Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Изучение клонированных последовательностей ДНК мыши, гомологичных длинной двуспиральной РНК

ВАК РФ 03.00.03, Молекулярная биология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Букринский, Михаил Ильич

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

ГЛАВА I. Двуспиральные структуры в составе ядерной про-мРНК.

ГЛАВА 2. Мобильные диспергированные гены

ГЛАВА 3. Отличные от ВДГ протяженные повторяющиеся элементы в геноме дрозофилы.

ГЛАВА 4. Короткие рассеянные по геному млекопитающих повторы.

ГЛАВА 5. Эндогенные ретровирусы.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

I. Бактериальные штаммы и векторы для клонирования.

2» Выделение тотальной РНК из клеток асцитной карциномы Эрлиха.

3. Выделение ядерной и цитошгазматической РНК из клеток асцитной карциномы Эрлиха.

4. Выделение ядерной и цитошгазматической РНК из клеток печени и опухоли МОРС 21.

5» Выделение полиШ+РНК из различных препаратов РНК.

6. Введение метки в РНК.

7. Электрофорез РНК в агарозных гелях.

8. Выделение ДНК из клеток печени мыши.

9. Элвдия фрагментов ДНК из гелей.

10. Выделение плазмид.

11. Клонирование Фрагментов ДНК мыши в плазмиде pBZ 322.

12. Анализ клонированных последовательностей.

13. Клонирование фрагментов ДНК мыши в бактериофаге X 47.1.

14. Введение метки в ДНК.

15. Рестрикционный анализ ДНК.

16. Электрофорез фрагментов ДНК в агарозных и акриламидных гелях.

17. Деление цепей ДНК.

18. Иммобилизация ДНК на нитроцеллюлозннх фильтрах.

19. Гибридизация иммобилизованных на нитроцеллюлозе нуклеиновых кислот с меченными пробами.

20. Гибридизация иммобилизованной на ДБМ-бумаге РНК с меченными пробами ДНК.

21. Определение первичной структуры ДНК.

РЕЗУЛЬТАТЫ.

1. Клонирование последовательностей ДНК мыши, гомологичных дсРНК-А.

2. Природа последовательности AI и ее структурная организация.

3. Природа последовательности А2 и ее структурная организация.

4. Транскрипция элементов AI и А2.

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

1. Структура и трансщшпция: AI.

2. Структура и транскрипция А2.

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Изучение клонированных последовательностей ДНК мыши, гомологичных длинной двуспиральной РНК"

Одной из основных задач молекулярной биологии является изучение структуры и функций генома эукариотических клеток. Относительно мало изученной оставалась до последнего времени роль в организации структуры и работы генома эукариотов повторяющихся последовательностей и особенно тех из них, которые относятся к классу разбросанных по геному повторов. Последовательности этого класса повторяются в геноме эукариотов до нескольких десятков и даже сотен тысяч раз и активно транскрибируются.

Во второй половине 70-х годов в лабораториях Хогнесса и Георгиева независимо были проклонированы последовательности генома дрозофилы, относящиеся к классу умеренно повторяющихся последовательностей. Оказалось, что эти активно транскрибирующиеся элементы, имеющие длину в несколько тысяч пар оснований и разбросанные по геному, обладают рядом свойств, сходных со свойствами бактериальных транспозонов. Эти элементы генома дрозофилы были названы мобильными диспергированн-ными генами (ВДГ). Они ограничены прямыми повторами длиной в несколько сотен пар оснований, так называемыми длинными концевыми повторами (ДЕЛ). ДЕШ содержат ряд функционально значимых последовательностей, таких, как сигналы полиаденшш-рования, инициации и терминации транскрипции и др. Хотя функции ВДГ пока неизвестны, им приписывают важную роль в регуляции работы других генов. Эта регуляция может осуществляться как путем включения транскрипции генов засчет сигнальных последовательностей, содержащихся в ДКП ВДГ, так и путем инактивации промоторных последовательностей генов интегрировавшим в них ЩГ.

