Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Исследование некоторых кислородозависимых процессов на изолированном сокращающемся сердце при гипоксии

ВАК РФ 03.00.02, Биофизика

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Корнеев, Александр Александрович

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Энергетический метаболизм миокарда в норме

1.2. Особенности энергетического метаболизма миокарда при гипоксии . . 15.

1.3. Изолированное сокращающееся сердце как модель для изучения процессов окислительного метаболизма '.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

3. СОБСТВЕННЫЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ДАННЫЕ.

3.1. Оценка адеватности модели изолированного сокращающегося сердца для комплексного изучения его функции и окислительного метаболизма

3.2. Изучение особенностей окислительного метаболизма изолированного сокращающегося сердца у животных с различной чувствительностью к гипоксии

3.3. Общая схема нарушений функции дыхательной цепи и сократительной функции миокарда и прин-циты их коррекции у животных с- различной чувствительностью к кислородной недостаточности

3.4. Использование изолированного сокращающегося сердца крысы в качестве модельной системы для отбора антигипоксантов

ОБСУЖДЕНИЕ.131;

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Исследование некоторых кислородозависимых процессов на изолированном сокращающемся сердце при гипоксии"

Сохранение и поддержание энергетической функции сердца является одной из центральных задач современной кардиологии. Образование высокоэнергетических соединений, необходимых для всех видов деятельности миокардиальной клетки происходит, в основном, за счет процессов аэробного окисления. Этим обусловливается высокая зависимость сердечной ткани от снабжения кислородом и ее чувствительность к кислородной недостаточности. Многие патологические процессы в сердце сопровоздаются нарушениями в обеспечении миокарда кислородом, включая и ишемическую болезнь. Понимание механизмов развития таких нарушений, а также выбор путей и средств защиты миокарда от гипоксии невозможны без углубленного и всестороннего изучения соотношения физиологической функции органа и его энергетики. Поэтому исследования данной проблемы представляют не только значительный теоретический интерес, но и являются чрезвычайно актуальными для практической медицины.

Однако, на сегодняшний день, несмотря на огромный феноменологический материал, описывающий функционально-метаболические нарушения сердечной деятельности ( О^оп ,1969; Куряоп ,1978;

Ыее€у,1980; Но^бееп ,1983; Ист ,1984 и др.), остается малоизученным состояние сократительной способности сердечной мышцы в условиях кислородной недостаточности, отсутствуют данные о ведущих регуляторных биохимических и молекулярных механизмах, инициирующих развитие патологических сдвигов в сердце при гипоксии, в том числе и о закономерностях нарушения энергетического обмена и их лимитирующих звеньях. В силу этого нет четких представлений о способах фармакологической защиты и коррекции гипоксических состояний в миокардиальной ткани. Это же затрудняет поиск новых эффективных антигипоксантов, а также веществ, активирующих и стабилизирующих энергетический обмен кардио-цитов на уровне, обеспечивающем их выживаемость в условиях кислородной недостаточности.

Самостоятельным вопросом, который тем не менее относится к проблеме в целом, является диапазон переносимости различными организмами кислородной недостаточности, так как хорошо известно наличие выраженной индивидуальной чувствительности животных к дефициту кислорода в окружающей среде (Шапот,1952; Лукьянова, 1978; Березовский,1978; 5ипс//-,1972; риг5ЬоНат , 1972 и др.). Остается неизвестным, связана ли эта чувствительность с особенностями работы сердца и его энергетического метаболизма. Особое значение и большой теоретический и практический интерес представляет вопрос о принципах направленной коррекции нарушений функции дыхательной цепи и сократительной способности миокарда, возникающих при гипоксии, с учетом индивидуальной резистентности организма к недостатку кислорода.

Решение всех этих вопросов несомненно является чрезвычайно актуальным для современной кардиологии, однако их практическое выполнение возможно лишь на модельной системе, которая, максимально сохраняя функционально-метаболические свойства, присущие сердцу ин виво, позволила бы одновременно проводить исследования физиологических, биохимических и биофизических параметров его жизнедеятельности. Наиболее полно всем этим требованиям отвечает модель изолированного сокращающегося сердца млеко-питающегося. Поэтому ее использовали для подобного рода исследований наиболее целесообразно.

В связи с этим, целью настоящей работы являлось установление закономерностей работы энергетического аппарата изолированного сокращающегося сердца млекопитающих (крыс) в условиях кислородной недостаточности у животных с различной к ней чувствительностью.

Задачи работы заключались в следующем:

1. Разработать на модели изолированного сокращающегося сердца крысы комплексную систему регистрации параметров состояния энергетического аппарата и сократительной функции миокарда.

2. Исследовать особенности окислительного метаболизма миокарда в "нормоксических" и гипоксических условиях у животных с различной чувствительностью к кислородной недостаточности. Установить лимитирующие звенья энергетического обмена во время ги-поксического воздействия.

3. На основании полученных данных попытаться сформулировать принципы фармакологической коррекции гипоксических состояний сердца с учетом индивидуальной чувствительности животных к кислородной недостаточности.

Заключение Диссертация по теме "Биофизика", Корнеев, Александр Александрович

ВЫВОДЫ

1. Разработана комплексная система регистрации функционально-метаболических параметров изолированного сокращающегося сердца крысы. Подобран рабочий режим, при котором сократительная функция миокарда, его дыхание, а также степень восстанов-ленности дыхательных переносчиков 1-го пункта сопряжения остаются стабильными в течение 2-3 часов. Определено, что скорость потребления кислорода миокардом при насыщении "венозного" пер-фузата кислородом на 15-25% от "артериального", а также содержание АТФ в ткани близки к соответствующим значениям ин виво. Регистрируемые параметры использованы для анализа состояния энергетического обмена в миокарде и его сократительной функции при моделируемой гипоксии разной тяжести у животных с различной чувствительностью к кислородной недостаточности.

