Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Интродукция лилий в Башкирском Предуралье и их размножение in vivo и in vitro

ВАК РФ 03.00.05, Ботаника

Автореферат диссертации по теме "Интродукция лилий в Башкирском Предуралье и их размножение in vivo и in vitro"

ÜÜ34Y7S2Ü

На правах рукописи

си^

Мухаметвафина Аниса Анасовна

ИНТРОДУКЦИЯ ЛИЛИЙ BJJАЛЖИРСКОМ ПРЕДУРАЛЬЕ И ИХ РАЗМНОЖЕНИЕ IN VIVO ИINVITRO

Специальность 03.00.05 - ботаника

03.00.23 - биотехнология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

2 4 СЕН 2GC9

Уфа-2009

003477520

Работа выполнена в лаборатории популяционной биологии и биотехнологии растений и лаборатории интродукции и селекции цветочных растений Учреждения Российской академии наук Ботанический сад-инстигут Уфимского научного центра РАН

Научные руководители: кандидат сельскохозяйственных наук

Миронова Людмила Николаевна

кандидат биологических наук Байбурина Рима Кашафовна

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор

Круглова Наталья Николаевна

кандидат биологических наук, доцент Неуймин Сергей Иосифович

Ведущая организация: Учреждение Российской академии наук

Главный ботанический сад им. Н.В.Цицина РАН (ГБС РАН)

Защита диссертации состоится « 15 » октября 2009 года в 14.00 часов на заседании диссертационного совета Д 212.013.11 в ГОУ ВПО «Башкирский государственный университет» по адресу: 450074, г. Уфа, ул. Заки Валиди, 32, биологический факультет, аудитория 332; (347)273-67-78; e-mail: disbiobsu@mail.ru.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «Башкирский государственный университет», с авторефератом - в сети Интернет по адресу: http:www.bashedu.ru/autoreferat/autoreferat.htm

Автореферат разослан « j г.

: 9 Я 2009 года

Ученый секретарь диссертационного совета, дб.н. yfeCdLP Шарипова М.Ю.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Лилии - известные с древних времен растения, широко распространенные во всем мире, по праву считаются одними га самых популярных и красивых цветов и представляют несомненный интерес как важная декоратившя культура. В этой связи актуально изучение биологических особенностей большого количества видов и сортов лилий в условиях региона с целью отбора наиболее перспективных для широкой культуры.

В условиях Республики Башкортостан лилии мало используются в зеленом строительстве, хотя при правильном подборе ассортимента можно достичь того, что цветение будет продолжаться с весны до осени. Перед специалистами декоративного садоводства ставятся новые задачи, для выполнения которых нужен большой ассортимент элитного исходного материала и эффективные методы вое прош во детва декоративных растений. В связи с этим возникает вопрос о быстром получении посадочного материала в большом количестве, чтобы обеспечить хозяйства, занимающиеся озеленением. Перспективным направлением в решении этой задачи является использование физиологически активных вешеств, ускоряющих процессы вегетативного и семенного размножения лилий. Кроме того, некоторые авторы используют метод размножения in vitro (Румынии, Слюсаренко, 1989; Миронова, 2004; Мокшин, 2005).

Цель и задачи исследований. Целью работы являлось шучение биологических особенностей представителей рода Lilium L. при интродукции в лесостепную зону Башкирского Предуралья, разработка методов интенсивного размножения перспективных форм и пополнение зонального ассортимента растений культивируемых в Республике Башкортостан.

В связи с этим были поставлены следующие задачи:

1. Провести шггродукционное изучение видов и сортов лилий коллекции Ботанического сада-института УНЦ РАН. Разработать ассортимент лилий для использования в озеленении в Башкирском Предуралье.

2. Изучить влияние физиологически активных вешеств та процессы вегетативного и семенного размножения лилий.

3. Апробировать метод клонального микроразмножения на видовых и сортовых лилиях для быстрого получения массового посадочного материала. Оценить эффективность стерилизующих веществ и питательных сред для культивирования in vilro и выявить особенности регенерации лилий с использованием разных типов эксплантов.

Защищаемые положения:

- В результате интродукционных исследований выявлено что, L. aurantiacum Weston, L. henryi Baker, L. martagón L., L. regale Wils, обладают устойчивостью к условиям культивирования в лесостепной зоне Башкирского Предуралья.

- По комплексу декоративных и хозяйственно-полезных признаков 59 сортов лилий могут быть рекомендованы для пополнения зонального ассортимента культивируемых декоративных растений Республики Башкортостан.

- Использование физиологически активных веществ перспективно для ускорения вегетативного и семенного размножения лилий.

- Фрагменты бутонов и чешуи луковиц являются перспективными эксплантам для ускоренного размножения лилий методом культуры тканей и органов in vitro.

Научная новизна. Автором впервые изучены биологические особенности и оценены успешность интродукции 4 видов и 99 сортов лилий в условиях Башкирского Предуралья. Проведена их оценка по комплексу декоративных и хозяйственно-полезных признаков. Изучено влияние регуляторов роста (в том числе новых - рифтал и фэтил) на прорастание семян видовых лилий: L. regale, L. martagón, L pensylvanicum, L. philippinense. Отработан метод клонального микроразмножения с использованием генеративных органов на сортах Азиатских (Афродита, Фата Моргана, Лемон Пикси, Коррида, Фангио, Брунелло) и Восточных (Берлин, Медуза, Старгейзер) гибридов, а также L. henryi и L. regale. Детально изучены морфогенетические потенции фрагментов бутонов (цветоложа, околоцветников, тычиночных нитей, завязи, столбика) как перспективных эксплангов для получения массового посадочного материала. Установлено, что в культуре тканей генеративных органов лилий возможна реализация процессов адвентивного органогенеза.

Практическая значимость работы. Данные диссертационной работы могуг быть широко использованы в зеленом строительстве населенных пунктов, расположенных в Башкирском Предуралье. Созданная автором коллекция лилий служит основой для размножения и получения массового посадочного материала для обеспечения хозяйств занимающихся озеленением.

Разработаны основные этапы процесса клонального микроразмножения от получения стерильной культуры до доращивания растений в условиях in vivo с использованием в качестве эксплангов как чешуй и зачаточного побега луковиц лилий, так и новых перспективных эксплантов - фрагментов бутонов.

Культура тканей и органов in vitro позволяет размножать лилии с более высоким выходом посадочного материала, чем при традиционном способе размножения. При использовании способа размножения фрагментами бутонов in vitro достигается высокий процент стерильности исходного материала и исключается возможность гибели растения-донора.

Полученные данные могут служить методологической основой при изучении лилий другими учебными и научно-исследовательскими организациями.

Апробация работы. Основные результаты работы докладывались на Х1-ом Делегатском съезде русского Ботанического общества. Новосибирск, Барнаул, 17-27 августа 2002 г.; Ш-ей Межд. науч. конф. Минск, 7-9 октября 2003 г,; И-ой Межд. конф. молодых ученых «Современные проблемы генетики, биотехнологии и селекции растений». Харьков, 2003 г; VIH International Conference «The Biology of Plant Cells In Vitro and Biotechnology». Saratov, September 9-13, 2003; Межд конф. «Генетические ресурсы лекарственных и ароматических растений». Москва, 12-14 июля 2004 г.; Межд. конф. «Природное наследие России: изучение, мониторинг, охрана». Тольятти, 21-24 сентября 2004 г.; VI межд. симпозиуме «Новые и нетрадиционные растения и перспективы их использования». Москва, Пущино, 2005 г.; I (IX) Межд. конф. молодых ботаников в Санкт-Петербурге. С-Пб, 2006 г.; Всеросс. науч.-пракг. конф. «Биотехнология как инструмент сохранения биоразнообразия растительного мира», Волгоград 2006 г.; Всеросс. науч. конф. «Ботанические исследования в Поволжье и на Урале», поев. 50-летию Ботанического сада СГУ им. Н.Г. Чернышевского,

Саратов, 2006 г.; IX конф. «Биология клеток растений in vitro и биотехнология». Звенигород, 2008 г.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 18 работ, в том числе 4 публикации в журналах, рекомендованных ВАК РФ и 1 методическое пособие.

Структура н объем диссертации. Диссертация изложена на 170 страницах машинописного текста, состоит из введения, 4 глав, заключения, выводов, приложения и списка цитируемой литературы; содержит 24 таблицы и 35 рисунков. Список используемой литературы включает 204 источника, в том числе 63 на иностранных языках.

ГЛАВА 1. ИСТОРИЯ, КЛАССИФИКАЦИЯ И БИОЛОГИЯ ЛИЛИЙ

Глава посвяшена обзору литературы и состоит га 6 подглав, в которых приведена классификация видовых и сортовых лилий, дан подробный анализ работ отечественных и зарубежных авторов, в областях, касающихся интродукции и селекции лилий, их биологии и размножения с использованием различных методов, способствующих ускоренному получению массового посадочного материала. Выделены основные направления биотехнологических исследований в роде Lilium L. Подробно описаны факторы, влияющие на морфогенетические процессы, происходящие в тканях лилий при микроклональном размножении.

ГЛАВА 2. УСЛОВИЯ, ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Полевые и лабораторные исследования проводили на базе Ботанического сада-института Уфимского научного центра РАН с 2001 года.

Территория Ботанического сада расположена в лесостепи на границе правобережья и левобережья Предуралья. В климатическом отношении район Ботанического сада характеризуется большой амплитудой колебаний температуры в ее годовом ходе, неустойчивостью и недостатком атмосферных осадков, быстрым переходом от суровой зимы к жаркому лету, поздними весенними и ранними осенними заморозками. Метеорологические условия в годы проведения исследований существенно отличались, что позволило объективно оценить изучаемый материал. Прохладным и дождливым был 2002 г., теплым (но с холодным началом лета) и умеренно дождливым - 2003, жарким и засушливым - 2004, теплым (но с холодной весной) изасушливым-2005.

Объектами и иг редукционных исследований являлись L. aurantiacum, L. henryi, L. regale и L. martagón, а также сорта лилий ю групп Азиатских гибридов (77 шг), Восточных гибридов (13 шг), Трубчатых гибридов (4 шг) и ЛА-гибридов (5 шг).

Объектами иэксплантами исследований по разработке методов интенсивного размножения с применением регуляторов роста являлись семена L. regale, L. martagón, L. pensylvanicum и L. philippinense и чешуи луковиц L. regale, L. henryi, L. martagón.

В качестве объектов исследований по микроклональному размножению были использованы L. regale, L. henryi и сорта Бианка, Блек Вельвет, Фангио, Коррида, Брунелло, Афродита, Фата Моргана и Лемон Пикси, относящиеся к группе Азиагскje гибриды; Медуза, Берлин и Старгейзер - из группы Восточные гибриды.

Эксплантами для биотехнологических исследований служили чешуи, донце, зачаточный побег с луковиц лилий, прошедших период покоя, а также фрагменты бутонов - цветоложе, околоцветник, тычиночная нить, завязь, столбик.

Изучение декоративных и хозяйственно-полезных признаков сортов и видов лилий проводили в условиях открытого г рута по методике государственного сортоиспытания декоративных культур (1960).

Коэффициент вегетативного размножения устанавливали путем подсчета образовавшихся дочерних луковиц за один период вегетации.

Оценку успешности шпродукции видовых лилий проводили по 7-баллыюй шкале, разработанной Донецким ботаническим садом (Баканова, 1984).

