Колонизация условно-патогенными микроорганизмами слизистой оболочки полости рта при хроническом пародонтите

Матисова, Елена Владимировна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Колонизация условно-патогенными микроорганизмами слизистой оболочки полости рта при хроническом пародонтите
ВАК РФ 03.02.03, Микробиология

Автореферат диссертации по теме "Колонизация условно-патогенными микроорганизмами слизистой оболочки полости рта при хроническом пародонтите"

На правах рукописи

МАТИСОВА ЕЛЕНА ВЛАДИМИРОВНА

КОЛОНИЗАЦИЯ УСЛОВНО-ПАТОГЕННЫМИ МИКРООРГАНИЗМАМИ СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКЙПОЛОСТИ РТА ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ ПАРОДОНТИТЕ

03.00.07 - Микробиология 14.01.14 - Стоматология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Волгоград - 2010

604605893

004605893

Работа выполнена в ГОУ ВПО «Волгоградский государственный медицинский университет Росздрава»

Научные руководители: доктор медицинских наук, профессор

B.C. Крамарь

доктор медицинских наук, профессор

C.B. Дмитриенко

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор А.Т. Яковлев

доктор медицинских наук, профессор И.В. Маланин

Ведущая организация:

ГОУ ВПО «Саратовский государственный

медицинский университет

им. В.И. Разумовского Росздрава»

Защита состоится « 2010 г в /О. ¿ЗС*часов на заседании

диссертационного совета Д 208.008.06 при Волгоградском государственном медицинском университете по адресу: 400066, Волгоград, пл. Павших борцов,!

С диссертацией можно ознакомиться в фундаментальной библиотеке Волгоградского государственного медицинского университета

Автореферат разослан «_ /Л ^¿¿¿¿и 2010 г

Ученый секретарь Диссертационного совета Д.с.н., доцент \У<Г \f М.Д. Ковалева

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования. Полость рта представляет своеобразную экологическую систему, тесно связанную с внутренней средой организма и внешним окружением. Высокая частота ее поражения в значительной степени обусловлена особенностями строения и функции, постоянным контактом с внешней средой, разнообразной нагрузкой (А.И. Рыбаков с соавт., 1990; Е.В. Боровский, 2000; Е.Н. Жулев, 2003; Х.П. Мюллер, 2004).

Неотъемлемой частью экологической системы полости рта является нормальная микрофлора, представляя собой первичную мишень для любых факторов, прямо или опосредованно влияющих как на симбионты, так и на условно-патогенные микроорганизмы, обеспечивает колонизационную резистентность (А.А. Воробьев, 2000; О.В. Бухарин, 2002; Т.С. Осипенкова, 2002; Е.В. Боровский, 2003; В.Н. Царев с соавт., 2008).

Среди болезней, имеющих большее значение в стоматологии, наиболее распространенной считается пародонтит, который проявляется в различных формах, формирует в полости рта очаги хронической инфекции. Все вышеперечисленное позволяет отнести данную патологию зубочелюстной системы не только к медицинской, но и к важной социальной проблеме (И.В. Безрукова, 2004; О.М. Брагина, 2004; B.C. Крамарь с соавт., 2010).

В настоящее время роль микробного фактора в развитии пародонтитов не вызывает сомнения, хотя работ, посвященных анализу микрофлоры слизистых оболочек и пародонтальных карманов, в доступной литературе не много (В.Н. Царев с соавт., 2005; JJ. Kamura, 1995).

Однако, несмотря на богатый опыт исследователей по этому вопросу, при анализе качественного состава микрофлоры зубных отложений не удалось выделить один или несколько каких-либо видов микроорганизмов как специфических факторов, детерминирующих развитие заболевания. У

В последние годы в литературе появились работы, посвященные роли анаэробов в развитии пародонтита (J. Slots et al., 1990; A.D. Haffajee, S.S. Socransky, 1994; A. Tanner et al., 1998). Вместе с тем изучение колонизации условно-патогенными микроорганизмами различных экологических ниш полости рта и углубленное исследование критериев их патогенности является необходимым условием для объективной оценки микробного фактора и экологической значимости микроорганизмов при стоматологической патологии.

Исследования, проведенные в последние десятилетия, позволили установить, что A. actinomycetemcomitans играет важную роль в развитии быстро прогрессирующего пародонтита, при этом выделение этого микроорганизма коррелирует с глубиной пародонтального кармана и тяжестью воспалительно-деструктивных изменений в околозубных тканях Вместе с тем, ряд авторов (W.J. Loesche, et al., 1990; М. Umeda et al., 1996; L.J. Brown, H. Loe, 2000) подвергает сомнению этиологическую роль данных бактерий в развитии воспалительных заболеваний пародонта.

Не подлежит сомнению факт, что при увеличении пародонтальных карманов наблюдается гипоксия тканей, и анаэробы становятся ведущим фактором деструктивных процессов. Перечень анаэробных микробов, значимых в возникновении заболеваний пародонта, известен, однако роль этих патогенов в развитии хронического процесса при пародонтите изучена недостаточно. Это объясняется трудностями, связанными с обнаружением и выделением анаэробов, их идентификаций, а также недостаточной изученностью факторов патогенности этой группы микроорганизмов.

В последние годы сообщается об увеличении резистентности микроорганизмов к различным антибактериальным препаратам. Поэтому биология чувствительности региональных клинически значимых изолятов к антибиотикам приобретает важное значение при выборе эффективных этиотропных средств.

Все вышеизложенное явилось обоснованием проведения настоящего диссертационного исследования, направленного на изучение спектра доминирующих условно-патогенных микроорганизмов в биоценозе полости рта, детальное изучение их биологических свойств для выяснения возможной причастности к возникновению пародонтита.

Цель исследования: оценка биоценоза полости рта и анализ биологических свойств условно-патогенных микроорганизмов, колонизирующих экосистему при пародонтите.

Задачи исследования:

1. Изучить стоматологический статус больных, страдающих хроническим пародонтитом, проживающих в крупном промышленном центре; установить его особенности в зависимости от уровня экологической нагрузки на популяцию.

2. Провести анализ микробиоценоза полости рта при пародонтите, определив значение условно-патогенных микроорганизмов в микрофлоре различных биотопов экосистемы полости рта.

3. Оценить биологические свойства «маркерных» пародонтопатогенных микроорганизмов на основе анализа морфологических, культуральных и биохимических свойств.

4. Исследовать у выделенных микроорганизмов наличие и распространенность факторов вирулентности в зависимости от формы течения патологического процесса.

5. Разработать математическую модель прогнозирования взаимосвязи биологических свойств условно-патогенных микроорганизмов и клинических проявлений пародонтита.

Научная новизна

Впервые проведены исследования, свидетельствующие о том, что развитию пародонтита предшествуют дисбиотические процессы в ротовой полости, обусловленные перестройкой аэробной аутохтонной микрофлоры, и

проявляющиеся увеличением числа условно-патогенных микроорганизмов, имеющих высокие показатели факторов персистенции. Установлена частота встречаемости анаэробных «маркерных» видов, характерных для развития пародонтита. Полученные результаты дают возможность оценить степень нарушения микробиоценоза при пародонтите и прогнозировать резидентное носительство как аэробных, так и анаэробных условно-патогенных бактерий, колонизирующих полость рта при данной патологии.

Практическая значимость

Определен спектр доминирующих аэробных и анаэробных бактерий, присутствующих в биологических субстратах ротовой полости больных пародонтитом. Показано широкое распространение полирезистентности к антибиотикам, в том числе к препаратам последних поколений, клинически значимых культур как аэробных, так и анаэробных бактерий. Предложены и обоснованы препараты для биокоррекции дисбактериоза полости рта при пародонтите (рац. предложение № 12 от 22.03.2010 г.), ингибирующие факторы персистенции «маркерных» пародонтопатогенных микроорганизмов - пробиотики и отвары трав (рац. предложение № 13 от 22.03.2010 г.). Материалы диссертации внедрены в учебный процесс кафедр детской и терапевтической стоматологии и микробиологии, вирусологии и иммунологии Волгоградского государственного медицинского университета.

Основные положения, выносимые на защиту.

Изучение колонизационной резистентности полости рта при пародонтите должно проводится с использованием методик определения как аэробных, так и анаэробных представителей.

Изменения в аэробной составляющей микробиоценоза являются пусковым моментом развития заболевания. В силу этого, эффективная биокоррекция дисбактериоза ротовой полости при пародонтите должна быть направлена на восстановление и нормализацию функций аутохтонной аэробной микрофлоры.

Полученные данные показали наличие у анаэробных бактерий широкого спектра маркеров антибиотикорезистентности в разных сочетаниях, которые обеспечивают им большой патогенный потенциал в развитии инфекционного процесса в тканях пародонта. Это позволило использовать данную микробиологическую характеристику для дифференциации (типирования) клинических значимых изолятов анаэробных бактерий.

Апробация работы

Материалы работы доложены и обсуждены на конференциях студентов и молодых ученых (2008-2010), научных сессиях ВолГМУ (2008-2010). Диссертация обсуждена на совместном заседании кафедр микробиологии, вирусологии и иммунологии, терапевтической и детской стоматологии ВолГМУ (17.04.2010 г.). По теме диссертации опубликовано 9 научных работ, в том числе 1 - в издании, рекомендованном ВАК.

Структура и объем работы. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, глав собственных исследований, обсуждения результатов и выводов, указателя литературы, включающего 234 источника, в том числе 165 отечественных и 69 зарубежных. Работа изложена на 171 странице машинописного текста, проиллюстрирована 23 рисунками и 35 таблицами.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования

Основные клинические симптомы заболевания выявлялись при тщательном целенаправленном расспросе, а также путем объективного обследования.

Изучение стоматологического статуса у находившихся под нашим наблюдением лиц проводилось по методике, рекомендованной ЦНИИС и ВОЗ.

При осмотре полости рта обращали внимание на гигиеническое состояние, наличие кариеса и его осложнений, состояние тканей пародонта, используя индексы КПУ, гигиены (ГИ), РМА и пародонтита. Состояние слизистой оболочки полости рта и красной каймы губ оценивали по A.JI. Машкиллейсону (1984). Все полученные клинические и лабораторные данные заносили в медицинскую карту, разработанную на основании предложений ЦНИИС.

Биологические свойства ротовой жидкости оценивались по активности лизоцима (В.Г. Дорофейчук, 1968), присутствию С-реактивного белка (B.C. Крамарь, Е.О. Кравцова, 1995), муцина (В.Г. Дорофейчук, 1973). Значения pH ротовой жидкости регистрировали на рН-метре-340.

Забор материала для бактериологического исследования проводился по методике B.C. Крамарь и Е.О. Кравцовой (1994). Микрофлора изучалась по методу Haenel (1979) в модификации С.К. Канарейкиной с соавт. (1981).

Для изучения качественного и количественного состава микрофлоры полости рта нами были обследованы зубной налет, слизистые оболочки языка, неба и щеки, пародонтальный «карман».

При проведении бактериологического исследования учитывали: 1) общее количество микроорганизмов; 2) стрептококки; 3) лактобактерии; 4) стафилококки; 5) дрожжеподобные грибы; 6) энтеробактерии.

Культивирование анаэробов осуществлялось в микроанаэростате системы Gas - Рак (ОХОЮ, Англия).

Идентификация выделенных микроорганизмов проводилась на основании морфологических, культуральных, биохимических и антигенных признаков в соответствии с классификацией Берджи (1980).

Плотность популяции определяли путем подсчета микроорганизмов в 1 г зубного налета, на 1см2 слизистой оболочки (КОЕ/ед. субстрата).

Антилизоцимная активность изучалась по методам О.В. Бухарина с соавт. (1984).

Оценку микроэкосистемы полости рта проводили с использованием коэффициента значимости (МП. Наткевичайте-Иванеускене, 1985), видового разнообразия (Р. Уитгекера, 1988).

Чувствительность анаэробов к антимикробным препаратам изучали диско-диффузионным методом на плотной питательной среде в анаэробных условиях. Определяли чувствительность к бензилпенициллину, эмпициллину, карбенициллину, метицшшину, оксациллину, канемицину, гентамицину, мономицину, полимиксину, левомицетину, эритромицину, линкомицину и метронидазолу.

Все материалы были подвергнуты статистической обработке. Вычисления проводились в среде пакета STAT1STICA 5.0, а также с использованием программы статистического и инженерного анализа MS Excel 97. Для биохимической идентификации стрептококков, стафилококков, энтеробактерий, анаэробов использовали тест-системы API-20, Staph. test, Entero-test. Наличие связи между изучаемыми признаками и явлениями устанавливали с использованием коэффициентов парной и множественной корреляции. Различия между величинами считались достоверными при р<0,05.

Результаты исследования и их обсуждение

Для выполнения поставленных задач обследованы пациенты, возраст которых колебался от 20 до 65 лет, в среднем составив 47,3 года. Среди наблюдаемых было 79 женщин (65,8 %) и 41 мужчина (34,2 %) с давностью заболевания от 6 месяцев до 30 лет. Наибольшее количество обследованных составили пациенты со средней и тяжелой степенью проявления хронического пародонтита, которые сформировали II и III основные группы.

Данные о распределении пациентов относительно нозологической формы, степени тяжести процесса между основными группами наглядно представлены табл. 1.

Таблица 1

Распределение пациентов относительно нозологической формы, степени тяжести

Нозологическая форма Группа сравнения абс. % %

женщ. мужч. женщ. мужч.

Легкая 45 32 13 71,1 28,9 37,5

Средняя 39 27 12 69,2 30,8 32,5

Тяжелая 36 20 16 55,6 44,4 30,0

Отмечено, что начальные проявления хронического пародонтита были выявлены уже у лиц 20 лет. Начиная с 30 лет, у пациентов преобладал хронический пародонтит средней степени тяжести, что говорит об агрессивности течения процесса.

При обследовании пациентов клиническая картина заболевания соответствовала пародонтиту легкой (37,5 %), средней (32,5 %) и тяжелой (30,0 %) степени тяжести, что подтверждено рентгенологическими данными.

Состояние гигиены полости рта и тканей пародонта представлено в табл. 2.

