Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Изучение действия никотинамида на сорбитоловый путь обмена глюкозы при экспериментальном диабете

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Обросова, Ирина Геннадьевна

ВВЕДЕНИЕ.

ЧАСТЬ I. Обзор литературы

Глава I. СОРБИТОЛОВЫЙ П7ТЬ ОБМЕНА ГЛЮКОЗЫ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ДИАБЕТЕ.

Глава II. НЕШТОРЫЕ БИОХИМИЧЕСКИЕ И ФАР1ШОЛОШЧЕСКИЕ

ЭФФЕКТЫ ВИТАМИНА РР.

ЧАСТЬ II. Экспериментальная

часть

Глава III. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Глава 1У. СОРБИТОЛОВЫЙ ПУТЬ ОБМЕНА ГЛЮКОЗЫ ПРИ СТРЕПЗО-30Т0ДИН0В0М ДИАБЕТЕ РАЗНОЙ ДЛИТЕЛЬНОСТИ И ТЯЖЕСТИ. ДЕЙСТВИЕ ШОДТИНАМИДА.

Глава У. ГИШГЛИШЛИЧЕСКИЙ ЭФФЕКТ НИШТИНАМИДА ПРИ

СТРЕПТОЗОТОЩНОВОМ ДИАБЕТЕ.

Глава 71. ИЗМЕНЕНИЕ Ш ДЕРЖАНИЯ И ОТНОШЕНИЯ ОКИСЛЕННЫХ И ВОССТАНОВЛЕННЫХ ФОРМ ШШТИНАМИДНЫХ КОФЕР-МЕНТОВ ПРИ СТРЕПТОЗОТОЦЙНОВОМ ДИАБЕТЕ И ВВЕДЕНИИ НИЮГИНАМИДА.

Глава УН. АКТИВНОСТЬ НЕКОТОРЫХ 1Ш)Р -ЗАВИСИМЫХ ДЕ-ГИДРОГЕНАЗ В СВОБОДНО ПГОШЩЕМЫХ ДЛЯ ГЛЮКОЗЫ ТКАНЯХ ПРИ СТРЕПТОЗОТОЦЙНОВОМ ДИАБЕТЕ И

ВВЕДЕНИИ ЕШТИНАМИДА.

Глава 7111. КИНЕТИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ ПРЯШЙ СОРБИТОЛДЕ-ГИДРОГЕНАЗНОЙ РЕАКЦИИ И ИХ РЕГУЛЯЦИЯ ОТНО

ШЕНИЕМ 1Ш)+/1Ш)Н.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Изучение действия никотинамида на сорбитоловый путь обмена глюкозы при экспериментальном диабете"

Актуальность проблемы * По данным экспертов Всемирной Организации Здравоохранения, развитие хронических диабетических поражений является главной причиной инвалидности и смертности больных сахарным диабетом. Поиск терапевтических средств для профилактики и лечения диабетических ангио-, нефро-, поли-нейропатий и катаракты составляет одну из основных задач современной эндокринологии.

По мнению ряда ведущих диабетологов /22,110,177/, одним из возможных механизмов в патогенезе хронических диабетических поражений является переключение потока глюкозы с метаболических процессов, чувствительных к инсулину, на таковые, интенсивность которых не зависит от концентрации данного гормона в крови /69,70/. Так, активация биосинтеза мукополиса-харидов и предшественников гликопротеидов из глюкозы при диабете способствует развитию почечного гломерулосклероза /72, 210/ и ретинопатии /203/, а возрастание скорости восстановления глюкозы в сорбитол с последующим накоплением его в тканях играет роль в патогенезе катаракты /223/, полинейропатии /89/, а, возможно, также макро- и микроангиопатии /22,177/.

С целью направленной регуляции содержания сорбитола в тканях при диабете в течение последних 10 лет в ряде научных лабораторий проводится синтез и испытание ингибиторов альдо-зоредуктазы / ь - альдитол: шшр I - оксидоредуктаза, КФ 1.1.1.21/ - фермента, катализирующего восстановление глюкозы в сорбитол. В настоящее время известно свыше ста таких соединений. Однако, ни одно из них не нашло широкого клинического применения вследствие высокой токсичности, нежелательных системных эффектов, наличия канцерогенных и мутагенных свойств /223/. Все это ставит под сомнение оправданность такого рода подходов /78/ и побуждает искать другие, более физиологические пути регуляции обмена сорбитола при диабете.

Поскольку сорбитоловый путь обмена глюкозы включает две дегидрогеназные реакции - альдозоредуктазную и сорбитолдегид-рогеназную / l -идитол: nad 5-оксидоредуктаза, КФ I.I.I.II/, то активность этих ферментов и, возможно, их биосинтез находятся под метаболическим контролем со стороны низкомолекулярных соединений - витамина РР и никотинамидных коферментов. Следовательно, знание механизма такой регуляции позволило бы целенаправленно воздействовать на содержание сорбитола в тканях при диабете путем коррекции регуляторных факторов с помощью соединений естественного происхождения. По этой причине изучение роли никотинамидных коферментов в регуляции сорбито-лового пути обмена глюкозы при диабете представляется весьма актуальным в медико-биологическом аспекте.

К настоящему времени в изучении витамина РР / никотиновой кислоты и никотинамида/, важного представителя водорастворимых витаминов, достигнуты существенные успехи /4,10,60/. Расшифрована его основная функциональная роль в реакциях биологической оксидоредукции, реализующаяся посредством широко распространенных никотинамидных коферментов - никотинамидаденин-динуклеотида / nad / и никотинамидадениндинуклеотидфосфата / itadp /, исследованы механизмы действия последних как коферментов в дегидрогеназном катализе /148/. Открыт также ряд других, некоферментных функций никотинамида и NAD . Так, показано, что никотинамид и N -метилникотинамид участвуют в процессах метилирования т-РНК и белков /150/, a had является аллостерическим эффектором в регуляции активности ключевых ферментов энергетического обмена /98,208/, компонентом ДНК-лигазной реакции /241/, модулятором нейросинаптической передачи /55,196/, субстратом в синтезе биополимера / поли-adp /рибозы, который, соединяясь с акцепторными ядерными белками, регулирует синтез и репликацию ДНК /53,129/, а такие стимулятором биосинтеза инсулина /188/.

Работы по изучению механизмов обмена витамина РР привели к получению экспериментальных доказательств существования трёх альтернативных путей биосинтеза никотинамидных кофермен-тов в тканях животных из никотиновой кислоты, никотинамида и триптофана /44,54/.

При исследовании широкого спектра метаболических эффектов витамина РР при диабете был выявлен ряд благоприятных моментов. Так, введение никотиновой кислоты и никотинамида приводит к сшшению уровня глюкозы в крови животных с аллоксановым диабетом /12/ и больных сахарным диабетом /29,43/, а также оказывает выраженный ингибирующий эффект на процессы липолиза и кетогенеза /126/. Введение витамина РР животным с аллоксановым диабетом сопровождается активацией окисления глюкозы по гликолитическому пути и ингибированием глюконеогенеза в печени /12/, усиление которого является одним из факторов прогрес-сирования диабетической гипергликемии /170/.

Эти факты находят своё объяснение в рамках следующей гипотезы. Известно, что в процессах дихотомического и апотоми-ческого окисления глюкозы, а также её биосинтеза de novo из неуглеводыых предшественников значительную роль играют 1-iad-и itadp -зависимые дегидрогеназы. Нацравление протекания реакций, катализируемых этими ферментами, определяется окислительно-восстановительным состоянием свободных had-и ïiadp-пар, которое выражается через отношения nad+/ïtadh и îtadp+/nadph. Для ряда тканей диабетических животных характерно снижение этого показателя, что ведёт к повышению восстановительных свойств nad - и hadp-nap цитоплазмы клеток /12,152,224/. Введение в организм животных никотиновой кислоты вызывает усиленный биосинтез nad с одновременным повышением его содержания при менее выраженном росте nadh /44/, и, вследствие этого, сдвиг окислительно-восстановительного состояния nad -пары в сторону большей окисленности. В итоге усиливается окисление глюкозы в печени и угнетается её биосинтез de novo из неуглеводных предшественников в глюконеогенезе /12/.

Имеются данные /163/, свидетельствующие о том, что ряд эффектов никотиновой кислоты и никотинамида на углеводный и липидный обмен сходны. Однако, предварительное введение никотинамида защищает животных от диабетогенного действия стреп-тозотоцина и аллоксана, в то время как никотиновая кислота и триптофан - другие предшественники никотинамидных коферментов, не аккумулируются в бета-клетках в значительной степени и не обладают подобным эффектом /165/. Это объясняется сильным ин-гибирующим действием никотинамида / но не никотиновой кислоты/ * на /шли-adp/рибозосинтетазу бета-клеток/238/, активность которой повышена при экспериментальном диабете, что сопровождается уменьшением содержания nad в островках и ингибирова-нием биосинтеза проинсулина на стадии трансляции /188/. Введение никотинамида в течение месяца мышам со спонтанным диабетом приводило к полному восстановлению нормальной толерантности к углеводам /237/. Рядом авторов /221,237/ сделано предположение об обратимости развития поражений бета-клеток на ранних этапах инсулин-зависимого диабета и о возможности применения никотинамида для их коррекции.

По нашему мнению, никотинамид обладает и рядом других преимуществ, по сравнению с никотиновой кислотой. Во-первых, никотинамид, в отличие от никотиновой кислоты, не обладает сосудорасширяющим эффектом, который может отрицательно сказываться на состоянии организма при введении больших доз препарата. Во-вторых, изучение фармакокинетических свойств никотинамида показало, что никотинамид при введении в организм быстрее и полнее проникает в клетки тканей и превращается в никотинамидные коферменты.

В настоящее время препараты, в состав которых входит никотиновая кислота / нигекеин, компламин, ксавин, никоверин/, успешно применяются в клинике в качестве сосудорасширяющих и желчегонных /никодин/ средств. Кроме того, никотиновая кислота и никотинамид в комплексе с другими витаминами широко используются при лечении гиповитаминозов, возникающих при ряде патологических состояний, в том числе, и при диабете, Однако, теоретические основы для применения никотинамида в комплексной терапии хронических диабетических поражений практически не разработаны.

Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы явилось изучение регуляции сорбитолового пути обмена глюкозы на уровне метаболитов и кофакторов, её нарушений при экспериментальном диабете, а также оценка возможности применения

- ю никотинамида для коррекции наблюдаемых патологических изменений.

В соответствии с поставленной целью решались следующие задачи:

I/ на основании определения концентрации метаболитов, а также альдозоредуктазной и сорбитолдегидрогеназной активности, изучить сорбитоловый путь обмена глюкозы у животных с экспериментальным диабетом, а также действие никотинамида на этот процесс;

2/ изучить на выделенном ферменте кинетические параметры сорбитолдегидрогеназной реакции и их регуляцию окислительно-восстановительным состоянием had -пар;

3/ используя определение концентрации метаболитов лак-татдегидрогеназной и малатдегидрогеназной /декарбоксилирую-щей оксалоацетат/ / nadp+ / систем и расчеты отношений свободных had+/nadh и nadp+/nadph для цитоплазмы клеток по уравнению действующих масс, оценить изменения окислительно-восстановительного состояния свободных никотинамидных кофер-ментов при диабете и введении никотинамида;

4/ определяя содержание глюкозы в крови и активность ферментов глюконеогенеза в печени экспериментальных животных, изучить гипогликемический эффект никотинамида при стрептозо-тоциновом диабете;

5/ на основании определения содержания никотинамидных ко-ферментов, а также активности некоторых hadp -зависимых де-гидрогеназ, изучить влияние никотинамида на генерацию восстановительного эквивалента в виде nadph / кофактора альдозоредуктазной реакции/.

Научная новизна. На защиту выносятся следующие новые научные положения:

I/ интенсификация биосинтеза и ингибирование окисления сорбитола при стрептозотоциновом диабете сопровождаются накоплением метаболитов сорбитолового пути обмена глюкозы в тканях. Степень накопления сорбитола и фруктозы определяется длительностью и тяжестью диабета;

2/ никотинамид снижает содержание сорбитола в тканях животных со стрептозотоциновым диабетом путем угнетения его биосинтеза в альдозоредуктазной и активации окисления в сор-битолдегидрогеназной реакции;

2/ возможными путями действия никотинамида на обмен сорбитола являются изменение содержания кофакторов альдозоредуктазной и сорбитолдегидрогеназной реакций, сдвиг окислительно-восстановительного состояния had - и nadp -пар в сторону повышения окислительных свойств, а также гипогликемический эффект, сопровождающийся снижением уровня глюкозы в тканях;

4/ кинетические параметры прямой сорбитолдегидрогеназной реакции определяются отношением nad+/ uadh , причём nadh является её конкурентным ингибитором в отношении шл+.

Практическое значение. Полученные в настоящей работе данные могут служить теоретической основой для клинических испытаний никотинамида в качестве средства для профилактики и лечения хронических диабетических поражений и определяют актуальность поиска новых препаратов витамина РР с пролонгированным действием. эе ' ж эе

Изложенные в настоящей работе данные являются фрагментом

- 12 плановых исследований, проводимых в диабетологическом отделе Киевского научно-исследовательского института эндокринологии и обмена веществ МЗ УССР под руководством член-корреспондента АМН СССР, доктора медицинских наук, црофессора А.С.Ефимова по изучению патогенеза и разработке методов диагностики, профилактики и лечения хронических диабетических поражений. Руководство всеми разделами работы осуществлялось также старшим научным сотрудником отдела биохимии коферментов Института биохимии им.А.В.Палладина АН УССР, кандидатом биологических наук Н.Н.Великим.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Обросова, Ирина Геннадьевна

ВЫВОДЫ

1. Интенсификация биосинтеза сорбитола в альдозоредук-тазной и угнетение его окисления в сорбитолдегидрогеназной реакции при стрептозотоциновом диабете приводят к повышению содержания сорбитола в тканях. Степень накопления сорбитола и фруктозы определяется длительностью и тяжестью диабета.

2.Введение никотинашзда диабетическим крысам приводит к ингибированию биосинтеза и активации окисления сорбитола. Эффект никотинашда, выражающийся в снижении содержания сорбитола в тканях, отмечен в остром и хроническом эксперименте.

3. Действие никотинашда на обмен сорбитола при диабете опосредуется через гипогликемический эффект препарата, сопровождающийся снижением содержания глюкозы в тканях. Гипоглике-мическое действие никотинашда связано с ингибированием ключевых реакций глюконеогенеза в печени.

4. Повышение уровня itadph / кофактора альдозоредуктаз-ной/ и уменьшение содержания шшУ кофактора сорбитолдегид-рогеназной реакции/, сопровождающееся возрастанием восстановительных свойств Nad/Р/ -пар, способствует интенсификации биосинтеза и угнетению окисления сорбитола в тканях при диабете. Введение никотинамида, вызывая повышение содержания nad/р/ и окислительных свойств nad/р/ -пар, сопровождается угнетением биосинтеза сорбитола в альдозоредуктазной и активацией его окисления в сорбитолдегидрогеназной реакции.

5. Окислительно-восстановительное состояние NAD -пар оказывает прямое регуляторное влияние на кинетические параметры сорбитолдегидрогеназной реакции. При снижении отношения had+/ nadh связывание nad+ с ферментом и скорость реакции уменьшаются, nadh является конкурентным ингибитором прямой сорбитолдегидрогеназной реакции в отношении nad+ .

6. Возрастание содержания nadph - кофактора альдозоре-дуктазной реакции в тканях при стрептозотоциновом диабете объясняется более выраженным угнетением его потребления в глу-татионредуктазной реакции, по сравнению со снижением образования в дегидрогеназных реакциях пентозофосфатного пути, ма- ' латдегидрогеназной / декарбоксилирующей оксалоацетат// nadp +/ и изоцитратдегидрогеназной/nadp + / системах. Введение диабетическим животным никотинамида сопровождается активацией ферментов, генерирующих nadph , и не оказывает влияния на глутатионредуктазную активность.

заключение

В исследованиях последних лет получены убедительные доказательства роли метаболитов сорбитолового пути обмена глюкозы в патогенезе хронических диабетических поражений: катаракты и полинейропатии /22,89,110,223/. Имеются также сведения, указывающие на возможную роль нарушений регуляции обмена сорбитола в генезе макро- и микроангиопатий /21,23,177/. В связи с этим широким фронтом ведутся исследования, посвященные выяснению механизмов регуляции биосинтеза и окисления сорбитола в тканях, и поиск фармакологических средств, позволяющих контролировать обмен последнего у больных сахарным диабетом. В этой области современной эндокринологии в настоящее время сформировалось два основных направления: I/ синтез и испытание ингибиторов альдозоредуктазы, катализирующей восстановление глюкозы в сорбитол; 2/ поиск средств естественного происхождения, коррегирующих обмен сорбитола в тканях при диабете.

Несмотря.на достижение определенных успехов в синтезе многих высокоэффективных ингибиторов альдозоредуктазы /квер-цетин, кверцитрин и другие флавоноиды //223,225/, эти соединения пока не нашли широкого клинического применения вследствие высокой токсичности, наличия канцерогенных и мутагенных свойств /223/. По этой причине, второе направление исследований, предполагающее коррекцию нарушений регуляторных механизмов при диабете естественными факторами и сопряженное с минимальным риском для организма, представляется нам более перспективным.

Многочисленными работами показано, что у больных сахарным диабетом наблюдаются серьёзные нарушения обмена ряда витаминов, приводящие к развитию гиповитаминозов различной степени тяжести и соответствующим нарушениям обмена веществ. Так, при декомпенсации заболевания был установлен факт наличия недостаточности витаминов Bg, тиамина, цианкобаламина, пантотеновой кислоты. Недостаток витаминов С, Р, Bjg и фоли-евой кислоты играет определённую роль в развитии хронических поражений периферической нервной системы при диабете /40/. По нашему млению, существенную роль в патогенезе хронических диабетических поражений может играть недостаточность витами -на PP.

К настоящего времени получены многочисленные данные о роли витамина РР - важного представителя водорастворимых витаминов - в обмене веществ животного организма. Показано его участие в реакциях окисления и восстановления в составе нико-тинамидных коферментов /10,12,44,98,208/, исследованы реакции ферментативного синтеза и распада последних /52,54,60/, интенсивно изучаются некоферментные функции Nad + в механизме синаптической передачи /55,196/ и adp -рибозилирования ядерных белков /53,129/. Установлено значение дефицита NAD+ в развитии абсолютной инсулиновой недостаточности при различных типах экспериментального диабета /165,188,220,237,238/, показано, что введение никотинамида повышает секрецию инсулина /242/, увеличивает чувствительность инсулиновых рецепторов /105/.

Большое внимание уделяется изучению действия никотиновой кислоты и никотинамида на углеводный и липидный обмен. Введение витамина РР влияет на интенсивность липогенеза в тканях,

- 117 снижая включение радиоактивной метки /^С-/-ацетата в жирные кислоты в печени и жировой ткани крыс /7,31,32/ и оказывает выраженный антилиполитический эффект у диабетических животных /126/. Никотиновая кислота вызывает снижение уровня холестерина и общих липидов в сыворотке крови /119/, а также уровня свободных жирных кислот в плазме крови /84/.

Введение никотинамида снижает уровень глюкозы в крови, препятствуя развитию гипергликемии как у нормальных животных /153/, так и у крыс с аллоксановым диабетом /12/. В других исследованиях также показано, что введение витамина РР активирует гликолиз /104/ и ингибирует глюконеогенез /14/ в печени крыс.