Несмотря на то, что в последнее время мобильные элементы активно изучаются в различных лабораториях мира, мало что известно до сих пор о мобильных элементах генома млекопитающих. Весьма актуальным представлялся поэтому поиск подобных элементов в геноме мыши. Г Мобильные диспергированные гены дрозофилы были про клонированы благодаря тому, что они активно транскрибируются в культуре клеток. Поэтому меченая поли(А)"*ШК служила хорошим зондом для "вылавливания" ЩГ из библиотеки генов дрозофилы. Подобный прием не работает в случае млекопитающих, поскольку, в отличие от дрозофилы, в их геноме содержится огромное количество коротких активно транскрибирующихся повторов. Поэтому для выделения из банка фрагментов геномной ДНК мыши мобильных элементов мы использовали другой подход. т В лаборатории биосинтеза нуклеиновых кислот Института молекулярной биологии АН СССР в 1973 г. были открыты длинные двуспиральные структуры в составе ядерной РНК мыши. Было показано, что эти двуспиральные РНК (дсРНК) могут быть фракционированы по длине на два класса: А (длинные) и В (короткие). Оба эти класса дсРНК гомологичны повторяющимся после -довательностям, причем было продемонстрировано, что цепи дсРНК-В транскрибируются с коротких повторяющихся элементов генома. Позже было обнаружено, что из клеток дрозофилы также может быть выделена дсРНК, однако она представлена только молекулами класса А. Оказалось, что эта дсРНК гомо-! логична ВДГ дрозофилы.

Основываясь на этом мы поставили задачу проклонировать ВДГ-подобные элементы из генома мыши, используя в качестве зонда мышиную дсРНК-А. В работе были получены клоны, содержавшие два вида таких последовательностей, названных нами AI и А2. С помощью этих клонов были изучены некоторые особенности структуры и транскрили, и и выделенных элементов.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

В 1969 году Бриттен с сотрудниками, изучая кинетику ренатурации ДНК, выделенной из разных видов организмов, пришли к выводу, что последовательности генома эукариотов могут быть разделены по повторяемости на 3 класса: высокопов-торяющиеся (сотни тысяч раз), умеренно повторяющиеся ( от нескольких до десятков тысяч копий) и уникальные /26/. К вы-сокоповторяющимся последовательностям относится сателлитная ДНК, в которой короткие отрезки ДНК повторяются до нескольких миллионов раз. Эта ДНК образует в хромосомах блоки в районе теломерных и центромерных участков. Эти участки не активны в транскрипции и участвуют в основном в архитектурной организации хромосом /30/.

Ко второму классу повторов относятся рассеянные по геному умеренно повторяющиеся последовательности. По размеру они могут быть разделены на длинные повторы, длинной несколько тысяч пар нуклеотидов (тыс.п.н.) и короткие повторы длиной несколько сотен пар оснований. И те и другие рассеяны по всему геному эукариотов /2/. В отличие от сателлитной ДНК, большинство умеренно повторяющихся последовательностей активно транскрибируются /6/. В настоящем обзоре мы ограничимся описанием некоторых наиболее интересных на наш взгляд последовательностей, относящихся к классу умеренных повторов.

В первой главе обзора описаны двуспиральные РНК, обнаруживаемые в составе ядерной РНК клеток животных. Как уже было отмечено, эти дсРНК транскрибируются с повторяющихся элементов генома, поэтому включение данной главы в настоящий обзор не случайно.

Вторая глава обзора посвящена описанию мобильных диспергированных генов дрозофилы. Изучение этих элементов было начато на молекулярном уровне во второй половине 70-х годов, когда в лабораториях Георгиева и Хогнесса независимо были про-клонированы последовательности генома дрозофилы, эффективно гибридизующиеся с цитоплазматической полиаденилированной РНК. Оказалось, что эти последовательности имеют дайну в. несколько тысяч пар оснований и рассеянны по геному. Структуры подобные ВДГ дрозофилы найдены в геноме дрожжей/32/. Похожие структуры найдены и у других классов эукариотов. Поэтому мобильные диспергированные гены являются универсальным компонентом генома эукариотов.

В третьей главе обзора описаны другие типы длинных повторов дрозофилы. Это, во-первых, так называемые FB-элементы, характеризующиеся наличием на концах обращенных повторов /134,156/. Эти элементы, также, как и ВДГ, имеют варьирующую локализацию в геноме. Другим типом длинных повторов являются F- и G-элементы /45,46/. Эти элементы не содержат концевых повторов. Однако наличие коротких дуплицированных последовательностей, обрамляющих эти элементы, говорит об их мобильности. Последовательности типа "длинных перемешанных повторов" пока еще плохо охарактеризованы. Как целое они не являются повторами, однако могут быть разбиты на более короткие участки, каждый из которых цредставляет из себя повтор. Длинный элемент строится из серии таких повторов в том или ином сочетании /159/. Обнаруженный недавно Рубином с соавторами так называемый Р-элемент представляет очень большой интерес, так как целый ряд мутаций у дрозофилы непосредственно связан с интеграцией этого элемента в район соответствующего гена /140/.

