Коррекция пробиотиками микроэкологических нарушений кишечника у пациентов после эрадикационной терапии Helicobacter pylori

Мустафина, Регина Ришатовна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Коррекция пробиотиками микроэкологических нарушений кишечника у пациентов после эрадикационной терапии Helicobacter pylori
ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Автореферат диссертации по теме "Коррекция пробиотиками микроэкологических нарушений кишечника у пациентов после эрадикационной терапии Helicobacter pylori"

На правах рукописи

МУСТ АФИНА РЕГИНА РИШАТОВНА

КОРРЕКЦИЯ ПРОБИОТИКАМИ МИКРОЭКОЛОГИЧЕСКИХ

НАРУШЕНИЙ КИШЕЧНИКА У ПАЦИЕНТОВ ПОСЛЕ ЭРАДИКАЦИОННОЙ ТЕРАПИИ HELICOBACTER PYLORI

03.00.07 - микробиология

Автореферат

диссертации на соискание уч<

uuj1G1785 кандидата биологически 00

Уфа-2007

003161785

Работа выполнена в Федеральном государственном учреждении науки "Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии" Роспотребнадзора

Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор

Горелов Александр Васильевич

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор

Киреева Наиля Ахняфовна, кандидат медицинских наук Тимербаева Рина Харисовна

Ведущая организация: Государственное учреждение Научно - исследовательский институт вакцин и сывороток им И.И Мечникова Российской академии медицинских наук

Регионального диссертационного совета КМ 002 124 01 при Президиуме Академии наук Республики Башкортостан по адресу 450014 г Уфа, ул Новороссийская, 105

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке филиала «Иммуно-препарат» Федерального государственного унитарного предприятия «Научно-производственное объединение по медицинским иммунобиологическим препаратам «Микроген» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации по адресу 450014 г Уфа, ул Новороссийская, 105

Защита диссертации состоится <

2007 г в 14 ч на заседании

Автореферат разослан «

2007 г

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор медицинских наук

Лукманова К. А

Общая характеристика работы

Актуальность проблемы

В современной гастроэнтерологии существуют стандартизированные методы диагностики и лечения заболеваний желудочно-кишечного тракта (ЖКТ), ассоциированных с Helicobacter pylon (Hp) Лечение заболеваний, ассоциированных с Hp, регламентируется рядом национальных и международных рекомендаций, которые формируются на основе

• данных о распространенности в популяции штаммов Hp, резистентных к антибиотикам - компонентам лечения,

• результатов крупных мультицентровых исследований,

• длительных наблюдений за больными, получивших курс антихеликобактер-ной терапии (анти-Нр-терапии) [Исаков В А, Доморадский И В , 2003]

В настоящее время «стандартом» анти-Нр-терапии являются тройные схемы эрадикации продолжительностью не менее 7-10 дней на основе ингибиторов протонной помпы (ИПП) и двух антибиотиков, рекомендованные группой европейских гастроэнтерологов во главе с Р Malfertheiner и получившие известность как Маастрихтский консенсус (1996, 2000, 2005) Но при реализации стратегии тотальной эрадикации Hp исследователи столкнулись со стремительно нарастающей вторичной резистентностью Hp к используемым антибактериальным препаратам и, как следствие, с развитием частых и клинически значимых осложнений в виде дисбактериозов кишечника и/или антибиотик-ассоциированных диарей [Щербаков П JI и др , 1998, Успенский Ю П и др , 1998, Шептулин А А , 1999; Donowitz M et al, 1995, Fennerty MB et al, 1998]

Анализ результатов исследований не позволяет со всей очевидностью судить о первичности или вторичности дисбактериоза в генезе гастродуоденальной патологии, ассоциированной с Hp По данным некоторых авторов, хеликобактериоз сам по себе можно рассматривать как дисбиоз слизистой оболочки желудка (СОЖ) [Щербаков ПЛ, Воробьев А А и др, 1998] Успешная эрадикация Hp позволяет снизить процент рецидивов заболевания [Ивашкин В Г, Лапина Т Л , 1996, Лапина Т Л , 1999, de Boer WA et al, 1995], однако частота побочных эффектов при проведении антихеликобактерной терапии достигает 63 % [Van der Hülst R W M et al, 1996], a y 3-10 % больных служит причиной преждевременного прекращения лечения [Bell G D et al, 1992, Laine L et al, 1996] Среди больных, которым был проведен курс эрадикации Hp, на 63,4 % увеличилась частота дисбактериоза П степени и на 90,7 % - частота дисбактериоза Ш степени [Щербаков П Л, Воробьев А А и др, 1998]

Все вышеизложенное указывает на необходимость разработки современной концепции диагностики и лечения гастродуоденальной патологии, ассоциированной с Hp, и дает основания для поиска новых подходов к решению проблемы хеликобак-териоза Одним из направлений является внедрение в широкую практику ускоренных и информативных методов диагностики рассматриваемых во взаимной связи функциональных и микроэкологических нарушений ЖКТ [Воробьев А.А и др, 2004, Бельмер С В и др, 2006, Кондракова OA и др, 2006] Оценка микробиоценоза кишечника должна содержать достаточно полную характеристику структурного и микроэкологического статуса, структуру основных в функциональном плане при-

стеночных популяций, а также отражать интегральную метаболическую активность микрофлоры [Минушкин ОН и др , 1999, Циммерман Я С , 2004, Богданова Е.А и др , 2006, Cremolum F et al, 2002]

Отсутствие систематизированных данных по обоснованию адекватной диагностики и терапии заболеваний позволило акцентировать наше внимание на изучении микроэкологического и метаболического статуса кишечника у больных с гастродуо-денальной патологией ЖКТ, ассоциированной с Hp, и проблеме комплаентности ан-тихеликобактерной терапии, так как в известной мере несоблюдение схемы лечения определяется побочными действиями средств анти-Нр-терапии

В целом ряде экспериментальных исследований было показано, что культура или препараты, изготовленные из микроорганизмов-пробионтов, могут подавлять жизнедеятельность Hp, так как известно, что механизм терапевтического действия штаммов - пробионтов связан с конкурентной адгезивностью, иммуностимулирующими свойствами, образованием антимикробных веществ и т д [Шендеров Б А, 2001, Чупринина Р П , 2002, Хавкин А И , 2006, Rolfe R D, 2000, Mukai Т, Asasaka Т et al, 2002, Nam H, Ha M et al, 2002] Но вклад пробиотиков в уничтожение микроорганизма Hp, ответственного за развитие и рецидивы гастрита, гастродуоде-нита и язвенной болезни, пока еще полностью не доказан Следует отметить, что подобные антихеликобактерные средства находятся только в самом начале их клинической разработки, и поэтому результаты их использования нередко противоречивы [Исаков В А , Доморадский И В , 2003] В некоторых клинических исследованиях был показан положительный эффект, в то время как другие испытания не дали однозначного ответа Поэтому пока сложно высказать определенное мнение и в связи с этим, по рекомендациям отечественных и зарубежных исследователей, клинические испытания в этом направлении должны быть продолжены [А И Хавкин, 2006, G Reíd, 2003]

Цель исследования

Изучение структурного, микроэкологического и метаболического статуса кишечника у больных с гастродуоденальной патологией, ассоциированной с Helicobacter pylon, на фоне эрадикационной терапии и применения пробиотиков

Задачи исследования

1 Изучить особенности количественного и качественного состава микробиоценоза кишечника у больных с гастродуоденальной патологией, ассоциированной с Helicobacter pylon

2 Определить метаболическую активность микрофлоры кишечника по содержанию летучих жирных кислот (ЛЖК С2-Сб) у больных с хеликобактер-ассоциированными заболеваниями желудочно-кишечного тракта

3 Изучить влияние сопутствующих заболеваний желудочно-кишечного тракта на количественное и качественное содержание летучих жирных кислот (Сг-Сб) в фекалиях детей с хеликобактер-ассоциированными гастродуденитами

4 Оценить динамику микроэкологических, метаболических и копрологических изменений микробиоценоза кишечника у больных на фоне эрадикационной терапии и применения пробиотиков

5 Изучить влияние пробиотиков на состояние слизистой оболочки толстой кишки у больных с хеликобактер-ассоциированной патологией желудочно - кишечного тракта

6 Оценить возможность применения моно- и поликомпонентных пробиотиков для коррекции нарушений микробиоценоза кишечника при эрадикации Helicobacter pylon

Научная новизна

Впервые изучена метаболическая активность микрофлоры толстого кишечника по содержанию летучих жирных кислот (Сг-Сб) в фекалиях больных с гастродуоде-нальной патологией, ассоциированной с Helicobacter pylon

Впервые проведен сравнительный анализ содержания летучих жирных кислот (Сг-Сб) у детей с неосложненными хроническими хеликобактер-ассоциированными гастродуоденитами и у детей с хроническими гастродуоденитами и сопутствующей патологией желудочно-кишечного тракта (дискинезией желчевыводящих путей, патологией поджелудочной железы, нарушениями моторно-эвакуаторной функции кишечника)

На основании результатов бактериологических, биохимических, копрологиче-ских и эндоскопических исследований проведена оценка состояния микробиоценоза у больных с гастродуоденальной патологией, ассоциированной с Helicobacter pylon Подобраны критерии комплексного изучения микробиоценоза кишечника у больных с хеликобактер- и/или антибиотик-ассоциированным дисбиозом

При эрадикации Helicobacter pylon обоснована целесообразность применения поликомпонентных пробиотиков для коррекции нарушений микробиоценоза кишечника Включение в схему терапии гастродуоденальной патологии, ассоциированной с Helicobacter pylon, трехкомпонентного пробиотика линекс на основе анти-биотикорезистентных штаммов-пробионтов, снижает риск развития антибиотик-ассоциированных дисбактериозов кишечника и/или диарей

Научно-практическая значимость работы

Полученные данные о структуре микроэкологических и метаболических изменений микрофлоры кишечника при заболеваниях гастродуоденальной зоны у взрослых и детей, ассоциированных с Helicobacter pylon, ориентируют врачей на проведение направленных адекватных мероприятий для профилактики побочных эффектов эрадикационной терапии

Для оценки эффективности проводимой эрадикационной терапии подобраны критерии комплексного изучения микробиоценоза кишечника у больных с хелико-бактер- и/или антибиотик-ассоциированным дисбиозом

Метаболический фактор регламентирован как один из критериев оценки микроэкологических нарушений и эффективности проводимой терапии у больных с патологией желудочно-кишечного тракта, ассоциированной с Helicobacter pylon На основании результатов количественного и качественного изучения метаболитов анаэробных бактерий (летучих жирных кислот) появилась возможность интегральной оценки состояния микрофлоры кишечника у больных с гастродуоденальной патологией, ассоциированной с Helicobacter pylon, в режиме реального времени

Эрадикация Helicobacter pylon антибиотиками широкого спектра действия (курс не менее 7 дней) направлена также на селективную деконтаминацию кишечника и является первым этапом коррекции дисбактериоза

Предложены способы коррекции микробиоценоза кишечника человека в составе эрадикационной терапии, обеспечивающие снижение частоты дисбиотических осложнений При коррекции хеликобактер- и/или антибиотик-ассоциированных дисбиозов доказана эффективность трехкомпонентного пробиотика линекс в сравнении с монокомпонентными препаратами

Внедрение результатов исследования в практику

Материалы диссертации использованы в разделе «Коррекция микроэкологических нарушений» монографии «Микрофлора пищеварительного тракта» (под ред А И Хавкина) — М Фонд социальной педиатрии, 2006 Монография предназначена для педиатров, терапевтов, гастроэнтерологов и семейных врачей

Основные положения, выносимые на защиту

1 Патология желудочно-кишечного тракта, ассоциированная с Helicobacter pylon, вызывает количественные и качественные изменения микроэкологии толстой кишки Параметры микробных компонент биотопа толстого кишечника обладают довольно свободным варьированием, но для кишечного микробиоценоза при хели-кобактер-ассоциированной патологии выявлен определенный принцип формирования с превалированием роста условно-патогенных микроорганизмов определенных родов и семейств

2 Определение метаболической активности анаэробной микрофлоры по содержанию летучих жирных кислот (С2-С6) в кале является биохимическим маркером, позволяющим охарактеризовать структурные и функциональные нарушения кишечного микробиоценоза в режиме реального времени

3 Параметры биохимических изменений в кишечнике при гастродуоденальной патологии, ассоциированной с Helicobacter pylon, могут быть введены в качестве критериев своевременной диагностики, назначения и оценки эффективности лечебной коррекции хеликобактер- и/или антибиотик-ассоциированных дисбактериозов

4 Эрадикационная терапия способствует селективной деконтаминации кишечника и может рассматриваться как первый этап коррекции дисбактериоза кишечника, обусловленного инфекцией Helicobacter pylon

5 Назначение моно- и поликомпонентных пробиотиков в составе комплексной эрадикационной терапии препятствует усугублению дисбактериоза кишечника, значительно снижает побочные действия в виде антибиотик-ассоциированных дисбактериозов и/или диарей

6 Бактерийный поликомпонентный препарат линекс, содержащий антибиотико-резистентные штаммы представителей облигатного биоценоза ЖКТ, рекомендован для включения в схемы эрадикационной терапии

Апробация работы

Материалы диссертации представлены и обсуждены на ряде научных форумов 13-м конгрессе детских гастроэнтерологов России "Детская гастроэнтерология 2006" (Москва, 2006), 5-м конгрессе детских инфекционистов России "Актуальные вопросы инфекционной патологии и вакцинопрофилактики" (Москва, 2006), 9-м международном Славяно-Балтийском научном форуме "Санкт - Петербург - Гастро - 2007" (Санкт - Петербург, 2007), юбилейной Российской научной конференции с международным участием, посвященной 175-летию со дня рождения С П Боткина (Санкт - Петербург, 2007) Основные положения диссертации обсуждены на заседании клинического отделения детей ФГУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора (г Москва, март 2007 г )

Публикации

По теме диссертации опубликовано семь научных работ, из них одна в центральной печати

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 158 страницах, иллюстрирована 30 таблицами, 15 рисунками Работа состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, четырех глав собственных исследований, заключения, выводов и практических рекомендаций Список литературы включает 202 источников (134 отечественных и 76 зарубежных)

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Материалы и методы исследований

Группы больных Обследовано две возрастные группы пациентов

- в возрасте от 24 до 46 лет (средний возраст (34±0,5) года), страдающие язвенной болезнью желудка (ЯБЖ) - 51, язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки (ЯБ ДПК) - 79 Всего в открытое контролируемое рандомизированное исследование вошли 130 пациентов 89 мужчин, 41 женщина,

- в возрасте от 6 до 16 лет (средний возраст 11,8 лет), страдающие хроническим гастродуоденитом (ХГД) - 104 Всего в открытое контролируемое рандомизированное исследование вошли 66 мальчиков, 48 девочек

