Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Изучение противогрибкового действия нового антибиотика розеофунгина

ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Автореферат диссертации по теме "Изучение противогрибкового действия нового антибиотика розеофунгина"

вдионалшя академия наук респшики Казахстан Ино гит микробиология я вирусолога я

На ПР&38Х рукописи K0EÄXMET0B Айзнгзладн СараетиовиЧ

ИЗГЧШИВ ПРОТИВОГРЙБКОШГО д$$ствия нового АНТИБИОТИКА РОЗеС^УНША

03.00.07 - микробиология

А в г о р в ф * р а г

диссертации на соискание учете огепчвв квндвдата биологаччскях наук

Алмагы, Ï994 г.

Рабога выполнена в Инопдов микробиология и вирусологии ШН Республики Казахоган (г.Алмагц) и Всесоизноы ваучно-иоследова« гельском вногигуг? ангибиогасов и фермвягов медицинского назва-ченая (г, Ca вкт-Петербург),

Научеда руководя га ли - доктор биодогичвокш наук

Ш.а.жшгинГ!

- доктор медициною» наув Р.А.АРАВИЙСКИЙ

Официальные ошювевга - докгор медицинских наук, профессор

AJI.KDTOBA

г кавдидаг биологичеоких наук О.Ш.201АМ?РАТОВА

Ведущее учреждением аоавегерииарныв ивотигуг, кафедра

микробиологии а вирусологии, г.Адмагы

Защита ооотоиюя г, a^^^f^coa на

веседавяи опеодаяизироваввого совета Д.53.24,01 ш ващихе на иди-дагокшс диссертаций яри Ивотуге {®кро биологи а и вирусологии ШН PK ю адресу? <©0100, Алмага, ул.Богенбай багыра.ЮЗ.

О диоовргациай мочно овнакощгьоя в библиотеке MB HAH PK,

Авгорвфара* равоолац т.

Учевыв секретарь опаиаалиаароваввого Со вага, докгор биолоричвоких наук Н.А.АЙТИЭШША

С

ОБЩАЯ ХАРАКТЕШЯИКА РАБОТЫ

Актуальность проблем. Вопросы химиотерапии дзрмзгошкозов до настоящего вредчнв являются одной пз основных проблем медицинской микологии. Этому способствует целый ряд причин: перемещение крупных континг»нтов населения (в частноето,военных); применение в одежде я обуки синтетячзских тканей, создвимх термостатические условия для микроорганизмов На.поверхности кожи "гловека. Грибковые инфекции, имеют, как правило, хроническое и ревддвеярущее течение, вызывают длительную потерю трудоспособности я зпачнтельнов снижение производительности груда. Существующие, лекарствеиные средства не всегда эффективны и требуют длительного применения, иногаа - до 3-х месяцев. Это способствует возникновению устойчя-внх форм возбудителей, вывивает необходимость увеличения лечебных доз, что усиливает вредное побочное влияние препаратов й мечег значительные матерчэльнне затрата». В связи с этим актуален поиск новых эффективных средств лечения микозов.

Полученный в Институте микробиология и вирусология AR Республики Казахстан.ногай антибиотик розеофувгяи (Ветлугита, Никитина, 1980; Дауренбековй, IS89 и др.) превосходит по активности я спектру действия известные противогрибковое антибиотики, обладает большей стабильность*) и меньшей токсичностью. ЛД^ при внутрибршинвом я внутривенном введения оливам равны соответственно 140 и 16,5 мг/кг (Ниниченко, 1970). В специальных исследованиях было показано (Айтхожина, Никитина, 1980), что возбудители грибковых инфекций на образуют устойчивых к резаофунгияу форм. Взе это указывает на перспективность его использования в терапии шкоэов. Однако до сих пор не исследована активность розеоФупгива в отношении широкого набора возбудителей трихофития, микроспории, кеголдозв й зпвдврмо-Фитии, что определяет области его возможного применения, Не про-водилиоь сравнительные исследования противогрибковой и химиомра-пввтической активности розеофунлпга в сочетания о используемыми в медицине препаратами.

Цель работы: определение действия, розеофунгина на культуры возбудителей трихофитии, микроспория я канягдозов, при экспериментальных микозах, а также сравнение противогрибковой октявнооти розеофунгина и используемых э медицине полиеновнх и нополиеновых антибиотиков. В соответствии о целью работы конкретные задачи исследования включали:

I, Определение широты спектре розеофгнгина в опытах

2. Научения хишотерапевгической эффективности розеофунгина на моделях грибковых инфекций: экспериментальной трихофитии, микроспории, кавдадоза слизистых, генерализованного кондидоза.

