Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Изменения в системном и локальном иммунитете при синдроме хронической обстипации и способы их коррекции

ВАК РФ 03.00.15, Генетика

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Алексеева, Екатерина Александровна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР.

1.1. Синдром хронической обстипации.

1.2. Системный и локальный иммунитет в реализации воспалительных процессов в желудочно-кишечном тракте.

1.2.1. Цитокины - медиаторы межклеточных взаимодействий.

1.2.2. Нейтрофильные гранулоциты - фактор иммунной защиты и повреждения организма.

1.2.3. Воспалительные процессы в слизистой желудочно-кишечного тракта.

1.3. Микробиоценоз кишечника как фактор модуляции иммуно-реактивности организма.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1. Характеристика клинического материала.

2.2. Общеклинические исследования.

2.2.1. Анамнестические исследования.

2.2.2. Клинические наблюдения за состоянием больного.

2.3. Иммунологические методы исследования.

2.3.1. Выделение чистой взвеси лимфоцитов и нейтрофилов на двойном градиенте плотности.

2.3.2. Иммунофлюоресцентный метод определения Т- и В-лимфоцитов и их субпопуляций с помощью панели моно-клональных антител.

2.3.3. Иммунофлюоресцентный метод определения субпопуляций нейтрофильных гранулоцитов.

2.3.4. Определение содержания иммуноглобулинов (IgA, IgM,

IgG) в сыворотке крови.

2.3.5. Реакция бактериального фагоцитоза нейтрофилов с определением степени завершенности.

2.3.6. Оценка оксидазных микробицидных систем нейтрофильных гранулоцитов в спонтанном и стимулированном NBT-тесте.

2.3.7. Определение цитокинового профиля в сыворотке крови.

2.3.8. Иммуногистохимический метод определения ИЛ-1(3 и ИЛв слизистой толстой кишки.

2.4. Бактериологический анализ.

2.5. Статистическая обработка материала.

Глава 3. ОСОБЕННОСТИ ФУНКЦИОНИРОВАНИЯ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ И СИСТЕМЫ ЦИТОКИНОВ ПРИ СИНДРОМЕ ХРОНИЧЕСКОЙ ОБСТИПАЦИИ.

3.1. Особенности иммунного статуса пациентов с синдромом хронической обстипации.

3.1.1. Характеристика клеточного и гуморального иммунитета пациентов с синдромом хронической обстипации.

3.1.2. Нейтрофильные гранулоциты и их дисфункции при синдроме хронической обстипации.

3.2. Особенности цитокинового профиля при синдроме хронической обстипации.

3.2.1. Содержание провоспалительных цитокинов IL-lp и IL-8 в слизистой толстой кишки при синдроме хронической обстипации.

3.2.2. Изменения в системном цитокиновом статусе у пациентов с синдромом хронической обстипации.

Глава 4. ВОЗМОЖНОСТИ КОРРЕКЦИИ НАРУШЕНИЙ ИММУНИТЕТА ПРИ СИНДРОМЕ ХРОНИЧЕСКОЙ ОБСТИПАЦИИ ИММУНОМОДУЛЯТОРОМ ПОЛИОК-СИДОНИЕМ.

4.1. Клинико-иммунологическая эффективность монотерапии полиоксидонием.

4.1.1. Влияние иммунотерапии полиоксидонием на состояние клеточного и гуморального иммунитета у пациентов с синдромом хронической обстипации.

4.1.2. Полиоксидоний в коррекции дисфункций нейтрофильных гранулоцитов пациентов с синдромом хронической обстипации.

4.1.3. Влияние полиоксидония на содержание цитокинов в сыворотке крови пациентов с синдромом хронической обстипации.

Глава 5. МИКРОБИОЦЕНОЗ ТОЛСТОЙ КИШКИ ПРИ СИНДРОМЕ ХРОНИЧЕСКОЙ ОБСТИПАЦИИ И ВОЗМОЖНОСТИ ЕГО КОРРЕКЦИИ ПОЛИОКСИДОНИЕМ.

5.1. Особенности нарушений микрофлоры (микробиологический портрет) при СХО.

5.2. Пробиотическая активность полиоксидония.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Изменения в системном и локальном иммунитете при синдроме хронической обстипации и способы их коррекции"

Актуальность темы. Иммунная система человека филогенетически сложилась как система адаптации макроорганизма к окружающим его внешним повреждающим воздействиям. Не существует практически ни одного заболевания, не сопровождающегося иммунной недостаточностью, которая проявляется изменениями клеточного, гуморального звеньев иммунитета, системы нейтрофильных гранулоцитов (НГ), патологией функционирования цитокиновой сети [С.А. Кетлинский и др., 1998; И.В. Нестерова и др., 1999, 2002; А.С. Симбирцев, 1998, 2002; А.А. Ярилин, 1999].

Синдром хронической обстипации (СХО), запор, стазовая болезнь, ко-лостаз — это клинико-функциональный синдром, выражающийся в комплексе различных симптомов, связанных с нарушением опорожнения кишечника. В последние годы интерес к СХО заметно повысился, что объясняется значительным распространением данной патологии среди населения планеты. По самым скромным оценкам, хроническими запорами страдает свыше 20% всего взрослого населения земного шара. Запор - признак целого ряда заболеваний желудочно-кишечного тракта (ЖКТ), особенно толстой кишки [A.JI. Гребенев, Л.П. Мягкова, 1994; И.В. Маев и др., 2000; Хаммад Е.В., Григорьева Г.А., 2000; N.S. Painter., 1980].

Важными условиями нормального функционирования ЖКТ является определенный качественный и количественный состав кишечного содержимого, эубиотическое состояние кишечного микробиоценоза и адекватная иммунная реактивность GALT-системы ЖКТ и всей иммунной системы в целом. На фоне кишечного стаза изменяются условия существования нормальной микрофлоры, заселяющей просвет кишки. Все это создает предпосылки для размножения патогенной флоры и развития дисбактериоза [П.В. Сирта-ков, 1981; С.Н. Наврузов и др., 1987; С.Н. Наврузов, 1988; С. Dunne, 2001]. Наряду с явлениями дисбактериоза при субкомпенсированной и декомпенси-рованной формах толстокишечного стаза отмечаются нарушения иммунного статуса [С.Н. Наврузов, 1988]. СХО нередко сопровождается выраженным воспалением слизистой оболочки толстой кишки, периколитом, воспалитель-но-рубцовыми изменениями в брыжейке, образованием межкишечных и межпетлевых брюшинных спаек, интоксикацией, изменением дезинтоксика-ционной функции печени и почек [С.Н. Наврузов и др., 1987; Н.И. Царев, 1981]. Несмотря на распространенность СХО среди населения во всем мире и целый комплекс нарушений, являющихся как причиной, так и следствием СХО, способы терапии сводятся, в основном, к восстановлению моторно-эвакуаторной функции кишечника и недостаточно учитывают необходимость нормализации кишечной микрофлоры и иммунного гомеостаза, которые к тому же до настоящего времени практически не изучены [А.Н. Окороков, 1995; А.В. Фролькис, 1993]. Высокая частота неудовлетворительных результатов консервативного и хирургического лечения толстокишечного стаза заставляет исследовать как механизмы, лежащие в основе этиопатогенеза данной патологии, так и искать новые подходы к лечению. Принимая во внимание, что иммунная система функционирует как многокомпонентное целое, оценка дисбаланса и дисфункции различных показателей иммунного статуса при различных патологиях, и в частности при СХО, должна проводиться комплексно. Это позволит целенаправленно и обоснованно проводить полноценную иммунокоррекцию [И.В. Нестерова, 1992, 1996; В.Е. Нефедова, 1992].

Известно, что НГ занимают особое место в системе иммунитета, участвуя одновременно в регуляции и реализации физиологических механизмов неспецифической и специфической иммунологической защиты, поддерживая тем самым иммунный гомеостаз. В то же время нейтрофилы, защищая организм от различных повреждающих факторов, играют основную роль в патогенезе воспаления [J.A. Smith, 1994].

Отмечено, что в течение последних 10-15 лет значительно увеличилось количество пациентов, страдающих вторичными иммунодефицитными состояниями (ИДС), протекающими на фоне дефектно функционирующей системы НГ [И.В. Нестерова, 1992; И.В. Нестерова, Н.В. Колесникова, 1999]. В основе дисфункций НГ лежат различные звенья формирования клеточного ответа - от восприятия антигенного стимула до секреции ферментов, синтеза цитокинов и т.п. [И.Ю. Блинников, А.П. Корчагина, 1992; И.И. Дзержинская, 1982; И.В. Нестерова, 1980, 1992]. Также как и ослабление функциональной активности НГ, их гиперактивация может способствовать развитию различных патологических состояний, вызывая оксидативный стресс в окружающих тканях [Н.М. Бережная, 1988; C.G. Cochrane, 1991; В. Fontes, R. Sergio-Pogetti, 1996; М.В. Grisham, D.N. Granger, 1988; К. Kobayashi et al. 1998; P.A. Ward, J. Varani, 1993].

Оценка функционального состояния системы НГ - основной в количественном отношении клеточной популяции периферической крови, оснащенной мощными микробицидными и цитотоксическими механизмами, остается малоизученной при данной патологии, что и, вызывает определенный интерес к более углубленному изучению системы НГ у пациентов с СХО.

В последние годы, благодаря развитию методов количественного определения уровней продукции цитокинов, был достигнут значительный прогресс в понимании роли некоторых цитокинов в норме и при патологии. Было установлено, что цитокины служат важнейшими факторами иммунопато-генеза широкого круга заболеваний человека. Оценка содержания цитокинов в биологических жидкостях дает неоценимую помощь для характеристики состояния иммунной системы организма [А.В. Демьянов и др., 2003]. На сегодняшний момент, диагностическая значимость оценки уровня цитокинов заключается в констатации самого факта повышения или снижения уровня цитокинов у данного больного с конкретным заболеванием, в определении связи этих изменений с течением заболевания, а также в возможном использовании сведений о цитокинах для оценки эффективности проводимого лечения. Диагностическая ценность подобных анализов при некоторых патологиях определена не в полной мере, а при СХО эти данные отсутствуют вовсе в доступной литературе.

Присутствие нормальной бактериальной флоры, которая не только угнетает рост многих патогенных и условно-патогенных микроорганизмов вследствие микробного антагонизма, но и способствует установлению и развитию нормального (адекватного) иммунного ответа, является чрезвычайно важным фактором в поддержании иммунного гомеостаза слизистых и всей иммунной системы в целом. Описанные в литературе изменения в композиции кишечной микрофлоры при СХО [С.Н. Наврузов и др., 1987; С.Н. Наврузов, 1988; П.В. Сиртаков, 1981; С. Dunne, 2001] указывают на необходимость исследования микробиоценоза в комплексе с изучением иммунного статуса.

Разработка и совершенствование средств терапии СХО, а также проблема целенаправленного воздействия на иммунный процесс при данной патологии, несомненно, является одной из важнейших проблем гастроэнтерологии и клинической иммунологии.

К иммунотерапевтическим средствам, полученным с помощью направленного химического синтеза, относится препарат полиоксидоний (ПО) -нетоксичный, водорастворимый, биодеградируемый синтетический полимер. Благодаря сочетанию иммуномодулирующих свойств с детоксикационными, антиоксидантными и мембранопротекторными свойствами, ПО эффективно используется в профилактике и лечении острых и хронических инфекционных процессов различной этиологии, характеризующихся устойчивостью к адекватной этиотропной терапии [В.А. Александрова, Ф.Н. Рябчук, 2004; Т.В. Латышева и др., 2001; Л.В. Лусс и др., 2000; Р.В. Петров и др., 1999; Б.В. Пинегин, 2000; В.Д. Шаповалов, 2001; P.M. Хаитов, Б.В. Пинегин, 1999, 2000].

Выраженная иммунотропная активность ПО в отношении НГ, наличие иммуномодулирующих эффектов на уровне местного мукозального иммунитета, а также его высокая детоксикационная и антиоксидантная способности определили выбор данного препарата в качестве иммуномодулятора при исследуемом синдроме.

В связи с изложенным, отчетливо просматривается необходимость комплексного исследования структуры дисбаланса на уровне местного и системного иммунитета при СХО с параллельным изучение микробиоценоза толстой кишки, а также изучение возможности применения ПО в качестве иммуномодулятора.

Цель исследования. Изучить особенности системного и локального иммунитета при синдроме хронической обстипации и с учетом выявленных нарушений разработать программу иммуномодулирующей терапии.

Задачи исследования.

1. Изучить особенности системного иммунитета с углубленным тестированием системы нейтрофильных гранулоцитов при синдроме хронической обстипации.

2. Оценить особенности состояния системного и локального цитокиново-го профиля у пациентов с синдромом хронической обстипации.

3. Провести сопоставительный анализ особенностей локального и системного цитокинового профиля при синдроме хронической обстипации.

4. Провести изучение клинико-иммунологической эффективности монотерапии полиоксидонием при синдроме хронической обстипации.

5. Изучить особенности микрофлоры кишечника при синдроме хронической обстипации.

6. Установить возможности влияния полиоксидония на микробиоценоз кишечника при синдроме хронической обстипации.

Научная новизна работы.

1. Впервые изучены особенности системного иммунитета с углубленным тестированием системы нейтрофильных гранулоцитов при синдроме хронической обстипации.

2. Впервые исследованы особенности состояния системного и локального цитокинового профиля у пациентов с синдромом хронической обсти-пации.

3. Впервые систематизированы дефекты функционирования локального и системного иммунитета при синдроме хронической обстипации.

4. Впервые проведено изучение иммунологической эффективности поли-оксидония на системный иммунитет и определение возможности влияния полиоксидония на микробиоценоз кишечника.

5. Впервые проведен сопоставительный анализ особенностей дефектов системного иммунитета и нарушений микробиоценоза кишечника до и после терапии полиоксидонием.

Научно-практическая значимость работы.

1. Выполненное исследование позволяет расширить современные знания о системном и локальном иммунитете при синдроме хронической обстипации, а также выявить особенности функционирования системы нейтрофильных гранулоцитов, цитокинов и микрофлоры толстой кишки.

2. Включение полиоксидония в комплексную терапию синдрома хронической обстипации повышает ее клинико-иммунологическую эффективность.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. При синдроме хронической обстипации имеет место комбинированное поражение иммунной системы в разнообразных сочетаниях.

2. Одними из наиболее информативных иммунодиагностических критериев при синдроме хронической обстипации являются показатели, характеризующие функциональную активность нейтрофильных гранулоцитов (фагоцитарная активность, состояние кислородзависимой микробицидной систем и ответы в функциональных нагрузочных тестах in vitro), цитокиновый статус и микробиоценоз кишечника.

3. Разработанная тактика иммунокоррекции у лиц, страдающих СХО, обладает высоким клинико-иммунологическим эффектом.

4. Применение полиоксидония для иммуномодуляции патогенетически оправдано и способствует улучшению качества жизни пациентов.

Внедрение результатов в практику.

Практические рекомендации, полученные в результате проведенного исследования, используются для лечения больных с синдромом хронической обстипации в Российском центре функциональной хирургической гастроэнтерологии.

Апробация работы.

Основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены на 18-й Всероссийской конф. «Физиология и патология пищеварения» в г. Геленджике, 4-6 сентября 2002 г.; научно-практической конференции молодых ученых Краснодарского края (ВДЦ «Орленок», 8-11 декабря 2002 г.); Международной научно-практической школе-конференции «Цитокины. Воспаление. Иммунитет» в г. Санкт-Петербурге 23-26 июня 2002 г.; V Съезде иммунологов и аллергологов СНГ в г. Санкт-Петербурге, Россия, 5-11 июля 2003г.; 19 Всероссийской конференции «Физиология и патология пищеварения» в г. Сочи, 3-5 ноября 2004 г.

Публикации.

По теме диссертации опубликовано 13 печатных работ.

Объем и структура диссертации.

Работа изложена на 163 странице и состоит из глав: " Введение", " Обзор литературы", "Материалы и методы", 3 глав собственных исследований, заключения", "выводов", указателя литературы. Последний содержит 155 работ отечественных и 250 зарубежных авторов. Диссертация иллюстрирована 12 таблицами и 21 рисунком. Работа выполнена на базе ФГУ «Российский центр функциональной хирургической гастроэнтерологии Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию».

Выражаю глубокую и искреннюю благодарность своему учителю и научному руководителю Ирине Вадимовне Нестеровой, сотрудникам Центра клинической и экспериментальной иммунологии, лабораторий микробиологии и патологической анатомии РЦФХГ.

Заключение Диссертация по теме "Генетика", Алексеева, Екатерина Александровна

выводы.

1. У пациентов с синдромом хронической обстипации выявлены разнообразные дефекты функционирования иммунной системы, - у 84,62% обследованных пациентов имеет место комбинированное поражение иммунной системы в различных сочетаниях: у 20,51% больных наблюдалось сочетанное поражение клеточного, гуморального звена иммунитета и системы НГ, у 25,64% - гуморального звена и системы НГ, у 38,46% - клеточного звена и системы НГ.

2. Нарушения в системе НГ, как изолированного, так и сочетанного характера, наблюдались в 100% случаев. Выявлена дискордантность между активированным рецепторным аппаратом при высокой спонтанной активности мембранных оксидаз и депрессированным фагоцитозом - с нарушенными процессами захвата и киллинга бактерий на фоне сниженного ответа кислородзависимых микробицидных систем на дополнительную бактериальную нагрузку.

3. Установлено наличие IL-1{3- и IL-8-продуцирующих клеток в слизистой толстой кишки при СХО, повышенное в участках тканей с характерными признаками хронического воспаления, наличие которого было подтверждено гистологическим исследованием.

4. Установлено, что в целом у пациентов, страдающих СХО, увеличена сывороточная концентрация как IL-ip, TNFa и IL-8, так и рецепторного антагониста IL-1 (IL-lra), представляющих, соответственно, группу медиаторов с про- и противовоспалительными свойствами. При этом у пациентов с СХО выявлено увеличение в 1,7 раза соотношения уровня противовоспалительных цитокинов к провоспалительным (IL-lra+IL-4)/(IL-ip+TNFa+IL-8) по сравнению со здоровыми лицами.

5. Обнаружена выраженная клиническая эффективность полиоксидония при СХО: проявления астено-вегетативного синдрома уменьшились в 2,4 раза, а диспептического - в 2 раза.

6. Монотерапия полиоксидонием способствовала восстановлению дисфункций НГ: нормализовалась фагоцитарная активность, активизировалась работа мембранных оксидаз в условиях дополнительной бактериальной нагрузки.

7. Влияние полиоксидония на уровень сывороточных цитокинов неоднозначно: отмечены тенденции к незначительному снижению концентрации IL-lra, повышению уровней IL-4, TNFa и IL-ip. Полиоксидоний еще больше увеличил соотношение уровня противовоспалительных цитокинов к провоспалительным (IL-lra+IL-4)/(IL-l(3+TNFa+IL-8), сохранив смещение цитокинового баланса преимущественно в сторону противовоспалительных медиаторов.

8. Выявлены достоверные изменения состава кишечной микрофлоры при СХО: снижение количества и функциональной активности бифидо- и лактобактерий. Характер нарушений существенно зависел от присутствия в составе микробиоценоза условно-патогенной флоры, среди которой преобладали представители рода Enterobacter с уреазной активностью. Монотерапия полиоксидонием у больных с СХО положительно влияла на состояние микрофлоры кишечника в результате стимуляции роста и функциональной активности лактобактерий и, меньшей степени, бифидобактерий, что позволяет отнести этот препарат к разряду пребиотиков.

Заключение.

Проведенная работа посвящена комплексному расширенному изучению состояния иммунной системы, системы цитокинов и структуры микробиоценоза толстой кишки при синдроме хронической обстипации. Самостоятельный интерес представляло исследование иммунорегуляторной роли им-муномодулятора полиоксидония при данной патологии.

Средние показатели клеточного и гуморального иммунитета в группе пациентов с СХО достоверно не отличались от аналогичных в группе здорового контроля. Нарушения нами были обнаружены только при исследовании системы НГ и оценки цитокинового статуса. Однако, при анализе индивидуальных иммунограмм нами были выявлены разнообразные виды нарушений иммунитета у всех больных (в 100% случаев). Установлено, что у 84,62% обследованных пациентов имело место комбинированное поражение иммунной системы в разнообразных сочетаниях. При этом у 20,51% больных наблюдалось поражение клеточного, гуморального звена иммунитета и системы НГ; у 25,64% - гуморального звена и системы НГ; у наибольшего количества обследуемых (38,46%) встречались сочетанные отклонения в показателях, характеризующих состояние клеточного звена иммунитета и системы НГ; комбинированное нарушение клеточного и гуморального звена иммунитета без вовлечения системы НГ отсутствовало. Также отсутствовало изолированное повреждение только клеточного или гуморального звеньев иммунитета. Изолированные отклонения были выявлены лишь со стороны системы НГ - в 15,38% случаев.

В целом, разнообразные нарушения в системе НГ как изолированного, так и сочетанного характера имели место в 100% случаев. Таким образом, система НГ является наиболее уязвимой при данной патологии, что и предопределило ее углубленное исследование.

В результате проведенного комплексного исследования системы НГ нами было установлено, что у пациентов с СХО относительное количество НГ в циркулирующей крови в среднем достоверно не отличалось от уровня здорового контроля (56,28±1,78% против 57,33±1,78%). Абсолютное количество НГ у пациентов с СХО было несколько выше, чем в группе здорового контроля, однако достоверных отличий обнаружено не было. Тем не менее, при анализе индивидуальных показателей у 16-ти пациентов из 39-ти (41,03%) были обнаружены количественные сдвиги НГ. У 2-х из них наблюдалась относительная нейтропения, скомпенсированная по абсолютному содержанию НГ за счет лейкоцитоза. У 2-х пациентов обнаруживалась относительная и абсолютная нейтропения; у 8-ми - нейтрофилез. У 6-ти пациентов с СХО в периферической крови было выявлено повышенное содержание "молодых" клеточных форм - юных и палочкоядерных нейтрофилов, что, возможно, свидетельствует о "раздражении" нейтрофильного ростка на фоне истощения костномозгового пула НГ.

Расширенный анализ функционального статуса НГ выявил наличие дефектов в функционировании системы НГ при СХО. При исследовании экспрессии поверхностных рецепторов НГ у 77,78% больных было обнаружено повышенное содержание клеток, экспрессирующих CDllb-, CD16-, СБ95-рецепторы, в среднем в 1,5-2 раза относительно здорового контроля. Увеличение количества НГ, несущих рецепторы адгезии (CDllb), антитело-зависимой цитотоксичности (CD 16) и активационного рецептора, способствующего запуску апоптозной программы (CD95), по-видимому, можно рассматривать как стереотипное реагирование на имеющийся хронический воспалительный процесс в слизистой оболочке толстой кишки.

Активация рецепторного аппарата при СХО сопровождалась повышенной спонтанной активностью мембранных оксидаз, что проявилось в увеличенном количестве формазан-позитивных НГ в спонтанном NBT-тесте.

Несмотря на активацию рецепторного аппарата и высокую спонтанную возбудимость, НГ пациентов с СХО обладали более слабыми функциональными способностями по сравнению с НГ здоровых лиц. Эти нарушения были связаны с депрессией процессов фагоцитоза и угнетением активности кислородзависимых микробицидных систем в нагрузочных тестах in vitro со St. aureus.

Наибольшую частоту встречаемости имел дефицит фагоцитарной защиты: выявлен у 37 пациентов из 39 (94,87%). Были существенно депресси-рованы процессы захвата бактериальных частиц, что проявилось в уменьшении количества активно фагоцитирующих нейтрофилов - %ФАН составил 41,82±1,77%, что на 38% ниже контрольного значения (р<0,001); и в снижении среднего числа захваченных микробов - ФИ составил 1,74±0,12 против 2,12±0,16 в контроле. В целом страдала и переваривающая активность: индекс переваривания (ИП), характеризующий среднее число убитых микробов на 1 посчитанный нейтрофил, был достоверно ниже контрольных значений: 1,15±0,08 и 2,96±0,36, соответственно, (р<0,001). Ослабление фагоцитарной активности НГ у пациентов с СХО отразилось в сниженном по сравнению со здоровым контролем интегральном показателе переваривающей активности (ИППА), характеризующем суммарный итог фагоцитарного процесса.

На фоне повышенной спонтанной продукции супероксиданиона (Ог~) выявлена значительная депрессия кислородзависимых микробицидных систем в ответ на бактериальную стимуляцию нейтрофилов in vitro - наблюдался феномен дезадаптации НГ, блокировалась их способность адекватно реагировать на бактериальную нагрузку, что количественно отразилось на коэффициенте мобилизации: КМ снизился в 2,1 раза по сравнению с контрольным уровнем (р<0,05).

Таким образом, проведенное исследование выявило наличие дефектов в функционировании системы НГ при СХО. При этом отмечалась дискор-дантность между активированным рецепторным аппаратом при высокой спонтанной активности мембранных оксидаз и депрессированным фагоцитозом с нарушенными процессами захвата и киллинга бактерий на фоне сниженного ответа кислородзависимых микробицидных систем на дополнительную бактериальную нагрузку.

Предполагая, что нейтрофильные дисфункции могут быть обуслрвле-ны дисбалансом в системе цитокинов, мы проанализировали результаты, характеризующие цитокиновый статус при СХО:

Оценка уровня цитокинов в сыворотке показала, что в целом в группе больных определяется увеличение концентрации как IL-lp, TNFa и IL-8, так и рецепторного антагониста IL-1, представляющих соответственно группу медиаторов с про- и противовоспалительными свойствами.

Установлено, что сывороточный"уровень провоспалительного IL-lp у пациентов с СХО составил в среднем 99,34±88,15 пг/мл, однако это повышение не являлось достоверным из-за значительных индивидуальных различий. Только у 2-х пациентов содержание данного цитокина было значительно выше контрольного уровня (184,3 и 2561 пг/мл). В последнем случае у пациентки с очень высокой концентрацией IL-ip (2561 пг/мл) наблюдался* выраженный болевой синдром.

Уровень TNFa в группе пациентов с СХО находился в диапазоне концентраций от 0 до 20;07 пг/мл со средним значением 4,8±1,98 пг/мл. Несмотря на то, что в среднем содержание TNFa в сыворотке пациентов с СХО было незначительно повышено по сравнению со здоровым контролем, это различие было статистически значимым (р<0,05). В отличие от контрольной группы, где в 95,65% случаев TNFa в сыворотке отсутствовал полностью, в группе пациентов'с СХО данный цитокин не определялся только в 44,44%-случаев, а.у 55,56% обследуемых лиц уровень TNFa превышал порог чувствительности метода.

Концентрация другого провоспалительного цитокина - IL-8 - была существенно повышена1 в группе пациентов с СХО и составила в среднем 88,5±50,6 пг/мл (р<0,05). Однако, как и в случае с TNFa, повышенный уровень IL-8 был выявлен только>у половины пациентов, что послужило основой для разделения их на на 2 группы по содержанию данного цитокина в сыворотке крови. У половины обследуемых (50%) IL-8 не определялся, однако во второй группе концентрация данного цитокина значительно превышала среднее значение в группе здоровых лиц (177,0±82,03 пг/мл против 6,32±5,31 пг/мл в контроле, р<0,001).

Средняя концентрация противовоспалительного цитокина IL-lra в сыворотке пациентов с СХО была достоверно выше, чем у здоровых лиц (280,0±76,19 пг/мл против 23,4±13,2 пг/мл в контроле, р<0,001). По содержанию IL-lra пациенты разделились на 3 группы.

В 1-ой группе (п=15) - уровень IL-lra был достоверно повышен в 2 раза по сравнению с аналогичным показателем в группе здоровых лиц (45,29±7,01 пг/мл, р<0,01). Во П-й группе (п= 11) пациенты имели статистически значимое повышение концентрации IL-lra по сравнению с контрольной группой в 13,3 раза (310,8±51,1 пг/мл, р<0,001). У трех пациентов (III-я группа) были обнаружены очень высокие концентрации IL-lra, составляя в среднем 1337,67+53,01 пг/мл (р<0,001).

Сывороточная концентрация IL-4 в группе пациентов с СХО находилась на минимальном уровне за порогом чувствительности метода, достоверно не отличаясь от аналогичного показателя в контрольной группе.

Таким образом, несмотря на то, что определение уровней цитокинов в сыворотке крови имеет ряд сложностей из-за наличия специфических и неспецифических факторов связывания, а также не всегда является информативным в отсутствие острых проявлений воспалительного процесса, данное исследование позволило нам установить значимое изменение цитокинового баланса у больных с СХО с повышением сывороточной концентрации как про-, так и противовоспалительных цитокинов. При этом соотношение уровня противовоспалительных цитокинов к провоспалительным (IL-lra+IL-4)/(IL-lp+IL-8+TNFa) у пациентов с СХО по сравнению со здоровым контролем было увеличено в 1,7 раза, что свидетельствует о смещении цитокинового баланса преимущественно в сторону противовоспалитель-ных/иммуносупрессорных реакций. Как известно, реорганизация системных реакций в этом направлении является одним из универсальных механизмов негативного контроля, нацеленных на ослабление избыточных проявлений воспалительного ответа и восстановление исходного гомеостаза организма (Bone R.C. et al, 1997). Однако глубокие изменения баланса между про- и противовоспалительными цитокинами, проявляющиеся резким увеличением соотношения противовоспалительных цитокинов к провоспалительным и усилением иммуносупрессорной активности сыворотки крови, ассоциируются с развитием более выраженных иммунных дисфункций. Возможно, что именно это смещение цитокинового баланса в сторону противовоспалитель-ных/иммуносупрессорных реакций является одной из причин выявленных нами дисфункций НГ, связанных с угнетением их функциональной активности.

Дисфункции в иммунной системе при СХО могут способствовать возникновению и поддержанию хронического воспалительного процесса в слизистой толстой кишки, который подтверждался стандартным гистологическим исследованием биоптатов. При этом в участках тканей с воспалением были обнаружены все основные признаки, характерные для хронического воспаления: снижение высоты крипт, расширение и ветвление ворсинок и мононуклеарная. инфильтрация. При СХО в основании крипт обнаружены клетки с оксифильной зернистостью, что не характерно для толстой кишки и может свидетельствовать о метаплазии.