Взрослые после завершения обследования и получения согласия были разделены на 4 группы (основные I, П, Ш и сравнения) по методу рандомизирования и в течение 7 дней получали эрадикационную терапию (тройная схема 1-й линии), включающую рабепразол (париет) 20 мг 2 раза в день, кларитромицин в дозе 500 мг 2 раза в день и амоксициллин в дозе 1000 мг 2 раза в день (схема А), основная I группа в сочетании с эрадикационной терапией получала линекс по 2 капсулы 3 раза в день (схема Б), основная II группа в сочетании с эрадикационной терапией получала лактобактерин по 5 доз 3 раза в день (схема В), основная Ш группа в сочетании с эрадикационной терапией получала бифидумбактерин по 5 доз 3 раза в день (схема Г) После завершения эрадикационной терапии больные основных групп I, П, Ш продолжили прием пробиотиков еще в течение 3 недель

Дети после завершения обследования и получения согласия были разделены на 2 группы (основную и контрольную) по методу рандомизирования, которые в течение 7 дней получали эрадикационную терапию (тройная схема 1-й линии), включающую омепразол 2 раза в день, кларитромицин 2 раза в день и амоксициллин 2 раза в день в возрастных дозировках (схема А), основная группа в сочетании с эрадикационной терапией получала линекс в возрастной дозировке (схема Б)

Критериями исключения из исследования являлись лечение антибиотиками и висмутсодержащими препаратами за 1 мес до исследования, непереносимость препарата, отказ от приема препарата, наличие тяжелых сопутствующих заболеваний, необходимость дополнения лечения назначением других препаратов, влияющих на состав кишечной микрофлоры, а также сомнения, сможет ли больной продолжить лечение после выписки из стационара в амбулаторных условиях

Всем пациентам перед началом исследования были проведены клинический осмотр и лабораторная диагностика (1-й осмотр) В дальнейшем больные основных групп в составе антихеликобактерной терапии в течение 1-й недели получали про-биотики, после окончания курса 7-дневной антихеликобактерной все пациенты были обследованы повторно (2-й осмотр), основные группы продолжали прием пробиотиков еще 3 недели Спустя 3 недели все группы были обследованы в третий раз (3-й осмотр)

Питательные среды использовали набор коммерческих селективных и дифференциально-диагностических питательных сред (ФГУП «НПО «Микроген» МЗ РФ, филиал НПО «Питательные среды» г Махачкала, Manufactured by «ЬюМепеих», Франция и др) Диагностические наборы «Энтеротест24» («Lachema», Чехия), «API 20С» («ЬюМепеих», Франция)

Пробиотики для исследований использовали пробиотики, зарегистрированные в Российской Федерации лактобактерин, бифидумбактерин, линекс

Таблица 1 - Пробиотики, применяемые для лечения больных с гастродуоде-нальной патологией, ассоциированной с Helicobacter pylori

Пробиотик Состав Специфическая активность, КОЕ/доза

Лактобактерин (Россия) Лиофильно высушенная биомасса живых бактерий производственного штамма Lactobacillus plantarum 8Р-ЗА He менее 2x109

Бифидумбактерин (Россия) Лиофильно высушенная биомасса живых бактерий производственного штамма Bifidobacterium bifidum 1 Не менее 107

Линекс (Словения) Лиофильно высушенная биомасса живых бактерий производственных штаммов Bifidobacterium infantis v hberorum, Lactobacillus acidophilus и Enterococcus faecium Каждого штамма не менее 1,2x107

Бактериологические исследования заключались в исследовании видовой и родовой принадлежности микрофлоры Анализ микрофлоры кишечника осуществляли по общепринятым методикам согласно приказу МЗ СССР № 535 от 22 апреля 1985 г [Методические указания по применению унифицированных микробиологических методов исследования в клинико-диагностических лабораториях] Для определения стадий дисбактериоза кишечника использовали разделение больных в зависимости от степени нарушений кишечной микрофлоры [классификация дисбактериоза по Ф Н Рябчук и др , 1988]

Определение концентраций ЛЖК (Сг-Сб) в фекалиях проводилось методом газожидкостного хроматографического анализа, основанным на разделении веществ в потоке газа-носителя на гетерогенизированных поверхностях адсорбционных колонок благодаря различным скоростям адсорбционно-десорбционных процессов [Иконников НС и др, 1999, Кондракова О А, Дубинин AB и др , 2002 ] В кале были определены ЛЖК С2-С6 (С2 - уксусная, С3 - пропионовая, 1С4- изомасляная, С4 - масляная, 1С5- изовалериановая, С5 - валериановая, iC6- изокапроновая и С6 - капроновая) Копрологический анализ кала осуществляли по общепринятой методике [Нейменов Ю М, 1972 ] Для эндоскопических исследований использовали биопта-ты слизистой оболочки толстой кишки (СОТК), полученные от пациентов, которым требовалось проведение ректороманоскопического исследования, до и после проведения комплексной терапии антихеликобактерными препаратами и пробиотиками (таблица 1) В биоптатах СОТК учитывали плотность воспалительного клеточного инфильтрата в собственной пластинке, клеточный состав инфильтрата по степени убывания в нем тех или других клеток (лимфоцитов, плазмоцитов, макрофагов, эо-зинофильных и нейтрофильных гранулоцитов)

Статистическую обработку фактического материала проводили общепринятыми методами вариационной статистики [Ашмарин И П , Воробьев А А, 1962] и на персональном компьютере с помощью программы "Statistica 6" StatSoft USA Определяли среднюю арифметическую (М), стандартную ошибку средней арифметической (т) Оценку значимости различий средних арифметических проводили с использованием критерия Стьюдента (t) и уровня значимости (Р) Различия считали статистически значимыми при Р<0,05

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Исследование микрофлоры толстого кишечника у больных с гастродуоденальной патологией, ассоциированной с Helicobacter pylori

Дисбиотические нарушения до проведения эрадикационной терапии выявлены у 122 (93,85 %) из 130 обследованных пациентов в возрасте от 24 до 46 лет и у 99 (95,2 %) из 104 обследованных детей Дисбактериоз кишечника I степени установлен у 18,5 % больных, дисбактериоз П степени - у 39,91 % больного, у 35,26 % отмечались признаки дисбактериоза кишечника Ш степени Степень выраженности дисбактериоза, как правило, соответствовала тяжести течения основного заболевания Жалобы на метеоризм, ощущение переливания или урчания в животе предъявляли 75,4 % пациентов, запоры и чувство неполного опорожнения кишечника выявлены у 43,08 % больных, жидкий стул более 3 раз в сутки - у 18,46 % больных, неустойчивый стул - у 56,92 % пациентов У 10 % пациентов не было ни запоров, ни диареи

Таблица 2 - Частота выделения и среднее количество основных представителей кишечной микрофлоры в 1 г кала больных с язвенной болезнью, ассоциированной с Helicobacter pylon

Микроорганизмы Биоценоз у больных ЯБ Показатели у здоровых лиц

частота обнаружения,% содержание (lg КОЕ/г) частота обнаружения,% содержание (lg КОЕ/г)

Анаэробная ассоциация - 95-99 % общее количество бифидобакгерий бактероидов клосгридий (сульфатредуцирующих) 30,8±3,0** 20,6±2,0** 12,5±1,0** 6,8±0,1** 8,0±0,3* 6,0±0,2* 98,0t 1,0 90,0±3,0 60,0±4,0 8,6±0,б 9,2±0,5 4,6±0,4

Общее количество лактобацилл 15,1±3,0** 5,8±0,1 96,0±1,0 6,9±0,3

Аэробная ассоциация - 1,5-5 % Кишечные палочки с типичными свойствами с измененными биологическими свойствами (лактозонегативные) гемолизирующие 90,6±5,0 6,8±0,5* 100 8,5±0,5

48±0,5 5,6±0,3* 50,0±4,0 4,5±0,4

12,4±1,0 5,3±0,4 0 0

Бактерии рода Proteus 15,8±0,8** 6,1±0,5** 2,0±0,5 3,4±0,2

Другие цитратассимилирующие эн-теробактерии 23,1±2,5** 5,0±0,4 3,0±0,5 4,3±0,3

Клебсиеллы 26,3±3,3** 5,0±0,5* 8,9±0,5 2,8±0,2

Неферментирующие бактерии 7,2±0,9** 5,0±0,3 2,0±0,5 3,9t0,4

синегнойные палочки 1,9±0,1 4,0±0,2 0 0

Энтерококки (фекальные стрептококки) Гемолитические 68,4±2,0** 6,1±0,7 80,2±2,0 5,6±0,5

3,7±0,5 9,2±0,5 0 0

Стафилококки коагулазоположительные 53,3±3,0** 5,6±0,6** 15,0±3,0 3,2±0,3

16,8±0,7 4,3±0,3 0 0

Пептосгрептококки 33,8±2,2* 8,0±0,4* 55,0±5,0 6,4±0,6

Вейлонеллы 6,3±0,5** 8,6±0,5** 23,0±3,0 4,7±0,7

Грибы рода Candida 25,5±1,0 5,3±0,4 0 0

Примечание - * - различие с контролем статистически значимо (р<0,05)

** - различие с контролем статистически значимо (р<0,01)

На нервом этапе исследования мы провели оценку состояния микроэкологии содержимого толстой кишки (СТК) у больных в возрасте от 24 до 46 лет с ЯБЖ и ЯБ ДГТК, ассоциированной с Hp r сравнении с микробным пейзажем практически здоровых лиц (таблица 1).

В результате проведенных исследований установлено, что больные с тетроду од спальной патологией, ассоциированной с Hp, имели значительные изменения в фекальной микрофлоре, В первую очередь наблюдались изменения количественного содержания представителей анаэробной ассоциации: среднепопу л анионная концентрация бифидобактерий в СТК составляла (6,8±0,1) lg КОЕ/г (р<0,01) при частоте встречаемости (30,8±3,0) %, наблюдалось резкое снижение частоты встречаемости бактероидов - (20,6±2,0) % у больных с Hp- инфекцией (норма - (90,0±3,0) %) и су л ьфатре ду ци ру ю ш их клостридий (р<0,01).

Всего из 130 проб фекалий выделены 663 штамма (St.) микроорганизмов, из них анаэробов Bifidobacterium sp. и Lactobacillus sp. - 149 (22,5 %) St., представителей аэробной и факультативно-анаэробной микрофлоры - 428 (64,5 %) St., а также дрожжеп о лобных (с учетом рода Candida) и плесневых грибов — 86 (13 %) St. В общем количестве изолятов равный или практически равный удельный вес приходится на долю Bifidobacterium sp., Lactobacillus sp., E. coli, E.faecalis, E. faecium и других микроорганизмов - представителей семейства Enterobacteriaceae, а также дрожже-полобных и плесневых грибов. Это свидетельствует о значении бактерий семейства Enterobacteriaceae в развитии нарушений микробиоценоза СТК у больных с гастро-дуоденальной патологией, ассоциированной с Hp. Среди представителей семейства Enterobacteriaceae наибольшая частота встречаемости отмечена для рода Klebsiella". 7,5 % от всех изолированных St, с преобладанием Klebsiella pneumoniae -S3 (5 %) St. Изоляты рода Klebsiella составили 44,5 % от общего количества бактерий семейства Enterobacteriaceae. Удельный вес рода Enterobacter составил 5,3 % от всех выделенных культур и 35,6 % от St. семейства Enterobacteriaceae (рисунок 1).

Otrobecter sp. 2,1

Serrana sp.; / Morgamua

Klebsiella sp. 44,5

1.6 X X/ sp-4-7

y Proteus sp.. 11,3

Enterobacter sp.; 353

Рисунок 1 - Процентное соотношение микроорганизмов семейства

Enterobacteriaceae, выделенных из СТК больных ЯБЖ и ЯЬ ДПК

Задача следующего этапа состояла в получении общей характеристики состояния микробиоценоза СТК у больных ЯБЖ и ЯБ Д[ 1К. Анализ данных показал, что в изученной группе больных концентрация Bifidobacterium sp. в СТК чаще (82,7 %

случаев) составляла 107 и менее КОЕ/г, снижение Lactobacillus sp менее 10б КОЕ/г отмечалось у 86,7 % Установлено, что одновременное отсутствие микроорганизмов вышеперечисленных родов не наблюдалось ни в одном случае, но практически в 100 % случаев у обследованных лиц определялось снижение содержания в кишечнике индигенных бактерий родов Bifidobacterium и Lactobacillus

Общее количество кишечной палочки колебалось в широких пределах - от полного отсутствия у 4 (5,2 %) больных до 109 КОЕ/г у 14,3 % больных Вместе с тем, только у 12,8 % пациентов содержание Е coli оказалось в границах принятой нормы (106 - 107 КОЕ/г), а пониженное (10б и менее КОЕ/г) - у 72,9 % Рассматривая атипичные формы Е coli, необходимо отметить, что лактозонегативная Е coli в количестве, превышающем 10 % от содержания общего уровня кишечной палочки, была обнаружена у 100 % пациентов , Е coli Hly*с - у (8±4) % в концентрации 106 КОЕ/г

Дрожжеподобные, плесневые грибы и грибы рода Candida были обнаружены у 45 % пациентов, из них у 29,8 % - в концентрации 103-107 КОЕ/г, а у 8,3 % высевали ассоциации дрожжеподобных и плесневых грибов Грибы рода Candida выделены у 25,2 % больных, в том числе у 25,5 % - в концентрации выше 105 КОЕ/г

Энтерококки дифференцировались по видам Е faecium, faecalis, Е faecalis Hly+ Их удельный вес в общем количестве выделенных St составил соответственно 14,1, 15,6 и 3,7 %, а количественное содержание колебалось от 0 до 108 КОЕ/г Так, Е faecalis в концентрации, принятой за норму (105-10б КОЕ/г) выявили у 17,1 %, ниже нормы - у 13,2 %, выше нормы - у 69,7 % Содержание Е faecium выше нормы было у 55,4 % больных Гемолитическая форма Е faecalis обнаружена у 3,7 % больных в концентрации 109 КОЕ/г

Всего было выделено 33 штамма микроорганизмов рода Staphylococcus, что составило 4,9 % от всех выделенных штаммов Из них у 17 % пациентов обнаружили S aureus в концентрации 104-105 КОЕ/г, у остальных - группу коагулазонегативных стафилококков, преимущественно S epidermidis - в концентрации 102-105 КОЕ/г у 26,9 % больных

В СТК у подавляющего большинства пациентов с ЯБЖ и ЯБ ДПК (75-94 %) представлены следующие микроорганизмы Bifidobacterium sp - 107 КОЕ/г и менее, Lactobacillus sp - 101 - 10б КОЕ/г, Е coli - 106 КОЕ/г и менее, Е faecalis - 106 КОЕ/г и более, Е faecium - 106 КОЕ/г и более, семейство Enterobacteriaceae (преимущественно Klebsiella - Enterobacter sp) - 101 - 106 КОЕ/г, дрожжеподобные (с учетом рода Candida) и плесневые грибы - 101 - 105 КОЕ/г; род Staphylococcus - 101 - 103 КОЕ/г

Изучение реального значения патологического состояния в популяционной вариабельности микроэкологии СТК позволило установить, что в данном случае патологическое состояние само приводит к определенным изменениям микробного пейзажа Несмотря на довольно свободное варьирование микробных компонент СТК, наблюдалось резкое снижение частоты встречаемости бифидо-, лактобактерий, бактероидов и сульфатредуцирующих клостридий (р<0,01) Основные закономерности дисбаланса кишечной микрофлоры заключаются в уменьшении содержания обли-гатной анаэробной микрофлоры, увеличении количества кишечных палочек с измененными биологическими свойствами, энтерококков (в т ч гемолизирующих форм), грибов, представителей семейства Enterobacteriaceae (преимущественно Klebsiella,

Proteus, Enterobacter sp.). Соотношение анаэробов к аэробов ъ исследованных пробах фекалий составило 1:4 (норма 1:100-1:1000).

