Изучение ассоциаций полиморфизма генов факторов некроза опухолей и их рецеп-торов с формированием рака молочной железы

Луговая, Ольга Владимировна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Изучение ассоциаций полиморфизма генов факторов некроза опухолей и их рецеп-торов с формированием рака молочной железы
ВАК РФ 03.02.07, Генетика

Автореферат диссертации по теме "Изучение ассоциаций полиморфизма генов факторов некроза опухолей и их рецеп-торов с формированием рака молочной железы"

На правах рукописи

ЛУГОВАЯ Ольга Владимировна

ИЗУЧЕНИЕ АССОЦИАЦИЙ ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНОВ ФАКТОРОВ НЕКРОЗА ОПУХОЛЕЙ И ИХ РЕЦЕПТОРОВ С ФОРМИРОВАНИЕМ РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

03.02.07 - генетика

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

2 5 ОПТ2012

Белгород-2012

005053678

Работа выполнена в Федеральном государственном автономном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Белгородский государственный национальный исследовательский университет» Минобрнауки РФ

Научный руководитель: Должиков Александр Анатольевич

доктор медицинских наук, профессор

Официальные оппоненты: Иванов Владимир Петрович

заслуженный деятель науки РФ, доктор медицинских наук, профессор, ГБОУ ВПО «Курский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития РФ, зав.каф. биологии, медицинской генетики и экологии

Голубцов Виктор Иванович

доктор медицинских наук, профессор, ГБОУ ВПО «Кубанский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития РФ, зав. каф. биологии с курсом медицинской генетики

Ведущая организация:

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Российский университет дружбы народов» Минобрнауки РФ

Защита диссертации состоится (^»¿м)^ 2012 года в часов на

заседании совета по защите диссертаций на соискание учёной степени кандидата наук, на соискание учёной степени доктора наук Д 212.015.13 при ФГАОУ ВПО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет» по адресу: 308015, г. Белгород, ул. Победы, 85

С диссертацией можно ознакомиться в Научной библиотеке ФГАОУ ВПО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет»

Автореферат разослан ОЧ7аиУ/и(1- 2012 г.

Ученый секретарь

совета по защите диссертаций на соискание учёной степени кандидата наук, на соискание учёной степени доктора наук Д 212.015.13 , доктор биологических наук

В.И. Кочкаров

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы. Рак молочной железы (РМЖ) неизменно занимает первое место в структуре онкологической заболеваемости женщин в экономически развитых странах. В 2009 г. в России зарегистрировано 54315 новых случаев рака молочной железы, что составляет 20,1% общей онкоза-болеваемомости. По сравнению с 2004 г. прирост составил 10,3%, средний показатель заболеваемости - 44,2 на 100 тысяч женского населения [Давыдов М.И., Аксель Е.М., 2011].

В настоящее время серьезной проблемой в клинической онкологии при планировании терапии РМЖ является значительная вариабельность чувствительности опухолей к лечебным мероприятиям в связи с выраженной их морфологической, иммунологической и генетической гетерогенностью К числу биологически значимых тканевых маркеров рака молочной железы относятся рецепторы стероидных гормонов: эстрогенов и прогестерона, а также рецепторы эпидермального фактора роста II типа (белок Her2/neu) Гормоно-зависимые опухоли молочной железы, содержащие оба, или хотя бы один из рецепторов, имеют более благоприятное течение и оказываются чувствительными к гормонотерапии [Моисеенко В.М., и др., 1997; Кушлинский Н Е Герштейн Е.С., 2001; Семиглазов В.Ф. и др., 2001]. Гиперэкспрессия связанная с амплификацией соответствующих генов, ассоциируется с увеличением темпов ее роста и метастазированием, а также неблагоприятно влияет на показатели безрецидивной и общей выживаемости [Hortobacvi G.N.,1999; Piccart M.J.,1999; Семиглазов В.Ф., 2000].

Многочисленные исследования с применением достижений молекулярной биологии выявили связи между экспрессией различных групп генов особенностями клинического течения РМЖ и его чувствительности к различным видам терапии [Silvestrini R., Benini Е„ et.al., 1993- Wooster R et al.,1995; Ciardiello F„ 2001; Любченко Л.Н. и др., 2004]. По данным литера^-ры полиморфизмы таких цитокинов как фактор некроза опухолей a (TNFa) и лимфотоксин a (Lta) оказывают влияние на развитие и течение злокачественных опухолей молочной железы. Однако результаты разных исследователей противоречивы и окончательно роль TNFa в канцерогенезе РМЖ до конца не изучена. Исследования, посвященные изучению данных молекуляр-но-генетических аспектов РМЖ, в России немногочисленны [Маливанова Т. Ф., Осташкин А. С., 2007]. Изучения требуют ассоциации полиморфных маркеров генов семейства факторов некроза опухолей и их рецепторов с семейно-наследственными факторами, клиническими, иммунофенотипическими особенностями опухолей и эндокринно-метаболическими факторами риска.

Цель исследования: изучить вовлеченность генетических полиморфизмов факторов некроза опухолей в формирование, клинические и иммунофено-типические особенности рака молочной железы.

Задачи исследования:

1. Изучить распространенность полиморфных вариантов генов фактора некроза опухолей а (-308С/А ШРа), лимфотоксина а (+250А/0 Ы а), рецепторов фактора некроза опухолей 1-го (+36А/С ТЫРЮ) и 2-го (+1663АЮ ШПи) типов у больных раком молочной железы и в популяционной выборке.

2. Изучить ассоциации молекулярно-генетических маркеров с возрастными, эндокринно-метаболическими и семейно-наследственными факторами при раке молочной железы.

3. Провести анализ ассоциаций молекулярно-генетических маркеров с характеристиками клинических стадий рака молочной железы.

4. Изучить иммунофенотипические особенности рака молочной железы и их связь с клиническими характеристиками опухолей.

5. Определить наличие и значение ассоциаций молекулярно-генетических маркеров с имунофенотипическими особенностями рака молочной железы.

Научная новизна. Впервые проведен анализ ассоциаций полиморфных локусов факторов некроза опухолей (-3080/А 77\Та, +250АЛЗ У: а) и их рецепторов (+36А/С 77/^7) и 2-го (+1663А/С ШГЯ2) с развитием рака молочной железы, эндокринно-метаболическими и семейно-наследственными факторами пациенток, клиническими и иммунофенотипическими особенностями опухолей. Установлены связи молекулярно-генетических маркеров с наличием эн-докринно-метаболических факторов риска, гинекологическими заболеваниями при раке молочной железы, семейно-наследственной отягощенностью, клинической стадией и иммунофенотипом опухолей.

Научно-практическое значение. Выявленные в результате исследования ассоциации молекулярно-генетических маркеров с характеристиками пациенток с раком молочной железы и клинико-иммуноморфологическими особенностями опухолей могут быть использованы в работе онкологических клиник при определении прогноза течения рака молочной железы, оптимизации индивидуальных подходов к лечению. Полученные данные являются основой для дальнейших исследований роли генетических факторов в развитии рака молочной железы. Результаты исследования используются в образовательном процессе в ФГАОУ ВПО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет», а также в практической работе в иммуногистохимической лаборатории ОГКУЗ особого типа «Белгородское патологоанатомическое бюро» и в практической работе ОГБУЗ «Белгородский онкологический диспансер».

службы» (Воронеж, 2010), Всероссийской конференции «Актуальные вопросы экспериментальной и клинической морфологии», поев, памяти чл.-корр РАМН, проф. В.Б. Писарева (Волгоград, 2010), Всероссийской конференции с международным участием «Репродуктология: новые технологии, перспективы» (Белгород, 2010), VI Съезде Российского общества медицинских генетиков (Ростов - на - Дону, 2010), международной конференции «Геронтоло-гические чтения - 2010» (Белгород, 2010), II всероссийской научной конференции с международным участием, «Медико-биологический аспекты муль-тифакториальной патологии» (Курск, 2011).

Личный вклад автора. Автором лично определены цель и задачи исследования, разработаны методические подходы для их решения, проведено клиническое обследование всех больных РМЖ, выполнен сбор и анализ анамнестической информации. Автор лично принимал участие в выполнении молекулярно-генетических и иммуноморфологических исследований, проводил обработку и анализ полученных данных, подготовку публикаций, апробацию результатов исследования, написание и оформление рукописи.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 16 печатных работ, в том числе 4 в журналах из перечня ВАК Минобрнауки РФ.

Положения, выносимые на защиту.

1. Генетические полиморфизмы -З08в/А 7Жа, +250А/С Па и+1663 А/О ™РК2 ассоциированы с формированием рака молочной железы.

2. Молекулярно-генетические маркеры ассоциированы с семейно-наследственной онкологической отягощенностью анамнеза, эндокринно-метаболическими факторами риска.

3. Выявлены связи клинической стадии заболевания с генами-кандидатами на момент выявления опухоли.

4. Имеются значимые ассоциации клинических, иммунофенотипических особенностей рака молочной железы и молекулярно-генетических маркеров.

Структура н объем диссертации. Диссертация изложена на 124 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, главы материала и методов исследования, главы результатов собственных исследований, обсуждения результатов исследования, выводов, практических рекомендаций и списка литературы. Результаты исследования обобщены в 22 таблицах, представлены на 10 рисунках, включающих 8 графиков и диаграмм, 2 монтажа из 13 микрофотографий. Список литературы содержит 216 источников, из них 51 отечественный, 165 зарубежных.

Работа выполнена в рамках Федеральной целевой программы «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 годы госконтракт № 02.740.11.0712.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Клиническая характеристика исследованных групп

Исследование выполнено в двух группах: пациентки с РМЖ (основная) и группа популяционного контроля. Основная группа состояла из 250 случаев, в которых было выполнено молекулярно-генетическое исследование. Возраст пациенток составил от 25 до 77 лет (в среднем 57,4+11,0). Группа сформирована соответственно критериям отбора: (русские, уроженки Центрального Черноземья, не имеющие родства между собой) из общего числа полностью исследованных случаев РМЖ, которые использованы для анализа иммуноморфологических особенностей опухолей и клинических сопоставлений. Все наблюдения представлены впервые выявленными карциномами молочной железы за период с 2007 по 2011 годы.

Группа популяционного контроля представлена 248 женщинами в возрасте от 20 до 60 лет (средний возраст 54,2±7,5 лет), отобранных по национальному составу (русские) и месту рождения (уроженки Центрального Черноземья, не имеющие родства между собой). Обе исследуемые группы не отличалась по возрасту (р>0,05), месту рождения и национальности.

Клинико-лабораторное обследование пациенток проведено на базах поликлинического и хирургического отделений Белгородского областного онкологического диспансера. Морфологическое и иммуногистохимическое исследования выполнены на базах отделения онкоморфологии Белгородского областного патологоанатомического бюро и лаборатории научно-образовательного центра «Прикладной иммуноморфологии и цитогенетики» НИУ БелГУ. Молекулярно-генетические исследования выполнены в лаборатории "Молекулярной генетики человека" медицинского факультета Белгородского государственного национального исследовательского университета.

Все исследования проводили с информированного согласия пациенток на использование материалов лечебно-диагностических мероприятий, связанных с заболеванием, для научно-исследовательских целей и протоколировались по стандартам этического комитета Российской Федерации. На каждую пациентку была заполнена разработанная анкета-опросник, включающая возраст, место рождения, место жительства, семейный онкологический и акушерско-гинекологический анамнез, историю заболевания и лечения.

Проведен анализ структуры патогенетически значимой, связанной с нарушением метаболизма стероидных гормонов и липопротеидным обменом, сопутствующей патологии в группе больных РМЖ. У всех пациенток исследуемой группы проводили определение веса и типа питания с использованием показателя индекса массы тела по Кетле (ИМТ).

Иммуноморфологические методы

Во всех случаях было выполнено стандартное патогистологическое исследование с верификацией гистологического типа карцином молочной железы, определением степени гистологической злокачественности по обще-

принятой системе Blum и Richardson. В исследование включены случаи типичных инвазивных протоковых карцином. После патогистологического исследования выполнено иммуногистохимическое определение уровней экспрессии рецепторов эстрогенов (ER) и прогестерона (PgR), а также экспрессии рецепторов эпидермального фактора роста II типа - белка Her2/neu. Исследование выполнено по стандартным протоколам диагностических имму-ногистохимических исследований с использованием антител категории «For in vitro diagnostic»: к рецепторам эстрогенов (клон SP1; CellMarque, USA), к рецепторам прогестерона (клон SP2; CellMarque, USA), к белку Her2/neu -поликлональные антитела (Dako). Постановку реакций при определении белка Her2/neu осуществляли на автостейнере Autostainer 480 (ThermoScientific, Великобритания). Оценку уровней экспрессии ER и PgR осуществляли по общепринятой диагностической шкале Allred. Экспрессию Her2/neu оценивали в соответствии с современными рекомендациями с определением гиперэкспрессии при яркой непрерывной мембранной окраске в более чем 30% опухолевых клеток. Для объективизации полученных иммуноморфологиче-ских данных создавали базу электронных изображений с помощью системы сканирования и архивирования изображений «MiraxDesk», а также на микроскопе «Leica DM4000B», оснащенного цифровой видеосистемой регистрации и анализа изображений.