3. Исследование возможности синяргидного противогрибкового аффекта розеофунгана и других биологически активных веществ.

Научная новизна. Впервые охаракхвривована широта спектра розеофунгинЕ в отношении десяти видов грибов, вызывавших трихофи-тие, uieera видов - возбудителей микроспорна. Противогрибковое действие розеофунгана in vitro выражается в подавлении развития мицелия и спорообразования чувствительных грабов.

Выявлены синергвдные свойства розеофунгивэ. При комбинированном использовании гризеофульвина и розеофувгина синергидный аффект выражается в трехкратном повышении их противогрибковой активности в отношении деркатофитов. Отобраны сочетания розяофунгина о другими БАВ о усиленной антимикоти ческой активностью.

При експеримевтальной трихофитии и микроспории морских свинок впервые доказано преимущество лечебных свойств роэеофунгина перед аарубежными препаратама-толмицином, микооептином и нитро-фунгяном. ,

Практическая ценность, Соэдана модель акспериыянгадьной трихофитии я микроспории, пригодная для испытания антимакотиков. Критерий лечебного действия противогрибковых препаратов на этой модели основан не го"ь«о на оценке кяинической картины и выделении ретрокультур, но и на планиметрии очагов поражения в динамике инфекционного процесса. Обоснована перспективность розаофувгина как средстве для терапии грибковшс инфекций. При создании лекарственных форм предлагается учитывать синергвдный вффчкт ровеофун-гина и гриаеофуьвина.

На защиту выносятся положения: о широте спектра противогрибковой активности нового антибиотика розеофунгана; о оинергидноо-ти действие антибиотиков ровеофунгина и гривеофульвина; о перепек-тиввости применения роэаофунгина и его сочетаний о гриввофульвином в терапии микозов.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены на васаданаях секции микологии (1964, 1985 гг.) и химиотерапии <1585, 1986 гг.) Ленинградского общеемикробиологов и Ленин-гр; цекого отделения Воесоианого научно со общества инфекционистов; ИВ 7-м емвде Всесоюзного микробиологического общеотва (Алматы, Щ5 г,).

■ з -

Зфбликации. Содержание дассвртатигпрвжйг&йяено в пятя работах,

Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной частя объекты л метода исследования,результаты , закяотения.ЕЫЕодов. Работа изложена на страницах машинописного текста, иллюстрирована ри-

сунками, таблицами. Список цитированной литературы включает работ, из них на английском языке.

(Ы-ШН If МЕТОДУ ИССЛЕДОВАНИЯ Объектами исследований были 17 культур дэрматофитов, как свежевыделенных от сальных, так и храниться в микотеке отпела Глубоких микозов Всесоюзного научно-исследовательского института технологического института антибиотиков я Ферментов медицинского »¿значения. Исследовалось 10 культур рода Trichophyton (Т.mentagrophytes vat.gypseuffl<T,tonpaians,tl,Bch!M:nleiniili,.oi3lai:emn_-6716, T.ecndanenee X-ü22,T.yao<?n<^i X-715*T.a,1eUoi276/ -II,

T.vanbrenscshemii X-3'!fe), 6 культур рода Млгоерогш-^.олпАв, ferrtiglnei'ffl-21 »K.audouinll-H»M.cockei 256/5,M.gypseum 27/'»351. M.vonbrensegbemii 41-X-322 Я Epidermophyton floccosum ra также 3 культуры рода Candida(C.albicans i;,C.sutllieroondll,C.tropioR-lin.

Различные концентрации розеоФунгияа испытывали на противогрибковую активность как янлявидуаяьно» так я в сочетании о гризео-йуяьйино'Д и энзйстатинш. Для получения их разведений использовал» Метод квадратного титрования на кадкой среде Сабуро Цыганов, 1У71 , Опыты ставились in vitro Тэст-культурн шосилй в среду Сабуро из расчета 10^ кл/кя. ,

тсевн инкубировались при температуре 37°С 48 часов. После этого производился внсеЕ из всех вариантов опытов, ¡¡осле подсчета выросших колони? судили о количестве жизнеспособных клеток в пробе. Результаты зг«х исследований позволили сделать выводы не только о наличия илч отсутствии ингйбярувдего я скергядаого действия препаратор, яо и количественно охарактеризовать повревдавдээ действие их различных доз на клетки грибов.

