Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Использование генофонда белков молока в селекции крупного рогатого скота

ВАК РФ 06.02.01, Разведение, селекция, генетика и воспроизводство сельскохозяйственных животных

Автореферат диссертации по теме "Использование генофонда белков молока в селекции крупного рогатого скота"

Санкт-Петербургский государственный аграрный университет

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ГЕНОФОНДА БЕЛКОВ МОЛОКА В СЕЛЕКЦИИ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

Специальность: 06.02.01 - разведение, селекция и

воспроизводство сельскохозяйственных животных

На правах рукописи Уда 636.2.082:637.127.3

ХАЕРГДИНОВ Равиль Анварович

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

Санкт-Петербург-Цушккн 1992

Работа выполнена в Казанском ветеринарном институте им. Н.Э.Баумана.

Научный консультант - академик Российской академии ссльск хозяйственных наук, доктор биологических паук, профессор Л.С.ЛобрОВСКИН

Официальные оппоп енти: .доктор биологических наук, и.о.профессора В.Ц.Митютько, доктор биологических наук, профессор АЛЫаи'ачев, доктор сельскохозяйственных наук, профессор А.Е.Ьолгов

Ведущее учреждение - Московская сельскохозяйственная академия шл. К.А.Тимирязева

. Защита диссертации состоится "У/" ¿рС/^иССи^ 1903 р. в 14 час.30 шн. на заседании специализированного совета Д 120.37.05 по защите диссертаций на соискание учено]! степени доктора наук в Санкт-Петербургском государственном аграрном университете по ¿адресу: 189620, Санкт-Лотербург - Пушкин, Ленинградское ш'оссе, 2, ауд.342.

С диссертацией мсишо ознакомиться в библиотеке университета.

Автореферат разослан "^У" 1592 г

Ученый секретарь специализированного совета, кандидат с.-х. наук, доцент

Т,А.Заморская

I. ОБДАЙ ХЛРАКТЕГССТИКА РШУШ

Актуальность т е м ы. Сод^р^нике С ел коз я молоке - один из важнмх селехиноняруемлх: прнгникоз молочного скота. Во всех с развитым молочнта; скотоводством странах придают большое значения селекции молочного скота на поэк^нис белковомолоч-кости.

Селекция молочного скота на пэгчзекио белковости молока осуществляется на основе фекстилических дакнкх но содержании массовок доли общего белка в молоке. Однако, известно, з молоке имеется около 20 различных 6олксе:-.т>: фракций, содержание которое' во многом определяет технологические свойства и п'лдозко качества молока. Поэтому в кастолцоо время предполагается отбор коров не только по содержания массссой доли белка в молоке, но п по белковому составу, к ставится задача селекпии полочного схота на ■ повышение содержали?, з молоке белка, имспдего более вксокуэт биологическую и технологическую ценность (Медведев И.К.,1936; Вагg С. ot al. , 1987; Moi;;ia:iii-5c>r«r»sc:i л. et ai. f JOQ'/j Bral-taasiein к. a. et al., ,1939). разить эту задачу с помощью 7ради-циенньтх методов селекции (отбор короз по белковости .молока, использование быков, улучшателей данного признака) очень трудно. Необходимо разработать новке методк селекци -, основанные на последних достижениях в области генетики белков коровьего молока. Наиболее прогрессивным э этом направлении было открытие генетического полиморфизма ряда молочных белков ( Asciiaffenburc а., Drewry J. , 1955, 105V; liioapsor. :,;.?. et ai. t 1962;

AschaifбпЬш'а a. , I9G3; Kaolin J.il. f 1964; Grosclau-da ?. ot al., I9V8). Основные белки молока - Л

казенны и J3 -лактоглобулии оказались полиморфными почти у всех пород .крупного рогатого скота (Колесник Н.Н., Сокол Б.И., 1972; Жебровский Л.С., Млтютько В.Е., 1979; ¿Завуров A.M., 1980).

Поскольку полиморфным белкам приходится около 70% ¡кассовой доли белка в молоке, перспективными были исследования по изучению влияния их генетических типов на её содержание, на технологические свойства и пищевые качества молока ( saerbon j,,y, ei ai 1967; Sadler А.Ы. at al. t 1968 ; 31-Necouay А.Ы. ,

1972; Michalalc iv. , 1973; Лебедев :LIL и др., 1976; Кривенцов iO.M., 1979; Мнтиков А.С., 1979; Жебровский Л.С., Митптько В.Е., 1979). Исследования в этом направлении имели важное значе-

ние в связи с переработкой молока на белковсмолочные продукты. Как известит, их качс. гво во многом зависят от содержания и колк честг.ениога соотношения белковых фракций в молоке. ¡1озтому в пос леднее время в литератур« широко обсуждается проблема изменения структура молочного белка ( ¡.'аДпааи-зо?эг.зэа л. оь а!,..1967] Вг-э11;иа£|1е.1!1 К.й. оЬ а1. , 1939; (ИЬаоз Л.Р. et ,

1290). Дчк успешного решения данной проблемн и такой актуальной задача, как селекция молочного скота на повышение содержания мае совой доли белка более высокой биологической и технологической ценности очень вачньт знания о генофонде молочных пород по белковым фракциям молока.

Оценка молочных пород проведена в основном по содеркани» комплексна* белков - общего белка, казеина, альбумина, глобулина Олебровский Л.С., 1973), и очень мало известно о содержании массовой доли отдельных белковых фракций в молоке разных пород. Подавляющее большинство отечественных пород не охарактеризовано пс генофонду их белков молока с учетом сцепления казеиновых локусо! и подварипито» .в -казеина А. Такая оценка пород имеет важное значение для разработки новых способов повышения содержания белков в мслоке коров. Методы повышения массовой доли отдельных бел ковых фракций молока, за исключением ^-казеина, пока еще не разработаны. Для их повышения и улучшения структура молочного белка требуются новые нетрадиционные методы селекции.

В настоящее время не выяснены генетические механизмы регуляции синтеза молочных белков. Весьма перспективными в этом отноше нии могут быть исследования по изучению влияния имеющихся в локу сах с*^ т-, £>е-Си , - // мутационных замен на коли-

чество синтезируемого белка. Количественная сценка генетических вариантов белков с соответствующими аминокислотными заменами поможет прояснить вопрос о степени экспрессии аллелей вышеуказанных локусов.

. Из данных научной литературы следует, что содержание массовой доли белков в молоке коров мояет находиться в определенной зависимости от их генотипа по локусам £ л?-Сп ,

£ - . Однако данный вопрос оказался недостаточно изученный для разработки практических рекомендаций по использованию этой зависимости в селекции на белковомолочность.

Успех решения вышеуказанных проблем во многом определяется наяичием экспресс-методов по анализу молочных белков. Существую-цио ныне методы трудоемки, требуют иного времени и позволяют ой-

ределить содержание немногих белковых фракций в молоке. Поэтому необходимо разработать достаточно точный и быстрый метод для проведения массового качественного и количественного анализа различных молочных белков.

Цель и задачи исследований. Целью настоящей работы являлось изучение генофонда молочных пород скота, по бачкам молока и на основе этих исследований разработка способов селекции на повышение содержания массовой дели белкеэ а молоке. Для достижения этой цели необходимо было решить следующие задачи:

- разработать более эффективный метод качественного и количественного анализа белновых фракций з молоке коров;

- разработать программу для проведения количественного анализа белков молока на персональных ЗЕМ;

- провести комплексную оценку колотаьгх пород скота по генофонду их Сел''оп молока;

- определить степень генетического сходства и различия молочных пород по частотам генов белков молока;

- провести количественный анализ генетических вариантов и типов белков молока;

- изучить сопряженность аллелей и генотипов по локусам

уЗ эс- С>г , £ с содержанием массовой доли бел кои в

молоке;

- выявить комплексные генотипы по локусам У3

Са , ^ - и^ , связанные с повышением содержания молочных белков;

- изучить влияние генотипа отца и линейной принадлежности коров на содержание массовой доли различных белковых фракций в молоке;

- определить внутрипородныэ различия по содержанию молочных белков в зависимости от происхождения коров;

- определить корреляционную связь мезду абсолютным содержанием молочных белков;

- провести отбор и подбор коров и быков-производителей по их генотипу, в локусах <*«,■£-, л эс-Сл , £ с цельп повышения содеркания массовой доли белков в молоке потомства.

Научная новизна. Работа вносит новые знания в генофонд молочных пород по белкам молока, использование которых будет способствовать повышений эффективности селекционной работы

íio Оелковонолочности и улучшению структур молочного белка. Проведена количественная оценка генетических вариантов а зипов белка молока, и впервые показано, что сущестпущио количественные различия между ними обусловлены мутационными заменами в локусах

ó j-» и t Jb - Ьр . Обнаружено существенное вли-

яние генотипов по зтим лонусам на содержание массовой доли молочных белков и установлены генотипы, сопряженные с повышением их содеркания. На основе исследований разработан генетический способ повышения содеркания белков в молоке коров.

Впервые в Татарстане проведена комплексная оценка разводимых шм молочных пород скота и их помесей по генофонду белков молока. {Разработан метод для проведения качественного и количественного анализа белков в молоке коров. Предложен пакет программ для обработки результатов анализа белковомолочности на персональных ЭВМ.

Получены новые данные о наследуемости и корреляции содеркания массовой доли белковых фракций в молоке коров молочных пород.

Теоретическая и практическая значимость. В работе приводятся новые данные о генофонде бестужевской, холмогорской, айрширской пород и помесного скота по белкам молока. Показано, что использование полученных данных позволяет более эффективно вести селекционную работу tía повышение содеркания массовой доли белка в молоке и улучшение его структуры. Получены дополнительные научные данные о генетическом сходстве и различии основных молочных пород. Они существенно уточняют. недостаточные исторические сведения и способствуют рациональной организации межпородных скрещиваний.

В понимание генетических механизмов регуляции содеряания массовой доли белков в молоке внесены новые представления, которые заключаются в том, что ее изменчивость до 55$ определяется генотипом в локусах jñ -, х-Сп и j3- ty .

Разработаны методические рекомендации по проведению качественного и количественного анализа белков молока методом электрофореза в полиакриламидном геле. Рекомендации предназначены для научно-исследовательских институтов и лабораторий, занимающихся научением белков молока. Использование метода позволяет проводить анализы на современном уровне, ускоряет решение многих вопросов селекции на белковомолочность.

Нредловен способ отбора и подбора коров и 0 ын о в-произ водителей Ь учетом их генотипа по локуг.нм l*s¡¡-. -i'n , js -

- ö -

¿у для повышения содержания массовой доли белков в молоке mm."' ства. Способ но сравнении с существующими обладает рядом преимуществ, и использование его в селекции молочного скотт по тишает у потомков первого не поколения содержание массовой доли общего белка в среднем на 0,211; общего казеина - 0,186; сХэ j-кпппнпп - 0,041; ß -казеина - 0,090; л;-каэеинп - 0,031 и ß -л'>кто-глобулина на 0,049 г/100 мл.

Применение на персональных ЭВМ разработанного нами пакета программ для обработки результатов исследований обеспечивает ры--сокую точность результатов, значительно ускоряет аналитический процесс и позволяет исследовать большое число образцов.

На защиту выносятся следующие основные вопросы:

1. Материалы по разработке метода качественного и количественного анализа различных белковых фракций в молоке коров.

2. Результаты изучения генофонда молочных пород скота по бчд • кам молока. .

3. Результаты количественной оценки различных генетических вариантов и типов белков молока. . .

4. Результаты изучения внутрипородной изменчивости и корреля ции количественного содеркания молочных белков.

5. Результаты оценки молочных пород скота, разводимых в Татарстане, по содержанию массовой доли белков молока.

6. Штериалн по разработке способа селекции молочного скота на повышение содеркания массовой доли белков в молоке.

Реализация результатов исследован и й. Результаты исследований внедрены в селекционный процесс с молочными стадами бестужевской, холмогорской и яйрширской пород в хозяйствах, где проводились исследования: учебном хозяйстве Казанского ветеринарного института, звероводческом хозяйстве "Восточный", племенном заводо "КИМ", колхозах "Ярыш" и "Маяк". Для них разработаны долгосрочные (на 10 лет) селекционные программы по улучшению племенных качеств и повышению продуктивности животных (Казань, I9B5, 1907, 1990, 1992). В программах предусматривается оценка и отбор коров и быков-производитплей по белковомолочности и их генотипу в локусах белков молока. Отдельные положения работы включены в "Перспективный план селекционно-племенной работы в молочном скотоводстве в хозяйствах Татарской АССР до 2000 года" (Казань, !9<39).