Молекулярно-генетическне методы

У всех пациенток основной группы (250) и у индивидуумов популяци-онного контроля (248) выполнено типирование четырех молекулярно-генетических маркеров: диаллельные локусы генов TNFa (-308G/A TN Fa), Lta (+250A/G Ltd), рецептора фактора некроза опухоли 1-го типа (+36A/G TNFR1) и рецептора фактора некроза опухоли 2-го типа (+1663A/G TNFR2).

Материалом для исследования послужила венозная кровь в объеме 8-9 мл, взятая из локтевой вены пробанда. Забор венозной крови производили в пробирки с консервантом, содержащим 0,5М раствор ЭДТА (рН=8.0).

Выделение геномной ДНК из периферической крови осуществлялось методом фенольно-хлороформной экстракции [Mathew С.С., 1984].

Анализ всех локусов осуществлялся методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) синтеза ДНК на амплификаторе IQ5 (Bio-Rad) с использованием полимеразы Thermus aquaticus, производства фирмы «Силекс-М», олигонук-леотидных праймеров и зондов, синтезированных фирмой «Синтол» с последующим анализом полиморфизмов методом дискриминации аллелей.

Генотипирование ДНК-маркеров выполняли методом дискриминации аллелей на основе TaqMan зондов с использованием программного обеспечения Standart Edition Version 2,0 (Bio-Rad).

Методы анализа и статистической обработки результатов

Расчет фенотипических и генных частот проводили стандартными методами [Животовский JI.A., 1983, Вейр Б., 1995].

Для сравнения частот аллелей и генотипов между различными группами использовали критерий х с поправкой Йетса на непрерывность. Вычисления производили в таблицах сопряженности 2x2 (при 95% CI).

Об ассоциации молекулярно-генетических маркеров с формированием РМЖ судили по величине отношения шансов (OR). При изучении взаимосвязей генетических полиморфизмов с количественными признаками сначала оценивали характер распределения исследуемых признаков с использованием критерия Шапиро-Уилка [Реброва О.Ю., 2006]. Последующий статистический анализ проводили в соответствии с характером распределения исследуемых количественных признаков [Реброва О.Ю., 2006].

Статистическую обработку данных проводили на персональном компьютере с использованием программных пакетов «STATISTICA for Windows 6.0» и «Microsoft Excel 2003».

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ОБСУЖДЕНИЕ

Сравнительный анализ частот полиморфизмов генов TNFa, лимфоток-сина и рецепторов TNFa 1 и 2 типов при раке молочной железы и в по-пуляционном контроле

Изучение частот генотипов полиморфных маркеров генов показало, что для всех рассмотренных локусов в популяционной выборке и в группе больных РМЖ эмпирическое распределение генотипов соответствует теоретически ожидаемому при равновесии Харди-Вайнберга (р>0,05). Уровень ал-лелыюго разнообразия по изученным локусам варьировал от Но=0,19 (для локуса -308 G/A TNFa) до Но= 0,47(для локуса +36 A/G TNFR1) в популяционной выборке и от Но=0,17 (-308 G/A TNFa) до Но=0,50 (+36 A/G TNFR1) среди больных раком молочной железы. При сравнительном анализе распределения частот аллелей и генотипов полиморфных маркеров -308 G/A TNFa, +250 A/G Lta, +36 A/G TNFR1 и +1663 A/G TNFR2 больных РМЖ и в группе популяционного контроля достоверных статистических различий не выявлено.

Полученные результаты свидетельствуют, что полиморфизмы изучаемых генов не имеют этиологического значения в развитии рака молочной железы, они могут играть определенную роль в патогенезе данного заболевания и характере его течения, изучению чего посвящена основная часть данного исследования.

Таблица 7

Распределение частот полиморфных маркеров генов факторов некроза опухолей и их рецепторов у больных РМЖ и в популяционном контроле_

Полиморфизм Аллели, генотипы Контрольная группа (п=248) Больные (п=250) ОК (95% С1), х2,р

П] % п. %

-3080 446 89,92 449 89,80 0,99(0,64-1,52) X2- 0,01; р=1,00;

1 -308А 50 10,08 51 10,20

-З08в/А ; -30800 200 80,65 203 81,20 1,04(0,65-1,66) Х2=0,01;р=0,97;

-3080А 46 18,55 43 17,20 0,91(0,56-1,48) Х2=0,08;р=0,78;

-308ЛА 2 0,80 4 1,60 2,00(0,31-15,86) Х2=0,16; р=0,69;

+250А 370 74,90 372 74,40 0,97(0,73-1,31) Х2=0,01;р=0,92;

3 >-1 +25СЮ 124 25,10 128 25,60

+250АА 136 55,06 138 55,20 1,01(0,69-1,45) Х2=0,01;р=1,01;

■о + +2500А 98 39,67 96 38,40 0,95(0,65-1,38) Х2=0,40;р=0,84;

+2500й 13 5,27 16 6,40 1,23(0,55-2,78) Х2=0,12;р=0,73

+36А 245 49,80 253 51,01 1,05(0,8-1,36) Х2=0,10;р=0,75;

£ +ЗбО 247 50,20 243 48,99

к, +36АА 65 26,42 64 25,80 0,97(0,64-1,48) Х2=0,003;р=0,96;

+ +36АС 115 46,75 125 50,40 1,16(0,8-1,67) Х2 = 0,52;р=0,47;

+3600 66 26,83 59 23,80 0,85(0,56-1,30) Х2=0,45;р=0,50;

<•4 +1663А 179 37,29 204 40,96 0,86(0,66-1,11) Х2= 1,23; р=0,27;

+ 16630 301 62,71 294 59,04

+ 1663АА 35 14,58 46 18,47 1,32(0,79-2,20) Х2 = 0,72;р=0,30;

+ +1663АО 109 45,42 112 44,98 0,98(0,68-1,42) Х2=0,0;р=0,90;

+166300 66 40,00 91 36,55 0,86(0,59-1,27) Х2 = 0,86;р=0,49

Аналнз ассоциаций полиморфизмов генов ТОТа, Ыа и рецепторов TNFа 1 и 2 типов с возрастными, соматическими и семейно-наследственнымн факторами при раке молочной железы

В зависимости от возраста пациентки были разделены на две группы: до 50 лет (п=76) и старше 50 лет (п=174). При анализе полиморфизма генов факторов некроза опухолей и их рецепторов среди женщин с РМЖ в зависимости от возраста выявлены статистически достоверные различия. Обнаружено, что в группе до 50 лет выше концентрация аллеля -3080 ТЫ Ра (94,08%) по сравнению с группой старше 50 лет (87,93%, х2 =3,72, р=0,05), а также гомозиготного генотипа -30800 ТЫРа, частота которого составила 88,46%, что почти на 10% выше чем в группе старше 50 лет.

У всех пациенток проведено определения индекса массы тела (ИМТ) на момент установления диагноза. Из 250 больных РМЖ нормальную и пониженную массу тела имели только 18% (п=45). У 205 женщин выявлен избыток масса тела и ожирение различной степени, в 16 случаях отмечалось мор-бидное ожирение с ИМТ более 40. При изучении распределения полиморфных генетических маркеров у женщин с раком молочной железы без ожирения и повышенной массой тела выявлено, что у пациенток с ИМТ более 25 для +36 АЮ ТИРЮ характерно увеличение частот генотипов +36АС и +36СС (около 6%) с недостоверной разницей.

Нарушения жирового обмена сопровождаются инсулинорезистентно-стью, способствуя тем самым возрастанию уровня инсулиноподобных факторов роста. Жировые отложения являются источником внегонадного синтеза половых стероидов, в том числе андрогенов, которые путем ароматизации преобразуются в эстрогены. Подобное состояние реализуется за счет эффектов эстрогенов и, в конечном итоге, может привести к гиперплазии ткани молочной железы и послужить фоном для развития неоплазии [Бештейн Л.М., 2009].

Одним из факторов риска развития новообразрваний в молочной железе могут являться заболевания гепатобилиарной системы (гепатит, жировой гепатоз, холестаз). Вследствие нарушения обменных процессов происходит замедленная утилизация эстрогенов из организма, одну из основных ролей в котором играет печень. При анализе ассоциаций полиморфизма изучаемых генов с патогенетически значимой обменно-эндокринной соматической патологией выявлено увеличение частоты генотипа -308 СА ТЫ Ра (21,20%) по сравнению с группой женщин без патологии (11,1%, =0,59, р=0,05). Для локуса +1663АС ТИРЯ2 отмечается снижение частоты до 38,0% в сравнении с группой без соматической патологии (56,12%, х2=6,74, р=0,01).

Современный подход к рассмотрению причин возникновения РМЖ сместил акценты к поиску механизмов, связанных с наследственными факторами. Семейными формами (около 23%) считаются случаи рака молочной железы у одного или нескольких кровных родственников по материнской линии, генетически обусловленным (не более 9%) -случаи рака молочной железы у кровных родственников, а также ассоциированный рак (яичников,

толстого кишечника) и связанный с мутацией генов ВЯСА1 и ВЯСА2 [Семи-глазов В.В, 2009]. Большинство же случаев РМЖ представляет спорадический вариант у женщин, в семье у которых не было случаев онкологических заболеваний. Мы изучили особенности связей генетических полиморфизмов факторов некроза опухолей и их рецепторов с формированием РМЖ в зависимости от семейно-наследственной отягощенности.

В группу больных с отягощенным онкологическим анамнезом включены пациентки, у которых родственники 1-2 степени родства имели злокачественные опухоли различной локализации. У 39 женщин в семьях имели место случаи рака молочной железы и тела матки. При анализе полученных данных обнаружена наибольшая частота высокопродуктивного аллеля -308А ТЫРа 15,66% у пациенток со злокачественными новообразованиями в семье, по сравнению с группой женщин без онкологического анамнеза (7,49%, =7,23, р=0,008), а так же высокопродуктивного генотипа -308АА Т№а (4,82%; 1 =5,41, р=0,02) и женщинами популяционного контроля (0 8% Х~=3,59, р=0,057).

12.5

вйШЙН ян

5,27

3,53

---- -

И популнционный контроль

М болыгыо РМЖ без онкоанамноэа

■ больные РМЖ с опкоанамнозом

частом генотипа,%

Рис.1. Распределение генотипа +250 вв Ш в группах больных РМЖ в зависимости от наличия или отсутствия онкопатологии в семье и популяционном контроле, %

Выявлено уменьшение концентрации аллеля +250А Ш в группе с наследственной отягощенностью на 10% (67,47%) в сравнении с группой контроля (74,94%, х2 =3,11, р=0,07) и группой без наследственной отягощенности (77,84%; х"=5,73, р=0,02). При этом выявлено увеличение концентрации высокопродуктивного аллеля +250С Ш в первой группе больных (32,53%) в сравнении с женщинами без онкопатологии в семье (22,16%, х2=5,73, р=0,02) и высокопродуктивного генотипа +250 вв Ш в 3 раза ( 12,5%) (рисунок I).

Анализ ассоциаций полиморфизмов генов TNFa, лнмфотоксина и рецепторов TNFa 1 и 2 типов с клиническими особенностями рака молочной железы

Группу высокого риска опухолевой патологии молочных желез представляют собой женщины с гиперпластическими процессами гениталий, нарушениями функций яичников. Различного рода воспалительные состояния влияют на частоту возникновения РМЖ. Изменения в сложной цепи гипота-ламо-гипофизарно-яичниковой системы вызывают формирование широкого диапазона патологии молочных желез, которая в зависимости от характера гормональных нарушений проявляется в виде гипер- или гипопластических процессов.

У пациенток с сопутствующей гинекологической патологией (гиперпластические изменения эндометрия, нарушения функций яичников) нами выявлено достоверное преобладание генотипа +250AG Lía, что составило 42,86%, по сравнению с индивидуумами без сопутствующей гинекологической патологии (32,04%, х2=18,23, р=0,01).

Одним из основных факторов прогноза при РМЖ является стадия опухолевого процесса на момент установления диагноза. При анализе генетических полиморфизмов с учетом стадии опухолевого процесса нами установлено следующее. Гетерозиготные генотипы -308GA TNFa при III стадии встречались в 26% случаев, тогда как при I стадии в 9,37% (х2=2,87,р=0,09). Частота гомозиготного генотипа -308GG TNFa достоверно выше (90,63%) при первой стадии в сравнении с третьей (72,06%, х,2=33,42, р=0,005). Однако при III клинической стадии РМЖ в сравнении как с I (х2=7,61, р=0,006), так и со II (Х2=6,37, р=0,01) выше концентрация аллеля +36ATNFa.