Четвертая глава обзора посвящена описанию коротких высокоповторяющихся элементов, рассеянных по геному многих видов млекопитающих. Впервые описанные у мыши как В-элементы /96/ и у человека как повторы /83/, эти последовательности были первыми проклонированными мобильными элементами млекопитающих. Изучение этих повторяющихся последовательностей, большой вклад в которое внесли работы, проведенные в лаборатории Г.П.Георгиева привело к расшифровке первичной структуры В-элементов и выяснению основных закономерностей их транскрипции. В настоящее время считается, что последовательности В-типа способны перемещаться в новые места хромосом засчет механизма "ретропозиции": транскрипции, обратной транскрипции и интеграции новой копии в геном /84/.

В пятой главе обзора будут описаны эндогенные прорет-ро вирусы млекопитающих. Эти последовательности повторяются до нескольких десятков раз в геноме хозяина и должны быть поэтому отнесены к классу умеренно повторяющихся генов. По своей структуре проретровирусы очень похожи на ВДГ дрозофилы, и многие авторы приписывают им функции транспозонов высших организмов.

Заключение Диссертация по теме "Молекулярная биология", Букринский, Михаил Ильич

ВЫВОДЫ

1. Показана возможность клонирования длинных повторяющихся элементов генома млекопитающих, используя дсРНК-А.

2. Определена структурная организация последовательности А2, идентифицированы ее концевые районы, показано отсутствие длинных концевых повторов.

3. С использованием клонированных последовательностей AI и А2 показана транскрипция обеих цепей ДНК. Наблюдается сильное превалирование транскрипции одной из цепей, особенно в случае AI.

4. С помощью электрофореза РНК с последующей гибридизацией с фрагментами ДНК клонированных AI- и А2-элементов определены размеры транс1фиптов. Показано, что в случае AI транскрибируются в основном минорные варианты последовательности. Для А2 показана ядерная локализация транскриптов и их высокая гетерогенность по размеру. Транскрипты с А2-элементов обнаруживаются как в опухолевых, так и в нормальных клетках.

Выражаю глубокую благодарность моим руководителям А.П.Рыскову и Д.А.Крамерову за поддержку и постоянное внимание к работе.

Я очень признателен В.Буш за участие в некоторых экспериментах и Г.Н.Ениколопову за денные советы и замечания.

Сердечно благодарю всех сотрудников и аспирантов Лаборатории биосинтеза нуклеиновых кислот и ее руководителя чл.-корр. АН СССР Г.П.Георгнева за доброжелательное отношение.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Букринский, Михаил Ильич, Москва

1. Ананьев E.B., Беляева E.C., Гвоздев В. A., Чуриков Н.А., Ильин Ю.В., Георгиев Г.П. Множественные рассеянные порующей локализацией. Сообщение 2: локализация генов225 и 234 в районах интеркалярного гетерохрома-тина. Генетика, 1979, т.15, М, с.785-799.

2. Гвоздев В. А. Организация генома у эукариотов. Молек. би-ол. ,1978, т.12, И, с.5-35.

3. Георгиев Г.П., Ильин Ю.В., Рысков А.П., Крамеров Д.А. Мобильные диспергированные генетические элементы эука-риот и их возможное отношение к канцерогенезу. Генетика, 1981, т.17, №2, с.222-230.

4. Георгиев Г.П., Мантьева В.Л. Информационная и рибосомаль-ная нуклеиновые кислоты хромосомно-ядрышкового аппарата, методы разделения и нуклеотидный состав. Биохимия, 1962, т.27, вып.5, с.949-957.

5. Зильбер Л.А., Ирлин И.Р., Киселев Ф.Л. Эволюция вирусо-генетической теории возникновения опухолей. М., "Наука", 1975, с.3-343.

6. Ильин Ю.В. Повторяющиеся гены эукариот. Молек.биол., 1982, т.16,№3, с.229-257.

7. Ильин Ю.В. Мобильные диспергированные гены эукариот. В кн.: Итоги науки и техники, сер. Молек.биол., М., ВИНИТИ, 1982, т.18, с.5-48.

8. Ильин ГО.Б., Хмеляускайте В.Г., Кульгускин В.В. Множественные рассеянные по хромосомам структурные геныycrr.zferG варьирующей локализацией. Сообщение 7: трансТкрипция мобильных диспергированных генов I и 3. Генетика, 1981, т.17,№2, с.211-221.

9. Киселев ФЛ., Татосян А.Г., Гудков А.В., Колобков СЛ. Молекулярные механизмы вирусного и невирусного канцерогенеза. Итоги науки и техники, ВИНИТИ, 1983,т.10,с.3-169.

