Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Лабораторная оценка липид-транспортной системы при первичной гиперлипидемии и сахарном диабете первого типа

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Волкова, Татьяна Юрьевна

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Липид-транспортная система сыворотки крови человека ••

1.1.1 Характеристика липопротеидов сыворотки крови

1.1.2 Жирные кислоты: состав и роль в метаболизме липопротеидов

1.1.3 Методы определения холестерина липопротеидов высокой и низкой плотности

1.1.4 Методы определения концентрации и состава жирных кислот сыворотки крови

1.2 Характеристика липид-транспортной системы у больных сахарным диабетом 1 типа

1.2.1 Патогенетические факторы риска развития сосудистых осложнений при сахарном диабете 1 типа

1.2.2 Влияние инсулина на показатели липид-транспортной системы

1.2.3 Влияние жирных кислот на обмен углеводов

1.2.4 Нарушения липид-транспортной системы у больных сахарным диабетом 1 типа

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1 Клиническая характеристика больных

2.2 Методы исследования липид-транспортной системы

2-2.1 Биохимические методы исследования липид-транспортной системы

2.2.2 Принцип титрометрического озонирования двойных связей липидной фракции сыворотки крови

2.2.3 Принцип прямого определения холестерина липопротеидов высокой и низкой плотности

2.3 Методы статистического анализа

2.3.1 Стандартные методы статистического анализа

2.3.2 Методы оценки взаимосвязи количества двойных связей липидной фракции сыворотки крови и показателей липид-транспортной системы

2.3.3 Методы статистической оценки аналитических характеристик определения холестерина липопротеидов высокой и низкой плотности

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

3.1 Оценка аналитических характеристик определения холестерина липопротеидов высокой и низкой плотности •

3.2 Показатели липид-транспортной системы сыворотки крови у пациентов с первичной гиперлипидемией

3.3 Показатели липид-транспортной системы у больных сахарным диабетом 1 типа в условиях стационарной коррекции доз инсулина

Введение Диссертация по биологии, на тему "Лабораторная оценка липид-транспортной системы при первичной гиперлипидемии и сахарном диабете первого типа"

Актуальность проблемы

Пандемия сердечно-сосудистых заболеваний, охвативших практически все человечество, связывается с нарушениями липид-транспортной системы - увеличением уровня холестерина липопротеидов низкой и очень низкой плотности, снижением холестерина липопротеидов высокой плотности и апопротеина А-1 (14,88). Однако нарушения липидного обмена не всегда сопряжены с выраженными количественными изменениями традиционных параметров липид-транспортной системы, а могут проявляться изменением состава основных классов липидов и липопротеидов сыворотки крови. Эти нарушения заключаются в изменении соотношений насыщенных/ненасыщенных жирных кислот сыворотки крови; этерифицированного/свободного холестерина; апопротеинов А-1 и В; состава фосфолипидов (57,111). Высказано предположение, что атеросклеротические изменения связаны с нарушениями поступления в клетки полиненасыщенных эссенциальных жирных кислот (35) . Лабораторным тестом ненасыщенности сыворотки крови является суммарное количество двойных связей в липидной фракции (37).

В клинической практике показано, что при гиперлипопротеидемии формирование атерогенных изменений в значительной степени обусловлено составом жирных кислот, входящих в молекулы липидов разных классов липопротеидов сыворотки крови (58) . У пациентов с сахарным диабетом 1 типа традиционные показатели липид-транспортной системы не всегда выявляют нарушения липидного обмена, хотя заболеваемость и смертность от сердечно-сосудистых заболеваний в 4 и 2 раза выше, по сравнению с популяцией людей без диабета (8,5). В этой связи расширение комплекса методических приемов для дополнительной оценки липид-транспортной системы при первичных и вторичных дислипидемиях является по-прежнему актуальным.

Цель исследования - комплексная оценка показателей липид-транспортной системы у пациентов с первичной гиперлипидемией и у больных сахарным диабетом 1 типа в условиях стационарной коррекции доз инсулина.