1ри изученчЧ ингибиругашх свойств антибиотиков на грибы использовался гак же W3T0D вй'и)узий на твердой среде Сабуро. Лсполь-зсвались диск» фшьтровашюй бумаги, пропитанной штиййотака&а. Зксперженталъныэ исследования вкльчала также разработку моде-

да грибковой инфекца« для испытания разаофунгинв, а также сочетание его с другими биологически активными веществами.

В опытах in vivo использовано 233 белых самки изреки* свивок весом 250-300 г и 243 белые мши, сейш а самки, весом 10-20 г, в такав 53 золотиатцх хомяка весом 100,0 г. Для еараже-виа применялись 2-3 недельные культуры Trichophyton mentagrophytes vaF.fcypceu'UjMiorospoi'uia c&nis , И 2-0УГ0ЧНвЯ КУЛЫУРа Candida albicans шгаш-ГЗ {лаборатория экспериментальной микологии и вирусологии г .Ленинград),

Обсеменевность тканей акспериментальных живэгнше грибами исследовали на 5-е сутки после заражения до лечения в в процессе лечения на 5, 7, Ю и 15 сутки от начала заражения.

Б указанные срока животных выводила ив спита зфирним наркозом. О целью проведения гистологических исследований пораженные учааг-ки кожи вырезали, 2x2 см после отолойки апидармального пласта, пленки впидермальной ткани окрашивали РАс-методом (3.Пирс,1962), и докрашивала гвллооианин-хромоаыми квасцами (по методу Зйварсона), Гистологические препараты мучали под микроокопом МБИ-З, а фяуо-ресцянцис зараженных волос просматривали под микроскопом ЛШАМ-РЗ. С помощью фотометрического зовда 2,5 мкм проводили 10 измерений по длине волоса. Измерялось 50-100 волос ос каждого животного. Интенсивность взлучевия регистрировалась ШУ-39А я выражалась условно а ш? или регистрировалась на самописце.

£да определений химиотерацавтичвекой активности препаратов быда проведены 2 серии наследований. В I серии ва 30 свинках проводили испытание ровеофунгива дла того,чтобы выяснить, какая же ' минимальная концентрация оказывавг лечебный аффект. Для контроля использовали основу мази бее антибиотика (гидрофильная полиэги-леноксидкаа ооноаа - ПЭО),

Во 2-Й серив исследований была изучена эффективность комбинации полиенового антибиотика розеофунгяна с проишгрибкоаыми антибиотиками гризеофульвином в ингибитором протваз-вваисгагивом, Сравнение проводили также с отдельно ввятыми противогрибковыми. имаортвши препаратами-толмиципом, ниврофунгином, щкосепгивоы. Еязэтншс этой серии делили на 10 опытных lwna и одну контрольную Кй во taue, леченные сочетаниями щ "пактов, сравнивались как с J »вогными контрольной Группы, так и i'iYfiri вдя лечение проводилось каждым препаратом в отдельности.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

I. ПК)ТЙВ01ТШ0ВАЯ АКТИВНОСТЬ РОЗГОШГЙНА .

В таблице I приведена данные о мияймвлмшх иодазлящих ггаииях розео;|-унгина при андивздуальиэм использовании. Они рас-йиряпг представление о спэкгре противогрибковое активности антибиотика розгофунгявз. Ранее была известна e:t» активность только в отношении грэх видов рода ' Trichophyton я одного щда рода f'Ac-говроглл. (Никитина, Карпябазва, 1970). Результаты лайме йссл?-доданиЯ свила тльсгвувт о возиюжноотя получение лечебного бффск-га роаеофуьтвш при гркхофягаи я-мшероопоряя различной агиологии.

При оовмвонгом яспнгапии на противогрибковую актив:юо*ь poaw-фуигяяа и гррзоофулввинэ выявился огйтлввнй синартгеыя эффпкт. В отноиении Trichophyton nir-tagrophytea -»я.1%сураеша МЯИТОВЛЬ-ная годавляпцая концентрещго роввофуйш» ооставляет 3,12 мкгЛи, грмеофульряяв 1,56 мкг/мл» При совместном тчтроявнии фуягвстатя-чвский аффект проявлялся yaw при 0*78 мкг/мл розеофукгв® и 0,39 йкг/мя грязеофульвяйа. ,

таблица I

Действие розеофупгзна на дердайфигы г дрояаздодобт» грябн

i Ш.-ямальгая *в*ивярув-Тесг-органяам : пая кощввграотя.нкг/йл

IZZIZIlIirnilllllllfllllllirilllllZIillllliZZIIIZlIZilirilllZZIliri

Trichophyton Mentagrophytes ' : 3,12

trichophyton ruhrua X»S6

trichophyton touaurans 1,56 trichophyton acboertleiftii " . . 0,78 Trichophyton oiolaöeuffi 6715 , • * ' • 3,12