Таким образом, на основании результатов проведенных исследований можно Сделать выводы, что патологический процесс (хсликобактер-ассоциированные язвенная болезнь или гастриты и гастродуодешпы) следует отнести к мощным эндогенным факторам изменчивости микробиологического фенотипа С'ГК. Изменения биотопа толстого кишечника, выявленные до проведения эрадикационной терапии, доказывают первичность ди с бактериоза и генезе заболеваний ЖКТ, ассоциированных с Пр. Антибактериальная терапия при эраликации лишь усугубляет дисбиоти-ческие сдвиги.

Сравнительная оценка действия л а кто- и б ифидос оде ржащ их пробиотиков в составе комплексной эрадикациоиной терапии на структурные и микроэкологические показатели микробиоценоз а кишечника

Следующим этапом нашей работы было изучение особенностей микроэкологических нарушений кишечника у больных ЯБ, ассоциированной с Нр, до и после эра-дика циошюй терапии и применения моно- и поли компонентных пробиотиков. Целесообразность исследований обоснована в первую очередь побочными эффектами эрадикационной терапии, вызванными угнетением представителей нормобиоценоза, углублением степени дисбактериоза и подавлением ингибиторами протонной помпы кислотообразующей функции желудка с последующим увеличением степени обсеменения слизистых оболочек желудка и двенадцатиперстной кишки Пр.

Общее кол-во Грибы Бифидобактерии Лактобактерии

Рисунок 2 - Содержание в фекалиях некоторых представителей кишечной микрофлоры (в Щ КСШ/г) у больных с хели ко б актер-ассоциированной язвенной болезнью до проведения эрадикационной терапии (1 проба)

Как видно из рисунка 2, статистической значимости различий в содержании некоторых представителей кишечного биоценоза в СТК у больных с хеликобактер-ассоцинрованной язвенной болезнью как основной группы I, так и группы сравнения при первом осмотре не выявлено. Снижение количества лакто- и бифидобакте-рий до начала эрадикационной терапии во всех исследуемых группах по сравнению

с нормой (р<0,01) взаимодействовало с ассоциативным ростом условно-патогенных микроорганизмов

Эрадикационная терапия, проведенная по тройной схеме в течение 7 дней (схема А), привела к угнетению (2 проба) ряда микроорганизмов - представителей как облигатного биоценоза, так и патогенных и условно-патогенных штаммов, более выраженному в группе сравнения Исходно выраженный во всех группах дефицит бифидобактерий (на 1-2 lg КОЕ/г в сравнении с нормой при частоте встречаемости 25,6 % в группе сравнения и частоте встречаемости 27,9, 30,5 и 31,5 % в группах основная I, П и Ш соответственно) усугублялся к окончанию эрадикационной терапии (в группе сравнения на 3 lg КОЕ/г, в основной группе I - на 1,5 lg КОЕ/г, в группах П и Ш - на 2 lg КОЕ/г) Частота встречаемости бифидобактерий к окончанию эрадикационной терапии составляла 29,5 % в группе сравнения и 55,9; 42,5 и 49,5 % в группах основная I, II и Ш соответственно

Содержание лактобактерий в группах основная I, П к окончанию эрадикационной терапии статистически значимо отличалось от содержания лактобактерий в группе сравнения (р<0,05) По-видимому, более высокая обсемененность образцов лактобактериями в группах, получавших, наряду с эрадикационной терапией, лакто-содержащие пробиотики из антибиотикорезистентных штаммов, связана, в первую очередь, с введением в организм в процессе лечения антибиотикоустойчивых лактобактерий Процент встречаемости в группах сразу после окончания эрадикационной терапии отличался значимостью различий от 14,8 % в группе сравнения до 22-32 % в основных (р<0,05)

Установлена статистическая значимость различий между показателями содержания общего уровня кишечной палочки и увеличением доли лактозонегативных и гемолизирующих эшерихий до начала эрадикационной терапии (р<0,01) Анализ результатов проведенных исследований позволил выявить статистическую значимость различий между содержанием лактозонегативных и гемолизирующих эшерихий Доля лактозонегативных эшерихий в группе сравнения к окончанию эрадикации (2 проба) составляла 42,1 % (в сравнении с исходным уровнем повысилась на 3,7 % (р>0,05), в основных группах I, П и Ш доля лактозонегативных эшерихий увеличилась на 9,2, 7,3 и 6,1 % соответственно)

Доля гемолизирующих эшерихий, наоборот, к окончанию эрадикации в основных группах I, П и Ш статистически значимо уменьшилась в сравнении с группой сравнения (р<0,001) При применении линекса в сочетании с эрадикационной терапией (группа основная I) доля гемолизирующей кишечной палочки снизилась почти в 6 раз при незначительном увеличении процента встречаемости (7,9 % до эрадикации и 8,6 % после), при применении лактобактерина (группа основная П) - доля гемолизирующей кишечной палочки снизилась в 3 раза (частота встречаемости 13,4 % до эрадикации и 12, 6 % - после), при применении бифидумбактерина (группа основная Ш) - доля гемолизирующей кишечной палочки снизилась в 2,3 раза (частота встречаемости 10,1 % до эрадикации и 12,3 % - после)

Помимо этого, установлено, что эрадикационная терапия приводит к снижению на 1 lg (КОЕ/г) содержания гемолизирующих форм рода Staphylococcus Наличие гемолизирующих форм микроорганизмов в кишечнике, как известно, находится в прямой корреляции с глубиной дисбиотических сдвигов У пациентов с язвенной болезнью, ассоциированной с Hp, во всех исследуемых группах процент встречае-

мости в фекальном ми кробиоценозе стафилококка гемоптирующего составлял в среднем 10 %, уровень обсемененности варьировал в пределах 4-5.

Эрадикания Нр приводила к снижению гемолизирующега стафилококка на 1 причем статистически значимого различия по уровню обсеменен но сти при проведении эрадикании по схемам Л, Б, В, Г выявлено не было (р>0,05). Однако процент встречаемости стафилококка гемолизирующего в группах основная I, II и Щ отличался Статистически значимой динамикой положительной направленности; к концу эрадикации процент встречаемости в группе основная I уменьшился в 2,3 раза, в группе основная II - в 1,6 раза, в 1руппе основная Ш - в 2 раза (группа сравнения -увеличение процента встречаемости в 2 раза

В динамике при проведении эра ли кацион н ой терапии прослеживалась положительная направленность изменений фекального микробиоценоза, подтверждающая теорию «наслаивания» этапа эрадикации Пр при терапии ЯБ на селективную декон-таминацшо патогенной и условно-патогенной микрофлоры при терапии дисбакте-риоза кишечника (рисунок 3).

При изучении состава фекального микробиоценоза во 2 пробе (сразу после эрадикации) установлена статистическая значимость различий в содержании представителей вышеперечисленных родов: снижение на 1-2 при значительном снижении частоты встречаемости. Содержание дрожжеподобиых грибов в фекальном микробиоценозс после эрадикации увеличилось па 1

Сравнительное изучение содержания в фекалиях некоторых представителей кишечной микрофлоры через 3 недели после окончания эради кацион ной терапии позволило выявить статистическую значимость различий (р<0,(И) между содержанием анаэробного, факультативно-анаэробного и аэробного компонентов СТК у больных с хеликобактерассоциированной язвенной болезнью в основной группе и в группе сравнения.

О 1 осмотр ■ 1 осмотр а з осмотр

Бифидобактерии Лактобэктерии Общее кол-во Е. Грибу

СОЙ

Основная I

Ёифадобаюерии Лактобакгерии Общее кол-во Е.

coli

Группа сравнения

Грибы

□ 1 осмотр о 2 осмотр О 3 осмотр

Рисунок 3 - Содержание в фекалиях некоторых представителей кишечной микрофлоры (в lg КОЕ/г) у больных с холикобактер-асеоциированной язвенной болезнью (группа сравнения - лечение но схеме A, ipyri-па основная Г - по схеме Б)

* - различие с группой сравнения статистически значимо (р<0,05) ** - различие с группой сравнения статистически значимо (р<0,01)

Таким образом, эрадикационная терапия ЯБ желудка и двенадцатиперстной кишки {курс 7 дней) может проводиться как )-й этап коррекции дисбактериоза (селективная дсконтаминация кишечника). Основные закономерности изменения кишечной микрофлоры при эрадикацин Hp заключаются в уменьшении содержания патогенной, условно-патогенной и облигатпой анаэробной микрофлоры, уменьшении количества кишечных палочек с измененными биологическиШ свойствами, энтерококков (в т.ч. гемолизирушщих форм), представителей семейства Enterobacteriaceae: родов Proteus, Enterobacter, Citrobacter, Serratia, Klebsiella и др.

Установлено, что применение пробиотиков во время зрадикационной терапии и после нее курсом продолжительностью 3 недели способствовало повышению кли-нико - микробиологической эффективности пробиотиков, В первую очередь, нами отмечены положительные сдвиги в клинической и микробиологической картине у пациентов, принимавших линекс. Применение линскса длительными курсами оказывает выраженное положительное действие на микрофлору кишечника у этих пациентов: отмечается высокая частота случаев нормализации микрофлоры кишечника после проведенной терапии, не регистрируются больные с выраженным дисбак-териозом Ц-Ш степени. Кроме того, использование липекса в комплексной терапии у всех наблюдавшихся пациентов оказывало более благоприятное действие на микробиоценоз СТК по сравнению с таковыми, получавшими лактобактерин и бифи-дум бактерии.

Изучение метаболической активности анаэробной микрофлоры для характеристики днсбиотических состояний кишечника у детей с гастро-дуоденальной патологией, ассоциированной с Helicobacter pylori

В последние годы для скрининговой диагностики дисбактериоза используют газожидкостной хроматографический анализ, позволяющий создать микробный метаболический «паспорт» как при эубиозе кишечника, так и при патологических состояниях, соотнести выбранные параметры с клинической картиной заболевания, с результатами бактериологического и копрологического анализов, а также успешно использовать данный метод при оценке эффективности проводимого лечения

Результаты сравнительного изучения абсолютного содержания JDKK в фекалиях у детей с гастродуоденапьной патологией, ассоциированной с Helicobacter pylori, до эрадикационной терапии и у здоровых лиц представлены в таблице 3

Таблица 3 - Результаты изучения абсолютного содержания JDKK - С2-С6 в фекалиях у детей с гастродуоденапьной патологией, ассоциированной с Helicobacter pylori, до эрадикационной терапии

Показатель Значение (М±т)

хгд норма

Общий уровень, мг/мл 5,83+1,16* 10,51+2,27

Анаэробный индекс -0,469+0,08* -0,576+0,002

Индекс изокислот 0,3005+0,05 0,29+0,04

Концентрации летучих жирных кислот, мг/г

Уксусная (Сг) 3,45+0,72* 5,88+0,87

Пропионовая (Сз) 0,99+0,12 1,79+0,46

Изомасляная (1С4) 0,19±0,05** 0,25+0,11

Масляная (С4) 0,89+0,13* 1,72+0,50

Изовалериановая (1С5) 0,36+0,08** 0,40+0,19

Валериановая (С5) 0,13+0,04** 0,34+0,12

Изокапроновая (iG.) 0,0019±0,0001** 0,01+0,001

Капроновая (Сб) 0,0096±0,001** 0,014+0,03

Соотношения концентраций JDKK, %

Уксусная (С2) 63,5+4,8 64+2,00

Пропионовая (Сз) 19,3+2,4* 16+0,50

Масляная (С4) 16,8+2,6 20+1,70

Отношения изо-форм к нормальным формам

1С4/С4 0,213+0,029* 0,145±0,0022

1С5/С5 2,769+0,342** 1,176±0,310

iCs/Ce 0,190±0,003** 0,071 ±0,003

Доля концентрации в общем пуле, %

Уксусная (Сг) 59,17 55,95

Пропионовая (Сз) 16,98 17,03

Изомасляная (1С4) 3,26* 2,38

Масляная (С4) 15,27 16,36

Изовалериановая (1С5) 6,17** 3,80

Валериановая (С5) 2,23* 3,23

Изокапроновая (iCi) 0,032** 0,095

Капроновая (С6) 0,172 0,133

Примечание - * - различие с нормой статистически значимо (р<0,05)

** - различие с нормой статистически значимо (р<0,01)

Для понимания наблюдаемых изменений введен параметр, отражающий качественный состав ЛЖК - «профиль» кислот, или относительное содержание (рСп=Сп/ХС2-С6) (таблица 4) Профиль ЛЖК не зависит ни от количества продуцирующих и утилизирующих метаболиты микроорганизмов, ни от числа клеток (эпи-телиоцитов) всасывающей поверхности

Таблица 4 - Результаты изучения относительного содержания (профилей) ЛЖК -0>-С6 в фекалиях у больных с гастродуоденальной патологией, ассоциированной с Helicobacter pylori, до эрадикационной терапии

Показатель Значение (М±т)

ХГД | норма

Профили летучих жирных кислот, мг/г

Уксусная (С2) 0,602+0,011* 0,565+0,01

Пропионовая (Cj) 0,147+0,01* 0,168+0,011

Изомасляная (1С4) 0,037+0,004* 0,025+0,006

Масляная (С4) 0,123+0,01* 0,155+0,009

Изовалериановая (1С5) 0,062+0,009* 0,042+0,004

Валериановая (С5) 0,028+0,002* 0,033+0,002

Изокапроновая (iQ) 0,002+0,001** 0,001±0,001

Капроновая (Сб) 0,0002+0,0001** 0,011±0,001

Суммарное содержание ЛЖК 1 1

Примечание - * - различие с контролем статистически значимо (р<0,05)

** - различие с контролем статистически значимо (р<0,01)

Анализ профилей ЛЖК в кале у больных ХГД свидетельствует об изменении относительного содержания отдельных кислот, что указывает на отклонения в видовом составе микрофлоры, продуцирующей различные ЛЖК Из таблицы 4 видно, что основную долю в общий пул кислот вносят кислоты с числом углеродных атомов С2-С4 Смещение содержания ЛЖК с числом углеродных атомов С2-С4 вносящих основной вклад в общий пул кислот, возможно оценить с помощью анаэробного индекса АИ показывает, что у больных с хеликобактер-ассоциированными заболеваниями окислительно - восстановительный потенциал продуктов смещен в область слабоотрицательных значений (-0,469) по сравнению с нормой (-0,58) При АИ= -0,469 перестают работать терминальные ферредоксинсодержащие ферменты облигатных анаэробов, что приводит к блокированию их жизнедеятельности На этом фоне начинают активно размножаться и продуцировать условно-патогенные анаэробы, в частности, штаммы условно - патогенных бактероидов

Выявленные изменения при хеликобактер-ассоциированных заболеваниях можно объяснить стрессовым воздействием на эпителий кишечника, когда происходит переключение метаболизма колоноцитов с цикла Кребса на анаэробный вариант гликолиза, активацию гексозомонофосфатного шунтирования (ГМШ) Учитывая, что основным источником питания и роста кишечного эпителия являются ЛЖК, особенно масляная кислота (С4), такое изменение метаболизма меняет трофическую базу колоноцитов С одной стороны, последние перестают всасывать и утилизировать ЛЖК, в первую очередь, масляную и пропионовую, с другой стороны, активизация ГМШ у колоноцитов приводит к тому, что они становятся продуцентами токсических метаболитов кислорода, вследствие чего увеличиваются активность и численность аэробного звена микрофлоры Эти изменения отражаются на изменении

окислительно - восстановительного потенциала как в пршпитслиальной зоне, так и в просвете кишечника.

