Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Изучение Д-глицеральдегид-З-фосфатдегидрогеназы при помощи катионного флуоресцентного зонда - аурамина О

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Кличко, Владимир Иванович

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1. Структура и свойства Д-глицеральдегид-З-фосфатде-гидрогеназы.

1.1. Строение молекулы ГАФД

1.2. Структура активного центра ГАФД.

1.3. Кооперативные свойства ГАФД.

1.4. "Полуцентровые" свойства ГАФД.

1.5. Модели, объясняющие строение ГАФД.

1.6. Значение димер-димерной организации ГАФД в процессе катализа.

2. Применение конформационных зондов.

2.1. Значение конформационных проб для исследования ферментов." ГТ.

2.2. Применение флуоресцентных зондов для исследования ферментов.•.

2.3. Природа флуоресцентных зондов.

2.4. Участки белков, связывающие зонды.

2.5. Поляриметрические методы в исследованиях, связанных с применением конформационных зондов

2.6. Флуоресцентные свойства аурамина

2.7. Аурамин 0 как конформационный зонд.

2.8. Применение аурамина 0 для исследования алкоголь-дегидрогеназы /АДГ/ из печени

2.9. Применение аурамина 0 для исследования алкого'ль-дегидрогеназы /АДГ/ из дрожжей

2.10.Взаимодействие алкогольдегидрогеназы с другими катионными зондами

2.11. Применение производных зтеноцитозина для исследования ГАЩЦ.

МАТЕРИМЫ И МЕТОДЫ.

1. Использованные реактивы.

2. Определение концентраций и приготовление растворов реактивов

3. Выделение ГАЩЦ из пекарских дрожжей

4. Выделение ГАЩЦ из скелетных мышц кролика

5. Получение алофермента ГАЗЩ из мышц кролика.

6. Определение концентрации белка в препаратах ГАЩЦ

7. Определение энзиматической активности ГАЩЦ

8. Избирательная модификация ЗН-групп активных центров: фермента иодацетатом и иодацетамидом.

9. Флуориметрические исследования.

10. Титрование белка красителем

11. Титрование комплекса ГАЩЦ-аурамин 0 лигандами

12. Спектрофотометрические измерения.

13. Поляриметрические исследования.

14. Исследования методом равновесного диализа

15. Седиментационный анализ.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

1. Флуоресценция аурамина 0, связанного с ГАЗЩ.

2. Влияние рН среды на флуоресценцию связанного аурамина

3. Влияние ионов на связывание аурамина 0 с ГАЗЩ

4. Флуоримиетрическое титрование препаратов фермента аурамином 0.

5. Исследование связывания флуоресцентного зонда дегидрогеназой методом равновесного диализа

6. Связывание акридинового оранжевого с ГАЩ из пекарских дрожжей

7. Влияние НАД на флуоресценцию и связывание аурамина 0 с ГАФД.

8. Влияние НДЦН на флуоресценцию и связывание аурамина 0 с ГАЩ

9. Исследование связывания аурамина 0 с ГАЩЦ методом кругового дихроизма

10. Взаимодействие с ГЛЩЦ никотинамидмононуклеотида . . III

11. Влияние аденинсодержащих фрагментов. НАЦ на связывание аурамина 0 с ГАЩЦ и на флуоресцентные характеристики зонда.

12. Влияние субстрата и его аналогов на связывание аурамина 0 с ГАЩЦ и флуоресцентные характеристики зонда

13. Изучение модифицированного фермента.

13.1. Модификация фермента Д1НБ.

13.2. Модификация фермента алкилирующими агентами

14. Влияние аурамина 0 на реакцию, катализируемую ГАФД

15. Изучение способности аурамина 0 связываться с субъединицами ГАЩЦ в различных функциональных состояниях.

ЗдаюЧЕНИЕ. вывода.i6i

Введение Диссертация по биологии, на тему "Изучение Д-глицеральдегид-З-фосфатдегидрогеназы при помощи катионного флуоресцентного зонда - аурамина О"

В В Е Д Е Н И Е Одной из наиболее важных проблем современной энзимологии можно считать выяснение механизмов конформационных перестроек, претерпеваемых ферментами на различных стадиях катализа,а также структурных изменений,лежащих в основе регуляции их активности. Конформационное состояние фермента определяется превде всего его взаимодействием со специфическими лигандами участниками реакции,а также различными эффекторами,У ферментоволигомеров существенную роль в формировании структуры,обеспечивающей определенное функциональное состояние белковой молекулы, играют межсубъединичные взаиьюдействия. Особый аспект эта проблема приобретает в том случае,когда олигомеры формируются при ассоциации идентичных субъединиц, В этой ситуации /наиболее распространенной/ выяснение характера конформационных различий между соседними субъединицами и условий, в которых они возникают,непосредственно связано с пониманием функционального смысла существования олигомерной структуры. Действительно,в настояцее время накоплен уже значительный экспериментальный материал,показывающий,что изолированные субъединицы ряда ферментев-олигомеров /к их числу относятся некоторые пиридиннуклеотидзавиеимые дегидрогеназы и,в частности,глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа/ полностью способны к проявлению активности. Шесте с тем,ассоциация таких субъединиц в олигомер создает систему,в которой возникает их конформационная неэквивалентность. Природа этой неэквивалентности /выявляемой чаще всего в кооперативности по связыванию лигандов,а также по неодинаковой реакционной способности функциональных групп/ в большинстве случаев остается неясной. Наиболее трудноразрешимым остается вопрос о том, возникает ли она просто как следствие ассоциации субъединиц, т.е. является предшествующей в апоферменте, или появляется лишь в результате влияния, индуцированного тем или иным воздействием на белок. Глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназу можно считать модельным ферментом, на котором многие из упомянутых вопросов разработаны наиболее детально. Так, для тетрамерной молекулы этого фермента, изолированного из разных источников, показано существование выраженной межсубъединичной кооперативности. Вопрос о том, существует ли конформационная неэквивалентность субъединиц в апоферменте, остается неясным. Шеющиеся в настоящее время результаты рентгеноструктурных исследований холофермента разноречивы. То же можно сказать и в отношении пока еще немногочисленных данных, касающихся структуры апофермента. Трактовка кристаллографических данных затрудняется также тем обстоятельством, что конформация белка в кристалле и в растворе может быть несколько различна. Вполне очевидной в связи с этим представляется необходимость дополнения результатов рентгеноструктурного анализа исследованиями белка в растворе. Среди методических подходов, позволяющих обнаружить тонкие различия конформации белка, часто не выявляемые другими методами, важное место занимает применение флуоресцентных зондов. Характер получаемой с их помощью информации прежде всего зависит от локализации зондов по отношению к участкам молекулы фермента, вовлеченным в конформационные перестройки. Если мы ставим перед собой задачу уловить структурные сдвиги, индуцируемые связыванием лигандов в активном центре или их каталитическим превращением, мы должны использовать зонд, присоединяющийся к ферменту вне области активного центра.Глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа относится к числу ферментов, использующих субстраты анионного характера. Ранее было показано, что флуоресцентный зонд анионной природы 1-анилино8-нафталиясульфонат также связывается в области активного центра этого белка. С другой стороны, производные этеноцитозина, несущие положительный заряд, присоединялись в участках, отличных от активного центра этого фермента. В настоящей работе мы установили, что способность связывать зонды катионной природы вне области активного центра можно считать общей закономерностью, отражающей структурные особенности молекулы данной НДЦ-зависимой дегидрогеназы. Подробное исследование взаимодействия глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы с аурамином О показало, что этот зонд служит чувствительным индикатором конформационных изменений, индуцируемых связыванием лигандов в различных областях активного центра фермента, изолированного как из пекарских дрожжей, так и из глышц кролика. С помощью аурамина О удалось выявить конформационную неэквивалентность субъединиц тетрамера и показать, что она предсуществует в апоферменте. Использованный нали методически!! прием впервые позволил идентифищфовать в растворе конформацию субъединиц, обладающих высоким сродством к НАД и, следовательно, первыми вступающих в реакцию.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Кличко, Владимир Иванович

