Venereol. 1987. - Vol. 67, №4. - P. 295-300.

148. Kind L.S., Allaway E. Enhaced IgE and IgG anti-melittin antibody formation induced by heparin-Melittin complexes in mice // Allergy. 1982. - Vol.37, №4.-P. 225-229.

149. Koppenol W.H., Moreno J.J., Pryor W.A. Peroxynitrite: a cloaked oxydant from superoxide and nitric oxide// Chem. Res. Toxicol. 1992. - V. 5. -P. 834— 842.

150. Leach J.K., Van Tuyle G., Lin P.-S. Ionizing radiation-induced, mitochondria-dependent generation of reactive oxygen/nitrogen // Cancer Res. 2001. -V. 61, № 10.-P. 3894-3901.

151. Marnett L.J. Lipid peroxidation DNA damage by malondialdehyde // Mutat. Res. - 1999. - V. 424. - P. 83-95.

152. Marnett L.J. Oxyradicals and DNA damage // Carcinogenesis: Oxford. -2000. V. XXI, № 3. - P. 361-370.

153. Milos M., Scaer J.J., Comte M., Cox J.A. Microcalorimetric investigation of the interactions in the ternary complex calmodulin-calciurn-melittin // J. Biol. Chem. 1987. - Vol. 262, №6. - P. 2746-2749.

154. Mothersill С., О Malley К., Seymour С.В. Relevance of radiation-induced bystander effects for environmental risk assessment // Радиац. биология. Радиоэкология. 2002. - Т. 42, № 6. - С. 585-587.

155. Munro T.R. The Relative Radiosensitivity of the Nucleus and Cytoplasm of Chinese Hamster Fibroblasts // Radiat. Res. 1970. - V. 42, № 3. - P. 451-470.

156. Navaratnam N., Virk S.S., Ward S., Kuhn N.J. Cationic activation of ga-lactosyltranaferase from rat mammary Golgi membranes by polyamines and by basic peptides and proteins // Biochem. J. 1986. - Vol. 239, №2. - P.423-433.

157. Ohki S., Marcus E., Sukumaran D.K., Arnold K. Interaction of melittin with lipid membranes // Biochim. Biophys. Acta. 1994. - Vol. 1194. - P. 223232.

158. Radford I.R. Evidence for a general relationship between the induced level of DNA double strand breakage and cell killing after X-irradiation of Mammalian cells // Int. J. Radiat. Biol. - 1986. - V. 49, № 5. - P. 611-620.

159. Rao N.M. Differential suscetibility of phosphotidylcholine small unilamellar vesicles to phospholipases A2, С and D in the presence of membrane active peptides. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1992. - Vol. 182, № 2. -P. 682688.

160. Rozegurt E., Gelehrter T.D., Legg A., Pettican P. Melittin stimulates Na entery, Na-K pump activity and DNA synthesis in quiescent cultures of mouse cells //Cell. 1981. - Vol.23, №3. - P. 781-788.

161. Scholes G., Simic M. Radiolysis of aqueous solutions of DNA and related substances; reaction of hydrogen atoms // Biochim. et biophys. acta. 1968. - V. 166, №2.-P. 255-258.

162. Spilini R., Brodbury A., Callevaert G., Vernon C. The structure of apamin // Chem. Communs. 1967. - V. 14. - P. 679-680.

163. Steiner R.F., Norris L. The interactin of melittin with troponin C. // Arch. Biochem. Biophys. 1987. - Vol.254, №1. - P. 342-352.

164. Talbot J.C., Lalanne J., Faucon J.F., Dufourcq J. Effect of th^ of association of melittin and phospholipids on their reciprocal binding. // Biochim. Biophys Acta. 1982. - Vol.689, № 1. - P. 106-112.

165. Tosteson M.T., Holmes S.J., Razin M., Tosteson D.C. Melittin Lysis of red cells // J. Membs. Biol. 1985. - Vol.87, №1. - P. 35-44.

166. Tosteson M.T., Tosteson D.C. The sting. Melittin forms channels in lipid bilaers.//Biophys. J. 1981. - Vol.36, №1. -P. 109-116.

167. Voss J., Birmachu W., Hussey D.M., Thomas D.D. Effects of melittin on molecular dynamics and Ca- ATPase activity in sarcoplasmic reticulum membranes: time-resolved optical anisotropy // Biocemistry. 1991. - Vol.30, №30. -P. 7498-7506.