На рисунке 4 представлены абсолютные и относительные показатели содержания нормальных и изо форм ЛЖК в 1, 2 и 3 пробах кала (до начала приема, сразу после недельного приема и через 3 недели пойле Скончания курса антибиотиков соответственно) у детей контрольной (группы сравнения) и основной групп.

Л« ■Ш1ЦН

д)

■

ж)

Рисунок 4 - Результаты ГЖХ - анализа кала у детей основной и контрольных групп до и после эрадташюшоЙ терапии

а) общий уровень ЛЖК; б) анаэробный индекс; в) индекс изоформ ЛЖК; г) процент уксусной кислоты; д) процепт пропионовой кислоты; е) процент масляной кислоты; ж) доля изо валериановой кислоты

* - различие с контролем статистически значимо (р<0,05)

В контрольной и в основной группах сразу после окончания приема антибиотиков отмечается снижение уровней практически всех ЛЖК (более выраженное в контрольной группе), за исключением уровня уксусной кислоты (который даже несколько повысился) в основной группе, что может быть связано с содержанием в линексе микрофлоры, продуцирующей данный метаболит. В основной группе в меньшей степени "пострадал" и уровень пропионовой кислоты. Эти данные свидетельствуют о более выраженном угнетении нормальной микрофлоры в контрольной группе, что подтверждается данными бактериологических исследований. Имеют место и различия в значениях относительных показателей. Если в основной группе значение анаэробного индекса несколько понизилось (из-за повышения уровня уксусной кислоты), то в контрольной группе аналогичный показатель заметно вырос, поскольку основные продуценты уксусной кислоты (кишечная палочка, лактобакте-рии) по данным бактериологическош анализа в контрольной группе угнетены в большей степени. Следует отметить некоторое увеличение вклада маслянокислого брожения, чго может быть отражением относительного увеличения продуцентов масляной кислоты, в том числе с про геолити ческой активностью (пептострептокок-ков и др.). В контрольной группе уровень масляной кислоты в итоге повысился в большей степени, чем в основной. То же самое можно сказать и о значении индекса изокислот, отражающего прогеолити ческу ю активность микрофлоры - он снизился в основной группе и повысился в контрольной (в основном, за счет изовалсриановой кислоты). Снижение индекса изокислот в основной группе может быть связано с увеличением доли не обладающей протеолитическими свойствами микрофлоры, содержащейся в поли компонентном пробиотике липекс.

Таким образом, наши наблюдения свидетельствуют' об эффективности сочетания эрадикапионной терапии и применения поли компонента ого пробиотика линекс как в процессе эрадикании, так и для дальнейшего восстановления пормобиоценоза

кишечника Селективная деконтаминация патогенной и условно-патогенной флоры кишечника в процессе антибактериальной терапии с активацией резидентной микрофлоры приводит к восстановлению внутриполостного окислительно - восстановительного потенциала В свою очередь, в результате нормализации среды обитания происходит активация метаболизма и увеличивается численность облигатного биоценоза

Выводы

1 Гастродуоденальная патология, ассоциированная с Helicobacter pylon, является мощным эндогенным фактором изменчивости микробиоценоза ЖКТ, основные закономерности формирования которого проявляются уменьшением содержания облигатной анаэробной микрофлоры и превалированием роста кишечных палочек с измененными биологическими свойствами, энтерококков (в тч гемолизирующих форм), представителей семейства Enterobacteriaceae (преимущественно Klebsiella, Proteus, Enterobacter sp ), грибов

2 Интегральная оценка метаболитов микрофлоры кишечника (абсолютного и относительного содержания JDKK (С2-Сб) в кале, анаэробных индексов и др) является важным критерием диагностики микроэкологических нарушений и эффективности проводимой терапии у больных с хеликобактер-ассоциированной патологией желудочно-кишечного тракта в режиме реального времени

3 Метаболитный статус кишечника у детей с хеликобактер-ассоциированным гастродуоденитом, осложненным соматической патологией желудочно-кишечного тракта, характеризуется показателями более выраженного угнетения микробиоценоза толстого кишечника, повышенной протеолитической активности микрофлоры, энергодефицита колоноцитов

4 Слизистая оболочка толстой кишки у больных с хеликобактерассоциирован-ной патологией желудочно-кишечного тракта после проведения комплексной терапии в сочетании с пробиотиками имеет минимальную активность патологического процесса

5 Анализ результатов бактериологических, метаболических и копрологических исследований установил клинико-микробиологическую эффективность поликомпонентного антибиотикорезистентного пробиотика линекс в составе комплексной эра-дикационной терапии заболеваний желудочно-кишечного тракта, ассоциированных с Helicobacter pylori

6 Современный алгоритм эрадикационной терапии в сочетании с лактосодер-жащими антибиотикорезистентными пробиотиками способствует повышению эффективности лечения хеликобактерассоциированных заболеваний Правильное соблюдение предлагаемого комбинированного протокола лечения обеспечивает развитие ремиссии, характеризующейся положительной динамикой микроэкологических, метаболических и копрологических показателей

Практические рекомендации

рованных с Hp, рекомендуется использовать для диагностики нарушений удельного содержания микробных компонент кишечника, выявления принципа формирования популяционной структуры при дисбиотических сдвигах, своевременной диагностики сопутствующей патологии ЖКТ (дискинезии желчевыводящих путей, патологии поджелудочной железы, нарушений моторно-эвакуаторной функции)

Параметры метаболизма микрофлоры кишечника (абсолютное и относительное содержание JDKK (Сг-Сб) в кале, анаэробные индексы, отношение изомеров кислот к отношению неразветвленных кислот), впервые изученные при гастродуоденальной патологии, ассоциированной с Helicobacter pylon, рекомендуются в качестве критериев своевременной диагностики хеликобактер- и/или антибиотик-ассоциированных дисбактериозов

Современную фармакотерапию заболеваний ЖКТ, ассоциированных с Helicobacter pylon, рекомендуется направить на различные звенья патогенеза и профилактику побочных эффектов антисекреторной и антибактериальной терапии

Необходимо ориентировать практических врачей на проведение направленных мероприятий для профилактики побочных эффектов эрадикационной терапии (антибиотик-ассоциированных дисбактериозов и/или диарей) Наиболее оптимален способ коррекции микробиоценоза кишечника у больных с хеликобактер- и/или ан-тибиотик-ассоциированным дисбиозом применением трехкомпонентного антибио-тикорезистентного пробиотика линекс в составе эрадикационной терапии и после нее

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1 Бельмер С В , Хавкин А И, Горелов А В , Блат С Ф , Мустафина Р Р, Кондракова О А Роль пробиотичеекой терапии при хроническом хеликобактерассоциированном гастрите // Медицинский вестник -2006 -№42 -С 16

2 Бельмер С В, Хавкин А И, Горелов А В , Щиголева Н Е , Блат С Ф, Каннер Е В , Рагнико-ва М А, Кондракова О А , Семенова Е В , Мустафина Р Р Эффективные пути коррекции антибио-тик-ассоциированного дисбактериоза кишечника Результаты мультицентрового исследования // Детская гастроэнтерология -2006 - №6 - С 7-10

3 Мустафина РР Коррекция пробиотиками микроэкологических нарушений кишечника у пациентов с синромом диареи различного генеза // Материалы V Российского конгресса детских инфекционистов "Актуальные вопросы инфекционной патологии и вакцинопрофилактики у детей" - Москва. - 2006 -С 113

4 Кондракова О А, Затевалов А М , Мустафина Р Р, Гусарова М П, Грачева Н М Метаболический фактор - один из критериев оценки микроэкологических нарушений кишечника у детей с патологией желудочно-кишечного тракта // Человек и лекарство матер XIV Российского национального конгресса -Москва -2007 -С 704-705

5 Кондракова О А, Гусарова М П, Мустафина Р Р, Блат С Ф Особенности микроэкологических нарушений кишечника у детей больных гастродуоденитом, ассоциированным с Helicobacter pylon // Матер 9-го Международного Славяно-Балтийского научного форума "Санкт - Петербург -Гастро-200Т' -Санкт-Петербург - 2007 -С 235

6 Кондракова О А, Коновалова М В , Затевалов А М , Мустафина Р Р , Кондракова Т В Особенности микроэкологических нарушений у детей 1-6 месячного возраста с лактазной недостаточностью // Материалы юбилейной научной конференции, посвященной 175-летию со дня рождения СП Боткина -Санкт-Петербург - 2007 -С 46

7 Бельмер С В, Щиголева Н Е, Хавкин А И , Горелов А В, Блат С Ф , Каннер Е В , Ратнико-ва М А, Кондракова О А, Семенова Е В , Мустафина Р Р Пробиотическая коррекция антибиотик-ассоциированного дисбактериоза кишечника у детей II Вопросы современной педиатрии - 2007 -Т 6, № 3 - С 89-93

МУСТ АФИНА РЕГИНА РИШАТОВНА

КОРРЕКЦИЯ ПРОБИОТИКАМИ МИКРОЭКОЛОГИЧЕСКИХ НАРУШЕНИЙ КИШЕЧНИКА У ПАЦИЕНТОВ ПОСЛЕ ЭРАДИКАЦИОННОЙ ТЕРАПИИ HELICOBACTER PYLORI

03 00 07 - МИКРОБИОЛОГИЯ

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Подписано в печать 01 10 07 г Бумага офсетная Формат 60x84 1/16 Гарнитура «Times New Roman» Печать офсетная Уел печ л 14 Тираж 100 экз Заказ №635

Тип ИП Шмаков, г Уфа ,ул Цюрупы, 149 тел/факс (347) 251-63-03 Свидетельство о регистрации № 304027809600041 от 05 04 2004г, выд ИФНС по Советскому району г Уфы

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Мустафина, Регина Ришатовна

Список сокращений и условных обозначений

Введение 5 Обзор литературы

Глава 1. Helicobacter pylori в этиологии гастродуоденальной патологии

1.1 Роль Helicobacter pylori в развитии заболеваний желудочнокишечного тракта

1.2 Микробиологические аспекты дисбакгериоза кишечника у 21 больных с гастродуоденальной патологией, ассоциированной с Helicobacter pylori

1.3 Метаболическая активность анаэробной микрофлоры желу- 27 дочно-кишечного тракта при дисбакгериозе кишечника

Глава 2. Современные методы комплексной диагностики гастродуоде- 36 нальной патологии, ассоциированной с Helicobacter pylori

Глава 3. Основные принципы коррекции микробиоценоза кишечника у 47 больных с гастродуоденальной патологией, ассоциированной с Helicobacter pylori

3.1 Эрадикация (уничтожение) Helicobacter pylori

3.2 Микроэкологические подходы к коррекции дисбакгериоза 53 кишечника

Собственные исследования

Глава 4. Материалы и методы исследований

4.1 Материалы исследований

4.2 Методы исследований

Глава 5. Изучение влияния лакго- и бифидосодержащих пробиотиков в 67 составе комплексной эрадикационной терапии на микробиоценоз кишечника больных язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки

5.1 Исследование микрофлоры толстого кишечника у больных с 67 хеликобактер-ассоциированной язвенной болезнью

5.2 Сравнительная оценка действия лакто- и бифидосодержащих 76 пробиотиков в составе комплексной эрадикационной терапии на структурные и микроэкологические показатели микробиоценоза кишечника

5.3 Изучение влияния пробиотиков на состояние слизистой обо- 90 лочки толстой кишки у больных с хеликобактерассоциированной патологией желудочно-кишечного тракта

Глава 6 Влияние поликомпонентного пробиотика в составе комплекс- 97 ной эрадикационной терапии на микрофлору кишечника детей с гаст-родуоденальной патологией, ассоциированной с Helicobacter pylori

6.1 Исследование качественного и количественного состава мик- 97 рофлоры содержимого толстой кишки у детей с хеликобактерас-социированными гастродуденитами

6.2 Сравнительное изучение фекального микробиоценоза боль- 103 ных на фоне эрадикационной терапии и применения линекса

Глава 7 Изучение метаболической активности микрофлоры для харак- 109 теристики дисбиотических состояний кишечника у детей с гастродуо-денальной патологией, ассоциированной с Helicobacter pylori

7.1 Изучение качественного и количественного содержания лету- 109 чих жирных кислот в фекалиях

7.2 Анализ метаболических и копрологических изменений ки- 116 шечника у детей с хеликобактерассоциированной и сопутствующей патологией желудочно-кишечного тракта

7.3 Изучение содержания летучих жирных кислот (Сг-Сб) в ки- 122 шечнике на фоне применения пробиотиков в составе комплексной эрадикационной терапии

Введение Диссертация по биологии, на тему "Коррекция пробиотиками микроэкологических нарушений кишечника у пациентов после эрадикационной терапии Helicobacter pylori"

Актуальность проблемы

В современной гастроэнтерологам существуют стандартизированные методы диагностики и лечения заболеваний желудочно-кишечного тракта (ЖКТ), ассоциированных с Helicobacter pylori (Hp). Известно, что Hp является возбудителем или участвует в патогенезе целого ряда заболеваний, однако далеко не все они являются показаниями к проведению антихеликобактерной эрадикационной терапии [66, 67, 72]. Лечение заболеваний, ассоциированных с Hp, регламентируется рядом национальных и международных рекомендаций, которые формируются на основе:

• данных о распространенности в популяции штаммов Hp, резистентных к антибиотикам - компонентам лечения;

• результатов крупных мультицентровых исследований;

• длительных наблюдений за больными, получивших курс антихеликобактерной терапии (анти-Нр-терапии) [46].

