Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Исследование системы контроля высокоминерализованных водных сред на основе биологических преобразователей

ВАК РФ 03.00.23, Биотехнология

Содержание диссертации, кандидата технических наук, Ивакина, Анна Валерьевна

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Наиболее распространенные тест-объекты, используемые для биотестирования морских сред

1.2. Применение инфузорий в биотестировании 1.2.1. Особенности инфузорий P. caudatum и P. calkinsi

1.3. Методы измерения концентрации инфузорий СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Аппаратура, материалы, реактивы

2.2. Измерения

2.3. Культуры и штаммы микроорганизмов

2.4. Культуральные среды

2.5. Определение этологических характеристик культуры P. calkinsi

2.6. Определение констант роста культуры P. calkinsi

2.7. Модификация прибора «Биотестер»

2.8. Определение чувствительности инфузорий к химическим веществам

2.10. Испытания методики в природных условиях

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Культуры микроорганизмов

3.1.1.Инфузории P. caudatum как тест-объект

3.1.2. Инфузории P. calkinsi как тест-объект

3.2. Исследование кинетики роста культуры P. calkinsi

3.3 Адаптация прибора «Биотестер-2» для измерения концентрации инфузорий типа P. calkinsi

3.4. Исследование чувствительность инфузорий

3.4.1. Определение чувствительности инфузорий P. caudatum к токсичным веществам

3.4.2. Исследование поведения культуры P. calkinsi в зависимости от способа подготовки культуры к анализу

3.4.3. Определение чувствительности P. calkinsi к токсичным веществам

3.5.Испытания методики в природных условиях

4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

4.1. Исследование свойств и культивирование тест-объектов

4.2. Разработка адаптированной модификации прибора «Биотестер»

4.3. Исследование чувствительности инфузорий к химическим веществам

4.4. Испытания методики в природных условиях

ВЫВОДЫ

Введение Диссертация по биологии, на тему "Исследование системы контроля высокоминерализованных водных сред на основе биологических преобразователей"

В последние три десятилетия проблема загрязнения Мирового океана особенно остро привлекла внимание общества. Загрязнение моря путем внесения человеком веществ или энергии в морскую среду повлекло за собой неблагоприятные последствия, такие как нанесение ущерба биологическим ресурсам, опасность для здоровья людей, помех для морских отраслей хозяйственной деятельности, уменьшение пригодности морской воды для использования и ухудшение эстетических достоинств морских ландшафтов [20].

Среди всех возмущающих факторов на первом месте стоит химическое загрязнение, приводящее к нарушению важнейших экологических факторов: изменению общей солености, соотношения главных ионов и ионного состава, т. е. осмотического и рапического факторов. Кроме того, загрязнение Мирового океана меняет характер энергообмена океан-атмосфера и уменьшает испарение с водной поверхности, которое является основным источником влаги на Земле. Механизмы и последствия загрязнения воды можно считать наиболее опасными явлениями, поскольку многочисленные твердые загрязнения могут растворяться в воде или во взвешенном состоянии переноситься на огромные расстояния. Еще одна проблема состоит в том, что вода содержит относительно небольшое количество растворенного кислорода. Даже сильно загрязненный воздух поддерживает квазипостоянную концентрацию кислорода, в то время как вода не обладает таким свойством. Кислород относится к лимитирующим экологическим факторам для большинства организмов в пресной и соленых водах. Все это приводит к необходимости создания системы экологической безопасности, в рамках которой первое место имеет мониторинг фактического состояния гидросферы, критических факторов антропогенного воздействия и прогноз.

В настоящее время большинством специалистов признается, что действующая система мониторинга, основанная на дифференциальном определении концентраций поллютантов и сопоставлении их с ПДК мало эффективна. Во-первых, нормирование базируется на санитарно-гигиенических нормах, т.е. на необходимости защиты для человека. Во-вторых, изучать изолированное действие отдельных химических веществ без учета реальной ситуации недостаточно. Т.о., существующие нормы носят антропоцентрический характер и не могут обеспечить защиту всех объектов природы. Следовательно, возникает необходимость использовать биологический мониторинг, включающий биоиндикацию и биотестирование - способ получить интегральную оценку токсичности водной среды по реакции гидробионтов на загрязнение, наиболее полно отражающую влияние неблагоприятных факторов.

Полную комплексную оценку может дать только сочетание физико-химических методов исследования с биологическими.