Для науино-иссл(?дош>тельн:нх институтов и лабораторий, осни-

- С -

мшицихся изучением белков моле• а, разработаны "Методические рекомендации по проведения качественного и количественно. > анализа белков молока методом электрофореза в полнакриламидном геле" ■(Москва, 1989).

Разработки "Метод повышения содержания белков в молоке молочного скота", "Метод детализированного качественного и количественного анализа белков молока" вошли в "Каталог избранных научных -разработок "ноу-хау" высших сельскохозяйственных учебных заведений" ( МоаКо« 1991). Каталог распространен на Х1У годичном со-.бранил Американо-советского торгово-экономического совета в г. Нью-йорке среди представителей американского бизнеса.

Пакет программ по обработке результатов исследования на ПЭВМ внедрен в учебный процесс и научно-исследовательскую работу. Программы аспирантами и студентами используются при выполнении диссертационных, дипломных, курсовых и индивидуальных работ. Пакет программ'включен в "Методические указания по выполнению дипломных работ студентами аооишкенерного факультета" (Казань, 1990) и "Задания к практическим занятиям по генетике'сельскохозяйственных кивотных" (Казань, 1990).

Результаты исследований использованы для составления заданий к практическим занятиям по генетике сельскохозяйственных кивотных и вопли в "Методические разработки к курлу генетики для студентов аооинленерного и ветеринарного факультетов, часть Ш" (Казань, 1984), в "Практикум по генетике" (Москва, 1935.■-С.258, 259).

Апробация. Материалы работы докладывались и обсуждались на научных семинарах лаборатории иымуногенетикм и сравнительной генетики животных Института общей генетики (ИОГен) им. 1 Н.И.Вавилова (Москва, I974, 1975, 19%, 1988); научно-теоретической конференции молодых ученых }ЮГен им.Н.И.Вавилова (Москва, 1975); региональном симпозиуме по "Использованию иммуногенетичес-ких методов в племенном животноводстве" (Байсогала, 1976); ХУ1 Международной конференции по группам крови и биохимическому полиморфизм животных (Ленинград, 1978); научной конференции "Повышение эффективности методов генетики и селекции в животноводстве" (Байсогала, 1978); ежегодных республиканских научно-производственных конференциях (Казань, 1981 - 1992); Ш, У съездах ВОГиС (Кишинев, 1982; Москва, 1987); Всесоюзном симпозиуме "Биохимия сельскохозяйственных животных и Продовольственная программа" (Ташкент, 1986); уп Всесоюзном симпозиуме "Молекулярные ыеханиз-

мы генетических процессов" (Москва, 1990); учебно-методической и научно-методической конференциях по "Компьютеризации учебного процесса и научно-исследовательской работы в сельскохозяйственных вузах" (Кострома, 1991, 1992).

Способу подбора родителей по генотипу и селекции на повышение содержания массовой доли белка в молоке залцпдеиы авторским свидетельством на изобретение (№ 1467808, 1988) и положительным решением'на выдачу патента (Г 4926636/15(032130), 1992).

Работа выполнялась по госбюджетной теме, Jiff госрегистрапии 0I86003036I и 0I9I0052U66. В 1991 году проект научно-исследовательской работы по данной теме прошел по конкурсу и включен в межвузовскую научно-техническую программу "Создание селекционно-генетических программ совершенствования стад молочного скота", раздел I.

Публикация результатов исследования. Основное содержание диссертации опубликовано п 32-х -печатных работах.

Объем и структура диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов, методики и методов, результатов собственных исследований, обсуждения, выводов, практических предложений, списка литературы л приложений. Работа изложена на 334-х стр. машинописного текста, иллюстрирована 57-ю таблицами и 15-ю рисунками. Список литературы включает 190 источников отечественных и зарубежных авто-оов.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материал, методика и методы исследований 2.I.I. Материал и методика исследований

Исследования проводили в течение 1973 - 1992 годов в племен-[ых хозяйствах республики Татарстан: учебно-опытном хозяйстве Ка-1анского ветеринярюго института (КВИ), племенном заводе "КИМ", 1вероводческих хозяйствах "Восточный", "Луч", государственном теменном заводе "Птицевод" и совхозе "Тюршсевский". В зтих хо-яйствах исслсдсвано 1807 коров бестужевской, холмогорской, айр-:ирской пород и помесей 1-го поколения бестужевская х айрлирсепп Б х А), бестужевская х красная датская (Б х КД), холмогорская х

айрширская (X х А), холмогорская х голштинскал (X х Г).

Молоко коров иссл.¡довали в париод зимнестойлового содержания. Рационы кормления подопытных коров были полноценными, соответствовали дуализированным.нормам,, сбалансированным по 12-и показателям, Полноценное кормление и высокий уровень племенной работы обеспечивали продуктивность коров, отвечающую современным требованиям. Так, средняя молочная продуктивность коров холмогорской породы составила 5125 кг, айрширской - 5909 кг, бестужевской -3868 кг.

Исследование белков молока. У коров на 3...4-мыес. первой и полновозрастной лактаций по'разработанному наш методу определяли генотип в 4-х локусах белков молока: C*s j-t 'Ji -> ^¿-Caí. , Jb -L(j и содержание массовой доли 14-и »белковых фракций в молоке: 0-. ex's j— ^ схц g-, jS> -, УС -, f -, S -казеинов, -лактоглобулина ( JS - >, с*-

лактоальбумина { л - Lo ), альбумина сыворотки крови ( ), протеозо-пептонной фракции (Рр), иммуноглобулина ( $ ) и быстрой фракции ( F ). Идентификацию казеиновых фракций проводили по Ф.Гроклоду (1979), белков молочной сыворотки - по í.H.naimar-dea,H,A.Mehrena (1978).

Генотип коров в локусах схь j—, J> г, зе-Сте , jS on

ределяли по электрофоретическим типам соответствующих белков, а быков-производителей - по генотипам их 10...15-и лактирущих дочерей.

Частоту генов по локусаи fi -, 2¿-Crt , д - Itg

вычислили, используя общеизвестные формулы (Рокицкий П.Ф., 1974). Комбинации аллелей казеиновых локусов устанавливали методами семейного (по парам "мать-дочь") и поцуляционного анализа. Для определения комбинации аллелей методом популяциОнного анализа использовали те генотипы, которые были гомогенными по всем трем и гетерогенными лишь по одному из трех казеиновых локусов.

Генетическое сходство и различие молочных пород скота определяли по частотам генов в локусах 'Л зе-Сп , jS -kg ¿ Для этого по бестужевской, холмогорской, айрширской породам использовали частоты генов, полученные в собственных исследованиях, а по другим породам - литературные данные (Машуров A.M., I960). . •

Влияние различных генетических факторов: мутационных замен в локусах J& ¡H-ZU , В-'If , генотипов по белкам

молока, генотипа отца, линейной и породной принадлежности на содержание массовой доли белковых фракций в молоке коров изучали методом однофакторного дисперсионного анализа с вычислением показателя доли влияния фактора - Iе.

Для определения влияния генотипа отца и наследуемости количественного содержания молочных белков в стаде бестужевской породы учитывали массовую долю белковых фракций в молоке 139-и дочв рей от 17-и быков, холмогорской - 105-и дочерей от 9-и быков, айрширской - 80-и дочерей от 10-и быков. Минимальное число дочерей от одного быка составило 5.

Межлинейные различия по содержанию в молоке массовой доли белковых фракций изучали у коров бестужевской породы, принадлежа гцих к шести линиям: Наждака ТБ-П, Неруча ТВ-12, Лома НБ-47, Миномета УПБ-321, Нарыва ПБ-2П, Жемана Б-67; холмогорской - к тр^н линиям: Наилучшего СХ-0856, Алнчка МХ-2307, Лимона СХ-0721; ширской - к пяти линиям: 23000 С,.13093 В, 13711 Д, 7900 С, НГ157 С.

Испытание разработанного нами способа селекции на погашение содержания массовой доли молочных белков проводили в стадах бестужевской породы племенного завода "КИМ" и холмогорской - учебно-опытного хозяйства КВИ. Потомство было получено от рекомендуемых нами вариантов подбора коров и бнков-дроиэводителей. Коровы-матери имели возраст третьего отела и старше. У потомства на 3.,.4-м мес. первой лактации определяй и генотип по локусам о^-, 3 ■ус. -Сп , ^з - и содержание в молоке массовой доли общего белка, казеина, белка сыворотки и 14-и различных белковых фракций. Потомство оценивали по методу "дочери-сверстницы".

' 2.1.2, Методы исследований

2.1.2.1. Разработка метода качественного и количественного анализа белков молока •

Метод вертикального электрофореза в полиакриламидном геле (МАГ) является современным аналитическим методом и нашел широкое применение в исследованиях по изучению белков растений, балков крови человека и животных (<Маурер Г., 1971; Конарев В.Г., 1980; Гааль Э. и др., 1982). Поэтому этот метод использован нами для проведения качественного и количественного анализа белковых фракций в молоке коров. До напой разработки ч отечественной лито-

pa-iype сообщения о проведении количественного анализа молочных белков методом влектрофореза в ПААГ отсутствовали. В работе, в отличие от аналогичное работ зарубежных авторов, осуществлена тщательная проработка деталей эксперимента, проведена метрологи ческая аттестация метода, разработана программа для обработки денситограми на персональных ЭВМ, что для методик, связанных с электрофорезом, является носим.

Отбор проб молока. Пробы молока отбирали из суточного удоя коров. Отобранные пробы консервировали 20#-ным раствором тиоыерсаля, конечния концентрация которого в молоке с ставила 0,003%. Пробы молока хранили в холодильнике при +4°С. При таком консервировании они пригодны для анализа в течение 15-и суток.

.Подготовка проб к исследованию. Для анализа использовали обезжиренное молоко. Казенны ос&ждапи подкислением молока ацетатным буферным раствором (25 ш уксусно кислоты, 35 г трехводного уксуснокислого натрия, 100 мл воды, р 4,6) из расчета на I мл молока 0,25 мл буфера. Дня полного осак дения казеинов пробы подогревали в водяной бане при 38...40°С в течение 30-и мин. Затеи центрифугировали 20 мин при 6000 об/мин Сыворотку сливали в другую посуду, а осажденные казенны раствор ли в буфере, состоящей из 86 ия уксусной и 25 ил муравьиной кис лот, 4,5 М мочевины, рН 3,0. В таком же растворе готовили стандартный образец из казеинов по Гаммерстену в концентрации 2,5 г на 100 мл.

В одной пробе из каждых двадцати в трех повториостях опреде ляли содержание казеинов и белков сыворотки по Къельдалю, согла но методическим указаниям Л.С.Жебровского и др. (1981). Этот об разец также принимали за стандарт.

Электрофорез и качественный анализ белков молока. Электрофорез белков молока пр водили на аппарате АБГЭ-I с вертикальными пластинками геля. Для электрофореза казеинов при рН.8,9 использовали систему 7,5$£-ног ПААГ У I по Г.Ыауреру (1971) с добавлением в нее 4,5 Ы мочевины и 2-меркантоатанола.

В лунки геля вносили 10 мкл разбавленного в соотношении 1:2 исследуемого образца (одна часть растворенных казеинов, две час ти смеси, состоящей из одной части раствора М 4, пяти частей Jf и 0,1|-ного 2-меркантоэтанола). В каждую пластинку геля вносили

- и -

два стандартных образца: квзеиин по Гяммергтену и образец с известной массовой долей казеинов, а также в одну и> лунок - "свидетель" (0,001&-ный водный раствор бг«мфенолового синего).

Электрофорез проводили при +4°С. Силу тока установили ЮСмД, напряжение - в зависимости от силы тока - £00-300 В. Электрофоре заканчивали в тот момент, когда "свидетель" проходил в разделяющем геле 90 мм. Продолжительность электрофореза составила 3,5 ч. Форсграммы окрашивали в течение 10-и мин 1%-тщ раствором амидо-черного 10 В в 7%-ном растворе уксусной кислоты. Фореграмчы обесцвечивали электрофоретическии способом в '/,?-ной уксусной кислоте при 500мА до полного удаления неовязавлегося красителя.

На фореграмме после обесцвечивания появлялись окрашенные п".™-сы тести идентифицированных казеинов: сх<з 0, сча^, <*>$,>, уз , зе , и их известных генетических типов (рис. 1). Самую высокую подвижность в геле имеет -казеин. Далее в порядке снижения электрофоретической подвижности располагаются ^-казеин * остальные казенны, о» $ _/} ¿е -казенны в зависимости от генотипа коровы имеют одну или две, си $ .,-4?азеим - две, -казеин - одну полосу белка. Около самого старта находится диффузная полоса медленного казеина Ь .