В настоящее время «стандартом» анти-Нр-терапии являются тройные схемы эрадикации продолжительностью не менее 7-10 дней на основе ингибиторов протонной помпы (ИПП) и двух антибиотиков, рекомендованные группой европейских гастроэнтерологов во главе с P. Malfertheiner и получившие известность как Маастрихтский консенсус (1996, 2000, 2005). Но при реализации стратегии тотальной эрадикации Hp на основе Маастрихтского консенсуса исследователи столкнулись со стремительно нарастающей вторичной резистентностью Hp к используемым антибактериальным препаратам и, как следствие, с развитием частых и клинически значимых осложнений в виде дисбактериозов кишечника и/или антибиотико-ассоциированных диарей [6,30,33, 39,56, 73,110,125,127,162,205,207].

Анализ результатов исследований не позволяет со всей очевидностью судить о первичности или вторичности дисбактериоза в генезе гастродуоде-нальной патологии, ассоциированной с Hp. По данным некоторых авторов, хеликобактериоз сам по себе можно рассматривать как дисбиоз слизистой оболочки желудка (СОЖ) [127]. Заболевания ЖКТ, такие как острые кишечные инфекции (ОКИ), хронические гастриты (ХГ), гепатиты, язвенная болезнь желудка (ЯБЖ) и двенадцатиперстной кишки (ЯБ ДПК), холецисто-панкреатиты, дискинезии желчевыводящих путей, синдром раздраженного кишечника и др., сопровождаются синдромом дисбактериоза кишечника в 100 % случаев. Установлено, что в период обострения гастрита и рецидива язвенной болезни происходит развитие дисбактериоза с активацией ферментов патогенности не только у Hp, но и у других представителей условно-патогенной микрофлоры [64, 71, 114,120,121,122].

Успешная эрадикация Hp позволяет снизить процент рецидивов заболевания [44, 45, 66, 67, 72, 143], однако частота побочных эффектов при проведении антихеликобактерной терапии достигает 63 % [208], а у 3-10 % больных служит причиной преждевременного прекращения лечения [143, 145, 175]. Среди больных, которым был проведен курс эрадикации Hp, на 63,4 % увеличилась частота дисбактериоза II степени и на 90,7 % - частота дисбактериоза III степени [127].

Все вышеизложенное указывает на необходимость разработки современной концепции диагностики и лечения гастродуоденальной патологии, ассоциированной с Hp, и дает основания для поиска новых подходов к решению проблемы хеликобактериоза. Одним из направлений является внедрение в широкую практику ускоренных и информативных методов диагностики рассматриваемых во взаимной связи функциональных и микроэкологических нарушений ЖКТ [3, 5, 19, 28, 46, 50, 51, 52]. Оценка микробиоценоза кишечника должна содержать достаточно полную характеристику микроэкологического статуса, структуру основных в функциональном плане пристеночных популяций, а также отражать интегральную метаболическую активность микрофлоры [21,22,78,81,85, 88,90,112,114,155].

С этих позиций современные приемы микробиологического исследования в виде общепринятого анализа "на дисбактериоз" недостаточно информативны [52]. Большое диагностическое и прогностическое значение имеет выявление разнонаправленных отклонений от физиологической нормы уровней и спектров микробных метаболитов, являющихся биохимическими маркерами структурных и функциональных нарушений кишечного микробиоценоза. Анализ абсолютных и относительных показателей содержания летучих жирных кислот (ЛЖК) в фекалиях в совокупности с данными копрологиче-ского анализа с известным набором признаков (физические параметры, степень гидролиза поступающих в толстую кишку нутриентов, желчеотделение, всасывательная способность слизистых, скорость транзита и др.) даст более полное представление о процессе микробного пищеварения в толстом кишечнике и его нарушениях [4, 5, 51, 52, 82].

Результаты исследований метаболитов анаэробной микрофлоры при синдроме раздраженного кишечника и желчекаменной болезни позволили ввести параметры метаболической активности в качестве критериев эффективности лечебной коррекции и адекватного выбора фармакологического препарата [3, 4, 82]. Но в литературе отсутствуют данные о степени структурного метаболического дисбаланса микрофлоры кишечника у больных с гастродуоденальной патологией, ассоциированной с Hp, так как изучение этой стороны патогенеза хеликобактерассоциированных заболеваний ранее было лимитировано ограниченностью и сложностью лабораторных методов.

Отсутствие систематизированных данных по обоснованию адекватной диагностики и терапии заболеваний позволило акцентировать наше внимание на изучении микроэкологического и метаболического статуса кишечника у больных с гастродуоденальной патологией ЖКТ, ассоциированной с Hp, и проблеме комплаентности антихеликобактерной терапии, так как в известной мере несоблюдение схемы лечения определяется побочными действиями средств анти-Нр-терапии.

Разработка современных схем лечения гастродуоденальной патологии, ассоциированной с Hp, также предусматривает поиск новых подходов к решению проблемы хеликобактериоза. К настоящему времени предложено значительное количество препаратов и множество способов лечения ХГ, ЯБ желудка и/или ЯБ ДПК, а также дисбактериоза кишечника/антибиотико-ассоциированной диареи, являющихся одними из наиболее частых осложнений антибиотикотерапии [8, 46, 95, 119, 162, 179]. Продолжающаяся экспансия резистентных штаммов Hp в популяции требует создания все новых и новых, как правило, более дорогих фармпрепаратов с антихеликобактерной активностью, которые обычно вызывают больше побочных эффектов [30, 115]. Это свидетельствует о том, что эта проблема все еще далека от своего разрешения и требует поиска принципиально новых подходов.

Одним из перспективных путей решения проблемы нивелирования микроэкологических нарушений является дополнительное назначение пробиоти-ков, предупреждающих побочные эффекты антибиотикотерапии [12, 15, 24, 25, 111, 162, 165, 179, 195, 203]. В целом ряде экспериментальных исследований было показано, что культура или препараты, изготовленные из микроор-ганизмов-пробионтов, могут подавлять жизнедеятельность Hp, так как известно, что механизм терапевтического действия штаммов - пробионтов связан с конкурентной адгезивностью, иммуностимулирующими свойствами, образованием антимикробных веществ и т. д. [32, 111,123, 124, 162, 164,165, 195,201,202].

По данным рандомизированных контролируемых испытаний было высказано предположение, что некоторые штаммы могут помочь в снижении численности Hp и в ослаблении воспалительных процессов в желудке [169, 209]. Уже первые опыты на гнотобиотических мышах линии Balb/c, моно-контаминированных Lactobacillus salivarius и впоследствии зараженных Hp, дали весьма обнадеживающие результаты. Данные лактобактерии не только ингибировали адгезию и колонизацию Hp, но при пероральном введении животным, ранее инфицированным Hp, способствовали исчезновению их из желудка. Но вклад пробиотиков в уничтожение микроорганизма Hp, ответственного за развитие и рецидивы гастрита, гастродуоденита и язвенной болезни, пока еще полностью не доказан.

Многочисленные исследования свидетельствуют о необходимости включения в комплексную терапию хеликобактерассоциированных заболеваний верхних отделов пищеварительного тракта биопрепаратов, в частности, лакто- и бифидосодержащих, что позволяет уменьшить частоту развития и глубину выраженности дисбиотических изменений и, как следствие, уменьшить выраженность и длительность сохранения болевого абдоминального и диспепсического синдромов у детей [56, 58, 59, 95, 119,193].

Следует отметить, что подобные антихеликобактерные средства находятся только в самом начале их клинической разработки, и поэтому результаты их использования нередко противоречивы [46]. В некоторых клинических исследованиях был показан положительный эффект, в то время как другие испытания не дали однозначного ответа. Поэтому пока сложно высказать определенное мнение и в связи с этим, по рекомендациям отечественных и зарубежных исследователей, клинические испытания в этом направлении должны быть продолжены [111].

Цель исследования

Изучение структурного, микроэкологического и метаболического статуса кишечника у больных с гастродуоденальной патологией, ассоциированной с Helicobacter pylori, на фоне эрадикационной терапии и применения пробио-тиков.

Задачи исследования

1 Изучить особенности количественного и качественного состава микробиоценоза кишечника у больных с гастродуоденальной патологией, ассоциированной с Helicobacter pylori.

2 Определить метаболическую активность микрофлоры кишечника по содержанию летучих жирных кислот (Сг-Сб) у больных с хеликобактер-ассоциированными заболеваниями желудочно-кишечного тракта.

3 Изучить влияние сопутствующих заболеваний желудочно-кишечного тракта на количественное и качественное содержание летучих жирных кислот (Сг-Сб) в фекалиях пациентов с хеликобактер-ассоциированными гаст-родуденитами.

4 Оценить динамику микроэкологических, метаболических и копрологи-ческих изменений микробиоценоза кишечника у больных на фоне эрадикационной терапии и применения пробиотиков.

5 Изучить влияние пробиотиков на состояние слизистой оболочки толстой кишки у больных с хеликобактер-ассоциированной патологией желу-дочно - кишечного тракта.

6 Оценить возможность применения моно- и поликомпонентных пробиотиков для коррекции нарушений микробиоценоза кишечника при эради-кации Helicobacter pylori.

Научная новизна

Впервые изучена метаболическая активность микрофлоры толстого кишечника по содержанию летучих жирных кислот (С2-С6) в фекалиях больных с гастродуоденальной патологией, ассоциированной с Helicobacter pylori.

Впервые проведен сравнительный анализ спектра метаболитов бактерий кишечника (летучих жирных кислот Сг-Сб) у детей с неосложненными хроническими хеликобактерассоциированными гастродуоденитами и у детей с хроническими гастродуоденитами и сопутствующей патологией желудочно-кишечного тракта (дискинезией желчевыводящих путей, патологией поджелудочной железы, нарушениями моторно-эвакуаторной функции).

На основании результатов бактериологических, биохимических, копро-логических и эндоскопических исследований проведена оценка состояния микробиоценоза у больных с гастродуоденальной патологией, ассоциированной с Helicobacter pylori. Подобраны критерии комплексного изучения микробиоценоза кишечника у больных с хеликобактер- и/или антибиотикоассо-циированным дисбиозом.

При эрадикации Helicobacter pylori обоснована целесообразность применения монокомпонентных и комбинированных пробиотиков для коррекции нарушений микробиоценоза кишечника. Включение в схему терапии гастродуоденальной патологии, ассоциированной с Helicobacter pylori, поликомпонентного пробиотика линекс на основе антибиотикорезистентных штаммов-пробионтов, снижает риск развития антибиотик-ассоциированных дисбакте-риозов кишечника и/или диарей.

Научная новизна

Впервые изучена метаболическая активность микрофлоры толстого кишечника по содержанию летучих жирных кислот (Сг-Сб) в фекалиях больных с гастродуоденальной патологией, ассоциированной с Helicobacter pylori.

Впервые проведен сравнительный анализ содержания летучих жирных кислот (Сг-Сб) у детей с хроническими хеликобактер-ассоциированными га-стродуоденитами и у детей с хроническими гастродуоденитами и сопутствующей патологией желудочно-кишечного тракта (дискинезией желчевыво-дящих путей, патологией поджелудочной железы, нарушениями моторно-эвакуаторной функции кишечника).

На основании результатов бактериологических, биохимических, копро-логических и эндоскопических исследований проведена оценка состояния микробиоценоза у больных с гастродуоденальной патологией, ассоциированной с Helicobacter pylori. Подобраны критерии комплексного изучения микробиоценоза кишечника у больных с хеликобактер- и/или антибиотик-ассоциированным дисбиозом.

При эрадикации Helicobacter pylori обоснована целесообразность применения поликомпонентных пробиотиков для коррекции нарушений микробиоценоза кишечника. Включение в схему терапии гастродуоденальной патологии, ассоциированной с Helicobacter pylori, трехкомпонентного пробиотика линекс на основе антибиотикорезистентных штаммов-пробионтов Bifidobacterium infantis v. liberorum, Lactobacillus acidophilus и Enterococcus faecium, снижает риск развития антибиотик-ассоциированных дисбактерио-зов кишечника и/или диарей.

Научно-практическая значимость работы

Полученные данные о структуре микроэкологических и метаболических изменений микрофлоры кишечника при заболеваниях гастродуоденальной зоны у взрослых и детей, ассоциированных с Helicobacter pylori, ориентируют врачей на проведение направленных адекватных мероприятий для профилактики побочных эффектов эрадикационной терапии.

Метаболический фактор регламентирован как один из критериев оценки микроэкологических нарушений и эффективности проводимой терапии у больных с патологией желудочно-кишечного тракта, ассоциированной с Helicobacter pylori. На основании результатов количественного и качественного изучения метаболитов анаэробных бактерий (летучих жирных кислот) появилась возможность интегральной оценки состояния микрофлоры кишечника у больных с гастродуоденальной патологией, ассоциированной с Helicobacter pylori, в режиме реального времени.

Эрадикация Helicobacter pylori антибиотиками широкого спектра действия (курс не менее 7 дней) рассматривается как первый этап коррекции дис-бактериоза и направлена на селективную деконтаминацию кишечника

Предложены способы коррекции микробиоценоза кишечника человека в составе эрадикационной терапии, обеспечивающие снижение частоты дис-биотических осложнений. При коррекции хеликобактер- и/или антибиотик-ассоциированных дисбиозов доказана эффективность трехкомпонентного пробиотика линекс в сравнении с монокомпонентными препаратами.

Внедрение результатов исследования в практику

Материалы диссертации использованы в разделе «Коррекция микроэкологических нарушений» монографии «Микрофлора пищеварительного тракта» (под ред. А.И. Хавкина) - М.: Фонд социальной педиатрии, 2006.

Монография предназначена для педиатров, терапевтов, гастроэнтерологов и семейных врачей.