Поскольку введение никотиновой кислоты или никотинамида приводит к повышению содержания 1Ш)+ в тканях, то приведенные выше факты находят своё объяснение в рамках следующей гипотезы. Окислительно-восстановительное состояние свободных ни-котинамидных коферментов играет исключительно важную роль в интеграции обменных процессов в клетке и её отдельных компарт-ментах. Отношение свободных ШШ+/ наш и ЮР+/ nadph определяет возможность протекания nad -зависимых дегид-рогеназных реакций, их направленность и термодинамические характеристики /10/. Обмен глюкозы / процессы гликолиза, пенто-зофосфатного пути, глюконеогенеза/ в значительной степени находятся под контролем со стороны окиелительно-восстановитель-ного состояния nad/р/ -пар/ отношения nad+/ nadh и nadp+/ hadph /. Введение витамина РР увеличивает это отношение, что сопровождается интенсификацией гликолиза в печени нормальных крыс и подавлением глюконеогенеза в печени голодавших животных /14,104/.

Повышение восстановительных свойств свободных had - и HADP -пар при голодании и экспериментальном диабете сопровождается ингибированием гликолиза и пентозофосфатного пути в печени /12/ и активацией биосинтеза глюкозы de novo . Введение на фоне этих состояний никотинамида, вызывая усиленный биосинтез HAD+ при одновременном увеличении его содержания и менее выраженном росте НАШ , снижает восстановительные свойства had -пар, что ведёт к интенсификации гликолиза и ингибированию глюконеогенеза.

В исследованиях Varma и Kino shit а /224/ установлена корреляция мех;ду изменениями окислительно-восстановительного состояния HAD/Р/ -пар в хрусталике и активности ферментов сорбитолового пути обмена глюкозы при стрептозотоци-новом диабете. Однако, вопрос о роли окислительно-восстановительного состояния свободных никотинамидных коферментов в регуляции данного метаболического процесса в литературе не разработан. Действие никотинамида на обмен сорбитола в тканях также не было изучено.

Всё вышесказанное побудило нас провести исследования, целью которых было изучение эффекта и выяснение возможных путей действия никотинамида на биосинтез и окисление сорбитола в свободно проницаемых для глюкозы тканях при стрептозото-циновом диабете. Имеющиеся литературные данные позволяли ожидать изменения интенсивности биосинтеза и окисления сорбитола при экспериментальном диабете и зависимости этих процессов от длительности и тяжести данной патологии.

Проведенные наш исследования показали, что у животных со стрептозотоциновым диабетом, наряду с увеличением концентрации глюкозы в крови, имеет место повышение её содержания в I исследованных нами тканях: хрусталике, седалищном нерве и аорте. Отмечается интенсификация восстановления глюкозы в сор-битол в альдозоредуктазной и угнетение его окисления до фруктозы в сорбитолдегидрогеназной реакции, что сопровождается возрастанием уровня сорбитола в свободно проницаемых для глю козы тканях. Содержание фруктозы при этом также увеличивается. Возрастание альдозоредуктазной активности, степень накопления сорбитола и фруктозы в тканях зависят от тяжести экспериментального диабета, однако, последняя не оказывает влияния на величину сорбитолдегидрогеназной активности. Наиболее выраженные изменения альдозоредуктазной и сорбитолдегидрогеназной активности происходят в течение первых двух недель после индукции диабета, что соответствует максимальной скорости накопления сорбитола и фруктозы. С увеличением длительности диабета повышение содержания данных метаболитов в тканях прогрессирует и достигает исключительно высоких уровней у крыс с экспериментальным моделированием хронических диабетических поражений / длительно текущим стрептозотоциновым диабетом/.

Введение диабетическим животным никотинамида приводит к снижению содержания метаболитов сорбитолового пути в хрусталике, седалищном нерве и аорте. Причём уменьшение уровня сорбитола отмечено как в остром опыте с введением нагрузочных доз препарата, так и в хроническом эксперименте с введением животным дробных доз витамина.

Снижение уровня сорбитола в хрусталике, седалищном нерве и аорте при введении никотинамида диабетическим животным вызвано угнетением биосинтеза первого в альдозоредуктазной и

- 120 возрастанием скорости его окисления в сорбитолдегидрогеназноы реакции. Учитывая тот факт, что введение витамина РР животным с аллоксановым диабетом сопровождается гипогликемическим эффектом, нами выдвинуто предположение о том, что угнетение биосинтеза сорбитола при введении никотинамида животным со стрептозотоциновым диабетом также опосредовано через снижение уровня глюкозы - субстрата альдозоредуктазной реакции в крови и тканях,

В проведенных исследованиях обнаружен гипогликемический эффект никотинамида с сопутствующим снижением уровня глюкозы в исследованных нами тканях. По-видимому, одной из возможных причин уменьшения степени выраженности гипергликемии является угнетение никотинамидом ключевых реакций глюконеогенеза в печени диабетических крыс.

Поскольку сорбитоловый путь обмена глюкозы включает две дегидрогеназные реакции, мы допустили возможность опосредованного действия никотинамида на обмен сорбитола в тканях при диабете, которое может осуществляться через усиление биосинтеза никотинамидных коферментов. Учитывая это, нами было изучено содержание последних в хрусталике, седалищном нерве и аорте контрольных и диабетических крыс, а также при введении никотинамида на фоне диабета.

Полученные данные позволили сделать вывод, что в исследованных тканях контрольных животных никотинамидные кофермен-ты представлены, в основном, окисленными формами - 1Ш)+ и 1ш)р+ . У крыс со стрептозотоциновым диабетом содержание окисленных форм снижается при одновременном возрастании уровня восстановленных форм - паш и набрн . Тамм образом,

- 121 создаются благоприятные условия для протекания альдозоредук-тазной реакции, использующей в качестве кофактора nadph , напротив, сорбитолдегидрогеназная реакция, потребляющая had"1* , при диабете угнетается. Введение никотинамида, вызывая повышение содержания окисленных форм никотинамидных коферментов при практически неизменном уровне восстановленных, способствует интенсификации окисления сорбитола во фруктозу.

Поскольку окислительно-восстановительное состояние свободных никотинамидных коферментов является одним из основных факторов, определяющих скорость и направленность дегидрогеназ-ных реакций углеводного обмена, то на основании полученных экспериментальных данных нами рассчитывались величины отношений nad+/nadh и nadp+/nadph. Установлено, что при стрептозо-тоциновом диабете имеет место снижение отношения общих и свободных Nad+/ nadh и 1Ш>р+/ itadph в исследованных тканях. Введение диабетическим животным никотинамида, повышая содержание окисленных форм никотинамидных коферментов, приводит к повышению окислительных свойств свободных nad - и nadp -пар.

Ввиду того, что nadph является кофактором альдозоредук-тазной реакции, в которой осуществляется биосинтез сорбитола, то изучение nadp-пары в тканях с наличием сорбитолового пути обмена глюкозы представляло особый интерес. Повышение содержания nadph при стрептозотоциновом диабете позволило наг,! сделать предположение о повышении активности nadp -зависимых дегидрогеназ, генерирующих восстановительный эквивалент в виде nadph , в исследованных тканях при диабете.

Однако, полученные нами данные позволили опровергнуть это предположение и показали, что при стрептозотоциновом диабете, то есть в условиях значительной интенсификации потребления шшрн для биосинтеза сорбитола, снижается активность основных ттабрн -продуцирующих дегидрогеназ, в частности, глюко-зо-6-фосфат- и б-фосфоглюконатдегдцрогеназная, малатдегидро-геназная / декарбоксилирующая оксалоацетат/ / шшр+/ и изоцит-ратдегидрогеназная/1Ш>Р+/. Однако, одновременно снижено и потребление 1шэрн . в глутатионредуктазной реакции, активность которой в изученных тканях при диабете резко угнетена. Возможно, этот факт объясняет возрастание пула набрн при стрептозотоциновом диабете.

Введение диабетическим животным никотинамида приводит к повышению активности изученных Набрн -продуцирующих дегидрогеназ / кроме изоцитратдеги,црогеназной /пабр1-/ активности седалищного нерва и малатдегидрогеназной / декарбоксилирую-щей оксалоацетат//набр+/ активности аорты; для этих показателей отмечена тенденция к возрастанию/. Глутатионредуктазная активность в этих условиях не изменялась.

Полученные данные позволяют сделать вывод, что у диабетических животных, для которых характерна интенсификация биосинтеза сорбитола в альдозоредуктазной реакции, последняя в достаточной степени обеспечена восстановительным эквивалентом. Введение никотинамида, сопровождающееся угнетением образования сорбитола, вызывает повышение активности 1ш)рн -генерирующих дегидрогеназ, однако, содержание восстановительного эквивалента в виде иабрн при этом достоверно не изменяется. Однако, возрастание отношения 1шэр+/1ш)рн то есть сдвиг окислительно-восстановительного состояния 1ш)р -пар в сторону повышения окислительных свойств, наблюдаемое при введении ни

- 123 котинамида на фоне диабета, является одной из возможных причин угнетения восстановления глюкозы в сорбитол в альдозоредуктаз-ной реакции.

Для установления причинно-следственной взаимосвязи между изменениями окислительно-восстановительного состояния никотин-амидных коферментов и скоростью ферментативных реакций сорби-толового пути обмена глюкозы, в специальной серии опытов на выделенном ферменте сорбитодцегидрогеназе мы изучали действие экспериментального изменения отношения md+/ наш при постоянной концентрации 1Ш)+ на кинетические параметры прямой сорбитолдегидрогеназной реакции. Было установлено, что скорость реакции в значительной степени определяется отношением had+/ наш , a hadh является конкурентным ингибитором реакции в отношении had+ . Kj для hadh составляет 7,65 + 1,28 х 10""%.

Кинетические параметры связывания 1Ш>+ сорбитолдегид-рогеназой также зависят от наличия hadh в среде. Так, константа диссоциации / KD / сорбитоддегидрогеназы для had4" составляет 7,05 + 0,9 х 10"% в отсутствие hadh и значительно возрастает / до 12,0 +2,4 х Ю~%/ при внесении hadh в среду. Напротив, константа ассоциации во втором случае, соответственно, снижается. Характер кривых Скэтчарда показывает, что сорбитолдегидрогеназа обладает одним участком связывания для HAD+ .

