Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Клонирование, анализ структуры и характеристика регуляторных областей двух паралогичных генов эстрогенсульфотрансферазы крысы

ВАК РФ 03.00.03, Молекулярная биология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Астапова, Инна Игоревна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Общая характеристика сульфотрансфераз.

1.2. Суперсемейство генов сульфотрансфераз млекопитающих

Классификация и характеристика генов сульфотрансфераз.

1.2.1. Фенолсульфотрансферазы (Stp, SULT1A).

1.2.2. Гидроксиариламинсульфотрансферазы (Stic, SULT1C).

1.2.3. Сульфотрансферазы тиреоидных гормонов (Stlb, SULT1B).

1.2.4. Эстрогенсульфотрансферазы (Ste, SULT1E).

1.2.5. Гидроксистероидсульфотрансферазы ( Std, SULT2A и SULT2B).

1.3. Особенности регуляции экспрессии эстрогенсульфотрансфераз в различных тканях

1.3.1. Регуляция экспрессии эстрогенсульфотрансфераз в эпителии молочной железы.

1.2.2. Регуляция экспрессии эстрогенсульфотрансфераз в эндометрии.

1.2.3. Регуляция экспрессии эстрогенсульфотрансфераз в семенниках.

1.2.4. Регуляция экспрессии эстрогенсульфотрансфераз в печени.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1. Животные.

2.2. Материалы.

2.3. Электрофорез.

2.4. Трансформация Escherichia coli плазмидной ДНК.

2.5. Выделение и очистка плазмидной ДНК.

2.6. Полимеразная цепная реакция.

2.7. Скрининг библиотеки геномной ДНК крысы.

2.8. Выделение и анализ ДНК рекомбинантных бактериофагов.

2.9. Амплификация фрагментов генов эстрогенсульфотрансфераз с помощью ПЦР.

2.10. Определение нуклеотидных последовательностей ДНК.

2.11. Анализ нуклеотидных последовательностей ДНК.

2.12. Выделение РНК.

2.13. Картирование точек инициации транскрипции методом удлинения затравки.

2.14. Быстрая амплификация 5' -концевых последовательностей ьсДНК эстрогенсульфотрансфераз крысы (5'RACE).

2.15. Получение ядерного матрикса.

2.16. Изучение связывания фрагментов гена Stel с ядерным матриксом in vitro.

2.17 Выделение фракции ДНК, ассоциированной in vivo с ядерным матриксом в клетках печени крысы.

2.18. Получение ядерных экстрактов.

2.19. Футпринтинг с ДНКазой I.

2.20. Сдвиг подвижности в геле.

2.21. Репортерные конструкции.

2.22. Условия трансфекций и культивирования клеток.

2.23. Измерение активности люциферазы и р-галактозидазы.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

3.1. Геномная организация кодирующих районов генов Stel и Stel.

3.2. Строение 5'-НТО мРНК STE1 и STE2 и геномная организация

5'-областей генов Stel и Ste2.

3.3. Экзон-интронная структура генов Stel и Ste2 крысы.

3.4. Поиск и определение локализации MAR элементов в 5'-области, 5'-нетранслируемых и первом кодирующем экзоне гена Stel.

3.5. Изучение взаимодействия ядерных белков из печени крыс с потенциальными регуляторными участками гена Stel.

3.5.1. Поиск сайтов связывания пол специфических регуляторных белков в проксимальной промоторной области гена Stel.

3.5.2. Поиск сайтов связывания по л специфических регуляторных белков в интроне 1 генов Stel и Ste2.

3.6. Изучение промоторной активности 5'-области гена Stel в клетках линии HepG2.

ВЫВОДЫ.

БЛАГОДАРНОСТИ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Клонирование, анализ структуры и характеристика регуляторных областей двух паралогичных генов эстрогенсульфотрансферазы крысы"

Эстрогенсульфотрансферазы (STE) (ЕС 2.8.2.4) - ферменты, катализирующие сульфирование эстрогенов, - являются представителями большого суперсемейства сульфотрансфераз. Это суперсемейство включает ферменты, которые катализируют сульфирование ряда эндогенных и экзогенных соединений - стероидов, нейромедиаторов, желчных кислот и биогенных аминов, а также некоторых лекарств и других ксенобиотиков. Таким образом, у млекопитающих они выполняют ряд важнейших функций, таких как уничтожение конечных продуктов катаболизма, дезактивация и биоактивация ксенобиотиков (в том числе некоторых канцерогенов), регуляция активности стероидных гормонов и нейротрансмиттеров. Универсальным донором сульфогруппы для этих ферментов является 3'-фосфоаденозин-5'-фосфосульфат.

