Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Исследование роли различных типов серотонинорецепторов в регуляции сокращений желудка

ВАК РФ 03.03.01, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Исследование роли различных типов серотонинорецепторов в регуляции сокращений желудка"

На правах рукописи

КУЧУК Андрей Владимирович

ИССЛЕДОВАНИЕ РОЛИ РАЗЛИЧНЫХ ТИПОВ СЕРОТОНИНОРЕЦЕПТОРОВ В РЕГУЛЯЦИИ СОКРАЩЕНИЙ ЖЕЛУДКА

4843103

03.03.01 -физиология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

J ° " г.

Москва 2011

4843103

Работа выполнена на кафедре нормальной физиологии ГОУ ВПО Российского государственного медицинского университета Минздравсоцразвития России, Москва.

Научный руководитель -

доктор биологических наук, кандидат медицинских наук, профессор

Виктор Михайлович Смирнов

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Юматов Бвгеннй Антонович

ГОУ ВПО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздравсоцразвития России

доктор биологических наук Тройская Наталия Сергеевна

ГУЗ «Научно-исследовательский институт скорой помощи им. Н.В. Склифосовского Департамента здравоохранения г. Москвы

Ведущая организация:

Учреждение Российской Академии Наук Институт Высшей Нервной Деятельности и Нейрофизиологии РАН

Защита состоится » 011г. в-/^часов на заседании диссертационного

совета Д. 212.203.10 при Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Российский университет дружбы народов» (адрес: 117198, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 8.)

С текстом диссертации можно ознакомиться в научной библиотеке при Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Российский университет дружбы народов» (адрес: 117198, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 6.)

Ученый секретарь

диссертационного совета

доктор медицинских наук, профессор

Н.В. Ермакова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Вопросы регуляции функций желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) имеют важное теоретическое и практическое значение, поскольку нарушения регуляции деятельности любого отдела ЖКТ может сопровождаться тяжелыми патологическими последствиями. Например, недостаточная выработка соляной кислоты ведет к ухудшению переваривания белков, а избыточная выработка соляной кислоты способствует развитию язвенной болезни. Снижение моторики также ведет к ухудшению переваривания содержимого и химуса, к интоксикации организма. Известно, что парасимпатические (холинергические) нервы стимулируют моторику и секрецию ЖКТ, а симпатические (адренергические) тормозят их (Н. А. Агаджанян, В. М. Смирнов, 2009; А. А. Кромин, 2010; В. M Покровский, Г. Ф. Коротько, 1998).

Однако обнаружены и противоположные влияния симпатического и парасимпатического нервов. Так, еще в середине XIX в. Пфлюгер (1857, цит. по Богач П.Г., 1974) обнаружил, что раздражение большого чревного нерва может вызвать не только торможение, но иногда и усиление сокращений ЖКТ. Позже это подтвердили и другие авторы (J. Malmegjac, et al., 1940; J. Gillespie, В. Mackenna, 1961; Y. Nakazato, et al., 1970; D. Delbro, В. Lisander 1980; E. Bathon, H. Ormsbee, 1980). Возбуждающее влияние чревных нервов на моторику ЖКТ лучше выявляется на фоне покоя органа (В. М. Бехтерев, Н. Л. Миславский, 1888 - 1889; С. Van Ham, 1963) или в условиях действия симпатолитиков (Р.В. Уткина, 1956).

Существующее в настоящее время общепринятое представление (В. И. Бадиков, 2000; В. М. Покровский, и др., 1998) о зависимости ответной реакции органа от исходного его функционального состояния и силы раздражения нерва, изучено недостаточно. Результаты исследований В. М. Смирнова (1989, 1990) показали, что двоякое влияние нерва при его раздражении определяется не исходным состоянием органа, а наличием в составе нерва волокон различной медиаторной природы: в составе симпатического нерва -парасимпатических волокон, а в составе парасимпатического нерва - симпатических волокон.

В частности, при изучении механизмов регуляции сокращений желудка авторы (В. М. Смирнов, А. Э. Лычкова, Д. С. Свешников, И. Л. Мясников 1986 - 2008гт.) обнаружили, что раздражение симпатического нерва в грудной полости у собак вызывает, как правило (до 90% случаев), не торможение, а усиление сокращений желудка. Авторы получили убедительные доказательства наличия в составе большого чревного (симпатического, адренергического) нерва серотонинергических нервных волокон, усиливающих сокращение желудка. Причем, количество серотонинергических волокон в составе симпатического нерва, согласно гистохимическим исследованиям в несколько раз больше, чем адренергических (В. М. Смирнов, С. Ф. Волынцева, 1995).

Однако с каким типом серотонинорецепторов образуют преганглионарные, а с каким -постганглионарные нервные волокна эти авторы судили только по имеющимся противоречивым данным литературы (J. Fozard, 1987, 1990; E. Zifa, G. Fillion, 1992; S. Watts, D. Сох, 1994; R. Glennon, 1990; T. Martin, et al., 1994). Свои опыты эти авторы выполняли на полосках и вне связи с наличием серотонинергических нервов в организме, поскольку о существовании этих нервов указанные авторы не подозревали.

Кроме того, для более глубокого изучения серотонинершческой нервной системы и подтверждения ее наличия в организме необходимо выяснить - вызывает ли экзогенный серотонин такие же эффекты желудка, как и раздражение серотонинергического нерва. Необходимо знать также - выключается ли действие серотонина на желудок теми же блокаторами, которые выключают стимуляторное влияние на желудок серотонинергического нерва.

Цель исследования - изучить влияние серотонина на сокращения желудка и функциональную организацию серотонинергического нерва.

Задачи исследования.

1. Выяснить, вызывает ли экзогенный серотонин такие же моторные реакции желудка, как и раздражение серотонинергического нерва.

2. Определить, участвуют ли адрено- и холинергические механизмы в реализации егамуляторного влияния серотонина на сокращения желудка.

3. Исследовать роль разных типов нейронных и гладкомышечных серотонинорецепторов в усилении сокращений желудка.

Научная новизна. Впервые изучалась функциональная организация серотонинергического нерва, усиливающего сокращения желудка - с помощью какого типа серотонинорецепторов на нейронах вегетативных ганглиев образуют синапсы преганглионарные серотонинершческие нервные волокна и с какими эффекгорными рецепторами образуют синапсы постганглионарные волокна на гладкомышечных клетках желудка. При этом вначале установили, что экзогенный серотонин вызывает такие же сгимуляторные эффекты желудка, как и раздражение серотонинергического нерва. Показали также, что адренергические и холинергические механизмы ослабляют стимулирующее действие серотонина на желудок. Преганглионарные серотонинергические волокна образуют синапсы, согласно нашим данным, с бИТу -рецепторами нейронов вегетативных ганглиев, а постганглионарные - с 5НТ2,4-реце1порами волокон гладких мышц желудка. Активация 5НТ2,4-рецепторов гладких мышц желудка ведет к возбуждению миоцитов и усилению со!фащений желудка.

Научно-практическое значение работы.

Научное значение работы заключается в том, что получены дополнительные экспериментальные данные, свидетельствующие о том, что в организме имеется серотонинергический нерв, усиливающий сокращения желудка. Согласно нашим новым данным преганглионарные серотонинергические нервные волокна образуют синапсы на нейронах вегетативных ганглиев посредством 5НТ13-рецепторов, а постганглионарные волокна на гладких мышечных волокнах желудка - посредством бЫТ^-рецепторов, активация которых вызывает усиление сокращений желудка, что существенно дополняет современные представления о механизме регуляции моторики желудка.

Практическое значение работы состоит в том, что результаты наших исследований могут быть основой для разработки новых фармакологических препаратов и использования их в лечебно-профилактической деятельности врачей.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 3 печатные работы, из них 1 в изданиях рекомендованных ВАК РФ.

Апробация работы. Диссертация апробирована на заседании кафедры нормальной физиологии ГОУ ВПО Российского государственного медицинского университета Минздравсоцразвития России.

Структура и объем диссертации: диссертация состоит из общей характеристики работы, обзора литературы, главы «материалы и методы», «результаты собственных исследований» и «обсуждение результатов», практических рекомендаций и библиографического списка. Материалы диссертации изложены на 108 страницах машинописного текста, иллюстрированы 28 рисунками и 7 таблицами. Библиографический список содержит 128 источников, 67 из которых российских и 61 иностранных авторов.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Исследование провели в 17 сериях опытов на крысах линии Вистар, • использовались половозрелые лабораторные животные, обоего пола, массой тела 250-450 г, Изучено 394 реакции на введение препаратов: серотонина, NAS-181, SB 204741, MDL 72222, RS 39604, миансерина проксодолол, доксазозин, пропранолол, пентамин и бускопан.

Серия Число опытов

С серотонином внутриартериально 11

С серотонином 0,05 мг/кг 28

С серотонином 0,1 мг/кг 36

С серотонином 0,15 мг/кг 16

Опыты с одновременной блокадой а- и р-адренорецепгоров и № и М- 28 холинорецепторов

С проксодололом (2 серии) 32

С доксазозином 8

С пропранололом 10

Спентамином 15

С бускопаном 13

С миансерином 9

СЫАБ-Ш 7

С БВ 204741 0,1 мг/кг 9

С вВ 204741 0,05 мг/кг 8

С МБЬ 72222 9

С ЯЭ 39604 9

Всего 208

Опьгш проводили натощак, в условиях хирургической стадии нембуталового наркоза, ИВЛ и двухсторонней ваготомии. В ходе экспериментов, с целью подтверждения блокады холинорецепторов, выполняли контрольные раздражения периферического отрезка правого блуждающего нерва. В правую сонную артерию осуществляли введение 0,9 % NaCl, растворов серотонина и его антагонистов. Другие препараты вводили подкожно. О сократительной деятельности желудка судили по показателям регистрации давления в его полости и ЭМГ.

Механическую активность желудка исследовали с помощью манометрических датчиков DC ASDXAVX001PG7A5 0 - 50 мм вод.ст. (Honeywell, США), соединенных с баллончиком, помещенным в просвет желудка. Электрическую активность продольного слоя гладких мышц антрального отдела желудка регистрировали с помощью электрода и усилителя BioAmp ML132 (Adinstruments, Австралия), соединенного с электродом, сигнал ЭКГ поступал от поверхностных электродов на одноканальный усилитель оригинальной конструкции. Сигналы от перечисленных устройств поступали на каналы АЦП Maclab 8е (Adinstruments, Австралия), соединенного с компьютером Macintosh Performa 6400/180. Обсчет полученных данных учитывал усредненные показатели внутриполостного давления, а также усредненное значение амшплуды медленных электрических волн продольного мышечного слоя.

Статистическую обработку данных, построение графиков производили с помощью бесплатных компьютерных программ Stat Plus и Plainstat. Критическое значение уровня значимости принималось равным 5%(р< 0,05).

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ РАЗЛИЧНЫХ ДОЗ СЕРОТОНИНА НА МОТОРИКУ ЖЕЛУДКА

Эффекта серотонина адипината на моторную активность желудка изучили в трех сериях опытов. При подборе оптимальной дозы серотонина путем многократного внутриартериального его введения для вызова хорошо выраженного стимуляторного эффекта, использовали три дозы: 0,05; 0,1; 0,15 мг/кг.

В первой серии на 28 животных, изучили 56 реакций. Реакции распределились следующим образом: у 6 животных наблюдались тормозные ответы, у 3 животных реакция отсутствовала вообще (табл. 1).

Таблица 1. Повышение гидростатического давления в полости желудка при

Дозы серотонина адипината (мг/кг) Фон до введения серотонина (мм рт.ст.) Результат на введение серотонина (мм рт.ст.) Прирост щцростатического давления (%)

0,05 11,74 ± 3,23, р< 0,05 13,28 ± 3,02, р< 0,05 13%± 1,4, р< 0,05

ОД 11,52 ± 3,32, р< 0,05 14,53 ± 2,67, р< 0,05 26%± 1,1, р <0,05

0,15 11,71 ± 3,28, р< 0,05 14,9 ± 2,32, р< 0,05 27%± 1,1, р <0,05

Во второй серии опытов, поставленных на 36 животных, изучили 72 реакции на серотонин, который вводили в дозе 0,1 мг/кг. Торможение наблюдалось лишь у двух животных, причем давление незначительно уменьшалось. У остальных же 34 животных из 36-ти наблюдались только стимуляторные ответы (см. табл. 1)

В третьей серии экспериментов на 16 животных изучили 32 реакции на серотонин, который вводили в дозе 0,15 мг/кг. Реакции также отличались значительной продолжительностью. У всех 16-ти животных наблюдались только стимуляторные реакции, их выраженность в этой серии была такой же, как и во второй серии (см. табл. 1).

Таким образом, результаты опытов, показали (как мы и полагали), что экзогенный серотонин вызывает примерно такие же стимуляторные эффекты желудка, как и раздражение симпатического нерва.

Принимая во внимание частоту встречаемости и степень выраженности стимуляторных реакций (при дозе 0,05 мг/кг стимуляторный эффект был небольшой - прирост давления в полости желудка составлял 13%, а при дозе 0,1 и 0,15 мг/кг стимуляторный эффект был хорошо выражен и составлял 26% и 27% соответственно, т.е. был одинаковым) в дальнейших экспериментах использовали дозу серотонина, равную 0,1 мг/кг.

Для получения более надежных результатов необходимо было заблокировать холино- и адренергические механизмы.

ИССЛЕДОВАНИЕ ВОЗМОЖНОЙ РОЖ АДРЕНО- И ХОЛИНЕРГИЧЕСКИХ МЕХАНИЗМОВ В ОСУЩЕСТВЛЕНИИ ДЕЙСТВИЯ СЕРОТОНИНА

Опыты с одновременной блокадой а- и Р-адренорецепторов и 14- и М-холинорецепторов.

Вначале, исследовали эффекты действия самого серотонина в дозе 0,1 мг/кг у 28 1фыс без каких-либо других фармакологических препаратов, кроме наркоза, при этом лишь у одного

животного была выявлена слабая тормозная реакция, у остальных 27 животных выявили стимуляторные ответы (табл. 2).

Таблица 2. Выраженность стимуляторных реакций желудка при внутриартериальном введении серотонина интактным животным и на фоне действия блокаторов а- и (3-

адренорецепторов и блокады N- и М- холино] зецепторов.

Название препарата Фон до введения препаратов (мм рт.ст.) Результат на введение препаратов (мм рт.ст.) Фон до введения серотонина (мм рт.ст.) Результат на введение серотонина (мм рт.ст.) Прирост гидростат ического давления (%)

Комбинация доксазозина, пропранолола, пенгамина и бускопана 10,03 ± 2,02 р < 0,05 13,59 ±2,32 р < 0,05 13,59 ±2,32 р < 0,05 21,71 ±2,13 р < 0,05 59,7 %± 1,8, р < 0,05

Затем, этим же животным одновременно вводили адрено- и холиноблокаторы (доксазозин, пропранолол, пентамин и бускопан). Показатели моторики после введения комбинации препаратов заметно увеличились (см. табл. 2).

Завершали данные эксперименты введением серотонина на фоне продолжающегося действия адрено- и холиноблокаторов. У 27 животных введение серотонина (0,1 мг/кг) вызывало выраженные стимуляторные ответы (см. табл. 2).

Результаты оказались совершенно неожиданными - серотонин усиливал моторику желудка у этих крыс значительно больше (на 59,7%), чем у интакгных животных (на 26%), т.е. адрено- или холинорецепторы препятствовали стамуляторному влиянию серотонина на сокращения желудка. Для установления причин усиления эффектов серотонина были поставлены несколько серий опытов с раздельным использованием блокаторов адрено- и холинорецепторов.

Исследование возможной роли адренорецепторов в реализации стимуляторных эффектов серотонина изучили в четырех сериях опытов.

Эксперименты с проксодололом - блокатором а- и (З-адренорецепторов. Изучили 16 реакций на 16-ти крысах. Через 10 минут после инъекции проксодолола, введение серотонина вызывало значительное усиление сокращений и желудка (см. табл. 3).

Поскольку совместная блокада а- и Р-адренорецепторов способствовала увеличению амплитуды и продолжительности стимуляторных реакций, предприняли попытку изучения вклада а-, и Р-адренорецепторов по отдельности, опыты проводили по аналогичной схеме.

Возможную роль а-адренорецепторов в реализации стимуляторных эффектов серотонина исследовали в опытах на 8 животных с доксазозином - блокатором а-адренорецепторов (1 мг/кг). Введение серотонина спустя 10 минут после инъекции адреноблокатора у всех животных сопровождалось усилением моторики (см. табл. 3).

Предполагаемую роль р-адренорецепторов в реализации стимуляторных эффектов серотонина изучали в отдельной серии на 10 животных. Пропранолол - р-адреноблокатора (1 мг/кг) вводили интактным животным. Спустя 10 минут исследовали у этих же животных реакции желудка на введение серотонина в условиях действия пропранолола (0,1 мг/кг). У всех животных отмечалось ярко выраженное усиление моторики желудка (см. табл. 3).

Таблица 3 Абсолютный прирост гидростатического давления в полости желудка, вызванный введением серотонина (0.1 мг/кг) на фоне действия различных адреноблокаторов.

Адреноблокатор Фон до введения препаратов (мм рт.ст.) Результат на введение адреноблока торов (мм рт.ст.) Фон до введения серотонина (мм рт.ст.) Результат на введение серотонина (мм рт.ст.) Прирост гидростатич еского давления (%•)

Проксодолол - а- и Р-адреноблокатор 11,54 ±2,14 р < 0,05 11,53 ±3,34 р < 0,05 11,73 ±3,27, р < 0,05 18.23 ± 1.87 р < 0,05 58%± 1,02, р < 0,05

Доксазозин - а-адреноблокатор 12.34 ±1.26 р с 0,05 12.02 ±2.34 р < 0,05 12,02 ±2,34 р < 0,05 19.43 ±1.14 р < 0,05 62%± 1,1, р < 0,05

Пропранолол - р-адреноблокатор 10.03 ±2.02 р < 0,05 13.47 ±1.74 р < 0,05 13,47 ± 1,74 р < 0,05 25.43 ±4.14 р < 0,05 89%± 1,5, р < 0,05

Блокада а- и Р- адренорецепторов порознь или совместно значительно усиливала сократительный эффект желудка на последующее введение серотонина. Причем наиболее значительное усиление сокращений желудка наблюдалось при введении серотонина на фоне действия блокатора Р-адренорецепторов пропранолола (на 89%, без фармакологических препаратов - на 26%). Что касается, более слабого стимулирующего действия серотонина на сокращения желудка при интакгных адренорецепторах, это объясняется (как мы полагаем) наличием пресинаптических серотонинорецепторов на симпатических (адренергических) нервных окончаниях.

Таким образом, мы установили, что блокада адренорецепторов не только не препятствует, а напротив, способствует развитию стимуляторных эффектов, вызванных введением серотонина. Наиболее эффективной в этом плане была блокада р-адренорецепторов пропранололом.

Роль возможного участия холинорецепторов в реализации стимуляторных реакций на серотонин изучили в двух сериях опытов.

Исследование возможного участия ^холинорецепторов в осуществлении влияния серотонина. Опыты выполнили на 15 животных, зарегистрировали 30 реакций на серотонин на фоне действия пентамина - блокатора К-холинорецепторов (1 мг/кг), (табл. 4).

Придерживаясь стандартной схемы, спустя 10 минут после инъекции ганглиоблокатора вводили серотонин. У всех 15 животных наблюдались стимуляторные ответы. Элеюрическая же активность практически не изменялась (табл. 4).

Таким образом, М-холинорецепторы препятствуют реализации стимуляторных эффектов серотонина.

С целью изучения роли М-холинорецепторов в реализации стимуляторных влияний, вызываемых серотонином, поставили эксперимента с М-холиноблокатором бускопаном.

Эксперименты с М-холиноблокатором бускопаном. Изучили 26 реакций желудка в опытах на 13 животных. Как и в предшествующих случаях с №холиноблокаторами, вначале изучили влияние самого бускопана на фоновую моторику, а затем, спустя 10 минут животным вводили серотонин в дозе 0,1 мг/кг.

Далее в этом же опыте на фоне продолжающегося действия бускопана вводили серотонин (0,1 мг/кг), что вызывало ярковыраженные стимуляторные реакции (см. табл. 4).

Таблица 4. Прирост гидростатического давления в желудке, вызванный введением _серотонина (0.1 мг/кг) на фоне действия пентамина и бускопана._

Препарат Фон до введения препаратов (мм рт.ст.) Результат на введение холиноблокат оров (мм рт.ст.) Фон до введения серотонина (мм рт.ст.) Результат на введение серотонина (мм рт.ст.) Прирост гидростатическ ого давления (%)

Пентамин-И-холиноблокатор 10.23 ± 2.32 р < 0,05 13.52 ±2.14 р < 0,05 13,52 ±2,14 р < 0,05 18,9 ±1,67 р < 0,05 40%± 1,08, р < 0,05

Бускопан -М-холиноблокатор 10,9 ±2.9 р < 0,05 11,02 ±1.92 р < 0,05 11,02 ±1,92 р < 0,05 17,24 ±2.26 р < 0,05 56%± 1,02, р < 0,05

Результаты этих экспериментов оказались для нас также неожиданными, поскольку на фоне действия этих блокаторов стимуляторный эффект на введение серотонина был значительно больше (на фоне действия пентамина - блокатора №холинорецепторов +40%, бускопана - блокатора М-холинорецепторов +56%), чем при интактных холинорецепторах (+26%).

Известно, что возбуждение холинергических нейронов активируют М-холинорецепторы мышц желудка (посредством высвобождения ацетилхолина из постганглионарных окончаний), что ведет к усилению сокращений желудка. Поэтому в собственных опытах мы (с помощью блокады холинергических нейронов) исключили возможную активацию их серотонином и дополнительное усиление сокращений желудка.

Результаты всех серий опытов с блокадой адрено- и холинорецепторов и введением серотонина на фоне их действия показали, что стимуляторный эффект серотонина значительно превосходит таковой при его введении интактным животным. Это означает, что адрено- и холинертаческие механизмы препятствуют стимуляторному влиянию серотонина на желудок. Дальнейшие исследования провели в условиях одновременной предварительной блокады адрено- и холинорецепторов, что обеспечивало получение более надежных результатов - в экспериментах получали чисто серотонинергические эффекты (непосредственного действия серотонина на серотонинорецепторы гладких мышц и серотонинерпгаеских нейронов вегетативных ганглиев).

ИССЛЕДОВАНИЕ ЛОКАЛИЗАЦИИ РАЗЛИЧНЫХ ТИПОВ 5НТ-РЕЦЕПТОРОВ В ГАНГЛИЯХ И НА ГЛАДКОМЫШЕЧНЫХ ВОЛОКНАХ

Изучение роли различных типов серотонинорецепторов проводили в условиях одновременной блокады а- и р-адренорецепторов и М- и М-холинорецепторов. В начале каждого опыта изучали эффекты воздействия серотонина (0,1 мг/кг) без каких-либо других фармакологических препаратов, кроме наркоза. После получения стимуляторных эффектов, одновременно вводили адрено- и холиноблокаторы (доксазозин, пропранолол, пентамин и бускопан). Спустя 10 минут вновь исследовали реакции желудка на серотонин - убеждались, что серотонин вызывал хорошо выраженную реакцию. После окончания этих реакций, через 5 минут производили внутриартериальную инъекцию блокатора определенного типа серотониновых рецепторов. Спустя еще 5 минут после последней инъекции вновь вводили серотонин в той же дозе.

Опыты с миансерином - блокатором 5НТШ, 2а, г с з, б, 7-рецепторов и а-адренорецепторов. Опыты по изучению различных типов 5НТ-рецепторов в регуляции

сокращений желудка начинали с блокады 5НТ-рецепторов неселективным блокатором -миансерином.

Миансерин - блокатор 5-НТШ1 2А_ гс, з ,6,7-рецепторов, вводили 9 животным в дозе 1 мг/кг. Введение серотонина на фоне продолжающегося действия комбинации препаратов и миансерина ни у одного животного не вызывало изменений сократительной деятельности желудка. Амплитуда медленных волн ЭМГ в ответ на введение серотонина снижалась (см. рис. 1.Б и табл. 5).

Первая серия экспериментов по изучению роли различных типов серотонинорецепторов в регуляции сокращений желудка в опытах с блокадой практически всех типов

Рис. 1. Реакции желудка на введение серотонина (0,1 мг/кг) в различных условиях: А - на фоне совместного действия адрено- и холиноблокаторов, Б - на фоне совместного действия адрено- и хсшинблокаторов и миансерина - блокатора 5НТШ, 2А, гс, з, б, 7-рецепгоров (стрелка). Вверху - кривая изменений

гидростатического давления в полости желудка, внизу -ЭМГ. Жирные линии внизу -отметки введения серотонина (30 с).

серотонинорецепторов неспецифическим блокатором миансерином являлась контрольной. Как мы и полагали, предварительное введение в организм миансерина полностью устраняло усиление сокращений желудка на последующую инъекцию серотонина. Последующие опыты выполняли с применением селективных блокаторов различных типов серотонинорецепторов.

Эксперименты с КАв-Ш - блокатором 5НТц,-рецепторов выполнены на 7 животных согласно стандартной схеме. Далее в этом же эксперименте животным вводили ЫАБ-Ш (0,1 мг/кг), что не вызывало существенных изменений гидростатического давления в полости желудка и медленных волн ЭМГ.

Рис. 2. Реакции желудка на введение серотонина в различных условиях. А - на фоне совместного действия адрено- и холиноблокаторов, Б

- на фоне совместного действия адрено- и холиноблокаторов и КАБ-Ш - блокатора 5НТ1Ь-рецепторов (стрелка). Вверху -гидростатическое давление в полости желудка, внизу - ЭМГ. Жирные горизонтальные линии

- отметки введения серотонина (30с).

15 мм рт ст

миансерин

А Б

Введение серотонина на фоне продолжающегося действия комбинации адрено- и холиноблокаторов и ИАБ-Ш у всех 7-ми животных вызывало обычные стимуляторные реакции (рис 2.Б, табл. 6).

Результаты экспериментов с ИАв-Ш - блокатором 5НТ1Ь-рецепторов свидетельствуют о том, что данный тип 5НТ-рецепторов локализуется на нейронах вегетативных ганглиев, поскольку стимуляторный эффект серотонина в опыте не устраняется - прямое действие серотонина на мышцу сохраняется.

Таблица 5. Реакции желудка на введение серотонина (0,1 мг/кг) на фоне действия блокаторов серотонинорецепторов различных типов

Название препарата Фон до введение блокаторо в (мм рт.ст.) Результат на введение блокаторо в (мм рт.ст.) Фон до введения серотонин а (мм рт.ст.) Результат на введение серотонин а (мм рт.ст.) Прирост гидроста тическог 0 давления (%)

Миансерин-блокатор 5НТш,2а, 2с. з .6,7-рецепторов 13,01 ± 2,34 р < 0,05 12,48 ± 2,53 р < 0,05 12,48 ± 2,53 р < 0,05 12,51 ± 2,4 р < 0,05

КАБ-Ш-блокатор 5НТц,-рецепторов 12,08 ± 2,12 р < 0,05 12,1 ± 1,95 р < 0,05 12,1 ± 1,95 р < 0,05 17.35± 1.14 р < 0,05 43 %± 1,1, р < 0,05

8В204741 -блокатор 5НТ2ь-рецепторов (0,1 мг/кг) 12,13 ± 1,52 р < 0,05 12,13 ± 1,18 р < 0,05 12,13 ± 1,52 р < 0,05 12,14 ± 1,58 р < 0,05

БВ 204741 -блокатор 5НТ2ь-рецепторов (0,05 мг/кг) 12,13 ± 1,52 р < 0,05 12,13 ± 1,18 р < 0,05 12,09 ± 1,51 р < 0,05 14.23± 1.08 р < 0,05 18%± 1,07, р < 0,05

МЛЬ 72222-блокатор 5НТз-рецепторов 13,9 ±2,33 р < 0,05 13,82 ± 2,29 р < 0,05 13,82 ± 2,29 р < 0,05 17,9 ±2,28 р < 0,05 29,5%± 1,05, р < 0,05

КЗ 39604 -блокатор 5НТ4-рецепторов 13,95 ± 2,55 р < 0,05 17,35 ± 2,48 р < 0,05 12,81 ± 2,12 р < 0,05 12,9 ±2,19 р < 0,05

Эксперименты с ЭВ 204741 - блокатором бНТгь-рецепторов. Эксперименты выполняли на 9 животных, препарат вводили в дозе 0,1 мг/кг.

Введение серотонина на фоне продолжающегося действия комбинации адрено- и холиноблокаторов и ЭВ 204741 не вызывало реакций желудка т.е. вВ 204741 предотвращал развитие стимуляторного эффекта желудка на серотонин (см. рис З.Б, табл. 5).

Дополнительно на 8 животных поставлена серия опытов с более низкой концентрацией йВ 204741 (0,05 мг/кг). В данной серии экспериментов у 4 животных (из 8) серотонин не вызывал существенных стимуляторных реакций желудка. У других 4 животных стимуляторные реакции желудка на серотонин сохранялась, однако ЭМГ оставалась без изменений (см. табл. 5).

Результаты эксперименты с ЭВ 204741, во-первых показали, что выбранная нами доза этого блокатора является оптимальной (уменьшенная в 2 раза доза препарата предотвращает стимуляторный эффект не полностью)

Во-вторых, эти результаты свидетельствуют о том, что 5НТ2ь-рецепторы локализуется на мышечных волокнах желудка, поскольку стимуляторный эффект серотонина полностью выключился оптимальной дозой блокатора 5НТ2ь-рецепторов.

15 ымртст '

SB 204741

1 мВ

Рис. 3. Реакции желудка на введение серотонина в различных условиях. А - на фоне совместного действия адрено- и холиноблокаторов, Б - на фоне совместного действия адрено- и холиноблокаторов и вВ 204741 -блокатора 5НТ2>,-рецепторов (стрелка) в дозе 0,1 мг/кг. Вверху -кривая изменений гидростатического давления в полости желудка, внизу - ЭМГ. Жирные горизонтальные линии -отметки введения серотонина - 30с.

Опыты с MDL 72222 - блокатором 5НТ3-рецепторов. Опыты поставили в аналогичных условиях на 9 животных, MDL 72222 вводили в дозе 1 мг/кг. У б животных из 9 это вызывало хорошо выраженные стимуляторные реакции (рис 4.В).

и-ртоД | Апмно-итлиноблпгатопы Л Б iimum В Рис. 4. Реакции желудка на

введение серотонина (0,1 мг/кг) в различных условиях: А

- у интакгных животных, Б -на фоне совместного действия адрено- и холиноблокаторов, В

- на фоне совместного действия адрено- и холиноблокаторов и MDL 72222 - блокатора 5НТз-рецепторов (стрелка). Вверху -кривая изменений гидростатического давления в полости желудка, внизу -

" ЭМГ. Жирные линии внизу -

отметки введения серотонина (30 с).

Результаты данной серии опытов свидетельствуют о том, что 5НТз-рецепторы локализуются преимущественно на нейронах вегетативных ганглиев, поскольку стимуляторные реакции желудка на серотонин при блокаде этих рецепторов в основном не предотвращаются.

\Г

^YTVVjjV—

Опыты с Шз 39604 - блокатором 5НТ4-рецепторов.

ЯБ 39604 (0,1 мг/кг) -вводили на фоне действия, адрено- и холиноблокаторов, как и в перечисленных выше сериях опытов.

Введение серотонина на фоне продолжающегося действия комбинации адрено-, холиноблокаторов и Ш> 39604 ни у одного животного не вызывало существенных изменений гидростатического давления в полости желудка (см. рис. 5.В).

Полученные в этой серии экспериментов факты свидетельствуют о том что 5Ш>

рецепторы локализованы преимущественно на гладкомышечных волокнах, т. к.

стимуляторный эффект полностью предотвращается блокадой 5НТ4-рецепторов.

А Б В Рис. 5. Реакции желудка на

.__, II введение серотонина (ОД мг/кг)

Адрено-и холиноолокаторы вооии > \

1 1 ,ЧМИ " в различных условиях: А - у

интаиных животных, Б - на

фоне совместного действия

адрено- и холиноблокаторов, В

- на фоне совместного

действия адрено- и

холиноблокаторов и ЯБ 39604-

блокатора 5НТ< -рецепторов

(стрелка). Вверху - кривая

изменений гидростатического

давления в полости желудка,

внизу - ЭМГ. Жирные линии

внизу - отметки введения

серотонина (30 с).

Таким образом, мы впервые установили, что преганглионарные серотонинергические нервные волокна образуют синапсы на ганглионарных нейронах с помощью 5Ш\з-рецепторов, на миоцитах желудка - посредством бИТу-рецепторов (рис. 6.).

лреганглионарное волокно

0серотонинорецепторы 7,3 топов серотонинергический нейрон ганглия

постганглионарное волокно

свРотониноРеЧвпторы 2.4 типов Рис. 6. Схема, иллюстрирующая локализацию

гладкоыышечная клетка серотонинорецепгоров, в серотонинергическом

нерве.

Следует заметить, что с появлением новых более селективных блокаторов 5НТ-рецеиторов эта схема может быть уточнена.

В заключение необходимо отметать следующее: поскольку серотонин шрает важную роль в регуляции функции внутренних органов, нарушение секреции его может сопровождаться развитием патологических процессов.

Так, Н. С. Тройская (2005) исследовала в хронических экспериментах на крысах на модели послеоперационного илеуса - влияние серотонина и 5НТ4-агониста цизаприда на

электрическую активность желудка и тонкой кишки. Показано, что при послеоперационном илеусе происходит исчезновение мигрирующего миоэлектрического комплекса желудка и тонкой кишки.

L.-G. Axelsson, et al. (2003) наблюдали, что введение крысам антагониста 5НТ3-рецепторов алосетрона, (0,5 мг/кг в/в) пролонгировало мигрирующий миоэлектрический комплекс, регистрируемый электрофизиологическими методами с 16,6 до 30, 4 мин., а 5НТ4-антагонист пибосерод, (в той же дозе) пролонгировал его до >60 мин. Антагонисты мускариновых рецепторов, PNU - 171990А и PNU - 174708А, (до 20-ти мг/кг) не влияли на параметры миоэллектрического комплекса, а 1-гиосциамин (20 мг/кг) пролонгировал его с 17,6 до 20 мин. Сделан вывод, что блокада 5НТ4-рецепторов оказывает ингибиторное воздействие на моторику кишечника у крыс. С нашей точки зрения все указанные препараты угнетали моторику кишки, однако наиболее сильным действием обладает пибосерод, блокирующий 5НТ4-рецепторы, что совпадает с нашими данными - блокада 5НТ4-рецепторов полностью устранят стимуляторное влияние серотонина на орган.

И. Е. Трубицына (2006) показала в экспериментах на животных и в исследованиях на людях, что процесс язвообразования был разделен на периоды деструкции и рубцевания. В период деструкции повышение серотонина в часовые сроки осуществляется за счет выброса серотонина из синапсов, в последующем из тучных и ЕС-клеток, которые активированы ацетилхолином. Повышение ацетилхолина в период рубцевания контролирует высвобождение серотонина.

Sun Xue-li Wang et al. (2004) обследовали 89 пациентов с пептическими язвами и 50 здоровых людей (контрольная группа). У пациентов с пептическими язвами было больше отрицательных эмоций и другая манера их выражения. Концентрация 5НТ-рецепторов на тромбоцитах при пептических язвах была значительно ниже, чем в контрольной группе.

А. Э. Лычкова (2008) моделировала пилоростеноз и панкреатит до и в условиях предварительного введения серотонина и блокатора 5НТ2-рецепторов спиперона. Показано, что активация серотонинергической нервной системы препятствует развитию панкреатита, но способствует более тяжелому течению пилоростеноза.

В наблюдениях Пошехоновой Ю.В. (2003) обследовано 118 детей с функциональной диспепсией в возрасте от 5-ти до 15-ти лет. Группу сравнения составили 45 детей с хроническим гастродуоденитом соответствующего возраста. У всех больных с функциональной диспепсией отмечено повышение уровней гистамина и серотонина в плазме крови.

Высокие уровни в плазме крови серотонина отмечены при дискинетическом и неспецифическом вариантах функциональной диспепсии, которые характеризовались болями в животе умеренной и малой интенсивности; преходящей гиперемией антрального отдела слизистой оболочки желудка и дуоденогастральными рефлюксами; нарушениями желудочной секреции со снижением стимулированной фазы.

Известно целебное действие серотонина, которое изучалось в частности на сосудистой системе.

По мнению ряда авторов, одной из причин дисфункции гладкой мышцы, является синдром серотониновой недостаточности (А. П. Симоненков, А. В. Федоров, В. Д. Федоров и др. 1995; А. П. Симоненков, В. Д. Федоров, 2003; В. Д. Федоров, А. П. Симоненков, 1995). В норме происходят периодические сокращения и расслабления гладкой мускулатуры микроциркуляторного русла, необходимые для поддержания нормального тканевого обмена. В литературе они получили названия "эндогенная вазомоторика", "вазомоция", "вазомоторная активность", "перистальтика сосудов", "миогенная регуляция тонуса микрососудов" (А. Д.

Ноздрачев, 1997; А. П. Симоненков, В. Д. Федоров, 2002; Р. Шмидт, Г. Тевс, 2004). Вазомоция сохраняется при денервации, она осуществляется следующим образом: серотонин, вырабатываемый антерохромаффинными клетками ЖКТ, адсорбируется тромбоцитами, которые, проходя через микрососуды, высвобождают серотонин, который активирует серотшиновые рецепторы гладкой мускулатуры, что ведет к их сокращению (А. П. Симоненков, А. В. Федоров, В. Д. Федоров и др., 1994; А. П. Симоненков, В. Д. Федоров, 2002; В. Д. Федоров, А. П. Симоненков, 1995).

В литературе появляются сведения о так называемой серотониновой недостаточности. Установлено, что при взаимодействии серотонина с серотонин- реактивными структурами гладких мышц происходит сокращение гладкой мускулатуры. Действие серотонина на гладкую мускулатуру ослабляется лекарственными препаратами, являющимися его антагонистами, в результате чего и возникает гладкомышечная недостаточность. Восстановление перистальтики кишечника у больного с функциональной кишечной непроходимостью под действием серотонина адипината происходило непосредственно во время введения препарата, которое сопровождалось отхождением газов и каловых масс (А. П. Симоненков, В. Д. Федоров. 2003).

Эндолимфатическая инфузия серотонина адипината является эффективным средством в борьбе с послеоперационным парезом кишечника. Аллергических реакций и побочных отрицательных действий на введение препарата не было отмечено (Г. И. Синенченко, В. Г. Вербицкий, А. В. Колунов 2006).

Таким образом, физиологическое, патофизиологическое и целебное действие серотонинергической нервной системы и экзогенного серотонина, вводимого в организм, в последние 20-30 лет изучается весьма активно и получены важные данные в теоретическом и практическом отношениях. Мы надеемся, что и наша работа будет заметной в этом же направлении.

ВЫВОДЫ

1. В результате проведенных экспериментальных исследований функциональной организации серотонинергического нерва, получены данные о том, что на нейронах вегетативных ганглиев локализуются преимущественно 5НТу-рецелторы, на гладкомышечных клетках желудка - 5НТ214-реце1Гторы. Это означает, что возбуждение с преганглионарных серотонинергических волокон передается на нейроны вегетативных ганглиев с помощью 5НТ1,3-рецепторов, с постганглионарных на мышечные волокна -посредством бИТурецепторов.

2. Установлено что, введение в организм серотонина вызывает такой же сократительный эффект желудка, как и раздражение «симпатического» (большого чревного) нерва, что подтверждает представление о наличии серотонинергических волокон в его составе. Предварительная блокада вместе и в отдельности а- и Р-адренорецепторов и М- и 14-холинорецепторов ведет к усилению сократительного эффекта желудка на введение в организм серотонина - это означает, что штгакгаые а- и р-адренорецепторы и М- и Ы-холинорецепторы препятствуют стимуляторному действию серотонина на желудок.

3. Выявлено что, блокада Р-адренорецепторов сама по себе сопровождается усилением сокращений желудка, а последующее введение в организм серотонина вызывает наиболее выраженную стимуляцию сокращений желудка, что пока не учитывается в клинической практике.

4. Выявлено, что блокада в отдельности ]М-холинорецепторов и р-адренорецепторов ведет к усилению сокращения желудка, а блокада М-холинорецепторов не сопровождается

изменением его моторной активности, что свидетельствует о наличии тонуса симпатического нерва и отсутствии тонуса блуждающего нерва для желудка.

5. При изучении механизмов регуляции сокращений желудка с помощью серотонина выявлен эффективный способ его введения в организм — внутриартериальный, так как медленно развивающиеся реакции желудка по мере всасывания серотонина, при других способах его введения, несопоставимы с быстрыми эффектами, возникающими при раздражении нерва. Установлено, что оптимальной дозой является 0,1 мг/кг (0,15 мг/кг вызывало такие же эффекты, а 0,05 мг/кг вызывало двоякий эффект - реже стимуляторный, чаще - тормозный).

6. Получены данные о том, что торможение сокращений желудка при введении малых доз серотонина (вместо усиления) объясняется, по-видимому, тем, что малые дозы серотонина активируют возможно имеющиеся только более чувствительные пресинаптаческие серотониновые рецепторы адренергических терминалей, что ведет к высвобождению норадреналина, который тормозит сокращения желудка.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ.

Материалы проведенных исследований указывают на необходимость организации комплексных исследований с участием фармакологов и клиницистов по разработке препаратов серотонина пролонгированного действия и исследования его в клинических условиях с лечебной целью.

Следует учитывать в клинической практике эффект усиления влияния серотонина, на моторику ЖКТ, на фоне действия блокагоров Р-адренорецепторов.

СПИСОК НАУЧНЫХ ТРУДОВ ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. A.B. Кучук, М.А Трубецкая, Ю.Е. Трофимова Исследование усиления сокращений двенадцатиперстной кишки, возникающих при раздражении симпатического нерва. // Вестник РГМУ Материалы V Международной (XIV Всероссийской) Пироговской научной медицинской конференции студентов и молодых ученых. М., 2010 - Спецвыпуск №2. - С. 509.

2. Д.С. Свешников, В.М. Смирнов, И.Л.Мясников, A.B. Кучук, Ю.Е. Трофимова М.А Трубецкая Серотонинергические волокна симпатического ствола, усиливающие сокращения двенадцатиперстной кишки, являются преганглионарными. // Журнал теоретической и практической медицины. Воронеж, 2010. - Том 8, №2. - С.221.

3. М.А. Трубецкая, Ю.Е. Трофимова, A.B. Кучук, МЛ. Монгуш, ИЛ. Юрасова Роль серотонинергических нервных волокон в реализации двоякого влияния симпатического нерва на сокращения двенадцатиперстной кишки. II Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктолопш. Материалы шестнадцатой российской гастроэнтерологической недели 11-13 октабря 2010г., Москва. М., 2010. - Приложение № 36. - С. 122.

СОКРАЩЕНИЯ

5НТ-рецепторы - 5-гидрокситриптаминовые (серотониновые) рецепторы

ЖКТ - желудочно-кишечный тракт

ЭМГ - элекгромиограмма

МГ - механограмма

ВНС - вегетативная нервная система

Кучук Андрей Владимирович (Россия) Исследование роли различных типов серотонинорецепторов в регуляции сокращений желудка В работе приведены результаты исследования структурной организации серотонинергического нерва и действия серотонина на моторику желудка.

В результате исследований было выявлено, что на нейронах вегетативных ганглиев локализуются преимущественно бНТу-рецепторы, на гладкомышечных клетках желудка -5НТ2,4-рецепторы. Эффекты на введение в организм серотонина сопоставимы с таковыми на раздражение серотонинергического нерва. Блокада в отдельности N-холинорецепторов и р-адренорецепторов ведет к усилению сокращения желудка, а блокада М-холинорецепторов не сопровождается изменением его моторики, что свидетельствует о наличии тонуса симпатического нерва и отсутствии тонуса блуждающего нерва для желудка. Блокада (3-адренорецепторов сама по себе сопровождается усилением сокращений желудка, а последующее введение в организм серотонина вызывает наиболее выраженную стимуляцию сокращений желудка. Обнаружено также торможение сокращений желудка при введении малых доз серотонина. Полагаем, что это объясняется активацией более чувствительных пресинаптических серотониновых рецепторов адренергических терминалей. Возбуждение симпатических окончаний ведет к высвобождению норадреналина, который тормозит сокращения желудка.

Kuchuk Andrey (Russia) The role of different types of 5HT- receptors in regulation of stomach contractions

This study is dedicated to the structural organization of serotoninergic nerve and the action of serotonin on motility of the stomach.

The studies revealed predominant localization of 5Ш\з receptors in neurons of autonomic ganglia and 5HT2,4in stomach smooth muscle cells. The effects of serotonin infusion are comparable with those to stimulation of the serotoninergic nerve. Isolated blockade of N-cholinoreceptors and (3-adrenoreceptors leads to increased stomach contractions; the blockade of M- cholinoreceptors is not accompanied by a change in motility, which indicates the presence of sympathetic nerve tone and absence of vagal tone to the stomach. Blockade of р-adrenoceptor itself been accompanied by stomach contractions but subsequent infusion of serotonin causes the most pronounced effect on motility. Low doses of serotonin as also been discovered provide an inhibition of stomach contractions. We believe that describing phenomena could be explained by activation of more sensitive presynaptic serotonin receptors on adrenergic terminals. Excitation of sympathetic endings leads to the release of norepinephrine, which inhibits the stomach motility.

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Кучук, Андрей Владимирович

Общая характеристика работы

Глава 1. Современные представления о структурно- 9 функциональной организации вегетативной нервной системы. Обзор литературы

1.1 Современные представления о структурно- 9 функциональной организации симпатической нервной системы

1.2 Стимуляторные влияния симпатического нерва на сокращения желудка

1.3 Доказательства наличия серотонинергической иннерва- 18 ции желудка

1.4 Серотонинорецепторы

1.5 Разнообразие эффектов действия серотонина

Глава 2. Материалы и методы

2.1 Объект и объем исследования

2.2 Методика исследования, оборудование и материалы

2.3 Методы статистического анализа полученных результатов

2.4 Фармакологические препараты

Глава 3. Результаты собственных исследований

3.1 Выбор способа введения серотонина

3.2 Изучение влияния различных доз серотонина на моторику желудка

3.3 Исследование роли адрено- и холинергических механиз- 55 мов в осуществлении действия серотонина

3.3.1 Опыты с одновременной блокадой а- и ßадренорецепторов и N- и М-холинорецепторов

3.3.2 Исследование роли адренорецепторов в реализации 57 стимуляторных эффектов серотонина

3.3.3 Изучение роли N-холинорецепторов в осуществле- 64 нии влияния серотонина

3.3.4 Эксперименты с М-холиноблокатором бускопаном 66 3.4 Исследование локализации различных типов 5НТрецепторов в ганглиях и на гладкомышечных волокнах

3.4.1 Опыты с миансерином - блокатором 5НТШ, 5НТ2а> 70 5НТ2с, 5НТ3, 5НТ6, 5НТ7-рецепторов

3.4.2 Эксперименты с NAS-181 - блокатором 5HTib- 72 рецепторов

3.4.3. Эксперименты с SB 204741 - блокатором 5НТ2ь- 74 рецепторов

3.4.4 Опыты с MDL 72222 - блокатором 5НТ3- 77 рецепторов

3.4.5 Опыты с RS 39604 - блокатором 5НТ4-рецепторов

Глава 4. Обсуждение результатов 81 Выводы 93 Литература

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Введение Диссертация по биологии, на тему "Исследование роли различных типов серотонинорецепторов в регуляции сокращений желудка"

Вопросы регуляции функций желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) имеют важное теоретическое и практическое значение, поскольку нарушения регуляции деятельности любого отдела ЖКТ может сопровождаться тяжелыми патологическими последствиями. Например, недостаточная выработка соляной кислоты ведет к ухудшению переваривания белков, а избыточная выработка соляной, кислоты способствует развитию язвенной болезни. Снижение моторики также ведет к ухудшению переваривания содержимого и химуса, к интоксикации организма. Известно, что парасимпатические (холинергические) нервы стимулируют моторику и секрецию ЖКТ, а симпатические (адренергические) тормозят их (Н. А. Агаджанян, В. М. Смирнов, 2009; А. А. Кромин, 2010; В. М Покровский, Г. Ф. Коротько, 1998).

Однако обнаружены и противоположные влияния симпатического и парасимпатического нервов. Так, еще в середине XIX в. Пфлюгер (1857, цит. по Богач П.Г., 1974) обнаружил, что раздражение большого чревного нерва может вызвать не только торможение, но иногда и усиление сокращений ЖКТ. Позже это подтвердили и другие авторы (J. Malmegjac, et al., 1940; J. Gillespie, В. Mackenna, 1961; Y. Nakazato, et al., 1970; D. Delbro, B. Lisander 1980; E. Bathon, H. Ormsbee, 1980). Возбуждающее влияние чревных нервов на моторику ЖКТ лучше выявляется на фоне покоя органа (В. М. Бехтерев, Н. JI. Миславский, 1888 - 1889; С. Van Нагп, 1963) или в условиях действия симпатолитиков (Р.В. Уткина, 1956).

Существующее в настоящее время общепринятое представление (В. И. Бадиков, 2000; В. М. Покровский, и др., 1998) о зависимости ответной реакции органа от исходного его функционального состояния и силы раздражения нерва, изучено недостаточно. Результаты исследований В: М. Смирнова (1989, 1990) показали, что двоякое влияние нерва при его раздражении определяется не исходным состоянием органа, а наличием в составе нерва волокон различной медиаторной природы: в составе симпатического нерва — парасимпатических волокон, а в составе парасимпатического нерва — симпатических волокон.

В частности, при изучении механизмов регуляции сокращений желудка авторы (В. М. Смирнов, А. Э. Лычкова, Д. С. Свешников, И. JL Мясников 1986 - 2008гг.) обнаружили, что раздражение симпатического нерва в грудной полости у собак вызывает, как правило (до 90% случаев), не торможение, а усиление сокращений желудка. Авторы получили убедительные доказательства наличия в- составе большого чревного (симпатического, адренергического) нерва, серотонинергических нервных волокон; усиливающих сокращение желудка. Причем, количество серотонинергических волокон в составе симпатического нерва, согласно гистохимическим исследованиям в несколько раз больше, чем адренергических (В. М.' Смирнов, С. Ф. Волынцева, 1995).

Однако с каким типом серотонинорецепторов образуют преганглионар-ные, а с каким - постганглионарные нервные волокна эти авторы судили только по-имеющимся противоречивым данным литературы, (J. Fozard, 1987, 1990; Е. Zifa, G. Fillion^ 1992; S. Watts, D. Сох, 1994; R. Glennon, 1990; T. Martin, et al., 1994). Свои опыты эти авторы выполняли на полосках и вне связи с наличием серотонинергических нервов в организме, поскольку о существовании этих нервов указанные авторы не подозревали.

Кроме того, для более-глубокого изучения серотонинергической нервной системы и подтверждения ее наличия в организме необходимо выяснить - вызывает ли экзогенный серотонин такие же эффекты желудка, как и раздражение серотонинергического нерва. Необходимо знать также — выключается ли действие серотонина на желудок теми же блокаторами, которые выключают стимуляторное влияние на желудок серотонинергического нерва.

Цель исследования - изучить влияние серотонина на сокращения желудка и функциональную организацию серотонинергического нерва.

Задачи исследования.

1. Выяснить, вызывает ли экзогенный серотонин такие же моторные реакции желудка, как и раздражение серотонинергического нерва.

2. Определить, участвуют ли адрено- и холинергические механизмы в реализации стимуляторного влияния серотонина на сокращения желудка.

3. Исследовать роль разных типов нейронных и гладкомышечных серото-нинорецепторов в усилении сокращений желудка.

Научная новизна.

Впервые изучалась функциональная организация серотонинергического нерва, усиливающего сокращения желудка - с помощью какого типа серото-нинорецепторов на нейронах вегетативных ганглиев образуют синапсы пре-ганглионарные серотонинергические нервные волокна и с какими эффектор-ными рецепторами образуют синапсы постганглионарные волокна на гладко-мышечных клетках желудка. При этом- вначале установили, что экзогенный серотонин вызывает такие же стимуляторные эффекты желудка, как и раздражение серотонинергического нерва. Показали также, что адренергические и холинергические механизмы ослабляют стимулирующее действие серотонина на желудок. Преганглионарные серотонинергические волокна образуют синапсы, согласно нашим данным, с 5НТ1;3 -рецепторами нейронов вегетативных ганглиев, а постганглионарные — с бШ^-рецепторами волокон гладких мышц желудка. Активация 5НТ2>4-рецепторов гладких мышц желудка ведет к возбуждению миоцитов и усилению сокращений желудка.

Научно-практическое значение работы.

Научное значение работы заключается в том, что получены дополнительные экспериментальные данные, свидетельствующие о том, что в организме имеется серотонинергический нерв, усиливающий сокращения желудка. Согласно нашим новым данным преганглионарные серотонинергические нервные волокна образуют синапсы на нейронах вегетативных ганглиев посредством 5НТ1)3-рецепторов, а постганглионарные волокна на гладких мы> шечных волокнах желудка - посредством 5НТ2)4-рецепторов, активация которых вызывает усиление сокращений желудка, что существенно дополняет современные представления о механизме регуляции моторики желудка.

Практическое значение работы состоит в том, что результаты наших исследований могут быть основой для разработки новых фармакологических препаратов и использования их в лечебно-профилактической деятельности врачей.

Практические рекомендации.

Материалы проведенных исследований указывают на необходимость организации комплексных исследований с участием фармакологов и клиницистов по разработке препаратов серотонина пролонгированного действия и исследования его в клинических условиях с лечебной целью.

Следует учитывать в клинической практике эффект усиления влияния серотонина, на моторику ЖКТ, на фоне действия блокаторов (3-адренорецепторов.

Апробация работы.

Диссертация апробирована на заседании кафедры нормальной физиологии ГОУ ВПО Российского государственного медицинского университета Мин-здравсоцразвития России.

Структура и объем диссертации.

Диссертация состоит из общей характеристики работы, обзора литературы, глав «материалы и методы», «результаты собственных исследований» и «обсуждение результатов», практических рекомендаций и библиографического списка. Материалы диссертации изложены на 108 страницах машинописного текста, иллюстрированы 28 рисунками и 7 таблицами. Библиографический список содержит 128 источников, 67 из которых российских и 61 иностранных авторов.

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Кучук, Андрей Владимирович

выводы

1. В результате проведенных экспериментальных исследований функциональной организации серотонинергического нерва, получены данные о том, что на нейронах вегетативных ганглиев локализуются преимущественно 5НТ1)3-рецепторы, на гладкомышечных клетках желудка — 5НТ2>4-рецепторы. Это означает, что возбуждение с преганглионарных серотонинергических волокон передается на нейроны вегетативных ганглиев с помощью бНТ^з-рецепторов, с постганглионарных на мышечные волокна — посредством 5НТ2>4-рецепторов.

2. Установлено что, введение в организм серотонина вызывает такой же сократительный эффект желудка, как и раздражение «симпатического» (большого чревного) нерва, что подтверждает представление о наличии серотонинергических волокон в его-составе. Предварительная блокада вместе и в отдельности а- и (3-адренорецепторов и М- и Ы-холинорецепторов ведет к усилению сократительного эффекта желудка на- введение в организм серотонина -это означает, что интактные а- и (3-адренорецепторы и М- и Ы-холинорецепторы препятствуют стимуляторному действию серотонина на желудок.

3. Выявлено что, блокада р-адренорецепторов сама по себе сопровождается усилением сокращений желудка, а последующее введение в организм серотонина вызывает наиболее-выраженную стимуляцию сокращений желудка, что пока не учитывается в клинической практике.

4. Выявлено, что блокада в отдельности КГ-холинорецепторов и р-адренорецепторов ведет к усилению сокращения желудка, а блокада М-холинорецепторов не сопровождается изменением - его моторной активности, что свидетельствует о наличии тонуса симпатического нерва и отсутствии тонуса блуждающего нерва <для желудка.

5. При изучении механизмов регуляции сокращений желудка с помощью серотонина выявлен эффективный способ его введения в организм - внутриар-териальный, так как медленно развивающиеся реакции желудка по мере всасывания серотонина, при других способах его введения, несопоставимы с быстрыми эффектами, возникающими при раздражении нерва. Установлено, что оптимальной дозой является 0,1 мг/кг (0,15 мг/кг вызывало такие же эффекты, а 0,05 мг/кг вызывало двоякий эффект - реже стимуляторный, чаще - тормоз-ный).

6. Получены данные о том, что торможение сокращений желудка при введении малых доз серотонина (вместо усиления) объясняется, по-видимому, тем, что малые дозы серотонина активируют возможно имеющиеся только более чувствительные пресинаптические серотониновые рецепторы адренерги-ческих терминалей, что ведет к высвобождению норадреналина, который тормозит сокращения желудка.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Кучук, Андрей Владимирович, Москва

1. Агаджанян, Н. А. Нормальная физиология : учеб. / H.A. Агаджанян, В.М. Смирнов,- М.: ООО «Медицинское информационное агентство», 2007.-520 е.: ил.

2. Бадиков, В. И. Кровообращение / В.И. Бадиков // Физиология. Основы и функциональные системы / под ред. К. В. Судакова. -М.: Медицина, 2000.- С.319-364.

3. Бехтерев, В. М. О центральной и периферической иннервации кишок / В.М. Бехтерев, H.JI. Миславский // Избранные произведения / H.A. Миславский.- М., 1952.- С.106-129.

4. Богач, П. Г. Гладкомышечная клетка / П.Г. Богач // Физиология пищеварения. JI. : Наука, 1974.- С. 91 -119.

5. Глебов, Р. Н. Функциональная биохимия синапсов / Р.Н. Глебов, Г.Н. Крыжановский.- М.: Медицина, 1978.- 325 е.: ил.

6. Доказательства наличия серотонинергического отдела вегетативной нервной системы (ВНС) / В.М. Смирнов, Д.С. Свешников, А.Э. Лычкова и др. // Материалы XIX съезда физиол. о-ва им. И.П. Павлова.- Екатеринбург, 2004.-С.200-201.

7. Изучение механизма стимуляторного влияния симпатического нерва на сокращения желудка / В.М. Смирнов, И.Л. Мясников, Е.А. Берсенева, Д.С. Свешников //Рос. физиол. журн.- 1999.- №8.-С. 1095-1102.

8. Кен-Куре, К. Значение блуждающего нерва в парасимпатической иннервации органов брюшной полости / К. Кен-Куре // Сов. невропатология, психиатрия, психогигиена.- 1935.-Т.4, Вып.2,- С.146 — 159.

9. Климов, П. К. Пептиды и пищеварительная система / П.К. Климов.-Л.: Наука, 1983.-273 с.

10. Кромин, А. А. Нормальная физиология / A.A. Кромин.- М.: Издательский центр «Академия», 2010.-С. 265 303.

11. Лазебник, Л. Б. Функционально-морфологическая организация вегетативной иннервации желудка / Л.Б. Лазебник, А.Э. Лычкова, С.Г. Хоме-рики // Успехи физиол. наук.-2008.- Т.39, №2.- С. 58 -76.

12. Лычкова, А. Э. Серотонинергическая система в развитии пилоро-. стеноза и панкреатита / А.Э.1 Лычкова // Бюл: эксперимент, биологии и медицины.-2008.-Т. 146, №8.-0.226-232.

13. Меньшиков, В: В. Лабораторные методы исследования; в клинике: справ. / В.В. Меньшиков.- М., 1987.-364 с.

14. Механизм стимуляции; двигательной активности двенадцатиперстной кишки'большим чревным нервом / В.М. Смирнов, В.А. Клевцов, Н.А. Смирнова, А.Э. Лычкова, // Бюл. эксперимент, биологии и медицины.-1987.- №9.- С.270-273. .

15. Механизм эндогенной вазомоторики и гладкомышечной недостаточности микроциркуляторного русла / А.П. Симоненков, В.Д. Федоров, A.B. Федоров и др. // Вестн. РАМН. 1994. - № 6. - С. 11-15.

16. Мясников, И. JI. Исследование механизмов усиления сокращений желудка возникающие при раздражении симпатического ствола : дис. .-. канд. мед. наук.- М., 1997.-143 с.

17. Ноздрачев, А.Д. Болезни органов кровообращения: рук. по внутр. болезням / А.Д. Ноздрачев; под ред. Е. И. Чазова. М., 1997.-С. 8-89.

18. Ноздрачев, А.Д. Первичные афферентные и двигательные нейроны тонкой кишки морской свинки / А.Д. Ноздрачев, Ю.А. Толкунов // Вестн. СПб ун-та. Сер.3.-2007.- №1.-С. 71-77.

19. Нормальная физиология: учеб. / под ред. В.М. Смирнова.- 3-е изд.-М.: Академия, 2010.-480 с.

20. Овсянников, В. И. Механизм сопряжения адренергических и холи-нергических влияний на гладкую мускулатуру тонкой кишки / В.И. Овсянников, Б.И. Ткаченко // Вестн. АМН СССР.-1989.-№1.-С.45-53.

21. Ольбинская, JI. И. Эффективность и безопасность отечественного неселективного ß-адреноблокатора проксодололола в лечении больных с хронической сердечной недостаточностью / Л.И. Ольбинская, Ж.М. Сизова //Кардиология.-2006.-Т.46,№12.-С. 17-20.

22. Пошехонова, Ю. В. Юпшчне значения показниюв пстамину й серотоншу в плазм! кров} д1тей з функциональною диспешлею / Ю.В Пошехонова // Пед1атр1я, акушерство та гшекол.-2003.-№5.-С. 33 37.

23. Свешников, Д. С. Исследование механизмов усиления сокращений двенадцатиперстной кишки возникающие при раздражении симпатического ствола : дис. . канд. мед. наук.- М., 1996.-122 с.

24. Симоненков, А. П. Серотонин и его рецепторы в генезе стресса и адаптации / А.П. Симоненков, В.Д. Федоров // Вестн. РАМН. -2002. -№ 8. С.9-13.

25. Симоненков, А.П. Аргументы в пользу уточнения классификации гипоксических состояний / А.П. Симоненков // Бюл. эксперимент, биологии и медицины. -1999.-№2.-С. 146-151.

26. Симоненков, А.П. Профилактика и лечение серотониновой недостаточности у хирургических больных / А.П. Симоненков, В.Д. Федоров // Хирургия. -2003. -№3.- С.76-80.

27. Синенченко Г. И. Эндолимфатическая инфузия серотонина адипи-ната в лечении послеоперационного пареза кишечника / Г.И. Синенченко, В.Г. Вербицкий, A.B. Колунов // Мед. вестн. МВД.- 2006.- №2(21).-С.21-23

28. Смирнов В. М. Стимуляция сокращений желудка серотонинергиче-скими нервными волокнами / В.М. Смирнов, И.Л. Мясников, Д.С. Свешников // Рос. журн. гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии.-1997.- №5.-С.51. '

29. Смирнов, В. М. Роль серотонинергической иннервации в регуляции моторики желудка и тонкой кишки / В.М. Смирнов // Бюл. сибирской медицины.-2005.-Прил. 1.-С. 10.

30. Смирнов, В. М. Адренергическая природа вагусного ускорения сердцебиений у лягушек / В.М. Смирнов // Бюл. эксперимент, биологии и медицины.-1991.-№9.- С.229-231.

31. Смирнов, В. М. Анализ механизмов ускорения сердцебиений, возникающих при^раздражении блуждающего нерва / В.М. Смирнов // Физи-ол. журн. СССР.- 1989.-Т.75, №12.- С.1782-1788.

32. Смирнов, В. М. Анализ механизмов ускорения сердцебиений, возникающих при.раздражении блуждающего нерва / В.М. Смирнов // Физи-ол. журн. СССР.- 1990.-Т.76,№10.-С.1265-1272.

33. Смирнов, В. М. Гипотеза о механизме торможения сокращений тонкой кишки посредством блуждающего нерва / В.М. Смирнов // Бюл. эксперимент. биологии и медицины. -2000. -№2.- С.135-138.

34. Смирнов, В. М. Изучение механизмов двоякого влияния симпатического и блуждающего нервов на моторику желудка и двенадцатиперстной кишки / В.М. Смирнов // Рос. журн. гастроэнтерологии, гепатологии и ко-лопроктологии.-1999.-№5.-Прил.№8.-С.42.

35. Смирнов, В. М. Исследование механизма усиления сокращений двенадцатиперстной кишки при раздражении симпатического ствола / В.М. Смирнов, Д.С. Свешников, И.Л. Мясников // Бюл. эксперимент, биологии и медицины.-1997.- №1.-С.11-14.

36. Смирнов,.В. М. Исследования механизма усиления сокращений желудка. возникающих при раздражении симпатического ствола / В.М: Смирнов, И.Л. Мясников, Д.С. Свешников // Бюл. эксперимент, биологии и медицины.- 1994.- №10.-С.355-359 .

37. Смирнов^ В. М. Механизм стимуляции сокращений желудка и двенадцатиперстной-кишки большим чревным нервом / В.М. Смирнов, В.А. Клевцов, А.Э. Лычкова // Физиол. журн. СССР.- 1986.- Т.72, №5.-С.650-655.

38. Смирнов, В. М. Механизм торможения деятельности сердца звездчатым ганглием у кошек и морских свинок / В.М. Смирнов // Физиол. журн. СССР.- 1986.-Т.72, №1.- С.104-108.

39. Смирнов, В. М. О серотонинергическом отделе вегетативной нервной системы / В.М. Смирнов // Медико-биологические науки для теоретической и клинической медицины : сб. тез. докл. науч.-практич. конф., г. Москва;-М;, 2003.-С.86.

40. Смирнов,.В. М. Природа нервных волокон, усиливающих сокращения желудка и кишечника / В:М. Смирнов, Д.С. Свешников, И. Л. Мясников// Успехи физиол. наук.- 1994. Т.25, №3. - С. 118-119:

41. Смирнов- В; М. Роль серотонинергического отдела вегетативнойнервной системы / В.М. Смирнов// Современные проблемы нейробиоло-гии : материалы III Между нар. симп;,. г.Саранск.- Саранск, 2001.-С.69-70;

42. Смирнов, В. М. Серотонинергическая природа нервных волокон, усиливающих сокращения желудка и? кишечника / В.М. Смирнов, С.Ф. Волынцева // Структурам функции вегетативной нервной системы : Г Ме-ждунар. симщ г.Воронеж.- Ворнеж, 1995.- С.95-97.

43. Смирнов, В. М; Серотонинергическая регуляция моторики желудочно-кишечного тракта / В.М. Смирнов // Рос. жури, гастроэнтерологии, гепагологии, колопроктологии.-1996,- Т.6, №4.-Прил.-С.288.

44. Смирнов, В: М. Серотонинергическая .регуляция моторикш желудочно-кишечного .тракта / В.М. Смирнов // Рос. журн. гастроэнтерологии, гепатологии; колопроктологии.- 1998,-Прил. № 5.-С. 261.

45. Смирнов, В. М. Существует ли серотонинергический отдел, вегетативной-нервной-системы / В.М; Смирнов // Структура и функции вегетативной нервной системы : Iii Мёждунар. симп., май, 1998, г. Воронеж.- Воронеж, 1998:-С.25-27. •

46. Смирнов, В. М. Функция неизвестных нервных волокон симпатического ствола / В.М; Смирнов // Структура и функции вегетативной нервной системы.: ГМеждунар. симп., г.Воронеж:- Ворнеж, 1995.-С.93-95.

47. Смирнов, В.М. Механизм'; синергизма симпатической и парасимпатической нервной системы в регуляции деятельности сердца* и: желудка- / В.М. Смирнов, А.Э. Лычкова // Вести. РАМН.- 20021-№ 4.-С. 16-20.

48. Смирнов, В.М. Синергичное влияние серотонинергических и холи-нергических нервных волокон / В.М. Смирнов, А.Э. Лычкова // Бюл. эксе-римент. биологии и медицины.- 2001.-№ 12.-С.624-626.

49. Способность гемоглобина и миоглобина вызывать спазм гладкой мускулатуры и ускорять разрушение тромбоцитов. Описание серотонин-ферропротеиновых рецепторов / А.П. Симоненков, В.Д. Федоров, A.B. Федоров и др. // Вестн. РАМН.- 1995. №12.-С.45-51.

50. Судаков, К. В. Нормальная физиология: учеб. / К.В. Судаков.- М.: МИА, 2006.-920 с.

51. Ткаченко, Б. И. Нормальная физиология человека: учеб. / Б.И. Тка-ченко.- М.: Медицина, 2005.-928 с.

52. Тропская, Н. С. Роль серотонина в восстановлении электрической активности желудка и тонкой кишки в раннем послеоперационном периоде у крыс / Н.С. Тропская // Бюл. эксперимент, биологии и медицины.-2005.- №11.-С.511 -514.

53. Трубицына, И. Е. Молекулярный механизм взаимодействия нервной и диффузной эндокринной системы слизистой оболочки желудка / И.Е. Трубицына // Рос. мед. форум 2006 "Фундаментальная наука и практика", 18-20 окт., г. Москва.- М., 2006.-С. 134 - 135.

54. Уткина, Р. В. О значении заднекорешковой иннервации в моторной активности желудка / Р.В. Уткина // Физиол. журн. СССР.-1956.-Т.42,№12.-С.Ю58 1063.

55. Уточнение Классификации гипоксических состояний / А.П. Симоненков, В.Д. Федоров, В.М. Клюжев и др. // Вестн. РАМН.- 2004. -№1. -С.46-48.

56. Физиология человека : курс лекций / Н.А. Агаджанян, JI.3. Тель, В.И. Циркин, С.А. Чеснокова.- СПб.: Сотис, 1998.- 510 с.

57. Физиология человека : учеб. В 2-х т. / под ред. В.М. Покровского, Г.Ф. Коротько.- М.: Медицина, 1998.

58. Физиология человека. Т.1-3 / под ред. Р. Шмидта, Г. Тевса.- 3-е изд.-М.: Мир, 2004. 864 е.: ил.

59. Шварева, О. А. Серотонинпродуцирующие клетки двенадцатиперстной кишки сибирского бурундука в различных сезонных условиях / О.А. Шварева, М.С. Виноградова, JI.B. Шестопалова // Бюл. эксперимент, биологии и медицины.- 2001. №6.-С.709-712.

60. Barajas-Lopez, C. Inhibitory interactions between 5HT3 and P2X channels in submucosal neurons / C. Barajas-Lopez, L.M. Montano, R. Espinosa-Luna // Amer J Physiol Gasrtoin Liver Phys.-2002.-Vol.283.-N6.-P. G1238 -G1248.

61. Bathon, E. Cholinergic responce of the gastroduodenal junction to splanchnic nerve stimulation / E. Bathon, H. Ormsbee // Gastroenterology.-1980.- Vol.78.- N5.-P.1528-1600.

62. Bejar, E. Inhibitory effect of 5-hydroxytryptamine on rat stomach fundus: mediated indirectly by activation of noradrenaline release / E. Bejar, M.H. Malone // J Pharm Pharmacol. -1995.-Vol.47.-N8.-P. 637-42.

63. Black, J. Definition and antagonism of Histamine2 receptors / J. Black, L. Barker // Nature.-1981.-Vol.236.-N2.-P.385-390.

64. Bockaert, J. The 5HT4-receptors a place in1 the sun / J Bockaert // Trends Pharmacol.- 1992-Vol.l3.-P.141-145.

65. Cerutti, M. P. Paultre Beat-to-beat stroke volume estimation from aortic pressure waveform in conscious rats: comparison of models / M.P. Cerutti, P. Gustin, C.Z. Molino // Am J Physiol Heart Circ Physiol.-2001.- Vol.281.- P. H1148-H1155.

66. Changeux, J. The nicotine acetylcholine receptor : molecular architecture of a ligand regulated ion channel / J. Changeux, J. Giraudot, M. Dennis // Trends Pharmacol Sci.-1987.-Vol. 8.-Issuel2.-P.459-465.

67. Characteristics of the L-leucine uptake inhibition by serotonin across the jejunum of rabbit' / M.T. Salvador, .M.C. Rodriguez-Yoldi, A.I. Alcalde, M.J. Rodriguez-Yoldi> // J Physiol Proc.- 1996:-N 493.- P. 107S.

68. Clinical trial: Effects of tegaserod on gastric motor and sensory function in patients with functional dyspepsia / M. Thumshirn, H. Fraehauf, B. Stutz et al. //Alim Pharmacol*Ther.-2007.-Vol.26.-N10.-P. 1399-1407.

69. Cothert, M. 5HT3 receptor antagonism by anpirtoline, mixed 5HT1 agonist 5HT3-receptor antagonist / M. Cothert, M. Hamon, M. Barran // J Pharmacol.- 1995.- Vol.114.-N2.-P:269-274.

70. Delbro,-D. Non-ganglionic cholinergic excitatory pathways in the sympathetic supply to the feline stomach. An efferent system orafferents with'excitatory axon collateral / D: Delbro, B. Lisander // Acta Physiol Scand.- 1980.-Vol:110.-N2.-P. 137-144.

71. Derkach, V. 5HT3-receptors are membrane ion channels / V. Derkach, A. Suprenant, R. North //Nature.-1989.- Vol.339.-N.6227.-P.706-709.

72. Effects of rat sinoaortic denervation on the vagal responsiveness and expression of muscarinic acetylcholine receptors / P.P. Soares, C.S. Porto, F.M. Abdalla et al. // J Cardiovasc Pharmacol.- 2006.-Vol.47.-N3.-P.331-336.

73. Effects of serotonin on acid secretion in isolated rat stomach: the role of 5HT3-receptors / Y.C. Lai Y, Y. Ho, K.H. Huang, L.H. Tsai // Chin J Physiol.-2009.-Vol.52.- Suppl 5.-P.395-405.

74. Evidence for a non-classical splanchnic neural control of the feline pylorus / P. Lidberg, R. Edin, J. Lundberg et al. // Acta physiol Scand.-1982.-Vol.l5.-N2.-P.225-232.

75. Fandriks, L. Cholinergic excitatori motor responses of the feline colon elicited by high-strength sympathetic nerve / L. Fandriks, D. Delbro // Acta Physiol Scand.- 1983-Vol.117-N3.-P.473-475.

76. Fozard J. 5HT3-receptors and cytotoxic drug-induced vomiting / J. Fo-zard //Trends Pharmacol Sci.-1987.-Vol.8.-Issue2.-P.44-45.

77. Fozard, J. Agonists and antagonists of 5HT3-receptors / J. Fozard // Cardiovascular Pharmacology of 5-Hydroxytryptamine / ed. P. Saxena.- Kluwer the Netherlands, 1990.-P. 101-115.

78. Function of Serotonin 2C Receptor in Rats' Aortic and Pulmonary Arterial Smooth Muscle Cells Exposed to Hypoxia / Zhang Bo, Li Zhi-chao, Liu Yi et al. // J US-China Med Science.- 2007.-Vol. 4.-N3.-P.1-5.

79. Gillespie, J. E. The inhibitory action of the sympathetic nerves on the smooth muscle of the rabbit gut, its reversal by reserpine and restoration by catechol amines and by dopa / J.E. Gillespie, B.R. Mackenna // J PhysioL-1961.-Vol.156.-Nl.-P. 17-34.

80. Glennon, R. Serotonin receptors : Clinical implications / R. Glennon // Neuroscience & Biobehav Rew.-1990.-Vol.l4.-Nl.-P.35-40.

81. Guinea pig 5HT transporter: Cloning, expression, distribution, and function in intestinal sensory reception / Chen Jing-Xian, Pan Hui, P. Rothman Taube et al. // Amer J Physiol.- 1998.-Vol.275.-N3, Ptl.-P.433-448.

82. Hagihara, K. Antagonistic activities of N-3389, newly synthesied diazo-bicycloderivate at 5HT3 and HT4 / K. Hagihara, T. Hayakawa, T. Arai // J Pharmacol.- 1994.- Vol.271.- N1.-P. 159-166.

83. Hardcastle, J. 5-hydroxytiyptamine-induced secretion by rat jejunum in-vitro involves several 5-hydroxytryptamine receptor subtypes / J. Hardcastle, P. Hardcastle // J Pharm. and Pharmacol.-1998. -Vol.50.-N5.-P.539-547.

84. Hardcastle, J. Comparison of the intestinal secretory, response to 5-hydroxytryptamine in the rat jejunum and ileum in vitro / J. Hardcastle, P. Hardcastle // J Pharm and Pharmacol. -1997.-Vol.49.-Nl l.-P.l 126-1131.

85. Hoffmann, B. Adrenoreceptor activating and other sympathomimetic drugs / B. Hoffmann // Basic and Clinical Pharmacology / ed. B. Hoffmann.-6 ed. -Lange med.book, 1995.- Chapter 9,10.-P.l 15-146.

86. Inhibitory effects of various spasmolytics on the vagal afferent gastric excitatory response in cats / K. Kurahashi, M. Iwamoto, S. Aoki et al. // Life Sci. -1997.-Vol.61.-N8.-P.831-838.

87. Intestinal serotonin acts as a paracrine substance to mediate vagal signal transmission evoked by luminal factors in the rat / J.X. Zhu, X.Y. Wu, C. Owy-ang, Y. Li // J Physiol. -2001. -Vol.530.-N3.-P.431-442.

88. Kellum, J.M . PaulStroking human jejunal mucosa induces 5HT-release and CI' secretion via afferent neurons and 5HT4 receptors / J.M. Kellum, F.C. Albuquerque; M.C. Stoner, R. Harris // Amer J Physiol.- 1999.-Vol.277.- N3, Ptl.-P. G515-G520:

89. Komada, T. Pharmacological characterization of 5-hydroxytryptamine — receptor subtypes in circular muscle from the rat stomach / T. Komada, Sh.Yano // Biol Pharm Bull.-2007.-Vol.30.-N3.-P.508-513.

90. Kreis, M. E. Cosensitivity of vagal mucosal afferents to histamine and 5HT in the rat jejunum / M.E. Kreis, W. Jiang, A.J. Kirkup, D. Grundy // Amer J Physiol.- 2002-Vol. 283.-N3.-P.G612-G617.

91. MacLean, M. R. Serotonin and pulmonary hypertension—from bench to bedside / M.R. MacLean, Y. Dempsie // Curr Opin Pharmacol.- 2009.-Vol. 9.-N3.-P.281-286.

92. Malmejac, J. Action des nerfs extrinseques de l'estomac surla motraoite gastrique / J. Malmejac, V. Donnet, H. Monges // C R Soc Biol.-1940.-Vol.l33.-N3.-P.478-480.

93. Maricq, A. Primary structure and and functional expression of the 5-HT3 receptor, a serotonin ion-gated channel / A. Maricq // Science.-1991.- Vol.254.-N2.-P.423-432.

94. Marlier, L. Autoradiographic mapping of 5HTi, 5HT2-receptors in the rat spinal cord / L. Marlier, J. Teihac, C. Ceruti // Brain Res.- 1991.- Vol.550.-Nl.-P. 15-23.

95. Martin, T. Serotonin — induced pulmonary receptors are mediated by the 5HT2-receptor in the mouse / T. Martin, M. Cohen, J Drasen // J Exp Ther.-1994.-Vol.268 .-N1 .-P. 104-109.

96. McKenzie, C. Mechanisms involved in the regulation of bovine pulmonary vascular tone by the 5HTiB receptor / C. McKenzie, V.R. Alapati, A. MacDonald, A.M. Shaw // Br J Pharmacol. -2010.-Vol. 159.-N1.-P. 188-200.

97. Mediation by 5-hydroxytryptamine of the femoral vasoconstriction induced by acid challenge of the rat gastric mucosa / H. Wachter, A. Heinemenn, J. Donnerer et al. // J Physiol.- 1998.-Vol. 509.- N2.-P.541-550.

98. Nakazato, Y. Gastric motor and inhibior response stimulatoin on the sympathetic nerve in the dog / Y. Nakazato, K. Saito, A. Ohga // Jap J Pharma-col.-1970.-Vol.20.-Nl .-P. 131-141.

99. New benzimidazole derivatives: selective and orally active 5-HT3 receptor antagonists / D. Pascual, R. Giron, A. Alsasua et al. // Eur J Pharmacol.-2003 .-Vol.462.-Nl -3 .-P.99-107.

100. New benzimidazole derivatives: selective and orally active 5HT3-receptor antagonists / D. Pascual, R. Giron, A. Alsasua et al. // Eur J Pharmacol.- 2003.-Vol.462.-N(l-3).-P.99-107.

101. Pharmacological characterization of 5-hydroxytryptamine-induced contraction in the chicken gastrointestinal tract / T. Kitazawa, H. Ukai, S. Komori, T. Taneike // Auton Autacoid Pharmacol. -2006.-Vol.2.-N2.-P. 157-168.

102. Psychosocial factors and platelet 5-HT levels and gastric ulcer relations. / Xue-li Sun, Wang Yi-ping, Liu Tao-sheng, Wu Jun-chao, Luo Qiu-hua // Sichuan Science (Medical Sciences).-2004.- Vol.35.-№6.-P. 815-817

103. Regulatory role of 5HT and muscarinic receptor antagonists on the migrating myoelectric complex in rats / L.-G. Axelsson, B. Wallin, P.-G. Gillberg et al. // Eru J Pharmacol. -2003.-Vol.467.-№ 1-3.-P.211-218.

104. Richardson, B. The pharmacology and function of 5HT3-receptors / B. Richardson, G. Engel // Trends Neurosci. -1986.- N9.-P.424-429.

105. Role of 5-HT1B/D receptors in canine gastric accommodation: effect of sumatriptan and 5-HT1B/D receptor antagonists / F.De Ponti, F.Crema, E. Moro et al. // Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol.-2003.-Vol. 285.-P.G96-G104.

106. Ronde, P. Homologous desensitisation of 5HT4-receptors in rat esophagus. Functional and second messenger studies / P. Ronde, H. Asanay, A. Dum-nis // J Pharmacol Exp Ther.- 1995.-Vol.272.-N3.-P.977-983.

107. Saxena, P.R. Cardiovascular Effects of Serotonin Agonists and Antagonists / P.R. Saxena, C.M. Villalon // J Cardiovasc Pharmacol.- 1990. Vol. 15.-Suppl7.-P.S. 17-34.

108. Serotonergic modulation of murine fundic tone / L. Xue, M. Camilleri, G.R. Locke 3rd et.ah. // Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. -2006.-Vol. 291.-N6.-P G1180-G1186.

109. The secretory response of mouse distal colon to 5-hydroxytryptamine in vitro / J. Hardcastle, P. Hardcastle, P. Klaren et al. // Physiol Proc.- 1999.-Vol.517.-P.89.

110. Van Harn, G. L. Responses of muscles of cat small intestine to autonomic nerve stimulation / G.L. Van Harn // Amer J Physiol.- 1963.-Vol.204,-N2.-P.352-358.

111. Walcourt-Ambardermo, A. 5HT-receptors on identifed lymnae neurons in culture. Pharmacological characterization of 5HT2 receptors / A. Walcourt-Ambardermo, W. Winlow // Gen Pharmacol.- 1994.- Vol.25.-N.6.-P. 10791092.

112. Zifa, E. 5-Hyroxytriptamine Receptors / E. Zifa, G. Fillion // Pharmacol Rew.- 1992.-Vol.44.-N.3.-P.401-458.