10. Крамеров Д.А., Григорян А.А., Рысков А.П., Георгиев Г.П. Клонирование в клетках £.c*Li фрагментов ДНК мыши, гомологичных двум основным видам длинных шпилечных участков цро-мРНК. Молек.биол., 1980, т.14, №3, с.650-660.

11. Крамеров Д.А., Ломидзе Н.В.,Парадоксальная эволюция индивидуальной транскрибируемой повторяющейся последовательности ДНК (BI) у грызунов. Докл. АН СССР, 1980,т.255, М, с.1005-1009.

12. Кульгускин В.В., Ильин Ю.В., Георгиев Г.П. Множественные рассеянные по хромосомам структурные гены £>• ьо^сиь-кг с варьирующей локализацией. Сообщение 8: первичная структура длинных концевых повторов в ВДП. Генетика, 1982, т.18, $6, с.869-879.

13. Леках И.В., Крамеров Д.А., Маркушева Т.В., Рысков А.П.биосинтез малой цитоплазматической поли/А/^РНК,гомологичной повторяющейся последовательности В2 генома мыши осуществляется РНК-полимеразой III.Докл. АН СССР,1984, т.277,113 4,с. 1006-1008.

14. Тарантул В.3.,Гольцов В.А.,Кузнецова Е.Д. Структурная организация генома эукариот. В.кн.: Итоги науки и техники .,сер.Молек.биол.,М.,ВИНИТИ,1982,т.19,с.7-83.

15. Adams I., Kaufman R., Kretschmer P., Karrison M., Nienhnis A.

16. A family of long reiterated DNA sequences one copy of which is next to the human beta globin gene- Nucl.Acids Res. 1980, v. 8,-N. 19, p.6113-6128.

17. AI*w'ine I.,Kemp D., Stark G. Method for detection of specific HNAs in agarose gels by transfer to diazobenzyloxymethyl — paper and hybridization, with DNA probes. Pro с .Natl. Acad. Sci -USA 1977, v.,73, M" 9, p.5350-535^.

18. Bentvelzen P. ША—viruses and host genome in oncogenesis. Am1sterdam. Elsevier, 1972, p.309-339»

19. Brown S. A mouse dispersed repeat sequence showing remarkable similarities to the long terminal, repeats of retroviruses. Gene, 1983, v.,23, Ш , p.95-97.

20. Brown. S.D.l-Г.,, Dover G. Organization and evolutionary progress of dispersed repetitive family of sequences in widely separated rodent genomes. J.,Mol.Biol., 1981, v.150, IT 4^.441-466.

21. Cameron. J.» Coh E., Davis R. ; Evidence for transposition: of dispersed repetitive DHA families in yeast. Cell, 1979, v.16, N 4, p. 739-7 51 •

22. Chase D. and. Piko L. Expression of A— and C-type particles in.early mouse embryos. J.ITat.Cancer Just., 1973, V.51, E 8,p. 1971197334. Co f f in, J ., Maxam A., Easel tine V/. Structure of the genome of

23. Moloney murine leukemia virus: a terminally redundant sequence. Cell, 1977, v. 13, N. 3,. p.761-773.

24. Cole M., Ono M., Huang P. Terminally redundant sequences in. cellular intraclsternal A-particle genes» <Г.ЛГ1го1.,1981 ,v.38,, N3, p.680-687.

25. Cole M., Ono M., Huang P.- Intracisternal A—particle genes:structure of adjacent genes and mapping of the boundaries of the trans criptional unit., J.Virol., 1982, v.^2, N 1, p.123-130.

26. Cuny G., Soriano P., Macaya G., Bernard! G„ The magor components of the mouse and human genomes. 1.Preparation, basic properties and compositiftal heterogeneity. Eur.,J.Blochenu, 1981, v-113, N 2, P.227-232.

27. Deborah Wilde C., Crowther K., Cripe D.B., Gwo-Shu Lee M., Cowan. H". Evidence that a humanjB-tubulin pseudogene Is derived from Its corresponding ГпША., Mature, 1982, v-.,297,ET 295,P-83-8^.

28. Deininger P.L., Jolly D.I., Rubin С.1Г.,. Friedmann T.,Schm£d CA'U Base sequence studies of 300 nucleotide renatured repeated DNA clones. J.M0I.BL0I., 1981,v.131, К 1, p.17-33.