Однако, использование биотестовых методов определения токсичности минерализованных вод для морских гидробионтов на практике ограничено целом рядом причин. Во -первых, следует отметить недостаточность нормативной базы для оценки качества морских вод. В последний обобщенный перечень ПДК вредных веществ в воде водообъектов, используемых для рыбохозяйственной деятельности приведено 876 значений концентраций различных веществ, и только 45 из них относятся к морским водам. Использование же ПДК, установленных для пресноводных бассейнов совершенно неоправданно из-за различий в солевой (ионной) устойчивости и существенных геохимических различий. Кроме того, значения ПДК некоторых веществ (например, цинка) в пресной воде ниже, чем средняя концентрация этих веществ в Мировом океане. Во-вторых, недостаточно изучены последствия воздействия токсичных веществ на морские организмы. Например, известно, что воздействия тяжелых металлов может быть различным в зависимости от фона; металлорганические комплексы поглощаются в морской среде в меньшей степени, поэтому токсичность тяжелых металлов, внесенных в одинаковом количестве в разные пробы морской воды, содержащих разное количество комплексообразующих веществ, будет проявляться в разной степени. Кроме того, высокая концентрация солей может стать причиной снижения токсичности ряда соединений. В тоже время морские организмы могут быть более чувствительными к загрязнению, поскольку для открытого моря характерно постоянство условий среды. Еще одним фактором, затрудняющим проведение токсикологических экспериментов, является то, что такие исследования часто являются сложным мероприятием, требующим сложной аппаратуры, дорогостоящих материалов, длительного времени и трудоемкого процесса культивирования тест-объектов.

В связи с этим задача разработки экспрессных биологических тестов с достаточно простым и дешевым способом культивирования организмов для оценки качества морской среды представляется весьма актуальной. При этом многие специалисты отмечают преимущества использования чистых культур микроорганизмов, которых можно получать в больших количествах для массовых опытов и исследовать реакцию на популяционном уровне, и изучение их реакции. по изменению какого-то характерного, хорошо измеряемого показателя, интегрально отражающего нарушения всех важных жизненных функций.

С учетом вышеизложенного в настоящей работе ставилась цель: разработать токсикологическую тест-систему с использованием инфузорий.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

1. Определить структуру разрабатываемой тест-системы и выбрать наиболее удобный тест-объект, обладающий чувствительностью к токсическим веществам, встречающимся в морской среде;

2. Определить характеристики и свойства этого вида, позволяющие использовать его в качестве тест-объекта;

3. Разработать набор методических приемов по культивированию инфузорий и проведению биотестового анализа;

4. Разработать приборное средство для измерения тест-реакции инфузорий;

5. Исследовать возможности применения методики для определения токсичности водных проб.

Научная новизна.

Разработана методика адаптации инфузорий Paramecium caudatum и Paramecium calkinsi к средам с повышенным содержанием соли и выведены клоны инфузорий, адаптированных к низко- и нормальносоленым средам.

Разработан прибор для измерения концентрации инфузорий Paramecium calkinsi.

Разработана методика организации измерения токсичности высокоминерализованных водных сред с использованием выведенных инфузорий и созданного прибора.

Изучена чувствительность инфузорий в присутствии некоторых загрязняющих веществ.

Апробация работы.

Материалы работы доложены на: • международной конференции «Ноология. Экология ноосферы.

Гуманизм», Санкт-Петербург, 1998

• конференциях «Мониторинг и прогнозирование чрезвычайных ситуаций», Санкт - Петербург, 1998, 1999;

• международном конгрессе «Слабые и сверхслабые поля и излучения в биологии и медицине», Санкт-Петербург, 2000.

Публикации.

По теме диссертационной работы опубликовано 8 печатных работ.

Объем и структура работы.

Материалы диссертации изложены на 113 страницах машинописного текста и включают в себя введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, результаты исследований, обсуждение, выводы и приложения. Материал иллюстрирован 10 таблицами и 19 рисунками. Список основной использованной литературы содержит 94 наименований работ отечественных и зарубежных авторов, в том числе 65 российских и 29 иностранных издания.

Заключение Диссертация по теме "Биотехнология", Ивакина, Анна Валерьевна

ВЫВОДЫ

1. Разработаны способы адаптации и получены клоны пресноводных инфузорий Paramecium caudatum , адаптированных к солености среды 5%о и эвригалинных инфузорий Paramecium calkinsi , адаптированных к солености 7-35%о.

2. Для управления процессом культивирования моноксеничной культуры инфузории P. calkinsi использована математическая модель, состоящая из двух дифференциальных уравнений. Опытным путем получены значения коэффициентов этой модели.