Поскольку в развитии РМЖ определяющее значение имеет гормональный фактор [Семиглазов В.В., 2009], безусловного внимания заслуживает анализ связи полиморфизмов изученных генотипов с другими изменениями дисгормональной природы, которые в разной степени могут быть фоновыми для РМЖ: в большей степени фибро-кистозные изменения с внутрипротоко-вой пролиферацией разной степени выраженности и атипии, в меньшей степени - фиброаденомы.

Из 250 больных РМЖ в 106 случаях диагностированы фибро-кистозные изменения, фиброаденома и внутрипротоковая папиллома молочной железы, а в 6 случаях выявлены сочетания указанных патологий. Проведенный сравнительный анализ распределения генетических полиморфизмов факторов некроза опухолей и их рецепторов в группах больных РМЖ в зависимости от наличия доброкачественной патологии молочных желез показал, что пациентки больные РМЖ с доброкачественной патологией молочных желез имеют низкую встречаемость (более чем в 3 раза) генотипа +250 GG Lía лимфотоксина a (2,84%) по сравнению с больными без патологии молочных желез, с различиями близкими к достоверным.

Иммуноморфологические особенности рака молочной железы и их связь с клиническими характеристиками опухолей

Полученные в данной части работы результаты выявили наличие ряда закономерных связей между клинико-морфологическими и иммунофеноти-пическими особенностями рака молочной железы, которые имеют значение для последующего анализа ассоциаций молекулярно-генетических маркеров с формированием РМЖ.

С возрастом достоверно увеличивается частота рецептор-позитивных случаев, как изолированно рецепторов эстрогенов, так и полного рецепторного позитива (ЕК.+Р§11+). При анализе по уровням экспрессии соответственно шкале АПгес! также выявлено преобладание высоких уровней экспрессии рецепторов стероидных гормонов, особенно ЕЯ. По декадам жизни установлено нарастание частоты ЕЯ+ карцином молочной железы от третьей декады (12,5%) до шестой (81,9%) с последующим некоторым снижением до стабильного уровня 64,2 - 72 % в возрастном интервале от 60 до 88 лет.

Другим важным маркером биологического потенциала РМЖ является наличие гиперэкспрессии рецепторов к эпидермальному фактору роста II типа - белка Нег2/пеи. При анализе собственного материала нами установлено, что частота гиперэкспрессии Нег2/пеи (Нег2/пеи 3+), являющейся фактором неблагоприятного прогноза, связана с экспрессией рецепторов эстрогенов, прогестерона, пролиферативной активностью и клиническими параметрами РМЖ. При полном рецепторном позитиве (ЕИ/Н^Ш-) частота гиперэкспрессии Нег2/пеи составляет 5,5%, тогда как при полном рецепторном негативе она достоверно (р<0,05 по х2) в 4 раза выше.

Рецепторный статус связан с Т стадией опухоли. При Т3 стадии достоверно (р<0,05) больше частота ЕЯ- случаев, суммарно ниже частота рецептор-позитивных случаев при всех уровнях экспрессии (49,4% против 65,3% при Т,). Частота случаев прогрессивно уменьшается от Т! до Т3

стадии, при этом в 2 раза увеличивается частота ЕЯ^К,- статуса (р<0,05).

Частота гиперэкспрессии Нег2/пеи при Т, стадии составляет 7,1%, при Т3 — 15,7%. Нами обнаружено, что при Т! стадии частота гиперэкспресии Нег2/пеи связана с рецепторным статусом: Нег2/пеи 3+ случаи при сочетании Т-, ЕЯ+Р§Ят составляют только 4,4%, тогда как при Т! частота поч-

ти в 5 раз выше - 21,7% (р<0,05 по х2). Гиперэкспрессия Нег2/пеи демонстрирует достоверную зависимость от N статуса и его сочетаний с уровнем стероидных рецепторов: при N0 частота ее составляет 5,0%, при N1 - 13,0%, при N0 Е1Ш^К+ только 1,9%, при N1 ЕП-Р§11- 11,1%.

На основании иммунофенотипа в настоящее время определяются моле-кулярно-генетические подтипы рака молочной железы, которые отличаются по степени агрессивности течения, чувствительности к терапии и прогнозу. В изученном нами материале типы рака молочной железы распределились следующим образом: люминальный А - 62,4%, люминальный В - 4,6%, ТНРМЖ - 25,8%, Нег2/пеи 3+ - 7,2%. Основные иммуноморфологические картины представлены

Анализ ассоциаций полиморфизмов генов TNFa, лимфотоксина и рецепторов TNFa 1 и 2 типов с иммунофенотипическими особенностями рака молочной железы

С учетом выявленных ассоциаций полиморфизмов изученных генов с основными факторами, имеющими значение в развитии и прогнозе РМЖ, а также иммунофенотипических особенностей изученных случаев опухолей нами проведен анализ связей молекулярно-генетических маркеров с иммунофенотипическими характеристиками в 250 случаях. Экспрессия рецепторов эстрогенов, прогестерона и Her2/neu явяются определяющими биологическими характеристиками РМЖ не только для определения тактики лечения и прогноза, но и для определения биологических (молекулярно-генетических) подтипов, поскольку экспрессионный профиль опухолей во многом отражает основные генетические особенности опухолевых клеток.

В зависимости от иммунофенотипических вариантов РМЖ выявлено следующее.

Группа с люминальными типами карцином не имела отличий в частоте аллелей и генотипов обоих изученных цитокинов и рецепторов фактора некроза опухолей 1 и 2 типов. Наибольшее число отличий выявлено в группе Her-2/neu гиперэкспрессирующего РМЖ и при гиперэкспрессии данного белка вне зависимости от рецепторного статуса. Аллель А в гомозиготном (-308 АА TNFa) и гетерозиготном (-308 GA TNFa) вариантах имелся в 30,43%, в группе популяционного контроля - 19,35%, в группе ТНРМЖ - 12,50% (р<0,05). При объединении всех случаев с гиперэкспрессией Her2/neu в одну группу (вне зависимости от рецепторного статуса) установлено, что при наличии высокопродуктивного аллеля А частота гиперэкспрессии Her2/neu почти в 2 раза выше (14,9%), чем при гомозиготном генотипе -308 GG TNFa, при котором она составляет 7,9% (р<0,05).

Связи генотипов и Her-2/neu статуса выявлены и для Lta. Аллель +250 G Lta в группе ТНРМЖ выявлен в 30,4% случаев, что было выше, чем в по-пуляционном контроле и в других иммунофенотипических группах РМЖ, генотип +250AG Lta также выявлен чаще (60,9% против значений от 35,3 до 39,7% в остальных группах). Достоверным оказалось отличие частоты гиперэкспрессии Her-2/neu вне зависимости от рецепторного статуса в группе гомозигот +250АА Lta, в которой оно составило 6,5%, от группы с наличием аллеля G, в которой Her-2/neu гиперэкспрессия выявлена в 12,5% (р<0,05). В целом во всех изученных группах не выявлено отличий частот аллелей и генотипов TNFR1 и TNFR2 в связи с Her-2/neu статусом.

Иной характер имели связи изученных генотипов и рецепторного статуса опухолей. Установлено, что генотип -308GG TNF-a чаще (88,2%) встречается при высоком уровне экспрессии рецепторов эстрогенов, чем при рецептор-отрицательном статусе (74,4%). При этом имеется тенденция к превалированию генотипов с аллелем -308GG TNFa по мере снижения экспрессии

ЕЯ: при высоком уровне генотипы с аллелем -30800 ТИЕа составили 11,7%, при среднем 23,6%, при низком 20,0%, при отрицательном ЕЛ статусе 15,6%.

Гомозиготный генотип +1663 ОО ШРЯ2 достоверно чаще встречался при высоком уровне экспрессии рецепторов эстрогенов в сравнении с рецептор-негативной группой (44,1% против 31,2%; р=0,05).

Таким образом, генетические полиморфизмы факторов некроза опухолей и их рецепторов ассоциированы с формированием рака молочной железы. Наибольшее число ассоциаций выявлено для генетических полиморфизмов -3080А ТИРа и +250АО На. Концентрация высокопродуктивного аллеля -308А ЮТа и генотипа -3080А ТЫРа. ассоциирована с патогенетически значимой соматической патологией, семейно-наследственной отягощенностью, прогностически худшими рецептор-отрицательными и Нег2/пеи гиперэкс-прессирующими вариантами карцином молочной железы. При первой стадии заболевания достоверно преобладает гомозиготный генотип -30800 ТМРа. Имеются ассоциации +250А/0 Ыа с семейно-наследственной отягощенностью, наличием фоновых и сопутствующих доброкачественных изменений в молочных железах, сопутствующей гинекологической патологии у пациенток с РМЖ. На основании полученных данных сделаны следующие выводы.

ВЫВОДЫ

1. Генетические полиморфизмы фактора некроза опухолей a (-308G/A TNPá), лимфотоксина a (+250A/G Lt а), рецепторов фактора TNFa 1-го (+36A/G TNPR1) и 2-го (+1663A/G TNFR2) типов ассоциированы с формированием, клиническими и иммунофенотипическими особенностями рака молочной железы.

2. У пациенток с РМЖ, имеющих эндокринно-метаболические факторы риска, частоты генотипа -308GA TNFa в 2 раза выше (21,20% против 11,10%), а частота генетического варианта +1663 AG TNPR2 - в 1,5 раза ниже (38,0%) в сравнении с больными без эндокринно-метаболических факторов риска (56,12%). При сопутствующей гинекологической патологии (гиперпластические процессы в эндометрии, нарушения функций яичников) достоверно преобладает генотип +250AG Lta (42,86% против 32,04%).

3. Больные с семейно-наследственной отягощенностью онкологического анамнеза отличаются в 2 раза большей концентрацией аплеля -308А TNFa (15,66% против 7,49%), большей частотой генетического варианта -308АА TNFa,, в 3 раза большей частотой генотипа +250GG Lta (12,50% против 3,59%) в сравнении с пациентками без семейно-наследственной отягощенно-сти.

4. Молекулярно-генетические маркером первой клинической стадии опухолевого процесса является гомозиготный генотип -308GG TNFa, частота которого достоверно выше (90,63%) в сравнении с третьей стадией (72,06%). При третьей стадии опухоли в сравнении как с первой (54,84%%), так и со

второй (48,65%) достоверно выше концентрация аллеля +36А TNFR1(55,97%).

5. Иммунофенотипические особенности рака молочной железы связаны с возрастом, Т-стадией заболевания. С возрастом достоверно увеличивается частота полного рецептор-позитивного статуса. Частота гиперэкспрессии белка Her2/neu в 4 раза выше (р<0,05) в возрастной группе до 35 лет и во всех возрастных группах связана с Т-стадией (при T¡ стадии она составляет 7,1%, при Тз - 15,7%; р<0,05).

6. Генетические полиморфизмы -308G/A TNFa и +250A/G Li а ассоциированы с иммунофенотипическими подтипами рака молочной железы. Частота прогностически неблагоприятной гиперэкспрессии Her2/neu у пациентов с генетическими вариантами -308АА TNFa и -308GA TNFa почти в 2 раза выше (14,9%), чем у пациенток с генотипом -308GG TNFa (7,9%; р<0,05). Генотипы +250GG Lía и +250AG Lía связаны с достоверно большей частотой Her2/neu 3+ случаев в сравнении с генотипом -250АА Lía (12,4% против 6,5%; р<0,05).

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. В комплексе методов диагностики рака молочной железы при наличии эндокринно-метаболических факторов риска и наследственной отяго-щенности онкологического анамнеза целесообразно молекулярно-генетическое исследование полиморфизмов -308G/A TNFa, +250A/GLt а.

2. При определении факторов биологического прогноза рака молочной железы в качестве дополнительного метода рекомендуется молекулярно-генетическое исследование полиморфизмов -308G/A TNFa при низком уровне экспрессии рецепторов эстрогенов и прогестерона, при сомнительных результатах Her2/neu тестирования и гиперэкспресии Her2/neu по результатам иммуно-гистохимического исследования.

3. Выявленные генетические полиморфизмы -308G/A TNFa, +250A/G Li а целесообразно учитывать в динамике наблюдения за пациентками с пролифера-тивной патологией молочных желез и при определении групп риска развития рака молочной железы.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ:

1. Взаимосвязь пролиферативной активности, рецепторного статуса и Her2/neu статуса в раке молочной железы / А. А. Должиков, А. А. Котля-ров, О. В. Луговая [и др.] // Актуальные вопросы фармакологии и фармации : сб. тр. межвуз. науч. конф., посвящ. памяти проф. В. В. Пичугина и 75-летию КГМУ / Курск, гос. мед. ун-т, Центр.-Чернозем. науч. центр РАМН, Рос. акад. естеств. наук [и др.] ; редкол.: В. А. Лазаренко [и др.]. - Курск, 2009.-С. 171-172.