Задачи исследования:

1. Оценить и сопоставить показатели липид-транспортной системы и концентрацию двойных связей липидной фракции сыворотки крови у пациентов с первичной гиперлипидемией и у больных сахарным диабетом первого типа.

2 - Изучить взаимосвязь показателей липид-транспортной системы и двойных связей липидной фракции сыворотки крови при первичной гиперлипидемии и у больных сахарным диабетом 1 типа, используя многопараметрические статистические методы.

3. Оценить динамику показателей липид-транспортной системы и уровень двойных связей у больных сахарным диабетом 1 типа при поступлении в стационар, через 10 и 20 дней подбора доз инсулина.

4. Оценить аналитические характеристики методов определения холестерина липопротеидов высокой плотности и холестерина липопротеидов низкой плотности для лабораторной интерпретации выраженных нарушений липид-транспортной системы.

Научная новизна:

На основе оценки показателей липид-транспортной системы и многопараметрического статистического анализа установлено, что количество двойных связей липидной фракции достоверно выше в группе пациентов с первичной гиперлипидемией и у больных сахарным диабетом 1 типа по сравнению с группой здоровых лиц. Показано, что увеличение уровня двойных связей при первичной гиперлипидемии имеет место при повышении показателей липид-транспортной системы, ггогда как у больных сахарным диабетом 1 типа увеличение уровня двойных связей наблюдается при нормальных значениях показателей липидного обмена.

Применение множественного регрессионного анализа для оценки взаимосвязи концентраций двойных связей липидной фракции сыворотки крови с показателями липидного обмена показало, что изменение уровня двойных связей в группе здоровых лиц и у пациентов с первичной гиперлипидемией обусловлено увеличением уровня фосфолипидов сыворотки крови (112 = 62%) и (К2 = 66%) соответственно. У больных сахарным диабетом 1 типа при поступлении в стационар не выявлена взаимосвязь между двойными связями и показателями липид-транспортной системы; на 10 день изменение числа двойных связей детерминируется уровнем фосфолипидов, общего и свободного холестерина (Я2=62%); на 20 день - уровнем общего холестерина (К2=56%). Практическая значимость:

Результаты сопоставления концентрации двойных связей липидной фракции сыворотки крови с показателями липид-транспортной системы у пациентов с первичной гиперлипидемией и у больных сахарным диабетом 1 типа позволяют предложить использование метода титрометрического озонирования двойных связей липидов сыворотки крови для дополнительной оценки нарушений липидного обмена.

Прямые методы определения холестерина липопротеидов высокой и низкой плотности могут быть рекомендованы для использования в практике клинико-диагностических лабораторий, как обладающие лучшими точностными характеристиками и позволяющие проводить обследование больных с гипертриглицеридемией.

Внедрение в практику:

Результаты диссертации используются при проведении занятий с курсантами на циклах повышения квалификации кафедры клинической лабораторной диагностики РМАПО (зав. кафедрой д.м.н., профессор В.В.Долгов). Методы оценки нарушений липид-транспортной системы внедрены в практику клинико-диагностической лаборатории клинической больницы им. С.П.Боткина МЗ г.Москвы (зав. КДЛ В.И.Коровина).

Положения, выносимые на защиту :

1. Концентрация двойных связей липидной фракции сыворотки крови в группе пациентов с первичной гиперлипидемией достоверно выше, чем в группе здоровых лиц. Уровень двойных связей липидов у больных сахарным диабетом 1 типа ниже, чем у пациентов с первичной гиперлипидемией, но выше по сравнению с группой здоровых лиц.