Таким образом, проведенные эксперименты показывают, что кинетические параметры сорбитолдегидрогеназной реакции в значительной степени определяются окислительно-восстановительным состоянием свободных had -пар. Полученные данные раскрыва

- 124 ют возможный механизм угнетения сорбитодцегидрогеназной реакции при стрептозотоциновом диабете и её активации введением никотинамида.

Подученные в настоящем исследовании данные свидетельствуют о том, что изучаемые показатели находятся под влиянием ряда факторов, к числу которых относятся, в первую очередь, состояние организма, вид ткани и другие. Однако, полученные результаты позволяют лишь качественно оценить характер и направленность изменений различных показателей. Для количественной оценки силы влияния состояния организма на различные показатели применен метод двухфакторного дисперсионного анализа /39/, который позволил выявить наиболее уязвимые при диабете метаболические параметры, изменяющиеся в сторону нормализации при введении никотинамида. Результаты анализа приведены в табл.14.

Необходимо сразу отметить, что для большинства изученных дегидрогеназных активностей и метаболитов сила влияния состояния организма весьма велика. Наибольший интерес, на наш взгляд, представляют показатели, проявляющие наиболее сильную зависимость от исследуемых состояний организма. Таковыми являются содержание шшр+ , нае>+ , сорбитола, лактата, ма-лата, наш , а также глутатионредуктазная активность. Результаты дисперсионного анализа позволяют заключить, что эти показатели являются наиболее уязвимыми при диабете и в большей степени, чем другие, коррегируются никотинамидом.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Обросова, Ирина Геннадьевна, Киев

1.. Абсава Г.И., Южаков С.Д. Ксантинола никотинат / результаты экспериментального и 1Ш1Нического изучения/. -Экспресс-информация. Ноше лекарственные препараты, 1983, МО, с. 8-14.

2. Баранов В.Г. Основные проблемы клинической эндокринологии. Фармакология и токсикология, 1974, №2, с.116-121.

3. Баранов В.Г. Руководство по клинической эндокринологии. -Ленинград: Медицина, 1977, 664 с.

4. Березовский В.М. Химия витаминов. -2-е изд., пер. и доп.-М.: Пищ. промышленность, 1973, 632 с.

5. Варфоломеев С.Д., Зайцев C.B. Кинетические методы в биохимических исследованиях. М.: Изд-во Московского ун-та, 1982, 344 с.

6. Васюкова Е.А., Марголис М.Г., Малькович И.А. Достижения отечественной диабетологии. Клин, мед., 1977, И2,с.18-25.

7. Великий H.H., Могилевич С.Е., Симонова Н.Я. Ингибирование никотинамидом включения 2-^С-ацетата в свободные жирные кислоты и липиды тканей крыс. -Укр.биохим.журн., 1978,т.50, В2, с.368-371.

8. Великий H.H., Могилевич С.Е., Пархомец П.К., Клименко А.II. Изучение регуляции никотинамидными коферментами глицеро-неогенеза из пирувата в эпидидимальной жировой ткани крыс. -Укр. биохим. журн., 1982, т. 5 4, J56, с. 650-657.

9. Великий H.H., Пархомец П.К., Симонова Н.Я. Окислительно-восстановительное состояние клеток печени крыс, получав- 130 ших в составе диеты 1,2-пропандиол. Вопр. питания, 1975, J*5, с.40-46.

10. Великий H.H., Пархомец П.К. Роль окислительно-восстановительного состояния никотинамидных коферментов в регуляции клеточного метаболизма. Витамины, Киев: Наукова думка, 1976, вып.IX, с.3-15.

11. Великий H.H., Пархомец П.К., Могилевич С.Е. Транспорт восстановительных эквивалентов из митохондрий в цитоплазму при интенсификации липогенеза. -В кн.: УТ Всесоюз.сим-поз."Биохимия митохондрий"/ Одесса, окт.1976./:Тез.докл.--М.:Наука, 1976, с.104.

12. Великий H.H., Пархомец П.К., Симонова Н.Я., Могилевич С.Е., Еучмеровская Т.М., Чичковская Г.В., Хащурадов А.Г. Гипо-гликемический эффект никотинамида при аллоксановом диабете у крыс. Пробл.эндокринол.,1978, Т.ХХ1У, ЖЕ, с.83-87.

13. Великий H.H., Пархомец П.К.-Ферментативные аспекты регуляции внутриклеточного распределения кофакторов и метаболитов в печени крыс. -Биохимия животных и человека, Киев: Наукова думка, 1978, вып.2, с.46-58.

14. Великий H.H., Халмурадов А.Г., Пархомец П.К., Чаговец Р.В. Никотинамид как ингибитор глюконеогенеза в перфузирован-ной печени крыс. Доклады АН СССР, 1980, т.250, JM,с. 992-995.- .

15. Гулый М.Ф., Дегтярь Р.Г., Болюх JI.B. Использование сухих препаратов кристаллического гемоглобина крупного рогатого скота для определения глюкозы в крови. -Белки в медицине и народном хозяйстве, Киев: Наукова думка, 1965,с. 404-410.- 131

16. Гуревич K.JI. 0 содержании пировиноградной кислоты, в крови после внутривенного введения аскорбиновой кислоты, никотиновой кислоты и тиамина. Труды ШЛА., 1947, ЖЗ, с.151-158.

17. Данилова А.И., Каминский Л.А., Скробонская H.A., Петах H.H. Содержание гормона роста и компонентов сорбитолового шунта в крови больных с диабетическими ангиопатиями. -Эндокринология, Киев:Здоров*я, 1977, вып.7, с.73-79.

18. Ефимов A.C., Гордиенко В.М., Ткачук Ю.В., Мельник И.М., Каминский Л.А. Экспериментальное моделирование диабетических ангиопатий. Физиол. журн., 1981, т.ХХУП, iE,с.88-94.

19. Ефимов A.C., Гордиенко В.М., Ткачук Ю.В., Каминский Л.А., Мельник И.М. Применение нафтилимидоуксусной кислоты при экспериментальном диабете у крыс. Пробл. эндокринол., 1980, т.26, №4, с.69-71.

20. Ефимов A.C., Скробонская H.A., Петах H.H. Сорбитоловый- 132 путь обмена глюкозы и осложнения сахарного диабета. -Пробл. эндокринол., 1980, т.ШТ, 113, с.86-90.

21. Ефимов A.C. Патогенез .диабетических ангиопатий / Обзор и собственные данные/. Пробл. эддокринол., 1982, М,с.85-88. ■

22. Журбин Г.И., Стогний H.A. Включение "^С-ацетата в белки и липиды органов и тканей кролика при экспериментальной ожоговой болезни. -Вопр.мед.химии, 1974, т.XX, вып.З, с.284-290.

23. Капитонова З.К. Активность гексокиназы и глюкозо-6-фосфат-дегидрогеназы кроветворных клеток костного мозга кроликов в норме, после введения им гидрокортизона, при голоданиии аллоксановом диабете. -Вопр.мед.химии, 1971, т,17, М, с.394-396. '

24. Карабун П.М. Активность ключевых ферментов пентозофосфатного цикла и цуринрибонуклеоздцмоно-, ди- и трифосфатаз у больных сахарным диабетом и влияние на неё некоторых лечебных факторов. Автореф.дис. . кацд.мед.наук, Киев, 1973. -23 с.

25. Климов А.Н.Липопротеиды плазмы крови и их взаимодействие с клеткой. В кн.: IУ Всесоюз. симпоз. по биохимии липи-дов /Киев, июнь,1983/: Тез. докл.-Киев, 1983, с.7-8.

26. Климов А.Н., Нагорнец В.А., Зубжицкий Ю.Н., Алмазов В.Н., Денисенко А.Д., Ивановский Ю.В., Попов В.Г., Пигарев-ский Л.В., Артёмова А.Г., Сапименкова Е.И. Роль иммунологических факторов в патогенезе атеросклероза. -Кардиология, 1982, т.22, М2, с.22-26.

27. Курганов Б.й. Коферментная и регуляторная функция нико- 133 тинамидадениндинуклеотидов. Кинетический аспект. В кн.: Коферменты, М.: Медицина, 1973, с.82-117.

28. Лейтес С.М. Проблемы регуляции обмена веществ в норме и патологии / избранные труды/, М.¡Медицина, 1978, 224 с.

29. Могилевич O.E. Изучение возможных путей действия никотинамида на интенсивность биосинтеза свободных жирных кислот и липидов в печени крыс. -Автореф. дис. . канд.биол. наук, Киев, 1981, 22 с.

30. Монофумарат пиридил-3-метил- никотината, способ его получения и лекарственный препарат на основе указанного соединения. Патент, Франция, 1977, заявка J&33I347, МКИ

31. А 6IK 31/455; СО 76 657/14, СО 7Д 213/80.

32. Микоша A.C., Комиссаренко В.П. Влияние о'^п'-дихлорфенил--дихлорэтана и его аналогов на глюкозо-6-фосфатдегвдроге-назную активность надпочечниковых желез собак и морских свинок. Укр.биохим.журн., 1971, т.43, №3, с.311-315.

33. Мясников А.Л. Витаминотерапия внутренних болезней. В кн: XIII Всесоюзн. съезд терапевтов /Ленинград, апр. 1948 г./, Труды, Л.: Медгиз, 1949, с.443-453.

34. Нещерет А. П. Влияние гипергликемии цри экспериментальном сахарном диабете на адренергические и холинергические реакции венечных сосудов. Эндокринология, Киев: изд-во

35. Здоров'я", 1981, вып.II, с.52-56.- 134

36. Никотинат цинка, применявши: как липемический препарат, и способ его получения. Патент, Франция, 1979, заявка JS240 95 74, МКИ A6IK 31/455, 007 Д 213/80.

37. Пархомец П.К., Ивашковская И. Г.,. Великий H.H., Чаговец Р.В.

38. Изучение биосинтеза глюкозы в жировой ткани крыс. Доклады АН СССР, 1980, т.255, Ж, с.231-234.

39. Шохинский И.А. Биометрия. ~М.: Изд-во МГУ, 1970, 367 с.