2. Анализ результатов фармакодиагностики рака молочной железы /

A. А. Должиков, А. В. Иванов, ... О. В. Луговая [и др.] // Актуальные вопросы фармакологии и фармации : сб. тр. межвуз. науч. конф., посвящ. памяти проф. В. В. Пичугина и 75-летию КГМУ / Курск, гос. мед. ун-т, Центр.-Чернозем. науч. центр РАМН, Рос. акад. естеств. наук [и др.] ; редкол.: В. А. Лазаренко [и др.]. - Курск, 2009. - С. 173-174.

3. Иммунофенотип и клинические характеристики рака молочной железы: анализ взаимосвязей / А. А. Должиков, А. А. Котляров, О. В. Луговая [и др.] // Актуальные вопросы экспериментальной и клинической морфологии : сб. тр. науч.-практ. конф., посвящ. памяти чл.-корр. РАМН, проф. В. Б. Писарева, Волгоград, 15-16 апр. 2010 г. / Волгогр. гос. мед. ун-т, Волгогр. науч. центр РАМН [и др.] ; под ред. В. И. Петрова. - Волгоград, 2010. - С. 207-211.

4. Иммунофенотипические варианты рака молочной железы, генетические и конституциональные факторы риска / А. А. Должиков, О. В. Луговая, М. И. Чурносов [и др.] // Охрана репродуктивного здоровья - будущее России : материалы всерос. конф. с междунар. участием, посвящ. десятилетию каф. акушерства и гинекологии мед. фак. БелГУ, Белгород, 11-12 марта 2010 г. / БелГУ, Департамент здравоохранения и соц. защиты населения Бел-гор. обл., Белгор. обл. клинич. больница святителя Иоасафа. - Белгород, 2010.-С. 230-232.

5. Иммунофенотипические варианты и клинико-морфологические особенности рака молочной железы / А. А. Должиков, В. А. Нагорный, ... О.

B. Луговая [и др.] // Современные аспекты патоморфологической диагностики, клиники и лечения рака молочной железы. Вопросы организации па-тологоанатомической службы : материалы конф. врачей-патоморфологов и врачей-онкологов Центр, федер. округа с междунар. участием, Воронеж, 2223 апр. 2010 г. / Департамент здравоохранения Воронеж, обл., Воронеж, гос. мед. акад. ; гл. ред. И. Э. Есауленко. - Воронеж, 2010. - С. 58-60.

6. Взаимосвязи клинических, иммунофенотипических вариантов рака молочной железы с показателями репродуктивного здоровья и конституциональными факторами / А. А. Должиков, О. В. Луговая, Т. С. Мухина [и др.] // Репродуктология: новые технологии, проблемы и перспективы : материалы всерос. конф. с элементами науч. шк. для молодежи, Белгород, 12-15 окт. 2010 г. / БелГУ, Департамент здравоохранения и соц. защиты Белгор. обл., Белгор. обл. клинич. больница святителя Иоасафа. - Белгород, 2010. -

C. 155-158.

7. Луговая, О. В. Рак молочной железы у пациенток с сопутствующей гинекологической патологией / О. В. Луговая // Репродуктология: новые технологии, проблемы и перспективы : материалы всерос. конф. с элементами науч. шк. для молодежи, Белгород, 12-15 окт. 2010 г. / БелГУ, Департамент здравоохранения и соц. защиты Белгор. обл., Белгор. обл. клинич. больница святителя Иоасафа. - Белгород, 2010. - С. 158-160.

8. Особенности рака молочной железы в пожилом и старческом возрастах / А. А. Должиков, М. И. Чурносов, О. В. Луговая [и др.] // Герон-тологический журнал им. В. Ф. Купревича. - 2010. - № 2. - С. 52-53. - (Ге-ронтологические чтения-2010 : материалы третьей междунар. науч.-практ. конф., Белгород, 11-12 нояб. 2010 г.).

9. Ангиогенез в раке молочной железы: клинико-морфологические и прогностические аспекты / А. А. Должиков, М. И. Чурносов, ... О. В. Луговая // Человек и его здоровье. -2010. -№ 4. - С. 148-155.

10. Луговая, О. В. Полиморфизм генов цитокинов у населения Белгородской области и молекулярно-генетические факторы в развитии рака молочной железы / О. В. Луговая, М. И. Чурносов, А. А Должиков // Медицинский академический журнал. -2010. - Т. 10, № 5. — С. 57.

11. Должиков, А. А. Распределение генетического полиморфизма +250 A/G лимфотоксина а среди женского населения Центрального Черноземья и его связь с раком молочной железы / А. А. Должиков, О. В. Луговая, М. И. Чурносов // Материалы VI съезда Российского общества медицинских генетиков, Ростов-на-Дону, 14-18 мая 2010 г. : тез. докл. / Рос. о-во мед. генетиков, РАМН [и др.]. - Ростов н/Д, 2010. - С. 56.

12. Некоторые особенности распределения клинически значимых молекулярно-генетических маркеров рецепторов фактора некроза опухолей а 1 и 2 типов среди женского населения Центрального Черноземья / О. В. Луговая, Н. А. Горяинова, А. А Должиков [и др.] // Материалы VI съезда Российского общества медицинских генетиков, Ростов-на-Дону, 14-18 мая 2010 г. : тез. докл. / Рос. о-во мед. генетиков, РАМН [и др.]. - Ростов н/Д, 2010. -С. 104-105.

13. Сравнительное иммуноморфологическое исследование первичных карцином молочной железы различных молекулярно-генетических типов и их метастазов в регионарных лимфоузлах / А. А. Должиков, М. И. Чурносов, О. В. Луговая [и др.] // Человек и его здоровье. - 2011. - № 4. - С. 98102.

14. Фиброаденомы молочной железы. Случай цистосаркомы (злокачественной филлоидной фиброаденомы) / А. А. Должиков, Т. С. Мухина, ... О. В. Луговая [и др.] // Вестник новых медицинских технологий. - 2011. - Т. 18, №2.-С. 143-144.

15. Луговая, О. В. Исследование распределения полиморфных генетических маркеров фактора некроза опухолей альфа и его рецептора 2 типа у пациенток с раком молочной железы / О. В. Луговая // Медико-биологические аспекты мультифакториальной патологии : сб. материалов II всерос. науч.-практ. конф. с междунар. участием, Курск, 17-19 мая 2011 г. / Адм. Курск, обл., Курск, гос. мед. ун-т, Рос. акад. естеств. наук [и др.]. -Курск, 2011.-С. 73-74.

16. Луговая, О. В. Анализ ассоциаций полиморфизмов генов факторов некроза опухолей и их рецепторов с иммунофенотипическими особенностями рака молочной железы / О. В. Луговая, А. А. Должиков, М. И. Чурно-

сов // Вестник новых медицинских технологий. - 2012. - Т. 19, № 2. - С 125.

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ

РМЖ - рак молочной железы TNF — фактор некроза опухолей Lta - лимфотоксин а

TNFR - рецепторы фактора некроза опухолей ER - рецепторы эстрогенов PgR - рецепторы прогестерона

Her2/neu - рецепторы эпидермального фактора роста II типа

Подписано в печать 20.09.2012 г., формат 60х84'/16. Тираж 100 экз., заказ 6330. Отпечатано в ЗАО «Белгородская областная типография», пр. Б. Хмельницкого, 111а.

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Луговая, Ольга Владимировна

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 .Современные представления о факторах риска развития рака молочной железы.

1.2.Генетические факторы в развитии рака молочной железы.

1.3.Факторы некроза опухолей и их рецепторы: молекулярно-генетические характеристики и медико-биологические эффекты.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 .Общая характеристика групп исследования.

2.2. Методы исследования

2.2.1 .Методы клинических исследований.

2.2.2.Иммуноморфологические методы.

2.2.3.Молекулярно-генетические методы.

2.2.4.Методы анализа и статистической обработки результатов

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ 3.1.Сравнительный анализ частот полиморфизмов генов ТМ^а, лимфотоксина и рецепторов ТЫРа 1 и 2 типов при раке молочной железы и в популяционном контроле.

3.2.Анализ ассоциаций полиморфизмов генов ТОРа, лимфо-токсина и рецепторов ТЫРа 1 и 2 типов с возрастными, эндо-кринно-метаболическими и семейно-наследственными факторами при раке молочной железы.

3.3. Анализ ассоциаций полиморфизмов генов ТМ^а, лимфо-токсина а и рецепторов ТИРа 1 и 2 типов с клиническими особенностями рака молочной железы.

3.4. Иммунофенотипические особенности рака молочной железы и их связь с клиническими характеристиками опухолей.

3.5.Анализ ассоциаций полиморфизмов генов ТОРа, лимфо-токсина а и рецепторов Т№а 1 и 2 типов с иммунофенотипче-скими особенностями рака молочной железы.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Изучение ассоциаций полиморфизма генов факторов некроза опухолей и их рецеп-торов с формированием рака молочной железы"

Рак молочной железы (РМЖ) неизменно занимает первое место в структуре онкологической заболеваемости женщин в экономически развитых странах. В 2009 г. в России зарегистрировано 54315 новых случаев рака молочной железы, что составляет 20,1% общей онкозаболеваемомости. По сравнению с 2004 г. прирост составил 10,3%, средний показатель заболеваемости - 44,2 на 100 тысяч женского населения [Давыдов М.И., Аксель Е.М., 2011].

В настоящее время серьезной проблемой в клинической онкологии при планировании терапии РМЖ является значительная вариабельность чувствительности опухолей к лечебным мероприятиям, в связи с выраженной их морфологической, иммунологической и генетической гетерогенностью. К числу биологически значимых тканевых маркеров рака молочной железы относятся рецепторы стероидных гормонов: рецепторы эстрогенов и прогестерона, специфически связывающие соответствующие стероидные гормоны и опосредующие их биологические эффекты. Гормонозависимые опухоли молочной железы, содержащие оба, или хотя бы один из рецепторов, имеют более благоприятное течение и оказываются чувствительными к гормонотерапии [Моисеенко В.М., и др., 1997; Кушлинский Ы.Е., Герштейн Е.С., 2001; Семиглазов В.Ф. и др., 2001]. Тирозинкиназные рецепторы семейства ErbB, активизирующие родственные рецепторы, являются ключевым звеном передачи митотических сигналов. Гиперэкспрессия гена c-erbB-2 (Her2/neu) в опухоли ассоциируется с увеличением темпов ее роста и метастазированием, а также неблагоприятно влияет на показатели безрецидивной и общей выживаемости [Hortobagyi G.N.,1999; Piccart M.J.,1999; Семиглазов В.Ф., 2000].

Многочисленные исследования с применением достижений молекулярной биологии выявили связи между экспрессией различных групп генов, особенностями клинического течения РМЖ и его чувствительности к различным видам терапии [Silvestrini R., Benini Е., et.al., 1993; Wooster R., et al., 1995; Ciardiello F., 2001; Любченко JT.I-I. и др., 2004]. По данным литературы, полиморфизмы таких цитокинов как фактор некроза опухолей a (TNFa) и лимфотоксин a (Lta) оказывают влияние на развитие и течение злокачественных опухолей молочной железы на разных этапах патогенеза: путем усиления эстроген-зависимой пролиферации клеток протоков молочной железы [Rubio М. A., Werbajh S. et al., 2006], за счет непосредственно образования геморрагического некроза в опухоли [Hollegaard M.V. et al., 2006; Brian E. С., 2009], а также влияя на активность ароматазы [Purohit A. et al., 2002].

Окончательно роль TNFa в канцерогенезе РМЖ до конца не изучена, предположительно он имеет значение в активации раковых клеток посред-ствам сети других цитокинов и хемокинов [Bates R.C., Mercurio A.M. 2003]. Вопрос участия семейства факторов некроза опухолей и их рецепторов при раке молочной железы остается открытым.

Генетические исследования, посвященные изучению молекулярно-генетических аспектов РМЖ, в России немногочисленны и касаются изучения полиморфизмов микросателлитного маркера TNFa и -308(G/A) TNFa в промоторе гена TNF a при некоторых морфологических типах опухолей [Маливанова Т. Ф., Осташкин А. С., 2007]. Изучения требуют ассоциации полиморфных маркеров генов семейства факторов некроза опухолей и их рецепторов с эндокринно-обменными и наследственными факторами, клиническими, иммунофеногипическими особенностями опухолей у пациенток с РМЖ.