Семенную продуктивность определяли по методике Вайнагий (1974).

Для определения влияния регуляторов роста использовали следующие вещества в концешрациях, предложенных производителем: гетероауксин 0,001%, крезацин 0,001%, крезацин 0,01%, фигон 0,001%, фэтил 0,0005%, рифтал 0,0005% и корневин (порошок).

Микроклоналыгое размножение проводили согласно общепринятым методикам (Бутенко, 1964; Катаева, Бутенко, 1983). В работе использовали питательные среды MS по прописи Мурасиге и Скута (1962) и L6 (циг. по Румынину, Слюсарегасо, 1989).

Математическую обработку экспериментальных данных проводили стандартными методами (Зайцев, 1984; Лакин, 1990) с использованием статистических пакетов программы Microsoft Excel 2003.

ГЛАВА 3. ИНТРОДУКЦИОННОЕ ИЗУЧЕНИЕ ВИДОВЫХ И СОРТОВЫХ

ЛИЛИЙ

Изучены сезонные ритмы развития, оценены декоративные и хозяйственно-полезные признаки 4 видов и 99 сортов из коллекции Ботанического сада УНЦ РАН в условиях Башкирского Предуралья.

Интродущионное изучение видовых лилий.

Результаты фенонаблюдений позволили выявить, что L. aurantiacum и L. martagon относятся к раноцветущим видам, L. regale - к среднецветущим, а L. henry - к поздноцветущим. В зависимости от вида и погодных условий период от начала отрастания до зацветания составляет от 52 (L martagon) - 88 (L henryi) дней. Наиболее продолжительным цветением характеризуется L. henryi (более 35 дней). По срокам созревания семян L. martagon относится к группе раннеспелых, L. regale -позднеспелых.

Наиболее интенсивный рост генеративных побегов у L. aurantiacum и L. martagon приходится на фазу бутонизации, а у L. henryi и L. regale - на фазу отрастания. Максимальный суточный прирост составлял от 1,7 (L aurantiacum) до 3,3 (L. henryi) см.

При оценке декоративных качеств выделяются L. aurantiacum и L. regale, получившие более 90 баллов. Они отличаются крупностью цветков и устойчивостью цветоносов, а также более длительным сохранением декоративности околоцветника.

Из исследованных видов L. martagon и L. regale характеризуются высокой семенной продуктивностью, обусловленной биоморфологическими особенностями: многоцветковым соцветием, многосеменной коробочкой, высокими фергильностью пыльцы и процентом плодообразования (таб. 1).

В целом эти виды характеризуются почти полной реализацией семенного потенциала. Разрыв между потенциальной (ПСП) и реальной семенной продуктивностью (РСП) небольшой, что обуславливает высокий коэффициент

продуктивности (К,,,). Ь. аигапИасит и I.. 'пепгуг в условиях Башкирского Прсдуралья семян не образуют.

Таблица 1

Семенная продуктивность видовых лилий (2003-2005 гг)

Вид Плодо-образование, % ПСП, шг ГСП, шт Кпр,%

L. martagón 96,4 1305±412 1254±396 96,1

L. regale 84,6 1593±295 1463±278 91,7

Изучены особенности размножения видовых лилий подеемными органами. Показано, что вегетативное размножение у лилий проходит тремя путями: 1) делением материнской луковицы; 2) образованием деток в пазухах луковичных чешуи; 3) образованием деток на подземной части стебля в пазухах чешуевидных листьев.

Первый путь размножения характерен для L. martagón и L. regale, второй путь - для всех изученных видов, третий путь - для L. auranliacum, L. martagón и L. henryi. У L. henryi может формироваться подземный блуждающий стебель, который удаляется от материнской луковицы на некоторое расстояние и на нем образуется до 3 луковичек-деток. Коэффициент вегетативного размножения составил у L. regale -2,5, у L. henryi и L. aurantiacum - 2, у L. martagón - 1.

В результате оценки успешности интродукции лилий по 7-балльной шкале выявлено, что изученные виды лилий в различной степзни адаптируются к условиям выращивания в культуре в лесостепной зоне Башкирского Предуралья (таб 2).

Таблица 2

Оценка успешпости интродукции видов лилий в Ботаническом саду

Виды лилий Развитие вегетативных органов Наличие регулярного Зимостойкость Засухоустойчивость Способность шггродуцентов к саморасселению Баллы

цветения плодоношения едини чно массово

L. aurantiacum + + - + + + - 5

L. henryi + + - + + + - 5

L. martagón + + + + + - - 5

L. regale + + + + + + - 6

L. aurantiacum, L. henryi и L. martagón, получившие 5 баллов, регулярно массово цветут. L. martagón плодоносит, но не каждый год L. henryi и L. aurantiacum не плодоносят, размножаются вегетативно. Виды обладают устойчивостью к местным климатическим условиям. Не требуют полива и укрытия на зиму.

1. regale, получившая б баллов, регулярно и массово цветет, ежегодно плодоносит, размножается вегетативно. Обладает высокой устойчивостью к местным климатическим условиям.

Показано, что инорайонные виды лилий (L. regale, L. henryi и L. aurantiacum) являются адаптированными к климатическим условиям Башкирского Предуралья.

Интродущионное изучение сортовых лилий.

Проведено интродукционное изучение сортовых. Показано, что наиболее интенсивный рост растений (1,0-2,6 см) наблюдается в фазы отрастания и бутонизации. В результате фенологических исследований выявлено, что по годам меняются лишь сроки и продолжительность цветения лилий, а их последовательность остается неизменной.

По срокам цветения большинство изучаемых сортов лилий являются средне цветущим и (таб. 3).

Таблица 3

Разделение щученных сортов лилий на группы по срокам цветения и декоративным признакам

Группа Параметр Кол-во сортов

сроки цветения

Раноцветущие зацветают в июне 3

Среднецветущие зацветают в июле 91

Поздноцветущие зацветают в августе 5

продолжительность цветения

Короткоцветущие до 15 дней 39

Среднецветущие от 15 до 30 дней 58

Дпительноцветущие свышс 30 дней 2

длина цветоноса

Высокорослые до 50 см 26

Среднерослые от 50 см до 100 см 67

Низкорослые свыше 100 см 6

форма околоцветника

Направленные вверх кубковидная 8

чашевидная 58

звездчатая 10

махровая г

Направленные вбок воронковидная 10

трубчатая 4

Направленные вниз колокольчатая 1

чалмовидная 2

трубчато-чалмовидная 4

окраска околоцветника

Одноцветные белая 6

желтая 22

оранжевая 13

красная 13

розовая 25

сиреневая 6

Двуцветные 10

диаметр околоцветника

Мелкоцветковые 5-9 см 12

Среднецветковые 10-15 см 79

Крупноцветковые свыше 15 см 8

В зависимости от сортовых особенностей и погодных условий года количество дней от начала вегетации до начала цветения колебалось в пределах 60-90 дней. Оценка декоративных качеств позволила разделить сорта на группы по высоте цветоноса, по величине, форме и окраске околоцветника (табл. 3).

При оценке декоративных признаков по 100-балльной шкале 90 и более баллов получили 72 сорта, в том числе из групп Азиатские гибриды - 54, Восточные гибриды -11, Трубчатые гибриды - 2 и JlA-гибриды - 5.

Определен коэффициент вегетативного размножения сортовых лилий. Наибольшим коэффициентом размножения обладают ЛА-гибриды (от 4,0 до 7,7). Азиатские гибриды обладают меньшим коэффициентом размножения (от 2,3 до 4,9). Восточные и Трубчатые гибриды дочерних луковичек образуют мало или вообще не образуют.

Азиатские гибриды и ЛА-гибриды успешно зимуют в климатических условиях Башкирского Предуралья. Восточные и Трубчатые гибриды требуют укрытия на зиму. Все сорта коллекции устойчивы к болезням и вредителям.

Комплексная оценка декоративных и хозяйственно-полезных качеств сортовых и видовых лилий позволила выделить наиболее перспективные формы: L. regale и L. aurantiacum, а также 54 сорта из группы Азиатские и 5 сортов из группы ЛА-гибриды. Они отличаются высокой декоративностью цветков, устойчивостью цветоносов, обильным и продолжительным цветением, устойчивостью к болезням и климатическим условиям Башкирского Предуралья, а также высоким коэффициентом вегетативного размножения. Эти сорта и виды рекомендованы для пополнения зонального ассортимента Республики Башкортостан.

ГЛАВА 4. РАЗРАБОТКА МЕТОДОВ УСКОРЕННОГО РАЗМНОЖЕНИЯ

ЛИЛИЙ

Размножение in vivo.

Изучено влияние регуляторов роста (корневин и крезацин) на регенерационную способность чешуй луковиц L. resale, L. henryi, L. martagón in vivo. Действие регуляторов роста на чешуи луковиц определяли по количеству чешуй, образовавших луковички-детки, коэффициенту образования луковичек-деток на чешуях, морфометрическим показателям луковичек-деток. В результате исследований выявлено, что ответная реакция на обработку регуляторами роста определяется видовыми особенностями лилий.

Использование крезацина и корневищ при размножении in vivo способствует увеличению числа чешуй, способных образовывать луковички-детки и повышает коэффициент образования дочерних луковичек более чем в 1,7-4,5 раза (рис. 1).

Анализ данных выявил, что наиболее существенное влияние регуляторы роста оказали на чешуи луковиц L. martagón. Практически во всех вариантах опыта отмечено увеличение по всем показателям. Оптимальными вариантами обработки являлись 0,01%-ный и 0,001%-ный растворы крезацина при экспозиции 48 ч. В этих вариантах доля чешуй образовавших луковички-детки увеличилась с 20% (в контроле) до 70%. Обработка крезацином заметно повлияла на корневую систему: увеличилась длина корней до 3,01 см, что в 7,5 раз превышает показатели в контроле. Неоднозначно повлияла обработка регуляторами роста на показатели L.regale и L. henryi, которые изначально отличались высокой регенерационной способностью. В

большинстве вариантов опыта регуляторы роста не оказали положительного действия или даже икгибировали процесс образования и роста луковичек-деток. Оптимальными вариантами обработки являлись для С.п$а1г - 0,01%-ный раствор крезацина, 48 ч, для I. кепгуп - 0,001 % раствор крезацина, 60 ч.

Pite. 1. Коэффициент образовании луковичек-деток на чешуях луковиц видовых

ЛИЛИЙ.

Исследовано действие регуляторов роста: гетероауксит. фигона, фэтила, риФтала. крезацина на всхожесть семян L. resale. L martagón, L philippinense и L. pensvlvanicum. Выявлено, "гго фэтял, фстон и рифтал повышают всхожесть семян лилий в !,5 раза (рис. 2). Другие регуляторы роста оказывают существенное влияние лишь на энергию прорастания семян.

Рис. 2. Влияние регуляторам роста на прорастание семян видовых лил а в Регеперациоипая способность луковиц лилий in vitro.

Проведены исследования по размножению лилий а культуре in vitro на примере L regate, L, henryi, а также сортов Блек Вельвет и Бианка. Исследована возможность использования в качестве эхеплантоь чешуй, зачаточного побега (почки возобновления) и донца луковицы. Первый этап культивирования растений включает получение стерильной, хорошо растущей культуры, что осуществляется стерилизашкй тканей. Разработанная схема стерилизации позволила достичь 44-66%-ной стерильности материала.