40. Прихожан В.М. Поражение нервной системы при сахарном диабете. -М.: Медицина, 1981, 296 с.

41. Производные амида никотиновой кислоты в качестве лекарственных средств.-Патент,США, заявка В 4100289, МКИ A6IK 31/455,'НКИ 424-266. .

42. Производные аминоникотиновой кислоты и содержащие их фармацевтические составы. -Патент, Великобритания, заявка ЖЗЭ0007, публ.№4475, МКИ С07Д 213/80, А 6IK 31/455 /С07 Д/80, 213/74/.

43. Рысс С.М. Витамины / физиологическое действие, обмен, терапия/. -JI. :Медгиз, 1963, 376 с.

44. Северин С.Е., Телепнева В.И., Цейтлин JI.А. Пути образования и превращений никотинамидных коферментов / шш и ШШР / в мышечной ткани. Витамины, 1974, вып.7, с.11-23.

45. Северин'С.Е., Телепнева В.И., Цейтлин JI.A. Цути и локализация процессов обмена никотиншшдадениндинуклеотидов в клетке. В кн.: Химические факторы регуляции активности и биосинтеза ферментов, М.¡Медицина, 1969, с.118-136.

46. Способ лечения диабета. -Патент, США, заявка MQ739I0, МКИ А 6IK 31/455, НКИ 424-266, 1978, т.967, J£2.до

47. Способ получения хлоргидрата N^-никотиноил-0-п-хлоргидратафеноксиизобутаноил этанолашна, Патент, Франция, заявка JS234600I0, 1977, МНИ А 6IK 31/455; С07Д 213/82.

48. Струшло С.А. Взаимодействия витаминов РР и Bj в регуляции ферментов пентозофосфатного пути обмена углеводов при различных функциональных состояниях гипофиз-адреналовой системы. -Автореф. дис. . канд.биол.наук, Вильнюс, 1975, 23 с.

49. Тронько Н.Д., Турчин И.О. Изучение функциональной активности надпочечных желез у крыс с аллоксановым диабетом после трансплантации островков Лангерганса. Тез. III Всесоюз. съезда патофизиологов /Тбилиси, ноябрь, 1982/, с.94.

50. Уускюла Л.С. Влияние инсулина на активность дегидрогеназ' глюкозо-6-фосфата и 6-фосфоглюконата жировой ткани придатка яичка крыс нормальных, голодавших и с аллоксановым диабетом. В сб. "Химия и биохимия углеводов", М.: Наука, 1969, с.269-271.

51. Халмурадов А.Г. Ниацин /витамин РР/. В кн. Зксперимен-тальная витаминология / под ред. Ю.М.Островского/, Шнек: Наука и техника, 1979, 549 с.

52. Халмурадов А.Г. 0 метаболизме никотиновой кислоты и 3-ме-тилпиридина в тканях животных и его регуляция. Автореф. дис. . д-ра биол. наук, Киев, 1975, 44 с.

53. Халмурадов а.г., Мулявко h.a. adp -рибозилирование гисто-нов ядер печени цыплят при различной интенсивности глико-гидролазного распада it ad^ . Биохимия, 1984, вып.и ,с. 20-24.

54. Халмурадов А.Г., Пакирбаева Л.В., Чаговец Р.В. НАД-глико-гидролаза и её роль в регуляции метаболизма РР-витамин-содержащих коферментов. Витамины, 1974, вып.7, с.56-74.- 136

55. Халмурадов А.Г., Пархомец П.К., Кучмеровская Т.М., Чич-ковская Г.В. Особенности связывания had синаптически-ми мембранами головного мозга крыс. -Биохимия, 1983, т.48, вып.8, с.1287-1292. г

56. Холодова Е.А., Эберт Г.Л., Братина Е.Е. К диагностике ан-гиопатий нижних конечностей у больных сахарным диабетом. Клин, мед., 1078, Ш7, с.98-101.

57. Чаговец Р.В., Лахно Е.В. Коферментные витамины и кофер-менты. Витамины, 1974, вып.7, с.3-10.

58. Чаговец Р.В., Халмурадов А.Г., Шушевич С.И. Изменения активности НАД-азы печени крыс при избыточном введении никотиновой кислоты, 3-метил-пиридина и никотинамида.- 137

59. Доклады АН СССР, 1968, т.181, JS2, с.245-247.

60. Чичковская Г.В. Особенности углеводного обмена при окислении 1,3-бутандиола в печени крыс. -Автореф. дис. . канд.биол.наук, Киев, 1979, 23 с.

61. Шестакова С.А. Активность некоторых ферментов пентозофос-фатного цикла в лейкоцитах экссудата при диабете. В кн.: Механизмы регулирования жизнедеятельности организма в условиях патологии, М., 1970, 249 с.

62. Шушевич С.И., Халмурадов А.Г. /Поли-АДФ/- продукт превращения НАД и АДФ-рибозилирование белков. Витамины, Киев: Наукова думка, 1976, вып.9, с.68-79.

63. Шушевич С.И., Халмурадов А.Г., Гусева Л.Н., Чаговец Р.В. Влияние витамина РР на протеинкиназную активность печени цыплят. В кн.: Всесоюз. конф. "Актуальные проблемы витаминологии" /Москва, апр., 1978/, Тез.докл. -М., 1978, т.1, с. I91-192.

64. Эфиры 2,-/3*'-трифторметилбиофенил/-аминоникотиновой кислоты и содержащие их фармацевтические композиции. -Патент В I380I79, Великобритания, 1975, МКИ С07Д 213/80; A 6IK 31/455 / С07Д 213/80, 213/ 74/ , публ. М475.

65. Altura В.Т., Altura В, . Factors affecting vascular responsiveness. In: Microcircularion, ed. Kaleyand Altura, University Park Press, Baltimore, 1978,v. II, p. 547-615.

66. Altura B.M., Halevy S., Turpalathy P.D.M.V. Vascular smooth muscle in diabetes and its influence on the reactivity of blood vessels. Adv.Microcirc., 1979, v.8,1. P. 118 -150.

67. Anderson J.V/. Alterations in metabolic fate of glucosein liver of diabetic animals. Am.J.Clin.Hutr., 1974, v. 27, p.746-755.

68. Anderson J.W. Metabolic abnormalities contributing to diabetic complications. 1. Glucose metabolism in insulin -insensitive pathways. Am.J.Clin.Hutr., 1975, v.28,p.273-280.

69. Beaumont P., Schofield P.J., Hollows F.C., Williams J.F.

70. Growth hormone, sorbitol and diabetic capillary disease. Lancet, 1971, v.1, 7699, p. 579-581.

71. Beisswenger P.J., Spiro P.G. Human glomerular basement membrane. Chemical alterations in diabetes mellitus. -Science, 1970, v.1b8, p.596-598.

72. Bennett P.A,, Pegg A.E. Alkylation of DHA in Rat Tissues following administration of streptozotocin, Cancer Res., 1981, v.41, 7, p.2573-2589.

73. Berger H.A., Sikorski G.W., Petzold S.J., Kurohara K.K. Defective Poly /adenosine diphosphoribose/ synthesis in Xeroderma Pigmentosum. Biochemistry, 1980, v.19, 2, p. 289 - 293.

74. Berger H.A., Sikorski G.W. nicotinamide stimulates repair of DHA damage in human lymphocytes. Biochim.Biophys.Res« Comm., 1980, v.95, 1, p.67 - 72.

75. Bergmeyer H.-U. Principles of enzymatic analysis. -In : Methods of Enzymatic Analysis / ed.H.-U.Bergmeyer/, V/einheim, Verlag Chemie, 1963, p.47-50.

76. Beutler E., Guinto E. The Reduction of Glyceraldehyde by Human Erythrocytes. L-Hexonate Dehydrogenase Activity, ~ J.Clin.Invest., 1974, v.51, 1, p.1258- 1264.

77. Brachet E.A. Presence of the Complete Sorbitol Pathway in- 139 the Human ¡formal Umbilical Cord Tissue. Biol.Neonat., 1973, v.23, 4, p.314-323.

78. Bücher Th., Czok R., Lamprecht \7., Latslco E. Pyruvate. -In: Methods of Enzymatic Analysis / ed.H.-U. Bergmeyer/, Y/eincheim , Verlag Chemie, 1963, . p. 253 259.

79. Bucher Th., Klingenberg M. Y/erge des V/asserstoff s in der Lebendigen Organisation. Angewandte Chemie, 1958, v.70, p.552 - 554.

80. Butt R., Smulson M. Relationship between nicotinamide adenine dinucleotide concentration and in vivo synthesis of poly/adenosine diphosphate ribose/ on purified nuc-leosomes. -Biochemistry, 1980, v.19, 2, p.5235 5242.

81. Buzney S.Iu., Prank R.IT., Varma S.D., Tanishima T., Gab-bay K.H. Aldose Reductase in the retinal mural cells. -Invest.Ophthalmol.Vis.Sei., 1977, v.16, 5, p.392-396.

82. Carlier Ivi,-P., Pantaloni D. ITADP linked isocitrate dehydrogenase from beef liver. Purification, quaternary structure and catalytic activity.- Eur.J.Biochem., 1973,. v.37, P.341 - 354.

83. Carlson L.A., Oro L. The effect of nicotinic acid on the plasma free fatty acids. -Acta Med.Scand., 1962, v.172, 6, p.641 645.

84. Charles M.A., Lawecki J., Pictet R., Grodky G.M. Insulinsecretion. Interrelationships of glucose, cyclic adenosi-» »ne 3 ,5 monophosphate and calcium. J.Biol.Chem., 1975, v. 250, p.6134 - 6140.

85. Chylack L.T. Efficasy of Alrestatin, an aldose reductase inhibitor in human diabetic and non-diabetic lenses.,- Ophthalmology / Rochester /, 1979, v.86, 9, p.1579-1585. .