Задачи исследования:

1. Изучить распространенность полиморфных вариантов генов фактора некроза опухолей a (-308G/A TNFa), лимфотоксина a (+250A/G Lt а), рецепторов фактора некроза опухолей 1-го (+36A/G TNFR1) и 2-го (+1663A/G TNFR2) типов у больных раком молочной железы и в популяционной выборке.

5. Определить наличие и значение ассоциаций молекулярно-генетических маркеров с иммунофенотипическими особенностями рака молочной железы.

Научная новизна. Впервые проведен анализ ассоциаций полиморфных локусов факторов некроза опухолей (-308С/А ТЫ Ра, +250А/0 и а) и их рецепторов (+36А/С ШРЯУ) и 2-го (+1663АЮ ТМГЯ2) с развитием рака молочной железы, эндокринно-метаболическими факторами, семейно-наследственными особенностями пациенток, клиническими и иммунофенотипическими особенностями опухолей. Установлены связи молекулярно-генетических маркеров с наличием эндокринно-метаболических факторов риска, гинекологическими заболеваниями при раке молочной железы, семейно-наследственной отягощенностыо, клинической стадией и иммунофенотипом опухолей.

Апробация работы. Основные результаты диссертации были представлены на: межвузовской научной конференции, посвященной памяти профессора В.В. Пичугина и 75-летию КГМУ (Курск 2009), Всероссийской конференции «Охрана репродуктивного здоровья - будущее России» (Белгород, 2010), научно-практической конференции с международным участием «Современные аспекты патоморфологической диагностики, клиники и лечения рака молочной железы. Вопросы организации патологоанатомической службы» (Воронеж, 2010), Всероссийской конференции «Актуальные вопросы экспериментальной и клинической морфологии», поев, памяти чл.-корр РАМН, проф. В.Б. Писарева (Волгоград, 2010), Всероссийской конференции с международным участием «Репродуктология: новые технологии, перспективы» (Белгород, 2010), VI Съезде Российского общества медицинских генетиков (Ростов - на - Дону, 2010), международной конференции «Геронтоло-гические чтения - 2010» (Белгород, 2010), II всероссийской научной конференции с международным участием, «Медико-биологический аспекты муль-тифакториальной патологии» (Курск, 2011).

Личный вклад автора. Автором лично определены цель и задачи исследования, разработаны методические подходы для их решения, проведено клиническое обследование всех больных РМЖ, выполнен сбор и анализ анамнестической информации. Автор лично принимал участие в выполнении молекулярно-генетических и иммуноморфологических исследований, проводил обработку и анализ полученных данных, подготовку основных публикаций, апробацию результатов исследования, написание и оформление рукописи.

Положения, выносимые на защиту.

1. Генетические полиморфизмы -308G/A TNFa, +250A/G Lta и +1663 A/G

ГЛ7<У?2 ассоциированы с формированием рака молочной железы.

3. Выявлены связи клинической стадии заболевания с генами-кандидатами на момент выявления опухоли.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 124 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, главы материала и методов исследования, главы результатов собственных исследований, обсуждения результатов исследования, выводов, практических рекомендаций и списка литературы. Результаты исследования обобщены в 22 таблицах, представлены на 10 рисунках, включающих 8 графиков и диаграмм, 2 монтажа из 13 микрофотографий. Список литературы содержит 216 источников, из них 51 отечественный, 165 зарубежных.

Заключение Диссертация по теме "Генетика", Луговая, Ольга Владимировна

выводы

1. Генетические полиморфизмы фактора некроза опухолей а (-3080/А ТЫРа), лимфотоксина а (+250АЮ Ыа), рецепторов фактора ТЫРа 1-го (+36АЮ и 2-го (+1663А/0 ТМРЯ2) типов ассоциированы с формированием, клиническими и иммунофенотипическими особенностями рака молочной железы.

2. У пациенток с РМЖ, имеющих эндокринно-метаболические факторы риска, концентрация генотипа -3080А ТЫРа в 2 раза выше (21,20% против 11,10%), а частота генетического варианта +1663 АО ТМРЯ2 - в 1,5 раза ниже (38,0%) в сравнении с больными без эндокринно-метаболических факторов риска (56,12%). При сопутствующей гинекологической патологии (гиперпластические процессы в эндометрии, нарушения функций яичников) достоверно преобладает генотип +250АО Ыа (42,86% против 32,04%).

3. Больные с семейно-наследственной отягощенностыо онкологического анамнеза отличаются в 2 раза большей концентрацией аллеля -308А ТМРа (15,66% против 7,49%), большей частотой генетического варианта -308АА ТЯРа,, в 3 раза большей частотой генотипа +25000 Ыа (12,50% против 3,59%) в сравнении с пациентками без семейно-наследственной отягощенно-сти.

4. Молекулярно-генетические маркером первой клинической стадии опухолевого процесса является гомозиготный генотип -30800 ТИРа, частота которого достоверно выше (90,63%) в сравнении с третьей стадией (72,06%). При третьей стадии опухоли в сравнении как с первой (54,84%%), так и со второй (48,65%) достоверно выше концентрация аллеля +36А ТЫРЛ 7(55,97%).

5. Иммунофенотипические особенности рака молочной железы связаны с возрастом, Т-стадией заболевания. С возрастом достоверно увеличивается частота полного рецептор-позитивного статуса. Частота гиперэкспрессии белка Нег2/пеи во всех возрастных группах в 4 раза выше (р<0,05) при рецептор-негативном статуте в сравнении с рецептор-позитивными опухолями и связана с Т-стадией (при Ti стадии она составляет 7,1%, при Т3 - 15,7%; р<0,05).

6. Генетические полиморфизмы -308G/A TNFa и +250A/G Lt а ассоциированы с иммунофенотипическими подтипами рака молочной железы. Частота прогностически неблагоприятной гиперэкспрессии Her2/neu у пациентов с генетическими вариантами -308АА TNFa и -308GA TNFa почти в 2 раза выше (14,9%), чем у пациенток с генотипом -308GG TNFa (7,9%; р<0,05). Генотипы +250GG Lta и +250AG Lta связаны с достоверно большей частотой Her2/neu 3+ случаев в сравнении с генотипом +250АА Lta (12,4% против 6,5%; р<0,05).

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

2. При определении факторов биологического прогноза рака молочной железы в качестве дополнительного метода рекомендуется молекулярно-генетическое исследование полиморфизмов -3080/А ТИРа при низком уровне экспрессии рецепторов эстрогенов и прогестерона, при сомнительных результатах Нег2/пеи тестирования и гиперэкспресии Нег2/пеи по результатам иммуно-гистохимического исследования.

3. Выявленные генетические полиморфизмы -308С/А 7М7«, +250А/С Ь( а целесообразно учитывать в динамике наблюдения за пациентками с пролифера-тивной патологией молочных желез и при определении групп риска развития рака молочной железы.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Луговая, Ольга Владимировна, Белгород

1. Абраменко, И. В. Оценка параметров апоптоза в диагностике онкологических заболеваний, их прогнозе и оптимизации схем терапии / И. В. Абраменко, А. А. Фильченков // Вопросы онкологии. 2003. - Т. 49, № 1. -С. 21-30.

2. Берштейн, Л. М. Гормональные и прогенотоксические аспекты BRCA1 -ассоциированного канцерогенеза / Л. М. Берштейн // Вопросы онкологии. 2007. - Т. 53, № 6. - С. 642-653.

3. Берштейн, Л. М. Сравнительная эндокринология семейного и BRCA-опосредованного рака молочной железы / Л. М. Берштейн // Вопросы онкологии. 2009. - Т. 55, № 2. - С. 127-135.

4. Божок, А. А. Факторы прогноза при раке молочной железы / А. А. Божок, В. Ф. Семиглазов, В. В. Семиглазов // Современная онкология. 2005. - Т. 7, № 1. - С. 4-9.

5. Вейр, Б. Анализ генетических данных: дискрет, генет. признаков / Б. Вейр ; пер. с англ. Д. В. Зайкина и др. ; под ред. Л. А. Животовского, А. И. Пудовкина. М. : Мир, 1995. - 400 с. : ил.

6. Гейниц, O.A. Цитокиновый статус у пациентов с хронической почечной недостаточностью / O.A. Гейниц, В.В. Калюжин, ГО.Д. Пак // Сборник трудов XII ежегодного Санкт-Петербургского нефрологического семинара. Санкт-Петербург, 2004. - С.33.

7. Генетические и клинико-патологические особенности рака молочной железы у больных с сохраненной менструальной функцией и в менопаузе / В. М. Перельмутер, М. В. Завьялова, С. В. Вторушин и др. // Успехи геронтологии. 2008. - Т. 21, № 4. - С. 643-653.

8. Генетические маркеры локуса гена фактора некроза опухолей: ассоциация с рецепторным статусом рака молочной железы / Т. Ф. Маливанова, А. С. Осташкин, Е. С. Герштейн и др. // Молекулярная медицина. 2009.-№3.-С. 18-23.

9. Генетический полиморфизм и вариабельность метаболизмастероидных гормонов: связь с риском развития рака молочной железы Текст. / V. N. Ю^епвеп, N. Нагас1а, Т. Кл^епБеп [е1 а1.] // Вопросы онкологии. 2001. - Т. 47, № 2. - С. 156-159.

10. Демьянов, А. В. Диагностическая ценность исследования уровней цитокинов в клиничекой практике / А. В. Демьянов, А. Ю. Котов, А. С. Симбирцев // Цитокины и воспаление. 2003. - Т. 2, № 3. - С. 20-35.

11. Зубова, С. Г. Молекулярные механизмы действия фактора некроза опухолей а и трансформирующего фактора роста В в процессе ответа макрофага на активацию / С. Г. Зубова, В. Б. Окулов // Иммунология. 2001. -№ 5. - С. 18-22.

12. Имянитов, Е. Н. Молекулярная онкология: клинич. аспекты / Е. Н.

13. Имянитов, К. П. Хансон. СПб. : СПбМАПО, 2007. - 212 с.

14. Кетлинский, С. А. Цитокины / С. А Кетлинский А. С. Симбирцев. -СПб.: Фолиант, 2008. 552 с.

15. Коненков, В. И. Структурные основы и функциональная значимость аллельного полиморфизма генов цитокинов человека и их рецепторов / В. И. Коненков, М. В. Смольникова // Медицинская иммунология. 2003. - Т. 5, № 1-2.-С. П-28.

16. Копнин, Б. П. Мишени действия онкогенов и опухолевых супрессоров: ключ к пониманию базовых механизмов канцерогенеза / Б. П. Копнин // Биохимия. 2000. - Т. 65, № 1. - С. 5-33.

17. Копнин, Б. П. Опухолевые супрессоры и мутаторные гены / Б. П. Копнин // Канцерогенез / под ред. Д. Г. Заридзе. М., 2004. - С. 125-156.

18. Кушлинский, Н. Е. Современные возможности молекулярно-биохимических методов оценки биологического «поведения» рака молочной железы / Н. Е. Кушлинский, Е. С. Герштейн // Вестник РАМН. 2001. - № 9. -С. 65-70.

19. Левшин, В. Ф. Профилактика рака молочной железы / В. Ф. Левшин. М. : Медицина, 1987. - 64 с.

20. Ли, Ч. Введение в популяционную генетику / Ч. Ли ; пер. с англ. Е. А. Салменкова, Е. Я. Тетушкина ; под ред. Ю. П. Алтухова, Л. А. Животовского. М. : Мир, 1978.- 555 с.: ил.

21. Любченко, Л. Н. Клинико-генетическая гетерогенность семейного рака молочной железы / Л. Н. Любченко, Р. Ф. Гарькавцева // Современная онкология. 2004. - Т. 6, № 2. - С. 67-69.

22. Маянский, А. Н. Нуклеарный фактор kJ3 и воспаление / А. Н. Маянский, PI. А. Маянский, М. И. Заславская // Цитокины и воспаление. -2007.-Т. 6, №2.-С. 3-9.

23. Мешкова, Р. Я. Иммунопрофилактика : руководство для врачей / Р. Я. Мешкова. Смоленск : Русич, 1999. - 256 с.

24. Miller, W. R. Ароматаза и рак молочной железы Текст. / W. R.

25. Miller, F. Howie, I. Mason // Вопросы онкологии. 2001. - Т. 47, № 2. - С. 182-186.

26. Моисеенко, В. М. Современное лекарственное лечение местнораспространенного и метастатического рака молочной железы / В. М. Моисеенко, Ф. Семиглазов, С. А. Тюляндин. СПб. : Грифон, 1997. - 254 с.

27. Полиморфизм в локусе гена фактора некроза опухолей у больных раком молочной железы / А. С. Осташкин, Т. Ф. Маливанова, В. А. Юрченко и др. // Генетика. 2008. - Т. 44, № 9. - С. 1275-1280.