2. Установлено, что в условиях "нормоксического" режима энергообеспечение миокарда высокоустойчивых и неустойчивых к гипоксии крыс связано с окислением различных энергетических субстратов. У НУ животных оно зависит преимущественно от окисления НАД-зависимых субстратов, в то время, как у БУ оно обеспечивается амиталнечувствительными метаболическими потоками.

3. Показано, что при гипоксии средней тяжести (50% 0%) у НУ животных происходит некомпенсируемое нарушение электрон-транспортной функции НАД-зависимого участка дыхательной цепи миокарда, сопровождаемое снижением образования энергии и резко нарастающим угнетением (на 75%) сократительной функции сердца. У ВУ крыс в этих же условиях происходит лишь умеренное снижение содержания АТФ и сократительной способности миокарда (на 26%), что связано с компенсаторной активацией амиталнечувствительных, в том числе сукцинатоксидазного путей окисления субстратов, обеспечивающих образование энергии во 2-м и 3-м пунктах сопряжения.

4. Установлено, что при увеличении длительности или степени тяжести гипоксического воздействия (снижение содержания кислорода в перфузате до 20% от исходного) происходит дальнейшее нарушение электронтранспортной функции дыхательной цепи на участке цитохром в - цитохром Ср Эти изменения проявляются раньше у НУ, но в условиях Г2д они уже равно выражены в миокарде как НУ, так и ВУ крыс.

5. Цитохромоксидазный участок дыхательной цепи сохраняет свою интактность как при гипоксии средней тяжести (Г50), так и при тяжелой гипоксии (Г^). Однако количества АТФ, образующегося за счет активности одного этого участка, недостаточно для поддержания сократительной функции миокарда, которая в этих условиях резко подавляется в обеих группах животных.

6. Полученные результаты позволили разработать принципы научно-обоснованного прогноза фармакологической коррекции функционально-метаболических нарушений миокарда при гипоксии средней тяжести с учетом индивидуальной чувствительности животных к кислородной недостаточности.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Корнеев, Александр Александрович, Москва

1. Арбузов С.Я., Пастушенков Л.В. Фармакологические средства, повышающие устойчивость к гипоксии. - Фармакол. и токсикол., 1969, т.32, № 1. с.115—120.

2. Атауллаханов Ф.И., Пичугин A.B. Модификация люциферин-люциферазного метода определения концентрации АТФ в эритроцитах. Биофизика, 1981, т.26, I, с.86-88.

3. Ахмеров Р.Н. Особенности дыхания густых суспензий MX при низком давлении кислорода. В сб.: Руководство по изучению биологического окисления поляолграфическим методом. М.:Наука, 1973, с.173-175.

4. Белый В.Н. Лекарственная профилактика гипоксических повревдений мозга. Кацд.дисс., Ленинград, 1973.

5. Березовский В.А., Бойко К.А., Клименко К.С. и др. Гипоксия и индивидуальные особенности реактивности. Киев, 1978.

6. Блаттнер Р., Классен X., Денерт X., Дёринг X. Эксперименты на изолированных препаратах гладких мышц. М.:Мир,1983.

7. Браунвальд Е., Росс Ж., Зонненблик Е. Механизмы сокращения сердца в норме и при недостаточности. М.: Мир,1974.

8. Брашфельд Н. Ишемия миокарда. Патологические и биохимические корреляции. Кардиология, 1972, № 12, с.117-131.

9. Вавилин В.А., Филиппова С.Н., Панов A.B. и др. Динамика повреждений митохондрий при острой ишемии печени. М., 1980.

10. Гольдберг Л.М., Кондрор В.И. Тиреотоксическое сердце. М. ,1972.

11. Грин Д.Е. Структура и функция субклеточных частиц. -Пленарная лекция на 5 Межд.Биохим.Конгр., М., 196I.

12. Гроздова М.Д. Особенности обмена веществ в мышцесердца. Вопр.мед.химии, 1967, т.13, № 6, с.563-573.

13. Дудченко А.М. Активность ферментов митохондрий и содержание метаболитов энергетического обмена в коре головного мозга крыс, обладающих различной чувствительностью к гипоксии Дисс. канд.наук, М., 1976.

14. Джендрассик Е. Факторы, расщепляющие перген в скелетных мышцах. 5 Межд.Биохим.Конгресс, 1961, т.1, с.420-421.

15. Ещенко Н.Д., Путилина Ф.Е., Вольский Г.Г. и др. Влияние 2,4-ДНШ и гипоксии на активность ферментов биосинтезаи окисления цитрата в митохондриях. Митохондрии,1974, с.104-108.

16. Каминский Ю.Г. Флуорометрическое и фотометрическое исследование митохондрий при транспорте ионов. Автореф.дисс.кацд. наук., Пущино,1973.

17. Карнаухов В.Н., Кулаков В.И., Мельникова Е.В. и др. Микрофлуориметр на базе стационарных деталей и узлов. Цитология, 1968, т.10, № 5, с.675-694.

18. Карнаухов В.Н. Люминесцентный спектральный анализ клетки, М., Наука,1978, с.207т

19. Козлов Ю.П. Свободные радикалы и их роль в нормальных и патологических процессах. М., Изд-во МГУ,1973, с.174.

20. Колесова Г.М., Капитанова Н.Г., Райхман Л.Л. Стимуляция хинонами дыхания митохондрий в условиях цианидного блока. В сб.: Фармакологическая коррекция кислородзависимых патологических состояний, М.,1984, с.18-19.

21. Колотилова А.И., Лызова С.Н., Вагнер В.К., Коровкин Б.Ф. 0 некоторых биохимических изменениях в сердечной мышце и крови в ранние сроки инфаркта миокарда. Вопр. мед.химии. 1965, т.II,5, с.70-74.

22. Кондрашова М.Н. Биохимический цикл возбуждения.