Суперсемейство генов сульфотрансфераз, называемое ST или SULT, разделяется на два семейства, - Stp/Ste (SULT1) и Std (SULT2), - которые, в свою очередь включают 6 подсемейств: фенолсульфотрансферазы (Stp или SULT1A), сульфотрансферазы тиреоидных гормонов (Stlb или SULT1B), гидроксиариламинсульфотрансферазы (Stic или SULT1C), эстрогенсульфотрансферазы (Ste или SULT1E) и два подсемейства гидроксистероидсульфотрансфераз (SULT2A и SULT2B). Клонированы и охарактеризованы более десятка генов различных сульфотрансфераз человека и некоторых других видов млекопитающих. Их структуры характеризуются значительным сходством. Эти гены включают 7 кодирующих экзонов (за исключением Std) и часто несколько альтернативных 5'-нетранслируемых экзонов. Консервативно также положение точек сплайсинга и длины экзонов. Интересно отметить, что у некоторых видов имеется несколько изоформ одного фермента, которые являются продуктами разных генов, образовавшихся, скорее всего, в результате дупликации единственного гена-предшественника. Такие гены, называемые паралогами, как правило, располагаются в виде кластеров. У человека существует кластер из трех генов Stp на коротком плече шестнадцатой хромосомы, гены SULT1C1 и SULT1C2 образуют кластер на длинном плече хромосомы 2, а два гена Std (SULT2A1 и SULT2B1) расположены на 19ql3.3.

К настоящему времени полностью охарактеризована структура только одного гена подсемейства Ste - гена Ste человека, организация которого во многом сходна с организацией других генов сульфотрансфераз. Клонирована также 5'-область гена Ste морской свинки, содержащая 2 первых экзона и предполагаемую промоторную обасть.

Изучение свойств STE показало, что эти ферменты катализируют реакцию сульфирования природных эсторогенов со значениями Кщ в низком наномолярном диапозоне. Поскольку продукты каталитической реакции - сульфированные эстрогены, -не способны связываться со своими рецепторами и потому не обладают гормональной активностью, эстрогенсульфотрансферазы могут реально участвовать в поддержании баланса активных эстрогенов в тканях in vivo и влиять на экспрессию контролируемых этими гормонами генов. Клонирование кДНК STE и прямое определение активности этого фермента позволило изучить особенности его тканевого распределения у различных видов животных. Таким образом, было установлено, что STE, по-видимому, принимают участие в модуляции активности эстрогенов в таких органах-мишенях этих гормонов, как молочная железа, матка, семенники и печень. Необходимо отметить, что наличие STE в печени представляет собой дополнительный механизм для осуществления ползависимой регуляции ее функций.

К настоящему моменту клонированы две близкородственные кДНК эстрогенсульфотрансферазы из печени крысы, предположительно кодируемые двумя паралогичными генами. Экспрессия STE у крыс тканеспецифична и находится под сложным гормональным контролем. мРНК STE выявляется в матке и семенниках, однако наиболее высокая концентрация мРНК и самого фермента наблюдается в печени. Экспрессия STE в печени крыс характеризуется ярко выраженным половым диморфизмом: ген активируется в печени самцов в период полового созревания, а в печени самок остается малоактивным в течение всей жизни. Существуют данные, свидетельствующие о том, что экспрессия гена(ов) Ste в печени крыс регулируется половыми стероидными гормонами и гормоном роста. Однако имеющиеся данные о характере этой регуляции не укладываются ни в одну из существующих схем зависимой от пола регуляции экспрессии генов в печени.

Целью настоящей работы было клонирование гена(ов) Ste крысы и определение их геномной организации, а также идентификация их промоторных районов и участков ДНК, принимающих участие в дифференцированной по полу регуляции транскрипции этого(их) гена(ов).