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Проведенные нами исследования позволяют сделать некоторые заключения о характере ассоциации субъединиц в молекуле ГАЩД.

Взаимодействие субъединиц в олигомере происходит таким образом, что в определенных условиях можно обнаружить их неэк- . вивалентность. В предыдущих исследованиях этот феномен наблюдали при кооперативном связывании кофермента или при модификации фермента "полуцентровыми" реагентами. Мы обнаружили, что неэквивалентность субъединиц дегидрогеназы проявляется при связывании зонда катионной природы - аурамина 0.

Апофермент из мышц кролика и пекарских дрожжей имеет два участка связывания А. Такая стехиометрия связывания зонда указывает на диыер-димерную организацию тетрамерной молекулы фермента. Следует заметить, что при взаимодействии с катионннш зондами асимметрия дегидрогеназ проявляется только с усложнением структуры при переходе к тетрамерному строению. АДГ из печени, которая является димером, связывает две молекулы А в равноценных независимых участках /62/» в то время как тетрамерная АДГ из дрожжей /61/ и ГАФД имеют только два участка связывания, по одному на димер. Такая точка зрения подтверждается тем фактом, что при инкубации ГАФД из мышц кролика в буфере ^е содер

V V «V жащем сгосшата, участки связывания А на ферменте исчезают, это явление может быть связано с переходом дегидрогеназы в конфор-мационное состояние, в котором ослаблены междимерные субъединичные взаимодействия.

А связывается в участках, расположенных вне активного центра ГАФД, что дает возможность исследовать фермент при образовании комплексов с субстратами и их аналогами.

В настоящее время хорошо известно, что связывание кофермен-та с ГАФД вызывает конформационные перестройки в молекуле фермента. Значительно меньше исследовано влияние субстрата З-ФГА на конформацию дегидрогеназы. Мы обнаружили, что образование комплекса с 3-ФГА сопровождается возникновением конформацион-ных изменений, которые имеют высокоспецифический характер и не возникают при связывании с дегидрогеназой его аналогов, это даёт повод считать, что не только кофермент, но и субстрат оказывает на структуру белка специфическое организующее влияние, необходимое для протекания каталитической реакции.

При переходе из апо- в холо-состояние фермента из мышц кролика участки связывания А сохраняются, но в случае дегидрогеназы из пекарских дрожжей происходит значительное снижение сродства белка к красителю, это указывает на различия структуры каталитической области ГАФД, изолированных из дрожжей и мышц кролика. Выявление и исследование этих различий может быть важным для понимания молекулярных механизмов кооперативное™ и функционирования гомологичных ферментов.

С другой стороны, образование комплекса с восстановленной ■ формой кофермента не .отражается на флуоресцентных характеристиках и прочности связывания зонда с ГАФД из обоих источников, сто служит веским указанием на различную ориентацию никотин-амидного кольца при связывании НАД и НАДН.

Связывание с дегидрогеназой аденинсодержащих фрагментов кофермента, АМФ, АДФ, АДФ-рибозы, вызывает конформационные перестройки структуры фермента, отличные от перестроек, индуцированных целой молекулой кофермента. эти изменения отражаются на флуоресцентных характеристиках связанного А. Аналогичный эффект адениновых нуклеотидов на флуоресценцию связанного А.описан для АДГ из печени, что свидетельствует об общих чертах строения и динамики конформационных изменений в НАД-зависимых дегидроге-назах.

Впервые нам удалось обнаружить, что НШ способен служить в качестве кофермента в реакции окисления 3-ФГА. Связывание НШ с дегидрогеназой вызывает конформационные перестройки фермента. Есть основания считать, что эти перестройки качественно сходны с изменениями, которые вызывает при связывании с ГА©Д целая молекула НАД. Действительно, при связывании НШ с ГАЩ из дрожжей наблюдается значительное снижение сродства белка к А, так как это происходит при связывании целой молекулы НАД. Эти результаты показывают важную роль взаимодействий,реализующихся в каталитической области активного центра и приводящих к формированию функционально активной конформации дегидрогеназы. Введение в эту область заместителя, тионитробензоата, не влияло на флуоресценцию и связывание с белком А. Однако оно блокировало передачу конформационных изменений»индуцируемых связыванием НАД и его аденинсодержащего фрагмента.

С другой стороны, избирательная модификация того же аминокислотного остатка иодацетатом и иодацетамидом не влияла на передачу конформационных сигналов из аденилатсвязывающей области в участок связывания А.

Таким образом, состояние каталитического участка оказывает влияние на возникновение и распространение конформационных изменений в различных областях фермента. Введение в эту область модификаторов разной природы оказывает различное влияние на протекание конформационных изменений, которое можно обнаружить при помощи флуоресцентного зонда - А.

ГАФД имеет два участка связывания А и четыре участка связывания кофермента и адениновых нуклеотидов. Причём, дегидроге-наза из мышц кролика связывает НАД в двух субъединицах с высоким и в двух с низким сродством. Нам удалось установить, что связывание А происходит в субъединицах с высоким сродством к коферменту, так как достаточно вытеснить адениновые нуклеотиды из двух субъединиц с высоким сродством к коферменту, чтобы полностью ликвидировать их влияние на флуоресценцию красителя. Следовательно, участки связывания А характеризуют структурные особенности субъединиц с высоким сродством к НАД, которые отсутствуют на субъединицах с низким сродством. Таким образом, впервые удалось описать асимметрические участки, характерные для конформации фермента в растворе и отличные от активного центра, а также определить их связь с функциональным состоянием субъединиц. Согласно схеме на рис.4, субъединица с высоким сродством к НАД первая вступает в катализ, но в каталитическом цикле каж-• дая из двух субъединиц функционального димера проходит через все промежуточные состояния. Следовательно конформация, способная связывать зонд, должна поочередно возникать то на одной, то на другой субъединице.