Эффективность микроразмножения в значительной степени определяется подбором питательной среда. Для культивирования указанных эксгшангов использовали две среды - MS и Ц с добавлением БАП и НУК. По результатам работы выявлено, что лучшей питательной средой для инициации морфогенеза на чешуях луковиц являются MS + 0,1 мг/л НУК и 1( + 0,1 мг/л НУК. Начало образования адвентивных почек у L. regale наблюдалось уже через 2 недели, а у L. henryi и сортов Блек Вельвет н Бианка через месяц а через 2-2,5 месяца формировались микролуковички диаметром 1,5-2 мм (рис. 3, 4).

Рис, 3. Формирование побегов на чешуях Рис.4. Формирование побегов на чешуях луковиц i, regale Wils. луковиц L. henryi Bat.

Присугсгвие в питательной среде ауксина (НУК) способствовало образованию микро луковичек на первом этане культив крова пня в t,5-2 раза быстрее, чем на питательной среде с преобладанием цжокннина (ВАП). Присутствие БАП в питательной среде вызывало усиленное образование листьев (рис. 5).

Лучшими из взятых в эксперимент эксгшангов являлись чешуи луковиц, на которых коэффициент регенерации достигал 48 адвентивных почек т одну чешую (таб. 2). Более высокая способность к регенерации отмечена на сегментах чешуй, взятых с базальной части. i, J

0,1 мг/л нук , Н

/тгу №А Щ

0,1 мг/л НУК + 2,0 мг/л БАП

, Jr.

Рис. 5. Влияние регуляторов роста на морфогенез чешуй луковиц лилий, а-иачало образования адвентивных почек, 5, в - рост адвент»иных ночек, г - образование каллуса на экс план те чешуи луковицы, д - образование зачатков листьев на каллусе, с — каллус с зачатками листьев, отделенный от чешуи, ж - рост листьев, з - н - растенне-регенерант.

Таблица 2

Коэффициент образования адвентивных почек на эксллантах чешуй и зачаточных побегов лилнй на питательной среде М8, содержащей 0,1 мг/л НУК

Объект Экспланг

исследования сегмент чешуи зачаточный побег

апикальная базальная апикальная базальная

часть часть часть часть

L. regale 1,7±0,75 6,4±1,31 3,1±0,80 10,7±2,00

L. henryi 1,3±0,46 3,9±0,96 1,4±0,50 3,6±l,0t

Блек Вельвет 1,4±0,53 3,0±0,89 1,8±0,77 2,2±1,01

Бианка 1,5±0,52 4,6±1,09 1,5±0,52 2,9±0,80

Примечание: одну чешую делили на 6-8 частей

Коэффициент регенерации на эксплангах зачаточного побега зависел от сортовых и видовых особенностей лилий и составлял в среднем 3-5 адвентивных почек на экспланг, максимально у L. regale - до 12. Базальная часть зачаточного побега проявила большую регенерационную способность.

Показано, что донце непригодно для использования при размножении лилий in vitro. Единичные побеги на эксплангах донца наблюдались лишь у L. regale.

Коэффициент регенерации у L. regale на исследуемых фрагментах был в 2-3 раза выше, чем у L. henryi и сортов Блек Вельвет и Бианка. Это обусловлено высокой регенерационной способностью L. regale.

Морфогенез и регенерация растений на генеративных органах лилий в культуре in vitro.

В задачу исследования входило выявление особенностей регенграции фрагментов бутонов видовых и сортовых лилий и оценка эффективности различных питательных сред для культивирования in vitro.

В качестве объектов использованы два вида: L. regale и L. henryi, а также шесть сортов ю группы Азиатские гибриды и три сорта из группы Восточные гибриды. Бутоны фрагментировали на цветоложе, основание околоцветника, тычиночную нить, завязь, столбик и помещали на питательные среды MS и L6, с добавлением регуляторов роста: индолилмасляной кислоты, индолилуксусной кислоты, а-пафтилуксусной кислоты, 6-бешиламинопурина, в различных комбинациях и концентрациях.

Усредненные значения коэффициента регенерации на фрагментах бутонов приведены в таблице 4.

Способность к индуцированному морфогенезу тканей фрагментов бутонов существенно зависит от видовых и сортовых особенностей лилий, а также от состава питательной среды и экспланга, взятого в эксперимент. В результате исследований для каждого экспланга видов и сортов подобрана оптимальная среда, с регуляторами роста. Показано, что у L. henryi и сорта Берлин все шученные экспланты обладали морфогенетической активностью.

Аналго полученных данных по изученным видам и сортам лилий показал, что наибольшим морф ore нет ическим потенциалом обладает цветоложе. На этом экспланте у всех исследуемых видов и сортов наблюдалось образование адвентивных

почек. Коэффициент размножения достигал 12 адвентивных почек на экспланг и варьировал в зависимости от состава среды и объекта исследования.

Отмечено, что высокой способностью к регенерации обладают околоцветники лилий, где коэффициент размножения варьировал от 3 до 7, а у сорта Берлин достигал 13.

Таблица 4

Коэффициент образования адвентивных почек на фрагментах бутонов

видовых н сортовых лилий in vitro

Виды и сорта лилий Экс платы

цветоложе околоцветник тычиночная нить завязь

L regale 2,8±1,29 3,9±1,20 - -

L. henryi 2,8±0,92 1,5±0,53 2,1±0,77 2,5±1,11

Демон Пикси 7,1±2,23 6,9±1,94 3,4±0,52 -

Фата Моргат 5,2±1,75 - - -

Афродита 7,3±2,31 - - -

Брунелло 3,6±1,17 - 2,7±0,48 -

Коррида 3,0±0,82 - - -

Фангио 5,2±1,48 3,3±1,49 2,7±0,48 -

Берлин 8,1±1,37 10,9±2,60 7,0±0,82 6,2±0,79

Медуза 10,1±1,91 7,6±2,07 - -

Старгейзер 7,7 ±1,70 - - 6,0±2,11

Примечание: прочерк означает отсутствие морфогенеза

Предложенный способ размножения лилий обладает рядом преимуществ: 1) достигается максимальная стерилизация исходного материала, причем схема стерилизации гораздо проще, чем при введении в культуру in vitro чешуй луковиц; 2) исключается возможность повреждения или гибели растения, являющегося донором экспланта, в случае дефицита исходного материала; 3) является менее трудоемким по сравнению с размножением чешуек in vitro, проводится меньше манипуляций перед введением в культуру in vitro.

Таким образом, клетки тканей цветоложа, завязи, столбика, оснований околоцветника и тычиночной нити бутонов лилий способны к образованию адвентивных почек с последующим их развитием до нормальных проростков с корнями. Реализация морфогенетического потенциала фрагментов бутонов зависит от генотипа, опгимшированного состава питательной среды, типа первичного эксплата, условий культивирования.

Перевод растений-регенерантое е условия ex vitro.

Необходимым и очень важным этапом микроклонального размножения является перевод растений-регенерангов в нестерильные условия.

Важную роль играет величина микролуковички. Экспериментально показано, что оптимальный размер микролуковичек, позволяющий адаптироваться к почвенным условиям, равен 0,6-0,8 см в диаметре. Приживаемость регенерангов составила 90-100%. Для подготовки к высадке в открытый грунт растения доращивали в тепличных условиях.

Сравнительные данные по результатам размножения лилий in vivo и in

vitro.

По результатам исследований выявлено, что применение метода культуры тканей in vitro при размножении лилий позволяет получать более чем в 100 раз больше посадочного материала, чем при размножении традиционным способом. Так, с одной луковицы за вегетационный период можно получать до 28 луковичек-деток, а применяя метод культуры in vitro за 2-3 месяца - до 500.

Преимуществом этого метода является также возможность использования в качестве эксплангов не только луковиц лилий, но и бутонов. С учетом общего числа эксплангов, с одного бутона за 2-3 месяца можно получать до 114 растений-регенерангов. В зависимости от вида и сорта количество бутонов на побеге лилий варьирует от 5 до 25 шт. Следовательно, с одного генеративного побега можно получать до 3093 луковичек-деток.

Таким образом, использование метода культуры тканей in vitro на начальном этапе культивирования позволяет получать с одной особи около 3,6 тысяч растений-регенератов.

ВЫВОДЫ

1. Изучены биологические особенности 4 видов и 99 сортов лилий при культивировании в лесостепной зоне Башкирского Предуралья. Показано, что наиболее интенсивный рост растений (1,0-3,3 см) наблюдается в фазы отрастания и бутонизации. По срокам цветения выделены раноцветущие лилии: L. martagón, L. aurantiacum и 3 сорта из группы Азиатские гибриды; среднецветущие: L. regale и большинство сортов; поз дно цветущие: L. henryi и 5 сортов из группы Восточные гибриды. Наиболее продолжительным цветением характеризуются L. henryi и 2 сорта из группы Азиатские гибриды (Аэлита и Галактика) - более 30 дней. Отмечено, что по годам меняются сроки и продолжительность цветения, а их последовательность остается неизменной. Высокой семенной продуктивностью в условиях культуры характеризуются L. martagón и L. regale (коэффициент продуктивности больше 90%). Для L. martagón этот показатель в значительной степени меняется по годам и зависит от погодных условий в период цветения и плодоношения. Все изученные виды и сорта проходят полный цикл развития и заканчивают вегетацию с наступлением устойчивых осенних заморозков (в первой половине октября).

2. Комплексная оценка декоративных и хозяйственно-полезных качеств сортовых и видовых лилий позволила выделить наиболее перспективные формы: L. regale и L. aurantiacum, а также 54 сорта из группы Азиатские гибриды и 5 сортов из группы JIA-гибриды. Они отличаются высокой декоративностью цветков, устойчивостью цветоносов, обильным и продолжительным цветением, устойчивостью к болезням и климатическим условиям Башкирского Предуралья, а также высоким коэффициентом вегетативного размножения. Эти сорта и виды рекомендованы для пополнения зонального ассортимента культивируемых растений Республики Башкортостан

3. Семена большинства изученных видовых лилий имеют высокую всхожесть (до 80 %) в течение 1-2 лет хранения при низкой положительной температуре. Использование физиологически активных веществ позволяет повысить процент

и энергию прорастания семян лилий с низкой всхожестью в 1,5 раза. Лучшие результаты получены при обработке семян 0,0005% водными растворами фэтила и рифтала, и 0,001%-фигона.

4. Для ускоренного размножения лилий чешуями луковиц могут быть использованы регуляторы роста: крезацин и корневин. Определены оптимальные концентрации и экспозиции раствора крезацина, повышающего коэффициент образования дочерних луковичек на чешуях L. regale, L, martagón и L. henryi в 1,7-4,5 раза и стимулирующие на них корпеобразование в условиях in vivo. Для L. regale и L, martagón это обработка 0,01%-ным раствором крезацина при экспозиции 48 ч, для L. henryi - обработка 0,001%-ным раствором в течение 60 ч.

5. Показано, что ткани чешуй, зачаточного побега луковиц лилий, цветоложе, завязь, основания околоцветника и тычиночной нити обладают тагипотенгностью, способны к образованию адвентивных почек и могут быть использованы для получения посадочного материала лилий методом культуры in vitro.

6. Подобраны оптимальные питательные среды и условия стерилизации и культивирования эксплангов in vitro, позволяющие получать до 500 регенератов от одной луковицы лилий, более 100 — от одного бутона и более 3,6 тысяч - от одного растения-донора.