Trichophyton sonäancnee Х-£22 •■' 3,12

Trichophyton y«ocndei X-247 . ' . 3,13

Oishophytbn siaii X-713. .1,50

Trichophyton .ajciloi .276/ -It • 3,13

Trichophyton vsnbi-eiiBephemli _ ■ . 3,12

Micro&poruja öaniö 3,12

Kicrospörua audoinii -11 1,56

MicroEporum f<?rru£inema -21 1,50

Окончание таблицы I

.....................I_____________-___________i______§_________

Исроерогиа oooïcei 256/5 - 3,12

mcrosporurn gypeeuw 27/4851 3,12

UicrospOïUM v oiii> ru t.3 е¿houi 1 41-Х-322 3,12

ВрЗ da riaophy ton fе осс os иш 3,12

Candida albicaas 13 .1,56

Gandid* suilleíaondii 1,56

Candida tropicalia 0,78

Однотипные данные полусны про действии втих сочетаний на ДрОЖЖЭПОДОбНЫе Грибы C.guiUn-ai;>r.idii,C.tropicalie . в 3-7

рев далось снизать фунгицид »ую концентрации поливное в сочетание со статической а субсгагачвской доэами гриавофульвива, lia 2-5 порядков СНИЗИЛОСЬ количестве} жизнеспособных клеток C.alMcans при сочетание субфунгистатачвсквх концентраций роаеофунгш.а а аеофулъвана в дозах в 7-И раз меиьших, чем фукгивддныа (табл.2), СинергиднгЛ эффект получен также при сочетании розеофунгана сан-вистатиноы, Сам по себе втог препарат не обладает противогрибковой активностью, Комбинация se анаистатина (4 шг/ш) и фунгисгагичеи-кой дозы розеофунгива позволила выявить усиленный фукгицидный вф факт (cu.табл.3). Минимальнее янгибирувдая конченграция розеофун-гина находилась в вависимооги or продолкагельноога присутствие еивис тетина в соохаве сиеси.

Противогрибковый эффект сочетаний роваофунгига и гривеофуль-. вина дополнительно исследовали диффузионным методом (Васильев, IS78). Йспытывалисъ концентрации» 25, 12,5, 25, 3,12, 1,56, 0,78, 0,78, 0,39 мкг/мл. Исследовалась чувствительность культур родов ïricbopbytcn,LiicroepcxuT!,Epideraopbytoa . СяаерГИДНОа дейотвиа выявилось а этим «ле годом в ¡отношении всех напитанных игашоа,

Х1Ш0ТЕРА1ЕВГЙЧЕСШ ЭШКИШЮСТЬ МАЗЕЙ Р03Ю®ГНШНА НА МОДЕЛИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ТРИХОйИШ

Дли предварительных опытов была приготовлена Ы таъ розео-фунгина на гидрофобной ланолин-вазелиновой оонове (ланолин вазелин 60*). Ы ксвдентрациа била аьбрена по аналогии о ыцогиыи, ыестнчш двкформаш, првмяввешлв для лечения наго во в (шкоовптйн, увдецвденовая кислота, амиковол и кр.). Затем были сопоставлены По аффективно оси 5, 2,5, 1,25, 0,6, 0,3? ыази ровеофуигина. Дека-

шка размеров очагов поражения свидетельствовала, что снижение концентрация антибиотика а Ы до 1,25t суиествеино не менясг эффектов! ос т.; в первой половина курса лечзнпя. Конпентрашгя антбио-тяка 0,6? оказалась минимальной дозой, угнетавдэй развитие грибковой инфекции уже к 5 суткам горапии. Меньшая концентрация на влияла на размеры очагов поражения, которые не отличались от таких т У некоторых нелеченных жида mr»

Исходя из данных, полученных in vitro при "квадрегвом" титровании розеофунгяна и грязефульвина, показвипях си^ергидвый аффект в отнояэнии хзозбуди гелей дорматовдкозов и-пытываля нря экспериментальной трихофитии мазь, содержвщую комбинация этих антибиотиков. Композиция состояли из 0,6f розяофунгинз я различных концентраций грязеофульвяна (2, I, 0,5» 0,25, 0,125£). Как следу»* йз рисунка I я таблицы 4, все использованные сочетания оказывая! лечебное действие, но комбинация 0,б£ розеофунгина я2? гриз«о-фульвина наиболйв эффективна. К 10 суткам лечения наблщалась 1001? санация очага, а к 15 суткам исчезал очаг велушввяя» вурастела здоровая иерсгь» Таким образом, Навевал композиция Ofii роэ»офун-Гина В 2t гризчофульвяна, обладает эффектом, равным прямднчнйи мази 5t розеофувгяна я, исходя из опытов in vitro » ойтадзет потенциально более иярокям спектром дайогвяя, чем лекфорш грйзео-.фульвяна.