Анализ возникновения и распространения конформационных сигналов при связывании адениновых нуклеотидов с комплексом фермент-А, привел нас к заключению, что неэквивалентность молекулы ГАФД предсуществует в апоферменте. возникает вопрос, что же представляют собой участки связывания А? Могут ли взаимодействия в этих участках влиять на функционирование дегидрогеназы?

В настоящее время для ГАФД не описано модуляторов ферментативной активности, связывающихся вне активного центра. Многие исследователи считают, что в клетке активность дегидрогеназы в значительной мере заторможена благодаря влиянию адениновых нуклеотидов. Полученные нами значения Кд для адениновых нуклео-тидов в тройных комплексах с апоферментом и А на порядок ниже, чем найденные ранее другими авторами на основании кинетических исследований. Они, однако, близки к значениям, полученным в опытах по вытеснению нуклеотидами аналога кофермента /табл.2/. Это указывает на то, что в кинетических исследованиях были получены результаты, характеризующие другое функциональное состояние белка. иными словами, ГАФД в различных функциональных состояниях может иметь различные характеристики связывания адениновых нуклеотидов. это обстоятельство необходимо учитывать для правильного понимания механизмов регуляции ферментативной активности в условиях Ш VIVO.

Исследования, проведенные группой чешских авторов,показали, что в участках, ответственных за взаимодействие катионных зондов ю АДГ, могут связываться и другие положительно заряженные молекулы, в том числе и многие лечебные препараты. Они обнаружили, что в этой области происходит прочное связывание три-циклических психотропных агентов /71/. Авторы высказали предположение, что это взаимодействие может влиять на уровень ферментативной активности АДГ и на обмен веществ в целом при лечебном применении этих препаратов. Когда проводились эти исследования, не было известно о том, что аналогичная область имеется на ГАФД и, вероятно, на других НАД-зависимых дегидрогеназах. результаты* полученные к настоящему времени, указывают, что изучение взаимодействия дегидрогеназ /а может быть и других ферментов/ с лиган-дами, способными связываться в области присоединения катионных зондов,может пролить свет на действие некоторых терапевтических препаратов и объяснить механизм если не прямого, то побочного их влияния на обмен веществ в организме.

1. Обнаружена способность ГАФД из пекарских дрожжей и мышц кролика связывать катионный зонд - аурамин 0.

2. Аурамин 0 связывается с тетрамерной молекулой апофермента в двух равноценных и независимых участках с Кд, равными 4,5 х 10"% для фермента из пекарских дрожжей и 3,3 х !0~% для фермента из мышц кролика.

3. Инкубация апофермента из мышц кролика в буфере, не содержащем фосфата, сопровождается ослаблением междимерных взаимодействий и исчезновением участков связывания аурамина 0, но не влияет на ферментативную активность.

4. Апофермент из мышц кролика связывает аурамин 0 и НАД независимо, в то время как апофермент из пекарских дрожжей связывает аурамин 0 конкурентно по отношению к НАД и никотинамидмо-нонуклеотиду. Никотинамидмононукдеотид способен служить кофер-ментом в реакции окисления 3-ФГА, катализируемой дегидрогеназой из дрожжей.

5. Участки связывания аурамина 0 сохраняются при образовании комплексов дрожжевой и мышечной ГАФД с НАДН, адениновыми нуклеотидами, 3-ФГА и его аналогами - ОС-глицерофосфатом и глицериновым альдегидом, а также в комплексе фермент-НАДН-ацил.

6. Избирательная модификация цистеиновых остатков активного центра ГАФД из пекарских дрожжей ДТНБ блокирует передачу конфор мационных изменений из аденилатсвязывающего "кармана" в участок связывания аурамина 0, в то время как избирательная модификация этих цистеиновых остатков иодацетатом и иодацетамидом не оказывает влияния на распространение "конформационных сигналов".

7. Связывание 3-ФГА с ГАФД из мышц кролика и пекарских дрожжей вызывает специфические конформационные изменения, сопровождающиеся тушением флуоресценции связанного А. Аналоги субстрата а-глицерофосфат и глицериновый альдегид не оказывают аналогичного влияния при связывании с ферментом. Величина Кд для 3-ФГА в тройном комплексе с ферментом из пекарских дрожжей и аурамином 0 равна I х М.

8. Связывание аурамина 0 с ГАФД позволяет выявить предсу-ществующую неэквивалентность субъединиц апофермента. Участки связывания аурамина 0 на апоферменте из мышц кролика характеризуют структурные особенности субъединиц, обладающих высоким сродством к НАД.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Кличко, Владимир Иванович, Москва

1. Болотина И.А. /1973/ Изучение структуры белков методом кругового дихроизма. В сб. Итоги науки и техники, сер. Молекулярная биология I, 61-104, ВИНИТИ АН СССР, М.

2. Болотина И.А. /1975/ Применение спектрополяриметрии для изучения структуры мембранных белков. В сб. Итоги науки и техники, сер. Биофизика 4, 133-225, ВИНИТИ АН СССР, М.

3. Веллюз Л., Легран М., Грожан М. /1967/ Оптический круговой дихроизм. Мир, М. .

4. Витвицкий в.Н. /1973/ Исследование центров сывороточного альбумина, связывающих метиловый оранжевый, и изменений в связывании красителя при нагревании и действии трипсина. Мол. Еиол. 7, 6, 841-848.

5. Владимиров Ю.А., Добрецов Г.Е. /1980/ Флуоресцентные зонды в исследовании биологических мембран. Наука, М.

6. Добрецов Г.Е. /1975/ Применение флуоресцентных зондов для исследования мембран. В сб. Итоги науки и техники, сер. Биофизика 4, 86-132, ВИНИТИ АН СССР, М.

7. Добрецов Г.Е. /1975/ Исследование структуры белков методом флуоресцентных зондов. В со. Итоги науки и техники, сер. Молекулярная биология 6, 34-106, ВИНИТИ АН СССР, М.

8. Ю. Ермолин С.В., Кост A.A., Иванов М.В., Наградова Н.К. /1978/ нопроизводные цитозина как Флуоресцентные зонды при исследовании Д-глицеральдегид-З-фосфатдегидрогеназы. Докл. АН СССР 238, 245-248.

9. Иванов в.И. /1973/ Круговой дихроизм и структура комплементарных нуклеиновых кислот. В сб. Итоги науки и техники, сер. Молекулярная биология I, 105-140, ВИНИТИ АН СССР, М.

10. Иванов М.В., Асриянц P.A., Наградова Н.К. /1975/ Флуоримет-рическое определение связывания Фрагментов никотинамидаденин-динуклеотида с Д-глицеральдегид-З-фосфатдегидрогеназой. Докл. АН СССР 225, 6, 1438-1441.

11. Иванов М.В., Наградова Н.К. /1977/ Использование флуоресцирующей пробы для изучения активного центра Д-глицёральдегид-3-фосфатдегидрогеназы. Биохимия 42, 2, 211-222.