Применение множественного регрессионного анализа для сопоставления содержания двойных связей липидной фракции сыворотки крови с показателями липидного обмена позволило установить, что изменение концентрации двойных связей в группе пациентов с первичной гиперлипидемией и у здоровых лиц на 66% и 62% соответственно обусловлено вариацией уровня фосфолипидов сыворотки крови, тогда как у больных сахарным диабетом 1 типа к выписке из стационара концентрация двойных связей липидной фракции сыворотки крови детерминируется уровнем общего холестерина (К2=5б%). При поступлении в стационар у больных сахарным диабетом 1 типа увеличен уровень двойных связей липидной фракции, неэстерифицированных жирных кислот, фосфолипидов сыворотки крови, тогда как традиционные параметры липидного обмена находятся в пределах нормальных значений.

В процессе подбора доз инсулина у больных сахарным диабетом 1 типа изменения показателей липид-транспортной системы разнонаправлены: увеличивается уровень общего холестерина, эфиров холестерина, холестерина липопротеидов высокой и низкой плотности; снижается концентрация неэстерифицированных жирных кислот и двойных связей. Несмотря на увеличение общего холестерина, эфиров холестерина, холестерина липопротеидов низкой плотности в процессе стационарной коррекции доз инсулина, данные показатели имеют нормальные значения, тогда как уровень двойных связей липидов, несмотря на снижение, остается достоверно увеличенным.

Объем и структура диссертации

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Волкова, Татьяна Юрьевна

ВЫВОДЫ:

1. Концентрация двойных связей липидной фракции сыворотки крови достоверно выше в группе пациентов с первичной гиперлипидемией и у больных сахарным диабетом 1 типа по сравнению с группой здоровых лиц. Увеличение уровня двойных связей при первичной гиперлипидемии имеет место при повышении показателей липид-транспортной системы, тогда как у больных сахарным диабетом 1 типа увеличение уровня двойных связей наблюдается при нормальных значениях показателей липидного обмена.

2. При первичной гиперлипидемии выявлена высокозначимая корреляция между концентрацией двойных связей и уровнем общего холестерина, свободного холестерина, триглицеридов и фосфолипидов. Изменение ненасыщенности липидной фракции в группе здоровых лиц и у пациентов с первичной гиперлипидемией обусловлено увеличением уровня фосфолипидов сыворотки крови (К2=62%) и (112=66%) соответственно.

3. При поступлении в стационар у больных сахарным диабетом 1 типа не выявлена взаимосвязь между двойными связями и показателями липид-транспортной системы; на 10 день изменение числа двойных связей обусловлено вариацией уровня фосфолипидов, общего и свободного холестерина

К2=^б2%) ; на 20 день - изменением уровня общего холестерина (И.2 = 56%) .

При поступлении в стационар содержание двойных связей липидной фракции, фосфолипидов, неэстерифицированных жирных кислот сыворотки крови у больных сахарным диабетом 1 типа выше, чем в группе здоровых лиц, тогда как традиционные показатели липид-транспортной системы (общий холестерин, триглицериды, холестерин липопротеидов высокой и низкой плотности) имеют нормальные значения.

К 10 и 2 0 дню коррекции доз инсулина выявлено увеличение уровня холестерина, эфиров холестерина, холестерина липопротеидов высокой и низкой плотности и снижение концентрации двойных связей, неэстерифицированных жирных кислот и апопротеина В. Несмотря на снижение к выписке из стационара уровень двойных связей остается достоверно выше, чем в группе здоровых лиц.

Прямые методы определения холестерина липопротеидов высокой плотности и холестерина липопротеидов низкой плотности характеризуются высокой сходимостью и воспроизводимостью в сыворотке крови как с нормальным так и с патологическим содержанием липидов, что позволяет лабораторно интерпретировать выраженные нарушения липидного обмена.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Волкова, Татьяна Юрьевна, Москва

1. Агеева В.В., Красильникова Е.И., Зубина И.М., Шляхто Е.В. «Влияние глиформина на показатели липидного спектра крови и ПОЛ у больных ожирением» /Клиническая медицина, №10, 2000, с.46-49

2. Айвазян С.А., Мхитарян B.C. /Теория вероятностей и прикладная стаистика, М., изд. «Мир», 2001, с.396