Список работ опубликованных но теме диссертации Публикации в изданиях, рекомендованных ВАК РФ

1. Байбурина Р. К., Мухаметвафищ А. А., Миронова Л. Н. Опыт культивирования некоторых видов Lilium L. in vitro. // Растительные ресурсы. - 2004. - Т. 40, вып. 1. - С. 82-89.

2. Байбурина Р. К., Мухаметвафина А. А., Миронова Л. Н. Особенности регенерации гибридов азиатских лилий ш фрагментов соцветий в культуре in vitro. II Сельскохозяйственная биология. - 2006. - № 1. - С. 80-85.

3. Мухаметвафина А. А., Байбурина Р. К., Миронова Л. Н. Введение зародышей Lilium regale Wils, в культуру in vitro. И Цитология. - 2006. - Т. 8.-№9.-С. 783.

4. Мухаметвафина А. А., Байбурина Р. К., Миронова Л. Н. Особенности регенерации Lilium regale Wils, и L. henryi Baker из фрагментов бутонов в культуре in vitro. II Биотехнология. - 2009. -№ 2. - С. 37-41.

Публикации в сборниках и материалах конференций

1. Мухаметвафина А. А., Миронова Л. Н., Байбурина Р. К. Ингродукционное изучение лилий в Ботаническом саду г. Уфы. И Мат. XI Делегатского съезда русского Ботанического общества. - Новосибирск, Барнаул, 2002.- С. 207.

2. Мухаметвафина А. А., Байбурина Р. К. Морфогештические процессы in vitro у лилий. // Мат. Ill Межд туч. конф. - Минск, 2003. - С. 90-91.

3. Мухаметвафина А. А. Особенности введения эксплангов лилий в стерильную культуру. // Мат. II Межд. конф. молодых ученых «Современные проблемы генетики, биотехнологии и селекции растений». -Харьков, 2003.-С. 95.

4. Мухаметвафина А. А., Байбурина Р. К., Миронова Л. Н. Опыт культивирования видовых лилий в культуре in vitro. II VIII International Conference « The Biology of Plant Cells In Vitro and Biotechnology». - Saratov, 2003,-p. 217.

5. Мухаметвафина А, А, Байбурина P. К., Миронова JI. H. Интродукция и размножение in vitro Lilium martagón L. // Мат. межд. конф. «Природное наследие России: изучение, мониторинг, охрана». - Тольятти, 2004. - С. 185-186.

6. Мухаметвафина А. А., Байбурина Р. К., Миронова Л. Н. Интродукция Lilium martagón L. и опыт введения ее в культуру in vitro. II Мат. Межд. конф. «Генетические ресурсы лекарственных и ароматических растений». - М., Пущино, 2004 г. - С. 122.

7. Мухаметвафина А. А., Байбурина Р. К., Миронова Л. Н. Интродукция и размножение in vitro Lilium martagón L. // Мат. межд конф. «Природное наследие России: изучение, мониторинг, охрана». - Тольятти, 2004. С. 185186.

8. МухаметвафшаА. А., Миронова Л. Н., Байбурина Р. К. Лилии. Руководство по размножению и выращиванию. - Уфа: РУНМЦ МО РЕ, 2004. -34 с.

9. Мухаметвафина А. А. Материалы изучения коллекции лилий Уфимского Ботанического сада. // Мат. VI междунар. симпозиума «Новые и нетрадиционные растения и перспективы их использования». - М., Пущино, 2005. - Т. I.-С. 86-88.

10. Мухаметвафина А. А. Опыт размножения сортовых лилий го группы Восточные гибриды. //Мат. I (IX) Межд конф. молодых ботаников в Санкт-Петербурге. - С-Пб, 2006. - С. 175.

11. Мухаметвафина А. А., Байбурина Р. К. Размножение видовых лилий чешуйками с использованием регуляторов роста. // Бюлл. Ботанического сада СГУ им. Н. Г, Чернышевского. - Саратов, 2006. - Вып 5. - С. 239-242.

12. Мухаметвафина А. А., Ишмуратова М. М. Особенности начальных этапов онтогенеза Lilium martagón L. в естественных условиях обитания и в культуре in vitro. // Онтогенетический атлас лекарственных растений: науч. изд. - Йошкар-Ола: МарГУ, 2007. - Том V. - С. 114-120.

13. Мухаметвафина А. А., Миронова Л. Н. Оценка декоративных качеств сортовых лилий, интродуцированных в Уфимский Ботанический сад. // Бюлл. Ботанического сада СГУ им Н. Г. Чернышевского. - Саратов, 2008. -С. 139.

14. Мухаметвафина А. А. Фрагменты бутонов лилий как перспективные эксплангы для микроклонального размножения лилий. // Мат. IX конференции «Биология клеток растений in vitro и биотехнология». -Звенигород, 2008. - С. 272.

Мухаметвафина Аниса Анасовна

ИНТРОДУКЦИЯ ЛИЛИЙ В БАШКИРСКОМ ПРЕДУРАЛЬЕ И ИХ РАЗМНОЖЕНИЕ IN VIVO Я IN VITRO

Специальность 03.00.05 - ботаника

03.00.23 - биотехнология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Подписано в печать 03.09.2009 г. Бумага офсетная. Отпечатано на ризографе. Формат 60x84 'Да. Усл.-печ. л. 1,0 Уч.-иэд. 1,3 Тираж 100 экз. Заказ № 01.

450061, г. Уфа, ул. Свободы, 15 ООО «Компания «Спектр Полиграф»

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Мухаметвафина, Аниса Анасовна

Введение.

Глава 1. История, классификация и биология лилий.

1.1. История интродукции и селекции лилий.

1.2. Географическое распространение лилий.

1.3. Классификация видовых и сортовых лилий.

1.4. Биология лилий.

1.5. Практическое использование лилий.

1.6. Размножение лилий.

1.6.1. Вегетативное размножение.

1.6.2. Размножение семенами.

1.6.3. Размножение с использованием культуры in vitro.

Глава 2. Условия, объекты и методы исследований.

2.1. Место и условия проведения опытов.

2.2. Объекты и методы исследований.

Глава 3. Интродукционное изучение сортовых и видовых лилий.

3.1. Результаты интродукционного изучения сортовых лилий.

3.1.1. Результаты фенологических наблюдений.

3.1.2. Динамика роста сортовых лилий.

3.1.3. Оценка декоративных качеств.

3.1.4. Оценка хозяйственно-полезных признаков и перспективы использования.

3.2. Результаты изучения видовых лилий.

3.2.1. Результаты фенологических наблюдений.

3.2.2. Динамика роста видовых лилий.

3.2.3. Оценка декоративных качеств.

3.2.4. Биология цветения.

3.2.5. Оценка хозяйственно-полезных признаков.

3.2.6.Определение успешности интродукции и перспективы использования видовых лилий.

Глава 4. Разработка методов ускоренного размножения лилий.

4.1. Размножение лилий чешуями in vivo.

4.2. Размножение лилий в культуре in vitro.

4.2.1. Регенерационная способность луковиц лилий in vitro.

4.2.2. Морфогенез и регенерация растений на генеративных органах лилий в культуре in vitro.

4.2.3. Перевод растений-регенерантов в условия ex vitro.

4.2.4. Сравнительные данные по результатам размножения лилий in vivo и in vitro.

4.3. Семенное размножение.

4.3.1. Определение всхожести семян лилий в лабораторных условиях (in vivo).

4.3.2. Влияние ФАВ на лабораторную всхожесть семян in vivo.

4.3.3. Сравнение всхожести семян видовых лилий in vivo и in vitro.

4.3.4. Влияние дезинфицирующих растворов на лабораторную всхожесть семян лилий.

4.3.5. Влияние регуляторов роста на всхожесть семян in vitro.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Интродукция лилий в Башкирском Предуралье и их размножение in vivo и in vitro"

Актуальность темы.

В нашей стране большое внимание уделяется благоустройству и озеленению городов и сел. В последнее время эта тенденция приобретает все возрастающий характер. Появляются все новые и новые профессиональные фирмы, занимающиеся ландшафтным дизайном. Заметно увеличиваются площади занятые под парки, сады, скверы; увеличивается количество выращиваемых цветов. С каждым годом растет интерес населения к разведению цветов дома, на приусадебных участках, коллективных садах.

Особый интерес, как с практической, так и с теоретической точки зрения представляют луковичные. Одними из лучших декоративных луковичных растений, пользующихся огромным спросом, являются лилии.

Лилии - известные с древних времен растения, широко распространенные во всем мире, по праву считаются одними из самых популярных и красивых цветов и представляют несомненный интерес как важная декоративная культура. В этой связи актуально изучение биологических особенностей большого количества видов и сортов лилий в условиях региона с целью отбора наиболее перспективных для широкой культуры.

В условиях Республики Башкортостан лилии мало используются в зеленом строительстве, хотя при правильном подборе ассортимента можно достичь того, что цветение будет продолжаться с весны до осени. Перед специалистами декоративного садоводства ставятся новые задачи, для выполнения которых нужен большой ассортимент элитного исходного материала и эффективные методы воспроизводства декоративных растений. В связи с этим возникает вопрос о быстром получении посадочного материала в большом количестве, чтобы обеспечить хозяйства, занимающиеся озеленением. Перспективным направлением в решении этой задачи является использованием физиологически активных веществ, ускоряющих процессы вегетативного и семенного размножения лилий.

Кроме того, некоторые авторы используют метод размножения in vitro (Румынии, Слюсаренко, 1989; Миронова, 2004; Мокшин, 2005).

Цель и задачи исследований. Целью работы являлось изучение биологических особенностей представителей рода Lilium L. при интродукции в лесостепную зону Башкирского Предуралья, разработка методов интенсивного размножения перспективных форм и пополнение зонального ассортимента растений,культивируемых в Республике Башкортостан.

В связи с этим были поставлены следующие задачи:

1. Провести интродукционное изучение видов и сортов лилий коллекции Ботанического сада-института УНЦ РАН. Разработать ассортимент лилий для использования в озеленении в Башкирском Предуралье.

2. Изучить влияние физиологически активных веществ на процессы вегетативного и семенного размножения лилий.

3. Апробировать метод клонального микроразмножения на видовых и сортовых лилиях для быстрого получения массового посадочного материала. Оценить эффективность стерилизующих веществ и питательных сред для культивирования in vitro и выявить особенности регенерации лилий с использованием разных типов эксплантов.

1. ИСТОРИЯ, КЛАССИФИКАЦИЯ И БИОЛОГИЯ ЛИЛИЙ.

Заключение Диссертация по теме "Ботаника", Мухаметвафина, Аниса Анасовна

ВЫВОДЫ

1. Изучены биологические особенности 4 видов и 99 сортов лилий при культивировании в лесостепной зоне Башкирского Предуралья. Показано, что наиболее интенсивный рост растений (1,0-3,3 см) наблюдается в фазы отрастания и бутонизации. По срокам цветения выделены раноцветущие лилии: L. martagon, L. aurantiacum и 3 сорта из группы Азиатские гибриды; среднецветущие: L. regale и большинство сортов; поздноцветущие: L. henryi и 5 сортов из группы Восточные гибриды. Наиболее продолжительным цветением характеризуются L. henryi и 2 сорта из группы Азиатские гибриды (Аэлита и Галактика) - более 30 дней. Отмечено, что по годам меняются сроки и продолжительность цветения, а их последовательность остается неизменной. Высокой семенной продуктивностью в условиях культуры характеризуются L. martagon и L. regale (коэффициент продуктивности больше 90%). Для L. martagon этот показатель в значительной степени меняется по годам и зависит от погодных условий в период цветения и плодоношения. Все изученные виды и сорта проходят полный цикл развития и заканчивают вегетацию с наступлением устойчивых осенних заморозков (в первой половине октября).