12. Кост A.A., Иванов М.В. /1980/ Этенопроизводные аденина и цитозина. Химия гетероциклических соединений 3, 291-305.

13. Ьфронец В.И., Головина Т.О., Воспельникова Н.Д., Сафронова м.И. /1976/ 0 двух механизмах обратимой инактивации глице-раль-з-фосфатдегидрогеназы. Докл. АН СССР 226, I22I-I224.

14. Наградова Н.К., Асриянц P.A. /1969/ Влияние pH на активность дрожжевой глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы. Биохимия 34, 102-107.

15. Наградова Н.К., Ворона М.К., Асриянц P.A. /1969/ Влияние адениновых нуклеотидов на активность глицеральдегид-3-фос-фатдегидрогеназ разного происхождения. Биохимия 34, 627-631.

16. Наградова Н.К., Асриянц P.A. /1970/ Активация солями дрожжевой глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы. Биохимия 36, 588-594.

17. Наградова Н.К., Асриянц P.A. /19^1/ Взаимодействие"гидро-юобной пробы"-1-анилино-3-наФталинсульфоната с глицераль-дегид-3-фосфатдегидрогеназой^ Докл. АН СССР 199 , 474-477.

18. Наградова Н.К., Асриянц P.A., Иванов М.В. /1972/ Изучение связывания 1-анилино-8-нафталинсульфоната глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназой. Биохимия 37, 299-304.

19. Наградова Н.К., Крюкова С.С., Прасолова И.Д. /1972/ Изучение свойств ГАФД из сердечной мышцы кролика. Биохимия 37, 556-561.

20. Паркер С. /1972/ Фотолюминесценция растворов. Мир, М.

21. Полетаев А.И. /1976/ Круговой дихроизм комплексов ДЖ. В сб. Итоги науки и техники, сер. Молекулярная биология 8, П, 180241, ВИНИТИ АН СССР, М.

22. Фадеева М.Д. /1969/ Взаимодействие нуклеиновых кислот с основными флуоресцентными красителями. В сб. механизмы проницаемости, возбуждения и повреждения клетки 13, 5-15, Наука, Ленинград.

23. Франк Г.М., Теплова В.В., Карнаухов В.И. /1971/ Люминесцентные спектральные исследования распределения полярных и гидрофобных групп в саркомере. В сб. Биофизика живой клетки 615, Институт Биологической физики АН СССР, Пущино-на-Оке.

24. Черницкий Е. А. /19'?2/ Люминесценция и структурная лабильность белков в растворе и клетке. Наука и техника, Минск.

25. Юценфренд С. /1965/ Флуоресцентный анализ в биологии и медицине. Мир, М.

26. Adams M.J., Ford G.C., Koekoek R., Lenbz P.J., McPherson A.J., Rossmann M.G., Smiley I.E., Scheevibz R.W., Wonacobb A.J. (1970) Sbrucbure of lacbabe dehydrogenase ab 2,8 A resolubion. Nabure (London) 227, 1098-1103.

27. Adams M.J., McPherson A.J., Rossmann M.G., Schevibz R.W., Wonacobb A.J. (1970) The sbrucbure of bhe nicobinamide-adenine dinucleobide coenzyme when bound bo lac babe dehydrogenase.

28. J. Mol. Biol. 51, 1, 31-38.

29. Adams M.J., Liljas A., Rossmann M.G. (1973) Molecular symmebry axes and subunibs inberfaces in cerbain dehydrogenases. J. Mol. Biol. 76, 4, 533-537.

30. Babke J., Kelebi T., Bisbher E. (1974) The mechanism of reacbion of cys-149 of D-glyceraldehyde-3-phosphabe dehydrogenase wibh p-hydroxy mercuribenzoabe. Eur. J. Biochem. 46, 307-315.

31. Bell J.E., Dalziel K. (1975) Sbudies of coenzyme binding bo rabbi b muscle glyceraldehyde-3-phosphabe dehydrogenase. Biochim. biophys. Acba 391, 249-258.

32. Bernhard S.A., MacQuarrie R.A. (1973) Half-sibe reacbiviby and bhe "induced-fib" hypobhesis. J. Mol. Biol. 74, 73-78.

33. Berni R., Mozzarelli A., Pelacani L., Rossi G.L. (1977) Cabaly-bic and regulabory properbies of D-glyceraldeh.yde-3-phosphabe dehydrogenase in bhe crysbal. J. Mol. Biol. 110, 2, 405-415.

34. Berni R., Mozzarelli A., Rossi G.L. (1979) Crysballographic symmebry and coenzyme binding properbies of D-glyceraldehyde-3-phos-phabe dehydrogenase from bhe bail muscle of Palinurus vulgaris. J. Biol. Chem. 254, 16, 8004-8006.

35. Biesecker G., Harris J.I., Thierry J.C., Walker J.E., Wonacobb A.J. (1977) Sequence and sbrucbure of D-glyceraldehyde-3-phos-phabe dehydrogenase from Bacillus sbearobhermophilus. Nabure (London) 266, 328-333.

36. Blake C.C.F., Evans P.R. (1974) Sbrucbure of horse muscle phos-phoglycerabe kinase. Some resulbs of bhe chain conformabion, subs bra be binding and evolubion of bhe molekular from a 3 A fourier map. J. Mol. Biol. 84, 585-601.

37. Block W., MacQuarria H.A., Bernhard S.A. (1971) The nucleotide and acyl group content of native rabbit muscle glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase. J. Biol. Chem. 246, 780-790.

38. Bock R.M., üng N.S., Morell S.A., Iapton S.H. (1956) Ultraviolet absorption spectra of adenosine-5-triphosphate and related fji-ribonucleotides. Arch. Biochem. Biophys. 62, 253-254.

39. Bode J., Blumenstein M., Raffery M.A. (1975) Nonidentical alky-la tion sites in rabbit muscle glyceraldehyde-3-phosphabe dehydrogenase. Biochemistry 14, 6, 1146-1152.

40. Bode J., Blumenstein M., Raffery M.A. (1975) Nuclear magnetic resonance studies of structure and function relationships in trifluoroacetonylated rabbit muscle glyceraldehyde-3-phos-phabe dehydrogenase. Biochemistry 14, 6, 1153-1160.

41. Boross L. (1967) Secondary SH-disulfide exchange reactions following the modification of nucleophilic SH-groups in D-glycer-aldehyde-3-phosphabe dehydrogenase with DTNB. Acta. Biochim. Biophys. Hung. 4, 57-69.

42. Boyer P.D. (1979) The binding-change mechanism of ATP sinthesis. In "Membrane bioenergetics (Eds. Lee C.P.,Schatz G.,Ernster L.), p, 461-479,Addison-Wesley Publishing Company, Masachusetts.