Электрофорез белков молочной сыворотки проводили в той же системе геля N I, что и казеинов, но без мочевины и 2-меркаптоэтано-ла. Концентрирование белков сыворотки происходило лучше, если при полимеризации концентрирующего геля в качестве катализатора использовали рибофлавин и добавляли 40#-нуто сахарозу.

Молочную сыворотку разбавляли в соотношении 1:1 смесью, состоящей из одной части раствора № 4 и четырех частой ряствора № 7.

В каждую пластинку вносили образен с известной массовой долей белков молочной сыворотки по Къельдалю. Электрофорез заканчивали, когда "свидетель" проходил в разделяющем геле 70 мм.

На обесцвеченной фореграмме проявлялись шесть белков сыворотки: быстрая фракция, у8 -локтоглобулин, <я -лпктоальбумин, альбумин сыворотки крови, протеозо-пептонная фракция, иммуноглобулин (рис. 2). Между быстрой фракцией и _/3 -лактоглобулином, альбумином и протеозо-пептоиной фракцией находились неидентифипированныо "малые" сывороточные белки. Б сыворотке молока коров исследованных пород лишь один белок - ¿! -ляктоглобулин оказался полиморфным. У итого белка наиболее распространенные варианты Л и В пекл-лзны на рисунке 2.

Электрофорез казеинов при рН 3,0 проводили для разделения fi -казеина А на Ar, Ag, A3, для чего использовали однородную буферную систему, состоящую из уксусной и муравьиной кислот ( Kiddy С.A. v 1973) и 10^-ного Л1ААГ. Поскольку полимеризация кис лых растворов геля резко замедлена или не идет вообще, для ускорения гелеобразования в качестве катализатора на и мл смеси геля добавляли 0,1 мл 0,2 н раствора нитрата серебра.

В лунки геля вносили 10 мкл растворенных казеинов, которые предварительно разбавляли в соотношении 1:1 раствором 10 М мочевины и 20%-ной сахарозы.

Вначале, до внесения образцов в гель, проводили двухчасовой предварительный электрофорез при силе тока 95мА, а затем - окончательный при 100мА. Продолжительность электрофореза составила 22 ч.

На обесцвеченной фореграмие хорошо проявлялись только £*s j-и J3 -казенны, разделение остальных казеинов происходило хуже, чей при рН 8,9. В молоке исследованных животных наиболее часто встречались варианты Aj и А^. Вариант Ад оказался редким.

Количественный анализ белков молока и егопрограммное обеспечение. Для определения содержания массовой доли белков в исследуемых об разцах фореграммыденситометрировали на микрофотометре ИФО-451 и получали денситограммы белков молока (рис. I и 2).

Массовую доле белка во фракциях определяли путем сравнения со стандартными образцами. На денситограше исследуемых и стандартных образцов находили площадь пиков соответствующих фракций. По стандартным образцам вычисляли коэффициент перевода единиц из ыерения площади пиков (мм^) на г/100 на.

Предлагаемый метод количественного анализа белков испытали на точность определения: проверяли стабильность результатов и на ходили систематическую ошибку. Абсолютная погрешность опредаче-ння не превышала ¿0,0145 г/100 мя, а относительная +8,3$. Эти пс казатели стабильности результатов в среднем по всей белкам состе вили соответственно ¿0,006 г/100 мл и ¿3,2% с доверительной вере ятностью 0,95, что не превыпает допускаемую погрешность при опр< делении массовой доли белков молока другими методами, предусмотренными по ГОСТу, Результаты параллельных определений общего 6cj к», казеинов и белков сыворотки методами электрофореза и Къельд! яя показали отсутствие систематической погрешности метода.

ЛлГ

I/

\

V 6 5 4 3 2 1

ВА ВА ВВ РисЛ. Денситограмма казеннои

после электрофореза в 7,5^-ном 11ААГ, рН 8,9. I - сх6о_казеин 2 - ^-казеин ВВ, 3 - Сч«,^ казеин, 4 - Л -казеин АВ, 5 - -казеин АВ, 6 - у -казеин, 7-5 -казеин.

Рис.2. Денситограмма белкоп молочной сыворотки после электрофореза в 7,5$-ном ПАЛ]', рН 8,9. I - Г -фракция, 2 - / -лактоглобулин АВ, 3 - <х -лактоальбумин, 4 - альбумин сыворотки крови, 5 - протеояо пептонная фракция, б - иммуноглобулин .

Разработана программа для определения массовой доли белков молока на персональной ЭВМ "Электроника ДЗ-28". Программа может быть использована и на ЭВМ "ДВК-2", "ДВК-2М", "ДШС-3". ЭВМ осуществляет расчет площади под пиками, соответствующими отдельньм фракциям белков, и общей площади всей денситогреммы. В программе предусмотрено введение переводного коэффициента и получение массовой доли белка в г/100 мл.

Вначале, до введения данных в ЭВМ, проводили предварительную обработку денситограмм. Предобработка денситограмм заключалась в том, что пики, соответствующие белковым фракциям, разбивпли на прямоугольники и треугольники, определяли их координаты по осям абсцисс и ординат. В ЭВМ последовательно вводили число обрабатываемых однотипных денситограмм, число фракций на каждой денсито-грамме. Отправной точкой вычислений являлось введение нулевых значений координат прямоугольников и треугольников первой фракции. В программе предусмотрено исправление ошибок, допущенных пр.1

введении первичных данных (координат прямоугольников и треугольников).

Коэффициент для перевода единиц измерения площади пиков на г/100 мл получали по результатам обработки стандартных образцом. После введения коэффициента на экране дисплея и в печати получали результаты о содержании массовой доли белков в каядом отдельном образце молока и средние показахали по группе коров одного генотипа.

Систематическая ошибки метода определения содержания массовой доли молочных белков на ЭШ составила не более 0,012 г/100 мл. Критерий достоверности разности, за исключением "малых" белков сыворотки, был низким и не превышал значения 0,54.

Использование ЭВМ обеспечивало высокую точность результатов, значительно ускорило процесс количественного анализа белков моле ка и позволило исследовать большое число образцов.

2.1.2.2. Обработка результатов исследований на ПЭВМ и ее программное обеспечение

Проведение биометрического анализа обычными методами - довольно трудоемкая работа и отнимает много времени. Использование ЭВМ существенно облегчает и ускоряет решение этой задачи. Разработанный нами пакет программ позволяет проводить полный биометри ческий анализ результатов исследований на персональных ЭВМ "Элек тропика де-2й","ДШ-2", "ДВК-2Ы", "ДВК-3", "Агат". Программы сое тавили по формулам и алгоритмам вычисления биометрических величин, приводимых в хорошо известных руководствах (Ппохинский H.A. 1970; Рокицкий П.Ф., 1974).

По первой программе осуществляли вычисление средней величины дисперсии, среднеквадратического отклонения, ошибки'средней, коэффициента вариации, критерия достоверности; коэффициента корреляции и наследуемости.

Зторая программа разработана для проведения дисперсионного анализа и вычисления коэффициента наследуемости по внутриклассовой корреляции между дочерями-полусестрами. По этой прог]>амме осуществляется вычисление не только коэффициента наследуемости, но и его ошибки, приводится определение достоверности наследуемости. Кроме этих величин, на экран дисплея выдаются средние дан iwß и их ошибки по дочерям быков-производителей.

Третья программа разработана для определения доли влияния

фактора на изменчивость признаке. ГЪсчет доли влияния производится методом однофакторного дисперсионного анализа. lin экран д'ч:-плея выдаются ведущие результаты обработки: доля влияния фактора, ее ошибка и достовер^сть, разность средних данных и их ошибки по сравниваемым группам яивотных.

Четвертая программа разработш1» для определения по частотам генов генетического расстояния между породами. Вычисление величины генетического расстояния ( ) осуществляли по формуле, предложенной K.K.Kidd с соавторами (1974), а ее ошибки - по И.Г. Тучкову и В.А.Шереметьевой (1972). На экран дисплея по дтпшй программе выдаются следующие результаты: число локуеоп и аллелей; генетическое расстояние между породами, его оиибкп и достоеер-тсть.

2.2. Результаты исследований

2.2.1. Генофоцц молочных пород скота по белкам молока

2.2.1.1. Структура молочных пород скота по генотипам белков молока

Генофонд по белкам молока оказался уникальным и наиболее разнообразным у бестужевского скота. В этой породе найдено наибольшее число генотипов, которых оказалось 44 (табл. I). Коровы холмогорской и айрширской пород имели значительно меньшее число генотипов. У холмогорского скота число таких генотипов составило 20, айрширского - 17.

Генотипы ВВ AjAj АА АА; ВВ AjAj АА ВВ; ВВ AjAj AA АВ; ВВ AgAg АА ВВ; ВВ A2Ag АА АВ; ВВ AfA2 АА АА; ВВ AjAg АА ВВ; ВВ AjAj, АА АВ; ВВ AjAg АВ ВВ; ВВ AjAg АВ АВ; ВВ AjB АВ АВ; ВВ AgB АВ АВ встречались у всех трех исследованных пород. Однако их частота сильно колебалась в зависимости от породы. Например, для бестужевского скота характерна высокая частота генотипов ВВ AjAj ДА АА; ВВ AjAj АА АВ; ВВ AjB АВ AJÎ (7,98...16,Ш) и низкая - ВВ AjAj АЛ ВВ; ВВ A2Ag АЛ ВВ; ВВ AgAg АА АВ; ВВ AjAg АА ВВ (0,94...3,22/,). У коров холмогорской и айрширской пород по этим генотипам наблюдалась противоположная зависимость. Межпородные различия по остальным генотипам выражены отсутствием их у одной или же двух но трех сравниваемых парод. Так, обладателями значительного числа (24-х) генотипов были лишь коровы бестужевской породы.

Выявлено изменение генетической структуры помесей по ср*гвне-

Таблица I

1Сош1Лб"сниб гено"ипы коров разных пород по белкам молока

ж я .са; а и = =: п а I: а» _ лз -

Комплексные гено*ипи по локусам

П о

3 л

зг-С/г

РОД

вв а|а-

бестужевская холмогорская айрширская гол. %

вв а£а вв а£а вв аха ЬВ'А|А .вв а1а

i аа аа ! аа вв аа ав i ав аа ! ав вв i ав ав вв а^ аа аа вв а2а2 аа вв вв а^а^ аа ав вв а2а2 вв ав вв а^ао ав вв вв а^а^ ав ав■ вв а^ аа аа вв а1а2 аа вв вв а^ аа ав вв а1а2 ав аа вв а^ ав вв вв а^ ав ав вв а^з аа вв вв а^ м ав вв вв вв аа • вв вв вв вв вв вв вв ав вв вв ав аа вв вв ав вв вв ахв аа вв вв а{в аа ав вв а|в вв ав вв ахв ав аа вв ахв ав вв вв а1в ав ав вв а2в вв ав

20

7

36

1

2

2 4 I

6

3 9 19

4 7 12 I I I 3

г I I I I I

а б .

17 I

9,39

3.28 16,90

0,47 0,94

0,94 1,88 0,47

2,02 1,41 4,22 8,92 1,88

3.29 6,63 0,47 0,47 0,47 1,41 0,94 0,47 0,47 0,47 0,47 0,47 1,41 2,34 7,98 0,47

'> ГОЛ. „А гол. %

1 4~~ _____ _____

3 2,24 2 2,04

8 5,97 8 8,16 '

1 4 2,98 5 5,10.

I 0,75 I 1,02

- - I 1,02

- 4 4,08

I 0,75 2 '2,04

12 8,96 14 14,29

Б 3,73 Б 15,31

б 3,73 2 2,04

6 4,48 - -

2 1,49 3 3,06

. 24 17,91 13 13,27

II 8,21 17 ' 17,35

5 3,73 6 6,12

9 6,72 2 2,04

I I

7 .7

0,75 0,75 5,22 6,22

2,04

2

bb agb ab aa bb a2b ab bb bb a2b ab ab ВС AjAJ AA AB ВС A2A£ AB BB ВС A2A2 AB AB ВС AjA2 AA AA ВС AjA2 AA AB ВС AjAg BB AB ВС AjAg AB AA ВС AjA2 AB BB ВС AjA^ AB AB ВС BB BB AB ВС AgB AB BB . ВС agb ab ЛВ

Итого

ни» с материнскими породами. Среди помесей Б х А и Б х КД найдены коровы с такими уникальными генотипами, как BB AjAj AA АС; ВС А2А2 AA АА; ВС A2Ag AB АА; ВС А^В AA АВ, которые не встречались ни у одной из участвующих в скрещивании пород. Кроме того, у помесей Б х КД по сравнению с материнской-породой существенно (на 20,05$) увеличилась частота генотипа BB AjAj АА ВВ. Аналогичные изменения по генотипам BB AjAj АА АВ; BB AjB AB AB; BB AjB АВ АЛ произошли и у помесей X х Г.

