Локализация и состояние тканевых трансмиттерных систем в норме и эксперименте

Козлов, Вадим Авенирович

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Локализация и состояние тканевых трансмиттерных систем в норме и эксперименте
ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Локализация и состояние тканевых трансмиттерных систем в норме и эксперименте"

На правах рукописи

КОЗЛОВ Вадим Авенирович

ЛОКАЛИЗАЦИЯ И СОСТОЯНИЕ ТКАНЕВЫХ ТРАНСМИТТЕРНЫХ СИСТЕМ В НОРМЕ И ЭКСПЕРИМЕНТЕ

Специальность 03.00.13 - физиология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

Москва - 2006

Работа выполнена в ФГОУ ВПО Чувашский государственный университет имени И.Н. Ульянова на кафедре фармакологии медицинского факультета

Научный консультант:

доктор медицинских наук, профессор, Любовцев Вячеслав Борисович

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор

Швалев Вадим Николаевич доктор медицинских наук, профессор, Северин Александр Евгеньевич

доктор биологических наук Лосева Елена Владимировна

Научно-исследовательский институт нормальной физиологии им. П.К. Анохина РАМН

Защита диссертации состоится 18 декабря 2006 года в 15.30 час на заседании диссертационного совета Д 212.154.17 при Московском педагогическом государственном университете по адресу: 129164, Москва, ул. Кибальчича, д.6, корп. 4, биолого-химический факультет, ауд. 205.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Московского педагогического государственного университета по адресу: 119992, Москва, ул. М. Пироговская, д. 1.

Автореферат разослан « ^» ноября 2006 г.

Ученый секретарь

Ведущая организация:

диссертационного совета

Холмогорова Н.В.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

5НТ - серотонин АЦХ - ацетилхолин АХЭ - ацетилхолинэстераза ВН - водная нагрузка ВД - водная депривация Н - гнетамин

ДК - дистальные канальцы

ИП - интактная почка

ИТ — интактный тимус

КА - катехоламины

КП - контрольная почка

мВ- милливольт

МО - медуллярная область

ПГ - петли Генле

ПК - проксимальные канальцы

ПО - парамедуллярная область

С - септа

СК - субкапсулярные клубочки СО - субсептальная область СФ светофильтр ТК - тимус контрольных крыс ТКВ - толща коркового вещества ЭНО - эндокардиальная область ЭПО - эпикардиальная область ЮК - юкстамедуллярные клубочки

Актуальность темы. С точки зрения современной парадигмы, гомеостаз регулируется нейрогуморально. То есть, нервная система полностью контролирует исполнительные органы, функциональный ответ которых реализует обратную отрицательную связь. Поэтому в рамках медиаторной теории не рассматриваются возможные тканевые ауторегуляторные механизмы, которые могли бы осуществляться такими трансмиттерами, как: ацетилхолин, катехоламины, серотонин. В настоящее время доказано наличие экстранейронального синтеза целого ряда трансмиттеров, считающихся исключительной принадлежностью нервной системы: аце-тилхолина (Piróla С J. et al., 1989, 1991), гистамина (Heald J.I., Hollis T.M., 1976) и дофамина (Ball S.G., Lee M.R., 1977; Hafdi Z. et al, 1996; Suzuki H. et al., 1984; Guimaraes J.T. et al., 1997) в почках, ацетилхолина в тимусе (Kawashima К. et al., 1989), дофамина в поджелудочной железе (Mezey Е. et al., 1996), катехоламинов в миокарде (Чифликян М.Д., и соавт., 1988). В последних обзорах, где рассматриваются вопросы классификации ре-гуляторных веществ, амины в целом называют тканевыми гормонами (Кулинский В.И., Колесниченок JI.C., 2005). Г. Берн (1961) предполагал, что автоматизм миокарда контролируется ацетилхолином как локальным гормоном. А.Г. Гинецинский(1964) пришел к убеждению, что: «...B отношении почки имеет место преобладание гормональных факторов над эфферентными нервами. Сами эти нервы ... обладают способностью воздействовать на различные стороны деятельности почки в виде параллельно дублирующего механизма». Таким образом, в настоящее время в тканях обнаружен синтез трансмиттеров, в отношение которых принято мнение, что они являются исключительной принадлежностью нервной системы. Учитывая важность сведений о локальном (in situ) количественном распределении этих трансмиттеров в отдельных органах, мы провели целенаправленный поиск таких литературных данных, однако нам не удалось найти публикаций об изучении аутакоидной функции тканевого пула ацетилхолина, гистамина, катехоламинов и серотонина в их сопоставлении на целостном взрослом организме. В связи с этим не представляется возможным оценить их поведение при наиболее важных изменениях гомеостаза. Мы не обнаружили сведений о локальном количественном распределении этих трансмиттеров, их реакцию на диаметрально противоположные нагрузки, такие как: изменения водного баланса, кислотно-основного состояния, активация симпатики и парасимпатики, влияние на механизмы синтеза трансмиттеров, физиологические механизмы которых достаточно хорошо изучены. В синтезе и деградации серотонина и катехоламинов принимают участие такие микроэлементы, как медь и цинк, биологически являющиеся функциональными антагонистами (Ав-цын А.П. и соавт., 1995; Ноздрюхина JIP., 1997; Prasad A.S., 1996). По-

скольку их влияние на синтез медиаторов является более физиологичным, чем фармакологическая плохо обратимая блокада синтеза с помощью медиаторных адов,, например, резерпина, модель с длительным насыщением организма ионами этих металлов кажется более приемлемой. Обычно изучается дефицит микроэлементов, а их избыток является редкой патологией, связанной, в основном, с промышленной токсикологией. В настоящее время, в связи с бесконтрольным широким распространением пищевых добавок, содержащих иногда очень большие дозы микроэлементов, их избыточное пищевое поступление становится еще и актуальной медицинской проблемой. Клинические критерии необходимости применения тех или иных микроэлементов, вопросы дозирования, сочетаемости, влияния избытка, как на естественное отправление физиологических процессов, так и на их патоморфоз, не изучены. Более того, данная проблема не сформулирована и не существует клинической настороженности. В связи с вышесказанным актуальность исследования экстранейрональных трансмитгерных систем не оставляет сомнений.

Цель исследования: изучить локализацию и ответ экстранейрональных трансмитгерных систем организма на изменения кислотно-щелочного состояния, водного баланса, микроэлементного, симпатического и холинер-гического статуса.

Для решения этих вопросов поставлены следующие задачи:

1. Определить количественные параметры тканевых трансмитгерных систем почки, сердца и тимуса при использовании флуоресцентно-гистохимических методик в условиях обычной жизнедеятельности;

2. Изучил» влияние предшественника ацегилхолина холина на количественные параметры трансмштерныхсистем почки;

3. Изучить реакцию экстранейрональных трансмитгерных систем в реализации функционального ответа почки на водную депривацию;

4. Изучить реакцию экстранейрональных трансмитгерных систем почки, почечной капсулы, миокарда и тимуса на нагрузку водой;

5. Изучить реакцию экстранейрональных трансмитгерных систем в реализации функционального ответа почки, почечной капсулы, миокарда и тимуса при изменении кислотно-основного баланса;

6. Изучшь реакцию экстранейрональных трансмитгерных систем в реализации функционального ответа почки, почечной капсулы и тимуса на длительную (б мес.) нагрузку Си"" и За*"1";

7. Изучить реакцию экстранейрональных трансмитгерных систем в реализации функционального ответа почки и почечной капсулы и тимуса на нагрузку водой в условиях изменения микроэлементного статуса;

8. Изучил, роль экстранейрональных трансмитгерных систем в реализации функционального ответа миокарда на гиперсимпатикотонию.

Научная новизна. Впервые описаны количественные параметры распределения ацетилхолина, катехоламинов, серотонина и гастамина в тканях почки и почечной капсуле, ацетилхолина в миокарде и тимусе при их люминесцентно-гистохимическом обнаружении. Впервые в эксперименте с использованием тонких гистоморфологических методик обосновано участие тканевого пула трансмиттеров в регуляции тканевого гомеосгаза. Впервые разработан и апробирован в данной работе флуоресценгно-гистохи-мический метод обнаружения ацетилхолина в тканях (Козлов В А., Уфукова AJO., Толмачев А.С. Патент № 2159433, приоритет 27 октября 1999 «Способ определения ацетилхолина»), с помощью которого описан почечный, кардиальный и тимусный паттерн ацетилхолина, сопоставленный с пат- 1 тернами катехоламинов, серотонина и гистамина. Впервые изучено влияние водной нагрузки и водной депривации на состояние транемттерных систем почки, почечной капсулы, миокарда и тимуса, в том числе на фоне 6 месячного » поступления с питьевой водой Си~ и Zri"" Показано влияние холина на статус транемттерных систем почки на процесс реализации регуляторных актов по поддержанию сосудистого объема и кислотно-основного баланса в условиях водной, кислотной и бикарбонатной нагрузок. Впервые изучено методами флуоресцентной гистохимии влияние длительной гиперсимпа-тикотонии на трансмиттерный статус миокарда.

Научная и практическая значимость. Подучены данные, расширяющие представления об участии транемттерных систем в процессах почечной регуляции сосудистого объема и кислотно-основного баланса. Внедрен в практику новый метод исследования тканевого паттерна ацетилхолина. Показаны возможные механизмы токсического поражения почек, миокарда и тимуса некоторыми препаратами, широко используемыми в практической медицине. Изучены трансмиттерные эффекты избытка Си4"* и Zn**. Настоящее исследование проводилось по единому наряд-заказу №Б-75 Министерства Образования Российской Федерации в рамках плана науч- <

но-исследовательских работ ФГОУ ВПО «Чувашский государственный университет им. И.Н. Ульянова», кафедра профилактической медицины и по программе «Университеты России», номер государственной регистра- .

ции научного направления 01870032287. Основные положения, выносимые на защиту

1. Выявлен тканевой пул ацетилхолина, катехоламинов, серотонина и гистамина и установлены их локальные количественные параметры в миокарде, тимусе, почках и почечной капсуле.

2. Длительное назначение холина дозазависимо и реципрокно статистически достоверно изменяет количество ацетилхолина и активность хеши-нэстеразы в тканях почки.

3. Водная депривация статистически достоверно увеличивает количество аце-

■шлхолина и уменьшает содержание катехошмшюв, серотонина и гастамина во всех отделах нефрона в течение первых суток лишения вод ы.

4. Под влияшем воднойнагрузки (6% от массы тела) статистически достоверно: увеличивается количество, тканевого ацетилхолина: в миокарде, канальцевом аппарате и капсуле почки, трамедуллярнсй области тимуса; содержание каге-хсшаминсж и серотонина в миокарде, капсуле почки и тимусе; количество гас-тамина в миокарде; снижается количество серотонина и гастамина в тканях почки.

5. Смещение кислотно-щелочного состояния в кислую склону статистически достоверно уменьшает содержание всех исследованных трансмиттеров в тканях почки, а в щелочную - увеличивает.

6. При длительном питьевом потреблении в течение 6 мес. Синили ^^наблюдаются противоположные количественные изменения паттерна тканевых трансмиттеров. В почке Си++уменьшает, а 2п++увеличивает их локальные тканевые концентрации. В тимусе оба микроэлемента увеличивают тканевые концентрации ацегалхолива.

7. Длительное питьевое потребления Си** или Тхи видоизменяет реакцию паттерна тканевых трансмиттеров на водную нагрузку. При этом, если на фоне Си4* тканевая концентрация трансмиттера увеличивается, то на фшегл^количество этого трансмиттера уменьшается.

8. В миокарде при длительной симпаггакопонии наблюдаются фазные изменения количества тканевых концентраций ацешлхолина, гисгамина, катехолами-нов и серотонина. При этом паттерн каждого трансмиттера имеет собственную фазность.

Апробация, работы. Основные положения работы были доложены на 20 конференции по эссенциальным макро- и микроэлементам (Германия, Йена, 2000), IX Всероссийской конференции по физиологии почек (Петербург, 2001), Первом международном симпозиуме «Современные проблемы геохимической экологии болезней» (Чебоксары, 2001), 21 конференции по эссенциальным макро- и микроэлементам (Германия, Йена, 2002), Четвертом международном симпозиуме по редким элементам у людей (Греция, Афины, 2003), Четвертой Российской биогеохимической школе «Геохимическая экология и биогеохимическое изучение таксонов биосферы» (Москва, 2003), Третьей Всероссийской конференции с международным участием «Механизмы функционирования висцеральных систем» (Петербург, 2003), Всероссийском конгрессе «Нефрология и диализ сегодня» (Новосибирск, 2003), Третьей всероссийской школы-конференции с международным участием по физиологии кровообращения (Москва, 2004).

Публикации. Основные материалы работы опубликованы в 17 статьях. Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 253 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, описания

методов исследования, пяти глав результатов исследований, обсуждения результатов исследований, выводов, списка цитируемой литературы и иллюстрированного приложения. Работа иллюстрирована 49 рисунками, 10 фотографиями и 45 таблицами. Указатель литературы содержит 117 отечественных и 210 зарубежных источников.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Эксперименты проведены на 347 белых беспородных крысах обоего пола, массой от 140 до 160 г. и в 24 модельных опытах. Отбор, обсервацию животных и количество проведенных экспериментов осуществляли согласно рекомендациям И.М. Трахтенберга и соавт. (1991). Для изучения ответа экстранейрональных систем на экспериментальные изменения гомеостаза нами были выбраны органы-мишени, в которых обнаружен экстранейрональный синтез интересующих трансмиттеров, и использованы нагрузки, наиболее оптимальные выполняемым им физиологическим функциям. Интенсивность нагрузки была подобрана таким образом, чтобы вызвать максимально возможный функциональный ответ. Методика выявления ацетилхолина. Для выявления АЦХ в тканях нами, на основе метода Феллмана (Fellman J.H., 1996), выявляющего АЦХ в жидкой фазе, создан метод визуализации этого медиатора в твердой фазе (Козлов В Л., Уфукова А.Ю., Толмачев А.С. Патент № 2159433, приоритет 27 октября 1999 «Способ определения ацетилхолина»). Технологию выявления АЦХ в тканях и его флуоресцентную морфологию отработали в модельных экспериментах и на криостаггных срезах разных органов 60 белых лабораторных беспородных крыс. Флюоресценцию АЦХ измеряли на светофильтре (СФ) N 91=534±9 нм насадки ФМЭЛ-1А. Методика выявления катехаламинов и серотонина. КА и 5НТ в тканях выявляли по методу В. Falck et al. (1962) в модификации Е.М. Крохиной (1973). Люминесценцию КА, после выдерживания срезов в темноте в течение 1 часа, исследовали при 484±10 нм, 5НТ - при 525±11 нм. Результаты всех замеров КА и 5НТ исследовались как статистическая величина, кроме того, вычисляли серотониновый индекс: ^(количество 5НТУ(количество КА) (Ястребова С.А., Сергеева В.Е., 2000), который изучался как статистическая величина, для этого тканевое количество КА и 5НТ замеряли в одних и тех же точках.

Методика выявления гиетамина. Люминесцентное обнаружение Н осуществляли по S.A. Cross et al. (1971). Срезы микроскопировали при 507±13 нм. Все замеры осуществляли при следующих параметрах: запирающий СФ ЖС18, А„ОТб>жл:=460 нм, СФ ФС, БС, СЗС, люминесцентный микроскоп «Люмам-4», люминиметрия с помощью микролюминиметра ФМЭЛ-1А (для почек зонд 1,5, для других органов - 0,5), ФЭУ-39, показа-

ния снимали с цифрового вольтметра. Электрические параметры при всех измерениях: входное напряжение 900В, сопротивление усилителя 10б Ом. На каждом препарате плаг-методом измеряли интенсивность люминесценции от 10 участков.

Методика выявления ацетилхолинэстеразы (АХЭ). АХЭ обнаруживали по Karnovsky, Roots (1964) в модификации (Лойда и соавт., 1982). Фотометрию проводили в проходящем свете (синий СФ, =420±9 им), запирающий СФ 436±12нм) по поглощению (зонд 1,5, ФЭУ-39) на люминесцентном микроскопе «Люмам-4». Измерение осуществляли микролюмнниметром ФМЭЛ-1А, ФЭУ-79, показания снимали с цифрового вольтметра, на котором при измерении пустого участка стекла устанавливалось значение 1, принимаемое за 100%. Полученный цифровой.материал пересчитан по формуле D=lg(Io/I). где D- оптическая плотность (безразмерная величина), Io=l,0,1 - показатель вольтметра, данные каждого среза служили для вычисления средней, которая исследовалась как статистическая величина, ошибки средней складывали по правилу сложения ошибок (Агроскин JLC., ПапаянГ.В., 1977). Объем и методы исследования представлены в табл. 1. В экспериментах с нагрузкой объемом крысы получали водную, кислотную или бикарбонатную нагрузку 6% от массы тела для исключения пшцеводно- и гастроренального рефлексов внутрибрюшинно (Берхин Е.Б., 1979). В конце эксперимента всех крыс подвергали эфирной эвтаназии, органы монтировали на охлажденные до -21°С блоки и помещали в криостат. В 20т срезах исследовали содержание КА, 5НТ, Н, АЦХ, активность АХЭ по вышеприведенным методикам. Флюоресценцию изучаемых веществ в почках исследовали в субкапсулярных (СК) и юкстамедуллярных (ЮК) клубочках, проксимальных (ПК) и дистальных (ДК) канальцах и петлях Генле (ПГ). Отдельные участки нефрона дифференцировали согласно рекомендациям А. Хэма, Д. Кормака (1983). В поперечных срезах миокарда: в субэпи-(ЭПО) и субэндокардиальной области (ЭНО) предсердий, правого и левого желудочков отдельно, межпредсердной и межжелудочковой перегородке. Желудочки миокарда, с цепью различения левого и правого, оценивали визуально по толщине при микроскопии под планаром или объективом 10. Поскольку синтез и деградация катехоламинов и серото-нина регулируются медь-зависимыми ферментами (Ноздрюхина ЛР., 1977; Авцын А.П. и соавт. 1991), мы использовали хроническое водное потребление сульфата меди из расчета 50 мг/л Cut* в режиме свободного доступа в течение 24 недель. При суточном потреблении воды у крыс массой 150-180 г около 20 мл (СалейАЛ., 2000) это составляет 1±0,01. мг/сут Cut1"' или б±0,02 мг/кг массы в сутки, то есть, 1/20 ЛД» Cut*" для крыс (Бандман А.Л. и соавт., 1988), либо эквивалентно по-

треблению при содержании в воде Си"" 10 ПДК (1 ПДК Си~- 5 мг/л, СанПиН 2.1.4.559-96).