28. Полиморфизм в локусе гена фактора некроза опухолей при спорадическом и наследственном раке молочной железы / Т. Ф. Маливанова, А. С. Осташкин, В. А. Юрченко и др. // Вопросы онкологии. 2007. - Т. 53, № 6. - С. 664-667.

29. Практическая маммология : для онкологов, хирургов, терапевтов. / [И. В. Высоцкая и др.] ; под ред. М. И. Давыдова, В. П. Летягина. М. : Практ. медицина, 2007. - 272 с.

30. Пузырев, В. П. Патологическая анатомия генома человека / В. П.

31. Пузырев, В. А. Степанов. Новосибирск : Наука, 1997. - 224 с.

32. Реброва, О. Ю. Статистический анализ медицинских данных применение пакета прикладных программ Statistica / О. Ю. Реброва. М. : Медиа Сфера, 2006. - 305 с. : ил.

33. Рыдловская, А. В. Функциональный полиморфизм гена TNFA и патология / А. В. Рыдловская, А. С. Симбирцев // Цитокины и воспаление. -2005.-Т. 4, № 3. С. 4-10.

34. Santen, R. J. Потенциальная возможность использования ингибиторов ароматазы в профилактике рака молочной железы / R. J. Santen // Вопросы онкологии. 2001. - Т. 47, № 2. - С. 187-193.

35. Семиглазов, В. В. Рак молочной железы / В. В. Семиглазов, Э. Э. Топузов ; под ред. В. Ф. Семиглазова. М. : Медпресс-информ, 2009. - 172 с. : ил.

36. Семиглазов, В. Ф. Значение прогностических и предсказывающих факторов при выборе лечения у больных метастатическим раком молочной железы / В. Ф. Семиглазов // Практическая онкология. 2000. - № 2. - С. 2630.

37. Сем и глазов, В. Ф. Опухоли молочной железы: лечение и профилактика / В. Ф. Семиглазов, К. Ш. Нургазиев, А. С. Арзуманов. -Алматы : б. и., 2001. 345 с.

38. Семиглазов, В. Ф. Современные подходы к гормонотерапии рака молочной железы как отражение патогенеза заболевания / В. Ф. Семиглазов // Вопросы онкологии. 2001. - Т. 47, № 2. - С. 195-199.

39. Содержание белка р53 в сыворотке крови больных распространенным раком молочной железы, и его изменение прихимиотерапии / Е. М. Миль, Д. Б. Корман, О. В. Мышлякова и др. // Вопросы онкологии. 2006. - Т. 52, № 2. - С. 159-163.

40. Содержание цитокинов IL-1|3, TNFa и уровни антител к TNFa у больных с онкологическими и воспалительными заболеваниями / А. И. Аутеншлюс, А. II. Шкунов, Г. Г. Иванова и др. // Цитокины и воспаление. -2005.-Т. 4, № 3.- С. 11-15.

41. Царегородцева, Т. М. Цитокины при гастроэнтерологической патологии / Т. М. Царегородцева // Медицинская газета. 2005. - № 63. - С. 3-4.

42. Цитокины в терапии рака / И. В. Киселёва, С. Ф. Протасова, С. М. Щеканова и др. // Цитокины и воспаление. 2002. - Т. 1, № 3. - С. 27-30.

43. Цитокины: роль в развитии анемии у больных множественной миеломой и хроническим миелолейкозом / Н. О. Сараева, Т. С. Белохвостикова, Т. Г. Потрачкова и др. // Цитокины и воспаление. 2005. -Т. 4, № 3. - С. 16-19.

44. A Phase I trial of TNFerade biologic in patients with soft tissue sarcoma in the extremities / A. J. Mundt, S. Vijayakumar, J. Nemunaitis et al. // Clin. Cancer Res.-2004.-Vol. 10, № 17.-P. 5747-5753.

45. A polymorphism that affects OCT-1 binding to the TNF promoter region is associated with severe malaria / J. C. Knight, I. Udalova, A. V. Hill et al. //

46. Nat. Genet. 1999.-Vol. 22, №2.-P. 145-150.

47. A strong candidate for the breast and ovarian cancer susceptibility gene BRCA1 / Y. Miki, J. Swensen, D. Shattuck-Eidens et al. // Science. 1994. -Vol. 266, №5182.-P. 66-71.

48. A systematic review of genetic polymorphisms and breast cancer risk /

49. A. M. Dunning, C. S. Healey, P. D. Pharoah et al. // Cancer Epidemiol. Biomarkers Prev. 1999. - Vol. 8, № 10. - P. 843-854.

50. A TNFR1 genotype with a protective role in familial rheumatoid arthritis / P. Dieudé, J. Osorio, E. Petit-Teixeira et al. // Arthritis and rheumatism. 2004. -Vol. 50, is. 2.-P. 413-419.

51. Aberrant subcellular localization of BRCA 1 in breast cancer / Y. Chen, C. Chen, D. Riley et al. // Science. 1995. - Vol. 270, 5237. - P. 789-791.

52. Abnormal development of peripheral lymphoid organs in mice deficient in lymphotoxin / P. De Togni, J. Goellner, N. H. Ruddle et al. // Science. 1994. - Vol. 264, № 5159. - P. 703-707.

53. Accumulation of p53 tumor suppressor gene protein: an independent marker of prognosis in breast cancers / A. D. Thor, D. IT. Moore, S. M. Edgerton et al. // J. Natl. Cancer Inst. 1992. - Vol. 84, № 11. - P. 845-855.

54. Age at any birth and breast cancer risk / D. Trichopoulos, С. C. Hsieh,

55. B. MacMahon et al. // Int. J. Cancer. 1983. - Vol. 31, № 6. - P. 701-704.

56. Albano, W. Natural history of hereditary cancer of the breast and colon / W. Albano, J. Recabaren, IT. Lynch et al. // Cancer. 1982. - Vol. 50, № 2. - P. 360-363.

57. An allelic polymorphism within the human tumor necrosis factor apromoter region is strongly associated with HLA-A1, B8, DR3 alleles / A. G. Wilson, N. de Vries, F. Pociot et al. // J. Exp. Med. 1993. - Vol. 177, № 2. - P. 557-560.

58. Anti-tumor necrosis factor therapy inhibits pancreatic tumor growth and metastasis / J. H. Egberts, V. Cloosters, A. Noack et al. // Cancer Res. 2008. -Vol. 68, №5.-P. 1443-1450.

59. Aromatase P450 gene expression in human adipose tissue / Y. Zhao, J. E. Nichols, S. E. Bulnn et al. // J. Biol. Chem. 1995. - Vol. 270, № 27. - P. 16449-16457.

60. Association of single nucleotide polymorphisms (SNPs) in TNF-LTA locus with breast cancer risk in Indian population / I. Kohaar, P. Tiwari, R. Kumar et al. // Breast Cancer Res. Treat. 2009. - Vol. 114, № 2. - P. 347-355.

61. Azmy, I. A. Role of tumour necrosis factor gene polymorphisms (-308 and -238) in breast cancer susceptibility and severity / 1. A. Azmy, S. P. Balasubramanian, A. G Wilson et al. // Breast Cancer Res. 2004. - Vol. 6, № 4. -P. R395-400.

62. Balkwill, F. Tumor necrosis factor or tumor promoting factor? / F. Balkwill // Cytokine Growth. Factor Rev. 2002. - Vol. 13, № 2. - P. 135-141.

63. Bates, R. C. Tumor necrosis factor-a stimulates the epithelial-to-mesenchymal transition of human colonic organoids / R. C. Bates, A. M. Mercurio //Mol. Biol. Cell.-2003.-Vol. 14, №5.-P. 1790-1800.

64. Baud, V. Signal transduction by tumor necrosis factor and its relatives / V. Baud, M. Karin // Trends Cell. Biol. 2001. - Vol. 11, № 9. - P. 372-377.

65. Bazzoni, F. The tumor necrosis factor ligand and receptor families / F. Bazzoni, B. Beutler // N. Engl. J. Med. 1996. - Vol. 334, № 26. - P. 1717-1725.

66. Beutler, B. Unraveling function in the TNF ligand and receptor families /

67. B. Beutler, C. van Huffel // Science. 1994. - Vol. 264, № 5159. - P. 667-668.

68. BRCA1 4153delA founder mutation in Russian ovarian cancer patients / N. Y. Krylova, O. S. Lobeiko, A. P. Sokolenko et al. // Hered. Cancer Clin. Pract. -2006.-Vol. 4.-P. 193-196.

69. BRCA1 founder mutations: population genetics and genome evolution /

70. BRCA1 is secreted and exhibits properties of a granin / R. A. Jensen, M. E. Thompson, T. L. Jetton et al. // Nat. Genet. 1996. - Vol. 12, № 3. - P. 303308.

71. Breast cancer and breastfeeding: collaborative reanalysis of individual data from 47 epidemiological studies in 30 countries, including 50302 women with breast cancer and 96973 women without the disease // Lancet. 2002. - Vol. 360, №9328.-P. 187-195.

72. Breast cancer and hormone replacement therapy: collaborative reanalysis of data from 51 epidemiological studies of 52,705 women with breast cancer and 108,411 women without breast cancer // Lancet. 1997. - Vol. 350, № 9084. - P. 1047-1059.

73. Brian, E. C. Peripheral receptor targets for analgesia: novel approaches to pain treatment / ed. by E. C. Brian. Hoboken, N. J. : John Wiley & Sons, 2009. -541 p.

74. Burton, E. R. Targeting TNF-a for cancer therapy / E. R. Burton, S. K. Libutti // J. Biology. 2009. - Vol. 8, № 9. - P. 85.

75. Cachectin/TNF kills or inhibits the differentiation of 3T3-L1 cells according to developmental stage / M. Kawakami, N. Watanabe, H. Ogawa et al. //J. Cell. Physiol. 1989.-Vol. 138, № l.-P. 1-7.

76. Cancer incidence and mortality in relation to body mass index in the

77. Million Women Study: cohort study / G. K. Reeves, K. Pirie, V. Beral et al. // BMJ. 2007. - Vol. 335, № 7630. - P. 1134.

78. Ciardiello, F. A novel approach in the treatment ofcancer: targeting the epidermal growth factor receptor / F. Ciardiello, G. Tortora // Clin. Cancer Res. -2001. Vol. 7, № 10. - P. 2958-2970.

79. Claus, E. Age at onset as an indicator of familial risk of breast cancer / E. Claus, N. J. Risch, W. D. Thompson // Amer. J. Epidemiol. 1990. - Vol. 131, №6.-P. 961-972.

80. Cohort studies of fat intake and the risk of breast cancer—a pooled analysis / D. J. Hunter, D. Spiegelman, PI. O. Adami et al. // N. Engl. J. Med. -1996. Vol. 334, № 6. - P. 356-361.

81. Colborn, T. Enveronmental estrogens : Health imolications for human and wildlife / T. Colborn // Enveron. Health Perspectivers. 1995. - Vol. 103, suppl. 7.-P. 135-136.

82. Crystal structure of TNF-a mutant R3 ID with greater affinity forreceptor R1 compared with R2 / C. Reed, Z. Q. Fu, J. Wu et al. // Protein Eng. 1997. -Vol. 10, № 10.-P. 1101-1107.

83. Cytokine gene polymorphisms and breast cancer susceptibility and prognosis / K. C. Smith, A. C. Bateman, H. M. Fussell et al. / Eur. J. Immunogenet. 2004. -Vol. 31, №4.-P. 167-173.

84. Dietary fat reduction and breast cancer outcome: interim efficacy results from the Women's Intervention Nutrition Study (WINS) / R. T. Chlebowski, G. L. Blackburn, C. A. Thomson et al. // J. Natl. Cancer Inst. 2006. - Vol. 98, № 24. -P. 1767-1776.

85. Dinarello, C. A. Immunological and inflammatory functions of the interleukin-1 family / C. A. Dinarello // Annu. Rev. Immunol. 2009. - Vol. 27. -P. 519-550.

86. Distribution of four polymorphisms in the tumour necrosis factor (TNF) genes in patients with inflammatory bowel disease (IBD) / G. Bouma, B. Xia, J. B. Crusius et al. // Clin. Exp. Immunol. 1996. - Vol. 103, № 3. - P. 391-396.

87. Duncan, L. J. The interaction of cytokines in regulating oestradiol 170-hydroxysteroid dehydrogenase activity in MCF-7 cells / L. J. Duncan, N. G. Coldham, M. J. Reed // J. Steroid Biochem. Mol. Biol. 1994. - Vol. 49, № 1. - P. 63-68.

88. Effects of a polymorphism in the human tumor necrosis factor alpha promoter on transcriptional activation / A. G. Wilson, J. A. Symons, T. L. McDowell et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1997. - Vol. 94, №> 7. - P. 3195-3199.