2.2.1.2. Характеристика молочных пород скота по генам белков молока

Как известно, казеиновые локусн тесно сцеплены и могут быть рассмотрены как одна сложная система (Гроклод Ф., 1979). Знания о комбинации аллелей локусов ^Sj-» fi -, ^-C/t. и об их частоте важны для определения ожидаемого расщепления потомства но генотипу при том или ином подборе родителей,

У бестужевского скота выявлено II, холмогорской и айрширской пород - по 5 комбинаций (табл. 2). Комбинации аллелей BAjА и ВА^А окапались наиболее pn.cnрастраненными и найдены во всех груп-

Окончгшие таблицы 1

2 3 4 Г) . г а т: ss г- -г1v г"те г*: б 7 я w г* с jp zs tr. st — ta *г •

7 3,28

I 0,47 15 11,19 -

7 3,28 7 5,22 I I, ОЙ

I 0,47 - _

2 0,94 - - -

I 0,47 - -

I 0,47 - -

6 2,82 - _

I 0,47 - _

2 0,94 - -

2 0,94 - _

4 1,88 - -

I 0,47 - _

I 0,47 - - -

4 1,88 - -

213 100 134 100 Ш Ш)

Таблица 2

Комбинации аллелей локусов о«лков молока и их частота у коров разных пород

Комбинация алле- Частота комбинаций аллелей по породам___

Ле<я Г-КУС^ _ бестужевская холмогорская_айрширская

* п частота п. частота и частота

Ш :А варл 195 0,551 92 0,343 VI 0,444

66 0,106 III 0,414 78 0,487

ва3а 2 0,006 - - - -

ВВА 4 0,011 - - - -

вьв 57 0,161 38 0,142 3 0,019

ВА1В 5 0,014 7 0,026 6 0,038

вл2в 12 0,034 20 0,075 2 0,012

СА|А 2 0,006 - - - -

са2а 9 0,025 - - - -

СА^В I 0,003 - - - -

свв I 0,003 - - - -

пах у 17,9...65,Ь% коров. Частота комбинации ВА^А была низкой (0,092) лишь у помесей Б х КД, что обусловлено влиянием генотшш быков красной датской породы. Для бестужевского скота характерна высокая частота комбинации ВА^А, а для холмогорского - ВА2А. Комбинации ВА^А и ¡и^А у айрширской породы имели примерю равную частоту. Комбинации ВВВ, ВА|В и ВА^В обнаружены также во всех грушах животных. Однако частота комбинаций ВА|В и ВА^В была низкой, и по ним межпородные различия слабо выражены. Айрпцрская порода отличалась низкой частотой комбинации ВВВ.

Комбинации ВА3А, СА|А, (^А, С^В обнаружены у незначительного числа коров бестужевской породы и помесей, происходящих от них.

Из данных таблицы 2 следует, что подавляющее большинство животных бестужевской породы с комплексными генотипами ВВ А|В АВ АА; ВВ А^В АВ АВ, представленными в таблице I, имеют комбинации аллелей ВАдА и ВВВ. Вероятность образования этих генотипов из аллелей ЬА^В и БВА очень мала и составила 0,00031. Такая вероятность для айрширской и холмогорской пород отсутствует вовсе. Это обстоятельство очень важно для определения ожидаемого расщепления потомства от рекомендуемого нами подбора коров и быков-производи-талей по генотипу (см. раздел 2.2.4).'

2.2.1.3. Г'енетичесное сходство и различив пород по частотам генов белков молока

Эффект гетерозиса, наблюдаемый по хозяйственно-полезным признакам при межпородном скрещивании, во многом зависит от степени генетической отдаленности скрещиваемых пород и гетерогенности помесей. В наших исследованиях установлено, что на содержание массовой доли белков в молоке коров оказывает большое влияние генетическая структура породы и гетерогенность животных по генам белков молока. Б этой связи нами определены генетические различил по генам белков молока между девятью основными молочными породами скота, а такжо породами и помесями, изученными в настоящей работе.

Наибольшая генетическая близость обнаружена между голландской и черно-пестрой ( « 0,0174), красной датской и шортгорнской ( я 0,0159), голштинской и симментальской породами (. " 0,0031; см.рис. 3). Существует большое генетическое сходство нег ду красными породами: айрщирской, красной датской и шортгорнскои. Дпл них величина Н не превышала значения 0,0763. Однако ото сходство не относится к бестужевской породе,, имеющей красную масть. Генетическая структура бестужевского скота по белкам молока оказалась близка к симментальской и черно-пестрым породам ( (о- " 0,0214...0,0569), нежели красным (« 0,1068...0.1287).

Порода

©г

№

Г©

X:

гх

V

1 - айрширская

2 - голландская

3 - голштинская

4 - бестужевская

5 - красная датская

6 - симментальская

7 - холмогорская

8 - черю-пестрая

9 - шортгорнская

Рис.3. Изображение генетического расстояния между основными молочными породами в трехмерном пространстве. Составлено на основании значений методом многомерного шка.та|*звадия.

Чорно-пестрьт породи: голландская, голштинская и чецю-пест-рия обладали сходнш генофондом по белкам молока. Генетические различия между этими породами были незначительными и составили 0,0174...0,0354. Генетическую близость с черю-пестрими породами имел сишинтальский скот ( = 0,0031.. .0,0540).

Не обнаруживается общность происхождения красных и черно-пес-трих пород. Породи этих групп занимали крайнее положение по генетическому расстоянию между ними ( f$. = 0,1013...0,1867). Отечественный холмогорский скот находился примерю на равном генетической расстоянии от красных и черно-пестрых пород ( - 0,0323... 0.0Ш0). Исключение составила лишь че^ю-пестрая порода, с которой холмогорский скот имел меньше сходства.

Помеси Б х А, Б х КД, X х А занимали промежуточное положение между породами, от которых они произошли.

2.2.2. Бнутрипородная изменчивость по содержанию массовой доли молочных белков

2.2.2.1. Содержание генетических вариантов и типов . белков в молоке коров

Содержание c*s j-казеина в молоке коров высокое и его массовая доля составила 0,928...0,849 г/100 ия (табл. 3). По содерка-нию «з j-казеина наблюдался эффект гетерозиса. Массовая доля гетерогенного типа ВС была на 0,121...0,076 г/100 мл выше, чем гомогенного типа ВВ (Р-^0,01). Обнаружены количественные различия и иежду генетическими вариантами «5 j-кааеииа. У гетерогенного типа ВС на вариант В приходилось 59,8...58,1% белка, а на вариант С - 40,2...41,(Р-^ 0,001). Доля влияния аллелей В и С на количественное содержание генетических вариантов была высокой и составила 0,506...0,697 (Р-^0,001). Следовательно, аллель В обеспечивает повышенное содержание в молоке соответствующего ему генетического варианта, чем аллель С. Различия по экспрессии аллелей Б и С у гетерогенных особей и гетерозис по массовой доле ocs j-казеина, по-видимому, обусловлены влиянием мутационной замени ГАА~»ГГА в 192-м кодоне, приводившей к изменению аминокислотного состава генетического варианта С и количества синтезируемого белка.

J} -казеин по содержанию в молоке уступал лииь о(& казеину и ого массовая доля составила 0,769...О,956 г/100 мл. Наибольшее

Таблица 3

Содержание генетических типов и вариантов белков в молоке коров розных пород

Белок и его генетические

Массовая доля белка по породам, г/100 мл

холмогорская

ьщц* п оар- анты м + т м + пг м + т

<*ь г-казе-ин: 1 вв 255 0,902+0,006 147 0,676+0,008 149 0,905+0,009

вс 35 0,978+0,018 - - - -

из них: в 0,575+0,014 - . - - -

с 0,403+0,014 - - - -

-казеин: А1А1 71 0,819+0,012 16 0,833+0,024 21 0,826+0,022

л2л2 10 0,733+0,024 29 0,716+0,019 23 0,099+0,021

вв 12 0,819+0,020 - - - -

а1а2 70 0,792+0,012 51 0,821+0,015 41 0,790+0,010

из них: А^ 0,440+0,008 0,430+0,010 0,415+0,009

а2 0,352+0,008 0,391+0,010 0,375+0,009

АГВ 26 0,880+0,022 16 0,891+0,030 2 0,895+0,062

¡13 них: А£ 0,50370,015 0,473+0,014 0,400+0,079

в 0,377+0,015 0,418+0,014 0,435+0,079

а2в 21 0,847+0,020 22 0,863+0,023 i 1,020+0,103

из них: а^ 0,378+0,011 0,408+0,012 0,400^0,094

в 0,469+0,011 0,455+0,012 0,620+0,094

эе-казеин: аа 158 0,230+0,004 80 0,247+0,005 129 0,222+0,004

вв 14 0,259+0,013 i 0,210+0,050 - -

ав 118 о,24бТо,оо4 ее 0,253+0,005 20 0,244+0,010

из них: А 0,150+0,002 0,147+0,003 0,158+0,000

в 0,098+0,002 одоо+о.ооз 0,08снь,006

73 -лакто-глобулин: АА

ВВ

АВ

из них: А В

59 0,360+0,008 9 66 0,273+0,006 02 165 0,32^0,004 56 0,180+0,002 О,14бТо,002

0,3/2+0,020 0,27140,005 0,295^0,007 0,167т0.004 0,120+0,004

II

08 70

0,420+0,010 0,323+0,000 0,376+0,007 0,205+0,00-1 0,171+0,004

чодичество ß -казенна содержалось в. молоке коров с типами А^В и А^В, а наименьшее - с AgAg (Р^ 0,01...0,001). Гетерогенные типы AjB и AgB, превышая гомогенных Aj-Aj, AgAg и ВВ по массовой доле ß -казеина на 0,02d...0,316 г/100 Ш1, обладали эффектом гетерозиса. Гетерозис по количеству Л -казеина наблюдался, только у типов AjB и AgB. Он не обнаружен у гетерогенного типа AjAg. В молоке корон с типом AjAj массовая доля ß -казеина оказалась достаточно высокой и на 0,081...0,170 г/IÜO мл вше, чем AgAg (Р 0,001). Такое содержание ^казеина ставит тип AjAj на один уровень с типами AjB и AgB. Таким образом, содержание ß -казеина в молоке коров сильно зависит от его генетического типа, и эта зависимость имеет следующую закономерность: AjB, AgB >AjAp ВВ, AjAg > AgAg.

Количественные различия обнаружены и между генетическими вариантами ß -казеина. Варианту Aj соответствовало наибольшее, В -среднее, Ag - наименьшее содержание белка. Так, в молоке коров с гетерогенными типами AjAg и AjB из общей массовой доли ß -казеина на вариант Aj приходилось 51,1...57,4$, на .В и Ag - 42,6... 40,9/6 белка (Р01...0,001). У коров с типами AgB содержание варианта В в молоке было на 0,030...О,243 г/100 ш выше, чем варианта Ag (Р 0,05...0,001). Такие же количественные соотношения иекду вариантами Ар Ag, В сохранились и в их гомогенном состоянии, т.е. у типов A|Ag, AgAg и ВВ. Доля влияния аллелей Ар Ag, В на содержание в молоке генетических вариантов ß -казеина била достаточно высокой - 0,107...0,852 (Р ^ 0,01...О,001). Следовательно, аллель Aj обеспечивает повышенное содержание соответству-щего ему варианта ß-казенна по сравнении с аллелями В, и Ag. Аллели локуса ß -Cn н их генетические варианты белка различаются мутационными заменами в 37-и, 67-и, 106-м, 122-и кодонах и соответствующих позициях молекулы белка- ( Groeclaude i. et el. , 1972; 'тойрвоа-ы.р., iarreU H,lä. t 1974. Баев

АД, а др., 1987). Замены 67 Про -*Тис и 122 Сер -^-Арг оказали положительное влияние на количество синтезируемого белка, так как массовая доля вариантов Aj и В с этими заменами как в гомогенном, так и гетерогенном состояниях была выше, чем исходного варианта Ag.'H варианту Aj соответствовало наибольшее содержание белка. Таким образом, селективным преимуществом по сравнению с адлеляыи В и Ag обладает 'Ар как обеспечивающий более высокое со-держпние контролируемого им варианта. '

Содерканне ?г-казеина в молоке невысокое и его массовая доля составила 0,210...0,276 г/100 мл. Во всех группах коров обнаружено повышенное содержание генетического типа AB по сравнению с АЛ (Р 0,05...0,001). Содержание генетического типа ВВ в молоке коров бестужевской породы было наибольшее (Р^-0,05). Это позволяет предположить, что, по-видимому, по массовой доле х. — казеина у гетерогенных особей AB не существует гетерозиса, и концентрация ¿¿-казеина в молоке находится-в следующей зависимости от генотипа коров: ВВ >АВ > АА. Однако у VeTeporeHHux коров AB более высокая экспрессия аллеля В по сравнению с аллелем А не подтвердилась. Так, в молоке коров с типом AB из общего количества х—казеина на вариант А приходилось значительно больше белка, чем на вариант В (Р-*1 0,001). Генетические различия мелду вариантами А и В з*.-казеина заключаются в наличии двух мутационных замен в 136-й и 148-й позициях макропептида, которые оказывают влияние на количество синтезируемого белка как у гомо-, так и гетерогенных коров.