Таблица 2

Среднее значение индексов состояния пародонта у пациентов обследуемых групп

—.___ Индекс Группа ■— ИГ ПМА ПИ CPITN

I 3,3+0,3 38,4±5,7 3,1 ±0,7 1,7+0,1

II 3,4±0,3 61,5±3,6 5,6±0,3 2,7+0,3

III 3,7+0,5 69,1+3,3 6,2±0,6 3,4±0,9

Из данных таблицы 2 видно нарушение гигиенического состояния полости рта, подтвержденное показателями ИГ, ПИ и PMA, CPITN. При этом индекс гигиены коррелировал с тяжестью патологического процесса,

составляя при легкой 3,3 ± 0,3, средней - 3,4 ± 0,3 и тяжелой - 3,7 ± 0,5. Показатели РМА и ГШ так же нарастали пропорционально степени поражения (38,4 ± 5,7 и 3,1 ± 0,7 в первой, 61,5 ± 3,6 и 5,6 ± 0,3 - во второй, 69,1 ± 3,3; 6,2 ± 0,6 - в третьей группе больных соответственно). Весьма часто регистрировали вовлечение в процесс твердых тканей зубов в виде резорбции костной ткани, межзубных перегородок более чем на 1А длины корня, расширение периодонтальной щели, очаги остеопороза, наиболее выраженные при тяжелой степени болезни.

Индексы, характеризующие состояние пародонта, были различными и зависели от района проживания обследуемых.

Так, индекс РМА и CPITN, глубина кармана — все эти показатели были выше в разнозначных группах у жителей южного модельного района.

Установлено, что сравнительные клинические и стоматологические показатели больных были значительнее в южных районах по сравнению с центральным (рис. 1).

Рис. 1. Значения индекса КПУ у больных в зависимости от тяжести пародонтита и экологии места проживания.

Анализ неспецифической резистентности полости рта показал снижение окислительно-восстановительного потенциала слюны и уменьшение активности лизоцима, при этом наиболее четко это проявлялось у больных с тяжелой степенью патологического процесса и присутствием кариеса твердых тканей зубов. Наличие воспалительных изменений в тканях подтверждалось увеличением продукции муцина и С-реактивного белка, при этом максимальные значения достоверно чаще регистрировались в Ш группе.

При оценке взаимосвязей между обнаруженными у больных изменениями было установлено, что снижение продукции муцина имело корреляцию с низким индексом гигиены (г = 3,0), а состояние пародонта через количество удаленных зубов зависело от уровня КПУ, что подтверждало влияние факторов неспецифической резистентности на состояние стоматологического статуса больных. Кроме того, было установлено возрастание индексов гигиены и гингивита с увеличением продукции С-реактивного белка (г = 0,38 и г = 0,45), что свидетельствовало о более сложной структурно-функциональной организации ротовой полости у больных периодонтитом как единой экосистемы.

При объективном обследовании полости рта у 86 человек (71,7 %) обнаружена гиперемия и отек десневых сосочков, цианочность маргинальной и альвеолярной части десны, кровоточивость (86,7 %), зубной налет и отложения зубного камня (84,2 %). Глубина пародонтальных карманов варьировала от 3,9 до 7,0 мм и сопровождалась гноетечением (45,0 %), подвижность зубов обнаружена у 64 лиц (53,3 %). Рентгенологическое обследование соответствовало картине тяжести патологического процесса.

Анализ состояния зубочелюстной системы показал, что распространение кариеса и его осложнений была высокой (100,0 %), пломбированные и удаленные зубы были выявлены также у всех больных. У обследуемых среднее количество зубов, пораженных кариесом, было равно

19,5±1,5, в то время как в группе сравнения этот показатель был равен 17,5±1,2 ед., удельный вес удаленных зубов составил 6,5±1,5 (у здоровых лиц 2,3±0,3).

Следующим этапом нашей работы было изучение колонизации микроорганизмами полости рта у лиц обследуемых групп. В процессе работы было выделено и идентифицировано 3221 культур, относящихся к 10 семействам, 15 родам и 26 видам.

Анализ биоценоза при пародонтите показал резкое уменьшение доминирования аутохтонных микроорганизмов на фоне увеличения значимости условно-патогенных представителей. Одновременно с этим бактерии-симбионты обнаруживали резкое снижение плотности колонизации слизистых оболочек. Так, обсеменение S. salivarins снижалось с 6,65-102± 2,3 при легкой до 8,81-101 ± 1,3 КОЕ/ед.суб. при тяжелой форме пародонтита, 5. sanguis - с 1,63-Ю2 ± 4,4 до 9,75-10'±0,4 КОЕ/ед.суб. соответственно (р<0,05).

Грамнегативные бактерии не обнаруживались в ротовой полости здоровых людей. У больных пародонтитом эти микроорганизмы выделялись в 22,2% при легкой форме болезни, а при тяжелой этот показатель доходил до 72,2 % . Видовой состав энтеробактерий был разнообразным. Так, у 17,5 % больных высевалась кишечная палочка, у 15 человек (12,5 %) - клебсиеллы, у 8 (6,6 %) - энтеробактеры, у 5 (4,2 %) - бактерии рода Proteus. Слизистые оболочки ротовой полости у 3 (2,5 %) больных были колонизированы синегнойной палочкой.

Увеличение тяжести пародонтита сопровождалось резким нарастанием в микробиоценозе анаэробных «пародонтопатогенных» представителей. Так, бактерии рода Veillonella выделялись у 59,2 %, Peptostreptococcus - у 64,2 % наблюдаемых лиц. Отмечено увеличение частоты встречаемости пигментообразующих бактероидов (Prevotella spp. и Porphyromonas spp.),

грамнегативных анаэробных бактерий (Fusobacterium spp.), грамположительных микроорганизмов (Actinomyces spp.).

Максимальные показатели биологической сукцессии были установлены для золотистых стафилококков, при этом выявлено достоверное увеличение частоты встречаемости S. aureus у больных по сравнению с группой сравнения (26,2% и 42,2, 51,1 и 75,5% соответственно). Также регистрировалось изменение значимости дрожжеподобных грибов, частота встречаемости которых составляла 11,1 % и 30,3 % в I и II группе, затем уменьшалась до 22,2 % в третьей. При легкой степени заболевания в микрофлоре обнаруживались только С. albicans и С. tropicalis (40,0 и 60,0 % соответственно), а у больных тяжелой степенью пародонтита видовое разнообразие грибов увеличилось за счет появления дополнительного вида С. krusei (20,0 %).

Выявленный состав микрофлоры характеризовал собой дисбактериоз ротовой полости, диагностируемый у всех обследованных (100%). Интенсивность его выраженности определялась тяжестью основного заболевания - пародонтита.

Учитывая, что в результате патогенеза пародонтита образовалась новая ниша (карман), в дальнейшем представляло интерес изучение и анализ биоценоза этой экониши. Выделено и идентифицировано 242 штамма микроорганизмов, в том числе 171 аэробных и факультативно-анаэробных и 71 анаэробных вида.

Анализ бактериального наполнения карманов показал его широчайшее многообразие: 7,8 % культур были грамположительными анаэробными палочками рода Bacteroides, пигментообразующие бациллы {Porphyromonas spp. и Prevotella spp.) составляли 13,2 %. Грампозитивные факультативно-анаэробные кокки (стафило- и стрептококки) обнаруживались в 36,4 %, факультативно-анэробные палочки (лактобактерии) - в 16,5 %, анаэробные кокки (пептострептококки) и грамнегативные палочки (Fusobacterium spp.) -

в 5,8 и 2,5 % наблюдений соответственно. На долю аэробных микроорганизмов семейства Enterobacteriaceae и грибов приходилось 11,6 и 6,2 % выделенных культур. Из условно-патогенных факультативно-анаэробных видов в содержимом карманов чаще всего обнаруживались S. aureus - 57,5 %.

Самым значимым фактом, установленным в ходе изучения микрофлоры, была высокая частота встречаемости анаэробных бактерий. Данные микроорганизмы были выделены у 71 человека (59,2 %). Наиболее часто (26,6 %) в состав бактериальной флоры кармана входили пигментообразующие грамположительные палочки родов Prevotella и Porphyromonas (13,3 % равнозначно), в 11,7 % наблюдений высевали пептострептококки, в 10,0 % - актиномицеты, в 5,8 % - бактероиды и у 5,0 % больных - грамнегативные фузобактерии (рис. 2).

Fusobacterium Peptostreptococcus Actinomyces Porphyromonas Prevotella Bacteroides

Рис. 2. Анаэробные микроорганизмы, выделенные из пародонтапьного кармана больных (%)

Для анаэробных микроорганизмов была определена высокая плотность колонизации - 1,72-102 ± 1,75-Ю1 КОЕ/ед.суб., при этом для бактероидов

данный показатель составил 1,50Т02± 7,07-Ю1, актиномицетов - 2,02-Ю2 ± 1,40-Ю1, порфиромонасов и превотелл - 8,33-Ю2 ± 2,88-Ю1 и 6,66-Ю2 ± 2,88-10' КОЕ/ед.суб. соответственно, что было сопоставимо с наличием аэробных бактерий.

Число анаэробных микроорганизмов увеличивалась при нарастании тяжести процесса. Так если при легком течении содержание бактерий рода РогрИуготопаз составляло 1,32Т02 ± 34,4, то при среднетяжелой оно увеличивалось более чем в 6 раз (8,34Т02 ± 7,2 КОЕ/ед.суб.), а при тяжелой их число достигало нескольких тысяч клеток в единице субстрата (9,75Т03 ± 6,4-102 КОЕ/ед.суб.). Аналогичные результаты были установлены для бактероидов, превотелл и актиномицетов (рис. 3).

Рис. 3. Анаэробные микроорганизмы в биоценозе полости рта у больных с различной степенью тяжести заболевания (%)

Таким образом, полученные данные подтверждают современные воззрения о том, что ключевыми маркерами начинающейся деструкции тканей пародонта являются «пародонтопатогенные» виды, которыми выступают бактероиды (Porphyromonas spp. и Prevotella spp.), вейлонеллы,

актиномицеты и пептострептококки, с высокой частотой обнаруживаемые нами в карманах при пародонтите. С этих позиций представлялось интересным изучить состав ассоциаций пародонтального кармана на основе анализа частоты встречаемости и сочетания различных микроорганизмов.

Так, у 13,3% наблюдений ассоциации были представлены симбионтными видами микрофлоры - лактобактериями, различными видами стрептококков, стафилококков.

Довольно значительную группу (20,8%) составили пациенты, у которых грамположительные и грамотрицательные анаэробные виды ассоциировались с грибами (8,3%), условно-патогенными бактериями (5,0%). Только у 2 человек в содержимом кармана не были зарегистрированы аэробные виды-симбионты. У 11,7% в пародонтальном кармане определялись только грамположительные анаэробы в сочетании с аэробными бактериями. Самой многочисленной оказалась группа больных, у которых микрофлора была представлена только аэробными видами в различных сочетаниях. При этом доминирующим видом, имеющим максимальную частоту встречаемости и плотности колонизации, был S. aureus.

Общеизвестно, что факторы внешней среды (климатогеографические и экологические) могут влиять на качественный и количественный состав микрофлоры (Е.В. Резников, 1999; JI.B. Крамарь, 2002). Согласно данным эколого-гигиенического мониторинга (Н.В. Латышевская, 2009), город Волгоград по уровню техногенного прессинга разделен на 2 модельных территории: южную и центральную. С этих позиций было интересным установить влияние экологии места проживания на степень выраженности дисбиотических процессов у лиц обследуемых групп.

При оценке колонизации было обнаружено, что средняя частота выделения лактобацилл у больных, проживающих в центральной части города, составляла 76,3±6,4, в южной - 70,9±8,8%, при этом плотность обсеменения данными микроорганизмами у жителей центрального района

была выше, чем в группе сравнения. Так, при тяжелой степени болезни количество лактобактерий составило тогда как в центральной

части - 8,23-10'±0,83 КОЕ/ед.субстр. (р<0,05).

Были выявлены различия во встречаемости S. mutans и S. pyogenes, при этом в экологически благополучной зоне она равнялась у 5. mutans 30,0±18,5 и у S. pyogenes 6,5±2,1%, тогда как на юге была достоверно выше, составляя 50,9±6,6 и 30,6±9,8% соответственно (р<0,05).

Такая же закономерность касалась и S. aureus, при этом обсемененность этим микроорганизмом при тяжелой форме пародонтита также была выше в экологически неблагополучных районах (1,80 1 03±2,0-102КОЕ/ед.субстр. и 1,36-103±1,5-102 соответственно) (р<0,05).

Таким образом, полученные данные свидетельствуют о нарушении бактериальной экологии полости рта у больных пародонтитом, постоянно проживающих в южной модельной территории города. Данный факт, по-видимому, является отражением снижения общей колонизационной резистентности макроорганизма в условиях высокого технологического прессинга.

Для подтверждения выдвинутой гипотезы нами проведено сравнительное изучение микробиоценоза пародонтальных карманов у наблюдаемых больных. Анализ полученных данных показал, что значимые различия были установлены по всем группам микроорганизмов.

Стрептококки-симбионты (S. salivarius и S. sanguis) чаще обнаруживались в пародонтальных карманах жителей центральной части города, тогда как S. mitis и S. mutans - южной (15,0 % равнозначно). Более высоким на юге было обнаружение S. pyogenes и S.aureus (12,5 и 67,5 %; 5,0 и 48,7 % соответственно по группам), энтеробактерий и грибов (17,5 и 15,0% на юге и 12,5 и 11,2 % в центральной части). Среди больных, проживающих в районе экологического неблагополучия, значительно большей была частота

встречаемости Бейллонелл (17,5 %), тогда как Ps. aeruginosae чаще выделялись у больных первой группы (12,5 %).

Плотность бактериальных сообществ анаэробных пародонтогенных видов также показывала прямую зависимость от уровня техногенного прессинга на популяцию и была достоверно больше у больных экологически неблагополучного юга города.

Таким образом, проведенные нами исследования свидетельствуют о том, что содержимое пародонтальных карманов у больных южного модельного района характеризуется большим наполнением условно-патогенными видами, высокой частотой выделения пигментопроду-цирующих «пародонтопатогенных» бактерий по сравнению с таковыми у лиц, проживающих в экологически благополучной обстановке. Установленные различия имеют прогностический характер и свидетельствуют о более тяжелом течении заболевания на фоне снижения общей резистентности макроорганизма под воздействием экологических факторов.

Общепризнано, что основным этиологическим фактором заболеваний пародонта являются анаэробные микроорганизмы. Однако экология данных возбудителей в момент развития патологического процесса неразрывно связана с другими дестабилизирующими микроорганизмами полости рта, в частности, с одними из наиболее значимых представителей - стафилококком (S. aureus и S. epidermidis) и стрептококком (S. sanguis).