43. Bradley D.E., Wolf M.K. (1959) Aggregation of dyes bound bo po-lyanions. Proc. Nab. Acad. Sei. USA 45, 7, 944-952.

44. Brand L., Gohlke J.R., Rao D.S. (1967) Evidence for binding of rose bengal and anilinonaphbalene-sulfonabes at the active site regions of liver alcohol dehydrogenase. Biochemistry 6, 11, 3510-3518.

45. Brand K., Tsolas 0., Horeker B.L. (1969) Evidence for a specific function for hisbidine residues in transaldolase. Arch. Biochem. Biophys. 130, 521-529.

46. Brand L., Gohlke J.R. (1971) Nanosecond bime-resolved fluorescence spectra of a protein-dye-complex. J.Biol.Chem. 246, 7, 2317-2324.

47. Bränden C.-I., Rossmann M.G. 0970) In "Pyridine nucleotide dependent dehydrogenases (Ed. Sand H.) p. 133-134, Springer-Verlag, Heidelberg, New York.

48. Bränden C.-I., Eklund H., Nordström B., Boiwe T., Söderland C.} Zeppezauer E., Ohlsson J., Akeson A. (1973) Structure of liver alcohol dehydrogenase at 2,9 A resolution. Proc.Nat.Acad.Sei. USA 70, 2439-2442.

49. Buchner U,, Pord G.C., Moras D., Olsen K.W., Rossmann M.G.1973) D-Gljiceraldehyde~3 phosphate dehydrogenase: three-dimensional Structure and evolutionary significanse. Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 70, 3052-3054.

50. Buchner M., Pord G.C., Moras D., Olsen K.W. and RossmannM.G.1974) Three-dimensional Structure of D-glyceraldehyde-3 phosphate dehydrogrnase. I. Mol. Biol. 90, 1, 25-49.

51. Buehner M., Pord G.G., Moras D., Olsen K.Y/., Rossmann M.G. (1974) Structure determination of crystalline lobster D-glyce-raldehyde-3-phosphate dehydrogenase . J. Mol. Biol. 82, 563-585.

52. Cardon J.W., Boyer P.D. (1982) Subunit Iuteraction in Catalysis. Some experimental and theoretical approaches with glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase. J. Biol. Chem. 257, 13, 7615-7622.

53. Chappelet-Fordo D., Iwatsubo M., Lazdunski M. (1974) Negative cooperativity and halt-of-the-sites reactivity. Alcal'ine. phosphatases of Escherichia coli with Zn2+, Co2+, Cd , Mn^4" and Cu2+in the active sites. Biochemistry 13» 3754-3762.

54. Chen R.P. (1977) Pluorescence of free and protein-bound auramine 0. Arch. Biochem. Biophys. 179» 672-681.

55. Conrad R.H., Heitz J.R., Brand L. (1970-) Characterization of afluorescent complex between auramine 0 and horse liver alcohol dehydrogenase. Biochemistry 9» 7, 1540-1546.

56. Constantimdes S.M., Deal W.C., Jr (1969) Reversible dissociation of tetrameric rabbit muscle dlyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase into dimers or monomers by adenosine triphosphate. J. Biol. Chem. 224, 5695-5702.

57. Constantinides S.M., Deal W.C. Jr (1970) Reversible dissociation of tetrameric 7,4S rabbit muscle glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase into 4,4S dimers by ammonium sulfate andinto 3,2S monomer by KC1. J. Biol. Chem. 245, 146-253.

58. Conway A., Koshland D.E. Jr (1968) Negative cooperativity in enzyme action. The binding of diphosphopyridine nucleotide to glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase. Biochemistry 7, 40114022.

59. Cook R.A., Koshland D.E. Jr (1970-) Positive and Negative cooperativity in yeast glyceraldehyde-3-phosT>hate dehydrog nase. Biochemistry 9, 3337-3342.

60. Mc Daniel C.P., Kirtley M.E. (1974) The interaction of glyceral-dehyde-3-phosphate dehydrogenase with human erythrocyte membranes. Biochem. Biophys. Res. Com. 65, 1196-1200.

61. Eby D., Kirtly M.E.,(1971) Interaction of nicotinamide-adenine dinucleotide and it's analogs with glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogemase. Biochemistry 10, 14, 2677-2682.

62. Eby D., Kirtly M.E. (1976) Cooperativity and noncooperativity in the Binding of NAD analogues to Rabbit Muscle glyceraldehy-de-3-phosphate dehydrogenase. Biochemistry 15, 10. 2168-2171.

63. Edelman G.M., Mc Clure W.O. (1968) Fluorescent probes and the Conformation of proteins . Acc. Chem. Res. 1, 3, 65-70.

64. Einarsson R., Zeppezauer M. (1975) Catalysis of the photochemical dismutation of N-methylacridinium Cation to by hydrophobic Sites of horse-lifer alcohol dehydrogeneseand humanserum albumin. Eur. J. Biochem. 59, 1, 295-304.

65. Eklund H., Branden C-J. (1976) Structural Comparisons of Mammalian, Yeast and Bacillar Alcohol dehydrogenases. J. Mol. Biol. 102, 1, 61-73.

66. Ellman G.L. (1959) Tissue sulfhidryl group^Arch. Biochem. Biophys. 82, 70.

67. Elody P., Szorenyi E. (1956) Crystallization and comparative Studies of D-glyceraldenyd-3-phosphate dehydrogenase from muscle of various mammals. Acta. Physi-ol. Acad. Scien. Hung. 2, 339-350.

68. Ferdinand W. (1964) The isolation and specific activity'of rabbit muscle D-glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase-. Biochem. J. 92, 578-581.

69. Fife T.H., Rikihisa T. (1970) Reactionof glyceraldehyde-3-phospa-te dehydrogenase with aliphatic aldehyde. Biochemistry 9, 40644067.

70. Fife T.H., Rikihisa T., Benjamin B.M. (1971) Reaction of aromatic aldehydes with glyceraldehyde-3-phospate dehydrogenase. Biochemistry 10, 3875-3880.

71. Forster T. (1959) Transfer mechanisms of electronic excitation. Faraday Soc. Discuss. 27, 7-17.

72. Foucault G., Fraore F., Levilliers J., Pudles J. (1974) Structure-Function Relationship in Rabbit Muscle gl :ceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase. Irimitrophenylation of the lysine Residues. Eur. J. Biochem. 46, 1, 43-57.

73. Foucaut G., Bodo J.-M., Nakano M. (1981) Structure and Reactivity Relationship in glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase. Dinitrophenylation of Cysteine Residues of Yeast and Rabbit Muscle Enzymes, Eur. J. Bioch. 119, 3, 625-632.

74. Garavito R»M., Berger D. and Rossmann M.G. (1977) Molecular asymmetry in an Abortive Ternary Complex of lobster glyceraldehyde-3— phosphate dehydgenase. Biochem. 16. 20. 4393-4398.

75. Gelb W., Oliver E., Brandts J.F., Nordin J.H. (1970) Unusual Kinetic transition in honeybee glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase. Biochemistry 9, 16, 3228-3235.