Таким образом, результаты исследований указывают на значительное 'преимущество гетерогенного типа AB по сравнению с гомогенным АА. Генотип AB обеспечивает не. только повышенное содержание зе-казеина, но и, по данным других авторов ( Sadler .A.M. et al. , 1968; Christ; JV. , 1981; Schaar J. , 1984; Jakov I. , 1989), улучшает технологические свойства молока: скорость свертывания, плотность казеинового сгустка и термоустойчивость. В отношении генотипа ВВ следует отметить, что он для многих европейских пород является редким или яе вовсе не обнаруживается.

ß -лактоглобулин - основной белок молочной сыворотки, и его массовая доля в молоке составила 0,259...0,420 г/100 мл. Наибольшее количество ß -лактоглобулина соответствовало типу АА, наименьшее - ВВ, промежуточное - AB (Р-^0,01...0,001). Аллель А по сравнению с аллелем В обеспечивал повышенное содержание ß -лак-тоглобулина в молоке и в гетерогенном состоянии. Так, у гетерогенных особей AB из общего количества ß -лактоглобулина на вариант А приходилось 53,3...58,4%, на В - 41,б...46,7% белка (Р^-0,001). Доля влияния аллелей А и В на содержание соответствующих им генетических вариантов была высокой и составила 0,126...0,631 (Р -^0,001). Следовательно, степень экспрессии аллеля А как в гомо-, так и гетерогенном состоянии значительно вше, чем аллеля

В. Различия по степени экспрессии аллелей локусa ß - lg могут быть обусловлены мутационными заменами в 64-м и 118-м кодонах. Как известно, соответствующие этим аллелям генетические варианты В и А имеют аминокислотные замещения Гли-'Лсп и Ала -*-Вал (Thorn-Рвоп Ы.Р., ffarrall Н.Ы. , 1974).

Обнаружено влияние породы на содержание некоторых генетических типов белков молока. Так, содержание <*5|-казеина ВВ в молоке коров бестужевской и айрширской пород по сравнению с холмогорской оказалось повышенным 0,01). Достоверные межпородные различия выявлены по эс -казеину АА, которого содеркалось больше в молоке бестужевской и холмогорской пород, меньше - айрширской (Р-^ 0,001). Повышенным содержанием всех трех типов ß -лактогло-булина обладали коровы айрширской породы (Р 0,05...0,001). Доля влияния породной принадлежности коров на содеркание этих генетических типов белков составила 0,024...0,236 (Р^-0,05...0,001). Однако по содержанию всех генетических типов ß -казеина, ВС

«3 j-казеина, AB ъе. -казеина существенных межпородных различий не обнаружено.

2.2.2.2. Содержание белков в молоке коров с разными генотипами

В исследованиях установлено аддитивное влияние генотипов по локусац <*3j-, ß -, зе-Crt и ß - на содержание комплексных белков: общего быка, казеина, белка молочной сыворотки, а на содержание ими не контролируемых белковых фракций - плейотронное влияние. Так, по локусу ^Sj-C/i генотип ВС обеспечивал повышенное содержание массовой доли общего белка (3,379...3,524 г/100 мл), казеинов (2,640...2,832 г/100 мл), ß -казеина (0,810 ...0,864 г/100 мл), ж -казеина (0,250...0,264 г/100 мл), чем ВВ (соответственно 3,234...3,363; 2,524...2,619; 0,800...0,812; 0,231...О,237 г/100 мл; Р-^ 0,05...0,001). Доля влияния генотипо! ВВ и ВС на содеркание этих белков в зависимости от породы коров составила от 0,013 до 0,359 0,001).

По локусу ß -С/г повышенным содержанием массовой доли общего белка и казеинов (соответственно 3,273...3,505; 2,587...2,754 г/100 мл) обладали генотипы AjB, AgB, AjAj, а пониженным - А^А^ (3,234...3,253; 2,469.. .2,547 г/100 мл; Р^ 0,01...0,001). Из казеиновых фракций в большой зависимости от генотипа по ß -Сп находилось содержание ¿«-казеина ( ¿Z2 = 0,106...0,IG4). Обна-

ружено также плейотропное влияние генотипов локуса £ -С'г- на содержание отдельных сывороточных белков. Так, генотип А|А| превышал остальных генотипов на 0,002...0,049 г/100 мл по массовой доле р -лактоглобулина, а ^¿к^ - протеозо-пептонной фракции и "малых" белков сыворотки на 0,004.. .0,018 г/100 га (Р^0,05... 0,01).

Генотипы по локусу х -С/г оказали устойчивое влияние на со-деркиние общего белка, казеина и его £ -фракции. В молоке коров с генотипом АВ содержалось массовой доли о'бщего белка на 0,087... 0,288 г/100 мл, казеина - 0,075...0,273 г/100 мл, ¿> -казеина -0,018...0,073 г/100 мл больше, чем с генотипом АА (Р^ 0,05... 0,001). Доля влияния генотипов АА и АВ на содержание этих белков была достоверной во всех группах животных и составила 0,023... 0,388 (Р0,01.. .0,001). Стабильное влияние локуса зе -Ск обнаружено также на содержание "малых" белков сыворотки ( » 0,016...0,151).

Установлено, что различия между коровами по содержанию массовой доли белков сыворотки в основном обусловлены влиянием генотипов локуса р> - Ьд . Независимо от породной принадлежности коров генотип АА обеспечивал высокое их содержание (0,735...0,841 г/100 мл), ВВ - низкое (0,658...0,783 г/100 мл), АВ - промежуточное (О,662...О,826 г/100 ил; 0,05...О,001). Выявлено также стабильное влияние локуса р - на содержание отдельных белков сыворотки и некоторых казеиновых фракций ( » 0,035...0,431). Представляет интерес наличие связи между генотипами по локусу £ - и содержанием -казеина. Выше, по локусу £ -Си , приводились данные, доказывающие влияние этого локуса на содержание р -лактоглобулина. Локусы -Сп и .^9 - ¿^ , по-видимому, находятся в тесном взаимодействии, что отражается на содержании массовой доли соответствующих им белков.

Гйэличия по содержанию белков, обусловленные влиянием локусов I-« Л ж-Сп , £ - Ьд , суммировались и тем самым определяли высокое содержание общего белка, казеина, белков сыворотки и основных белковых фракций: 3 -» эе?-казеинов и Я -лактоглобулина в молоке коров с генотипами ВС АВ АВ АА; ВС АВ АВ АВ; ВВ АВ АВ АВ (без разделения ^ -казеина А на Ар А Ад). Так, у коров бестужевской породы с такими генотипами содержание массовой доли белков соответственно составило 3,521... 3,735; 2,713,..2,894; 0,717...0,910; 0,955...1,095; 0,793... 0,871; 0,240...0,270 г/100 мл. У коров холмогорской породы гено-

типу ВВ АВ АВ АВ также соответствовало повышенное содержание общего белка, казеина и его 3 -, ^-фракций. Разделение 3 ¡-казеина А на Ар Аз, Ад показало, что оба генотипа ВВ А|В АВ АВ и ВВ А2В АВ АВ обеспечивают высокое содержание этих белков (соответственно 3,357...3,583; 2,660...2,842; 0,879...0,939; 0,786...0,914 ; 0,274...0,302 г/100 мл; Р-^0,05.. .0,01). ГЪвную с генотипами ВВ А|В АВ АВ; ВВ А^В АВ АВ ценность представлял и генотип ВВ Л|А| АА АА. Этот генотип обеспечивал наивысшую белковость молока у коров холмогорской и айрширской пород (3,492 и 3,730 г/100 ил). Наименьшее содержание общего белка и казеина (3,066...3,292; 2,395...2,502 г/100 мл) наблюдалось в молоке коров с генотипами ВВ А^ АА ВВ и Ю А^ АА АВ (Р^ 0,05... 0,001). Влияние комплексных генотипов на содержание молочных белков хорошо выражено, и оно обнаружено почти по всем белкам молока у коров бестужевской породы. У них доля совместного влияния четырех локусов на содержание массовой доли белков в молоке была высокой и составила 0,219...0,546 (Р-^ 0,05...0,001;.табл. 4). Комплексные генотипы оказали влияние на содержание несколько меньшего числа белковых фракций в молоко коров холмогорской и айрширской пород, что связано с отсутствием между ниш генетических различий по одному важноцу казеиновому локусу - «з л .

Таблица 4

Влияние комплексных генотипов на содержание белков

в молоке коров

Доля влияния по породам, ± т

Белок бестужевская холмогорская айрширская ( п, 189) ( п = 128) ( им 79)

Общий белок 0,298+0,094хх 0,166+0,119 0,211+0,120

Казенны: 0,340+0,ОШ50™ 0,197+0,109 0,284+0,117х

<*50 0,242+0,103х 0,204+0,109 0,136+0,142

оч5х 0,322+0,Ов?^ 0,278+0,094хх • 0,103+0,145

0,257+0,098хх 0,144+0,120 0,327+р,Ю7хх

£ 0,398+0,077ххх 0,459+Э,077ххх 0,347+0,109**

эе 0,289+Э,092хх 0,206+0,101х 0,092+0,149

Г 0,265+0,097х* 0,253+0,ЮВ* 0,12470,146

& о.збг+э.оео^ 0,194+0,119 о,325+0,114?х

Окончание таблицы 4

I

3

4

Балки сыворотки: 0,425+0,074 F

ü-Lk М Рр

Ъ

прочие

xxx

0,250+0,095хх 0,546+0, ОбО30™ 0,176+0,103 0,240+р,095хх О,219+0,098х

0,377+0,080 0,349+0,081

xxx

0,250+0,109х 0,244+0,094х* 0,474+0,073ххх 0,190+0,105 0,220+0,102х 0,212То,103х 0,330+0,092ххх О,241+0,096х

Примечание: здесь и в последующих таблицах

xx

0,01;

xxx

0,216+0,122 0,164+0,121 0,401+0,092ххх 0,142+0,130 0,122+0,142 0,289+0,109х* 0,149+0,142 О,256^0,IIIх

?-= 0,05;

Р^- 0,001

Таким образом, комплексные генотипы по локусам с*Э|-, >3 эе -Сн , /3 -^ обуславливают значительную часть (до 55$) изменчивости содержания белков в молоке коров. Поэтому эффективность селекции на повышение белковости молока можно значительно повысить, если вести отбор и подбор коров и быков с учетом их комплексного генотипа по локусам Л -, х-Сп , ^ -

иц , отдавая предпочтение генотипам ВВ А^Ъ АВ АВ; ВВ А£В АВ АЬ; ВВ А^В АВ АА; ВВ А2В АВ АА и ВВ А^ АА АА. В бестужевской породе, кроме них, селекционную ценность представляют еще животные с аналогичными генотипами по локусам уЗ -, ж-Си- , , и

имеющие генотип ВС по <х$|-С/г .