89. Effect of neoadjuvant treatment with anastrozole on tumour histology in postmenopausal women with large operable breast cancer / T. J. Anderson, J. M. Dixon, M. Stuart et al. // Br. J. Cancer. 2002. - Vol. 87, № 3. - P. 334-338.

90. Enhanced tumor necrosis factor in the serum and renal hypoperfusion in nephrosis associated with focal segmental glomerulosclerosis / N. Futrakul, P. Butthep, S. Patumraj et al. //Ren. Fail. 2000. - Vol. 22, № 22. - P. 213-217.

91. Estrogens, progesterons, normal breast cell proliferation, and breast cancer risk / M. C. Pike, D. V. Spicer, L. Dahmoush et al. // Epidemiol. Rev. -1993.-Vol. 15, № 1. P. 17-35.

92. Fackenthal, J. D. Breast cancer risk associated with BRCA1 and BRCA2 in diverse populations / J. D. Fackenthal, O. I. Olopade // Nat. Rev. Cancer. -2007. Vol. 7, № 12. - P. 937-948.

93. Familial breast-ovarian cancer locus on chromosome 17ql2-q23 / S. A. Narod, J. Feunteun, H. T. Lynch et al. // Lancet. 1991. - Vol. 338, № 8759. - P. 82-83.

94. Founder mutations in BRCA1 and BRCA2 genes /R. Ferla, V. Calo, S. Cascio et al. // Ann. Oncol. 2007. - Vol. 18, suppl. 6. - P. vi93-98.

95. Furth, J. Hormones as etiological agents in neoplasia / J. Furth // Cancer: a comprehensive treatise / ed. by F. Becker. 2nd ed. - New York, 1982. - Vol. 1 : Etiology: chemical and physical carcinogenesis. - P. 89-134.

96. GCF2/LRRFIP1 represses tumor necrosis factor alpha expression / A. R. Suriano, A. N. Sanford, N. Kim et al. // Mol. Cell. Biol. 2005. - Vol. 25, №20.-P. 9073-9081.

97. Genes for the tumor necrosis factors alpha and beta are linked to the human major histocompatibility complex / T. Spies, C. C. Morton, S. A. Nedospasov et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1986. - Vol. 83, № 22. - P. 8699-8702.

98. Genetic heterogeneity and penetrance analysis of the BRCA 1 and BRCA 2 genes in breast cancer families / D. Ford, D. Easton, M. Stratton et al. // Am. J. Hum. Genet. 1998. - Vol. 62, № 3. - P. 676-89.

99. Genetic linkage analysis in familial breast and ovarian cancer: results from 214 families / D. F. Easton, D. T. Bishop, D. Ford et al. // Am. J. Hum. Genet. 1993.-Vol. 52, №4.-P. 678-701.

100. Genetic polymorphisms of TGF-betal & TNF-beta and breast cancer risk / K. M. Lee, S. K. Park, N. Hamajima et al. // Breast Cancer Res. Treat. -2005. Vol. 90, № 2. - P. 149-155.

101. Golstein, P. Homology between Reaper and the cell death domains of Fas and TNFR1 / P. Golstein, D. Marguet, V. Depraetere // Cell. 1995. - Vol. 81, №2.-P. 185-186.

102. Gravestein, L. A. Tumor necrosis factor receptor family members in the immune system / L. A. Gravestein, J. Borst // Semin. Immunol. 1998. - Vol. 10, № 6. - P. 423-434.

103. Greiser, C. M. Menopausal hormone therapy and risk of breast cancer: a meta-analysis of epidemiological studies and randomised controlled trials / C. M. Greiser, E. M. Greiser, M. Doeren // Hum. Reprod. Update. 2005. - Vol. 11, №6.-P. 561-573.

104. PIereditary Factors in Gynecologic Cancer / H. T. Lynch, M. J. Casey, T. G. Shaw et al. // Oncologist. 1998. - Vol. 3, № 5. - P. 319-338.

105. Hormone therapy and the risk of breast cancer in BRCA1 mutation carriers / A. Eisen, J. Lubinski, J. Gronwald et al. // J. Natl. Cancer Inst. 2008. -Vol. 100, № 19.-P. 1361-1367.

106. Human tumor necrosis factor mutants with preferential binding to and activity on either the R55 or R75 receptor / X. Van Ostade, P. Vandenabeele, J. Tavernier et al. //Eur. J. Biochem. 1994. - Vol. 220, № 3. - P. 771-779.

107. Identification of the breast cancer susceptibilit gene BRCA 2 / R. Wooster, G. Bignell, J. Lancaster et al. // Nature. 1995. - Vol. 378, № 6559. -P.789-792.

108. Idriss, H. T. TNF alpha and the TNF receptor superfamily: structure-function relationship(s) / H. T. Idriss, J. H. Naismith // Microsc. Res. Tech. -2000.-Vol. 50, №3.-P. 184-195.

109. Increased risk of noncardia gastric cancer associated with proinflammatory cytokine gene polymorphisms / E. M. El-Omar, C. S. Rabkin, M. D. Gammon et al. // Gastroenterology. 2003. - Vol. 124, № 5. - P. 1193-1201.

110. Induced heteroduplex genotyping of TNF-alpha, IL-lbeta, IL-6 and IL-10 polymorphisms associated with transcriptional regulation / H. R. Morse, O. O. Olomolaiye, N. A. Wood et al. // Cytokine. 1999. - Vol. 11, № 10. - P. 789795.

111. Inflammatory cytokines induce DNA damage and inhibit DNA repair in cholangiocarcinoma cells by a nitric oxide-dependent mechanism / M. Jaiswal, N. F. LaRusso, L. J. Burgart et al. // Cancer Res. 2000. - Vol. 60, № 1. - P. 18490.

112. Inherited p53 gene mutations in breast cancer / D. Sidransky, T. Tokino, K. Helzlsouer et al. // Cancser Res. 1992. - Vol. 52, № 10. - P. 29842986.

113. Keen, L. J. The extent and analysis of cytokine and cytokinereceptorgenepolymorphism / L. J. Keen // Transplant Immunology. -2002. Vol. 10, № 2-3. - P. 143-146.

114. Kulidjian, A. A. Rodent models of lymphocyte migration / A. A. Kulidjian, R. Inman, T. B. Issekutz // Semin. Immunol. 1999. - Vol. 11, № 2. -P. 85-93.

115. Lang, C. PI. Tumor necrosis factor impairs insulin action on peripheral glucose disposal and hepatic glucose output / C. H. Lang, C. Dobrescu, G. J. Bagby // Endocrinology. 1992. - Vol. 130, № 1. - P. 43-52.

116. Linkage of early-onset breast cancer to chromosome 17q21 / J. M. Hall, M. K. Lee, B. Newman et al. // Science. 1990. - Vol. 250, № 4988. - P.1684-1689.

117. Localization of a breast cancer susceptibility gene, BRCA2, to chromosome 13ql2-13 / R. Wooster, S. L. Neuhausen, J. Mangion et al. // Science. 1994. - Vol. 265, № 5181. - P. 2088-2090.

118. Localization of the active site of human tumour necrosis factor (hTNF) by mutational analysis / X. Van Ostade, J. Tavernier, T. Prange et al. // EMBO J. 1991.-Vol. 10, №4.-P. 827-836.

119. Locksley, R. M. The TNF and TNF receptor superfamilies: integrating mammalian biology / R. M. Locksley, N. Killeen, M. J. Lenardo // Cell. 2001. -Vol. 104, №4. - P. 487-501.

120. Lymphotoxin beta, a novel member of the TNF family that forms a heterodimeric complex with lymphotoxin on the cell surface / J. L. Browning, A. Ngamek, P. Lawton et al. // Cell. 1993. - Vol. 72, № 6. - P. 847-856.

121. Lymphotoxin-alpha polymorphisms and presence of cancer in 1,536 consecutive autopsy cases / K. Takei, S. Ikeda, T. Arai et al. // BMC Cancer. -2008.-Vol. 8.-P. 235.

122. Lymphotoxin-alpha polymorphisms and the risk of endometrial cancer in Japanese subjects / Y. Niwa, PI. Ito, K. Matsuo et al. // Gynecol. Oncol. -2007. Vol. 104, № 3. p. 586-590.

123. MacEwan, D. J. TNF receptor subtype signalling: differences and cellular consequences / D. J. MacEwan // Cell. Signal. 2002. - Vol. 14, № 6. -P. 477-492.

124. Macrophages induce invasiveness of epithelial cancer cells via NF-kappa B and JNK / T. Hagemann, J. Wilson, H. Kulbe et al. // J. Immunol. -2005.-Vol. 175, №2.-P. 1197-1205.

125. Mathew, C. G. The isolation of high molecular weight eukaryotic DNA / C. G. Mathew // Methods Mol. Biol. 1985. - Vol. 2. - P. 31-34.

126. Molecular epidemiology of genetic susceptibility to gastric cancer: focus on single nucleotide polymorphisms in gastric carcinogenesis / M. Yin, Z. Hu, D. Tan et al. // Am. J. Transl. Res. 2009. - Vol. 1, № 1. - P. 44-54.

127. Mutation analysis of the BRCA1 and BRCA2 genes in the Belgian patient population and identification of a Belgian founder mutation BRCA1 IVS5 + 3A > G / K. Claus, E. Machakova, D. Vos et al. // Dis. Markers. 1999. - Vol. 15, № 1-3.-P. 69-73.

128. Mutational analysis of the BRCA1 tumor suppressor gene in endometrial carcinoma / F. S. Liu, E. S. Ho, R. T. Shih et al. // Gynecol. Oncol. 1997.-Vol. 66, №3.-P. 449-453.

129. Nagata, S. Apoptosis by death factor / S. Nagata // Cell. 1997. - Vol. 88, №3.-P. 355-365.

130. Narod, S. A. Modifiers of risk of hereditary breast and ovarian cancer / S. A. Narod // Nat. Rev. Cancer. 2002. - Vol. 2, № 2. - P. 113-123.

131. Nathanson, K. L. Breast cancer genetics: what we know and what we need / K. L. Nathanson, R. Wooster, B. L. Weber // Nat. Med. 2001. - Vol. 7, № 5.-P. 552-556.

132. Neuhausen, S. L. Founder populations and their uses for breast cancer genetics / S. L. Neuhausen // Breast Cancer Res. 2000. - Vol. 2, № 2. - P. 7781.

133. NF-kB activation of human breast cancer specimens and its role in cell proliferation and apoptosis / D. K. Biswas, Q. Shi, S. Baily et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-2004.-Vol. 101,№27.-P. 10137-10142.

134. Non-dietary factors as risk factors for breast cancer, and as effect modifiers of the association of fat intake and risk of breast cancer / D. J. Hunter, D. Spiegelman, H. O. Adami et al. // Cancer Causes Control. 1997. - Vol. 8, № l.-P. 49-56.

135. Non-esterified fatty acids and alpha 1-fetoprotein are the modulators ofuterine binding of estrogens during development in the rat / G. Vallette, C. Benassayag, N. Christeff et al. // Dev. Pharmacol. Ther. 1984. - Vol. 7, suppl. l.-P. 30-37.

136. Obesity, androgens, estrogens and cancer risk / M. A. Kirschner, G. Schneider, N. H. Ertel et al. // Cancer Res. 1982. - Vol. 42, suppl. 8. - P. 3281s-3285s.

137. Oestrogen receptor negative breast cancer exhibit high cytokine content / C. Charvey, F. Bibeau, S. Gourgou-Bourgade et al. // Breast Cancer Res. -2007.-Vol. 9, № l.-P. R15.

138. Oral contraceptive use and breast or ovarian cancer risk in BRCA1/2 carriers: a meta-analysis / S. Iodice, M. Barile, N. Rotmensz et al. // Eur. J. Cancer. -2010. Vol. 46, № 12. - P. 2275-2284.

139. Parity and breast cancer risk among BRCA1 and BRCA2 mutation carriers / A. C. Antoniou, A. Shenton, E. R. Maher et al. // Breast Cancer Res. -2006. Vol. 8, № 6. - P. R72.

140. Paul, N.L. Lymphotoxin / N. L. Paul, N. H. Ruddle // Annu. Rev. Immunol. 1988. - Vol. 6. - P. 407-438.

141. Pharmacogenetic investigation of the TNF/TNF-receptor system in patients with chronic active Crohn's disease treated with infliximab / S. Mascheretti, J. Hampe, T. Kiihbacher et al. // Pharmacogenomics J. 2002. -Vol. 2, №2.-P. 127-136.

142. Physical status: the use and inteipretation of anthropometry : report ofa WHO Expert Committee. Geneva : World Health Organization, 1995. - 452 p. : ill.

143. Polymorphisms of tumor necrosis factor-alpha are associated with increased susceptibility to gastric cancer: a meta-analysis / J. Zhang, C. Dou, Y. Song et al. // J. Hum. Genet. 2008. - Vol. 53, № 6. - P. 479-489.