Результаты кяяяяческих я микробиолога чаек их данных были йодгвёрэдины гистологическими йсслэдояэнйши препаратов, получай-etat методом отслойки эпидершлытих пяаетой. Этот метод да вел эоз-MOÄBocrb изучить распространение возбудителя по плоавди очага и провести * тотальный" учет клэгок возбудителя 9 эпядермиое. Причем, открывалась возможность участь все окрашенные FAC-ттодо« клетки грибов - как живые, так я мертвые»

Таким образом, оптимальной лекарственной формой, пригодной для лечения д*лгошгоскБа!,08ной тряхофитяя сяедУМ пригнать мазь на йолиэтилдноксвдноА основе* оодеркаауо 0,61 розеофунгена и 2t Згрйзеофульввна. Из всех изученных противогрибковых средств,применяемых в практике, только разработанная нами лекфбрмэ да вала пОл<-нуо санаций очага в течение Ю дней лечение у IOCß sFeöfHttx.pocr адороёих волоо восстанавливается у вЬ^зс жявогних к 15 дно теряпая.

-1 <ыА|* иД 4

КШШЧйОТВО Ш1'4НвСЦОСООНиХ ЮЮТОК С*Од1д«. «1Ъ1сап9 посла

2-х суючнсй янкубаци» о различными девши розеофунгина и гризэофулгвина

Резесфшчш

■ «¡Кг/МЛ 1,66

Гризео-

Фул1ьин,

¡уст/мл

0.78 ЧЮ*)

0,39.

5 (1С7) «

I

'цО

9 0,09 0,04

: ао1) Ню7)

»

Г4 ■ -

г* ю2

щ 1Ф ю7 1ф

т. г* 1С7 1ф \Ф

»4 10? 108

*» - К)4 ю8 \Ф

Таблица -л

4,12 1,56 С,78 0,39

0, ОЙ

ио^

ясР) асР) ао8)

Количества кис.аесшэсосиы* клеток сыШйа «йМвыш после их 2-х суточной инхуОащш с различным» дозат розеофуыгана и ензиотатдаа

К? {ф

108

Роааофунгин: 1,66 | 0,78 I 0,33 ) 0,19 » 0,0® I 0,Ш ^маг/мл «

фгаста-250 ЦО7)

12$ €2,6 91,2

16, е

7.8

1.9

<108> <Ю9)

аоь) аФ) ц<£>

Ггриьеч&нйе:

, (1о7> лмЪ {ибо , ао'О

| I ] ! \]

* ~ "-Г " 1Ф ~ ~ 1Ф "хУ

** 1 ф 1 ф 1Ф 1Ф

* я» 1ф 1ф ю8 1Ф

ч» 10 е 1 ф 108 1Ф

хф гФ 1Ф хФ

•ч» 1 ф 1Ф гФ 1ф

т* V* 1 ф 1Ф г Ф

>ф 1 ф 1Ф 1ф к?

В скобках ьредмавшш данные р ксшич^слва неспособных клеток уриоа посла «х инкубации только е роэеофунгаьш или врйзеойгльвшл.

энэистатиаам«

V

Динамика раемвров очагов поражение ексаеримеигальной »рихофитии морских йВИВОЦ В ходе Лечение МВВЬЮ, СОДврявш. и 0,6< рО80Офунг«ва я рааличные ковденграодн грнввофульвинв

Рис Д.

по оси Ж - в числи»еле ноицвигреции гразайфульмна (3).

в внамянагеде ковцвнгрзщзя роввоф&'нгяня (Í); по оси У - срок лечения в днях; ПО оси 1 - площадь очага поражена» в см®

а

I

л

«s

ta

»

I

В

m

о

m

В.

«с

M

s

to

M

} 1 I

I «a

!¿ I Csj

I I

« ta i t i ю

« M

I

I

I » I

(CI

Kl

œi *9 <ti i ВЧ Q

«я H

ВЯ œi

» I

I *я

i-

1

I

• I I

• • **

•g <C

i @ щ

lop, oov

МП го

•Ф + ч* to Oi

' M « С\» »

$ S $ ° Я

с- - о е- о е- о *5о -ío too

« И « « * * * ж.