2.2.2.3. Внутрипороднне различия по содержанию молочных белков в зависимости от происхождения коров

Определенная часть внутрипородной генетической изменчивости по массовой доле молочных белков зависит от генотипа родителей и линейной принадлежности коров. Выявлены существенные различия по массовой доле молочных белков у коров-дочерей, происходящих от разных быков-производителей. Повышенное содержание технологически пенных £ -, -фракций казеина имели дочери быков Немана 2990, Нектара 626, Полета 7266, Манита 3797 бестужевской породы (соответственно 0,977..Л,036; 0,970...0,987; 0,262... 0,293 г/100 мл). У холмогорской и айриирской пород улучшающее

влияние на содержание казеиновых фракций оказали быки Шипок 16, . Наклон 656, с номером 5, Фас 1151. Дочери этих быков превосходили сверстниц по массовой доле казеиновых фракций на 0,040... 0,212 г/100 мл (Р-^ 0,05...0,001). Молоко коров, происходящих от быков Немана 2990, Дымка 3663, Нектара 626 бестужевской породы, фонтана 8171 холмогорской, Филей 2967 и Венца 9 айрширской, оказалось богатым сывороточным белком и его основной фракцией - Я -лактоглобулином. В нем содержание этих белков было наивысшим и соответственно составило 0,820...О,894; 0,366...О,392; 0,701; 0,308; 0,901 и 0,894; 0,411 и 0,420 г/100 мл.

Наблюдалась устойчивая тенденция повышенного содержания белков в молоке дочерей от быков с желательными комплексными генотипами: ВВ А|В АВ АВ; ВВ А1В АВ ВВ; ВВ А^ АА АВ; ВВ А^ АА ВВ. Такие генотипы имели быки Манит 3797, Алмаз 6338, Неман 2990, Нектар 626 и с номером 201, оказавшие улучшающее влияние на белковость молока дочерей. Вазличия по содержанию белков в молоке коров-дочерей, происходящих от разных быков-производителей, использовались для определения наследуемости молочных белков. Коэффициенты наследуемости массовой доли общего белка и казеина у трех молочных пород оказались сходными и достаточно высокими -0,433...0,678 (Р-^-0,001; табл. 5). Примерно такие же значения наследуемости получены по отдельным фракциям казеина: сх5 о и ж. Стабильно высокие значения наследуемости казеинов были характерны для коров бестужевской и холмогорской пород (0,300...0,855), что создает благоприятные условия по селекции их на повышение технологически важных фракций казеинов. Однако, как оказалось, обычными методами селекции (отбор коров по белковости молока, использование быков, улучшателей данного признака) можно повысить лишь абсолютное содержание казеиновых фракций, изменить их соотношение очень трудно. Об этом свидетельствуют низкие значения коэффициента наследуемости по процентному соотношению казеиновых фракций, которые составили по «з^-казеину 0,02, £ -казеину 0,03 и 9С-казеину 0,005 ( Кгоеквг Е.М. et а1. , 1985).

Из наших исследований следует, что возможность избирательного повышения содержвяия сх'зр, £ ос-казеиновых фракций существует, если при подборе родителей учитывать их генотип по локусам я й £ -Си .

Наследуемость массовой доли сывороточных белков молока у коров разных пород оказалась менее сходной, чем казеинов и состав»-

Таблица 5

Наследуемость массовой доли белков молока у коров разных пород

в _ а _

Наследуемость по породам, Н- + №

Белок .....~ ..........

бестужевская холмогорская айрширская

( «. - 122) ( и- » 115) ( *лГб7)

О.бЗб+О.ОбТ30™ 0,444+р,Ю2ххх

0,433нн0,088ххх 0,484^0,090ххх

0,684^),03вххх о^г+о.овб50"

О^бЗ+О^З30™ 0,190+0,132

0,214+0,101х О^Об+О.ОЭб3"*

0,751+0,ОЗ!3™* 0,226+0,146

о.еез+о.о'ю*** о.збз+о,кл*^

0,417+0,0?!5001 0,089+0,169 О,300*0,099х* 0,142+0,143

0,235^, IIIх 0,437+0,086ххх 0,018+0,130 - 0,450+0,084ххх

о.зот+о.оэо*3" оию+о.ош™

0,036*0,130 0,514+0,076ххх

0,054ч0,132 0,318+0,185

0,205^0,103* 0Г,493+0,076ххх

0,380+0,Ов1?3"* 0,685+0,043ххх

0,464+0.,064ХХХ 0,104+0,131

ла 0,235...О,649 (Р ^-0,05...О,001). Наиболее высокие и стабильные значения наследуемости белков сыворотки молока получены у коров бестужевской и айрширской пород (0,319...О,712), менее -холмогорской (0,018...О,454). Для основного белка сыворотки -£ -лактоглобулина характерна достаточно высокая наследуемость -0,307...0,712 (Р^ 0,001). Аналогичные значения наследуемости получены по протеозо-пептонной фракции и иммуноглобулину (0,205... 0,685). Полученные результаты по наследуемости сывороточных белков молока свидетельствуют о перспективности селекции на повышение абсолютного содержания £> -лактоглобулина, иммуноглобулина и протеозо-пептонной фракции.

Ыежлинейные различия были лучше выражены у коров бестужевской и айрширской пород, хуже - холмогорского скота. У последнего дос-'

Общий белок Казенны:

о

«5Х

Л

ж

У 5

Белки сыворотки:

Г

а-Ро К Рр

Ч

прочие

0,678+0,094ххх 0,572+0 .Ш™ 0,45(5+0, 162ххх 0,39953,210х 0,С84+0,Ю5ХХХ 0,635+0,124ххх О.бТб+О.ОЭб30™ о.бгб+о.мт3™*

0,655+0,040ххх

о,649^0,обо30"

0,472+0,125ххх 0,712+0,064ххх 0,529+0,108ххх 0,452+0, ¡гб*3™ 0,330+0,159* 0,468+0,124*** О,319+0,161х

товерные различия наблюдались по содержанию лишь двух минорных фракций: 3 -казеина и быстрой фракции сыворотки. В стаде бестужевского и айрширского скота межлинейные различия обнаружены но массовой доле общего белка, казеина, белка сыворотки и некоторых белковых фракций. Однако влияние линии на содержание белков оказалось значительно ниже, чем отца. Доля влияния данного фактор» на содержание массовой доли общего белка, казеинов и белков сыворотки, за исключением с* 5 2~казеина и протеозо-пептонной фракции у айрширских коров, не превышала значения 0,206. Величина

*1 сильно колебалась в зависимости от породы. Наибольшее значение этого показателя наблюдалось у коров бестужевской и айршир-ской пород (0,024...0,382), наименьшее - холмогорской (0,004... 0,088).

2.2.2.4. Корреляция содержания массовой доли общего белка и белковых фракций в молоке коров

В селекционной работе на повышение белковости молока очень важно учитывать корреляционные связи между содержанием общего белка и его фракций. Массовая доля общего белка в молоке изученных пород положительно коррелировало со всеми молочными белками, (табл. 6). Коэффициенты корреляции между содержанием общего белка в молоке и большинства его фракций независимо от породной принадлежности коров оказались сходными и довольно высокими - 0,247 ...0,957 (Р 0,01...0,001). Исключение составила лишь быстрая минорная фракция сыворотки, которая находилась в слабой связи с общим белком молока ( ^ =» -0,056.. .0,181).

Выявлено, что величина коэффициента корреляции между общим белком и отдельными его фракциями определяется содержанием массовой доли белка во фракциях. Казеин, которому приходится значительная часть белка в молоке - около 76/5, имел наиболее высокую связь с общим белком ( » = 0,934...0,957). Содержание сывороточного белка существенно меньше, чем казеина, и ему соответствовало более низкое значение коэффициента корреляции - 0,413...0,559. Аналогичная зависимость установлена и по отдельным фракциям казеина и сывороточного белка. Так, содержание главных казеиновых Фракций: «'з р <*з 2» Я » х и основного белка молочной сыворотки - -лактоглобулина находилось в тесной связи с уровнем общего белка в молоке ( £ = 0,367...0,845). Зависимость содержа-

Таблица 6

Корреляция содержания массовой доли общего белка и белковых фракций в молоке коров разных пород

Коэффициент корреляции.по породам, ъ + ¡ч

е л 0 к бестужевская холмогорская айрширская ( п = 102) ( п. = 137) ( п = 91)

0,957+0,009ххх 0,582+0,069ххх С,790+0,039ххх ' 0,688+0,055ххх О^б+О.ОЗО30^ 0,617+0,064ххх 0,352+0,ОЭ!500* 0,286+0,096хх

0,406+0, (Щххх 0,101+0,101 0,367+0,090ххх 0,ЗЬ7То,089ххх 0,337+0,092ххх 0,286+0,096хх О,157+0,102 0,275+0,096хх

ния "малых" белков от концентрации общего белка проявилась в меньшей степени ( с = 0,148...0,582), чем основных белков молока. Следует отметить, что связь "малых" казенное с общим белксм выражена сильнее по сравнению с аналогичными белками молочной сыворотки.

Корреляция между казеиновыми фракциями и белками молочной сыворотки оказалась значительно слабее, чем с общим белком молока. Коэффициент корреляции не превышал значения 0,393. Связь уровня казеина с сывороточнъм белком у коров изученных пород была устойчиво положительной ( 1- = 0,127.. .0,315). Аналогичная сгзязь обнаружена ме<(ду белком сыворотки и сл 5 ^-кнзеннамл, казеином и £ -лактоглобулином ( г - 0,131...0,339). Корреляция содержания остольш.'х казеиновых фракций и белков молочной сыворотки оказалось менее стабильной. Характер и величина связи резко колебались в зависимости от породы коров. Следует отметить, что кор-

Казеины:

<*ь о »ъ j

fi Ж К 5

Белки сыворотки :

F

<к~ Lu Ж Рр

h прочие

.ООЭ***

.ОбТ50™

0,934_Ю 0,461+р О.ЬОЗ+О 0,63o_j0 О,702+0 0,516+0 0,393+0 0,407^0,061

1,026' ),044 >,037 ) ,054 ),062

ххх ххх

xxx XXX

XXX XXX

0,413+0 0,166+0 0,372^0 0,254+0 0,285+0 0,310+0 0,31270 0,14Ь+0

,061ххх ,071х ,064ххх ,069ххх ,068

,06? ,067 ,073х

ххх ххх

ххх

0,937+0 0,345^0 0,527+0 0,639+0 0,588+0 0,641+0 0,437+0 0,465+0

0,559+0 -0,056+0 0,562+0

о.зм+о 0,172+0 0,427+0

о,збз7о

0,247+0

,0J0XXX )(j74xxx

,06IXXX ,050ххх ,055ххх

XXX

,050' ,068ххх .Обб30®

,059ххх ,086 ,050ххх ,072ххх ,083х

,070 ,073 ,000:

ххх ,ххх

,хх

реляция казеина с белками сыворотки имела устойчивое положительное значение (0,033...О,339), нежели сывороточного белка с казеиновыми фракциями (-0,085...О,393). Следовательно, селекция по содержанию казеинов является более перспективной в той селекционной ситуации, когда необходимо сохранить оптимальное соотношение казеиновых фракций и сывороточных белков в молоке. Кроме того, такая селекция приведет к повышению содержания в молоке массовой доли белковых фракций, как Л -, -казеинов и

-лактоглобулина, имеющих высокую биологическую и технологическую ценность.

2.2.3. Содержание белков в'молоке коров разных пород и помесей

Комплексный анализ содержания различных белковых фракций в молоке коров разных пород способствует обоснованному ведению селекционной работы на белковомолочность и оптимальному решению проблемы переработки молока на другие пищевые продукты.

Коровы бестужевской и айрширской пород обладали по сравнен«! с холмогорскими коровами повьшенной белковостью молока (Р 0,001; табл. 7). Молоко бестужевских коров представляет более высокую ценность для приготовления сыра и творога. Содержание массовой доли казеина, из которого готовят эти продукты, в молоке коров бестужевской породы было наиболее высокое и составило 2,626 г/100 мл, айрширской же - 2,561 г/100 ми (Р^ 0,01). У xoJ могорских коров содержание казеина было промежуточным. Качество белковомолочных продуктов определяется содержанием основных каз иновых фракций: £ , зе . Они в оптимальных соотношениях

34,7%; 31,0^5; 9,1% от общего казеина содержались в молоке бесту жевских коров, Выявлено пониженное содержание массовой доли ог& казеина в молоке коров холмогорской породы (Р 0,01...0,001). Однако в молоке холмогорских коров содержалось больше других ка зеиновых фракций: Л , (0,813; 0,252 г/100 мл). Повышенным содержанием этих фракций обладали также бестужевские коровы. Их превосходство над айрширскими коровами было значительным и сост вило 0,014...0,029 г/100 мл (Р^ 0,05...0,001).

Межпородные различия по содержанию массовой доли казеинов обусловлены породными особенностями и их генетической структуре по локусам уз эе-С п- . Так, повышенное содержание

у: ь ^-казеина в молоке бестужевских коров связано с наличием 1

Таблица 7

Содержание белков в молоке коров разных пород

Белок

Общий белок Казенны:

«б!