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение Диссертация по теме "Молекулярная биология", Астапова, Инна Игоревна

выводы

1. Определена геномная организация двух генов эстрогенсульфотрансферазы крысы Stel и Ste2; оба гена состоят из семи кодирующих и двух альтернативных 5'-нетранслируемых экзонов 1а и lb.

2. Выявлены и охарактеризованы два варианта 5'-нетранслируемых областей мРНК STE1 и STE2, образующиеся в результате альтернативного сплайсинга 5'-концевых экзонов 1а и lb этих генов.

3. Показана способность участков гена Stel, лежащих непосредственно перед 5'-нетранслируемыми экзонами 1а и lb, направлять транскрипцию репортерного гена в клетках линии HepG2; данные участки представляют собой альтернативные промоторы РаиРЬ.

4. В 5'-области гена Stel обнаружен участок, взаимодействующий с ядерным матриксом in vitro и in vivo. Ассоциация этого участка с ядерным матриксом не зависит от пола.

5. Методами футпринтинга и сдвига подвижности в геле в промоторе РЬ гена Stel крысы обнаружены участки, способные взаимодействовать с белками ядерных экстрактов из печени крыс, причем связывающая активность белковых факторов из печени самцов и самок не различалась.

6. В интронах 1 генов Stel и Ste2 выявлены участки, взаимодействующие с ядерными белками из печени самцов. Эти взаимодействия могут, по меньшей мере, отчасти определять специфичность экспрессии генов Ste в печени самцов.

БЛАГОДАРНОСТИ

Автор выражает глубокую благодарность своим научным руководителям профессору П.М.Рубцову и д.б.н. А.Н.Смирнову, за постоянное внимание и помощь при выполнении данной работы и написании диссертации.

Автор глубоко признателен всем сотрудникам лаборатории гормонов и рецепторов ИМБ им. В.А.Энгельгардта РАН и лаборатории эндокринологии Биологического факультета МГУ им. М.В.Ломоносова за доброжелательное отношение, критические замечания, помощь и моральную поддержку.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Астапова, Инна Игоревна, Москва

1. Розен, В.Б., Матарадзе, Т.Д., Смирнова, О.В., Смирнов, А.Н. Половая дифференцировка функций печени. М.: Медицина. 1991. 334с.

2. Колмен А.//Транскрипция и трансляция/Под ред. Хеймса Б. и Хиггинса С. М.: Мир, 1987. С. 65-88.

3. Смирнова, О.В. Прямые гепатотропные эффекты половых стероидов в гормональных механизмах половой дифференцировки функций печени. Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук. Москва, 1990.

4. Яровая, О. В., Разин, С. В. (1998). Новые подходы к изучению структурно-функциональной организации эукариотического генома. Молекулярная биология, 32: 43-53.

5. Aaronson, D.S. and Horvath, С.М. (2002). A road map for those who don't know JAK-STAT. Science, 296: 1653-1655.

6. Aksoy, I.A., Callen, D.F., Apostolou, S., Her, C., Weinshilboum, R.M. (1994 (a)). Thermolabile phenol sulfotransferase gene (STM): localization to human chromosome 16pll.2. Genomics, 23: 275-277.

7. Aksoy, I.A., Wood, T.C., Weinshilboum, R. M. (1994 (b)). Human liver estrogen sulfotransferase: identification by cDNA cloning and expression. Biochem Biophys Res Commun 200:1621-1629.

8. Aksoy, I.A., Weinshilboum, R.M. (1995). Human thermolabile phenol sulfotransferase gene (STM): molecular cloning and structural characterization. Biochem Biophys Res Commun 208: 786-795.

9. Bagchi M. K. (1998) in: Molecular Biology of Steroid and Nuclear Hormone Receptors (Freedman L. P., ed.). Birkhauser, Boston, pp. 159-189.

10. Beato, M., Chalepakis, G., and Schaurer, M. (1989) in: The Steroid and Thyroid Hormone

11. Receptor Family and Gene Regulation (Carlstedt-Duke, J., Eriksson, H., and Gustafsson, J.-A., eds.), Birkhauser, Basel, Boston, Berlin, pp. 253-261.

12. Bernier, F., Soucy, P., Luu-The, V. (1996). Ншпап phenol sulfotransferase gene contains two alternative promoters: structure and expression of the gene. DNA Cell Biol 5: 367-375.