2. Комплексная оценка декоративных и хозяйственно-полезных качеств сортовых и видовых лилий позволила выделить наиболее перспективные формы: L. regale и L. aurantiacum, а также 54 сорта из группы Азиатские гибриды и 5 сортов из группы JIA-гибриды. Они отличаются высокой декоративностью цветков, устойчивостью цветоносов, обильным и продолжительным цветением, устойчивостью к болезням и климатическим условиям Башкирского Предуралья, а также высоким коэффициентом вегетативного размножения. Эти сорта и виды рекомендованы для пополнения зонального ассортимента культивируемых растений Республики Башкортостан.

3. Семена большинства изученных видовых лилий имеют высокую всхожесть (до 80 %) в течение 1-2 лет хранения при низкой положительной температуре. Использование физиологически активных веществ позволяет повысить процент и энергию прорастания семян лилий с низкой всхожестью в 1,5 раза. Лучшие результаты получены при обработке семян 0,0005% водными растворами фэтила и рифтала, и 0,001% - фитона.

4. Для ускоренного размножения лилий чешуями луковиц могут быть использованы регуляторы роста: крезацин и корневин. Определены оптимальные концентрации и экспозиции раствора крезацина, повышающего коэффициент образования дочерних луковичек на чешуях L. regale, L, martagon и L. henryi в 1,7-4,5 раза и стимулирующие на них корнеобразование в условиях in vivo. Для L. regale и L, martagon это обработка 0,01%-ным раствором крезацина при экспозиции 48 ч, для L. henryi — обработка 0,001%-ным раствором в течение 60 ч.

5. Показано, что ткани чешуй, зачаточного побега луковиц лилий, цветоложе, завязь, основания околоцветника и тычиночной нити обладают тотипотентностью, способны к образованию адвентивных почек и могут быть использованы для получения посадочного материала лилий методом культуры in vitro.

6. Подобраны оптимальные питательные среды и условия стерилизации и культивирования эксплантов in vitro, позволяющие получать до 500 регенерантов от одной луковицы лилий, более 100 - от одного бутона и более 3,6 тысяч - от одного растения-донора.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Лилии - известные с древних времен растения, широко распространенные во всем мире, по праву считаются одними из самых популярных и красивых цветов и представляют несомненный интерес как важная декоративная культура. В этой связи актуально изучение биологических особенностей большого количества видов и сортов лилий в условиях региона с целью отбора наиболее перспективных для широкой культуры.

В условиях Республики Башкортостан лилии мало используются в зеленом строительстве, хотя при правильном подборе ассортимента можно достичь того, что цветение будет продолжаться с весны до осени. Перед специалистами декоративного садоводства ставятся новые задачи, для выполнения которых нужен большой ассортимент элитного исходного материала и эффективные методы воспроизводства декоративных растений. В связи с этим возникает вопрос о быстром получении посадочного материала в большом количестве, чтобы обеспечить хозяйства, занимающиеся озеленением. Перспективным направлением в решении этой задачи является использованием физиологически активных веществ, ускоряющих процессы вегетативного и семенного размножения лилий. Кроме того, некоторые авторы используют метод размножения in vitro.

Для выполнения поставленных задач изучены биологические особенности интродуцированных в Ботанический сад видов и сортов лилий, оценены успешность использования лилий в лесостепной зоне Башкирского

Предуралья, а также апробированы современные методы размножения лилий с использованием культуры органов и тканей in vitro.

Проведено интродукционное изучение 4 видов лилий: L. regale, L. martagon, L. henryi, L. aurantiacum. Изученные виды лилий в различной степени адаптируются к условиям выращивания в культуре в лесостепной зоне Башкирского Предуралья. L. martagon, L. henryi и L. aurantiacum, получившие 5 баллов, регулярно массово цветут. L. martagon плодоносит, но не каждый год. L. henryi и L. aurantiacum не плодоносят, размножаются вегетативно. Виды обладают устойчивостью к местным климатическим условиям. Не требуют полива и укрытия на зиму.

L. regale, получившая 6 баллов, регулярно и массово цветет, ежегодно плодоносит, размножается вегетативно. Обладает высокой устойчивостью к местным климатическим условиям.

Показано, что инорайонные виды лилий (L. regale, L. henryi и L. aurantiacum) являются высокопластичными и адаптированными к климатическим условиям Башкирского Предуралья.

Комплексная оценка дикорастущих видов позволила выявить специфические особенности. Выявлено, что L. martagon и L. aurantiacum относятся к раноцветущим видам, L. regale — к среднецветущим, a L. henryi -к поздноцветущим. В зависимости от вида и погодных условий период от начала отрастания до зацветания составляет от 50 (L. martagon) до 91 (L. henryi) дня. Наиболее продолжительным цветением обладает L. henryi (более 30 дней). При оценке декоративных качеств выделяются 2 вида, получивших больше 90 баллов: L. regale и L. aurantiacum. Они отличаются крупностью цветков и устойчивостью цветоносов, а также более длительным сохранением декоративности околоцветника.

Изучены особенности размножения видовых лилий подземными органами. Показано, что вегетативное размножение у лилий проходит тремя путями: 1) делением материнской луковицы; 2) образованием деток в пазухах луковичных чешуй; 3) образованием деток на подземной части стебля в пазухах чешуевидных листьев.

Первый путь размножения характерен для L. regale и L. martagon, второй путь - для всех изученных видов, третий путь - для L. aurantiacum, L. martagon и L. henryi. У L. henryi может формироваться подземный блуждающий стебель, который удаляется от материнской луковицы на некоторое расстояние и на нем образуется до 3 луковичек-деток.

Коэффициент вегетативного размножения составил у L. regale — 2,5, у L. henryi и L. aurantiacum — 2, у L. martagon — 1.

Показано, что семена большинства изученных видовых лилий сохраняют достаточно высокую всхожесть (до 80 %) в течение 1-2 лет при низкой положительной температуре. Исследовано действие регуляторов роста (ФАВ): гетероауксина, фитона, фэтила, рифтала, крезацина на всхожесть семян L. regale и L. martagon (БСИ), L. philippinense и L. pensylvanicum (делектус). Выявлено, что фэтил и рифтал повышают всхожесть длительно хранившихся семян всех видов лилий в 1,5 раза, в то время как остальные регуляторы роста оказывают существенное влияние лишь на энергию прорастания семян.

Проведено интродукционное изучение коллекции сортовых лилий Ботанического сада-института из групп Азиатские гибриды (77 сортов), Восточные гибриды (13 сортов), Трубчатые гибриды (4 сорта) и JIA-гибриды (5 сортов). В результате фенологических исследований установлено, что большинство изучаемых сортов лилий по срокам цветения являются среднецветущими. К раноцветущим относятся только 3 сорта, к поздноцветущим - 5 сортов. В зависимости от сортовых особенностей и погодных условий года количество дней от начала вегетации до начала цветения колебалось в пределах 60-90 дней. Отмечено, что по годам меняются лишь сроки и продолжительность цветения лилий, а их последовательность остается неизменной. Выделены 2 сорта: Аэлита и Галактика, с наиболее продолжительным цветением — более 30 дней.

Определен коэффициент вегетативного размножения сортовых лилий. Наибольшим коэффициентом размножения обладают JIA-гибриды: Роял Сансет, Роял Парфюм, Королевский Парад (от 4,0 до 7,7). Азиатские гибриды обладают меньшим коэффициентом размножения по сравнению с предыдущей группой (от 2,0 до 4,9). Сорта из групп Восточных и Трубчатых гибридов дочерние луковички образуют мало или вообще не образуют.

Комплексная оценка декоративных и хозяйственно-полезных качеств лилий из коллекции Ботанического сада позволила выделить наиболее перспективные формы — 59 сортов, в том числе 54 сорта из группы Азиатские гибриды и 5 сортов из группы ЛА-гибриды. Все эти виды и сорта отличаются высокой декоративностью, обилием и продолжительностью цветения, устойчивостью к болезням и климатическим условиям лесостепной зоны Башкирского Предуралья, а также высоким коэффициентом вегетативного размножения. Эти сорта и виды рекомендованы для пополнения зонального ассортимента Республики Башкортостан.

Сорта из групп Восточные и Трубчатые гибриды, хотя и отличаются высокой декоративностью, менее успешные в условиях лесостепной зоны Башкирского Предуралья. Без укрытия в зимний период наблюдаются выпады.

Изучена регенерационная способность чешуй луковиц L. regale, L. henryi, L. martagon in vivo. В результате исследований выявлено, что наибольшей регенерационной способностью обладают чешуи луковиц L. regale. Использование таких регуляторов роста как крезацин и корневин при размножении in vivo повышает коэффициент образования дочерних луковичек более чем в 1,7-4,5 раза. Выявлены оптимальные варианты обработки регуляторами роста: для L. martagon — 0,001% раствор крезацина

48 ч и 0,01% раствор крезацина 48 ч, для L.regale — 0,01% раствор крезацина 48 ч, для L. henryi — 0,001% раствор крезацина 60 ч.

При размножении лилий в культуре in vitro на примере L. regale, L. henryi, а также сортов Блек Вельвет и Бианка, исследована возможность использования в качестве эксплантов чешуй, зачаточного побега (почки возобновления) и донца луковиц. В условиях in vitro L. regale также показала высокую регенерационную способность. Коэффициент регенерации данного вида был в 2-3 раза выше, чем у L. henryi и сортов Блек Вельвет и Бианка. Лучшим из перечисленных эксплантов оказались чешуи луковиц, на которых коэффициент регенерации достигал 48 адвентивных почек на одну чешую. Коэффициент размножения на эксплантах зачаточного побега зависел от сортовых и видовых особенностей лилий и составлял 3-5, максимально у L. regale — до 12. Показано, что донце непригодно для использования при размножении лилий in vitro.

Изучено влияние регуляторов роста на регенерацию чешуй луковиц in vitro. Выявлено, что присутствие в питательной среде ауксина (НУК) способствовало образованию микролуковичек на первом этапе культивирования. Преобладание в среде цитокинина (БАП) вызывает усиленное образование листьев. Присутствие в питательной среде ауксина ускоряло образование микролуковичек в 1,5-2 раза.

Изучены морфогенетические потенции фрагментов бутонов видовых: L. regale, L. henryi, и сортовых лилий: Фаигио, Коррида, Брунелло, Медуза, Берлин, Старгейзер, Лемон Пикси, Фата Моргана, Афродита. Показано, что морфогенетическими потенциями обладают все изученные фрагменты бутонов: цветоложе, завязь, тычиночные нити, околоцветники, столбик. Однако, коэффициент размножения у фрагментов бутона различался.

Установлено, что наибольшим морфогенетическим потенциалом характеризуется цветоложе. На этом экспланте у всех исследуемых сортов и видов наблюдалось образование адвентивных почек. Коэффициент размножения достигал 12 адвентивных почек на эксплант и варьировал в зависимости от состава среды и объекта исследования.

Также высокой способностью к регенерации обладают околоцветники. Особенно хорошие результаты получены на эксплантах сортовых лилий, где коэффициент размножения достигал 13.