29. Deininger P.!., Schmid С.Л7. An election., microscope study of tire ША sequence organization, of the human, genome- JJfol JSloL*,, 1976,, ЧГ.106, К 5, p.773-790.,

30. Delia Fo^ira K., Gelman E.P.^ Gallo Е.С.», Wong-Stall F„ A human one gene homologous to the transforming gene (V—sis) of simian^ sarcoma virus. Nature, 1981, v.292,. IT 3818, p.31-35

31. DiEocera P. and Dawid Inter digitated arrangeuent of two oligo (A)-terminated DNA sequences in Drosophila. Nucl.Acids Res.,.-1983, v. 11,. Ж 16, p.5475-5482.

32. DiNocera P., Digan. M . and Davvid Г. A family of oligo adenylate» — terminated transposable sequences in D.melanogaster. JJ'IoI.BloI.,. 1983, v. 168,. N" 6, p.715-727.

33. Chuvpilo S.A., Kolosov MT.N., Dobrynin V.IT., Korobko V.G., Sever-tsova Т.Ч., Bystrov N.S. Niicl.Acids Pes-, Symp.Series,. 1980,p.365-376.

34. Doolittle W.F., Sapienza C. Selfish genes, the phenotype paradigm and genome evolution^ Nature, 1980, v.284, N. 5736, p.601-603

35. Duncan C., Biro P.A., Chondary P.V*, Elder <Г.Т., Wang R.C., Forget B., DeRiel J.K., Weissman. S.K- ША polymerase IH transcription, units are interspersed among human, non.ot-globin genes. Proc. Natl.Acad.Sci.USA, 1979, ^-76, N. 10, p.5095-5099.

36. Duncan C., Iagadeeswaran P., Wang R.C., Weissman SJt. Structure analysis of templates and ENA polymerase 111 transcripts of ALu family sequences interspersed among the humanJ3-Iike globin genes. Gene, 1981, v.13, IT 2,. p. 185-196.

37. Eibel H.,. Gafner JV, Stotz A., Philippsen P. Characterization of the yeast mobile element ТуГ. Cold Spring Harbor Symp.Quant. Biol., 1981, v.45> p.609-617

38. Evgenl:ev MTJ3.Yenikolopov: G.N., Peunovjt ЕГ.Г^, Ilyin Y-V.

39. Transposition of mobile genetic elements in interspecific hybrids of Drosophila. Chromosoma, 1982,, v.85, N3,p„375-386

40. Farabaugh E.r Pink G. Insertion, of. the eukarlotic transposable element Tyl creates a5—base pair duplication^ Nature, 1980,u»286j N 5770, p.352-356.

41. Eedoroff N., Wellaner P., Wall R. Intermolecular duplexes in heterogeneous nuclear RNA from Hela Cells. Cell, 1977j v.10,, N. 4, p.597-610.60. iinnegan D. Transposable elements and proviruses. Nature, 1981, v.292, N5826, p.800—801.

42. Flavell A., Ish-Horowicz D. fcctrachromosomal. circular copiesof the eukarlotic transposable element, copia in cultured Drosophila cells. Nature, 1981, v.292, N 5824,. p. 591-594

43. Flavell A., Did retroviruses evolve from transposable elements?

44. Galll G», Hofstetter H.,. Blrnstiel M.L- Two conserved sequence blocks within eukaryotic t RNA genes are major promoter elements. Nature, 1981, vr.29^, NT 58Jf2, p.626-631.

45. Gebhard W-, Meltinger T., Hochtl I., Zachau H. A new family of interspersed repetitive DNA sequences In the mouse genome. J.Mol.Biol. , 1982, v. 157,- N- з,. р.Л53-471

46. Georgiev G.P., Varshavsky А.Г., RysKov A.P., Church R.B. On the structural organization of the transcriptional unit in animal chromosomes. Cold Spring Harbor Syrup-Quant-RLol., 1973» ^Зв* p.869-88*f.

47. Gergen. J.P., Stern R.H-, Wenslnk Р.С» Ellter replicas and permanent collections of recombinant DIfA plasmlds. Nucl.Aclds Res-, 1979, v.7, N9, p-2115-2136.

48. Gil "boa E„> HLtra S., Goff S. . and Baltimore D A detailed model of reverse transcription, and tests of crucial aspects. Cell, 1979, v. 18,. N 1,; p.93-Ю0.

49. GoUbacli P.,. Evers R- and. Borst P. Electrophoretic strand separation, of long DNAs with, poly (IT, G) in agarose gels. Nucl-Acids Res 1978, v.5, N. 12, p.- 27^3-275^.

50. Grunstein M. ,, and Hogness D. Colony hybridization: A method for the isolation of cloned DNAs that contain a specific gene. Proc. Natl.Acad.Sci.USA, 1975, ^„72, NJ 7, p.3961-3966.

51. De HarvenE. , Friend. С. Electron microscope study of a cell—free inducei leukemia of the mouse. J-Biophys-BiochenuCytol., 1958,> Y./f, К 2, p.151-156

52. Hawley E., ShulmanK., Murlaldo H. , Gibson D„, ETozumi. №. Kutant: immunoglobulin, genes have repetitive ША elements inserted into, their intervening sequences. Proc.lTatl.Acad.Sci.USA,; 1982, v-79* К 12,p.7 425-7 429.

53. Holmes D.S. and Qulgley M. A rapid boiling method for the preparation of. bacterial plasmids. Anal .Жо chem.,, 1981, v. 114, Щ, P. 193-197.

54. Houck C.M., RInehart F.P., Schmid C.W. A ubiquitous family of repeated DEA sequences in. the human genome. J.M0I.BI0I., 1979» v.132, N3, p.289-306.

55. JLagadeeswaran P., Forget B. and Weissman S. Short Interspersed repetitive ША elements in eukaryotes: transposable ША elements generated by reverse transcription of RNA pol.HT transcripts? Cell, 1981, v.26, N2, p. 141-142.

56. Jagadeeswaran P., Pan J., Spritz R., Duncan С Biro P.,Tuan D., Forget В., Weissman S., Structures in intergenlc DNA of non-«.— globln genes ol man. ICN-UCLA Symp.Mol.Cell.Blol.,1981 ,,v. 23, P.71-^4

57. Jelinek. W.R., Specific nucleotide sequences in Eela cell inverted repeated ША: enrichment for sequences found in double-stranded regions of heterogeneous nuclear RNA. J.Mol.Biol-,1977, тт. 115, Я 4, p .-591-601 .

58. Jelinek W., Darnell J.E». Double—stranded regions in. heterogeneous nuclear ША from Eela Cells» ProcJTatl.Acad^Sci.IJSA, 1972,69, & 9, p .2537-2541

59. Jelinek W.R., Ejrans R.,, Wilson. IT., Saldit-Georgieff M., Darnell J.E. Oligonucleotides in heterogeneous nuclear RIfA: similarity of inverted repeats and RITA from repe,'ti.tive DNA sites. Bio chemistry, 1978,. v., 17, F 14, е- 2776-2783.

60. Kelly F., Condamine H*. Tumor viruses and early mouse embryos. Biochim. Biophys.Acta, 1982, v.651, F 2, p.105-141

61. KLdwell M., Kidwell J., Sved J- Eybrid disgenesis in D.melano-gaster: a syndrome of aberrant traits including mutations, sterility and male recombination.Genetics, 1977,V-.86,N4,p.8.13-833»

62. Kingsman A., Gimich R., Clarke L., Chinault A., Carbon. Г. Sequence variation, in dispersed repetitive sequences in Saccharomyces c.e— revisiae. J.M0I.BL0I., 1981, v.45, № 3, p.6l9~632.

63. Kole L., Haynes S., Jelinek W. Discrete and heterogeneous high molecular weight RNAs complementary to a long dispersed, repeat family (a possible transposon) of human DNA. tJ.Mol^Biol., 1983, v.,165, N2, p.257-286.

64. Krametfov. D.A., Lekakh I.V., Samarina O.P.,, Ryskov A.P. The sequences homologous to major.- interspersed repeat are present in mRNA and small cytoplasmic poly(A)+ RNA. Nucleoids Res-„ 1982,1. V.10, N 23,: p.7477-7491

65. Krametfov D.A., Ryskov A.P., Georgiev G^P. The structural, organization. of nuclear pre-mRNA II. Very long double-stranded structures in nuclear pre-mRNA. BLochim., Biophys,.Acta, 1977, ^-475, N 3, P-461-475.

66. Krayev A^S., Markusheva TKramerov D.A»,. Ryskov A.P.,Skrya-bin K.G. , Bayev A.A., Georgiev G.P. Ubiquitous transposon—like repeats B1 and B2 in mouse genome: B2 sequencings Nucl.Acids Res-*1982,. V.10* N23, p.7461-7475

67. Kuff E., Feenstca A., Lueders K., Rechavi G., Givol D„, Cancta— ni E. Homology between an endogeneous viral LTR and sequences inserted in an activated cellular oncogene. Nature, 1983,v.302, p.547-548.

68. Kuff E., Feenstra A., Lueders K., Smith. L., Hawley R.,Hozumi N„, Shulman M. Intracisternal. A—particle genes as movable elements in the mouse genome. Proc.Natl.Acad.Sci.USA, 1983,.v„80, N, if, p.1992-1996.

69. Kuff E., Lueders K., Ozer H., V/ivel W. Some structural and antigenic properties of intracisternal A-^articles occuring in. mouse tumors. Proc.Natl.Acad.Sci.USA, 1972, v.69, N 1, p.218-222,

70. Kuff E., Lueders K., Scolnick. E. Nucleotide sequence relationship between, intracisternal. type A particles' of Miis.musculusand an: endogenous retrovirus (M 432) of Mus.cervicolor. J.Virol. 1978, v.28, N: 1, p.66-74.

71. Kuff E., Smith L., Lueders K. Intracisternal A—particle genes in Mus.musculus: a conserved family of retrovirus—like elements-Hoi.Cell.Biol., 1981, v:.1, N2, p.21 6-22

72. Kugimiya W., Ikenaga H. and Saigo K. Close relationship between, the long terminal repeats of avian, leukosis—sarcoma virus and copia—like movable genetic elements of Drosophila. Proc-Natl. Acad.Sci.USA, 1983,v-80, If 8, p.3193-31-97*

73. Lai M.M.C., Shimizu C.S., Rasheed S., Pal B.K., Gardner M.B. Characterization of genome structure of amphotropic and ecotro— pic wild mouse retroviruses. JWirol., 1982, v.41, N 2,.p.605-614

74. Lerman И., Thayer R»,. Singer К. . Kpn 1 family of long interspersed repeated DNA sequences in primates: polymorphism, of familymembers and evidence for transcription. Proc-Natl-Acad.Sci-USA,, 1983, vr. 80, N7, p.3966-3970.

75. Ю9. Lueders K., Kuff E. Sequences associated with intracisternal A—particles are reiterated in the mouse genome. Cell, 1977, v-12, N p.963-972.

76. Lueders K., Kuff E. Genetic Individuality of intracisternal.

77. Lueders K„, Segal S-, Kuff E, RNA sequences specifically associated with mouse intracisternal A—particles- Cell, 1977, v-11, 1, p.83-9*f.

78. Mandel M. and Hl^a A. Calcium-dependant bacteriophage DNA infection. J.Mol.BLol.-, 1970, v.53, N2, p.15if—1 61.

79. Manuelidis L., Biro P. Genomic representation of the Hind III 1.9 kb repeated DNA. Nucl.Acids Res., 1982,v.10,N 10,p.3221 -32if1

80. Maxam. A., Gilbert W. Sequencing find—labeled DNA with base specific chemical cleavages- Methods Enzymol., 1980, v-65, Р.Л99— 560.

81. Maunier-Rotivэ1 M-, Bernard! G- The Bam repeats of the mousegenome belong in several superfamilies the longest of which is over 9kb. in siz.e- Nucl.Acids Res-, 198b-, v„12, II 3, p-1593-1 608

82. Meunier-Ro tival M-, Soriano P.,. Cuny G.,. Strauss F., Bernard!. G. Sequence organization and genomic distribution of the major family of interspersed repeats of mouse DNA. Proc-Natl-Acad-Sci-USA, 1982, v-79, К 1, p-355-359.

83. Morris V.L., Kozak C-, Cohen J-C., Shank P.R., Jolicoeur P., Ruddle Varmus H.E. Endogenous mouse mammary tumor virus DNA is distributed among multiple mouse chromosomes. Virology,1979, vr-92, N: 1, р.Лб-55.

84. Morris V.L.,, Medeiros E-, Ringold G-M-, Bishop J-M-, Varmus H.E-Comparison of mouse mammary tumor virus-specific DNA in inbred,, wild and Asian mice and in. tumors and normal organs from inbred mice.lT.MoI.Biol., 1977, v-1 И, N1, p.73-91.

85. Ono M., Cole M.-, White A., Huang R. Sequence organization of cloned intraclsternal A-partide genes. Cell ,1980, v.21It 3, p.465-473.

86. Orgel L.E., Crick F.H.C. Selfish DM: the ultimate parasite. Nature, 1980, v.284, N 5736, p.604-£07.

87. Page G.S.,. Smith. S., Goodman H.H. DNA sequence of the rat growth, hormone gene: location of the 5t:—terminus of the growth hormone mRNA and identification of an internal transposon—like element. Nucl.Acids Res., 1981, v.9, N9, p.2087-2104.

88. Pan J., Elder J.T., Duncan.- C.H., Weissman. S.M. Structural analysis of interppersed repetitive polymerase III transcription units in human: DNA. Nucl.Acids Res., 1981, v.9,N5,. p.1151-1170.