3. Алмазов В.А., Благосклонная Я.В., Шляхто Е.В., Красильникова Е.И. /Метаболический Сердечно-сосудистый синдром, Изд-во С-Пб., 1999, с.175

4. Арутюнов Г.П. «Новые направления в лечении пациентов с исходно низким уровнем ХС ЛПВП», /Клиническая фармакология и терапия, 2000, №10, с.46-49

5. Балаболкин М.И., Диабетология, М., 2000, с.54

6. Балаболкин М.И., Креминская В.М. «Патогенез и профилактика сосудистых осложнений сахарного диабета» /Тер.архив, 1999, №10, с.5-12

7. Волчегорский И.А., Харченкова H.B. Фруктозамин, ЛПВП и степень дислипидемии у больных СД 1 типа с сосудистыми осложнениями" /Клин, лабор. диагностика, №1, 2003, с.14-17

8. Дедов И.И., Шестакова М.В., Максимова М.А. «Федеральная целевая программа «Сахарный диабет» /Методические рекомендации, Москва, 20 02, с.4 5

9. Долгов В.В., Титов В.Н., Творогова М.Г., Ройтман А.П., Шевченко Н.Г. «Лабораторная диагностика нарушений обмена липидов» рук.для врачей, М., 1999, с.3-4 7

10. Зелинский Б.А., Паламарчук A.B. /Проблемы эндокринологии, 1994, №2, с.14-17

11. Каширина Е.П., Брызгалина С.М. «Роль метаболических нарушений в лрогрессировании диабетической нефропатии у больных СД 1 типа» /Сборник н.т., 1999, с.350-351

12. Киселевский Ю., Оганесян Н., Костин Г., Конколь К., «Электрофоретические методы в лабораторной диагностике» /Метод, рек., Гродно, 1999, с.4-99

13. Климов А. П., Никульчева Н. Г. Липиды, липопротеиды и атеросклероз. /СПб.: Питер Пресс, 1995, с. 304

14. Климов А.Н., Никульчева Н.Г. «Обмен липидов и липопротеидов и его нарушения» рук-во для врачей, С.П-б., 1999, с.96

15. Климов А.Н. "Биохимия липидов и их роль в обмене веществ" М., 1981, с.45

16. Климов А.Н. «Липопротеиды плазмы крови: некоторые нерешенные и дискуссионные вопросы» Тезисы докладов YI симпозиума по биохимии липидов С-Пб., 1994, с.3-11

17. Когтева Г.С., Безуглов В.В. М., Биохимия, 1998, т. 63, с.6-15

18. Козлов С.Г., Лякишев A.A. «Дислипопротеидемии и их лечение у больных СД» Кардиология, №8, 1999, с.59-67

19. Колосова М.В., Новицкий В.В., Степовая Е.А., Кравец Е.Б. /Бюл.экспер.биологии, 2000, №3, с.306-609

20. Кольман Я., Рем К. /Наглядная биохимия, М., изд. «Мир» 2000, с.162

21. Левачев М.М. «Жиры рыб в диетологии ГЛП и гипертонии» М., Медицина, 1988, с.15

22. Лисицын Д.М., Поздняк Т.И., Разумовский С.Д. /Кинетика и катализ, 1976, т.17, №4, с.1049-1055

23. Лобачев А.Л. /Жирнокислотный состав сывороки крови у больных СД 2 типа, «Клинич.лабор.диагностика», 2001, с.13-15

24. Марри Р., Греннер Д., Мейес П., Родуэлл В. /Биохимия человека, М., изд. "Мир", 1993, т.1, с.238-255

25. Приказ МЗ РФ от 07.02.2000, №45 /Управление качеством клинических лаб. исследований. Нормативные документы, под ред. Меньшикова В.В., Москва-ЛАБПРЕСС, 2000, с. 152

26. Санфирова В.М., Титов В.Н., Рулин В.А. /Вопросы мед. химии, 1984, т.2, с.81-86

27. Сергиенко В.Т., Бондарева И.А. «Математическая статистика в клинических исследованиях» Москва, 2000, с.126-132

28. Соколов Е.И.,Зайчикова Щ.С. /Проблемы эндокринологии, 1996, №6, с.20-2629' Стентон Гланц /Медико-биологическая статистика, М., изд. «Мир», 2001, с.256

29. Титов В.Н. «Клиническая лабораторная диагностика» /Клиническая биохимия и кардинальные вопросы патогенеза атеросклероза, 2000, N'1, с. 3-9.