На остальных эксплантах адвентивные почки образовывались не всегда, и коэффициент регенерации был несколько ниже.

Таким образом, способность к индуцированному морфогенезу тканей фрагментов бутонов и коэффициент образования адвентивных почек на экспланте зависит от сортовых и видовых особенностей лилий. Существенное влияние оказывает и фитогормональный состав питательной среды. Концентрация регуляторов роста должна подбираться индивидуально для каждого экспланта, сорта или вида.

Разработанный нами способ размножения лилий фрагментами бутонов обладает рядом преимуществ: 1) достигается максимальная стерилизация исходного материала, причем схема стерилизации гораздо проще, чем при введении в культуру in vitro чешуй луковиц; 2) исключается возможность повреждения или гибели растения, являющегося донором экспланта в случае дефицита исходного материала; 3) является менее трудоемким по сравнению с размножением чешуек in vitro, так как проводится меньше манипуляций перед введением в культуру in vitro.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Мухаметвафина, Аниса Анасовна, Уфа

1. Аксенов Е. С., Аксенова Н. А. Декоративные растения: В 2 т. М.: ABF, 1997.-Т. 2. -608 с.

2. Алексеева О. В. Метод ускоренного вегетативного размножения лилий. // Лилии. Тула, 1992. - С. 10-12.

3. Алехина Н. Н. Лилии в коллекции ботанического сада Харьковского госуниверситета. // Лилии. Тула, 1992. - С. 21-22.

4. Артюшенко 3. Т., Федоров Ал. А. Атлас по описательной морфологии высших растений. Плод. Л.: Наука, 1986. - 392 с.

5. Артюшенко 3. Т. Атлас по описательной морфологии высших растений. Семя. Л.: Наука, 1990. - 204 с.

6. Бабкина Н. Выращиваю из семян. // Цветодство. — 2001. № 6. - С. 43.

7. Бабкина Н. Лилии цветут на подоконнике. // Цветоводство. 2006. - № 5.-С. 68.

8. Базилевская Н. А. Теории и методы интродукции растений. М.: Моск. университет, 1964. — 131 с.

9. Баканова В. В. Цветочно-декоративные многолетники открытого грунта. Киев: Наук. Думка, 1984. - 156 с.

10. Баранова М. В. Морфогенез луковиц лилий. // Ботанический журнал. -1971. Т. 56, № 11. - С. 1593-1604.

11. Баранова М. В. О формировании цветков в стеблевых луковичках Lilium II Ботанический журнал. 1973. - Т. 58, № 6. - С. 890-893.

12. Баранова М. В. Типы прорастания семян и развитие сеянцев у рода Lilium L. //Ботанический журнал. 1974. - Т. 59, № 7. - С. 1045-1055.

13. Баранова М. В. Структура, классификация и направления эволюционных преобразований вегетативных органов луковичных растений семейства Liliaceae. II Ботанический журнал. — 1986. — Т.71, № 10. С. 13081320.

14. Баранова М. В. Конспект системы рода Lilium (Liliaceae) // Ботанический журнал. 1988. - Т. 73, № 9. - С. 1319-1329.

15. Баранова М. В. Лилии. — Л.: Агропромиздат. Ленингр. отд., 1990. 384с.

16. Баранова М. В. Луковичные растения семейства Лилейных. География, биоморфологический анализ, выращивание. — СПб.: Наука, 1999. 229 с.

17. Баранова М. В. Трубчатые лилии. // В мире растений. — 2001. №11. -С. 29-33.

18. Баранова М. В., Алексеева О. В. Коллекция луковичных и других растений класса однодольных. // Растения открытого грунта Ботанического сада Ботанического института им. В. Л. Комарова. Коллекции, экспозиции. -СПб, 2002.-С. 119-150.

19. Ботанический сад института биологии Башкирского филиала АН СССР: Краткий путеводитель. Уфа, 1987. - 61 с.

20. Бутенко Р. Г. Культура изолированных тканей и физиология морфогенеза растений. М., 1964. - 272 с.

21. Бутенко Р. Г. Клеточные технологии в сельскохозяйственной науке и практике // Основы сельскохозяйственной биотехнологии. М., 1990. - С. 154—235.

22. Былов В. Н., Зайцева Е. Н. Выгонка цветочных луковичных растений (биологические основы). М.: Наука, 1988. — 240 с.

23. Вайнагий И. В. О методике изучения семенной продуктивности растений // Ботанический журнал. 1974. - Т. 59, № 6. - С. 826-831.

24. Васильева О. Ю., Павлова Т. А. Методы изучения биоразнообразия декоративных растений при интродукции в Сибири // Сибирский экологический журнал. 1997. - Т. 4, № 1. - С. 45-50.

25. Вендровска С. 100 минут для красоты и здоровья. Пер. с польск. Смирнитской И. М. — Ставрополь: Кавказская библиотека, 1990. - 160 с.

26. Верещагин В. И., Соболевская К. А., Якубова А. И. Полезные растения Западной Сибири. -М.; Л., 1959. 348 с.

27. Верзилов В. Ф., Каспарян А. С. Действие гиббереллина на декоративные растения. — М.: Наука, 1968. 45 с.

28. Волкова Г. А., Моторина Н. А. Итоги интродукции лилий на европейском северо-востоке. // Матер, междунар. науч. конф. «Сохранение биоразнообразия растений в природе и при интродукции». Сухум, 2006. -С. 124-126.

29. Высоцкий В. А. Клональное микроразмножение растений // Культура клеток растений и биотехнология. — М., 1985. — С. 91—102.

30. Глоба-Михайленко И. Д., Дамер И. Ф., Смирнова И. С. Размножение лилий в культуре ткани. / Науч. тр. НИИ горн, садоводства и цветоводства. -1986.-Т. 33.-С. 115-122.

31. Грот В. А. Лилии и их культура. М.: МГУ, 1966. — 91 с.

32. Еременко Л. Л. Цветочные растения на гидропонике в теплицах Сибири. Новосибирск: Наука, 1983. - 430 с.

33. Декоративные травянистые растения для открытого грунта СССР: В 2 т. Т. 2. -Л.: Наука, Ленинград, отд., 1977. 459 с.

34. Дети Флоры. Легенды и мифы о цветах. Под. ред. Барышева И. В. -М.: Зимний сад, 2001. - С. 84-86.

35. Дьяченко А. Д. Луковичные цветочно-декоративные растения открытого грунта // Справочник / Отв. ред. А. А. Лаптев. Киев: Наукова думка, 1990.-320 с.

36. Жизнь растений: В 6 т. Т. 6.: Семейство лилейные (.Liliaceae). — М., 1982.-С. 72-90.

37. Жмылев П. Ю., Алексеев Ю. Е., Карпухина Е. А., Баландин С. А. Биоморфология растений // Иллюстрированный словарь. М.: 2005. - 256 с.

38. Зайцев Г. Н. Математическая статистика в экспериментальной ботанике. М.: Наука, 1984. - 424 с.

39. Зайцева Е. Н., Железняк Ф. М. Интродукция лилий в Главном ботаническом саду. // Бюлл. ГБС. 1979. - Вып. 112. - С. 3-9.

40. Заливский И. JI. Лилии. М., Л.: гос. изд-во сельскохозяйственной литературы, 1959. — 112 с.

41. Заливский И. Л. Селекция и интродукция лилий в Ленинграде // Бюлл. ГБС.-1955.-Вып. 23.-С. 14-25.

42. Золотницкий Н. Ф. Цветы в легендах и преданиях: Репринтное воспроизведение издания А. Ф. Девриена. -М., 1991. -217 с.

43. Иванова Н. В. Влияние регуляторов роста на размножение лилий. // Бюлл. ГБС. 1983. - Вып. 127. - С. 62-64.

44. Иванова Н. В., Козицкий Ю. Н. Применение культуры изолированной ткани для размножения лилий. // Бюлл. ГБС. 1981. — Вып. 121. — С. 87-92.

45. Иванова Н., Анциферов А. Эффективные методы. // Цветоводство. — 2001.-№6.-С. 44.

46. Интродукция растений в Главном Ботаническом саду им. Н. В. Цицина. К 50-летию основания. Под ред. Коровина С. Е. и др. - М.: Наука, 1995. -188 с.

47. Интродукция хозяйственно-ценных видов растений, разработка способов их размножения и рационального использования в условиях

48. Башкирской АССР за 1985: Заключительный отчет по теме Интродукция и акклиматизация растений / Башкирский филиал АН СССР Ин-т Биологии Ботанический сад; Руководитель Р. И. Хайбуллин. № ГР 01829010114; Инв. №360.-Уфа, 1986. 106 с.

49. Казанкова JI. Лилии в теплицах. // Цветоводство. — 2004. № 4. - С. 8—11.

50. Карписонова Р. А. Цветоводство: Начно-популярное издание. М.: Кладезь - Букс, 2007. - 256 с.

51. Карпович Т. М. Использование методов биотехнологии для сохранения редкого вида республики Беларусь лилии кудреватой. // Тез. конф. «Природа, человек и экология». Минск, 1999. С 26.

52. Катаева Н. В., Аветисов В. А. Клональное размножение растений в культуре клеток растений. М.: Наука, 1981. — С. 137—149.

53. Катаева Н. В., Бутенко Р. Г. Клональное микроразмножение растений. -М.: Наука, 1983.-96 с.

54. Катаева Н. В. Культура тканей и органов фрезии // Физиология растений. 1989. - Т. 28, вып. 5. - С. 1062-1084.

55. Каталог цветочно-декоративных травянистых растений ботанических садов СНГ и стран Балтии. Минск, 1997. - С. 328-339.

56. Кильчевский А. В., Французенок В. В. Размножение лилий в культуре in vitro II Изв. Акад. аграр. наук Республики Беларусь. — 1997. Вып. 2. - С. 73-76.

57. Киреева М. Ф. Сортоизучение и селекция лилий в Мичуринске. // Матер, симпозиума «Вопросы интенсификации декоративного садоводства». -М., 1975.-С. 28-29.

58. Киреева М. Ф. Лилии на вашем участке. // Лилии. — Тула, 1992. С. 36.

59. Киреева М. Ф., Коршикова Н. Г., Иванова Н. В. Результаты и перспективы селекции лилий во ВНИИ садоводства им. И. В. Мичурина. // Лилии.-Тула, 1992.-С. 15-17.

60. Киреева М. Ф. Лилии. -М.: ЗАО «Фитон+», 2000. 144 с. Киреева М. Ф. В тайниках божественной природы. Лилии селекции Маргариты Киреевой. // В мире растений. - 2004. — № 5. - С. 20-27.

61. Киреева М. Ф. Зимостойкие лилии. // Цветоводство. 2004. - № 4. - С. 14-16.

62. Киреева М. Ф. Крупнейший садовод России. // Цветоводство. 2005. -№6.-С. 20-21.

63. Комаров В. Л. Род Lilium L. II Флора СССР: в 30 т. Т. 4. Л., 1935. - С. 282-294.

64. Коршикова Н. Г. Получение отдаленных гибридов лилий методом культуры зародышей на искусственной среде. // Бюлл. ГБС. 1981. - Вып. 120.-С. 77-80.

65. Коршикова Н. Г. Селекция раноцветущих лилий. II Селекция, сортоизучение, размножение и экономика декоративных растений: Сб. науч. тр. Мичуринск, 1988. - С. 15-20.