76. Golovina T.O., Muronetz V.I., Nagradova N.K. (1978) Half-of-thesites reactivity of rat skeletal muscle D-glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase. Biochim. Biophys. Acta. 524, 15-25.

77. Grazi E., Balboni G., Brand K., Tsolas C. (1977) Halt-of-the-sites reactivity and all-of-the-sites substrate binding in transaldolase. Arch. Biochem. Biophys. 179, 131-135.

78. Harada K., Wolfe R.C. (1968) Malic dehydrogenase. VI. A kinetic study of hydromalonate inhibition. J. Biol.-Chem. 243, 4123-4130.

79. Harada K., Y/olfe R.C. (1968) Malic dehydrogenase. VII. The catalytic mechanism and possible role of identical protein submits J.Biol. Chem. 243, 4131-4137.

80. Harrigan P.J., Trentham D.R. (1971) Reactions of D-glyceralde-hyde-3-phosphate dehydrogenase with chromophoric thiol reagents. Biochem. J. 124, 573-580.

81. Harrigan P.J., Trenth jn D.R. (1973) Kinetic studies on the acy-lation of pige muscle D-glyceraldehycle-3-phosphate dehydrogenase by 1, 6^iph.osph°gly cerate and of proton uptake and release in the .verall enzyme mechanism. Bioche<m*, J. 135, 695-703.

82. Harrigan P.J., Trentham D.R. (1974) Kinetic studies of oxidized nicotinamide-adenine dinucleotide-facilitated reactions of D-glyceraldehyde-3-ph08phate dehydrogenase. Biochem. J. 143, 353363.

83. Harrington W.F., Karr G.M. (1965) Subunit structure of D-glyce-raldehyde-3-phosphate dehydrogenase. J. Mol. Biol. 13, 885-889.

84. Harris J.I., Perham R.N. (1968) Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase from pig musche. Nature 219, 1025-1028.

85. Harris J.I. (1970) Primary structure and activity of D-glyceral-dehyde-3-phosphate dehydrogenase. In Pyridine-nucleotide dependent dehydrogenases, (ed. H. Sund), p. 57, Springer Verlag, Berlin.

86. Hartman S.C. (1963) The interaction of 6-diazo-5-oxo-1-norleu-cine with phosphoribosyl pyrophosphate amidotransferase J. Biol. Chem. 238. 3036-3047.

87. Heitz J.R., Brand L. (1971) Relation of the auramine 0 binding site to the active site of horse liver alcohol dehydrogenase. Biochemistry 10, 14, 2695-2700.

88. Henis Y.J., Levitzki A. (1980) The sequential Nature of the Negative Cooperativity in Rabbit Muscle glyceraldehyde-3-phospha-te dehydrogenase. Eur. J. Biochem. 112, 1, 59-73.

89. Henis Y.J., Levitzki A. (1980) Mechanism of negative cooperativity in glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase deduced from ligand compt-ation experiments. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77. 9, 5055-5059.

90. Hill E., Fsernoglou D., Webb L., Banaszak L.J. (1972) Polypeptide conformation, of cytoplasmic malate dehydrogenase from anelectron density map at 3,0 Ang resolution. J. Mol. Biol. 72, . 577-591.

91. Hocking J.B., Harris J.I. (1980) D-Crlyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase aminoasid sequence of the enzyme from the Extremehermophile Fhermus aq;uaticu.s. Eur. J. Biochem. 108, 2, 567579.

92. Holbrook J.J. (1972) Protein fluorescence of lactate dehydrogenase. Biochem. J. 128, 921-931.

93. Kant G.A., Steck T.L. (1973) Specificity of the associationof glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase with isolated hymen erytrocyte membranes. J. Biol. Chem 248, 8457-8464.

94. Karpatkin S., Helmraich E., Cori C.F. (1964} Regulation of glycolysis in muscle. II. Effect of stimulation and epinephrine' in isolated frog sartorius muscle. J. Biol. Chem. 239» 31393145.

95. Keleman N., Kelershohn N., Seydoux P. (1975) Sturgeon glyceral-dehyde-3-phosphate dehydrogenase. Formation of binary complexes with coenzymes and substrates. Eur. J. Biochem. 57, 69-78.

96. Keleti T.,(1966) Studies on D-glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase XXII. D-Glyceraldehyde oxidation. Acta, physiol. Acad. Sci. hung. 29, 2, 101-106.

97. Kellershohn N., Seydoux F.J. (1979) Functional asymmetry of tetrameric glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase in the transient kinetics of reductive dephosphorylation of 1,3-diphospho-glycerate. Biochemistry 18, 12, 2465-2470.

98. Kirtlay K.E., Koshland D.E. Jr. (1970) The properties of rabbit muscle glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase laleled with a "reporter group". J. Biol. Chem 245, 276-286.

99. Klotz J.M. (1947) The effects of salts and proteins in the spectra of some dyes and indicators. Chem. rev. 41, 373.

100. Klotz J. M., Valker P.M., "Pivan R.B. (1946) The binding of organic ions by proteins. J. Arner. Chem. Soc. 68, 1486-1490.

101. Kobayashi Y., Nishimura M. (.1972) Fluorescence change of auramine 0 bound to chromatophores of rhodospirillum rubrum-analy-sis in connection to ionic environment and ion transport. J. Biochem. 71, 2, 275-284.

102. Koshland D.E., Jr. (1970) The molecular basis for enzyme regulation. In the enzymes 1, 341-396.

103. Kovar J., Skurskjf L. (1973) Pluorescense study of liver-alcohol-dehydrogenase complexes with berberine and other ligands. Eur. J. Biochem. 40, 233-244.

104. Kovar J., Pavelka S. (1976) Characterization of binding site of horse liver alcohol "dehydrogenase for berberines and auramine 0. Collection. Gzechoslov. Chem. Commun 41, 1081-1095.

105. Kovar J., Skurskjf L., Blaha K. (1976) Chloroprothixene binding into the active site pocket of horse liver alcohol dehydrogenase. Collection Gzechoslov. Chem. Commun. 41, 928-940.

106. Kovar J., Skurckjf L.r Protiva M. (1978) Structural factors affecting interactions of tricyclic psychotropic drugs with alcohol dehydrogenase. Coll. Gzech. Chem. Commun. 43, 8, 2068-2081.

107. Kovar J., Durrova E., Skursk^ L. (1979) Differences in the interactions of liver alcohol dehydrogenases with probes binding into the substrate pocket. Eur. J. Biochem. 10t, 507-514.

108. Krebs R.G. (1953) Yast glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase. J. Biol. Chem. 200, 471-478.

109. Lazdunski M., Petiteler C., Chappelet D., Lazdunski C. (1971) Plip-flop mechanisin in enzymology. A model. The alcaline phosphatase of Escherichia coli. Eur. J. Biochem. 20, 124-129.