Основные положения, выносимые на защиту

1 Патология желудочно-кишечного тракта, ассоциированная с Helicobacter pylori, вызывает количественные и качественные изменения микроэкологии толстой кишки. Параметры микробных компонент биотопа толстого кишечника обладают довольно свободным варьированием, но для кишечного микробиоценоза при хеликобактер-ассоциированной патологии выявлен определенный принцип формирования с превалированием роста условно-патогенных микроорганизмов определенных родов и семейств.

2 Определение метаболической активности анаэробной микрофлоры по содержанию летучих жирных кислот (Сг-Сб) в кале является биохимическим маркером, позволяющим охарактеризовать структурные и функциональные нарушения кишечного микробиоценоза в режиме реального времени.

3 Параметры биохимических изменений в кишечнике при гастродуоде-нальной патологии, ассоциированной с Helicobacter pylori, могут быть введены в качестве критериев своевременной диагностики, назначения и оценки эффективности лечебной коррекции хеликобактер- и/или антибиотик-ассоциированных дисбактериозов.

6 Бактерийный поликомпонентный препарат линекс, содержащий анти-биотикорезистентные штаммы Bifidobacterium infantis v. liberorum, Lactobacillus acidophilus и Enterococcus faecium, рекомендован для включения в схемы эрадикационной терапии.

Апробация работы

Материалы диссертации представлены и обсуждены на ряде научных форумов: 13-м конгрессе детских гастроэнтерологов России "Детская гастроэнтерология 2006" (Москва, 2006), 5-м конгрессе детских инфекционистов России "Актуальные вопросы инфекционной патологии и вакцинопрофилактики" (Москва, 2006), 9-м международном СлавяноБалтийском научном форуме "Санкт - Петербург - Гастро - 2007" (Санкт -Петербург, 2007), юбилейной Российской научной конференции с международным участием, посвященной 175-летию со дня рождения С.П. Боткина (Санкт - Петербург, 2007).

Основные положения диссертации обсуждены на заседании клинического отделения детей ФГУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора (г. Москва, март 2007 г.).

Публикации

По теме диссертации опубликовано семь научных работ, из них одна в центральной печати.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 158 страницах, содержит 29 таблиц и 15 рисунков. Работа состоит из введения, обзора литературы (три главы), собственных исследований (четыре главы), заключения, выводов и практических рекомендаций. Список литературы включает 210 источников (134 отечественных и 76 зарубежных).

Заключение Диссертация по теме "Микробиология", Мустафина, Регина Ришатовна

Выводы

1 Гастродуоденальная патология, ассоциированная с Helicobacter pylori, является мощным эндогенным фактором изменчивости микробиоценоза ЖКТ, основные закономерности формирования которого проявляются уменьшением содержания облигатной анаэробной микрофлоры и превалированием роста кишечных палочек с измененными биологическими свойствами, энтерококков (в т.ч. гемолизирующих форм), представителей семейства Enterobacteriaceae (преимущественно Klebsiella, Proteus, Enterobacter sp.), грибов.

2 Интегральная оценка метаболитов микрофлоры кишечника (абсолютного и относительного содержания ЛЖК (Сг-Сб) в кале, анаэробных индексов и др.) является важным критерием диагностики микроэкологических нарушений и эффективности проводимой терапии у больных с хеликобактерассоциированной патологией желудочно-кишечного тракта в режиме реального времени.

4 Слизистая оболочка толстой кишки у больных с хеликобактерассоциированной патологией желудочно-кишечного тракта после проведения комплексной терапии в сочетании с пробиотиками имеет минимальную активность патологического процесса.

5 Анализ результатов бактериологических, метаболических и копроло-гических исследований установил клинико-микробиологическую эффективность поликомпонентного антибиотикорезистентного пробиотика линекс в составе комплексной эрадикационной терапии заболеваний желудочно-кишечного тракта, ассоциированных с Helicobacter pylori.

6 Современный алгоритм эрадикационной терапии в сочетании с лак-тосодержащими антибиотикорезистентными пробиотиками способствует повышению эффективности лечения хеликобактер-ассоциированных заболеваний. Правильное соблюдение предлагаемого комбинированного протокола лечения обеспечивает развитие ремиссии, характеризующейся положительной динамикой микроэкологических, метаболических и копрологических показателей.

Практические рекомендации

При хеликобактер-ассоциированных заболеваниях ЖКТ до и после проведения эрадикационной терапии рекомендуется проведение исследований для выявления структуры микроэкологических и метаболических изменений микрофлоры кишечника. Предлагаемую программу микробиологического, биохимического и копрологического исследований содержимого кишечника при заболеваниях ЖКТ, ассоциированных с Hp, рекомендуется использовать для диагностики нарушений удельного содержания микробных компонент кишечника, выявления принципа формирования популяционной структуры при дисбиотических сдвигах, своевременной диагностики сопутствующей патологии ЖКТ (дискинезии желчевыводящих путей, патологии поджелудочной железы, нарушений моторно-эвакуаторной функции).

Параметры метаболизма микрофлоры кишечника (абсолютное и относительное содержание ЛЖК (Сг-Сб) в кале, анаэробные индексы, отношение изомеров кислот к отношению неразветвленных кислот), впервые изученные при гастродуоденальной патологии, ассоциированной с Helicobacter pylori, рекомендуются в качестве критериев своевременной диагностики хеликобак-тер- и/или антибиотик-ассоциированных дисбактериозов.

Современную фармакотерапию заболеваний ЖКТ, ассоциированных с Helicobacter pylori, рекомендуется направить на различные звенья патогенеза и профилактику побочных эффектов антисекреторной и антибактериальной терапии. Необходимо ориентировать практических врачей на проведение направленных мероприятий для профилактики побочных эффектов эрадикационной терапии (антибиотик-ассоциированных дисбактериозов и/или диарей). Наиболее оптимален способ коррекции микробиоценоза кишечника в составе эрадикационной терапии и после нее у больных с хеликобактер- и/или анти-биотик-ассоциированным дисбиозом применением трехкомпонентного анти-биотикорезистентного пробиотика линекс, содержащего антибиотикорези-стентные штаммы Bifidobacterium infantis v. liberorum, Lactobacillus cidophilus и Enterococcus faecium.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Мустафина, Регина Ришатовна, Москва

1. Андерсен, Л. Клеточный иммунный ответ на инфекцию H.pylori / Л. Андерсен, А. Норгаард, М. Беннедсен // Helicobacter pylori: революция в гастроэнтерологии: сб. науч. трудов. М., 1999. - С. 46-54.

2. Ардатская, М.Д Исследование содержания и профиля низкомолекулярных метаболитов сахаролитической толстокишечной микрофлоры в норме и патологии: Дис. канд. мед. наук. М. - 1996. - 156 с.

3. Ардатская, М.Д. Диагностическое значение содержания короткоцепо-чечных жирных кислот при синдроме раздраженного кишечника / М.Д. Ардатская // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопрокто-логии. 2000. - № 3. - С. 36-41.

4. Ардатская, М.Д. Дисбактериоз кишечника: современные аспекты изучения проблемы, принципы диагностики и лечения / М.Д. Ардатская, А.В. Дубинин, О.Н. Минушкин // Тер. архив. 2001. - № 2. - С. 67-72.

5. Артамонов, В.Е. Переносимость и безопасность антихеликобактерных препаратов при лечении язвенной болезни / В.Е. Артамонов // Клиническая медицина. 2001. - № 2. - С. 53-57.

6. Аруин, Л.И. Хронический гастрит / Л.И. Аруин, П.Я. Григорьев, В.А. Исаков и др. // Амстердам, 1993. - 362 с.

7. Аруин, Л.И. Активный хронический гастрит и Helicobacter pylori / Л.И. Аруин, B.C. Городинская и др. // Арх патологии. 1994. - Т. 56, № 1. - С. 33.

8. Аруин, Л.И. Helicobacter pylori в этиологии и патогенезе язвенной болезни/ Л.И. Аруин // Материалы 7-й сессии Российской группы по изучению Helicobacter pylori. Н. Новгород, 1998. -С. 6-11.

9. Аруин, Л.И. Морфологическая диагностика болезней желудка и кишечника / Л.И. Аруин, Л. Л. Капуллер // М.: Триада-Х. 1998.

10. Аруин, Л.И. Helicobacter pylori и рак желудка / Л.И. Аруин // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 1999. - № 8(1).-С. 72-78.

11. Бабушкин, Н.В. Применение препарата «хилак-форте» в комплексном лечении дисбактериоза кишечника / Н.В. Бабушкин // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 1997. -№ 5. - С. 96-97.

12. Бабин, В.Н. Молекулярные аспекты симбиоза в системе хозяин-микрофлора / В.Н. Бабин, О.Н. Минушкин и др. // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 1998. - № 6. - С. 76-82.

13. Бабин, В.Н. Биохимические и молекулярные аспекты симбиоза человека и его микрофлоры / В.Н. Бабин, И.В. Домарадский, А.В. Дубинин и др. // Российский химический журнал. 1994. - т. 38(6). - С. 66-78.

14. Баженов, Л.Г. Изучение антагонистического действия лактобацилл на Helicobacter pylori / Л.Г. Баженов, В.М. Бондаренко, Е.А. Лыкова и др. // Журнал микробиологии. 1997. - № 3. - С. 89-91.16Билибин, А.Ф. / Тер. архив, 1967. - Т. 39, вып. 11.-С. 21-28.

15. Баранская, Е.К. Клинический спектр предраковой патологии желудка / Е.К. Баранская, В.Т. Ивашкин // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 2002. - № 4. - С. 7-14.

16. Бейер, Л.В. Факторы местного иммунитета гастродуоденальной системы и кишечника у здоровых детей / Л.В. Бейер, В.Г. Дорофейчук, Н.И. Толкачева // Педиатрия. 1993. - № 1. - С.4-7.

17. Белобородова, Н.В. Метаболиты анаэробных бактерий (летучие жирные кислоты) и реактивность макроорганизма / Н.В. Белобородова, С.М. Белобородое // Антибиотики и химиотерапия. 2000. -т. 45, № 2. - С. 28-35.

18. Блинков, И.Л. Проблема Helicobacter pylori миф и реальность / И.Л. Блинков // Клиническая медицина. - 1997. - № 12. - С. 71-74.

19. Бондаренко, В.М. Дисбактериозы желудочно-кишечного тракта / В.М. Бондаренко, Б.В. Боев, Е.А. Лыкова и др. // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 1998. -№ 1- С. 66-70.

20. Бондаренко, В.М. Дисбактериозы кишечника у взрослых / В.М. Бондаренко, Н.М. Грачева, Т.В. Мацулевич // М, 2003. - С. 220.

21. Бондаренко, В.М. Метаболитные пробиотики: механизмы терапевтического эффекта при микроэкологических нарушениях / В.М. Бондаренко // Consilium medicum. 2005. - Т.7. - №6. - С. 437-442.

22. Брашкина, Н.П. Линекс в лечении дисбактериоза кишечника у детей раннего возраста / Н.П. Брашкина, Г.А. Самсыгина, Г.Д. Першина // «Человек и лекарство»: сб. науч. тр. М, 1998. - С. 257.

23. Воробьев, А.А. Микрофлора кишечника при некоторых патологических состояниях инфекционной и неинфекционной природы / А.А. Воробьев, Ю.В. Несвижский и др. // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 1995. - № 4. - С. 30-35.

24. Воробьев, А.А. Микрофлора кишечника / А. А. Воробьев, Н.А. Абрамов, В.М. Бондаренко и др. // Вестник РАМН. 1997. - № 2. - С. 4-7.

25. Воробьев, А.А. Микроэкологические нарушения при клинической патологии и их коррекция бифидосодержащими препаратами / А. А. Воробьев, В.М. Бондаренко, Е.А. Лыкова и др. // Вестник Российской академии медицинских наук. 2004. - № 2. - С. 13-17.

26. Воробьев, А.А. Анализ штаммовой общности пристеночных биотопов желудочно-кишечного тракта / А. А. Воробьев, Ю.В. Несвижский и др. // Вестник Российской академии медицинских наук. 2004. - № 6. - С. 15-18.

27. Горелов, А.В. Принципы лечения острых кишечных инфекций у детей / А.В. Горелов // Фарматека. 2003. - № 7. - С. 64- 67.

28. Грачева, Н.М. Дисбактериоз кишечника, причины возникновения, диагностика, применение бактерийных биологических препаратов / Н.М. Грачева, Н.Д. Ющук, Р.П. Чупринина и др. // Пособие для врачей и студентов. -М, 1999.-44 с.

29. Грацианская, А.Н. Инфекция Helicobacter pylori: эффективность и переносимость эрадикационных лекарственных схем у детей / А.Н. Грацианская, П.А. Татаринов и др. // Фарматека. 2002. - № 9. - С. 74-78.

30. Григорьев, П.Я. Диагностика и лечение хронических болезней органов пищеварения / П.Я. Григорьев и др. // М.: Медицина, 1993. 409 с.

31. Григорьев, П.Я. Медикаментозная профилактика обострений язвенной болезни / П.Я. Григорьев, Э.П. Яковенко, Н.А. Агафонова и др. // Терапевтический архив. 1995. - Т. 67. - № 2. - С. 26-29.

32. Григорьев, Р.Я. Гастродуоденальные заболевания, ассоциированные с Helicobacter pylori / Р.Я. Григорьев, Е.П. Яковенко // Клиническая медицина.- 1998. -№6.-С. 5-11.

33. Григорьев П.Я. Helicobacter pylori: гастрит, дуоденит, язвенная болезнь / П.Я. Григорьев // Практикующий врач. 1999. - № 16. - С. 2-4.

34. Гриневич, В.Б. Клиническая эффективность пимафуцина в составе комплексной эрадикационной терапии язвенной болезни / В.Б. Гриневич, Ю.П. Успенский, Е.И. Сас и др. // Фарматека. 2003. - № 7. - С. 17-20.

35. Джулай, Г.С. Клинико- патогенетические варианты хронического гастрита и критерии их диагностики: Автореф. дис. . д-ра мед. наук / М., 2003.-39 с.

36. Ерюхин, И.А. Псевдомембранозный колит и "кишечный сепсис" -следствие дисбактериоза, вызванного антибиотиками / И.А. Ерюхин, С.А. Шляпников, В.Ф. Лебедев и др. // Вестник хирургии им. И.И. Грекова.- 1997. т. 156, № 2. - С. 108-111.

37. Захарова, Н.В. Течение хронического Helicobacter pylori-ассоциированного гастрита в условиях комплексной антибактериальной и иммунокоррегирующей терапии: Дис. канд. мед. наук / Санкт-Петербургская медицинская академия. СПб, 1998. - 115 с.

38. Златкина, А.Р. Современные подходы к коррекции дисбактериоза кишечника / А.Р. Златкина // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатоло-гии, колопроктологии. 1999. - № 3. - С. 64-66.