23. В сб.: Митохондрии. Ферментативные процессы и их регуляция. М., Наука, 1968, с.122.

24. Кондрашова М.Н. Возможное биологическое значение ограничения окисления сукцината щавелевоуксусной кислотой. В сб.: Митохондрии. Биохимические функции в системе клеточных орга-нелл. М., Наука,1969, с.23.

25. Кондрашова H.H. Роль янтарной кислоты в регуляции физиологического состояния ткани. Докт.дисс., Пущино, 1971.

26. Кондрашова М.Н. В кн.: Молекулярные механизмы ферментативных реакций. М., Наука, 1972, с.151-170.

27. Кондрашова М.Н., Маевский Е.И., Бабаян Т.Б. и др. Адаптация к гипоксии посредством переключения метаболизма на превращение ЯК. В сб.: Митохондрии. Биохимия и структура. М., Наука,1973, сЛ12-129.

28. Кондрашова М.Н., Ахмеров Р.Н., Акоев И.Г. и др.

29. О регуляции соотношения окисления янтарной кислоты и НАД-зави-симых субстратов производными индола. В кн.: Митохондрии, М., Наука, 1974, с.145-163.

30. Кондрашова М.Н. Выясненные и наметившиеся вопросы на пути исследования регуляции физиологического состояния янтарной кислотой. В сб.: Терапевтическое действие янтарной кислоты. Пущино,1976, с.8-30.

31. Кондрашова М.Н., Маевский E.H. Активация СДГ как основа "анаэробной" работы и устойчивости к гипоксии. В сб.: Мито-хондриальные процессы во временной организации жизнедеятельности, Пущино, 1978, с.6-12.

32. Кребс Г.А. В кн.: Стратегия биохимии. Москва, i960, с.126.

33. Лабори А. Регуляция обменных процессов. М., 1970.

34. Ленинджер A.M. Митохондрии, М., Мир, 1966.

35. Лихтенштейн Г.И., Фролов E.H., Незнайко Н.Ф. и др. Молекулярная биология, 1972, т.6, с.201.

36. Лукьянова Л.Д. Окислительный метаболизм и реактивность нервной ткани в переживающих препаратах и в условиях целостного организма. Докт.дисс. M., 1971, 365 с.

37. Лукьянова Л.Д. Роль митохондрий в фазных ответных реакциях переживающей нервной ткани. В кн.: Регуляция энергетического обмена и устойчивость организма. Пущино, 1975, с.150-153.

38. Лукьянова Л.Д., Попова O.A., Харадуров C.B. и др. Тканевоспецифические особенности работы 02-зависимых путей и их корреляция с некоторыми физиологическими параметрами у животных с различной чувствительностью к гипоксии Там же, с.136.

39. Лукьянова Л.Д., Балмуханов B.C., Уголев А.Т. Кислород-зависимые процессы в клетке и ее функциональное состояние. М., Наука,1982.

40. Лукьянова Л.Д. Механизмы регуляции кислородзависимых процессов в клетке у животных с разной чувствительностью к гипоксии. В сб.: Физиологические проблемы адаптации. Тарту, 1984, с.128-131,

41. Мартынов Н.В. Окисление важнейших субстратов головногомозга при циркуляторной гипоксии. В сб.: Клеточное дыхание в норме и в условиях гипоксии, Горький, 1973, с.51.

42. Мохова E.H. Использование различных тканевых препаратов при полярографическом изучении дыхания и сопряженных с ним реакций. В кн.: Руководство по изучению биологического окисления полярографическим методом., М.,1973, с.175-189.

43. Новиков Ю.Г., Быков Э.Г., Ткачева JI.B. и др. Вспомогательное кровообращение при экспериментальной ишемии миокарда и энергетический обмен сердца. Бюлл.экспер.биол. и мед., 1967, т.64, № 7, с.30-34.

44. Попов И.П. Соотношение микроэлементов и активность дыхательных ферментов при острой гипоксической гипоксии. Патол. физиол. и экспер. терапия, 1966, т.10, № 6, с.38.

45. Праткявичус А.К., Бурнецкене Ю.А., Шатинеске P.P. и др. Углеводный обмен в сердечной мышце в ранний период экспериментального инфаркта миокарда. Кардиология, 1973, т.13, № 7,с.30-38.

46. Протодьяконова, Силантьева З.Н. Энергетический обмен в сердце при гипоксии. Актуальные вопросы биохимии и клиники атеросклероза. Чита, 1973, с.101-105.

47. Рачев P.P. Митохондрии и тиреоидине гормоны, Л.» 1969.

48. Рачев P.P., Ещенко Н.Д. Тиреоидные гормоны и субклеточные структуры. М., Медицина, 1975.

49. Сакс В.А. и др. Механизмы регуляции синтеза КФ в клетках миокарда, сопряженные с реакциями гликолиза и митохондриаль-ным окислительным фосфорилированием, значение компартментализа-ции креатинкиназы. В кн.: Метаболизм миокарда, М., 1981.с.67-68.

50. Самойлов П.M. В кн.: Вопросы мед.химии, 1963, т.9, № 2, с.188.

51. Северин С.Е. Энергетический обмен сердца и его нарушения при коронарной недостаточности. Кардиология, 1961, т.2,с.3-13.

52. Северин С.Е. Энергетическое обеспечение физиологических функций. Реф.докл. на пленарном заседании, M., 1964, с.13.

53. Северин С.Е. Основные направления исследований по биохимии миокарда. Кардиология, 1967, № II, с.22-34.

54. Северин С.Е. и др. Пентозный путь превращения углеводов в ткани сердца (регуляторная роль эритрозо-4-фосфата) -Изв. АН СССР, Серия биол., 1974, № 3(с), с.416-424,

55. Скулачев В.П. Аккумуляция энергии в клетке. М., Наука,1969.