86. Clements R.S. Sorbitol and other polyols in lens. -Lancet, 1971, v.7689, 2, p.671 675.

87. Clements R.S. The role of Abnormalities in nerve metabolism in the pathogenesis of diabetic peripheral neuropathy. Alabama J.Med.Sci., 1976, v.13, 4, p.399-404,

88. Clements R.S., Morrison a.D., Winegrad A.I. Polyol pathway in Aorta. Regulation by Hormones. Science, 1969, v. 166, 3907, p.1007 - 1008.

89. Clements R.S., Vourganti J.B., Kuba T., Oh S.J., Darnell B, Dietary myo-Inositol Intake and Peripheral Nerve Function in Diabetic Neuropathy. -Metabolism, 1979, v.28, 4, Suppl. 1, p.477 486.

90. Clements R.S., Winegrad A.J. Modulation of mammalian polyol:NaDP oxidoreductase activity by ADP and ATP.

91. Biochem.Biophys.Res.Comm., 1969, v,36, p.1006-1012.f ■ ,

92. Culebras A., Alio J., Horrera J.-L,, Lopes-Fraile I,P, Effect of an Aldose Reductase Inhibitor on Diabetic Peripheral Neuropathy, Preliminary Report. -Arch.Neurol.,. 1981, v.38, 2, p.133-134.

93. Colman R.P. Glutathione Reductase /Yeast/. -In: Methods in Enzymology / ed.S.P. Colowick, N.O.Kaplan/, New York, Acad.- 141

94. Press, 1971, vol,XIII, Part B, p.500 -509.

95. Colwell J.A., Winocour P.D., Halushka P.V. Do Platelets have anything to do with diabetic microvascular disease.- Proceedings of a Conference on Diabetic Microangiopathy, Diabetes, 1983, v.32, suppl.2, p.14-19.

96. Conrad S.M., Doughty C.C. Comparative Studies on Aldose Reductase from Bovine, Rat and Human Lens. Biochim. Biophys.Acta /P/, 1982, v.708, 3, p.348-357.

97. Cunha-Vaz J.G. Studies on the Pathophysiology of Diabetic Retinopathy. The Blood-Retinal Barrier in Diabetes.- Proceedings of a Conference on Diabetic Microangiopathy, Diabetes, 1983, v.32, suppl.2, p.20-27.

98. Denton R.M., Richard D.A,, Chin J.G. Calcium Ions and the regulation of NAD+-linked isocitrate dehydrogenase from the mitochondria of rat heart and other tissues.-Biochem.J., 1978, v.176, 3, p.899 901.

99. Dons R.F., Doughty C.C. Isolation and characterization of aldose reductase from calf brain. Biochim. Biophys. Acta, 1976, v.452, 1, p.1-12.

100. Doughty C.C., Conrad S.M. A reaction mechanism for aldose reductase from lens. Biochim.Biophys.Acta /P/, 1982, v.708, 3, p.358-364.

101. Dulin W.E., Sout M.G. -In: The Diabetic Pancreas / eds. Volk B.W., Wellman K.F./, Plenum Press, New York, 1977, p.425-465.

102. Dvornik D., Simard-Duquesne IT., Krami M., Sestanj K., Gabbay K.H., Kinoshita J.H., Varma S.D., Merola L.O. Polyol Accumulation in Galactosemic and Diabetic Rats: Control by Aldose Reductase Inhibitor. Science, 1973,- 142 -v.182, 4117, p.1146-1147.

103. Eggleston L.V., Krebs H.A. Regulation of the Pentose Phosphate Cycle. Biochem.J., 1974, v.138, 3, p.425-435.

104. Exton J.H. Gluconeogenesis. -Metabolism, 1972, v. 21, 10, p. 945-990.

105. Piletti S., Takai N.A., Rapoport B. Insulin-receptor down-regulation prevention at a post-receptor site. -Endocrinology, 1981, v.108, 6, p.2409 2411.

106. Piske C.H., Subbarow Y. The colorimetric determination of phosphorus. -J.Biol.Chem., 1925, v.66, p.375 379.

107. Prank R.N., Chang S. S., Mikus K.P. Aldose Reductase Activity in Retinal and Cerebral Micro vessels. Diabetes, 1978, v.27, suppl.1, p.475.

108. Fukushi S., Merola L.o., Kinoshita J.H. Altering the course of cataracts in diabetic rats. Invest.Ophthalmol. Vis.Sci., 1980, v.19, 3, p.313-315.

109. Gabbay K.H. Pactors affecting the sorbitol pathway in diabetic nerve. Diabetes, 1969, v.18, suppl.1, p.336-337.

110. Gabbay K.H. The sorbitol pathway and the complications. . ., , ^of diabetes. -N.Eng.Journ.Med., 1973, v,288, 16, p.831-836.

111. Gabbay K.H. Hyperglycemia, polyol metabolism and complications of diabetes mellitus. -Ann. Re v.Me d., 1975, v. 26, p.521 536.

112. Gabbay K.H., Merola L.O., Pield R.A. Sorbitol pathway:presence in nerve and cord with substrate accumulation in diabetes. Science, 1966, v.151, pp.209-210.

113. Gabbay K.H., 0* Sullivan M.D. The sorbitol pathway. Enzyme localization and content in normal and diabeticnerve and cord. Diabetes, 1968, v.17, 5, p.239 - 243.

114. Gabbay K.H., 0*Sullivan J.B. The sorbitol pathway in diabetes and galactosemia: enzyme and substrate localization and changes in kidney. Diabetes, 1968, v.1T, 5, p.300.

115. Gabbay K.H., Spack II., Loo D., Hirsch H.J., Askil A. A. Aldose Reductase Inhibition. Studies with Alrestatin.-Metabolism, 1979, v.28, 4, suppl.1, p.471-476.

116. Gabbay K.H., Tze W.J. Inhibition of glucose induced insulin release by aldose reductase inhibitors. -Proc. ITatl. Acad.Sci., 1977, v.69, p. 1435 1439.

117. Gillon R.R.W. Myo-inositol and sorbitol metabolism in relation to peripheral nerve function in experimental diabetes in the rat: the effect of aldose reductase inhibition. Diabetologia, 1983, v.25, 4, p.232-238.

118. Glock G.E., McLean P. The hexosemonophosphate oxidative pathway in alloxan diabetes. -Biochim.Biophys.Acta, 1955, v.16, 3, p.446-456.

119. Goldsmith G.A. Mechanisms by which certain pharmacologic agents lower serum cholesterol. Federat. Proc., 1962, v.21, 4, p.81 - 84.

120. Gonzales A.-M., Sochor M., Hothersall J.S., McLean P.

121. Effect of experimental diabetes on the activity of hexokinase in rat lens : an example of glucose over-utilization in diabetes. -Biochem.Biophys.Res.Comm., 1978, v.84, 4, p.858-864.

122. Gonzales A.-M., Sochor M., McLean P. Effect of Experimental Diabetes on Glycolytic Intermediates and Regulation- 144 of Phosphofructokinase in rat lens. Biochem. Biophys. Res.Comm., 1980, v.95, 3, p.1173-1179.

123. Gordon T., Castelli W.P., Hjortland M.C., Kannel W.B., Dawber T.R. High Density Lipoproteins as a Protective Factor against Coronary Heart Disease. .Am.J.Med., 1977, v.62, p.707-714.

124. Green H., Salomon S.A. Investigations of glycolysis in lens of alloxan-diabetic rats and rabbits, .Arch. Ophthalmol., 1959, v.60, p.616-621.

125. Greene D.A., de Jesus P.V., Winegrad A.I. Effects of insulin and dietary myoinositol on impaired peripheral motor nerve conduction velocity in acute streptozotocin diabetes. J.Clin. Invest., 1975, v.55, p.1326-1336.

126. Greenbaum G., Gumaa K.A., McLean P. The distribution of hepatic metabolites and the control of the pathways of carbohydrate metabolism in animals of different dietary and hormonal states. Arch.Biochem.Biophys., 1971, v.14-3, 3, p.616-663.

127. Gross R. C., Carlson C.A. Metabolic effects of nicotinic acid in acute insulin deficiency in the rat. Diabetes, 1968, v.17, 6, p.353-362.

128. Gumport R.I., Lehman J.R. Structure of the DHA ligase adenylate intermediate : lysine / £ -amino/-lihked adenosine monophosphoramidate. - Proc Natl. Acad. Sci. USA, 1971, v.68, 10, p.2559-2563.

129. Handelsman D.J., Turtle J.R. Clinical trial of an aldose reductase inhibitor in diabetic neuropathy. Diabetes, 1981, v.30, 6, p.459-464.

130. Hayaishi 0., Ueda K. Poly/ADP-ribose/ and ADP-ribosy- 145 .latlon of proteins. Ann.Rev.Biochem., 1977, v.46, p.95-116.

131. Hayman S., LouM.F., Lierola L.O., Kinoshita J.H. Aldose reductase activity in the lens and other tissues. -Biochim.Biophys,Acta, 1966, v.128, p.474-482.

132. Heaf D.J., Galton D.J. Sorbitol and other polyols in lens, adipose tissue and urine in diabetes mellitus,-- Clin.Chim.Act a, 1975, v.63, p.41-47.

133. Heath H., Hamlett Y,C. The Sorbitol Pathway: Effect of Streptozotocin-Induced Diabetes and the Feeding of a Sucrose-Rich Diet on Retina, Blood and Liver of Rats.-Diabetologia, 1976, v,12, p.43-46.

134. Hohorst H.J, L(+)-Lactate Determination with Lactic Dehydrogenase and DPH. In : Methods of Enzymatic Analysis / ed.H.-U.Bergmeyer/, Y/einheim, Verlag Chemie, 1963, p. 266-270.

135. Hohorst H.J. L(—)-I/Ialate Determination with Malic Dehydrogenase and DPH. In : Methods of Enzymatic Analysised. H.-U.Bergmeyer/, Weinheim, Verlag Chemie, 1963, p.328-332.