Так как цитокины, синтезируясь в очаге воспаления, обладают корот-кодистантным действием и зачастую определение местной продукции цитокинов наиболее достоверно отражает цитокиновый фон и происходящие изменения, мы провели изучение продукции провоспалительных цитокинов IL-lbeta и IL-8 в слизистой толстой кишки при СХО. Для иммуногистохими-ческого исследования цитокинов в слизистой толстой кишки были отобраны образцы тканей операционного материала у пациентов с СХО (п=4): стенка толстой кишки с участками воспалительного поражения (визуально) и без него - группа I. В результате проведенного иммуногистохимического исследования мы установили наличие IL-lp- и IL-8-продуцирующих клеток в елизистой толстой кишки. Незначительный фоновый уровень цитокин-продуцирующих клеток был обнаружен в участках тканей без воспаления с некоторым преобладанием IL-lp-продуцентов. Наличие IL-lp- и IL-8-продуцирующих клеток в нормальной (невоспаленной) слизистой отмечается и другими исследователями. Установлено, что основным источником данных цитокинов являются мононуклеарные клетки lamina propria [R. Daig et al., 2000]. В зоне воспаления количество IL-ip- и IL-8-секретирующих клеток был значительно выше по сравнению с фоном, причем также с преобладанием 1Ь-1Р+-клеток.

Следующим этапом было сравнение содержания цитокин-продуцирующих клеток в слизистой толстой кишки при хроническом стазе (СХО) с продукцией аналогичных цитокинов при остром колостазе. Для этого были отобраны образцы тканей операционного материала у пациентов с острой толстокишечной непроходимостью опухолевого генеза (п=6) - группа сравнения II, где также брались участки с признаками воспаления и без него. В группе сравнения в участках тканей с визуальным воспалением при гистологическом исследовании были обнаружены экссудативные проявления и нейтрофильная инфильтрация, что свидетельствует об остром воспалительном процессе.

Было установлено, что при СХО количество как IL-1 J3-, так и IL-8-продуцирующих клеток в слизистой было в 1,5 раза меньше, чем в группе сравнения, что весьма вероятно для хронического воспалительного процесса, учитывая данные литературы о существовании зависимости между локальным уровнем данных цитокинов и выраженностью воспалительной реакции [R. Daig et al., 1996; М. Ligumsky et al., 1990; С. Stevens et al., 1992].

Триггером продукции цитокинов и одной из причин хронического воспалительного процесса могут стать дисбиотические изменения при СХО. Для изучения микрофлоры толстой кишки у больных с СХО нами было проведено комплексное количественное исследование с оценкой функциональной активности бифидо- и лактобактерий, установлением способности нормофлоры обеспечивать колонизационную резистентность. Определяли также функциональное состояние слизистой кишечника и оценивали внешнесекре-торную деятельность поджелудочной железы.

В результате проведенного исследования было установлено, что микробиоценоз кишечника при СХО имеет определенные достоверные отличия от нормы. Характер нарушений существенно зависит от присутствия в составе микробиоценоза условно-патогенной флоры. В зависимости от отсутствия или наличия в составе микробиоценоза условно-патогенной флоры пациенты с СХО разделились на 2 подгруппы: А (40%) и Б (60%), соответственно.

В подгруппе А количественные характеристики компонентов кишечного микробиоценоза достоверно не отличались от нормы, хотя и наблюдалась тенденция к снижению количества бацилл, бифидо- и лактобактерий. В этой подгруппе преобладали функциональные нарушения: угнетение функциональной активности нормофлоры (р<0,01) за счет как бифидобактерий (р<0,01), так и лактобактерий (р<0,05); увеличение рН feces (р<0,01); снижение ферментновыделительной активности поджелудочной железы ((р<0,01).

В подгруппе Б нарушения были более выраженными. Здесь, на фоне дефицита количества лактобактерий (р<0,05), пролиферации аэробной кокковой флоры (р<0,01) и тенденции к пролиферации бацилл, выделялась условно-патогенная флора в концентрации 4,943±0,527 Ig КОЕ/г. В структуре выделенной условно-патогенной флоры преобладали представители рода Enterobacter (67%) с уреазной активностью. Функциональная активность нормофлоры (р<0,01) была снижена не только из-за дефицита количества лактобактерий, но и за счет бифидобактерий (р<0,01). Дефицит пищеварительных ферментов также наблюдался и в этой подгруппе (р<0,05).

Вполне вероятно, что выявленные нами изменения в цитокиновом статусе слизистой толстой кишки обусловлены именно нарушениями микробиоценоза, что приводит к переходу «физиологического» воспаления, характерного для слизистой ЖКТ, в состояние патологического хронического вялотекущего воспалительного процесса.

Нарушения иммунного статуса и микробиоценоза толстой кишки при СХО требуют адекватной иммунокорригирующей терапии. Для этих целей нами был выбран отечественный синтетический иммуномодулятор полиок-сидоний, обладающий выраженной иммунотропной активностью в отношении НГ, иммуномодулирующими эффектами на уровне местного мукозального иммунитета, а также высокой детоксикационной и антиоксидантной способностью. Большинство пациентов, прошедших курс монотерапии ПО субъективно отмечали значительное улучшение общего состояния. Так проявления астено-вегетативного синдрома уменьшились в 2,4 раза, а диспепти-ческого синдрома в 2 раза. Ни в одном из наблюдений применение ПО не вызывало ни местных, ни общих побочных реакций как непосредственно после введения препарата, так и в течение всего курса лечения.

ПО не оказал каких-либо существенных влияний на состояние клеточного и гуморального иммунитета, однако был эффективен в отношении НГ, способствуя восстановлению их дисфункций. У пациентов, прошедших курс лечения ПО, отмечено незначительное повышение относительного количества НГ, экспрессирующих рецепторы CD1 lb, CD 16 и CD95, и так увеличенное по сравнению с контролем. Повышенное по сравнению с контролем количество CD lib-, CD16- и CD95-позитивных НГ у пациентов с СХО, вероятно, является реакцией на хронический воспалительный процесс, но при этом все же недостаточно адекватной для полноценной функциональной активации НГ. Незначительное усиление экспрессии адгезионной молекулы CDllb под влиянием ПО, возможно, способствует оптимизации процессов фагоцитоза и микробицидности.

Монотерапия ПО нормализовала фагоцитарную активность НГ: количество активно фагоцитирующих нейтрофилов (%ФАН) увеличилось в 1,4 раза и достигло уровня здорового контроля (р<0,001); активизировалась и переваривающая активность НГ: ИП увеличился в 1,8 раз и достоверно не отличался от уровня здорового контроля (р<0,001). Стимулирующее влияние ПО на фагоцитарную активность НГ особенно наглядно демонстрирует интетральный показатель4 переваривающей активности — ИППА, возросший с 89,7+10,46 до 121,3±14,81 после курса ПО и несколько превысивший аналогичный показатель в группе здоровых лиц.

Несмотря на отсутствие достоверных различий, был выявлен-позитивный эффект ПО на функционирование кислородзависимых микробицидных систем НГ в нагрузочных тестах in vitro. ПО не влиял на спонтанную активность мембранных оксидаз, однако стимулировал их работу в условиях дополнительной; бактериальной нагрузки (в среднем %ФПК в стимулированном NBT-тесте увеличился; с 5,11±1,04% до 8,42±3;05%), повысив;, тем самым; мобилизационные возможности клетки.

Таким образом,, монотерапия ПО у пациентов с СХО является клинически эффективной* и не вызывает ни местных, ни? общих побочных реакций. Анализ полученных данных позволил установить преимущественное влияние, ПО на фагоцитарную активность и кислородзависимую микробицидность НГ в условиях бактериальной нагрузки, депрессированные у пациентов с CXOi .

Можно предположить, что; позитивные клинико-иммунологические эффекты, ПО опосредованы, его прямым действием на НГ, так как известно, что ПО обладает стимулирующим действием на процессы фагоцитоза, бактериальный киллинг и продукцию цитокинов [В.А. Дьяконова и др., 2002, 2004]. Возможны также опосредованные эффекты ПО через нормализацию бактериальной' флоры. Для проверки этих предположений нами были выполнены дальнейшие исследования по: изучению влияния ПО; на систему цитокинов и микробиоценоз толстой кишки.

Влияние ПО на уровень сывороточных цитокинов оказалось неоднозначным., В среднем отмечено незначительное снижение IL-lra, повышение уровня IL-4 и TNFa, а также IL-lp. ПО еще больше увеличил соотношение уровня противовоспалительных цитокинов к провоспалительным (IL-lra+IL-4)/(IL-1 p+IL-8+TNFa), и, тем самым, сохранил смещение цитокинового баланса преимущественно в сторону противовоспалительных медиаторов. Данный факт свидетельствует о том, что, возможно, иммуносупрессивное влияние противовоспалительных цитокинов на функциональную активность НГ предотвращается ПО непосредственно на клеточном уровне, а не за счет его влияния на системный цитокиновый профиль.

Монотерапия ПО у больных с СХО положительно влияла на состояние микрофлоры кишечника в результате стимуляции функциональной активности лактобактерий и в меньшей мере бифидобактерий. Описанный фармакологический эффект ПО в отношении нормофлоры позволяет отнести этот синтетический иммуномодулятор к пробиотикам.

Таким образом, наряду с прямым действием ПО на НГ, не исключаются возможности его опосредованных эффектов через нормализацию кишечной микрофлоры, которая, как известно, оказывает позитивное влияние на состояние иммунологической резистентности организма.

Итак, анализируя полученные данные в целом, можно сделать заключение о том, что в большинстве случаев при СХО наблюдаются иммунологические сдвиги, вызванные длительным хроническим воспалительным процессом в слизистой толстой кишки, а также, вероятно, аутоинтоксикацией и нейрогормональными нарушениями.

Наиболее выраженные дефекты выявлены в системе нейтрофильных гранулоцитов, где нарушения комбинированного и изолированного характера наблюдались в 100% случаев. При этом отмечалась разбалансированность функций НГ, разрушение слаженной и сопряженной работы клеточных систем: активация рецепторного аппарата при высокой спонтанной активности мембранных оксидаз сопровождалась депрессией фагоцитоза с нарушением процессов захвата и киллинга бактерий на фоне сниженного ответа кисло-родзависимых микробицидных систем на дополнительную бактериальную нагрузку.

Поддерживанию, и, возможно, индукции хронического воспаления способствуют нарушения микробиоценоза кишечника, в той или иной степени присутствующие практически у всех пациентов с СХО.

Хроническое воспаление при СХО сопровождается повышением уровня провоспалительных цитокинов, осуществляющих активацию защитных реакций организма.

Универсальным механизмом негативного контроля, нацеленного на ослабление избыточных проявлений воспалительного ответа и восстановление исходного гомеостаза организма, является повышение уровня противовоспалительных цитокинов и реорганизация системных реакций. При СХО наблюдается значительное повышение сывороточной концентрации противовоспалительного цитокина IL-lra и увеличение соотношения уровня противовоспалительных цитокинов к провоспалительным (IL-lra+IL-4)/(IL-ip+IL-8+TNFa) по сравнению со здоровыми лицами, что свидетельствует о смещении цитокинового баланса в сторону системных противовоспалитель-ных/иммуносупрессорных реакций. Возможно, что именно этот дисбаланс в системе цитокинов является одной из причин выявленных нами дисфункций НГ, связанных с угнетением их функциональной активности.

Полиоксидоний, применяемый в качестве монотерапии при СХО, наряду с позитивным клиническим действием, обладает выраженными имму-норегуляторными эффектами относительно системы НГ, нормализуя ее функционирование, а также положительно влияет на состояние микрофлоры кишечника. Механизмы иммунорегуляторного действия ПО на НГ могут быть обусловлены как его непосредственным влиянием на нейтрофилы, так и опосредованными эффектами через нормализацию кишечной микрофлоры, которая, как известно, оказывает позитивное влияние на состояние иммунологической резистентности организма. Таким образом, применение данного препарата является совершенно новым подходом к проведению иммуномо-дулирующей терапии при СХО.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Алексеева, Екатерина Александровна, Ростов-на-Дону

1. Аверкиев В.Л., Тарасенко B.C., Латышева Т.В., Аверкиева Л.В. Коррекция иммунологических нарушений у больных с панкреонекрозом // Иммунология. 2002. - № 6. - С. 356-359.

2. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия. М.: Медицина, 1990. -383 с.

3. Александрова В.А., Рябчук Ф.Н. Полиоксидоний в комплексной терапии вторичных иммунодефицитов у детей // В сб. "Механизм действия и клиническое применение Полиоксидония". Вып. № 3. М., 2004. - С. 46-50.

4. Аршинова С.С., Пинегин Б.В., Стаханов В.А. и др. Иммуномодулятор полиоксидоний в комплексной терапии больных туберкулезом легких // Иммунология. 2001. - № 3. - С. 35-40.

5. Аршинова С.С., Стаханов В.А., Костенко Е.В. и др. Применение ультразвуковых ингаляций полиоксидония у больных активным туберкулезом легких // В сб. "Механизм действия и клиническое применение Полиоксидония". Вып. № 3. М., 2004. - С. 58-61.

6. Ашмарин И.П., Ткаченко С.Б., Рудько И.А. и др. Влияние дефенсина на функциональную активность тромбоцитов // Бюлл. эксп. биол. и мед. -1993. Т. CXV, № 1. - С. 23-25.

7. Бакиров А.Б., Гайнетдинова В.В. Иммунотропные свойства полиоксидония в комплексном лечении больных хроническим лимфолейкозом // Сб. трудов «Совр. пробл. аллергол., иммунол. и иммунофарм.», 4-й Конгресс РААКИ. М., 2001. - Т. 2 - С. 269.

8. Барбашев С.В., Токмаков А.Н., Сараф А.С. и др. Полиоксидоний в комплексном лечении трихомонадного уретрита у мужчин // Сб. трудов «Совр. пробл. аллергол., иммунол. и иммунофарм.», 4-й Конгресс РААКИ. М., 2001. - Т. 2 - С. 311.

9. Баринский И.Ф, Сидорович И.Г, Лазаренко А.А. и др. Способность полиоксидония повышать иммуногенность герпесвирусных вакцин // Иммунология. 2001. - № 2. - С. 17-20.

10. Бахметьев Б.А, Лихачева Н.С, Симбирцев А.С. Влияние интерлейки-нов на функции фагоцитирующих клеток // R. J. Imunnorehab. 1990. -V. 4, Suppl. l.-P. 36.

11. Белкания С.П, Куперман Л.Н. Клинические маски долихомегасигмы // Врачебное дело. 1985. - № 5. - С.29-32.

12. Бережная Н.М. Нейтрофилы и иммунологический гомеостаз. Киев: Наукова думка, 1988. - 170 с.

13. Блинников И.Ю, Корчагина А.П. Локомоторная функция фагоцитов у часто болеющих детей // Тез. докл. 1-го Съезда иммунологов России, 1992.-С. 51.

14. Бляхер М.С, Федорова И.М, Лопатина Т.К. и др. Цитокиновый статус часто болеющих детей и влияние на него пробиотика Ацилакта // Цитокины и воспаление. 2002. - № 2. - С. 24.

15. Борисова A.M., Лактионова Л.В, Сетдикова Н.Х. Клиническое применение отечественного препарата полиоксидония при вторичных имму-нодефицитах взрослых // Тер. арх. 1998. - № 10. - С. 52-57.

16. Бутаков А.А, Потютко М.Ю. Применение полиоксидония при генерализованных формах хирургической инфекции // В сб. "Механизм действия и клиническое применение отечественного иммуномодулятора полиоксидония". М, 2001. - С. 74-76.