56. Смирнов В.Н., Нестайко Г.В. Молекулярная биология миокарда. В кн.: Кардиология в СССР. Москва, 1982, с.29-35.

57. Степанян Е.П., Ярлыкова Е.И., Кузнецова Б.А. Энергетика оперированного сердца и некоторые аспекты ее регуляции. В кн.: Митохондрии, М., Наука, 1977, с.71-74.

58. Титовец Э.П. Биохимический механизм действия и применение новых аминопроизводных орто-бензохинона. Автореф.дисс. докт.наук, Л., 1983.

59. Умбрейт В.В. Манометрические методы изучения тканевого обмена. M., 1951.

60. Хватова Е.М., Мартынов Н.В. Метаболизм острой гипоксии, Горький, 1977.

61. Хватова Е.М. Ред. Окислительные ферменты животной клетки и регуляция их активности. Горький, 1978.

62. Шапот B.C. О природе особенностей чувствительности головного мозга к кислородной недостаточности. Успехи совр. биологии. 1952, т.35, вып.2, с.244.

63. Шеве Т., Модвиг П., Раппорт С.М. Торможение дыхательной цепи субмитохондриальных частиц сердца быка свободными жирными кислотами. В кн.: Митохондрии, М., Наука, 1977, с.18-23.

64. Шумицкая Н.М. Индивидуальные различия процесса гликолиза при гипоксической гипоксии. В кн.: Кислородный гомео-стаз и кислородная недостаточность. Киев, 1978, с.105-116.

65. Ягужинский Л.С., Смирнов Е.Г., Ратникова JI.A. Гидрофобные площадки ферментов начального участка электронтранспортной системы митохоццрий. Докл. АН СССР, 1972, т.205, № 3,с.734-737.

66. Ягужинский Л.С. Ингибиторный анализ в митохоццриях. -В кн.: Структура и функция ферментов, М., МГУ, 1973, с.106-132.

67. Ягужинский Л.С. Изучение действия неспецифических ингибиторов на полиферментные системы. В кн.: Тканевое дыхание в норме и патологии, М., Наука, 1978, с.47.

68. Якушев B.C., Слободин В.Б. Влияние L-аспарагиновой кислоты на некоторые стороны обмена веществ при экспериментальном инфаркте миокарда. Кардиология, 1970, т.10, № II, с.87-92.

69. Якушев B.C., Лившиц Р.Н., Слободин В.Б. и др. Влияние L -аспарагиновой кислоты на углеводно-фосфатный обмен сердечной мышцы в остром периоде экспериментального инфаркта миокарда. Кардиология, 1972, т.12, № 3, с.38-42.

70. Aiyar A.S#, Sreenivasan A. Intracellular distribution and biosynthesis of ubiquinone in rat liver in carbon tetrachloride liver injury. Biochem. J., 1962, vol. 82, pp.179-182.

71. By Banks P. Ihe biochemistry of the tissues. London,1968.

72. Barlow C.H. and Chance B. Ischemie areas in perfused rat hearts Measurement by NADH fluorescence photography. Science, 1976, vol. 193, p. 909-910.

73. Barry W.H., Pober J., Marsh J.D., Frankel S.R., Smith 3?.W. Effects of graded hypoxia on contraction of cultured chick embryo ventricular cells. Am. J. Physiol., 1980, vol. 239, N 5, p. 651-637.

74. Bersohn M.M. and Scheuer J. Effect of ischemia on the performance of hearts from physiology trained rats. Am. J. Physiol., 1978, vol. 23^, N 2, p. 215-218.

75. Bertrand M.S., Carre A.G., Ginestet A.P. et al. Maximal exercise in normal subjects. Changes in coronary sinus blood flow, contractility and miocardial extraction of FFA and lactate. Eur. J. Cardiol., 1977, vol. 5, N 6, p.481-491.

76. Bing H.J., Siegel A., Ungar I., Gilbert M. Metabolism of the Human Heart. II Studies on Fat, Ketone and Amino Asid Metabolism. Am. J. Med., 1954, vol. 16, N 4, p.504-515.

77. Bing R.J. Metabolism of the heart. "Physiol Revs", 1965, N 2, p. 171-213.

78. Bing O.H.I»., Brooks W.W., Messer J.V. Prolongation of tension on reoxygenation following miocardial hypoxia:

79. Braasch W., Gudbjarnason S., Puri P.S. et al. Early changes in energy metabolism in the myocardium following acute coronary artery occlusion in anesthetized dogs. Circulat. Res., 1968, vol. 23, N 3, p. 429.

80. Braunwald E., Ross J., Sonnenblick E.H. Mechanisms of contraction of the normal and failing heart. Boston, 1976.

81. Bretschneider H.J., Frank A., Kanrow E. et al. Uber den kritischen wert und die physiologische Abhängigkeit derA

82. Sauerstoff-Sättigung des venösen coronarblutes. Pflugers.A

83. Archiv, ges. Physiologie, 1957, vol. 264, N 4, p. 399-425.

84. Busuttil R.W., Paddock R.J., George W.J. Protective effect of glucagon on the isolated perfused rat heart following severe hypoxia. Proc. of the Society for Biol.and Med., 1974, vol. 147, p. 527-532.

85. Burnotte R.E., Gobert J.G., Temmerman J.J. Piracetam (2-pirrolidinone acetamide) induced modifications of the brain polyribosome pattern in ageing rats. Biochem. Pharmac., 1973, vol. 22, pp. 811-814.

86. Ghalloner D.R., Stenberg 0. Effect of free fatty acid on the oxygen consumption of perfused rat heart. Am. J. Physiol., 1966, vol. 210, p. 280-286.

87. Chance B. Spectra and reaction kinetics of respiratory pigmentes of homogenized and intact cells. Nature, 1952, vol. 9, N 4293, P. 215-221.