110. Levitzki A., Stallcup W.B., Koshland D.E., Jr. (1971) Half-of-the-sites reactivity and the conformational states of cytidine triphosphate synthetase. Biochemistry 10, 3371-3378.

111. Levitzki A. (1973) Ligand induced half-of-th.e-site reactivity in rabbit muscle glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase. Bio-chem. Eiophys. Res. Com. 54» 3, 889-893.

112. Levitzki A. (1974) Half-of-the-site and all-of-the-site reactivity in rabbit muscle glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase. J. Mol. Biol. 90, 451-458.

113. Linewear H., Burk P. (1934) The determination of enzyme dissociation constants. I. Amer. Chem. Soc. 56, 658-666.

114. Listowski I., Furfine O.S., Beitheil I.I., Endlard S. (1965) Coenzyme-induced changes in the optical rotatory dispersion properties of glyceraldehyde-3-phosphaté dehydrogenase. I. Biol. Chem. 240, 4253-4258.

115. Luisi P.L., Bignetti E. (1974) The half-of-the-sites reactivity of horse aie ohol dehydrogenase in the presence of alcohol substrates. I. Mol. Biol. 88, 643-670.

116. Mac Quarrie R., Bernhard (1971) Subunit conformation and catalytic function in rubbit muscle glyceraldehyd-3-phosphate dehydrogenase I. Mol. Biol. 55, 181-192.

117. Malhotra O.P., Bernhard S.A. (1981) Role of nicotinamide adenine dinucleotide as an effector in formation and reactions of acylglyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase. Biochemstry 20, 19, 5529-5538.

118. Martinez-Carrion M. and Raftery (1973) Use of a fluorescent probe for the study of ligand by the cholinergic receptor of Torpedo calitornica. Biochem. Biophys. Researh. Com. 55, 4, 1156-1164.

119. Meunier J.C., Dalzieltf. (1978) Kinetic studies of glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase from rabbit muscle. Eur. J.Biochem.82, 2, 483-492.

120. Mockrin S.C., Byers L.D., Eohland D.E. (1975) Subunit interaction in yeast glyceraldehyde-3-phsphate dehydrogenase. Biochemistry. 14, 5428-5437.

121. Monod J., Wyman J., Changeux J.P.(1965) On .the nature of allosteric transitions. A plausible model. I.Mol.Biol. 12, 88-118.

122. Mooser G., Schulman H. and Sigman D.S. (1972) Fluorescent.probes of acetilcholinesterase. Biochemistry. 11, 9, 1595-1602.

123. Mooser G., Sigman D. (1974) Ligand binding properties of acetylcholinesterase determined with fluorescent probes. Biochemistry. 13, 11, 2299-2307.

124. Moras P., Olsen K.W., Sabesan M.N., Buehner M., Ford G.C., Rossmann M. G. (1975^ Studies of asymmetry in the three dimensional structure of lobster D-glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase. J.Biol.Chem. 250, 9137-9162.

125. Muronetz V.I., Golovina T.O., Nagradova N.K. (197§) Glyceraldehy-de-3-phosphate dehydrogenase from rat skeletal muscle adenine nucleotide induced inactivation. Arch. Biochem. Biophys. 177, 16-23.

126. Nagradova N.K., Guseva U.K. (1971) Effect of anions on the structure of glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase from rat skeleta muscle. Biochem. Biophys. Res. Com. 43, 840-846.

127. Nagradova N.K., Muronetz V.I., Grozdova I.D., Golovina T.O.1975) Cold inactivation of glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase from rat sceletal muscle. Biochim. Biophys. Acta 377, 15-25.

128. Narayanan R. and Balaram P. (1978) Homologous cholinergic flu-.orescent pro es. Synthesis and fluorescence properties. FEBS Lett. 93, 1, 38-42.

129. Oguchi M., Certh E., Fitzgerald B., Park J.H. (1973) Regulation of glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase by phosphocreatine and aden, sine triphosphatalV . Factors affecting in vivo cotrol of enzymatic activity. J. Biol. Chem. 248, 5571-5576.

130. Ohlsson J., Nordstrom B., Branden K.-I. (1974) Structural and functional similarities within the coensyme binding domaine of dehydrogenase. I. Mol. Biol. 89, 339-354.

131. Olsen K.W., Moras P., Rossman M.G. (1975) Seguence variability and structure of D-glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase. J. Biol. Chem. 250, 9313-9321.

132. Olsen K.W., Garavito R.H., Sabesan M.N., Rossman M.G. (1976) Anion bindins sites in the active center of D-glyceraldehyde3.phosphate dehydrogenase. I. Mol. Biol. 107, 4, 571-576.\

133. Olsen K.W., Gavavito R.LT., Sabesan M.N., Rossman M.G. (1976) Studies of oenzyme binding to glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase. I. Mol. Biol. 107, 4, 577-584.

134. Ovadi J., Batke J., Bartha P., Keleti T. (1979) Effect of asso-ciation-diccociation on the cataly tic properties of glyceral-dehyde-3-phosphate dehydrogenase. Arch. Biochem. Biophys. 193, 28-33.

135. Pabst Laboratories Circular OR 18 Milwan Kee, Wisconsin (1961) Ultraviolet ab/sorption spectra of pyridine nucleotide conzymes and coenzyme analogs.

136. Park J.H., Merwether B.P., Clodfelder L.W., Cunningham L.W. (1961) The hydrolysis of p-nitrophenyl acetate catalyzed by 3-phosphoglyceraldehyde dehydrogenase. J. Biol. Chem. 236, 1, 136-141.

137. Peczon B.D., Spivey H.O. (1972) Catalitic sites in rabbit muscle glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase. Their number and their kinetic and spectral properties. Biochemistry 11, 12, 22092217.

138. Perham R.N., Harris J.I. (1963) Amino asid sequences around the reactive cysteine residues in glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenases. I. Mol. Biol. 7, 316-320.

139. Perham R.N. (1969) The comparative structure of maminalian gly-ceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase. Biochem. J. 1117, 17-21.

140. Price N.C., Radda G.K. (1971) The binding of NAD to rabbit muscle glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase studied by protein fluorescence quenching. Biochim. Biophys. Acta 235, 27-31.

141. Racker E., Krimsky J. (1952) The mechanism of oxidation of aldehydes by glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase. J. Biol. Chem. 198, 731-743.

142. Reynolds C.H., Dalziel K.C. (1979) Factors affecting coenzyme binding and subunit interactions in glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase. Biochim. Biophys. Acta 567, 287-294.

143. Rosenberry T.L. and Neuman E. (1977) Interaction of ligand with acetylcholinesterase. Use of temperature-jump relaxation kinetcs in the binding of specific fluorescent ligands. Biochemistry 16, 17, 3870-3878.i

144. Rossman M.G., Moras D., Olsen K.W. (1974) Chemical and biology-cal evolution of a nucleotide-binding proteins. Natura 250, 194199.