Для детального изучения межвидовых взаимоотношений в микробиоценозе при заболеваниях пародонта была исследована динамика совместного культивирования S. aureus и Bacteroides forsythus (как вариант симбиотических взаимоотношений пародонтопатогенных микроорганизмов), и S. sanguis и Bacteroides forsythus (как вариант взаимоотношений

стабилизирующего микробиоценоз стрептококка и пародонтопатогенного бактероида).

Было установлено, что в условиях совместного культивирования с бактероидами культуры стафилококка подвергались патоморфозу, что проявлялось уменьшением размера их колоний, потерей способности к пигментообразованию. Изучение репродуктивное™ стафилококков показало, что численность популяции снижалась по мере увеличения сроков совместного выращивания, однако оставшиеся штаммы проявляли более высокую экспрессию и распространенность факторов патогенности (фибринокиназной и гиалуронидазной активности).

Полученные данные объясняют проявление синергизма между пародонтогенными ассоциациями микроорганизмов, стафилококк при совместном вегетировании с анаэробными бактериями выступает в качестве вторичного патогенетического фактора в развитии деструктивных процессов в тканях пародонта.

При изучении результатов сокультивирования S. sanguis с пародонтопатогенными анаэробами было установлено снижение их лизоцимной активности, более низкая скорость роста популяции, чем в группе сравнения. Общеизвестно, что в биоценозе здорового человека S. sanguis блокирует размножение многих пародонотопатогенных облигатных анаэробов за счет выделения значительного количества перекисных соединений, продукции пировиноградной кислоты. Это создает благоприятные условия для колонизации слизистой оболочки и зубного налета другими стабилизирующими микробиоценоз бактериями. Полученные результаты, демонстрирующие угнетение S. sanguis анаэробными микроорганизмами, позволяют объяснить уменьшение значимости данных симбионтов при пародонте.

Итак, результаты исследования подтверждают общепринятую концепцию, согласно которой пародонтит следует относить к болезням, при которых патогенные виды, колонизирующие сублингвальный карман, не сразу вызывают явные патологические нарушения, а имеют выраженный латентный период развития. Его длительность во многом определяется как уровнем неспецифической резистентности, так и составом бактерий-ассоциантов.

Значительная изменчивость свойств микроорганизмов, формирование новых микробных ассоциаций, изменение чувствительности бактерий к антимикробным препаратам и увеличение количества антибиотикорезистентных штаммов приводят к тому, что лечение пародонтитов до сих пор является актуальнейшей проблемой современной стоматологии. Систематическое наблюдение за чувствительностью микрофлоры пародонтального кармана является существенным элементом в комплексе лечебных мероприятий. Учитывая это, на следующем этапе исследования нами было осуществлено определение чувствительности этиологически важных патогенов к антимикробным препарата. С этой целью была изучена антибиотикорезистентность 338 штаммов микроорганизмов, выделенных из содержимого пародонтального кармана, в том числе 120 S. aureus, 90 штаммов энтеробактерий (42 культуры кишечной палочки, 48 штаммов клебсиелл), 68 штаммов стрептококков (46 штаммов S. salivarius, 22 - S. sanguis), 6 штаммов вейлонелл, 24 культуры бактероидов, 20 штаммов пептострептококков, 10 штаммов актиномицет.

Анализ популяции стафилококков показал высокие уровни чувствительности для клиндамицина (65,0 %), ванкомицина (82,5%), рифампицина (84,2 %) и гентамицина (75,0% культур). Ципрофлоксацин задерживал рост 76,7%, а левофлоксацин - 84,2 % штаммов. Высокие

показатели резистентности были установлены к левомицетину, линезолиду и ко-тримоксазолу - 84,2,40,8 и 59,2 % соответственно.

Оценка чувствительности энтеробактерий выявила высокую резистентность к ампициллину (75,6 %), цефуроксиму и цефиксиму (36,6 и 37,8 % соответственно). Активно подавляли рост энтеробактерий фторированные хинолоны и имипенем. В ходе исследования были установлены высокие уровни устойчивости энтеробактерий к аминогликазидам. Так, количество выделенных штаммов, резистентных к гентамицину, составило 44,4 %; к амикацину оказались нечувствительны 66,6 %.

При изучении резистентности стрептококков по отношению к метронидазолу - препарату, широко применяемому при лечении различных форм пародонтита, показано, что 11,7% штаммов оказались устойчивыми, а количество культур, промежуточно чувствительных составило 26,5 %.

Число микроорганизмов, чувствительных к линкомицину, было 63,2 %, тогда как к его новому деривату клиндамицину были чувствительны 100 % культур.

Этот же препарат проявлял высокую активность по отношению к анаэробным бактериям, подавляя рост 100 % вейлонелл, 58,3 % бактероидов, 75,5 % пептострептококков и 90,0 % актиномицетов, тогда как препараты из группы пенициллинов, макролидов и тетрациклинов показали себя малоэффективными - число резистентных штаммов составлял от 50% и выше. Левомицетин проявлял выборочную активность по отношению к тестированным культурам. Так, к нему было чувствительно 91,7 % бактероидов, 65,0 % пептострептококков, 50,0 % актиномицетов и 33,3 % вейлонелл.

Проведенные исследования дали основание идентифицировать культуры анаэробных микроорганизмов, изолированные при пародонтите, как обладающие набором отдельных детерминант вирулентности:

способность к адгезии, антилизоцимная, каталазная и гемолитическая активность. Кроме того, значительная часть культур обладала полирезистеностью к антибиотикам. Рассмотренные признаки патогенности, по мнению Б.А. Шендерова (2000), ответственны за степень выраженности патологического процесса. Установлено, что маркеры патогенности присутствовали в разных сочетаниях, что позволило с помощью математической модели рекомендовать дифференциацию степени нарушения микробиоценоза в полости рта, оценивая факторы вирулентности у анаэробных представителей этой экониши.

Таким образом, проведенные исследования показали, что популяции микроорганизмов, колонизирующих сублингвальный карман больных при пародонтите, отличается высокой гетерогенностью по степени устойчивости к антибактериальным препаратам, что обусловливает необходимость проведения этиотропного лечения в соответствии с данными антибиотикограмм, выполненных для каждого конкретного больного.

ВЫВОДЫ

1. Комплексное стоматологическое обследование жителей двух модельных районов крупного промышленного города с различным техногенным прессингом выявило высокую распространенность и интенсивность заболеваний тканей пародонта.

2. Установлена значительная дискоординация обменных процессов в слюне, которая проявляется повышением содержания муцина, С-реактивного белка и резким снижением активности лизоцима, что свидетельствует о нарушении неспецифической резистентности этой экосистемы.

3. В микрофлоре полости рта условно-здоровых людей бифидо-, лактобактерии, стрептококки, дифтероиды, фузобактерии, пропионобактерии, бактероиды составляют резидентный биоценоз.

При этом анаэробная микрофлора более консервативна и устойчива, аэробная динамична и весьма изменчива.

4. Определены глубокие изменения и перестройка биоценоза в полости рта при пародонтите, что проявляется снижением доминирования и экологической значимости основных симбионтов, а также увеличением частоты встречаемости транзиторной микрофлоры.

5. Проведенные исследования позволили показать механизм коадаптации микрофлоры полости рта с появлением новой экониши -«пародонтального кармана».

6. При заселении пародонтальных «карманов» «маркерными» для пародонтита анаэробными и условно-патогенными аэробными бактериями нормальные симбионты теряют способность контролировать присутствие транзиторной микрофлоры.

7. Сравнительный анализ биологических свойств одного из часто встречающихся в биоценозе при пародонтите микроорганизма Ва^егсМев эрр. позволил построить математическую модель прогноза тяжести нарушений биоценоза при изучаемой патологии.

8. Оценка зубочелюстной области на предмет состояния воспалительного процесса в пародонте проведена комплексно, включая клинико-микробиологические исследования. При этом алгоритм обследования помимо традиционных клинико-инструментальных исследований должен включать изучение биологии полости рта (С-реактивный белок, муцин, лизоцим), а также определение у представителей микрофлоры факторов, способствующих персистенции и вирулентности.

СПИСОК ПЕЧАТНЫХ РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Матисова Е.В. Колонизационная резистентности полости рта в норме и при патологии / Е.В. Матисова, B.C. Крамарь, Т.Н. Климова // Вестник ВолГМУ. Вып. 4 (32). - Волгоград, 2009. - С. 80-83.

2. Матисова Е.В. Микроэкология полости рта и ее роль в развитии стоматологических заболеваний: монография / Е.В. Матисова, B.C. Крамарь, С.В.Дмитриенко, В.О. Крамарь, Т.Н. Климова // Волгоград: Издательство ВолГМУ, 2010.

3. Матисова Е.В. Характеристика биоценоза полости рта при пародонтите легкой степени тяжести / Е.В. Матисова, A.B. Еременко // Актуальные проблемы экспериментальной и клинической медицины: материалы 66-й открытой научно-практической конференции молодых ученых и студентов с международным участием 23-25 апреля 2008 г. -Волгоград, 2008.-С. 137-138.

4. Матисова Е.В. Распространенность S. aureus у практически здоровых людей и больных хирургических и терапевтических стационаров, молекулярно-генетическое типирование этих микроорганизмов / Е.В. Матисова, A.A. Покателов, В.А. Антонов, В.О. Крамарь, Т.Н. Климова, JI.B. Тонкушина, У.А. Спирюкова, Ю.В. Жадченко, A.B. Панченко // Проблемы и перспективы современной науки: сборник научных трудов. -Вып. 2. - Томск, 2008. - С. 32-36.

5. Матисова Е.В. Микрофлора экосистемы полости рта при расщелинах неба / Е.В. Матисова, М.В. Вологина, Т.Н. Климова, В.О. Крамарь, A.B. Панченко // Актуальные вопросы экспериментальной, клинической и профилактической стоматологии. - Том № 66. - Волгоград, 2009. - С. 13-18.

6. Матисова Е.В. Факторы персистенции условно-патогенных микроорганизмов, колонизирующих полость рта при патологии зубочелюстной системы / Е.В. Матисова, Т.Н. Климова, Г.А.Четвертнова // Актуальные проблемы экспериментальной и клинической медицины: материалы 67-й открытой научно-практической конференции молодых ученых и студентов с международным участием 22-24 апреля 2009 г. -Волгоград, 2009. - С.157.

7. Матисова Е.В. Колонизация S. aureus практически здоровых людей и больных хирургических и терапевтических стационаров крупного промышленного города / Е.В. Матисова, B.C. Крамарь, В.О. Крамарь,

В.А. Антонов, К.МПрокопенко, Л.В. Тонкушина, Л.В. Михайлова, Л,А. Блинцова, У.А. Спирюкова, А.В. Панченко // Ученые Волгограда -развитию города. Волгоград, 2009. - С. 241-244.

8. Матисова Е.В. Стоматологический статус у лиц с хроническим генерализованным пародонтитом, проживающих в центральном топодеме г. Волгограда / Е.В. Матисова, Т.С. Чижикова // Фундаментальные науки и практика: сборник научных работ с материалами трудов 1-ой международной телеконференции: «Фундаментальные медико-биологические науки и практическое здравоохранение». - Томск, 2010. - С.91-92.

9. Матисова Е.В. Микробиология полости рта при пародонтите различной степени тяжести / Е.В. Матисова // XIV Региональная конференция молодых исследователей Волгоградской области (сборник находится в печати).

Подписано в печать 29.04.2010 г. Формат 60x84/16. Бумага офсетная. Гарнитура Тайме. Усл. печ. л. 1,3. Тираж 100 экз. Заказ 117.

Издательство Волгоградского государственного университета 400062, Волгоград, пр. Университетский, 100

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Матисова, Елена Владимировна

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.0. НОРМАЛЬНАЯ МИКРОФЛОРА ПОЛОСТИ РТА

1.1. Современные представления об этиологии и патогенезе 16 воспалительных заболеваний пародонта

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.0. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Клинические методы обследования пациентов

2.2. Рентгенологическое исследование

2.3. Микробиологические методы исследования

2.4. Статистическая обработка результатов исследования

3.0. РЕЗУЛЬТАТЫ СТОМАТОЛОГИЧЕСКОГО ОБСЛЕДОВА- 45 НИЯ ПАЦИЕНТОВ С ХРОНИЧЕСКИМ ПАРОДОНТИТОМ, ПРОЖИВАЮЩИХ В ЦЕНТРАЛЬНОМ И ЮЖНОМ ТОПОДЕ-МАХ Г. ВОЛГОГРАДА

3.1. Стоматологический статус у лиц с хроническим пародонтитом, 45 проживающих в центральном и южном топодемах г. Волгограда

3.2. Стоматологический статус у лиц с хроническим пародонтитом, 51 проживающих в центральном топодеме г. Волгограда

3.3. Стоматологический статус лиц с хроническим пародонтитом, 60 проживающих в южном топодеме г. Волгограда

3.4. Сравнительная характеристика стоматологического статуса лиц 66 обследуемых групп, проживающих в районах с неравномерным техногенным прессингом

4.0. МИКРОФЛОРА ПОЛОСТИ РТА БОЛЬНЫХ 71 ПАРОДОНТИТОМ

4.1. Микрофлора полости рта здоровых людей

4.2. Микрофлора полости рта больных пародонтитом

4.3. Колонизационная резистентность полости рта у больных паро- 79 донтитом разной степени выраженности патологического процесса

4.4. Микрофлора пародонтального кармана

4.5. Микрофлора ротовой полости больных пародонтитом 94 в зависимости от экологии места проживания

5.0. СИСТЕМА ВЗАИМООТНОШЕНИЙ В МИКРОБИОЦЕНО- 104 ЗЕ ПОЛОСТИ РТА ПРИ ЗАБОЛЕВАНИИ ПАРОДОНТА 6.0. ЛЕКАРСТВЕННАЯ УСТОЙЧИВОСТЬ

УСЛОВНО-ПАТОГЕННЫХ МИКРООРГАНИЗМОВ, КОЛОНИЗИРУЮЩИХ ПОЛОСТЬ РТА ПРИ ПАРОДОНТИТЕ

7.0. БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА УСЛОВНО- 128 ПАТОГЕННЫХ АНАЭРОБНЫХ МИКРООРГАНИЗМОВ

7.1. Прогнозирование благополучия аутофлоры полости рта при 129 пародонтите

Введение Диссертация по биологии, на тему "Колонизация условно-патогенными микроорганизмами слизистой оболочки полости рта при хроническом пародонтите"

Актуальность исследования. Полость рта представляет своеобразную экологическую систему, тесно связанную с внутренней средой организма и внешним окружением. Высокая частота ее поражения в значительной степени обусловлена особенностями строения и функции, постоянным контактом с внешней средой, разнообразной нагрузкой (Е.Н. Жу-лев, 2003; Х.-П. Мюллер, 2004; АЛ. Пашаев, 2008).