H H О мм о о

« со м « со ни « «мм

M M

»V2

«о

5 % ъ О Ö $ o oq oo 9,0 coisoocnoc-o too MO oo с--о

-4" <T> N M M МММ

NM

too »

M

NM «

roo

M O <M M N ■ СО мм сэ «мм » « о ça "СЧ »Ol МП «О " ~

OltOOO^Ot^O С-О ЧТО 1ft « * « * • « * * 9 «О

co to со са м N см м

•I •>■

О ОО О M

•« «о» «м

СО О СО ^ M см

■ т _ — _ — — —

^ to

• О » Ö «О «О »О «О CO M N СО M «M

tf о

о

«о

"«* UÏ ю » •

<n ^ 5 ^ $ ш

(л со о

S Е S3

«

s

s

Р) n o n

я ■ а

•И +1 СЦ -Й Р» +1 Л-И Pi Й04 4iPt +1»

sas sa s sa a ta s

w « *

I s

s • a

+IP. 4V* Я - 3

«

■sa »

Ф tr a, n

<T>

0

no S •w m

л §

1 S

M О

ш m

A о

w о

p>

to g

о ej

Л ■

о

P4

»5 ïO

л

I

8

M

в &

IS «к

M

•ÎJÔ * * *

V <3 l^5

О MtCÍ ««

V

lOiO ûto Oto 4 ÖÖ OO oô HÖ NO $

3, ШДОШ>АПЕВТИЧБСШ ЭШШШОСЯЬ МАЗБЙ

ГОЗЗО^НГИНА ВА МОДШ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ШКЮСЗЮОД

Как в пра лечений трихофитии, в данной серна шытов ишш использованы ывая на полиэтилзвоксидноЯ и ланолин-вазвлиновом основе, содержащие о,б< роаеофунгина и различные концентрации ¡и веофульвива ( 2, I, 0,5, 0,25, 0,125?). Наибольший аффект наблюдался при использовании 0,6i роаеофунгвна и 2i гразеофульвииа .Fate через 5 дней лечения эратемвто-сквомозный очаг исчезал, свечение кожи и волос.прекращалось.

В оледущей серии опытов мазь роаеофунгива и гривеофулышш сравнивалась по химиотерапевта чеокому аффекту о мазью микосаптина я спиртовым раствором ни тро фунта на -пр апара таьш, широко используемыми в клинике. Мазевая композиция, состоящая из о,б£ розоофунгии,. и гривеофульвина оказалась высокоэффективной при экспериментальной микроспории у морских свивок. Излечевие происходит в течение 5-10 дней, что"не наблодается при использовании других лекарегвейьшс с радо те.

Следует отметить, что новая лекарственная форма действует выраженее на микоэ, вызванный Microsporia canis 1575 uo сроь-HeHUb о инфекцией, обусловленной Trichophyton cieatagropytee var. tyoseum шт.745. Это особенно наглядно _вддно при анализе ойшшпа графиков динамики очагов поражения у леченных аив&тяых - "зова клинического выздоровления" при хидаотераяии (экспериментальной микроспории (рис.2, табл.5) а 4 раза больше таковой при леченая аксперимеКталыюй трихофитии (ряо.1).

4. ИССЛЕДОВАНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ РОЗЙШНГИНА ОРИ РАЗЛИЧНЫХ äOFMAX ЗКСЯТЗРЕЧЕНТАЛШОГО КАЦЩ'ЛРЗА

Арсенал специфических лехсарогванных средств в тераши аан««*-дозов до сих пор остается довольно ограничеиным, Сложность прсбле мы усугубляется многообразием фэрм кандвдоаа, развитие?', заоааеш-Яйя на фоне аммуподефициишх оосюяний. Генерализованный кавдидоа у мышей внзывалоя внутри ванным введением взд?ен гриба в 4«з.Г-асг~ Воре. Лечение роаеофунгшюм начинала на второе сутки после эаражв яия. Препарат вводили ежедневно орально & ¡4ид<? эмульсии в доьех

б, 12,5, 25, 50 мг/кг массы животного. Курс лечения соогавлил дней. Лечебные свойства розеофунгина при оральдал иопольнованаи оказались незначительными, что обусловлено виакой баодоо.туттвосгыг>

Лянлмякэ ряммроя очзгов иэражсяия експярименгальпо« МЯКрООПОрИИ уорокях 0ВИН0К В ироцооое Ле'ИНЙЯ МВЭЬВ,

ролчпкйщ^й розеофуигива л раэличныэ йонцднграпйя

грив^офульвина

- в зпзг;егаг<зле кончен трепля розеофукгана it) -, по оои У - срок лечение в^двях; по ос»; Z - площадь очагя copaseкия в иг;

Таблица §

Зависимость ог концентрации щ>виарагов люаднеоевции волоо и площади очагов трахеям при экспериментальной мгкроопория

Концентрации :Статяо- 1ХО-Я день; Лид лезевяя :Йнтен-

препаратов :тичво. .после ее-: " Чсивн.