39. Ивашкин, В.Т. О патогенной роли Helicobacter pylori / В.Т. Ивашкин, С.Д. Положенцев и др. //Тер. архив. 1993. - Т. 65. -№ 2. - С. 11-13.

40. Ивашкин, В.Т. Helicobacter pylori: революция в гастроэнтерологии. Под ред. акад. РАМН В.Т. Ивашкина, проф. Ф. Мегро, Т.Д. Лапиной. М.: "Триада-Х", 1999.-255 с.

41. Исаков, В.А. Хеликобактериоз / В.А. Исаков, И.В. Доморадский // М.: Медпрактика-М, 2003. 412 с.

42. Конорев, М.Р. Клинико-иммунологические аспекты патогенеза, диагностики и лечения хронического дуоденита и гастрита, ассоциированного с Helicobacter pylori: Дис. докт. мед. наук / Смоленск, 2001. - 224 с.

43. Комаров, Ф.И. Руководство диагностики и лечения внутренних болезней / Ф.И. Комаров, А.В. Калинин // Болезни пищевода и желудка. - М.: Медицина, 1992. - Т. 3. - С. 9-138.

44. Корнева, Т.К. Дисбактериоз кишечника у проктологических больных: микробиологические аспекты / Т.К. Корнева // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 1999. -№ 3. - С. 55-60.

45. Корниенко Е.А. Клиника, диагностика и лечение гастродуоденальной патологии, ассоциированной с инфекцией Helicobacter pylori, у детей: авто-реф. дис. докт. мед. наук. СПб., 1999. - 40 с.

46. Корсунский, А.А. Целесообразность пробиотической терапии при пи-лорическом геликобактериозе у детей / А.А. Корсунский, А.И. Хавкин, Е.А. Лыкова и др. // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 1998. - № 5. - т. VIII. - С. 63.

47. Корсунский, А.А. Хеликобактериоз и болезни органов пищеварения у детей / А.А. Корсунский, П.Л. Щербаков II М.: Медпрактика, 2002. - 168 с.

48. Коршунов, В.М. Рациональные подходы к проблеме коррекции микрофлоры кишечника / В.М. Коршунов, В.В. Смеянов, Б.А. Ефимов // Вестник Российской академии медицинских наук. 1996. - № 2. - С. 60-65.

49. Коршунов, В.М. Микроэкология желудочно-кишечного тракта / В.М. Коршунов, Н.Н. Володин, Б.А. Ефимов и др. // Учебное пособие. М, 1999.

50. Коршунов, В.М. Качественный состав нормальной микрофлоры кишечника у лиц различных возрастных групп / В.М. Коршунов, JI.B. Поташник, Б.А. Ефимов и др. // Журнал микробиологии. 2001. - № 2. - С. 57-62.

51. Костоломова, Г.А. Клинико-иммунологический анализ дисбиотических состояний у детей / Г.А. Костоломова // Автореф. дис. .канд. мед. наук // Тюмень, 2001. - 25 с.

52. Красноголовец, В.Н. Дисбактериоз кишечника / В.Н. Красноголовец // М.: Медицина, 1989. С. 51-78.

53. Крылов, В.П. Принципы комбинированной терапии кишечного дисбактериоза / В.П. Крылов, В.Г. Орлов, Т.В. Малышева // Журнал микробиологии. 1998. - № 4. - С. 64-66.

54. Куваева, И.Б. Микроэкологические и иммунные нарушения у детей / И.Б. Куваева, К.С. Ладодо // Диетическая коррекция. М. - 1991.

55. Лапина, Т.Л. Язвенная болезнь: новые факты новые споры / Т.Л. Лапина // Арх. пат. - 1998. - № 60 (3). - С. 63-67.

56. Лапина, Т.Л. Основные принципы диагностики Helicobacter pylori / Т.Л. Лапина // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, коло-проктологии. 1999. -№ 2. - С. 41-45.

57. Лапина, Т.Л. Российские рекомендации по диагностике и лечению инфекции Helicobacter pylori / Т.Л. Лапина // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 1999. -№ 3. - С. 84-89.

58. Логинов, А.С. Диагностические возможности определения водорода в выдыхаемом воздухе нового функционального теста при заболеваниях кишечника / А.С. Логинов, Н.Ю. Лорие, А.И. Парфенов // Терапевтический архив. - 1991.-№ 2.-С. 74-76.

59. Логинов, А.С. Проблемы клинической гастроэнтерологии / А.С. Логинов // Терапевтический архив. 1993. - Т. 65. - № 2. - С. 4-7.

60. Маев И.В. Helicobacter pylori: эпидемиология, диагностика, основы эрадикационной терапии / И.В. Маев, Е.С. Вьючнова, Е.Г. Лебедева и др. // Под ред. И.В. Маева. М.: ВУНМЦ МЗ РФ. - 2000.

61. Маев, И.В. Побочные действия современной антихеликобактерной терапии / И.В. Маев, Е.С. Вьючнова, Е.Г. Петрова // Клиническая медицина. -2002.-№6.-С. 7-12.

62. Малфертайнер, П. Роль HP в развитии пептической язвенной болезни и рефлюксэзофагита / П. Малфертайнер // В кн.: Материалы симпозиума «Кислотозависимые и HP ассоциированные заболевания». М., 1999.

63. Материалы XI конгресса детских гастроэнтерологов России "Актуальные проблемы абдоминальной патологии у детей" / Под ред. В.А. Тобо-лина // М, 2004.

64. Масевич, Ц.Г. Гастроэзофагеальная рефлюксная болезнь в сочетании с инфицированием пилорическим хеликобактером / Ц.Г. Масевич, И.А. Лосева // Терапевтический архив. 1998. - № 2. - С. 26-28.

65. Маянский, А.Н. Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия / А.Н. Маянский // 2000. - Т. 2, № 2. - С. 61-64.

66. Минушкин, О.Н. Комплексная диагностика, лечение и профилактика-дисбактериоза (дисбиоза) кишечника в клинике внутренних болезней / О.Н. Минушкин // Методические рекомендации. М, 1997. - 53 с.

67. Минушкин, О.Н. Язвенная болезнь и Helicobacter pylori / О.Н. Минушкин // Кремлевская медицина. 1998. - № 2. - С. 7-9.

68. Минушкин, О.Н. Дисбактериоз кишечника / О.Н. Минушкин, М.Д. Ардатская и др. // Российский медицинский журнал. 1999. - № 3. - С. 40-45.

69. Методические указания по применению унифицированных микробиологических методов исследования в клинико-диагностических лабораториях. Приложение к Приказу МЗ СССР № 535 от 22 апреля 1985 г.

70. Митрохин, С.Д. Современная система мониторинга за микробной экологией кишечника человека / С.Д. Митрохин, Е.В. Никушкин // Практикующий врач. 1998. - № 13 (2). - С. 42-44.

71. Михайлова, T.JI. Биопрепараты и пищевые факторы в коррекции дисбактериоза / T.JI. Михайлова, Т.Ю. Калинская и др. // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 1999. -№ 3. - С. 67-70.

72. Нейменов, Ю.М. Методы лабораторных клинических исследований / Ю.М.Нейменов//-М.: Медицина, 1972.-С. 137-163.

73. Несвижский, Ю.В. Изучение изменчивости кишечного микробиоценоза человека в норме и патологии / Ю.В. Несвижский // Вестник Российской академии медицинских наук. 2003. - № 1. - С. 49-53.

74. Новикова А.В. Морфологическая диагностика, болезней желудка и кишечника / А.В. Новикова // Детская гастроэнтерология / Под ред. А.А. Баранова, Е.В. Климанской, Г.В. Римарчук. М., 2002. - С. 122 - 141.

75. Пасечников, В.Д. Полимеразная цепная реакция в диагностике Н. pylori-асооциированных заболеваний / В.Д. Пасечников // Материалы конф. «Диагностика и лечение заболеваний, ассоциированных с Helicobacter pylori».-М, 1998.-С. 8-10.

76. Пат. РФ № 99106669/12 Способ разделения смеси жирных кислот фракций С2-С7 методом газо-жидкостной хроматографии / Н.С. Иконников, М.Д. Ардатская, А.В. Дубинин и др. // Приоритет от 04.04.1999 г.

77. Перетц, Л.Г. Значение нормальной микрофлоры для организма человека / Л.Г. Перетц // М, 1995. - С. 250.

78. Приворотский В.Ф. Некоторые аспекты антихеликобактерной терапии в практике педиатра / В.Ф. Приворотский, Н.Е. Луппова // Вопросы детской диетологии. 2004. - Т.2, №1. - С. 62-63.

79. Пругло, Ю.В. Дисбактериоз: возможности его влияния на морфологическое состояние слизистой оболочки толстой кишки / Ю.В. Пругло, Ю.А. Гайдар и др. // Тез. докл. конференц. Рига. - 1983. - С. 153-158.

80. Решетников О.В. Helicobacter pylori и неязвенная диспепсия / О.в. Решетников // Клиническая медицина. 2002. - № 2. - С. 19-23.

81. Роккас, Ф. Инфекция Helicobacter pylori как фактор риска рака желудка: современные доказательства / Ф. Роккас // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 2002. - № 3. - С. 66-70.

82. Румянцев, В.Г. Дисбактериоз кишечника: клиническое значение и принципы лечения / Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 1999. -№ 3. - С. 61-63.

83. Рысс, Е.С. Эрозии желудка, эрозивный гастрит, их формы и подходы к лечению / Е.С. Рысс, Ю.И. Фишзон-Рысс // Клиническая медицина. -1995. -т. 73.-№4.-С. 31-34.

84. Рябчук, Ф.Н. Дисбактериозы у детей / Ф.Н. Рябчук, З.И. Пирогова, В .А. Александрова // JL: ГИДУВ, 1988. - 24 с.

85. Савицкая, К.И. Современные представления о роли и составе кишечной микрофлоры у здоровых взрослых людей / К.И. Савицкая, А.А. Воробьев, Е.Ф. Швецова // Вестник Российской академии медицинских наук. -2002.-№2.-С. 50-52.

86. Сафонова, Н.В. Гастрит, язвенная болезнь и хеликобактериоз / Н.В. Сафонова, А.Б. Жебрун // С.-Петербург. - 1995.

87. Справочник по микробиологическим и вирусологическим исследованиям / Под ред. М.О. Биргера. 3 изд. - М., 1982.

88. Тамм, А.О. Метаболиты кишечной микрофлоры в диагностике дис-биоза кишечника / А.О. Тамм, М.П. Вия, М.Э. Микельсаар и др. // Антибиотики и мед. биотехнология. 1987. - № 32 (3). - С. 191-195.

89. Тец, В.В. Справочник по клинической микробиологии / СПб. 1994.

90. Федоров, В.Д. Воспалительные заболевания толстой кишки/ В.Д. Федоров, М.Х. Левитан // Ташкент: Медицина. - 1982.

91. Хавкин, А.И. Микрофлора пищеварительного тракта / А.И. Хавкин // монография. М.: Фонд социальной педиатрии, 2006. - 416 с.

92. Циммерман, Я.С. Человек и Helicobacter pylori: концепция взаимоотношений / Я.С. Циммерман // Российский журнал гастроэнтерологии, гепа-тологии, колопроктологии. 1998. -№ 2 (прил.5): 64 (№ 169).

93. Циммерман, Я.С. Гастродуоденальная патология и Helicobacter pylori: точка зрения / Я.С. Циммерман // Клиническая фармакология и терапия. 1999. -№ 2. - С. 37-40.

94. Циммерман, Я.С. Концепция взаимоотношений организма человека и Helicobacter pylori / Я.С. Циммерман, М.Р. Зиннатуллин // Клиническая медицина. 1999. - № 2. - С. 52-56.

95. Циммерман, Я.С. Язвенная болезнь и проблема Helicobacter pylori-инфекции: новые факты, размышления, предположения / Я.С. Циммерман // Клиническая медицина. 2001. - № 4. - С. 67-70.

96. Циммерман, Я.С. Helicobacter pylori-инфекция и рак желудка / Я.С. Циммерман // Клиническая медицина. 2004. - № 4. - С. 9-15.

97. Циммерман, Я.С. Альтернативные схемы эрадикационной терапии и пути преодоления приобретенной резистентности Helicobacter pylori к проводимому лечению /- Клиническая медицина. 2004. - № 2. - С. 9-15.

98. Цветкова, Л.Н. Лечение язвенной болезни у детей: Автореф. дис. докт. мед. наук // М. - 1993.

99. Цветкова, Л.Н Результаты биокоррекционной поддержки у детей, получавших антигеликобактерную терапию / Л.Н. Цветкова, П.Л. Щербаков, B.C. Салмова и др. // Детская гастроэнтерология. 2002. - С. 482-484.

100. Чернин, В.В. Клинико-патогенетические аспекты патогенеза, сано-генеза и лечения язвенной болезни / В.В. Чернин // Калинин, 1994. - 255 с.

101. Чернин, В.В. Клинико-патогенетические варианты хронического гастрита /В.В. Чернин, Г.С. Джулай // Тер. архив. 2004. - № 2. - С. 22-27.

102. Шеляпина, В.В. Клинико-иммунологические особенности раннего периода адаптации в зависимости от характера микробной колонизации у новорожденных / В.В. Шеляпина // Педиатрия. 1998. - № 2. - С. 31-365.

103. Шендеров, Б.А. Нормальная микрофлора и ее роль в поддержании здоровья человека/ Б.А. Шендеров // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 1998. -№ 1. - С. 61-65.

104. Шендеров, Б.А. Медицинская микробная экология и функциональное питание / Б.А. Шендеров // М. - 1998. - т. 1-3.

105. Шептулин, А.А. Синдром избыточного роста бактерий и «дисбактериоз кишечника»: их место в современной гастроэнтерологии / А.А. Шептулин // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 1999.-№3.-С. 51-54.

106. Шкитин, В.А. Роль Helicobacter pylori в патологии человека / В.А. Шкитин, А.И. Шпирна и др. // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. 2002. - № 4 (2). - С. 128-141.

107. Щербаков, П.Л. Микроэкология толстой кишки при семейном хели-кобактериозе / П.Л. Щербаков, А.А. Воробьев, Ю.В. Несвижский и др. // Вестник Российской академии медицинских наук. 1998. - № 5. - С. 40-44.

108. Щербаков П.Л. Эпидемиология инфекции Helicobacter pylori / П.Л. Щербаков // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 1999. - № 2. - С. 8-11.

109. Щербаков, П.Л. Helicobacter pylori-революция в гастроэнтерологии / П.Л. Щербаков, Ф. Мегро, Т.Л. Лапина // М. - 1999. - С. 14-20.

110. Щербаков, П.Л. Эпидемиология инфекции Helicobacter pylori / П.Л. Щербаков // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 1999. - № 2. - С. 8-11.