Неотъемлемой частью экологической системы полости рта является нормальная микрофлора, выступающая в качестве первичной мишени для любых факторов, прямо или опосредованно влияющих как на симбионты, так и на условно-патогенные микроорганизмы, обеспечивая колонизационную резистентность (А.А. Воробьев, 2000; О.В. Бухарин, 2002; Т.С. Осипенкова, 2002; Е.В. Боровский, 2003; В.Н. Царев, 2006).

Среди болезней, имеющих большое значение в стоматологии, наиболее распространенной считается пародонтит, который проявляется в различных формах, образуя в полости рта очаги хронической инфекции. Все вышеперечисленное позволяет отнести данную патологию зубочелю-стной системы не только к медицинской, но и к важной социальной проблеме (И.В. Безрукова, 2004; О.М. Брагина, 2004; Л.М. Цепов, 2007).

В настоящее время роль микробного фактора в развитии пародонтита не вызывает сомнения, хотя работ, посвященных анализу микрофлоры слизистых оболочек и пародонтальных карманов, в доступной литературе не много (В.Н. Царев с соавт., 2005; Т. Demir et al., 2009).

Несмотря на богатый опыт исследователей по изучению этого вопроса, при анализе качественного состава микрофлоры зубных отложений не удалось выделить один или несколько каких-либо видов микроорганизмов и специфические факторы, детерминирующие развитие заболевания.

В последние годы в литературе появились работы, посвященные роли анаэробов в развитии пародонтита (А.С. Григорьян, 2004; JI.A. Дмитриева, 2007; О.О. Янушкевич, 2010; J. Slots et al., 1990; A.D. Haffajee, S.S. Socransky, 1994; A. Tanner et al., 1998; K. Cogo et al., 2009). Вместе с тем изучение колонизации условно-патогенными микроорганизмами различных экологических ниш полости рта и углубленное исследование критериев их патогенности является необходимым условием для объективной оценки микробного фактора и экологической значимости микроорганизмов при стоматологической патологии.

Исследования, проведенные в последние десятилетия, позволили установить, что A. actinomycetemcomitans играет важную роль в развитии быстро прогрессирующего пародонтита, при этом выделение этого микроорганизма коррелирует с глубиной пародонтального кармана и тяжестью воспалительно-деструктивных изменений в околозубных тканях. Вместе с тем, ряд авторов подвергает сомнению этиологическую роль данных бактерий в развитии воспалительных заболеваний пародонта (И. Вилкова, 2008; W.J. Loesche, et al., 1990; М. Umeda et al., 1996; L.J. Brown, H. Loe, 2000).

Перечень анаэробных микробов, значимых в возникновении заболеваний пародонта, известен, однако роль этих патогенов в развитии хронического процесса при пародонтите изучена недостаточно. Это объясняется трудностями, связанными с обнаружением и выделением анаэробов, их идентификаций, а также недостаточной изученностью факторов патогенности этой группы микроорганизмов.

В последние годы сообщается об увеличении резистентности микроорганизмов к различным антибактериальным препаратам при пародонтите. Поэтому биология чувствительности региональных клинически значимых изолятов к антибиотикам приобретает важное значение при выборе эффективных этиотропных средств.

Задачи исследования:

1. Изучить стоматологический статус больных, страдающих хроническим пародонтитом, проживающих в крупном промышленном городе; установить его особенности в зависимости от уровня экологического прессинга.

2. Провести анализ колонизационной резистентности полости рта при пародонтите, определив значение условно-патогенных микроорганизмов в микрофлоре различных биотопов экосистемы полости рта.

3. Оценить биологические свойства «маркерных» пародонтопатоген-ных микроорганизмов на основе анализа морфологических, культураль-ных и биохимических свойств.

4. Определить наличие и распространенность факторов вирулентности у выделенных микроорганизмов в зависимости от клинических проявлений.

5. Разработать математическую модель прогнозирования нарушений микроэкологии полости рта при пародонтите.

Научная новизна

Впервые на основании комплекса клинической и лабораторной диагностики показана роль дисбиоза полости рта в формировании микроэкосистемы полости рта у страдающих пародонтитом с различной степенью процесса заболевания.

Впервые проведены исследования, свидетельствующие о том, что развитию пародонтита предшествуют дисбиотические процессы в полости рта, обусловленные перестройкой аэробной аутохтонной микрофлоры, и проявляющиеся увеличением числа условно-патогенных микроорганизмов, имеющих высокие показатели факторов вирулентности. Установлена частота встречаемости анаэробных «маркерных» видов, характерных для развития пародонтита.

Обоснованы индивидуальные коррегирующие лечебно-профилактические программы для больных пародонтитом с учетом выявленных дисбиотических изменений в составе микробиоценоза полости рта с целью снижения тяжести патологического процесса.

Полученные результаты дают возможность оценить степень нарушения микробиоценоза при пародонтите и прогнозировать резидентное носи-тельство как аэробных, так и анаэробных условно-патогенных бактерий, колонизирующих полость рта при данной патологии.

Практическая значимость

Определен спектр доминирующих аэробных и анаэробных бактерий, присутствующих в биологических субстратах ротовой полости больных пародонтитом. Показано широкое распространение полирезистентности к антибиотикам, в том числе к препаратам последних поколений, клинически значимых культур как аэробных, так и анаэробных бактерий. Результаты научных и экспериментальных исследований легли в основу рационализаторского предложения «Способ оценки секреторного компонента колонизационной резистентности по исследованию антиадгезивных свойств слюны» (удов. ВолГМУ № 13 от 25.03.2010 г.).

Результаты исследований внедрены в работу клиники ГОУ ВПО Волгоградского государственного медицинского университета, МУЗ «Стоматологическая поликлиника № 12» и используются в учебном процессе на кафедрах терапевтической и детской стоматологии, кафедре микробиологии, вирусологии и иммунологии ВолГМУ Росздрава.

Основные положения, выносимые на защиту.

Хронический пародонтит характеризуется клиническими особенностями, а также отличается составом микробиоценоза различных биотопов полости рта.

У больных с хроническим пародонтитом развиваются дисмикробио-зы в полости рта и существенные изменения в составе нормальной микрофлоры, особенно они выражены у больных, проживающих в районах повышенного техногенного прессинга.

Определена роль вторичного микробного фактора в ассоциации с анаэробной микрофлорой. Установлено, что у больных пародонтитом при легкой степени заболевания нарушения в микробиоценозе полости рта касаются симбионтов аэробной микрофлоры и условно-патогенных микроорганизмов.

Апробация работы

Материалы работы доложены и обсуждены на конференциях студентов и молодых ученых (2008-2010), научных сессиях ВолГМУ (2008-2010) и Томского государственного университета (2008-2010). Диссертация обсуждена на совместном заседании кафедр микробиологии, вирусологии и иммунологии, терапевтической и детской стоматологии ВолГМУ (28.04.2010 г.). По теме диссертации опубликовано 7 научных работ, в том числе 1 - в издании, рекомендованном ВАК.

Структура и объем работы. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, глав собственных исследований, обсуждения результатов и выводов, указателя литературы, включающего 249 источника, в том числе 179 отечественных и 70 зарубежных. Работа изложена на 168 страницах машинописного текста, проиллюстрирована 23 рисунками и 35 таблицами.

Заключение Диссертация по теме "Микробиология", Матисова, Елена Владимировна

ВЫВОДЫ

2. Установлена значительная дискоординация обменных процессов в слюне при пародонтите, которая проявляется повышением содержания муцина, С-реактивного белка и резким снижением активности лизоцима, что свидетельствует о нарушении неспецифической резистентности этой экосистемы.

3. В микрофлоре полости рта условно-здоровых людей бифидо-, лакто-бактерии, стрептококки, дифтероиды, фузобактерии, пропионобакте-рии, бактероиды составляют резидентный биоценоз. При этом анаэробная микрофлора более консервативна и устойчива, аэробная динамична и весьма изменчива.

4. Определены глубокие изменения и перестройка биоценоза полости рта при пародонтите, что проявляется снижением доминирования и экологической значимости основных симбионтов, а также увеличением частоты встречаемости транзиторной микрофлоры.

5. Проведенные исследования позволили показать механизм коадапта-ции микрофлоры полости рта с появлением новой экониши - «пародонтального кармана».

7. Оценка зубочелюстной области на предмет состояния воспалительного процесса в пародонте проведена комплексно, включая клинико-микробиологические исследования. При этом алгоритм обследования помимо традиционных клинико-инструментальных исследований должен включать изучение биологии полости рта (С-реактивный белок, муцин, лизоцим), а также определение у представителей микрофлоры факторов, способствующих персистенции и вирулентности.

8. Сравнительный анализ биологических свойств анаэробных бактерий позволил построить математическую модель признаков тяжести нарушений биоценоза полости рта при пародонтите.

9. У жителей экологически неблагополучного модельного района выявлены более значительные нарушения в микробиоценозе. Это свиде тельствует о техногенном влиянии на общую реактивность организма.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Для выполнения поставленных задач обследованы пациенты, страдающие пародонтитом, возраст которых колебался от 20 до 65 лет, в среднем составив 47,3 года. Среди наблюдаемых было 79 женщин (65,8 %) и 41 мужчина (34,2 %) с давностью заболевания от 6 месяцев до 30 лет. Наибольшее количество больных составили пациенты со средней и тяжелой степенью проявления хронического пародонтита, которые сформировали I, II и III основные группы.

Анализ полученных данных показал, что проявления хронического пародонтита в 1 группе были выявлены у лиц с 20 лет. Начиная с 30 лет, у пациентов преобладал хронический пародонтит средней степени тяжести, что говорит об агрессивности течения процесса.

Клиническая картина согласно обследованию соответствовала нозологической форме заболевания легкой (37,5 %), средней (32,5 %) и тяжелой (30,0 %) степени тяжести, что подтверждено рентгенологическими данными.

Установлено нарушение гигиенического состояния полости рта, подтвержденное индексом гигиены (ИГ), пародонтальными индексами (ПИ, РМА и CPITN). При этом индекс гигиены коррелировал с тяжестью патологического процесса, составляя у больных легкой 3,3 ± 0,3 у.е., 3,4 ± 0,3 у.е. - средней и 3,7 ± 0,5 у.е. - тяжелой степенью пародонтита. Показатели РМА и ПИ так же нарастали пропорционально степени поражения пародонта (38,4 ± 5,7 и 3,1 ± 0,7 в первой, 61,5 ± 3,6 и 5,6 ± 0,3 - во второй, 69,1 ± 3,3; 6,2 ± 0,6 - в третьей группе больных). Весьма часто у больных регистрировали наличие резорбции костной ткани, межзубных перегородок, а также расширение периодонтальной щели, при этом выявлены очаги остеопороза, наиболее выраженные при тяжелой степени болезни.

Показатели, характеризующие состояние пародонта, у больных были различными и зависели от района проживания обследуемых. Так, индекс РМА и CPITN, величины кармана были выше в разнозначных группах у жителей южного и центрального модельных районов. Установлено, что сравнительные клинические и стоматологические показатели больных были значительнее в южных районах по сравнению с центральным.

Анализ данных неспецифической резистентности полости рта показал снижение окислительно-восстановительного потенциала и уменьшение активности лизоцима в слюне, при этом наиболее четко это проявлялось у больных с тяжелой степенью пародонтита и присутствием кариеса твердых тканей зубов. Наличие воспалительного процесса в полости рта подтверждалось увеличением значений муцина и С-реактивного белка, при этом максимальные значения достоверно чаще регистрировались в III группе больных.

Установлено, что величина муцина имела корреляцию с низким индексом гигиены (г = 3,0), а состояние пародонта зависело от уровня КПУ. Кроме того, было выявлено возрастание индексов гигиены и гингивита в зависимости от продукции С-реактивного белка (г = 0,38 и г = 0,45), что свидетельствовало о более сложной структурно-функциональной организации биологии полости рта у больных пародонтитом как единой экосистемы.

При объективном обследовании у 86 человек (71,7 %) обнаружена гиперемия и отек десневых сосочков, цианочность маргинальной и альвеолярной части десны, кровоточивость (86,7 %), отложения зубного камня (84,2 %). Глубина пародонтальных карманов варьировала от 3,9 до 7,0 мм и сопровождалась гноетечением (45,0 %), подвижностью зубов (53,3 %). Рентгенологическое обследование соответствовало картине патологического процесса.

Анализ состояния зубочелюстной системы показал наличие кариеса и его осложнений у всех больных, при этом пломбированные и удаленные зубы были выявлены также у всех пациентов, среднее количество зубов, пораженных кариесом, составило 19,5±1,5 ед. (в группе сравнения -17,5+1,2 ед.), удельный вес удаленных зубов был равен 6,5±1,5 (у здоровых людей 2,3±0,3).

При изучении микробиоценоза полости рта было выделено и идентифицировано 3221 культура, относящиеся к 10 семействам, 15 родам и 26 видам.

Полученные данные показали, что при пародонтите в микрофлоре регистрируется резкое уменьшение доминирования аутохтонных микроорганизмов на фоне увеличения значимости условно-патогенных представителей. Так, обсеменение S. salivarius снижалось с

6,65-10 ±2,3 при легкой до 8,8Т10'±1,3 КОЕ/ед.суб. при тяжелой форме пародонтита, S. sanguis - с 1,63-102± 4,4 до 9,75-10'±0,4 КОЕ/ед.суб. соответственно (р<0,05).

Максимальные показатели бактериальной сукцессии были установлены для золотистых стафилококков, при этом выявлено достоверное увеличение частоты встречаемости S. aureus у больных по сравнению с группой сравнения (26,2% и 42,2, 51,1 и 75,5 % соответственно). Также регистрировалось изменение значимости дрожжеподобных грибов, частота встречаемости которых составляла 11,1 % и 30,3 % в I и II группе, затем уменьшалась до 22,2 % в третьей.