17. Вавилова В.П. Применение отечественного иммуномодулятора полиоксидония в практике лечения детей с патологией лимфоглоточного кольца // Иммунология. 2003. - № 1. - С. 43-46.

18. Варфоломеева М.И,Феденко Е.С, Латышева Т.В. Клиническая эффективность полиоксидония при аллергопатологии // В сб. "Механизм действия и клиническое применение отечественного иммуномодулятора полиоксидония". М, 2001.- С. 80-81. •

19. Гланц С. Медико-биологическая статистика. М.: Практика, 1999. - 459 с.

20. Гординская Н.А., Пылаева С.И., Сидоркин В.Г., Аминев В.А. Влияние полиоксидония на уровень интоксикации у ожоговых больных // Иммунология. 2002. - № 6. - С. 363-365.

21. Гребенев А.Д., Мягкова Л.П. Болезни кишечника (современные достижения в диагностике и терапии). М.: Медицина, 1994 - 400 С.

22. Гришина Т.И., Ларина В.Н., Сускова B.C. и др. Применение полиоксидония в комплексной терапии ревматоидного артрита // Иммунология. -2002.-№ 6.-С. 365-370.

23. Демьянов А.В., Котов А.Ю., Симбирцев А.С. Диагностическая ценность исследования уровней цитокинов в клинической практике // Ци-токины и воспаление. 2003.- Т. 2, № 3. - С. 20-35.

24. Дзержинская И.И. Розеткообразующая способность нейтрофилов и Т-лимфоцитов у больных хронической почечной недостаточностью // Иммунология. 1982. - №1. - С. 64-66.

25. Долгушин И.И., Зурочка А.В., Чукичев А.В. Участие нейтрофилов в регуляции воспалительно-репаративной реакции поврежденной ткани // Иммунология. 1998. - № 6. - С. 14.

26. Дударев И.В., Сизякина Л.П., Дюжиков А.А. Эффективность полиокси-дония в экстракорпоральной терапии сепсиса у больных с врожденными пороками сердца // Иммунология. 2002. - № 6. - С. 353-356.

27. Дьяконова В.А., Климова С.В., Ким К.Ф., Пинегин Б.В. Продукция цитокинов под действием полиоксидония in vitro // Иммунология.- 2002. -№ 6. С. 337-340.

28. Дьяконова В.А., Климова С.В., Кулаков В.В. и др. Изучение взаимодействия полиоксидония с клетками иммунной системы с помощью проточной цитофлюорометрии // Иммунология. 2002. - № 6. - С. 334-337.

29. Дьяконова В.А., Бураков В.В., Шаронов Г.В., Пинегин Б.В. Изучение клеточных и молекулярных механизмов взаимодействия иммуномоду-лятора полиоксидония с клетками иммунной системы человека // Иммунология. 2004. - № 3. - С. 145-152.

30. Захарова Л.А., Петров Р.В. Медиаторы нейроиммунного взаимодействия // Итоги науки и техники. Сер. «Иммунология» 1990. - Т. 25 - С. 647.

31. Зорина В.В., Николаева Т.Н., Наровлянский А.Н. Влияние бактерий рода Lactobacillus на продукцию цитокинов клетками пейеровых бляшек экспериментальных животных // Иммунология. 2004. - № 5. - С. 288290.

32. Ивашкин В.Т., Полуэктова Е.А. Клиника и диагностика функциональных запоров // Лечащий врач. 2001. - № 5-6. - С. 26-29.

33. Иллек Я.Ю., Галанина А.В., Зайцева Г.А. Эффективность полиоксидония при тяжелом течении пневмонии у детей раннего возраста // Иммунология. 2003.- № 3.- С. 180-182.

34. Касаткина Э.П., Тараненко Л.А., Воронин А.А. Бактериологическая диагностика дисбактериоза кишечника у детей, больных сахарным диабетом: Метод, рекомендации Департамента здравоохранения Правительства Москвы № 18 от 17.09.96.-М., 1996.-48 с.

35. Кетлинский С.А. Роль Т-хелперов типов 1 и 2 в регуляции клеточного и гуморального иммунитета // Иммунология. 2002. - № 2. - С. 77-79.

36. Кетлинский С.А., Калинина Н.М. Иммунология для врача. СПб.: Гиппократ, 1998. - 156 с.

37. Кетлинский С.А., Симбирцев А.С., Воробьев А.Д. Эндогенные имму-номодуляторы. СПб: Гиппократ, 1992. - 112 с.

38. Кисляк Н.С., Ленская Р.В. Клетки крови у детей в норме и патологии. -М., 1978.- 164 с.

39. Клебанов Г.И., Любицкий О.Б., Дьяконова В.А., Пинегин Б.В. Изучениеантиоксидантных свойств иммуномодулятора полиоксидония // В сб. "Механизм действия и клиническое применение Полиоксидония". Вып. №3.-М., 2004.-С. 22-29.

40. Коджаева М.Х., Подзолкова Н.М., Кулаков А.В. и др. Полиоксидоний в комплексной терапии рецидивирующих инфекций урогенитального тракта // Иммунология. 2002. - № 6. - С. 376-379.

41. Козлов В.А. Некоторые аспекты проблемы цитокинов // Цитокины и воспаление. 2002. - Т. 1. - № 1. - С. 5-8.

42. Козлов Ю.А. Роль и место иммуномодулирующей терапии в комплексном лечении вторичной иммунной недостаточности при гнойно-воспалительных заболеваниях // В сб. "Механизм действия и клиническое применение Полиоксидония". Вып. № 3. М., 2004. - С. 50-58.

43. Козлов И.Г., Горлина Н.К., Чередеев А.Н. Рецепторы контактного взаимодействия // Иммунология. 1995. - № 4. - С.14-24.

44. Кокряков В.Н., Стефанов В.Е., Алешина Г.М. и др. Дефенсины и родственные им антибиотические пептиды в эволюции защитных систем животных // Журн эволюц. биохим. и физиол. 1997. - Т. 33, № 1. - С. 109-123.

45. Колесникова Н.В. Регуляция функционирования системы нейтрофильных гранулоцитов в эксперименте: Дисс. докт. биол. наук. Краснодар, 1999.-401 с.

46. Корнева Е.А., Рыбакина Е.Г., Фомичева Е.Е. и др. Иммуномодулирую-щие эффекты интерлейкина 1 и глюкокортикоидных гормонов как взаимодействующих звеньев в нейроиммунорегуляторной цепи // Int. J. Immunorehab. 1998. - № 10. - P. 38-48.

47. Конопля А.И., Шатохин М.Н., Серегин С.П. и др. Использование полиоксидония в комплексном лечении хронического простатита // Иммунология. 2002. - № 6. - С. 382-385.

48. Коршунов В.М., Володин Н.Н., Агафонова С.А., Коршунова О.В. Влияние пробиотиков и биотерапевтических препаратов на иммунную систему организма-хозяина // Педиатрия. 2002. - № 5. - С. 92-100.

49. Крылов В.П., Кроличенко Т.П., Малышева Т.В., Орлов В.Г. Новый вариант рабочей классификации дисбактериоза микрофлоры в просвете толстого кишечника // Журн. микробиол. 1997. - № 3. - С. 103-104.

50. Кубатиев А.А., Ашмарин И.П., Ткаченко С.Б. Сравнительная оценка влияния дефенсинов человека и кролика на функциональную активность тромбоцитов // Аллергол. и иммун. 2000. - Т. 1. - № 3. - С. 6164.

51. Кузина Т.Н., Сизякина Л.П., Андреева И.И. и др. Иммуномодулирую-щие и микробицидные эффекты полиоксидония в терапии ВИЧ-инфекции // Иммунология. 2002. - № 6.- С. 346-349.

52. Кунгуров Н.В, Филимонкова Н.Н, Тузанкина И.А. Иммуномодулятор полиоксидоний в терапии больных псориатической болезнью // Иммунология. 2003. - № 1. - С. 38-42.

53. Кушнир Е.А, Ловать М.Л, Обухова М.Ф. и др. Использование полиоксидония для иммунологической коррекции алкогольной мотивации // Иммунология. 2004. - № 2. - С. 87-90.

54. Латышева Т.В, Пинегин Б.В, Хаитов P.M. Принципы применения иммуномодулятора полиоксидония при иммунодефицитах // В кн. «Успехи клинической иммунологии и аллергологии» (Под ред. А.В.Караулова). М, 2001. - С. 19-29.

55. Литяева Л.А, Подтихова Е.А. Определение тканевого белка в фекалиях при экспресс-оценке состояния микробной экологии кишечника беременных // Клин. лаб. диагн. 1993. - № 7-8. - С. 62-63.

56. Лусс Л.В, Некрасов А.В, Пучкова Н.Г. и др. Роль иммуномодулирую-щей терапии в клинической практике // Иммунология. 2000. - № 5. - С. 34-39.

57. Лыкова Е.А, Воробьев А.А, Боковой А.Г, Мурашова А.О. Нарушения интерферонового статуса у детей с острой респираторной инфекцией и его коррекция бифидумбактерином-форте // Журн. микробиол. 2001. -№ 2. - С. 65-67.

58. Лысикова М, Вальд М, Масиновски 3. Механизмы воспалительной ре: акции и воздействие на них с помощью протеолитических энзимов // Цитокины и воспаление. 2004. - № 3. - С. 48-53.

59. Маев И.В, Самсонов А.А, Салова Л.М. Синдром хронической обстипации (патогенез, классификационные принципы, клиника, лечение) //

60. Materia medica (бюллетень для врачей и фармацевтов). 2000. - № 2. -С. 63-75.

61. Мазинг Ю.А. Нейтрофильные гранулоциты и система защиты организма// Арх. патол. 1991. - № 9. - С.70-73.

62. Манько В.М., Петров Р.В., Хаитов P.M. Иммуномодуляция: история, тенденции развития, современное состояние и перспективы // Иммунология. 2002. - № 3. - С. 132-138.

63. Мастернак Ю.А., Jlycc Л.В. Влияние полиоксидония на показатели иммунного статуса лиц пожилого возраста // Иммунология. 2002. - № 6. -С.343-346.

64. Маянский А.Н., Галиулин А.И. Реактивность нейтрофила. Казань, 1984.-200 с.

65. Маянский Д.Н., Маянский А.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге. -Новосибирск: Наука, 1989. 256 с.

66. Маянский А.Н., Маянская И.В. Реактивность и медиаторные функции интестинальных эпителиоцитов в системе мукозального гомеостаза // Иммунология. 2004. - № 3. - С. 185-192.

67. Наврузов С.Н. Лечение больных хроническим толстокишечным стазом //Вестн. хирург. 1988. - №9. - С. 123-127.

68. Наврузов С.Н., Корнева С.Л., Воробьёв Г.И., Давыдова Е.Н. Дисбакте-риоз у больных с толстокишечным стазом // Клин, мед.- 1988. № 2. -С. 106-109.

69. Нагоев Б.С. Очерки о нейтрофильном гранулоците. Нальчик, 1986. -196 с.

70. Некрасов А.В., Пучкова Н.Г., Иванова А.С. и др. Производное поли-1,4-этиленпиперазина, обладающее иммуномодулирующей, противовирусной и антибактериальной активностью. Пат. РФ № 2073031., 1997. -68 с.

71. Некрасов А.В., Иванова А.С., Пучкова Н.Г. и др. Препарат для лечения патологических состояний соединительной ткани. Пат. РФ № 2112542, 1998.-48 с.

72. Некрасов А.В., Пучкова Н.Г. Полиоксидоний: основы синтеза и свойства // Иммунология. 2002. - № 6. - С. 329-333.

73. Нестерова И.В. Интралейкоцитарная микробицидная система нейтро-фильных гранулоцитов у здоровых детей и при гнойно-септических заболеваниях: Дисс.канд. мед. наук, М., 1980. - 249 с.

74. Нестерова И.В. Иммунореабилитация детей со вторичными иммуноде-фицитными состояниями: Дисс. докт. мед. наук. Москва, 1992. - 455 с.

75. Нестерова И.В. Коррекция вторичных иммунодефицитных состояний по системе НГ при персистирующих вирусно-бактериальных инфекциях респираторного тракта. Метод, реком. № 96/10. Краснодар, 1996. -19 с.

76. Нестерова И.В. Вторичные иммунодефицитные состояния // В кн. "Справочник по иммунотерапии". С.-Петербург: Диалог.- 2002. - С. 72-87.

77. Нестерова И.В. Физиологическая роль нейтрофильных гранулоцитов в поддержании иммунного гомеостаза // Russ. J. of Immunol. 2004. - Vol. 9., Suppl. l.-P. 17.

78. Нестерова И.В., Колесникова H.B. Цитокиновая регуляция и функционирующая система нейтрофильных гранулоцитов // Гематол. и транс-фуз. 1999. - Т. 44, № 2. - С. 43-47.

79. Нестерова И.В., Колесникова Н.В. Современные представления о роли системы нейтрофильных гранулоцитов // Russ. J. of Immunol.- 1999.-Vol. 4, Suppl. l.-P. 22-29

80. Нестерова И.В., Светличная M.A. Значение исследования функционального потенциала нейтрофильных гранулоцитов при гнойно-септических заболеваниях // Педиатрия. 1984. - № 9. - С. 63-65.

81. Нестерова И.В., Швыдченко И.Н. Регуляция апоптоза в системе ней-трофильных гранулоцитов // Аллергол. и иммунол. 2001. - Т. 2, № 1. -С. 53-67.

82. Нестерова И.В., Швыдченко И.Н. Особенности строения и функционирования иммунной системы желудочно-кишечного тракта // Аллергол. и иммунол. 2002. - Т.З, №2. - С. 1-11.

83. Нестерова И.В., Колесникова Н.В., Чудилова Г.А. Комплексное трехуровневое исследование системы нейтрофильных гранулоцитов с возможной диагностикой ИДС при различной патологии. Метод, реком. № 96/11. Краснодар, 1996. - 22 с.

84. Нестерова И.В., Старченко А.А., Иванова С.А., Симбирцев А.С. Иммунотерапия и иммунотропные препараты // В кн. «Справочник по иммунотерапии».- С.- Петербург: Диалог, 2002. С. 88-99.

85. Нестерова И.В., Роменская В.А., Капранова Н.П., Рожкова Г.Г. Уровень экспрессии мембранных рецепторов нейтрофильных гранулоцитов при осложненной язвенной болезни двенадцатиперстной кишки // Russ. J. Immunol. 2004. -Vol. 9, Suppl. 1. - P. 46.

86. Олиферук H.C., Ильинская A.H., Пинегин Б.В. Оценка фагоцитарной и бактерицидной активности нейтрофилов, макрофагов и незрелых дендритных клеток // Иммунология. 2005. - № 1. - С. 10-12.

87. Паркер Ч.В. Медиаторы: высвобождение и функции // В кн. «Иммунология» (Ред. У. Пол). М.: Мир, 1989. - Т. 3. - С. 170-247.

88. Парфёнов А.И. Понос и запор//Клин. мед. 1997.-№ 3. - С. 53-61.

89. Першин Б.Б., Гелиев А.Б., Толстов Д.В., Ковальчук JI.B. Система лим-фоидной ткани пищеварительного тракта животных и перорально индуцированная иммунная толерантность // Иммунология. 2001. - № 6. -С. 10-18.

90. Петров Р.В., Лопухин Ю.М., Чередеев А.Н., Ковальчук JI.B. Оценка иммунного статуса человека. Методические рекомендации. М., 1984. -68 с.

91. Петров Р.В., Хаитов P.M., Пинегин Б.В. и др. Оценка иммунного статуса человека при массовых обследованиях. Методология и методические рекомендации. -М., 1989.-42 с.

92. Петров Р.В., Хаитов P.M., Некрасов А.В. и др. Полиоксидоний имму-номодулятор последнего поколения: итоги трехлетнего клинического применения // Аллергол. астма, и клин, иммун. - 1999. - № 3. - С. 3-6.

93. Пинегин Б.В. Полиоксидоний новое поколение иммуномодуляторов с известной структурой и механизмом действия // Аллергол. астма, и клин, иммун. - 2000. - № 1. - С. 27-28.

94. Пинегин Б.В., Сараф А.С. Отечественный иммуномодулятор Полиоксидоний: механизм действия и клиническое применение. М., 2000. -114 с.

95. Потапнев М.П. Цитокиновая сеть нейтрофилов при воспалении // Иммунология. 1995. - № 4. - С. 34-40.

96. Потапнев М.П., Печковский Д.В. Иммунорегуляция антимикробной активности нейтрофилов человека // Иммунология. 1994. - № 5. - С. 4-6.

97. Романова А.В., Латышева Т.В. Применение полиоксидония в комплексной терапии больных с тяжелой формой бронхиальной астмы // Иммунология. 2002. - № 6. - С. 372-376.

98. Роменская В.А. Иммунокоррекция лейкинфероном в лечении язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки // Дисс. канд. мед. наук. Краснодар., 2000. - 150 с.

99. Рыбакина Е.Г. Интерлейкин-1 в молекулярных механизмах нейроим-мунных взаимодействий. Автореф. дисс. докт. биол. наук. С.-Пб., 2001.-44 с.

100. Саламов К.Н., Ачкасов С.И., Мушникова В.Н. Заворот сигмовидной ободочной кишки у больных с долихоколон // Росс, ж-л гастроэнтерол., гепатол. и колопроктол. 1998. - № 6. - С. 82-86.

101. Саммерхайс М. Факторы роста миелопидного гемопоэза в клинической практике: сравнительный обзор // Европ. фарм. журн. 1995. - № 21. -С. 67-79.

102. Сенников С.В., Силков А.Н. Методы определения цитокинов // Цитокины и воспаление. 2005. - Т. 4, № 1. - С. 22-21.

103. Сенников С.В., Силков А.Н., Козлов В.А. Аллельные варианты и изо-формы цитокинов в диагностике и патогенезе иммунопатологических состояний // Иммунология. 2002. - № 4. - С. 243-250.

104. Сергеева С. Л., Конопля А.И., Локтионов А.Л. и др. Использование полиоксидония в комплексном лечении больных папиллома-вирусной инфекцией // В сб. "Механизм действия и клиническое применение Полиоксидония". Вып. № 3. М., 2004. - С. 81-86.

105. Сидорович И.Г., Шевалье А.Ф., Игнатьева Г.А. и др. Возможность фор-сификации с помощью полиоксидония кандидатной анти-ВИЧ-вакцины на основе новых рекомбинантных растворимых антигенов ВИЧ // Иммунология. 2001. - № 2. - С. 15-17.

106. Сизякина Л.П., Дударев И.В., Дюжиков А.А. Эффективность иммуно-корригирующей терапии полиоксидонием у детей, прооперированных по поводу врожденных пороков сердца синего типа // Иммунология. -2002.-№6.-С. 356-359.

107. Сизякина Л.П., Кузина Т.Н., Соколова Ю.В. Перспективы применения топических микробицидов в лечении ВИЧ-инфицированных пациентов // В сб. "Механизм действия и клиническое применение Полиоксидония". Вып. № 3. М., 2004. - С. 72-75.

108. Симбирцев А.С. Биология семейства интерлейкина-1 человека // Иммунология 1998. - № 3. - С. 9-17.

109. Симбирцев А.С. Интерлейкин-8 и другие хемокины // Иммунология. -1999.-№4.- С. 9-14.

110. Симбирцев А.С. Цитокины — новая система регуляции защитных реакций организма // Цитокины и воспаление. 2002. - Т. 1, № 1. - С. 9-17.

111. Симбирцев А.С. Цитокины: классификация и биологические функции // Цитокины и воспаление. 2004. - Т. 3, № 2. - С. 16-22.

112. Симбирцев А.С. Толл-белки: специфические рецепторы неспецифического иммунитета // Иммунология. 2005. - № 6. - С. 368-377.

113. Старченко А.А. Общая характеристика иммунотропных препаратов // В кн. «Справочник по иммунотерапии».- С.-Пб., 2002. С. 100-151.

114. Стрюковский А.Е. Хирургические подходы и тактика иммунокорригирующей терапии в комплексном лечении болезни Гиршпрунга. Дисс.канд. мед. наук. Краснодар, 1995. - 142 с.

115. Тотолян А.А., Фрейдлин И.С. Клетки иммунной системы. СПб.: Наука.-2000.-231 с.

116. Усов И.Н, Чичко М.В, Астахова JI.H. Практические навыки педиатра. -Минск, 1990.-236 с.

117. Фрейдлин И.С. Цитокины и межклеточные контакты в противоинфек-ционной защите организма // Соросовский образовательный журнал. -1996.-№7.-С. 19-25.

118. Фролькис А.В. Запоры. СПб, 1993. 32 с.

119. Хаитов Р.М, Пинегин Б.В. Иммунная система желудочно-кишечного тракта: особенности строения и функционирования в норме и при патологии // Иммунология. 1997. - № 5. - С. 4-7.

120. Хаитов Р.М, Пинегин Б.В. Вторичные иммунодефицита: клиника, диагностика, лечение // Иммунология. 1999. - № 1. - С. 14-17.

121. Хаитов Р.М, Пинегин Б.В. Основные принципы иммуномодули-рующей терапии //Аллергия, астма и клин, иммунол. 2000. - № 1. — С. 9-16.

122. Хаитов Р.М, Пинегин Б.В. Современные иммуномодуляторы: основные принципы их применения // Иммунология. 2000. - № 5. - С. 4-8.

123. Хаитов Р.М, Пинегин Б.В, Истамов Х.И. Экологическая иммунология.-М, 1995.- 146 с.

124. Хаммад Е.В., Григорьева Г.А. Анализ причин хронических запоров, результаты лечения // Росс. журн. гастроэнетрол., гепатол., колопроктол. -2000. Т. X, № 4. - С. 84-87.

125. Хашукоева А.З., Торчинов A.M., Фириченко В.И., Смирнова JI.E. Комплексная терапия хронических воспалительных заболеваний внутренних половых органов в стадии обострения с применением полиоксидония // Иммунология. 2002. - № 6. - С. 379-382.

126. Хашукоева А.З., Торчинов A.M., Смирнова JI.E. и др. Современные подходы к лечению хронических воспалительных заболеваний внутренних половых органов // В сб. "Механизм действия и клиническое применение Полиоксидония". Вып. № 3. М., 2004. - С. 86-94.

127. Царев Н.И. Удлиненная толстая кишка как хроническое заболевание // Вестн. хирург. 1981. - № 9. - С.58-63.

128. Чайникова И.Н., Смолягин А.И., Иванова А.С. и др. Эффективность использования полиоксидония для санации сальмонеллезных бактерионосителей // Иммунология. 2004. - № 6. - С. 339-343.

129. Чалый Ю.В., Колесникова Т.С., Войтенок Н.Н. Влияние дефензина UPN-1 на продукцию ФНО-а, ИЛ-ip и ИЛ-8 моноцитами человека. // Тез. докл. 4-й Межд. конф. «СПИД, рак и родств. проблемы». СПб., 1996.- 113 с.

130. Чахирева Н.Е., Луканов А.В. Полиоксидоний в комплексной терапии паразитарных инфекций // Иммунология. 2003. - № 1. - С. 46-47.

131. Черешнева М.В., Шилов Ю.И., Гейн О.Н. и др. Влияние полиоксидония на процессы травматического воспаления и регенерации при экспериментальном проникающем ранении глаза // Иммунология. 2004. - № 1. -С. 32-36.

132. Черешнева М.В., Шилов Ю.И., Баданина О.Н. и др. Иммунокоррекция при ранении глаза. Екатеринбург, 2001. - 32 с.

133. Чернеховская Н.Е., Федченко Г.Г., Андреев В.Г. и др. Значение полиоксидония в комплексном лечении больных абсцедирующей пневмонией

134. В сб. "Механизм действия и клиническое применение отечественного иммуномодулятора полиоксидония". М., 2001. - С. 61-62.

135. Шамова О.В., Лесникова М.П., Кокряков В.Н. и др. Действие дефенси-нов на уровень кортикостерона в крови и иммунный ответ при стрессе // Бюлл. эксп. биол. и мед. 1993. - Т. CXV, № 6. - С. 646-649.

136. Шаповалов В.Д. Влияние полиоксидония на клинические показатели больных хроническим пародонтитом, протекающим на фоне вторичной иммунной недостаточности // Иммунология. 2001. - № 6. - С. 34-36.

137. Швыдченко И.Н., Нестерова И.В., Синельникова Е.Ю. Цитокин-секретирующая функция нейтрофильных гранулоцитов // Иммунология. 2005.-№ 1.-С. 31-34.

138. Шельцина Т.Л., Марчук Е.В., Бутаков А.А. Применение полиоксидония при распространенных формах рака толстой кишки // В сб. "Механизм действия и клиническое применение отечественного иммуномодулятора полиоксидония". М., 2001. - С. 90-92.

139. Шенеткин И.А., Чердынцева Н.В., Васильев Н.В. Регуляция функциональной активности нейтрофилов цитокинами // Иммунология. 1994. -№ 1. - С. 4-6.

140. Шубич М.Г., Нестерова И.В., Старченко В.П. Тест с нитросиним тетра-золием в оценке иммунного статуса у детей с гнойно-септическими заболеваниями // Лаб. дело. 1980. - № 6. - С. 342-345.

141. Шульженко А.Е. Клиническая эффективность и безопасность применения полиоксидония в лечении хронической рецидивирующей инфекции, вызванной вирусами простого герпеса // Иммунология. -2002.-№ 6.-С. 349-353.

142. Шхинек Э.К., Рыбакина Е.Г., Корнева Е.В. ИЛ-1 в реализации иммуно-нейроэндокринных связей. // Успехи совр. биол. 1993. - Т. 113, № 1. -С. 95-106.

143. Ядигарова З.Т., Кубатиев А.А., Ткаченко С.Б. Взаимодействие поли-морфнонуклеарных лейкоцитов с тромбоцитами: //Аллергол. и иммун. -2000.-Т. 1. № 2. - С. 124.

144. Яремчук А.Я., Радолицкий С.Е., Топчий Т.В. Морозова H.JI. Хронический колостаз особенности клиники и диагностики // Вестн. хирург.-1990.- №7. -С. 113-117.

145. Ярилин А.А. Система цитокинов и принципы её функционирования, в норме и при патологии // Иммунология. 1997. - №5. - С. 7-14.

146. Ярилин А.А. Основы иммунологии. М.: Медицина.- 1999. - 608,с.

147. Al-Mohanna F., Salen S., Parher R.S., Collison К. IL-12-dependent nuclear factor-kappa В activation leads to de novo synthesis and release of IL-8 and TNF-a in human neutrophils // J: of Leukoc. Biol. 2002.- No 72.- P. 9951002.

148. Andus T.R., Daig R., Vogl D. Imbalance of the interleukin-1 system in colonic mucosa: assotiation with intestinal inflammation and interleukin-1 receptor antagonist genotype 2 // Gut. 1997. - Vol. 41. - P. 651-657.

149. Arondel J., Singer M., Matsukawa A. et al. Increased Interleukin-1 (IL-1) and Imbalance between IL-1 and IL-1 Receptor Antagonist during Acute Inflammation in Experimental Shigellosis // Infect, and Immun. 1999. -Vol. 67. - No 11. - P. 6056-6066.

150. Asseman C., Mauze S., Leach M.W. et al. An essential role for interleukin 10 in the function of regulatory T cells that inhibit intestinal inflammation // J. Exp. Med. 1999. - Vol. 190. - P. 995-1004.

151. Bagriacik E.U., Okabe M., Klein J.R. Origin of intestinal intraepithelial lymphocytes: direct evidence for a thymus-derived y5T cell component // Immun. Lett.- 2000,- Vol. 75.- No 1.- P. 77-83.

152. Baldwin A.S. Series introduction: the transcription factor NF-кВ and human disease // J. Clin. Invest.- 2001.- Vol. 107.- P. 3-6.

153. Balish E., Warner T. Enterococcus faecalis induces inflammatory bowel disease in interleukin-10 knockout mice // Am. J. Pathol.- 2002.- Vol. 160.-P. 2253-2257.

154. Beatty W.L., Sansonetti P.J. Role of lipopolysacharide in signaling to subepithelial polymorphonuclear leukocytes // Infect. And Immun.-1997.- Vol. 65.- P. 4395-4404.

155. Bell D., Young J.W., Banchereau J. Dendritic cells // Adv. Immunol.-1999.- Vol. 72.- P. 255-324.

156. Benestad H.B., Laerum O.D. The neutrophilic granulocyte // Cell kinet. Inflammatory React. Berlinetc., 1989. - P. 7-36.

157. Berg R.D., Savage D.C. Immunological responses and microorganisms indigenous to the gastrointestinal tract // Am. J. Clin. Nutr. 1972. — Vol. 25. - P. 1364.

158. Berin M.C., Jang P.C., Ciok L. et al. Role for IL-4 in macromolecular transport across human intestinal epithelium // Am. J. Phisiol.- 1999.-Vol. 276.- (Cell Phisiol. No 45).- P. C1046-C1052.

159. Berin M.C., Dwinell M.B., Eckmann L., Kagnoff K. Production of MDC/CCL22 by human intestinal epithelial cells // Am. J. Physiol. -2001. Vol. 280. - No 6. - P. 1217-1226.

160. Berkes J., Viswanathan V.K., Savkovic S.D., Hecht G. Intestinal epithelial responses to enteric pathogens: effects on tight junction barrier, ion transport, and inflammation // Gut.- 2003.- Vol. 52.- P. 439-451.

161. Berschneider H.M., Powell D.W. Fibroblasts modulate intestinal secretory responses to inflammatory mediators // J. Clin. Invest.- 1992.-Vol. 89.- P. 484-489.

162. Bescamps L.B., Witro S.V. Cytokines pro-inflammatoires et cellules phagocytaires //Rev. fr. allergol. et immunol. Clin. 1996. - V. 36. № 3. - P. 310-314.

163. Besedovsky H.O., del Rey A., Sorkin E., Dinarello C.A. Immunoregulatory feedback between interleukin-1 and glucocorticoid hormones //Science. -1986.-V. 48.-P. 346-355.

164. Besedovsky H.O., del Rey A., Klusman I. et al. Cytokines as modulators of the hypothalamus pituitary-adrenal axis //J. Steroid. Biochem. Molec. Biol.1991. V. 40. - № 4-6. - P. 613-618.i,

165. Berkes J., Viswanathan V.K., Savkovic S.D., Hecht G. Intestinal epithelial responses to enteric pathogens: effects on the tight junction barrier, ion transport, and inflammation // Gut. 2003.'- Vol. 52. - P. 439-451.

166. Bijlsma P.B., Kiliaan A.J., Scholten G. et al. Carbachol, but not forskolin, increases mucosal-to-serosal transport of intact protein in rat ileum in vitro // Am. J. Physiol.- 1996.- Vol. 271.- (Gastrointest. Liver Physiol. No 34).- P. G147-G155.

167. Bindoni M., Perciavalle V., Berretta S. et al. Interleukin-2 modifies the bioelectrical activity of some neurosecretory nuclear in rat hypothalamus //Brain. Res. 1988. - V. 462. - P. 10-14.

168. Bjarnason, I., Macpherson A., Hollander D. Intestinal permeability: an overview // Gastroenterology. 1995. - Vol. 108. - P. 1566-1581.

169. Bland P. W., Warren L.G. Antigen presentation by epithelial cells of rat small intestine. I. Kinetics, antigen specificity and blocking by anti-la antisera // Immunology. 1986. - Vol. 58. - P. 1-7.

170. Boirivant M., Pica R., DeMaria R. et al. Stimulated human lamina propria T cells manifest enhanced Fas-mediated apoptosis // J. Clin. Invest. 1996. - Vol. 98. - P. 2616-2622.

171. Bone R.C., Godzin С J., Balk R.A. Sepsis: a new hypothesis for pathogenesis of the disease process // Chest. 1997. - Vol. 112. - P. 235243.

172. Borruel N, Casellas F, Antolin M. et al. Effects of nonpathogenic bacteria on cytokine secretion by human intestinal mucosa // Am. J. Gastroenterol. 2003. - Vol. 98, No 4. - P. 865-870.

173. Boyum A. Isolation of mononuclear cells and granulocytes from human blood // J. Clin. Lab. Invest. 1968. - Vol. 21. - Suppl. 97. - P. 77-89.

174. Brighthill H.D, Modlin R.L. Toll-like receptors: molecular mechanisms of the mammalian immune response // Immunology. 2000. - No 101. - P. 110.

175. Bry L, Falk P.G, Midtvedt T, Gordon J.I. A model system of host-microbial interactions in an open mammalian ecosystem // Science. -1996. No 273. - P. 1380-1383.

176. Buckle A-M, Hagg N. The effect of IFN-y and colony- stimulating factors on the expression of neutrophil cell membrane receptors. / J. Immunol. -1989. Vol. 143. - P. 2295-2301.

177. Bueno L. Neuroimmune alterations of ENS functioning // Gut. — 2000. — Vol. 47.-P. 63-65.

178. Caamano J, Hunter C.A. NF-кВ family of transcription factors: central regulation of innate and adaptive immune functions // Clin. Microbiol. Rev. 2002. - Vol. 15. - P. 414-429.

179. Cao Y. et al. Abnormal Motiliti in Patients With Ulcerative Colitis/ The Role of Inflammatory Cytokines // Arch. Surg. 2002. - Vol. 137. - P. 439-446.

180. Cao Y. et al. Interleukin 1 {beta}-Induced Production of H202 Contributes to Reduced Sigmoid Colonic Circular Smooth Muscle Contractility in Ulcerative Colitis // J. Pharmacol. Exp. Ther. 2004. — Vol. 311.-P. 60-70.

181. Cario E, Rosenberg I.M, Brandwein S.L. et al. Lipopolysaccharide activates distinct signaling pathways in intestinal epithelial cell linesexpressing Toll-like receptors I I J. Immunol. 2000. - Vol. 164. - P. 966-972

182. Carter P.B., Pollard M. Host responses to "normal' microbial flora in germ-free mice // J. Reticuloendothel. Soc. 1971. - Vol. 9. - P. 580

183. Casini-Raggi V., Kam L., Chong Y.J.T. et al. Mucosal imbalance of IL-1 and IL-1 receptor antagonist in inflammatory bowel disease // J. Immunol. 1995. - Vol. 154. P. 2434-2440.

184. Castro G. A. Immunological regulation of epithelial function // Am. J. Physiol. 1982. - Vol. 243. - No 6. - P. G321-G329.

185. Chowers Y. Cahalon L., Lahav M. et al. Somatostatin through its specific receptor inhibits spontaneous and TNFa- and bacteria-induced IL-8 and IL-ip secretion from intestinal epithelial cells // J. Immunol. 2000. -Vol. 165.-P. 2955-2961.

186. Cochrane C.G. Cellular injury by oxidants //Amtr. J. Med. 1991. - V. 91. -№ 3 C. - P. 23-30.

187. Cohen M.C., Cohen S. Cytokine function: a study in biologic diversity // Am. J. Clin. Pathol. 1996. - Vol. 105. P. 589-598.

188. Collins S.M. The immunomodulation of enteric neuromuscular function: implications for motility and inflammatory disorders // Gastroenterology. -1996.-Vol. 111.-No 6.-P. 1683-1699.

189. Cong Y., Weaver C.T., Lazenby A. and Elson C.O. Bacterial-Reactive T Regulatory Cells Inhibit Pathogenic Immune Responses to the Enteric Flora // The J. of Immunol. 2002. - Vol. 169. P. 6112-6119.

190. Costa M. Brookes S J.H., Hennig G.W. Anatomy and physiology of the enteric nervous system // Gut.1- 2000. Vol. 47. - P. 15-19.

191. Daig R., Andus Т., Aschenbrenner E. et al. Increased interleukin 8 expression in the colon mucosa of patients with inflammatory bowel disease // Gut. 1996. - Vol. 38. - P. 216-222.

192. Daig R., Rogler G., Aschenbrenner E. et al. Human intestinal epithelial cells secrete interleukin-1 receptor antagonist and interleukin-8 but not interleukin-1 or interleukin-6 // Gut. 2000. - Vol. 46. - P. 350-358.

193. Dambaeva S.V., Mazurov D.V., Golubeva N.M. et al. Effect of polyoxidonium on the phagocytic activity of human peripheral blood leukocytes //Rus. J. Immunol. 2003. - Vol. 8. - No 1. - P. 53-60.

194. Delgado A.V., McManus A.T., Chambers J.P. Production of Tumor Necrosis Factor-alfa, Interleukin 1-beta, Interleukin 2 and Interleukin 6 by rat leukocyte subpopulation after exposure to Substance P // Neuropeptides. -2003. Vol. 37. - No 6. - P. 355-361

195. Denkers E.Y., Del Rio L., Bennouna S. Neutrophil production of IL-12 and other cytokines during microbial infection // Chem. Immunol. Allergy. -2003.-No 83.-P. 95-114.

196. Denning T.L., Campbell N.A., Song F. et al. Expression of IL-10 receptors on epithelial cells from the murine small and large intestine // Intern. Immunol. 2000. - Vol. 12. - P. 133-139.

197. DeSouza M., Tilney N.L., Kupiec-Weglinski J.W. Recognition of self within self: specific lymphocyte positioning and the extracellular matrix // Immunol. Today. 1991. - Vol. 12. -P.262-266.

198. Dianda L., Handy A.M., Wright N.A. et al. T-cell receptor-aP-deficient mice fail to develop colitis in the absence of a microbial environment // Am. J. Pathol. 1997. - Vol. 150.- P. 91-97.

199. Dickman K.G., Hempson S.J., Anderson J. et al. Rotavirus alters paracellular permeability and energy metabolism in Caco-2 cells // Am. J. Physiol. 2000. - Vol. 279. - P. G757-G766.

200. Dinarello C.A. Interleukin-1 and interleukin-1 antagonism // Blood. -1991. Vol. 77. - No 8. - P. 1627-1652.

201. Dinarello C.A. Biologic basis for interleukin-1 in disease // Blood. — 1996. Vol. 87. - P. 2095-2147.

202. Dinarello C.A., Wolff S.M. The Role of Interleukin-1 in Disease // N. Engl. J. Med. 1993. - Vol. 328. - No 2. - P. 106-113.

203. Djen J.N., Matsushima K., Oppenheim J.J. et al. Functional activation of human neutrophils chemotactic factor/IL-8 //J. Immunol. 1990. - V. 114. -No 6. - P. 2205-2210.

204. Duchmann R., Kaiser I., Hermann E. et al. Tolerance exists towards resident intestinal flora but is broken in active inflammatory bowel disease (IBD) // Clin. Exp. Immunol. 1995. - Vol. 102. - P. 448-455.

205. Duchmann R., Neurath M.F., Meyer zum Buschenfelde K.H. Responses to self and non-self intestinal microflora in health and inflammatory bowel disease // Res. Immunol. 1997. - Vol. 148. - P. 589.

206. Dugas В., Mercenier A., Lenoir-Wijnkoop I. et al. Immunity and probiotics //Immunol. Today. 1999. - Vol. 20. - P.387-390.

207. Dunne C. Adaptation of bacteria to the intestinal niche: probiotics and gut disorder// Inflamm. Bowel Dis. 2001. - Vol. 7. - No 2.- P. 136-145.

208. Dwinell M.B., Lugering N., Eckmann L., Kagnoff M.F. Regulated production of interferon-inducible T-cell chemoattractants by human intestinal epithelial cells // Gastroenterology. 2001. - Vol. 120. - P. 59.

209. Eckmann L., Kagnoff M.F. Cytokines in host defense against Salmonella // Microbes Infect. -2001,- Vol. 3. P. 1191 -1200.

210. Ellis T.N., Beaman B.L. Murine polymorphonuclear neutrophils produce interferon-y in response to pulmonary infection with Nocardia asteroids // J.of Leukoc. Biol. 2002. - No 72. - P. 373-381.

211. Erie D. J., M. J. Briskin, E. C. Butcher, A. et al. Expression and function of the MAdCAM-1 receptor, integrin a4p7, on human leukocytes // J. Immunol. 1994. - No 153. - P. 517-528.

212. Ethuin F., Delarche C., Gougerot-Pocidalo M.A. et al. Regulation of interleukin 12 p40 and p70 production by blood and alveolar phagocytes during severe sepsis // Lab. Invest. 2003. - Vol. 83. - No 9. - P. 1353-1360

213. Faria A.M., Weiner H.L. Oral tolerance: mechanisms and therapeutic applications // Adv. Immunol. 1999. - No 73. - P. 153-264.

214. Fasano A. Toxins and the gut: role in human disease // Gut. 2002. - Vol. 50.-P. 9-14.

215. Fiocchi C. Immunity and inflammation: separate or unified? In: Clinical Immunology in Gastroenterology and Hepatology: from Bench to

216. Bedside, edited by R. P. MacDermott // American Gastroenterological Association. 1994. - P. 182-188.

217. Fiocchi C. Cytokine in Inflammatory Bowel Disease // Austin, TX: R.G. Landes. 1996.

218. Fiocchi C. Inflammatory bowel disease: etiology and pathogenesis // Gastroenterology. 1998. - Vol. 115. - P.l82-205.

219. Fiocchi, C., Binion D. G., Katz J. A. Cytokine production in the person gastrointestinal tract during inflammation // Curr. Opin. Gastroenterol. -1994.-Vol. 2.-P. 639-644.

220. Foo L. Immunological response of mice to members of autochthonous intestinal flora // Ifect. Immun. — 1972. — Vol. 6. P. 525.

221. Fontes В., Sergio-Pogetti R. The role of the polymorphonuclear neutrophil in the failure of multiple organs and systems //Rev. Hosp. Clin. Fac. Med. Sao-Paulo. 1996. - V. 51. - No 1. - P. 21-25.

222. Foussat A., Cottrez F., Brun V. et al. A Comparative Study between T Regulatory Type 1 and CD4+CD25+ T Cells in the Control of Inflammation // J. Immunol. 2003. - Vol. 171. - No 10. - P. 50185026.

223. Fusunyan R.D., Nanthakumar N.N., Baldeon M.E., Walker W.A. Evidence for an Innate Immune response in the Immature human intestine: Toll-like receptors on fetal enterocytes // Pediatric Research.-2001.- Vol. 49.-P. 589-593.

224. Gailit J., Clark R.A.F. Wound repair in the context of extracellular matrix // Curr. Opin. Cell Biol. 1994. - Vol. 6. - P. 717-725.

225. Gerthoffer M. and Singer P. Secretory Functions of Smooth Muscle: Cytokines and Growth Factors // Mol. Interv. 2002. - Vol. 2. - P. 447456.

226. Gewirtz A.T, Navas T.A, Lyons S. et al. Bacterial flagellin activates basolaterally expressed TLR-5 to induce epithelial proinflammatory gene expression//J. Immunol. 2001. - Vol. 167. - P. 1882-1885.

227. Gibson P, Rosella O. Interleukin 8 secretion by colonic crypt cells in vitro: response to injury suppressed by butyrate and enhanced in inflammatory bowel disease // Gut. 1995. - Vol. 37. - P. 536-543.

228. Godaly G, Bergsten G, Hang L. et al. Neutrophil recruitment, chemokine receptors, and resistance to mucosal infection // J. Leukoc. Biol. 2001. - Vol. 69. - P. 899-906.

229. Goetzl E.J, Banda M.J, Leppert D. Matrix metalloproteinases in immunity // J. Immunol. 1996. - Vol. 156. - P. 1-4.

230. Gougerot-Podicalo M.A, Elbim C, Chollet M.S. Modulation of the oxidative burst of human neutrophils by pro- and anti-inflommatory cytokines //Pathol. Biol. Paris. 1996. - V. 44. - No 1. - P. 36-41.

231. Goyal R.K, Hirano I. The enteric nervous system // N. Engl. J. Med. 1996. -Vol. 334.-P. 1106-1115.

232. Grisham M.B, Granger D.N. Neutrophil-mediated mucosal injury. Role of reactive oxygen metabolites // Dig. Dis. Sci. — 1988. — Vol. 33. P. 6S-15S.

233. Grisham, M.B, Yamada T. Neutrophils, nitrogen oxides, and inflammatory bowel disease // Ann. NY Acad. Sci. 1992. - Vol. 664. -P. 103-115.

234. Groh V, Steinle A, Bauer S, Spies T. Recognition of stress-induced MHC molecules by intestinal уЬ T cells // Science. 1998. - Vol. 279. -P. 1737-1740.

235. Groux H, O'Garra A, Bigler M. et al. A CD4+T cell subset inhibits antigen-specific T-cell responses and prevents colitis // Nature. 1997. -Vol. 389.-P. 737-742.

236. Guarner F., Malagelada J.R., Thayer W.R. et al. Possible role of mycobacteria in inflammatory bowel disease. I. An unclassified Mycobacterium species isolated from patients with Crohn's disease // Dig. Dis. Sci. 1984. - Vol. 29. - P. 1073-1079.

237. Guarner F., Malagelada J.R. Role of bacteria in experimental colitis // Best Pract. Res. Clin. Gastroenterol. 2003. - Vol. 17, No 5. P. 793-804.

238. Guarner F., Malagelada J.R. Bacterial flora of the digestive tract // Gastroenterol. Hepatol. 2003. - Vol. 26, Suppl 1. - P. 1-5.

239. Guarner F., Malagelada J.R. Gut flora in health and disease // Lancet. 2003. Vol. 361, No 9356. - P. 512-519.

240. Haller D., Bode C., Hammes W.P. et al. Non-pathogenic bacteria elicit a differential cytokine response by intestinal epithelial cell/leukocyte co-cultures // Gut. 2000. - Vol.47. - P. 79-87.

241. Hardin J., Kroeker K., Chung В., Gall D.G. Effect of proinflammatory interleukins on jejunal nutrient transport // Gut. — 2000. Vol. 47. — P. 184-191.

242. Hattar K., Fink L., Fietzner K. et al. Cell Density Regulates Neutrophil IL-8 Synthesis: Role of IL-1 Receptor Antagonist and Soluble TNF Receptors // The J. of Immunol. 2001. - No 166. - P. 6287-6293.

243. Heresbach D., Alizadeh M., Dabadie A. Significance of interleukin-1 beta and interleukin-1 receptor antagonist genetic polymorphism in inflammatory bowel diseases // Am. J. Gastroenterol. 1997. - Vol. 92. — P. 1164-1169.

244. Higgins L.M., Frankel G., Connerton I. et al. Role of bacterial intimin in colonic hyperplasia and inflammation // Science. 1999. - Vol. 285. - P. 588-591.

245. Hinterleitner T. A., Saada J. I., Berschneider H. M., et al. IL-1 stimulates intestinal myofibroblast COX gene expression and augments activationof СГ secretion in T84 cells // Am. J. Physiol. 1996. - Vol. 271. - No 40.-P. C1262-C1268.

246. Hogaboam, С. M., Snider D. P., Collins S. M. Activation of T lymphocytes by syngeneic murine intestinal smooth muscle cells //Gastroenterology. 1996. - No 110. - P. 1456-1466.

247. Hooper L.V., Wong M.H., Thelin A. et al. Molecular analysis of commensal host-microbial relationships in the intestine // Science. -2001. Vol. 291. - P. 881-884.

248. Hooper L.V., Gordon J.I. Commensal host-bacterial relationships in the gut// Science. 2001. - Vol. 292. - P. 1115-1118.

249. Ina K., Binion D. G., West G. A. et al. Secretion of soluble factors and phagocytosis by intestinal fibroblasts regulate T-cell apoptosis (Abstract) // Gastroenterology. 1995. - Vol. 108. - P. A841.

250. Ina K., Binion D. G., West G. A. et al. Crohn's disease (CD) mucosal T-cells are resistant to apoptosis (Abstract) // Gastroenterology. 1995. — Vol. 108.-P. A841.

251. Ina K., Kusugami K., and Fiocchi C. Enhanced interaction of intestinal fibroblasts with T-cells in inflammatory bowel disease (IBD) (Abstract) // Gastroenterology. 1996. - Vol. 110. - P. A930.

252. Isolauri E., Kirjavainen P.V., Salminen S. Probiotics: a role in the treatment of intestinal infection and inflammation? //Gut. 2002. - Vol. 50. - P. iii54-iii59.

253. Iwasaki A., Kelsall B.L. Freshly isolated Peyer's Patch, but not spleen, dendritic cells produce interleukin 10 and induce the differentiation of T helper type 2 cells // J. Exp. Med. 1999. - Vol. 190. - P. 229-239.

254. Jiang C.L., Lu C.L. Interleukin-2 and its effects in the central nervous system //Biol. Signals and Receptoss. 1998. - V. 7. - № 3. - P. 148-156.

255. Jobson T.M., Billington C.K., Hall I.P. Regulation of Proliferation of Human Colonic Subepithelial Myofibroblasts by Mediators Important in Intestinal Inflammation // J. Clin. Infest. 1998. - Vol. 101. - No 12. - P. 2650-2657.

256. Jung, H. C., Eckmann L., Yang S.-K. et al. A distinct array of proinflammatory cytokines is expressed in human colon epithelial cells in response to bacterial invasion //J. Clin. Invest. 1995. — Vol. 95. — P. 55-65.

257. Kagnoff M.F., Eckmann L. Epithelial cells as sensors for microbial infection //J. Clin. Invest. 1997. - Vol. 100. - P. 6-10.

258. Kahn I., Collins S.M. Expression of cytokines in the longitudinal muscle mesenteric plexus of the inflamed intestine of rat // Gastroenterology. — 1994. Vol. 107. - P. 691-700.

259. Kahn I., Blennerhassett M. G., Kataeva G. V., Collins S. M. Interleukin 1 (3 induces the expression of interleukin 6 in rat intestinal smooth muscle cells // Gastroenterology. 1995. - Vol. 108. - P. 1720-1728.

260. Kelly D, Conway S. Genomics at work: the global gene response to enteric bacteria // Gut. 2001. - Vol. 49, No 5. - P. 612-613.

261. Kaplow L.S. A histochemical procedure for localization and evaluating leukocyte alkaline phosphatase activity in smeares of blood and marrow // Blood.- 1955.-Vol. 10, No 10.-P. 1023-1029.

262. Kleesen В., Kroesen A.J., Buhr H.J. et al. Mucosal and invading bacteria in patients with inflammatory bowel disease compared with controls // Scand. J. Gastroenterol.-2002.-Vol. 37.-P. 1034-1041.

263. Kiliaan A.J., Saunders P.R., Bijlsma P.B. et al. Stress stimulates transepithelial macromolecular uptake in rat jejunum // Am. J. Physiol. -1998.- Vol. 275. P. G1037-G1044.

264. Kim J.M., Eckmann L., Savidge T.C., et al. Apoptosis of human intestinal epithelial cells after bacterial invasion // J. Clin.Invest. — 1998. -Vol. 102.-P. 1815-1823.

265. Kita H., Ohnishi Т., Okubo V. et al. Granulocyte/macrophage colony-stimulating factor and interleukin 3 release from human peripheral blood eosinophils and neutrophils // J. Exp. Med. 1991. - Vol. 174. - No 3. - P. 745-748.

266. Kobayashi K., Kashima K., Higuchi K., Arakawa I. The mechanisms of gastrointestinal mucosal injury and repair // Nippon Rinsho. 1998. - Vol. 56.-No 9.-P. 2215-2222.

267. Koizumi M., King N., Lobb R. et al. Expression of vascular adhesion molecules in inflammatory bowel disease // Gastroenterology. 1992. - Vol. 103.-P. 840-847.

268. Kruis W., Schutz E., Fric P. et al. Double-blind comparison of an oral Escherichia coli preparation and mesalazine in maintaining remission of ulcerative colitis // Aliment. Pharmacol. Ther. 1997. - Vol. 11. - P. 853858.

269. Kuhn R., Lohler J., Rennick D. et al. Interleukin-10-deficient mice develop chronic enterocolitis // Cell. 1998. - Vol. 75. - P. 263-274.

270. Kuhns D.B., Young H.A., Gallin E.K., Gallin J.I. Ca2+-Dependent Production and Release of IL-8 in Human Neutrophils // The J. of Immunol. 1998.-No 161.-P. 4332-4339.

271. Kulkarni A.B., Huh C.G., Becker D. et al: Transforming growth factor pi null mutation in mice causes excessive inflammatory response and early death // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1993. - Vol. 90. - P. 770-774.

272. Kurt-Jones E.A., Mandell L., Whithey C. et al. Role of toll-like receptor 2 (TLR2) in neutrophils activation: GM-CSF enhances TLR2 expression and TLR2-mediated interleukin 8 responses in neutrophils // Blood. 2002. -Vol. 100. - No 5. - P. 1860-1868.

273. Levite M., Chowers Y. Nerve-driven immunity: neuropeptides regulate cytokine secretion of T cell and intestinal epithelial cells in a direct, powerful and contextual manner // Ann. Oncol. 2001. - Vol. 12. - P. S19-S25.

274. Ligumsky M., Simon P.L., Karmeli F., Rachmilewitz D. Role of interleukin 1 in inflammatory bowel disease — enhanced production during active disease // Gut. 1990. - Vol. 31. - P. 686-689.

275. Liu Y. van Kruiningen H.J;, West A.B. Immunocytochemical evidence of Listeria, Escherichia coli, and Streptococcus antigens in Crohn's disease // Gastroenterology. 1995. - Vol. 108. - P. 1396-1404.

276. Lorentz A, Schwengberg S., Sellge G. et al. Human intestinal mast cells are capable of producing different cytokine profiles: role of IgE receptor cross-linking and IL-4 // J. Immunol. 2000. - Vol. 164. - P. 43-48.

277. Ma T.Y, Nguyen D, Bui V. et al. Ethanol modulation of intestinal epithelial tight junction barrier //Am. J. Physiol. 1999. - Vol. 276. - P. G965-G974.

278. MacDonald T.T, Pettersson S. Bacterial regulation of intestinal immune responses // Inflamm. Bowel. 2000. Vol. 6. - No 2. - P. 116-122.

279. Madsen K.L, Doyle J.S, Jewell L.D. et al. Lactobacillus species prevents colitis in interleukin 10 gene-deficient mice // Gastroenterology. 1999. - Vol. 116. - P. 1107-1114.

280. Malchow H.A. Crohn's disease and Escherichia coli. A new approach in therapy to maintain remission of colonic Crohn's disease? // J. Clin. Gastroenterol. 1997. - Vol. 25. - P. 653-658.

281. Malizia G, Calabrese A, Cottone M. et al. Expression of leukocyte adhesion molecules by mucosal mononuclear phagocytes in inflammatory bowel disease // Gastroenterology. 1991. - Vol. 100. - P. 150-159.

282. Manchini G, Carbonara A.O, Heremans J.F. Immunochemical quantitation of antigens by single radial immunodiffusion // Immunochemistry. 1965. -Vol. 2.-P. 235-254.

283. Mandi Y, Nagy Z, Ocsovski I, Farkas G. Effects of tumor necrosis factor and pentoxifylline on ICAM-1 expression on human polymorphonuclear granulocytes //Int. Arch. Allergy Immunol. 1997. - Vol. 114. - No 4. - P. 329-335.

284. Marteau P. Immunologic functions of the gastrointestinal epithelium // Gastroenterol. Clin. Biol. 1990. - Vol. 14, No 12, Pt 2. - P. 39D-40D.

285. Marteau P, Pochart P, Flourie B. et al. Effect of chronic ingestion of a fermented dairy product containing Lactobacillus acidophilus and

286. Bifidobacterium bifidum on metabolic activities of the colonic flora in humans I I Am. J. Clin. Nutr. 1990. - Vol. 52, No 4. - P. 685-688.

287. Marteau P., Flourie В., Pochart P. et al. Effect of the microbial lactase (EC 3.2.1.23) activity in yoghurt on the intestinal absorption of lactose: an in vivo study in lactase-deficient humans // Br. J. Nutr. — 1990. —Vol. 64, No l.-P. 71-79.

288. Marteau P., Colombel J.F., Nemeth J. et al. Immunological study of histologically non-involved jejunum during CrohnVs disease: evidence for reduced in vivo secretion of secretory IgA // Clin. Exp. Immunol. — 1990. Vol. 80, No 2. - P. 196-201.

289. Matsuzaki Т., Chin J. Modulation immune responses with probiotic bacteria // Immunol. Cell Biol. 2000. - Vol. 78. - P.67-73.

290. May M.J., Ghosh S. Signal transduction through NF-kB // Immunol. Today. 1998. - Vol. 19. - P. 80-88.

291. Mayer L. Current concept in mucosal immunity. I. Antigen presentation in the intestine: new rules and regulations // Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 1998. - Vol. 274. - P. G7-G9.

292. Mayer L. Mucosal Immunity // Pediatrics. 2003. - Vol. 111. - No 6. - P. 1595-1600.

293. Mayer L., and Eisenhardt D. Lack of induction of suppressor T cells by intestinal epithelial cells from patients with inflammatory bowel disease // J. Clin. Invest. 1990. - Vol. 86. - P. 1255-1260.

294. Mayer L., and Shlien R. Evidence for function of la molecules on gut epithelial cells in man // J. Exp. Med. 1987. - Vol. 166. - P. 1471-1483.

295. McKay D.M., Baird A.W. Cytokine regulation of epithelial permeability and ion transport // Gut. 1999. - Vol. 44. - P. 283-289.

296. McOrist S., Jasni S., Mackie R.A. et al. Reproduction of porcine proliferative enteroparthy with pure cultures of ileal symbiont intracellularis // Infect. Immunol. 1993. - Vol. 61. - P. 4286-4292.

297. Melmed G., Thomas L.S., Lee N. et al. Human intestinal epithelial cells are broadly unresponsive to Toll-like receptor 2-dependent bacterial ligands: implications for host-microbial interactions in the gut // J. Immunol. 2003. -Vol. 170.-P. 1406-1415.

298. Mombaerts P., Mizoguchi E., Grusby M.J. et al. Spontaneous development of inflammatory bowel disease in T cell receptor mutant mice // Cell. 1993. - Vol. 75, No 2. - P. 274-282.

299. Moreau M.C. et al. Increase in the population of duodenal immunoglobulin A plasmocytes in axenic mice associated with different living or dead bacterial strains of intestinal origin // Infect. Immunol. 1978. - Vol. 21. — P. 532.

300. Muller-Lissner S. Диагностика и терапия запора // Pharmedicum. 1995. -Vol. 3.-P. 15-16.

301. Nakamura K., Kitani A., Strober W. Cell contact-dependent immunosuppression by CD4+CD25+ regulatory T cells is mediated by cell surface-bound transforming growth factor (3 // J. Exp. Med. 2001. - Vol. 194.-P. 629.

302. Nakamura S., Ohtani H., Watanabe Y. et al. In situ expression the cell adhesion molecules in inflammatory bowel disease // Lab. Invest. — 1993. -Vol. 69.-P. 77-85.

303. Neish A.S., Gewirtz A.T., Zeng H. et al. Prokaryotic regulation of epithelial responses by inhibition of IkappaB-alpha ubiquitination // Science. 2000. - Vol. 289, No 5484. - P. 1560-1563.

304. Nikolaus S., Bauditz J. Gionchetti P. et al. Increased secretion of proinflammatory cytokines by circulating polymorphonuclear neutrophils and regulation by interleukin 10 during intestinal inflammation //Gut. — 1998. - Vol. 42. - P. 470-476.

305. Nomura F., Akashi S., Sakao Y. et al. Cutting edge: endotoxin tolerance in mouse peritoneal macrophages correlates with down-regulation of surface toll-like receptor 4 expression // J: Immunol. — 2000. — Vol. 164. -P. 3476-3479.

306. Northeast AD, Dennison AR, Lee EG. Sigmoid volvulus: new thoughts on the epidemiology // Dis Colon Rectum. 1984. — Vol. 27, No 4. - P. 260-261.

307. Ocada Y. et al. Effects of fecal microorganisms and their chloroform-resistant variants derived from mice, rats, and humans and physiological characteristics of the intestines of ex germfree mice // Infect. Immun. — 1994.-Vol. 62.-P. 5442.

308. Omori F., Okamura S., Shimoda K. et al. Levels of human serum " granulocyte colony-stimulating factor and granylocyte-macrophage colonystimulating factor under pathological conditions // Biotherapy. 1992. - Vol. l.-No 2.-P. 147-153.

309. Opal:S.M., DePalo V.A. Anti-inflammatory cytokines // Chest. 2000. - Vol. 117.-No 4.-P. 1162-1172.

310. Oppenheim J., Feldman M. (Eds) Cytokine Reference. London: Academic Press, 2000.-2015 p.

311. Ortega-Cava C.F., Ishihara S., Rumi M.A.K. et al. Strategic Compartmentalization of Toll-Like Receptor 4 in the Mouse Gut // The J. of Immunol. 2003. - Vol. 170. - P. 3977-3985.f

312. Ott S.J., Musfeldt M., Wenderoth D.F. et al., Reduction in diversity of the colonic mucosa associated bacterial microflora in patients with active inflammatory bowel disease // Gut. 2004. - Vol. 53. - P. 685-693.

313. Otte J.-M., Podolsky D.K. Functional modulation of enterocytes by gram-positive and gram-negative microorganisms // Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 2004. - Vol. 286. - P. G613-G626.

314. Painter N.S. Constipation // Practitioner. 1980. - Vol. 224, No 1342. -P. 387-391.

315. Panja A., Goldberg S., Eckmann L., et al. The regulation and functional consequence of proinflammatory cytokine binding on human intestinal epithelial cells // J. Immunol. 1998. - Vol. 161. - P. 3675-3684.

316. Perdue M.H. Mucosal immunity and inflammation. III. The mucosal antigen barrier: cross talk with mucosal cytokines // Am. J. Physiol. -1999. Vol. 277.-P. G1-G5.

317. Pessi Т., Sutas Y., Hurme M., Isolauri E. Interleukin-1-generation in atopic children following oral Lactobacillus rhamnosus GG // Clin. Exp. Allergy. 2000. - Vol. 30. - P. 1804-1808.

318. Philpott D.J., McKay D.M., Мак W. et al. Signal transduction pathways involved in enterohemorrhagic Escherichia coli-induced alterations in T84 epithelial permeability // Infect. Immun. 1998. - Vol. 66. - P. 16801687.

319. Podolsky D.K. Regulation of intestinal epithelial proliferation: a few answers, many questions // Am. J. Physiol. 1993. - Vol. 264. - P. G179-G186.

320. Pollard M., Sharon N. Responses of the Peyer's patches in germ-free mice to antigenic stimulation // Infect. Immun. — 1970. — Vol. 2. — P. 96.

321. Pugin J., Schurer-Maly C., Leturcq D. et al. Lipopolysaccharide activation of human endothelial and epithelial cells is mediated by lipopolysaccharide-binding protein and soluble CD 14 // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1993. - Vol. 90. - P. 2744-2748.

322. Quagic J.A., Adams S., Bucknall R., Edward S. Interleikin-1 expression by neutrophils in rheumatoid arthritis // Ann. Rheum. Dis. 1995. - Vol. 54. -No 11.-P. 930-933.

323. Ranghow R. The role of extracellular matrix in postinflammatory wound healing and fibrosis // FASEB J. 1994. - Vol. 8. - P. 823-831.

324. Rath H.C. Role of commensal bacteria in chronic experimental colitis: lessons from the HLA-B27 transgenic rats // Pathobiology. 2002. - Vol. 70. -P. 131-138.

325. Rath H.C., Herfarth H.H. Ikeda J.S. et al. Normal luminal bacteria, especially bacteroides species, mediate chronic colitis, gastritis and arthritis in HLA-B27/human p2-niicroglobulin transgenic rats // J. Clin. Invest. -1996.-Vol. 98.-P. 945-953.

326. Rath H.C., Wilson K.H., Sartor R.B. Differential induction of colitis and gastritis in HLA-B27 transgenic rats selectively colonized with Bacteroides vulgatus or Escherichia coli // Infect. Immun. 1999. - Vol. 67. - P. 29692974.

327. Read S., Malmstrom V., Powrie F. Cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4 plays an essential role in the function of CD25+CD4+ regulatory cells that control intestinal inflammation // J. Exp. Med. 2000. - Vol. 192. -P. 295.

328. Reichlin S. Neuroendocrine-immune interactions // N. Engl. J. Med. — 1993.-Vol. 329.-P. 1245-1253.

329. Reinecker H.C, Podolsky D. К. Human intestinal epithelial cells express functional cytokine receptors sharing the common gamma-c chain of the interleukin 2 receptor // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1995. - Vol. 92. -P. 8353-8357.

330. Rembacken B.J., Snelling A.M., Hawkey P.M. et al. Non-pathogenic Escherichia coli versus masalazine for the treatment of ulcerative colitis: a randomized trial // Lancet. 1999. Vol. 354. - P. 635-639.

331. Renner HW, Munzner R. The possible role of probiotics as dietary antimutagen // Mutat. Res. 1991. - Vol. 262, No 4. - P. 239-245.

332. Romagnani S. The Thl/Th2 paradigm // Immunol. Today. 1997. - Vol. 18. - P. 263-266.

333. Roncarolo M.G, Bacchetta R, Bordignon C. et al. Type 1 T regulatory cells //Immunol. Rev. 2001. - Vol. 182. No 1. P. 68-79.

334. Roussomoustakaki M, Satsangi J, Welsh K. Genetic markers may predict disease behavior in patients with ulcerative colitis // Gastroenterology. 1997. - Vol. 112. - P. 1845-1853.

335. Ruemmele F.M, BeaulieuJ.F, Dionne S. et al. Lipopolysaccharide modulation of normal enterocyte turnover by toll-like receptors is mediated by endogenously produced tumour necrosis factor a // Gut. -2002. Vol. 51. - P. 842-848.

336. Salinthone G. et al. Imflammatory gene expression by human colonic smooth muscle cells // Am. J. Physiol. 2004. - Vol. 287. - G627-G637.

337. Salminen S. The role of intestinal microflora in preserving intestinal integrity and health with special reference to lactic acid bacteria // Ann. Med.- 1990.-Vol. 22, No l.-P. 35.

338. Sartor R.B. Enteric microflora in IBD: pathogens or commensals? // Inflamm. Bowel Dis. 1997. - Vol. 3. - P. 230-235.

339. Sartor R.B., Rath H.C., Sellon R.K. Microbial factors in chronic intestinal inflammation // Curr. Opin. Gastroenterol. — 1996. — Vol. 12. — P. 327-333.

340. Savcovic S.D., Koutsouris A., Hecht G. Activation NF-кВ in intestinal epithelial cells by enteropathogenic E. coli // Am. J. Phisiol. 1997. -Vol. 273. - P. C1160-C1167.

341. Scott S., Pandolfi F., and Kurnick J. T. Fibroblasts mediate T cell survival: a proposed mechanism for retention of primed T cells // J. Exp. Med. 1990.-Vol. 172.-P. 1873-1876.

342. Selby W. S., Janossy G., Mason D. Y., and Jewell D. P. Expression of HLA-DR antigens by colonic epithelium in inflammatory bowel disease //Clin. Exp. Immunol. 1983.-Vol. 53.-P. 614-618.

343. Sellon R.K., Tonkonogy S., Schultz M. et al. Resident enteric bacteria are necessary for development of spontaneous colitis and immune system activation in interleukin-10-deficient mice // Infect. And Immun. 1998. -Vol. 66. - P. 5224-5231.

344. Shanahan F. A gut reaction: lymphoepithelial communication in the intestine // Science. 1997. - Vol. 275. - P. 1897-1898.

345. Shanahan F. Nutrient Tasting and Signaling Mechanisms in the Gut. V. Mechanisms of immunologic sensation of intestinal contents // Am. J. Physiol. 2000. - Vol. 278. - P. 191-196.

346. Shanahan F. Crohn's disease // Lancet. 2002. Vol. 359. - P. 62- 69.

347. Sharkey K.A., Mawe G.M. Neuroimmune and epithelial interactions in intestinal inflammation // Curr. Opin. Pharmacol. 2002. - Vol. 2. - P. 669-677.

348. Shimizu Y., Shaw S. Lymphocyte interactions with extracellular matrix // FASEB J. 1991.-Vol. 5.-P. 2292-2299.

349. Shull M.M., Ormsby I., Kier A.B. et al. Targeted disruption of the mouse transforming growth factor (31 gene results in multifocal inflammatory disease //Nature. 1992. - Vol. 359. - P. 693.

350. Shevach E.M., McHugh R.S., Piccirillo C.A., Thornton A.M. Control of T-cell activation by CD4+CD25+ suppressor T cells // Immunol. Rev. -2001.-Vol. 182. No l.-P. 58-67.

351. Simon G.L., Gorbach S.L. Intestinal flora in health and disease // Gastroenterology. 1984. - Vol. 86. - P. 174-193.

352. Singh В., Read S., Asseman C. et al. Control*of intestinal inflammation by regulatory T cells // Immunol. Rev. 2001. - Vol. 182. - No l.-P. 190-200.

353. Slifka M.K., Whitton J.L. Clinical implications of dysregulated cytokine production // J. Mol. Med. 2000. - Vol. 78, № 2. - P. 74-80.

354. Smith J.A. Neutrophils, host defence and inflammation: a double edgen sword // J. Leukoc. Biol. - 1994. - Vol. 56. - No 6. - P. 672-686.

355. Smith W.B. et al. Neutrophils activated by granulocyte-macrophage colonystimulating factor express receptor for interleukin-3 which mediates class II expression // Blood. 1995. - Vol. 86. - No 10. - P. 3938-3944.

356. Song F., Ito K., Denning T.L. et al. Expression of the neutrophil chemokine КС in the colon of mice with enterocolitis and by intestinal epithelial cell lines: effect flora and proinflammatory cytokines // J. Immunol. 1999. - Vol. 162. - P. 2275-2280.

357. Spitz J., Yuhan R., Koutsouris A. et al. Enteropathogenic E. coli adherence to intestinal epithelial monolayers diminishes barrier function //Am. J. Physiol. 1995. - Vol. 268. - P. G374-G379.

358. Stadnyk A.W. Cytokine production by epithelial cells // The FASEB Journal. 1994.-Vol. 8.-P. 1041-1047.

359. Steidler L., Hans W., Schotte L. et al. Treatment of murine colitis by Lactococcus lactis secreting interleukin-10 // Science. — 2000. Vol. 289.-P. 1352-1355.

360. Stevens C., Walz G., Singaram C. et al. Tumor necrosis factor-alpha, interleukin-1 beta, and interleukin-6 expression in inflammatory bowel disease // Dig. Dis. Sci. 1992. - Vol. 37. - No 6. - P. 818-826.

361. Strater J., Wedding U., Barth T.F. et al. Rapid onset of apoptosis in vitro follows disruption of (3 \ -integrin/matrix interactions in human colonic crypt cells II Gastroenterology. 1996. - Vol. 110. - P. 1776-1784.

362. Strobel S., Mowat A.M. Immune responses to dietary antigens: oral tolerance //Immunol. Today. 1998. - No 19. - P. 173-181.

363. Strober W., Kelsall В., Marth T. Oral tolerance // J. Clin. Immunol. -1998.-No 18.-P. 1-30.

364. Swidsinski A., Ladhoff A., Pernthaler A. et al. Mucosal flora in inflammatory bowel disease // Gastroenterology. — 2002. — Vol. 122. P. 44-54.

365. Suzuki S., Kobayashi M., Chiba K. et al. Autocrine production of epithelial cell-derived neutrophil attractant-75 induced by granulocyte colonystimulating factor in neutrophils // Blood. 2002. - Vol. 99. - No 5. - P. 1863-1865.

366. Так P.P., Firestein G.S. NF-kB: a key role in inflammatory diseases // J. Clin. Invest. 2001. - Vol. 107. - P. 7-11.

367. Teunissen M.B.M., Piskin G., di Nuzzo S. et al. Ultraviolet В Radiation Induces a Transient Appearance of IL-4+Neutrophils, Which Support the Development of Th2 Responses // The J. of Immunol. 2002. - No 168. - P. 3732-3739

368. Thayer W.R.Jr., Coutu J.A., Chiodini R.J. et al. Characteristics of an unclassified Mycobacterium species isolated from patients with Crohn's disease // Dig. Dis. Sci. 1984. - Vol. 29. - P. 1080-1085.

369. Valentich J. D., and Powell D. W. Intestinal subepithelial myofibroblasts and mucosal immunophysiology // Curr. Opin. Gastroenterol. — 1994. -Vol. 10.-P. 645-651.

370. Waidmann M., Allemand Y., Lehmann J. et al. Microflora reactive IL-10 producing regulatory T cells are present in the colon of IL-2 deficient mice but lack efficacious inhibition of IFNa and TNFa production // Gut. -2002. Vol. 50. - P. 170-179.

371. Ward P.A., Varani J. Mechanisms of neutrophil-mediated injury // Clin, and Exh. Immunol. 1993. - V. 93. - Suppl.l. - P. 2.

372. Wardle T.D., Turnberg L.A. Potential role for interleukin-1 in the pathophysiology of ulcerative colitis // Clin. Sci. 1994. - Vol. 86. - P. 619626.

373. Watanabe M., Ueno Y., Yajima T. et al. Interleukin-7 is produced by human intestinal epithelial cells and regulates the proliferation of intestinal mucosal lymphocytes // J. Clin. Invest. 1995. — Vol. 95. - P. 2945-2953.

374. Watson A.M.J. Necrosis and apoptosis in the gastrointestinal tract // Gut. 1995.-Vol. 37.-P. 165-167.

375. Weiner H.L. Induction and mechanism of action of transforming growth factor-P-secreting Th3 regulatory cells // Immunol. Rev. 2001. — Vol. 182.-No l.-P. 207-214.

376. Wu Sh, Lim K.-Ch, Huang J. et al. Bacteroides fragilis enterotoxin cleaves the zonula adgerens protein, E-cadherin // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1998. Vol. 95. - P. 14979-14984.

377. Xia Y, Hu H.-Z. Liu S. et al. IL-ip and IL-6 excite neurons and suppress nicotinic and noradrenergic neurotransmission in guinea pig enteric nervous system // Clin. Invest. 1999. - Vol. 103.-No 9.-P. 1309-1316.

378. Yang X, Letterio J.J, Lechleider R.J. et al. Targeted disruption of SMAD3 results in impaired mucosal immunity and diminished T cell responsiveness to TGF-P // EMBO J. 1999. - Vol. 18.-P. 1280.

379. Yokota K, Nishihira T, Shineha R. et al. Association between elevated plasma granulocyte colony-stimulating factor and the degree of surgical stress in patients undergoing gastrointestinal surgery // Surg. Today. 1995. -V. 25.-№7.-P. 579-584.

380. Yu L.C, Perdue M.H. Role of mast cells in intestinal mucosal function: studies in models of hypersensitivity and stress // Immunol. Rev. 2001. -Vol. 179.-P. 61-73.

381. Yu B.J, Shinnick-Gallagher P. Interleukin-1 beta inhibits synaptic transmission and induces membrane hyperpolarization in amigdala neurons // J. Pharmacol. Exp. Ther. 1994. - Vol. 271. - P. 590-600.

382. Zareie M, McKay D.M, Kovarik G.G, Perdue M.H. Monocyte/macrophages evoke epithelial dysfunction: indirect role oftumor necrosis factor-a // Am. J. Phisiol. 1998. - Vol. 275. - P. C932-C939.

383. Zeman K. Wspotczesne poglady na role granulocytow obojetnochtonnych (neytrofilow) w proceeach zapalnych. I patofizjologiczne padstawy udzialy neutrofilow w zapaleniu // Pol. J. Immunol. 1993. - Vol. 18. - No 1. - P. 321.

384. Zeman K. Wspotczesne poglady na role granulocytow obojetnochtonnych (neytrofilow) w proceeach zapalnych. II Wspotzaleznosce pomiedzy neutrofilami о komorkami i produktami adpornosciowey // Pol. J. Immunol. 1993. - Vol. 18. - No 1. - P. 23-44.у