136. Holten D., Procsal D., Chang H.-L. Regulation of pentose phosphate dehydrogenases by HADP+/ HADPH ratios.

137. Biochem.Biophys.Res,Comm., 1976, v,68, 2, p.636-641,

138. Holzer H., Schultz G., Lynen F. Bestimmung des Quotient DPHH/DPN in lebenden Hefezellen durch Analyses stationnärer Alkohol- und Acetaldehyd-Konzentrationen. -Bio ehem. Z., 1956, v.328, 1, p. 252-263.

139. Horecker B.L. In: Carbohydrate Metabolism / ed, by Dickens, Rändle, Whelan/, London, Acad.Press, 1965,v.1, p.162

140. Ilubinont С., Sener A., Malaisse W.J. Sorbitol Content of Plasma and Erythrocytes during Induced Short-Term Hyperglycemia.- Clin.Biochem., 1981, v.14, 1, p.19-20.

141. Hundley J.Li. Hiacin. In: The Vitamins, Hew York, Acad. Press, 1954, 2, p.452-490.

142. Hutton J.C., Schofield P.J., Williams J.P., Hollows F.C. Sorbitol metabolism in the retina: accumulation of pathway intermediates in streptozotocin-induced diabetes in the rat. Aust.J.Exp.Biol.Med.Sci., 1974, v.521. Pt.2/, p.361-373.

143. Hutton J.C., Schofield P.J., Williams J.F., Hollows F.C.

144. The localization of sorbitol pathway activity in the rat renal cortex and its relationship to the pathogenesis of the renal complications of diabetes mellitus. Aust. J.Exp.Biol.Med.Sci., 1975, v.53 / Pt.1/, p.49-57.

145. Jain 1С,, Logothetopoulos J. Proinsulin biosynthesis by pancreatic islets of the rat and the study of alloxan cytotoxicity in vitro. Biochim.Biophys. Acta, 1976, v.435, p.145-151.

146. Judzewitsch R., Polonsky K. Aldose reductase inhibition improves nerve conduction velocity in diabetic patients. H.Eng.J.Med., 1983, v.308, 3, p.119 -125.

147. Kador P.P., Kinosiiita J.Ii., Tung W.H., Chylack L.T. Differences, in the susceptibility of various aldose reductases to inhibition. II. Invest. Ophthalmol.Vis.Sci., 1980, v. 19, 8, p.980-982.

148. Kaplan IT. Metabolic pathways involving niacin and its derivatives. In: Metabolic pathways, ITew York - London,- 147

149. Acad. Press, 1961, v. 2, p.627-670.

150. Kaplan H.O. The pyridine coenzymes. in : The Enzymes, New York - London, Acad. Press, 1960, v. 3, part B,p. 105-169.

151. Kaplan 11.0., Goldin A., Humphreys S.P., Ciotti M.M., Stolzenbach P.E. Pyridine nucleotide synthesis in the• mouse. J.Biol.Chem., 1956, v.219, 1, p.287 -298.

152. Kaplan 1T.0., Sarma R.H. The structure of pyridine coenzymes as related to binding. In: Pyridine-nucleotide - dependent dehydrogenases, Berlin-Heidelberg- Hew York, Springer Verlag, 1970, p.39-56.

153. Kerbey A.L., Randle P.J., Cooper R.H., Whitehouse S.f Pask H.T., Denton R.M. Regulation of pyruvate dehydrogenase in rat heart. Biochem.J., 1976, v.154, 2, p.327-348.

154. Kerr S.J. Absence of a Natural Inhibitor of the t-RNA Methylases. from Petal and Tumour Tissue. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1971, v.68, 2, p.406-410.

155. Kinoshita J.H., Pukushi S., Kador P., Merola L.O. Aldose Reductase in Diabetic Complications of the Eye. -Metabolism, 1979, v.28, 4, Suppl.1, p. 462-469.

156. Kinoshita J.H., Putterman S., Satoh K., Merola L.O. Factors affecting the formation of sugar alcohols in ocular lens. Biochim.Biophys.Acta, 1963, v.74, 3, p. 340 -350.

157. Kleber H.-D., Mauthei R.W. Influence of nicotinic acid and nicotinamide on insulin hypoglycemia. Proc.Soc. Exp.Biol.Med., 1961, v.107, 4, p.975-977.

158. Klingenberg M., Diphosphopyridine nucleotide /DPN /. -In: Methods of Enzymatic Analysis / ed.H.-U.Bergmeyer/, Weinheim, Verlag Chemie, 1963, p.528-530.

159. Klingenberg M. Triphosphopyridine nucleotide /TPN/« -In: Methods of Enzymatic Analysis / ed. H.-U.Bergmeyer/, Weinheim, Verlag Chemie, 1963, p.535-536.

160. Kobric M., Lippman V/. Effect of alrestatin sodium on glucose-stimulated insulin secretion in the fasted anaesthetized rats. Horm.Metab.Res., 1978, v.10, 6, p. 495 -500.

161. Krebs H.A. The redox state of nicotinamide adenine dinuc-leotide in the cytoplasm and mitochondria of rat liver,-Adv.Enzyme Regul., 1967, v.5, p.409-434.

162. Krebs H.A., Eggleston L.V. The regulation of pentosephosphate cycle in rat liver. Adv.Enzyme Regtil., 1974, v. 12, p.421-434.

163. Krebs H.A., Veech R.L. In: Pyridine-Nucleotide «Dependent Dehydrogenases, Heidelberg -New York, Acad Press, 1970, 413 p.

164. LagunasR., McLean P., Greenbaum A.L. The effect of- 149 raising the NAD content on the pathways of carbohydrate metabolism and lipogenesis in rat liver. Eur.J.Biochem., 1970, v.16, 1, p.179-190.

165. La lioue K.P., Bryla J., Williamson J.R. Feedback interactions in the control of citric acid cycle activity in rat heart mitochondria. J.Biol.Chem., 1972, v.247, 3, p.667-679.

166. Lazarow A. ,Lsanbies J., Tausch A.J. Protection against diabetes with nicotinamide. J.LAb.Clin.Med., 1950, v.36, 2, p. 249-258.

167. Lippman W., Inhibition of prostaglandin-induced cyclic AMP accumulation in the rat anterior pituitary by alre-statin. Experientia, 1978, v.34, 4, p.441-443.

168. Lippman V/., Kbbric M. Effect of alrestatin on arginine-induced secretion of glucagon and insulin in the rat. -Horm.Metab.Res., 1978, v.10, 4, p.280-282.

169. Lowry O.H., Rosenbrough H.E., Parr A.E., Randall R.J. Protein measurement with the Folin phenol reagent. J. Biol.Chem., 1951, v.193, p.265-272.

170. Lundbaek K. Diabetische jingiopathie. ITeue Konzepte der Pathogenese. Munch.med.Wschr., 1977, v.119, 19, p.647-654.

171. Mahler R.J. The relationship between the hyperplastic pancreatic islet and insulin insensitivity in obesity. -Acta diabetol.Lat., 1981, 1, p. 1-17.

172. Malaisse W.J., Hutton J.C., Kawaru A., Sener A. The stimulus-secretion coupling of glucose-induced insulin release. Metabolic effects of menadione in isolated islets. Eur. J.Biochem., 1978, v.87, p.121-130.- 150

173. Malaisse W.J., Sener A., Mahy M. The stimulus-secretion Coupling of Glucose Induced Insulin Release and Sorbitol Metabolism in Isolated Islets, -Eur.J.Biochem.,1974, v.47, 2, p.365-370.

174. Maldonato A., Trueheart P.A., Renold A.E., Sharp G.W.G. Effects of streptozotocin in vitro on proinsulin biosynthesis, insulin release and ATP content of isolatedrat islets of Langerhans. Diabetologia, 1976, 12, p.471-481.

175. Malone J.I., Knox G., Benford S., Tedesco T.A. Red cell sorbitol : an indicator of diabetic control. -Diabetes, 1980, v.29, 11, p.861-865.

176. Mango D., Scirpa P., Menini E. Effects of Dehydroepiand-rosterone and 16 hydroxydehydroepiandrosterone on the reduction of glucose to glucitol by the human placenta. -Horm.Metab.Res., 1976, v.8, 4, p.302-307.

177. Martelli P., Ricci C. Studies on the in vivo biosynthesis of NAD. Ital.J.Biochem., 1964, v.13, 5, p.277-288,

178. McMillan D.E. Deterioration of the microcirculation in diabetes. Diabetes, 1975, v.24, 10, p#944-957.

179. Miller G.J., Miller H.E. Plasma High-Density Lipoprotein Concentration and Development of Ischemic Heart Disease.-Lancet, 1975, 1, p.16-19.

180. Mordes J.R., Rossini A.A. Animal Models of Diabetes. -Am.J.Med., 1981, v.70, p.353-360.

181. Morrison A.D., Clements R.S., Winegrad A.I. Effects of elevated glucose concentrations on the metabolism of the aortic wall. J.Clin.Invest., 1972, v.51, p.3114-3123.

182. Hegelein E., Haas E, Uber die Wirkungsweisse des Zwischenferments. Biochem.Z., 1935, v. 282, s.2o6 - 220.

183. Nordlie R.C., Lardy H.A. Mammalian liver phosphoenolpyru-vate carboxylcinase activities. -J.Biol.Chem., 1963,v.238, 7, p.2259-2270.

184. Okamoto H., Noto Y., Miyamoto S., Mabuchi H., Takeda K.t1.hibition by somatostatin of insulin release from isolated pancreatic islets, FEBS Letters, 1975, v.54, p.103-105.

185. Okamoto H. Regulation of proisulin synthesis in pancreatic islets and a.new aspect to insulin-dependent diabetes.-Moll.Cell.Biochem., 1981, v.37, p.43-61.

186. Packard C.G., Stewart J.M., Third J.L.H.C., Morgan H., Lawrie T.D., Veilch S.J. Effects of nicotinic acid therapy- 152 oil high density lipoprotein metabolism in type II and type IV hyperlipoproteinaemia. Biochim.Biophys.Acta, 1980, v.618, 1, p.53-62,

187. Peterson M.J., Sarges R., Aldinger C.E., McDonald D.P. CP-45,634: A Novel Aldose Reductase Inhibitor that Inhibits Polyol Pathway Activity in Diabetic and Galactosemia Rate. Metabolism, 1979, v.XXVIII, 4, suppl.1, p.456-457.