Выявленный состав микрофлоры характеризовал собой дисбактериоз полости рта, диагностируемый у всех обследованных (100 %). Интенсивность его выраженности определялась тяжестью основного заболевания -пародонтита.

Учитывая, что в результате развития пародонтита образовалась новая ниша (карман), в дальнейшем нами проведено изучение и анализ состава биоценоза этого биотопа. Выделено и идентифицировано 242 штамма микроорганизмов, в том числе 171 аэробных и 71 анаэробных вида.

Анализ бактериального наполнения этой экониши показал его широкое многообразие: 7,8 % культур были грамположительными анаэробными палочками рода Bacteroides, пигментообразующие бациллы (.Porphyromonas spp. и Prevotella spp.) составляли 13,2 %. Грампозитивные факультативно-анаэробные кокки (стафило- и стрептококки) обнаруживались в 36,4 %, факультативно-анэробные палочки (лактобактерии) - в 16,5 %, анаэробные кокки (пептострептококки) и грамнегативные палочки (Fusobacte-rium spp.) - в 5,8 и 2,5 % наблюдений соответственно. На долю аэробных микроорганизмов семейства Enterobacteriaceae и грибов Candida приходилось 16,5 и 12,5 % выделенных культур. Из условно-патогенных факультативно-анаэробных видов в содержимом карманов чаще всего обнаруживались S. aureus — 57,5 %.

Самым значимым фактом, установленным в ходе изучения микрофлоры, была высокая частота встречаемости анаэробных бактерий. Данные микроорганизмы были выделены у 71 человека (59,2 %). Наиболее часто (26,6 %) в состав бактериальной флоры кармана входили пигментообразующие грамположительные палочки родов Prevotella и Porphyromonas (13,3 % равнозначно), в 11,7 % наблюдений высевались пептострептококки, в 10,0 % - актиномицеты, в 5,8 % - бактероиды и у 5,0 % больных -грамнегативные фузобактерии.

При этом у анаэробных микроорганизмов регистрировалась высокая плотность колонизации - 1,72Т02± 1,75-101 КОЕ/ед.суб.: для бактероидов данный показатель составил 1,50-102±7,07-101, актиномицетов

2,02-102 ± 1,40-101, порфиромонас и превотелл - 8,33-102 ± 2,88-101 и 6,66-102±2,88-101КбЁ/ед.суб. соответственно.

Число анаэробных микроорганизмов увеличивалось при утяжелении пародонтита. Так если при легком течении содержание бактерий рода Рог-phyromonas составляло

1,32-10 ± 34,4, то при среднетяжелои оно увеличивалось более чем в 6 раз

8,34-10 ± 7,2 КОЕ/ед.суб.), а при тяжелой их число достигало нескольких тысяч клеток в единице субстрата

3 2

9,75-10 ± 6,4-10 КОЕ/ед.суб.). Аналогичные результаты были установлены у бактероидов, превотелл и актиномицетов.

Таким образом, полученные данные подтверждают современные воззрения о том, что ключевыми маркерами начинающейся деструкции тканей пародонта является наличие «пародонтопатогенных» микроорганизмов, которыми выступают бактероиды (Porphyromonas spp. и Prevotella spp.), вейлонеллы, актиномицеты и пептострептококки, с высокой частотой обнаруживаемые в новой эконише (пародонтальном кармане). С этих позиций представлялось интересным изучение состава бактериальных ассоциаций пародонталыюго кармана на основе анализа частоты встречаемости и сочетания различных микроорганизмов.

Установлено, что у 13,3% наблюдаемых ассоциации были представлены симбионтными видами микрофлоры - лактобактериями, различными видами стрептококков, стафилококков.

Общеизвестно, что факторы внешней среды (климатогеографические и экологические) могут влиять на качественный и количественный состав микрофлоры (И.А. Кражан, 1997; JI.B. Крамарь, 2002). Согласно данным эколого-гигиенического мониторинга (Н.В. Латышевская, 2006), город Волгоград по уровню техногенного прессинга разделен на 3 территории. С этих позиций было интересным установить влияние экологии места проживания на степень выраженности дисбиотических процессов у лиц обследуемых групп. С этой целью были обследованы больные 2 модельных районов: южного и для сравнения центрального.

При оценке колонизации было обнаружено, что средняя частота выделения лактобацилл*у больных, проживающих в центральной части города, составляла 76,3±6,4, в южной - 70,9±8,8%, при этом плотность обсеменения данными микроорганизмами у жителей центрального района была выше, чем в группе сравнения. Так, при тяжелой степени болезни количество лактобактерий составило 3,61Т0'±0,71, тогда как в центральной части - 8,23-10^0,83 КОЕ/ед.субстр. (р<0,05).

Были выявлены различия во встречаемости S. mutans и S. pyogenes, при этом в экологически благополучной зоне она равнялась у S. mutans 30,0±18,5 и у S. pyogenes 6,5±2,1%, тогда как на юге была достоверно выше, составляя 50,9±б7б и 30,6±9,8% соответственно (р<0,05).

Подобная закономерность обнаружена и у 51. aureus, при этом обсемененность этим микроорганизмом при тяжелой форме пародонтита также была выше в экологически неблагополучных районах (1,80-103±2,0-102КОЕ/ед.субстр. и 1,36-103±1,5-102 соответственно)

Р<0,05).

Таким образом, полученные данные свидетельствуют о нарушении бактериальной экологии полости рта у больных пародонтитом, постоянно проживающих в южной модельной территории города. Данный факт, повидимому, является отражением снижения неспецифической резистентности макроорганизма в условиях высокого технологического прессинга.

Для выполнения поставленных задач нами проведено сравнительное изучение микробиоценоза пародонтальных карманов у наблюдаемых больных. Анализ полученных данных показал, что значимые различия были установлены по всем группам микроорганизмов.

Стрептококки-симбионты (S. salivarius и S. sanguis) чаще обнаруживались в микрофлоре пародонтальных карманов жителей центральной части города, тогда как S. mitis и S. mutans — южной (15,0 % равнозначно). Более часто на юге высевались S. pyogenes и S.aureus (12,5 и 67,5 %; 5,0 и 48,7 % соответственно), энтеробактерий и грибов (17,5 и 15,0% и 12,5 и 11,2 % соответственно по группам).

Плотность бактериальных сообществ анаэробных пародонтопатоген-ных видов также показывала прямую зависимость от уровня техногенного прессинга на популяцию и была достоверно выше у больных экологически неблагополучного юга города.

Проведенные нами исследования свидетельствуют о том, что биоценоз содержимого пародонтальных карманов у больных южного модельного района характеризуется большим наполнением условно-патогенными видами, высокой частотой выделения пигментопродуцирующих «пародонто-патогенных» бактерий по сравнению с таковыми у лиц, проживающих в экологически благополучной обстановке. Установленные различия имеют прогностический характер и свидетельствуют о более тяжелом течении заболевания на фоне снижения общей резистентности макроорганизма под воздействием экологических факторов.

Для детального изучения межвидовых взаимоотношений в микробиоценозе при заболеваниях пародонта была исследована динамика совместного культивирования S. aureus u Bacteroides forsythus (как вариант сим-биотических взаимоотношений пародонтопатогенных микроорганизмов), и S. sangiris и Bacteroides forsythus (как вариант взаимоотношений стабилизирующего микробиоценоз стрептококка и пародонтопатогенного бактероида).

Выявлено, что в условиях совместного культивирования с бактероидами культуры стафилококка подвергались патоморфозу, что проявлялось уменьшением размера их колоний, потерей способности к пигментообразо-ванию. Изучение репродуктивности этого микроорганизма показало снижение численности популяции по мере увеличения сроков совместного выращивания, при этом установлено, что штаммы проявляли более высокую экспрессию и распространенность факторов патогенности (фибринокиназ-ной и гиалуронидазной активности).

Экспериментальные данные объясняют проявление синергизма между пародонтопатогенными микроорганизмами, в ассоциации со стафилококками при совместном вегетировании с анаэробными бактериями, выступая в качестве вторичного патогенетического фактора в развитии деструктивных процессов в тканях пародонта.

Анализ результатов сокультивирования sanguis с пародонтопатогенными анаэробами показал более низкую скорость роста популяции, а также снижение их лизоцимной активности, чем в группе сравнения. Полученные результаты, демонстрирующие угнетение роста S. sanguis анаэробными микроорганизмами, позволяют объяснить уменьшение значимости данных симбионтов при пародонтите.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Матисова, Елена Владимировна, Волгоград

1. Абалмасов Н.Г., Абалмасов Н.Н., Шашмурина В.Р. Результаты и возможности комплексного лечения заболеваний пародонта (клинико-экспериментальные исследования) // Стоматология. 2001. - Т.80. -№ 1.-С. 83-87.

2. Акатов А.К. Стафилококки / А.К. Акатов, B.C. Зуева. М., 1983. -187с.

3. Антипова О.А. Транскраниальная электростимуляция в комплексном лечении больных пародонтитом: клинико-иммунологические аспекты : Автореф. Дис. . канд.мед.наук. Волгоград, 2005. - 21с.

4. Артюшкевич А.С. Заболевания периодонта / А.С. Артюшкевич, С.В. Латышева, С.А. Наумович, Е.К. Трофимова // М.: Медицинская литература, 2006. 328 с.

5. Бабин В.Н. Молекулярные аспекты симбиоза в системе хозяин-микрофлора / В.Н. Бабин, О.А. Минушкин, А.В. Дубинин // Российский химический журнал. 1993. - № 6. - С. 66-78.

6. Бабин В.Н. Молекулярные аспекты симбиоза в системе хозяин микрофлора / В.Н. Бабин, О.Н. Минушкин, А.В. Дубинин // Рос. журн. гастроэнтерологии, гепатологии. - 1998. - № 6. - С. 76-82.

7. Базеров М.А. Адгезивные свойства и характеристика поверхности стрептококков, колонизирующих клетки буккального эпителия / М.А. Базеров, С.Е. Воскун, Л.Ф. Новикова // ЖМЭиИ. 1993. - № 4. -С. 37-40.

8. Барер Г.М. Количественная характеристика десневой жидкости у лиц с интактным пародонтом // Стоматология. 1986. - № 5. - С. 24-26.

9. Безрукова И.В. Быстропрогрессирующий пародонтит. Этиология. Клиника. Лечение: Дис. . д-ра мед. наук. М., 2001. 180с.

10. Безрукова И.В. Быстропрогрессирующий пародонтит / И.В. Безрукова. М.: Медицинская книга, 2004. -142с.

11. Бейер JI.В. Система местной защиты пищеварительного тракта, прогнозирование здоровья и профилактика заболеваний у детей: Автореф. дис. . док. мед. наук. Н.Новгород, 1992. 45с.

12. Бондаренко В.М. Общий анализ представлений о патогенных и условно-патогенных бактериях // Журн. микробиол. 1997. - № 4. - С. 20-26.

13. Бондаренко В.М. Дисбактериозы желудочно-кишечного тракта / В.М. Бондаренко, Б.В. Боев, Е.А. Лыкова // Рос. Журнал гастроэнтерологии, гепатологии и колопроктологии. 1998. - № 1. - С. 66-71.

14. Боровский Е.В. Биология полости рта / Е.В. Боровский, В.К. Леонтьев. М. Медицина, 1991. - 3 04с.

15. Боровский Е.В. Терапевтическая стоматология: Учебник для студентов медицинских вузов / Под. Ред. Е.В. Боровского. М.: «Медицинское информационное агентство», 2003. - 840с.

16. Брагина О.М. Ранняя диагностика и прогнозирование заболеваний пародонта у пациентов с частичной потерей зубов : дис. . канд. мед. наук Нижний Новгород, 2004. С. 14

17. Буданова Е.В. Нарушения микроэкологии желудочно-кишечного тракта при гнойно-воспалительных заболеваниях челюстно-лицевой области // Гигиенич. Аспекты охраны окружающей среды и здоровья человека. М.- 1992.-С. 118-120.

18. Бухарин О.В. Бактерионосительство (медико-экологический аспект)

19. О.В. Бухарин, Б.Я. Усвяцов. Екатеринбург: УрО РАН., 1996. - 203 с.

20. Бухарин О.В. Персистенция патогенных бактерий. М.: Медицина,1999.-360 с.

21. Бухарин О.В. Персистенция патогенных бактерий: теория и практика

22. Журн. микробиол. 2000. - № 4. - С. 4-7.

23. Вайс С.И. участие слюны в обменных процессах слизистой оболочки полости рта / С.И. Вайс, Н.Н. Миролюбов, А.Д. Калинин // Тр. Иркутского мед. инс-та. Иркутск, 1980. Вып. 148. - С. 3-13.

24. Вилкова И. Макроугроза от микромира // МГ, 2008. № 16. - С. 10-11.

25. Воробьев А.А. Микрофлора человека и иммунитет: единство и противоположность / А.А. Воробьев, Ю.В. Несвижский // Сб. трудов. Современные проблемы аллергологии, клинической иммунологии и имму-нофармакологии. М., 1997. - С. 137-141.

26. Воробьев А.А. Мир микробов / А.А. Воробьев, A.JI. Гинцбург, В.М. Бондаренко // Вестник РАМН. 2000. - № 11. - С. 11-14.

27. Воробьев А.А. Иммуносупрессивное действие патогенных грамотрица-тельных бактерий / А.А. Воробьев, Е.В. Борисова, О.С. Моложавая // Вестник РАМН. 2001. - № 2. - С. 21-25.

28. Воронин В.В. Две модели обоснования этиологии кариеса с позиции современного подхода / В.В. Воронин, В.К. Леонтьев, В.Т. Шестаков // Стоматология. 2001. -Т. 80. - № 6. - С. 15-17.

29. Воронина И.Е. Влияние активности зубного налета на развитие патологического процесса в пародонте // Комплексное лечение и профилактика стоматол. заболеваний: Материалы 7-го съезда стоматологов УССР. -Киев, 1989.-С. 29-30

30. Габриэлян Н.И. Функции микрофлоры желудочно-кишечного тракта и последствия ее нарушений после хирургических вмешательств / Н.И. Габриэлян, Е.М. Горская, Н.Д. Снегова // Антибиотики и химиотерапия. 2000. Т. 45. № 9. - С. 24-29.