144. Prevention of DMBA-induced rat mammary carcinomas comparing leuprolide oophrectomy and tamoxifen / A. B. Hollingsworth, M. R. Lerner, S. A. Lightfoot et al. // Breast Cancer Res. Treat. 1998. - Vol. 47, № 1. - P. 63-70.

145. Purohit, A. The role of cytokines in regulating estrogen synthesis: implication for the etiology of breast cancer / A. Purohit, S. P. Newman, M. J. Reed // Breast. Cancer Res. 2002. - Vol. 4, № 2. - P. 65-69.

146. Recent developments in the molecular genetic understanding of breast cancer / P. Devilee, E. Schuuring, M. J. van de Vijver et al. // Crit. Rev. Oncogen. 1994. - Vol. 5, № 2-3. - P. 247-270.

147. Role of ethnic variations in TNF-a and TNF-(3 polymorphisms and risk of breast cancer in India / S. Pooja, A. Francis, H. K. Bid et al. // Breast. Cancer Res. Treat. 2011. - Vol. 126, № 3. - P. 739-747.

148. Role of tumor necrosis factor receptor 2 (TNFR2) in colonic epithelial hyperplasia and chronic intestinal inflammation in mice / E. Mizoguchi, A. Mizoguchi, IT. Takedatsu et al. // Gastroenterology. 2002. - Vol. 122, № 1. - P. 134-144.

149. Role of tumour necrosis factor gene polymorphisms (-308 and -238) in breast cancer susceptibility and severity / Iman A. F. Azmy, S. P. Balasubramanian, A. G. Wilson et al. // Breast Cancer Res. 2004. - Vol. 6, №4. P. R395-R400.

150. Schlesselman, J. J. Case-control studies: design, conduct, analysis / J. J. Schlesselman ; with contributions by P. D. Stolley. New York : Oxford University Press, 1982. - 354 p.: ill.

151. Schmitt, C. A. Apoptosis and therapy / C. A. Schmitt, S. W. Lowe // J. Pathol. 1999. - Vol. 187, № 1. - P. 127-137.

152. Screening for germ line TP53 mutations in breast cancer patients / A. L. Borresen, T. I. Andersen, J. Garber et al. // Cancer Res. 1992. - Vol. 52, № 11.-P. 3234-3236.

153. Secretion imbalance between tumour necrosis factor and its inhibitor in inflammatory bowel disease / M. Noguchi, N. Hiwatashi, Z. Liu et al. // Gut. -1998. Vol. 43, № 2. - P. 203-209.

154. Serum sex hormone levels after menopause and subsequent breast cancer / F. Berrino, P. Muti, A. Micheli et al. // J. Nat. Cancer Inst. 1996. -Vol. 88, №5.-P. 291-296.

155. Serum sex hormone levels are related to breast cancer risk in postmenopausal women / J. F. Dorgan, C. Longcope, H. E. Jr. Stephenson et al. //Environ. Health Perspect. 1997.-Vol. 105, suppl. 3. - P. 583-585.

156. Serum tumor necrosis factor in mesangial IgA glomerulonephritis with macroscopic hematuria in children / S. Inaba, T. Takahashi, S. Ishihara et al. // Nephron. 1996. - Vol. 72, № 4. - P. 518-522.

157. Severity of symptoms and demyelination in MOG-induced EAE depends on TNFR1 / H. P. Eugster, K. Frei, R. Bachmann et al. // Eur. J. Immunol. 1999. - Vol. 29, № 2. - P. 626-632.

158. Sheeran, P. Cytokines in anaesthesia / P. Sheeran, G. M. Hall // Br. J. Anaesth. 1997. - Vol. 78, № 2. - P. 201-219.

159. Smith, C. A. The TNF receptor superfamily of cellular and viral proteins: activation, costimulation, and death / C. A. Smith, T. Farrah, R. G. Goodwin // Cell. 1994. - Vol. 76, № 6. - P. 959-962.

160. Sokolenko, A. P. Founder mutations in early onset, familial and bilateral breast cancer patients from Russia / A. P. Sokolenko, M. E. Rozanov, N. V. Mitiushkina et al. // Fam. Cancer. -2007. Vol. 6, № 3. - P. 281-286.

161. Soussi, T. p53 website and analysis of p53 gene mutations in human cancer: forging a link between epidemiology and carcinogenesis / T. Soussi, K. Dehouche, C. Beroud//Plum. Mutat. 2000.-Vol. 15, № l.-P. 105-113.

162. Splice-site mutation of the p53 gene in a family with hereditary breast-ovarian cancer / K. W. Jolly, D. Malkin, E. C. Douglass et al. // Oncogene. -1994. Vol. 9, № 1. - P. 97-102.

163. Stimulation of bone resorption and inhibition of bone formation in vitro by human tumour necrosis factors / D. R. Bertolini, G. E. Nedwin, T. S. Bringman et al. //Nature. 1986.- Vol. 319, № 6053. -P. 516-518.

164. Stimulation of human T-cell proliferation by specific activation of the 75-kDa tumor necrosis factor receptor / L. A. Tartaglia, D. V. Goeddel, C. Reynolds et al. //J. Immunol. 1993. - Vol. 151, № 9. - P. 4637-4641.

165. Subcutaneous adipose tissue releases interleukin-6, but not tumor necrosis factor-alpha, in vivo / V. Mohamed-Ali, S. Goodrick, A. Rawesh et al. // J. Clin. Endocrinol. Metab. 1997. - Vol. 82, № 12. - P. 4196-4200.

166. Susceptibility for and clinical manifestations of rheumatoid arthritis are associated with polymorphisms of TNF-alpha, IL-1 beta, and IL-IRa genes / J. Cvetkovic, S. Wallberg-Johnson, B. Stegmayr et al. // J. Rheumatol. 2002. -Vol. 29, №2.-P. 212-219.

167. Szlosarek, P. Tumour necrosis factor-a as a tumour promoter / P. Szlosarek, K. A. Charles, F. R. Balkwill // Eur. J. Cancer. 2006. - Vol. 42, № 6. -P. 745-750.

168. Szlosarek, P. W. Tumour necrosis factor alpha: a potential target for the therapy of solid tumours / P. W. Szlosarek, F. R. Balkwill // Lancet Oncol. 2003.- Vol. 4, № 9. P. 565-573.

169. The expression of tumor necrosis factor in human adipose tissue. Regulation by obesity, weight loss, and relationship to lipoprotein lipase / P. A. Kern, M. Saghizadeh, J. M. Ong et al. //J. Clin, invest. 1995. - Vol. 95, № 5. -P. 2111-2119.

170. The gene polymorphism of tumor necrosis factor-P, but not that of tumor necrosis factor-a, is associated with the prognosis of sarcoidosis / E. Yamaguchi, A. Itoh, N. Hizawa et al. // Chest. 2001. - Vol. 119, № 3. - P. 753761.

171. The Inflammatory Cytokine Tumor Necrosis Factor-a Generates an Autocrine Tumor-Promoting Network in Epithelial Ovarian Cancer Cells / H. Kulbe, R. Thompson, J. L. Wilson et al. // Cancer Res. 2007. - Vol. 67, № 2. -P. 585-592.

172. The protective role of pregnancy in breast cancer / J. Russo, R. Moral, G. A. Balogh et al. // Breast Cancer Res. 2005. - Vol. 7, № 3. - P. 131 -142.

173. The role of tumor necrosis factor (TNF)-alpha and TNF receptor polymorphisms in susceptibility to ankylosing spondylitis / A. Chatzikyriakidou, I. Georgiou, P. V. Voulgari et al. // Clin. Exp. Rheumatol. 2009. - Vol. 27, № 4.-P. 645-648.

174. The tumor-promoting actions of TNF-a involve TNFR1 and IL-17 in ovarian cancer in mice and humans / K. A. Charles, PI. Kulbe, R. Soper et al. // J. Clin. Invest. 2009. - Vol. 119,№ 10.-P. 3011-3023.

175. Time-modulated oscillatory structures in phase-separating reactive mixtures / S. Sugiura, T. Okuzono, T. Ohta // Phys. Rev. E. Star. Nonlin. Soft Matter Phys.- 2002.- Vol. 66, № 6. Pt. 2. P. 066216.

176. TNF receptor-deficient mice reveal divergent roles for p55 and p75 in several models of inflammation / J. J. Peschon, D. S. Torrance, K. L. Stocking et al. // J. Immunol. 1998. - Vol. 160, № 2. - P. 943-952.

177. TNF-alpha polymorphisms and breast cancer / Y. Yang, R. Feng, S. Bi et al. // Breast Cancer Res. Treat. 2011. - Vol. 129, № 2. - P. 513-519.

178. TNF-alpha stimulates monocyte adhesion to glomerular mesangial cells. The role of intercellular adhesion molecule-1 gene expression and protein kinasesi / R. Pai, B. Bassa, M. A. Kirschenbaum et al. // J. Immunol. 1996. -Vol. 156, №7.-P. 2571-2579.

179. TNFR1 promoter -329G/T polymorphism results in allele-specific repression of TNFR1 expression / S. Kim, S. M. Moon, Y. S. Kim et al. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2008. - Vol. 368, № 2. - P. 395-401.

180. TNFR2 gene polymorphism in coronary artery disease / V. H. Sankar, K. M. Girisha, A. Gilmour et al. // Indian J. Med. Sci. 2005. - Vol. 59, № 3. -P. 104-108.

181. TRADD-TRAF2 and TRADD-FADD interactions define two distinct TNF receptor 1 signal transduction pathways / IT. Hsu, PI. B. Shu, M. G. Pan et al. // Cell. 1996. - Vol. 84, № 2. - P. 299-308.

182. Tumor necrosis factor (TNF) alpha and its soluble receptor (sTNFR) p75 during acute human parvovirus B19 infection in children / J. Barash, D. Dushnitzki, Y. Barak et al. // Immunol. Lett. 2003. - Vol. 88, № 2. - P. 109112.

183. Tumor necrosis factor gene complex in COPD and disseminated bronchiectasis / C. Patuzzo, L. S. Gile, M. Zorzetto et al. // Chest. 2000. - Vol. 117, №5.-P. 1353-1358.

184. Tumor necrosis factor gene polymorphisms, leukocyte function, and sepsis susceptibility in blunt trauma patients / M. Majetschak, U. Obertacke, F. U.

185. Schade et al. // Clin. Diagn. Lab. Immunol. 2002. - Vol. 9, № 6. - P. 12051211.

186. Tumor necrosis factor-a is a potent endogenous mutagen that promotes cellular transformation / B. Yan, H. Wang, Z. N. Rabbani et al. // Cancer Res. -2006.-Vol. 66, №24.-P. 11565-11570.

187. Tumor vasculature-targeted delivery of tumor necrosis factor-alpha / A. Tandle, E. Hanna, D. Lorang et al. // Cancer. 2009. - Vol. 115, № 1. - P. 128-139.

188. Tumors producing human tumor necrosis factor induced hypercalcemia and osteoclastic bone resorption in nude mice / R. A. Johnson, B. F. Boyce, G. R. Mundy et al. // Endocrinology.- 1989. -Vol. 124, № 3. P. 1424-1427.

189. Tumor necrosis factor (TNF)-TNF receptor gene polymorphisms and their serum levers in Korean women with endometriosis / S. J. Chae, FI. Kim, B. C. Jee et al. // Am. J. Reprod. Immunol. 2008. - 60, № 5. - P. 432-439.

190. Tumour-necrosis factor-A polymorphisms and gastric cancer risk: a meta-analysis / F. Gorouhi, F. Islami, FI. Bahrami et al. // Br. J. Cancer. 2008. -Vol. 98, № 8.-P. 1443-1451.

191. Vassalli, P. The pathophysiology of tumor necrosis factors / P. Vassalli // Annu. Rev. Immunol. 1992. - Vol. 10. - P. 411 -452.

192. Worm, M. Lymphotoxin-a is an important autocrine factor for CD40 + interleukin-4-mediated B-cell activation in normal and atopic donors / M. Worm, K. Ebermayer, B. Flenz // Immunology. 1998. - Vol. 94, № 3. - P. 395-402.

193. Wynder, E. L. Does alcohol consumption influence the risk of developing breast cancer? Two views / E. L. Wynder, R. E. Harris // Important advances in oncology 1989 / ed. by V. T. De Vita, S. Hellman, S. A. Rosenberg. -Philadelphia, 1989. P. 283-293.

Информация о работе

Луговая, Ольга Владимировна
кандидата медицинских наук
Белгород, 2012
ВАК 03.02.07

Диссертация

Изучение ассоциаций полиморфизма генов факторов некроза опухолей и их рецеп-торов с формированием рака молочной железы - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы