Изменение показателей крови и выживаемости крыс при действии зоотоксинов в условиях гипертермии и в постгипертермический период

Лушникова, Ольга Викторовна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Изменение показателей крови и выживаемости крыс при действии зоотоксинов в условиях гипертермии и в постгипертермический период
ВАК РФ 03.03.01, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Изменение показателей крови и выживаемости крыс при действии зоотоксинов в условиях гипертермии и в постгипертермический период"

На правах рукописи

ЛУШНИКОВА Ольга Викторовна

ИЗМЕНЕНИЕ ПОКАЗАТЕЛЕЙ КРОВИ И ВЫЖИВАЕМОСТИ КРЫС ПРИ ДЕЙСТВИИ ЗООТОКСИНОВ В УСЛОВИЯХ ГИПЕРТЕРМИИ И В ПОСТГИПЕРТЕРМИЧЕСКИЙ ПЕРИОД

03.03.01 - физиология 03.01.04 - биохимия

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

2 1 ОКТ 2010

Нижний Новгород 2010

004611243

Работа выполнена на кафедре физиологии и биохимии человека и животных биологического факультета Нижегородского государственного университета им. Н.И. Лобачевского

Научные руководители:

доктор биологических наук, профессор Хомутов Александр Евгеньевич доктор сельскохозяйственных наук Гиноян Рубен Варданович

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор Конторщикова Клавдия Николаевна; доктор биологических наук, доцент Плескова Светлана Николаевна

Ведущая организация:

Нижегородский государственный педагогический университет

Защита состоится « И »Яо^м 2010 г. в /(Г часов на заседании диссертационного совета Д.212.166.15 Нижегородского государственного университета им. Н.И. Лобачевского по адресу: 603950, Нижний Новгород, пр. Гагарина, д. 23, корп. 1, биологический факультет. Факс: (8312) 465-82-92

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Нижегородского государственного университета им. Н.И. Лобачевского

Автореферат разослан « / О »

Учёный секретарь диссертационного совета кандидат биологических наук, доцент

С.В. Копылова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Влияние высокой температуры окружающей среды на организм человека и животных охватывает широкий круг вопросов физиолого-биохимического характера. Одним из вопросов этого влияния является тот факт, что кратковременное действие тепла на организм или эпизодические случаи перегревания не являются типичными в условиях жизнеоби-тания. Чаще всего организм сталкивается с более или менее продолжительным влиянием высокой внешней температуры, которое связано с климатогео-графическими условиями или со спецификой процессов (Султанов и др., 2001; Portner, 2001, 2002; Sharma, Hoopes, 2003).

На кафедре физиологии и биохимии человека и животных в течение последних 30 лет ведутся активные исследования термопротекторных свойств зоотоксинов как на уровне целостного организма, так и отдельных функциональных систем. В экспериментах на лабораторных животных показано увеличение продолжительности жизни при предварительном введении зоотоксинов по сравнению с использованием только высокой внешней температуры. Установлен механизм защитно-компенсаторных реакций, связанных с острым перегреванием (Хомутов и др. 2005, 2006; Ягин, 2007, Данилова, 2008).

Не менее актуальной является проблема использования общей и местной гипертермии в онкологической практике, поэтому изучение общих закономерностей влияния высокой внешней температуры на функциональные системы, а также исследование адаптогенов может в значительной степени расширить применение гипертермии в онкологии (Николаев, 1977; Лопатин, 1983; Рисина, 1985; Жарвид, 1986; Васильченко, 1998; Myerson R.J. et al., 1999).

Однако практическое использование термопротекторных свойств зоотоксинов невозможно при отсутствии сведений о реакциях организма, в частности, о состоянии системы крови в постгипертермический период.

Цель исследования: изучение показателей крови и выживаемости крыс в условиях гипертермии и в посгипертермический период и анализ возможных механизмов термопротекторного действия зоотоксинов.

Задачи исследования:

1. провести сравнительный анализ влияния зоотоксинов на выживаемость в постгипертермическом периоде лабораторных крыс при температурной (50°) экспозиции 30 и 45 мин;

2. изучить влияние гепарина на термопротекторные свойства зоотоксинов в условиях гипертермии и в постгипертермический период;

3. исследовать изменения морфологического состава крови при действии зоотоксинов в условиях гипертермии и в постгипертермический период;

4. оценить тромбоэластографические изменения показателей свёртывания крови при действии пчелиного яда, яда щитомордника и жабьего яда в условиях гипертермии и в постгипертермический период;

5. изучить изменение показателей аланин- и аспартатаминотрансфераз при действии пчелиного яда и яда щитомордника в постгипертермический период.

Научная новизна работы. Впервые проведён сравнительный анализ действия зоотоксинов, относящихся к различным, по механизму действия, физиолого-биохимическим группам, на выживаемость крыс в постгипертер-мическом периоде. Показано, что при введении физиологического раствора и тепловой экспозиции (50°С) в течение 45 мин в постгипертермическом периоде все животные погибают. При предварительном введении зоотоксинов в течение суток выживают от 40% до 100% крыс, в зависимости от таксономической принадлежности яда.

Впервые произведена комплексная оценка тромбоэластографических показателей при действии зоотоксинов при гипертермии и в постгипертермический период. Установлено, что высокая внешняя температура сопровождается гиперкоагуляцией, а совместное действие гипертермии и пчелиного яда вызывает гипокоагуляцию, гипертермии и яда щитомордника - гиперкоагуляцию, гипертермии и жабьего яда - не вызывает изменений гемостаза. В постгипертермическом периоде все показатели в течение суток восстанавливаются до контрольных величин.

Впервые произведена оценка изменений аланин- и аспартатаминотран-фераз в периферической крови при действии пчелиного яда и яда щитомордника в постгипертермический период. Показано, что введении пчелиного яда и яда щитомордника в условиях нормотермии активность AJTT и ACT повышается. При совместном применении ядов и высокой внешней температуры показатели AJIT не отличаются от контрольных величин, показатели ACT в постгипертермическом периоде при введении пчелиного яда превышают показатели контрольной группы, а при введении яда щитомордника не отличаются от контрольных величин.

Теоретическая и практическая значимость работы. Полученные данные о термопротекторном действии зоотоксинов значительно расширяют современное представление о неспецифической регуляции гомеостаза, связанной с повышением выживаемости крыс в постгипертермическом периоде.

Фундаментальное значение для понимания процессов теплового стресса имеют исследования состояния системы крови, изменений её морфологического состава, изменений свёртывающей и противосвёртывающей систем крови, изменений аминотрансферазного статуса при гипертермии и в постгипертермический период.

Результаты работы внедрены в учебный процесс кафедры физиологии и биохимии человека и животных Нижегородского государственного университета им. Н.И. Лобачевского. Опубликовано методическое пособие для работы студентов по курсу «Анатомия человека», рассматривающее вопросы физиологии и биохимии крови.

Положения, выносимые на защиту:

1. Установлено, что все исследованные зоотоксины (пчелиный яд, яд скорпиона, жабий яд, яд кобры, гюрзы, эфы, гадюки) повышают выживаемость крыс в постгипертермическом периоде. Увеличение выживаемости лабораторных животных зависит от видовой принадлежности продуцента того или иного яда.

2. Исследованные зоотоксины, в условиях гипертермии увеличивают количество эритроцитов, ретикулоцитов, уровень гемоглобина и гематокрит, количество сегментоядерных нейтрофилов, уменьшают количество лимфоцитов. В постгипертермическом периоде показатели красной и белой крови в течение суток возвращаются к исходным величинам.

3. В условиях гипертермии общее время свёртывания крови на фоне введения пчелиного яда снижается, снижается время реакции, время формирования сгустка крови, константа специфического свёртывания крови, повышается максимальная амплитуда тромбоэластограммы (ТЭГ) и увеличивается эластичность кровяного сгустка. При введении яда щитомордника используемые показатели ТЭГ имели прямо противоположную тенденцию. В постгипертер-мический период все показатели ТЭГ возвращаются к норме. Жабий яд не оказывает влияния на свёртывание крови.

4. Уровень свободного гепарина в периферической крови в условиях гипертермии достоверно снижается, с последующим восстановлением в течение суток. Введение пчелиного яда в условиях нормотермии (20°С) сопровождается повышением уровня свободного гепарин, а в условиях гипертермии снижается. Введение яда щитомордника при нормотермии достоверно снижает уровень гепарина, а при гипертермии этот процесс углубляется. Жабий яд не влияет на уровень гепарина. В постгипертермическом периоде в течение суток показатели уровня гепарина возвращались к норме.

5. При введении пчелиного яда и яда щитомордника в условиях нормотермии активность AJIT и ACT повышается. При совместном применении ядов и высокой внешней температуры показатели АЛТ не отличаются от контрольных величин, показатели ACT в постгипертермическом периоде при введении пчелиного яда превышают показатели контрольной группы, а при введении яда щитомордника не отличаются от контрольных величин.

Апробация работы. Основные положения работы были доложены и обсуждены: на Международной конференции «Инновации в пчеловодстве» (Сочи, 2008), на XIV Всероссийской конференции «Успехи апитерапии», на заседании кафедры физиологии и биохимии человека и животных ННГУ.

По материалам диссертации опубликовано 13 работ, в числе которых 1 монография и 1 учебно-методическое пособие; 6 статей опубликованы в изданиях, рекомендуемых ВАК.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 171 странице и состоит из введения, 2 глав обзора литературы, материалов и методов исследования, 5 глав собственных исследований, выводов, библиографического указателя, приложения. Список цитируемой литературы содержит 304 источ-

ника, из которых 185 на русском и 119 на иностранных языках. Диссертация иллюстрирована 37 таблицами и 17 рисунками.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

В работе использовались яды животных различных таксономических групп - пчелы медоносной (Apis mellifera L.), представителя насекомых (In-secta); скорпиона пестрого (Butus eupeus С. Koch), относящегося к классу паукообразных (Arachnida); жабы зеленой (Bufo viridis L.), представляющей бесхвостых земноводных (Amphibia); кобры среднеазиатской (Naja oxiana Eichw.), эфы песчаной (Echis carinatus Schneid), гюрзы среднеазиатской (Vipera lebetina L.), гадюки обыкновенной (Vipera berus L.), щитомордника восточного (Agkistrodon blomhoffi Boie), относящихся к классу рептилий (Reptilia).

В части экспериментов применяли гепарин (АО «Курган»), содержащий 5000 ME в 1 мл, а также в качестве классического блокатора гепарина прота-мин сульфат (1% раствор).

Исследования были проведены на 380 нелинейных белых крысах-самцах массой 180 - 210 г. Все животные до опыта содержались на общем рационе вивария. Исследуемые яды животных разводились в изотоническом растворе хлорида натрия и вводились животным внутрибрюшинно в объеме 0,5 мл. Контрольной группе животных вводили физиологический раствор в том же объеме. Через 10 минут животные помещались в термокамеру. Эксперименты проводились при стабилизированной температуре 50°С. Оценка по-стгипертермического состояния животных производилась через 1, 6 и 24 часа. В части опытов определяли ректальную температуру экспериментальных животных при помощи электротермометра ТПЭМ-1.

В качестве показателей морфологического состава крови были выбраны следующие: количество эритроцитов, ретикулоцитов, показатели гематокри-та, уровень гемоглобина, количество лейкоцитов и лейкоцитарная формула. Определение показателей крови осуществлялось общепринятыми методами (Крылов, Кац, Канторович, 1981). Размеры эритроцитов определялись на приготовленных сухих мазках крови, окрашенных по Романовскому-Гимза. Диаметр эритроцитов измеряли с помощью окуляр-микрометра. Исследование эритроцитов по форме проводились на тех же препаратах крови, с помощью окуляра Эрлиха.

Исследование влияния зоотоксинов и высокой внешней температуры на систему свертывания крови проводилось на анализаторе гемокоагуляции механическом АГКМ 1-01, тромбоэластографическим способом. Исследование проводилось на цитратной крови в микрообъеме (0,10±0,0025 мл). Кровь, взятая из хвостовой вены животных, исследовалась в динамике: до гипертермии, во время гипертермии и через 1, 6 и 24 часа после тепловой экспозиции.

Расшифровка ТЭГ производилась по общепринятым параметрам.

Уровень свободного гепарина в периферической крови определяли микрометодом Сирмаи (Балуда и др., 1980).

Определение активности аланинаминотрансферазы и аспартатами-нотрансферазы определяли общепринятыми методами (Комаров, Коров-кин, Меньшиков, 2001).

Статистическая обработка экспериментальных данных была выполнена с помощью программы «Биостат». Для сравнения нескольких групп использовали однофакторный дисперсионный анализ и критерий Стьюдента (Гланц, 1999).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Продолжительность жизни экспериментальных животных при действии зоотоксинов в условиях гипертермии и в постгипертермический период

Известно, что экстремальная температура для крыс и мышей начинается от 40°С и выше (Султанов, 1984). В наших экспериментах исследование действия температуры 50°С показало, что для животных, неакклиматизирован-ных к высоким температурам, она является неадекватной и ведет к стрессовым реакциям, влекущим за собой быструю гибель в результате избыточного поступления тепла в организм. В данных условиях белые лабораторные крысы в среднем живут 45минут (рис.1).

При введении исследуемых зоотоксинов наблюдался двухфазный характер изменения выживаемости животных: при малых дозах - увеличение времени жизни, при более высоких - уменьшение по сравнению с контролем. Также отмечались характерные поведенческие реакции, направленные на уменьшение поступления тепла в организм. При внутрибрюшинном введении пчелиного яда в дозе 1мг/кг на 30 минуте тепловой экспозиции наблюдалось повышение двигательной активности животных и усиление саливации; через 50 минут погибло первое животное, последнее - через 64 минуты. При дозе 8 мг/кг высокая двигательная активность была зафиксирована уже на 21 минуте.

В опытах с ядом кобры на первых минутах нагревания была отмечена первоначальная малоподвижность, вялость крыс, переходящая на 15 минуте к «сверхактивности» (интенсивные поиски выхода, активные перемещения из угла в угол, агрессивность). В целом, продолжительность жизни в опыте была ненамного выше контроля (рис. 1).

При внутрибрюшинном введении яда эфы происходило резкое повышение теплоустойчивости животных (дозы 1-10 мг/кг). Через 1 час после помещения в термокамеру крысы имели «взъерошенный» вид и перемещались по камере ползком, сбиваясь в кучки. Было заметно сильное покраснение ушных раковин и хвоста, что свидетельствовало об обильном кровоснабжении этих частей тела для увеличения теплоотдачи. Максимальная терморезистентность отмечена у крыс, получивших дозу 6 мг/кг, которые прожили при этом 159,0±9,2 мин (рис 1).

При исследовании действия яда щитомордника при острой тепловой экспозиции наблюдалось значительное увеличение продолжительности жиз-

ни крыс в термокамере по сравнению с другими зоотоксинами. Причем, максимальный эффект приходился на интервал доз от 2 до 10 мг/кг. Часть животных при оптимальных дозах яда (4-8 мг/кг) сохраняла жизнеспособность более 4-х часов в термокамере, что говорит о большой роли индивидуальных особенностей организма в приспособлении к высокой температуре (рис. 1).

280 260 240 220 200 180 160 140 120 100 80 60 40 20 0

Контроль 1

2 3 4 5 6 7 8

Рис. 1. Максимальная продолжительность жизни крыс при тепловой экспозиции (50°С) на фоне действия зоотоксинов

1 - яд кобры (1 мг/кг) 2 - яд эфы (6 мг/кг)

3 - яд щитомордника (4 мг/кг) 4 - яд гюрзы (4 мг/кг)

5 - яд гадюки (1 мг/кг) 6 - яд пчелы (2 мг/кг)

7 - яд скорпиона (1 мг/кг) 8 - яд жабы (2 мг/кг)

* - различия между контрольной и экспериментальными группами статистически значимы (р<0.05)

Известно, что адекватным показателем тепловой устойчивости животного является продолжительность сохранения «плато» при гипертермии (Леках, 1980). По-видимому, в данном случае часть крыс «сумела поддерживать» достаточно долгое время «плато» на одном и том же, допустимом с границами жизни, температурном уровне. Также наблюдалась общая тенденция увеличения саливации при возрастающих дозах яда щитомордника.

В следующей серии экспериментов нами была произведена оценка продолжительности жизни животных, подвергавшихся тепловой экспозиции (50°С) в течение 45мин на фоне введения зоотоксинов в дозах, обладающих наибольшим термопротекторным действием. Так, если в контрольной серии в течение 45 тепловой экспозиции погибали все животные (0% выживших), то действие высокой внешней температуры на фоне введения ядов животных сопровождалось выживанием большинства крыс (рис. 2).

контроль

Рис. 2. Количество выживших крыс (%) после тепловой экспозиции (50°С) в

течение 45 мин, при действии зоотоксинов: первый столбец - через 1 час, второй столбец - через 6 часов,

третий столбец - через 24 часа после тепловой экспозиции. 1 - яд кобры (1 мг/кг) 2 - яд эфы (6 мг/кг)

3 - яд щитомордника (4 мг/кг) 4 - яд гюрзы (4 мг/кг)

5 - яд гадюки (1 мг/кг) 6 - яд пчелы (2 мг/кг)

7 - яд скорпиона (1 мг/кг) 8 - яд жабы (2 мг/кг)

Штриховой линией отмечен уровень выживаемости при гипертермии.

Максимальная выживаемость в постгипертермический период регистрировалась при предварительном введении яда эфы (6 мг/кг) и яда щитоморд-

ника (4 мг/кг) в течение 24 часов после гипертермии (рис. 2). Эффект, видимо, связан с тем, что именно при введении этих ядов наблюдается максимальная продолжительность жизни в условиях гипертермии.

Снижение времени тепловой экспозиции до 30 мин показало, что через час в условиях нормотермии (Т= 20°С) в контрольной группе животных выживало 40% особей, а во всех экспериментальных группах отмечалась 100% выживаемость. Через 6 часов в контрольной группе все крысы погибали, а при введении зоотоксинов процент выживших особей не опускался ниже 80%.

Острое перегревание при внешней температуре 50°С сопровождается отчетливо выраженной гипертермией. Так, к 30 - 40 мин острого перегревания в контрольной группе животных, которым вводили физиологический раствор, ректальная температура повышалась до 43,7±0,3°С, после чего регистрировалась смерть животных (табл. 1). При предварительном введении зоотоксинов ректальная температура также увеличивалась, причём при инъекции яда щитомордника она увеличивалась до 44,3±0,4°С. Через 24 часа после тепловой экспозиции температура тела возвращалась к исходным показателям (интактные животные).

Таблица 1

Изменение ректальной температуры крыс при действии зоотоксинов в условиях острого перегревания (50°С) и в постгипертермический период

Исследованные Ректальная Время после тепловой экспозиции

токсины температура (час)

(°С) 1,0 6,0 24,0

Интактные животные 36,0±0,3 36,0±0,3 36,0±0,3 36,0±0,3

Контроль (Т= 50°С) 43,7±0,3* - - -

Кобра (1 мг/кг) 42,9±0,1* 42,1 ±0,1* 38,3±0,2 36,1±0,1

Эфа (бмг/кг) 44,1±0,1* 39,5±0,4* 36,9±0,2 36,0±0,2

Щитомордник (4мг/кг) 44,3±0,4* 38,7±0,2* 36,0±0,5 36,1±0,1

Гюрза (4мг/кг) 43,3±0,1* 40,2±04* 39,6±0,1* 36,9±0,6

Гадюка (1 мг/кг) 43,5±0,3* 40,8±0,5* 38,9±0,1* 36,7±0,7

Пчела (2мг/кг) 42,5±0,3* 39,2±0,3* 37,0±0,6 36,0±0,5

Скорпион (1 мг/кг) 43,1±0,1* 39,9±0,4* 36,8±0,3 36,1±0,1

Жаба (2мг/кг) 43,0±0,2* 38,9±0,3* 37,0±0,6 36,0±0,2

* различия между контрольными и экспериментальными группами

статистически значимы (р<0,05) Прочерк - все крысы погибли

Влияние гепарина на термопротекторные свойства зоотоксинов в условиях гипертермии и в постгипертермический период

В настоящее время хорошо установленным фактом является способность гепарина образовывать комплексы с широким спектром белков, пептидов, ферментов, катионных соединений, при этом могут меняться как его собст-

венные свойства, так и свойства веществ, вступающих с ним во взаимодействие (Кудряшов, 1975; Хомутов, 1987; Ляпина, 1987; Умарова и др., 1993; Кондашевская, Ляпина, 1998; Chen et al., 2006; Troy, 2006; Prakesh et al., 2007; Liang et al., 2008; Meneghelli et al., 2008).

На кафедре физиологии и биохимии человека и животных было установлено, что гепарин вступает во взаимодействие с широким спектром ядов животных, относящихся к разным таксономическим группам, и имеющим различные физиологические механизмы токсического действия (Хомутов, 19862008). Однако влияние гепарина на термопротекторное действие зоотоксинов в постгипертермический период не установлено, в связи с чем была поставлена серия экспериментов, в которой, в первую очередь, изучалось действие экзогенного и эндогенного гепарина на продолжительность жизни лабораторных крыс при температурной экспозиции 50°С.

В результате проведённых экспериментов было установлено, что гепарин и протамин сульфат, являющийся классическим блокатором эндогенного гепарина, не обладают термопротекторным действием и не влияют на выживаемость крыс в условиях гипертермии.

Гепарин в смеси с определённой концентрацией зоотоксинов снижает продолжительность жизни экспериментальных животных с одной стороны, а с другой стороны сопровождается полной гибелью экспериментальных животных в постгипертермическом периоде. Следует отметить, что гепарин не влияет на термопротекторные свойства яда щитомордника и жабьего яда (табл. 2).

При предварительном введении протамин сульфата наблюдается иная картина. В большинстве случаев протамин, нейтрализуя эндогенный гепарин, потенцирует термопротекторные свойства зоотоксинов, в связи с чем увеличивается продолжительность жизни крыс и увеличивается выживаемость в постгипертермическом периоде. Этот феномен отсутствует при введении яда щитомордника и жабьего яда (табл. 2).

Инверсия термопротекторных свойств зоотоксинов при совместном введении с гепарином, по-видимому, связана с тем, что гепарин взаимодействует с пчелиным ядом кобры, гюрзы, эфы с образованием не токсического комплексного соединения, а яд щитомордника и жабий яд не взаимодействуют с гепарином (Хомутов, 2008).

Изменение морфологического состава крови при действии зоотоксинов в условиях гипертермии и в постгипертермический период

Известно, что большинство животных ядов обладает способностью резко изменять состав и свойства крови (Артемов, Калинина, Михайлова, 1951). К стандартным показателям красной крови, широко применяемым в клинической практике, относятся: количество эритроцитов и ретикулоцитов, уровень гемоглобина и гематокрит. Кроме того, весьма ценную информацию можно извлечь при изучении размера и формы эритроцитов.

Таблица 2

Влияние гепарина на выживаемость белых крыс (%) после тепловой экспозиции (Т= 50°С) в течение 45 мин при действии зоотоксинов

Условия опыта Мах. продол, жизни(мин) (Т= 50°С) Время после тепловой экспозиции (час)

1 6 24

Физиол. р-р (контроль) 45±0,5 0,00 0,00 0,00

Пчелиный яд (2 мг/кг) 79±2,9* 90 90 80

Пчелиный яд + Гепарин (1:0,5) 32±1,4* 0,00 0,00 0,00

Протамин сульфат (Юмг/кг) —»Пчелиный яд (2мг/кг) Ю6±7,9* 100 100 90

Яд скорпиона (1 мг/кг) 69±4,9* 100 80 70

Яд скорпиона + Гепарин (1:0,5) 22±2,4* 0,00 0,00 0,00

Протамин сульфат (Юмг/кг) —»Яд скорпиона (1 мг/кг) 118±3,4* 100 80 60

Яд кобры (1 мг/кг) 61±1,4* 90 80 60

Яд кобры (1 мг/кг) + Гепарин (1:0,05) 18±2,4* 0,00 0,00 0,00

Протамин сульфат (Юмг/кг) —»Яд кобры (1 мг/кг) 98±1,4* 100 70 50

Яд эфы (6 мг/кг) 159±9,2* 100 100 100

Яд эфы (6 мг/кг) + Гепарин (1:0,05) Ю2±9,6* 100 90 70

Протамин сульфат (Юмг/кг) —»Яд эфы (6 мг/кг) 167±11,3* 100 100 100

Яд щитомордника (4 мг/кг) 226±30,0* 100 100 100

Яд щитомордника (4 мг/кг) + Гепарин (1:0,05) 231±34,0* 100 100 100

Протамин сульфат (Юмг/кг) —»Яд щитомордника (4 мг/кг) 202±12,7* 100 100 100

Яд жабы (2 мг/кг) 78±3,2* 100 90 80

Яд жабы (2 мг/кг) + Гепарин (1:0,05) 86±5,2* 100 100 70

Протамин сульфат (Юмг/кг) —»Яд жабы (4 мг/кг) 73±3,2* 100 100 100

(Т = 20°С) экспозиция при температуре 20°С

30 мин

Рис. 3. Изменение количества эритроцитов при действии зоотоксинов в условиях гипертермии и в постгипертермический период. 1 - контроль (физиол. р-р) 2 - яд пчелы (2 мг/кг)

3 - яд эфы (6 мг/кг) 4 - яд гюрзы (4 мг/кг)

5 - яд кобры (1 мг/кг) 6 - яд щитомордника (4 мг/кг)

* - различия между исходным значением в контроле и экспериментальными группами статистически значимы (р<0.05)

Внутрибрюшинное введение пчелиного яда, яда кобры и щитомордника в условиях нормотермии (Т=20°С) сопровождается значительным увеличением количества эритроцитов. При инъекции яда эфы гюрзы в тех же условиях опыта отмечается незначительный эритроцитоз (рис. 3).

При совместном применении зоотоксинов и высокой внешней температуры количество эритроцитов в основном увеличивается. Максимальная величина эритроцитоза отмечалась при сочетанном действии яда щитомордника в дозе 4 мг/кг и температурного воздействия (Т=50°С). В этом случае количество эритроцитов увеличивалось с 7,8±0,23 в контроле до 12,8±0,17х1012/л (рис. 3).

В постгипертермический период, через 24 часа после тепловой экспозиции, количество эритроцитов в периферической крови достоверно не отличалось от контрольных величин, а через 6 часов значительный эритроцитоз регистрировался в опытах с введением яда кобры и яда щитомордника (рис. 3).

При изучении изменения количества ретикулоцитов в условиях острого перегревания был обнаружен ярко выраженный ретикулоцитоз. Количество ретикулоцитов увеличивалось с 41,0±3,22%о в контроле до 65-82%о при температурной экспозиции 50°С (рис. 4).

120

Исходно (Т = 20°С)

Т = 50 С, экспозиция 30 мин

1ч. 6 ч. 24 ч.

при температуре 20°С

Рис. 4. Изменение количества ретикулоцитов при действии зоотоксинов в условиях гипертермии и в постгипертермический период 1 - контроль (физиол. р-р) 2 - яд пчелы (2 мг/кг)

3 - яд эфы (6 мг/кг) 4 - яд гюрзы (4 мг/кг)

5 - яд кобры (1 мг/кг) 6 - яд щитомордника (4 мг/кг)

* - различия между исходным значением в контроле и экспериментальными группами статистически значимы (р<0.05)

Введение пчелиного яда и ядов змей при температуре 20°С сопровождалось увеличением количества ретикулоцитов в циркулирующей крови, причем максимальный ретикулоцитоз отмечался при инъекции яда щитомордника в дозе 4 мг/кг (рис. 4).

При сочетанном действии животных ядов и температурной экспозиции максимальный ретикулоцитоз отмечался также при предварительном введении яда щитомордника. В этом случае количество ретикулоцитов более чем в три раза превышало контрольные величины (рис. 4).

Таким образом, совместное применение животных ядов и высокой внешней температуры сопровождается ярко выраженным эритро- и ретикулоцито-зом.

По мнению Н.М.Артемова и др. (1951), эритроцитоз может быть следствием или поступления в кровоток новой порции эритроцитов, ранее не принимавшей участия в циркуляции, или выхода из кровообращения жидкой части крови, или обеих причин вместе.

В постгипертермический период, через 24 часа после тепловой экспозиции, в большинстве экспериментов уровень ретикулоцитов снижается до исходных величин, однако при применении пчелиного яда и яда щитомордника ретикулоцитоз сохраняется в течение суток (рис. 4).

Параллельно с уменьшением количества эритроцитов при действии высоких температур, снижается уровень гемоглобина. При введении зоотокси-нов в исследованных дозах уровень гемоглобина во всех случаях повышается, причем, следует отметить, что максимальных величин он достигает при инъекции яда щитомордника в дозе 4 мг/кг.

Еще большее увеличение уровня гемоглобина в циркулирующей крови наблюдается при сочетанном действии животных ядов и высокой температуры. Максимальное количество гемоглобина отмечено при остром перегревании (Т=50°С) на фоне предварительного введения тестовой дозы яда щитомордника. Так, при введении яда щитомордника в дозе 4 мг/кг в условиях нормотермии уровень гемоглобина повышается с 165±1,1 до 200±1,4 г/л, а при совместном действии высокой температуры (50°С) - до 215±0,8 г/л.

В постгипертермический период уровень гемоглобина в периферической крови снижается и через 24 часа после тепловой экспозиции возвращается к контрольным величинам.

При тепловой экспозиции экспериментальных животных показатели ге-матокрита снижаются, что связано со значительным уменьшением количества эритроцитов и поступлением тканевой жидкости в кровеносное русло. Разжижение крови является, видимо, результатом реакции организма на сильное внешнее раздражение и направлено на обеспечение процессов терморегуляции. Возможно, этим предотвращается нарушение перераспределения воды и солей между кровью и тканями, а сам процесс выполняет приспособительно-компенсаторную функцию. Внутрибрюшинное введение животных ядов сопровождается увеличением показателей гематокрита, причем наиболее ярко при инъекции ядов кобры и щитомордника.

При совместном действии пчелиного яда и высокой температуры показатели гематокрита достигают максимальных величин в начальный период острого перегревания при температуре 50°С. В условиях гипертермии на фоне введения ядов эфы, гюрзы и кобры показатели гематокрита изменяются незначительно, однако в некоторых случаях они достоверно отличаются от контрольных величин. Максимальные изменения наблюдаются при сочетании двух экстремальных раздражителей - яда щитомордника и внешней температуры 50°С.

В клинической практике для оценки состояния белой крови пользуются лейкоцитарной формулой, включающей следующие показатели: общее количество лейкоцитов, процентное содержание эозинофилов, базофилов, ней-трофилов палочкоядерных и сегментоядерных, лимфоцитов и моноцитов.

Наши исследования показали, что при действии зоотоксинов в условиях гипертермии наименее вариабельными являются показатели эозинофилов, ба-зофилов, палочкоядерных нейтрофилов и моноцитов, в связи с чем их небольшие изменения не учитывались в дальнейшей работе.

При сочетанном применении большинства исследованных зоотоксинов и высокой внешней температуры количество лейкоцитов уменьшалось, и только при введении пчелиного яда уровень лейкоцитов оставался на уровне контрольных значений (рис. 5).

(Т=20°С) экспозиция при температуре 20°С

30 мин

Рис. 5. Изменение количества лейкоцитов при действии зоотоксинов в условиях гипертермии и в постгипертермический период 1 - контроль (физиол. р-р) 2 - яд пчелы (2 мг/кг)

3 - яд эфы (6 мг/кг) 4 - яд гюрзы (4 мг/кг)

5 - яд кобры (1 мг/кг) 6 - яд щитомордника (4 мг/кг)

* - различия между исходным значением в контроле и экспериментальными группами статистически значимы (р<0.05)

В постгипертермический период наблюдалась тенденция к восстановлению количества лейкоцитов в периферической крови и только на фоне введения яда щитомордника через сутки количество лейкоцитов было достоверно ниже контрольных величин (рис. 5).

Количество сегментоядерных нейтрофилов при введении исследованных зоотоксинов в условиях нормотермии значительно увеличивается. Этот эффект особенно ярко выражен при инъекции пчелиного яда в дозе 2 мг/кг.

Количество нейтрофилов возрастает с 6,0±0,91% в контроле до 20,0±1,89% при введении апитоксина (табл. 3).

Таблица 3

Изменение количества сегментоядерный нейтрофилов при действии зоотоксинов в условиях гипертермии и в постгипертермический период

Условия опыта Стат. показ. Количество сегментоядерных нейтрофилов(%)

Т=20°С Т=50°С Т=20°С

10 мин 20 мин 30 мин 1,0 ч. 6,0 ч. 24,0 ч.

Контроль (физ. р-р) М 6,0 16,0 19,0 23,1 - - -

ГП 0,91 1,16 1,02 1,69 - - -

Яд пчелы (2 мг/кг) М 20,0* 9,1* 5,0* 18,9 22,3* 15,1* 10,4*

ш 1,89 1,50 0,63 3,36 2,52 1,97 1,04

Яд эфы (3 мг/кг) М 14,2* 7,0* 30,1* 20,8 24,5* 18,8* 12,3*

ш 1,82 0,97 1,95 3,75 3,21 2,75 2,81

Яд гюрзы (3 мг/кг) М 12,3* 21,1* 19,0 23,2 22,8* 14,4* 9,6*

ш 0,89 2,73 1,65 4,86 2,56 1,87 1,23

Яд кобры (1 мг/кг) М 21,0* 21,4* 23,2* 18,7* 20,0* 12,3* 8,2

т 1,8 1,3 1,6 1,2 2,80 1,64 1,83

Яд щитомордника (4 мг/кг) М 22,3* 23,5* 38,9* 34,0* 30,1* 21,2* 17,3*

т 1,5 1,7 3,2 3,8 4,82 3,96 2,45

Р - продолжительность жизни

* Различия между контрольными и экспериментальными группами статистически значимы (р<0,05)

Нейтрофилоцитоз наблюдается и при высокой внешней температуре. В этом случае, применение тепловой экспозиции (50°С) сопровождается увеличением количества сегментоядерных нейтрофилов в 3-4 раза (табл. 3).

При сочетанном действии высокой температуры пчелиного и змеиных ядов в исследуемых дозах количество сегментоядерных нейтрофилов изменяется разнонаправленно и при различных температурно-временных параметрах колеблется в пределах 7,0-30,0% (табл. 3).

В постгипертермическом периоде наблюдалось постепенное снижение сегментоядерных нейтрофилов, однако и через сутки в большинстве случаев их количество оставалось выше контрольных величин, зарегистрированных у животных, не подвергавшихся действию высокой внешней температуры (табл. 3).

Количество лимфоцитов в пробе крови всех групп экспериментальных животных изменялось однонаправленно. Введение животных ядов сопровождалось достоверным снижением количества лимфоцитов на 8-15% (табл.26).

Применение высокой температуры без предварительной инъекции зоотокси-нов снижало уровень лимфоцитов на 12-18%.

При оценке лимфоцитарного статуса в постгипертермический период отмечалась тенденция к повышению количества лимфоцитов и через 24 часа после тепловой экспозиции во всех случаях, кроме экспериментов с ядом щитомордника, количество лимфоцитов достоверно не отличалось от контрольных величин.

Изменение показателей свёртывания крови при действии зоотоксинов в условиях гипертермии и в постгипертермический период

Выбор зоотоксинов для проведения исследований по изучению тромбо-эластографических показателей в условиях гипертермии и в постгипертермический период был обусловлен тем, что пчелиный яд, является антикоагулянтом, яд щитомордника - коагулянтом, а жабий яд - не влияет на процесс свёртывания крови.

В контрольных экспериментах при внутрибрюшинном введении физиологического раствора в условиях гипертермии общее время свёртывания крови снижается с 14,6±0,7 мин до 12,2±1,0 мин, однако эти различия недостоверны. В постгипертермический период наблюдается тенденция восстановления параметров общего времени свёртывания крови (рис. 6).

Введение пчелиного яда в дозе 2 мг/кг в условиях нормотермии (20°С) увеличивает время свёртывания крови с 14,6±0,7 мин в контроле до 37,2±2,9 мин. В условиях высокой внешней температуры (50°С) показатель общего времени свёртывания крови снижается относительно нормотермии до 18,7±2,1 мин, но остаётся повышенным относительно контрольных величин. В постгипертермический период наблюдается тенденция к нормализации гемостаза, а через 24 часа после тепловой экспозиции в течение 25 мин время свёртывания крови не отличается достоверно от контрольных величин (рис. 6).

Иная картина наблюдается при введении яда щитомордника в дозе 4 мг/кг. В условиях нормотермии инъекция яда сопровождается снижением общего времени свёртывания крови с 14,6±0,7 мин в контроле до 10,5±0,9 мин. При тепловой экспозиции происходит дальнейшее снижение показателя общего времени свёртывания крови до 8,5±1,0 мин. В течение последующих суток время свёртывания крови возвращается к норме (рис. 6).

Введение жабьего яда в дозе 2 мг/кг сопровождается изменениями, характерными для контрольной серии экспериментов (рис. 6).

Пусковым механизмом свёртывания крови является образование тромбо-пластина, которое оценивается временем реакции и характеризует первую невидимую фазу свёртывания крови.

Введение пчелиного яда в дозе 2 мг/кг в условиях нормотермии сопровождается увеличением времени реакции с 2,3±0,1 мин в контроле до 18,2±3,5 мин. При температурной экспозиции в течение 25 мин показатель времени реакции снижается до 5,0±0,6 мин, оставаясь, тем не менее, выше контрольных величин. Через 6 часов после тепловой экспозиции показатель времени

реакции вновь увеличивается до 11,8±2,7 мин, а через 24 часа он возвращается к исходным величинам.

Исходно Т=50°С 1ч. 6 ч. 24 ч.

(Т=20°С) После гипертермии

Рис. 6. Изменение показателей общего времени свертывания крови Т (мин) в условиях гипертермии и в постгипертермический период

1 - контроль (физиол. р-р) 2 - пчелиный яд (2 мг/кг)

3 - яд щитомордника (4 мг/кг) 4 - жабий яд (2 мг/кг)

* - различия между контрольными и экспериментальными группами статистически значимы (р<0,05)

В условиях нормотермии яд щитомордника в дозе 4 мг/кг достоверно снижает показатель времени реакции, что показывает увеличение скорости образования тромбопластина. В условиях гипертермии контрольный показатель и показатель времени реакции практически соответствуют друг другу. Через 6 часов после тепловой экспозиции показатель времени реакции достоверно увеличивается, достигая 4,3±0,9 мин. Через 24 часа этот показатель не отличается от контрольных величин.

Кривая изменений показателя времени реакции при введении жабьего яда как в условиях гипертермии, так и в постгипертермический период практически совпадает с изменениями, происходящими в контрольной серии экспериментов.

О начале формирования сгустка можно судить по величине «К». Изменение этого параметра зависит от концентрации тромбина и фибриногена. В отрезок времени «К», образовавшийся тромбин переводит фибриноген в фибрин, поэтому параметр «К» ещё называют тромбоэластографической константой тромбина. Таким образом, увеличение времени формирования сгустка говорит о гипокоагуляции.

При введении пчелиного яда в дозе 2 мг/кг в условиях нормотермии величина «К» увеличивается с 1,3±0,4 мин в контроле до 2,4±0,1 мин. В условиях высокой внешней температуры происходит снижение времени формирования сгустка, как в контрольной серии, так и в условиях эксперимента. В течение 24 ч параметры «К» возвращаются к исходным величинам.

Введение яда щитомордника при нормотермии более чем в два раза снижает показатели времени формирования сгустка, а инъекция жабьего яда сопровождается при всех условиях эксперимента стабильными показателями «К», достоверно не отличающимися от контрольных величин.

Одним из показателей свёртывания крови является константа специфического свёртывания крови «t», которая соответствует периоду от конца видимого свёртывания крови до начала ретракции сгустка. Исходя из этого, чем короче «t», тем быстрее происходит образование сгустка, удлинение «t» свидетельствует о наклонности к гипокоагуляции.

В условиях нормотермии при введении пчелиного яда константа «t» достоверно увеличивается, при введении яда щитомордника - достоверно снижается, а при инъекции жабьего яда - остаётся в пределах вариации контрольных величин. При тепловой экспозиции показатели «t» снижаются относительно нормотермии, но в посгипертермическом периоде постепенно возвращаются к исходным величинам.

Величина «Am», равная максимальной амплитуде, характеризующая физические качества сгустка, соответствует III фазе свертывания крови.

В условиях нормотермии максимальная амплитуда ТЭГ регистрировалась при введении яда щитомордника в дозе 4 мг/кг (21,0±1,5 мм), при введении пчелиного яда она снижалась относительно контроля с 17,0±1,3 мм до 13,0±0,7 мм. Инъекция яда жабы в дозе 2 мг/кг достоверно не изменяла величины максимальной амплитуды относительно контрольных значений.

В течение суток после тепловой экспозиции во всех экспериментах, кроме серии с введением пчелиного яда, величина максимальной амплитуды ТЭГ достоверно не отличалась от исходных величин.

Исходя из величины максимальной амплитуды, расчётным путём можно вычислить эластичность кровяного сгустка (Е), который отражает качество сгустка и зависит от количества тромбоцитов.

Эластичность кровяного сгустка в наших экспериментах изменялась в зависимости от температуры, вида яда и совместного их применения. Так в условиях нормотермии введение пчелиного яда сопровождалось снижением эластичности сгустка до 14,9±1,7 у.е. относительно контроля (20,5±1,9 у.е). Инъекция яда щитомордника сопровождалась увеличением показателя эла-

стичности сгустка до 26,6±1,3 у.е., а жабий яд не изменял этого параметра свёртывания крови.

При тепловой экспозиции введение пчелиного яда сопровождалось снижением эластичности сгустка, а при введении яда щитомордника показатель «Е» увеличивался до 30,5±2,5 у.е. В течение постгипертермического периода показатель эластичности при введении яда щитомордника довольно быстро возвращался к исходным величинам, чего нельзя сказать о серии с применением пчелиного яда, в которой даже через 24 часа величина показателя соответствовала 14,0±1,8 у.е.

Одним из активных участников гемостаза является гепарин, который, обладая высокой реактивностью, тормозит свёртывание крови на всех стадиях свёртывания крови. В связи с этим были поставлены эксперименты, связанные с определением времени свободного гепарина в периферической крови при действие ряда зоотоксинов в условиях высокой внешней температуры.

Так, было показано, что пчелиный яд на всех этапах эксперимента вызывает повышение уровня свободного гепарина (табл. 4), что хорошо согласуется с данными о гипокоагуляционном действии пчелиного яда, как при нормо-термии, так и гипертермии и в постгипертермическом периоде.

Таблица 4

Изменение уровня свободного гепарина в условиях гипертермии и в постгипертермический период (%)

Условия Темпера- Темпера- Время

эксперимента тура 20°С тура 50°С после гипертермии, ч

1,0 6,0 24,0

Контроль 100±5,0 86±3,2* 89±2,8* 94±4,7 98±2,9

(физ. р-р)

Пчелиный яд 685±22,2* 459±38,6* 395±18,9* 245±12,5* 184±22,1*

(2 мг/кг)

Яд 83±10,0* 74±7,5* 92±12,4 158±14,2* 110±12,3

щитомордника (4 мг/кг)

Жабий яд 108±7,4 96±6,4 98±7,5 106±10,1 104±9,6

(2 мг/кг)

Яд щитомордника в условиях нормотермии достоверно снижает уровень гепарина. Это явление усугубляется при совместном действии яда и высокой внешней температуре. Однако, следует заметить, что через 6 часов после тепловой экспозиции уровень гепарина резко возрастет и соответствует 158±14,2 с. Данное явление, по-видимому, связано с двухфазным действием яда щитомордника на гемостаз (Орлов, Гелашвили, 1985).

Введение жабьего яда практически не влияет на уровень свободного гепарина, что также соответствует предыдущим экспериментам, в которых яд жабы не влиял ни на одну из стадий свёртывания крови.

Изменение активности аминотрансфераз при действии зоотоксинов в условиях гипертермии и в постгипертермический период

Большинство зоотоксинов, в том числе пчелиный яд и яд щитомордника, обладают кардиотропным и гепатотропным действием, в связи с чем был поставлен ряд экспериментов с оценкой изменений AJIT и ACT при действии указанных ядов в условиях гипертермии и в постгипертермический период.

При внутрибрюшинном введении физиологического раствора в объёме 1 мл в условиях нормотермии показатели АЛТ и ACT в течение 24 часов практически не меняются, оставаясь на уровне 0,078-0,085 и 0,116-0Д48 мкмоль ПВК/ч-мл соответственно.

При введении пчелиного яда и яда щитомордника в условиях нормотермии активность АЛТ и ACT повышается. При совместном применении ядов и высокой внешней температуры показатели АЛТ не отличаются от контрольных величин, показатели ACT в постгипертермическом периоде при введении пчелиного яда превышают показатели контрольной группы, а при введении яда щитомордника не отличаются от контрольных величин.

Выводы

1. Установлено, что в постгипертермическом периоде после 45-минутной тепловой экспозиции (50°С) в контрольных экспериментах (физиологический раствор) в течение суток погибают 100% экспериментальных животных, а при введении зоотоксинов выживают от 40% до 100% крыс в зависимости от таксономической принадлежности животных ядов.

2. Гепарин и протамин сульфат модифицируют процесс выживания крыс в постгипертермическом периоде. Гепарин, при определённых дозах, характерных для каждого яда, снижает выживаемость крыс в постгипертермический период, а протамин сульфат увеличивает выживаемость. Гепарин и протамин сульфат не влияют на термопротекторные свойства яда щитомордника и жабьего яда.

3. При введении исследованных зоотоксинов в условиях гипертермии количество эритроцитов и ретикулоцитов, уровень гемоглобина и гематокрит значительно увеличиваются. При воздействии высокой внешней температуры количество эритроцитов в пробе крови снижалось, однако количество ретикулоцитов повышалось, уровень гемоглобина и показатели гематокрита снижались. В течение 24 часов после тепловой экспозиции все показатели возвращались к норме.

4. При сочетанном применении исследованных зоотоксинов и высокой внешней температуры количество лейкоцитов уменьшалось. В постгипертермический период наблюдалась тенденция к восстановлению количества лейкоцитов в периферической крови. Количество сегментоядерных нейтрофилов при введении исследованных зоотоксинов в условиях нормотермии значительно увеличивается. При высокой внешней температуре регистрируется

нейтрофилоцитоз. В постгипертермическом периоде наблюдалось постепенное снижение сегментоядерных нейтрофилов.

В условиях гипертермии на фоне действия зоотоксинов количество лимфоцитов в периферической крови относительно контроля снижалось. В постгипертермический период отмечалась тенденция к повышению количества лимфоцитов.

5. В условиях гипертермии общее время свёртывания крови снижается, время начала формирования сгустка снижается, константа специфического свёртывания крови и величина максимальной амплитуды ТЭГ не изменяются. Введение пчелиного яда (2 мг/кг) сопровождается при гипертермии снижением общего времени свёртывания крови, снижением времени реакции, снижением времени формирования сгустка, снижением константы специфического свёртывания крови, повышением максимальной амплитуды ТЭГ, увеличением эластичности кровяного сгустка. При введении яда щитомордника используемые показатели ТЭГ имели противоположную тенденцию. В постгипертермический период все показатели ТЭГ возвращаются к норме. Жабий яд не оказывал влияния на свёртывание крови.

6. Уровень свободного гепарина в периферической крови в условиях гипертермии достоверно снижается, с последующим восстановлением в течение суток. Введение пчелиного яда в условиях нормотермии (20°С) сопровождается повышением уровня свободного гепарина в 6 - 7 раз, а в условиях гипертермии снижается до 459±38,6%, оставаясь выше контрольных величин (86±3,2%). Введения яда щитомордника при нормотермии достоверно снижает уровень гепарина, а при гипертермии этот процесс углубляется. Жабий яд не влиял на уровень свободного гепарина в периферической крови. В постгипертермическом периоде в течение суток показатели уровня гепарина возвращались к норме.

7. При введении пчелиного яда и яда щитомордника в условиях нормотермии активность AJ1T и ACT повышается. При совместном применении ядов и высокой внешней температуры показатели АЛТ не отличаются от контрольных величин, показатели ACT в постгипертермическом периоде при введении пчелиного яда превышают показатели контрольной группы, а при введении яда щитомордника не отличаются от контрольных величин.

Список работ O.B. Лушниковой, опубликованных по теме диссертации

Статьи в изданиях, рекомендованных ВАК

1. Хомутов А.Е., Гиноян Р.В., Лушникова О.В. Динамика изменения показателей тромбоэластограммы при введении гепарина // Вестник Нижегородского госуниверситета им. Н.И. Лобачевского, 2008. № 5. - С. 81-85.

2. Ягин В.В., Гиноян Р.В., Хомутов А.Е., Лушникова О.В. Оценка эрит-роцитарного и ретикулоцитарного статуса крови крыс при действии гипертермии на фоне введения ядов гюрзы и эфы // Вестник Нижегородского госуниверситета им. Н.И. Лобачевского, 2008. № 5. - С. 77-80.

3. Гиноян Р.В., Хомутов А.Е., Лушникова О.В. Изменение морфологического состава крови крыс при введении гепарина // Вестник Нижегородского госуниверситета им. Н.И. Лобачевского, 2008. № 6. - С. 100-103.

4. Пурсанов К.А., Хомутов А.Е., Ягин В.В., Лушникова О.В. Состояние гемостаза при введении гепарина и пчелиного яда в условиях нормо- и гипертермии // Нижегородский медицинский журнал, 2008. № 6. - С. 56-60.

5. Пурсанов К.А., Хомутов А.Е., Лушникова О.В. Влияние сочетанного применения зоотоксинов и гипертермии на форму и размер эритроцитов // Нижегородский медицинский журнал, 2008. № 6. - С. 72-75.

6. Хомутов А.Е., Гиноян Р.В., Лушникова О.В. Постгипертермические изменения ректальной температуры и выживаемости крыс на фоне действия зоотоксинов // Вестник Нижегородского госуниверситета им. Н.И. Лобачевского, 2009. № 5. - С.109-112.

Статьи в региональных изданиях и материалы конференций

7. Гиноян Р.В., Хомутов А.Е., Лушникова О.В. Влияние сочетанного применения пчелиного яда и высокой внешней температуры на лимфоцитар-ный статус экспериментальных животных // Инновации в пчеловодстве. Материалы международной конференции. Сочи, 11-14 октября 2008. Рыбное, 2009. С. 269-274.

8. Хомутов А.Е., Ягин В.В., Гиноян Р.В., Лушникова О.В. Влияние пчелиного яда и гепарина на скорость свертывания крови в условиях нормо- и гипертермии // Инновации в пчеловодстве. Материалы международной конференции. Сочи, 11-14 октября 2008. Рыбное, 2009. С. 275-278.

9. Пурсанов К.А., Хомутов А.Е., Лушникова О.В. Изменение показателей красной крови при действии зоотоксинов в условиях гипертермии и в по-стгипертермический период // Медицинский альманах, 2009. № 1(6). С. 124126.

10. Лушникова О.В., Гиноян Р.В., Хомутов А.Е. Изменение показателей красной крови при действии пчелиного яда в условиях гипертермии и в по-стгипертермический период // Материалы XIV Всероссийской конференции «Успехи апитерапии». Рыбное, 28-30 мая 2009. С. 33-36.

11. Пурсанов К.А., Хомутов А.Е., Ягин В.В., Лушникова О.В. Влияние гепарина на термопротекторные свойства зоотоксинов в условиях гипертермии и в постгипертермический период // Медицинский альманах, 2009. № 2(7). С. 210-212.

12. Гиноян Р.В., Хомутов А.Е., Лушникова О.В. Продукты пчеловодства и апитерапия. Монография - Н. Новгород: Изд-во ННГУ, 2008. - 648 с.

13. Гиноян Р.В., Хомутов А.Е., Крылова Е.В., Лушникова О.В. Сердечно-сосудистая система. Кровь. Учебно-методическое пособие. Нижний Новгород: ННГУ, 2009,- 168с.

Подписано в печать 10.09.2010. Формат 60x84 1/16. Печать офсетная. Бумага офсетная. Усл. печ. л. 1. Тир. 100. Зак. 554.

Отпечатано в центре цифровой печати Нижегородского госуниверситета им. Н.И. Лобачевского. 603000, Н. Новгород, ул. Б. Покровская, 37.

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Лушникова, Ольга Викторовна

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

ГЛАВА 1. МЕХАНИЗМЫ ТЕРМОРЕГУЛЯЦИИ В'УСЛОВИЯХ ОСТРОГО

ПЕРЕГРЕВАНИЯ.

ГЛАВА 2. ХИМИЧЕСКИЙ'СОСТАВ И ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЕ ДЕЙСТВИЕ ЗООТОКСИНОВ.

2.1. Яды членистоногих.'.

2.1.1. Яд пчелы

2.1.2. Яд скорпиона

2.2.Яды змей

2.2.1.Яд кобры.

2.2.2'. Яд щитомордника.

2.2.3. Яд гюрзы.

2.2.4. Яд эфы.

2.2.5. Физиологическое действие змеиных ядов.

2.3. Жабий яд.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

ГЛАВА 3. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

3.1. Тромбоэластография<.

3.2. Определение свободного гепарина крови по Сирмаи.

3.3. Определение активности аланинаминотрансферазы.

3.4. Определение активности аспартатаминотрансферазы.

РЕЗУЛЬТАТЫ ОПЫТОВ.

ГЛАВА 4. ПРОДОЛЖИТЕЛЬНОСТЬ ЖИЗНИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ ПРИ ДЕЙСТВИИ ЗООТОКСИНОВ В УСЛОВИЯХ ГИПЕРТЕРМИИ И В ПОСТГИПЕРТЕРМИЧЕСКИЙ ПЕРИОД.

ГЛАВА 5. ВЛИЯНИЕ ГЕПАРИНА НА ТЕРМОПРОТЕКТОРНЫЕ СВОЙСТВА ЗООТОКСИНОВ В УСЛОВИЯХ ГИПЕРТЕРМИИ И В ПОСТГИПЕРТЕРМИЧЕСКИЙ ПЕРИОД

5.1. Пчелиный яд.

5.2. Яд скорпиона.

5.3. Яд кобры.

5.4. Яд гюрзы.

5.5. Яд гадюки

5.6. Яд эфы.

5.7. Яд щитомордника.

5.8. Яд жабы.

ГЛАВА 6. ИЗМЕНЕНИЕ МОРФОЛОГИЧЕСКОГО СОСТАВА КРОВИ ПРИ ДЕЙСТВИИ ЗООТОКСИНОВ В УСЛОВИЯХ ГИПЕРТЕРМИИ

И В ПОСТГИПЕРТЕРМИЧЕСКИЙ ПЕРИОД.

6.1 .Показатели красной крови.:.

6.1.1. Количество эритроцитов.

6.1.2.Количество ретикулоцитов.

6.1.3. Уровень гемоглобина.

6.1.4. Показатели гематокрита.

6.1.5. Изменения размера и формы эритроцитов.

6.2. Показатели белой крови.

6.2.1. Общее количество лейкоцитов.

6.2.2. Количество сегментоядерных нейтрофилов.

6.2.3. Количество лимфоцитов.

ГЛАВА 7. ИЗМЕНЕНИЕ ПОКАЗАТЕЛЕЙ СВЁРТЫВАНИЯ КРОВИ ПРИ ДЕЙСТВИИ ЗООТОКСИНОВ В УСЛОВИЯХ ГИПЕРТЕРМИИ И В ПО

СТГИПЕРТЕРМИЧЕСКИЙ ПЕРИОД.

ГЛАВА 8. ИЗМЕНЕНИЕ АКТИВНОСТИ АМИНОТРАНСФЕРАЗ ПРИ ДЕЙСТВИИ ЗООТОКСИНОВ В УСЛОВИЯХ ГИПЕРТЕРМИИ И В ПО

СТГИПЕРТЕРМИЧЕСКИЙ ПЕРИОД.

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Изменение показателей крови и выживаемости крыс при действии зоотоксинов в условиях гипертермии и в постгипертермический период"

Актуальность исследования. Влияние высокой температуры окружающей среды на организм человека и животных охватывает широкий круг вопросов физиолого-биохимического характера. Одним из вопросов этого влияния является-тот факт, что кратковременное действие тепла на организм или эпизодические случаи перегревания не являются типичными в условиях жизнеобитания. Чаще всего организм сталкивается с более или менее продолжительным влиянием высокой внешней температуры, которое связано с климатогеографическими условиями или со спецификой процессов (Султанов и др., 2001; Portner, 2001, 2002; Sharrna, Hoopes, 2003).

На кафедре физиологии и биохимии человека и животных в течение последних 30 лет под руководством профессора А.Е. Хомутова ведутся активные исследования термопротекторных свойств зоотоксинов как на уровне целостного организма, так и отдельных функциональных систем. В экспериментах на лабораторных животных показано увеличение продолжительности жизни при предварительном введении зоотоксинов по сравнению с использованием только высокой внешней температуры. Установлен механизм защитно-компенсаторных реакций, связанных с острым перегреванием (Хомутов и др. 2005, 2006; Ягин, 2007, Данилова, 2008).

Однако практическое использование термопротекторных свойств .зоотоксинов невозможно при отсутствии сведений о реакциях организма, в частности, о состоянии системы крови в постгипертермический период.

Задачи исследования:

1. провести сравнительный анализ влияния зоотоксинов на выживаемость лабораторных крыс при температурной (50°) экспозиции 30 и 45 мин;

Научная^ новизна работы. Впервые проведён сравнительный! анализ действия зоотоксинов, относящихся к различным, по механизму действия, физиолого-биохимическим группам, на выживаемость крыс в постгипертер-мическом периоде. Показано, что при введении физиологического раствора и тепловой экспозиции (50°С) в течение 45 мин в постгипертермическом периоде все животные погибают. При предварительном введении зоотоксинов в течение суток выживают от 40% до 100% крыс, в зависимости от таксономической принадлежности яда.

Впервые произведена комплексная оценка тромбоэластографических показателей при действии зоотоксинов при гипертермии и в постгипертермический период. Установлено, что высокая внешняя температура сопровождается гиперкоагуляцией, а совметное действие гипертермии и пчелиного яда вызывает гипокоагуляцию, гипертермии и яда щитомордника - гиперкоагуляцию, гипертермии и жабьего яда - не вызывает изменений гемостаза. В постгипертермическом периоде все показатели втечение суток восстанавливаются до контрольных величин.

Впервые произведена оценка изменений аланин- и аспартатаминотран-фераз в периферической крови при действии пчелиного, яда и яда щитомордника в постгипертермический период. Показано, что при введении-пчелиного, яда и яда щитомордника в условиях нормотермии активность АЛТ и> ACT повышается. При совместном применении ядов и высокой внешней температуры показатели АЛТ не отличаются от контрольных величин, показатели ACT в постгипертермическом периоде при введении пчелиного яда превышают показатели контрольной группы, а при введении яда щитомордника не отличаются от контрольных величин.

Теоретическая и практическая значимость работы. Полученные данные о термопротекторном действии зоотоксинов значительно расширяют современное представление о неспецифической, регуляции гомеостаза, связанной с повышением выживаемости крыс в постгипертермическом периоде.

Результаты работы внедрены в учебный процесс кафедры физиологии и биохимии человека и животных Нижегородского государственного университета им. Н.И. Лобачевского. Опубликовано методическое пособие для* работы студентов по курсу «Анатомия человека», рассматривающее вопросы физиологии и биохимии крови.

Положения, выносимые на защиту:

1. Установлено, что все исследованные зоотоксины (пчелиный яд, яд скорпиона, жабий яд, яд кобры, гюрзы, эфы, гадюки) повышают выживаемость крыс в постгипертермическом периоде. Увеличение выживаемости лабораторных животных зависит от его видовой принадлежности » физиолого-биохимических свойств.

2. Исследованные:зоотоксины, в^условиях гипертермиигувеличивают количество эритроцитов;. ретикулоцитов^ уровень, гемоглобина: и гематокрит, количество сегментоядерных, нейтрофилов, уменьшают количество лимфоцитов. В постгипертермическом периоде, показатели красной и белой крови в течение суток возвращаются к исхзодным величинам.

3 . В условиях гипертермии общее время свёртывания крови на фоне:введения пчелиного яда снижается, снижается время реакции, время формирования сгустка крови, константа специфического свёртывания крови, повышается максимальная амплитуда ТЭГ и увеличивается эластичность кровяного сгустка. При введении яда щитомордника используемые показатели: ТЭГ имели прямо противоположную тенденцию; В постгипертермический.период все показатели ТЭГ возвращаются к норме. Жабий яд не оказывает влияния на свёртывание крови.

4. Уровень^ свободного гепарина в периферической: кровш в .условиях ги пертермии достоверно - снижается, с - последующим восстановлением в-, течение суток. Введение пчелиного яда в условиях нормотермии (20?С) сопровождается повышением уровня свободного гепарин, а в условиях гипертермии снижается. Введение яда щитомордника при нормотермии достоверно снижает уровень гепарина, а при гипертермии этот процесс углубляется. Жабий яд не влияет на уровень гепарина. В ; постгипертермическом периоде в течение суток показатели уровня гепарина возвращались к норме.

5. При введении пчелиного яда и яда щитомордника в условиях* нормотермии активность АЛ'Г и АСТ повышается; При: совместном применении ядов: и высокой внешней температуры, показатели АЛТ не: отличаются от контрольных величин, показатели АСТ в постгипертермическом периоде при введении пчелиного яда превышают показатели контрольной группы,, а при введении яда щитомордника не отличаются от контрольных величин.

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Лушникова, Ольга Викторовна

выводы

1. Установлено, что в постгипертермическом периоде после 45-минутной- тепловой экспозиции (50°С) в контрольных экспериментах (физиологический раствор) в течение суток погибают 100% экспериментальных животных, а при введении зоотоксинов выживают от 40% до.100% крыс в зависимости от таксономической принадлежности животных ядов.

2. Гепарин и протамин сульфат модифицируют процесс выживания крыс в постгипертермическом периоде. Гепарин, при определённых дозах, характерных для каждого яда, снижает выживаемость крыс в постгипертермиче-ский период, а протамин сульфат увеличивает выживаемость. Гепарин и протамин сульфат не влияют на термопротекторные свойства яда щитомордника и жабьего яда.

4. При сочетанном применении исследованных зоотоксинов и высокой внешней температуры количество лейкоцитов уменьшалось. В постгипер-термический период наблюдалась тенденция к восстановлению количества лейкоцитов в периферической крови. Количество сегментоядерных нейтро-филов при введении исследованных зоотоксинов в условиях нормотермии значительно увеличивается. При высокой внешней температуре регистрируется нейтрофилоцитоз. В постгипертермическом периоде наблюдалось постепенное снижение сегментоядерных нейтрофилов.

6. Уровень свободного гепарина в периферической крови в условиях гипертермии достоверно снижается, с последующим восстановлением в течение суток. Введение пчелиного яда в условиях нормотермии (20°С) сопровождается повышением уровня свободного гепарина в 6 - 7 раз, а в условиях гипертермии снижается до 459±38,6%, оставаясь выше контрольных величин (8б±3,2%). Введения яда щитомордника при нормотермии достоверно снижает уровень гепарина, а при гипертермии этот процесс углубляется. Жабий яд не влиял на уровень свободного гепарина в периферической крови. В по-стгипертермическом периоде в течение суток показатели уровня гепарина возвращались к норме.

7. При введении пчелиного яда и яда щитомордника в условиях нормотермии активность AJIT и ACT повышается. При совместном применении ядов и высокой внешней температуры показатели AJIT не отличаются от контрольных величин, показатели ACT в постгипертермическом периоде при введении пчелиного яда превышают показатели контрольной группы, а при введении яда щитомордника не отличаются от контрольных величин.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Лушникова, Ольга Викторовна, Нижний Новгород

1. Ажуцкий Д.Г., Ажуцкий Г.Ю:, Борисенко С.Н. Взаимодействие ме-литтина пчелиного яда с альбумином крови человека //Укр. биохим. журн. -1995.-Т. 67, №4.-С. 54-62.

2. Аминова E.H. и др. Динамика содержания 11-оке в. надпочечниках и плазме крови при воздействии малой дозы яда среднеазиатской кобры // Зоо-токсины в экспериментальной биологии и мед.:-сб. научн. статей. Горький: ННГУ. 1990. - С.36-42.

3. Андреева Л.Н., Горанчук В.В., Столярова H.A. Метаболические и физиологические особенности срочной реакции организма человека на перегревание // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1999. - № 1. -С. 19-23.

4. Андреева Л.Н., Горанчук В.В., Шустов Е.Б. Адаптация человека к гипертермии и изменения в лейкоцитах периферической крови // Российский физиологический журнал им. Сеченова. -2001. Т.87, № 9. - С. 1208-1216.

5. Антонов В.К., Дьяков В.Л., Зимберман К.Д. Сравнительное исследование кинетических свойств изоферментов Е2 и Ез фосфолипазы А2 из яда кобры // Биорг. химия. 1982. - №3. - С. 377-385.

6. Артемов Н.М. Пчелиный яд. М.: АН СССР, 1947. 180с.

7. Артемов Н.М. Предварительные итоги экспериментального изучения лечебных масляных препаратов пчелиного яда // Ученые зап. / Горьк. ун-т. -1962.-вып. 55.-С. 265-276.

8. Артемов Н.М. Пчелиный ад как продукт пчеловодства // XX Юбилейный Международный конгресс по пчеловодству. М. - 1965. - С.211-219.

9. Артемов Н.М. Физиологические основы действия на организм пчелиного яда: автореф. дисс. . . доктора биол. наук: 102 / Артемов Николай Михайлович. Горький, 1969. - 55с.

10. Артемов Н.М. Факторы распространения пчелиного яда // Ученые зап. /Горьк. ун-т. 1970.-вып. 101.-С. 181-186.

11. Артемов Н.М., Зевеке A.B. Физиологический анализ гипотензивного действия пчелиного яда //Яды пчел и змей в биол. и мед. — Горький. 1967. -вып. 82. - С. 25-47.

12. Артемов Н.М., Калинина Т.Е., Михайлова Я.В. Влияние пчелиного яда на морфологический состав крови млекопитающих // Ученые зап. / Горьк. ун-т.-1951.-С. 53-87.

13. Артемов Н.М., Тарасова Л.Н., Филимонова A.A. Стимуляция пчелиным ядом гипофизарно-надпочечной системы // Научн. докл. высшей школы биол. науки. -1961. № 1. - С. 86-89.

14. Ахмедов P.A. Терморегуляция человека и животных в условиях повышенной температуры. Ашхабад: Ылым, 1978. -210с.

15. Байдан Л.В., A.B. Жолос Апамин высокоспецифический и эффективный блокатор некоторых кальцийзависимых калиевых проводимостей // Нейрофизиология. - 1988. - №6. - С. 833-846.

16. Баркаган З.С., Полушкин Б.В. О'значении гемокоагуляции в механизме интоксикации змеиным ядом // Патол. физиол. и экспер. терапия. -1960.-Т. 4, №2.-С. 48-54.

17. Баркаган З.С. Геморрагические заболевания и синдромы. М.: Медицина, 1988. - 527с.

18. Батова P.C. Влияние некоторых факторов на анализ фосфолипазы А пчелиного яда / P.C. Батова, A.A. Лаздынын, Э.Ю. Петерсоне // Фармация,/ Рижский мед. ин-т. 1986. - С.74-78.

19. Батыров Б.Б. и др. Динамика транспорта ионов кальция в почках при воздействии яда среднеазиатской кобры // Зоотоксины в экспер. биол. и мед. Горький, 1990. - С. 42-46.

20. Бердыева А.Т. К патогенезу интоксикации ядами среднеазиатских змей гюрзы и кобры. Ашхабад: Ылым, 1972. -234с.

21. Бердыева А.Т. Змеиные яды, их токсическое действие и меры оказания помощи при укусах змей. Ашхабад: Ылым. 1974. - 185с.

22. Бердыева А.Т. Динамика газообмена у животных при интоксикации ядами гюрзы и кобры. // Мех. действ, зоотоксинов. Горький, 1980. - С. 116120.

23. Бердыева А.Т. Изменение некоторых свойств змеиных ядов в процессе их хранения // Мех. действ, зоотоксинов. Горький, 1982. - С. 103-105.

24. Бердыева А.Т.Патофизиологические аспекты токсического действия змеиных ядов. Ашхабад, 1990. - 164с.

25. Бердыева А.Т., Батыров Б.Б. Диурез и экскреция электролитов у белых крыс при интоксикации различными дозами яда кобры // Мех. действ, зоотоксинов. Горький, 1986. - С. 77-82.

26. Блинов И.О. и др. Влияние ацилирования остатков лизина нейроток-сина (Naja naja oxiana) на нейротоксическую активность // Биорг. химия. -1982.- №2. -С. 165-168.

27. Бондарев Д.П., Стуижас Н.М. Водно-электролитный обмен эритроцитов при остром перегревании организма // Актуальные вопросы экспер. и клин, фарм-ии. Смоленск, 1994. - С. 17-18.

28. Вальцева И.А. Патофизиологические особенности действия ядов змей, обитающих на территории СССР и некоторые вопросы экспериментальной терапии. М., 1963. - 176с.

29. Вальцева И.А. О роли неспецифических средств в борьбе с последствиями змеиных укусов. // Труды 1-го Москов. мед ин-та. 1965. - С. 22-25.

30. Вальцева И.А. Об изменении функций дыхательного центра при отравлении ядом среднеазиатской кобры //Реактивность. М., 1967. - С. 204211.

31. Вальцева И.А. Материалы к патогенезу и лечению поражений ядами змей, фауны СССР: автореф. дисс. . . . док. биол. наук: 03.00.14 / Вальцева Инга Алексеевна. М., 1972. - 48с.

32. Вальцева И.А. и др. Сравнительный анализ действия некоторых зоотоксинов на изолированное сердце //Биологические науки. 1991. - № 4. - С. 47-53.

33. Вальцева И.А., Миронова Т.А., Мясковский A.B. Исследование действия препаратов химотрипсина и трипсина при поражении ядом среднеазиатской кобры // Мех. действ, зоотоксинов. Горький, 1980. - С. 133-135.

34. Вальцева И.А., Павловский E.H., Талызин Ф.Ф.° О действии яда змей на сердце лягушки / И.А. Вальцева, // Докл. АНСССР. 1961. - 140, №4. - С. 956-958.

35. Варваштян В.М., и др. Изменение ферментативной активности крови под действием различных доз змеиного яда // Мех. действ, зоотоксинов. -Горький, 1984. С. 20-24.

36. Василенко C.B., Колесников H.H., Комисаренко C.B. Иммуно-химический анализ нейротоксина апамина и его производных // Докл. АНСССР. 1981. - 257, №1. - С. 245-247.

37. Васильченко А.Н. Злокачественная гипертермия и время наркоза и операции // Клин, хирургия. 1988. - №12. - С. 47-48.

38. Выборнова И.И., А.Н. Гольцов, С.Ю. Епифанов Механизмы воздействия температурных условий и антропогенных химических факторов на функционирование биологических мембран //Физиология человека. 1994. -Т.20, № 6. - С. 124-136.

39. Гальперин Ю.М., Штернберг Ю.М., Чоботова Т.И. и др. Влияние изменений газообмена на нейтрализацию гепарина протамин сульфатом // Материалы конференции по физиологии, биохимии, и фармакологии и клиническому применению гепарина. Москва, 1965. - С. 17-18.

40. Гелашвили Д.Б. Реакция физиологических систем в условиях воздействия на организм нейротоксинов пестрого скорпиона // Мех. действ, зоотоксинов. Горький, 1985. - С. 49-6

41. Гелашвили Д.Б. и др. Электроэнцефалографический и фармакологический анализ судорожной активности, вызываемой ядом пестрого скорпиона // Мех. действ, зоотоксинов. Горький, 1982. - С. 76-84.

42. Гелашвили Д.Б. и др. Сравнительный анализ действия яда скорпиона при внутрижелудочковом и внутрикаудатном введении крысам // Мех. действ, зоотоксинов. Горький, 1983. - С. 56-62.

43. Гелашвили Д.Б., Орлов Б.Н. Нейротоксины животных ядов как инструменты в биологических исследованиях // Мех. действ, зоотоксинов. Горький, 1977.-С. 105-124.

44. Гелашвили Д.Б., Сиднев Б.Н., Крюков М.А. Нейрофизиологические механизмы судорожного действия яда скорпиона Butus eupeus и синтетического аналога лей-энкефалина // Мех. действ, зоотоксинов. Горький, 1984. -С. 24-32.

45. Гиноян Р.В., Хомутов А.Е., Ягин В.В., Калашникова JI.M. Способ управляемой гипертермии. Патент на изобретение № 2313353 от 27 декабря 2007.

46. Горизонтов П.Д. Гомеостаз. М.: Медицина, 1981.-576с.

47. Гиноян Р.В., Ягин В.В., Хомутов А.Е. Термофизиология. Терминологический словарь. Н.Новгород: ННГУ, 2004. - 102с.

48. Громова И.А., Молотковский Ю.Г., Бергельсон Л.Д. Изучение взаимодействия мелиттина с многокомпонентными смесями с помощью липид-специфических флуоресцентных зондов // Биологические'мембраны. 1990. -№ 9. - С. 986-1000.

49. Гущин И.С., Мирошников А.И., Мартынов В.И: Особенности гиста-минвысвобождающего действия- МСД-пептида из яда пчел // Бюлл. экспер. биол. и мед. 1977. - №7. - С. 78-80.

50. Давлятов Я.Д. Исследование ядов-различных видов щитомордников // Мех. действ, зоотоксинов. Горький, 1985: - С. 73-78.

51. Давлятов Я.Д. Электрофоретический анализ ядов различных популяций кобр // Мех. действ, зоотоксинов. Горький, 1986. - С. 42-47.

52. Данилова О.О. Модификация гепарином токсических и термопротекторных свойств зоотоксинов: автореф. дисс . кандидата биологических наук: 03.00.13/ Данилова Оксана Олеговна. Н. Новгород, 2008. — 24 с.

53. Дворцова В.Л., Гладилов В.В. Действие пчелиного яда на содержание 2,3-ДФГ в эритроцитах и сродство гемоглобина к кислороду / Мех. действ, зоотоксинов. Горький, 1980. - С. 33-36.

54. Дворцова В.Л. и др. Сравнительное исследование действия яда скорпиона на функциональное состояние эритроцитов // Мех. действ, зоотоксинов. Горький, 1982. - С. 26-31.

55. Демченко А.Н., Костржевская Е.Г. Мелиттин: структура, свойства, взаимодействие с мембраной // Укр. биохим. журн. — 1986. Т. 58, № 5. - С. 74-90.

56. Довганский А.Н. Об изменениях тканевого дыхания при тяжелых ожогах и их лечение в эксперименте. Кишинев, 1962. - 186с.

57. Егоров В.В. и др. Электрофизиологический и нейрофармакологиче-ский анализ действия яда скорпиона Buthus eupeus на ЦНС // Мех. действ, зоотоксинов. Горький, 1980. - С. 90-103.

58. Захаров В.И. Жабий яд. Кишинев, 1960. - 134с.

59. Захаров В.И., Кузнецова B.C., Симонова. В.Ф. Антибиотические свойства секрета надлопаточных желез жаб. Кишинев, 1973. - 142с.

60. Зинчук В.К. Кислородтранспортная функция крови при гипертермии. // 3 съезд Белорус, физиол. об-ва им. И.П.Павлова. Минск, 1991. - С. 15.

61. Ихолэ В., Садыков Э.С., Юкельсон Л.Я. Гемолитическое действие двух мембраноактивных полипептидов из яда среднеазиатской кобры// Узб. биол. журн. 1980. - №4. - С. 3-5.

62. Кадыров И.К. Цитоморфологическая характеристика аденогипофиза после введения минимальной летальной дозы яда гюрзы // Мех. действ, зоо-токсинов. Горький, 1982. - С. 84-89.

63. Кадыров И.К. Морфологические изменения эндокринных желез животных после введения яда гюрзы // Мех. действ, зоотоксинов. Горький, 1984.-С. 10-15.

64. Кадыров И.К. Электронно-микроскопические изменения в надпочечниках крыс под влиянием яда гюрзы // Мех. действ зоотоксинов. -Горький, 1986.-С. 39-42.

65. Кадыров И.К. Характеристика патоморфологических изменений в эндокринной системе под влиянием яда гюрзы // Мех. действ, зоотоксинов. -Горький, 1987. С. 76-80.

66. Калинина Т.Е. Сравнительное исследование действия животных ядов на морфологию крови // Ученые зап. / Горьков. ун-т 1951. - вып. 19. - С. 2741.

67. Калинина Т. Е. О действии ядов пчел и других перепончатокрылых на морфологический состав крови // Пчелы в сельском хоз-ве и медицине. -Горький, 1962. С. 245-248.

68. Калмыкова И.Б., Славнова Т.И., Шадыбекова И.И. Процессы пере-кисного окисления липидов и жирнокислотный состав липидной фазы тромбоцитов под влиянием ядов среднеазиатских змей // Проблемы гематологии и переливания крови. 1997. - № 2. - С. 20-23.

69. Калюжный Л.В., С.Б. Парин К анализу анальгетического эффекта яда среднеазиатской кобры // Мех. действ, зоотоксинов. Горький, 1980. - С. 107-116.

70. Каримов З.Н. Гемокоагулирующее и геморрагическое действие яда гюрзы // Мех. патол. процессов. Ташкент, 1976. - С. 58-60.

71. Касенов К.У. Влияние змеиных ядов на содержание иммунокомпе-тентных клеток // Механизмы действия зоотоксинов. Горький, 1977. - С. 143-147.

72. Киреева В.Ф. Морфофункциональная характеристика эритроцитов при действии зоотоксинов // Мех. действ, зоотоксинов. Горький, 1985. - С. 104-114.

73. Киреева В.Ф., Конькова Л.Г., Курникова Н.П-. Действие яда кобры на гемолитическую устойчивость эритроцитов крыс // Мех. действ, зоотоксинов. -Горький, 1980. С. 120-127.

74. Колтакова С.И., Нелинова Т.С., Таранина Т.С. Влияние гепариниза-ции на локальное геморрагическое действие яда гюрзы // Мех. действ, зоотоксинов. Горький, 1983. - С. 67-71.

75. Колтакова С.И., Цывкина Л.П. О влиянии тромбиноподобных ферментов яда щитомордника и активированного фактора X на фибрин-стабилизирующий фактор // Мех. действ, зоотоксинов. Горький, 1980. - С. 127-129.

76. Комаров Ф.И., Коровкин Б.Ф., Меньшиков В.В. Биохимические исследования в колинике.- Элиста: АПП «Джангар», 2001. 216с.

77. Кондашевская М.В., Айанян Л.Е. Действие производных фосфолипаз Аг из яда кобры на миниатюрные потенциалы концевой пластинки в мышце млекопитающего. М.: Наука, 1981. 165с.

78. Кондашевская М.В., Ляпина Л.А. Новое свойство комплекса гепарин-серотонин //Бюлл. экспер. биологии и медицины , 1998, Т. 126, № 10. С.425-426.

79. Конькова Л.Г. Реакция эозинофилов крови на введение пчелиного яда //Яды пчел и змей в биологии и медицине. Горький, 1967. - С. 135-141.

80. Корнева Н.В. Влияние ядов змей семейства гадюковых на распределение нейтрального красного в тканях и органах белых мышей // Мех действ, зоотоксинов. Горький, 1977. - С. 138-143.

81. Корнева Н.В., Горбачева Т.Н., Романова Е.Б. Действие ядовитых секретов беспозвоночных животных на вязкость крови // Мех. действ, зоотоксинов. -Горький, 1987. С. 85-90.

82. Корнева Н.В., Романова Е.Б., Когтев А.Б. Изменение агрегационных свойств эритроцитов при воздействии ядовитых секретов членостоногих // Мех. действ, зоотоксинов. Горький, 1985. - С. 29-35.

83. Корнева Н.В., Романова Е.Б., Москаленко Л.А. Изменение реологических свойств крови при действии некоторых зоотоксинов // Мех. действ, зоотоксинов. Горький, 1984. - С. 35-39.

84. Косенков Н.И. Изменение чувствительности к адреналину в процессе тепловой адаптации // Физиология человека. 1984. - Т. 10, №3. - С. 478-479.

85. КочкинаВ.М. Аспартатаминотрансфераза. Белки и пептиды, 1995. Т. 1.-С. 102-109.

86. Крылов В.Н. Механизмы изменения некоторых функций нормального и альтернативного сердца при действии зоотоксинов: автореф. дисс. . . докт. биол. наук: 03.00.14 / Крылов Василий Николаевич. М., 1990. - 48с.

87. Крылов В.Н. Пчелиный яд. Н.Новгород: ННГУ, 1995. 223с.

88. Крылов В.Н. и др. Исследование действия яда скорпиона на людях в патологии кровообращения //Мех. действ, зоотоксинов. Горький, 1986. - С. 5-12.

89. Крылов В.Н. и др. Влияние препарата жабьего яда на некоторые показатели гемодинамики собак в условиях кранио-церебральной гипотермии //Механизмы действия зоотоксинов. Горький, 1978. - С. 91-96:

90. Крылов В.Н., Орлов Б.Н., Егоров В.В. Действие некоторых животных ядов на изолированное сердце кошки //Механизмы действия зоотоксинов. -Горький, 1971. С.134-137.

91. Крылов В.Н. и др. Буфотин и налорфин в экспериментальной терапии геморрагического шока //Тезисы X Всероссийского пленума анестезиологов и реаниматологов. Н. Новгород, 1995. - С. 95.

92. Крылов В.Н., Юнина JI.B., Лысова И.И. К анализу кардиотропных свойств жабьего яда и некоторых его фракций //Механизмы действия зоотоксинов. Горький, 1982. - С. 65-71.

93. Кудряшов Б.А. Биологические проблемы регуляции жидкого состояния и ее свертывания. М.: Медицина, 1975.- 487с.

94. Кулмаматов А.К. Вопросы экологии пестрых (Buthus eupeus) и желтого (Buthus caucasicus) скорпионов и токсикологическая характеристика их ядов / А.К. Кулмаматов и др. // Мех действ, зоотоксинов. Горький, 1980. -С. 103-107.

95. Лакин K.M., Пятницкий H.H., Сейфулла Р.Д., Ефимов B.C. Исследование антагонистов гепарина и гепариноидов // Гепарин. Физиология, биохимия, фармакология и клиническое применение-М., 1969. С. 65-67.

96. Лакин K.M., Ефимов B.C. Антагонисты гепарина // Кардиология. -1970.-Т. 10, №8.-С. 138-148.

97. Лакин K.M., Ефимов B.C., Развадовский Е.Ф. и др. Фармакологическое изучение синтетических антагонистов гепарина // Гепарин. Физиология, биохимия, фармакология и клиническое применение. Тезисы III Всесоюзной конференции. -М., 1973.-С. 182-183.

98. Лашина В.Л. Кислородсвязывающие свойства гемоглобина в условиях воздействия на организм природных зоотоксинов // Мех. действ, зоотоксинов. Горький, 1985. - С. 100-104.

99. Лашина В.Л., Киреева В.Ф., Щенева H.A. Действие яда гюрзы на кислотную резистентность и энергетический обмен эритроцитов хомяков // Мех. действ, зоотоксинов. Горький, 1987. - С. 67-71.

100. Леках В.А. Особенности переходного процесса в системе терморегуляции крыс при адаптации к повторным тепловым воздействиям / В.А. Леках // Физиол. журн. 1980. - Т. 26, №5. - С. 589-591.

101. Ляпина Л.А. Физиологические* функции гепарина //Успехи современной биологии, 1987, Т. 103, № 1. С.66-80.

102. Манухина Е.Б., Малышев И.Ю., Микоян В.Д. Увеличение продукции оксида азота в органах крысы при тепловом шоке // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1996. - № 5. - С. 520-524.

103. Микоян В.Д., Кубрина Л.Н., Манухина Е.Б. Различия в стимуляции синтеза оксида азота при тепловом шоке у крыс генетически разных популяций //Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1996. - № 6. -С. 634-638.

104. Мельниченко O.A., Черепнова H.A. Количественное определение ядов пчелы, кобры и их фракций по гемолитической активности // Мех. действ, зоотоксинов. Горький, 1977. - С. 101-105.

105. Мещерякова Е.А. и др. О структуре Са-связывающего центра фос-фолипазы А2 из яда среднеазиатской кобры // Биоорганич. химия. 1982. -Т. 8, №3. - С. 349-363.

106. Мирошников А.И. Механизм молекулярного действия экзогенных фосфолипазА2 //Биомембраны. Рига, 1982. - С. 152-166.

107. Моммадов И.М., Султанов Г.Ф., Григорьян А.Г Прогнозирование уровня здоровья, физической работоспособности и профессиональной успешности в условиях аридной зоны //Физиология человека. 2001. - Т.27, № 1. - С. 86-94.

108. Наумов А.П. О природе потенциал-зависимости связывания токсина скорпиона с натриевыми каналами возбудимых мембран // Мех. действ, зоотоксинов. -Горький, 1980. С. 80-90.

109. Нигматов З.К. Очистка холинэстеразы яда среднеазиатской кобры и изучение ее некоторых свойств // Мех. действ, зоотоксинов. Горький, 1985. - С. 78-84.

110. Овчинников Ю.А. Природные токсины в изучении молекулярных основ нервной проводимости // Фундаментальные науки медицине. - М.: Наука, 1980. - С. 60-69.

111. Омаров Ш.М. Патофизиологические аспекты антикоагулирующего действия зоотоксинов и их инградиентов: автореф. дисс. . . докт. мед. наук: 14.00.16 / Омаров Шамиль Магомедович. М., 1980. - 32с.

112. Омаров Ш.М. Патофизиологические аспекты антикоагуляционного действия пчелиного яда и его ингридиентов // Механизмы действия» зоотоксинов. Горький, 1986. С. 54-61.

113. Орлов Б.Н. Действие жабьего яда на центральную нервную систему // Ученые зап. / Горьк. ун-т. 1963. - С. 89-92.

114. Орлов Б.Н. Биоэлектрическая активность коры головного мозга при отравлении некоторыми животными ядами // Докл. АН СССР. -1964. Т. 53, № 1.-С. 233-235.

115. Орлов Б.Н. О деполяризующем действии животных ядов // Ученые зап. / Горьк. ун-т. 1970. - С.1 97-204.

116. Орлов Б.Н., Аратен С.М. Изменение аккомодационной способности при действии некоторых животных ядов //Ученые зап. /Горьк. ун-т. 1970.С. 138-145.

117. Орлов Б.Н., Вальцева И.А. Яды змей. Ташкент, 1977. 158с.

118. Орлов Б.Н., Гелашвили Д.Б. Зоотоксинология. М.: Высшая школа, 1985.-280с.

119. Орлов Б.Н., Гелашвили Д.Б., Ибрагимов А.К. Ядовитые животные и растения СССР. М.: Высшая школа, 1990. 272с.

120. Орлов Б.Н., Крылов В.Н. Кардиотропное действие яда зеленой жабы //Биологические науки. 1980. - № 9. - С. 62-66.

121. Орлов Б .H., Крылов В.Н. Влияние яда жабы Bufo viridis Laur. на кардиогемодинамику собак //Биологические науки. — 1986. № 4. - С. 54-58.

122. Павлов A.C. О двух типах тепла в организме человека в условиях эрготермической нагрузки //Физиология человека. 1995. - Т.21, № 2. - С. 137-143.

123. Павлов A.C. О физиологической тяжести гипертермии различной этиологии для человека // Физиология человека. 2006. - Т.32, № 4. - С. 110115.

124. Парин С.Б. К оценке опиоидных механизмов действия некоторых зоотоксинов // Мех. действ, зоотоксинов. Горький, 1984. - С. 71-79.

125. Перлик Э. Антикоагулянты. Л., 1965. - 248с.

126. Петрова О.П. Развитие терморегуляционной реакции теплоотдачи в онтогенезе у крыс //Физиологический журнал СССР им. Сеченова. 1995. -Т.81, № 9. - С. 88-94.

127. Петрова Т.В., Васин М.В., Разинкин С.М. Вияние гипертермии на некоторые гормональные и иммунные показатели человека //Физиология человека. 1991. - Т. 17, № 3. - С. 94-97.

128. Пигулевский C.B. Ядовитые животные. Л.: Медицина, 1966. 386с.

129. Плужников К.Ф. и др. Получение фотоактивированных монопроизводных нейротоксинов (Naja naja oxiana) и их взаимодействие с ацетилхолиновым рецептором //Биоорг. химия. 1982. - №7. - С. 905-913.

130. Побережская Т.И. Ганглиоблокирующее действие жабьего яда / Т.И. Побережская, Л.И. Сергеева, Г.И. Малышева //Матер, научн. конф. «Функциональные взаимоотношения между различными системами органов в норме и патологии». Иваново, 1962. - С. 874-876.

131. Романова С.Б. Оценка действия яда среднеазиатской гюрзы в реакциях гуморального и клеточного иммунитета // Зоотоксины в экспер. биол. и мед. Горький, 1990. - С. 31-36.

132. Романова Е.Б., Сейфулла Р.Д. Сравнительный анализ действия некоторых природных биологически активных веществ на ферментативную активность лимфоцитов // Мех. действ, зоотоксинов. Горький, 1983. - С. 4650.

133. Сахибов Д.Н., Сорокин В.М., Юкельсон Л.Я. Химия и биохимия змеиных ядов. Ташкент: Фан, 1972. 186с.

134. Селье Г. Очерки об адаптационном синдроме. М.: Наука, 1972. -121с.

135. Сергеева Л.И. Влияние пчелиного яда на ганглии вегетативной нервной системы // Ученые зап. / Горьк. ун-т. 1970. - С. 95-104.

136. Сергеева Л.И., Хомутов А.Е., Михайлова Н.Л. О торможении гепарином ганглиоблокирующего действия яда кобры // Биол. науки. 1975. - №8. - С. 36-42.

137. Сирмаи Э. Новые методы исследования системы свертывания крови // Проблемы гематологии и переливания крови. 1957. - Т. 2, № 6. - С. 38-44.

138. Смирнова В'.П. и др. Влияние некоторых зоотоксинов на ультраструктуру и метаболизм альтерированного сердца собак // Зоотоксины в экс-пер. биол. и медицине. Горький, 1990. - С. 69-72.

139. Смурова Е.А., Нестерова JI.A., Манухин Б.Н. Действие высокой температуры- in vitro на специфическую активность а-адренорецепторов // Доклады РАН. 1995. - 342, №3. - С.421-423:

140. Соловьев A.C. Исследование иммунологических реакций организма при общей экзогенной гипертермии // Иммунология. 1994. - №4. - С. 21-23.

141. Соловьев Д.А., Платонова Т.Н., Угарова Т.П. Выделение и характеристика экамулина активатора протромбина из яда эфы многочешуйчатой (Echis carinatus multisquamatus) // Биохимия. - 1996: - Т. 61, вып. 6. - С. 10941099:

142. Сорокин В.М., Гусаковский Е.Е. Флуоресценция и поглощение йодированного нейротоксина из яда среднеазиатской кобры // Мех. действ, зоотоксинов. Горький, 1983. - С. 53-56.

143. Султанов М.Н. К механизму действия ядов змей // Мех. действ, зоотоксинов. Горький, 1977. - С. 128-134.

144. Султанов Ф.Ф. Общие вопросы адаптации человека и животных в аридной зоне // Физиологические механизмы адаптации организма к условиям аридной зоны. Ашхабад, 1982. - С. 5-52.

145. Султанов Ф.Ф: Теоретические и практические проблемы-терморегуляции. Ашхабад: Ылым, 1984. -285с.

146. Султанов Ф.И. Влияние кратковременного воздействия тепла на синтез катехоламинов в органах белых крыс // Изв. АН Туркменистана. Сер. биол. 1992. - № 1. - С. 8-11.

147. Султанов Ф.Ф., Клочкова Г.М., Мезидова Х.А. Влияние природно-климатических условий аридного региона на гормональный статус человека //Физиология человека. 2001. - Т. 27, № 1. - С. 74-85.

148. Талызин Ф.Ф., Вальцева И.А., Васильченко В.В. Кардиотропное действие яда зеленой жабы // Труды Всесоюзной конференции ЦНИЛ мед. вузов СССР. М., 1967. - С. 198-199.

149. Терехова Н.М. К механизму противовоспалительного действия аминазина// Фармакология и токсикология. 1975, № 1. С.55-57.

150. Тилис А.Ю. Гемодинамические и биохимические сдвиги при солнечно-тепловом перегревании. Ташкент, 1964. -198с.

151. Тилис Ю.А. Перегревание //Патологическая физиология экстремальных состояний. М.,1973. - С. 180-221.

152. Титов В.Н. Лейкоцитарная реакция периферической крови на острое перегревание при длительном поступлении с пищей природных цеолитов. // Ин-т физиологии АН СССР.- Новосибирск, 1991. С. 9-10.

153. Туракулов Я.Х., Сахибов Д.Н. Биохимические механизмы токсического действия змеиных ядов // Научн. Труды Ташкент, ун-та. 1968. - С. 6375.

154. Туракулов Я.Х., и др. Токсины яда среднеазиатской кобры //Биохимия. 1971. - 36, №6. - С. 1282-1286.

155. Ушкалова Е.А., Кремнева В.Ф:, Щеглова Н.В. Изучение нейтрализующего действия протамин сульфата и 2,5-иопена в отношении, гепаринов, полученных из разных источников // Фармакология и токсикология. М., 1987. ВИНИТИ. - 14с.

156. Физер JL, Физер М. Стероиды. М., Мир, 1964. 982с.

157. Филиппов А.К., Поротиков В.И., Тертышникова С.Б., Асафова H.H. Клеточные механизмы действия яда скорпиона на сердечную мышцу // Мех. действ, зоотоксинов. Горький, 1986. - С. 47-54.

158. Филиппов А.К. и др. Действие мелиттина на ионные токи мембран сердечных волокон // Биофизика. 1988. - 33, №1. - С. 620-623.

159. Хамудханова Ш.М., Сахибов Д.Н. О фосфодиэстеразной активности ядов среднеазиатских змей // Узб. биол. журн. 1980. - №1. - С. 67-69.

160. Хомутов А.Е. Гепарин и зоотоксины //Механизмы действия зоотоксинов, Горький, 1987. С.13-30.

161. Хомутов А.Е. Действие зоотоксинов на синаптические структуры вегетативных ганглиев // Матер. VII Всероссийского съезда неврологов. -Н.Новгород, 1995. С. 453-455.

162. Хомутов А.Е., Гиноян Р.В., Ягин В.В. Термоадаптивные свойства зоотоксинов. Н. Новгород: Изд. ННГУ, 2005. — 225с.

163. Хомутов А.Е., Ягин В.В. Термоадаптивные свойства змеиных ядов //Первая конференция герпетологов Поволжья. Тольятти, 1995. - С.56-58.

164. Хомутов А.Е., Ягин В.В. Температурный гомеостаз и змеиные яды // Вестник Нижегородского университета. Серия биология. — Н.Новгород: ННГУ, 2005. вып. 2(10). С. 152-156.

165. Хомутов А.Е., Ягин В.В., Гаранин A.B. Влияние гепарина и протамин сульфата на термоадаптивные свойства пчелиного яда //Экологические аспекты производства, переработки и использования продуктов пчеловодства. Рыбное, 2005. - С. 156-164.

166. Хомутов А.Е., Ягин В.В., Зимина Т.А. Введение в термофизиологию. Н. Новгород, 2005. - 153 с.175: ХомутовА.Е., Ягин В.В., Калашникова JI.M. Температурный стресс и пчелиный яд // Пчеловодство, 2005. № 2. С. 54 55.

167. Хомутов А.Е., Ягин В.В. Худайбердыев М.Д., Некрасова JI.A. Влияние, зоотоксинов на выживаемость экспериментальных животных в условиях перегревания // Механизмы действия зоотоксинов: Межвузовский сборник. Горький: ГГУ, 1986. - С. 34-39.

168. Шапиро A.M., Вальцева И.А-., Бажутина Г.А. Действие пчелиного' яда на некоторые показатели крови // Мех. действ, зоотоксинов. Горький, 1976. - С. 80-84.

169. Шкендеров С., Иванов Ц. Пчелиные продукты. София: Земиздат, 1985.-280с.

170. Шкинев Ф.В. и др. Действие мелиттина яда пчел на функции митохондрий //Биохимия. 1978. - Т. 43, вып. 8. - С. 1452-1457.

171. Шмидт-Ниельсен К. Физиология животных: приспособление и среда . М.: Мир, 1982. 800с.

172. Шольц К.Ф. и др. Действие мелиттина и его тетраацетильного производного на митохондрии печени крыс // Биохимия. 1980. - Т. 45, вып. 10. -С. 1840-1849.

173. Штернберг Ю.М. О нейтрализации гепарина протамин сульфатом в различных условиях // Гепарин. Физиология, биохимия, фармакологи* и клиническое применение. Тезисы II Всесоюзной конференции. М., 1968. -С. 283-285.

174. Юркова И.Б. Обезвреживающее действие ингибиторов свободнора-дикальных процессов на яды змей // Труды 1-го Моск. мед. ин-та. Москва. -1965.-41.-С. 33-35.

175. Ягин В'.В. Эколого-физиологические аспекты термопротекторного действия зоотоксинов. Автореферат на соискание учёной степени доктора биологических наук. Н. Новгород, 2007. 48 с.

176. Якунин Г.А., Зилм JI.H. Влияние яда гюрзы на внутрисосудистое свертывание крови в онтогенезе // Матер. 8-ой научн. конф. по возрастной морфологии, физиологии и биохимии. М., 1967. - С. 463-464.

177. Agostinucci W., Cordoni A., Rosenberg Ph. Effect of papain on bee venom toxicity// Toxicon. 1981. - V. 19, N6. - P. 851-855.

178. Alder G.M. et al. Divalent cation-sensitive pores formed by natural and syntetic melittin and by Triton X-100 //Biochim. Biophys. Acta. 1991. - V.l 061, Nl.-P. 111-120.

179. Almeida O.P., Bohm G.M., Bonta I.L. Morphological study of lesions induced by snake venoms (Naja naja and Agkistrodon piscivorus) in the lung and cremaster vessels of rats //J. Pathol. 1977. - V. 121, N3.-P: 169

180. Azhitskii D.G., Azhitskii G.I., Borisenko S.N. Interaction between- bee venom melittin and human blood albumin //Ukr. Biokhiv. Zh. 1995. - V. 67, N. 4.-Pi 64-67.

181. Banks B. et al. Some peripheral activities of Apamin // Toxicon. 1979. -V. 17, N 1. - P. 4.

182. Barbouche R., Brown C. et al. Anty-platelet activity of the peptides composing the lebetin 1 family, a new class of inhibitors of platelet aggregation //Toxicon, 1998, V. 36, N 12. P. 1939-1947.

183. Barbouche R. et al. Novel anty-platelet aggregation polypeptides from Vipera lebetina venom: isjlation and characterization //FEBS Lett. 1996. - V. 392, N. l.-P. 6-10.

184. Bauer M. et al. Assignment of all four disulfide bridges in echistatin //J. Protein Chem. 1993. - V. 12, N 6. - P. 759-764.

185. Berg T., Boman D. Distribution of lysosomal enzymes between parenchymal and Kupffer cells of rat //Biochim. Biophys. Acta. 1988. - V. 321. - P. 585-595:

186. Berger E.M., Woodward M.P: Small heat shock proteins in Drosophila may confer thermal tolerance // Exp. Cell Res. 1983. - V. 147. - P. 437-442.

187. Bian R., Tian K., Yang R. Fractionation of bee venom by chromatography and its anticoagulantaction //J. Toxin. Rev. 1990. - V. 9, N 1. - P. 63-67.

188. Bkaily G., et al. Apamin, a highly pjtent blocker of the TTX-and Vn2(+)-insensitive fast transient Na+current in voung embryonic heart //J. Vol. Cell. Car-liol. 1991. - V. 23, N. 1. - P. 25-39.

189. Breithaupt H., Habermann E. Mastzelldegranulierendes Peptid (MSD-peptid) ans Bienengift: Isolierung, biochemische und pharmakologische Eigeschaften // Arch. Pharmacol. 1968. - V. 261, N5. - S. 252-258.

190. Brigge M.N. The chemistri of animal venoms // Sci. Progr. 1960. - V. 40,N. 191.-P. 456-562.

191. Calvete J.J. et al. The disulfide bridge pattern of snake venom disin-tegrins, flavoridin and echistatin //FEBS Lett. 1992. - V. 309, N. 3. - P. 316-320.

192. Chang C., Lee. C. Cholienesterase and anticholinesterase activities in snake venonis//J. Med. Ass. Formosa. 1955.-V. 54.-P. 102-118.

193. Chen J. et al. Enzymatic redesigning of biological active heparan sulfate //Journal of Biological Chemistry, 2006; № 12. - P. 329-332.

194. Chen C.C., Lin-Shiau S.Y. Modt of inhibitory action of melittin on Na+-K+-ATPase activity of the rat synaptic membrane //Biochem. Pharmacol. 1985. -V. 34, N 13. -p: 2335-2341.

195. Chen Y.L., Tsai I.H. Functional and sequence characterization of coagulation factor IX, factor X-binding protein from the venom of Echis carinatus leuco-gaster //Biochem. 1996. - V. 35, N 16. - P. 5264-5271.

196. Cho W. et al. Purification and characterization of calobin II, a second type of thrombin-like enzyme from Agkistrodon caliginosus (Korean viper) //Toxicon. 2001. - V. 39, N 4. - P! 499-506.

197. Cho W. et al. The chemical basis for interfacial activation of monomeric phospholipases A2. Autocatalytic derivatization of the enzyme by acyl transfer from substrate //J. Biol. Chem. 1988. - V. 263, N 23. - P. 11237-11241.

198. Comte M., Maulet Y., Cox J.A. Ca -dependent high-affinity complex formation between cfimodulin and melittin //Biochem. J. 1983. - V. 209, N 1. -P. 269-272.

199. Condrea E., A. de Vries Phospholipase A // Reviem. Toxicon. 1965. -N2.-P. 261-270.

200. Condrea E. et al. Dissosiation of enzimatic activity from lethality and pharmacological properties carbomylation of lysines in Naja nigricollis and Naja atra snake venom phospholipase A2 // Toxicon. 1981.- 19, N5. - P.705-720.

201. Craig E.A. The heat shock response // CRC Crit Rev. Biochem. 1985. -V. 18.-P. 239-280.

202. Cuppoletti J., Abbott A J. Interaction of melittin with the (Na+-K+) ATPase: evidence for a meluttin-induced conformational change //Arch. Biochem. Biophys. 1990. - V. 283, N 2. - P. 249-257.

203. Cuppoletti J., Blumental K.M., Malinowska D.H. Melittin inhibition of the gastric Na+-K+ ATPase and photoaffmity Labeling with azidosalicylyl melittin //Arch. Biochem. Biophys. 1989. - V. 275, N 1. - P. 263-270.

204. Dan Phyllis J. et al. Inhibition of type I and type II phospholipase A2 by phosphatidyl-ethanolamine linked to polimeric carries //Biochemistry. 1998. - V. 37,N17.-P. 6199-6204.

205. De Bony I., Dufoureg I., Clin B. Lipid-protein interactions: NMR-study of melittin and its binding to lisophosphatidylcholine // Ibid. 1978. - V. 510, N 1. - P. 75-86.

206. De Grado W.F. et al. Kinetics and mechanism of hemolysis induced by melittin and by a syntetic melittin analogue // Biophys. J. 1982. - V. 37, N 1. - P. 329-338.

207. De Maio A., Beck S.C. Buchman induction of translational thermotoler-ance in liver of thermally stressed rats //Eur. J. Biochem. 1993. - V. 218. - P. 413-420.

208. Deshpande A.K., Koide S.S. In vitro induction of germinal vesicle breakdown in Xenopus laevis oocytes by melittin //Differentiation. 1982. - V. 21, N 2. -P. 127-132.

209. Dhillon D.S., et al. Comparison of enzymatic and pharmacjljgical activities of lysine-49 and aspartate-49 phospholipases A2 from Agkistrodon piscivorus piscivorus snake venom //Biochem. Pharmacol. — 1987. V. 36, N 10. - P. 17231730.

210. Doi T. Hypothalamic neuronal hystamine regulates adaptive behavior at high ambient temperature in rats // Ihp. J. Physiol. 1990. - V. 40. - P. 273.

211. Ferreira L.A. Structure and effect of a kinin potentiating fraction- F (AppF) isolated'from Agkistrodon piscivorus piscivorus venum //Toxicon. 1995. -V. 33, N 10. - P.' 1313-1319.

212. Freitas M.A. et al. Citrate is a major component of snake venoms-//Toxicon. 1992. - V. 30, N 4. - P. 461-464.

213. Frerejacque M. Venins de crapauds //Rev. Gen. Sei. Pures et appl. -1958. V.65, N 5. - P. 145-149.

214. Fumiaki I., Yoshiaki O. Hiroshi F. Responses of plasma insulin, glucagon growth hormone and metabolites in heifers during cold and heat txposure //Anim. Sei. and Technol. 1997. - V.68, N. 8. - Pi 727-734.

215. Galbo H. Glucogon and plasma cateholamines during beta-receptor blockade in exercising man / H. Galbo, J.J. Holst, N.J. Christenses // J. Appl. Phisiol. 1976. - V.40. - P. 855-860.

216. Gasmi A. et al. Purification and characterization of a growth factor-like which increases capillare permeability from Vipera lebetina venom //Biochem. Biophys. Res. Commun. 2000. - V. 268, N 1. - P. 69-72.

217. Gasmi A. et al. Further characterization and thrombolytic activity in a rat model of a flbrinogenase from Vipera lebetina venom // Thromb. Res. 1997. -V. 86, N 3. - P. 233-242.

218. Gasmi A. et al. Purification and characterization of a flbrinogenase from Vipera lebetina venom // Toxicon. 1991. - V. 29, N 7. - P. 827-836;

219. Gasmi A. et al. Purification from Vipera lebetina venom of a protein that depletes human complement //Nat. Toxins. 1994. - V. 2, N 1. - P: 44-48.

220. Gasmi A., Srairi N., Guermasi S. Amino acid structure and characterization of a heterodimeric disintegrin from Vipera lebetina venom // Biochem. Biophys. Acta. -2001. V. 1547, N 1. - P. 51-56.

221. Gevord V.S., Birdi K.S. Melittin and the 8-26 fragment. Differences in ionophoric properties as measured by monolayr method //Biophys. J. 1984. -V.45.N6.-P. 1079-1083.

222. Haas E. On the mechanism of invasion. Antinvasin I and enzyme in plasma //1. Biol. Ceem. 1946. - V. 163. - P. 68-69.

223. Habermann E. Eigenschaften und Anreicherung der Uialuronidase von Bienengift//Biochem. Zeitsch. 1957.-N4. - S. 329-331.

224. Habermann E. Uber die Wircung tierischer Gifte auf Erythrocyten // Z. exp. Med. 1958. - 122, N7. - S. 436-464.

225. Habermann E. Bee and Wasp venonis // Science. 1972. - 177. - P: 314322.

226. Habermann E., Reaz K. Apamin: ein basischen zentral erregen des Polypeptid aus Bienengift // Naturwiss. 1964. - 51, N3. - S. 61-75.

227. Habermann E., Rubsamen K. Biochemical and pharmacological analysis of the so-called crotoxin 11 Toxins. Anim. and Plant Origin. 1971. - V. 1, N4. - P. 333-341.

228. Habermann E., Walch P., Breithaupt A. Biochemisty and Pharmacology of the Crotoxin Complex // Arch. Pharmacol. 1972. - V. 273, N4. - P. 313-330.

229. Hahn B.C., Chang I.M., Kim Y.S. Purification and characterization of piscivorase I and II, the fibrinolytic enzymes from easten cottonmouth mocassian venom (Agkistrodon piscivorus piscivorus) //Toxicon. 1995. - V. 33, N 7. - P. 929-941.

230. Hahn B.C. et al. Purification and molecular cloning of calobin, a throm-din-like enzyme from Agkistrodon caliginosus (Korean viper) //J. Biochem. — 1996.-V. 119.-P. 835-843.

231. Hayshi K. Hino M., Tomita Y. Effect of short-term exposure to heat or cold on musde protein breakdown in rats // Amin. Sci and Fechnol. 1993. - V. 64,N2.-P. 101-106.

232. Hendon R., Fraenkel H., Conrat H. Biological roles of the two components of crotoxin//Proc. pat. Acad. Sci. 1971. - V. 68. - P. 1560-1563.

233. Hensel H. Neuronal process in thermoregulation // Physiol. Rev. 1973. -V. 53.-P. 948-1017.

234. Hider R., Khader F. Biochemical and pharmacological properties of car-diotoxins isolated from cobra venom // Toxicon. 1982. -V. 20, N1. - P. 175-179.

235. Himatkumar P.V., Alka V.A., Kavita V.A. Heparin and heparan sulfate bind to snake cardiotoxin //J. Biol. Chem. 1997/ - V. 272, N. 3. - P. 1484-1492.

236. Hoffmann D. et al. Correlation of IgG and IgG-antibody levels to honey bee venom allergens with protection to sting challenge // Ann. of Allergy. 1981. -V. 46, N1.-P. 17-23.

237. Homutov A.E., Yagin V.V., Zimina T.A. Thermoadaptive Properties of bee venom //XXXV Inter. Apicultural Congress. Bucharest: Apimondia, 1997. P.136-137.

238. Itakura M., T. Iio Static and kinetic of calmodulin and melittin complex //J. Biochem.- 1992. V. 112, N 2. - P. 183-191.

239. Iwadate M., Asakura T., Williamson M.P. The structure of the melittin tetramer at different temptratures-an NOE-based calculation with chemical shift refinement //Eur. J. Biochem. 1998. - V. 257, N 2. - P. 479-487.

240. Juwadi P. et al. Structure-activity studies of normal and retro pig ce-cropin-melittin hybrids //J. Ptpt. Res. 1999. - V. 53, N 3. - P. 244-251.

241. Kajita S., H. Iizuka Melittin-induced alteration of epidermal adenylate cyclase responses //Acta. Derm. Venereol. 1987. - V. 67, N4.-P: 295-300.

242. Karlsson E. Chemistry of some potent animal toxins // Experientia. -1973.-V. 29,N 11. -P. 1319-1327.

243. Katsu T. et al. Mechanism of cellular membrane damage induced by melittin and mastoparan // Jap. J. Med. Sci. and Biol. 1990. - V. 43, N 6. - P. 259263.

244. Kemparaju K., Prasad B.N., Gowda V.T. Purification of a basis phos-pholipase A2 from Indian saw-scaled viper (Echis carinatus) venom: characterization of antigenic, catalytic and pharmacological properties //Toxicon. 1994. - V. 32.,N10.-P. 1187-1196.

245. Komori Y., Nikai T., Tohkai T., Sugihara H. Primary structure and biological activity of snakt venom lectin (APE) from Agkistrodon p. piscsforus (Eas-ten cottonmouth) // Toxicon. 1999. - V. 37, N7. - P. 1053-1064'.

246. Koumi S., Sato R., Hayakawa H. Modulation of the delayed rectifier K+ current by apamin in guinea-pig.heart//Tur. J. Pharmacol. 1994; - V. 261, N. 1. -P. 213-216;

247. Kreil G. Zur Reindarstellung und< Charakterisierung von Mellitin dem Haupttoxin des Bienengiftes //Monatschrift fur Chemie. 1965. - V. 96, N6. - S. 2061-2063;

248. Kreil G., Kreil-Kiss G. The isolation of N-formylyeine from a polypeptide present in the bee venom II Biochem., Biophys. Res. Commun. 1967. - V. 27. - P. 275-280.

249. Krysteva M. et al. Partial characterization of hyaluronidase bee venom // Toxicon. 1973. -V. 26, N7. - P. 917-918.

250. Kucinchi V., Kafirau R. Disporitive si tehnologii ou o eficieata in obtine-rea renfhuem die albie //Apicult. Rom. 1978. - V. 53, N 12. - S. 16-19:

251. Kudo K., Tu A.T. Characterization of hyaluronidase isolated from Agkistrodon contortrix contortrix venom //Arch. Biochem. Biophys. 2001. - V. 386, N2.- P. 154-162.

252. Kumar V., Rejent T., Elliot W. Anticholinesterase action5 of elapid venoms // Toxicon. 1973; -V. 11, N2.--P. 131-138.266; Lee C. Elapid neurotoxins and their mode of action // Clinical toxicology. 1979.-N3.-P; 457-472.

253. Lee C. Chemistry and pharmacology of polypeptide toxin in snake venom //Ann. Rev. Pharmacol. 1972. -N12. - P. 265-286.

254. Lee C., Chung C., Kamijok K. Cholinesterase inactivation by snake venom // Biochem. I. 1956. -N 62. - P. 582-589.

255. Lee C., Ho C. Mechanisms of neurotoxicity and myotoxicity of phos-pholipases A2 from snake venoms // Toxicol. Lett. 1980. - N 6. - P. 125-126.

256. Liang A., Liu X., Du Y., Wang K., Lin B. Further characterization of the binding of heparin to granulocyte colony-stimulating factor: Importance of sulfate groups Electrophoresis.2008. V. 149, № 2. P. 109 — 112.

257. Lowy P.H., Sarmiento L., Mitchel N.K. Polipeptides minimine and melit-tin frjv bee venom: effects on drosophila // Arch. Biochem. Biophys. 1971. - V. 145, N1.-P. 338-343.

258. Lu L., Xiao M., Brandt I. Hypertheraiia enhances cloning efficiency of purified populations of hematopoetic progenitor cells from normal human bone marrow exposed to multiple cytokines in vitro // Blood. 1991. - V. 78, N10. - P. 297.

259. Malencik D.A., Andtrson S.R. Effects of calmodulin and related proteins on the hemolytic activity of melittin //Biochem. Biophys. Res. Commun. 1985; -V. 130,N l.-P. 22-29.

260. Maraganore J.M., Htinrikson R.L. The lysine-49 phospholipase A2 from the venom of Agkistrodon piscivorus piscivorus. Relation of structure and .function to other phospholipases A2 //J. Biol. Chem. 1986: - V. 261, N 11. - P. 4797-4804.

261. Meyer K., LindH. Venomous vertebrates J I Venomous animals and'their venoms. Acad. Press. London, 1971. - V. 2. - P. 126-132.

262. Meneghelli S., Luoni L., De Michelis M.L Heparin Stimulates a Plasma Membrane Ca2+-ATPase of Arabidopsis thaliana //J Biochem. 2008. V. 143", №. 2. P: 253 259.

263. Menez A., et al. Comparison- of the toxic and antigenic regions- in toxin isolated fromNaja nigricollis venom // Toxicon. 1982: - V. 20, N1. - P. 95-103.

264. Milos M: et al. Microcalorimetric investigation of the interactions in the ternary complex calmodulin-calcium-melittin //J. Biol. Chem. 1987. - V. 262, N 6. - P. 2746-2749.

265. Mitsuhiro O., Kiyoce Z. Biomedical application of snake venom neurotoxins: Acetylcholine receptor and myastenia gravis//J. Toxicol. Toxin Rev. -1998. V. 17, N. 3. - P. 337-359.

266. Mollay C., Kreit G., Berger H. Action of phospholipases on the cytoplasmic membrane of E. coly, stimulation by melittin //Biochem. Biophys. Acta -1976. V. 426, N 2. - P. 317-324.

267. Mosely P., Gapen C., Wallen E. Thermal stress induces epithelial permeability // Amer. J. Physiol. 1994. - V. 267, N 2. - P. 425-434.

268. Nabil Z.I. et al. Mechanism of action of honey bee (Apis mellifera L.) venom on different types of muscles //Hum. Exp. Toxicol. 1998. - V. 17, N 3. -P. 185-190.

269. Nagpal A. et al. Purification, crystallization and preliminary crystallo-graphic analysis of a natural complex of phospholipase A2 fronv Echis carinatus (saw-scaled viper) //Acta Crystallogr. D. Biol. Crystallogr. 1999. - V. 55, N 6. -P. 1240-1241.

270. Nenduszynski I., Atkins E. Conformation of the Mucopolysaccharides // Biochem. I. 1973.-V. 135,N4.-P. 729-735.

271. Nikai T. et al. Beta-fibrinogenase from the venom of Agkistrodon p. pis-civorus //Comp. Biochem. Physiol. 1988. - V. 89, N 3. - P. 509-515.

272. Nishija T. Mechanistic study on membrane basis by bee venom //Phosph., Sulfur, Silicon and Relat. Elem. 1993. - V. 77, N 14. - P. 117-120.

273. Nunez C.E., Angulo Y., Lomonte B. Identification of the myotoxic site of the Lys-49 phospholipase Ai from Agkistrodon piscivorus piscivorus snake venom //Toxicon.- 2001. V. 39, N 10.-P. 1587-1594.

274. O' Brian C.A., Ward N.E. ATP-sensitive binding of melittin to the catalytic domain of protein kinase G //Mol. Pharmacol! 1989. - V. 36, N 3. - P. 355359.

275. Odom T., Ono Y. The time course in the development of hypocalcemia and plasma.lactate accumulation in mature and immature hyperthermic domerstic fowl (Gallus domesticus) // Comp. Biochem. and Phisiol. 1991. - V. 98, N 2. - P. 207-210.

276. Ohki S., Marcus E., Sukumaran D:K. Interaction of melittin with lipid membrfoes // Biochim. Biophys. Acta. 1994. - 1194, N 2. - P. 223-232.

277. Okuda D., Morita T. Purification and characterization of a new RGD/KGD-containing dimeric disintegrin, piscivostatin, from the venom of Ag-kistrodon piscivorus piscivorus //J. Biochem. 2001. - V. 130, N 3. - P. 407-415.

278. Ownby C.L., Colberg T.R., Li Q. Presense of heat-stable hemorrhagic toxins in snake venoms //Toxicon. 1994. - V. 32, N 8. - P. 945-954.

279. Savage B. et al. Binding of the snake venom-derived proteins applagin and echistatin to the arginine-glycine-aspartic site on platelet glycoprotein Ilb/IIIa complex inhibits receptor function //J. Biol. Chem. 1990. - V. 265, N 20. - P. 1766-1772.

280. Sharma H.S., Hoopes P.J. Hyperthermia induced pathophysiology of central nervous system // Int. J. Hyperthermia. 2003. - V. 19. - P: 325-354.

281. Siigur J., Samel M., Tonismagi K. Biochemical characterization of lebe-tase, a direct-acting fibrinolytic enzyme from Vipera lebetina snake venom //Thromb. Res. 1998. - N. 90. - P. 39-49.

282. Subbalakshmi C., Nagaraj R., Sitaram N. Biological actyivities of C-terminal 15-residue syntetic fragment of melittin:. design of an analog with antibacterial activity //FEBS Lett. 1999. - V. 448, N 1. - P. 62-66.

283. Tytell M., Barbe M., Brown I. Induction of heat-shock (stress) protein 70 and its mRNA in the normal and light-damaged rad retina atter Whole body hyperthermia//J. Neurosei Res. 1994. - V. 38,N l.-P. 19-31.

284. Troy N.Y. Blood-Compatible Nanoscale Materials Possible Using Heparin // Immediate Release, 2006. N. 4. - P: 165-168.

285. Trummal K. et al. MALDI-TOF mass spectrometry analysis of substrate specificity of lebetase, direct-acting fibrinolytic metalloproteinase from Vipera lebetina snake venom // Biochim. Biophys. Acta. 2000. - V. 1476, N 2. - P. 331336.

286. Tu Anthony T. Neurotoxins from snake venom //Chimia. 1998. - V. 52, N. l.-P. 56-62.

287. Wang W., Lu Q., Zhang Y. Cobra (Naja naja atra) membrane toxin iso-forms: structure and functions // J. Toxicol. Toxin Rev. 1998. - V. 17, N. 4. - P. 525-532.

288. Wenz B., Burns E.R. Rapid removal of heparin from plasma by affinety filtration // Amer. J. Clin. Patjl. 1991. - V. 96, N. 3. - P. 385-390.

289. Yahav S. et al. Blood system response of chickens to changes in environmental temptrature //Poult. Sci. 1997. - V. 76. - PI 627-633.

Информация о работе

Лушникова, Ольга Викторовна
кандидата биологических наук
Нижний Новгород, 2010
ВАК 03.03.01

Диссертация

Изменение показателей крови и выживаемости крыс при действии зоотоксинов в условиях гипертермии и в постгипертермический период - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Изменение показателей крови и выживаемости крыс при действии зоотоксинов в условиях гипертермии и в постгипертермический период - тема автореферата по биологии, скачайте бесплатно автореферат диссертации

Похожие работы