66. Кравченко О. А. Итоги интродукции декоративных и травянистых многолетников в Ботаническом саду Института биологии БФАН СССР // Ресурсы и интродукция растений в Башкирии: Сб. науч. тр. Уфа, 1983. - С. 27-45.

67. Кравченко О. А. Многолетние цветы. // Декоративные растения для озеленения городов Башкирии. Уфа, 1971. - С. 80-142.

68. Кравченко О. А. Башкирский Ботанический сад. // Бюлл. ГБС. 1950. -Вып. 6.-С. 104-105.

69. Красная книга Башкирской АССР. Редкие растения и животные. Проблемы их охраны. — Уфа: Башк. кн. изд-во, 1987. — 212 с.

70. Красная книга СССР: Редкие и находящиеся под угрозой исчезновения виды животных и растений: В 2 т. Т. 2. М.: Лесн. пром-сть, 1984. - 480 с.

71. Красная книга РСФСР. Растения. М.: Росагропромиздат, 1988. — 590с.

72. Крокер В., Бартон Л. Физиология семян. М.:Изд-во иностр. лит., 1955.-399 с.

73. Кубалакова М., Гавел Л. Использование культур тканей в процессе селекций у Lilium L. // Биология культивируемых клеток и биотехнология растений, «Вопросы биотехнологии». — 1995. — С. 206-209.

74. Кузьмин 3. Е., Горбунов Ю. Н. Сохранение биоразнообразия растений России ex situ. //Бюлл. ГБС. 2003. - Вып. 185. - С. 168-173.

75. Кучеров Е. В. Дикорастущие пищевые растения Башкирии и их использование. Уфа: РИО Госкомиздата БССР, 1990. - 160 с.

76. Лакин Г. Ф. Биометрия: Учеб. пособие для биол. спец. вузов 4-е изд., перераб. и доп. - М.: Высш. шк., 1990. - 352 с.

77. Лилии ЛА и ОТ. // Мой прекрасный сад. 2004. - № 2. - С. 68.

78. Макаров А. А. Растительные лечебные средства якутской народной медицины. — Якутск, 1974. С. 35.

79. Методика государственного сортоиспытания декоративных культур. -М.: Изд-во Мин-ва с. х-ва РСФСР, 1960. С. 134-137.

80. Минаева В. Г. Лекарственные растения Сибири. — Новосибирск, 1991. -С. 280-281.

81. Миркин Б. М., Наумова Л. Г., Мулдашев А. А. Высшие растения: краткий курс систематики с основами науки о растительности: Учебник. -М.: Логос, 2001.-264 с.

82. Миронова Л. Н., Воронцова А. А., Шипаева Г. В. Итоги интродукции и селекции декоративных и травянистых растений в Республике Башкортостан. В 2-х частях. Часть 2. Класс однодольные. — М.: Наука, 2006. 211 с.

83. Миронова О. Ю. Разработка и совершенствование технологий клонального микроразмножения декоративно-цветочных культур: Автореф. дис.канд. биол. наук. Москва, 2004. - 20 с.

84. Мокшин Е. В. Морфо-физиологические особенности клонального микроразмножения in vitro различных сортов лилий {Lilium L.) и гладиолусов {Gladiolus L.) Автореф. дис.канд. биол. наук. Нижний Новгород, 2005. -24с.

85. Мухаметвафина А. А., Миронова JI. Н., Байбурина Р. К. Лилии. Руководство по размножению и выращиванию. Уфа, РИО РУНМЦ МО РБ, 2004 г.-34 с.

86. Набиева А. Ю. Сохранение и размножение в культуре in vitro генотипов редких видов лилий азиатской части России: Автореф. дис.канд. биол. наук. — Новосибирск, 2008. 20 с.

87. Немченко Э. П. Лилия кудреватая // Биологическая флора московской области. 1993. - Вып. 9, Ч. I. - С. 32 - 39.

88. Несауле В. П., Орехов В. П. Лилии. Рига: Лиесма, 1973. — 151 с.

89. Николаева М. Г. Физиология глубокого покоя семян. — Л.: Наука, 1967. 207 с.

90. Николаева М. Г., Разумова М. В., Гладкова В. Н. Справочник по проращиванию покоящихся семян. Л.: Наука, Ленинград, отд., 1985. - 346 с.

91. Николаева М. Г., Разумова М. В. О влиянии температуры и ростовых веществ на прорастание семян тюльпанов. // Бюлл. ГБС. — 1973. Вып. 89. -С. 73-75.

92. Николаенко Н. П. Лилии. М.: Изд-во Мин. ком. хоз-ва РСФСР, 1954. -84 с.

93. Отрошко А. В. Разведение трубчатых лилий. // Лилии. — Тула, 1992. -С. 7-9.

94. Отрошко А. В. Селекция лилий за рубежом. // Лилии. — Тула, 1992. С. 25-27.

95. Отрошко А. В. Любители-селекционеры. // Лилии. — Тула, 1992. С. 30-32.

96. Отрошко А. В. Лилии. -М.: Хоббикнига, 1993. 176 с. Петренко Н. Как много разных лилий. // Приусадебное хозяйство. 1987.-№4. -С. 64—66.

97. Пешкова Г. И., Шретер А. И. Растения в домашней косметике и дерматологии. Справочник. — М.: Изд. Дом МСП, 2001. — 688 с.

98. Писарев Е. Немодные лилии. // Цветоводство. 2004. - № 5. - С. 56-57. Плисис Я., Калва Г. Клональное микроразмножение трубчатой лилии сорта Дагния. // Тр. Латвийской с.-х. академии. — 1987. — Т. 236. — С. 13-26.

99. Поддубная-Арнольди В. А. Характеристика семейств покрытосеменных растений по цитоэмбриологическим признакам. М.: Наука, 1982.-С. 214-223.

100. Полетико О. М., Мишенкова А. П. Декоративные травянистые растения открытого грунта. Справочник по номенклатуре родов и видов. Л., Наука, 1967.-С. 109-114.

101. Полная энциклопедия народной медицины: В 2 т. — М.: АНС, 1996. Т.1.2.

102. Пугачева Г. Лилии. Трубчатые гибриды. // Цветоводство. 2005. - № 2. -С. 24.

103. Разработка научных основ строительства и создание экспозиций Ботанического сада за 1966: Научный отчет / Башкирский филиал АН СССР. Ин-т Биологии. Ботанический сад; Руководитель О. А. Кравченко. № ГР отсутствует; Инв. № 187. — Уфа, 1967. 103 с.

104. Разработка научных основ строительства и создание экспозиций Ботанического сада за 1966-1967: Заключительный научный отчет / Башкирский филиал АН СССР, Ин-т Биологии Ботанический сад;

105. Руководитель О. А. Кравченко. № ГР отсутствует; Инв. № 199. Уфа, 1968. — 183 с.

106. Растительные ресурсы России и сопредельных государств: Цветковые растения, их химический состав, использование. Семейства Butomaceae-Typhaceae. Спб.: Наука, 1994. - С. 36-39.

107. Редкие и исчезающие виды полезных растений Башкирии и пути их охраны. Уфа, 1982. - С. 10-12.

108. Рейвн П., Эверт Р., Айкхорн С. Современная ботаника: В 2-х т. Т. 2. -М., 1990.-344 с.

109. Ресурсы и интродукция лекарственных, плодово-ягодных и декоративных растений в Башкирии за 1961: Научный отчет / Башкирский филиал АН СССР. Ин-т Биологии. Ботанический сад; Руководитель Р. К. Байков. № ГР отсутствует; Инв. №129. Уфа, 1962. - 244 с.

110. Румынии В. А., Слюсаренко А. Г. Масс-клональное размножение лилий // Бюлл. ГБС РАН. 1989. - № 153. - С. 62 - 69.

111. Руцкий Н. И. Лилии. Минск: Изд-во Урожай, 1970. - 152 с.

112. Седова Е. А. Некоторые морфофизиологические особенности начальных этапов онтогенеза видов рода Lilium с разным типом прорастания семян. // Биологические науки. 1982. -№3 (219). — С. 73-79.

113. Седова Е. А. Изучение морфофизиологической реакции эпигеально и гипогеально прорастающих видов лилии на охлаждение в фазе семян и проростков. // Вестн. Моск. ун-та. Сер. Биол. — 1986. № 2. - С. 38-45.

114. Сенин И. Новинки в мире лилий. // Цветоводство. 2002. — № 4. - С. 9.

115. Слюсаренко А.Г. Опыт клонального микроразмножения лилий // Бюлл. ГБС.-2003.-Вып. 185.-С. 148-160.

116. Соболевская К. А. Исчезающие растения Сибири в интродукции. — Новосибирск: Наука, 1984. 223 с.

117. Сорокопудова О. А. Биологические особенности лилий в Сибири. -Белгород: Изд-во БелГУ, 2005. 244 с.

118. Федоров А. А., Артюшенко 3. Т. Атлас по описательной морфологии высших растений. Соцветие. — JL: Наука, 1979. — 296 с.

119. Федоров А. А., Артюшенко 3. Т. Атлас по описательной морфологии высших растений. Цветок. JL: Наука, 1975. — 352 с.

120. Филиппова В., Володин В. Микроклональное размноженрте как способ сохранения редких и исчезающих видов растений // http://ib.komisc.rU/t/ru/ir/vt/02-56/06.html Институт биологии, 1999.

121. Французенок В. В. Совершенствование методов микроклонального размножения лилий: Автореф. дис. канд. с.-х. наук. Горки, 1997. - 24 с.

122. Хондырев В. Лилии. Восточные гибриды. // В мире растений. 2002. -№7.-С. 21-24.

123. Хорунжий А. Х.Любительские организации лилиеводов. // Лилии. -Тула, 1992.-С. 28-29.

124. Цветы в вашем саду: Сборник / Под ред. Р. А. Карписоновой. М.: Моск. рабочий, 1992. - С. 176.

125. Цыденданбаева Т. Н. Зимняя выгонка лилий отечественных сортов. // Селекция, сортоизучение, размножение и экономика декоративных растений: Сб. науч. тр. Мичуринск, 1988. - С. 37-41.

126. Черепанов С. К. Сосудистые растения СССР. Л.: Наука, 1981. - 510 с.

127. Чурикова О. А., Румынии В. А., Барыкина Р. П., Слюсаренко А. Г. Некоторые особенности морфогенеза in vitro при масс-клональном размножении лилий. // Бюлл. ГБС. 1991. - Вып. 159. - С. 43^19.

128. Чурикова О. А. Морфогенетические процессы при масс-клональном размножении некоторых декоративных луковичных и клубнелуковичных растений: Автореф. дис. . канд. биол. наук. М., 1993. - 26 с.

129. Чурикова О. А., Румынии В. А., Барыкина Р. П., Слюсаренко А. Г. Морфогенетические процессы в луковичных чешуях некоторых видов лилий в условиях масс-клонального размножения in vitro. // Бюлл. ГБС РАН. — 1994.- № 169.-С. 105-111.

130. Чучин В. М. Лилии. М.: ЗАО «Фитон+», 2004. - 144 с.

131. Чучин В. М. Лилии. Новые гибридные группы. // Цветоводство. 2004.- № 6. С. 24.

132. Чучин В. М. Лилии: ОТ-гибриды. // Цветоводство 2003. - № 6. - С. 10-12.