.показа- 'ражеяея , .флуоре.-

твль | ■ Б.в I т.й % 15_а 'Ценпии

• » • I : •поралвь

? г » :волос

I I г } I

______________1________________:.......______\mi.w

^вв^леЧениа) ^ 4»е±°»4 4.9340,4 5,040»5 6,1*0,5 100±0,0£

Оонова мази Ы^м 3,5*0,4 3,5*0,4 4,110,4 3,710,4 9210,04

Мииооепмн 4,110,3 3,7*0,4 3,510,4 3,5*0,3 8110,04

(мазь) р 0,01 С, 001 0,01

Нигрофунган Ы^ 4,0*0,3 4,210,5 4,510,4 4,510,4 3310,01

Р 0,02 0,02 0,02

П гюзеофуль- М+м 4,010,3. 4,010,4 4,110,4 4,110,4 3710,01

ВИН Р 0,02 0,02 0,02

п гризеофульвин м*ы З.б^.З 3.8Ю.4 3,8Ю,4 3.9Ю.4 26+0,0]

Р 0,01 0,02 0,02

0,6« розеофун- М1М 3,810,4 3,910,4 3,910,4 4,010,4 3810,01 ГЮ1 Р 0,01 0,01 0,02

0,1252 (г) М1М 3,210,3 3,810,4 3,010,4 3,910,4 4010,01:

0,62 (р) Р 0,01 0,02 0,02

0,25 ^ .„_ М+м 3,510,3 3,510,3 4,010,4 4,110,4 37+0^01

0,6 Р 0,01 0,02 0,02

0,% М1Ы 3,9+0,4 3,710,4 4,010,4 4,010,4 3310,01

0,6 р 0,01 0,02 0,02

1.0| М1М 4,010,4 3,810,4 2,010,1 О О

0.6 р 0,01 0,002

2,0=5 -н- М1М 4,210,4 1,810,2 ООО

?'6 Р 0,002

Ifetoaa б

Результаты высеваешоти грибов c.albicane из очагов поражения

Лечение *----.------—___&?8_§8£gg§----_-------------------

: 3 супеи : 5 сутки :10 сутки :15 сутки

КОНГРОЛЬ % е с ж *

(нелеченннэ) 5,9*ItrjI,8 7,2*lOb*2,3 1,9'Ю4*0,9 2,2*Ю3±0,6

0,б£ розео- с с ж о

фунгив на ПЭО 7,2*10 ±2,9 I,5éI05±0,9 I,2*I04*0,5 5,4*l03iI,I

0,6Í роэео-

фунгин на ва- с с ■ • . ч ч'

велине 4,6'Ю5±0,6 6,4*Ю5±2,5 4,1*Ю3±1,5 1,3* 1СГ±0,4

2,5% розео- А к « о

фунгин на ПЭО 4,7*10^1,8 3,8*I0&±2,7 I,3*I03i0,7 3,0*ВГ*1,0

2,5^ роэво-

фунгин на ва- к ч - ?

велине 7,3*Ю5±2,5 4,0*10&Ю»5 2,ЗЛСПР(9 .

2«+ 0,6 %

(линимент) 5,8*10 $0,5 5,8*10 *0»3 8,0*10¿±6,6 3,3*10^,1

2% + 0,6$ ' ?П§0) I,8*I06±0,5 I,3*l04t0,2 9,3*10^+2,3

ZZ + 0,61? г + p

(вазелин) 2,I*I06±0,5 4,ГЮ3+1,0 I,6*I02+0,2

слабым поступлением препарата из желудочно-кишечного тракта в кровь, что показано при изучении 4®Р"э кокинетики ровеофунгива, Кавдядоз слизистых оболочек полости рта хомяков воспроизводился по методу, разработанному Бойко Г.И. и Потнльчанекой О.Л. (1985). Лечение проводили желатиновой капоулоЛ, содерзгадой порошок розеофунгина, которая вкладывалась в- азвдчнпй мешок подопытных животных. При Есех использованных концентрациях розеофунгяна лечебный зффакг огсугогвовал. •

IS

Изучено лечебное действие лекформ розеофунгина при кавдидозе коки новорожденных довей, весом,IOtI гЛивотным епилировали на боковой поверхности туловища волосяной покров и вводили внутри-кохно до образования "лимонной корочке" 0,2 мл вавеси candid« albicans (1,5 шгр. клеток в мл). Через сутки на месте заражения обнаруживался припуяаий геперемированный участок - 4,3*1 мм2. Как правило, в центре опухоли появаялось ивмзаленив, прикрытое желто-бурой корочкой.