31. Гаврилова О.AvФакторы местной защиты полости рта и состояние тканей пародонта у дошкольников и школьников с врожденными расщелинами верхней губы и неба // Тверская госуд. мед. академия. Тверь, 1997. - С. 21.

32. Горбачева И. А. Общесоматические аспекты патогенеза и лечения генерализованного пародонтита / И.А. Горбачева, А.И. Кирсанов, Л.Ю. Орехова // Стоматология. 2001. - Т.80, №1. - С. 26 - 34.

33. Горонкина С.М. Влияние ортодонтического лечения зубочелюстных аномалий и деформаций на неспецифическую резистентность полости рта: Дис.канд.мед.наук. Волгоград, 1996. - 124 с.

34. Григорьян А.С. Роль и место феномена повреждения в патогенезе заболеваний пародонта // Стоматология. 1999. - № 1. - С. 16-21.

35. Григорьянц Л. А. Клинический опыт применения препарата «Имудон» на амбулаторном хирургическом приеме / Л. А. Григорьянц, К. Ю. Бадалян Н Стоматология для всех. № 3, 2000. - С. 8- 12.

36. Григорьянц Л.А. Воспалительные заболевания слизистой оболочки полости рта, пародонта и глотки / Л.А. Григорьянц, В.А. Бадалян. М., Медицина, 2001. - С. 24 - 28.

37. Грудянов А.И. Этиологическая роль некоторых видов микроорганизмов в патогенезе заболеваний пародонта / А.И. Грудянов, Л.В. Чернавина, Л.В. Морозова // Мед. реф. журнал. 1986. - № 4. - С. 6-10.

38. Грудянов А.И. Сравнительное изучение эффективности воздействия ряда местных антимикробных препаратов на видовой и количественный состав микробной флоры пародонтальных карманов /

39. А.И. Грудянов, Г.В. Масленикова, В.Ф. Загнат // Стоматология. 1992. - №1. - С. 25-26.

40. Грудянов А.И. Пародонтология. Избранные лекции. Стоматология / А.И. Грудянов. М., 1997. - 32с.

41. Грудянов А.И.'Иммунологические показатели крови при быстропрог-рессирующем пародонтите / А.И. Грудянов, И.В. Безрукова // Стоматология. 2000. - Т. 79, № 3. - С. 15-17.

42. Грудянов А.И. Антимикробная и противовоспалительная терапия в па-родонтологии / А.И. Грудянов, В.В. Овчинникова, Н.А. Дмитриева. -М.: Медицинское информационное агентство, 2004. 80с.

43. Грудянов А.И., Дмитриева Н.А., Фоменко Е.В. Применение пробиоти-ков в комплексном лечении воспалительных заболеваний пародонта // М. : ООО «Медицинское информационное агентство», 2006. 112с.

44. Гумерова М.И. Микробиоценоз пародонта у больных хроническим генерализованным пародонтитом на фоне тонзиллярной патологии и без нее / М.И. Гумерова, Л.Ф. Азнабаева, Т.С. Чемикосова, Р.Ф. Хуснаризанова // Пародонтология, 2007. № 2 (43). - С. 39-47.

45. Давыдова Т.Р. К проблеме дисбиоза в стоматологической практике / Т.Р. Давыдова, Я.Н. Карасенков, Е.Ю. Хавкина // Стоматология. -2001.- №2. -С. 23-24.

46. Данилевский Н.Ф. Структурные основы хронического течения воспалительного процесса при болезнях пародонта / Н.Ф. Данилевский, Н.А. Колесова, A.M. Политун, Э.Э. Керимов // Стоматология. 1988. -№6. -С. 49-51.

47. Данилевский Н.Ф. Заболевания пародонта / Н.Ф. Данилевский,

48. Е.А. Магид, Н.А. Мухин. М.: Медицина, 1993. - 320с.

49. Денисов А.Б. Муцины слюны // Стоматолог. 2006. - №7. с. 30-36.

50. Дмитриева Л.А. Современные аспекты клинической пародонтологии / Л.А. Дмитриева. -М.: Изд-во МЕДпресс, 2001. 128с.

51. Дмитриева Л.А. Терапевтическая стоматология: Учебн. пособие / Под. Ред. Проф. Л.А. Дмитриевой. М.: МЕДпресс-информ, 2003. -896с.

52. Дмитриева Л.А. Пародонтит / Л.А. Дмитриева. М. : МЕДпресс-информ, 2007. - 504с.

53. Дорофейчук В.Г. Определение активности лизоцима нефелометриче-ским методом // Лаб. Дело.- 1968. № 1. - С. 28-30.

54. Дорофейчук В.Г. Кишечный дисбактериоз и его роль на современном этапе в патогенезе заболеваний у детей: Автореф. дис. . д-ра мед. наук.-М., 1979.-32с.

55. Дрожжина В.А. Естественные биологические активные вещества в профилактике и лечении заболеваний зубов и пародонта: Автореф. дис.канд. мед.наук. СПб, 1995. - 33 с.

56. Дубова Л.В. Иммунологические маркеры адаптационной защиты пародонта у здоровых лиц // Образование, наука и практика в стоматологии: сборник трудов Всеросс. научно-практич. конф., 10-13 февраля 2004 года. Москва, 2004. - С. 116-120.

57. Дунязина Т.М. Значение исследования «маркерных» микроорганизмов зубной бляшки на пародонтологическом приеме / Т.М. Дунязина, C.D. Bauermeister // Пародонтология. СПб., 2000.

58. Дунязина Т.М. Значение исследования «маркерных» микроорганизмов зубной бляшки на пародонтологическом приеме // Институт стоматологии. 2001. -№ 3. - С. 7-8.

59. Дунязина Т.М. Современные методы диагностики заболеваний пародонта: Метод, пособие для врачей и студентов стоматологических факультетов / Т.М. Дунязина, Н.М. Калинина, И.Д. Никифорова. СПб.,2001.-48 с.

60. Езепчук Ю.В. Функциональные критерии патогенности микроорганизмов // Журн. Микробиол. 1998. - № 5. - С. 113-116.

61. Жулев Е.Н. Клиника, диагностика и ортопедическое лечение заболеваний пародонта / Е.Н. Жулев. Н.Новгород: Издательство НГМА, 2003. -278с.

62. Иванов B.C. Заболевания пародонта. 2-е изд.перераб. и доп. -М.: Медицина, 1989. - 272 с.

63. Иванов B.C. Заболевания пародонта. — М.: Медицинское информационное агентство, 1998. 296 с.

64. Иванова Ж.В. Распространенность, интенсивность и особенности клинического течения заболеваний пародонта у лиц молодого возраста // Современная стоматология и зубное протезирование. 2006. - №2. -С. 18-22.

65. Иванова Е.Н. Зубные отложения: учебное пособие / Е.Н. Иванова, A.M. Петрова. Ростов н/Д: Феникс, 2007. - 93с.

66. Ивашкевич Л.Г. Неспороносные анаэробы в микрофлоре кариозных зубов / Л.Г. Ивашкевич, О.А. Звезденкин // Лаб. дело. 1991. №1. -С. 53-56.

67. Иорданишвили" А.К. Заболевания эндодонта, пародонта и слизистой оболочки полости рта / Под. Ред. Проф. А.К. Иорданишвили. М.: МЕДпресс-информ, 2008. - 344с.

68. Калашникова А.П. Оценка местного гуморального иммунитета ротовойполости у студентов ВГМА / А.П. Калашникова, А.А. Дронова, Н.Е. Бочарникова, А.А. Соломатина // Инновационные технологии в медицине. Сборник научных статей. Воронеж, 2005. — С.-185-188.

69. Канканян А.П. Болезни пародонта: Новые подходы в этиологии, патогенезе, диагностике, профилактике и лечении /А.П. Канканян, В.К. Леонтьев. Ереван: «Тигран Мен», 1998. - 360 с.

70. Каргальцева Н.М. Ротовая полость важный биотоп организма человека//Институт стоматологии. -2001. - №1(10). - С. 18-21.

71. Квасникова Е.И. Молочно-кислые бактерии и пути их использования / Е.И. Квасникова, О.А. Нестеренко. М., 1975. - 389с.

72. Колпакова С.Д. Биоэлектромагнитная модель механизма развития кишечной палочки // ЖМЭИ. 1995. № 3. - С. 70-74.

73. Кирсанов А.И. Изучение взаимосвязи патологии пародонта с общим состоянием организма /А.И. Кирсанов, Л.Ю. Орехова, И.А. Горбачева // Пародонтология. 1996. - № 2. - С. 41-42.

74. Королева Н.В. Колонизация и факторы персистенции условно-патогенных микроорганизмов при красном плоском лишае слизистых оболочек полости рта: Автореф. дисс. . канд. мед. наук. Волгоград, 2001.-24 с.

75. Коршунов В.М. Качественный состав нормальной микрофлоры кишечника у лиц различных возрастных групп / В.М. Коршунов, Л.В. Поташник, Б.А. Ефимов и др. // ЖМЭИ. 2001. №2. - С. 57-62.

76. Котлова О.В. Функциональное состояние тканей пародонта и микробиоценоза полости рта у молодежи архангельской области : дис. . канд. мед. наук-- Архангельск, 2001, с. 14 24.

77. Котлова О.В., Роль микробного фактора в развитии заболеваний пародонта у жителей Архангельской области / О.В. Котлова, О-В. Лебедева, Т.А. Бажукова, Т.Н. Юшманова // Экология человека. 2007. №5.- 15-17.

78. Кочеткова М.Г. Особенности микрофлоры полости рта у рабочих тет-рациклиновых производств / М.Г. Кочеткова, И.П. Балмасова // Стоматология, 1985. № 1. - С.79.

79. Кравцова Е.О. Колонизация микроорганизмами слизистой оболочки полости рта людей, живущих в неблагоприятной экологической обстановке: Автореф. Дис. . канд.мед.наук. Волгоград, 1995. -22с.

80. Кралсан И.А. Клинико-эпидемиологическая характеристика, лечение и профилактика заболеваний пародонта у жителей химической промышленной зоны : дис. . канд. мед. наук Ставрополь. - 1997. - 137 с.

81. Крамарь Л.В. Микробная экология кишечника людей, проживающих в условиях техногенного воздействия крупного промышленного города: Автореф. дис. . док. мед. наук. Москва, 2002. 43с.

82. Крамарь В.О. Эколого-гигиенические аспекты бактерионосительства стафилококков у детей, проживающих в районах крупного промышленного города с различной антропогенной нагрузкой. Волгоград,2008.

83. Крамарь B.C. Колонизация микроорганизмами полости рта: Метод. Рекомендации. Волгоград, 1989. 16с.

84. Крамарь B.C. Определение степени благополучия микрофлоры полости рта с помощькЗ С-реактивного белка / B.C. Крамарь, Е.О.Кравцова // Рац.предл. №17-91. - Волгоград, 1995.

85. Кузьмина Э.М. Профилактика стоматологических заболеваний. Учебное пособие М.: Тонга-Принт, 2001. -216с.

86. Кузнецова П.А. Взаимосвязь кариеса зубов и зубочелюстных деформаций / П.А. Кузнецова, В.А. Дистель // Стоматология. — 1981. № 3. -С. 58-59.

87. Латышевская Н.И. Гигиенические и социальные аспекты образа жизнишкольников крупного промышленного города. Волгоград, 2006. -264с.

88. Левицкая С.В. Эндоскопические и микробиологические параллели при гастродуоденальном кампилобактериозе / Н.А. Коровина, Т.С. Спирина, С.В. Левицкая и др. // Патология системы пищеварения.-М. 1987.- С.27-32.

89. Левицкий А.Б. Зубной налет / А.Б. Левицкий, И.К. Мизина. Киев: Здоровье, 1983Т- 80 с.

90. Левицкий А.Б., Мизина И.К. Зубной налет. Киев: Здоровье, 1983. 80с.

91. Лемецкая Т.И. Клинико-экспериментальное обоснование классификации болезней пародонта и патогенетические принципы лечебно-профилактической помощи больным с патологией пародонта: Автореф. дис.канд.мед.наук. М., 1998. - 38 с.

92. Ленцнер А.А. Актуальные проблемы микроэкологии человека /

93. A.А. Ленцнер, Х.П. Ленцнер // Аутофлора человека в норме и патологии и ее корреляция. Горький, 1988. С. 10-14.

94. Леонтьев В.К. О характере воздействия некоторых химических веществ на активность микрофлоры мягкого зубного налета /

95. B.К Леонтьев, Ю.А. Петрович, Л.Н. Круглова // Стоматология. 1997. -№ 3. - С.5-11.

96. Леонтьев В.К. Микрофлора полости рта / В.К. Леонтьев, В.Ф. Воронин,

97. B.Т. Шестаков. Москва. 2000. - 21 с.

98. Лепилин А.В. Проблемы клеточного обновления эпителиоцитов десны при воспалительных заболеваниях пародонта / А.В. Лепилин, Н.В. Булкина, A.IO. Кропотина // Успехи современного естествознания. 2003.-С. 55.

99. Леус П.А. Стоматологический статус и уровень здоровья человека // Заболевания челюстно-лицевой системы и их профилактика: Тез. I съезда научного общества стоматологов Эстонии. Таллин, 1988.1. C. 148-149.

100. Логинова Н.К.- Воложин А.И. Патофизиология пародонта: Учебно-методическое пособие — М., 1995- с. 108.

101. Луцкая И.К. Болезни пародонта / И.К. Луцкая М.: Мед. лит., 2010. -256с.

102. Лычев В.Г. Изменение количественного состава микробной флоры зубного налета при интенсификации гигиены полости рта / В.Г. Лычев, С.Е. Косюга // Стоматология. 2000. - № 6. - С. 7-8.

103. Магид Е.А. Общее лечение кариеса зубов / Е.А. Магид, Е.Е. Маслак, Н.Ф. Алешина, А.Ф. Касибина // Метод. Рекомендации. Волгоград, 1992. -24с. *

104. Максимовский Ю.М. Бактериологический аспект периодонтита // Новое в стоматологии, 2001. № 6(96). - С. 8-13.

105. Мельников В.Г. Изучение роли актиномицетов в развитии воспалительных заболеваний пародонта: Автореф. дис. . канд. мед. наук. М., 1990.-20с.

106. Мегрелишвили Н.А. Тактика консервативного лечения заболеваний пародонта, основанная на ранней идентификации пародонтопатогенной микробной флоры: Автореф. Дис. . канд.мед.наук. Москва, 2004. -с. 138.