89. Paterson. В., Segal S., Lueders K., Kuff E. RNA associated with murine intracisternal type A particles codes for the main particle protein. J".Virol., 1978, v.27, N 2, p.118-126.

90. PerJkK., Dahlberg I. Murine intracisternal A-type particles fail to separate from the membrane of the endoplasmic reticulum.J.Virol., 1974, v.14, F6, p.1304-1306.

91. Potter S. DNA sequence of a fold-back transposable element in Drosophila. Nature, 1982, v.297, N 5863, p.2D 1-204.

92. Rave IT»,. Crkven^akov R., Boedtker E„ Identification of procollagen mRNAs transferred to diazobenzyloxymethyl paper front formaldehyde agarose gels. Nucl.Acids Res- 1979, vr«.6, N 15, P-3559— 3567.

93. Rigby P.W., Dieckmann. M., Rhodes C., Berg P. Labeling deoxyribonucleic acid to high, specific activity in vitro by translation. with. DNA polymerase I. J.M0I.Biol. 1977, v.113, N" Ь P-237-251.

94. Rinehart F.P., Rich. Т.,, Deininger P-L., Schmid C^W- Renaturation. rate studies of a single family of interspersed repeated sequences in human: deoxyribonucleic acid. Biochemistry, 1981, v.20,1. N 11, 3OO3-3OII.

95. Ryskov. A.P., Limbo r. ska S.A., Georgiev G-P- Hybridization of mRNA and pre-mHNA with, the sequences forming double-stranded structures in pre-mRNA. Kol.Biol.,Reports, 1973, v-1, IT 2,p-215-219.

96. Ryskov A-P., Saunders G-F.Farashyan V-R., Georgiev G-P. Double-helical regions in nuclear precursor of mRITA (рге-шБЩ^. Bio— chim-Biophys.Acta, 1973, v-312, N 1, p.,152-164

97. Searles L., Jokerst R., Bingham. P-, Voelker R-, Greenleaf A-Molecular cloning of sequences from. Drosophila RNA polymerase ГГ locits by p element transposon tagging- Celi, 1982, v- 31 , N" 3, p-585-592.

98. Shafit-Zagardo B-, Kaio JT.,. Brown F. Kpnl families of long interspersed repetitive DITAs in human and other primate genomes. ITucl. Acids Res.-, 1982, v.lO, IT 10, p-3175-3194

99. Sharp P. Conversion of EN A to DNA in mammals: ALu-like elements and pseudogenes. Nature, 1983, v.3O1, p.471-472.

100. Shen-Qng G.Cole K. Differing populations of intracisternal A—particle genes in. myeloma tumors and mouse subspecies. <J.Virol., 1982,. v.42, N"3, p.411-421.

101. Southern E. Detection; of specific sequences among DNA fragments separated by gel electrophoresis. J.Mol.Blol.-, 1975, v„98, К 3, P. 503-509 •

102. Stanfleld S. and Lenguel I. Small circular deoxyribonucleic acid of D.melanogaster: homologous transcripts in the nucleus and. cytoplasm. Biochemistry, 1980, v. 19, N""15, p.-3873-3877

103. Stoll E. ,, Billeter M., Palmenberg A.,. Weissman C., Avian mlelo— blastosis virus ША Is terminally redundant: implications for the mechanism of retrovirus replication. Cell,. 1977, v. 12, Ш,p.57—72

104. Tashima M., Calabretta B.Tovelll Scofield M.,.Malzel A., Saunders G.F. Presence of a highly repetitive and widely dispersed DNA sequence In the human genome. Proc.Natl. Acad.Sci.,lTSA, 1981,. v„78y Ы" 3, p.1508-1512

105. Temlir K., Origin of retroviruses from cellular movable genetic elements. Cell, 1980, v.,21, K" 3,. p.599-600.

106. Truett Ы., Jones R. and Potter S., Unusual structure of the FBfamily of transposable elements in Drosophila- Cell, 1981, v.24, 5» p.753-7631 57. VanArsdelle S.W., Denison. R. A., Bernstein L.В., Weiner AJL.,

107. Mauser f.,Gesteland R-F. ;Direct repeats flank three small nuclea RNA pseudogenes in the human genome. Cell,. 1981, v.26, N1, p11-17.158.- Varmus H". Form, and function of retroviral pro viruses. Science, 1982, V.216, p.812-620.

108. Wensink P., Tabata S., and Pachl C„ The clustered and scrambled arrangement of moderately repetitive element In Drosophila DNA. Cell, 1979, v.,18,- К p-1231-12^6