30. Титов В.Н. «Лаборатория», №9, 1998, с.3-5

31. Титов В.Н. «Атеросклероз как патология полиеновых жирных кислот» Москва, 2002, с.3-495

32. Титов В.Н., Лисицын Д.М., Амелюшкина В.А. «Определение двойных связей в липидах сыворотки крови методом титрования озоном: патофизиология и диагностическое знначение» /Клиническая лабораторная диагностика, №7, 2001, с.16-24

33. Титов В.Н. «Клиническая химия атеросклероза» /Клиническая лабораторная диагностика, №4, 1998, с.3-13

34. Титов В.Н. «Филогенез и становление транспорта в клетки жирных кислот» /Клиническая лабораторная диагностика, №3, 1999, с.3-7

35. Титов В.Н. «Альбумин, транспорт насыщенных жирных кислот и метаболический стресс-синдром» /Клиническая лабораторная диагностика, №4. 1999, с.3-10

36. Туркина Т.И., Марченко Л.Ф., Т.И.Позняк, Е.В. Киселева, М.И. Мартынова, Д.М. Лисицын «Исследование ненасыщенности липидов плазмы крови при сахарном диабете у детей» /Педиатрия, №2, 1991, с.22-2 5

37. Херхеулидзе П. Н. «Апопротеиды и липопротеиды сыворотки крови при сахарном диабете у детей» /Пробл. эндокринол, 1993, т.39, №4, с. 11-12.

38. Эндокринология под ред. Н.Лавина, пер. с англ., М. , 1999

39. Akanji А.О. Direct method for the measurement of LDL cholesterol levels in patients with chronic renal disease.-Nephron a comparative assessment, 1998, vol.79, p.154-61

40. Alaupovic P., Lee D., McConathy W.-Biochim. Biophys. Acta, 1972, vol.260, p.689

41. Beamont J.L., Carlson L.A., Cooper G.R., Fejfar Z., Fredrickson D.S., Strasser T. Classification of hyperlipidaemias and hyperlipoproteinemias.-Bull. WHO, 1970, vol.43, p.891-908

42. Branchi A., Rovellini A., Torri A., Sommariva D. Accurary of calculated serum LDL cholesterol for the assessment of coronary heart disease risk in NIDDM patients.-Diabetes Care, 1998, vol.21, p.1397-402

43. Burstein M. and Samaille J. Structure and function of the plasma lipoproteins and their receptors. Sur un dosage rapide du cholesterol lie aux a-at aux b-lipoproteins du strum.-Clin. Chim. Acta, 1960, vol.5, p.609

44. Chipkin S.R., Alter C.A., Yeager S.D. Self reported factors that affect glycemic control in college studentswith type 1 diabetes. -Diabetes educator, №26, 2000, p. 656666

45. Connor W.E. Nutr.-Am. J.Clin., 2000, v.71, p.171-175

46. Craber R., Sumida C., Nunez E.A.-J. Lipid. Res, 1994, v. 9, p.91-116

47. Джеймс Р.Соуэрс, Мэлвин А. Диабет и сердечно-сосудистые заболевания, Международный мед. журнал, №11-12, 1999, с.619-626

48. Cullen P., Fobke M., Tagelkamp К., Meyer К., Assmann-J.Lipid Res, 1997, v.38, p.401-409

49. Ericsson U.J., Borg L. Diabetes and embrionic malformations role of substrate-induced free-oxygen radical production for dysmorphogenesis in cultured rat embryosDiabetes, 1993, vol 42, p.411-419.

50. Fain J.N., Leffler C.W., Bahouth S.W. /J.Lipid.Res, 2000, v. 41, p.1689-1694

51. Friedewald W.T., Levy R.I., Fredrickson D.S. Estimation of the concentration of low density lipoprotein cholesterolin plasma, without use of the preparative ultracentrifuge.-Clin. Chem., 1972, vol.18, p.499-502

52. Galtier-Dercure F., Biron C., Vies M., Bourgeois V., Sohved J-F., Bringer J. Vascular complications of diabete mellitus what role for phospholipids binding antibodies.-Lupus, 7(7), 1998, p. 469-474

53. Ginsberg H.N.-Clin.Invest., 2000, v.106, p.453-458

54. Goldberg R.B. Hyperlipidemia and cardiovascular risk factors in patients with type 1 diabetes.-Amer.J. of Managed Care, 6(13), 2000, S682-691

55. Grainer W.F.and Kostner G.M. Glycated low-density lipoprotein and atherogenesis the missing link between diabetes mellitus and hypercholesterolamia.-Evropean Journal of Clinical investigation, vol 27, №6, 1997, p.457-540

56. Guallar E., Aro A., Jimener J. Omega 3 Fatty Acids in Adipose Tissue and Risk of miocardial infarction.-Arterioscler Thromb.Vasc Biol, 1999, 19, p.1111-1118

57. Haban P., Simonic R., Klvanova I., Ozbin L., Zidekova E. Bratisl.Lek Listy, 1998, v.99, p.37-42

58. Halliwell B. Eds L.Packer et al.-Antioxidants in Diabetes Menegements, New York, 2000, p.33-35

59. Harris N., Galpchian V., Thomas J., Iannotti E., Law T., Rifai N. Three geneation of HDL cholesterol assayscompared with ultracentrifugation/dextrn sulfat-Mg method. Clin Chem, 1997, vol.43-5, p.816-823

60. Hartnett M.E., Stratton R.D. et all.-Diabetes Care, 2000, v.23, №2, p.234-240

61. Hennes M. , Dua A., Kisselban K. Effect of free fatty acids and glucose on splanchnic insulin dynamics.-Diabetes, 1997, v.46, p.57-62

62. Herley J.H., Tsujishita Y., Pearson M. A. Curr. Opin. Biol., 2000, v.10, p.737-743

63. Hernandez C., Chacon P., Garcia-Pascual L., Simo R. Differential influence of LDL cholesterol and triglycerides on Lp(a). Concentrâtions in Diabetic patients.-Diabetes Care, vol.24, №2, 2001, p.350-355

64. Illingworth D., Durrington P. Dyslipidemia and atherosclerosis: how much more evidence do we need?. -Curr. Opin. Lipidol., 1999, v.10, p.383-386

65. Jack-Hays M.G., Xie Z., Wang Y.,Huang W.H.,Askari A. -Biochem.Biophys.Acta, 1996, v.1279, p.43-48

66. Johannes, Aufenanger and Bernd Zawta LDL Cholesterol : Don t guess.Measure it.-Clin.lab, 1999, vol.11-12, p.617-622

67. Johansen K. Hyperlipidemia ved diabetes mellitus.patogenese, diagnose og medikamentel behanding.-Ugeskr.Laeger, 1990, v.152, p.584-588r

68. Johnson R., McNutt P., MacMahon S., Robson R. Use of the Friedewald formula to estimate LDL cholesterol in patients with chronic renal failure on dialysis.- Clin Chem, 1997, vol.43, p.2183-4

69. Judith R., McNamara, Jeffrey S.Cohn, Peter W.F.Wilson Calculeted Values for LDL Cholesterol in the Assesment of Lipid Abnormalities and Coronary Disease Risk».- Clin.Chem, 36/1, 1990, p.36-42

70. Kahn B.B., Flier J.S.-J.Clin Invest, 2000, v.106, p.473-481

71. Kamisaka Y., Noda N. Intracellular transport of phosphatidic acid and phosphatidylcholine int bodies: use of fluorescent lipids to study lipid-body formation.-Biochemical Society Transactions, 2000, 28(6).