107. Мизина И.К. Влияние активных компонентов средств гигиены полости рта на образование и биологические свойства зубного налета: Автореф. дисс. . канд. мед. наук. Одесса, 1980. - 18 с.

108. Микельсаар М.Э. Формирование и сохранение резидентной микрофлоры желудочно-кишечного тракта / М.Э. Микельсаар. В кн.: Антибиотики и колонизационная резистентность / Под ред. Б.А. Шендерова. -М., 1990.

109. Митронин А.В. Стоматологический статус и клинико-лабораторные аспекты диагностики и течения болезней пародонта у пациентов старших возрастных групп / А.В. Митронин, Т.П. Вавилова, Е.Н. Сажина, Е.Я Ясникова // Пародонтология, 2007. № 2 (43). - С. 3-8.

110. Морозова Л.В. Дисбиозы полости рта у стоматологических больных и возможность их коррекции эубиотиками. М., 1994. - Вып. 7-8. -Часть 2.

111. Мюллер Х.-П. Пародонтология / Х.-П. Мюллер. пер. с нем. - Львов: ГалДент, 2004.-256с.

112. Недосеко В.Б. Резистентность зубов в проблеме кариеса (клинико лабораторное исследование): Автореф. дис. . док. мед. наук. М., 1989. -42с.

113. Никитина Т.В. Показатели водородных ионов в полости рта человека / Т.В. Никитина, Т.В. Кулаженко, B.C. Воробьев и др. // Стоматология. 1982.-№ 2.-С. 26-30.

114. Николаев И.В. Частота колонизации стафилококками кишечника у детей с явлениями дисбактериоза / И.В. Николаева, В.М, Бондаренко, В .А. Анихина // ЖМЭИ. 2000. № 1.-С. 17-21.

115. Овруцкий Г.Д., Леонтьев В.К. Кариес зубов. М.: Медицина, 1986. -114с.

116. Овчинникова Л.И. Применение новых катионных поверхностно-активных веществ при лечении гингивита: Автореф. дис. . канд. мед. наук. М., 1988.- 16с.

117. Олейник И.И. Современные аспекты биологии / И.И. Олейник, В.Н. Покровский // ЖМЭИ, 1987. № 6. - С. 91-97.

118. Олейник И.И. Микробиология и иммунология полости рта // Биология полости рта. М., 1991. С. 226-261.

119. Орехова Л.К\ Заболевания пародонта / Под. общ. ред. проф. Л.Ю. Ореховой. М.: «Поли Медиа Пресс», 2004. - 432с.

120. Пашаев А.Ч. Динамика развития заболеваний пародонта у населения Азербайджана за прошедшие 30 лет // Пародонтология, 2008. № 4. -С. 69-72.

121. Перетц Л.Г. Значение нормальной микрофлоры для организма человека. М., 1955. -.434 с.

122. Петровская В.Г. Общие принципы генетического контроля патогенности бактерий / В.Г. Петровская, В.М. Бондаренко // Журн. Микробиол. 1994.-№3.-С.106-110.

123. Пилат Т.Л. Зубной камень и его влияние на ткани пародонта / Т.Л. Пилат // Стоматология. 1984. - № 3. - С. 88-90.

124. Плахтий Л.Я. Тактика антибактериальной терапии пародонта, основанная на результатах микробиологического и молекулярно-генетического исследования: Автореф. Дис. . д-ра мед.наук. — Москва, 2002. 23с.

125. Пономарева И.Г. Экологическая значимость микрофлоры полости рта в плане стоматологической реабилитации: Автореф. дисс. . канд. мед. наук. Волгоград, 1993. - 18 с.

126. Прозоровский С.В. Медицинская микоплазмология / С.В. Прозоровский, И.В. Раковская, Ю.В. Вульфович. М.: Медицина, 1995.-225 с.

127. Прозоровский С.В. Возбудители оппортунистических инфекций роль в инфекционной патологии человека и методы лабораторной диагностики // Клин, лабораторная диагностика. - 1998.-№2.-С.33-35.

128. Рабинович И.М. Значение микрофлоры полости рта в этиологии и патогенезе красного плоского лишая: Обзор литературы / И.М. Рабинович, В.В. Хазанова, И.В. Безрукова // Стоматология, 1997. -№ 2. С. 25-27.

129. Рабинович И.М., Дмитриева Н.А., Ефимович О.И. Коррекция микробиологических изменений у больных с дисбактериозами полости рта / Труды VI съезда СтАР (Москва, 11-14 сентября, 2000). С. 281-283.

130. Рабинович И.М. Применение иммудона в комплексной терапии дисбактериозов полости рта / И.М. Рабинович, О.П. Ефимович, О.Ф. Рабинович и др. // Клинич. Стоматология. 2001. - № 33. -С. 70-72.

131. Рабинович И.М. Роль микрофлоры в патологии слизистой оболочки полости рта / И.М. Рабинович, Г.В. Баненко, О.Ф. Рабинович // Стоматология. 2002. - № 5. - С. 48-50.

132. Реброва Р.Н. Грибы рода Candida при заболеваниях негрибковой этиологии.-М., 1989.- 123с.

133. Робустова Т. Г. Актиномикоз челюстно-лицевой области и шеи // М.: Медицина , 1983. 247с.

134. Робустова Т. Г. Иммунная система региона зуба-зубочелюстного сегмента / Т.Г. Робустова, К.А. Лебедев, И.Д. Толякина и др. // Стоматология.-1990.4. С. 88-91.

135. Ронь Г.И. Проблема дисбиоза полости рта у больных с заболеваниями слизистой оболочки полости рта и его коррекция // Маэстро стоматологии. 2001. - № 5. - С. 55-56.

136. Ростока Д. Слюна и кариес зубов: диагностические тесты в зубоврачебной практике / Д. Ростока, Ю. Кройча, В. Кузнецова и др. // Стоматология, 2001. Т. 80. - № 5. - С.7-10.

137. Рыбаков А.И., Челидзе Л.Н. Анатомо-физиологические особенности ротовой полости и их значение в патологии. Тбилиси, 1990. 118с.

138. Свирин В.В. Изучение состояния микробиоценоза полости рта при воспалительных заболеваниях пародонта и оценка возможности его коррекции с помощью Стоматидина® / В.В. Свирин, В.О. Богданова, М.Д. Ардатская // Фарматека, 2009. № 19. - С. 56-63.

139. Семенов А.В. ^Микробная регуляция антагонистической активности бактерий / А.В. Семенов, А.В. Сгибнев, С.В. Черкасов, О.В. Бухарин // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 2007. Т. 144. -№11. - С.545-548.

140. Соловьева A.M. Эпидемиологическое исследование распространенности периодонтопатогенной микрофлоры полости рта у населения России / A.M. Соловьева, С.К. Матело, А.А. Тотолян, А.Б. Чухловин,

141. Сомов Г.П. Особенности экологии внеорганизменных популяций бактерий и их отражение в эпидемиологии инфекций // ЖМЭИ, 1997. -№ 5.-С. 12-16.

142. Стомахина Н.В. Комплекс методов оценки состояния неспецифической резистентности организма по иммунологическим показателям слюны / Н.В. Стомахина, М.К. Данилова, Л.В. Каткова, М.Б. Новикова // Гигиена и санитария,'1992. № 3. - С. 67-69.

143. Сытник С.Н. Таксономическая структура и характер доминирования в кожном микробиоценозе молочных желез // ЖМЭИ. 1994. - № 4.1. C. 27-31.

144. Темирбаев М. Этиология, патогенез, клиника протезных стоматитов, пути профилактики и лечения: Дис. . док. мед. наук. Алма-Ата, 1990. -348с.

145. Тулеуова Д.К. Микрофлора полости рта и ее роль в развитии заболеваний пародонта // Проблемы стоматологии 2001. - №3(13). — С. 12-14.

146. Уразова И.В. Содержание лизоцима в слюне у больных с воспалительными процессами челюстно-лицевой области // Региональная научно-практическая конференция стоматологов. Ижевск, 1992. - Ч. 1. -С. 58-59.

147. Ушаков Р.В. Микрофлора полости рта и ее значение в развитии стоматологических заболеваний / Р.В. Ушаков, В.Н. Царев // Стоматология для всех. 1998. - № 3. - С. 22-24.

148. Фазылова Ю.В. Колонизационная резистентности и гуморальные факторы хащиты слизистой оболочки полости рта у блтных с хроническими воспалительными заболеваниями пародонта / Ю.В. Фазылова,

149. B.Ю. Хитров, Ф.Х. Закиров // Казанский медицинский журнал, 2007. — Т. 88, №5.-С. 469-472.

150. Филатова Е.С. Комплексная оценка состояния тканей пародонта по химическому составу сред полости рта и содержанию нуклеазопозитив-ных микроорганизмов: Автореф. Дис. . канд.мед.наук. Москва, 2002,- 28 с.

151. Хазанова В.В. Морфология микроорганизмов содержимого зубодесне-вого кармана в зависимости от тяжести пародонтита /В.В. Хазанова, А.Н. Балашов,~В.Ф. Загнат и др. // Стоматология. 1993. ■ № 3.1. C.16-18.

152. Хельвиг Э. Терапевтическая стоматология / Э. Хельвиг, И. Климек, Т. Аггин. Изд. « ГалДент», 1999. - 409с.

153. Царев В.Н. Динамика колонизации микробной флорой полости рта различных материалов, используемых для зубного протезирования / В.Н. Царев, С.И. Абакров, С.Э. Умарова // Стоматология. 2000. -№ 1.-С. 55-57.

154. Царев В.Н., Николаева Е.Н., Плахтий JI.A. и др. Применение новых мо-лекулярно-биологических систем для диагностики и прогнозированиязаболеваний пародонтита. Пособие для врачей. М., 2005. 24с.

155. Царев В.Н. Коррекция нарушений микробиоценоза ротовой полости при терапии Ликопидом // Стоматология. 2006. - № 2. - С. 44-49.

156. Цепов Л.М. К пересмотру вопросов патогенеза и принципов лечения хронического генерализованного пародонтита / Л.М. Цепов, А.И. Николаев // Российский стоматологический журнал. - 2001. - № 3. -С. 43-45.

157. Цепов Л.М., Николаев А.И. Диагностика и лечение заболеваний пародонта. — 2-е изд, испр. и доп. М.: МЕДпресс-информ, 2004. - 200с.

158. Цепов Л.М. Некоторые аспекты этиологии и патогенеза хронических воспалительных генерализованных заболеваний пародонта / Л.М. Цепов, Л.Ю. Орехова, А.И. Николаев, Е.А. Михеева // Пародонтология, 2005. № 2 (35). - С. 3-6.

159. Цепов Л.М. Микрофлора полости рта и ее роль в развитии воспалительных генерализованных заболеваний пародонта // Пародонтология, 2007. № 4(45). - С. 3-6.

160. Цепов Л.М. Взгляд на проблему этиологии, патогенеза и лечения воспалительных заболеваний пародонта/ Л.М. Цепов, А.И. Николаев, Н.А. Голева // Дентал-Юг. 2008. - № 8. - С. 14-16.

161. Цепов Л.М. Роль микрофлоры в возникновении воспалительных заболеваний пародонта / Л.М. Цепов, Н.А. Голева // Пародонтология, 2009. № 1(50).-С. 7-11.

162. Цимбалистов А.В. Состояние полости рта у Helicobacter pylory-инфицированных больных / А.В. Цимбалистов, Н.С. Робакидзе // Современные проблемы стоматологии: Сборник научных трудов М., 1999.-С. 250-252.

163. Цимбалистов А.В. Профессиональная гигиена полости рта: Метод, пособие / А.В. Цимбалистов, Г.Б. Шторина, Е.С. Михайлова. СПб., 2002.-48с.

164. Цимбалистов А.В. Комплексное лечение генерализованного пародонтита тяжелой степени с применением депульпирования зубов. Руководство для врачей / А.В. Цимбалистов, Э.Д. Сурдина, Г.Б. Шторина, Е.Д. Жидких. СПб.: Спец Лит, 2008. - 109с.

165. Чайковская И.В. Микробиоценоз полости рта в норме и при кариесе / И.В. Чайковская, Т.С. Осипенкова // Архив клинической и экспериментальной медицины. 2002. - T.l 1, №3. - С. 394-397.

166. Чепуркова О.А» Особенности микробиоценоза пародонтального кармана при генерализованном пародонтите средней степени тяжести / О.А. Чепуркова, М.Г. Чеснокова, В.Б. Недосеко // Институт стоматологии. 2007. - №3. - С.86-88.

167. Чистович Г.Н. "Элективно-дифференциальная среда для выделения патогенных стафилококков из загрязненного материала // ЖМЭИ. 1952.- № 2. С. 78-90.

168. Чуйкина О.В. Условно-патогенные микроорганизмы в микробиоценозеполости рта при дисбактериозах кишечника, их персистентные свойства: Дис.Т. канд. мед. наук. Волгоград, 2002. - 163 с.

169. Чумаков А.А. Роль ассоциативной условно-патогенной флоры в развитии одонтогенных воспалительных заболеваний челюстно-лицевой области / А.А. Чумаков, Л.Г. Миринова // Стоматология, 1991. № 6. — С. 30-32.

170. Чурилов Л.П. Механизмы развития стоматологических заболеваний.

171. Учебное пособие / Л.П. Чурилов, М.А. Дубова, А.И. Каспина, и др. // СПб.: «ЭЛБИ-СПб», 2006. 534 с.

172. Шабанская М.А. Некоторые показатели дисбактериозов полости рта при разных формах стоматологических заболеваний и эффективности коррекционной бактериальной терапии: Дисс. канд. мед.наук.-М.,1994.-169 с.

173. Шевченко Ю.Л. Микроорганизмы и человек. Некоторые особенности их взаимодействия на современной этапе / Ю.Л. Шевченко, Г.Г. Онищенко // Журн. микробиологии. 2001. - № 2. - С. 94-104.

174. Ярова С.П. Коррекция резистентности организма в системе кариеспро-филактики: Автореф. дис. . канд. мед. наук. Минск, 1991. 23с.

175. A sensitive method for the duection of in human gingival creviculer fluid I Listgarten M.A. // J. Clin. Periodontal. 1992. - Vol. 19. - P. 601-603. '

176. Addy M. Tooth Wear and Sensitivity: Clinical Advances in Restorative Dentistry / M. . Addy, G. Embery, W. M. Edgar Publisher: Martin Dunitz -1983.- p.