133. Чучин В. М. Лилии Танго. // Цветоводство. 2008. - № 1. - С. 26-28. Шиповская Е. И. Лилии Зинаиды Цветаевой. // Цветоводство. - 2000. -№3.- С. 19.

134. Шиповская Е. И., Колокольникова В. И., Матросова Г. В. Лилии. Виды, разновидности и гибридные формы. М.: МГУ, 1972. - 158 с.

135. Эмбриология цветковых растений. Терминология и концепции. В 3 т. -Спб.: Изд-во Мир и семья, 1997 2000. Т. 2.: Семя. - 1997. - 823 с. Т. 3: Системы репродукции. - 2000. - 640 с.

136. Aguettaz P., Paffen A., Delvallee I., van der Linde P., De Klerk G-J. The development of dormancy in bulblets of Lilium speciosum generated in vitro. // Plant Cell Tiss Org Cult. 1990. - Vol. 22. - P. 167-172.

137. Bach A., Swiderski A. The effect of light quality on organogenesis of Hyacinthus orientalis L. in vitro. // Acta Biologia Cracoviensia. 2000. - Vol. 42. -P. 115-120.

138. Bennici A. Cytological chimeras in plants regenereted from Lilium longiflorum tissues grown in vitro. // Z. Pflanzenzucht. 1979. - Vol. 82. - P. 349-353.

139. Bonnier F. I. M., Van Tuyl I. M. Long term in vitro storage of Lili: effect of temperature and concentration of nutrients and sucrose. // Plant Cell Tiss Org Cult. 1997. - Vol. 49. - P. 81-87.

140. Dierben H. Lilien vermehrung im Reagenzglas. // Staudengarten. 1996. -Vol. 47, № l.-P. 104.

141. De Klerk G-J. Hormonal control of dormancy and apical dominance in tissue-cultured plants. // Acta Bot Neerl. 1992. - Vol. 41, № 4. - P. 443-451.

142. Delvallee I., Paffen A., De Klerk G- J. The development of dormancy in bulblets of Lilium speciosum generated in vitro. II. The effect of temperature. // Physiol. Plant. 1990. - Vol. 80. - P. 431-436.

143. Fox D. The propagation of lilies. // The Plastman. 1982. - Vol. 4. - P. 1628.

144. Fox D. Lilies from seeds. // Growing from Seeds. 1987. - Vol. 2. - P. 2729.

145. George E. F. Plant Propagation by Tissue Culture. Part 2. Eversley.: Exegetics Ltd., 1993. - P. 889-892.

146. Gerrits M. M., De Klerk G-J. Dry-matter partitioning between bulbs and leaves in plantlets of Lilium speciosum regenerated in vitro. II Acta Bot Neerl. -1992.-Vol. 41(4).-P. 461-468.

147. Grunert Ch. Garten Blumen von A bis Z. Ein Handbuch fur Freunde der Stauden. Blumenzwibeln, Sommerblumen und Rosen. Leipzig: Neumann verlag, 1972.-P. 368-386.

148. Gupta P., Sharma A. K., Charturvedi H. C. Multiplication of Lilium longiflorum Thunb. by asceptic culture of bulb-scales and their segments. // Indian J Exp Biol. 1978. - Vol. 16. - P. 940-942.

149. Han D-S., Niimi Y, Nakano M. Formation of Calli from Isolated Mikrospore Cultures of Asiatic Hybrid Lily «Connecticut King». // J. Japan. Soc. Hort. Sci. -2000. Vol. 69 (1). - P. 52-56.

150. Haruki K., Yamada K., Hosoki Т., Ohta K. Effekt of sugars and temperature on the growth of miniature bulbs of Lilium japonium Thunb. cultured on a rotary shaker. // J. Japan. Soc. Hort. Sci. 1996. - Vol. 65. - P. 363-371.

151. Horita M., Morohashi H., Komai F. Regeneration of flowering plants from difficile lily protoplasts by means of a nurse culture. // Planta. — 2002. Vol. 215. -P. 880-884.1.ternational Lily Register. The Royal Horticultural Society. London, 1982.-377 p.

152. Maesato K., Sharada K., Fukui H., Нага Т., Sarma KS. In vitro bulblet regeneration from bulbscale explants of Lilium japonicum Thunb. Effect of plant growth regulators and culture environment. // J. Hortic Sci. 1994. -Vol. 69(2). -P. 289-297.

153. Matsuo E., Ohkurano Т., Arisumi K., Sakata Y. Scale Bulblet Malformations Seen in Lilium longiflorum during Scale Propagation. // HortScience.-1986.-Vol. 21 (l).-P. 150.

154. Montezuma-de-Carvalho J., Guimaraes ML. Production of buds and plantlets from the stamen's filament of Lilium regale cultivated in vitro. II Biologia Plantarum. 1974. - Vol. 16 (6). - P. 472-473.

155. Murashige Т., Skoog F. A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue cultures. // Physiol Plant. 1962. - Vol. 15. - P. 473-497.

156. Nhut D. T. Micropropagation of lily (Lilium longiflorum) via in vitro stem node and pseudo-bulblet culture. // Plant cell rep. 1998. - Vol. 17. - P. 913-916.

157. Nhut D. Т., Le В. V., Tanaka M., Tran Thanh Van K. Shoot induction and plant regeneration from receptacle tissues of Lilium longiflorum. I/ Scientia Horticulturae.-2001.-Vol. 87.-P. 131-138.

158. Niimi Y. Application of leaf-segment cultures to in vitro bulblet production of six Lilium species. // Acta Bot Neerl. 1986. - Vol. 35(3). - P. 189-194.

159. Niimi Y. In vitro propagation and post-in-vitro establishment of bulblets of Lilium japonicum Thunb. // J Jpn Soc Hortic Sci. 1995. - Vol. 63(4). - P. 843852.

160. Niimi Y., Han D-S., F ujisaki M. Production of virus-free plantlets by anther culture of Lilium x 'Enchantment'. // Scientia Hortic. 2001. — Vol. 90. - P. 325334.

161. Niimi Y., Misaki Y., Nakano M. Production of Commercial Bulbs of Lilium rubellum Baker: Changes in Carbohydrates in Bulblets and Sugars of Liquid

162. Medium during their Culture. // J. Japan. Soc. Hort. 2000. - Vol. 69 (2). - P. 161-165.

163. Ohkawa M., Ohshiro Т., Ikekawa T. Effects of 24-epibrassinolide and NAA on the formation of regenerated bulblet of Lilium japonicum Thunb. by scale culture in vitro. II Environ Control in Biol. 1996. - Vol. 34. - P. 15-19.

164. Oishi K., Inoue Y. Raising Seedlings of the Sasa lily (Lilium japonicum) in vitro. // Combined Proceedings International Plant Propagators Society. 1997. -Vol. 47. -P. 685-686.

165. Okazaki K., Umada Y., Urashima O., Kawada J., Kunishige M., Murakami K. Interspecific hybrids of Lilium longiflorum and L. x formolongi with L. rubellum and L. japonicum through embryo culture. // J. Jpn. Soc. Hortic. Sci. -1992.-Vol. 60.-P. 997-1002.

166. Panizza M., Mensuali Sodi A., Tognoni F. Effects of various factors on in vitro propagation of Lilium speciosum Thunb. and Lilium longiflorum Thunb. // Adv. Hort. Sci. 1990. - Vol. 4. - P. 103-106.

167. Pelkonen V-P. Biotechnological approaches in lily (Lilium) production. -Oulu: Oulu university press, 2005. 65 p.

168. Priyadarshi S., Sen S. A revised scheme for mass propagation of Easter lily. // Plant Cell Tiss Org Cult. 1992. - Vol. 30. - P. 193-197.

169. Qu Y., Мок M. С., Мок D. W. S., Stang J. R. Phenotipic and cytological variation among plants derived from anther cultures of Lilium longiflorum // In vitro Cellular & Dewelopmental Biology. 1988. - Vol. 24, № 5. p. 471-475.

170. Read P. E. Environmental Effects in Microporpagation. // Handbook of Plant Cell Culture. New York: McGraw-Hill Publishing Co, 1990. - 213 p.

171. Robb S. The culture of excised tissue from bulb scales of Lilium speciosum Thunb. //J Exp Bot. 1957. - Vol. 8. - P. 348-352.

172. Sheridan W.F. Tissue culture of the monocot Lilium. II Planta. — 1968. -Vol. 82.-P. 189-192.

173. Simmonds S.A., Cumming B.G. Dependence of bulbet production on tiem of scale removal and growht substances. // Sci. hort. — 1976. — Vol. 5, № 1. P. 77-83.

174. Simmonds S.A., Cumming B.G. Propagation of Lilium hybrids. 2. Production of plantlets from bulbscale callus cultures for increased propagation rates. // Sci. hort. 1976. - Vol. 5. - P. 161-170.

175. Stimart D.P., Asher P.D. Tissue culture of bulb scale sections for asexual propagation of Lilium longiflorum Thunb. // J. Am. Soc. Hart. Sci. 1978. - Vol. 103.-P. 182-184.

176. Takayama S., Misawa M. A scheme for mass propagation on Lilium in vitro // Scientia Horticult. 1983. - Vol. 18. - P. 353-362.

177. Takayama S., Misawa M. Regulation of organ formation by cytokinin and auxin in Lilium bulbscales grown in vitro. II Plant and Cell Physiol. 1982. -Vol. 23.-P. 67-74.

178. Takayama S., Misawa M. Differentiation in Lilium bulbscales grown in vitro. Effect of various cultural conditions // Physiol, plant. 1979. - Vol. 46. - P. 184-190.

179. Takhtajan A. L. Diversity and classification of flowering plants. New York, 1997.-558 p.

180. Tanaka A., Hoshi Y., Kondo K., Taniguchi K. Induction and rapid shoot primordia from shoot apices of Lilium japonicum. I I Plant Tissue Cult. Lett. -1991. -Vol. 8.-P. 206-208.

181. Tisserat B. Embryogenesis, organogenesis and plant regeneration. 11 Dixon RA (ed) Plant Cell Culture; a Practical Approach. Oxford: IRL Press Ltd, 1987. -P. 79-105.

182. Tribulato A., Remotti P. C., Loffler H. J. M., van Tuyl J. M. Somatic embryogenesis and plant regeneration in Lilium longiflorum Thunb. // Plant cell rep. 1997. - Vol. 17. - P. 113-118.

183. Van Aartrijk J., Blom-Barnhoom Y.J. Adventitious bud formation from bulb-scale explants of Lilium speciosum Thunb. in vitro. Effects of wounding, TIBA, and temperature. // Z Pflanzenphysiol. 1983. - Vol. 110. - P. 355-363.

184. Wawrosch C., Malla PR., Kopp B. Clonal propagation of Lilium nepalense D. Don, a threatened medicinal plant of Nepal. // Plant cell rep. 2001. - Vol. 20. -P. 285-288.

185. Wickremesinhe E. R. M., Holkomb E. J., Arteca R. N. A practical method for the prodaction of flowering Easter lilies from callus cultures. // Sci. Hort. -1994.-Vol. 60.-P. 143-152.

186. Woodcock H. В., Stearn W. T. Lilies of the World. — London: Country Life Ltd, 1950.-431 p.

187. Yamagishi M. Effects of mannose on enlargement of in vitro bulblets of Lilium japonicum Thunb. // Bull RIAR Agr Coll. 1995. - Vol. 4. - P. 86-89.