13. Bode, J., Schlake, Т., Rios-Ramirez, M., Mielke, C., Stengert, M., Kay, V., Klehr-Wirth (1995). Scaffold/Matrix-attached regions: structural properties creating transcriptionally active loci. International Review of Cytology, 162A: 389-454.

14. Brooks, S.C., Battelli, M.G., Corombos, J.D. (1987) Endocrine steroid sulfotransferases: porcine endometrial estrogen sulfotransferase. J Steroid Biochem 26: 285-290.

15. Chatterjee B, Song C.S., Jung M.H., Chen S., Walter C.A., Herbert D.C., Weaker F.J., Mancini M.A., Roy A.K. (1996). Targeted overexpression of androgen receptor with a liver-specific promoter in transgenic mice. Proc Natl Acad Sci U S A. 93: 728-733.

16. Cho K.-0., Minsk В., Wagner J. (1990). NICER elements: a family of nerve growth factor-inducible cAMP-extinguishable retrovirus-like elements.Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 87: 3778-3782.

17. Chomczynski P., and Sacchi, N. (1987). Single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction. Anal. Biochem. 162: 156-159.

18. Clarke, C.L., Adams, J.B., Wren, B.G. (1982). Induction of estrogen sulfotransferase in the human endometrium by progesterone in organ culture. J Clin Endocrinol Metab 55(l):70-75

19. Choi, H.K., and Waxman, D.J. (1999). Growth hormone, but not prolactin, maintains low-level activation of STAT5a and STAT5b in female rat liver. Endocrinology 140: 5126-5135.

20. Comer, K.A., Falany, J.L., Falany, C.N. (1993). Cloning and expression of human liver dehydroepiandrosterone sulphotransferase. Biochem J 289: 233-240.

21. Darnell, J.E. (1997). STATs and gene regulation. Science 277: 1630-1635.

22. Davey, H.W., Park, S.-H., Grattan, D.R., McLachlan, M.J., Waxman, D.J. (1999). STAT5b-deficient mice are growth hormone pulse-resistant. J Biol Chem 274: 35331-35336.

23. DeFanco D.B. (1998) in: Molecular Biology of Steroid and Nuclear Hormone Receptors (FreedmanL. P., ed.), Birkhauser, Boston, pp. 19-34.

24. Demyan, W.F., Song, C.S., Kim, D.S, Her, S., Gallwitz, W., Rao, T.R., Slomczynska, M.,

25. Chatterjee, В., Roy, A.K. (1992). Estrogen sulfotransferase of the rat liver: complementary DNA cloning and age- and sex-specific regulation of messenger RNA. Mol Endocrinol 6: 589-597

26. Dooley, T.P., Huang, Z. (1992). Genomic organization and DNA sequences of two human phenol sulfotransferase genes (STP1 and STP2) on the short arm of chromosome 16. Biochem Biophys Res Commun 228:134-40

27. Dooley, T.P., Obermoeller, R.D., Leiter, E.H., Chapman, H.D., Falany, C.N., Deng, Z„ Siciliano, M.J. (1993). Mapping of the phenol sulfotransferase gene (STP) to human chromosome 16p 12.1-pi 1.2 and the mouse chromosome 7. Genomics 18: 440-443

28. Dooley, T.P., Probst, P., Munroe, P.B., Mole, S.E., Liu, Z., Doggett, N.A. (1994). Genomic organization and DNA sequence of the human catecholamine-sulfating phenol sulfotransferase gene (STM). Biochem Biophys Res Commun 205: 1325-32

29. Driscoll, W.J., Komatsu, К., Strott, С. A. (1995). Proposed active site domain in estrogen sulfotransferase as determined by mutational analysis. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 92: 1232812332

30. Dufort, I., Tremblay, Y., Belanger, A., Labrie, F., Luu-The,V. (1996). Isolation and characterization of a stereospecific 3beta-hydroxysteriod sulfotransferase (pregnenolone sulfotransferase) cDNA. DNA Cell Biol 15: 481-7.

31. Eddy, E.M., Washburn, T.F., Bunch, D.O., Goulding, E.H., Gladen, B.C., Lubahn, D.B., Korach, K.S. (1996). Targeted disruption of the esrogen receptor gene in male mice causes alteration of spermatogenesis and infertility. Endocrinology 137: 4796-4805

32. Faisst, S., and Meyer, S. (1992). Compilation of vertebrate-encoded transcription factors. Nucleic Acids Research 20: 3-26.