88. Chance B. Units of biological structure and function. Ed. O.H. Goebler. N.Y.: Acad. Press, 1956, p. 447-462.

89. Chance B. Quantitative aspects of the control of oxygen utilization. In: Ciba foundation symposium on the regulation of cell metabolism, 1959, p. 91-129.

90. Chance B., Cohen P., Jobsis F., Schoener B. Intracellular oxidation-reduction states in vivo. Science, 1962, vol. 137, 5529, 499-507.

91. Chance B., Legallais V. A spectrofluorimeter for recording of intracellular oxidation-reduction states. JEEE (Trans. Bio-Med. Electron., 1963, vol. 10, N 2, p. 40-47.

92. Chance B., Williamson J., Jamieson D. et al. Properties and kinetics of reduced pyridine nucleotide fluorescence of the isolated and in vivo rat heart. Biochem. Z., 1965, vol. 341, N 4, p. 357.

93. Chance B., Muyes D., Luige R. A time-staring instrument for direct readout of oxidation-reduction states in intracellular compartments of cardiae tissue. JEEE Trans-actions of Bio-Med. engineering B.M.E., 1970, vol. 17, N 2, p.118-121.

94. Chance B., Saronio C., Leigh J. Functional intermediates in reaction of cytochrome oxidase with oxygen. J. Biol. Chem., 1975, vol. 250, p. 9926-9932.

95. Chance B., Sies H., Boveries A. Hydroperoxide metabolism in mammalian organs. Physiol. Rev., 1979, vol. 59, N 3, P. 527-605.

96. Coffman J.D., Lewie P., Gress E. Effect of prolongedperiod of anoxia on atrioventricular condition and cardiac muscle. Circul. Res., 1960, vol. 8, N 3, p. 649-659.

97. Cooney G.J., Taegtmeyer H., Newsholme E. Tricarboxylic acid cycle flux and enzyme activités in the isolated working rat heart. Biochem. J., 1981, vol. 200, p. 701-703.

98. Chance B. and Schoener B. Correlation of oxidation-reduction changes of intracellular reduced pyridine nucleotide and changes in electroencephalogram of the rat in anoxia. -Nature, 1962, vol. 195, p. 956.

99. Chappel J.B. The effect of 2,4-dinitrophenol on mitochondrial oxidation. Biochem. J., 1964, vol. 90, pp.237-248.

100. Danielson L., Eruster L. Lack of regulationship between mitochondrial oxidative phosphorylation and the dicouma-rol-sensitive flavoenzime "DT-diaphorase" or. Vitamin K reductase. Nature, 1962, vol. 194, pp. 153-157.

101. Decker R.S., Wildenthal K. Lysosomal alterations in hypoxia and reoxygenated hearts. Am. J. Pathol., 1980, vol. 92, N 2, pp. 425-444.

102. Denton R.M., McCormack J.G., Edgell N.J. Role of calcium ions in the regulation of intramitochondrial metabolism. Biochem. J., 1980 , vol. 190, pp. 107-117.

103. Denton R.M., McCormak J.G. On the role of the calcium transport cycle in heart and other mammalian mitochondria. FEBS Lett. 1980a, vol. 119, pp. 1-8.

104. Flaherty J.O?., Clower D.D. et al. Use an isolated heart model for testing substrates for cardioplegic solutions. J. Mol. Cell. Cardial., 1980, vol. 12, suppl. 1, p. 43.

105. Friedman I. Subacute myocardial hypoxia in the rat. An electron microscopic study of the left ventricular myocardium. J. Mol. Cell. Cardiol., 1973, vol. 5, N 2, pp.125-132.

106. Gailis L., Benmonyal E. Endogenous alanine, glutamate, ospartate and glutamine in perfused guinea pig heart. Effect of substrates and cardioactive agents. Can. J. Biochem., 1973, vol. 51, PP. 11-20.

107. Gewers W. Generation of protons by metabolick processes in heart cells. J. Mol. Cell. Cardiol., 1977, vol.9, N 11, pp. 867-874.

108. Gibbs C.L. Cardiac energetics. Physiol. Rev., 1978, vol. 58, p. 174.

109. Gmeiner R., Ehapp E., Dienste F. Zur wirkung von insulin auf den glukosestoffwechsel und die hamodynsmik des isolieien ratten herzens bei hypoxie. Basic. Res. Cardiol., ■ 1973, vol. 68, N 6, pp. 614-618.

110. Godin D.Y., Tuchek J.M., Moore M. Membrane alterations in acute myocardial ischemia, 1980, vol. 58, pp.777-786.

111. Goldfarb D., Jaina A., Serban I, et al. Benefical effect of verapamil in ischemie acute renal failure in the rat. Proc. S. exp. biol. med., 1983, vol. 172, pp. 389-392.

112. Green D.E., Fliischer S. Ihe mitochondrial system of enzymes. Metabolic pathways, 1960, vol. 1, p. 41.

113. Groscth-Robertson M., Breger D., Shell W.E. Alanine production by isolated perfused hypoxia hearts: a potential marker of AIP degradation. Circulation, 1977, vol. 126, PP. 55-56.

114. Grove T.H., Ackerman J.J.H., Radda G.K., Bore P.J. Analysis of rat heart in vivo by phosphorus nuclear magnetic resonance. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1980, vol. 77, N 1, pp. 299-302.

115. Guarnieri G., Flamingi F., Rossoni-Coldarera C. Glutathione peroxidase activity and release of glutathione from oxygen-deficient rat heart. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1979, vol. 89, N 2, pp. 678-684.

116. Gudbjarmason S., Mathes P. and Rovens K.G. Functional compartment at ion of A!EP and creatine phosphate in heart muscle. J. Mol. Cell. Cardiol., 1971, vol. 2, pp.253-276.

117. Hassinen I.E., Hiltunen J.K. Respiratory control in isolated perfused rat heart. Role of the equilibrium xelations between the mitochondrial electron carries and adenylate system. B.B.Á., 1975, vol. 408, N 3, pp. 319-330.