Таблица I

Объем и методы исследования

Разработка метода флуоресцентного выявления ацетил дал и на. 60 крыс и модельные эксперименты ня биологических подложках - 24

Эксперименты с юлином подюжно в течение 7 дней, 33 крысы. О&ьеет исследования: почка К Доза чолина, мг/кг

100 200 400

ö 9 9 9

Эксперименты с водной депривацией. 20 крыс. Объект исследования, почка 8 1 сутки 2 сутки

б 6

Водная нагрузка 6% от массы тела внутрибрюшинно, 120 крыс Объект 1 час 2 час 3 час 4 час

почка 9 9 9 9 9

капсула почки 6 6 6 б 6

миокард 3 3 3 3 3

тимус 6 6 6 6 6

Нагрузка 4% р-м ИаНСО,. либо 0.1 н р-м НС1 5% от массы тела внутрибрюшинно. по 35 крыс. Объект исследования- почка NaHCO, 7 7 7 7 7

HCl 7 7 7 7 7

Интакгные Получали Zn или Ctr*

Хроническая питьевая нагрузка ионами металлов (50 мг/л) в режиме свободного доступа в течение 24 недель с водной кагрузнэй в финале, 55 крыс. Объекты исследования: почка, почечная капежа, тимус 5 4 4 4 4 4

6 6 6 б 6

Эксперименты с гиперсимпагтиштонией 0,005% р-р мезатона в режиме свободного доступа и ежедневно адреналин 1 мгУкг массы в 18.00 в течение 30 дней декабря, 24 крысы. Объект исследования: миокард Недели 1 2 3 4

юнтроль 12 3 3 3 3

Для оценки специфичности медного нарушения трансмнттерного паттерна был применен сульфат цинка в эквивалентном количестве 50 мг/л ZiV~\ являющийся антагонистом меди (Dick А.Т., 1953; Prasad A.S., 1996). После этого экспериментальную группу делили на подгруппы: I подгруппа - контроль, осталась без воздействия, 2 подгруппа - получила ВН. В предварительно взвешенных на аналитических весах тимусах флюоресценцию трансмиттеров исследовали в гранулярных люминеспирующих клетках (ГЛК) и их ближайшем окружении в субсептальной (СО), парамедуллярной (ПО) и медуллярной (МО) областях тимуса и в толще его коркового вещества (ТКВ). Полученный цифровой материал использован для вычисления индекса:

Ig/s К Люминесценция ГЛК)/(люминесценция ближайшего клеточного окружения ГЛК), отдельно для катехоламинов, серотонина и гистамина. Статистические методы исследования Полученный первичный и вторичный (Is) цифровой материал обработан методами описательной и вариационной статистики с расчетом средней - М и ошибки средней - т. После предварительной проверки на нормальность распределения, достоверность различий экспериментальных выборок оценивали с помощью критерия t Сгьюдеша в среде табличного процессора Excel из пакета прикладных программ MS Office ХР (хвост 2, тип 3, согласно рекомендациям К Карлберга, 1995) и в среде статистического пакета «Статистика 6.0». Кроме того, исследованы корреляционные отношения (по Пирсону). Кривые выживаемости оценивали по логранговому критерию с поправкой Иейгса с помощью статистического пакета «Биостат».

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Влияние холина на содержание АЦХ в почке. При выявлении АЦХ образуется желто-оранжевый флуорофор с максимумом флуоресценции при 1=534±11 нм, зависимой от концентрации, г=0,99 (р<0,001) (Рис. 1).

20 -, мВ - - ■ Концентрация ацеталюлина

-Интенсивность флуоресценции

15 10 5

7,68

2нмоль/л 8 нмоль/л 1бнмоль/л

Рис, 1. Зависимость интенсивности флуоресценции люминофора ацетилхолина от его концентрации в 30% желатине Это совпадает с мнением Л.С. Агроскина и Г.В. Папаяна (1977) о пропорциональности интенсивности флуоресценции и количества флуоресцирующих веществ. Холин подкожно в течение 7 дней в дозах 100 и 400 мг/кг массы крыс увеличивал флуоресценцию АЦХ во всех частях нефрона при дозах 100 и 400 мг/кг массы, а доза 200 мг/кг только в ДК и ПГ (Табл. 2). Отсутствие дозазависимости, видимо, связано с индуцированным холином увеличением активности АХЭ. Доза 200 мг/кг увеличивала ее активность больше, чем 100 (Рис. 2), а 400 мг/кг - только в канальцах и ПГ. Максимальная активность АХЭ обнаруживалась в париетальной и висцеральной части капсулы Шумлянского-Боумена в виде интенсивно-черного узкого ободка, практически полностью поглощающего свет. Феномен ауторегуляции активности АХЭ АЦХ описан ранее (Голиков С.Н. и соавт., 1985).

ск

О Интактная

ЮК □ 100 мг/кг

ПК

П 200 мг/кг

дк

I 400 мг/кг

Рис. 2. Зависимость активности ацетилхолинэстеразы от дозы холина. О - оптическая плотность. - к интактной почке (р<0,01),

: - к ннтактной почке и на фоне дозы 100 мг/кг (р<0,01)

Таблица 2

Влияние холина на количество ацетилхолина в почке, М±ш

Объект ИП Доза холина, мг/кг

100 200 400

СК 4,48±0,6 б,77±0,38*** 4,09±0,33 6,22±0,45*

ЮК 4,94±0,7 6,59±0,29* 3,94±0,37 4,98±0,32

ПК 9,47±1,2 15,3±0,58*** 11,21±0,81 13,62±0,73**

дк 6,91 ±0,7 15.2±0,65*** 11,16±0,8*** 13,91±0,45***

ПГ 3,34±0,4 6,5+0,29*** 6,32±0,6** 5,07 ±0,46*

Примечание, здесь и далее: ИП - интактная почка, СК - субкапсулярные клубочки. ЮК -юкстамеяуллярные клубочки, ПК - проксимальные канальцы, ДК - дисталы >ые канальцы. ПГ- петли Генле. * р<0.05, **р<0,01, ***р<0,001, **** р<0,001

В почках различных млекопитающих обнаруживается градиент активности АХЭ, с максимумом в корковом веществе почки и минимумом в вершинах пирамид, в мозговом веществе активность АХЭ занимает промежуточное положение (Фоменко Г.Ф., Аникин Г Д., 1973). В связи с изложенным, допустимо предположить, что холинергическая регуляция в почках осуществляется через увеличение синтеза АЦХ в клубочках, который увеличивает синтез N0, вовлекающий в регулягорный процесс далеко расположенные от места его выделения клетки мишени. Такая регуляция способна быстро вовлечь в диуретический или антидиуретический ответ почку в целом. Избыточный АЦХ. в основном, разрушается в капсуле клубочка.

Реакция эксгранейроналыюго пула ацетилхолина исследуемых органов иа различные нагрузки

В 1-е супси ВД в 4 раза увеличивала интенсивность флуоресценции АЦХ в клубочках и ПГи в 1,5 раза в канальцах (Рис. 3), затем количество АЦХ восстанавливался до исходного. Водная нагрузка (ВН) увеличивала флуоресценцию АЦХ в ПК и ДК (р<0,05) (Рис. 4). Кислотная нагрузка вызывала олигоа-нурию в течение всего периода наблюдения. Исходно щелочной рН смешанной (артерио-венозной) крови снижался в кислую сторону от 8,06±0,14 до 7,42+0,17 (р<0,05).

□ Интактная почка ■ 1 су тки депр ив ации 2 сутки депривации

39,6**28,6*

Рис. 3. Изменение люминесценции ацетилхолина в структурах нефрона крыс

при водной депривации

В отличие от кислотной нагрузки, 4% раствор бикарбоната увеличивал рН арте-риовенозной крови от 8,26±0,11 до 8,78±0,07 (р<0,05) и защелачивал мочу от 6,46±0,01 до 9Д5±0,03 (р<0,001). Четырехчасовой диурез составлял около 50% введенной нагрузки и был выше, чем у контрольных крыс (1,3±0,1 и 3,4±0,1 соотв. (р<0,05)). При кислотной нагрузке количество АЦХ уменьшалось в 3-й час в ДК (р<0,05) и ПГ (р<0,01) и увеличивалось в 4-й час в ПК (р<0,05). Щелочная нагрузка вызывала противоположные изменения в субкапсулярных клубочках и проксимальных канальцах (р<0,05) (Рис. 5). Поскольку основной пул Н4" секретируегся в проксимальных канальцах (БерхинЕБ, Иванов ЮИ, 1972; БерхинЕБ, 1979), обеспечивая реабсорбцию бикарбоната и эквивалентного количества N»1- (УаМп Н., (Зеппап Е, 1987; Иванова ЯН, 1973), то обнаруженный нами эффект можно расценивать как доказательство, что в проксимальном отделе нефрона медиаторная регуляция секреции Н+, как и в желудке, осуществляется с помощью АЦХ. В капсуле почки ВН увеличивала флуоресценцию АЦХ (р<0,0001) с 1-го часа после введения. К окончанию эксперимента количество АЦХ снижается до уровня, близкого к ингакгаому (Рис.6). Питьевая нагрузка Си44" уменьшала количество АЦХ в ЮК на 30% (р<0,05). На этом фоне ВН уменьшала количество АЦХ на 23% (р<0,03) через 1 час после введенияв СК и на 56 % и 44 % в КЖ через 2 и 3 часа соотв. (р<0,0001 и р<0,01), но в ПК и ПГ содержание трансмиттера к 4-му

часу увеличивалось в 1,3 раза (р<0,05), а в ДК - на 30% к 1-у часу р<0,01). В отличие от крыс, получавших ОГЛ у животных, нагруженных ТтС*. флуоресценция АЦХ увеличивалась в 1,3 раза в ЮК (р<0,05) и уменьшалась в ДК и ПГ (р<0,02) в 1,9 раза и 1,7 раза (р«0,0001) соотв. В ответ на ВН направленность изменений флуоресценции АЦХ была аналогична ответу на фоне Си^. В отличие от нагрузки Си**, в этих условиях реакции были более выраженными, в 341 час наблюдалось значительное увеличение флюоресценции, к 4-му часу ее интенсивность понизилась, но оставалась выше исходной (Рис. 7).

зо.о 25.0 20,0 -15.0 Ю,0 5,0 0,0 -

мВ

—— Су бкапсу лярпые клу бочкн О111 Юкста клу бочки — — — Проксимальные кпналыткт

- — Днсггальньге каыальиы -А-Петли Генле

Интакгная

2 час

3 час

4 час

Рис. 4. Изменение флюоресценции ацетилхолина при водной нагрузке, далее легенда как здесь. Примечание: * р<0,01 по отношению к контролю; л р<0,01 по отношению к аналогичному отделу нефрона

мВ

"Г- ,

1 ч

3 ч ] 4 ч

Магр> зка 0,1 н НС1

Нагрузка 4% бикарбонатом

Рис. 5. Влияние кислотной и бикарбонатной нагрузок на количество ацетилхолина в структурах нефрона

Прием 7п** снижал флуоресценцию АЦХ в капсуле почки (р<0,001). ВН на этом фоне еще больше угнетала его флуоресценцию (р<0,001), максимально в 1-й час. К 4-му часу содержание АЦХ резко возрастало и превышало исходное количество на 14% (р>0,05). Как и потребление прием Си** уменьшал содержание АЦХ в капсуле почки (р<Д0001). Если на фоне 7п'* ВН уменьшала

флуоресценцию АЦХ, то на фоне Си* увеличивала более чем в 4 раза (р<0,0001), к 3-му часу количество восстанавливалось до исходного (Рис. 8). В различных частях тимуса. ВН мотает флуоресценцию АЦХ фазно (Рис. 9).

++ ++

Рис. 7. Влияние длительного потребления Си и Хп и водной нагрузки на их фоне на содержание ацетилхолина в структурах почки

В СО количество АЦХ в 1-й час наблюдения уменьшалось, а ко 2-у и 4-у часам увеличивалось выше исходного уровня. Флуоресценция увеличивалась во 2-й и 4-й часы наблюдения в ТКВ. Количество АЦХ увеличилось в ПО более чем в 2 раза и оставалось высоким в течение всего периода наблюдения, но во 2-й и 4-й часы снижалось. В МО количество АЦХ увеличивалось только в 3-й час наблюдения, а в 4-й час он снижалось. Если без нагрузки Си**, ВН, в основном, увеличивала количество АЦХ в тимусе, то на фоне Си** она уменьшила флуоресценцию АЦХ во всех частях дольют (Рис. 9). Как и Си44", Тп* увеличивал количество АЦХ в структурах дольки тимуса. В СО его содержание выше, чем в интактной ткани в 7 раз (рс0ДЮ01), в ЖВ и ПО в 4 и 3,7 раза соотв. (р<0,001). Количество АЦХ в МО долек выше, чем в интакгаом тимусе на 70% (р<0,001), а в С -в 1,5 раза (р<0,03). После ВН флюоресценция АЦХ во всех отделах тимуса крыс, получавших как и на фоне Си^, уменьшилась. Однако такая реакция наблюдалась только в первый час. Затем в ТКВ и МО флуоресценция

увеличивалась (Рис. 9). Распределение АЦХ в миокарде не равномерно (Фото 1А), в эпикардиальной области (ЭПО) его больше, чем в эндокардиаль-ной (ЭНО) 1,31±0,23 мВ и 0,72±0,08 (р«0,001) слева и 0,56±0,05 и 0,41±0,02 мВ (р<0,01) справа (Рис. 10).

5.0 4,0 3.0 2.« ■ 1,0 ■ 0,0

мВ

1.9

К Си

4 Час

Рис. 8. Влияние длительного потребления Си1"1" и 2хС* и водной нагрузки на их фоне на содержание ацетилхолипа в капсуле почки

1 ч ' 2ч Зч ] 4ч Нагрузка волой

И К | 1 ч I 2ч Зч 4ч 1 I И К | 1 ч | 2ч ' Зч I 4ч Нагрузка водой на фоне Си [Нагрузка волой на фоне 7лI

Рис. 9. Влияние длительного потребления Си и и водной нагрузки на их фоне на содержание ацетилхолина в строме тимуса

Палому люминесценцию исследуемых вешест мы изучали раздельно. ВН сильно увеличила количество АЦХ в перегородке и предсердий (Рис. 10), от 0,17:Ю,01 мВ до 2,79^3,001 (р<0ДЮ1, 2-й час), и желудочков, от 0,5&Ю,0б до 1,6310,01 мВ (р<0,01. 3-й тис). Поскольку пик водного диуреза приходится на 2-3 час, то наблюдаемые изменения трансмиггерного статуса миокарда полностью совпадают с динамикой водного диуреза у крыс (Берхин ЕБ., Ившюв ЮЛ, 1972; Берхин Е.Б., 1979).

Фото 1. Локализация в миокарде флуоресценции А) ацетилхолина и Б) катехоламинов и серотонина 1 - субэпикардиальная область; 2 - субэндокардиальная область. Объектив 40. Гомаль 1,5.

Коктрозк l-ivt

И— ЛяыНЭПО — ( ж Правый ЭНО -

Я •■Лешаэно

Ш «Перегороди

. З-Ишс 4-Ишс

fr Пржвый ЭПО

Рис. 10. Влияние водной нагрузки на содержание ацетилхолина в миокарде. Здесь и далее: А - предсердия, Б - желудочки. ЭПО - субэпикардиальная область,;

ЭНО - субэндокардиальная область.

Далее легенда как здесь

Контроль 1-й час 2-й час 3-й час 4-й час

№ полученных данных следует, что распределял« АЦХ в различных спделих исследуемых органов не равномерно^ его югаявство заахсмерюиэуЕНяегсявзюЕимосшш-типа гегружи. Цхдивсгсшяснье юмэения гаувосгаза- смещение КЩС в кислою иш щеяэтную сторону, водное лишение или нагруаа водой, готре&иие юсв-биэтгичхких ашагшилов, - вызывает грэтивспа'ОкньЕ кменения тканевого сожр-»анияацгшлхотина

Реакция экстранейронального пула гнетамина исследуемых органов на различные нагрузки У крыс наблюдалось различие по уреюво Н между CK и ЮК(р<0,001) при исходно вькхжойлюминзеценции Н (Рис. IIA), сохраняющееся при ВН При низком уровне Н таких различий нет (Рис. 11Б). Но вне зависимости от исходного уровня Н, ВН нагрузка гасит люминесценцию Н в почках. ВД в 1-е сутки резко угне-

тала люминесценцию Н (Рис. 12), что, видимо, является биологически целесообразной реакцией, поскольку, судя по литературным данным, стимуляция почечных Н2-рецепторов увеличивает диурез (Banks R.O. et al., 1979).

8,0 мВ

Hirnucnutf 1 час

3 час

4 час

5.0 - мВ

4,0

Б)

3,0

Рис П. Типы реакций на водцую нагрузку в лависи-мосш от исходного уровня гиламина

А) тменэпк люминеажн-щи гасгамига при его «высоком» исходном уровне, Б) изменение люминещм-ЮТ! пилжяов при его «ню-ком» исход! юм уровне, вое данные сгашспноаси различимы (р<0,0Д креме грокаматьныхкиплшев Во 2-е сутки количество гистамина возвращалось к исходному. Кислотная нагрузка, уменьшала люминесценцию Н во всех отделах нефрона, щелочная — вызывала противоположные изменения (Рис. 13). Вероятно, из этого следует, что в почках, как и в желудке, Н осуществляет контроль транспорта протонов и бикарбоната. Питьевая нагрузка Си" увеличивала люминесценцию Н в СК на 33% (р<0,05), а 7тГ на 42% в СК и ДК и в 2,4 раза в ПК (р<0,05). ВН уменьшала количество Н в клубочках (р<0,05), а в канальцах увеличивала к 3-му часу (р<0,0001). Тогда как на фоне количество Н уменьшалось в 2 раза (р<0,001) (Рис. 14).

4,0

Интакгная 1 час

3 пас

4 час

(! Итжгаая почка ■ 1 сутки депрпвашш 2 сутки депривашш

Рис. 12.Изменение люми-нвшонши гисгамиш в структурах nafjpom крыс при водной депрншшш Приметание:

* р<0,01 по отношении к кошролю;

л р<0,01 по отношении к аналогичному отделу нефрона

0,35 0,3 0,25 -0,2 -0,15 -од -0,05 -

мВ

ИП

4 ч

ИП | 1ч | 2ч | Зч Нагрузка 4% бикарбонатом

1ч | 2ч | Зч | 4ч Нагрузка 0.1н НС1

Рис. 13. Влияние кислотной и бикарбонатной нагрузок на количество гиста-мина в структурах нефрона

В почечной капсуле в ответ на ВН количество Н снижается в 2 раза к концу 3-го часа (р<0,0001), однако к концу 4-го люминесценция близка к исходному уровню (Рис. 15). снижал люминесценцию Н в капсуле почта в 2 раза (р<0,0001), а Си44 увеличивала на 42% (р>0,05). ВН на их фоне уменьшала люминесценцию, но более выражено на фоне Си44 (р<0,0001) (Рис. 16). В ответ на ВН количество Н в разных отделах стромы тимуса менялось по-разному. В ТКВ оно увеличивалось, а в других частях — уменьшалось, исходная люминесценция Н в этом эксперименте была значительно ниже, чем в опытах с нагрузкой металлами (Рис. 17).