145. Rossmann M.G., Agros P. (1977) The taxonomy of protein structure. I. Mol. Biol. 89, 24-32.

146. Scatchard G. (1949) The attractions of proteins for small molecules and ione. Ann. N.Y. Acad. Sci 51, 660.

147. Schlessinger J., Levitzki A. (1974) Molecular basis of negative cooperativity in rv.bbit muscle glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase. I. Mol. Biol. 82, 547-562.

148. Schulz G.E., Schirmer R.H. (1974) Topological comparison of adenyl kinase with other proteins. Mature 250, 142-144.

149. Seydoux F.I., Keleman N., Kellershohn N., Roucous C. (1976) Specific interaction of 3-phosphoglycerQyl-glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase with coenzymes. Eur. J. Biochem. 64, 2, 481-489.

150. Shibata Y., Kronman M.J. (1967) Inactivation of glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase. Arch. Biochem. Biophyc. 118, 410-419.

151. Sigman D.S. and Glazer A.N. (1977) The site of auramine 0 binding to horse liver alcohol dehydrogenase. J. Biol. Chem. 247, 2, 334-341.

152. Simpson R.T., Vallee B.L. (1970-) Negative homotropic interactions in binding of substrate to alcaline phosphatase of Escherichia coli. Biochemistry 9, 953-958.

153. Skurskj L., Kov^rtJ.(l972) Inhibition of LADH by berberine and some related alkaloids. In structure and function of oxidation-reduction enzymes (eds. Akeson A, Enrenberg A), v. 18, p. 653662, Pergamon press, Oxford-N.Y.-Toronto-Sydney-Baunschweig.

154. Smith C.M., Velick S.F. (1972) The glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenases of liver and muscle. Cooperative interactions and conditions for functional reversibility. J. Biol. Chem. 247, 273-284.

155. Smith G.D., Schachman H.K. (1973) Effect of D20 and nicotinamide adenine dinucleotide on the sedimentation properties and structure of glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase. Biochemistry 12, 3789-3801.

156. Spector A.A., Fletcher J.E. and Ashbrook J.D. (1971) Analysis of long-chain fatty acid binding to bovine serum albumin by determination of stepwise equilibrium constants. Biochemistry 10, 17, 3229-3232.178,179180181182183184185186187188189190191

157. Stallcup W.B., Коshiand D.E. Jr. (1972) Half-of-the-site reactivity of yeast glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase. Biochem. Biophys. Res. Com. 49, 4, 1108-1114.

158. Stallcup W.B., Коshiand D.E. Jr. (1973) Half-of-the-sites reactivity and negative co-operativity. The case yeast glycaralde-hyde-3-phosphate dehydrogenase. I. Mol. BriL. 80, 41-62.

159. Stallcup W.B., Коshiand D.E. Jr. (1973) Half-of-the-site reactivity in the catalytic mechanism of yeast glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase. I. Mol. Biol. 80, 77-9.1.

160. Steitz T.A., Fletterick R.J., Anderson W.F. (1976) High resolution X-ray structure of yeast nexokinase, an allosteric protein exhibitiong a non-symmetric arrangement of subunits. I. Mol. Biol. 104, 1, 197-222.

161. Steitz T.A., Anderson W.F., Fletterick R.J., Anderson C.M. (1977) High resolution crystal structures of yeast hexokinase complexes with substrates, activators and intibitors. J. Biol. Chem. 252, 13, 4494-4500.

162. Stern 0., Voimer M. (1919) Phvs. z . 20, s, 183. Цитируется по Владимиров Ю.А.,добрецов Г.Е. /1980/ Флуоресцентные зонды в исследовании биологических мембран. Наука,М.

163. Stone А.Ъ., Bradly D.F. (1961) Aggregation of acridine orange bound to polyanionss The stacking tendency of deoxyribonucleic acids. J. Amer. Chem. Soc. 83, 17, 3627-3634.

164. Taylor E.L., Lowry C. (1956) The molecular weights of some crystalline enzymes from muscle and yeast. Biochem. Biophys. Acta 20, 109-14.

165. Trentham D.R. (1968) Aspects of the chemistry of D-glyceralde-hyde-3-phosphate dehydrogenase. Biochem. J. 109, 603-612.

166. Trentham D.R. (1971) Rate-determining processes and the number of simultaneously active site of D-glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase. Biochem. J. 122, 71-77.

167. Tsolas 0., Horeker B.L. {1976) Half-of-the sites reactivity of trans^aldolases titration of the active sites and characterisation of the slow reaction catalized by the second subunits. Arch. Biochem. Biophys. 173, 577-585.

168. Velick S.F. (1958) Fluorescense spectra and polarization of glyceraldehyde-3-phosphate and lactic dehydrogenase coenzyme complexes. J. Biol. Chem. 233, 1455-1467.

169. De Vijlder J.J.M., Slater E.C. (1968) The reaction between NADand rabbit muscle glyceraldehydephosphate dehydrogenase. Biochim. Biophys. Acta 167, 23-34.

170. De Vijlder J.J.M., Boers W., Staler E.C. (1969) Binding and properties of NAD in glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase from lobster-tail muscle. Biochem. Biophys. Acta. 191, 214-220.

171. De Vijlder J.J.M., Harmsen B.J.M. (1969) Binding of NAD to rabbit-muscle glyceraldehydephosphate dehydrogenase as studied by optical rotatory dispersion and circular dichroism. Biochim. Biophys. Acta. 178, 434.

172. Walker J.E., Carne A.F., Runswick M.J., Bridgen J., Harus J.I. (1980) D-Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase complete amino-asid sequence of the enzyme from Bacillus stearothermo-philus. Eur. J. Biochem. 108, 2, 549-565.

173. Wassarman P.M., Major J.P. (1969) The reactivity of the sulfhyd-ryl group of lobster muscle glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase. Biochemistry 8, 1076-1082.

174. Watson H.C., Duce E., Mercer W.D. (1972) Low resolution structure of glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase. Nature new Biology 240, 130-133.

175. Weber G., Laurence D.J.R. (1954) Fluorescent of adsorption in aqueous solution and on the solid phase. Biochem. J. 56, 31.

176. Weber G., Young L.B. (1964) Fragmentation of bovine serum albumin by pepsin. J. Biol. Ohem. 239»1415.

177. Wicken J.S. and Woody R.W. (1973) Circular dichroism of liver alcohol dehydrogenase Complexes with auramine 0. Biochemistry 12, 18, 3459-3466.

178. Wonacott' A.J. and Biesecker G. (1977-)- Symmetry and NAD dependent structural cha ges in D-glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase» In Pyridine nucleotide dependent dehydrogenases (ed. Sund, H) p. 140-156.

179. Zapponi M.C., Ferri G., MichiottL., Forcina B.G. (1976) A structural study of pig liver glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase. Biochim. Biophys. Acta. 439» 38-46.