118. Henderson A.H., Craig R.J., Garlin R. et al. Free fatty acids and myocardial function in perfused rat hearts. -Cardiovas. Res., 1970, vol. 4, pp. 466-472.

119. Hess M.Z., Manson N.H., Okabe E. Involvement of free radical in the pathophysiology of ischemia heart desease. Com. J. Physiol. Pharmac., 1982, vol. 60, N 11, pp. 1382-1389.

120. Hiltunen J.E., Hassinen I.E. Energy-linked regulation of glucose and pyruvate oxidation in isolated perfused rat heart. Role of pyruvate dehydrogenase. B.B.A., 1976, vol.440, PP. 377-390.

121. Hochachka P.W. Enzymatic adaptations to deep sea life. Biol. Ocean Pacif. Proc. 33rd., Ann. Biol. Colloq., 1974, pp. 107-167.

122. Hochacka P.W., Storey K.B. Metabolic conseqvences of diving in animals and man. Science, 1973» vol. 187, pp. 613-621.

123. Holton F.A., Hulsmarm W.C., Mregls et al. A comparison of the properties of mitochondria isolated from liver and heart. Biochem. J., 1937, vol. 67, pp. 579-594.

124. Hoskin F.C. Specificity of the stimulation by qui-nones of direct oxidation of glucose by brain slices. B.B.A., 1962, vol. 62, N 11, pp. 1-6.

125. Ishikawa T., Sies H. Cardiac transport of glutha-tione disulfide and S-conjugate. Studies with isolated perfused rat heart during hydroperoxide metabolism. J. Biol. Chem., 1984, vol. 259, N 6, pp. 3838-3843.

126. Jarmakani J.M., NakazawaM., Nagomoto (D., Longer G.A. Effect of hypoxia on mechanical function in the neonatal mammalian heart. Am. J. Physiol., 1978, vol. 235, N 5, pp.469474.

127. Jones D.P. Hypoxia and drug metabolism. Biochem. Pharm., 1981, vol. 30, N 10, pp. 1019-1023.

128. Kathleen H., McDonough and Spitzer J.J. Effects of hypoxia and reoxygenation on adult rat heart cell metabolism.- Proc. Soc. Exp. Biol. Med., 1983, vol. 173, PP. 519-526.

129. Katz A.M. Ihe early "pump'1 failure of the ischemie heart. Am. J. Med., 1969, vol. 47, pp. 497-502.

130. Katz A.M. Physiology of the heart. N.I. Raven, 1977, pp. 51-52.

131. Kielley W.W. (Che biochemistry of muscle. Ann. revs, biochem., 1964, vol. 33, p. 403.

132. Mm D.H., Akera T., Kennedy R.H., Stemmer P.M. Reduced tolerance to digitalis induced arrhythmias by coronary flow alterations in isolated perfused heart of guinea pig. -Life Sci., 1984, vol. 34, N 2, pp. 105-112.

133. Kimmich L.A., Ranles T., Brand J.S. Assay of picomole amound of A IP, ADP and AMP using the luciferase enzyme system.- Anal. Biochem.,'1975, vol. 69, N 1, pp. 187-206.

134. Kjekshus J.K., Mjos O.D. Effect of free fatty acid on myocardial function and metabolism in the ischemie dog heart. U. Clin. Invest., 1972, vol. 51, N 7, pp. 1767-1776.

135. Kohen E. Pyridine nucleotide compartmentalization in gloss-grown ascites cell. Exp. Cell. Res., 1966, vol.35, pp. 303-516.

136. Kohen E., Kohen C., Thorell B, Rapid-two-canal micro-fluorimetry. B.B.A., 1972, vol. 286, pp. 186-194.

137. Kypson J. and Hait G. Effects of inosine on the metabolism and the performance of isolated oxygenated and hypoxic rabbit hearts. J. Pharmac. Exp. Ther., 1978, vol. 204,pp. 149-158.

138. Lamanna J.C., Saive J.J., Snow I.R. The relative time course of early changes in mitochondrial function and intracellular pH during hypoxia in the isolated toad bufomarinus ventricle strip. Circ. Res., 1980, vol. 40, N 6, pp. 755-763.

139. Langendorff 0. Untersuchungen am uberlebenden sau-gethierherzen. Arch. Ges. Physiol., 1895, vol. 61, pp.291-332.

140. Latipaa P.M., Hiltunen J.K., Pennkurinen K.J., Hassinen I.E. Regulation of fatty acid oxidation in heart muscle. B.B.A., 1983, vol. 752, N 1, pp. 162-171.

141. Lochner W. Substratumsatz, Sanerstoffverbrauch und anaerober Energiegewinn der Herzens. Zs. Kreislaufforsch, 1965, vol. 54, N 1, pp. 103-113.

142. Lovell D., Prankerd T.A. Effect of Quinones on the uptake of oxygen by red cells. Nature, 1961, vol. 192, p.561.

143. Lowry O.U., Rosebiongh N.J., Pass A.L. Protein measurement with the Polin phenol reagent. J. Biol. Chem., 1951, vol. 193, P. 265.

144. Maley G.F., Lardy H. Efficiency of phosphorylation in selectee oxidations by mitochondria from normal and thyrotoxic rat liver. J. Biol. Chem., 1955, vol. 215, pp.577-558.

145. Morgreth A., Azzone G.F. A study of respiration in fluoroacetate-possened muscle preparation. Biochem. J., 1964, vol. 92, p. 73.

146. Margreth A., Azzone G.F. Oxidation of reduced nicotinamide adenine dinucleotid in muscle homogenates. Biochem. J., 1964, , vol. 92, p. 88.

147. Martins C. Alternative pathways of electron transport. Ins Civa Pondat Symp. Regulat. Cell Metabolism. London, 1955, p. 194.