111. Щербаков П.Л. Эпидемиология инфекции H.pylori / П.Л. Щербаков // В сб. «Helicobacter pylori: революция в гастроэнтерологии». Ред. акад. РАМН В.Т. Ивашкина, проф. Ф. Мегро., Т.Л. Лапиной. М.,1999. - С. 14-21.

112. Щербаков, И.Т. Патоморфология слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта при острых бактериальных, вирусных кишечных инфекциях и хронических колитах / И.Т. Щербаков // // Дис. . докт. мед. наук. М. -1995.-44 с.

113. Яременко, М.В. Оценка состояния желудка, двенадцатиперстной кишки и желчевыводящих путей при хроническом гепатите С у лиц молодого возраста / М.В. Яременко // Дис. канд. мед. наук. С.- Петербург. - 2003.

114. Ярыгин, В.Н. Дисбактериоз кишечника у детей. Традиционные и нетрадиционные подходы к лечению и профилактике (методические рекомендации) / В.Н. Ярыгин, В.Ф. Демин и др. // РГМУ. М. - 2000. - 55 с.

115. Aaronson, P.J. Br. J. Pharmacol. / P.J. Aaronson, W. McKinnon, L. Poston/- 1996.-Vol. 117, suppl. 2.-P. 365-371.

116. Arslan, D. Helicobacter pylori infection in children with insulin dependent diabetes mellitus / D. Arslan, M. Kendirci, S. Kurtoglu, M. Kula // J. Pediatr Endocrinol Metab. 2000. - V.13. - №5. - P. 553-556.

117. Asai, S. Arch. Virol. / S. Asai, Y. Nacamura et al. // 1991. - Vol. 119, suppl. 3-4.-P. 291-296.

118. Ardizzone, S. Drug / S. Ardizzone, G.B. Porro. 1998. - Vol. 55, suppl. 4.-P. 519-542.

119. Atherton, J.C. Non-endoscopic tests in the diagnosis of Helicobacter pylori infection/ H. Cohen, L. Laine // Aliment. Parmacol. Ther. 1997. - Vol. 11, suppl. l.-P. 11-20.

120. Bai, J.C. Malabsorption syndromes / J.C. Bai // Digestion. 1998. - № 59.-P. 530-546.

121. Baker, J. Nutrition, eating and gastrointestinal conditions in adolescence / J. Baker, B.K. Sandhu // J. R. Coll Physicians Lond. 2000. - V. 34. - № 2. - P. 137-140.

122. Barnard, J.A. Adv. Exp. Med. Biol. / J.A. Barnard, J.A. Delzell, N.M. Bulus // 1997. - Vol. 422. - P. 137-144.

123. Blaser M.J. Helicobacter pylori and duodenal ulcer / M.J. Blaser // Lancet. 1997. - Vol. 349. - P. 1020-1022.

124. Blaser M.J. Helicobacter pylori: balance and inbalance / M.J. Blaser // Eur. J. Gastroenterol. Hepatolog 1998. - 10 (suppl. 1). - P. 15-18.

125. Blaser M.J. Helicobacter pylori and gastric disease / M.J. Blaser // Br. Med.J. 1998.-316.-P. 1507-1510.

126. Blaser M.J. Helicobacters and indigenous to the human stomach: Duodenal ulceration is due to changes in gastric microecology in the modern era // M.J. Blaser // Ibid. 1998. - 43. - P. 721-727.

127. Bogovic Matijasic, B. Lactobacillus K7 a new candidate for a probiotic strai / B. Bogovic Matijasic, I. Rogelj // Food Technol. Biotechnol. - 2000. - № 38.-P. 113-120.

128. Boukhliq, R. Anim. Reprod Sci / R. Boukhliq, G.B. Martin // 1997. -Vol. 5, suppl. 49 - P. 143-159.

129. Brieger, L.J. Pract. Chemie / L.J. Brieger. 1978. - Vol. 17. - P. 124138.

130. Casafont, F. Bacterial overgrowth in the small intestine in chronic liver disease / F. Casafont, L. Martin et al. // In: Proceeding of the Falk symposium, 100. Boston. - Kluwer Academic Publichers. - 1998. - P. 332-340.

131. Cherbut, C. Scand J. Gastroenterologie / C. Cherbut, A.C. Aube, H.M. Blottiere // 1997. - Vol. 222. - P. 58-61.

132. Cohen, H. Endoscopic methods for the diagnosis of Helicobacter pylori / H. Cohen // Aliment. Parmacol. Ther. 1997. - Vol. 11, suppl. 1. - P. 3-9.

133. Cook, S.I. Aliment Pharmacol. Therapeut / S.I. Cook, J.H. Sellin // -1998. Vol. 12, suppl. 6. - P. 499-507.

134. Curi, R Gen Pharmacol. / R. Curi, J.A. Bond, P.C. Calder // 1993. -Vol. 24, suppl. 3.-P. 591-597.

135. Current European concepts in the management of Helicobacter pylori infection. The Maastricht Consensus Report / Gut. 1997. - Vol. 41, № 1. P. 8-13.

136. Edlund, C. Effect on the human normal microflora of oral antibiotics for treatment of urinary tract infection / C. Edlund, C.E. Nord // J. Antimicrob. Chemoter. 2000. - Vol. 46, Suppl.Sl. - P.41-41.

137. Eftimiadi, C. J. Infect. Dis. / C. Eftimiadi, M. Tonetti, A. Cavallero et al. II- 1990.- Vol. 161,suppl. l.-P. 138-142.

138. Fanaro, S. Intestinal microflora in early infancy: composition and development / S. Fanaro, R. Chierici, P. Guerrini, V. Vigi// Acta Paediatr. 2003. -Vol.91, supp.l. -P. 48-55.

139. Fernandez, M. F. Probiotic properties of human lactobacilli strains to be used in the gastrointestinal tract / M. F. Fernandez, S. Boris, C.J. Barbes // J. Appl. Microbiol. 2003. № 94. - P. 449-455.

140. Gibson, G.R. Human colonic bacteria: role in nutrition, physiology and pathology / G.R. Gibson, G.T. Macfarlane // Boca Raton, Florida: CRC Press.1995.-P. 1-18.

141. Gill H.H. Epidemiology of Helicobacter pylori: the Indian scenario / H.H. Gill, H.G. Desai, P. Majmudar et al. // Indian. J. Gastroenterol. 1993. - № 12. -P. 9-11.

142. Graham, D.Y. Pathogenesis of increased sucrose permeabilily in Helicobacter pylori gastritis / D.Y. Graham // Comment on: Dig Dis Sci. 1998. -Vol. 3. - № 4.-P. 749-753.

143. Hamilton-Miller, J.M. The role of probiotics in the treatment and prevention of Helicobacter pylori infection / J.M. Hamilton-Miller // Int. J. Antimicrob Agents. 2003. - Vol. 22. - P. 360-6.

144. Hentges, D.J. Human intestinal microflora in health and disease / D.J. Hentges // New Yore. Academic Press. -1983.

145. Imrie, C. Is Helicobacter pylori infection in childhhd risk factor for gastric cancer? / C. Imrie, M. Rowland, B. Bourke et al. // Pediatrics. 2001. - № 107.-P. 373-380.

146. Kishiro, Y. Jpn. J. Pharmacol. / Y. Kishiro, K. Ueda, M. Fujiwara, I. Yamamoto // 1994. - Vol. 66, suppl. 3. - P. 369-376.

147. Lambe, D.W. Anaerobic bacteria / D.W. Lambe, R.J. Genco, N. Mayberry Carson // Selected topics, plenum Press, 1980. - P. 313.

148. Le Leiko, N.S. Pediatr Clin. North. Am / N.S. Le Leiko, M.J. Walsh //1996. Vol. 43, suppl. 2. - P. 451-470.

149. Lukacs, A. Dermatologica / A. Lukacs, H.C. Korting, G. Ruckdeschel // -1991.-Vol. 182, suppl. l.-P. 32-34.

150. Macfarlane, G.T. J. Gastroenterologie / G.T. Macfarlane, S. Macfarlane // 1997.-Vol. 32: 22.-P. 3-9.

151. Malaty, H. Helicobacter pylori and socioeconomic factors in Russia / H. Malaty, V. Paykov, 0. Bycova et al. // Helicobacter. 1996. - № 1 (2). - P. 82-87.

152. Malfertheiner, P. Current concepts in the management of Helicobacter pylori infection the Maastricht 2000 Consensus Report / P. Malfertheiner, F. Megraud, C. 0' Morain et al. // Aliment Pharmacol. Ther. - 2000. - Vol. 16 (2). -P. 167-80.

153. Matsunaga, N. Arch. Phisiol. / N. Matsunaga, M. Wakiya, S.G. Roh et al. // 1998. - Vol. 274, suppl. 1. - P. 45-51.

154. McFarland, L.V. Risk factor for antibiotic-associated diarrhea / L.V. McFarland // Ann. Med. Intern. (Paris). 1998. - Vol. 149. - № 5. - P. 261-266.

155. McNiel, N.I. Am J. Clin. Nutr. / N.I. McNiel // 1984. - Vol. 39. - P. 338-342.

156. Megraud, F. How should Helicobacter pylori infection be diagnosed? / F. Megraud // Gastroenterologie. 1997. - Vol. 113, suppl. 1. - P. S93-S98.

157. Monteiro, L. Detection of Helicobacter pylori in gastric biopsy polymerase chain reaction. Helicobacter pylori: techniques for clinical diagnosis and basic research / L. Monteiro, C. Birac, F. Megraud // Ed. By A. Lee, F. Megraud.-1996. -P. 112-120.

158. Mortensen, P.B. Scand J. Gastroenterologie / P.B. Mortensen, M.R. Clausen// 1996.-Vol.216. -P. 132-148.

159. Mortensen, P.B. Ibid / P.B. Mortensen // Vol. 31. - P. 132-148.

160. Mukhopadhyay D.K. A study of Helicobacter pylori in north Indian subjects with nonulcer dyspepsia / D.K. Mukhopadhyay, R.K. Tandon, S. Dasarathy et al. // Indian. J. Gastroenterol. 1992. - № 11. - P. 76-79.

161. NIH consensus development panel on Helicobacter pylori in peptic ulcer disease. Helicobacter pylori in peptic ulcer disease / JAMA. 1994. - Vol. 272. -P. 65-69.

162. Nord, С / Microbial Ecology Hilt Dis. // C. Nord, A. Heimdahl, L. Kager //-1991.-Vol. 3, № 2. P. 193-207.

163. Nordgaard, I. P.B. Mortensen, A.M. Langkilde // Nutrition. 1995. -Vol. 11.-P. 129-137.

164. Peng, N.J., A 15-minute 13C.-urea breath test for the diagnosis of Helicobacter pylori infection in patients with non-ulcer dyspepsia / N.J. Peng, P.I. Hsu, S.C. Lee // J. Gastroenterol. Hepatol. 2000. - V. 15. - № 3. - P. 284-289.

165. Poundeyr, R.E. Aliment. Pharmacol. Ther. / R.E. Poundeyr, D. Ng // 1995. - Vol. 9, Suppl. 2. - P. 33-39.

166. Pretolani, S. Helicobacter pylori: An atlas / S. Pretolani, R. Bonvicini, G. Gasbarrini // Eds P. Malrertheiner, P. Michetti. London. - 1997. - P. 2.1. - 2.6.

167. Roffe, C. Biotherapy for antibiotic associated and other diarrhoeas/ C. Roffe II J. Infect. 1996. - 32. - P. 1-10.

168. Salminen, S. Gut flora in normal and disordered states / S. Salminen, E. Isolauri, T. Onela // Chemotherapy. -1995. № 41 (supll. 1). - P. 5-15.

169. Sano, N. Сотр. Biochem. Physiol. /N. Sano, E. Nacamura, H. Takahashi // 1995. - Vol. 110, suppl. 4. - P. 375-378.

170. Sartor, R.B. Hepatic injury and biliary tract diseases associated with small intestinal overgrowth / R.B. Sartor, S.N. Lichtman. Ibid. - P. 241-250.

171. Savage, D.C. / Microbial Ecology of the Gut II Eds R.T.J. Clark, T. Baushop. 1977.-P. 277-310.

172. Sellin, J.H. J. Gastroenterologie / J.H. Sellin, R. De Soignie // 1998. -Vol. 114, suppl. 4.-P. 737-747.

173. Stojkovic, S. Prezivetje in ucinkovitost sevov Lactobacillus K7 in LF221 v razlicnih okoljskih razmerah / S. Stojkovic // Doktorsko delo. - Ljubljana, Biotehniska fakulteta. - 2003. - P. 133.

174. Sullivan, A., Effect of antimicrobial agents on the ecological balance of human microflora / A. Sullivan, C. Edlund, C.E. Nord // Lancet Infect. Dis.2001.- Vol. l.-№2.-P.101-114.

175. Tannock, G.W. Normal microflora // London: Chapman & Hall. 1995.

176. The Report of the Digestive Healthinitiative International Update Conference on Helicobacter pylori / Gastroenterology. 1997. - Vol. 113, suppl. l.-P. s4-s8.

177. Toshio, M. J. Jap. Soc Food Technolog. / M. Toshio, Y. Toshihiro, M. Akihiro et al. // 1994. - Vol. 41. - P. 10.

178. Tutgat, G.N.J. Treatment of Helicobacter pylori infection: Management of patients with ulcer disease by general practitioners and gastroenterologists / G.N.J. Tutgat//Gut. 1998.-43 (suppl. l).-P.24-26.

179. Tursi, A. Evaluation of the efficacy and tolerability of four different therapeutic regimens for the Helicobacter pylorieradication / A. Tursi, G. Cammarota, M. Montalto et al. // Panminerva Medica. 1996. - Vol. 38, suppl. 3. -P. 145-9.

180. Wang, K.J. Effects of ingesting Lactobacillus and Bifidobacterium -containing yogurt in subjects with colonized Helicobacter pylori / K.J. Wang, S.N. Li, C.S. Liu et al. // Am J. Clin. Nutr. - 2004. - Vol. 80. - P. 737-41.

181. Wu, Q.H. J. Virol. Meth. / Q.H. Wu, J. Ascensao, G. Jamamura et al. // -1994. Vol. 47, suppl. 1-2. - P. 37-50.

Информация о работе

Мустафина, Регина Ришатовна
кандидата биологических наук
Москва, 2007
ВАК 03.00.07

Диссертация

Коррекция пробиотиками микроэкологических нарушений кишечника у пациентов после эрадикационной терапии Helicobacter pylori - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Коррекция пробиотиками микроэкологических нарушений кишечника у пациентов после эрадикационной терапии Helicobacter pylori - тема автореферата по биологии, скачайте бесплатно автореферат диссертации

Похожие работы