3. Инфузории Paramecium caudatum наиболее рационально использовать для анализа низкосоленых вод, a Paramecium calkinsi для нормальносоленых; при этом наиболее рационально применение P. calkinsi в экспоненциальной стадии жизненного цикла.

4. Разработана модифицированная версия универсального концентратометра «Биотестер», позволяющая измерять концентрацию инфузорий Р calkinsi, на созданном приборе проведены экспериментальные исследования сигналов от взвеси инфузорий, подтверждающие основные положения, на которых обосновывалось использование данных инфузорий в качестве тест-объекта.

97

5. На основе разработанной методики проведена серия биотестовых анализов водных проб, включающих растворы модельных токсикантов и природные воды, что показало способность обоих видов инфузорий различать концентрации токсикантов и выявлять источники и направления миграции загрязняющих веществ в водных акваториях.

98

Библиография Диссертация по биологии, кандидата технических наук, Ивакина, Анна Валерьевна, Санкт-Петербург

1. Агамалиев Ф.Г. Инфузории Каспийского моря. - Л.: Наука, 1983. - 230 с.

2. Адаптация у микроорганизмов// пер. с англ. В.А. Шорина. М.: изд. Иностранная литература, 1956. - 534 с.

3. Айвазова Л. Е., Гроздов А. О., Соколова С. А., Новосадова Т. Г., Трофимова М. Г. Метод биотестирования водной среды с использованием инфузорий//Методы биотестирования вод. -Черноголовка, 1988.- С. 37-42.

4. Алексперов И.Х. Токсичное влияние некоторых тяжелых металлов на модельные сообщества инфузорий Каспия// Инфузории в биотестировании. -СПб., 1998.- С. 66.

5. Богомолова Н. А. Экспериментальные исследования над сво-бодноживущими и паразитическими инфузориями: Автореф. дис. канд. биол. наук. Л., 1952.- 16 с.

6. Бойкова Э. Е. Простейшие биомониторы морской среды. - Рига: Зинатне, 1989. - 257 с.

7. Брагинский Л. П. Гидробиология Дуная и лиманов Северо- Западного Причерноморья// Сб.науч.тр. Киев: Наукова думка, 1986.- 155с.

8. Булатов М.И., Калинкин И.П. Практическое руководство по фотометрическим методам анализа.-Л. :Химия.- 1986.-431 с.99

9. Бурковский A.JI. Биологический контроль за токсичностью многокомпонентных сточных вод на химических предприятиях методом рыбной пробы. -Труды ГосНИОХР, 1974. -Т. 38. С. 127-129.

10. Бурковский И.В. Экология свободноживущих инфузорий. М., 1984. -208с

11. Васильев Л.Ф. Оценка интегральной токсичности морских и речных вод// Новое в геологии Мирового океана. СПб.: ВНИИОкеанология,.- 1999. -С. 6-8.

12. Ващенко М.А., Лучшева Л.Н. Оценка экологической ситуации в бухте Алексеева (залив Петра Великого Японского моря) по биологическим и биохимическим показателям.//Биология моря.- 1999. № 2.- С. 36-43.

13. Виноградова А.К. Токсичность высокоминерализованных стоков для морских гидробионтов. Киев: Наукова Думка. -1986. - 169с.

14. Владимиров A.M., Ляхин Ю.И., Матвеев Л.Т., Орлов В.Г. Охрана окружающей среды. Л.: Гидрометеоиздат. - 1991. - 230с.

15. Виноходов Д.О. Токсикологические исследования кормов с помощью инфузорий. -СПб. 1995.- 80 с.

16. Воденичаров Д. Г., Атавина Т. Г., Стом Д. И. Метод биотестирования по остановке движения зооспор хлорококковых// Методы биотестирования вод.-Черноголовка.- 1988.- С. 83-84.100

17. Гельцер Ю. Г. Почвенные простейшие как тест для изучения биологически активных веществ// Вестник Московского университета.- 1967.-№2.-С. 31-39.

18. Гельцер Ю. Г., Гептнер В. А. Влияние пестицидов на почвенных простейших//Протозоология. -1980. Вып. 5. - 1980. - С. 143-153.

19. Герлах С.А. Загрязнение морей. Диагноз и терапия. Л.:Гидрометеоиздат. -1985. 221с.

20. Гольд З.Г., Мучкина Е.Я. Парамеции как тест-объекты при определении токсичности сточных вод// Биологические исследования в вузах Красноярского края. Красноярск. - 1977. - С. 53-54.

21. Гроздов А. О., Патин С. А., Соколова С. А. Биотестирование природных и сточных вод с помощью культуры простейших// Гидробиологический журнал. 1981. - Т. 17. - С. 69-71.

22. Гроздов А.О., Соколова С.А Оценка степени загрязнений морской среды с помощью биотестирования// Экологические аспекты химического и радиоактивного загрязнения водной среды. -М.:- 1983.-С. 97-103.

23. Грин Н., Стаут У., Тейлор Д. Биология.-М.: Мир, 1996.-Ч.1 .-367с.101

24. Данильченко О. П., Тушмалова Н. А., Бресткина М. Д. Экспресс-методы оценки качества природной и сточной воды по функциональному состоянию инфузорий спиростом// Методы биотестирования качества водной среды.-М.- 1989.-С. 40-46.

25. Де-Ваарт Ж. Устойчивость различных простейших к токсинам бактериального происхождения// Успехи протозоологии: Тез. докл. III международный конгресс протозоологов. JL, 1969. - С. 198.

26. Долгов В. А. Методические рекомендации для использования экспресс-метода биологической оценки продуктов и кормов.- М.: Б.и., 1990.-10с.

27. Ждан-Пушкина С. М., Хасанова JI. А. Некоторые аспекты роста культур микроорганизмов. Уфа, 1991. 126 с.

28. Жмур Н.С. Вопросы мониторинга источников загрязнения природных вод: состояние, условия принятия решений, перспективы// Экологическая химия. 1998. -Вып.З. - С. 191-199

29. Захаров И.С. Метод и аппаратура для измерения концентрации инфузорий в медико-экологических исследованиях. Автореф. дис. канд. техн. наук.- СПб., 1996.- 14 с.

30. Захаров И.С. Компактный оптический датчик для измерения концентрации живых инфузорий// Инфузории в биотестировании . СПб., 1998. - С. 53-54102

31. Захаров И.С., Пожаров А.В., Папутская Н.И. Качество воды -качество жизни.// Мониторинг.-1995.-№1.- С. 39-42

32. Ивакина А.В. Биотестовая приборная методика оценки токсичности высокоминерализованных водных сред// Мониторинг и прогнозирование чрезвычайных ситуаций. СПб., 1998.- С.173-174

33. Ивакина А.В. Использование инфузорий P. calkinci для оценки интегральной токсичности высокоминерализованных водных сред// Мониторинг и прогнозирование чрезвычайных ситуаций. СПб., 1999.- С.56-57.

34. Ивакина А.В. Применение биотестового метода для оценки интегральной токсичности высокоминерализованных водных сред// Новое в геологии Мирового океана. СПб., ВНИИОкеанология, 1999. - С. 25.

35. Израэль Ю.А., Цыбань А.В. Антропогенная экология океана. JL, 1985.-240 с.

36. Илющенко В.П. Быстрое тестирование токсичности, основанное на определении респираторной активности сперматозоидов и (или) инфузорий// Экология. 1995. - №1. - С. 63-67.103

37. Ирлина И. С. Неспецифическая устойчивость тетрахимен в стационарной фазе роста культуры// Современные проблемы протозоологии: Тез. Докл. Четвертого съезда Всесоюзного общества протозоологов. -Л., 1987.263 с.

38. Кобаяси Н. Биологический метод оценки загрязнения морской воды.// Сэйтай кагаку, Ecol. Chem., 1980. N 1. - С. 13-20

39. Кокова В. Е. Непрерывное культивирование беспозвоночных. Новосибирск: Наука, 1982. 168 с.

40. Кокова В.Е., Любчик Я.Г., Шелемотов С.А. Методика непрерывного культивирования парамеций как тест-объекта для индикации загрязнения воды на приборе «Биотестер». Красноярск, 1991. 96 с.

41. Контроль химических и биологических параметров окружающей среды/Под ред. проф. Л.К. Исаева,- СПб.: Экометрия, 1998. -730с.

42. Кондратьев А.Я. Экологический мониторинг на морском побережье северо- востока России. Магадан, 1987. 108с.

43. Леткевич И. Ф., Плященко С. И., Бондаренко Т. В. Токсикологическая оценка материалов для полов// Ветеринария. -1991. №1. - С. 17-20.

44. Лозина-Лозинский Л.К., Быченкова В.Н., Заар Э.И. Влияние на инфузорий физичеких условий, имитирующих среду на поверхности планеты Марс// Проблемы космической биологии. М., 1981.- Т. 16. С. 450-457.104

45. Мазманиди Н.Д., Котов A.M., Мазманиди Е.Н., Сметанина О.В. Рыбы мониторы состояния морской среды // Биоиндикация и биотестирование природных вод. Тез. докл. всесоюз. конф. - Ростов-на- Дону, 1986

46. Малиновская Т.М. Мониторинг прибрежных вод бухты Крабовая (остров Шикотан) с использованием бурой водоросли Fucus evfnesctrs.// Биология моря.-1999. № 2.- С. 35-41.

47. Предельно допустимые концентрации наиболее распространенных загрязняющих веществ в воде морских водоемов: Научный отчет по теме №36 ВНИИ морского рыбного хозяйства и океанографии. М., 1978. -78с.

48. Орлова А.Ф. Длительная модификация у P. caudatum и Р.

49. Multimicronucleatum// Зоологический журнал. 1941. - №20.- С. 341.

50. Патин С.А. Влияние загрязнения на биологические ресурсы и продуктивность Мирового океана. М., 1979. 242 с.

51. ПНД ФТ 14.1:2:3:4.2-98. Анализ воды на токсичность. Методика по хемотаксической реакции инфузорий. М., 1998

52. Пожаров А.В., Гольцова В.В., Кулангиева JI.B. Опыт использования «Биотестера -2» для определения интегральной токсичности морской воды// Инфузории в биотестировании : Тез.докл. междунар. науч-практ. конф. СПб., 1998.-С.148-150105

53. Пожаров А.В., Жмур Н.С. Нормирование токсикологических показателей на основе приборного биотестового метода// Инфузории в биотестировании: Тез. докл. междунар. науч-практ. конф. СПб., 1998, С. 37-38

54. Саутин С. Н., Пунин А. Е. Методы интегрирования жестких систем дифференциальных уравнений. JL, 1987. 77 с.

55. Скибенко В.В. Методы и устройства для определения подвижности микроорганизмов при оценке активности химических соединений.// Обзорная инф. ЦБНТИ. -М. -1082.- Вып.6.- С.86-92.

56. Строганов Н.С. Токсическое загрязнение водоемов и деградация водных экосиситем// Общая экология, биоценология, гидробиология.- 1976.-Т.З.-С. 5-47.

57. Ткаченко В.Н., Еманов B.C., Третьякова Л.В., Чернина У.Ю. К вопросу о биотестировании отходов, сбрасываемых в морскую среду// Биоиндикация и биотестировакие природных вод: Тез. докл. всесоюз. конф. -Ростов-на- Дону, 1986. -С. 181

58. Тушмалова Н. А., Данильченко О. П., Бресткина М. Д. Метод биотестирования природных и сточных вод по уровню двигательной активности инфузории спиростом// Методы биотестирования вод.- Черноголовка, 1988, С. 44-46.

59. Флейшман Б.С. Мониторинг океана. М., 1986.- 250 с.106

60. Шлыгин И. А., Ткаченко В.Н., Гончаров А.А. Вопросы биотестирования в связи со сбросом отходов в морскую среду// Биоиндикация и биотестирование природных вод: Тез. Докл. Всесоюз. Конф. Ростов-на- Дону, 1986. -С.186.

61. Штрапов А. А., Ханевич М. Д., Ирлина И. С. Использование инфузорий Tetrahymena pyriformis для определения уровня токсемии у больных// Лабораторное дело. 1990. - № 8. - С. 72-74.

62. Христофорова Н.К. Биоиндикация и мониторинг загрязнения морских вод тяжелыми металлами. Л.: Наука, 1989. -157с.

63. Экологический мониторинг. Методы мониторинга.- Нижний Новгород, 1995.-2 ч.

64. Этлин С.Н., Лахонина Г.М., Мадоян А.Г. Вопрсы теории и практики применения простейших в экологотоксилогических исследованиях// Экология морских и пресноводных простейших.- Ярославль. 1989. - 155 с.

65. Berk Sh.C. Effects of cadmium and copper on chemotaxis of marine and freshwater ciliates// Bull. Environmental Cjntamination. Toxicol. 1985.-Vol. 34.,№6, p. 897-903.

66. Bijl J., Dive D., Van Peteghem C. Comparison of some bioassay methods for mycotoxin studies// Environmental pollution (Series A) 26. -1981. -p. 173-182.107

67. Burbanck W. D., Spoon D. M. The use of sessile ciliates collected in plastic Petri dishes for rapid assessment of water pollution// The journal of protozoology.- 1967 v. 14.- p. 739-744.

68. Butzel H. M., Jr., Brown L. H., Martin W. В., Jr. Effects of detergents upon electromigration of Paramecium aurelia.// Physiological zoology. -1960. v. 33.-p. 39-41.

69. Buznicov G.A., Jokanovic M, Rakic L. Sea urchin empryos and larnae as the model for screening and detailrd study of toxic substances// Toxicology Letters, supplement 1/95.- 1998,. -p. 240

70. Chapman G. A., Denton D.L. Short-time methods for estimating the chronic toxicity of effluents and receiving waters to west coast marine and estuarine organisms//U.S. EPA, 1995

71. Dinnel Paul A. Improved methodology for a sea urchin sperm cell bioassay for marine waters.// Arch. Environment Contamination and Toxicology. -1987.-NL-p.23-32

72. Dive D., Moreau S., Cacan M. Use of a Ciliate Protozoan for fungal toxins studies// Bulletin of environmental contamination & toxicology. 1978. - p. 490-495.

73. Dive D., Robert S., Angrand E., Bel C., Bonnemain H., Brun L., Demarque Y., Le Du A., Bouhouti El R., Fourmaux M. N., Guery L., Hanssen O.,108

74. Murat M. A bioassay using the measurement of the growth inhibition of a ciliate protozoan: Colpidium campilum Stokes//Hydrobiologia. 1989. - p. 181-188.

75. Frish J.A. The experimental adaptation of Paramecium to sea water// Arch. Proteisenk. 1939. - p.38.

76. Gay J.S., Ventilla RJ. Growth rates of sediment living marine protozoan as a toxicity indicator for heavy metals// AMBIO. - 1973.- Vol. 2.- №4.-p.118-121.

77. Hill D. L. The biochemistry and physiology of Tetrahymena. London, 1972.-230 p.

78. Kimball K. D., Levin S. A. Limitations of laboratory bioassays: the need for ecosystem-level testing//Bioscience. 1985. - v. 35. - p. 165-171.

79. Komala Z. The effect of some pesticides on Paramecium aurelia// Folia biologica. 1975.-p. 231-243.

80. Larsen J. The influence of growth phase and culture conditions of Tetrahymena on effects of cadmium// Toxicology. 1989. - v. 58 -p. 211-223.109

81. Lecloux A. Risk assesment for the marine environment// Toxicology Letters, supplement 1/95. 1998. - p.15.

82. Marine organisms susceptibility to pollution. Effect studies in an ecological context./ Sepigstad Bjorn// Clean Seas'91.: Conf., Valletta. 1991.- p. 114

83. Mills W.L. Water quality bioassay using selekted protozoa// J. of Environmental Science and Health. -1976. №7. - p. 491-500.

84. Parker I.G. Toxic effect of heave metals upon cultures of Uronema marinum// Marine Boil.- 1979.- Vol. 54,- № 1. p. 17-24.

85. Pauli W., Berger S. Sensory mechanisms of a ciliated protozoan as a tool in pollution monitoring// European journal of protistology. -1992. v. 28. - p. 352-353.

86. Persoone G., Vattersport C. Influence of inorganic and organic pollutants on the rate of reproduction of a marine ciliate, Euplates vannus// Rev. Inter. Oceanographic Med. 1975.- Vol. 35. - № 8. - p. 125 -151.

87. Proper G., Garver J. C. Mass culture of the Protozoa Colpoda steinii// Biotechnology and bioengineering. 1966, v. VIII. - p. 287-296.

88. Snell Terry W., Persoone Gnido Acute toxicology bioassay using rotifers. A test for brancrish and marine environments with Brachionus phcatilis.// Aquan toxicology.- 1989.- 14, N1.- p. 65-80110

89. Stoecker P.K., Sunda W.G Effects of copper and zink on two planktonic ciliaters// Marine Biol. -1986. Vol. 92. - №1. - p.21-29

90. Sunila I. Histopathological effects of environmental pollutants on common mussel, Mutilus edulis L. (Baltic sea), and their application in marine monitoring// Dept. of Zoology.- 1987

91. Water pollution control federation. Literature reviews.-1996.- № 4 p. 102-110; 1997. -№ 4. p. 98- 109.

92. Wichterman R. The biology of Paramecium. New York and London: Plenum Press, 594 p.1.l