177. Beck G. The epidemiology of root surface caries // J. Dent. Res. 1990. Vol.69.-N 5.-P. 1216-1221.

178. Benno I., Mitsuoka T. Development of intestinal microflora in humen andanimals//Bifidobacteria and microflora. 1986. Vol. 5.-N 1.-P. 13-25.

179. Brown L.J. Prevalence, extent, severity and progression of periodontal dis-ease/L.J. Brown, H. Loe//Periodontal. 2000.-2000.-vol.2.-P.57-71.

180. Carlsson J., Johanson T. Sugar and the production bacteria in the human mouth.// Caries Res.-1973. Vol.7. - N4. - P.273-282.

181. Cogo K. The effects of nicotine and cotinine on Porphyromonas gingivalis colonization of epithelial cells / K. Cogo, B.M. Calvi, F.S. Mariano, G.C. Franco, R.B. Con9alves, F.C. Groppo // Arch Oral Biol., 2009. -Vol. 54 (11)-PT 1061-1067

182. Damir T. Effects of different blood groups on the reproduction of periodontal pocket bacteria / T. Damir, H. Uslu, R. Orbac, U. Altoparlak, A. Ayyildiz // Int Dent J., 2009. Vol. 59 (2). - P. 83-86.

183. Davenport E.S., Day S., Hardy T.M. Salivary streptococcus mutans and lac-tobacillus levels in young people // J. Dent. Res. 1988. Vol.67. — N 4. — P. 69-121.

184. De Boever E.H., Loesche W.J. Assessing the contribution of anaerobic microflora of the tongue to oral malodor.// J. Am. Dent. Assoc. 1995. -Vol.126.-P. 1384-1393.

185. Ebersole J.L. Longitudinal dynamics of infection and serum antibody in A. actinomycetemcomitans periodontitis / J.L. Ebersole, D. Capelli, M.J. Steften // Oral. Dis.-1995. Vol. 1. P. 129-138.

186. Edger W.M. Saliva and detal health // Brit. Dent. J.-1990.-Vol.l89, N3-4.-P. 96-98.

187. Einwag J. Bacterien redden miteinander // Dental Spiegel. 2004. - N 8.-P. 38-39.

188. Engelkirk P.G. Clinical anaerobic bacteriology // Houston, Texas. 1992 -462p.

189. Ezzo P.J. Microorganisms as risk indicators for periodontal disease/ P.J. Ezzo, C. Cutler//Periodontal.-2003.-Vol. 32.-P.24-35.

190. Finegold S. M. Bilophila wadsworthia isolates from clinical specimens /

191. E. J.Baron, М. Curren, G. Henderson, H. Jousimies-Somer, K. Lee, K. Lechowitz, C. A. Strong, P. Summanen, K. Tuner, S. M. Finegold // J. Clin. Microbiol. 1992. Vol. 30. - P. 1882-1884.

192. Finegold, S. Clinical importance of Bilophila wadsworthia / S. Finegold, P. Summanen, S. Hunt Gerardo, E. Baron // Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 1992. Vol. 11.-P. 1058-1063.

193. Firatly E., Uygur O., Gurel N. Distribution of T-lymphocyte subsets in patients with generalised prepubertal periodontitis // J. Dent. Res.-1999.-Vol.78.-Special Issue.-P.513

194. Goldberg S. Cadaverin as a putative component of oral malodor / S. Goldberg, A. Kozlovsky, D. Gordon, I. Gelemter, M. Rosenberg // J. Dent. Res. 1994. - Vol.73. - P. 1168-1172

195. Gomes B.P. Clinical singiflcance of dental root canal microflora / B.P. Gomes, I.D. Lilley, D.B. Drucker // J. Dent. 1996, Jan., Mar. -P. 47-55.

196. Gordon D.F. Jr.r Gibbons R.J. Studies of the predominant cultivable microorganisms from the human tongue. // Arch. Oral Biol. — 1966. Vol.11. -P. 627-632.

197. Haenal H. System Mench und Microflora // Ernauhrung for schung, 1973.-В. 19.-P.293-298.

198. Haffajee A.D. Relation of baseline microbial parameters to future periodontal attachment loss / A.D. Haffajee, S.S. Socransky et al // J. Clin. Periodon-tol. 1991,- Vol.18.-P.744-750.

199. Haffajee A.D. Microbial etiological agents of destructive periodontal diseases / A.D. Haffajee, S.S. Socransky // J. Periodontol. 2000. 1994. - Vol.5. -P.78-111.

200. Hans W., Scholmerich J., Grosse V. The role of the resident intestinal flora in acute and chronic dextran sulfate sodium-induced colitis in mice//Eur. J. Gastroenterol. Hepatol. 2000. Mar.; 12 (3) P. 267-73.

201. He. F:, Onwehand A. C., Jsolauri E. et al. Comparison of mucosae adhesion and species indentification of bifidobacteria isolated from healthy and allergic in fants//FEMS Immunol. Med. Microbiol. 2001. Feb; 30 (1) P. 7-43.

202. Henteges D. The protective function of the indigenous intestinal flora // Pe-diatr. Infect. Dis. 1996. V. 5. Supple. 1 P. 17-20.

203. Henthorn P.S., Raducha M. et al. Microflora of root surface // Proc. Nat. Acad. Sci. Usa. 1987. Vol. 84. P. 1234-8.

204. Iacono V .J. Lysozyme-mediated aggregation and lysis of the periodontal microorganism Capnocytophagagingivalis / V.J. Iacono, S.M. Zove, B.L. Grossbard et al. // Infect. Immun. 1985. V.47.№ 2. P. 457-464.

205. Jngram E. Studies of the extracellular proteolytic activity produced by Pro-pionibacterium acnes / E. Ingram, K.T. Hollend, G. Gowland, W.J. Cunllffe. // J.Appl. Bacterid. 1998. V. 54. № 2. P. 263-271.

206. Kawasaki Y., Tazume S., Shimizu K. Inhibitory effects of bovine lactofer-rin on the adherence of enterotoxigenic Escherichia coli to host cells // Bios-ci.Biotechnol. Biochem. 2000. Feb; 64 (2). P. 384-54.

207. Kleinberg I., Codipilly M. The biological basis of oral malodor formation. In: Rosenberg M. Bad Breath: Perspectives, ed 1. Tel-Aviv, Israel: Ramot.-1995.-P.13-39.

208. Клоке M. Microecologie des Menschen, Microflora bei Gesunden und Kranken / M. Knoke // Berlin: Academie-Verlag. 1985. - 1358 p.

209. Kohler B. Mutans streptococci and dental caries prevalance in a group of Latvian hreschool children / B. Kohler, S. Bjamasok, R. Care // Eur. J. Oral Sci.-1995. № 103. - P. 264-266.

210. Leung W.K. Microflora cultivable from minocycline strips placed in persisting periodontal pockets / W.K. Leung, L. Jin, J.Y. Yau, Q. Sun, E.F. Corbet // Arch Oral Biol., 2005. V. 50 (1).- P. 39-48.

211. Lidbeck A., Nord C. Lactobacilli and the normal human anaerobic microflora // Clin. Infect. Dis., 1993; 16. P. 181-187.

212. Lilly D.M. Growth promoting factor produced by microorganisms / D.M. Lilly // Science.- 1995.- V. 147.- P. 747-748.

213. Loesche W.J. Development of a diagnostic test for anaerobic periodontal infections based on plaque hydrolysis of benzoyl-DL-arginine-naphthylamide / W.J. Loesche, W.A. Bretz, D. Kerschensteiner // J. Clin. Microbiol. 1990.-Vol. 28.-P. 1551-1559.

214. Loesche W. Measuring harmful levels of bacteria in dental aerosols / R Earnest., W. Loesche // Journal of the American Dental Association, 1991. -Vol. 122 -№ 12.-P. 55-57

215. Loesche WJ Effects of metronidazole on periodontal treatment needs / Loesche W.J., Schmidt E., Smith B.A., Morrison E.C., Caffesse R., Hujoel P.P. // J Periodontol. 1991. Vol. 62(4). - P. 247-257.

216. Makenzil J.S., Dabelsteen E. Oral Mucosal diseases: biology, ecology and therapy// Acta CTdontol. Scand. 1990. Vol. 48. # 1 P. 5-8.

217. Marcotte H. Oral Microbial Ecology and the Role of Salivary Immunoglobulin A / H. Marcotte, M.C. Lavoie // Microbiol. Mol. Biol. Rev. 1998. -Vol. 62, N1.-P. 71-109.

218. MC Namara TF., Alexander J. E., Lee M.The role of micro-organisms in the production of oral malodor.//Oral Surg.-1972.-Vol.34.-P.41-48.

219. Microbial flora in the acute phase of periodontitis and the effect of local administration of minocycline / M. Umeda, Y. Tominaga, Т. He, K. Yano, H. Watanabe, I. Ishikawa // J. Periodontol. 1996. - Vol. 67. - P. 422-442.

220. Microbial of health, gingivitis, and initial periodontitis / A. Tanner, M. G. Maiden, P.J. Macuch // J. Clin. Periodontal.-1998.-N2.-P.85-98

221. Mombelli A., Gmur R. Actinobacillus actinomycetemcomitans in adult periodontitis. I. Topographic distribution before and after treatment // J. Periodontal.- 1994.-Vol.65.-N6.-P.820-826

222. Mombelli A., Gmur R. Actinomycetemcomitans in adult patients. II. Characterization of solated strains and effect mechanical periodontal treatment // J. Periodontol.-1994.-Vol. 65.-N6.-P.827-834

223. Moore W.E. The bacteria of periodontal diseases/W.E. Moore, L.V. Moore//Periodontology.-1994. Vol. 5. - P. 66-77.

224. Murdoch D. A.Gram-Positive Anaerobic Cocci // Clinical Microbiology Reviews, 1998.- Vol. 11 №. 1. - p. 81-120.

225. Nyvad В., О. Fejerskov. An ultrastructural study of bacterial invasion and tissue breakdown in human experimental rootsurface caries // J. Dent. Res. 1990. Vol. 69. #.5. P. 1118-1124.

226. Olsen J., Stenderup A. Clinical-mycologic diagnosis of oral yeast infections //Acta odontolog. Scand. 1990. Vol. 48. # 11. P. 11-18.

227. Omar A.A., Newan N.H., Bulman J. Darkground microscopy of subgingival plaque of the periodontal process. // J. Clin. Periodontal. 1990. Vol. 17. # 6. P. 346-370.

228. Orrhage K. Bifidobacteria and lactobacilli in human health / K. Orrhage, C.E. Nord // Drugs. Exp. Clin. Res 2000. - Vol. 26, 3. - P. 95-111.

229. Pannuti E., Trapani M., Verrocchi G. Studio clinico longitudinale sull effi-cacia delle tetracycline associate alia levigature radicolare in parienti affetti du mallattia perodontale.//Minerva stomatol.-1990. Vol.39, N5. - P. 407 -412.

230. Persson S., Edlund MB., Claesson R., Carlsson J. The formation of hydrogen sulfide and methyl mercaptan by oral bacteria.//Oral Microbiol Immu-nol.-1990.-Vol.5.-N8.-P. 195-201.

231. Relter B. Review of nonspecilc antimicrobial factors in colostrums // Ann. Rech. Vet. 1998. V. 9. N 2.P. 205-224.

232. Sandholm L. The cellular host response in juvenile periodontitis // A review. J Periodontol ,1985. Vol. 56. - № 6. - P. 359—366.

233. Slots J. Bacteroides gingivalis, Bacteroides intermedius and Actinobacillus actinomycetemcomitans in human periodontal diseases/ J. Slots, M.A. Listgarten // J. Periodontol, 1988. Vol. 15. P. 85-93

234. Slots J. Actinobacillus actinomycetemcomitans and Bacteroides intermedins in human periodontitis: age relationship and mutual association/ J. Slots, D. Feik, Т.Е. Rams // J. Clin. Periodontal.-1990,- Vol. 17. P. 659-662.

235. Socransky S.S. Periodontal therapy by local delivery of tetracycline / J. M. Goodson, E A. Haffage, S.S. Socransky // Journal of Dentistry. 1979. -Vol. 7. № 4. - P. 352

236. Socransky S.S. Chemotaxis and vascular permeability produced by human periodontopathic bacteria / Lindhe J. and S.S. Socransky // Journal of Dentistry. 1979. Vol. 7. - № 4. - P. 358

237. Socransky S.S. Microchemical confirmation of triglycerides in some gram-positive oral bacteria / E.I. Szabo, B.H. Amdur, S.S. Socransky // Archives of Oral Biology: 1979. Vol. 24. - № 3. - P. 233-234

238. Socransky S.S. Jawbone cavities and trigeminal and atypical facial neuralgias Oral Surgery / Eugene J. Ratner, Philip Person, Daniel J. Kleinman, Gerald Shklar, Sigmund S. Socransky // Oral Medicine, Oral Pathology, 1979,-Vol. 48. №1,- P. 3-20.

239. Socransky S.S., Haffajee A.D. The bacterial etiology of destructive periodontal desiase.//J. of Periodontology.-1992.-Vol.63.-P.322-331.

240. Socransky S.S. Effect of therapy on periodontal infections / S.S. Socransky, A.D. Haffajee // J. Periodontol. 1993. - Vol. 64. - P.754-759

241. Sorsa T. Cellular source, activation and inhibition of dental plague collage-nase//J. Clin. Periodontol. 1995. Sep; P. 709-17.

242. Todorovic T. Use of saliva as a diagnostic fluid in dentistry / T. Todorovic, I. Dozic, D. Pavlica, D. Markovic, G. Brajovic, M. Ivanovic. G. Stevanovic. S. Mirkovic, B. Andjelski // Spr Arh Celok Lek., 2005. Vol.133 (7-8). -P. 372-378.

243. Wilson G. Fundamentals of periodontics / G. Wilson, K.S. Kornman. -Tokyo: Quintessence Publishing Co., 1996. 564 p.

244. Zambon J. Actinobacillus actinomycetemcomitans in human periodontal disease // J. Clin Periodontol, 1985. Vol. 12. P. 1-20.

Информация о работе

Матисова, Елена Владимировна
кандидата медицинских наук
Волгоград, 2010
ВАК 03.02.03

Диссертация

Колонизация условно-патогенными микроорганизмами слизистой оболочки полости рта при хроническом пародонтите - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы