Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Исследование противолучевой эффективности биотехнологических препаратов МД1 и МД2

ВАК РФ 03.00.01, Радиобиология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Соболь, Константин Владимирович

ВВЕДЕНИЕ.

Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Часть I,

1.1. Химическая защита.

1.1.1. Рецептор-опосредованная защита.

1.2. Биологическая защита.

1.3. Механизмы противолучевой защиты.

Часть II.

1.4. Длительность митотического цикла в культуре лимфоцитов.

1.5. Задержка клеточного деления, вызванная облучением.

1.5.1. задержка клеток млекопитающих.

1.5.2. Связь репликации и репарации ДНК.

1.6. Использование микроядерного теста для оценки величины повреждения генетического материала клетки.

1.7. Передача информации в клетке.

1.7.1. Фосфоинозитидный путь передачи сигнала.

1.7.1.1. Двойственная роль цротеинкиназы 0.

1.7.1.2. Роль протеинкиназы С в клеточном цикле лимфоцитов.

1.7.1.3. Участие протеинкиназы С в тоническом сокращении гладких мышц.

1.7.2. Участие вторичных мессенджеров в реализации защиты от лучевого воздействия.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Ра диомоди$ициру щев действие препаратов

KD1 и MD

2.1 Л. Эксперименты на животных.

2.1.1.1. Условия облучения.

2.1 Л.2. Схема применения MD2.

2.1.2. Эксперименты In vitro.

2Л.2.1. Анализ количества микроядер.

2.1.2.2. Культура лимфоцитов человека для цитофлуориме триче ского анализа.

2Л.2.3. Условия облучения.

2.1.2.4. Цитофлуориме триче ский анализ количества ДНК.

2.2. Фармакологические эксперименты.

2.2Л. Объект.

2.2.2. Экспериментальная установка.

2.2.3. Ход эксперимента.

2.3. Используемые растворы.

2.4. Препараты MDI и MD2.

2.5. Статистическая обработка экспериментов.

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Радаомодифицирущее действие препаратов

MD1 И MD2.

3.1 Л. Эксперименты на животных.

3.1.1.1. Радиозащитное действие MD2 в опытах на мышах.

3.1.1.2. Терапевтическое действие MD2 в опытах на собаках.

3.1.2. Экперименты In vitro. бб

3.1.2.1. Влияние MDI на образование микроядер в лимфоцитах человека после облучения.

3.1.2.2. Изменение кинетики клеточного цикла после добавления Ш31 в культуру лимфоцитов человека.

3.2. Фармакологический анализ.

3.2.1. Сократительные реакции нижней полой вены лягушки в ответ на действие MDI.

3.2.2. Влияние блокаторов кальциевых каналов, верапамила и ионов Со , на тоническое сокращение, вызванное 10% MD1.

3.2.3. Влияние блокатора протеинкиназы Cf Н7, на тоническое сокращение, вызванное 10% MDI.

3.2.4. Действие бескальциевой среды на тоническое сокращение, вызванное 10% MDI.

Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ.

4.1. Радиомодифицирущее действие MD2 в опытах на животных.

4.2. Эффекты, вызываемые MDI в культуре лимфоцитов человека.

4.3. Эффекты, вызываемые MDI в нижней полой вене

ВЫВОДЫ.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Исследование противолучевой эффективности биотехнологических препаратов МД1 и МД2"

Прошло более 40 лет с момента опубликования работ (Patt et al., 1949; Bacq et al., 1949), предопределивших изучение сероазотсодержащих веществ в качестве основных и перспективных средств профилактики радиационных поражений. Последущее интенсивное развитие радиобиологических исследований, базирующихся на скрининге десятков тысяч соединений различной химической структуры, привело к открытию новых радиопротекторов в различных классах веществ. Несомненным достижением является открытие эффективных радиопротекторов среди тиофос-фатов, N-замещбнных солей Бунте, индолил- и фенилалкилами-нов, имидазолинов, эстрогенов, пуриновых оснований и ряда других веществ (Sweeney, 1979; Владимиров и др., 1989; Вартанян и др., 1993; Свердлов и др., 1993).

Вместе с тем, результаты этих многолетних исследований свидетельствуют и о том, что среди всего многообразия активных в радиозащитном отношении соединений пока не обнаружено таких веществ, которые по своим основным характеристикам (ФИД, переносимость) принципиально отличались бы в лучшую сторону от ранее предложенных препаратов. Например, ФИД существующих радиопротекторов по критерию выживаемости животных пока не превысил 1,8-2,0. Одним из основных препятствий к практическому использованию многих радиопротекторов остаЗтся снижение их эффективности при переходе от мелких лабораторных животных к высшим млекопитающим и человеку. Так, если число эффективных радиопротекторов в опытах на мелких грызунах составляет несколько сотен, то в опытах на собаках и обезьянах в условиях летального облучения только единичные препараты повышают выживаемость животных более чем на 50% (Саксонов и др., 1976).

Что касается использования химических средств для противолучевой защиты человека, то этот вопрос ещб окончательно не решЗн. Основной причиной, препятствующей практическому применению протекторов, является их высокая токсичность (Саксонов и др., 1976; Ярмоненко, 1988).

О другой стороны, число соединений, обладающих радиотерапевтическим действием, ограничено (Вартанян и др., 1991; Бойко и др., 1995). Те средства, которые могут применяться после облучения, имеют низкий ФИД (1,1-1,3) и, как правило, эффективны при нелетальных дозах облучения (Weiss et al., 1990; РогачЭва, 1995).

Поэтому поиск веществ, обладающих низкой токсичностью, применение которых эффективно после облучения, является актуальной и крайне важной задачей для практики.

В бывшем Советском Союзе препарты MDX и MD2 использовались в пищевой промышленности в качестве добавок диетического, в частности детского питания, в кондитерской промышленности, в качестве стимуляторов ферментативных процессов в сыродельческой и мясной промышленности, а также в качестве добавок в корм скоту (Клаар и др., 1968).

В 1962 г. Бобровым и др. была подана заявка на получение авторского свидетельства. Было найдено, что при пероральном введении MD2, в дозе I мл/кг веса, повышается устойчивость организма мышей и человека к физическим нагрузкам и гипоксии, а также улучшает функциональное состояние центральной

- 7 нервной системы человека (Бобров и др., 1982).

Поскольку, МВД увеличивает неспецифическую резистентность организма к неблагоприятным факторам среда, представляется важным проверить МВД на наличие радиозащитной активности.

Цель и задачи иссляддрдния Основная цель исследования -показать радиозащитные и терапевтические свойства биотехно-логических препаратов MDI и МВД и определить некоторые из возможных механизмов радиозащитного эффекта. В связи с этим в работе решались следующие конкретные задачи:

1) В экспериментах на собаках и мышах оценить влияние препарата МВД, применяемого как до, так и после облучения, на развитие лейкопении и анемии, среднюю продолжительность жизни (СПЖ) и на выживаемость.

2) Исследовать влияние постлучевого применения препарата MDI на процессы восстановления генетического материала в лимфоцитах человека, а именно, на образование микроядер и задержку клеток в G2 фаге.

3) Осуществить фармакологический анализ действия MDI и определить некоторые аспекты механизма действия препарата в экспериментах на изолированных сегментах нижней полой вены лягушки.

Научная новизна. Подтверждена перспективность изыскания радиозащитных средств среди веществ, являющихся активаторами протеинкиназы С.

- Показано, что МВД обладает радиозащитным и терапевтическим действием в опытах на животных.

- В опытах in vitro показано, что MDI при постлучевом применении способен восстанавливать повреждение генетическо го материала клетки.

- Найдено, что биотехнологический препарат ЬШ1 является активатором протеинкиназы С.

Практическая значимость состоит в том, что показана перспективность применения препаратов ШЯ и МВ2 при острых лучевых поражениях.

Заключение Диссертация по теме "Радиобиология", Соболь, Константин Владимирович

вывода

1) При введении хивотннм-мышам препарата Ш32 за 1-5 ч до тотального 7-облучения в дозе 7,5 Гр (ДЦ95/30) выявлен значительный радиозащитный эффект, который проявляется в увеличении выживаемости защищенных животных на 36-52% и предупреждении инволюции тимуса и селезенки.

2) В опытах на мышах и собаках, облученных в су0летальных и летальных дозах, установлено, что МШ обладает терапевтическим действием, который проявляется в увеличении выживаемости леченых животных (соответственно на 18% и 44%) и ослаблении клинических проявлений костно-мозгового синдрома. Показано, что для реализации терапевтического эффекта в полном объеме, необходимо многократное введение препарата в постлучевом периоде.

3) На клеточном уровне выявлен значительный противолучевой эффект препарата МШ. Найдено, что при постлучевом применении МБ1 значительно снижает частоту микроядер в лимфоцитах человека и накопление клеток в 02+М фазе клеточного цикла.

4) На гладкомышечной модели установлено, что ММ вызывает сокращение гладких мышц сосудов лягушки посредством активации кальций-зависимой формы протеинкиназы С.

- но

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Соболь, Константин Владимирович, Санкт-Петербург

1. Авдонин П.В., Ткачук В.А. Рецепторы и внутриклеточный кальций.- М.: Наука, 1994, 262 с.

2. Агафонов В.И., Дыгзй A.M., Шахов В.П., Гольдберг Е.Д. Роль гемопоэзиндуцирущего микроокружения в постлучевой регенерации гемопоэза.- Радиац. биология. Радиоэкология, 1994, Т. 34, N I, с. III-II6.

3. Асламова Л.И., Блюм Л.Б., Цудзевич Б.А., Кучерина Н.Е. Радиобиология, 1985, Т. 27, с. 342-327.

4. Бак 3. Химическая защита от ионизирующей радиации.-М.: Атомиздат, 1968, 264 с.

5. Бак 3. , Александер П. Основы радиобиологии.- М., 1963, 500 с.

6. Барабой В.А. Ионизирующая радиация в нашей жизни. -М., 1991, 224с.

7. Бобров Ю.М., Соболь Ю.Ц., Колесов А.П. и др. Применение MD2 в качестве вещества, повышающего физическую работоспособность и обладающего антигипок-сическим действием.- а.с. К 3512125/13, 1982.

8. Брехман И.И. Элеутерококк. Л: Наука, 1968.

9. Вартанян Л.П., Пустовалов Ю.И., Горнаева Г.Ф.,- 112

10. Вершинина С.Ф. Новые подходы к разработке химических протекторов, эффективных при пострадиационном применении.- В сб.: Современные достижения медицинской радиологии, С.Пб., 1993а, с. 261-263.

11. Вартанян Л.П., Крутовских Г.Н., Пустовалов Ю.И., Горнаева Г.Ф. Адаптационные лучевые реакции систем клеточного обновления и механизмы радиомодофшации.-Медицинская радиология, 19936, Т 38, N 9, с. 35-36.

12. Вартанян Л.П., Горнаева Г.Ф.,Пустовалов Ю.И., Вершинина С.Ф. Результаты поиска химических радиомодификаторов среди производных пуриновых оснований,- В сб.: Новые технологии в радиационной медицине, С.Пб., 1995, с. 210-212.

13. Виноградов А.Е., Ежевский С.А. Возможная роль протеин-киназы С в клеточном цикле Т-лимфоцитов.- Цитология, 1987, Т. 29, N 7, с. 749-752.

14. Владимиров В.Г., Красильников И.И., Арапов О.В. Радиопротекторы: структура и функции.- Киев: Наук, думка, 1989, 264 с.

15. Владимиров В.Г., Красильников И.И. Фармакологические механизмы радиозащитного эффекта в условиях целостного организма и перспективы изыскания радиопротекторов.- Радиац. биология. Радиоэкология, 1994, т. 34, N I, с. 121-133.

16. Воробьёв А.И., Чертков И.А., Бриллиант М.Д. Кроветворение.- В кн.: Руководство по гематологии / Под ред. А.И. Воробьёва, М.: Медицина, Т. I, 1985.

17. Гончаренко E.H., Кудряшов Ю.Б. Гипотеза эндогенногофона радиорезистентности. М.: Изд-во МГУ, 1985, 249с.

18. Груздев Г. П. Острый радиационный костномозговой синдром,- М.: Медицина, 1988, 144 с.

19. Гуценко К.К., Иванов A.A., Каверина К.В. Влияние бактериальных препаратов на гемопоэз облучённых животных.- Радиац. биология. Радиоэкология, 1994, Т. 34, Н 4-5, С. 582-586.

20. Дешевой Ю.Б., Мороз Б.Б. и др. Стимулирующее действие миелопида на регенерацию костно-мозгового кроветворения при экспериментальной острой лучевой болезни. -Радиац. биология. Радиоэкология, 1994, Т. 34, N 4-5, с. 561-564.

21. Жербин Е.А., Чухловин A.B. Радиационная гематология.-М.: Медицина, 1989, 176 с.

22. Жеребченко П.Г. Противолучевые свойства индолилалкила-минов. М., 1971.

23. Жестянников В.Д. Репарация ДНК и её биологическое значение.- Л.: Наука, 1979, 185 с.

24. Жестянников В.Д. Проблема регуляции конститутивных процессов репарации ДНК в клетках млекопитающих.-Studia Biophysica, 1986, v. 112, N 1, р. 27-31.

25. Ильинских H.H., Ильинских В.В. и др. Микроядерный анализ и цитогенетическая нестабильность.- Томск, 1992, 272 с.

26. Комар В.Е., Хансон К.П. Информационные макромолекулы при лучевом поражении клеток. М.: Атомиздат, 1980.

27. Коноплянников А.Г. Радиобиология стволовых клеток.-М.: Энергоатомиздат, 1984, 120 с.

28. Корытова Л.И., Ильин Н.В., Вартанян Л.П. и др. Протективное действие рибоксина в процессе лучевого лечения больных лимфогранулематозом.- В сб. : Новые технологии в радиационной медицине, С.Пб., 1995, с. 145-146.

29. Костюк П.Г., Чазов Е.И. Внутриклеточная сигнализация: биологические и медицинские аспекты проблемы.- Успехи физиол. наук, 1988, Т. 19, N 4, с. 3-II.

30. Крутецкая З.И., Лонский Л.Е. Биофизика мембран.- С.Пб. 1994, 250 с.

31. Кузин A.M. Структурно-метаболическая теория в радиобиологии.- M., I986, 260 с.

32. Кулинский В. И. Роль циклических нуклеотидов в естественной и модифицированной радиорезистентности.-В кн.: Радиобиология системы циклических нуклеотидов / под ред. A.C. Соболева, М.: Наука, 1980, с. 30-33.

33. Лазарев Н.В. Руководство по фармакологии. М: Медгиз, 1961.

34. Легеза В.И., Шагоян М.Г., Чигарева Н.Г. и др. Цростагландины роль в механизмах развития синдрома первичной реакции на облучение.- Радиац. биология. Радиоэкология, 1994, Т. 34, К с. 32-38.

35. Меньшиков В.В. Лабораторные методы исследования в клинике. Справочник.- М.: Медицина, 1987, 365 с.

36. Паркер Ч.В. Медиаторы: высвобождение и функция.- В кн.: Иммунология, 1989, Т. 3, с. 170-247.

37. Рогачбва С. А. Лечебное действие рекомбинантного интерлейкина-2 человека при острой лучевой болезни вэксперименте,- Радиац. биология. Радиоэкология, 1995, Т. 35, К 2, с. 237-243.

38. Рогачбва С.А., Симбирцев A.C., Муксинова К.Н. Изучение противолучевого действия интерлейкина-Iß в эксперименте.- Радиац. биология. Радиоэкология, 1995, Т. 34, N 3, с. 419-423.

39. Саксонов П.П., Шашков B.C., Сергеев П.В. Радиационная фармакология. M., 1976, 256 с.

40. Свердлов А.Г., Грачев С.А., Бондарев Г.Н., Никэнорова Н.Г. Поиск путей повышения химической защиты от действия ионизирующей радиации. В сб.: Современные достижения медицинской радиологии, С.-Петербург, 1993, с. 316-318.

41. Севанькаев A.B. Радиочувствительность хромосом лимфоцитов человека в митотическом цикле.- М.: Энергоатомиз-дат, 1987, 160 с.

42. Соболев A.C. Радиационная биохимия циклических нуклеотидов,- М.: Энергоатомиздат, 1987, 102 с.

43. Соболь К.В. Тензометрический датчик для измерения силы, развиваемой одиночным мышечным волокном. Физиол. ж. СССР, 1991, Т. 77, с. 108-111.

44. Соболь И.В., Колюбаева С.Н., Комар В.Е. Снижение повреждающего действия 7-облучеиия на лимфоциты человека при постлучевой обработке препаратом MDI.

45. Радаац. >бжадогия. Радиоэкология, 1994а, Т. 34-с. 143-147.

46. Соболь К.В., Алтмери Т.У., Соболь Ю.Ц. Иммуномодуляторы с бактерицидными свойствами. Патент N 94-023794,- 116 приоритетная справка от 30 мая 1994.

47. Хансон К.П., Комар В.Е. Молекулярные механизмы радиационной гибели клеток.- М.: Энергоатомиздат, 1985, с. 150.

48. Эйду с Л.Х. Физико-химические основы радиобиологических процессов и защиты от излучений. М., 1979.

49. Эйду с Л.Х., Корыстов Ю.К. Кислород в радиобиологии. -М., 1984.

50. Эшмен Р.Ф. Активация лимфоцитов.- В кн: Иммунология / под ред. У. Пола, М.: Мир, 1987, Т. I, с. 414-469.

51. Ярилин А. А. Действие ионизирующей радиации на лимфоциты.- Иммунология, 1988, Т. 5, с. 5-11.

52. Ярмоненко С.П. Радиобиология человека и животных.- М., 1988, 424с.

53. Abe К., Yoshida М., Haul Т. et al. Highly synchronous culture of fibroblasts from G2 block caused by staurosporlne, a potent Inhibitor of protein kinases.-Exp. Cell. Res., 1991, v. 192, p. 122-127.

54. Abraham S.K., Mahajan S., Kesavan P.O. Inhibitory effects of dietary vegetables on the in vivo clastoge-nicity of cyclophosphamide.- Mutat. Res. Genet. Toxicol. Test., 1986, v. 172, p. 51-54.

55. Ainsworth E.J. Prom endotoxins to newer immunomodula- 117 tors: Survival-promoting effects of microbal polysa-charide complexes In irradiated animals. Pharmacol. Therapeut., 1988, y. 39, p. 223-241.

56. Bacq Z. The amines and particularly cysteamine as protector against roentgen rays.- Acta radio1., 1954, Y. 41, p. 47

57. Bacq Z., Herve A. Protection chimique contre le rayonnement X.- Bull. Acad. Roy. Med. Belg., Vlth aeries, 1952, y. 17, p. 13

58. Bacq Z., Herve A., Lecomte J. et al. Protection contre le rayonnement X par la p-mercaptoethylamine. Arch. Intern. Physiol., 1951, v. 59, p. 442.

59. Bacwell C.B., Hudson J.L., Irvin G.L. Non-parametric flow cytometry analysis.- J. Histochem. Cytochsm., 1979, Y. 27, N 1, p. 293-296.

60. Barron E., Dickman S., Muntz J., Singer T. Studies on the mechanism of action of ionizing radiations. I. Inhibition of enzymes by X rays.- J. Gen. Physiol., 1949, Y. 32, p. 537

61. Bender M.A., Prescott, D.M. DNA synthesis and mitosis in cultures of human peripheral leukocytes.- Exptl. Cell Res., 1962, y. 27, p. 221-229.

62. BerkowR.L., Kraft A.S. Bryostatin, a non-phorbo- 118 macrocyclic lactone, activates intact human polymorphonuclear leukocytes and hinds to the phorbol ester receptor- Biochem. Biophys. Res. Commun., 1985, v. 131, p. 1109-1116.

63. Bernhard E.J., Maity A., Muschel R.J., McKenna W.G. Increased expression of cyclin B1 mRNA coincides with diminished G2-phase arrest in irradiated HeLa cells treated with staurosporine or caffeine.- Radiat. Res., 1994, v. 140, p. 393-400.

64. Berridge M.J. Inositol trisphoshate and diacylglycerol: two interacting second messengers.- Annu. Rev. Biochem., 1987, v. 56, 159-193

65. Berridge M.J., Irvine R.F. Inositol trisphoshate, a novel second messendger in cellular signal transduction. Nature, 1984, v. 312, p. 315-321.

66. Berridge M.J., Irvine R.F. Inositol phoshatea and cell signalling.- Nature, 1989, v. 341, p. 197-205.

67. Bolton T.B. Mechanisms of action of transmittersand other substances on smooth muscle.- Physiol. Rev., 1979, V. 59, p. 606-718.

68. Bogo V., Jacobs A.J., Weiss J.F. Behavioral toxicity of WR-2721 as a radioprotectant. Radiat. Res., 1985, v. 104, p. 182-190.

69. Carpenter G., Cohen S. Human epidermal growth factor and the proliferation of human fibroblasts.- J. Cell. Physiol., 1973, v. 88, p. 227-237.

70. Castagna M., Takai Y., Kaibuchi K., Sano K., Kikkawa U., Nishizuka, Y. Direct activation of calcium-activated,phospho 1 ipid-dependent protein kinase by tumor-promoting phorbol esters.- J. Biol. Chem., 1982, v. 257, p. 7847-7851 .

71. Catalan J., Autio K., Wessman M. et al. Age-associated micronuclei containing centromeres and the X chromosome in lymphocytes of women.- Cytogenet. Cell. Genet., 1995, v. 68, p. 11-16.

72. Chapman W., Sipe C., Eltzholtz D et al. Sulfhydryl-containing agents and the effects of ionising radiation.- Rdiology, 1950, v. 55, p. 865.

73. Chirigos M.A., Patchen M.L. Surrey of newer biological response modifiers for possible use in radioprotection.-Pharmacol. Therapeut., 1988, v. 39, p. 243-246.

74. Countryman P.I., Heddle J.A. The production of micronuclei from chromosome aberration in irradiated cultures of human lymphocytes.- Jftitat. Res., 1976, v. 41, p. 321-332.

75. Dale W., Gray L-, Meredith W. The Inactivation of an enzyme (carboxypeptidase) by X-and a-radiation.-Phil. Trans. Roy. Soc, 1949, v. 242 A, p. 33

76. Darsynkiewicz Z. Andreeff H. Proliferation and differentiation of normal and leukemic lymphocytes as analysed by flow cytometry.- Acta Path. Microbiol. Scand., 1981, v. 89, Suppl. 274, p. 392-397.

77. Davidson D. E., Grenan M. M., Sweeney T.R. Biological characteristics of some improved radioprotectors.-Radiat. Sensitizers, Their Use in the Clinical Managment of Cancer, ed. Brady L.W. (Masson, New- 120 -York), 1980, p.- 309-320.

78. Dewey W.C., Highfield D.P. G2 Mock In Chinese hamster ovary cells Induced by X-lrradlatlon, hyperthermia, cycloheximide or actinomycin D.- Rad. Res., 1976, v. 65, p. 511-528.

79. Bosch H.M., Schunnan R.K.B., Gelfand E.W. Polyclonal activation of human lymphocytes in vitro.- J. Immunol., 1900, v. 125, N 2, p. 827-832.

80. Durum S., Oppenheim J.J., Neta R. Immunophysiological role of iterleukine-1. In: Immunophysiology: Role of Cells and Cytokines in Immunity and Inflamation, 1989,

81. Oppenheim J.J., Shevach E. ed., Oxford University Press, Oxford, p. 210-225.

82. Eldjarn L-, Pihl A. On the mode of action of X-ray protective agents.- I The fixation in vivo of cystamine and cysteamine to proteins. J. Biol. Chem, 1956, v. 223, p. 41.

83. Parrar W.L., Anderson W.B. Interleukin-2 stimulates association of protein kinase C with plasma membrane.-Nature, 1985, v. 315, p. 233-235.

84. Farrar W.L., Ruscetti F.M. Association of protein kinase C activation with IL2 receptor expression.- J. Immunol., 1986, v. 136, p. 1266-1273.

85. Parrar W.L., Thomas P.T., Anderson W.B. Altered cytosol/membrane redistribution on interleukin-3 activation of protein kinase C.- Nature, 1985, v 315, p. 325-327.

86. Fujio N. Cyclic nucleatides, prostaglandins and- 121 ischemie heart disease.- N. Y., 1984, p 661-670.

87. Gelfand E.ff., Cheng R.K. et al. Mitogens trigger a calcium-independent signal Tor proliferation In phorbol-ester-treated lymphocytes.- Nature, 1985, v. 325, p. 419-420.

88. Gerber M.- Rad. Res., 1984, v. 100, p. 365-377. Gerber M., Ball D et al.- Immunol. Lett., 1985, v. 9, p. 279-283.

89. Giuolotto E., Mottura A., Giorgi R., et al. Frequences of SCE in relation to cell kinetics in lymphocytes cultures.- ttutat. Res., 1980, v. 70, N 3, p. 343-350.

90. Grdina D. J., Nagy B., Hill C. K. et al. The radiopro tector WR-1065 reduces radiation-induced mutations at the hypoxanthine-guanine phosphorlbosyl transferase locus in V79 cells.- Carcinogenesis, 1985, v. 6.,p. 929-931.

91. Greaves M., Janossy G., Doenhoff M. Selective triggering of human T and B lymphocytes in vitro by polyclonal mitogenes.- J. Exp. Med., 1974, v. 140, N 1, p. 1-18.

92. Hallahan D.E., Virudachalam S., Schwartz J.L. et al. Inhibition of protein kinases sensitizes human tumor- 122 cells to Ionizing radiation.- Radiat. Res., 1992, v. 129, p. 345-350.

93. Hanson W.R. Radiation protection by axogenoua arachidonic acid and several metabolites.- Prostaglandin and Lipid Metabolism in Radiation Injury, ed. Waiden T.L., Hughes H.N. (Plenum, New York), 1987, p. 233-243.

94. Hanson W. R., Ainsworth E.J. 16,16-Dime thy1 prostaglandin E2 induces radiopro test ion in murine intestinal and hematopoietic stem cells.- Radiat. Res., 1985, v. 100,p. 290-297.

95. Hanson W.R., Houseman K.A., Collins F.ff. Radiation protection in vivo by prostaglandins and related compaunds of the arachldonic acid cascade.- Pharmacol. Therapeut., 1988, v. 39, p. 347 -356.

96. Herve A., Bacq Z. Cyanure et dose le thaïe de rayons.-X. C. R. Soc. Biol., 1949, v. 143, p, 881.

97. Horiguchi J., Spriggs D., Imamura K. et al. Role of arachldonic acid metabolism in transcriptional Induction of tumor necrosis factor gene expression by phorbol ester.- Mol. Cell. Biol., 1989, v. 9,p. 252-258.

98. Iraray P.P., Kidson C. Perturbation of cell-cycle progression in 7-irradiated ataxia telangiectasia and Huntington's disease cells detected by DNA flow cytometric analysis.- Mutat. Res., 1983, v. 112, p. 369-382.

99. Itoh T., Kanmura Y., Kurlyama H., Simmoto K. A phorbol ester has dual actions on the mechanical response inthe rabbit mesenteric and porcine coronary arteries. J. Physiol. (London), 1966, v. 375, p. 515-534.

100. Kaibuchi K., Takai Y., Nishizuka Y. Protein kinase C and calcium ion in mitogenic response of macrophage depleted human peripheral lymphocytes.- J. Biol. Ghem., 195, v. 260, p. 1366-1369.

101. Kelly J.P., Johnston M.O., Parker C.W. J. Immunol., 1979, v. 122, p. 1563.

102. Kikkawa U., Takai Y. et al. Protein kinese C as a possible receptor protein for tumour promoting phorbol esters.- J. Biol. Cfoem., 1983, y. 258, p. 11442-11445.

103. Koretzky G.A., Danicli R.P., Green W.O. et al. Evidence for an interleukin independent pathway for human lymphocytes activation.- Proc. Natl. Acad. Sei. U.S.A., 1983, v. 80, p. 3444-3447.

104. Kraft A.S., Adler V., Hall P. et al. In vitro administration of bryostatln 1, a protein kinase C activator, decreases murine resistance to Salmonella typtiimurlum. Cancer Rea., 1992, v. 52 , 2143-2147.

105. Krauss S., Mochly-Rosen D. et al. Exposure of HeLa DNA polymerase alpha to protein kinase 0 affects its catalytic properties.- J. Biol. Ghem., 1987, v. 262, p. 3432-3435.

106. La Salle M., Billen D. Inhibition of BKA synthesis in murine bone-marrow cells by AET and cysteamine. Ann. N.Y. Acad. Sei., 1964, v. 114, p. 622-628.

107. Latarjet R., Ephrati E. Influence protectrice de certaines substances contre l'inactlvation d'un- 124 bacteriophage par les rayons. X. 0. R. Soc. Biol.-1948, Y. 142, p. 497

108. Lim-Sylianco C.Y., Concha J.A. et al. Mutagenicity, clastogenicity and antimutagenlcity of medicinal plant tablets produced by the NSTA pilot Plant.- Phillip. J. Sei., 1986, v. 115, p. 299-305.

109. Maisin J.R., Bacq Z.M. Toxicity. In: International Encyclopedia of Pharmacology and Therapeutics: Sulfur-Containing Radioprotective Agents, 1975, Bacq Z.M. ed., Fergamon, N.Y., p. 15-39.

110. Mai 8 in J.R., Kondl-Tamba A., Mattelin G. Polysacchardes Induce radioprotection of murine hemopoetic 3tem cells and increase the LD 50/30 days.-Radiat. Res., 1986, v. 105, p. 276-281.

111. Malikc M.A., Roy R.M., Sternberg J. Effect of vitamin E on postirradiation death In mice.- Experientia, 1978, v. 1216-1217.

112. Malkinson P., Gream M. et al. Cysteamine protection of X-ray-induced dysplasia in mouse hair.- Rad. Res., 1963, V. 19, p. 324-335.

113. May ff.S., Sharkis S.J., Esa A.H. et al. Antineoplastic bryiostatins are multipotential stimulators of human hematopoietic progenitor cell.- Proc. Natl. Acad. Sei. U.S.A., 1987, V. 84, p. 8483-8487.

114. Metcalfe J.C., Hecketh T.R., Smith G.A. et al. Early response pattern analysis of the mitogenic pathway in lymphocytes and fibroblasts.- J. cell. Sei., 1985, Suppl. 3, p. 199-228.- 125

115. Moore M.A.S., Gabrilove J., Jung J.P. Myeloid and erythroid stem cells: regulation in normal and neoplastic states.- In: Mediatora in cell growth differentiation, N.: Raven Press, 1985, v. 17, p. 147-156.

116. Neta R. Role of cytokines in radioprotection.-Pharmacol. Therapeut., 1988, v. 39, p. 261-266.

117. Neta R., Oppenheim J.J. Cytokines in therapy of radiation injury.- Blood, 1988. v. 72, p. 1093-1095.

118. Nishizuka Y. Studies and perspectives of protein kinase C.- Science, 1987, v. 233, p. 305-312.

119. Nishizuka Y. Studies and prospectives of the protein kinase С family for cellular regulation.- Cancer, 1989, v. 63, N 10, p. 1892-1903.

120. Oppenheim J.J., Gery I. Interleukin-1 is more than interleukin.- Immunol. Today, 1982, v. 3, p. 113.

121. Painter R. Effect of caffeine on DNA synthesis in irradiated and unirradiated mammalian cells.- J. Mol. Biol., 1980, V. 143, N 3, p. 289-301.

122. Painter R. Radioresistant DNA synthesis: an intrinsic feature of ataxia telangiectasia.- Mutat. Res., 1981, v. 84, N 2, p. 183-190.- 126

123. Patchen M.L., D'Alesandro M.M., Chirigos M.A., Weiss J.P. Radioprotection by biological response modifiers alone and in combination with WR-2721. Pharmacol. Therap., 1988, v. 39, p. 247-254.

124. Patchen M.L., MacVittie T.J., Jackson W.E. Postirra-diation glucan administration enhances the radioprotective affects of WR-2721Radiat. Res., 1989, v. 117, p. 59-69.

125. Patchen M.L., MacVittie T.J. et al. Administration of interleukin-6 stimulates multillneage hematopoieais and accelerates recovery from radiation-induced hematopoietic depression.- Blood, 1991, v. 77, N 3,p. 472-480.

126. Patt H., Smith D., Tyree E., Straube R. Further studies on modification af sensitivity to X-ray by cysteine.- Proc. Soc. Exptl. Biol. Med., 1950, v. 73, p. 18-25.

127. Patt H., Tyree E., Straube R., Smith D. Cysteine protection against X-irradiation.- Science, 1949, v. 110, p. 213-230.

128. Petkau A. Role of superoxide dismutase in modification of radiation injury. Br. J. Cancer., 1987, v. 55, (Supl. VIII), p. 87-95.

129. Prosser J.S., Moquet J.E. et al. Radiation induction of micronuclei in human lymphocytes.- Mutat. Res., 1988, V. 199, p. 37-45.

130. Rao P.N. The molecular basis of drug-induced G2 arrest in manmalian cells.- Mol. Cell. Biochem., 1980, v. 29,p. 47-57.

131. Rasmussen H.t Barrett P. Calcium messenger system: an integrated view. Physiol. Rev., 1984, v. 63, p. 938-984.

132. Rasmussen H., Takuwa Y., Park S. Protein kinase C in the regulation of smooth muscle contraction. FASEB J., 1987, v. 1, p. 177-185 .

133. Rickinson A.B., Ilbery P.L.T. The effect of radiation upon lymphocyte response to PHA. Cell Tiss. Kinet., 1971, V. 4, p. 549-562.

134. Riklis E. DNA repair as a probe of radioseñaltivity and radioprotection.- Radiopro tec tors and Anticarcino-gens, ed Nygaard O.F., Simic U.G. (Academic Press, N.Y.), 1983, p. 363-380.

135. Rozengurt E., Rodrlguez-Pena, A. et al. Diacylglycerol stimulates DNA synthesis and cell division in mouse 3T3 cells: Role of CA + 2-sensitive phospholipid dependent protein kinase.- Proc. Natl. Acad. Sei. U.S.A., 1984, V. 81, p. 5748-5752.

136. Samuales D., Shimizu Y., Shimizu N. Protein kinase C phosphorylates DNA topoisomerase I.- FEBS Lett., 1989, v. 259, p. 57-60.

137. Sasaki H, Norman, A. Proliferation of human lymphocytes in culture. Nature, 1966, v. 210, N5039, p. 913-914.

138. Schally A.V., Paz-Bouza J.J.I., Schlosser J.V. et al. Protective effects of analogs of luteinizing hormone-releasing hormone against X-radiat ion-induced damage1. rats.- Proc. Natl. Acad. Scl. U.S.A., 1987, v. 84, p. 851-857.

139. Scott D., Lyons G.Y. Homogeneous sensitivity of human peripheral blood lymphocytes to radiation-induced chromosome damage.- Nature, 1979, v. 278, N 5706,p. 756-758.

140. Seifter E. Rettura G., Fadawer J. et al. Morbidity and mortality reduction by sopplemental vitamin A or ß-carotene in CBA mice given total body radiation. -J. Natl. Cancer 1st., 1984, v. 73, p. 1167-1177.

141. Sharkis S.J., Jones R.J., Bellis M.L. et al. The action of bryostatin on normal human hematopoietic progenitors is mediated by accessory cell release of growth factors.- Blood, 1990, v. 76, p. 716.

142. Sinclair W.K. X-ray survival and BNA synthesis in Chinese hamster cells.- Proc. Natl. Acad. Sei. U.S.A., 1967, V. 58, p. 115-122.

143. Sinclair W.K. Protection by cysteamine against lethal-X-ray damage during the cell cycle of Chinese hamster cells.- Had. Res., 1969, v. 39. p. 135-154.

144. Slordal L., Warren D.J., Moore M.A.S. Effect of recombinant murine tumore necrosis factor on- 129 hemopoietic reconstitution in sublethally irradiated mice.- J. Immrnol., 1969, v. 142, p. 833-835.

145. Smith ff.W., Brecher G. et al. Effect of endotoxin on the kinetics of hemopoietic colony-forming cells In irradiated mice.- Radlat. Res., 1966, v. 27, p.710-717.

146. Sobol O.y. Mechanisms of vasoconstriction induced in frog vascular smooth muscle by MD1, a new bio techno logical agent. Gen. Physiol. Biothys., 1995, v. 14, p.293-303.

147. Sreedevl B., Rao B.S. Assay of micronuclei in peripheral blood lymphocytes as a biological indicator of radiation dose.- Radiat. Frot. Dosim., 1994, v. 51, N1, p. 41-45.

148. Sweeney T. R. A survey of compounds from the antiradiation drug development program of the US Army Medical Research and Development Command.- Washington, 1979, 851 p.

149. Taylor C.W. Receptor regulation of calcium entry.-Trends Pharmacol. Sci., 1987, v. 8, p. 79-80.

150. Vinogradov A.E., Ezhevsky S.A., Rozonov J.M. et al. Loosening of cell cycle controls of human lymphocytes under the action of tumour promoter TP A. Cell Prolif.,- 130 -1991, v. 24, p. 493-505.

151. Uckun P.M., Souza L., Waddick K.G. et al. In vivo radioprotective effects of recombinant human granulocyte colony-stimulating factor in lethally irradiated mice.- Blood, 1990, v. 75, p. 638-645.

152. Uckun P.M. Gil lis S et al. Effects of recombinant growth factors on radiation survival of human bone marrow progenitor cells.- Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys., 1989, v. 16, p. 415.

153. Urna Devi P., Thomas B. Bone marrow cell protection and modification of drug toxicity by combination of protectors.- Pharmacol. Therapeut., 1988, v. 39,p. 213-214.

154. Waiden T.L. A paradoxical role for eicosanoids: Radioprotectants and radiosensitizers.- Prostaglandin and Lipid Metabolism in Radiation Injury, ed. Waiden T.L., Hughes H.N. (Plenum, New York), p. 263-271.

155. Waiden T.L., Patchen M.L., MacVittie T.J. leukotriene-lnduced radioprotection of hematopoietic stem cells in mice.- Radiat. Res., 1988, v. 113, p. 338-395.

156. Waiden T.L., Patchen M.I., Snyder S.L. 16,16-Dimethyl prostaglandin E2 increases survival in mice following irradiation.- Radiat. Res., 1987, v. 109, p. 440-448.

157. Walker G.O. Inducible UNA repair systems.- Annu. Rev. Biochem., 1985, v. 54, p. 425-457.

158. Weiss J.P., Kumar K.S. Antioxidant mechanisms in radiation injury and radioprotection. In: Cellular Antioxidant Defense Mechanisms, 1988, V. II, Chow O.K.- 131 ed., CRC Press, Orlando, p. 163-189. \

159. Weiss J.F., Kumar K.S. Waiden T.L., et al. Advances in radloprotection through the use of combined agent regimens.- Int. J. Radiat. Biol.,1990, v.57, p.709-722.

160. Weksler M.E., Kuntz U.M. Synergy between human T and B-lymphocytes in their response to FHA and pokeweed mitogen.- J. Immunol., 1976, v. 31, N2, p. 237-251.

161. Welleweerd J., Wilder H.E. et al. Flow cytometric determination of radiation-induced chromosome damage and its correlation with cell survival.- Rad. Res., 1964, v. 99, N 1, p. 44-51.

162. Woloschak G.E., Chang-Li Ch-M., Shearln-Jones P. Regulation oi protein kinase С by ionizing radiation.-Cancer Res., 1990, v. 50, p. 3963-3967.