Лечение проводили ежедневным втиранием мази в очаг поранений. Оптимальный терапевтический аффект голучей при применении 2,5% мави розеофунгина на гидрофобной вазелиновой основе. 100? санация очага наблюдалась через 15 суток терапии (см.табл.б).

Таким образом, терапевтическое действие розеофунгина выявлено только при кожном кавдидозе. При генерализованном кащидозе и каняидозе слизигтых оболочек рта он не аффективен.

ВЫВОДЫ

1. Установлена высокая ингибируощаа активность антибиотика ровеофунгяна В отношения Ю вирулентных видов грибов рода Trichophyton , б ВИДОВ рода Microsporum , 3 видов рода Candida albicans Kpidermophyton íioccosum . Минимальные подавлящие концентрации составляет 0,78 - 3,12 мкг/мл. Впервые выявлена высокая активность розеофунгива против грибов-возбуадтелей ьи-ковов в странах с тропическим климатом,

2. Выявлена сянергидность действия розеофунгина и гризеофудь-вина, которая выражается в снижении минимальных подавляющих концентраций в 2-4 раза. Синергизм отмечается как на чистых"культурах возбудителей in vatro , ibk я при лечении животных при экспериментально* микозах.

3. Разработана и использована в работе акиперименгалыия модель дермагофйтии, позволявшая количаогвонно учитывать площадь очагов поражения и вести статистичеокув обработку результатов леченных и не леченных животных.

4. Лечение акопериментальной трихофитии и микроспории у морских свинок сочетанием 0,6? ровеофунгина о 2? гризеофульалном

в мазевой комповиции превосходит да эффективности моноте^апию, что выражается в сокращении сроков лечения,

5. Показана эффективность лечени*' акопериывмалыюго кен-двдоза кожи у шшай ыазевым препаратом розеофунгина (сочетание

•0,6$ розеойунгина с 2!? гризеофульвинда , Полная санация очагов поражения за 15 суток лечения.

f. Розеойунгин превосходит по лечебному эффекту толмицин, нитроТунгян.микосептин при лечения экспериментальных микозов а кандшгоза. Он рекомендуется для лечения микозов человека и животных.

7. Примененный в работе метод определения возбудителя в исанях с помощью слития плоскостных пленок эпидермиса более ин--Готативен, чем традицишно используалые микробиологические высевы.

8. Установлена зависимость флуоресценции всшоо,пораженных ■'лкроспорией.от дозы препарата и характера течения заболевания.

ПШИКМрт-S ПО ТШЕ ДИССЕИ АШЯ:

1. Кокахметов A.C., Аравийский P.A. Противогрибковые свойства роге о Лунгин а и гризеО'ЬульЕика при их совместном применения в эксперименте на животных // УП съезд ШО. Тезисы докладов.-Алма-Ата, 19F5. -Т.7,- С.35.

2. Ьелянин В.Л., Аравийский P.A., иатик Л.И., .'.ожахыетов А.0. Развитие я исход экспериментальной кандидозной пневмонии // Ш1 вып. Трудов Ленинградского научного общества патологоанатомов. - ЛМедицина, 1&ЬЬ. -С.47 -49.

3. БелянинВ.Л., Аравийский P.A., Потыльчанская 0JL, [■атяк Л.'Л., Кожахматов A.C., Костин И.А. Сравнительная морфологическая характеристика пневмоний,вызываемых разными видали грибов кандида // 1руды Ленинградского научного общества патологоанатомов ХХШ вып. - Л.: Медицина, 1966. - С.ЬЗ

4. г.'.ихаГлова ¡.i.A., Кояахметрв A.C., Кашкин АЛ1. Изучение хлниотерапевтической эффективности противогрибковых препаратон в сочетании с ингибиторами протеаз. // Сборник научных трудов Ьсосоюзного научно-исследовательского технологического института антибиотиков и тер: ентор медицинского назначения. J!., 19Я7. -

С. 142-145. ■ ' .

5. Ко'".ая,1етоЕ A.C., |аетлугинаЛ.д.] ЛротикогриокоЕ^е и с«нер-гиягке свойства дат:1биотука розеойунгяна. Вестник HAH PK, 1Ь94

в печати ,