33. Falany CN, Krasnykh V, Falany JL (1995 (a)). Bacterial expression and characterizetion of a cDNA for human liver estrogen sulfotransferase. J Steroid Biochem Mol Biol 52: 529-539.

34. Falany, J.L., Krasnykh, V., Mikheeva, G., Falany, C.N. (1995 (b)) Isolation and expression of an isoform of rat estrogen sulfotransferase. J Steroid Biochem Mol Biol 52: 35-44.

35. Falany, C.N., Comer, K.A., Dooley, T.P., Glatt, H. (1995 (c)). Human dehydroepiandrosterone sulfotransferase. Purification, molecular cloning, and characterization. Ann N Y Acad Sci 774: 59-72.

36. Falany, J.L., and Falany, C.N. (1996 (a)). Regulation of estrogen sulfotransferase in human endometrial adenocarcinoma cells by progesterone. Endocrinology. 137: 1395-1401.

37. Falany, J.L., and Falany, C.N. (1996 (b)). Expression of cytosolic sulfotransferases in normal mammary epithelial cells and breast cancer cell lines. Cancer Res. 56: 1551-1555.

38. Falany, J.L., and Falany, C.N. (1997). Regulation of estrogen activity by sulfation in human MCF-7 breast cancer cells. Oncol Res. 9: 589-596.

39. Feinberg, A.P. and Vogelstein, B. (1983). Anal Biochem 132: 6.

40. Freeman, D.J., Saidi, F., Hobkirk, R. (1983). Estrogen sulfotransferase activity in guinea pig uterus and chorion. J Steroid Biochem 18(l):23-27

41. Freyschuss, В., Stavreus-Evers, A., Sahlin, L., Eriksson, H. (1993). Induction of the estrogen receptor by growth hormone and glucocorticoid substitution in primary cultures of rat hepatocytes. Endocrinology 133: 1548-1554.

42. Gaedigk, A., Beatty, B.G., Grant, D.M. (1997). Cloning, structural organization, and chromosomal mapping of the human phenol sulfotransferase STP2 gene. Genomics 40: 242-6.

43. Glatt, H., Engelke, C.E.H., Pabel, U., Teubner, W., Jones, A.L., Coughtrie, M.W.H., Andrae, U., Falany, C.N., Meinl, W. (2000). Sulfotransferases: genetics and role in toxicology. Toxicology Letters 112-113: 341-348.

44. Gorski K., Carneiro M., Schibler U. (1986) Tissue-specific in vitro transcription from the mouse albumin promoter. Cell. 47: 767-776.

45. Greco, T.L., Furlow, J.D., Duello, T.M., Gorsky, J. (1992). Immunodetection of estrogen receptors in fetal and neonatal male mouse reproductive tracts. Endocrinology 130: 421-429.

46. Her, C., Aksoy, I.A., Kimura, S., Brandriff, B.F., Wasmuth, J.J., Weinshilboum, R.M. (1995). Human estrogen sulfotransferase gene (STE): cloning, structure, and chromosomal localization. Genomics 29: 16-23.

47. Her, С., Raftogianis, R., Weinshilboum, R.M. (1996). Human phenol sulfotransferase STP2 gene: molecular cloning, structural characterization, and chromosomal localization. Genomics 33: 409-20.

48. Her C., Kaur, G. P., Athwal, R. S., and Weinshilboum, R. M. (1997). Human sulfotransferase SULT1C1: cDNA cloning, tissue-specific expression, and chromosomal localization. Genomics 41: 467-470.

49. Her, C., Wood, T.C., Eichler, E.E., Mohrenweiser, H.W., Ramagli, L.S., Siciliano, M.J., Weinshilboum, R.M. (1998). Human hydroxysteroid sulfotransferase SULT2B1: two enzymes encoded by a single chromosome 19 gene. Genomics 53: 284-295.

50. Hobkirk, R., Glasier, M.A. (1993). Generation of estradiol within the pregnant guinea piguterine compartment with special reference to the myometrium. J Steroid Biochem Mol Biol 44:291-297.