1Д -| мВ

1 -

0.8 -

0,6 -0,4 0.2 -О

ж.

И I К | 1 ч | 2ч | 3 ч | 4ч Нагрузка медью

К | 1 ч | 2ч | Зч Нагрузка цинком

Рис. 14. Влияние Си44, 2п++и водной нагрузки на их фоне на количество гис-тамина в структурах нефрона

Си44 уменьшала люминесценцию Н во всех частях тимуса в СО и ТКВ на 30% (р<0,05), а в ПО (р<0,05) и МО (р<0,0001) в 2 раза. Реакция на 2л44 была сильнее: снижение на 140% в СО и на 240% в ТКВ (р<0,0001), а

в ГТО количество увеличивался на 71% (р<0,001). ВЫ на фоне Си~ увеличивала люминесценцию Н в 2-3 и более раз (р<0,01), а на фоне наблюдалось снижение в 1,5-2 раза (р<0,001).

чВ

О 08

ооб

1>(М 0 02 ООО

0,06 5—

0 05

0 06

4 Час

Рис. 15. Влияние водной нагрузки на количество гисгамина в капсуле почки

О 20

О 12 ООН

1)04 ■

(им

мВ

0 08

0,145

4 Час

0.048

4Чяс

Рис. 16. Влияние длительного потребления Си"" и 7п** и водной нагрузки на их фоне на содержание гисгамина в капсуле почки

Рис. 17. Влияние длительного потребления Си"" и гп<~|" и водной нагрузки на их фоне на содержание гистамина в строме тимуса

В ГЛК количество Н во всех экспериментах был несколько выше, чем в их ближайшем клеточном окружении, но менялся аутентично (Рис. 18). ВН увеличила люминесценцию Н в перегородке предсердий ог 0,17±0,02 до

0.4 ■ 03 • 0.2 0,1

мВ

- -О - СО —е—ткв А ПО —О -МО

Я" » л * л

0,6 0,4 0,2 0

мВ

- -О - СО

о ткв

А ПО

И I 1ч | 2ч I Зч ] 4ч | Нагрузка водой

И | К | 1ч | 2ч | Зч | 4ч | Нагрузка водой на фоне Си

И | К I 1 ч | 2ч | Зч | 4ч Нагруиса водой на фоне Та

Рис. 18. Влияние длительного потребления Си"" и 2л*' и водной нагрузки на их фоне на содержание гастамина в гранулярных люминеещрующих клетках тимуса

0,26+0,001 мВ (р<0,01). В желудочках уровни Н увеличились на 20-60% справа во 2-й час, а слева на 30% - 4-му часу (р<0,01) (Рис. 19). Как можно видеть на Рис. 19А), в интактных предсердиях количество Н не различается в зависимости от топографии замера. Гиперсимпатикотония снижала люминесценцию Н в 5 раз, к концу 2-й недели количество восстановилось (р<0,0001). Затем произошло увеличение в 1,5 ¡»за по сравнению с контролем (р<0,0001). Появились различия между ЭПО и ЭНО (р<0,05). К концу эксперимента количество Н снизилось до исходного уровня (Рис. 20А). В желудочках люминесценция Н увеличивалась только к концу 3-й недели (р<0,0001), при этом появлялась дифференциация между правым и левым желудочком и ЭПО и ЭНО (Рис. 20Б).

0,4 0,3 0,2 0,1 0,0

Контроль 1-й час 2-й чао 3-й час 4-й час

0,6 0,5 -0,4 -0,3 -0,2 -

Рис. 19. Влияние водной ваг о, 1 -грузки на содержание гисга- о,о минав миокарде

Контроль 1-й час 2-й час 3-й час 4-й час

Котроль 1 2 3 4 неделя

од-па - uB Б)

1)7

06 0 124 0 081

05 - 0<»3 0 081 0 017

04 - 0 082 0 064 0016

0 i - 00&6 0 005 0010

02 0 1 -, OMS 0107 0010

0 008

00 l

»687 D617 0 54«

g 0 357 1

Контроль

4 неделя

Рис. 20. Влияние пшеркате-холаминемии на количество гисгамина в А) предсердиях и Б) желудочках

Из полученных данных следует, что распределение гисгамина в изучаемых органах, как и ацегилхолина, не равномерно. Направленность изменений количества гисгамина в ответ на примененные нагрузки, как правило, совпадет с направленностью изменений содержания ацегилхолина.

Реакция экстранейронального пула катехоламинов и серотонина

на различные нагрузки Поскольку в наших экспериментах уровни КА и 5НТ, как правило, претерпевали содружественные изменения, мы их рассматриваем вместе. ВД уменьшала люминесценцию КА и 5НТ во всех отделах нефрона, максимально в 1-е суши депривации (Рис. 21). Кроме снижения люминесценции, зафиксировано различие между количеством КА в СК и ЮК, а также в ПК и ДК ингакг-ной почки. Люминесценция в медуллярной области в 2 раза ниже, чем в суб-капсулярной. В 1-е сутки эти различия нивелировались, а ко 2-м в канальцах восстанавливались. Флуоресценция в ПГ количественно сопоставима с флуоресценцией ЮК. Как в интакгаом органе, так н при ВД, вне зависимости от се длительности, максимальная люминесценция КА обнаруживается в канальцах. Люминесценция 5НТ сильнее выражена в канальцах, чем в клубочках и ПГ (Рис. 21). К концу 2-х суток интенсивность люминесценции всех изучаемых трансмиттеров стремилась к интактному уровню. Обнаружена сильная и средняя отрицательная достоверная корреляция между интенсивностью флюоресценции АЦХ и других медиаторов

(г=-0,74-0,99, р<0,01). Уровни КА, 5НТ и Н между собой коррелируют положительно (г=0,81-0,99, р<0,01). Видимо это означает, что для реализации диуреза при нагрузке объемом необходимо определенное количество КА в тканях почки, увеличение АЦХ и 5НТ и снижение Н.

О Лнтактная почка ■ I сутки дспрнвации р 2 сутки дсприваиии

=>\

Рис. 21. Изменение люминесценции катехоламинов и серогонина в структурах нефрона крыс при водной депривации

П Интактнад почка ■ 1 сутки леприватш И 2 сутки депривации

Г&т

Рис. 22. Типы реакций на водную нагрузку в зависимости от исходного уровня катехоламинов А) уменьшение люминесценции при высоком исходном уровне катехоламинов,

Б) увеличение люминесценции при низком исходном уровне катехоламинов, все исходные данные статистически различимы (р<0,01).

Иетаюнм

1 час

2 час

3 час

4 час

Ивтактная

1 час

3 час

4 час

А)

почках (Ilagege J., Richet G., 1985). Люминесценция 5HT уменьшилась в CK в 3 раза (р<0,001) (Рис. 29). На фоне приема Zn^B ПК произошло выраженное уменьшение КА в 3,7 раза (р<0,0001), щелочная - меняла люминесценцию КА противоположно, она увеличивалась в 2 раза (р<0,001), как и люминесценция 5НТ в канальцах и клубочках (р<0,001).

Рис. 25. Влияние кислотной и бикарбонатной нагрузок на количество кагехо-ламиновв структурах нефрона

Рис. 26. Влияние кислотной и бикарбонатной нагрузок на количество серото-нина в структурах нефрона

Потребление Си44" снижало количество КА в СК и ПК в 3,75 и 5,6 раза соотв. (р<0,001) (Рис. 28), что совпадает с данными о топографии синтеза дофамина в почках (Hagege 3., Шс1гег 1985). Люминесценция 5НТ уменьшилась в СК в 3 раза (р<0,001) (Рис. 29). На фоне приема Тл^ в ПК произошло выраженное уменьшение КА в 3,7 раза (р<0,0001), по сравнению с контролем. Люминесценция 5НТ уменьшалась в 2 раза в ДК (р<0,0001). На фоне Си^реакция КА на ВН была асинхронной. Увеличение люминесценции КА в 2,5 раза наблюдалось в СК (р<й,005) ко 2 часу после

введения ВН. В ЮК их количество снижалось в 1,6 раза к 1 часу ВН (ркЦООШ) и увеличивалось на 75% к 3-му часу (р<0,05). В ПК и ПГ ВН уменьшала интенсивность люминесценции в 1,4 и 1,6 раза, соига, (р<0,05) ко 2 час. Нэк 1-у и 4-у часам количество эшх веществ в ПГ увеличивалось в 1,6 раза (р<0,01). В ДК к 4 часу наблюдения количество КА превысило контрольный уровень на 48% (р<0,05). У животных, получавших Тл"', наблюдалось выраженное уменьшение КА в 3,7 раза (рс0,0001), по сравнению с контролем, наблюдалось в ПК Люминесценция 5НТ уменьшалась в 2 раза в ДК (р<0,0001) (Рис. 28 и 29).

0.020 ! vB

КА 0.015

4 Час

Рис. 27. Влияние водной на количество кшихоламинов и серотонина в капсуле почки

4 Час

В почечной капсуле в ответ на длительный прием Zn" количество КА увеличивалось в 3,5, а 5НТ в 4 раза (р<0,0001). ВН ка этом фоне рсжо в течение всего эксперимента угнешла как люминесценцию КА, так и 5 HT (р<0,0001 ) (Рис. 30), между 5НТ и КА 1^0,99 (р<0,01). Длительное потребление Си" не меняло количество КА в капсуле почки, а ВН на этом фоне меняла люминесценцию КА и 5НТ фазно: снижала в 2 раза к концу 2-го часа (р<0,()001), и увеличивала в 2,5 раза к концу 3-го (рх0,001). Но, в отличие от КА, содержание 5НТ под влиянием потребления Си"" увеличилось (р<0,05) (Рис. 31), между 5HT и КА г=0,92. Ls во всех случаях метается достоверно. Однако, если наВН без предварительного потребления металлов прирост только ! 1% (рк0,05), то на фоне Си увеличение Is составляет 94% (р<0,01 ). На фоне Zn Ls менялся только в 1-й час эксперимента на 54% (р<0,01), а затем восстанавливался. Как можно видеть на Рис. 32, динамика изменения ls отличается от динамики образующих его аминов, это связано с тем, что люминесценция 5HT меняется больше, чем КА.

uuz -,

0,01

I-

1,2 -1

мВ

0,8 0,6 0,4 -0,2 -0

I ir.Tr-*

•Ь

-I

- -а -

И I К | 1 ч | 2ч | 3 ч | 4 ч Нагрузка медью

а.

К I 1ч|2ч|3ч|4ч Нагрузка цинком

Рис. 28. Влияние Си*4", Хп^и водной нагрузки на их фоне на количество кше-холаминовв структурах нефрона

мв

2.5

1,5

0,5 -О

1ч | 2ч | Зч Нагрузка медью

4ч

К I 1ч I 2ч I Зч Нздрузга цинком

4ч

Рис. 29. Влияние Си""", и водной нагрузки на их фоне на количество серо-тонина в структурах нефрона

Длительное потребление Си4* не меняло количество КА в капсуле почки, аВН на этом фоне меняла люминесценцию КА и 5НГ фазно: снижала в 2 раза к концу 2-го часа (р<0,0001), и увеличивала в 2,5 раза к концу 3-го (р<0,001). В отличие от КА, содержание 5НТ под влиянием потребления Си4"* увеличилось (р<0,05) (Рис. 31), между 5НТ и КА г=0,92. Ь во всех случаях меняется достоверно. Однако, если на ВН без предварительного потребления металлов прирост только 11% (р<0,05), то на фоне Си увеличение Ь составляет 94% (р<0,01). На фоне 2п Ь менялся только в 1-й час эксперимента на 54% (р<0,01), а затем восстанавливался. Как можно видеть на Рис. 32, динамика изменения Ь отличается от динамики образующих его аминов, это связано с тем, что люминесценция 5НГ меняется больше, чем КА.

0,017

4Час

Час

Рис 30 Влияние длительного приема 7л" и полной нагрузки на фоне приема цинка на количество кате-холаминов и серотонина в капсуле почки

И КСи 1

0.037

3 4 Час

КСи 1 2 3

Час

Рис. 31. Влияние длительного приема Си"" и водной нагрузки на фоне приема меди на количество катехоламинов и серотонина в капсуле почки

В строме тимуса в ответ на ВН количество КА сильно в 3-9 раз (р<0,0001) увеличивалось в 1-й час эксперимента, а затем снижалось, достигая исходного уровня, и возрастало к окончанию эксперимента. Содержание 5НТ также увеличивалось в 1-й час на 300-500% Ггк0.0001), а затем возвращалось до

уровня, сравнимого с исходным (Рис. 33 и 34). Хроническое потребление Си" не вызвало изменений люминесценции КА, тогда как количество 5НТ в ТКВ, ПО и МО увеличилось в 1,5-2 раза (р<0,001). В ответ на ВН как на фоне приема Си*1", так и на фоне 2п" наблюдалось медленное нарастание люминесценции КА к концу 4 часа. Происходило аналогичное увеличение люминесценции 5НТ, но более выраженное, чем на воде с максимумом в 3-й час (Рис. 35 и 36). Реакция на фоне 2п"была интенсивнее, чем на фоне Си". Люминесценция КА и 5НГ в ГЛК тимуса менялась синхронно изменениям в их ближайшем окружении (Рис. 35 и 36).

6,0 -5,0 4,0 3,02,0 1,0

Рис. 32. Влияние длительного приема Си" и водной нагрузки на фоне 0,0 приема мели на количество Ь в капсуле почки

Контроль

1 час

2 час

внгп

3 час

4 час •ВНСи

0.1 0.09 0,08 0.07 0,06 0,03 0.04 0,03 0.02 0.01 О

мВ _ - -О- - СО

о ТКВ

* -*—по

А -О -МО

ШЛ т Я. -

I г^ •

и 11 ч|:ач | зч | 4ч | И | К | 1ч ] 2ч ' Зч | 4ч | И | К | 1 ч | 2ч | Зч | 4ч

Нагрузка водой Нагрузка водой на фоне Си Нагрузка водой на фоне

Рис..33. Влияние длительного потребления Си" и 7л* и водной нагрузки на их фоне на содержание катехоламинов в строме тимуса

В эксперименте на миокарде ВН вызвала ожидаемые изменения: в 1-й час снизилось содержание КА на 25-30% в предсердиях и желудочках (Рис. 37) и 5НТ (Рис. 38) в предсердиях от 03*0,03 мВ до 0,16±0,01в ЭПО и от 0,14±0,01 до 0,07±0,01мВ (р<Ю,001) в ЭНО. После этого и в предсердиях и в желудочках наблюдается рост люминесценции как КА, так и 5НТ в среднем в 2 роза (р<0,001), по времени совпадающий с динамикой выведения водной на-

грузки, описанной Е.Б. Берхиным и соавт. (1972, 1979). Из полученных данных следует, что длительный (24 мес.) прием Си*4 и вызывает, в основном, разнонаправленные изменения содержания в тимусе изучаемых трансмиттеров и противоположные по направленности ответы на ВН. Возможно, это есть следствие антагонизма между цинком и медью, наблюдаемое, например, у пациентов с болезнью Вильсона-Коновалова, у которых обнаруживается положительная клиническая динамика при лечении сульфатом цинка (Prasad A.S., 1996),

0,08 - мВ |

- -o - CO

0.07 - —e- — TKB

0.06 - — —no

! —о -MO

0 05 j

0,04 - Т

о.оз Jt

0,02 - fSS

0,01 -j Jr \ 5

olf . "a

I ч| 2ч Зч I 4ч I Нагрузка новой

1 ч I 2ч Зч 4ч

И К | 1 ч 2ч Зч 4ч

Рис.

I Натру 1ка возов на фоне Си | Нагрузка водой на фоне 2ч ,

34. Влияние длительного потребления Си++ и и водной нагрузки на их фоне на содержание серотоннна в строме тимуса

- мВ

- чз- - со

И X а , Л Щ

Рис. 35. Влияние потребления Си^и 2л"" н водной га их фоне на содержание катехоламинов в гранулярных люминеошрующих клетках тимуса

0,13

И j 1 ч| 2ч I Зч j 4ч Нагрузка волан

И j К I 1 ч J 2ч J Зч j 4ч Нагрузка водой на фоне 2п

И | К | 1 ч | 2ч | Зч | 4ч ( Нагрузка водой на фоне Си

Рис. 36. Влияние потребления Си""н 2а**н водной нагрузки на их фоне на содержание серотонияа в гранулярных люминесцирующих клетках тимуса

0,16

0,12

0,08

0,04

0,00

Контроль 1-й час 2-й час 3-й час

4-й час

0,20 0,15 -

Рис. 37. Влияние водной 010 нагрузки на содержание ' ' катехоламинов в мио- о(о5 карде

А) - предсердия, 0,00

Б) - желудочки

Контроль 1-й час 2-й час 3-й час 4-й час

Изменению количества отдельных транемштетеров возможно дать удовлетворительное объяснение. Например, Zn** является обязательным компонентом 5-НГз рецептора (Hubbard P.C., Lummis S.C., 2000), поэтому изменение количества Tri* в организме может быть причиной изменения аффинитета 5-НТ3 рецептора, в ответ на это может меняться количество 5НТ. Согласно литературным данным, Zn блокирует активность АХЭ (Suresh А. et al., 1992), с

чем можно связать наблюдавшееся нами увеличение количества АЦХ в ЮК и тимусе при нагрузке Zn++.

Контроль 1-й час 2-й час 3-й час 4-й час

Контроль

Рис. 38. Влияние водной нагрузки на содержание серотонина в миокарде А) - предсердия, Б) - желудочки

В почечной капсуле наблюдалось уменьшение уровня АЦХ в ответ на хроническое потребление Zn". Поскольку реакции трансмиттеров капсулы почки на все нагрузки противоположны наблюдавшимся в почке можно утверждать, что количество экстранейрональных трансмиттеров капсулы почки не зависимо от их количества в самой почке. Не смотря на то, что Си** и Zn." — физиологические и фармакокинетические антагонисты, избыток Си" также вызывает увеличение уровня АЦХ. Вероятной причиной этого может быть вторичная индукция. Как известно, m-ацетилхолиновые рецепторы контролируют синтез и высвобождение NO. Синтаза оксида азота является цитоплазменной частью NADPH-дегидрогеназы (Bascal Z.A. et al„ 1996; Dawson T.M. et al„ 1991), являющейся молибдензависимым ферментом (Schrauser G.N., 1984).

Между Си" и Мо" наблюдается физиологический антагонизм (Dick А.Т., 1953). Поэтому представляется возможным, что Си", как антагонист Мо", блокирует синтазу NO. В условиях блокады синтазы N0, как компенсаторная реакция, должен увеличиваться синтез АЦХ. Наблюдавшееся нами уменьшение массы тимуса в ответ на прием Zn", возможно, связано с прямым токсическим влиянием Zn"".

Нам не известно работ, в которых исследовалось бы влияние избытка Zn" на состояние трасмиттеров тимуса, однако известно, что его дефицит сопровождается существенным уменьшением массы тимуса (Авцын АЛ. и соавт., 1991). Уменьшение Н в тканях тимуса, индуцированное избытком Си"", может быть связано с увеличением активности гистаминазы, которая

является медьзависимым ферментом (Buffoni F., Blaschko Н., 1964). В почке мы такой реакции не наблюдали, возможно, потому, что почечный Н может быть экстраренального происхождения. Zn*"*" вызывал противоположные изменения уровня Н, что возможно объяснить его участием в синтезе Н из гистидина, тогда как дефицит 2h++ вызывает у крыс уменьшение гистаминовых уровней, без изменения содержания гистидина (Hsu J.M., Rubenstein В., 1982).

Реакция экстранейрональных трансмиттерных систем миокарда на длительную гиперсимпатикотонию

Многочисленные эксперименты с острой стимуляцией симпатических нервов миокарда, остром введением адреналина в общий кровоток и последующим немедленным изучением содержания катехоламинов в миокарде практически ничего не дали д ля понимания механизмов физиологической адаптации организма к естественной гиперсимшгакотонии - нейроэндокринном дисбалансе, являющемся одной из важных причин развития сердечной недостаточности. В практическом смысле более интересны данные о долговременном влиянии катехоловых аминов, либо близких к ним лигандов, чем данные о краткосрочном воздействии. На начальных этапах симпатические нейроэндок-ринные нарушения имеют адаптационно-компенсаторное значение в развитии хронической сердечной недостаточности, прт которой, наряду с повышением суточной почечной экскреции норадреналина его содержание в миокарде уменьшается иногда в 10 раз (Моисеев B.C., 2000). Кроме того, вопросы экстранейрональной комедиации в миокарде при длительной симпатической стимуляции видимо не исследовались. Поскольку в доступной литературе сведений о длительной симпатической активации миокарда в эксперименте мы не обнаружили, то предприняли данное исследование. Нагрузка КА, угнетала флуоресценцию ацетилхолина на 6065% в левых отделах миокарда к концу 1-й недели (р<0,05). К концу 2-й в ЭНО правого желудочка и их перегородке, в отличие от остального миокарда, количество АЦХ увеличилось на 61% (р<0,01) и 95% соотв. (р<0,001), по сравнению с интакгными крысами и на 62-64% (р<0,01 и р<0,001), по сравнению с подопытными крысами 1-й недели. В других областях количество АЦХ было сопоставимо с интакгным уровнем, но выше, чем у крыс 1-й недели на 53-105%, что совпадает с увеличением массы миокарда (Рис. 39). В последующем, параллельно с падением массы, количество АЦХ снижалось в ЭПО предсердий на 59% (р<0,05) и в ЭНО обоих желудочков на 82% (р<0,01), по сравнению с контролем. По сравнению с крысами 1-й недели уменьшение произошло на 17-52% (р<0,001). К концу 4-й недели флуоресценция АЦХ резко возрастала в перегородке предсердий на 138% (р<0,001) и желудочков на 90% (р<0,001), в левом желудочке и ЭНО правого желудочка также наблюдалось увеличение

флуоресценции АЦХ в среднем на 37-60% (р<0.001). В 1-ю неделю эксперимента произошло снижение люминесценции Н на 59% (р<0,05) в ЭНО левого желудочка. К концу 2-й недели во всех отделах миокарда его количество снизилось как по сравнению с контролем, так и с крысами 1-й недели в 6-11 раз (р<0,001). На 3-й неделе произошло увеличение Н в ЭНО предсердий на 38% (р<0,05) и в 2,5-8,5 раз в желудочках (р<0,001). После этого в желудочках количество Н снизилось в 1,5-2 раза (р<0,001) (Рис. 40).

10 1 мВ

Предсерамя

8 —■ - ЭНО » ЭПО —А - Перегородка

3 |

Контроль

1 Г

-левый ЭПО —■ ' правый ЭНО — Ж

Желудочки

■ - левый ЭНО перегородка

прапый ОПО

-ж- - -ж- - -ж

Контроль

Г" Г

Рис. 39. Влияние гиперсимпатикотонии на флуоресценцию ацетилхолина в различных отделах миокарда

В предсердиях контрольных крыс содержание КА в ЭПО области было выше, чем в ЭНО в среднем на 48% (р<0,05). Продолжающееся введение симпатических аминов к концу 2-й недели снижало их количество в ЭНО предсердий в 2 раза (р<0,05) и в ЭПО области левого желудочка на 93% (р<0,05) по сравнению с контролем. Однако в ЭНО правого желудочка наблюдался рост на 55% (р<0,01). Тогда как по сравнению с подопытными крысами 1-й недели практически во всех отделах наблюдалось увеличение люминесценции. В

3-ю неделю люминесценция КА в предсердиях была сопоставима с шпаюным уровнем, а в межжелущиковой перегороди Ж) обоих желудочков и ЭЕЮ левого желудочка - снижена на 286-486% (р<0,001). К окончанию эксперимента люминесценция КА сопоставима с ингакшым уровнем во веж областях кроме ЭНО левого желуцочка и межжелудочковой перегородки, где люминесценция оставалась сниженной (р<0,05) (Рис. 41).

0.20 -|

0,12 -

0,04 -

0.00.

Предсердия

Контроль

2. I 3 I А Опыт Недели

0,8 -,

0,7

0,6

0,5

0,4

0,3 -

ОД

0.1

Желудочки

Контроль

Рис. 40. Влияние гиперсимпатикотонии на люминесценцию гистамина в различных отделах миокарда

У интакгаых крыс 1-й и 3-й недель величина люминесценции 5-НТ достоверно шше в ЭГЮ левого желудочка, чем в Ж) (р<0,05). Гиперсимпагикогония снижала люминесценцию 5-НГ в стенках предсердий к концу 1-й недели на 51% (р<0,05) и 273% (р<Д001) соотв. в ЭГЮ и Ж). Аналошчная по величине и направленности реакция наблюдалась в желудочках и межжелудочковой перегородке. Со 2-й недели наблюдается рост люминесценции 5-НГ, который сохраняется до окончания эксперимента (Рис. 42). Таким образом, локальное распределение катеходаминов и серогонина не однородно. Очевидно, что их максимальное тканевое содержание обнаруживается в тех участках тканей, где в этом существует клеточная необходимость.

0.08 - мВ

0.04

0.00

Предсердия

__ 3 I

Контроль

Опыт

! 4 ! Недели 1

Желудочки

I 3 ! 4 | Кошроль Опыт Нелели

Рис 41. Влияние гиперсимпатикотонии на люминесценцию катехоламинов в различных отделах миокарда

Как и при исследовании реакции ацетилхолина и гистамина на изучаемые нагрузки, противоположные изменения гомеостаза вызывают противоположные изменения количественного содержания катехоламинов и серотони-на в тканях исследованных срзнов. Исходя из наших данных, следует что, даже если весь тканевой пул исследованных трансмиттеров имеет происхождение в результате захвата П, тимус, миокард, почка и почечная капсула не являются пассивными накопителями «отработавших» трансмиттеров. Они активно реагируют на изменяющиеся условия гомеостаза уменьшением, либо увеличением количества трансмиттеров. Биологическая целесообразность этих процессов требует дальнейшего широкомасштабного изучения. На основе проведенного исследования можно сделать заключение, что изученные воздействия (ВН, изменение КЩС в сочетании с нагрузкой объемом, гиперсимпатикотония, нагрузки избытком Си" и 2п**) изменяют экстранейрональное содержание исследуемых трансмиттеров критичным образом. Поскольку эти изменения могут иметь ре-

шающее значение в развитии патогенеза, как при прямом воздействии этих факторов, так и провоцировать патоморфоз других патологических и/или физиологических процессов, необходимо дальнейшее изучение влияния рассмотренных и аналогичных нагрузок на трансмитгерные системы в условиях функциональной нагруженное™ изучаемых органов.

0.28 -1

0,24 -0,20 -0,16

0,12

0,08 0.04

0,00

0,6 0,5 0,4 0,3 -0,2 0,1

мВ

Предсердия

1 3 I Контроль

2 | 3 Опыт

I *

Недели

мВ

Желудочки

! 3 I

Контроль .

Опыт

Недели

Рис 42. Влияние хронической гиперсимпатикотонии на люминесценцию серотонина в различных отделах миокарда

Из полученных нами данных следует, что локальное распределение изученных трансмиттеров в органах не однородно, максимальное содержание обнаруживается в функционально активных областях. Гомеостатические изменения влияют на локальное содержание трансмиттеров в соматических клетках. Динамика ответа определяется в основном типом тканей, а не видом воздействия. Вне зависимости от направленности количественных изменений содержания трансмиттеров, индуцированных применявшимися нагрузками, очевидно их совместное участие в формировании ин-

тегрального ответа органа на меняющиеся условия гомеостаза. В целом контроль тканевого содержания трансмиттеров мультивариантен и определяется клеточной потребностью.

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

1. Выявлены тканевые паттерны ацетилхсшина, катехоламинов, серотонина и гистамина и их локальное распределение в тканях миокарда, тимуса и почек, которое не однородно. Максимальное их количество обнаруживается в функционально более активных областях почки и тимуса. В миокарде ацетилхолина больше в быстрых миофибриллах, а катехоламинов и серотонина - в медленных.

2. Введение предшественника ацетилхолина холина увеличивает содержание ацетилхсшина и холинэстеразы в тканях почки (р<0,01).

3. Водная депривация в первые сутки снижает количество гистамина, катехоламинов и серотонина от 2 до 5 раз (р<0,01) и увеличивает содержание ацетилхолина от 2 до 8 раз в различных отделах нефрона (р<0,01).

4. Водная нагрузка (6% от массы тела) увеличивает тканевые концентрации ацетилхолина во всех исследованных органах (р<0,05), а катехоламинов и серотонина только в миокарде, капсуле почки и тимусе (р<0,01), гистамина-только в миокарде (р<0,01). В тканях почки содержание серотонина и гистамина при этом уменьшается (р<0,01). В почках при относительно низком уровне катехоламинов их количество увеличивается (р<0,01), а при относительно низком -уменьшается (р<0,01). В результате диуретический ответ развивается при примерно равных тканевых концентрациях катехоламинов. Максимумы и минимумы концентраций исследованных трансмиттеров в основном совпадают с пиком диуретического ответа.

5. Реакция тканевых концентраций исследованных трансмиттеров на изменение кислотно-щелочного состояния критически зависит от типа нагрузки: 0,1н соляная кислота уменьшает в тканях почки количество ацетилхолина и гистамина на 45-100% от интактного уровня (р<0,01), а катехоламинов и серотонина на 75-450% (р<0,001); 4% бикарбонат увеличивает содержание ацетилхолина и гистамина на 20-100% (р<0,01), а катехоламинов и серотонина на 80250% (р<0,001).

6. Реакция тканевых концентраций ацетилхолина и гистамина почки и почечной капсулы на длительное поступление в организм Си" или 7п** критически отличается. Си", 6±0,02 мг/(кгхмассыхсуг.), уменьшает содержание ацетилхолина, катехоламинов и серотонина в кортикальных отделах почек и ацетилхолина в капсуле почки, но увеличивает количество гистамина в клубочках почек (р<0,001). 7п* в эквималярной дозе увеличивает содержание ацетилхолина в тканях почки и ее капсуле и гистамина в почке (р<0,001). И Си" и 2л" уменьшают содержание серотонина и катехоламинов в тканях почки в 3,7-5,6 раза (р<0,001). В тимусе оба металла увеличивают количество аце-

тилхолина (Си^ от 2 до 3,5 раз (р<Д0ОД1), гп" до 7 раз (р<0,0001)), но уменьшают содержание гистамина в . 1,5-2 раза (р<0,001), а также катехола-минов и серогонина в мозговом веществе тимуса (р<0,05).

7. Прием в течение 6 мес. обоих,исследованных металлов изменяет реакцию тканевых трансмиттеров на нагрузку водой. В почке, почечной "капсуле и тимусе водная нагрузка на фоне приема Си1"1" уменьшала количество ацетилхолина, но увеличивала его на фоне потребления (р<0,001). Содержание гистамина после приема обоих металлов под влиянием водной нагрузки в почечной капсуле уменьшалось (р<0,001). В почках количество гистамина при водной нагрузюена фоне Си" уменьшалось в клубочках, но увеличивалось в канальцах ф<0,01). Содержание катехоламинов и серогонина при водной нагрузке на фоне Си" увеличивалось в кп>бачковом аппарате почки (р<0Д5) и капсуче почки (р<0,001) и уменьшалось в канальцевом (р<005), нафоне потребления уменьшение количества катехоламинов в 3,7 раза (р<0,0001) и серотонинав 2 раза от интакгаого уровня (р<Ю,0001)набли> далось в канальцевом аппарате и капсуле почки ф<0,0001).В'шм5теинафсиеСи,+,и на фше ЪР, всдаая нагрузка увеличивая оддфжаниесеротошнавба

ни, ч^ катехоламинов (р<0,01).

8. Распределение ацетилхолина и катехоламинов в ингаюгном миокарде нерав-номерно.Аце1Ш1халина в перегородке предсердий на 140% больше, чем в желудочках (р<0,01). В желудочках ацетилхолина в 1,8 раза больше в субэпикар-диальной области, чем в субэндокардиалыюй слева, и только на 37% справа (р<0,01). Распределение катехоламинс» и серогонина обратное, слева их на 14% больше в субэндокардиалыюй области, чем в субэпикардиальной (р<0,05). Нагрузка катехоламинами в первую неделю уменьшает количество ацетилхолина, серогонина и.катехоламинов в миокарде (р<0,001). Ко второй неделе содержание гистамина уменьшается (р<0,001), а ацегилхшина, серо-тонина и катехоламинов увеличивается (р<Д001). В третью неделю количэство аце-ютхолина, оерсггонина и катехоламиновуменьшаем до уровне <хиоаавимоп> с первой веделей (р<0,Ш1), а гистамина увеличивается (р<0,0001). К окончанию эксперимента (конец 4-й недели), тканевые концентрации ацегалхсшина и серогонина возрастают (р<0,001), а гистамина снижаются (р<0,001).

9. Эксгранейрональный пуп исследованных трансмиттеров активно и закономерно реагирует на предъявленные нагрузки, что свидетельствует об их самостоятельной функциональной роли в поддержании тканевого гомеосгаза.

СПИСОК ОСНОВНЫХ ПУБЛИКАЦИЙ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ Статьи в изданиях, включенных в список ВАК

1. КтловВА^МартюваКХиЗахарошВВ.Биоами^

и ацвддае. Нефрология. - 2001. - Т. 5, № 3. - С. 102-103. (0,13 п. л, 90% личного участия).

2. Козлов ВА, Глгпырина О.С, Толмачева AJO. Водная депривация влияет на эксг-ранеирональный медиагорный пул почек белых крыс и почечную популяцию тучных клеток//Нефрология 2003. -Т. 7,- N2- С. 76-81.(031 п. л., 65% личного участия).

3. Козлов ВА^ Главырина О.С., Татмачева AJO. Содержание некоторых медиаторов р виш1Шнькпочкахкрью.ЬЬ4^халсхт1яидиалт.-2003.-Т.5,№3.-С.(0^п..гц70% t < личного участия). QtiJ) ,

4. Козлов ВА, Глазырина О.СВлияние хронического всюного потребления молибдена 10 ЦДК на трансмиггерный сгаус почек крыс // Вест. Оренбургского гос. унта. Прил. «Биоолемеяголсгая». 2004. № 4. С. 47-48. (ОДЗпл^ 75% личного участия). Патенты "

5.Козлов RA-, Уфуиэва АЮ, Толшчев АС. Патент N2159433, приоритет 27 октября 1999, Способ определения ацетилхолика. (0,5 а л^ 80% личного учалия). Статьи в сборниках научных работ

6. Козлов В.А,, Толмачева А.Ю., Глазырина О.С., Толмачев А.С. Адаптация экстранейрональных трансмиттерных систем миокарда к хронической гиперсимпатикотонии. Среда обитания и здоровье / Сб. научн. раб. под. ред. акад. Н.А. Агаджаняна. - Москва-Чебоксары. - 2005. - С. 49-58. (0,56 п. л., 80% личного участия).

7. Kozlov YA., UfukovaA.Y., Tolmachev A.S., SuslikovV.L. Fluorescent method of Acetylcholine detection / 20th Workshop The biological essentiality of macro and trace elements Germany, Jena, 2000. - P. 895-899. (0.31 п. л., 90% личного участия).

8. Kozlov VA, Glazirina O.S., Kuzmina O.V, Suslikov V.L. Choline and L-Dopa influence on biogenic regulators kidney level and kidney mastocytes behaviour /21th Workshop The biological essentiality of macro and trace elements, Germany, Jena, 18-19 October, 2002, P. 846-856. (0,69 п. л., 90% личного участия).

9. Kozlov V.A., Glazirina O.S., Kuzmina O.V, Suslikov V.L. Water diuresis and choline influence on biogenic regulators kidneys level and kidney mastocytes behavior in acute exparement /21th Workshop The biological essentiality of macro and trace elements, Germany, Jena, 18-19 October, 2002, P. 831-839. (0,5 п. л., 90% личного участия).

10. Kozlov VA, Glazirina O.S., Ufukova A.U.The choline changes acetylcholinesterases activity and Acetylcholinum fluorescence intensity in the kid-

neys / 21th Workshop:.The biological essentiality of macro and trace elements, Germany, Jena, 18-19 October, 2002, - P. 839-846. (0,44 п. л., 90% личного участия).

11. Kozlov VA., Glazirina OS. Influence of chronic consumption Cu lO maximum concentrations limits от rats kidney mast cells population / 4 th Intemationalsympo-sium on trace elements in-Ьшпаш new-perspective. .Greece. Athens. 9-11 October. 2003. P. 674-679. (031 п. л., 90% личного участия).

12. Kozlov VA., Glazirina O.S. Influence of chronic consumption Cu 10 maximum concentrations limits on rats kidney bioaminic status / 4 th International synçosium on trace elements in human: new perspective. Greece. Athens. 9-11 October. 2003. P. 680-689. (0,63 п. л., 90% личного участия).

13. Kozlov VA., Glazirina O.S. Influence of chronic consumption Cu 10 maximum concentrations limits on rats thymic bioaminic status / 4 th International symposium on trace elements in human: new perspective. Greece. Athens. 9-11 October. 2003. P. 690-704. (0,94 п. л., 90% личного участия)..

14. Koziov VA, Glazirina O.S. Influence of chronic consumption Cu 10maximum concentrations limits on rats thymus mast cells population / 4 ih International symposium on trace elements in htmian: new perspective. Greece. Athens. 9-11 October. 2003. P. 782-788. (0,44 п. л., 90% личного участия).

15. Kozlov VA^ Glazirina O.S. Influence of chronic congreece. Athens. 9-11 October. 2003. P. 674-679. (031 п. л., 90% личного участия).

16. Kodov.VA^ Glazirina O.S. Influence of chronic consumption Zn 10 maximum concentrations limits on rats kidney bioaminic status / 4 th International symposium от trace elements in human: new perspective. Greece. Athens. 9-11 October. 2003. P. 705715. (0,63 п. л., 90% личного участия).

17;Kbaiov VA^ Glazirim O.S. Influence of chromc consumption Zh lOmaximum concentrations limits on rats thymus bioaminic status/4th International symposium on trace dements inhuman: new perspective. Greece. Athens. 9-11 October. 2003. P. 721734. (0,88 п. л., 90% личного участия).

18. Козлов В .А. Локализация и состояние тканевых трансмитттерных систем в норме и эксперименте. - Москва, ОАО Щербинская типография. - 2006. 124 с. (7,75 п.л.). Монография.

Подп к печ 08 11 2006 Объем 2,5 п.л. Заказ №.150 Тир 100 экз.

Типография МПГУ

Содержание диссертации, доктора биологических наук, Козлов, Вадим Авенирович

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. Экстранейрональный синтез и локальные функции ацетилхолина, гистамина, катехоламинов и серотонина.

1.1. Экстранейрональный синтез и функции нейрональных трансмиттеров.

1.1.1. Экстранейрональный синтез ацетилхолина.

1.1.2. Экстранейрональный синтез катехоламинов.

1.1.3. Экстранейрональный синтез серотонина.

1.2. Нейрональная и экстранейрональная регуляция некоторых функций почки, миокарда и тимуса.

1.2.1. Холинергическая нейрональная и экстранейрональная регуляция.

1.2.2. Дофаминовая нейрональная и паракринная регуляция.

1.2.3. Серотониновая нейрональная и паракринная регуляция.

1.2.4. Гистаминовая паракринная регуляция.

1.3. Нервная и рецепторная регуляция функционирования почек, миокарда и тимуса.

Глава 2. Материалы и методы исследования.

Глава 3. Результаты исследования.

3.1. Флуоресцентный метод обнаружения ацетилхолина в тканях.

3.2. Влияние изменения водного баланса, кислотноосновного состояния и длительного потребления Zn^ и Си* на содержание ацетилхолина в почке, почечной капсуле, миокарде и тимусе.

3.2.1. Влияние на тканевое содержание ацетилхолина изменения водного баланса и кислотноосновного состояния.

3.2.2. Влияние длительного потребления Си++ и Zn* на тканевое содержание ацетилхолина и его реакцию на водную нагрузку.

-33.2.3. Влияние водной нагрузки и длительного приема Си** и Zri" на содержание ацетилхолина в тимусе.

3.3. Влияние изменения водного баланса, кислотно-основного состояния и длительного потребления Zn44" и Си1"* на тканевое содержание гистамина.

3.3.1. Влияние изменения водного баланса и кислотно-основного состояния на тканевое содержание гистамина.

3.3.2. Влияние длительного потребления Cu++ Zn++ на тканевое содержание гистамина почки и его реакцию на водную нагрузку.

3.3.3. Влияние водной нагрузки и длительного приема Си++ и Zn++ на содержание гистамина в тимусе.

3.4. Влияние изменения водного баланса, кислотно-основного состояния и длительного потребления Zn4' и Си++ на тканевое содержание катехоламинов и серотонина.

3.4.1. Влияние изменения водного баланса и кислотно-основного состояния на тканевое содержание катехоламинов и серотонина.

3.4.2. Влияние длительного потребления Cu++ Zn~* на тканевое содержание катехоламинов и серотонина и их реакцию на водную нагрузку.

3.4.3. Влияние водной нагрузки и длительного приема Си1-1" и Zn++ на содержание катехоламинов и серотонина в тимусе.

3.5. Реакция экстранейрональных трансмиттерных систем миокарда на гиперсимпатикотонию.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Локализация и состояние тканевых трансмиттерных систем в норме и эксперименте"

Таким образом, в настоящее время в тканях обнаружен синтез трансмиттеров, в отношение которых принято мнение, что они являются исключительной принадлежностью нервной системы. Учитывая важность сведений о локальном (in situ) количественном распределении этих трансмиттеров в отдельных органах, мы провели целенаправленный поиск таких литературных данных, однако нам не удалось найти публикаций об изучении аутакоидной функции тканевого пула ацетилхолина, гистамина, катехоламинов и серотонина в их сопоставлении на целостном взрослом организме. В связи с этим не представляется возможным оценить их поведение при наиболее важных изменениях го-меостаза. Мы не обнаружили сведений о локальном количественном распределении этих трансмиттеров, их реакцию на диаметрально противоположные нагрузки, такие как: изменения водного баланса, кислотно-основного состояния, активация симпатики и парасимпатики, влияние на механизмы синтеза трансмиттеров, физиологические механизмы которых достаточно хорошо изучены

В синтезе и деградации серотонина и катехоламинов принимают участие такие микроэлементы, как медь и цинк, биологически являющиеся функциональными антагонистами [3, 77, 280]. Поскольку их влияние на синтез медиаторов является более физиологичным, чем фармакологическая плохо обратимая блокада синтеза с помощью медиаторных ядов, например, резерпина, модель с длительным насыщением организма ионами этих металлов кажется более приемлемой. Обычно изучается дефицит микроэлементов, а их избыток является редкой патологией, связанной, в основном, с промышленной токсикологией. В настоящее время, в связи с бесконтрольным широким распространением пищевых добавок, содержащих иногда очень большие дозы микроэлементов, их избыточное пищевое поступление становится еще и актуальной медицинской проблемой. Клинические критерии необходимости применения тех или иных микроэлементов, вопросы дозирования, сочетаемости, влияния избытка, как на естественное отправление физиологических процессов, так и на их патоморфоз, не изучены. Более того, данная проблема не сформулирована и не существует клинической настороженности.

В связи с вышесказанным актуальность исследования экстранейрональ-ных трансмиттерных систем не оставляет сомнений.

Цель исследования: изучить локализацию и ответ экстранейрональных трансмитерных систем организма на изменения кислотно-щелочного состояния, водного баланса, микроэлементного, симпатического и холинергического статуса.

Для решения этих вопросов поставлены следующие задачи:

-71. Определить количественные параметры тканевых трансмиттерных систем почки, сердца и тимуса при использовании флуоресцентно-гистохимических методик в условиях обычной жизнедеятельности;

2. Изучить влияние холина, предшественника ацетилхолина, на количественные параметры трансмиттерных систем почки;

3. Изучить реакцию экстранейрональных трансмиттерных систем в реализации функционального ответа почки на водную депривацию;

4. Изучить реакцию экстранейрональных трансмиттерных систем почки, почечной капсулы, миокарда и тимуса на нагрузку водой;

5. Изучить реакцию экстранейрональных трансмиттерных систем в реализации функционального ответа почки, почечной капсулы, миокарда и тимуса при изменении кислотно-основного баланса;

6. Изучить реакцию экстранейрональных трансмиттерных систем в реализации функционального ответа почки, почечной капсулы, и тимуса на длительную (6 мес.) нагрузку Си"" и Zn^;

7. Изучить реакцию экстранейрональных трансмиттерных систем в реализации функционального ответа почки и почечной капсулы, и тимуса на нагрузку водой в условиях изменения микроэлементного статуса;

8. Изучить роль экстранейрональных трансмиттерных систем в реализации функционального ответа миокарда на гиперсимпатикотонию.

Научная новизна. Впервые описаны количественные параметры распределения ацетилхолина, катехоламинов, серотонина и гистамина в тканях почки и почечной капсуле, ацетилхолина в миокарде и тимусе при их люминесцентно-гистохимическом обнаружении. Впервые в эксперименте с использованием тонких гистоморфологических методик обосновано участие тканевого пула трасмиттеров в регуляции тканевого гомеостаза. Впервые разработан и апробирован в данной работе флюоресцентно-гистохимический метод обнаружения ацетилхолина в тканях (Козлов В.А., Уфукова А.Ю., Толмачев А.С. Патент № 2159433, приоритет 27 октября 1999 «Способ определения ацетилхолина»), с помощью которого описан почечный, кардиальный и тимусный паттерн ацетилхолина, сопоставленный с паттернами катехоламинов, серотонина и гиста-мина. Впервые изучено влияние водной нагрузки и водной депривации на состояние трансмиттерных систем почки, почечной капсулы, миокарда и тимуса, в том числе на фоне 6 месячного поступления с питьевой водой Си1-" и Zn"14". Показано влияние холина на статус трансмиттерных систем почки на процесс реализации регуляторных актов по поддержанию сосудистого объема и кислотно-основного баланса в условиях водной, кислотной и бикарбонатной нагрузок. Впервые изучено методами флуоресцентной гистохимии влияние длительной гиперсимпатикотонии на трансмиттерный статус миокарда.

Научная и практическая значимость. Получены данные, расширяющие представления об участии трансмиттерных систем в процессах почечной регуляции сосудистого объема и кислотно-основного баланса. Внедрен в практику новый метод исследования тканевого паттерна ацетилхолина. Показаны возк можные механизмы токсического поражения почек, миокарда и тимуса некоторыми препаратами, широко используемыми в практической медицине. Изучены трансмиттерные эффекты избытка Си++ и Zn++. J

Настоящее исследование проводилось по единому наряд-заказу №Б-75 Министерства Образования Российской Федерации в рамках плана научно-исследовательских работ ФГОУ ВПО «Чувашский государственный университет им. И.Н. Ульянова», кафедра профилактической медицины и по программе «Университеты России», номер государственной регистрации научного направления 01870032287.

Основные положения, выносимые на защиту 1. Выявлен тканевой пул ацетилхолина, катехоламинов, серотонина и гистами-на и установлены их локальные количественные параметры в миокарде, тимусе, почках и почечной капсуле.

-92. Длительное назначение холина дозазависимо и реципрокно статистически достоверно изменяет количество ацетилхолина и активность холинэстеразы в тканях почки.

3. Водная депривация статистически достоверно увеличивает количество ацетилхолина и уменьшает содержание катехоламинов, серотонина и гистамина во всех отделах нефрона в течение первых суток лишения воды.

4. Под влиянием водной нагрузки (6% от массы тела) статистически достоверно:

-увеличивается количество тканевого ацетилхолина в миокарде, канальцевом аппарате и капсуле почки, парамедуллярной области тимуса; -содержание катехоламинов и серотонина в миокарде, капсуле почки и тимусе; -количество гистамина в миокарде; ,

-снижается количество серотонина и гистамина в тканях почки.

5. Смещение кислотно-щелочного состояния в кислую сторону статистически достоверно уменьшает содержание всех исследованных трансмиттеров в тканях почки, а в щелочную - увеличивает.

6. При длительном питьевом потреблении в течение 6 мес. Си++ или Zn++ наблюдаются противоположные количественные изменения паттерна тканевых

D П ++ 7 ++ трансмиттеров. В почке Си уменьшает, a Zn увеличивает их локальные тканевые концентрации. В тимусе оба микроэлемента увеличивают тканевые концентрации ацетилхолина.

7. Длительное питьевое потребления Си"1-1" или Zn++ видоизменяет реакцию паттерна тканевых трансмиттеров на водную нагрузку. При этом если на фоне ++ ++

Си тканевая концентрация трансмиттера увеличивается, то на фоне Zn количество этого трансмиттера уменьшается.

8. В миокарде при длительной симпатикотонии наблюдаются фазные изменения количества тканевых концентраций ацетилхолина, гистамина, катехоламинов и серотонина. При этом паттерн каждого трансмиттера имеет собственную фазность.

Апробация работы. Основные положения работы были доложены на 20 конференции по эссенциальным макро- и микроэлементам (Германия, Йена, 2000), IX Всероссийской конференции по физиологии почек (Петербург, 2001), Первом международном симпозиуме «Современные проблемы геохимической экологии болезней» (Чебоксары, 2001), 21 конференции по эссенциальным макро- и микроэлементам (Германия, Йена, 2002), Четвертом международном симпозиуме по редким элементам у людей (Греция, Афины, 2003), Четвертой Российской биогеохимической школе «Геохимическая экология и биогеохимическое изучение таксонов биосферы» (Москва, 2003), Третьей Всероссийской конференции с международным участием «Механизмы функционирования висцеральных систем» (Петербург, 2003), Всероссийском конгрессе «Нефрология и диализ сегодня» (Новосибирск, 2003), Третьей всероссийской школы-конференции с международным участием по физиологии кровообращения (Москва, 2004).

Публикации. Основные материалы работы опубликованы в 17 статьях. ;

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Козлов, Вадим Авенирович

- 193 -ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

1. Выявлены тканевые паттерны ацетилхолина, катехоламинов, серотонина и гистамина и их локальное распределение в тканях миокарда, тимуса и почек, которое не однородно. Максимальное их количество обнаруживается в функционально более активных областях почки и тимуса. В миокарде ацетилхолина больше в быстрых миофибриллах, а катехоламинов и серотонина - в медленных.

2. Введение предшественника ацетилхолина холина увеличивает содержание ацетилхолина и холинэстеразы в тканях почки (р<0,01).

4. Водная нагрузка (6% от массы тела) увеличивает тканевые концентрации ацетилхолина во всех исследованных органах (р<0,05), а катехоламинов и серотонина только в миокарде, капсуле почки и тимусе (р<0,01), гистамина - только в миокарде (р<0,01). В тканях почки содержание серотонина и гистамина при этом уменьшается (р<0,01). В почках при относительно низком уровне катехоламинов их количество увеличивается (р<0,01), а при относительно низком - уменьшается (р<0,01). В результате диуретический ответ развивается при примерно равных тканевых концентрациях катехоламинов. Максимумы и минимумы концентраций исследованных трансмиттеров в основном совпадают с пиком диуретического ответа.

5.Реакция тканевых концентраций исследованных трансмиттеров на изменение кислотно-щелочного состояния критически зависит от типа нагрузки: 0,1н соляная кислота уменьшает в тканях почки количество ацетилхолина и гистамина на 45100% от иншктного уровня (р<0,01), а катехоламинов и серотонина на 75-450% (р<0,001); 4% бикарбонат увеличивает содержание ацетилхолина и гистамина на 20-100% (р<0,01), а катехоламинов и серотонина на 80-250% (р<0,001).

6. Реакция тканевых концентраций ацетилхолина и гистамина почки и почечной капсулы на длительное поступление в организм Синили ЪтГ критически отличается. Си4*, 6±0,02 мг/(кгхмассы><сут.), уменьшает содержание ацетилхолина, катехоламинов и серотонина в кортикальных отделах почек и ацетилхолина в капсуле почки, но увеличивает количество гистамина в клубочках почек (р<0,001). Zn" в эквимолярной дозе увеличивает содержание ацетилхолина в тканях почки и ее капсуле и гистамина в почке (р<0,001). И Си4* и Zn4* уменьшают содержание серотонина и катехоламинов в тканях почки в 3,7-5,6 раза (р<0,001). В тимусе оба металла увеличивают количество ацетилхолина (Си4* от 2 до 3,5 раз (р<0,0001), Zn4* до 7 раз (р<0,0001)), но уменьшают содержание гистамина в 1,5-2 раза (р<0,001), а также катехоламинов и серотонина в мозговом веществе тимуса (р<0,05).

7. Прием в течение 6 мес. обоих исследованных металлов изменяет реакцию тканевых трансмиттеров на нагрузку водой. В почке, почечной капсуле и тимусе водная нагрузка на фоне приема Си** уменьшала количество ацетилхолина, но увеличивала его на фоне потребления Zn4* (р<0,001). Содержание гистамина после приема обоих металлов под влиянием водной нагрузки в почечной капсуле уменьшалось (р<0,001). В почках количество гистамина при водной нагрузке на фоне Си** уменьшалось в клубочках, но увеличивалось в канальцах (р<0,01). Содержание катехоламинов и серотонина при водной нагрузке на фоне Си** увеличивалось в клубоч-ковом аппарате почки (р<0,05) и капсуле почки (р<0,001) и уменьшалось в канальцевом (р<0,05), на фоне потребления Zn** уменьшение количества катехоламинов в 3,7 раза (р<0,0001) и серотонина в 2 раза от интактнош уровня (р<0,0001) наблюдалось в канальцевом аппарате и капсуле почки (р<0,0001). В тимусе и на фоне Си**, и на фоне Zn**, водная нагрузка увеличивает содержание серотонина в большей степени, чем катехоламинов (р<0,01).

8.Распределение ацетилхолина и катехоламинов в интактном миокарде неравномерно. Ацетилхолина в перегородке предсердий на 140% больше, чем в желудочках (р<0,01). В желудочках ацетилхолина в 1,8 раза больше в субэпикардиальной области, чем в субэндокардиальной слева, и только на 37% справа (р<0,01). Распределение катехоламинов и серотонина обратное, слева их на 14% больше в субэндокардиальной области, чем в субэпикардиальной (р<0,05).

Нагрузка катехоламинами в первую неделю уменьшает количество ацетилхолина, серотонина и катехоламинов в миокарде (р<0,001). Ко второй неделе содержание гистамина уменьшается (р<0,001), а ацетилхолина, серотонина и катехоламинов увеличивается (р<0,001). В третью неделю количество ацетилхолина, серотонина и катехоламинов уменьшается до уровня, сопоставимого с первой неделей (р<0,001), а гистамина увеличивается (р<0,0001). К окончанию эксперимента (конец 4-й недели), тканевые концентрации ацетилхолина и серотонина возрастают (р<0,001), а гистамина снижаются (р<0,001).

9. Экстранейрональный пул исследованных трансмиттеров активно и закономерно реагирует на предъявленные нагрузки, что свидетельствует об их самостоятельной функциональной роли в поддержании тканевого гомеостаза.

Выражаю искреннюю признательность за помощь в разработке отдельных методических гистологических приемов при апробации метода выявления ацетилхолина в тканях профессору Дине Семеновне Гордон.

Сердечно благодарен сотрудникам Чувашского госуниверситета П.Б. Карышеву, О.С. Глазыриной за оказанную помощь в проведении отдельных серий экспериментов.

Считаю своим долгом отметить вклад студентов-кружковцев А.Ю. Толмачевой, А.С. Толмачева, В.В. Захаровой, чей самоотверженный труд очень помог автору.

Библиография Диссертация по биологии, доктора биологических наук, Козлов, Вадим Авенирович, Чебоксары

1. Абзалов Р.А. Взаимодействие функциональных систем организма при мышечной деятельности // Третья всероссийская с международным участием шко-ла-конф. по физиол. кровообр. М.: МГУ. 2004. - С. 3-4.

2. Абзалов Р.А. Регуляция функций сердца неполовозрелого организма при различных двигательных режимах: Автореф. дис.дмн. Казань, 1987. 28с.

3. Авцын А.П., Жаворонков А.А., Риш М.А., Строчкова Л.С. Микроэлементозы человека. М.: М, 1991. - 496с.

4. Агроскин Л.С., Папаян Г.В. Цитофометрия. Л.: Наука, 1977. - 295с.

5. Ажялис В.П., Стропус Р.С., Тамашаускас К.А. Применение алюминия-формальдегида для выявления катехоламинов в криостатных срезах // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. 1981, N3. - С. 102-106.

6. Альперн Д.Е. Холинергичекские процессы в патологии. Москва, 1963. 280 с.

7. Аникин Г.Д. О механизме прямого влияния на почку некоторых биологически активных веществ: Автореф. дис. д.м.н. Барнаул; Чебоксары, 1971.28с.

8. Беляева З.В. Вопросы физиологии и морфологии центральной нервной системы. М.:М, 1953.

9. Бергольц В.М. Люминесцентная микроскопия. М.: Медгиз, 1953. - 136с.

10. Берн Г. Функция химических передатчиков вегетативной нервной системы. М., Изд. иностр. лит. - 1961.

11. БерхинЕ.Б. Фармакология почек и ее физиологические основы. М.: М., 1979.-336с.

12. Берхин Е.Б., Иванов Ю.И. Методы экспериментального исследования почек и водносолевого обмена. Барнаул: Алтайское кн. Изд-во, 1972. - 199с.

13. Бриттон Г. Биохимия природных пигментов М.: Мир, 1986. 442с.

14. Брэм А. Жизнь животных. М.: ЭКСМО. 2002. 960с.-19815. Бузников Г.А. Нейротрансмиттеры в эмбриогенезе. М.: Наука. 1987.

15. Бузников Г.А. Низкомолекулярные регуляторы эмбрионального развития. М.: Наука. 1967.

16. Вайсфельд И.Л., Кассиль Г.Н. Гистамин в биохимии и физиологии. -М.: Наука, 1981.-280с.

17. Валеева Х.Г. К морфологии нервного аппарата почки млекопитающих. Труды Казанск. мед. Ин-та. 1966. - Т. 18. - С. 67-74.

18. Винницкая К.Б. Определение содержания суммарных и связанных форм ацетилхолина в крови. // Лаборат. дело. 1972, N2. - С. 89-90.

19. Винницкая К.Б., Большакова Т.Д. Методы определения ацетилхолина. // Вопр. мед. химии. 1985.-Т. 31.-вып. 1.-С. 136-142.

20. Вредные химические вещества. Неорганические соединения элементов I-IV группы: Справ, изд. / А.Л. Бандман, Г.А. Гудзовский, Л.С. Дубейковская и др.; Под ред. проф. В.А. Филова и др. Л.: Химия. 1988. 512 с.

21. Гинецинский А.Г. Физиологические механизмы водно-солевого равновесия. -М., Л.: Наука. 1964.

22. Говырин В.А. Трофическая функция симпатических нервов сердца и скелетных мышц. Л.: Наука. -1967.132с.

23. Голиков П.П. Рецепторные механизмы глюкокортикоидного эффекта. -М.:М, 1988.-285с.

24. Голиков С.Н., Долго-Сабуров В.Б., Елаев Н.Р., Кулешов В.И. Холинерги-ческая регуляция биохимических систем клетки. М.: М., 1985. - 224с.

25. Гордон Д.С., Сергеева В.Е., Зеленова И.Г. Нейромедиаторы лимфоидных органов. Л.: Наука. 1982. - 128 с.

26. Громова Е.А. Серотонин и его роль в организме. М.: М., 1966. 264с.

27. Гуревич К.Г. Нарушение обмена микроэлементов // Вопр. биол. мед. и фармацевт, хим. 2002, №2. С. 7-14.

28. Данилов И.Н. Влияние веществ, изменяющих обмен биогенных моноаминов, на катехоламины и серотонин в тканях животного организма. Авто-реф.дисс. к.м.н. Харьков. - 1972. - 24с.

29. Диксон М., Уэбб Э. Ферменты. М.: Мир, 1968. - 816с.

30. Дискуссия о химическом методе определения ацетилхолина. // Лаборат. дело.-1972,N2.-С. 80-81.

31. Заводская И.С., Морева Е.В., Заскалько Н.И., Бульон В.В. Влияние катехоламинов на содержание норадреналина в тканях // Фармакол. и токсикол. 1975. Т. 38. №1. С. 44-45.

32. Западнюк И.П., Захария Е.А., Западнюк Б.В. Лабораторные животные: разведение, содержание, использование в эксперименте. Киев, 1983. - 284 С.

33. Зефиров Л.Н., Рахманкулова Г.М. Медиаторы. Обмен, физиологическая роль и фармакология. Казань: Казан, ун-т, 1975. - 185с.

34. Зуга М.В., Невзорова В.А., Баранов В.Ф., Гельцер Б.И. Активность НАДФ-диафоразы эпителия бронхов и их подвижность при ингаляции ацетилхолина // Пульмонология. 1997а. N 3. С. 32-39

35. Зуга М.В., Невзорова В.А., Гарцман Т.Ю., Гельцер Б.И. Активность НАДФ-диафоразы и состояние тучных клеток бронхов при вагусной деаффе-рентации легкого крысы // Пульмонология. 19976. N 3. С. 39-46

36. Иванова Л.Н. Регуляция почкой кислотно-основного состояния организма //В кн.: Физиология водно-солевого обмена и почки / Под ред. акад. Ю.В. Наточина, СПб., Наука, 1993. С. 417-446.

37. Ивашкин В.Т., Минаян Г.Я., Уголев A.M. Теория функциональных блоков и проблемы клинической медицины. Л., Наука, 1990. - 303с.

38. Изаков В.Я., Иткин Г.П., Мархасин B.C. и соавТ. Биомеханика сердечной мышцы. М.: Наука, 1981. 328с.

39. Карлберг К. EXCEL 5 для Windows в вопросах и ответах. BHV-Санкт-Петербург, С. П-б, 1995. - 416с.-20041. Карнаухов В.Н. Биологические функции каротиноидов. М.: Наука, 1988.-241с.

40. Карнаухов В.Н. Люминесцентный спектральный анализ клетки. -М.: Наука, 1978.-208с.

41. Карупу В.Я. К вопросу об иннервации почек // Физиол. журн. АН УССР.1963,N6.-С. 795-799.

42. Кассиль Г.Н., Вайсфельд И.Л. Обмен гистамина при некоторых формах нервной патологии // Патол. физиол. и эксперим. Терапия. 1959. - Т. 3,с. 16.

43. Кибяков А.В. Химическая передача нервного возбуждения / Кибяков А.В.; АН СССР. Объед. науч. совет. «Физиол. человека и животных». М.: Наука,1964.-208с.

44. Козлов В.А. Ренальные эффекты дофамина и дофаминергических препаратов. Автореф. дисс. кмн. Чебоксары, 1990. 24 с.

45. Козлов В.А., Уфукова А.Ю., Толмачев А.С. Патент N 2159433, приоритет 27 октября 1999, Способ определения ацетилхолина.

46. Козлов В.А., Маринова К.П., Захарова В.В. Биоаминный статус почки при ацидозе и алкалозе // Нефрология. 2001. Т. 5, N 3. - С. 102

47. Козлов В.А., Уфукова А.Ю., Толмачев А.С. Влияние фамотидина на активность некоторых почечных дегидрогеназ при водной нагрузке // Нефрология. -2001.-Т. 5, N 3. С. 103

48. Козлов В.А., Глазырина О.С., Толмачева А.Ю. Содержание некоторых медиаторов в интактных почках крыс. Нефрология и диализ. 2003. Т. 5, № 3. С. 104.

49. Козлов В.А., Глазырина О.С., Толмачева А.Ю. Водная депривация влияет на экстранейрональный медиаторный пул почек белых крыс и почечную популяцию тучных клеток // Нефрология. 2003. Т. 7. N 2. С. 76-81.

50. Кришталь Н.В. Адренергическая и дофаминергическая регуляция кислото-выделительной функции почек // Физиол. ж. 1992. - Т. 38, N 2. - С. 63-68.

51. Крохина Е.М., Александров П.Н. Симпатический (адренергический) компонент эффекторной иннервации сердечной мышцы // Кардиология.- 1969. N3.-C. 97-102.

52. Кулинский В.И., Колесниченок Л.С. Молекулярные механизмы действия гормонов I. Рецепторы. Нейромедиаторы. Системы со вторыми посредниками // Биохимия. 2005. - Т. 70. № 1. С. 33-50.

53. Леви М.Н., Мартин П.Ю. Нейрогуморальная работа сердца / В кн.: Физиология и патофизиология сердца. Т. 2: Пер. с англ. / Под ред. Н. Сперелакиса. -М.,М.: 1990.-624с.

54. ЛиллиР. Патогистологическая техника и практическая гистохимия. -М.: Мир, 1969.-648с.

55. Лойда 3., Госсрау Р., Шиблер Т. Гистохимия ферментов. М.: Мир, 1982. -272с.

56. Лопатин Ю.М. Симпато-адреналовая система при сердечной недостаточности: роль в патогенезе и возможности коррекции // Ж. сердечная недостаточность. 2003. Т. 4. №2(18). С.105-106.

57. Лысов В.Ф. К иннервации канальцев почки // Бюл. эксперим. биол. мед. 1962.-Т. 64. N 10.-С. 118-122.

58. Лысов В.Ф. О рефлекторных влияниях через систему блуждающих нервов на функции почек // Физиология и патология кортико-висцеральных взаимоотношений. Иваново. 1965. Вып. 1. С. 603-606.

59. Малкоч А.В., Майданник В.Г., Курбанова Э.Г. Физиологическая роль оксида азота в организме // Нефрология и диализ. 2000. - Т.2. - №1-2. - С. 69-75.

60. Манухина Е.Б., Лапшин А.В., Меерсон Ф.З. и соавТ. Влияние адаптации к физической нагрузке эндотелий-опосредованной реакции изолированных сосудов в продукции NO у крыс. // Физиол. журн. им. Сеченова. 1996. Т. 82, N 7, С. 54-60.

61. Мархасин B.C., Кацнельсон Л.Б., Никитина Л.В. и соавТ. Биомеханика неоднородного миокарда. Екатеринбург. УРО РАН, 1999. 254с.

62. Мельман Е.П. Функциональная морфология иннервации органов пищеварения.-М.:М, 1970.

63. Мельман Е.П., Шутка Б.В. Нервный аппарат почки // Архив анат., гистол. и эмбриол. 1986. - Т. 90, N6. - С. 90-97.

64. Моисеев B.C. Сердечная недостаточность и достижения генетики // Сердечная недостаточность. 2000. - Т. 1, № 4. - С. 121-131.

65. Мотавкин П.А Современные представления о механизмах регуляции мозгового кровообращения // Морфология. 1992. - Т. 103, N7-8. - С. 7-34

66. Наточин Ю.В. Основы физиологии почки. Л.: Медицина, 1982. 208с.

67. Наточин Ю.В. Проблемы эволюционной физиологии водно-солевого обмена. Л.: Наука, 1984. - 38с.

68. Наточин Ю.В., Чапек К. Методы исследования транспорта ионов и воды. -Л.: Наука, 1976. 220с.

69. Ноздрюхина JI.P. Биологическая роль микроэлементов в организме животных и человека. М., Наука. - 1977.184с.

70. Нужненко Е.А. Активность ацетилхолинэстеразы почки при действии некоторых нейротропных веществ. «Физиология, фармакология и патология функции почек» Всерос. научн. студ. конф. - Куйбышев, 1974. - С. 122-123.

71. Пидевич И.Н. Фармакология серотонина (периферические эффекты). // В кн.: Фармакология моноаминергических процессов. Под ред. В.В. Закусова и Н.В. Кавериной. М.: М., 1971. С. 263-276.

72. Пидевич И.Н. Фармакология серотонинреактивных структур. М.: М., 1977. 280с.

73. Райцес B.C. Нейрофизиологические основы действия микроэлементов. -Л.: Медицина. 1981.152 с.

74. Розенгард В.И. О химическом методе определения ацетилхолина в крови и тканях. // Вопр. мед. химии. 1968. - Т. 14. - вып. 5. С. 555-556.

75. Розенгард В.И., Розенгард Е.В. Химические методы определения содержания ацетилхолина. // Лаборат. дело. 1972, N2. - С. 81-84.

76. Салей А.П. К механизму адаптивного натриевого аппетита // Вестн. ВГУ. Серия химия, биология. 2000. С. 134-137.-20487. Самойлович И.М. Фармакологический анализ серотонинчувствительных структур. Автореф. дисс. к.м.н. - Донецк. - 1966.

77. Сергеев П.В. Биохимическая фармакология. М.: Высшая школа, 1982. -340с.

78. Сергеева В.Е., Гордон Д.С. Люминесцентно-гистохимическая характеристика ранней реакции моноаминсодержащих структур тимуса на антигенные воздействия. Чебоксары. - 1992. - 352 с.

79. Смирнова В.И. Видовые особенности аутолюминесценции и адренергиче-ской иннервации почки кошки и крысы. Морфофизиология нервной и сердечно-сосудистой системы в норме и патологии, Чебоксары, 1974. С. 23-26.

80. Смирнова В.И. Люминесцентно-гистохимический анализ действия адрено-тропных препаратов и серотонина на почку. Автореф. дисс . к.м.н., Чебоксары, 1976, 24с.

81. Смирнова В.И., Аникин Г.Д. Анализ влияния мезатона на люминесцентные структуры почки. В кн.: Вопросы теоретической медицины. Чебоксары, 1976.-С. 78-84.

82. Стопек Д., Гомбош А., Сиротякова М. Адренергическая и холинергическая иннервация почек некоторых млекопитающих // Архив анатомии, гистологии и патологии. 1978, N9. - С. 37-43.

83. Трахтенберг И.М., СоваР.Е., ШефтельВ.О., Оникиенко Ф.А. Проблемы нормы в токсикологии (современные представления и методические подходы, основные параметры и константы) // Под ред. проф. И.М. Трахтенберга М.: Медицина, 1991.208с.

84. Тучек С. Синтез ацетилхолина в нейронах. / Пер. с англ. под ред. проф. Н.Н. Демина М.: Мир. - 1981. - 284с.

85. ЮО.Уразаев А.Х., Зефиров АЛ. Физиологическая роль оксида азота (обзор) // Успехи биологических наук. 1999. - Т. 30, N 1. - С. 54-72.

86. Федоров В.И. Современные представления о холинергическом влиянии на секрециюи активность ренина и ангиотензипревращающего фермента // Успехи физиол. наук. 2003. - Т. 34, № 1. - С. 63-77.

87. Федоров В.И. Холинергическое влияние на гемодинамику и экскреторные функции почки. // Успехи физиол. наук. 1998. - Т. 29, №4. - С. 42-54.

88. Федоров В.И. Холинергическое угнетение ангиотензин I конвертирующей реакции // Физиол. журн. им. И.М. Сеченова. 1992. - Т. 78, № 6. С. 79.

89. Физиология и патофизиология сердца: В 2 Т. Пер. с англ. / Под ред. Н. Сперелакиса. -М.: М., 1990.

90. Физиология кровообращения. Физиология сердца. (Руководство по физиологии) / Г.П. Конради, В.В. Глаголева, Ю.С. Чечулин и др. // Под ред. проф. Е.Б. Бабского. Л., Наука. - 1980. - 598с.

91. Филонова К.С. Нервы почек человека. В кн.: Материалы к макромикроскопии вегетативной нервной системы и желез слизистых оболочек и кожи. М.: Медгиз. 1948. - С. 83-120.

92. Фоменко Г.Ф., Аникин Г.Д. Содержание холинэстеразы в почках различных животных при изменениях водного режима // VI Поволжская конференцияфизиологов с участием биохимиков, фармакологов и морфологов. 1973. Т. 1. -С. 171.

93. Ю8.Фрёмтер Э. Механизмы транспорта кислот и оснвоаний в проксимальном канальце почки / В кн. Современные проблемы физиологии почек. Рига. 1991. С.30-36.

94. Швалев В.Н. Иннервация почек. М.: Наука, 1965. - 179с.

95. Шпильрейн М.И. О соотношении показателей холинэргической активности крови в норме // Лаб. дело. 1974, N4. - С. 230-207.

96. Шток В.Н. Головная боль. М.: М. 1988.

97. Ястребова С.А., Сергеева В.Е. Механизмы гидрокортизоновой иммуномо-дуляции биоаминной клеточной системы тимуса. Чебоксары. - 2000. 83с.

98. Abboud Н.Е. Kidney catabolism of histamine in the isolated glomeruli and tubules of the rat kidney // Kidney Int. 1983. - Vol. 24, N 4. - P. 534-541.

99. Abe Y. Intrarenal blood flow distribution and autoregulation of renal blood flow and glomerular filtration rate // Jap. Circulat. J. 1971. - V. 35. - P. 163-173.

100. Amenta F. Light microscope autoradiography of peripheral dopamine receptor subtypes. // Clinical & Experimental Hypertension. 1997 Jan-Feb. - V. 19, N 1-2-P. 27-41.

101. Amenta F., Ricci A., Tayebati S.K., Zaccheo D. The peripheral dopaminergic system: morphological analysis, functional and clinical applications // Ital. J. Anat. Embryol. 2002. - V.107, N 3. - P. 145-167.

102. Aperia A., Bertorello A., Seril. Dopamine causes inhibition of Na+/K+-ATPase activity in the rat proximal convoluted tubule segments. // Boll. Sok. Ital. Boil. Sper-1987.-V. 59, N5.-P. 356-361.

103. Arvidsson U., Riedl M., Elde R., Meister B. Vesicular acetylcholine transporter (VAChT) protein: a novel and unique marker for cholinergic neurons in the central and peripheral nervous systems // J. Сотр. Neurol. 1997. V. 378, N4. P. 454-467.

104. Bachmann S., Mundel P. Nitric oxide in the kidney: synthesis, localization, and function. // Am. J. Kidney Diseases. 1994 Jul. - V. 24, N 1. - P. 112-129.

105. Baer P.G., Navar L.G., Guyton A.C. Renal autoregulation, filtration rate, and electrolyte excretion during vasodilatation // Am. J. Physiol. 1970. - V. 19. -P. 619-625.

106. Bainbridge F.A. The influence of venouse filling upon the rate of the heart // J. Physiol. (London). -1915. V. 50. - P. 65-84.

107. Ball S.G., Lee M.R. The effect of carbidopa administration on urinary sodium excretion in man, is dopamine on intrarenal natriuretic hormone // Brit. J. Clin. Pharmacol. 1977. V. 4.-N6.-P. 115-119

108. Banks R.O., Fondacaro J.D., Schwaiger M.M., JacobsonE.D. Renal histamine Hi and H2 receptors: Characterization and functional significance // Am. J. Physiol. -1978.-V. 235. -F570-F575.

109. Barajas L., Muller J. The innervation of the juxtaglomerular apparatus and surrounding tubules: A quantitative analysis by serial section electron microscopy // J. Ultrastruct. Res., 1973. V. 43, N 1-2. - P. 107-132

110. Barajas L., Silverman A.J., Muller J. Ultrastructural localization of acetycholi-nesterase in the renal nerves // J. Ultrastruct. Res., 1974. V. 49, N 3. - P. 297-311

111. Baranano D.E., Ferris C.D., Snyder S.H. Atypical neural messengers // Trends Neurosci. 2001. - V. 24. - P. 99-106.

112. Barbour В., Hausser M. Intersynaptic diffusion of neurotransmitter // Trends Neurosci. 1997. V. 20. P. 377-384.

113. Bascal Z.A., Montgomery A., Holden Dye L. et al. Histochemical mapping of NADPH diaphorase in the nervous system of the parasitic nematode // Ascaris suum. Parasitology. 1996. - V. 110, N5. - P. 625-637.

114. Batulevicius D., Pauziene N., Pauza D.H. Topographic morphology and age-related analysis of the neuronal number of the rat intracardiac nerve plexus // Ann. Anat. 2003. - V. 185, N 5. - P. 449-459.

115. Bayer P.G., Navar L.G., Guyton A.C. Renal autoregulation, filtration rate, and electrolyte, excretion during vasodilatation // Am. J. Physiol. 1970. - V. 19. -P. 619-625.

116. Beck F.W.J, Prasad A.S., Kaplan J., Fitzgerald J.T., Brewer G.J. Changes in cytokines production and T cell subpopulations in experimentally induced zinc-deficient humans // Am. J. Physiol. 1997. - V. 272. - P. E1002-E1007.

117. Beierwaltes W.H. Nitric oxide participates in calcium-mediated regulation of renin release // Hypertension. 1994. - V. 21. - Suppl.l. - P. 140-144.

118. Beierwaltes W.H., Carretero O.A. Nonprostanoid endothelium-derived factors inhibit renin release // Hypertension. 1992. - V. 19. Suppl. 2. - P. 11-68.

119. Bertorello A., Aperia A. Effect of L-Dopa, dopamine, dihydroxyfenilacetic acid on Na+/K+-ATPase activity in rat proximal tubule segments. // Acta Physiol. Scand-1987.- V. 130, N 4. P. 571-574.

120. Bhardwaj R., Moore P.K. Endothelium-derived relaxing factor and the effects of acetylcholine and histamine on resistance blood vessels. // British J. Pharmacol.-1988 NoV.- V. 95. N 3. - P. 835-843.

121. Blandina P., Bacciottinin L., Giovannini M., Mannaioni P. H3 receptor modulation of the release of neurotransmitters in vivo / In The Histamine H3 Receptor. Leurs R.L., Timmerman H. eds. 1998. - P. 27-40.

122. Bornstein S.R., Yoshida-Hiroi M., Sotiriou S. et al. Impaired adrenal catecholamine system function in mice with deficiency of the ascorbic acid transporter (SVCT2) // FASEB J. 2003. - V. 17, N 13. - P. 1928-1930.

123. Borresen H.C. // Acta Chem. Scand. 1967. v. 21. p. 2463-2470.

124. Bredt D.S., Hwang P.H., Snyder S.H. Localization of nitric oxide synthase structurally resembles cytochrome P-450 reductase // Nature. 1991. - V. 352. -P. 714-718.

125. Bredt D.S., Snyder S.H. Nitric oxide, a novel neuronal messenger // Neuron. -1992.-V. 8.-P. 3-11

126. Brostrom C.O., Hunkeler F.L., Krebs E.G. The regulation skeletal muscle phos-phorylase kynase by Ca2+ // J. Biol. Chem. 1971. V. 246. P. 1961-1967.

127. Buffoni F. and Blaschko H. Benzylamine oxidase and histaminase: purification and crystallization of an enzyme from pig plasma // Proc. R. Soc. Lond. В Biol. Sci. -1964-65.-V. 161 P. 153-167.

128. Cavallotti C., Artico N., Cavallotti D. Occurrence of adrenergic nerve fibers and of noradrenaline in thymus gland of juvenile and aged rats // Immunol. Lett. -1999. -V. 70.-P. 53-62.

129. Chakravorti B.P. Are there chromaffin eels inside the ventricule of frog's // Indian J. Med. Sci. 1959. V. 13. - P. 311.

130. Corsini W.A., Hook J.B, Bailie M.D. // Circulat. Res. 1975. - VI. - V. 37. - P. 1523.

131. Cote F., Thevenot E., Fligny C. et al., Disruption of the nonneuronal tphl gene demonstrates the importance of peripheral serotonin in cardiac function // Proc. Natl. Acad. Sci.USA.-2003.-V. 100,N23.-P. 13525-13530.

132. Crick S.J., Anderson R.H., Ho S.Y., Sheppard M.N. Localisation and quantitation of autonomic innervation in the porcine heart II: endocardium, myocardium and epicardium // J. Anat. 1999. - V. 195. - P. 359-373.

133. Cross S.A.M., Even S.W., Rost F.W.D. A study of methods available for cyto-chemical localization of histamine by fluorescence induced with o-phtaldehyde or ac-etaldehyde // Histochemistiy. 1971. - V. 3. N 6. - P. 471-476.

134. Daniels M., Hauswirth W.// Science. 1971. V. 171. P. 675-677.

135. Dawson T.M., Bredt D.S., Fotuhi M. et al. Nitric oxide synthase and neuronal NADPH-diaphoraes are identical in brain and peripheral tissues // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1991. - V. 88. - P. 7797-7801.

136. De Castro-e-Silva E., Luz C.P., Marinho C.A., et al. Central administration of zinc increases renal sodium and potassium excretion in rats // Brain Res. 1999. - V. 845, N2.-P. 176-184.

137. De Michele M., Amenta F., Cavallotti C. Autoradiographic localization of muscarinic receptors within the rat kidney. // European Journal of Pharmacology 1989 Oct.- V. 10, N 169 (2-3). - P. 297-305.

138. Dick A.T. The control of copper storage in the liver of sheep by inorganic sulfate and molybdenum // Aust. Vet. J. 1953. - V. 29. - P. 233.

139. Dietrich H.J. Electron microscopic studies of the innervation of the rat kidney // Z. Anat. Entwickl. 1974, V. 145. - P. 169-186.

140. Dinerstein R.J., Henderson R.C., Goldberg L.I. et al. Histofluorescence tecniqes prowide evidence for dopamine-containing neuronal elements in canine kidney // Science. 1979. v. 205. - p. 497-499.

141. Dinerstein R.J., Jones R.T., Goldberg L.I. Evidence for dopamine-containing neurves // Fed. Proc. 1983. - v. 42, N13. - P. 3005-3008.

142. Do Q.B., Dandan N., Cardinal R., Page P. A study of autonomic innervation of the atrial septum by iso-integral mapping in dogs // Ann. Chir. 1996. - V. 50. -P. 659-666.

143. Donato M.T., Ponsoda X., O'Connor E., et al. Role of endogenous nitric oxide in liver-specific functions and survival of cultured rat hepatocytes // Xenobiotica. -2001.-V. 31,N5. -P. 249-264.

144. Duchene-Marullaz P., Arnnould R, Schaff G., Lavarenne J., Billaud J. Com-parasion des effects chronotrope, inotrope et dromotrope de l'excitation du stellaire droit chez le chien chloralose // C. R. Soc. Biol. (Paris). 1966. - V. 160. P. 15861589.

145. Duner H., PernowB. Determination of histamine in blood Mid urine by absorption on amberlite IRC-50 // Scand. J. Clin, and Lab. Invest. 1958. V. 10, N 3. -P. 233.

146. DunerH., PernowB. The correlation between the occurrence of histamine in blood and urine // Scand. J. Clin, and Lab. Invest. 1958. - V. 10, N 4. - P. 390.

147. Duner H., Pernow B. Urinary excretion of histamine in healthy human subjects // Scand. J. Clin, and Lab. Invest. 1956. - V. 8, N 4. - P. 296.

148. Durand G., Feger J., et al. Isolement du serum humain normal d'une proteine capable de diminuer Tactivite biologique de Г histamine sur Tileon isole de cobaye: Etude preliminuer du mode Taction // Biochemie. 1971. - V. 53, N 8. - P. 909.

149. Durand G., Feger J., et al. Etude de mode d'action du facteur plasmatique di-minuant Tactivite de histamine sur Tileon isole de Cobaye // Biochem. Pharmacol. -1973.-V. 22,N8.-P. 919.

150. Eisenhofer G., Aneman A., Friberg P. et al. Substantial Production of Dopamine in the Human Gastrointestinal Tract // J. Clin. Endocrinol. & Metab. 1997. - V. 82, N11.-P. 3864-3871.

151. Eisenhofer G. The role of neuronal and extraneuronal plasma membrane transporters in the inactivation of peripheral catecholamines // Pharmacol. Ther. 2001. -V. 91, N1.-P. 35-62.

152. Elenkov I.J., Wilder R.L., Chrousos G.P., Vizi E.S. The Sympathetic Nerve An Integrative Interface between Two Supersystems: The Brain and the Immune System // Pharmacol. Rev. 2000. - V. 52, N 4. - P. 595-638.

153. Eltze M., Ullrich В., Mutschler E. et al. Characterization of muscarine receptors mediating vasodilatation in rat perfused kidney // EuroP. J. Pharmacol. 1993. -V. 238.-P. 343-355.

154. Endlich K., Kuhn R., Steinhausen M. Visualization of serotonin effects on renal vessels of rats //Kidney International. 1993 Feb. - V. 43, N2. - P. 314-323.

155. Erspamer V. Peripheral physiological and pharmacological actions of indoleal-kylamines // Handbook of Experimental pharmacol. V. 19. - P. 245-359.

156. Evans S., Garg L.C., Meyer E.M. Synthesis and release of acetylcholine in the rabbit kidney cortex. // Life Sciences 1992 - V. 51, N 22. - P. 1699-1703.

157. Falck В., Hillarp N.A., Thieme G., Torp A. Fluorescence of catheholamines and related compounds condensed with formaldehyde // J. Histochem. and Cytochem. -1962.-V. 10.-P. 348-354.

158. Fellman J.H. Determination of acetylcholine: Its application in a study of presynaptic release and a choline acetyltransferase assay. // J. Neuro-chem. 1969. - P. 135-143.

159. Felten D.L., Felten S.Y., Carlson S.L., Olschowka J.A., Livnat S. Noradrenergic and peptidergic innervation of lymphoid tissue. // J. Immunol.-1985. V. 135. P. 755s-765s.

160. Forstermann U., Closs E.I., Pollock J.S. et al. Nitric oxide synthase isozymes, characterization, purification, molecular cloning and function // Hypertension. -1994.-V. 23.-P. 1121-1131.

161. Fiyckstedt J., Meister В., Aperia A. Control of electrolyte transport in the kidney through a dopamine- and cAMP-regulated phosphoprotein, DARPP-32. // J. Autonomic Pharmacol. 1992. - V. 12. - N 3. - P. 183-189.

162. Furchgott R.F., Zavadski S. The obligatory role of endothelial cells in relaxation of arterial smooth muscle by acetylcholine // Nature. 1980. - V. 288. - P. 373-376.

163. Gaddium J.H., Piracelli Z.P. Two kinds of tiyptamine receptor // Brit. J. Pharmacol. 1957. -V. 11. - P. 323-328.

164. Geller D.A., Lowenstein С J., Shapiro R.A. et al. Molecular cloning and expression of inducible nitric oxide dsynthase from human hepatocytes // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1993. - V. 90. - P. 3491-3495

165. Gfell В., Kloas W., Hanke W. Neuroendocrine effects on adrenal hormone secretion in carp (Cyprinus carpio) // General & Comparative Endocrinology.- 1997 Jun.- V. 106, N3.-P. 310-319.

166. Gibson E.P.,TurnbullJ.H.//J. Photochem. 1979. V. 11. P. 313-318.

167. Goldberg L.I., McDonald R.M., Zimmerman M.N. Sodium diuresis produced by dopamine in patient with cognestive heart failure // New Eng. J. Med. 1963. -V. 269.-P. 1060.

168. Grandes S., Gallego M.J., Riesco A. et al. Mechanism of renal effects of different agents simulating productiong of cGMP // Amer. J. Physiol. 1991. - V. 261. -P. HI 109-1114.

169. Gullo F., Ales E., Rosati B. et al., ERG K+ channel blockade enhances firing and epinephrine secretion in rat chromaffin cells: the missing link to LQT2-related sudden death? // FASEB J. 2003. - V. 17, N 2. - P. 330-332.

170. HafdiZ., Couette S., ComoyE. et al. Locally formed 5-hydroxytryptamine stimulates phosphate transport in cultured opossum kidney cells and in rat kidney // Biochemical Journal.- 1996- V. 320 (Pt 2). P. 615-621.

171. Hagege J., Richet G. Proximal tubule dopamine histofluorescecnce in renal slices incubated with 1-dopa // Kidney Int. 1985. - V. 27. - P. 3-8

172. Hamamori Y., Hoshijima M., Ohmori T. et al. Serotonin as a major serum factor inducing the phospholipase C-mediated hydrolysis of phosphoinositides in normal rat kidney cells // Cancer Research. 1988. - V. 48, N 23. - P. 6697-6702.

173. Hayakawa H., Hirata Y., Suzuki E. et al. Endotheliumderived relaxing factors in the kidney of spontaneously hypertensive rats // Life Sci. 1995. - V. 56. -PL401-PL408.

174. Haynes W.G., Hand M.F., Dockrell M.E. et al., Physiological role of nitric oxide in regulation of renal function in humans. // Amer. J. Physiol. 1997. - V. 272. - N 3, Pt2.-F364-71.

175. Heald J.I., Hollis T.M. Histidine decarboxylase-mediated histamine synthesis in glomeruli from rat kidneys // Am. J. Physiol. 1976.- V. 230. -V.5.-P. 1349-1353.

176. Hein M.S. Copper deficiency anemia and nephrosis in zinc-toxicity: a case report // S. D. J. Med. 2003. - V. 56, N4. - P. 143-147.

177. Hestrin S. The reaction of acetylcholine and other carboxylic acid derivates with hydroxylamine and its analytical application // J. boil. Chem. 1949. -V. 180. — P. 249.

178. Higgins C.B., Vatner S.F., Braunwald E. Parasympathetic control of the heart // Pharmacol. Rev. 1973. V. 25. P. 205-216.

179. Hill C., Lateef A.M., Engels K., Samsell L., Baylis C. Basal and stimulated nitric oxide in control of kidney function in the aging rat. //American Journal of Physiology. 1997 Jun. - V. 272, N 6 (Pt 2). - R1747-53.

180. Hine R.J. Keim N.L. Hegstrand L.R. Effect of total parenteral nutrition on histamine in the rat brain and other tissues // In Vivo. 1990. - V. 4, N 4. - P. 239-242.

181. Ho S.S., Yun J.C., Gill J.R., Jr. Kelly G.D. Keiser H.R. On the mechanism of renal vasoconstriction induced by acetylcholine in indomethacin-treated dogs // Renal Physiol.-1985.-V. 8.-P. 310.

182. Hope B.T., Vincent S.R. Histochemical characterization of neuronal NADPH-diaphorase // J. Histochem. Cytochem. 1989. - V. 37. - P. 653-661

183. Hope G.T., Michael G.S., Knigge K.M. et al. Neuronal NADPH diaphorase is a nitric oxide synthase // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1991. - V. 88. - P. 2811-2814.

184. Hsu J.M., Rubenstein B. Effect of zinc deficiency on histidine metabolism in rats // J. Nutr. 1982. - V. 12, N3. - P. 461-467.

185. Jungbluth D., Simon-Oppermann C., Schutz H., Gerstberger R., Simon E. Noradrenergic modulation of avian kidney function // Сотр. Biochem. Physiol. Сотр. Physiol. 1994. - V. 108, N 1. - P. 7-16.

186. KamataK., HosokawaM. Endothelial dysfunction in the perfused kidney from the streptozotocin-induced diabetic rat. //Research Communications in Molecular Pathology & Pharmacology 1997a Apr - V. 96, N 1. - P. 57-70.

187. KamataK., Hosokawa M. Characteristics of vasodilatation induced by cyclopia-zonic acid in the rat perfused kidney. //Research Communications in Molecular Pathology & Pharmacology 1997b May - V. 96 N 2. - P. 147-156.

188. Kawashima K., Fujii T. Extraneuronal cholinergic system in lymphocytes // Pharmacol. Ther. 2000. V. 86, N1. - P. 29-48.

189. Kawashima K., Oohata H., Fujimoto K., Suzuki T. Extraneuronal localization of acetylcholine and its release upon nicotinic stimulation in rabbits // Neurosci Lett 1989. V. 104, N3. - P. 336-339.

190. Kendall M.D., Al-Shawaf A.A. Innervation of the rat thymus glandn // Brain Behav. Immun. 1991. -V. 5. - P. 9-28.

191. KeyP.S., VaziriN.D., ChildesterM. Effect of H2-histamine receptor blockade and stimulation on urinary acidification // Gen Pharmacol. 1985. - V. 16, N6. -P. 621-623.

192. Knighton W.B., Giscas G.O., CallisP.R. // J. Phys. Chem. 1982. - V. 86. -P. 49-52.

193. Kobzik L., Reid M.B., Bredt D.S., Stamler J.S. Nitric oxide in skeletal muscle. Nature. 1994; V.372; 546-549.

194. Koelle G.B. Cytological distributions and physiological functions of choli-nesterase. In: Cholinestetrases and anticholinesterase agents. Ed. By G.B. Koelle. Handbuch der exper. Pharmacologie, Bd. 15. 1967b.

195. Kondo M. // Bull. Chem. Soc. Jap. 1976. - V. 49. - P. 2679-2682.

196. Kook Y.J., Kim K.K., Yang D.K. et al. Mechanism of renal effects of intracere-broventricular histamine in rabbits // Arch. Internationales de Pharmacodynamic et de Therapie. 1988, Jan-Feb. - V. 291. - P. 280-295.

197. Kozlov V.A., Ufukova A. Y., Tolmachev A.S., Suslikov V.L. Fluorescent method of Acetylcholine detection. // 20th Workshop The biological essentiality of macro and trace elements, Germany, Jena, 1-3 December, 2000. P. 895-899.

198. Koyama M., Seyedi N., Wai-Ping Fung-Leung et al. Norepinephrine Release from the Ischemic Heart Is Greatly Enhanced in Mice Lacking Histamine H3 Receptors // Mol. Pharmacol. 2003. - V. 63. - N 2. - P. 378-382.

199. Kranz A., Kendall M.D. von Gaudecker B. Studies on rat and human thymus to demonstrate immunoreactivity of calcitonin gene-related peptide, tyrosine hydroxylase and neuropeptide Y // J. Ana. 1997. - V. 191. - P. 441-450.

200. Kuchel O., Bun Т., Unger T. Dopamine sodium relationship: is dopamine a part of the endogenous natriuretics system? //Contributions to Nephrology. 1978. -V. 13.-N27.-P. 36.

201. Kuzu M.A., Koksoy C., Alacayir L. et al. Tromboxane synthase inhibitor, UK 38485, prevents renal injury in the rabbit isolated perfused kidney exposed to cold ischemia // Transplantation. 1995. - V. 59. - P. 1096-1099.

202. Lameris T. W., A.H. van den Meiracker, Boomsma F., et al. Catecholamine handling in the porcine heart: a microdialysis approach // Am. J. Physiol. Heart. Circ. Physiol. 1999. -V. 277. -H1562-H1569.

203. Laskin J.D., Heck D.E., Gardner C.R., Laskin D.L. Prooxidant and antioxidant functions of nitric oxide in liver toxicity // Antioxid Redox Signal. 2001. - V. 3, N2.-P. 261-271.

204. Lavender A.R., Aho I., Pullman T.N. Renal responses to acetylcholine // Proc. Soc. Exptl Biol. Med. 1965. - V. 119. - P. 887-892.

205. Levine L. Actions of vanadate on arachidonic acid metabolism by cells in culture // Prostaglandins. 1991. - V. 41, N1. - P. 7-19.

206. Lewis A.J., Nicholls P.J. The effect of circadian and seasonal variations upon histamine turnover in the rat // Pharm. Res. Communs. 1972. - V. 2. P. 4.

207. Li Т., Core K., Inquest R.J. Vasoconstrictor and vasodilator effects of serotonine in the isolated rabbit kidney // J. Pharmacol. & Experimen. Ther. 1992. - V. 263. — N3.-P. 928-932.

208. Lowenstein C.J., Glatt C.S., Bredt D.S. et al. Cloned and expressed macrophage nitric oxide synthase contracts with the brain enzyme // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1992.-V. 89.-P. 6711-6715.

209. Mark M.R., Domino E.F., Han S.S. et al. Effect of parasympathetic denervation on acetylcholine levels in the rat parotid gland. Is there an extraneuronal pool of acetylcholine? // Life Sci. -1983. V. 33, N12. - P. 1191-1197.

210. Marietta M.A. Nitric oxide: biosynthesis and biological significance // Trends. Boil. Sci. 1989. - V. 14. - P. 488-492.

211. Marsden P.A., Schappert K.T., Chen H.S. et al. Molecular cloning and characterization of human endothelial nitic oxide synthase // FEBS Lett. 1992. - V. 307. -P. 287-293.

212. Mattson D.L., Roman R.J., Cowley A.W. Role of nitric oxide in renal papillary blood flow and sodium excretion // Hypertension. 1992. - V. 19, N6. Part 2. -P. 766-769.

213. Melander A., Ericson L.E. Intrathyroideal amines in the regulation of thyroid activity // Rev. Physiol. Biochem. And Pharmacol. 1975. - P. 39.

214. Mezey E., Eisenhofer G., Harta G. et al. A novel nonneuronal cathecholaminer-gic system: Exocrine pancreas synthesis and release dopamine // Proc Nat. Acad. Sci. USA. 1996. - V. 93, N 19. - P. 10377-10382.

215. Mitchel G.A.G. Anatomy of the autonomic nervous system. Edinburg, London. -1953.

216. Mocchegiani E., Fabris N. Age-related thymus involution: zinc reverses in vitro the thymulin secretion defect // Int. J. Immunopharmacol. 1995. - V. 17, N 9. -P. 745-749.

217. Morcos S.K., Oldroyd S., Haylor J. Effect of radiographic contrast media on endothelium derived nitric oxide-dependent renal vasodilatation. //British Journal of Radiology.- 1997 Feb.- V. 70. P. 154-159.

218. Morgan J.P., Daniels M. // Photochem. Photobiol. 1980. - V. 31. - P. 101-104.

219. Muscholl E. Пресинаптические м-холинорецепторы и торможение высвобождения. В кн.: Освобождение катехоламинов из адренергических нейронов: Пер. с англ. / Под ред. Д.М. Патона. М.: Медицина, 1982. 352 с.

220. Napier L.D., Roerig S.C., Yoshishige D.A., Barron B.A., Caffrey J.L. Canine cardiac muscarinic receptors, G proteins, and adenylate cyclase after long-term morphine // J. Pharmacol. Exp. Ther. 1999. - V. 291, N 2. - P. 725-732.

221. Naveh Y., Weis P., Chung H.R., Bogden J.D. Effect of cimetidine on tissue distribution of some trace elements and minerals in the rat // J. Nutr. 1987. - V. 117, N9.-P. 1576-1587.

222. Nevekim A. Regulation of dopamine D2 receptors by sodium and pH // Mol. Pharmacol. 1991. - V. 39, N4. - P. 570-578.

223. Novotny G.E.K., Sommerfeld H., Zirbes T. Thymic innervation in the rat: A light and electron microscopical study // J. Сотр. Neurology. 1990. - V. 302. -P. 552-561.

224. Oner G., Bilgen I., Edremitlioglu M. et al. Dietary zinc modifies the characteristics of endothelial dilation in normozincemic rats // Biol. Trace Elem. Res. 2003. -V. 92, N2. - P. 123-138.

225. Palmer R.M.J., Ferrige A.G., Moncada S. Nitric oxide release accounts for the biological activity of endothelium-derived relaxing factor // Nature. 1987. - V. 327. -P. 534-526.

226. Pirola C.J., Alvarez A.L., Finkielman S. et al. Release of acetylcholine from isolated canine renal tissue // Am. J. Physiol. 1991. V. 260, N 2 (Pt 2). - F198-203.

227. Policard A. // Compt. Rend. Sol. Biologie. 1924. - V. 21. - P. 1423-1435.

228. Porter J.P., GanongW.F. Vasoactive intestinal peptide and renin secretion. // Annals of the New York Academy of Sciences 1988 - V. 527. - P. 465-477.

229. Prasad A.S. Zinc: The Biology and Therapeutics of an Ion // Ann. Intern. Med. -1996.-V. 125.-P. 142-144.

230. Prasad A.S., Meftah S., Abdallah J. et al. Serum thymulin in human zinc deficiency // J. Clin. Inves. 1988. - V. 82. - P. 1202-1210.

231. Quik M., Afar R., Geertsen S., et al. Thymopoietin, a thymic polypeptide, regulates nicotinic alpha-bungarotoxin sites in chromaffin cells in culture // Mol Pharmacol. 1990. - V. 37, N 1. - P. 90-97.

232. Rand M.J., Li C.G. Nitric oxide as a neurotransmitter in peripheral nerves: nature of transmitter and mechanism of transmission // Ann. Rev. Physiol. 1995. - V. 57.-P. 659-682.

233. Rankin J.I. An investigation of the catecholamines receptors // Quart. J. Microsc. Sci. 1954. V. 95 (2), N 30. - P. 217-230.

234. Richet G, Wahbe F, Hagege J, Wiemeyer W. Extraneuronal production of dopamine by kidney slices in normo and hypertensive rats // Clin. Exp. Hypertens. A-1987.-V. 9.-P. 127-134.

235. Sanada H., Yao L., Jose P.A., Carey R.M., Felder R.A. Dopamine D3 receptors in rat juxtaglomerular cells. // Clinical & Experimental Hypertension 1997- V. 19, N1-2.-P. 93-105.

236. Sanatani S., Chiu C., Nykanen D. et al. Evolution of Heart Rate Control After Transplantation: Conduction Versus Autonomic Innervation // Pediatr Cardiol. -2003. Published online: Dec 4.

237. Sandros K. // Acta chem. Scand. A. 1976. - V. 30, N 9. - P. 761-763.-223289. Sandstead H.H., Prasad A.S., Schulert A.R. et al. Human zinc deficiency, fin-ishocrine manifestations and response to treatment // Am. J. Clin. Nutr. 1967. - V. 20.-P. 2242.

238. Schafer U., Schneider A., Neugebauer E. Identification of a nitric oxide-regulated zinc finger containing transcription factor using motif-directed differential display // Biochim. Biophys. Acta. 2000. - V. 1494, N3. - P. 269-76.

239. Scholz H., Kurtz A. Involvement of endothelium-derived relaxing factor in the pressure control of renin secretion from isolated perfused kidney. // J. Clin. Invest.-1993.-V. 91, N3.-P. 1088-1094.

240. Schrauser G.N. The discovery of the essential trace elements: An outline of the history of biological trace element research. Biochemistry of the essential ultratrace elements // Ed. E. Friden. New York, London: Plenum Press. 1984. - P. 17-32.

241. Shahedi M., Laborde K., Azimi S. et al. Mechanisms of dopamine effects on Na-K-ATPase activity in Madin-Darby canine kidney (MDCK) epithelial cells. // Pflu-gers Archiv Europ. J. Physiol.- 1995.- V. 429, N 6.- P. 832-840.

242. Sharpe M.A., Ollosson R., Stewart V.C., Clark J.B. Oxidation of nitric oxide by oxomanganese-salen complexes: a new mechanism for cellular protection by superoxide dismutase/catalase mimetics // Biochem. J. 2002. - V. 366, Pt 1. - P. 97-107.

243. Shoji Т., Tamaki Т., Fukui K., Iwao H., Abe Y. Renal hemodynamic responses to 5-hydroxytryptamine (5-HT): involvement of the 5-HT receptor subtypes in the canine kidney //Europ. J. Pharmacol. 1989. - V. 171, N 2-3. - P. 219-228.

244. Silver R.B., Mackins C.J., Smith N.C.E. et al. Coupling of histamine H3 receptors to neuronal Na+/H+ exchange: A novel protective mechanism in myocardial ischemia // PNAS 2001. - V. 98. - N 5. - P. 2855-2859.

245. Silver R.B., Poonwasi K.S., Seyedi N. et al. Decreased intracellular calcium mediates the histamine H3-receptor-induced attenuation of norepinephrine exocytosis from cardiac sympathetic nerve endings // PNAS 2002. - V. 99. - N 1. - P. 501506.

246. Smith R.B. Atrioventricular and semilunar valve innervation in ship, pigs and cattle // Cardiovasc. Res. 1971. - V. 5. - P. 113-117.

247. Soares-da-Silva P., Serrao M.P., Vieira-Coelho M.A. A comparative study on the synthesis of the natriuretic hormone dopamine in OK and LLC-PK1 cells // Cell Biol. Int. 1996. - V. 20, N8. - P. 539-544.

248. Spinazzola A.J., Sherrod T.R. J. Pharmacol. Exptl. Therap. 1957. - V. 111. -P. 1-119.

249. Steinbeck G. Genesis, pathophysiology and clinical aspects of cardiac arrhythmias. Characterization of the risk patient / /Med. Klin. 1997. -V. 92. - P. 192-196.

250. Stock K., Westermann Т.О. Concentracion of norepinephrine, serotonine, histamine, and amino-metabolizing enzymes in mammalian adipose tissue // J. Lipid Res. 1963. -V. 4, N3. - P. 297.

251. Stoos B.A., Carretero O.A., Garvin J.L. Endothelial-derived nitric oxide sodium transport by affecting apical membrane channels in cultured collecting duct cells // J. Am. Soc. Nephrol. 1994. -V. 4. -P. 1855-1860.

252. Takahashi Т., Hisa H., Satoh S. Serotonin-induced renin release in the dog kidney // Source Europ. J. Pharmacol. 1991. - V. 193, N 3. - P. 315-320.

253. Takahashi Т., HisaH., Satoh S. Serotonin-induced vasoconstriction in dog kidney // J. Cardiovascular Pharmacol. 1992. - V. 20, N5. - P. 779-784.

254. TalibS., OkarmaT.B., Lebkowski J.S. Differential expression of human nicotinic acetylcholine receptor alpha subunit variants in muscle and non-muscle tissues. // Nucleic Acids Research. 1993. - V. 21, N 2. - P. 233-237.

255. Theiler K. The house mouse: Atlas of Embrionic development. Springer-Verl. NewYork. 1989.

256. Thomas C.E., Ott C.E., Bell D. et al. Glomerular filtration dynamics during renal vasodilatation with acetylcholine in the dog // Amer. J. Physiol. 1983. - V. 244. -P. F606-F611.

257. Tsushima H., Mori M., Matsuda T. Antidiuretic effects of alpha- and beta-adrenoceptor agonists microinjected into the hypothalamic supraoptic nucleus in a water-loaded and ethanol-anesthetized rat // Jpn. J. Pharmacol. 1985. - V. 39, N 3. -P. 365-374.

258. Ugaily-Thulesius L. Thulesius O. The effects of urine on mast cells and smooth muscle of the human ureter. // Urological Res. 1988b. - V. 16, N 6. - P. 441-447.

259. Ugaily-Thulesius L. Thulesius O., Sabha M. The effect of urothelial damage on ureteric motility. An ultrastructural and functional study. // British J. Urology. -1988a.-V. 62, N1.-P. 19-25.

260. Valtin H., Gennari F. Acid-bases disoders. Basic concepts and clinical management. Boston: Little, Brown, 1987. 196 p.

261. Vargas F., Osuna A., Fernandez-Rivas A. Abnormal renal vascular reactivity to acetylcholine and nitroprusside in aging rats // General Pharmacology- 1997-V. 28, N1.-P. 133-137.

262. Vatner S.F., Manders W.T., Knight D.R. Vagally mediated regulation of renal function in conscious primates // Amer. J. Phisiol. 1986. - V. 250. - P. H546-H549.

263. Verbeke M., Smollich В., van de Voorde J. et al. Beneficial influence of ketan-serin on autoregulation of blood flow in post-ischemic kidneys //J. Am. Society Nephrol. 1996. - V. 7, N4. - P. 621-627.

264. Vigny P., Ballini J.P. // Exited States in Organic Chemistry and Biochemistry. Reidel, 1977. P. 1.

265. Wang Z.Q., Siragy H.M., Felder R.A., Carey R.M. Intrarenal dopamine production and distribution in the rat. Physiological control of sodium excretion // Hypertension. 1997. - V. 29, N 1 (Pt 2). - P. 228-234.

266. Wegelins O., Asboe-Hansen J. Histamine and connective tissue // Acta rheuma-tol. Scand. 1957. - V. 3, N 1. - P. 18.

267. Weller A. // Ibid. -1956. Bd. 60. S. 1144-1147.

268. Williams J.M., Felten D.L. Sympathetic innervation of murine thymus and spleen: A comparative histofluorescence study // Anat. Rec -1981. V. 199. -P. 531-542.

269. Wyeth R.P., Temma K., Siefen E. et al. Negative inotropic actions of nitric oxide require high doses in rat cardiac muscle // Pfluegers Arch. 1996. - V. 432. -P. 678-684

270. Yamaguchi I., Yao L., SanadaH. et al. Dopamine D1A receptors and renin release in rat juxtaglomerular cells. // Hypertension. 1997. - V. 29, N 4. -P. 962-968.

271. Yamasaki S., Sakurai E., Hikichi N. et al. The disposition of (R)-alpha-methylhistamine, a histamine H3-receptor agonist, in rats // J. Pharmacy & Pharmacol. 1994 May. - V. 46, N 5. - P. 371-374.

272. Yokokoji K., Otsuka Y., Okabe Т., Kanmatsuse K. The role of nitric oxide in two-kidney, one-clip renovascular hypertensive rats. // Nippon Jinzo Gakkai Shi. Japanese J. Nephrol. 1997. - V. 39, N 4. - P. 395-409.

273. Young J.B. Regulation of urinary dopamine by protein and NaCl. A model of extraneuronal amine formation in kidney // Am. J. Hypert. 1990. - V. 3, N 6 (Pt 2). -P. 14S-17S.

274. Yun J.C.H., Bartter F.C., Kelly G.D., Ramwell P. Interrelationship between acetylcholine and prostaglandins in the control of sodium excretion and renin secretion in anesthetized dogs // Nephron. 1979. - V. 23. - P. 247.

275. Zoli M., Torri C., Ferrari R. et al. The emergence of the volume transmission concept // Brain Res. Rev. 1998. - V. 26. - P. 136-147.

276. Zwart R., Verhaagh S., Buitelaar M. et al. Impaired Activity of the Extraneuronal Monoamine Transporter System Known as Uptake-2 in Orct3/Slc22a3-Deficient Mice // Molecular and Cell. Biol. 2001. - V. 21, N 13. - P. 4188-4196.

Информация о работе

Козлов, Вадим Авенирович
доктора биологических наук
Чебоксары, 2006
ВАК 03.00.13

Диссертация

Локализация и состояние тканевых трансмиттерных систем в норме и эксперименте - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему Локализация и состояние тканевых трансмиттерных систем в норме и эксперименте ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Локализация и состояние тканевых трансмиттерных систем в норме и эксперименте"

Содержание диссертации, доктора биологических наук, Козлов, Вадим Авенирович

Введение Диссертация по биологии, на тему "Локализация и состояние тканевых трансмиттерных систем в норме и эксперименте"

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Козлов, Вадим Авенирович

Библиография Диссертация по биологии, доктора биологических наук, Козлов, Вадим Авенирович, Чебоксары

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Локализация и состояние тканевых трансмиттерных систем в норме и эксперименте
ВАК РФ 03.00.13, Физиология