72. Kane J., Ed. by Fuster V., Ross R., Topol E., LippincottRaven Press Publishers, Philadelphia. -Atherosclerosis and coronary artery disease, 1996, p.89-1030

73. Kar Manoj, Chakraborti A.S.-Indian J.Exp.Biol, 1999, v.37, №2, p.190-1920

74. Kariko K., Rosenbaum H., Kuo A., Zurier R.B., Barnathan E.S.-FEBS Lett, 1995, v.361, p.118-122

75. Keen H. Therapevtic objectives and their practical achievement in type 2 diabetes.-J.Of diabetes and its complications, 14(4), 2000, p.180-184

76. Krishna M.I., Das U.N.-Nutrition, 2001, v.17,p.126-151

77. L.Lagrost et al.-Atherosclerosis, 1999, vol.142, p. 395402

78. Leary E.T., Tjersland G., Warnic Gr. Evaluation of the Genzyme Immunoseparation Reagent for direct quantitation of LDL cholesterol.-Clin Chem, 1997, 39, p.1124.

79. Lehto S., Ronnemaa T. Poor Glycemic control predicts coronary heart disease events in patients with type 1 diabetes without nephropathy.-Arterioscler Tromb. Vase., 1999, №19, p.1014-1019

80. Levy R., Bonnel M. , Ernst N.-J. Amer. Diet Ass, 1971, vol.58, p.40

81. Levy R.-Clin.Chem., 1981, vol.27, p.653

82. Li K.M., Wilcken D.E., Dudman N.P. Effect of serum lipoprotein (a) on astimation of LDL cholesterol by the Friedewald formuLa.-Clin. Chem., 1994, vol.40, p.571-3

83. Lichtenstein A.H., Schwab U.S.-Atherosclerosis, 2000, v.150, p.227-243

84. Liu Y.G., Tornheim K., Leahy J.L.-J. Clin.Invest, 1998, v. 101, p.1870-1875

85. Lovejoy J.C., Champagne C.M., Smith S.R., De Lany J.P., Bray G.A., Lefevre M., Denkins Y.M., Rood J.C.- Metabolism, 2001, v.50, p.86-92

86. Luc G. at al. Value of HDL cholesterol, Apo A~I, lipoprotein A-1 and lipoprotein A-I/A-II in Prediction of Coronary Heart Disease.-Atheriosclerosis Thromb. and Vase. Biol., 2002, vol. 22, p.11-55

87. Mahley R.W., Innerarity T.L., Rail S.C., Weisgraber K.H. J. Lipid Res, 1984, vol.25, p.1277-1294.

88. Mantzioris E., Cleland L.G., Gibson R.A., Neumann M.A., Demasi M., James M.J.,-Am.J.Clin Nutr, 2000, v.72, p.42-48

89. Marcovina S.M., Gaur V.P., Albers J.J. Biologocal variability of cholesterol, trigliceride, LDL and HDL cholesterol, lipoprotein (a) and apolipoproteins A-I and B. -Clin. Chem., 1994, vol.40, p.574-78

90. Mariano S., Juan P. Influence of intermediate-Density Lipiproteins on the Accuracy of the Friedwald Formula.-Clin Chem, 1991, vol.37/8, p.1394-1397

91. Markovic S., Dordevic J., Majkic-Singh N.-Clin lab, 1999, v.95, p.665-668

92. Marz W., Siekmeier R., Scharnagl H., Seiffert U., Gross W. Fast lipoprotein chromatography : new method jf analysis for plasma lipoproteins.-Clin Chem, 1993, vol.39, p.2276-81

93. Matas C., Cabre M. , La Ville A., Prats E., Joven J., Turner P. Limitations of the Friedewald formula for estimating LDL cholesterol in alcoholics with liver desease.-Clin Chem, 1994, vol.40, p.404-6