148. Matthews P.M., Bland J.L., Godian D.G. et al. The steady-state rate of ATP synthesis in the perfused rat heart measured by 31P NMK saturation transfer. Biochem, Biophys. Res. Commun., 1981, vol. 103, N 3, pp. 1052-1059.

149. McCord J.M., Roy R.S. Pathophysiology of superoxide roles in inflamation and ischemia. Can. J. Physiol. Pharmacol., 1982, vol. 60, pp. 1346-1352.

150. McDonough K.H., Spitzer J.J. Effect of hypaxia and reoxygenation on adult rat heart cell metabolism. Proc. S. Exp. Biol. Med., 1983, vol. 173, pp. 519-526.

151. McKean T., Landon R. Comparison of the response of muskrat ondatra-zibethica, rabbit and guinea-pig heart muscle to hypoxia. Am. J. Physiol., 1982, vol. 243, N 3, pp.245-250.

152. Mokchova E.N., Skulachev V.P., Zhigacheva 1.7. Activation of external pathway of NADH oxidation in liver mitochondria of cold-adapted rats. B.B.A., 1977, vol. 501,pp. 415-^25.

153. Moravec J., Renault G., Hatt P.Y. Alterations of mitochondrial function as detected in left ventricular myocardium of rats with acute aortie constriction. Basic. Res. Cardiol., 1978, vol. 73, N 6, pp. 535-550.

154. Mudge G.H., Mills R.M. et al. Alterations of myocardial amino acid metabolism in chrome ischemie heart disease. -J. Clin. Invest., 1976, vol. 58, pp. 1185-1192.

155. Naka^ja H., Kanno M. Effect of verapamil on conduction delay and potassium efflux induced by global ischemia in isolated rabbit hearts. Eur. J. Pharmacol., 1982, vol. 79,pp. 185-192.

156. Neely J.R., Liebermeister H., Battersby E.J., Morgan H.E. Effects of pressur development on oxygen consumption by isolated rat heart. Am. J. Physiol., 1967, vol. 212, N 4, pp. 804-814.

157. Neely J.R., Rovetto M.J., Oram J.F. Myocardial utilisation of carbohydrate and lipids. Prog. Card. Dis., 1972, vol. 15, pp. 289-329.

158. Neely J.R., Rovetto M.J. Effects of ischemia on function and metabolism of the isolated working rat heart. -Am. J. Physiol., 1973, vol. 225, N 3, PP. 651-658.

159. Neely J.R., Feuray D. The role of metabolic Productsin ischemie Miocardium. J. Moll. Cell. Cardiol., 1960, vol.12, p.

160. Neurohr K.J., Gollin G., Barrett E.J. et al. In vivo ^P-MMR studies of myocardial high energy phosphate metabolism during anoxia and recovery. FEBS Letters, 1983, vol.159, N 12, pp. 207-210.

161. Nickolson V. and Wolthuis O.L. Protein metabolism in the rat cerebral cortex in vivo and in vitro as affected by the acquisition-enhancing drug piracetam. Biochem. Pharmacology, 1976, vol. 25, pp. 2237-2240.

162. Nishiki K., Erechinska M., Wilson D.F., Cooper S. Evaluation of oxidative phosphorylation in hearts from euthyroid, hypothyroid and hyperthyroid rats. Am. J. Physiol., 1978, vol. 235, pp. 212-219.

163. Nuutinen E.N. Subcellular origin of the surface fluorescence of reduced nicotinamide in the isolated perfused rat heart. Basic. Res. Cardiol., 1984, vol. 79, N 1, pp.49-58.

164. Oliver M.F. Free fatty acids and the ischemie myocardium. Adv. Cardiol., 1974, v. 2, pp. 84-93.

165. Olson R.E. Myocardial metabolism in congestive heart failure. J. Cean. Disease, 1959, vol. 9, pp. 442-464.

166. Olsson R.A. Changes in content of purine nucleoside in canin myocardium during coronary occlusion. Circulat. Res., 1970, vol. 26, pp. 301-306.

167. Opic O.H. Metabolism of the heart in health and disease. Am. Heart. J., 1968, vol. 76, pp. 685-698.

168. Opie O.H. Metabolism of the heart in health and disease. Part II. Am. Heart J., 1969,vol.77, pp.100-122.

169. Oram J.F., Bennetch S.L., Ueely J.R. Regulation of fatty acid utilization in isolated perfused rat heart. J. Biol. Chem., 1973, vol. 248, pp. 5299-3309.

170. Owen P., Thomas M., Young V., Opie L. Comparison between metabolic changes in local venous and coronary arterial occlusion. Am. J. Cardiol., 1970, vol. 25, pp. 562-570.

171. Packer L., Mustafa M.G. Pathways of electron flow established by tetramethylphenylendiamine in mitochondria and ascites tumor cells. Biophys. Biochem. Acta, 1966, vol. 113, p. 1.

172. Pearce F.J., Forster J., Deleeuw G. et al. Inhibition of fatty acid oxidation in normal and hypoxie perfused rat hearts by 2-tetradecylglycide acid. J. Mol. Cell. Cardiol,, 1979, vol. 11, N 9, pp. 893-916.

173. Penney D.G., Cascarano J. Anaerobic rat heart. -Biochem. J., 1970, vol. 118, pp. 221-227.

174. Praskevicius A.K., Bolasevicius R.V., Kalvenas A.A.et al. Permeability of mitochondrial membranes and functionalthactivity of mitochondria under myocardial ischemia 9 colloquium on bioenergetics and mitochondria, Elbingerode, 1981, 4. 17.

175. Purshottam T., Chosh N.C. Effect of acetarolamide (Diamox) at different dose levels on survival time of rats under acute hypoxia and on Na+K- ATP-ase activity of rattissues micxocomes. Aerospace Med., 1972, vol. 43, N 6, p. 610.