188. Петридес П., Вайес Л., Лёффлер Г., Вийланд 0. Сахарный диабет. М.: Медицина, 1980, 200 с.

189. Randle P.J., Sale G.J., Kerbey A.L., Kearns A. Regulation of pyruvate dehydrogenase by phosphorylation and dephos-phorylation. In a Protein Phosphorylation, Book A,

190. New York, Cold Spring Harbor, 1981, 812 p.

191. Reed Z.J., Pettit Р.И. Phosphorylation and dephosphoryla-tion of pyruvate dehydrogenase. In : Protein Phosphorylation. Book A., Hew York, Cold Spring Harbor, 1981, p. 701-711.

192. Richards C.D., Snell C.R., Snell P.H. Nicotinamide adenine dinucleotide depresses synaptic transmission in the hippocampus and has specific binding sites on the synap- 153 tic membranes. Br.J,Pharmacol., 1983, v.79, 2, p.553-564.

193. Richards C.D., Snell C.P., Snell P.H. Nicotinamide adenine dinucleotide /HAD/ suppresses excitatory synaptic transmission in the dentate gyrus of the guinea pig. -J.Physiol., 1983, v.336, p.63-64.

194. Roe E.H. Keto-sugar measurements in animal tissues. -J.Biol.Ghem., 1934, v.107, 1, p.14-19.

195. Ro'ssner S., Olsson A.G. Effects of combined procetofene-nicotinic acid therapy in treatment of hypertriglyceri-daemia. Atherosclerosis, 19-80, v.35, 4, p.413-417.

196. Scatchard G. The attraction of properties for small molecules and ions. -Ann.H.Y.Acad.Sei., 1949, v.51, p. 660-672.

197. Schein P.S., Rakieten N., Cooney D.A., Davis R., Vernon M, Streptozotoein Diabetes in Monkeys and Dogs and Its Prevention by Nicotinamide /35 355/. Proc.Soc.Exp.Biol. Med., 1973, v.143, 2, p.514-518.

198. Schmidt G., Daklce H. Über den Einfluss von Xantinol-niko-tinat auf die Vascularization und die Ausbildung von

199. Gefässkollateralen, Arzneim.-Forsch., 1971, Bd.21, s. 446-449.

200. Schofield P.J., Gould N.J. Initial changes in the free carbohydrate profile of rat lens and retina following streptozotocin-induced diabetes. — Moll.Cell.Biochem., 1979, v.28, 1-3, p.17-21. "

201. Scirpa P., Mango D., Bompiani a., Meneni E. Glucitol pathway in human pregnancy. Eur.J.Obstet.Gynec.Reprod. Biol., 1978, v.8, 6, p.323-328.- 154

202. Sheäff C.M., Doughty C.C. Physical and Kinetic Properties of Homogenous Bovine Lens Aldose Reductase, J.Biol. Chem., 1976, v.251, 9, p.2696-2702.

203. Siddiqvi M.A., Rahman M.A. Enzymic Studies on the Lenses of Alloxan-Diabetic Rats. -Biochem.Soc.Trans., 1976, v.4, 6, p.1051-1052.

204. Smith M.J. Polyol dehydrogenases. 4.Crystallization of the L-iditol dehydrogenase of sheep liver. Biochem.J., 1962, v.83, 1, p.135-151.

205. Smith C.M., Bryla J., Williamson J.R. Regulation of mitochondrial o£-ketoglutarate metabolism by product inhibition of cL -ketoglutarate dehydrogenase. J.Biol.Chem., 1974, v.249, 5, p.1497-1505.

206. Smith C.M., Plaut G.W.E. Activities of NAD-specific and NADP-specific isocitrate dehydrogenases in rat liver mitochondria. Studies with D-threo-L-methylisocitrate. -Eur.J.Biochem., 1979, v.97, 1 , p.283-295.

207. Spiro R.G., Spiro M.J. Effect of diabetes on the biosynthesis of the renal glomerular basement membrane. Studies on the glycosyl-transferase. Diabetes, 1971, v.20, p.641-648.

208. Sqambato S., Ceriello A.,Passariello N., Quiliano D. -Plasma Sorbitol Dehydrogenase in Diabetic Subjectswith or without Vascular Complications. -Biochem. and Exp. Biol., 1979, v.15, 1, p.61-64.

209. Srere P.A., The molecular physiology of citrate. Nature, 1965, v.205, p.766-770.

210. Stein G., Glangeaud M.G., Fainaru M., Stein 0. The remo- 155 val of Cholesterol from Aortic Smooth Muscle Cells in Culture and Landschutz Ascites Cells by Fractions of Human High-Density Apolipoprotein. Biochim.Biophys. Acta, 1975, v.380, p.106-118.

211. Stewart M.A., Sherman W.R., Kurien M.M. ,Moonsammy G.I., Wisgerhof M.J« Polyol accumulations in nervous tissue of rats with experimental diabetes and galactosaemia. -J.iTeurochem.1967, v. 14, p. 1057-1066.

212. Stiller L.H., Joffe B.I., Samdler M., Seftel H.V. The effect of alrestatine on alanine-stimulated release of insulin and glucagon in man. J.Endocr.Invest., 1981, v.4,1, p.115-117.

213. Strano A., llovo S., Davi G., Avellone G., Mandala V. Effects of sorbinicate and nicotinic acid on blood viscosity, red cell deformation and platelet function. -Pharmacol.pLes.Commun., 1982,"«14, 7, p. 639-648.

214. Taketa K., Pogell B.M. Allosteric inhibition of rat liver fructose-1,6-diphosphatase by adenosine-5 -monophosphate. J.Biol.Chem., 1965, v.240, 2, p.651-662.

215. Travis S.F., Morrison A.D,, Clements R.S., Winegrad A.I., Oski F.A. Metabolic Alterations in the Human Erythrocyte Produced by Increases in Glucose Concentration. The Hole of Polyol Pathway. J.Clin.Invest., 1971, v.50, 10,p. 2104-2112.

216. Trus M.D., Hintz J.B., Weinstein A.D., Williams A., Pag-liarad E., Matschinsky P.M. Effects of glucose and acetylcholine on islet tissue 1IADH and insulin release. Life Sciences, 1978, v.22, p.809-816.

217. Uchigata Y., Yamamoto H., Nagai H., Okamoto H. Effect of poly/ADP-ribose/ synthetase inhibitor administration to rats before and after injection of alloxan and streptozo tocin on islet proinsulin synthesis. -Diabetes, 1983, v.32, 4, p.316-319.

218. Van Heyningen R. What happens to the human lens in cataracts. Scient.&ner., 1975, v.233, 6, p.70-72.

219. Varma S.D. Aldose Reductase and the Etiology of Diabetic Cataract. In : Current Topic in Eye Research, ITew York, Acad.Press, 1980, v.3, p.91-157.

220. Varma S.D., Kinoshita J.H. Sorbitol pathway in diabetic and galactosemic rat lens. Biochim. Biophys. Acta, 1974, v.338, 2, p.632-640.

221. Varma S.D., Mizuno A.O., Kinoshita J.H. Diabetic cataracts and flavonoids. Science, 1977, v.195, 4274, p. 632-640.

222. Veech R.L., Eggleston L.V., Krebs H.A, The redox states of free nicotinamide adenine dinucleotide phosphate in the cytoplasm of rat liver. — Biochem.J., 1969, v.115, p.609-619.

223. Volek V., Palek J. Ke lclinickemu pouziti dehzdrogenasy glucoza-6-fosfatu. -Casop.Lekaru cosk., 1966, v.105, 49,p.1381-1383.

224. Ward J.D. Polyol pathway in the neuropathy of early diabetes. In : Vascular and neurological Changes in Early Diabetes / ed. R.A. Camerini-Davalos and H.S. Cole/, Hew York-London, Acad.Press., 1973» p.425.

225. Ward J.D., Baker R.W.P., Davis B.H. Effect of Blood

226. Sugar Control on the Accumulation of Sorbitol and Fructose in ITervous Tissue, Diabetes, 1972, v. 21, 2, p.1173-1178.

227. Wick A.H., Drury D.R. Action of Insulin on the Permeability of Cells to Sorbitol, Am.J.Physiol., 1952, v.166, 2, p.421-423.

228. Weiss B.B. Streptozotocin. A Review on its pharmacology, efficasy and toxicity. Cancer Treat. Repts., 1982, v.66, 3, p.427-438.

229. Williamson J.R., Cooper R.H. Regulation of the citric acid cycle in mammalian systems. FEBS Letters, 1980, v. 117, suppl., pK 73- pK 85.

230. Williamson J.R., La Noue K.F, Feedback control of the citric acid cycle. -PAABS Revista /Pan-.American Association of Biochem.Societies/, 1975, v.4, 1-2, p.53-62.

231. Yamamoto H., Okamoto H, Poly/ADP-ribose/ synthetase inhibitors enhance streptozotocin-induced killing of insulinoma cells by inhibiting the repair of DITA strand break. FEBS Letters, 1982, v. 145, 2, p.298-302.'

232. Yamamoto H., Uchigata Y., Okamoto H. DNA strand breaks in pancreatic islets by in vivo administration of alloxan and streptozotocin. Biochem.Biophys. Ress. Comm., 1981, v.103, 3, p.1014-1020.

233. Young R.J., Ewing D.J., Clarke B.F. A controlled trialof sorbinyl, an aldose reductase inhibitor, in chronic painful diabetic neuropathy. Diabetes, 1983, v.32, 10, p.938-943.

234. Young H., Har T.S., Lawrence A.F.M. Partial characterization of polynucleotide ligese from baby-hamster kidney cells. Biochem.Soc. Trans., 1973, v.1, Part 2,p. 520-522.

235. Zawalich W.C., Dye E.S., Matschinsky P.M. Nicotinamide

236. Modulation of Rat Pancreatic Islet Cell Responsiveness in vitro. Horm.Metab.Res., 1979, v.II, p. 469-471