Р зс

Г 5

Белки сыворотки:

¥

к-Ц М Рр

прочие

бестужевская ( /г = 290)

холмогорская ( п. =» 147)

Массовая доля белков по породам (М+т. ), г/ЮОмл

айрширская ( п Г149)

,367+0,0213™* ,661+0,020 дбо^о.оог5™*

,906+0,007хх ,347+0,005 ,786+0,009 ,225+0,004 ,071+0,002 ,076+0,002

3,374+0 2,626+0 0,157+0 0,9IlTo 0,338+0 0,815+0 0,239+0 0,074+0 0,092+0

0,748+0 0,032+0 0,321+0 0,138+0 0,052+0 0,050+0 0,103+0 0,052+0

i0I6xxx

,013хх (002ххх

,006ххх ,004 ,006х* ,003х* ,002 ,002'

XXX

.ООб***

,001х*

,003ххх >002ххх

,001ххх

,001х j002xxx

,001х*

3,25%р;020

2,592+0,019

0,138+3,002

0,876+0,007

0,350+0,005

0,813+0,008*

0,252+0,004xxx

0,085+0,002**x

0,078+0,002

0,664+0,007

0,032+0,00IXX

0,286+0,004

0,118+0,002

0,048+0,001

0,048+0,001

0,083+0,002

0,049+0,001

0,806+0, 0,030+0, 0,352+0, 0,146+0, 0,056+0, 0,057+0, 0,099+0, 0,066+0,

qqqXXX 001

004ХХХ

002xxx QQjXXX

qqjxxx 002

QQjXXX

них 12,4% животных с генотипом ВС |-казеина (см. табл. 1).. Как было установлено, генотип ВС обеспечивает высокое содержание а 5 1~казеина (см. табл. 3), Этого генотипа не имели коровы холмогорской и айрширской пород. Превосходство бестужевской и холмогорской пород над айрширской по массовой доле & лг-казеино-вых фракций достаточно хорошо согласуется с высокой частотой у них генотипов А|В, А^ и АВ в локусах уз эе-Сп. (соответственно 24,6 и 26,5%; 45,0 и 44,9$; см. табл. I). Как уже известно, генотипам А|В, А£В и АВ соответствует повышенное содержание £ гс -казеинов (см. табл^ 3), а у айрширских коров частота этих генотипов была низкой (2,0; 13,4$).

Молоко коров бестужевской и айрширской пород оказалось богатым сывороточными белками, особенно их «изнснно важными для молодняка фракциями: £ -лактоглобулином, <х -лактоальбумином и имму- , ноглобулином, массовая доля которых соответственно составила

0,321 и 0,352; 0,£30 и 0,146; 0,103 и 0,099 г/100 мл. Коровы холмогорской породы значительно уступали им по содержанию этих белков (Р-^ 0,001). Межпородные различия по массовой доле сывороточных белков, особенно £ -лактоглобулина, в определенной степени зависят от генетической структуры порода по локусу уЗ - . Так, более половины коров холмогорской породы имели генотип ВВ (55,ЬЙ), которому соответствует пониженное содержание сывороточных белков, а в бест;тяевской породе коров с аналогичным генотипом было вдвое меньше (23,3%; см. табл. I и 3).

При скрещивании бестужевских коров с айрширскими быками я молоке помесей по сравнении с исходными породами содержание массовой доли казеина, белка молочной сыворотки и большинства белковых фракций оказалось промежуточным. На бестужевских использовались и быки красной датской породы. Скрещивание этих пород оказало неблагоприятное влияние на белковость молока помесей. У помесей Б х КД по сравнению с материнской породой наблюдалось существенное снижение массовой доли общего белка, казеина и белка молочной сыворотки (Р 0,05.. .0,01).

Скрещивание холмогорских коров с айрширскими и голштинскими быками следует считать удачным. Поскольку при таком скрещивании у помесей X х А, X х Г по сравнению с материнской породой наблюдалось значительное повышение общего белка, казеина, белка молочной сыворотки и улучшение структуры молочного белка. Кроме того, помеси X х Г обладали наивысшим содержанием основных казеиновых фракций: сКй}, уЗ , , которое в значительной степени обусловлено высокой частотой у них генотипа ВВ А^В АВ АВ (35,'7%\ см. табл. I).

11орода оказала достоверное влияние на соДеряание всех белков молока, доля влияния этого генетического фактора составила 0,026 ...0,335 (Р-^- 0,01.. .0,002). У белков молочной сыворотки до 30$ изменчивости по их содержанию было обусловлено влиянием породы, а по казеинам - около 3%.

2.2.4. Разработка генетического способа селекции

крупного рогатого скота на повышение содержания белков в молоке

Но результатам наших исследований в селекционном процессе ни повышение белковости молока наиболее желательными генотипами являются ВС Ахв АВ АА; ВС А^З АВ АВ; ВС А^В АВ АА; ВС А2Б АВ АН;

ВВ А1В АВ АА; ВВ А^Б АВ АВ; ВВ А2В АВ АА; ВВ А2В АВ АВ; ВВ А^ АА АА. Отбор и подбор в стаде должны быть направлены на увеличение доли животных с такими генотипами. Это будет способствовать повышению содержания массовой доли белков в молоке коров.

В эволюционно сложившейся генетической ситуации по частоте генотипов коров с желательными генотипами можно получить путем подбора родителей, имеющих следующие генотипы: ВВ А^В АВ.АВ и ВС А1А1 АА АА; ВВ АХВ АВ АА и ВС А^ АА АА; ВС А1В АВ АВ и ВВ А^ АА АА; ВВ АГВ АВ АВ и ВВ А^ АА АА; ВВ А^В АВ АА и ВВ А^ АА АА; ВВ А1А1 АА АА и ВВ А^ АА АА; ВВ А^ АА АА и ВВ А-[А1 АА АВ. Частота этих генотипов достаточно высокая, чтобы провести такой подбор. Подбор для получения генотипов ВС А2В АВ АА; ВС А2В АВ АВ; ВВ А2В АВ АА; ВВ А^В АВ АВ не может быть рекомендован по той причине, что он всегда приведет к появлению 25% или 50$ коров с генотипами ВС А2А2 АА АА и ВВ А2А2 АА АА, которым соответствует низкое содержание ^й -казеина. Кроме того, следует отметить, что подбор животных с генотипом ВС по локусу ^-С^ может быть проведен лишь у бестужевской породы. Коровы и быки-производители

холмогорской и айрширской пород не имели такого генотипа. .

от

В стаде бестужевского скота предлагаемых вариантов подбора было получено 20, холмогорского - 13 лактирующих коров-дочерей. Из 20-и бестужевских коров-дочерей б имели генотип ВВ АВ АВ АВ, I - ВС АВ АВ АВ, I - ВС АВ АВ АА, I - ВВ АВ АВ АА, 5 - ВВ АА АА АА, 6 - ВВ АА АА АВ; из 13-и холмогорских - 3 - ВВ АХВ АВ АА, 2 -ВВ А^ АВ АВ, 6 - ВВ А][А1 АА АВ, 2 - ВВ А^ АВ АВ. Содержание белков в молоке этих коров сравнивали с аналогичными показателями сверстниц, имевших нежелательные генотипы ВВ АА АА ВВ; ВВ А2А2 АА ВВ и другие менее ценные генотипы. Бестужевские коровы с желательными генотипами превосходили сверстниц по массовой доле общего белка в молоке на 0,215, казеина - 0,187, с<5 ^казеина -0,017, л -казеина - 0,093, х -казеина - 0,057, белков сыворотки - 0,037, л -лактоглобулина - 0,043 г/100 мл (Р-2- 0,001). Коровы с генотипами ВС АВ АВ АА и ВС АВ АВ АВ имели наивысшее со-дертание общего белка, казеина и его основных ^ -, ж--

фракиий (соответственно 3,93 и 3,69; 3,08 и 3,07; 0,94 и 1,08; 0,99 и 0,99; 0,30 и 0,30 г/100 мл).

Аналогичное превосходство над сверстницами наблюдалось и у холмогорских коров-дочерей с генотипами, полученными предлагаемым способом подбора родителей. Они превышали сверстниц по массовой

доле общего белка в молоке на 0,207, казеина - 0,184, р<&|-казе-ина - 0,063, 0 -казеина - 0,103, -казеина - 0,005, медленного казеина - 0,023, белков сыворотки - 0,021, £ -лактоглобулина - 0,054 г/100 мл 0,01,..0,001). Доля влияния предлагаемого способа подбора коров и быков-производителей по их генотипу в локусах с* Л -, эе-С«- , „а - на повышенное содержание вышеуказанных белков в молоке потомства была высокой и составила 0,126...0,393 (Р-*0,01...0,001).

Испытание показало, что разработанный способ значительно ускоряет селекций молочного скота на высокое содержание белков в молоке,- повышает эффективность этой работы, позволяет достичь более достоверной оценки генотипа.животных по белковости молока и повысить у потомков первого же поколения содержание в молоке массовой доли общего белка в среднем на 0,211, казеина - 0,186, « е |-казеина - 0,041, -казеина - 0,098, -казеина - 0,031 белков сыворотки - 0,029 и £ -лактоглобулина - 0,049 г/100 мл.

3. В Ы В О Д Ы

1. В результате исследований нами разработан новый метод по изучению состава .белков молока и определению содержания их массовой доли. Метод основан на разделении белков молока в полиакрил-амидном геле с последующим окрашиванием геля кислотным красителем амидочерным 10 В и денситометрированием полученных фореграмм Определение массовой доли белков молока осуществляется по их ден ситограммам на персональной ЭВМ. Для этой цели разработана программа. Использование ЭВ1\1 обеспечивает высокую точность результатов и существенно ускоряет аналитический процесс. Испытание пока зало, что разработанный метод по сравнению с другими ранее существующими методами дает возможность быстрее и точнее провести анализ и исследовать содержание 14-и белковых фракций в значительно большом числе образцов молока.

2. Исследованиями установлено, что бестужевская порода крупного рогатого скота по сравнению с холмогорской и айрширской обладает уникальным-и богатым генофондом по белкам молока. Поэтому необходимо принять эффективные меры по сохранению генофонда бес-тужепской породы при крупномасштабном скрещивании ее с айрширской, голштинской и черно-пестрой породами. 1) будущем генофонд бестужевского с.котп по белкам молока может оказаться существенным источником обогащения генофонда наиболее распт<;гр!шг1шм>с л

экономически выгодных пород.

3. Анализ результатов исследований показал, что генофонд помесей, полученных от межпородного скрещивания, по белкам молока чаще оказывается промежуточным между исходными породами. Данное заключение подтверждается данными, полученными нами при разведении помесей бестужевская х айрширская, бестужевская х красная датская и холмогорская х айрширская. Однако при малочисленности помесей на их генофонд большое влияние оказывает генотип производителей улучшающей породы, что наблюдалось у помесей холмогорская х голштинская.

4. Материалы исследований по генам белков молока показывают, что существует большое генетическое сходство между красными породами: айрширской, красной датской и шортгорнской, а также между черно-пестрыми породами голландского корня: голландской, гол-штинской, черно-пестрой. Необходимо отметить, что генетическая структура бестужевского скота по белкам молока близка н симментальской и черно-пестрым породам, нежели красным, а холмогорская порода занимает промежуточное положение между черно-пестрыми и красными породами. Знания о генетическом сходстве и различии пород имеют важное значение в селекционной работе. Они позволяют в определенной степени прогнозировать результаты межпородного скрещивания, в частности, по белковости молока.помесей.

5. Нашими исследованиями установлено,- что генотип коров по локусам А -, эс~Си- , >3 - /// оказывает значительное влияние на содержание массовой доли соответствующих им основных белков молока, на долю которых приходится около 70% общего белка. Содержание этих белков находится.в следующей зависимости от их генетических типов: х-казеина - ВС у ВВ; >9 -казеина - А^, А^В> А|Ар ВВ, г А^А,; эе -казеина - ВВ у АВ ^ АА; л ■-лактоглобулина - АА > АВ > ВВ. При этом в молоке гетерогенных коров на генетический вариант В ^-казеина, А| Л -казеина, А

-казеина, А Л -лактоглобулина приходится больше белка (52... 65%), чем на остальных вариантов (35...46%),-что объясняется различной степенью экспрессии аллелей, ответственных за их синтез.. Предполагается, что существующие между генетическими типами и вариантами Я -, с*-каэеинов и -лактоглобулина различия по содержанию их массовой доли п молоке обусловлены мутационными заменами в соответствующих локуапх,

6. В исследеваниях обнаружено влияние генотипов по локусам

6 ■эг-Сп , £ на содержание массовой доли

общего белка, казеина, белка молочной сыворотки и отдельных белковых фракций. Влияние генотипов на содержание комплексных белков носит аддитивный, а на содержание ими не контролируемых белковых фракций - плейотропный характер. Это влияние обуславливает значительную долю (до 55%) изменчивости содержания молочных белков, что доказывает эффективность отбора коров и быков по их генотипу в локусах «5 р, £ -, X -С п. , £ - ^ . В селекционном процессе на повышение белковости молока наибольшую ценность представляют без разделения 3 -казеина А на А|, Ад комплексные генотипы ВС АВ АВ АА; ВС АВ АВ АВ; ВВ АВ АВ АА; ВВ АВ АВ АВ и ВВ АА АА АА; с разделением - ВВ А^ АА АА; ВВ А^В АВ АВ; ВВ А][В АВ АА; ВС А1А1 АА АА и ВС А^ АВ АВ.

7. Анализ белковости молока коров, происходящих от разных быков, показал, что генотип отца оказывает значительное влияние на содержание массовой доли белков в молоке дочерей. При этом обнаружена устойчивая тенденция повышенного содержания белков в молоке коров, происходящих от быков с желательными комплексными генотипами: ВВ АХВ АВ АВ; ВВ А^ АВ ВВ; ВВ А^ АА АВ и ВВ А^ АА ВВ.

8. Полученные в исследованиях данные о наследуемости молочных белков позволяют заключить, что селекция крупного рогатого скота на повышение в молоке абсолютного содержания белковых фракций окажется успешной. Коэффициенты наследуемости независимо от породной принадлежности коров имеют стабильно высокие значения по содержанию массовой доли общего белка, казеина, белка молочной сыворотки и белковых фракций: ^¿-казеинов, Л -лактогло-булина, протеозо-пептонной фракции, иммуноглобулина. Для изменения соотношения белковых фракций в молоке и улучшения структуры молочного белка весьма перспективной может быть селекция с учетом генотипа коров и быков-производителей по локусам <Х5 р, Я -,

■х -Си , уз - Ьд , при которой существует возможность избирательного повышения е<5 уЗ -, -фракций казеина и -лак-тоглобулина.

9. В наших исследованиях разведение по линиям, как метод повышения содержания белков в молоке коров, имело значение для стад бестужевской и айрширской пород. Оказалось, что данный метод может дать солекционнмй эффект в основном по содержанию массовой доли коммексных белков: общего белка, казеина и белка молочной сыворотки. Возможность использования линейного разведения для повышения массовой доли отдельных белковых фракций в молоке сильно

ограничена.

10. Изучение корреляционных связей между молочными белками показало, что существуют благоприятные условия для селекции молочного скота на повышение содержания в молоке белковых фракций, имеющих высокуо биологическую и технологическую'ценность. Эти условия обусловлены наличием стабильной и достаточно высокой положительной корреляции между содерканием массовой доли общего белка и большинства его фракций. Кроме того, выявлена устойчивая положительная корреляция казеина с белками молочной сыворотки. Поэтому селекиия по содержанию массовой доли казеинов является более перспективной в той селекционной ситуации, когда необходимо сохранить оптимальное соотношение казеиновых фракций и сывороточных белков в молоке.

11. Исследованиями установлено значительное влияние породной принадлежности и породности на содержание массовой доли белковых фракций в молоке коров. Межпородные различия сильно выражены по содержанию сывороточных белков, слабее - казеинов, и они в значительной степени обусловлены генетической структурой пород по генам белков молока, нежелн другими породными особенностями. Поэтому при организации межпородных скрещиваний необходимо учитывать генофонд скрещиваемых пород по белкам молока. Следует отметить, что межпородное скрещивание может быть использовано в основном для повышения абсолютного содержания молочных белков, этим методом изменить структуру молочного белка трудно.

12. На основе проведенных исследований разработан генетический способ повышения массовой доли молочных белков, включающий отбор и подбор родительских пар по их генотипу в локусах сх5

Л -, эс-Сп , л - ид , получение потомства с желательными генотипами и повышенным содержанием белков В молоке. Испытание показало, что способ позволяет повысить у потомков первого же поколения содержание в молоке массовой доли общего белка в среднем на 0,211, казеина - 0,166, °<ь |-казеина - 0,041, л -казеина -0,098, к. -казеина - 0,031, белков сыворотки - 0,029 и Л -лакто-глобулина - 0,049 г/100 мл. Разработанный способ повышения содержания белков в молоке коров соответствует тому направлению селекции молочного скота, что рекомендуется проводить в странах с развитым молочным скотоводством.

- -

4. ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Для научно-исследовательских институтов и лабораторий, занимающихся исследованием белков молока, предлагается новый метод но изучению состава белков молока и определению содержания их массовой доли. Метод позволяет с высокой точностью исследовать содержание 14-и различных белковых фракций в молоке.

2. Для повышения белковости молока коров предлагается генетический способ селекции. Способ основан на проведении отбора и подбора коров и быков-производителей по их генотипу в локусах

Oüj-, ß -, эс-Сп- , ß - . Использование способа позвс лит повысить у потомков первого же поколения содержание в молоке массовой доли общего белка в среднем на 0,211, казеина - 0,166, сх j-казеина - 0,041, ß -казеина - 0,098, лг-казеина - 0,031 белков сыворотки - 0,029 и ß -лактоглобулина - 0,049 г/100 мл.

5. СПИСОК ОСНОВНЫХ РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕШ ДИССЕРТАЦИИ

1. Хаертдинов P.A. Изучение полиморфизма белков крови и молока у бестужевского скота в Татарской АССР // Теоретические и прикладные вопросы общей и молекулярной генетики.-М.: Наука, I977.-C.I05-III.

2. Хаертдинов P.A., Зубарева Л.А. Перспективы изучения полиморфных систем белков крупного рогатого скота методом электрофореза на полиакриламидном геле // Тезисы докладов науч.конф."Повышение эффективности методов генетики и селекции в животноводстве' .-Байсогала, I970.-C.82.

3. Хаертдинов P.A., Зубарева Л.А. Генетическое сходство бестужевского скота с родственными ему породами // Материалы ХУ1 Международ.конф. по группам крови и биохим.полиморфизму живот.-Л., 1979.-Т.2.-С.I16-120.

4. Хаертдинов P.A. Генетическое сходство и различие между породами крупного рогатого скота // Четвертый съезд ВОГиС им. Н.И.Вавилова. Тезисы докл.Часть 4.-Кишинев: Штиинца.-1982.-С.2ВЗ

5. Хаертдинов P.A. Генетическое сходство и различие между породами крупного рогатого скота // Генетика.-1982.-T.18.-f 5,-С.829-832.

6. Габитов H.A., Шайдуллов М.К., Хаергдинов P.A. Методические разработки к курсу генетики для студентов зооинженернпго и

ветеринарного факультетов.-Казань, 1984.-Часть Ш.-44 с.

7. Хаертдинов P.A. Влияние генотипа коров холмогорской породы по бета-лактоглобулину на их белковомолочность // Тезисы докл. респуб. научн.-производ. конф.-Казань, 1985.-С.95-96.

8. Хаертдинов P.A. Количественные различия ме;кду генетическими вариантами белков молока у коров холмогорской породы // Генетика. -1985.-Т.XXIИ.-С.1891-1895.

9. Хаертдинов P.A. Количественный анализ генетических типов и вариантов белков молока у норов бестужевской и холмогорской пород // С.-х. биология.-I9U5.-W II.-С.19-24.

10. Аманжолова К.С., Хаертдинов P.A. Спектрофотометрический метод определения количества общего белка в молоке коров // Тезисы докл.Всесоюз.симп. "Биохим.с.-х.живот. и Продовольственная программа".-Ташкент, 1986.-С.22.

11. Хаертдинов P.A., Аманжолова К.С. Генотипические различия по количеству белков в молоке коров // Тезисы докл.У съезда ВОГиС .-Ы., 1987.-Т.3.-С.222-223.

12. Хаертдинов P.A. Влияние генетических факторов на содер-' жание белков в молоке коров // Тезисы докл.респуб.науч.-произ. конф.-Казань, 1988.-С.64.

13. Хаертдинов P.A. Содержание белков в молоке коров бестужевской породы с различными генотипами по c<s j-, j3 .яе-каэе-инов и ß -лактоглобулину // С.-х.биология.-1988.-Ii 5.-С.71-75.

14. Хаертдинов P.A. Способ селекпии крупного рогатого скота бестужевской породы на повышение содержания белков в молоке // Авт.св.» 1467808 на изобретение.-1988.

15. Яковлев Б.П., Марсалов Д.Т., Габитов H.A., Хаертдинов P.A. и др. Перспективный план селекционно-племенной работы в молочном скотоводстве в хозяйствах Татарской АССР до 2000 года.-Казань, 1989.-229 с.

¡6. Хаертдинов P.A. Влияние генотипа коров по Л -казёину на количественное содержание молочных белков // Генетика.-1989.-Т. ХХУ.-li 8.-С.1462-1472.

17. Хаертдинов P.A. Методические рекомендации по проведению качественного и количественного анализа белков молока методом электрофореза в полиакриламидном геле.-.4. :Изд.ВАСХНИЛ, 1989.-30 с.

18. Хаертдинов P.A. Анализ белков молока коров методом электрофореза в полиакриламидном геле // С.-х.биология.-1989,-W 6.-С.П9-Т25.

19. Хаертдинов P.A. Влияние генотипа на количество молочных белков у коров холмогорской и айрлирской пород // Тезисы докл. УЛ Всесоюз.симп."Молекулярные механизмы генетических процессов". -М., I99Ü.-C.64.

20. Хаертдинов P.A. Содержание белков в молоке коров в зависимости от их породной принадлежности // Доклады ВАСХНЛЛ.-1990.-U 5.-С.52-55.

21. Хаертдинов P.A., Азимова P.A., Ардатовская П.П. Количество и качество молока у коров разных линий бестужевской породы и помесей бестужевская х красная датская, бестужевская х айр-ширская I поколения // Тезисы докл.респуб.научно-производ.конф.-Казань, 1990.-С.193.

22. Хаертдинов P.A., Азимова P.A. Задания к практическим занятиям по генетике сельскохозяйственных животных (с методическими указаниями).-Казань, 1990.-52 с.

23. Хаертдинов P.A., Азимова P.A. Применение ЭВМ на практических занятиях по генетике сельскохозяйственных животных // Применение в учебном процессе компьютерной техники и технических средств обучения. Тезисы докл.учебно-методич.конф.-Кострома, I99I.-C.60-8I.

24. Хаертдинов P.A. Влияние генотипа по ß -, казеинам и ß -лактоглобулину на количество молочных белков у коров холмогорской и айрширской пород // Повышение племенных и продуктивных качеств крупного рогатого скота. Сб.науч.трудов.-Казань, I99I.-C.39-45.

25. Хаертдинов P.A., Азимова P.A., Ардатовская И.П. Влияние скрещивания коров бестужевской и холмогорской пород с быками айрширской и красной датской пород на белковость молока и его технологические свойства // Тезисы докл.респуб.научно-производ.конф.-Казань, I99I.-C.220.

26. Хаертдинов P.A. Внутрипородная генетическая изменчивость содержания белков в молоке коров // Доклады BACXHM.-199I.-)f II.-С.49-52.

27. Khaertdinov a.A. Genetio method of increasing the protain content in the milk of milker cow // Catalogue of Balected scientific achievements (knov;-hc>¥/) of high agricultural educational institutions. - iloskows SPO "Aßrovnoahraklama", 1991.-P.I9.

26. Khaertdlnov F.A. ldethod of detailed quantitetive and

qualitative analysis cf milk proteins // Tan же. P.20,

29. Хаертдинов P.A. Способ подбора коров и быков-проиэводителей по генотипу для повышения содержания белков в молоке потомства // Полож.решение от 3 января 1992 г. на выдачу патента по заявке № 4926630/15 (032130).

30. Хаертдинов P.A. Программное обеспечение количественного анализа белков молока коров // Тезисы докл.межгосудар.учебно-ме-тодич.конф.по компьютеризации учеб.процесса и научно-исслед.работы в с.-х.вузах.-Кострома, 1992.-С.63-64t

31. Хаертдинов P.A. Оценка быков-производителей холмогорской, айрширской и бестужевской пород по генотипу и содержанию белков

в молоке дочерей // Тезисы докл.респуб.научно-производ.конф.-Казань, 1992.-С.178.

32. Хаертдинов P.A. Корреляция количественного содержания общего белка и белковых фракций в молоке коров разных пород // Доклады РяСХН.~1992.-# 6.-С.40-44.