94. Mateucci E., Ciampietro 0. Oxidative stress in families of type 1 diabetic patients.-Diabetes care, 23(8), 2000, p.1182-1186

95. Mather M.K., Thelen A. P., Pan D.A., Gamp D.B.J.Biol.Chem, 1999, v.274, p.32725-32732

96. Mayer E.J., Newman B.O., Quesenberry C.P., Selby J.V.Diabetes Care, 1993, v.16, p.1459-1469

97. McMilan D.E. -Biorheology, 1999, v.36, №1-2

98. Methods of Enzimatic Analisis /Ed.H.U. Bergmeyer.-weinheim, 1985, v.8

99. Miida T., Nakamura Y., Mezaki T., Hanyu. O, Maruyama S., Horikawa Y. LDL cholesterol and HDL cholesterol concentretions decrease during the day.-Ann Clin Biochem, 2002, 39 (Pt3), p.241-249.

100. Nauck M. , Grazini S., Jaruch J., Bruton D. A new Liquid Homogeneous Assay for HDL Cholesterol Determination Evaluated in Seven Laboratories in Europe and the United States.-Clin. Chem. Lab. Med., 1999, 37(11/12), p.1067-1076

101. Nuck M., Marz W., Wieland H. Hew immunoseparation based homogeneous assay for HDL-cholesterol compared with three homogeneous and two heterogeneous methods for HDL-cholesterol . -Clin . Chem., 1998, vol.44, p.1443-51

102. Oestergaad, Parving, Hans-Henrik, Hovind, Peter, Tarnow, Li. Elevated vascular endothelial growh facthor in type 1diabetic patients diabetic nephropathy.-Kidneyinternational-supplement, 2000, vol.75, p.S56-61

103. Okada M., Matsni H., Ito Y., Fujiwata A., Inano K-J. LDL-cholesterol can be chemicaly measured : A new superior method.- Of Lab. Clin. Med., 1998, v.l32(3), p.195-201

104. Olefsky J.M.-J.Clin.Invest, 2000, v.106, p.467-472107. popper D.A., Shiau Y.F., Reed M.-Amer.J.Physiol, 1985, v. 249, p. 161-167

105. Rifai N., Warnic G.R., Mc Namara J.R., Belceher J.D., Grinstead G.F, Frantz I.D. Measurment of LDL cholesterol in serum: a status report.-Clin. Chem., 1992, vol.38, p.150-160

106. Robertson R., Robertson P, Friesinger G.et al. Platelet aggeregates in peripheral and coronary-sinus blood in patients with spontaneous coronary artery spasm.-Lancet, 1980, v.2, p.829-831

107. Ruiz-Gutierrez V., Stiefel P., Villar J., Garcia-Donas M.A.,Acosta D., Carneado J.-Diabetologia, 1993, v.36, p.850-856

108. Seppo L., Tapani R., Kalevi P., Markku L.- Arterioscler Thromb Vase Biol, 1999, vol.19: p.1014-1019

109. Shulman I.-J.Clin.Invest, 2000, v.106, p.171-176

110. Sumida C., ValleteG., Nunez E.A.-Acta Endocrinol, 1993, v.129, p.348-355

111. Thorne S., Mullen M., Clarkson P., Donald A. Deanfield J. E. Early endothelial dysfunction in adults at risk from atherosclerosis: different responses to L-arginine.-J. Am. Coll. Cardiol, 1998, Vol. 32, №.1, p.110-116

112. Veikko S., Hannu V., Tatu A. Absorption and Syntesis in Nondiabetic Middle-Aged Men.-Diabetes Miettineu, 1996, vol.45, p.755-761.

113. Velle T., Koivisto V., Reunanen A.-Diabetes Care, 1999, v. 22, p.575-579

114. Weir G., Sharma A., Zangen D., bonner-Weir S. Transcription factor abnormalitites as a cause of a b-cell dysfunction in diabetes, a hypotesis-Acta Diabetologia, 1997, v.34, p.174-184