51. Huang E.Y., Zhang J., Miska E.A., Guenther M.G., Kouzarides Т., and Lazar M.A. (2000). Nuclear receptor corepressors partner with class II histone deacetylases in a Sin3-independent repression pathway. Genes Dev 14: 45-54.

52. Inoue, H., Nojima, H., Okayama, H. (1990). High efficiency transformation of Escherichia coli with plasmids. Gene 96:23-28.

53. Kalla, N.R., Nisula, B.C., Menard, R., Loriaux, D.L. (1980). The effect of estradiol on testicular testosteron biosyntesis. Endocrinology 106: 35-39.

54. Khan, A.S., Taylor, B.R., Chung, K., Etheredge, J., Gonzales, R., Ringer, D.P. (1993). Genomic structure of rat liver aryl sulfotransferase IV encoding gene. Gene 137: 321-326.

55. Klaassen, C.D., Liu, L., Dunn, R.T. (1998). Regulation of sulfotransferase mRNA expression in male and female rats of various ages. Chem Biol Interact. 109:299-313.

56. Kong, A.N., Yang, L., Ma, M., Tao, D., Bjornsson, T.D. (1992). Molecular cloning of the alcohol/hydroxysteroid form (hSTa) of sulfotransferase from human liver. Biochem Biophys Res Commun 187:448-54.

57. Kong, A.T., Tao, D., Ma, M., Yang, L. (1993 (a)). Molecular cloning of the alcohol/hydroxysteroid form (mSTal) of sulfotransferase from mouse liver. Pharm Res 10: 627-630.

58. Kong, A.N., Ma, M., Tao, D., Yang, L. (1993 (b)). Molecular cloning of cDNA encoding the phenol/aryl form of sulfotransferase (mSTpl) from mouse liver. Biochim Biophys Acta 1171: 315-318.

59. Kong, A.N., and Fei, P. (1994). Molecular cloning of three sulfotransferase cDNAs from mouse liver. Chem Biol Interact 92: 161-8.

60. Kotov, A., Falany, J.L., Wang, J., Falany, C.N. (1999). Regulation of estrogen activity by sulfation in human Ishikawa endometrial adenocarcinoma cells. J Steroid Biochem Mol Biol 68: 137-144.

61. Kozak, M. (1991). An analysis of vertebrate mRNA sequences: intimations of translational control. J. Cell. Biol. 115: 887-903.

62. Lee, Y.C., Park, C.S., Strott, C.A. (1994). Molecular cloning of a chiral-specific 3 alpha-hydroxysteroid sulfotransferase. J Biol Chem 269: 15838-45.

63. Leiter, E.H., and Chapman, H.D. (1994). Obesity-induced diabetes (diabesity) in C57BL/KsJ mice produces aberrant £r<my-regulation of sex steroid sulfotransferase genes. J. Clin. Invest. 93: 2007-2013.

64. Liu, L., and Klaassen, C.D. (1996 (a)). Ontogeny and hormonal basis of female-dominant rat hepatic sulfotransferases. J Pharmacol Exp Ther. 279: 386-391.

65. Liu, L., and Klaassen, C. D. (1996 (b)). Ontogeny and hormonal basis of male-dominant rat hepatic sulfotransferases. Mol Pharmacol. 50: 565-572.

66. Loza Arredondo, M.C., Gonzalez Juarez, N.A. (1994). Uterine estrogen sulfotransferase and estrogen sulfatasein embryo implantation. Ginecol Obstet Мех 62:341-344

67. Luu-The, V., Dufort, I., Paquet, N., Reimnitz, G., Labrie, F. (1995). Structural characterization and expression of the human dehydroepiandrosterone sulfotransferase gene. DNA Cell Biol 14:511-51

68. Maniatis, Т., Fritch, E.F., Sambrook, J. (1993). Molecular cloning. Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, New-York.

69. McKennaN. J., Lanz R. В., and O'Malley B.W. (1999). Nuclear receptor coregulators: cellular and molecular biology. Endocr Rev 20: 321-344.

70. Meyers, S.A., Lozon, M.M., Corombos, J.D., Saunders, D.E., Hunter, K., Christensen, C.,

71. Brooks, S.C. (1983). Induction of porcine uterine estrogen sulfotransferase activity by progesterone. Biol Reprod 28: 119-1128

72. Murphy, J.B., Emmott, R.C., Hicks, L.L., Walsh, P.C. (1980). Estrogen receptor in the human prostate, seminal vesicle, epididymis, testis, and genital skin: a marker for estrogen-responsive tissues? J. Clin. Endocrinol. Metab. 50: 938-948.

73. Nagai, F., Satoh, H., Matsui, M., Tamura, H. (2000). Assignment of rat estrogen sulfotransferase gene (Ste) to rat chromosome band 14p21.3~>p21.2. Cytogenet Cell Genet; 88(l-2):74-75.

74. Oeda, Т., Lee, Y.C., Driscoll, W.J., Chen, H.C., Strott, C.A. (1992). Molecular cloning and expression of a full-length complementary DNA encoding the guinea pig adrenocortical estrogen sulfotransferase. Mol Endocrinol 6: 1216-26.

75. Ogura, K., Kajita, J., Narihata, H., Watabe, Т., Ozawa, S., Nagata, K., Yamazoe, Y., Kato, R.1989). Cloning and sequence analysis of a rat liver cDNA encoding hydroxysteroid sulfotransferase. Biochem Biophys Res Commun 165:168-74.

76. Ogura, K., Satsukawa, M., Okuda, H., Hiratsuka, A., Watabe, T. (1994). Major hydroxysteroid sulfotransferase STa in rat liver cytosol may consist of two microheterogeneous subunits. Chem Biol Interact 92:129-144.

77. Otterness, D.M., Wieben, E.D., Wood, T.C., Watson, W.G., Madden, B.J., McCormick, D.J., Weinshilboum, R.M. (1992). Human liver dehydroepiandrosterone sulfotransferase: molecular cloning and expression of cDNA. Mol Pharmacol 41: 865-872.

78. Otterness, D.M., Her, С., Aksoy, S., Kimura, S., Wieben, E.D., Weinshilboum, R.M. (1995). Human dehydroepiandrosterone sulfotransferase gene: molecular cloning and structural characterization. DNA Cell Biol 14: 331-41.

79. Pack, B.A., Tovar, R., Booth, E., Brooks, S.C. (1979). The cyclic relationship of estrogen sulfurylation to the nuclear receptor level in human endometrial curettings. J Clin Endocrinol Metab 48(3):420-424.

80. Park, S.-H., Liu, X., Hennighausen, L., Davey, H.W., Waxman, D.J. (1999). Distinctive roles of STAT5a and STAT5b in sexual dimorphism of hepatic P450 gene expression. J Biol Chem 274: 7421-7430.

81. Parker C.S., Topol J. (1984). A Drosophila RNA polymerase II transcription factor contains a promoter-region-specific DNA-binding activity. Cell 36: 357-369.

82. Quandt, K., Freeh, K., Karas, H., Wingender, E., and Werner, T. (1995) Matlnd and Matlnspector: new fast and versatile tools for detection of consensus matches in nucleotide sequence data. Nucleic Acids Research 23: 4878-4884.

83. Qian, Y.M., Song, W.C. (1999). Regulation of estrogen sulfotransferase expression in Leydig cells by cyclic adenosine 3',5'-monophosphate and androgen. Endocrinology 140: 10481053.

84. Raftogianis, R.B., Her, C., Weinshilboum, R.M. (1996). Human phenol sulfotransferase pharmacogenetics: STP1 gene cloning and structural characterization. Pharmacogenetics 6: 473-87.

85. Rao, M.V., Mathur, N. (1988). Estrogen induced effects on mouse testis and epididymal spermatozoa. Exp Clin Endocrinol 91: 231-234.

86. Rastinejad, F. (1998) in: Molecular Biology of Steroid and Nuclear Hormone Receptors (Freedman L.P., ed.), Birkhauser, Boston, pp. 105-131.

87. Razin A. (1998). CpG methylation, chromatin structure and gene silencing-a three-way connection. EMBO J. 17: 4905-4908.

88. Rikke, B.A., and Roy, A.K. (1996). Structural relationships among members of the mammalian sulfotransferase gene family. Biochim Biophys Acta. 1307: 331-338.