176. Rabinowitz M. Control of metabolism and synthesis of macromolecules in normal and ischemic heart. J. Mol.Cell. Cardiol., 1971, vol. 2, N 3, pp. 277-292.

177. Ramirez J. Oxidation-reduction changes of cytochromes following stimulation of amphybian cardiac muscle. J. Physiol., 1959, vol. 147, pp. 14-32.

178. Rasmussen U.F. The oxidation of added NADH by intact heart mitochodria. FEBS Lett., 1969, vol. 2, pp. 157-162.

179. Rioux F., Kerouac K., St-Pierre S. Neurotenzin stimulates histamine release from the isolated spontaneously beating heart of rats. Life Sci., 1984, vol. 35, N 4,pp.423-432.

180. Rodbard S., Williams F., Williams C. The spherical dynamics of the heart. Am. Heart J., 1959, vol. 57, N 3, pp. 348-360.

181. Roeske W.R., DeLuka M., Ingwall J.S. Factors influencing enzyme release from fetal mouse hearts deprived of oxygen and glucose. J. Mol. Cell. Cardiol., 1978, vol.10, pp. 907-920.

182. Rogers N.J., Darnel H.G., Moraski R.E. et al. Effect of heparin-induced free fatty acid elevation on myocard oxygen consumption in man. Am. J. Cardiol., 1977, vol. 40,1. N 3, pp. 365-372.

183. Schollmeyer P., KLingenberg M. Uber den cytochromgechalt tierischer gewebe. Biochem. Zeitschr., 1962, vol. 335, pp. 426-439.

184. Seraydarian M.W., Harry I. In vivo studies of beating heart cells in culture XIII. Ihe effect of 1-fluoro2,4-dinitrobenzene (FDNB).-Arch. Biochem. Biophys., 1970, vol. 138, N 1, pp. 233-238.

185. Smith D.M. and Sugden P.H. Effect of insulin and lack of workload and hypoxia on protein degradation in the perfused working rat heart. Biochem. J., 1983, vol. 210, pp. 55-61.

186. Snow T.R. Substxate effects on myocardial performance during normoxia and hypoxia. Am. J. Physiol., 1978, vol.235, N 2, pp. 144-149.

187. Soloff L.A. Arrhythmias following infusions of fatty acids. Am. J. Heart., 1970, vol. 80, pp. 671-674.

188. Sugano I., Oshuno N., Chance B. Mitochondrial function under hypoxie conditions. B.B.A., 1974, vol. 347,pp. 340-358.

189. Sundt T.M., Michenfelder J.J.D. Focal francient cerebral ischemia in the squarrel monkey. Effect on brain adenosine triphosphate and lactate levels with electrocorticographie and patologic correlation. Circulât. Res., 1972, vol. 30,1. N 6, p. 703.

190. Suzuki Y. et al. Effects of L-carnitine on tissue levels of free fatty acid. acyl-CoA and acylcarnitine in ischemie heart. J. Mol. Cell. Caxdiol., 1980, vol. 12, suppl. 1, p. 163.

191. Taegtmeyer H.A., Ferguson G., Lesch M. Protein degradation and ammoacid metabolism in autholyzing rabbit myocardium. Exp. Mol. Pathol., 1971, vol. 26, pp. 52-62.

192. Taegtmeyer H. Metabolic response to myocardial hypoxia: Increaced production of succinate by rabbit popillary muscles. Circ. Res., 1978, vol. 43, pp. 808-815.

193. Taegmeyer H. et al. Utilization of energy-providing substrates in the isolated working rat heart. Biochem. J., 1980, vol. 186, pp. 701-711.

194. Tahiliani A.G., Vadlamudi R.V.S.V., McNeill J.H. Prevention and reversal of altered myocardial function indiabetic rats by insulin treatment. Can. J. Physiol. Pharmacol., 1983, vol. 61, N 5, pp. 516-323.

195. Tamboli A., O-Leoney P., et al. Comparative metabolism of free fatty acids and esterified fatty acids by the perfused rat heart and rat cardiac myocytes. B*,B.A., 1983, vol. 750, N 2, pp. 404-410.

196. Toleikis A. Cytochrome oxidase activity of mitochondria from ischemie and reperfused myocardium. J. Mol. Cell. Cardiol., 1980, vol. 12, suppl. 1, p. 169.

197. Toleikis A.£T., Bakayte L.J. The character and mechanisms of ischemie alteration of enzyme system of fatty acid oxidation in cardiac mitochondria. 9th colloquium on bio-energetic and mitochodria. Elbingerode, 1981, 218.

198. Tomlinson C.W., Dhalla N. Excitation-contraction coupling in heart. Cardiovasc. Res., 1973, vol. 7,pp.470-476.

199. Tan Brussel E.M., Freyss-Begun M. et al. Energy metabolism of cardiac cell cultures during oxygen deprivation. -Biochem. Pharmac., 1985, vol. 34, pp. 145-147.

200. Viswanathan R., Venkitasubramaman T.A. Microsomal and mitochondrial cytochromes in acutely hypoxic rat lung and liver. Indian J. Bioch. Biophys., 1980, vol. 17, N 2,pp. 130-134.

201. Wikman-Coffelt J., Sievers R., Coffelt R.J. et al. The cardiac cycle regulation and energy oscilations. Am. J. Physiol., 1983, vol. 245, N 2, pp. 334-362.

202. Williamson J.R. Glycolytie control mechanisms. 1. Inhibition of glycolisis by acetate and pyruvate in the isolated perfused rat heart. J. Biol. Chem., 1965, vol.240, pp. 2308-2321.

203. Williamson J.R. Effects of insulin and starvation on the metabolism of acetate and pyruvate by the perfused rat heart. Biochem. J., 1966, vol. 93, pp. 97-106.

204. Williamson D.H., Walker B. Concentration of free glucogenie amino acid in livers of rats subjected to various metabolic stress. Biochem. J., 1967, vol. 104, pp. 497-302.