89. Runge-Morris, M.A. (1997). Regulation of expression of the rodent cytosolic sulfotransferases. FASEB J 11:109-17.

90. Saeki, Y., Sakakibara, Y., Araki, Y., Yanagisawa, K., Suiko, M., Nakajima, H., Liu, M.C. (1998). Molecular cloning, expression, and characterization of a novel mouse liver SULT1B1 sulfotransferase. J Biochem (Tokyo) 124: 55-64

91. Saez, J.M. (1994). Leydig cells: endocrine, paracrine and autocrine regulation. Enocr Rev 15: 574-626.

92. Sairam, M.R., and Berman, M.I. (1979). Direct inhibitory effects of estrogens on rat Leydig cells in vitro. Sterroids 33: 233-242.

93. Singh, G.B., Kramer, J.A., and Krawetz, S.A. (1997). Mathematical model to predict regions of chromatin attachment to the nuclear matrix. Nucleic Acids Res, 25: 1419-1425.

94. Song, C.S., Kim, J.M., Roy, A.K., Chatterjee, B. (1990). Structure and regulation of the senescece marker protein 2 gene promoter. Biochemistry 29: 542-551.

95. Song, W.C., Moore, R., McLachlan, J.A., Negishi, M. (1995). Molecular characterization of a testis-specific estrogen sulfotransferase and aberrant liver expression in obese and diabetogenic C57BL/KsJ-db/db mice. Endocrinology 136: 2477-2484.

96. Song, W. С., Qian, Y., Sun, X., Negishi, M. (1997). Cellular localization and regulation of expression of testicular estrogen sulfotransferase. Endocrinology 138: 5006-5012.

97. Song, W.C., Qian, Y., Li, A.P. (1998 (a)). Estrogen sulfotransferase expression in the human liver: marked interindividual variation and lack of gender specifity. J.Pharmacol Exp Ther 284: 1197-1202.

98. Song, C.S., Jung, M.H., Kim, S.C., Hassan, Т., Roy, A.K., Chatterjee, B. (1998 (b)). Tissue-specific and androgen-repressible regulation of the rat dehydroepiandrosterone sulfotransferase gene promoter. J Biol Chem. 1998 273:21856-66.

99. Stavreus-Evers, A.C., Freyschuss, В., Eriksson, H.A. (1997). Hormonal regulation of the estrogen receptor in primary cultures of hepatocytes from female rats. Steroids 62: 647-654.

100. Supakar, P.C., Roy, A.K. (1996). Role of transcription factors in the age-dependent regulation of the androgen receptor gene in rat liver. Biol Signals 5: 170-179.

101. Toppe, J., Freedman, C. (1980). Multiple hormone interactions in the developmental biology of the mammary gland. Physiol Rev 60: 1049-1060.

102. Wang, J., Falany, J.L., Falany, C.N. (1998). Expression and characterization of a novel thyroid hormone-sulfating form of cytosolic sulfotransferase from human liver. Mol Pharmacol 53: 274-282.

103. Weinshilboum, R.M., Otterness, D. M., Aksoy, I. A., Wood, Т. C., Her, C., and Rafiogianis, R. B. (1997). Sulfotransferase molecular biology: cDNAs and genes. FASEB J. 11:3-14.

104. Wilborn, T.W., Comer, K.A., Dooley, T.P., Reardon, I.M., Heinrikson, R.L., Falany, C.N. (1993). Sequence analysis and expression of the cDNA for the phenol-sulfating form of human liver phenol sulfotransferase. Mol Pharmacol. 43: 70-77.

105. Wood, T.C., Aksoy, I.A,. Aksoy, S., Weinshilboum, R.M. (1994). Human liver thermolabile phenol sulfotransferase: cDNA cloning, expression and characterization. Biochem Biophys Res Commun. 198: 1119-1127.

106. Yoshinari, K., Sueyoshi, Т., Moore, R., and Negishi, M. (2001) Nuclear receptor CAR as a regulatory factor for the sexually dimorphic induction of CYB2B1 gene by phenobarbital in rat livers. Mol Pharmacol 59: 278-284.

107. Zhu, X., Veronese, M.E., Sansom, L.N., McManus M.E. (1993). Molecular characterisation of a human aryl sulfotransferase cDNA. ME Biochem Biophys Res Commun 192: 671-6.

108. Zhu, X., Veronese, M.E., Iocco, P., McManus, M.E. (1996). cDNA cloning and expression of a new form of human aryl sulfotransferase. Int J Biochem Cell Biol 28: 56571.